Мониторинг и совершенствование специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Павлов, Сергей Иванович

• Павлов, Сергей Иванович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Павлов, Сергей Иванович

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Род Salmonella - общие сведения

2.1.1. Мониторинг бактерий рода Salmonella

2.1.2. Биологические свойства

2.1.3. Антигенная структура

2.2. Средства специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц

2.3. Классификация и характеристика вакцинных препаратов

2.4. Биотехнология и производство вакцин

2.4.1. Питательные среды

2.4.2. Приготовление посевного материала

2.4.3. Глубинное культивирование микроорганизмов

2.5. Оценка иммуногенной активности вакцинных препаратов

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Материалы и методы

3.2. Результаты исследований

3.2.1. Мониторинг сальмонеллезной инфекции свиней и птиц

3.2.2. Бактериологические исследования на сальмонеллез

3.2.3. Определение чувствительности полевых штаммов сальмонелл к антибактериальным препаратам;

3.2.4. Технология изготовления и контроль живых вакцин против сальмонеллеза

3.2.4.1. Питательные среды для культивирования вакцинных штаммов

3.2.4.2. Подготовка посевного материала

3.2.4.3. Глубинное периодическое культивирование вакцинных штаммов S. choleraesuis SC230, S. tyhpimurium №3, S. enteritidis SE204 и S. gallinarum-pullorum T

3.2.4.4. Оценка безвредности и иммуногенности вакцин

3.2.5. Производственные испытания вакцин

3.2.6. Сравнительная оценка иммуногенных свойств «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» с другими сальмонеллезными вакцинами

3.2.6.1. Оценка протекгивной активности сальмонеллезных вакцин

3.2.6.2. Оценка гуморального иммунитета

3.2.6.3. Оценка макрофагального звена клеточного иммунитета

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

5. ВЫВОДЫ

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Мониторинг и совершенствование специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц»

Актуальность темы

Создание и возрождение крупных свиноводческих и птицеводческих комплексов сопровождается резким изменением эпизоотической ситуации по раду инфекционных заболеваний и активизацией условно патогенных микроорганизмов.

Большая плотность животных сопряжена с возможностью взаимного перезаражения, возникают идеальные условия для циркуляции возбудителей среди поголовья.

В последние годы ветеринарные службы наибольшее внимание уделяют профилактике вирусных инфекций и практически перестали контролировать бактериальные, что привело к увеличению процента заболеваемости сельскохозяйственных животных и птицы.

На первый план выдвинулись желудочно-кишечные заболевания (в том числе сальмонеллез) и инфекции с поражением дыхательных путей.

Возникновение и широкое распространение желудочно-кишечных болезней поросят обусловлено воздействием на их организм многих этиологических факторов.

По данным Шахова А.Г. (2003) при изучении этиологии желудочно-кишечных болезней поросят в 187 свиноводческих хозяйствах 10 областей России установлено: в 72% хозяйств диареи были вызваны бактериями, в 23% - вирусами, в 3% - простейшими, в 1% - патогенными грибами и лишь в 1% хозяйств возбудители из патологического материала не выделены.

Сальмонеллез относится к числу убиквитарных зооантропонозов. Экономический ущерб от сальмонеллеза складывается из падежа части заболевшего молодняка, отставания в росте и развитии переболевшего поголовья.

На сегодняшний день проблема профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, в том числе и птицы, имеет не только экономическое, но и социальное значение. Свидетельством реального существования такой угрозы, по данным ВОЗ, являются участившиеся вспышки инфекций среди людей. Причину заболеваний связывают с поражением продуктов питания животного происхождения патогенными микроорганизмами. Адаптация штамма Salmonella enteritidis к организму птицы, повышение его устойчивости создали предпосылки для передачи возбудителя от птицы к человеку и обратно. По данным ВОЗ, заболеваемость людей сальмонеллезом за последнее десятилетие возросла шестикратно, а в странах СНГ - в семь раз. При этом этиологическая значимость S. enteritidis в заболевании людей возросла на 30%, животных — 75%, а число случаев обнаружения возбудителя в продуктах питания увеличилось на 50%.

