Молекулярно-генетический анализ особенностей структуры и экспрессии генов BRCA1/2 при раке яичников и молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Шубин, Виталий Павлович

• Шубин, Виталий Павлович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шубин, Виталий Павлович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. РАК ЯИЧНИКОВ.

1.1 Заболеваемость раком яичников в России и в мире.

1.2 ВЯСЛ - ассоциированный рак яичников.

2. ГЕНЫ ВЯСА1/2 И ФУНКЦИИ ИХ БЕЛКОВ.

2.1 Гены ВКСА1/2.

2.2 Белки ВЯСА1/2 и их функции.

3. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ГЕНОВ ПРИ РАКЕ ЯИЧНИКОВ.

3.1 Этническая принадлежность и географическое положение популяции как фактор разнообразия частоты и спектра мутаций в генах ВКСА1/2 при раке яичников.

3.2 Экспрессия генов В11СА1/2 в злокачественной опухоли.

3.3 Злокачественная опухоль и ее микроокружение.

3. 4 Эстрогеновый рецептор.

3.5 Остеопонтин.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Пациенты.

Анализ первичной структуры генов ВЯСА1 и В11СА2.

Выделение геномной ДНК.

Полимеразная ценна)! реакция.

Конформационно — чувствительный гель электрофорез.

Автоматическое секвенирование.

Анализ экспрессии генов BRCA1, BRCA2, OPN и ESR1.

Выделение суммарной (тотальной) РНК.

Определение качества выделения суммарной РНК.

Проведение реакции обратной транскрипции.

ПЦР — Real time с продуктами обратной транскрипции.

Статистический анализ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Изучение пациентов с раком яичников на наличие мутаций в генах BRCA1/2.

Гаплотипирование гена BRCA1 с мутацией 3819del5.

Экспрессия генов BRCA1 и BRCA2 в злокачественной опухоли яичников

Экспрессия генов BRCA1 и BRCA2 в злокачественной опухоли молочной железы.

Экспрессия гена ESR1 в злокачественных опухолях яичников и молочной железы.

Экспрессия гена OPN в злокачественных опухолях яичников и молочной железы.

Экспрессия генов в прилегающей к злокачественной опухоли ткани.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетический анализ особенностей структуры и экспрессии генов BRCA1/2 при раке яичников и молочной железы»

Актуальность темы

Рак яичников и молочной железы являются наиболее распространенными заболеваниями среди женской репродуктивной системы в развитых странах. Ежегодно более миллиона новых случаев рака яичников/мол очной железы обнаруживают во всем мире. Высокий уровень заболеваемости в Северной Америке, Западной и Северной Европе, Австралии [Е1ша8гу а1., 2006] а так же в России [Давыдов и Аксель, 2009].

Рак яичников (РЯ) занимает важное место в структуре онкологической заболеваемости среди женщин. За пятилетний период 2001-2006 гг. отмечен заметный прирост заболеваемости злокачественными опухолями яичников в России - на 5,8% [Давыдов и Аксель, 2009]. Рак этой локализации имеет один из-самых высоких показатели смертности среди всех гинекологических опухолей.

Рак яичников преимущественно развивается в период постменопаузы. Появление в молодом возрасте, до 35 лет, обусловливается быстрым развитием болезни и снижением выживаемости.

Одним из факторов риска развития РЯ, является онкологически отягощенный семейный анамнез. Известно, что наличие в семье родственников с заболеванием рак молочной железы и/или яичников увеличивает риск развития РЯ в два раза. Основная доля наследственной формы РЯ обусловлена мутациями в генах ВЯСА1 и ВКСА2. Спектры и частоты мутаций в указанных генах зависят от этнической принадлежности и географического положения популяций. Информация об этих характеристиках важна с точки зрения понимания процессов возникновения и распространения мутаций и необходима для решения практической задачи — профилактики злокачественных новообразований.

Существенно, что в пределах даже небольших стран могут иметься заметные региональные различия спектров и частот мутаций в генаxBRCAl/2 [Gómez-Raposo et al., 2010], способные приводить к разному вкладу наследственной формы на уровень заболеваемости РЯ и требующие разных диагностических подходов. Примерно 70% случаев РЯ среди женщин приходится на 3-4 стадию развития опухоли яичников, так как развитие происходит практически без явных симптомов [Ramus and Gayther, 2009]. Это обстоятельство влияет на уровень тяжких последствий при этом заболевании и дополнительно акцентирует значимость выявления женщин с мутациями в генах BRCA1/2 и проведения в дальнейшем динамического диспансерного наблюдения.

