Мультифункциональность иммуномодулятора суперлимф (комплекс природных цитокинов): прямые противобактериальные эффекты in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Аведова, Татьяна Александровна

• Аведова, Татьяна Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Аведова, Татьяна Александровна

Список сокращений:.

ВВЕДЕНИЕ.

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1.1. Противомикробные пептиды.

1.1.1. Строение и классификация противомикробных пептидов.

1.1.2. Роль противомикробных пептидов во врожденном и приобретенном иммунитете.

1.1.3. Болезни человека, ассоциированные с противомикробными пептидами.

1.1.4. Механизм действия противомикробных пептидов на бактериальную клетку.

1.1.5. Лекарственные формы на основе противомикробных пептидов.

Глава 1.2. Естественный комплекс природных цитокинов (препарат

Суперлимф).

Часть И. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2.1 Материалы и методы.

2.1.1. Выделение полиморфноядерных лейкоцитов.

2.1.2. Определение продукции активных форм кислорода методом люминол-зависимой хемилюминисценции.

2.1.3. Определение активности катепсина D.

2.1.4. Получение субстанции комплекса природных цитокинов.

2.1.5. Фракционирование субстанции комплекса природных цитокинов методом гель-хроматографии.

2.1.6. Определение концентрации белка методом Лоури.

2.1.7. Иммуноферментный анализ определения концентрации ТФРр1.

2.1.8. Определение активности фактора, угнетающего миграцию макрофагов (МИФ).

2.1.9. Определение противомикробных пептидов методом масс-спектрометрического анализа.

2.1.10. Характеристика штаммов микробных клеток.

2.1.11. Определение чувствительности микробных клеток методом диффузии в агар с применением бумажных дисков.

2.1.12. Количественная оценка угнетения роста золотистого стафилококка.

2.1.13. Оценка бактериостатического или бактерицидного. действия субстанции.

2.1.14. Определение минимальных подавляющих и бактерицидных концентраций субстанции методом разведений в жидкой питательной среде.

Часть III. Результаты и обсуждение.'.

Глава 3.1. Действие комплекса природных цитокинов на противомикробную активность полиморфноядерных лейкоцитов здоровых доноров.

3.1.1. Влияние субстанции на продукцию активных форм кислорода полиморфноядерными лейкоцитами здоровых доноров.

3.1.2. Влияние субстанции на продукцию катепсина D лейкоцитами здоровых доноров.

Глава 3.2. Прямое действие субстанции на рост грам-положительных, грам-отрицательных и грибковых микроорганизмов in vitro.

3.2.1. Чувствительность S. aureus, Е. coli и С. albicans к субстанции препарата Суперлимф.

3.2.2. Количественная оценка эффекта угнетения роста S. aureus субстанцией.

3.2.3. Бактерицидное действие субстанции на S. aureus.

3.2.4. Действие субстанции на рост S. pyogenes.

3.2.5. Действие препарата Суперлимф и его субстанции на рост S. pyogenes, резистентных к антибиотикам.

Глава 3.3. Разработка методики выделения фракции, содержащей противомикробные пептиды.

Глава 3.4. Прямое действие цитокин-содержащей фракции м.м. 12-25 kD) и низкомолекулярной фракции (м.м. 1,5-6,0 kD) на рост Saureus и Е. coli.

Глава 3.5. Выявление противомикробных пептидов во фракции м.м. 1,5-6,0 kD).

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Мультифункциональность иммуномодулятора суперлимф (комплекс природных цитокинов): прямые противобактериальные эффекты in vitro»

Воспалительные заболевания бактериальной этиологии остаются важной медицинской и социальной проблемой. Грамположительные кокки и грамотрицательные палочки являются возбудителями самых разнообразных инфекций, с поражением практически всех органов и тканей (1).

Лечение бактериальных инфекций сводится к применению антибиотиков, которые, как известно, вызывают серьезные осложнения у больного - аллергические реакции, дисбактериоз и иммунодефицитные состояния. Развитие резистентности у микробов к антибиотикам затрудняют достигать нужной терапевтической эффективности при лечении воспалительных заболеваний. Кроме того, устойчивость бактерий к антибактериальным препаратам сужает поиск в выборе эффективных средств лечения.

В 80-е годы прошлого столетия Р. Лерером и В.Н. Кокряковым был открыт новый класс низкомолекулярных катионных пептидов, обладающих противомикробной активностью (10). Так выяснилось, что эндогенные пептиды, являясь регуляторами врожденного и адаптивного иммунитета, играют значительную роль в защите организма при бактериальной и вирусной патологии, подавляют рост грам-положительных и грам-отрицательных микроорганизмов и некоторых вирусов. Их по праву называют природными эндогенными антибиотиками (70). В настоящее время ведутся работы по созданию новых лекарственных препаратов на основе противомикробных пептидов.

На кафедре иммунологии РГМУ разработан оригинальный иммуномодулятор Суперлимф, представляющий комплекс природных цитокинов (КПЦ). В состав комплекса входят ИЛ-1р, ИЛ-6, ФНОа, МИФ, ТФР-ip, ИЛ-IRA в оптимальных физиологических соотношениях (3).

Суперлимф обладает широким спектром влияния на клетки, участвующих в реакциях врожденного иммунитета: макрофаги, нейтрофилы и естественные киллеры. Препарат активирует фагоцитоз, выработку ИЛ-1р, ФНОа, ИФНа и ИФНР моноцитами, индуцирует противоопухолевую активность макрофагов, способствует гибели внутриклеточных паразитов, регулирует миграцию лейкоцитов. Вследствие активации клеток макрофагально-моноцитарного ряда под влиянием Суперлимфа включаются механизмы адаптивного клеточного и гуморального иммунного ответа.

Суперлимф показан в терапии заболеваний различной этиологии, сопровождающихся развитием локального иммунодефицита, воспаления и нарушением репарации (3).

Многолетний опыт клинического применения препарата показал высокую эффективность при экзогенных поражениях тканей, воспалительно-деструктивных заболеваниях слизистых JlOP-органов, слизистых мочеполовых органов, для профилактики избыточного рубцевания при антиглаукоматозных операциях и в практической хирургии.