Так, в Голландии - стране, где санитарно-гигиенические требования к качеству мяса наиболее жесткие, из тушек мяса выделяют сальмонеллы видов S. gallinarum, S. typhimurium, S. enteritidis, S. hodar, S. anatis, S. dublin и др., и список этот постоянно пополняется. Развитые экономически страны несут ощутимые потери от сальмонеллезов. Так, в США убытки такого рода оцениваются в 2 млрд. долларов, в Канаде - в 300 млн. долларов (В. Ли, 2003).

В настоящее время во всем мире уделяется большое внимание разработке различных препаратов и вакцин, направленных на борьбу с возбудителями этой инфекции.

Сложность борьбы с сальмонеллезом определяется быстрой адаптацией возбудителя как к антибиотикам, так и другим химиотерапевтическим препаратам. Наблюдается селекция и циркуляция штаммов, несущих R-факторы, формирующиеся под влиянием вышеуказанных препаратов.

Бесконтрольное применение антибиотиков усугубило ситуацию и способствовало селекции антибиотико-резистентных штаммов микроорганизмов. В ряде хозяйств обнаруживается 100% - ная устойчивость бактерий ко всем применяемым антибиотикам.

Таким образом, на сегодняшний день специфическая профилактика сальмонеллеза играет главную роль в создании эпизоотического благополучия и успешном развитии свиноводческих и птицеводческих хозяйств.

В настоящее время в птицеводстве в качестве профилактических и лечебных средств при сальмонеллезах применяют пробиотики и бактериофаги.

Для профилактики сальмонеллеза свиней в настоящее время широко используются как жидкие инактивированные вакцинные препараты на основе вирулентных штаммов S. choleraesuis и S. typhimurium, так и вакцины живые сухие из аттенуированных штаммов. Применение в ветеринарной практике и той и другой формы вакцины объясняется наличием у каждой своих преимуществ и недостатков.

Жидкие инактивированные вакцины часто не обеспечивают эффективной защиты иммунизированных животных. Они имеют более низкую иммуногенность за счет действия инактиванта, повреждающего антигенные структуры клеток микроорганизмов. К тому же сальмонеллезные антигены в организме иммунизированных животных не способны размножаться и реплицироваться, что ограничивает их циркуляцию и проявление клеточного иммунитета.

Одной из основных причин медленного внедрения в практику живых вакцин является минимальная возможность применения антибиотиков до и после иммунизации.

Для профилактики сальмонеллеза свиней существует вакцина живая сухая из штамма ТС-177, который представляет собой «дикий» мутант, не имеет генетических маркеров, кроме пониженной вирулентности. Известна также вакцина живая сухая из супрессорного ревертанта S. choleraesuis №9. Штамм S. choleraesuis №9 (ФГУ ВГНКИ) отличается от эпизоотических штаммов высокой частотой (50%) выделения стрептомицинозависимых мутантов, большая часть из которых остается вирулентной. Поэтому использование этих вакцин приводит к затруднению при дифференциации вакцинного штамма от полевого, из-за необходимости изучения большого количества мутантных клонов (Э.А. Светоч и др. 2003).

Анализируя выше сказанное, можно сделать вывод, что разработка и совершенствование средств специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц остается актуальной задачей научных сотрудников, биотехнологов и практикующих врачей.

Цель и задачи исследования

Целью данной работы являлось проведение мониторинга сальмонеллезной инфекции в свиноводческих и птицеводческих хозяйствах и совершенствование профилактики этого заболевания с помощью специфических средств.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

-провести мониторинг сальмонеллеза свиней и птиц на территории Российской Федерации;

-разработать технологии производства, методы контроля и применения «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц»;

-разработать нормативно-техническую документацию (технические условия и наставление по применению) на производство данных препаратов;

-испытать вакцины в лабораторных и производственных условиях;

-оценить протективную активность «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» в сравнении с другими существующими противосальмонеллезными вакцинами;

Научная новизна работы

Получены новые данные по результатам мониторинга возбудителей сальмонеллеза свиней и птиц о роли S. choleraesuis, S. typhimurium, S. enteritidis, S. gallinarum-pullorum в развитии эпизоотической ситуации, складывающейся в неблагополучных по сальмонеллезу отдельно взятых хозяйствах.

Обоснована необходимость создания вакцинных препаратов для профилактики сальмонеллеза свиней на основе штаммов S. choleraesuis и S. typhimurium и сальмонеллеза птиц на основе штаммов S. enteritidis и S. gallinarum-pullorum.