Кроме того, присутствие у больного РЯ мутации в гене BRCA1 может являться фактором, влияющим на выбор средств терапии. Учет этого фактора позволяет существенно повысить эффективность лечения РЯ [Clark-Knowles et al., 2010]. Не исключено, что результат терапии может также зависеть от характеристик мутаций [Linger et al., 2010].

Однако наследственная форма занимает хотя и существенную, но меньшую долю всех случаев РЯ, по сравнению со спорадической формой этого заболевания. Молекулярные причины возникновения спорадических случаев РЯ в настоящее время не ясны. В недавней работе [Alimonti et al., 2010] было показано возникновение рака при снижении экспрессии гена-супрессора в опухоли, причем для этого было достаточно снижение экспрессии на 30%. Такое влияние частичной потери функции гена-супрессора может иметь широкое распространение и нуждается в дальнейшем исследовании [Berger et al., 2011]. Супр'ессорами спорадической формы РЯ могут быть те же гены - BRCA1/2 [Bowtell, 2010]. В пользу этого говорит, в частности, сходство профилей экспрессии в опухоли при спорадических и наследственных формах РЯ [Jazareri et al., 2002]. Прояснению значения генов BRCA1 и BRCA2 для возникновения и развития спорадической формы РЯ может способствовать изучение характеристик их экспрессии в злокачественной опухоли. Необходимость такого исследования усиливают накапливающиеся в последнее время данные о наличии популяционных различий характеристик экспрессии генов в опухоли [Patel et al., 2010; Rose et al., 2010]. Дополнительный свет на участие генов BRCA1 и BRCA2 в росте опухоли может пролить сравнительный анализ экспрессии генов при РЯ и связанном с этими генами раком другой локализации — молочной железы. Этот аспект существенен также в плане данных о взаимодействии генов BRCA1 и рецептора эстрогена (ESR1) при РМЖ. Именно такое взаимодействие рассматривается как определяющее органоспецифичность супрессорной функции гена BRCA1 [Gorsky et al., 2009]. В то же время, данные о взаимодействии генов BRCA1/2 с ESR1 при РЯ отсутствуют. Исследование в этом направлении, т.е. выявление особенностей взаимодействия указанных генов при РЯ, могло бы дать дополнительную информацию о причинах различия локализаций новообразований при одном и том же гене-супрессоре. В этой связи, представлялось также целесообразным изучить важные для развития рассматриваемых типов рака гены рецептора эстрогена (.ESR1) и остеопонтина (OPN), которые могут быть взаимосвязаны на уровне регуляции с геном BRCA1 [El-Tanani et al., 2006].

Как стало понятно в последнее время, большое значение для роста опухоли имеют процессы, происходящие й прилегающей к ней ткани и которые функционально могут быть связаны с процессами в опухоли [Wang et al., 2005;

Чехун, 2009; McAllister et al., 2008]. Эта важная для понимания развития опухоли область исследований далека от завершения. Заметную роль в качестве переносчика стимулирующего опухоль сигнала со стороны окружающей ткани может играть продукт гена OPN [McAllister et al., 2008].

Цель исследования: изучение особенностей структуры и экспрессии генов BRCA1 и BRCA2 при раке яичников и молочной железы.

Задачи исследования:

1. Исследовать спектр и частоту мутаций в гене BRCA1 в неселектированной выборке больных РЯ в Республике Мордовия.

2. Провести исследование экспрессии генов BRCA1, BRCA2, ESR1 и OPN в злокачественной опухоли яичников и сравнить с экспрессией этих генов при РМЖ.

3. Изучить экспрессию генов BRCA1, BRCA2, ESR1 и OPN в ткани ближайшего окружения опухоли при РЯ.

4. Изучить взаимосвязь уровней экспрессии генов BRCA1, BRCA2, ESR1 и OPN в злокачественных опухолях яичников и молочной железы и в ткани ближайшего окружения опухоли яичников.

Научная новизна

Впервые изучены частота и спектр мутаций в гене BRCA1 в Республике Мордовия. Выявленная частота мутаций в гене BRCA1 при РЯ составила 26% и относится к наиболее высокой из найденных в неселектированных выборках больных из других популяций. В спектре преобладают две мутации - 3819del5 "(53%) и 5382insC (17%).

