Молекулярная изменчивость кластера импринтированных генов хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Саженова, Елена Александровна

• Саженова, Елена Александровна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Саженова, Елена Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Феномен геномного импринтинга.

1.2. Однородительская дисомия и геномный импринтинг.

1.3. Импринтированные гены человека и мыши.

1.4. Механизмы регуляции геномного импринтинга.

1.5. Особенности молекулярной организации импринтированных генов хромосомы 15 и регуляция импринтинга.

1.6. Клиническая характеристика и генетическая гетерогенность синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярная изменчивость кластера импринтированных генов хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана»

Представление об универсальности менделевских законов передачи наследственной информации, которое господствовало в генетике достаточно долго, в последнее время претерпело существенное изменение. Этому способствовало открытие таких феноменов, как геномный импринтинг (ГИ), инактивация X хромосомы, экспансия тринуклеотидных повторов и ряда других явлений нетрадиционного наследования. Необходимость дальнейшего изучения этих явлений продиктована новым уровнем знаний о геноме человека и расширением наших представлений о многообразии механизмов функционирования генов.

Из всех явлений нетрадиционного наследования значительный интерес представляет феномен геномного импринтинга (англ. imprint — отпечаток), под которым понимают эпигенетический процесс, дифференциально маркирующий определенные локусы гомологичных хромосом и выключающий экспрессию одного из аллельных генов в зависимости от их родительского происхождения [John, Surani, 2000; Reik, Walter, 2001]. В результате наличия в гене на одной из двух гомологичных хромосом некого «отпечатка» этот ген теряет способность считывания генетической информации. Таким образом, в участках генома, подверженных импринтингу, обнаруживается моноаллельная экспрессия генов, причем если импринтирован материнский ген, то экспрессируется отцовский аллель и наоборот. ГИ устанавливается в результате надмолекулярных эпигенетических процессов, обеспечивающих дифференциальную экспрессию генов путем модификации ДНК, не затрагивающей их первичную нуклеотидную последовательность [Bestor, 2000; Назаренко, 2001; Jaenisch, Bird, 2003]. Показано, что основную роль в ГИ играет метилирование цитозиновых оснований ДНК с образованием 5метилцитозина, обеспечивающее выключение экспрессии генов с модифицированными нуклеотидами [Li, 2002].

Проблема дифференциальной экспрессии генов является одной из наиболее актуальных и интригующих проблем современной функциональной геномики. Открытие генов, экспрессия которых определяется полом передавшего их родителя, породило новое направление научных исследований в рамках изучения механизмов специфического функционирования генов. Для генетики развития значительный интерес представляет изучение механизмов и роли ГИ в формировании как нормальных фенотипических признаков организма, так и клинических, возникающих в результате нарушения дифференциальной экспрессии импринтированных локусов [Hitchins, Moore, 2002]. Эти вопросы в настоящее время активно исследуются в ведущих мировых генетических лабораториях. Показано, что многие импринтированные гены в геноме млекопитающих имеют кластерную организацию, т.е. они собраны в отдельные кластеры, обладающие определенной эволюционной консервативностью. Особый интерес представляет один из крупных кластеров импринтированных локусов хромосомы 15 человека, расположенный в области 15qll-ql3. Часть генов, расположенных в этом кластере, имеют противоположный характер импринтинга — т.е. они экспрессируются с разных гомологов хромосомы 15. Другой интересной особенностью кластерной организации импринтированных локусов генома является подчинение их экспрессии некому контролирующему элементу, так называемому центру импринтинга [Ohta et al., 1999].

Поскольку нарушение механизмов импринтинга связано с формированием ряда наследственных болезней человека (болезней геномного импринтинга), то их понимание возможно через изучение молекулярных основ развития этих заболеваний [Пузырев, Назаренко, 1997; Пузырев, Степанов, 1997; Paulsen, Ferguson-Smith, 2001; Немцова, 2002].

Эффекты импринтинга проявляются как при структурных нарушениях участков хромосом, содержащих импринтированные гены, так и при ошибочном наследовании обеих гомологичных хромосом от одного родителя — явлении однородительской дисомии (ОРД). Установлено, что нарушение моноаллельной экспрессии генов на отцовской хромосоме 15 приводит к синдрому Прадера-Вилли (СПВ), а на материнской - к синдрому Энгельмана (СЭ). В связи с этим, оба этих заболевания стали прекрасной моделью для изучения феномена ГИ у человека [Nicholls, Knepper, 2001].