В процессе изучения механизма действия и проведения клинических испытаний препарата Суперлимф было показано его противомикробное действие. У больных с раневыми процессами уменьшалась бактериальная обсемененность раны. Наблюдалось быстрое купирование воспалительного процесса в очаге деструкции у больных с острыми абсцессами легких, гайморитами, тонзиллитами, пародонтитом , при этом применение антибиотиков было сокращено до минимума (4). В последние годы было показано прямое противовирусное действие препарата в культуре клеток Vero, инфицированных вирусами герпеса простого, проявляющееся в нарушении целостности их оболочки (8).

Однако прямое действие препарата Суперлимф на бактериальные клетки in vitro практически не изучено.

В связи с этим целью работы явилось изучение противомикробного действия комплекса природных цитокинов (препарат Суперлимф) in vitro.

В соответствии с данной целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить действие субстанции на продукцию активных форм кислорода и катепсина D полиморфноядерными лейкоцитами здоровых доноров.

2. Изучить прямое противомикробное действие субстанции естественного комплекса природных цитокинов на штаммы Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus pyogenes и Candida albicans in vitro.

3. Исследовать эффекты субстанции и препарата Суперлимф на бактериальные культуры, резистентные к антибиотикам.

4. Разработать методику выделения фракции, содержащей противомикробные пептиды из субстанции препарата Суперлимф.

5. Охарактеризовать фракцию противомикробных пептидов и оценить ее противомикробную активность.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Изучено противомикробное действие комплекса природных цитокинов и противомикробных пептидов на модели грамположительных, грамотрицательных бактерий и грибов.

Впервые показано, что Суперлимф обладает прямым противобактериальным действием на Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus pyogenes и Candida albicans in vitro. Противобактериальная активность препарата обусловлена низкомолекулярной фракцией (1,5-6 kD), содержащей протегрин-подобные пептиды.

Установлено, что иммуномодулирующий препарат Суперлимф обладает бактерицидным механизмом действия.

Впервые продемонстрировано бактерицидное действие препарата на антибиотикорезистентный штамм Streptococcus pyogenes.

Полученные результаты расширяют представления об участии противомикробных пептидов в механизмах врожденного иммунитета. Это может служить основой для дальнейших медико-биологических исследований в области изучения механизмов противобактериального действия комплекса природных цитокинов и противомикробных пептидов в разработке новых лекарственных противомикробных средств.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Отработана экспериментальная модель, позволяющая оценить действие противомикробных пептидов на микробные клетки.

Полученные данные о прямом противобактериальном эффекте препарата Суперлимф обосновывают клиническую эффективность этого лекарственного средства. Противобактериальное действие на резистентные к антибиотикам микроорганизмы, такие как Streptococcus pyogenes, позволят расширить спектр эффективных лекарственных средств при лечении воспалительных заболеваний бактериальной . этиологии и избежать нежелательных побочных эффектов у больного, таких как иммунодефицит, аллергическая реакция и дисбактериоз.

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Аведова, Татьяна Александровна

выводы

1. Комплекс природных цитокинов (субстанция препарата Суперлимф) оказывает противобактериальное действие, заключающееся в активации бактерицидной активности полиморфноядерных лейкоцитов и прямом киллинге бактерий.

2. Комплекс природных цитокинов (субстанция препарата Суперлимф) повышает бактерицидную активность полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови здоровых доноров, увеличивая выработку активных форм кислорода в концентрации 0,1 - 1,0 мкг и индуцируя выработку лизосомального фермента катепсина D в концентрации 1 Омкг.

3. Комплекс природных цитокинов (субстанция препарата Суперлимф) обладает прямым дозозависимым противобактериальным действием на музейные штаммы Staphylococcus aureus АТСС 6538Р, Escherichia coli АТСС 25922 и Streptocossus pyogenes М29, тай-форма Д23/11 №62/59 in vitro. Эффект наблюдался при наличии в среде двухвалентных катионов кальция и магния.

4. Выявлено прямое бактерицидное действие субстанции и препарата Суперлимф на резистентный к эритромицину штамм Streptocossus pyogenes, полученный от больных с диагнозами лакунарная ангина (1 -58 №7) и флегмона (2 - 501130).

5. Методами гель-фильтрации на сефадексе G-50 fine и масс-спектрометрически из субстанции препарата Суперлимф выделена и охарактеризована фракция с молекулярными массами 1,5 -6 kD, содержащая катионные протегрин-подобные пептиды с бактерицидным действием in vitro.

6. Фракция субстанции молекулярной массы 12-25 kD с активностью цитокинов после элиминации низкомолекулярных пептидов не влияет на рост музейных штаммов Staphylococcus aureus АТСС 6538Р, Escherichia coli АТСС 25922 и Streptocossus pyogenes М29, matt-форма Д23/11 №62/59 in vitro.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Гнойно-воспалительные заболевания относятся к числу наиболее распространенных. Ими ежегодно болеют миллионы людей. Способностью вызывать гнойные и серозно-гнойные воспаления у человека и животных обладают многие патогенные и условно патогенные бактерии, но большинство острых и подострых нагноений вызывают кокки. На втором месте стоят грамотрицательные бактерии - факультативные анаэробы: Escherichia, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas и другие, а также строгие анаэробы. Однако репутация гноеродных (пиогенных) укоренилась прежде всего за кокками, так как они вызывают 70-80% всех гнойных заболеваний (2).

В настоящее время ведется активный поиск новых лекарственных препаратов противомикробного действия. В середине прошлого столетия открыт новый класс эндогенных антибиотиков: дефенсины и кателицидины, которые вырабатываются клетками иммунной системы (нейтро'филами и др.), клетками Панета крипт кишечника и эпителиальными клетками слизистых пищеварительной, дыхательной и мочеполовой систем. Противомикробные пептиды электростатически связываются с мембраной бактериальной клетки, образуют поры, нарушая ее проницаемость, и вызывают гибель микроорганизма (9).

Препарат Суперлимф, разработанный на кафедре иммунологии РГМУ, содержит цитокины (ИЛ-1(3, ИЛ-6, ФНОа, МИФ, ТФР-1[3, ИЛ-IRA) и является оригинальным иммуномодулятором (3).

Суперлимф обладает широким спектром влияния на клетки, которые участвуют в реакциях врожденного иммунитета: макрофаги, нейтрофилы и естественные киллеры. Препарат активирует фагоцитоз, выработку ИЛ-ip, ФНОа, ИФНа и ИФН(3 моноцитами, индуцирует противоопухолевую активность макрофагов, способствует гибели внутриклеточных паразитов, регулирует миграцию лейкоцитов.