Результаты гаплотипирования по микросателитным маркерам свидетельствуют в пользу распространения мутации 3819ёе15 вследствие эффекта основателя.

Получены данные о пониженном уровне экспрессии гена ВЯСА1 в опухоли спорадической (без наличия терминальной мутаций в данном гене) формы РЯ.

Впервые обнаружен повышенный уровень экспрессии гена ВЯСА2 в опухоли

РМЖ.

Впервые установлена корреляция уровней экспрессии гена ВЛСА2 с уровнями экспрессии генов Е8Я1 и ОРЫ в злокачественной опухоли яичников.

Впервые найдены координированные изменения уровней экспрессии генов ВЯСА1 и В11СА2 в опухоли РЯ и ткани её ближайшего окружения.

Научно-практическая значимость работы

Полученные данные о частоте и спектре мутаций в гене ВЯСА1 при РЯ необходимы для выявления наследственной предрасположенности к раку указанной локализации с целью его профилактики и указывают на возможность и целесообразность проведения скрининговых исследований больных РЯ в Мордовии. Данные о пониженном уровне экспрессии гена ВЯСА1 в опухоли спорадической формы РЯ указывают на значение гена ВЯСА1 для развития не только наследственной, но и спорадической формы РЯ. Эти результаты, наряду с данными о повышенном уровне экспрессии гена ВЯСА2 в опухоли при РМЖ могут быть в дальнейшем использованы при разработке маркеров указанных типов злокачественных новообразований. Полученные новые данные по функционированию генов в ткани ближайшего окружения опухоли важны для понимания взаимодействия опухоли и ее микроокружения и могут быть востребованы при разработке новых способов терапии РЯ и при хирургическом вмешательстве.

Положения, выносимые на защиту

- Выявленная частота мутаций в гене ВЯСА1 при РЯ в Мордовии, составившая 26%, относится к наиболее высоким частотам, найденным в неселектированных выборках больных из других популяций.

- В спектре мутаций в гене ВЯСА1 при РЯ в Мордовии преобладают две мутации - 3819(3е15 и 5382тзС. Результаты гаплотипирования по микросателитным маркерам демонстрируют общий гаплотип при мутации 3819ёе15, что может свидетельствовать в пользу распространения этой мутации вследствие эффекта основателя.

- Уровень экспрессии гена ВЯСА1 в злокачественной опухоли спорадической формы РЯ в основном числе случаев понижен. В злокачественной опухоли молочной железы уровень экспрессии гена ВЯСА2 в основном повышен. Уровень экспрессии гена ВЯСА2 коррелирует с уровнями экспрессии генов ЕБЯ 1 и ОРИ в злокачественной опухоли яичников. При раке молочной железы обнаружена корреляция уровней экспрессии генов ВЯСА1 и £57? 7.

- Существуют координированные изменения уровней экспрессии генов ВЯСА1 и ВЯСА2 в злокачественной опухоли яичников и ткани ее ближайшего окружения.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Шубин, Виталий Павлович

4. Результаты исследования экспрессии генов ВЯСА1, ВЯСА2, Е8Я1 и ОРИ могут быть в дальнейшем использованы при разработке маркеров прогноза развития РЯ и терапии при этом заболевании.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Высокая частота мутаций в гене ВЯСА1 в Мордовии позволяет рекомендовать молекулярно-генетическое исследование больных РЯ в этой Республике на наличие мутации в указанном гене.

2. Высокая доля двух мутаций (3819с1е15 и 5382шзС; 70%) в гене ВЯСА1 среди больных в Мордовии указывает на возможность проведения молекулярно-генетического скрининга.

3. Необходимо выявление мутаций в гене ВЯ.СА1 не только для формирования групп риска РЯ с целью профилактики. Наличие мутации у больной следует учитывать при терапии для повышения эффективности лечения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шубин, Виталий Павлович, 2011 год

1. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных образований в России и странах СНГ в 2007г. // Вестник российского онкологического научного центра им. H.H. Блохина РАМН. 2009. №3, прил.1. - С. 156.

2. Закс JI. Статистическое оценивание // Москва. 1976.

3. Карпухин A.B., Поспехова H.H., Музаффарова Т.А. и др. Молекулярная диагностика моногенных форм рака // Медицинская генетика. 2006. №5, прил.2. - С. 1-6.