Клиническая картина СПВ и СЭ отличается большим разнообразием, а генетические механизмы, лежащие в основе этиологии и патогенеза этих заболеваний, еще до конца не изучены. СПВ и СЭ возникают как в результате делеции области qll-ql3 отцовской или материнской хромосомы 15, так и в результате ОРД хромосомы 15 материнского или отцовского происхождения соответственно. Кроме того, они могут быть следствием мутаций в центре импринтинга и мутаций в локусах-мишениях импринтинга. Наличие разных механизмов развития наследственных заболеваний ставит вопрос о наличии популяционных и этнических особенностей в формировании отдельных вариантов генетически гетерогенных болезней вообще и болезней геномного импринтинга в частности. Однако в литературе по этому вопросу имеются весьма ограниченные данные. В качестве примера может служить недавно выполненная диссертационная работа по характеристике отдельных генетических вариантов СПВ и СЭ в Финляндии [Kokkonen, 2003]. Что касается России, то известна всего лишь одна работа, рассматривающая молекулярную нарушения у больных с СПВ и СЭ, но она выполнена на больных с СПВ и СЭ европейской части страны [Залетаев, Немцова, 2001; Немцова, 2002]. Дальнейшее накопление материала по болезням геномного импринтинга и более глубокое исследование больных с различными молекулярными вариантами этого класса патологии позволит не только глубже понять природу эпигенетической регуляции активности генов, но и необходимо для разработки методов профилактики и лечения данных заболеваний.

Выяснение характера связи между генотипом и фенотипом представляет другой важный аспект изучения генетически гетерогенных болезней. Попытки выявления гено-фенотипических корреляций при разных молекулярных формах СПВ и СЭ уже предпринимались рядом авторов и было отмечено, что у больных с СПВ, обусловленном ОРД хромосомы 15, имеется более «легкое» клиническое проявление заболевания, по сравнению с его делеционным вариантом [Moncla et al., 1999; Gillessen-Kaesbach et al., 1999; Roof et al., 2000]. Однако четких клинических признаков, характерных для разных генетических вариантов этого заболевания, не было выявлено. Более того, в ходе молекулярного анализа у некоторых больных с фенотипическими признаками СПВ были выявлены генетические дефекты, характерные для СЭ [Dupont et al., 1999; Gillessen-Kaesbach et al., 1999]. Таким образом, вопрос о гено-фенотипических корреляциях при болезнях геномного импринтинга представляет существенный интерес и требует дальнейшего изучения.

Важным представляется также вопрос о вкладе ОРД хромосомы 15 в эмбриональную летальность. В литературе имеется ограниченное число исследований, посвященных анализу взаимосвязи ОРД по хромосомам человека с ранней эмбриональной гибелью [Shaffer et al., 1998; Smith et al., 1998; Nazarenko et al., 1999]. На сегодняшний день ОРД у эмбрионов, погибших в I триместре беременности, обнаружена только по хромосомам 21 и 9 [Henderson et al., 1994; 2001; Wilkinson et al., 1996; Fritz et al., 2001]. В то же время эти хромосомы не содержат импринтированных локусов [Blouin et al., 1993; Robinson et al., 1994; Bjorck et al., 1999; Tiranti et al., 1999; Rogan et al., 1999; Bruyere et al., 2000]. Поэтому вопрос о вкладе ОРД в эмбриональную летальность по хромосомам, несущим импринтированные гены, и, в частности, хромосомы 15, пока остается открытым [Никитина, 1999].

Цель исследования: Определить спектр и фенотипическое проявление молекулярных нарушений кластера импринтированных генов хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана.

Задачи исследования:

1. Изучить полиморфизм ДНК, обусловленный вариациями числа тандемных повторов хромосомы. 15, у жителей Западно-Сибирского региона России и оценить информативность выбранных генетических маркеров для определения родительского происхождения хромосомы 15.

2. Определить статус метилирования импринтированных генов области qll-ql3 хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана.

3. Оценить протяженность делеции и частоту делеционного варианта области ql l-ql3 хромосомы 15 у исследуемых больных.

4. Изучить вклад однородительской дисомии хромосомы 15 в этиологию синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана, а также механизмы ее возникновения.

