Молекулярно-генетическая характеристика двух локусов синдрома ломкой х-хромосомы у жителей Западно-Сибирского региона тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Толмачева, Екатерина Николаевна

• Толмачева, Екатерина Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2001

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая характеристика двух локусов синдрома ломкой х-хромосомы у жителей Западно-Сибирского региона»

Наиболее частой формой Х-сцепленной умственной отсталости у человека является синдром Мартина-Белл (СМБ) [MIM 309550]. В 1969 г. Lubs описал цитогенетический маркер синдрома - ломкий сайт в сегменте Xq27 у четырех умственно отсталых мужчин, их матери и тетки [Lubs, 1969]. В большинстве случаев причиной возникновения СМБ служит резкое увеличение числа (экспансия) повторяющейся CGG-тринуклеотидной последовательности, локализованной в 5'-конце нетранслируемого района гена FMR1 [Verkerk et al., 1991]. СМБ исторически явился первой нозологической формой, которая открыла новый класс, так называемых, динамических мутаций [Richards et al, 1992], лежащих в основе целого ряда наследственных нейродегенеративных заболеваний. Отличительными признаками этих болезней являются неменделевский тип наследования и феномен антиципации, т.е. возрастание тяжести заболевания в последующих поколениях родословной [Sutherland et al., 1995]. В настоящее время в этой группе идентифицировано, по крайней мере, 12 наследственных болезней.

Несмотря на то, что СМБ активно изучается на протяжении уже более двух десятков лет, вопрос о происхождении и частоте этой патологии в различных популяциях и этнических группах остается недостаточно изученным.

Существует предположение, что инициация процесса экспансии происходит через нормальные аллели с числом CGG-повторов не менее чем в 40 копий, а хромосомы, содержащие такие аллели, являются резервным пулом для развития будущих мутаций [Morton et al., 1992]. Кроме того, AGG-вставки, встречающиеся в составе тракта CGG-повторов в гене FMR1, рассматриваются в настоящее время в качестве стабилизирующих триплетов, поскольку вероятность развития экспансии резко увеличивается при отсутствии таких вставок в составе тракта, включающего более чем 24 копии 6

CGG-повторов [Kunst et al., 1994]. Недавние исследования других локусов, связанных с экспансией тринуклеотидных повторов и нейродегенеративными заболеваниями, показали существенное варьирование частот аллелей промежуточного размера (между нормальными и премутантными) и фланкирующих их гаплотипов в разных популяциях, с некоторой зависимостью распространения заболеваний от частоты этих аллелей [Ashley и Warren, 1995; Burke et al., 1994]. Таким образом, исследования, направленные на выявление молекулярно-генетических особенностей структуры таких локусов в разных этнических группах и популяциях, проживающих в различных климато-географических условиях, имеют несомненную актуальность.

Нерешенным до настоящего времени остается вопрос о частоте СМБ. Первоначально частота синдрома, основанная на больших эпидемиологических исследованиях с помощью цитогенетических методов, оценивалась как 1 случай на 1500 мужчин и 2500 женщин [Gustavson et al., 1986; Webb et al., 1986]. После открытия гена FMRl с помощью молекулярно-генетических исследований была проведена существенная коррекция частоты СМБ как в общей популяции, так и у лиц с умственной отсталостью. Прежняя оценка распространения СМБ была значительно снижена и составила в большинстве популяций 1 случай на 3500-6000 населения [Turner et al., 1996; de Vies et al., 1997; Syrrou et al., 1998; Haddad et al., 1999]. Однако, по данным Руссо с соавторами [Rosseau et al., 1995], в Квебекской популяции Канады частота женщин-носительниц премутации FMR1 гена составила 1 : 2000, что гораздо выше вышеуказанных оценок. Не исключено, что в разных популяциях и этнических группах частоты носителей премутации гена FMR1 и самого синдрома Мартина-Белл могут реально различаться, как это показано для других моногенных заболеваний, таких как муковисцидоз и фенилкетонурия. У лиц с умственной отсталостью частота этого заболевания в различных популяциях мира колеблется от 0,5 до 7

22,1% [Holinski-Feder, 1996; Perroni et al., 1997; Pang et al., 1999]. У значительной части больных с СМБ на Х-хромосоме в сегменте Xq27.3 выявляется ломкий (фрагильный) сайт FRAXA, дистальнее которого на расстоянии в 600 и 1200 т.п.н. располагаются два других ломких участка -FRAXE и FRAXF соответственно. Умственная отсталость, сцепленная с ломким участком FRAXE, встречается намного реже формы FRAXA (1 случай на 50 тысяч человек), а фенотипический эффект еще более редкого локуса FRAXF до сих пор неясен. Таким образом, основной формой умственной отсталости, сцепленной с ломкой Х-хромосомой, является СМБ с ломким участком FRAXA.

В нашей стране изучению умственной отсталости, связанной с ломкой Х-хромосомой, посвящено ограниченное число исследований [Ракишева, 1993; Вехова, 1994; Стрельников, 2000]. Однако в этих работах молекулярно-генетический анализ изменчивости самой области экспансии, т.е. точное определение числа повторов в локусах FRAXA и FRAXE, определяющих две формы Х-сцепленной умственной отсталости, не проводился.

В последнее время стала подвергаться сомнению точность цитогенетической диагностики СМБ. Имеется предположение, что низкая экспрессия ломкого сайта в дистальной части длинного плеча Х-хромосомы в пределах 2-3% может привести к ложноположительной диагностике синдрома [Morton et al., 1997]. Так, в некоторых семьях, где экспрессия ломкой Х-хромосомы у пробандов не превышала 1-2%, диагноз СМБ был исключен после проведения дополнительной молекулярно-генетической диагностики [Баранов с соавт., 1993; Стрельников, 2000]. В связи с этим правильная оценка результатов цитогенетического исследования остается актуальной проблемой. К сожалению, современные, высокоразрешающие молекулярно-генетические методы диагностики СМБ являются сложными, дорогими и часто не доступны для многих медико-генетических консультаций нашей страны. Это ставит на повестку дня вопрос о 8 правильном подборе комплекса доступных методов, которые бы обладали хорошими разрешающими способностями для диагностики этого достаточно широко распространенного заболевания.

Цель работы: Молекулярно-генетическая характеристика области экспансии тринуклеотидных повторов локусов РЯАХА и БЯАХЕ у лиц с умственной отсталостью и здоровых индивидов Западно-Сибирского региона России с разработкой эффективного подхода к диагностике синдрома ломкой Х-хромосомы.

Задачи исследования:

1. Исследовать полиморфизм тринуклеотидных Свв- и ОСС-повторов локусов РЫАХА и РЯАХЕ у жителей Западно-Сибирского региона России.

2. Выявить больных с синдромом Мартина-Белл среди лиц с умственной отсталостью с помощью цитогенетического исследования ломкой X-хромосомы.

3. Провести молекулярно-генетический анализ локуса РЯАХА у индивидов с умственной отсталостью с помощью оценки статуса метилирования гена БМШ и определения числа СОО-повторов в данном локусе.

4. Сопоставить эффективность диагностики СМБ цитогенетическими и молекулярно-генетическими методами и разработать новый протокол диагностики синдрома ломкой Х-хромосомы на основе комплексного использования цитогенетических и молекулярно-генетических методов исследования.