4. Николаев В. В. // «Чуваши. Этническая история и традиционная культура». Москва. 2000.

5. Пальцев М.А., Аничков ILM. Патологическая анатомия // Учебник в 2т. М.: Медицина 2000. - 528 с.

6. Поспехова Н.И. Комплексный анализ наследственной формы рака молочной железы и/или яичников: молекулярно-генетические и фенотипические характеристики. Автореферат. - 2011. - С.47.

7. Смирнова Т.Ю., Поспехова Н.И., Любченко Л.Н., Османова Л.И., Тюляндин С.А., Гарькавцева Р.Ф., Гинтер Е.К., Карпухин A.B. Высокая частота мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 при раке яичников // Бюлл. эксп. биол. и мед. -2007.-№ 7.-С. 93-95.

8. Чехун В. Строма — регулятор прогрессии опухолевых клеток // Онкология. -2009. Т.П. - №3. - С.164-165.

9. An J, Wei Q, Liu Z, Lu KH, Cheng X, Mills GB, Wang LE. Messenger RNA expression and methylation of candidate tumor-suppressor genes and risk of ovarian cancer-a case-control analysis // Int J Mol Epidemiol Genet. 2010. - V. 1 -№1. -P.1-10.

10. Anderson S.F. et al. BRCA1 protein is linked to the RNA polymerase II holoenzyme //Nat. Genet. 1998. - V.19. - P. 254-256.

11. Antoniou A.C., Pharoah P.D., McMullan G., Day N.E., Stratton M.R., Peto J., Ponder B.J., Easton D.F. A comprehensive model for familial breast cancer incorporating BRCA1, BRCA2 and other genes // Br. J. Cancer. 2002. - V.86. -P. 76-83.

12. Barker DF, Almeida ER, Casey G, Fain PR, Liao SY, Masunaka I, Noble B, Kurosaki T, Anton-Culver H. BRCA1 R841W: a strong candidate for a common mutation with moderate phenotype // Genet Epidemiol. 1996. - V.13. - №6. -P.595-604.

13. Bergthorsson J.T., Ejlertsen B., Olsen J.H., et al. BRCA1 and BRCA2 mutation status and cancer family history of Danish women affected with multifocal or bilateral breast cancer at a young age // J. Med. Genet. 2001. - V.38. -P.361-368.

14. Bild AH, Yao G, Chang JT, et al. Oncogenic pathway signatures in human cancers as a guide to targeted therapies // Nature. 2006. - V.439. - P. 353-357.

15. Bindra RS, Gibson SL, Meng A, Westermark U, Jasin M, Pierce AJ, Bristow RG, Classon MK, Glazer PM. Hypoxia-induced down-regulation of BRCA1 expression by E2Fs // Cancer Res. 2005. - V.65. - №24. - P. 11597-11604.

16. Bogdanova NV, Antonenkova NN, Rogov YI, Karstens JH, Hillemanns P, Dörk T. High frequency and allele-specific differences of BRCA1 founder mutations in breast cancer and ovarian cancer patients from Belarus // Clin Genet. 2010 -V.78. - №4. — P.364-372.

17. Bottazzi B, Walter S, Govoni D, Colotta F, Mantovani A. Monocyte chemotactic cytokine gene transfer modulates macrophage infiltration, growth, and susceptibility to IL-2 therapy of a murine melanoma // J. Immunol. 1992. -V.148. — P. 1280-1285.

18. Bowtell DD. The genesis and evolution of high-grade serous ovarian cancer // Nat Rev Cancer. -2010. V.10. - №11. -P.803-808.

19. Brzovic P.S. et al. Structure of a BRCA1-BARD1 heterodimeric RING-RING complex // Nat. Struct. Biol. 2001 a. - V. 8. - P. 833-837.

20. Byrski T, Gronwald J, Huzarski T, et al. Response to neo-adjuvant chemotherapy in women with BRCA1-positive breast cancers // Breast Cancer Res Treat. 2008. -V.108. -P.289-296.

21. Cantor S.B. et al. BACH1, a novel helicase-like protein, interacts directly with BRCA1 and contributes to its DNA repair function // Cell. 2001. - V. 105. - P. 149-160.