Многолетний опыт клинического применения препарата показал высокую эффективность при экзогенных поражениях тканей, воспалительнодеструктивных заболеваниях слизистых JIOP-органов и мочеполовых органов.

В процессе изучения механизма действия и проведения клинических испытаний препарата Суперлимф было показано его противомикробное действие. У больных с раневыми процессами уменьшалась бактериальная обсемененность раны. Наблюдалось быстрое купирование воспалительного процесса в очаге деструкции у больных с острыми абсцессами легких, гайморитами, тонзиллитами, пародонтитом, при этом применение антибиотиков было сокращено до минимума (4).

Противомикробное действие Суперлимфа может быть вызвано противомикробными пептидами - протегринами. Это предположение основывается на том, что субстанция препарата получена из культур стимулированных лейкоцитов периферической крови свиньи, являющихся основным источником ПМП.

В последние годы было показано прямое противовирусное действие препарата в культуре клеток Vero, инфицированных вирусами герпеса простого, проявляющееся в нарушении целостности их оболочки (8). Однако прямое действие препарата Суперлимф на бактериальные клетки in vitro практически не изучено.

В данной работе проведено изучение механизмов прямого и опосредованного противобактериального действия комплекса природных цитокинов и различных его фракций.

С этой целью было использовано два подхода.

В первом изучали действие субстанции на противомикробную активность полиморфноядерных лейкоцитов — клеток-эффекторов врожденного иммунитета, ответственных за фагоцитоз и разрушение микроорганизмов.

Второй подход заключался в изучении прямого действия субстанции на музейные штаммы S. aureus, Е. coli, S. pyogenes и С. albicans и штаммы резистентные к антибиотиками S. aureus и S. pyogenes, выделенные от больных in vitro.

Противомикробная активность фагоцитарных клеток обусловлена кислород-независимыми и кислород-зависимыми механизмами. Активные формы кислорода, по мнению многих исследователей, являются основными эндогенными микробицидными агентами полиморфноядерных лейкоцитов. Как показано ранее в работе Хараевой 3. Ф. обработка лейкоцитов приводила к повышению фагоцитарной активности ПЯЛ и эффективности внутриклеточного киллинга S. aureus (17).

Обработка ПЯЛ периферической крови доноров субстанцией в различных концентрациях (1 - 0,1 мкг/мл) приводила к увеличению продукции АФК. Эффект зависел от дозы субстанции (гл. 3.1.1. рис. 12).

Протеолитический фермент катепсин D принимает участие в формировании бактерицидности наравне с активными формами кислорода. Катепсин D является поверхностно-активным веществом, также его воздействие на микробы подавляет синтез белка, молекул РНК и ДНК, резко снижает поглощение кислорода микроорганизмами, что приводит к гибели микробов (27).

Лейкоциты периферической крови здоровых доноров после инкубации с субстанцией в концентрации 10 мкг/мл высвобождали катепсин D из мемебраносвязанного состояния достоверно на 10 % эффективнее, что также способствует реализации противомикробного действия препарата Суперлимф (гл. 3.1.1. рис.13).

Мы предположили, что наряду с активацией бактерицидной активностью нейтрофилов, субстанция комплекса природных цитокинов может оказывать прямое действие на различные штаммы бактерий. Обоснованием этого служит рад причин: 1) препарат получен из культур лейкоцитов периферической крови свиньи, которые являются основным источником противомикробных пептидов - протегринов; 2) препарат снижает бактериальную обсемененность раны в очаге воспаления; 3) при применении препарата было сокращено применение антибиотиков до минимума.

В связи с этим, мы исследовали прямое противомикробное действие субстанции на рост S. aureus, Е. coli, S. pyogenes и С. albicans in vitro.

Показано, что субстанция угнетает рост Staphylococcus aureus АТСС 6538р и Escherichia coli АТСС 25922 (рис.14). Эффект угнетения роста бактерий субстанцией был сравним с действием пенициллина. Действие субстанции препарата оказалось эффективнее действия пенициллина.

При использовании субстанции в этих концентрациях и данных условиях проведения эксперимента субстанция не влияла на рост Candida albicans АТСС 865-465 in vitro (табл.4). Вероятно, наличие стеролов в мембране грибковой клетки повышает ее устойчивость к действию ПМП.

Противомикробные пептиды являются поверхностно-активными веществами, электростатически связываются с мембраной бактериальной клетки, связываются с отрицательно заряженными компонентами мембраны, образуют мультимерные поры, через которые осуществляется выход жизненно важных компонентов для микроорганизмов (ионов калия, фосфорсодержащих соединений, аминокислот, нуклеотидов, коферментов). Вследствие этого происходит подавление дыхания, окислительного фосфорилирования, репликации, транскрипции и синтеза белков, т.е. ключевых метаболических процессов микробных клеток, результатом которых является гибель клеток (11).

Как подтвердили наши данные необходимым условием для реализации прямого противобактериального действия явилось наличие в среде двухвалентных катионов кальция и магния, присутствующих в среде культивирования (раствор Хенкса). Растворение субстанции в изотоническом растворе натрия, лишенном двухвалентных катионов металлов не приводило к противобактериальному действию субстанции (табл. 5, рис. 16, рис.17).

Количественными методами показано, что противобактериальное действие субстанции зависит от дозы и от микробной нагрузки (гл.3.2.2).

Изучение механизма действия субстанции КПЦ показало, что она оказывает бактерицидное действие, т. е. вызывает гибель бактерий, а не ингибирует их рост (рис.20).

Стрептококковые инфекции относятся к числу широко распространенных бактериальных болезней человека. Одной из причин неудач лечения стрептококковой инфекции считают формирование вариантов стрептококка с резистентными свойствами, для которых минимальные бактерицидные концентрации (МБК) антибиотика во много раз превышают его МПК. Следствием этого является тот факт, что применяемые дозы, например, пенициллина оказываются неэффективными, что в конечном итоге может привести к серьезным осложнениям или длительному персистированию возбудителя в организме. В связи с этим были определены МПК - минимальные подавляющие и МБК - минимальные бактерицидные концентрации субстанции в отношении S. pyogenes методом разведений в жидкой питательной среде (гл. 3.2.4).