Показана возможность использования питательной среды на основе ПГРМ вместо мясных переваров без потери урожайности при культивировании сальмонелл.

Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза свиней» из аттенуированных штаммов S. choleraesuis SC230 и S. typhimurium №3 по иммуногенным свойствам превосходит существующие противосальмонеллезные вакцины.

Практическая значимость работы

Разработаны технологии изготовления, контроля и применения «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц». Созданы проекты научно-технической документации (НД) на вакцинные препараты по изготовлению и контролю.

Предложена питательная среда для культивирования вакцинных штаммов S. choleraesuis SC230, S. typhimurium №3, S. enteritidis SE204 и S. gallinarum-pullorum T10 на основе панкреатического гидролизата рыбной муки. Данная питательная среда позволяет снизить себестоимость вакцинных препаратов по сравнению с теми, которые получены на средах из мясных переваров.

Получены положительные результаты испытания вакцинных препаратов как на лабораторных, так и на естественно восприимчивых животных.

Публикация результатов исследований

По теме диссертации опубликовано 5 научных работ. Зарегистрировано 2 отчета о

НИОКР ГНЦ прикладной микробиологии по линии Министерства науки, промышленности и технологии РФ 2001-2002 (Раздел «Разработка образцов готовых форм препаратов и наработка опытных партий вакцин против сальмонеллеза птиц, гемофилеза свиней. Получение лабораторного образца вакцины против коксиеллеза крупного рогатого скота») и 2002-2003 гг. (Раздел «Разработка проекта нормативно-технической документации на приготовление «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц»).

Апробация работы

Материалы диссертации доложены:

- на международной конференции «Научные основы технологии производства ветеринарных биопрепаратов», Сб. докл. Межд. конф. молодых ученых 5-6 декабря 2002 г. -Щелково, 2002 г;

- на межлабораторном научном семинаре, ГНЦПМ - Оболенск, апрель 2004г.

Основные положения диссертации выносимые на защиту

1.Новые данные о роли полевых штаммов S. choleraesuis, S. typhimurium, S. enteritidis, S. gallinarum-pullorum в развитии эпизоотической ситуации в РФ на примере 21 свиноводческого и 36 птицеводческих хозяйств из 27 регионов России.

2.Питательная среда для культивирования сальмонелл на основе ПГРМ с содержанием ам. N > 600 мг%.

3.«Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза птиц», характеризующаяся крайне низкой остаточной реактогенностью и способностью формирования стойкого специфического иммунитета.

4.«Бивалентная вакцина живая сухая против сальмонеллеза свиней», обладающая крайне низкой остаточной реактогенностью и высокими иммуногенными свойствами по сравнению с другими сальмонеллезными вакцинами.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 104 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и приложений. Диссертация иллюстрирована 15 таблицами и 11 рисунками. Список литературы включает 115 источников, из них 83 отечественных и 32 зарубежных.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Павлов, Сергей Иванович

1. Мониторинг возбудителей сальмонеллезов свиней и птиц показал, что в настоящее время 47,4% свиноводческих и 48,6% птицеводческих хозяйств являются эпизоотическими очагами сальмонеллезной инфекции. Лечение и профилактика сальмонеллеза могут быть результативными при условии определения лекарственной устойчивости выделенных штаммов сальмонелл.2. Использование БГРМ вместо мясных питательных сред при культивировании вакцинных штаммов сальмонелл не приводит к потере урожайности, бактериальные клетки сохраняют характерные для сальмонелл тинкгориальные и серологические свойства, себестоимость вакцинных препаратов снижается по сравнению с теми, которые получены на средах из мясных переваров.3. Разработана и освоена технология изготовления «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц».4. Полученные экспериментальные серии вакцин прошли лабораторные и производственные испытания (в неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах) с положительными результатами.5. Сравнительная оценка протективной активности используемых в практике сальмонеллезных вакцин и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» из аттенуированных штаммов S. choleraesuis SC230 и S. typhimurium №3 показала, что экспериментальная вакцина превосходит по иммуногенным свойствам как инактивированные, так и живые сухие аналоги.6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ Представлены для рассмотрения и согласования в Департамент ветеринарии Минсельхоза России технические условия и наставления по применению «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза свиней» и «Бивалентной вакцины живой сухой против сальмонеллеза птиц».