22. Cass I., Baldwin R.L., Varkey T., Moslehi R., et al. Improved survival in women with BRCA-associated ovarian carcinoma // Cancer.- 2003.- Vol.97.-P.2127- 2179.

23. Chan KY, Oz9elik H, Cheung AN, Ngan HY, Khoo US. Epigenetic factorscontrolling the BRCA1 and BRCA2 genes in sporadic ovarian cancer // Cancer Res. 2002. - V.62. - №.14. - P.4151-4156.

24. Chiba N. & Parvin J.D. The BRCA1 and BARD associated with the RNA polymerase II holoenzyme // Cancer Res. 2002. - V. 62. - P. 4222-4228.

25. Clark-Knowles KV, O'Brien AM., Weberpals JI. BRCA1 as a Therapeutic Target in Sporadic Epithelial Ovarian Cancer // J Oncol. 2010. - V. 8. - P. 9.

26. Curci A., Capasso I., Romano A., et al. Characterization of 2 novel and 2 recurring BRCA1 germline mutations in breast and/or ovarian carcinoma patients from the area of Naples // Int. J. One. 2002. - V.20. - № 5. - P.963-970.

27. Deng C.X. Roles of BRCA1 in centrosome duplication // Oncogene. 2002. - V. 21.-P. 6222-6227.

28. Dorum A., Hovig E., Trope C., Inganas M., Moller P. Three percent of Norwegian ovarian cancers are caused by BRCA1 1675delA or 1135insA // Eur. J. Cancer. -1999.-V.35.-P.779-781.

29. Duggan BD., Dubeau L. Genetics and biology of gynecologic cancer // Curr Opin Oncol.- 1998.-V.10.-P. 439-446.

30. Egawa C, Miyoshi Y, Takamura Y, et al. Decreased expression of BRCA2 mRNA predicts favorable response to docetaxel in breast cancer // Int J Cancer. 2001. -V.95. - P.255-259.

31. Einbeigi Z., Bergman A., Meis-Kindblom J.M., Flodin A., Bjursell C., Martinsson

32. T., Kindblom L.G., Wahlstro'm J., Wallgren A., Nordling M. et al. Occurrence of both breast and ovarian cancer in a woman is a marker for the BRCA gene mutations: a population-based study from western Sweden // Fam. Cancer. 2007.1. V.6. P.35-41.

33. Ellis D., Greenman J., Hodgson S., et. al. Low prevalence of BRCA1 mutations in early onset breast cancer without family history // J.Med.Genet. 2000. - V.7. -P.792-794.

34. Elmasry K, Gayther SA. Ovarian cancer aetiology: facts and fiction // J Fam Plann Reprod Health Care. 2006. - P.82-86.

35. El-Tanani MK, Campbell FC, Crowe P, Erwin P, Harkin DP, Pharoah P, Ponder B, Rudland PS. BRCA1 suppresses osteopontin-mediated breast cancer // J Biol Chem. 2006. - V.281. - №6. - P.26587-26601.

36. Esashi F., Galkin VE., Yu X., Egelman EH., West SC. Stabilization of RAD51 nucleoprotein filaments by the C-terminal region of BRCA2 // Nat Struct Mol Biol.- 2007. №6. - V.14. - P.468-474.

37. Font A, Taron M, Perez-Roca L, et al. BRCA1 mRNA expression in patients (p) with bladder cancer treated with neoadjuvant cisplatin-based chemotherapy // J Clin Oncol. 2008. - V.26. - №.15. - P.255.

38. Friedman L.S., Gayther S.A., Kurosaki T. et al. Mutation analysis of BRCA1 and BRCA2 in a male breast cancer population // Am. J. Hum. Genet. -1997. V.60. -P. 313-319.

39. Fukasawa K. Centrosome amplification, chromosome instability and cancer development // Cancer Lett. 2005.- V.230. - №1 - P.6-19.

40. Geisler JP, Buller E, Manahan KJ. Estrogen receptor alpha and beta expression in acase matched series of serous and endometrioid adenocarcinomas of the ovary // Eur J Gynaecol Oncol. 2008. - V.29. - №2. - P.126-128.

41. Goelen G., Teugels E., Bonduelle M., et. al. High frequency of BRCA1/2 germline mutations in 42 Belgian families with a small number of symptomatic subjects // J. Med. Gen. 1999. - V.36. - P.304-308.