Научная новизна. Впервые в России проведено исследование распределения частот СвО- и ОСС-повторов в двух локусах синдрома ломкой Х-хромосомы - РЯАХА и РИАХЕ. Установлены различия в 9 распределении частот аллелей этих локусов у славянского населения от других этнических и расовых групп. У жителей Западно-Сибирского региона России выявлена высокая частота промежуточных аллелей более 40 копий СОв-повторов локуса РЯАХА. С помощью комплекса цитогенетических и молекулярно-генетических методов исследования определена частота СМБ у лиц с недифференцированной олигофренией.

Практическая значимость работы. Проведена цитогенетическая и ДНК-диагностика СМБ у 147 умственно отсталых больных и их родственников. В 18 случаях поставлен точный диагноз заболевания. Выявлены семьи с СМБ, в которых возможна дальнейшая профилактика умственной отсталости с помощью современных методов диагностики. В ходе исследования в практику здравоохранения внедрен новый протокол диагностики СМБ. Предложен более корректный диагностический критерий синдрома ломкой Х-хромосомы при использовании цитогенетического метода.

Положения, выносимые на защиту:

1. Определены популяционные характеристики распределения аллелей области тринуклеотидных повторов локусов ЕЯАХЕ и БИАХЕ у жителей Западно-Сибирского региона России.

2. Разработан двухэтапный протокол диагностики СМБ с помощью комплексного цитогенетического и молекулярно-генетического анализа области экспансии тринуклеотидных повторов локусов РЯАХА и РЯАХЕ у больных с Х-сцепленной умственной отсталостью.

3. Эффективная диагностика СМБ может быть достигнута путем предварительного выявления индивидов, не имеющих нормального локуса ШАХА, с последующей оценкой у них у них статуса метилирования Срв-островка гена РМШ.

10

4. Частота СМБ у лиц с умственной отсталостью в регионе составляет 6,8% (6,3% у мужчин и 8,1% у женщин).

5. При цитогенетической диагностике СМБ у лиц мужского пола правильный диагноз возможен лишь в том случае, если степень экспрессии ломкого сайта Хд27.3 составляет не менее 4%.

11

Заключение диссертации по теме «Генетика», Толмачева, Екатерина Николаевна

108 ВЫВОДЫ

1. В локусе FRAXA в у жителей г.Томска европеоидного происхождения выявлен 31 вариант аллелей в диапазоне от 8 до 56 копий CGG-повторов. Распределение является бимодальным, с модальными классами близкими к наблюдаемым в европеоидных популяциях. В исследованной популяции имеется высокая частота (11,8%) промежуточных аллелей локуса FRAXA от 41 до 55 копий CGG-повтора, которые могут стать источником новых мутаций гена FMR1 в популяции.

2. Показано, что локус FRAXE в томской популяции представлен 18 аллельными вариантами в диапозоне от 9 до 27 копий GCC-повторов и характеризуется унимодальным распределением с модальным классом в 17 повторов (частота 20%). Жители г.Томска достоверно отличаются высокой частотой коротких аллелей (менее 15 повторов) локуса FRAXE и сниженной частотой модального класса, в отличие от других исследованных популяций.

3. Установлено, что в 33,3% случаев с цитогенетически поставленным диагнозом СМБ, преимущественно с низкой частотой экспрессии ломкой X-хромосомы (в пределах 1-3%), имеет место ложно-позитивная диагностика заболевания. С помощью молекулярно-генетических методов диагноз СМБ подтверждается в 30,8% случаев с отсутствием ломкой Х-хромосомы (ложно-негативная диагностика синдрома), что также указывает на недостаточную чувствительность цитогенетического метода. Статусу полной мутации с метилированным промотором гена FMR1 при СМБ соответствует экспрессия ломкого сайта Xq27.3, превышающая 4%.

4. Разработана схема двухэтапного протокола диагностики СМБ, включающая на первом этапе цитогенетический анализ ломкой Х-хромосомы после культивирования клеток в условиях тимидинового шока с параллельной амплификацией области CGG-повторов локуса FRAXA. На втором этапе диагноз заболевания подтверждается, если у лиц с отсутствием

109 продукта амплификации указанной области имеется метилирование промоторной области гена БМЯ!.

5. Частота СМБ у лиц с умственной отсталостью европеоидного происхождения, выявленная с помощью цитогенетического и молекулярно-генетического анализов составляет 6,8% (6,3% - у мужчин и 8,1% - у женщин).

6. Установлено, что частота СМБ у больных с Прадера-Вилли-подобным фенотипом составляет 4,8%, что дает основание считать целесообразной диагностику этого заболевания у пациентов с данным фенотипом, но с отсутствующими аномалиями хромосомы 15.

7. Выявлен редкий случай СМБ с 3%-ным уровнем экспрессии ломкой Х-хромосомы и отсутствием метилирования СрО-островка локуса РИАХА в лимфоцитах периферической крови, что свидетельствует о том, что фенотип СМБ и экспрессия ломкого сайта Хц27.3 не всегда связаны с метилированием промоторной области гена РМШ. по

Считаю своим приятным долгом выразить глубокую благодарность доктору биологических наук, заведующему лабораторией цитогенетики МГ ТНЦ СО РАМН С.А. Назаренко как инициатору и руководителю настоящей работы. Выражаю искреннюю признательность коллегам по работе H.H. Сухановой, И.Н. Лебедеву, Е.А. Саженовой и всем сотрудникам лаборатории цитогенетики за поддержку и помощь в выполнении работы и обсуждении результатов. Огромная благодарность А. Н. Кучер за помощь в представлении и обсуждении работы, врачам-цитогенетикам C.JL Вовк, Н.Б. Жигаловой, врачам О.Ю. Корягиной, И.В. Пикаревской, Е.В. Липиной, В.М. Сивоха, зав. отделением наследственных болезней М.Н. Филимоновой, сотрудникам областного диагностического центра г. Новосибирска А.Б. Масленникову и Г.П. Китайник, а также среднему медперсоналу за помощь при сборе материала для настоящей работы.

Ill

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Синдром Мартина-Белл в России до сих пор остается малоизученным как в клиническом, так и медико-генетическом плане. Недостаточно разработаны методы эффективной молекулярно-генетической диагностики синдрома, нет четких данных о частоте заболевания, его распространении в различных регионах страны, отсутствуют регистры семей с СМБ, имеющих высокий риск рождения детей с умственной отсталостью. Все эти факторы и послужили основанием для проведения настоящей работы.

С помощью цитогенетического метода мы обследовали 108 неродственных индивидов с умственной отсталостью европеоидного происхождения (71 мужчина и 37 женщин) в возрасте от 5 до 30 лет, жителей Западно-Сибирского региона России. В результате проведенного цитогенетического анализа у 9 индивидов (6 лиц мужского и 3 - женского пола), была выявлена экспрессия ломкого сайта в сегменте Хя27.3. Степень экспрессии ломкой Х-хромосомы составила от 1 до 28%. Общая частота больных синдромом ломкой Х-хромосомы, выявленная цитогенетическим анализом без учета степени экспрессии ломкого сайта Xq27.3, составила 8,3%, в том числе у мужчин - 8,4% и у женщин - 8,1%. Частота больных СМБ среди умственно отсталых индивидов, выявленная с помощью цитогенетических методов исследования без учета степени экспрессии ломкого сайта Хц27.3, колеблется в разных популяциях от 0 до 6,2%. Таким образом, частота СМБ в нашей выборке несколько выше, чем в других популяциях. Вариабельность частоты заболевания в разных исследованиях может быть вызвана либо воздействием каких-либо факторов, влияющих на распространение мутации в различных популяциях, либо использованием разных критериев отбора пациентов для исследования. В результате генеалогического и цитогенетического анализа в 8 семьях, имеющих больных с СМБ, обнаружено 11 здоровых гетерозиготных носительниц мутации (5 женщин с ломким сайтом РИАХА и 6 - с отсутствием экспрессии) и 7 новых случаев СМБ у лиц обоего пола.