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Павлов, Сергей Иванович, 2004 год

1. Алимов A.M., Котылев О. А. Сравнительная оценка питательных сред при культивировании вакцинного штамма листерий АУФ. Ученые записки КВИ. - Казань: 1975. - Т. 119.-158 с.

2. Андросов Ф.З., Беляев И.Я., Клочко Р.Т,, Ковалерчук Л.И. и др.; Под ред. В.Я. Антонова Справочник ветеринарного лаборанта. - М.: Колос, 1981. - 40-41,89-91 с.

3. AHT0H0B Б.И., Борисова В.В., Волкова П.М., Каменева Л.П. и др.; Под ред. Б.И. Антонова Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные исследования. - М.: Агропромиздат, 1986. -177 - 209 с.

4. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. - Л.: Гос. изд-во мед. лит., 1962, - 127-173 с.

5. Баев И.А. Биотехнология. - М.: Наука, 1984. б.Баснакьян И.А. Культивирование микроорганизмов с заданными свойствами. - М.: Медицина, 1992.

6. Баснакьян И.Н. Культивирование микроорганизмов в переменных условиях. - М.: Наука, 1982.

7. Бейли Дж., Оллис Д. Основы биохимической инженерии. - В 2 т. М.: Мир, 1989.

8. Бухвальдер Р., Фухс Х.-В., Хайдер Г., Хипе Т. и др. Иммунопрофилактика болезней животных. Пер. с нем. - М.: Колос, 1981. - 415 с.

9. Вайсман И.Ш. Предпосылки комплексной оценки физиологического состояния бактерий и их популяций. Журн Микробиол. - 1984. - № 4. - 3 - 8 с.

10. Валеева Ф.К. Автореф. дис... канд. вет. наук. - Алма-Ата, 1966. П.Виестур У.Э., Шмите И.А., Жилевич А.В. Биотехнология. Биотехнологические агенты, технология, аппаратура. - Рига: Зинатне, 1987. -263 с.

11. Га11иакберова Н.И., Алимов А.М., Макаев Х.Н. Изыскание питательной среды и оптимизация условий культивирования сальмонелл. Сборник докладов Международной конференции молодых ученых 5-6 июня 2001г. - Щелково: 2001. - 103 - 106 с.

12. Галиакберова Н.И., Алимов А.М., Макаев Х.Н. Влияние дозы и фазы роста посевного материала на выход бактериальной массы сальмонелл. Сборник докладов Международной конференции молодых ученых 5-6 декабря 2002г. - Щелково: 2002. - 91 - 93 с.

13. Герхард Ф. Методы общей бактериологии. Пер. с англ. - М.: Мир, 1983. Т.З 21 .Гинзбург Н.Н. Живые вакцины. - М.: Медицина, 1969.

14. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. - М.: Мир, 2002. - 227 - 246 с.

15. Голубева И.В., Килессо В.А., Киселева Б.С., Прямухина Н.С. и др.; Под ред. В.И. Покровского Энтеробактерии. Руководство для врачей. - М.: Медицина, 1985. - 121 - 164 с.

16. Гусев В.В., Павлов СИ., Приходько СМ., Теймуразов М.Г. Актуальность проблемы сальмонеллеза в промышленном птицеводстве. Журн. Практик. - 2002. - № 9-10. - 94 - 96 с.

17. Гусев В.В., Теймуразов М.Г., Приходько СМ., Павлов СИ. Мониторинг возбудителей бактериальных инфекций в промышленном птицеводстве. Журн. Вет. консультант. - 2002. - № 19.-17-19 с.

18. Гусев В., Светоч Э., Глазков Н,, Теймуразов М. и др. Мониторинг возбудителей бактериальных инфекций. Журн. Птицеводство. - 2003. - № 2. - 8 - 10 с.

19. Гусев В.В., Приходько СМ., Павлов СИ., Теймуразов М.Г. Мониторинг бактериальных инфекций в промышленном свиноводстве. Журн. Ветеринария. - 2004. - № 2. - 7 -8 с.