42. Gómez-Raposo C, Mendiola M, Barriuso J, Hardisson D, Redondo A. Molecular characterization of ovarian cancer by gene-expression profiling // Gynecol Oncol. — 2010. V.l 18. - №1. - P.88-92.

43. Gorski B., Byrski T., Iiuzarski T., Jakubowska. Founder mutations in the BRCA1 gene in Polish families with breast-ovarian cancer // Am. J. Hum. Genet. — 2000. — V.66. -P.1963-1968.

44. Gorski JJ, Kennedy RD, Iiosey AM, Ilarkin DP. The complex relationship between BRCA1 and ERalpha in hereditary breast cancer // Clin Cancer Res. 2009. -V.l5. - №5. - P. 1514-1518.

45. Hilton JL, Geisler JP, Rathe JA, Hattermann-Zogg MA, DeYoung B, Buller RE. Inactivation of BRCA1 and BRCA2 in ovarian cancer // J Natl Cancer Inst. 2002. —V.94. - №.18. - P.1396-1406.

46. Ikeda K, Inoue S. Estrogen receptors and their downstream targets in cancer // Arch Histol Cytol. 2004. - V.67. - №5. - P.435-442.

47. Goetz JG, Minguet S, Navarro-Lérida I, Lazcano JJ, Samaniego R, Calvo E, Tello

48. Jasin, M. Homologous repair of DNA damage and tumorigenesis: the BRCA connection // Oncogene.- 2002.-V.21.-№58.-P.8981-8993.

49. Jazaeri AA, Yee CJ, Sotiriou C, Brantley KR, Boyd J, Liu ET. Gene expression profiles of BRCA 1-linked, BRCA2-linked, and sporadic ovarian cancers // J Natl Cancer Inst.-2002.-P. 990-1000.

50. Kim Y.T., Nam E.J., Yoon B.S. et al. Germline mutations of BRCA1 and BRCA2 in Korean sporadic ovarian carcinoma // Gynecol. Oncol.- 2005. Vol.99, № 3.-P.585-590.

51. Kos M, Reid G, Denger S, Gannon F. Minireview: genomic organization of the human ERalpha gene promoter region // Mol Endocrinol. 2001. - V.15. - №12. -P.2057-2063.

52. Ladopoulou A., Kroupis C., Konstantopoulou I., Ioannidou-Mouzaka L., Scholield A.C. Germline BRCA1/BRCA2 mutations in Greek breast/ovarian cancer families: 5382insC is the most frequent mutation observed // Can. Lett. 2002. - V.185. -№1. - P.61-70.

53. Lancaster JM, Dressman HK, Clarke JP, et al. Identification of genes associated with ovarian cancer metastasis using microarray expression analysis // Int J Gynecol Cancer. 2006. - V.16. - P.733-1745.

54. Lavin M.F. The complexity of p53 stabilization and activation // Cell Death Differ.- 2006. V.13. - №6. - P.941-950.

55. Linger RJ., Kruk PA. BRCA1 16 years later: risk-associated BRCA1 mutations and their functional implications // Febs J. 2010. - V.277. - №15. - P.3086-3096.

56. Mangia A, Chiriatti A, Tommasi S, Menolascina F, Petroni S, Zito FA, Simone G, Schittulli F, Paradiso A. BRCA1 expression and molecular alterations in familial breast cancer // Ilistol Histopathol. 2009. - V. 24. - №1. - P.69-76.

57. Mangia A, Chiriatti A, Tommasi S, Menolascina F, Petroni S, Zito FA, Simone G, Schittulli F, Paradiso A. BRCA1 expression and molecular alterations in familial breast cancer // Histol Histopathol. 2009. - V.24. - №.1. - P.69-76.

58. Manguoglu A.E., Luleci G., Ozcelik T., et al. Germline mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes "in Turkish breast/ovarian cancer patients // Hum. Mutat. 2003.1. V.21. №4. - P.444-445.

59. Manke I.A. ct al. BRCT repeats as phosphopeptide-binding modules involved in protein targeting // Science. 2003. - V. 302. - P. 636-639.

60. Mantovani A. Cancer: inflaming metastasis // Nature. 2009. - V.457. - P.36-37.

61. Ng LK, Rich AM, Hussaini HM, Thomson WM, Fisher AL, Home LS, Seymour GJ. Toll-like receptor 2 is present in the microenvironment of oral squamous cellcarcinoma // Br J Cancer. 2011. - V.104. - №3. - P.460-463.