103

Экспрессия ломкого сайта в дистальной части длинного плеча X-хромосомы не во всех случаях связана с экспансией CGG-повтора в гене FMR1, так как в этом районе Х-хромосомы локализованы еще три ломких сайта - FRAXD, FRAXE и FRAXF [Flynn et al., 1993; Hirst et al., 1993; Sutherland et al., 1989]. Кроме того, в некоторых случаях экспансии CGG-повтора в гене FMR1 ломкий сайт Xq27.3 не проявляется [Sklower Brooks et al., 1991]. Поэтому для уточнения цитогенетического диагноза и выявления мутации гена FMR1 у лиц с отсутствием ломкого сайта Xq27.3, нами с помощью молекулярно-генетических методов были проанализированы образцы ДНК от индивидов с экспрессирующимся ломкой Х-хромосомой и без нее.

Молекулярно-генетический анализ локуса FRAXA был осуществлен с применением двух методических подходов - прямого анализа числа CGG-повторов в указанном локусе и путем определения статуса метилирования промотора гена FMR1. Число CGG-повторов в локусе FRAXA было определено у 30 индивидов, имеющих только умственную отсталость с отсутствием экспрессии ломкой Х-хромосомы. У 22 индивидов аллели локуса FRAXA находились в диапазоне нормального распределения (от 13 до 38 CGG-повторов), что позволило исключить заболевание. У 8 индивидов продукт амплификации не был обнаружен, что могло косвенно указывать на наличие СМБ. Диагноз у этих больных был уточнен на втором этапе исследования, который включал определение статуса метилирования гена FMR1 с последующим исключением лиц с неметилированным локусом FRAXA. Из 69 обследованных индивидов с умственной отсталостью и не имеющих ломкую Х-хромосому был выявлен только один больной с метилированным CpG-островком локуса FRAXA, что составило 1,4%.

Уровень метилирования локуса FRAXA был проанализирован также у 15 больных мужского пола с экспрессией ломкого сайта Xq27.3 и 13 лиц с четкими клиническими признаками СМБ. В результате исследования у 14 из 28 исследованных индивидов (50,0%) был обнаружен гиперметилированный

Срв-островок гена РМШ. У 5 из 15 (33,3%) больных с цитогенетически поставленным диагнозом СМБ локус РЯАХА оказался не метилированным, т.е. имела место ложнопозитивная диагностика заболевания. Экспрессия ломкого сайта Хц27.3 в лимфоцитах этих индивидов была незначительной - в пределах 1-3%. У 4 из 13 (30,8%) больных с клиническими признаками СМБ, но с отсутствием ломкой Х-хромосомы, был обнаружен гиперметилированный промотор локуса БЯАХА, что также указывает на недостаточную чувствительность стандартного цитогенетического метода (ложнонегативная диагностика заболевания). В результате проведенного молекулярно-генетического анализа диагноз СМБ был поставлен 14 пациентам, причем 4 из них впервые. Кроме того, у пациента с четкими клиническими признаками СМБ и ломким сайтом Xq27.3 со степенью экспрессии 3% был выявлен неметилированный СрО-островок гена БМЕи. При исследовании области тринуклеотидных повторов локуса РЯАХА этого больного продукт амплификации не выявлялся, что могло косвенно указывать на экспансию СОв-повторов. Контрольная амплификация локуса РЯАХЕ, лежащего в том же сегменте Х-хромосомы при тех же условиях, показала наличие нормального аллеля. По-видимому, этот индивид имел редкую форму СМБ и являлся «мозаиком по метилированию». Изучение таких больных позволит понять взаимоотношение длины расширенного повтора, уровня экспрессии белка РМЮ5, метилирования локуса РЯАХА в различных тканях и степень проявления клинических признаков заболевания.

В целом из 132 индивидов (95 мужского и 37 женского пола), обследованных с помощью цитогенетических и молекулярно-генетических методов, СМБ был выявлен у 9. Таким образом, общая частота СМБ у лиц с умственной отсталостью составляет 6,8% (у мужчин - 6,3%, у женщин 8,1%).

По оценкам различных исследователей у пациентов с умственной отсталостью частота СМБ, определенная с помощью молекулярно-генетических методов, колеблется от 0,5% (Гонконг) до 22,0% (Италия). Причина такой вариабельности оценок обусловлена, вероятно, не

105 популяционными особенностями, хотя и не исключает их, а критериями отбора пациентов для исследования. Одна из наиболее высоких частот СМБ (22,0%) была выявлена в Италии, однако авторы указывают на достаточно серьезное смещение этой выборки вследствие предварительного клинического отбора пациентов для исследования. В основном, данные большинства авторов по частоте СМБ, определенной с помощью молекулярно-генетических методов, колеблются в пределах от 0,5 до 6,7%. Последнее значение представляет оценку частоты заболевания, полученную при исследовании умственно отсталых больных в Германии [Но1тзк>Ре<1ег & а1., 1996]. Авторы отмечают, что такая высокая частота заболевания обусловлена тем, что ими обследовались пациенты с четкими клиническими признаками СМБ. Частота данного синдрома в нашей выборке (6,8%) близка к данным немецких исследователей. Необычно высоким оказалось и значение частоты СМБ, выявленное нами у женщин (8,1%). Очевидно, комплекс таких клинических признаков как умственная отсталость, удлиненное лицо, аномалии соединительной ткани, аномалии поведения, гиперактивность и эмоциональная расторможенность, использованный нами для отбора больных, обладает достаточной информативностью для выявления СМБ среди контингента лиц с умственной отсталостью.

С помощью однофакторного дисперсионного анализа мы сравнили две группы больных, у которых первоначальный цитогенетический диагноз СМБ был либо подтвержден, либо отвергнут молекулярными методами диагностики. Обнаружено, что степень экспрессии ломкого сайта БИАХА у больных с подтвержденным диагнозом СМБ достоверно отличается от таковой у лиц с неподтвержденным диагнозом, причем минимальная частота клеток с ломкой Х-хромосомой для правильной диагностики СМБ должна составлять не менее 4%. Проблема корректной оценки результатов цитогенетической диагностики является весьма актуальной, поскольку в сегменте Хя27-28 локализованы еще три ломких сайта. Правильная интерпретация результов цитогенетического анализа особенно важна для

106 нашего региона, так как большинство медико-генетических консультаций продолжают пользоваться только цитогенетическими методами диагностики СМБ.