Минимальной подавляющей концентрацией является 50 мкг/мл субстанции, минимальной бактерицидной концентрацией - 100 мкг/мл (табл. 7, рис.21, рис. 22). В дальнейших экспериментах изучали действие препарата Суперлимф и его субстанции на два штамма S. pyogenes, резистентных к макролидам: 1- ИА-58 №7 и ИА-501130, выделенные от больных в лаборатории стрептококковых инфекций М.М.А им. И. М. Сеченова. Доза 100 мкг/мл является минимальной бактерицидной концентрацией, доза 50 мкг/мл является минимальной подавляющей концентрацией препарата Суперлимф в отношении штаммов S. pyogenes, резистентных к эритромицину. Полученные результаты обосновывают возможность применения препарата Суперлимф для лечения стрептококковых инфекций, вызванных антибиотико-резистентными штаммами S. pyogenes.

Не исключено, что прямое противомикробное действие препарата обусловлено наличием в нем ПМП - протегринов. Для объяснения механизмов прямого противобактериального действия комплекса природных

92 цитокинов (препарат Суперлимф) была проведена гель-хроматография субстанции (гл.3.3).

Молекулярная масса протегринов не превышет 6 kD, в связи с этим была предпринята попытка получить фракцию с молекулярной массой в диапазоне от 1,5 до 6,0 kD.

В результате гель-хроматографии нами были отобраны две фракции: первая фракция в диапазоне м.м.от 12 до 25 kD с активностью цитокинов и вторая фракция в диапазоне м.м. от 1,5 до 6 kD, предположительно содержащая ПМП (рис.26).

Прямым противобактериальным действием обладала низкомолекулярная фракция с м.м. от 1,5 до 6,0 kD на рост музейных штаммов S. aureus и Е. coli. Фракция с м.м. 12-25 kD не обладала таким действием (табл. 10).

Выделенная низкомолекулярная фракция проявляла противобактериальное действие в концентрации в 10 раз меныпией по сравнению с концентрацией субстанции (табл. 11).

Методом масс-спектрометрического анализа в низкомолекулярной фракции были обнаружены протегрин-подобные пептиды (PG-1=2155 D, PG-2=1946 D), обусловливающие прямые противобактериальные эффекты комплекса природных цитокинов (гл.3.5, рис. 28)

Таким образом, комплекс природных цитокинов (препарат Суперлимф) представляет собой естественную композицию цитокинов и протегрин-подобных противомикробных пептидов, что объясняет его многофункциональность действия. Являясь иммуномодулятором, Суперлимф оказывает прямое противобактериальное и противовирусное действие и стимулирует репарацию тканей.

Полученные ранее клинические эффекты комплекса природных цитокинов, проявляющиеся в снижении бактериальной обсемененности раны объясняются прямым противомикробным действием протегринов, входящих в состав препарата.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Аведова, Татьяна Александровна, 2005 год

1. Алистайер Л. Антибиотики: современная точка зрения. // Лечащий врач, 1998.

2. Брико Н.И. Болезни, вызываемые стрептококками группы А в начале XXI века: проблемы и перспективы профилактики. Вестник РАМН, 2001, №2, с. 3-6.

3. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В. Иммуноцитокины и локальная иммунокоррекция // Иммунология. 1995. - №1. - с. 4 - 7

4. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Клебанов Г. О., Никанкина Л.В., Долгина Е.Н. и др. Механизмы цитокин индуцированной активации фагоцитов // International J. Immunorehabilitation. - 1997. - № 11. - с. 36.

5. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Клебанов Г. О., Никанкина Л.В., Долгина Е.Н. и др. Модуляция кислородного метаболизма фагоцитов рекомбинантными цитокинами и комплексом природных цитокинов // Журн. Микробиол. 1999. - №5. - с. 106-108.

6. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Павлова К.С. и др. // Иммунология. -2000. №2.-с. 32-36.

7. Ковальчук Л.В., Лавров В.Ф., Ганковская Л.В. и др. Подавление цитопатического действия вируса герпеса простого 1 типа комплексом природных цитокинов in vitro. Журнал микробиологии эпидемиологии и иммунобиологии, 2005, №1, с.57-60.

8. Кокряков В.Н., Степанов В.Е., Алешина Г.М. и др. Дефенсины и родственные им антибиотические пептиды в эволюции защитных системживотных // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 1997. Т. 33, №1. С. 109-123.

9. Ю.Кокряков В.Н., Ротова Г.М., Мазинг Ю.А. Морфобиохимические основы функциональной активности нейтрофилов млекопитающих // Морфофункциональные аспекты неспецифической резистентности и демиелинизирующих заболеваний. Л., 1981. С. 31-45.

10. П.Кокряков В.Н. Биология антибиотиков животного происхождения // Монография. Наука. С.-П. 1999. с. 29-32.

11. Макаров А.Н., Сидоренко С.В. Бактериальные бета-лактамазы. Антибиотики и химитерапия, 1996,Т. 41.№1.С.45-58.

12. Насонова В.А., Белов Б.С., Страчунский Л.С. и др. Методические рекомендации для клиницистов. Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия, 1999, Том 1, № 1.

13. М.Пигаревский В.Е. Полиморфоядерный лейкоцит и макрофаг в реакциях гиперчувствительности// Арх. патологии. 1983. № 11. С. 14-22.

14. Снимщикова И. А. Иммунопатогенетическая и клиническая характеристика эффективности локальной иммунокоррекции при некоторых гнойно- воспалительных заболеваниях // Автореферат дисс. доктор. -2001. с. 3-5.

15. Франклин Т., Сноу Дж. Биохимия антимикробного действия. М., 1984. 240 с.

16. Хараева 3. Ф. Свободно-радикальный статус фагоцитов больных стафилококковой инфекцией: регуляция иммуноцитокинами и антиоксидантами // Автореферат к докторской диссертации, Москва, 2004 г.

17. Юдина С.М., Пискунов С.З. Локальная цитокинотерапия острых гайморитов // Методические рекомендации для студентов и врачей ФПО, Курск-2001.-с. 11.

18. Янковский О.Ю., Довнар Т.Е. Роль протеиназ и продуктов деградации белков в защитных реакциях // Журн. общ. Биологии. 1985. № 44. С. 93101.

19. Aarbiou, J.et al. Human neutrophil defensins induce lung epithelial cell proliferation in vitro. J. Leukoc. Biol. 72 167-174 (2002).