20. Дзагуров Г., Быченко Б.Д. Термины и определения, относящиеся к стандартным образцам биологических препаратов, используемых в медицине. Сборник трудов ГИСК им. Тарасевича и Московской НИИВиС - М.: 1972. -1 - 6 с,

21. Котова А.Л., Белозеров Е.С, Сальмонеллезы. - Алма-ата: Гылым, 1992.

22. Ли В. Физал - и сальмонелла исчезнет. Журн. Птицеводство. - 2003. - №2. - 21 - 22 с.

23. Лярски 3. Диагностика вирусных болезней животных. Пер. с пол. - М.: Колос, 1980. - 217-233 с.

24. Матвиенко Б.А. Иммуногенность аттенуированных штаммов сальмонелл. Журн. Ветеринария. - 1970. - № 8. - 44 - 45 с.

25. Матвиенко Б.А. Ветеринарная микробиология. - М.: Колос, 1982.

26. Машины, установки, системы.: Каталог / Фирма Pharmatec. - Германия, 1996.

27. Медуницын Н.В. Вакцинология. - М.: «Триада-Х», 1999. - 272 с.

28. Мосичев М.С., Складнев А.А., Котов В.Б. Общая технология микробиологических производств. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982.

29. Паутов В.Н., Чичерин Ю.В., Евстигнеев В.И. Протективные свойства фракции чумного микроба в эксперименте. Журн. микробиол. - 1979. - №10. - 37 - 42 с.

30. Перт Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. Пер. с англ. - М.: Мир, 1978.

31. Позмогова И.Н. Воздействие температур выше оптимальных на бактерии и дрожжи. - Изд-во АН СССР, сер. биол. -1978. - №2.

32. Позмогова И.Н. Культивирование микроорганизмов в переменных условиях. - М.: Наука, 1983.

33. Покровский В.И. Энтеробактерии. - М.: Медицина, 1985. ЗО.Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. - М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. - 363 - 378 с.

34. Работнова И.А. Роль физико-химических условий (рН и гНг) в жизнидеятельности микрорганизмов. - М.: Наука, 1957.

35. Работнова И.А., Поамогова И.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизма. - М.: Наука, 1979.

36. Работнова И.А., Баснакьян И.Н., Боровкова В.М., Запорожцев Л.Н. Процессы культивирования микроорганизмов. - Изв. АН СССР. Сер. биол. - 1982. - №4. - 559 - 573 с.

37. Равилов А.З. с соавт. Микробиологические среды. - Казань: ФЭН, 1999. - 398 с,

38. Раевский А.А. Разработка управляемого процесса культивирования Pasteurella multocida при производстве вакцин. Авореф. дне... канд. биол. наук. - Щелково, 2002.

39. Ряпис л.А,, Беляков В.Д. Проблемы номенклатуры и классификации сальмонелл и сальмонеллезов. Журн. микробиол. - 1995. -№ 4. -115-118 с.

40. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б.; Под ред. М.А. Сидорова Определитель зоопатогенных микроорганизмов: справочник. - М.: Колос, 1995. - 201 - 204 с.

41. Сохин А.А. Парадокс инфекционного иммунитета. Журн. микробиол. - 1988. - № 1. - 73 - 80 с. бб.Стерилизаторы фирмы «Гетинте».: Каталог / Фирма Getinge. - Германия, 1996.

42. Табаева А.А., Котова А.Л. Вопросы таксономии и номенклатуры бактерий рода SALMONELLA. Журн. Микробиология. - 200L - № 6. - 110 - 113 с.

43. Тимаков В.Д., Левашев B.C., Борисов Л.Б. Микробиология. - М.: Медициа, 1983. - 216 -217 с.

44. Ураков Н.Н., Волков В.Я., Боровик Р.В. Функциональное состояние и механизмы повреждения микрорганизмов в процессе приготовления бактериальных препаратов. Журн. Биотехнолоигия. - 1988. - Т. 4 - №4. - 420 -432 с.

45. Фробишер М. Основы микробиологии. - М.: Мир, 1963.

46. Хейфец А.Б. Теоретические и методические основы оценки эффективности специфической профилактики. - М.: Медицина, 1968.

47. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П., Стейли Дж. и др. Определитель бактерий Берджи. В 2 т. - М.: Мир, 1997. - Т. 1. - 192 - 193 с.