На основании полученных результатов был разработан алгоритм диагностики СМБ у лиц мужского пола с умственной отсталостью по следующей схеме: цитогенетический анализ после культивирования лимфоцитов в условиях тимидинового шока, молекулярно-генетический анализ области CGG-повторов локуса FRAXA для выявления индивидов с отсутствием продукта амплификации, соответствующего нормальным аллелям локуса FRAXA, с последующей оценкой статуса метилирования CpG-островка гена FMR1 у этих лиц.

Для многих локусов с тринуклеотидными повторами, экспансия которых является причиной тяжелых нейро-дегенеративных заболеваний, характерна положительная асимметрия распределения аллелей в различных популяциях. Существует гипотеза, согласно которой источником мутаций, приводящих к заболеванию, являются аллели с числом тринуклеотидных повторов в верхнем ранге распределения в популяции [Imbert et al., 1993; Morton et al 1992; Rubinzshtein et al., 1994]. Эта гипотеза предполагает прямую корреляцию распространения заболеваний экспансии с частотой длинных аллелей. С целью проверки этой гипотезы мы провели исследование распределения частот аллелей в локусах FRAXA и FRAXE, связанных с возникновением двух форм Х-сцепленной умственной отсталости. Обнаружено, что молекулярный полиморфизм локуса FRAXA у жителей Западно-Сибирского региона России характеризуется следующими чертами: распределение частот аллелей этого локуса является мультимодальным, с модальными классами 28-29, 18 и 20 копий CGG-повторов; частоты основных модальных классов снижены, а гетерозиготность локуса повышена, по сравнению с другими изученными популяциями; выявлена также высокая суммарная частота промежуточных аллелей, которые характеризуются большей нестабильностью по сравнению с нормальными, и склонны к

107 расширению в последующих поколениях. В локусе РЯАХЕ у жителей г.Томска по сравнению с другими европеоидными группами, выявлено симметричное распределение аллелей с высоким значением дисперсии и гетерозиготности, достоверным увеличением суммарной частоты класса коротких аллелей и модальным классом аллелей, соответствующим 17 копиям вСС-повтора.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Толмачева, Екатерина Николаевна, 2001 год

1. Вехова Н.В. Клинико-цитогенетический полиморфизм синдрома умственной отсталости, сцепленный с ломкой хромосомой X у детей: Автореф. дисс. канд. мед. наук.- М., 1994.-24с.

2. Кучер А.Р., Иванова О.Ф., Пузырев В.П., Цимбалюк И.В., Троценко Б.А. Генетико-демагрофическая характеристика современного сибирского города (на примере г.Томска) // Генетика,- 1995.- Т.ЗО.- № 2,-С.276-281.

3. Маринчева Г.С., Гаврилов В.И. Умственная отсталость при наследственных болезнях.- М.; Медицина. 1988.- 253 с.

4. Стрельников В.В., Немцова М.В., Чеснокова Г.Г., Кулешов Н.П. Залетаев Д.В. Диагностика синдрома Мартина-Белл на основе анализа структурно-функциональных изменений 5'-нетранслируемой области гена FMR1 // Мол. биология.- 1999.- Т.ЗЗ.- №2.- С.330-336.

5. Ракишева З.Б. Диагностические основы медико-генетической профилактики синдрома Мартина-Белла (C.FRA (Xq27)).' Автореф. дисс. канд. мед. наук.- М., 1993.- 20с.

6. Alcalay M., Toniolo D. CpG-islands of the X-chromosome are gene associated//Nucí. Acids Res.- 1988.- N.20.- P.9527-9543.

7. Amos W., Sawcer S.J., Feakes R.W., Rubinsztein D.C. Microsatellites show mutational bias and heterozygote instability // Nat. Genet.-1996.- V.13.- N.4- P.390-391.

8. Ashley Jr.C.T., Wilkinson K.D., Reines D., Warren S.T. FMR1 protein: conserved RNP binding // Science.- 1993.- N. 262.- P.562-566.

9. Bambara R. A., Murate R.S., Henricksen L.A. Enzymes and reactions at the eukaryotic DNA replication fork // J. Biol. Chem.- 1997.- V.272.- P.4647-4650.

10. Banchs J., Bosch A., Guimera J., Lazaro C., Puig A., Estivill X. New alleles at microsatellite loci in CEPH families mainly arise from somatic mutation in the lymphoblastoid cell lines // Hum. Mutat.- 1994.- N.3.- P.365-372.

11. Barner D.M. "Fragile X" syndrome and its puzzling genetics // Science.- 1989.- V.243.-N.13.- P.171-172.

12. Baylin S.B. Trying it all together: epigenetics, genetics, cell cycle, and cancer // Science.- 1997.- V.277.- P.1948-1949.

13. Beckman J.S., Weber J.L. Survey of human and rat microsatellites // Genomics.- 1992.- N.12.- P. 627-631.

14. Blomquist H.K., Gustavson K.H., Holmgren G., Nordenson I., Palsson-Stae U. Fraqile X syndrome in mildly mentally retarded children in Northern Swedish county. A prevalence study // Clin. Genet.- 1983.- V.24.- P.393-398.

15. Bowater R.P., Jaworski A., Larson J.E. et al. Transcription increases the deletion frequency of long CTG-CAG triplet repeats form plasmids in Echerichia coli // Nucl. Acids Res.- 1997.- V.25.- P.2861-2868.

16. Brown W.T. The FRAXE syndrome: is it time for routine screening // Am. J. Hum. Genet.-1996.- V.58.- P.903-905.

17. Burke J.R., Ikeuchi T., Koide R., Tsuji S., Yamada M., Pericak-Vance M.A., Vance J.M. Dentatorubral-pallidoluysian atrophy and Haw River syndrome //Lancet.-1994.- V.344.- P. 1711-1712.

18. Burman R.W., Popovich B.W., Jacky P.B., Turker M.S. Fully expanded FMR1 CGG repeats exhibit a length- and differentiation- dependent instability in cell hybrids that is independent of DNA methylation // Hum. Mol. Genet.- 1999.- V.8.- P.2293-2302.

19. Butler M.G., Allen A., Singh D.N., Carpenter N.J., Hall B.D. Photoanthropometric analysis of individuals with the fragile X syndrome // Am. J. Med. Genet.- 1988.- V.30.-N.l-2.- P. 165-168.

20. Butler M.G., Pratesi R., Vnencak-Jones C.L. Molecular genetic screening in cytogenetically normal mentally retarded males with manifestations of fragile X syndrome // Am. J. Med. Genet.- 1994.- V.51.- N.4.- P.315-316.

21. Camerino G., Mattei M.G., Mattei J.F., Jaye M., Mandel J.L. Close linkage of fragile X-linked mental retardation syndrome to haemophilia B and transmission through a normal male // Nature.- 1983.- V.306.- P.701-707.

22. Carbonell P., Lopez I., Gabbaron J. FRAXE mutation analysis of three Spanish families // Am. J. Med. Genet.- 1996.- V.64.- P.434-440.

23. Carey N.K.J., Jonson K., Nokelainen P., et al. Meiotic drive at the myotonic dystrophy locus // Nat. Genet.- 1994.- V.6.- P. 117-118.

24. Caskey C.T. Variation of the CGG repeat at the fragile X site results in genetic instability: resolution of the Sherman paradox // Cell.- 1991.- V.67.-P.1047-1058.