20. Aarbiou, J. et al. Neutrophil defensins enhance lung epithelial wound closure and mucin gene expression in vitro. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 30 193-201 (2004).

21. Abuja, P.M., Zenz, A., Trabi, M., Craik, D.J. & Lohner, K. The cyclic antimicrobial peptide RTD-1 induces stabilized lipid-peptide domains more efficiently than its open-chain analogue. FEBS Lett. 566 301-306 (2004).

22. Ayabe, T. et al. Modulation of mouse Paneth cell a-defensin secretion by mIKCal, a Ca2+-activated, intermediate conductance potassium channel. J. Biol. Chem. 277 3793-3800 (2002).

23. Ayabe, T. et al. Secretion of microbicidal a-defensins by intestinal Paneth cells in response to bacteria. Nat. Immunol. 1 113-118 (2000).

24. Bader, M.W. et al. Regulation of Salmonella typhimurium virulence gene expression by cationic antimicrobial peptides. Mol. Microbiol. 50 219-230 (2003).

25. Baiton D.F., Ullyot J.L., Farquhar H. The development of neutrophilic polymorphonuclear leukocytes in human bone marrow. Origin' and content of azurophil and specific granules // J. Exp. Med. (USA). 1971. Vol. 134 №4. P. 907-934.

26. Barret A. J. cathepsin G // Meth. Enzymol. 1981a. Vol. 80. P. 561-565.

27. Baxter F, McChesney J. Severe group A streptococcal infection and streptococcal toxic shock syndrome. Can. J. Anaesth, 2000, 47(11) 40.

28. Befus, A.D. et al. Neutrophil defensins induce histamine secretion from mast cells: mechanisms of action. J. Immunol. 163 947-953 (1999).

29. Bensch, K.W., Raida, M., Magert, H.J., Schulz-Knappe, P. & Forssmann, W.G. hBD-1: a novel p-defensin from human plasma. FEBS Lett. 368 331-335 (1995).

30. Boniotto, M. et al. A study of host defence peptide p-defensin 3 in primates. Biochem. J. 374 707-714 (2003).

31. Broekaert W.F., Terras F.R., Cammue B.P., Osborn R.W. Plant defensin: novel antimicrobial peptides as components of the host defense system // Plant Physiol. 1995. Vol. 108. P. 1353-1358.

32. Buffy, J.J. et al. Solid-state NMR investigation of the selective perturbation of lipid bilayers by the cyclic antimicrobial peptide RTD-1. Biochemistry 43 9800-9812 (2004).

33. Chalifour, A. et al. Direct bacterial protein PAMP recognition by human NK cells involves TLRs and triggers a-defensin production. Blood 104 1778-1783 (2004).

34. Chavakis, T. et al. Regulation of neovascularization by human neutrophil peptides (a-defensins): a link between inflammation and angiogenesis. FASEB J. 18 1306-1308(2004).

35. Chertov, O. et al. Identification of defensin-1, defensin-2, and CAP37/azurocidin as T-cell chemoattractant proteins released from interleukin-8-stimulated neutrophils. J. Biol. Chem. 271 2935-2940 (1996).

36. Chung, W.O., Hansen, S.R., Rao, D. & Dale, B.A. Protease-activated receptor signaling increases epithelial antimicrobial peptide expression. J. Immunol. 173 5165-5170 (2004).

37. Cole, A.M. et al. Retrocyclin: a primate peptide that protects cells from infection by T- and M-tropic strains of HIV-1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99 1813-1818 (2002).

38. Daher, K.A., Selsted, M.E. & Lehrer, R.I. Direct inactivation of viruses by human granulocyte defensins. J. Virol. 60 1068-1074 (1986).

39. David G. Perregaux, Kanan Bhavsar, Len Contillo, Jishu Shi, and Christopher A. Gabel. // The Journal of Immunology, 2002 168:00:00 30243032.

40. Diamond, G. et al. Tracheal antimicrobial peptide, a cysteine-rich peptide from mammalian tracheal mucosa: Peptide isolation and cloning of a cDNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 3952-3956 (1991).

41. Diamond, G. & Bevins, C.L. Endotoxin upregulates expression of an antimicrobial peptide gene in mammalian airway epithelial cells. Chest 105 5 IS 52S (1994).

42. Duits, L.A., Ravensbergen, В., Rademaker, M., Hiemstra, P.S. & Nibbering, P.H. Expression of (3-defensin 1 and 2 mRNA by human monocytes, macrophages and dendritic cells. Immunology 106 517-525 (2002).

43. Ehret-Sabatier L., Loew D., Goyffon M. et al. Characterization of novel cysteinerich antimicrobial peptides from scorpion blood // J. Biol. Chem. 1996. Vol. 271 №47. P. 29 357-29 364.

44. Eisenhauer, P.B. & Lehrer, R.I. Mouse neutrophils lack defensins. Infect. Immun. 60 3446-3447 (1992).

45. Fang, X.M. et al. Differential expression of a- and (3-defensins in human peripheral blood. Eur. J. Clin. Invest. 33 82-87 (2003).

46. Farner R.L., Dieckmann Т., Harwig S.S. et al. Solution structure of protegrin-1, a broad-spectrum antimicrobial peptide from porcine leukocytes // Chem. Biol. 1996. Vol. 3. P.543-550.

47. Gabay J.E., Almeida R.P. Antibiotic peptides and serine protease homologs in human polymorphonuclear leukocytes: defensins and azurocidin // Curr. Opin. Immunol. 1993. Vol. 5. P. 97-102.

48. Gans Т., Selsted M.E., Szklarek D. et al. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils // J. Clin. Invest. 1985. Vol. 76. P. 1427-1435.

49. Ganz Т., Selsted M.E., Lehrer R.I. Antimicrobial activity of phagocyte granule proteins // Semin. Respir. Infect. 1986. Vol. 1. P. 107-117.

50. Ganz Т., Oren A., Lehrer R.I. Defensins: microbicidal and cytotoxic peptides of mammalian host defense cells // Med. Microbiol. 1992. Vol. 181. P. 99-105.

51. Ganz, T. Defensins: antimicrobial peptides of innate immunity. Nat. Rev. Immunol. 3 710-720 (2003).

52. Ganz, Т. Extracellular release of antimicrobial defensins by human polymorphonulear leukocytes. Infect. Immun. 55 568-571 (1987).