5. Исследовать фенотипические особенности разных молекулярных вариантов синдрома Прадера-Вилли.

6. Оценить вклад однородительской дисомии хромосомы 15, как одного из молекулярных вариантов синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана, в эмбриолетальность у человека.

Научная новизна: Впервые у славянского населения ЗападноСибирского региона России изучен полиморфизм ряда ДНК-маркеров, расположенных как непосредственно в пределах кластера импринтированных генов хромосомы 15, так и вне границ этого района с оценкой их информативности для анализа родительского происхождения данной хромосомы. Установлены молекулярные формы патологии у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана. Впервые у пробанда с синдромом Прадера-Вилли обнаружена сегментная материнская однородительская гетеродисомия области 15qll-ql3, что свидетельствует о возможности соматического кроссинговера как механизма, детерминирующего развитие данного заболевания. Выявлены фенотипические отличия между больными с синдромом Прадера-Вилли, имеющими делеционный вариант заболевания и вариант болезни, обусловленный однородительской дисомией хромосомы 15 материнского происхождения. Показано, что ОРД хромосомы 15 не вносит заметного вклада в гибель кариотипически нормальных зародышей в эмбриональном периоде развития человека.

Практическая значимость: В настоящей работе проведена молекулярная диагностика заболеваний у 57 больных с клиническим диагнозом синдром Прадера-Вилли и у 11 больных с синдромом Энгельмана. Выявлены разные молекулярные варианты синдромов, определена их частота и фенотипическое проявление, оптимизированы подходы к диагностике этих болезней. Обнаружены достоверные отличия разных молекулярных вариантов синдрома Прадера-Вилли по ряду систем аномалий развития органов (аномалии нервной системы, позвоночника и конечностей), которые могут быть использованы для предварительной диагностики заболевания. Изученный в настоящей работе комплекс полиморфных ДНК-маркеров хромосомы 15 может быть использован в молекулярно-генетических исследованиях (для ДНК-диагностики наследственной патологии, анализа сцепления, идентификации личности, определения биологического отцовства и других форм родства). и

Положения, выносимые на защиту:

1. Аллельный спектр полиморфных микросателлитных ДНК-маркеров хромосомы 15 у славянского населения Западно-Сибирского региона России отличается от европейских популяций.

2. У больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана преобладающим типом мутаций области 15qll-ql3 являются делеции, а доля однородительской дисомии хромосомы 15 материнского и отцовского происхождения составляет 29,0% и 18,2% соответственно.

3. Сегментная однородительская дисомия хромосомы 15, выявленная при синдроме Прадера-Вилли, свидетельствует о возможности соматического кроссинговера как механизма, детерминирующего развитие данного заболевания.

4. Больные с синдромом Прадера-Вилли, имеющие делеционный вариант и ОРД хромосомы 15, отличаются по степени выраженности отдельных клинических признаков заболевания. Больные с ОРД имеют с меньшей частотой аномалии развития нервной системы, позвоночника и конечностей.

5. Однородительская дисомия по хромосоме 15 не вносит заметного вклада в раннюю эмбриональную летальность у человека.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на: научных чтениях, посвященных 100-летию профессора В.П.Чехова (Томск, 1997); научно-практической конференции «Медицинская генетика: проблемы диагностики, профилактики и диспансеризации больных с наследственной патологией» (Томск, 1998); Всероссийской научной конференции, посвященной 80-летию академика РАМН К.Р.Седова (Красноярск, 1998); II Европейской цитогенетической конференции (Вена, 1999); научно-практической конференции, посвященной 30-летию медико-генетической службы Новосибирской области «Современные медицинские технологии» (Новосибирск, 1999); II съезде Российского общества медицинских генетиков (Курск, 2000); научной конференции молодых ученых СО РАМН «Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины» (Новосибирск, 2000); научно-практической конференции «Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике» (Новосибирск, 2001); V итоговой научной конференции НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН (Томск, 2002); научно-практической конференции «Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике» (Новосибирск, 2002); межлабораторном семинаре НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН (Томск, 2003).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, результатов собственных исследований с обсуждением по разделам, заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста, содержит 16 таблиц и 25 рисунков. Список литературы включает 195 источников, из них 13 отечественных и 182 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Саженова, Елена Александровна

120 ВЫВОДЫ

1. У славянского населения Западно-Сибирского региона России в локусах D15S817 и D15S172 выявлены новые, не описанные ранее для европейской популяции аллели. Показано, что 8 исследованных локусов хромосомы 15 являются высоко информативными для анализа сегрегации данной хромосомы в семьях.