48. Шефлер С, Минцер Л., Бенеш Опыты по получению атгенуированных штаммов и иммуногенных штаммов энтеробактерий. Журн. ЖМЭИ. - 1957. - №8. - 8 - 14 с.

49. Шустер Б.Ю. Вакцины из атгенуированных штаммов сальмонелл: Дис... докт. вет. наук. - М., 1988.

50. Ярцев М.Я. Разработка технологии производства живых сухих вакцин против пастереллеза птиц, рожи и бруцеллеза животных (экспериментальные исследования и внедрение) Автореф. дис... докт. биол. наук. - М., 1991.

51. Ярцев М.Я., Бушуева Н.Б., Раевский А,А., Анисимова Л.В. и др. Технология промышленного производства бактериальных вакцин. Журн. Ветеринария. - 1998. - №3. - 22 -24с.

52. Ярцев М.Я. Специфическая профилактика и технология вакцинного производства при сальмонеллезах. Журн. Ветеринария. 1996. - № 8. - 47 - 51 с.

53. Ярцев М.Я. Показатель роста микроорганизмов в управляемых процессах культивирования. Журн. Ветеринария. 2000. - № 4. - 25 - 28 с.

54. Botes H.I. W. // Bull. Off. Int. Epiz. - 1968

55. Emst R.R. Sterilisation by heat. In «Desinfection, Sterilisation and Preservation». // Led and fabiger, Philadelphia, Pennsylvania, - 1977. - pp. 481 - 521.

56. Hansen N.H., Riemann H. Factors affecting the heat resistane of nonsporing organisms. // L. Appl. Bacteriol, - 26, - 1963. - pp. 314 - 333

57. Haurowits F. Immunochemistry and the biosynthesis of antibodies. New - Jork, 1.ondon,Interscience. -1968. - pp. 301.

58. Hemert P. // Progress in indust. Microbiol., 1974,13

59. Hinshelwood C.N. The chemical kinetics of the bacterial cell. // Clarendon Press, Oxford, 1946.

60. Kluyver A.J., Perquin L.H.C., Biochemische Zeit., 266,68 (1933)

61. Le Minor L., Veron M., Popoff M.Y. Proposition pour une nomenclature des Salmonella. Ibid. 1982,133 B: - pp. 245 - 254.

62. Le Minor L., Popoff M.Y., Laurent B. et al. Individualisation dune septieme sous-espece de Salmonella: S. choleraesuis subsp. indica subsp. nov. Ann. Microbiol. (Inst. Pasteur). 1986, 137 B: -pp.211-217.

63. Litwin J. A survey of various media and growth factors used in evil cultivation // Dev. Biol. Stand. - 42, -1979. - pp. 37 - 45.

64. Minkevich I.B. M'ass-Energy Balance for Microbial Product Synthesis. Biochemical cell Culture Aspects. // Biotech. Bioeng, - 25, -1267, - 1983,

65. Monod J. Recherhes sur la Croissance des Cultures Bacteriennes. 2"** edn., Hermann, Paris, 1942.

66. Pasteur L. Annales de Chime et de Physique, 3 // Serie, - 58, - 324, - 1869.

67. Raulim M. J. Annales des Scinces Naturellus, 5 Serie, - 11, - 93, - 1869.

68. Rohn O. Physicas methods of sterilisation of microorganisms. // Bacteriol. Rev., - 9, - 1945. - pp. 1 - 47.

69. Schodel F. // Infection. - 1992. 20. 1.

70. Scholes G., Weiss J. Chemical action of X-rays on nucleic acid and related substanus in aqueous systems. // Biochem. J., - 56, - 1954. - pp. 65 - 72.

71. Scott W.J. // Advances in Food Research, - 7, 83, - 1957.

72. Siiman R.W,, Bagley B.I. The visoostat: Prodnetstet method ef feed - rate control in oontinions fermentation. // Bloend, 21,1979. - pp. 173 -179. I lO.Slator A., J. chem. Soc, 119,115, (1921). II I.Smith H.W. / /1 . Higiene. 1965. 63. 1.

73. Solomons G.L. Materials and methods in fermentation. Academic Press, - London and New York,-1969.-pp. 335 in.Sykes Q, «Methods in Microbiology», Vol. 1., Academic Preess, New York, - 1969. - pp. 77-121.