53. Ganz, Т., Selsted, M.E. & Lehrer, R.I. Antimicrobial activity of phagocyte granule proteins. Sem. Resp. Infect. 1 107-117 (1986).

54. Garcia, J.R. et al. Human p-defensin 4:00 a novel inducible peptide with a specific saltsensitive spectrum of antimicrobial activity. FASEB J. 15 18191821 (2001).

55. Ghosh, D. et al. Paneth cell trypsin is the processing enzyme for human defensin-5. Nat. Immunol. 3 583-590 (2002).

56. Gray P.W., Flagg G., Leong S.R. et al. Cloning of the cDNA of a human neutrophil bactericidal protein. Structural and function correlations // J. Biol. Chem. 1989. Vol. 264. P. 9505-9509.

57. Harder, J., Bartels, J., Christophers, E. & Schroder, J.M. A peptide antibiotic from human skin. Nature 387 861 (1997).

58. Harder, J., Bartels, J., Christophers, E. & Schroder, J.M. Isolation and characterization of human P-defensin-3, a novel human inducible peptide antibiotic. J. Biol. Chem. 276 5707-5713 (2001).

59. Harder, J. & Schroder, J.M. Psoriatic scales: a promising source for the isolation of human skin-derived antimicrobial proteins. J. Leulcoc. Biol. 77 476-486 (2005).

60. Harder, J., Meyer-Hoffert, U., Wehkamp, K., Schwichtenberg, L. & Schroder, J.M. Differential gene induction of human (3-defensins (hBD-1, -2 -3 and -4) in keratinocytes is inhibited by retinoic acid. J. Invest. Dermatol. 123 522-529 (2004).

61. Hertz, C.J. et al. Activation of Toll-like receptor 2 on human tracheobronchial epithelial cells induces the antimicrobial peptide human (3-defensin-2. J. Immunol. 171 6820-6826 (2003).

62. Hill C. P., Yee J., Selsted M. E., Eisenberg D. Crystal structure of defensin HNP-3, an amphiphilic dimer: mechanisms of membrane permeabilization // Science. 1991. Vol. 251. P. -1481 1485.

63. Hiratsuka, Т. et al. Increased concentrations of human (3-defensins in plasma and bronchoalveolar lavage fluid of patients with diffuse panbronchiolitis. Thorax 58 425-430 (2003).

64. Hoffmann, J.A., Kafatos, F.C., Janeway, C.A. & Ezelcowitz, R.A. Phylogenetic perspectives in innate immunity. Science 284 1313-1318 (1999).

65. Hristova, K., Selsted, M.E. & White, S.H. Critical role of lipid composition in membrane permeabilization by rabbit neutrophil defensins. J. Biol. Chem. 272 24224-24233(1997).

66. Janeway, C.A., Jr & Medzhitov, R. Innate immune recognition. Annu. Rev. Immunol. 20 197-216 (2002).

67. Jones D.E., Bevins C.L. Paneth cells of the human small intestine express an antimicrobial peptide gene // J. Biol. Chem. 1992. Vol. 267 №32. P. 23 216-23 225.

68. Kagan, B.L., Selsted, M.E., Ganz, T. & Lehrer, R.I. antimicrobial defensin peptides form voltage-dependent ion-permeable channels in planar lipid bilayer membranes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87 210-214 (1990).

69. Lehrer R.I., Ganz T. Antimicrobial polypeptides of human neutrophils // Blood. 1990. Vol. 76 N 11. P. 2169-2181.

70. Lehrer R.I., Ganz T. Endogenous vertebrate antibiotics. Defensins, protegrins and other cysteine-rich antimicrobial peptides // Ann. N.Y. Acad Sci. 1996. Vol. 797. P. 228-239.

71. Lehrer R.I., Rosenman M., Harwig S.S. et al. Ultrasensitive assays for endogenous antimicrobial polypeptides // J. Immunol. Meth. 1991b. Vol. 137. P. 167-173.

72. Lehrer R.I., Hanifik J., Cline M.J. Defective bacterial activity in myeloperoxidase-deficient human neutrophils // Nature. 1969. Vol. 223. № 5238. P. 78-79.

73. Lehrer R.I., Ladra K.M., Hake R.B. Nonoxidative fungicidal mechanisms of mammalian granulocytes: demonstration of components with canididacidal activity in human, rabbit and guinea pig leukocytes // Infect, and Immun. 1975. Vol. 11. P. 1226-1234.

74. Lehrer R. I., Barton K. A., Daher S. S. et al. Interaction of human defensins with Escherichia coli. Mechanism of bactericidal activity // J. Clin. Invest. 1989a. Vol. 84 N 2. P. 553-561.

75. Lehrer, R.I. Primate defensins. Nat. Rev. Microbiol. 2 727-738 (2004).

76. Lehrer, R.I., Szklarek, D., Ganz, T. & Selsted, M.E. Correlation of binding of rabbit granulocyte peptides to Candida albicans with candidacidal activity. Infect. Immun. 49 207-211 (1985).

77. Lehrer, R.I., Ganz, Т., Szklarek, D. & Selsted, M.E. Modulation of the in vitro candidacidal activity of human neutrophil defensins by target cell metabolism and divalent cations. J. Clin. Invest. 81 1829-1835 (1988).

78. Leonova, L. et al. Circular minidefensins and posttranslational generation of molecular diversity. J. Leukoc. Biol. 70 461^164 (2001).

79. Sl.Lerher R.I. Neutrophil Defensins: Purification, Characterization, and Antimicrobial Testing // Methods in enzymology. 1994. Vol. 236 P. 160-161.

80. Lerher R. I., Szklarek D., Barton A. et al. Antibacterial properties of eosinophil major basic protein and eosinophil cationic protein // J. Immunol. 1989b. Vol. 142 N 12. P. 4428-4434.

81. Levy, O. Antimicrobial proteins and peptides: anti-infective molecules of mammalian leukocytes. J. Leukoc. Biol. 76 909-925 (2004).

82. Lichtenstein A.K., Ganz Т., Selsted M.E., Lehrer R.I. In vitro tumor cell cytolysis mediated by peptide defensins of human and rabbit granulocytes // Blood. 1986b. Vol. 68. P. 1407-1410.

83. Lichtenstein A.K., Ganz Т., Nguyen T.-M. et al. Mechanism of target cytolysis by peptide defensins // J. Immunol. 1988a. Vol. 140'№ 8. P. 26862694.