62. O'Donovan P.J. &.Livingston D.M. BRCA1 and BRCA2: breast/ovarian cancer susceptibility gene products and participants in DNA double-strand break repair // Carcinogenesis. 2010. - V.31. - P.961-967.

63. Pavelka JC, Li AJ, Karlan BY. Hereditary ovarian cancer assessing risk and prevention strategies // Obstet Gynecol Clin North Am. 2007. - V.34. - P.651-665.

64. Press J. Z. et al. Ovarian carcinomas with genetic and epigenetic BRCA1 loss have distinct molecular abnormalities // BMC Cancer. 2008. - V.8. - №17.

65. Polanowska J. et al. A conserved pathway to activate BRCA1-dependent ubiquitylation at DNA damage sites // EMBO J. 2006. - V. 25. - P. 2178-2188.

66. Quinn JE, James CR, Stewart GE, et al. BRCA1 mRNA expression levels predict for overall survival in ovarian cancer after chemotherapy // Clin Cancer Res. -2007. V.13. -P.7413-7420.

67. Ramus S.J., Harrington P., Pye C., DiCioccio R., Cox M., Garlinghouse-Jones K., Oakley-Girvan I., Jacobs I.J., Hardy R.M., Whittemore A. et al. The contribution of

68. BRCA1 and BRCA2 mutations to inherited ovarian cancer // Hum. Mutat. 2007. -V.28.- 1207-1215.

69. Ramus SJ, Gayther SA. The contribution of BRCA1 and BRCA2 to ovarian cancer // Mol Oncol. 2009. - P. 138-150.

70. Reguart N, Cardona AF, Carrasco E, Gomez P, Taron M, Rosell R. BRCA1 : a new genomic marker for non-small-cell lung cancer // Clin Lung Cancer. 2008. - V.9. - №6. - P. 331-339.

71. Rodrigues LR, Teixeira JA, Schmitt FL, Paulsson M, Lindmark-Mansson H. The role of osteopontin in tumor progression and metastasis in breast cancer // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. -2007. V.16. - №6. - P. 1087-1097.

72. Roldân G, Delgado L, Musé IM. Tumoral expression of BRCA1, estrogen receptor alpha and ID4 protein in patients with sporadic breast cancer // Cancer Biol Ther.2006.-V.5. -№5.-P.505-510.

73. Rosen E.M. BRCA1 in hormonal carcinogenesis: basic and clinical research/ E.M. Rosen, S. Fan, C. Isaacs // Endocr. Relat. Cancer. - 2005. - V.12. - №3. - P.533-548.

74. Russell PA, Pharoah PD, De Foy K, Ramus SJ, Symmonds I, Wilson A, Scott I, Ponder BA, Gayther SA. Frequent loss of BRCA1 mRNA and protein expression in sporadic ovarian cancers // Int J Cancer. 2000. - V.87. - №3. - P.317-321.

75. Russo A., Calo V., Bruno L., Rizzo S., Bazan Y., Fede G. D. Hereditary ovariancancer // Critical Reviews in oncology/Hematology. 2009. — V. - 69. - P. 28-44.

76. Sambrook, J. Molecular cloning: a laboratory manual 2nd edn. / Sambrook J., Fritch E.F., Maniatis T. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY.- 1989.

77. Sankaran S., Starita L.M., Simons A.M. et al. Identification of domains of BRCA1 critical for the ubiquitin-dependent inhibition of centrosome function // Cancer Res.- 2006. V.66(8). - P. 4100-4107.

78. Sarantaus L., Vahteristo P., Bloom E., Tamminen A., Unkila-Kallio L., Butzow R., Nevanlinna H. BRCA1 and BRCA2 mutations among 233 unselected Finnish ovarian carcinoma patients // Am. J. Hum. Genet. 2001. — P.424-430.

79. Shridhar V, Lee J, Pandita A, et al. Genetic analysis of early- versus late-stage ovarian tumors // Cancer Res. 2001. - V.61. - P. 5895-5904.

80. Sorlie T., Perou C M., Tibshirani R., et al. Gene expression patterns of breast carcinomas distinguish tumor subclasses with clinical implications // Proc Natl AcadSciUSA. 2001.-V. 98.-P. 10869-10874.