25. Chen X., Marriappan S.V., Moyriz R.K. et al. Hairpin-induced slippage and hypermethylation of the fragile X DNA triplets // J. Biomol. Str. Dynamics.- 1998.- V.15.- P.745-756.

26. Chiang S-C., Lee Y-M., Wang T-R, Hwu W-L. Allele distribution at the FMR1 locus in the general Chinese population // Clin. Genet.- 1999.- V.55.-P.352-355.

27. Chong S.S., Eichler E.E; Nelson D.L; Hughes M.R. Robust amplification and ethidium-visible detection of the fragile X syndrome CGG repeat using Pili polymerase // Am. J. Med. Genet.- 1994.- V.51.- N.4.- P.522-526.

28. Coffee B., Zhang F., Warren S.T., Reines D. Acetylated histones are associated with FMR1 in normal but not fragile X-syndrome cells // Nat. Genet.-1999.- N.22.- P.98-101.

29. Connor J.M. Cloning of the gene for the fragile X syndrome: implications for the clinical geneticist // J. Med. Genet.- 1991.- V.28.- N.12.-P.811-813.

30. Crawford D.C., Schwartz C.E., Meadows K.L., et al. Survey of the fragile X syndrome CGG repeat and the short-tandem-repeat and single-nucleotide-polymorphism haplotypes in an African American population // Am. J. Hum. Genet.- 2000.- V.66.- P.480-493.

31. Cross S.H., Bird A.P. CpG islands and genes // Curr. Opin. Genet. Dev.- 1995.- Y.5.-P.309-314.

32. Curey N., Johnson K., Nokelainen P., Peltonen L., Savontaus M-L., Juvonen V., Anvret M., Grandell U., Chotai K., Robertson E., Middelton-Price H.,

33. Malcolm S. Meiotic drive at the myotonic dystrophy locus? // Nat. Genet.- 1994.-V.6.- P.117-119.

34. Curfs L.M., Schreppers-Tijdink G., Wiegers A., Borghgraef M., Fryns J.P. Intelligence and cognitive profile in the fra(X) syndrome: a longitudinal study in 18 fra(X) boys // J. Med. Genet.- 1989.- V.26.- N.7.- P.443-446.

35. Darlow J.M., Leach D.R. Secondary structures in d(CGG) and d(CCG) repeat tracts // J. Mol. Biol.- 1998.- V.275.- P.3-16.

36. Darlow J.M., Leach D.R. Evidence for two preferred hairpin folding patterns in d(CCG) repeat tracts in vivo // J. Mol. Biol.- 1998.- V.275.- P. 17-23.

37. Dennis N., Curts G., Macpherson L. Two families with 27.3q fragility, no detectable insert in the FMR1 gene, mild mental impairment and absence of the Martin-Bell phenotype // Am. J. Med. Genet.- 1992.- V.43.- P.232-236.

38. Dijan P. Evolution of simple repeats in DNA and their relation to human disease // Cell.- 1998.- V.94.- P.156-160.

39. Duyao M., Ambrose C., Myers R., Novelletto A., Persichetti F., Frontali M., Folstein S., Ross C., Franz M., Abbott M., et al. Trinucleotide repeat length instability and age of onset in Huntington's disease // Nat. Genet.- 1993.-V.5.- P.387-392116

40. Echler E.E., Nelson D.L. Genetic variation and evolutionary stability of the FMR1 CGG repeat in six closed human populations // Am. J. Med. Genet.-1996.- V.64.- P.220-225.

41. Eichler E.E., Holden J.A., Popovich B.W., Reiss A.L., Snow K., Thibodeau S.N., Richards C.S., Ward P.A., Nelson D.L. Length of uninterrupted CGG repeats determines instability in the FMR1 gene // Nat. Genet.- 1994.- V.8.-P.88-94.

42. Faradz S.M.N., Buckley M., Lam-Po-Tang, et al. Molecular screening for fragile X syndrome among Indonesian children with developmental disability // Am. J. Med. Genet.- 1999.- V.83.- P.350-351.

43. Fisch G. Is autism associated with fragile X syndrome? // Am. J. Med. Genet.- 1992.- V.43.- P.47-55.

44. Floster-Iskenius U., Felsch G., Schirren C., Schwinger E. Screening for fra(X)(g) in a population of mentally retarded males // Hum. Genet.- 1983.-V.63.- P.153-157.

45. Freudenreich C.H., Stavenhagen J.B., Zakian V.A. Stability of a CTG/CAG trinucleotide repeat in yeast is dependent on its orientation in the genome // Mol. Cell. Biol.- 1997.- V.17.- P.2090-2098.

46. Fry M., Loeb L.A. The fragile X syndrome d(CGG)n nucleotide repeats form a stable tetrahelical structure // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1994.-V.91 .-P.4950-4954.

47. Gacy A.M., Doellner G., Juranic N., Macura S., McMurray C.T., Trinucleotide repeats that expand in human disease from hairpin structures in vitro //Cell.- 1995.- N.81.- P.533-554.117

48. Gecz J., Gedeon A.K., Suhterland G.R., Mulley J.C. Identification of FMR2, associated with FRAXE mental retardation // Nat. Genet.- 1996.- V.13.-P.105-108.

49. Gecz J., Oostra B.A., Hockey A., et al. FMR2 expression in families with FRAXE mental retardation // Hum. Mol. Genet.- 1997.- V.6.- N.3.- P.435-441.

50. Gedeon A.K., Baker E., Robinson H., Partington M.W., Gross B., Manca A., Korn B., Poustka A., Yu.S., Sutherland G.R., Mulley J.C. Fragile X syndrome without CCG amplification has an FMR1 deletion // Nat. Genet- 1992.-V.L- P.341-344.

51. Giangreco C., Steele M., Aston C., Cummins J., Wenger S. A simplified six-item checklist for fragile X syndrome in the pediatric population // J. Pediatr.- 1996.- P.611-614.

52. Gordenin D.A., Kunkel T.A., Resnick M.A. Repeat expansion-all in a flap? // Nat. Genet- 1997.- N. 16.- P. 116-118.

53. Gu Y., Shen T., Gibbs R.A., Nelson D.L. Identification of FMR2, a novel gene associated with the FRAXE GCC repeat and CpG-island // Nat Genet. -1996.-V.13.- P.105-108.

54. Gustavson K.H., Blomguist H.K., Holmgren G. Prevalence of the fragile X syndrome in mentally retarded children in Swedish country // Am. J. Med. Genet- 1996.- V.26.- P.581-587.

55. Haddad L.A., Aguiar M.J.B., Costa S.S., Mingroni-Netto R.C., Vianna-Morgante A.M., Pena S.D.J. Fully mutation and gray-zone FRAXA alleles in Brasilian mentally retarded boys // Am. J. Med. Genet.- 1999.- V.84.- P. 198201.118

56. Haddad L.A., Mingronni-Netto R.C., Vianna-Morgante A.M., Pena S.D.G. A PCR-based test suitable for screening for fragile X syndrome among mentally retardation males // Hum. Genet.- 1996.- V.97.- N.6.- P.808-812.

57. Hagerman R.J., Amiri K., Conister A. Fragile X checklist // Am. J. Hum. Genet.-1991.- V.38.- P.283-287.

58. Hagerman R.J., Silverman A.C. Fragile X syndrome: Diagnosis, treatment, research. Baltimore: Jons Hopkins University Press.- 1996. P.3-68.