84. Liu, L., Roberts, A.A. & Ganz, T. By IL-1 signaling, monocyte-derived cells dramatically enhance the epidermal antimicrobial response to lipopolysaccharide. J. Immunol. 170 575-580 (2003).

85. Lohner, K., Latal, A., Lehrer, R.I. & Ganz, T. Differential scanning microcalorimetry indicates that human defensin, HNP-2, interacts specifically with biomembrane mimetic systems. Biochemistry 36 1525-1531 (1997).

86. Lynn, D.J., Lloyd, A.T., Fares, M.A. & O'Farrelly, C. Evidence of positively selected sites in mammalian a-defensins. Mol. Biol. Evol. 21 819827 (2004).

87. Maemoto, A. et al. Functional analysis of the a-defensin disulfide array in mouse cryptdin-4. J. Biol. Chem. 279 44188-44196 (2004).

88. Mandal, M. & Nagaraj, R. Antibacterial activities and conformations of synthetic a-defensin HNP-1 and analogs with one, two and three disulfide bridges. J. Pept. Res. 59 95-104 (2002).

89. Morrison, G., Kilanowski, F., Davidson, D. & Dorin, J. Characterization of the mouse p-defensin 1 Defbl, mutant mouse model. Infect. Immun. 70 30533060 (2002).

90. Moser, C. et al. P-Defensin 1 contributes to pulmonary innate immunity in mice. Infect. Immun. 70 3068-3072 (2002).

91. Munk, C. et al. The 0-defensin, retrocyclin, inhibits HIV-l entry. AIDS Res. Hum. Retroviruses 19 875-881 (2003).

92. Murphy, C.J., Foster, B.A., Mannis, M.J., Selsted, M.E. & Reid, T.W. Defensins are mitogenic for epithelial cells and fibroblasts. J. Cell. Physiol. 155 408-413 (1993).

93. Nakamura Т., Furunaka H., Miyata T. et al. Tachyplesin, a class of antimicrobial peptide from the hemocytes of horseshoe crab (Tachypleus tridentatus) //J. Biol. Chem. 1988. Vol. 263. P. 16 709 16 713.

94. Nguyen, T.X., Cole, A.M. & Lehrer, R.I. Evolution of primate 0-defensins: a serpentine path to a sweet tooth. Peptides 24 1647-1654 (2003).

95. Nomura, I. et al. Cytokine milieu of atopic dermatitis, as compared to psoriasis, skin prevents induction of innate immune response genes. J. Immunol. 171 3262-3269(2003).

96. Odeberg H., Olsson I. Antibacterial activity of cationic proteins from human granulocytes // J. Clin. Invest. 1975. Vol. 56. P. 1118-1142.

97. Olsson I. Biochemical properties of neutral proteases of human neutrophils //Movement, metabolism and bactericidal mechanisms of phagocytes. Padua, 1977. P. 103-114.

98. Olsson I., Odeberg H., Weiss J., Elsbach P. Bactericidal cationic proteins of human granulocytes // Neutral proteases of human polymorphonuclear leukocytes. Baltimore-Munich, 1978. P. 18-32.

99. Ong, P.Y. et al. Endogenous antimicrobial peptides and skin infections in atopic dermatitis. N. Engl. J. Med. 347 1151-1160 (2002).

100. Panyutich A.V., Panyutich E.A., Krapivin V.A. et al. Plasma defensin concentrations are elevated in patients with septicemia or bacterial meningitis // J. Lab. And Clin. Med. 1993b. Vol. 122 № 2. P. 202-207.

101. Panyutich A.V., Ganz T. Fctivated alpha 2-Macroglobulin is a principal defensin-binding protein // Amer. J. Respirat. Cell and Molec. Biol. 1991. №5. P. 101-106.

102. Panyutich, A.V., Voitenok, N.N., Lehrer, R.I. & Ganz; T. An enzyme immunoassay for human defensins. J. Immunol. Methods 141 149-155 (1991).

103. Patil, A., Hughes, A.L. & Zhang, G. Rapid evolution and diversification of mammalian alpha-defensins as revealed by comparative analysis of rodent and primate genes. Physiol. Genomics 20 1-11 (2004).

104. Platz, J. et al. Microbial DNA induces a host defense reaction of human respiratory epithelial cells. J. Immunol. 173 1219-1223 (2004).

105. Proud, D., Sanders, S.P. & Wiehler, S. Human rhinovirus infection induces airway epithelial cell production of human (3-defensin 2 both in vitro and in vivo. J. Immunol. 172 4637-4645 (2004).

106. Rodriguez-Jimenez, F.J. et al. Distribution of new human (3-defensin genes clustered on chromosome 20 in functionally different segments of epididymis. Genomics 81 175-183 (2003).

107. Romeo D., Skerlavaj В., Bolognesi M., Gennaro R. Structure and bactericidal activity of an antibiotic dodecapeptide purified from bovine neutrophils // J. Biol. Chem. 1988. Vol. 263 N 20. P. 9573-9575.

108. Ross, D.J. et al. Increased bronchoalveolar lavage human (3-defensin type 2 in bronchiolitis obliterans syndrome after lung transplantation. Transplantation 78 1222-1224 (2004).

109. Rumio, С. et al. Degranulation of paneth cells via Toll-like receptor 9. Am. J. Pathol. 165 373-381 (2004).

110. Sahl, H.G. et al. Mammalian defensins: structures and mechanism of antibiotic activity. J. Leukoc. Biol. 77 466-475 (2005).

111. Saito Т., Kawabata S., Shigenaga T. et al. A novel big defensin identified in horseshoe crab hemocytes: isolation, amino acid sequence and antibacterial activity//J. Biochem. 1995. Vol. 117. P. 1131-1137.

112. Salzman, N.H., Ghosh, D., Huttner, K.M., Paterson, Y. & Bevins, C.L. Protection against enteric salmonellosis in transgenic mice expressing a human intestinal defensin. Nature 422 522-526 (2003).

113. Satchell, D.P. et al. Interactions of mouse Paneth cell a-defensins and p-defensin precursors with membranes. Prosegment inhibition of peptide association with biomimetic membranes. J. Biol. Chem. 278 13838-13846 (2003).