81. Swisher EM, Gonzalez RM, Taniguchi T, Garcia RL, Walsh T, Goff BA, Welcsh P. Mcthylation and protein expression of DNA repair genes: association with chemotherapy exposure and survival in sporadic ovarian and peritoneal carcinomas

82. Mol Cancer. 2009. - V.8. - P.48.

83. Sylvain V, Lafarge S, Bignon YJ. Dominant-negative activity of a Brcal truncation mutant: effects on proliferation, tumorigenicity in vivo, and chemosensitivity in a mouse ovarian cancer cell line // Int J Oncol. 2002. - V.20. - P.845-853.

84. Tavtigian, S.V. The complete BRCA2 gene and mutations in chromosome 13q-1 inked kindreds //Nat Genet. 1996. -V. 12. - №3. -P.333-337.

85. Turner NC, Reis-Filho JS, Russell AM, Springall RJ, Ryder K, Steele D, Savage K, Gillett CE, Schmitt FC, Ashworth A, Tutt AN. BRCA1 dysfunction in sporadic basal-like breast cancer // Oncogene. 2007. - V.26. - №.14. - P.2126-2132.

86. Van Der Looij M, Szabo C, Besznyak I, Liszka G, Csokay B, Pulay T, Toth J, Devilee P, King MC, Olah E. Prevalence of founder BRCA1 and BRCA2 mutations among breast and ovarian cancer patients in Hungary // Int J Cancer. -2000. V.86. - №5. - P.737-740.

87. Wagner T.M., Moslinger R.A., Muhr D., et al. BRCA1-related breast cancer in

88. Austrian breast and ovarian cancer families: specific BRCA1 mutations and pathological characteristics // Int. J. Cancer. 1998. - V.77. - №3. - P.354-60.

89. Wang B. et al. Abraxas and RAP80 form a BRCA1 protein complex required for the DNA damage response // Science. 2007. - V. 316. - P. 1194-1198.

90. Wang E., Ngalame Y., Panelli MC., et al. Peritoneal and subperitoneal stroma may facilitate regional spread of ovarian cancer // Clin. Cancer Res. 2005. - V.ll. -P.113-122.

91. Wang Y., Cortez D., Yazdi P., Neff N„ Elledge SJ., Qin J. BASC, a super complex of BRCA1 associated proteins involved in the recognition and repair of aberrant DNA structures // Genes Dev. 2000. - V.14. - P. 927-939.

92. Welboren WJ, Sweep FC, Span PN, Stunnenberg HG. Genomic actions of estrogen receptor alpha: what are the targets and how are they regulated? // Endocr Relat Cancer. 2009. -Y.16. - №4.- P.1073-1089.

93. Williams R.S., Green R. and Glover J.N. Crystal structure of the BRCT repeat region from the breast cancer-associated protein BRCA1 // Natl. Struct. Biol. -2001,-V. 8.-P. 838-842.

94. Xia B„ Sheng Q., Nakanishi K. et al. Control of BRCA2 cellular and clinical functions by a nuclear partner, PALB2 // Mol Cell. 2006. - V.22. - P.719-729.

95. Xu C. F., Chambers J. A., Nicolai H. et al. Mutations and alternative splicing of the BRCA1 gene in UK breast/ovarian cancer families // Genes Chromosomes Cancer. 1997.-P. 18.-P. 102-110.

96. Yang F, Guo X, Yang G, Rosen DG, Liu J. AURKA and BRCA2 expression highly correlate with prognosis of endometrioid ovarian carcinoma // Mod Pathol. 2011.

97. Yang H., Jeffrey P.D., Miller J. et al. BRCA2 function in DNA binding and recombination from a BRCA2-DSSl-ssDNA structure // Science. 2002. - V. 13. -№5588.-P. 1837-1848.

98. Yu X. et al. The BRCT domain is a phospho-protein binding domain // Science. -2003. V. 302. - P. 639-642.

99. Yu X. et al. The Cterminal (BRCT) domains of BRCA1 interact in vivo with CtIP, a protein implicated in the CtBP pathway of transcriptional repression // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 25388-25392.

100. Endocr Relat Cancer. 2009. - V.16. - №4. - P. 1241-1249.

101. Zheng W, Luo F, Lu JJ, Baltayan A, Press MF, Zhang ZF, Pike MC. Reduction of BRCA1 expression in sporadic ovarian cancer // Gynecol Oncol. — 2000. — V.76. -№3. -P.294-300.