59. Hamel B.C.G., Smits A.P.T., de Graaf E., et al. Segregation of FRAXE in large family: clinical, psychometric, cytogenetic, and molecular data // Am. J. Med. Genet.- 1994.- V.55.- P.923-931.

60. Hashimoto O., Shimizu Y., Kawasaki Y. Low frequency of the fragile X syndrome among Japanese autism subjects // J. Autism. Dev. Disod.-1993.- V.21.-N.1.- P.201-209.

61. Hecimovic S., Barisic I., Muller A., et al. Expanding long PCR for fragile X mutation detection // Clin. Genet.- 1997.- V.52.- P. 147-154.

62. Hirst M.C., Knight S.J.L., Bell M.V., Super M., Davles K.E. The fragile X syndrome // Clin. Science.-1992.- N.83.- P.255-264.

63. Hirst M.S., Barnlcoat A., Flynn S., Wang Q., Daker M., Buckle J., Davles K.E., Bobrow M. The identification of a third fragile site, FRAXF, in Xq27 -q28 distal to both FRAFA and FRAXE // Hum. Mol. Genet.- 1993.- V.2.- P.197-200.

64. Holden J.J.A., Chalifoux M., Wing M., et al. Screening of two institutions for FMR1 gene mutations using PCR and Southern blotting (abstract). Fourth International Fragile X Conference. The National Fragile Foundation, Albuquerque, NM.- 1994.

65. Holinski-Feder E., Chahrokh-Zaden S., Jedele K.B., et al. FRAXE testing // Am. J. Med. Genet.- 1996.- V.59.- P. 1168-1169.

66. Howard-Peebles P.N., Stoddard G.R. Familial X-linked mental retardation with a marker X chromosome and its relationship to macroorchidism //119

67. Clin. Genet- 1980.- V.17.- P.125-128.

68. Imbert G., Kretz C., Johnson K., Mandel J.L. Origin of the expansion mutation in myotonic dystrophy // Nat. Genet.- 1993.- V.4.- N.I.- P.7276.

69. Jacobs P.A. The fragile X syndrome // J. Med. Genet.-1991.- V.28.-P.809-810.

70. Jacobs P.A., Hunt P.A., Mayer M., Wang J.-C., Boss G.R., Erbe R.W. Expression of the marker (X)(q28) in lymphoblastoid cell lines // Am. J. Hum. Genet.- 1982.- V.34.- P.552-557.

71. Jacobs P.A., Bullman H., Macherson J., et al. Population studies of fragile X: a molecular approach // J. Med. Genet.- V.30.- P.454-459.

72. Jacobs P.A., Mayer M., Matsuura J., Rhoads F., Yee S.C. A cytogenetic study of a population of mentally retarded males with special reference to the marker (X) syndrome // Hum. Genet.- 1983.- V.63.- P. 139-148.

73. Jara L., Aspillaga M., Avendana I., et al. Distribution of (CGG)n and FMR-1 associated microsatellite alleles in a normal Chilean population // Am. J. Med. Genet.- V.75.- P.277-282.

74. Jenkens T., Krause A. Molecular evidence that fragile X syndrome occurs in the South African black population // J. Med. Genet.- 1998.- V.35.-P.878-879.

75. Johns M.B.Jr., Paulus-Thomas J.E. Purification of human genomic DNA from whole blood sodium perchlorate in phase on phenol // Anal. Biochem.-1989.- V.180.- N.2.- P.276-278.

76. Johnson R.E., Kovvali G.K., Prakach L., Prakach S. Requirement of the yeast RTH1 5' to 3'exonuclease for the stability of simple repetitive DNA // Science.-1995.- V.269.- P.238-240.

77. Khin N.A., Tarleton J., Raghu B., Park S.K., Clinical description of an adult male with psychosis who snowed FMR1 gene methylation mosaicism // Am. J. Med. Genet.- 1998.- V.81.- P.222-224.

78. Knight S.J.L, Voelckel M.A., Hirst M.C., Flannery A.V., Moncla A., Davis K.E. Triplet repeat expansion at the FRAXE and X-linked mild mental handicap // Am. J. Hum. Genet.- 1994.- V.55.- P.81-86.

79. Knight S.J.L., Flannery A.V. Hirst M.C., et al. Trinucleotide repeat amplification and hypermethylation of a CpG island In FRAXE mental retardation // Cell.- 1993,- V.74.- P.127-134.

80. Kirchgessner C.U., Warren S.T., Willard H.F. X inactivation in the FMR1 fragile X mental retardation gene // J. Med. Genet.- 1995.- V.32.- P.925-929.

81. Kirkilionis A., Sergovich F., Pozonsyi J. Use of testicular volume as a cytogenetic screening criterion // Am. J. Hum. Genet.- 1983.- V.35.- P.138.

82. Kuhl D.P.A., Caskey C.T. Trinucleotide repeats and genome variation // Curr. Op. Genet. Dev.- 1993.- V.3.- P. 404-407.

83. Kunst C.B., Leeflang E.P., Iber J.C., Arnheim N., Warren S.T. The effect of FMR1 CGG repeat interruptions on mutation frequency as measured by sperm typing // J. Med. Genet.- 1997.- V.34.- P.627-631.121

84. Kunst C.B., Leeflang E.P., Iber J.C., Arnheim N., Warren S.T. The effect of FMR1 CGG repeat interruptions on mutation frequency as measured by sperm typing // J. Med. Genet.- 1997.- V.34.- N.8.- P.627-31.

85. Kunst C.B., Warren S.T. Cryptic and polar variation of the fragile X could result in predisposition of normal alleles // Cell.- 1994.- V.54.- P.853-861.

86. Kunst C.B., Zerylnick C., Karickhoff L., Eichler E., Bullard J., Chalifouux M., Holden J.J., Torroni A., Nelson D.L., Warren S.T. FMR1 in global population // Am. J. Hum. Genet.- 1996.- V.58.- P.513-522.

87. Levinson G., Gutman G.A. Slipped-strand mispairing: a major mechanism for DNA sequence evolution // Mol. Biol. Evol.- 1987.- V.4.- P.203-221.

88. Levinson G., Maddalena A., Palmer F.T., Harton G.L., Bick D.P., Howard-Peebles P.N., Black S.H., Schulman J.D. Improved sizing of fragile X CCG repeats by nested polymerase chain reaction // Am. J. Med. Genet.- 1994.-V.51.- N.4.- P.527-534.

89. Li S.Y., Tsai C.C., Chou M.Y., Lin J.K. A cytogenetic study of mentally retarded schoolchildren in Taiwan with special reference to the fragile X chromosome // Hum. Genet.- 1988.- V.79.- P.292-296.

90. Lubs H.A. Jr. A marker X chromosome // Am. J. Hum. Genet.-1969.- V.21.-P.231-244.

91. MacPherson J.N., Curtis G., Crolla J.A., Dennis N., Migeon B., Grewal P.K. et al. Unusual (CGG)n expansion and recombination in a family with fragile X and DiGeorge syndrome // J. Med. Genet.- 1995.- V.32 P.236-239.

92. Malter H.E., Iber J.C., Willemsen R., de Graaff E., Tarleton J.C., Leisti J., Warren S.T., Oostra B.A. Characterization of the full fragile X syndrome mutation in fetal gametes //Nat. Genet.- 1997.- V.15.- P. 165-169.