114. Schaefer, T.M., Fahey, J.V., Wright, J.A. & Wira, C.R. Innate immunity in the human female reproductive tract: antiviral response of uterine epithelial cells to the TLR3 agonist poly(I:C). J. Immunol. 174 992-1002 (2005).

115. Schutte, B.C. & McCray, P.B., Jr. p-defensins in lung host defense. Annu. Rev. Physiol. 64 709-748 (2002).

116. Schutte, B.C. et al. Discovery of five conserved p-defensin gene clusters using a computational search strategy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99 2129-2133 (2002).

117. Selsted M.E. Investigational approaches for studying the structures and biological functions of myeloid antimicrobial peptides // Genetic engineering. 1993. Vol. 15. P. 131-147.

118. Selsted M.E., Brown D.M., De Lange R.J., Lehrer R.I. Primary structures of MCP-I and MCP-2, natural peptide antibiotics of rabbit lung macrophages // J. Biol. Chem. 1983. Vol. 258 №23. P. 14 485-14 489.

119. Selsted, M.E. et al. Purification, primary structures, and antibacterial activities of p-defensins, a new family of antimicrobial peptides from bovine neutrophils. J. Biol. Chem. 268 6641-6648 (1993).

120. Semple, C.A., Rolfe, M. & Dorin, J.R. Duplication and selection in the evolution of primate beta-defensin genes. Genome Biol. 4 R31 (2003).

121. Siebens H., Tevethia S.S., Babior B. Neutrophil-mediated antibody killing of herpes-simplex-infected cells // Blood. 1979. Vol. 54. P. 88-97.

122. Singh, P.K. et al. Production of P-defensins by human airway epithelia. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95 14961-14966 (1998).

123. Starkey P.M., Barrett A.J. Human cathepsin G. Catalytic and immunological properties // Biochem. J. 1976. Vol. 155. P. 273-278.

124. Tang, Y.Q. et al. A cyclic antimicrobial peptide produced in primate leukocytes by the ligation of two truncated a-defensins. Science 286 498-502 (1999).

125. Taudien, S. et al. Polymorphic segmental duplications at 8p23.1 challenge the determination of individual defensin gene repertoires and the assembly of a contiguous human reference sequence. BMC Genomics 5 92 (2004).

126. Territo, M.C., Ganz, Т., Selsted, M.E. & Lehrer, R.I. Monocyte-chemotactic activity of defensins from human neutrophils. J. Clin. Invest. 84 2017-2020(1989).

127. Trabi, M., Schirra, H.J. & Craik, D.J. Three-dimensional structure of RTD-1, a cyclic antimicrobial defensin from Rhesus macaque leukocytes. Biochemistry 40 4211^1221 (2001).

128. Tran, D. et al. Homodimeric 0-defensins from rhesus macaque leukocytes: isolation, synthesis, antimicrobial activities, and bacterial binding properties of the cyclic peptides. J. Biol. Chem. 277 3079-3084 (2002).

129. Tsutsumi-Ishii, Y. & Nagaoka, I. Modulation of human p-defensin-2 transcription in pulmonary epithelial cells by lipopolysaccharide-stimulated mononuclear phagocytesvia proinflammatory cytokine production. J. Immunol. 170 4226-4236(2003).

130. Yalore E., Ganz T. Posttranslational processing of defensins in immature human myeloid cells // Blood. 1992. Vol. 79 №6. P. 1538-1544.

131. Valore, E.V. et al. Human (3-defensin-1: an antimicrobial peptide of urogenital tissues. J. Clin. Invest. 101 1633-1642 (1998).

132. Vora, P. et al. Beta-defensin-2 expression is regulated by TLR signaling in intestinal epithelial cells. J. Immunol. 173 5398-5405 (2004).

133. Wang, T.T. et al. Cutting edge: 1,25-dihydroxyvitamin D3 is a direct inducer of antimicrobial peptide gene expression. J. Immunol. 173 2909-2912 (2004).

134. Wimley, W.C., Selsted, M.E. & White, S.H. Interactions between human defensins and lipid bilayers: evidence for formation of multimeric pores. Protein Sci. 3 1362-1373 (1994).

135. Wolk, K. et al. IL-22 increases the innate immunity of tissues. Immunity 21 241-254 (2004).

136. Wu, E.R., Daniel, R. & Bateman, A. RK-2: a novel rabbit kidney defensin and its implications for renal host defense. Peptides 19 793-799 (1998).

137. Wu, Z. et al. From pro defensins to defensins: synthesis and characterization of human neutrophil pro a-defensin-1 and its mature domain. J. Pept. Res. 62 53-62 (2003).

138. Wu, Z. et al. Engineering disulfide bridges to dissect antimicrobial and chemotactic activities of human p-defensin 3. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100 8880-8885 (2003).

139. Yang, D., Biragyn, A., Hoover, D.M., Lubkowski, J. & Oppenheim, J.J. Multiple roles of antimicrobial defensins, cathelicidins, and eosinophil-derived neurotoxin in host defense. Annu. Rev. Immunol. 22 181-215 (2004).

140. Yang, D., Chen, Q., Chertov, O. & Oppenheim, J.J. Human neutrophil defensins selectively chemoattract naive T and immature dendritic cells. J. Leukoc. Biol. 68 9-14 (2000).

141. Yang, D. et al. Beta-defensins: linking innate and adaptive immunity through dendritic and T cell CCR6. Science 286 525-528 (1999).

142. Yang, D., Biragyn, A., Kwak, L.W. & Oppenheim, J.J. Mammalian defensins in immunity: more than just microbicidal. Trends Immunol. 23 291296 (2002).

143. Yudin, A.I. et al. ESP 13.2, a member of the p-defensin family, is a macaque sperm surface-coating protein involved in the capacitation process. Biol. Reprod. 69 1118-1128 (2003).

144. Zanetti, M. Cathelicidins, multifunctional peptides of the innate immunity. J. Leukoc. Biol. 75 39-48 (2004).

145. Zasloff, M. Antimicrobial peptides of multicellular organisms. Nature 415 389-395 (2002).

146. Zeya H.I., Spitznagel J.K. Antimicrobial specificity of leukocyte lysosomal cationic proteins// Science. 1966a. Vol. 154. P. 1049-1051.

147. Zhao C., Liu L., Lehrer R.I. Identification of a new member of the protegrin family by cDNA cloning // FEBS Lett. 1994. Vol. 346. P. 285-288