93. Mandel J.-L. Breaking the rule of three // Nature.- 1997.- V.386.-P.767-769.

94. Mandel J.L., Heitz D. Molecular genetics of the fragile-X syndrome: a novel type of unstable mutation // Curr. Opin. Genet. Dev.- 1992.- V.2.- N.3.-P.422-430.

95. Martin R. H., Lin, C. C., Mathies B. J., Lowry R. B. X-linked mental retardation with macro-orchidism and marker-X chromosomes // Am. J. Med. Genet.- 1980,- V.7.- P.433-441.

96. Martin J. P., Bell J. A. pedigree of mental defect showing sex-linkage // J. Neurol. Psychiat.- 1943.- V.6.- P.154-157.

97. Mazurczak T., Bocian E., Milewski M., Obersztyn E., Stanczak H., Bal J., Szamotulska K., Karwacki M. Frequency of Fra X syndrome among institutionalized mentally retarded males in Poland // Am. J. Med. Genet.- 1996.-V.61.- P.184-186.

98. Mazzocco M.M.M., Myers G.F., Hamner J.L., et al. The prevalence of FMR1 and FMR2 mutations among preschoolchildren with language delay // J. Pediatr.- 1998.- V.132.- P.795-801.

99. Mitas M. Trinucleotide repeats associated with human disease // Nucl. Acids Res.- 1997.- V.25.- P.2245-2253.123

100. Moorheard P.S., Nowell P.S., Melman W.J. Chromosome preparations of leukocytes cultures from human peripheral blood // Exptl. Cell. Res.-I960.- V.20.- P.613-617.- V.92.- P.4833-4837.

101. Morris A., Morton N.E., Collins A., Macpherson J., Nelson D., Sherman S. An n-allele model for progressive amplification in the FMR1 locus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1995.- P. 4833-4835.

102. Morton J.E., Bundey S., Webb T.P., MacDonald F., Rindl P.M., Bullock S. Fragile X syndrome is less common than previously estimated // J. Med. Genet. 1997. V.34. N.l. P. 1-5.

103. Morton N.E., Macpherson J.N. Population genetics of the fragile-X syndrome: multiallelic model for the FMR1 locus // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-1992.- V.89.- P.4215-4217.

104. Mutter G.L., Boyton K.A. PCR bias in amplification of androgen receptor alleles, a trinucleotide repeat marker used in clonality studies // Nucl. Acids Res. 1995.- V.23.- N.8.- P.1411-1418.

105. Myers R.H., MacDonald M.E., Koroshetz W.J., Duyao M.P., Ambrose C.M., Taylor S.A., Barnes G., Srinidhi J., Lin C.S., Whaley W.L. et al. De novo expansion of a (CAG)n repeat in sparodic Huntington's disease // Nat. Genet.- 1993,-N.5.- P. 168-173.

106. Nakahori Y., Knight S.J.L., Holland J., Schwartz C., Roche A., et al. Molecular heterogeneity of the fragile X syndrome // Nucl. Acids Res.- 1991.-V.19.- P.1355-1359.

107. Napier J.R., Napier P.H. A Handbook of Living Primates. Academic Press, London, 1967.

108. Oberle I., Rousseau F., Heitz D., Kretz C., Devys D., Hanauer A.,124

109. Boue J., Bertheas M.F., Mandel J.L. Instability of a 550-base pair DNA segment and abnormal methylation in fragile X syndrome // Science.-1991.- V.252.-P.1097-1102.

110. Ohshima K., Wells R.D. Hairpin formation during DNA synthesis primer realignment in vitro in triplet repeat sequences from human hereditary disease genes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1997.- N212.- P. 16798-16806.

111. Okano M., Xie S., Li E. Cloning and characterization of a family of novel mammalian DNA (cytosine-5) methyltransferases // Nat. Genet.- 1998.-N.19.-P.219-220.

112. Pang C.P., Poon P.M.K., Chen Q.L., et al. Trinucleotide CGG repeat in Chinese mentally retarded patients // Am. J. Med. Genet.- 1999.- V.84.- P. 179183.

113. Perroni L., Grasso M., Argusti A. et al. Molecular and cytogenetic analysis of the fragile X syndrome in a series of 453 mentally retarded subjects: a study of 87 families //Am. J. Med. Genet.- 1996.- V.64.- P. 176-180.

114. Pieretti M., Zhang F., Fu, Y.-H., Warren S.T., Oostra B.A., Caskey C. T., Nelson D.L. Absence of expression of the FMR-1 gene in fragile X syndrome // Cell.- 1991.- V.66.- P.817-822.

115. Ramos F.J., Emanuel B.S., Spinner N.B. Frequency of the common fragile site at Xq27.2 under conditions of thymidylate stress: implications for cytogenetic diagnosis of the fragile-X syndrome // Am. J. Med. Genet.- 1992.-V.42.-P. 835-838.

116. Richards R.I., Holman K., Friend K., Kremer E., Hillen D., Staples125

117. A., Brown W.T., Goonewardena P., Tarleton J., Schwartz C., Sutherland G.R. Evidence of founder chromosomes in fragile X syndrome // Nat. Genet.- 1992.-N.h- P.257-260.

118. Richards R.I., Sutherland G.R. Dynamic mutation: A new class of mutation causing human disease // Cell.- 1992.- V.70.- P.709-712.

119. Richards R.I., Sutherland G.R. Dynamic mutation: possible mechanism and significance in human disease // Trends. Biochem. Sci.- 1997.-V.22.- P.432-436.

120. Ritchie R.J., Chakrabarti L., Knight S.J.L., Harding R.M., Davies K.E. Population genetics of the FRAXE and FRAXF GCC repeats, and a novel CGG repeat, in Xq28 // Am. J. Med. Genet.- 1997.- V.73.- P.463-469.

121. Rosseau F., Rouillard P., Morel M-L., Khandjian E.W., Morgan K. Prevalence of carries of premutation-size alleles of the FMR1 gene and implications the population genetics of the fragile X syndrome // Am. J. Hum. Genet.- 1995.-V.57.- P.1006-1018.

122. Rousseau F. The fragile X syndrome: implications of molecular genetics for the clinical syndrome // Eur. J. Clin. Invest.- 1994.- V.24.- N.I.- Pl-10.

123. Rubinsztein D.C., Amos W., Leggo S., Goodburn S., Sain S., Li S.H., Margobis R.L., Ross C.R., Ferguson-Smith M.A. Microsatellite evolution -evidence for directionality and variation in between species // Nat. Genet.- 1995.-V.10.- P.337-343.

124. Seabright M. A rapid banding technique for human chromosome // Lancet.-1971.- V.2. P.971-972.

125. Sklower Brooks S., Cohen I., Ferrando C. et al. Cytogenetic negative, linkage positive "fragile X" syndrome // Am. J. Med. Genet.-1991.-V.38.-P.370-373.

126. Smeets H.J., Smits A.P.T., Verheij C.E., et al. Normal phenotype in two brothers with a full FMR1 mutation // Hum. Mol. Genet.- V.4.- N.l 1.- P.2103-2108.

127. Smith S.S., Laayoun A. Lingeman R.G., Baker D.J., Riley J. Hypermethylation of telomere-like foldbacks at codon 12 of the human c-Ha-ras gene and the trinucleotide repeat of the FMR-1 gene of fragile X // J. Mol. Biol.-1994. V.243.- P.143-151.127

128. Snell R.G., et al. Relationship between trinucleotide repeat expansions and phenotypic variation in Huntington's disease // Nat. Genet.- 1993.-N.4.- P.393-397.

129. Soudek D., Partington M.W., Lawson J. Fragile X syndrome I: Familial variation in the proportion of lymphocytes with fragile site in moles // Am. J. Med. Genet.- 1984.- V.17.- P.241-252.

130. Sutherland G.R., Baker, E. Characterisation of a new rare fragile site easily confused with the fragile X // Hum. Mol. Genet.- 1992.- V.I.- P.l 11-113.

131. Sutherland G.R., Baker E. The common fragile site in band q27 of the human X chromosome is not coincident with the fragile X // Clin. Genet.-1990.- V.37.-N.3.- P. 167-172.

132. Sutherland G.R., Richards R.I. Simple tandem DNA repeats and human genetic disease // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1995.- V.92.- P.3636-3641.

133. Syrrou M., Georgiou I., Grigoriadou M., Petersen M.B., Kitsiou S., Pagoulatos G., Patsalis P.C. FRAXA and FRAXE prevalence in the patients with nonspecific mental retardation in the Hellenic population // Genet. Epidemiol.-1998.- V.15.- P.103-109.

134. Tautz D., Truck M., Dover G.A. Cryptic simplicity in DNA is a major source of genetic variation // Nature.- 1986.- V.322.- P.652-656.

135. Trinh T.Q., Sinden R.R. Preferential DNA secondary structure mutagenesis in the lagging strand of DNA replication in E.Coli // Nature.- 1991.-V.352.- P.544-547.

136. Trishkoff D.X., Filosi N., Gaiga G.M., Kolodner R.D. A novel mutation avoidance mechanism dependent on S. cerevisiae RAD27 is distinct from DNA mismatch repair // Cell.- 1997.- N.88.- P.253-263.

137. Turner G., Daniel, A., Frost M. X-linked mental retardation, macro-orchidism, and the Xq27 fragile site // J. Pediat.-1980.-V.96.- P.837-841.

138. Turner G., Webb T., Wake S., Robinson H. Prevalence of fragile X syndrome // Am. J. Med. Genet.- 1996.- V.64.- P. 196-197.

139. Uchida I. A., Joyce E. M. Activity of the fragile X in heterozygous carriers // Am. J. Hum. Genet.- 1982.- V.34.- P.286-293.

140. Usdin K., Woodford K.J. CGG repeats associated with DNA instability and chromosome fragility from structures that block DNA synthesis in vitro // Nucl. Acids Res.- 1995.- V.23.- P.4202-4209.

141. Verngnaud G. The use of synthetic tandem repeats to isolate new VNTR loci cloning of a human hypermutable sequence // Genomics.- 1991.- V.I.-P.135-144.

142. Vieregge P., Froster-Iskenius U. Clinico-neurological investigations in the fra(X) form of mental retardation // J. Neurol.- 1989.- V.236.- N.2.- P.85-92.

143. Vries B.B.A., Jansen C.C.A., Duits A.A., et al. Variable FMRP gene methylation of large expansion leads to variable phenotype in three males from one fragile X family // J. Med. Genet.- 1996.- V.33.- P.1007-1010.

144. Vries B.B.A., van den Ouweland A.M.W., Mohkamsing S., Duivenvoorden H.J., et al. Screening and diagnosis for the mentally retarded: anepidemiological and psychological survey // Am. J. Hum. Genet.- 1997.- V.61.-P.660-667.

145. Wang Z., Taylor A.K., Bridge J.A. FMR1 fully expanded mutation with minimal metylation in a high functioning fragile X male // J. Med. Genet.-1996.- V.33.- N.12.- P.376-378.

146. Warren S.T., Nelson D.L. Advances in molecular analysis of fragile X syndrome // J. Am. Med. Assoc.- 1994.- V.271.- P.5360-542.

147. Watson M.S., Breg W.R. Anthropometric comparison of mentally retarded males with and without the fragile X syndrome // Am. J. Med. Genet.-1991.- V.38.- N.2-3.- P.260-268.

148. Webb T.P., Bundey S.E., Thake A.I., Todd J. Population incidence and segregation rations in the Martin-Bell syndrome // Am. J. Med. Genet.- 1986.-V.23. P.573-580.

149. Weber J., Wong C. Mutation of short tandem repeats // Hum. Mol. Genet.- 1993.- N.8.-P.1123-1128.

150. Weber J.L., May P.E. Abundant class of human DNA polymorphisms which can be typed using the polymerase chain reaction // Am. J. Hum. Genet.- 1989.- V.44.- P.388-306.

151. Weber J.L., Wong C. Mutation of human short tandem repeats // Hum. Mol. Genet.- 1993,- V.2.- P.l 123-1128.

152. White P.Y., Borts R.H., Hirst M.C. Stability of the human fragile X (CGG)(n) triplet repeat array in Saccharomyces cerevisiae deficient of DNA metabolism // Mol. Cell. Biol.- 1999.- N.19.- P.5675-5684.

153. Winter R.M., Pembrey M.E. Analysis of linkage relationships between genetic markers around the fragile X locus with special reference to the daughters of normal transmitting males // Hum. Genet.- 1986.- V.74.- P.93-97.

154. Yoder J.A., Yen R.-W.C., Vertino P.M., Bestor T.H., Baylin S.B. New 5-prime regions of the murine and human genes for DNA (cytosine-5)-methyltransferase // J. Biol. Chem.- 1996.- V.271.- P.31092-31097.

155. Zhang L., Leeflang E.P., Yu J., Arnheim N. Studying human mutations by sperm typing: instability of CAG trinucleotide repeats in the human androgen receptor gene // Nat. Genet.-1994.- V.7.- N.4.- P.531-535.

156. Zhao Y., Shen Y., Liu Y., Zhang J.C.,Ye L.Z., Ma S.W., Lo W.H., Wu G.Y., Cheng Z.Y., Zhang X.Z. Fragile X syndrome (Martin-Bell syndrome) in China// Am. J. Med. Genet.- 1991.- V.38.- N.2-3.- P.288-289.

157. Zhong N., Ju W., Pietrofesa J., Wang D., Dobkins C., Brown W.T. Fragile X "gray zone" alleles: AGG patterns, expansion risk, and associated haplotypes // Am. J. Med. Genet.-1996.- V.64.- P.261-265.

158. Zhong N., Ju W., Ye L., Shen Y., et al. Frequency of the fragile X syndrome in Chinese mental retarded population is similar to that in Caucasians // Am. J. Med. Genet.- 1999,- V.84.- P.191-194.

159. Zhong, N., Dobkin C., Brown W.T. A complex mutable polymorphism located within the fragile X gene // Nat. Genet.- 1993.- V.5.- P.248-253.

160. Zong N., Ju W., Curley D., Wang D., Pietrofesa J., Wu G., Chen Y., Pang C., Poon P., Lui X., Gou S., Kajanoja E., Ryynanen M., Dobkin C., Brown W.T. A survey of FRAXE allele size in three population // Am. J. Med. Genet.-1996.-V.64.-P.415-419.