2. У больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана с помощью молекулярно-цитогенетического анализа выявляется соответственно 68,8% и 54,5% микроделеций области 15qll-ql3. Больные не имеют как атипичных по протяженности микроделеций, так и мозаичных делеционных вариантов заболеваний.

3. Частота однородительской дисомия хромосомы 15 материнского и отцовского происхождения у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана составляет 29,0% и 18,2% соответственно. При синдроме Прадера-Вилли преобладающая часть однородительских дисомий обусловлена ошибками I мейотического деления у матери (84,6%), приводящими к материнской гетеродисомии, а при синдроме Энгельмана однородительская дисомия определяется редкими ошибками сегрегации хромосом в I и II делении отцовского мейоза.

4. Сегментная однородительская гетеродисомия области 15qll-ql3 материнского происхождения, впервые выявленная у пробанда с синдромом Прадера-Вилли, свидетельствует о возможности соматического кроссинговера как молекулярного механизма, детерминирующего развитие данного заболевания.

5. Среди больных с синдромом Прадера-Вилли, статус метилирования импринтированных генов хромосомы 15 которых соответствует клиническому диагнозу, в 2,2% случаев выявляются индивиды без делеции и однородительской дисомии, что может свидетельствовать о наличии у них мутаций в центре импринтинга. В то же время у 27,3% пациентов с клиническим диагнозом синдрома Энгельмана отмечается нормальный статус метилирования импринтированных генов.

6. Больные с разными молекулярными вариантами синдрома Прадера-Вилли имеют различия по степени выраженности ряда клинических признаков заболевания. Анализ изменчивости 57 клинических признаков, вошедших в 12 систем аномалий развития организма, показал, что у больных с однородительской дисомией с меньшей частотой встречаются аномалии нервной системы, позвоночника и конечностей, по сравнению с больными, имеющими делеционный вариант заболевания.

7. Однородительская дисомия по хромосоме 15 не вносит заметного вклада в раннюю эмбриональную летальность у человека.

Считаю своим приятным долгом выразить глубокую благодарность директору ГУ НИИ медицинской генетики ТНЦ СО РАМН академику РАМН, доктору медицинских наук, профессору В.П. Пузыреву, заведующему лабораторией цитогенетики доктору биологических наук, профессору С.А. Назаренко как инициатору и руководителю настоящей работы за неоценимую помощь и поддержку во время выполнения данного исследования, директору Института медицинской генетики при Цюрихском университете г.Шверсенбах, Швейцария профессору А. Шинзелю и доктору А. Баумер. Выражаю свою искреннюю признательность коллегам по работе .Н.Лебедеву, Н.Н. Сухановой, Т.В. Никитиной и всем сотрудникам оратории цитогенетики за участие, помощь в выполнении работы и суждении результатов исследования. Огромная благодарность главному рачу генетической клиники ГУ НИИ медицинской генетики Л.П. Назаренко, каведующей отделением наследственных заболеваний М.Н. Филимоновой, ачам О.Ю. Корягиной, О.В. Напалковой, И.В. Пикаревской, сотрудникам сударственного Новисибирского областного клинического диагностического центра А.Б. Масленникову, Г.П. Китайник и А.Р. Шориной за помощь в сборе материала для настоящего исследования. .

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Кластер импринтированных генов хромосомы 15 человека в области 15qll-ql3 содержит ряд локусов, моноаллельно экспрессирующихся на отцовском и материнском гомологах. Нарушение экспрессии этих генов приводит к формированию двух классических болезней геномного импринтинга - синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана. В литературе имеется достаточно много информации об этом регионе генома человека и генах, в нем расположенных [Bocaccio et al., 1999; Cavaille et al., 2000; Santos et al., 2000; Muscatelli et al., 2000]. Так, в базе данных MEDLINE на сегодняшний день имеется 1519 и 658 ссылок на синдромы Прадера-Вилли и Энгельмана соответственно. Вместе с тем, несмотря на значительный объем информации, накопленной в этой области, вопрос о вкладе генетических нарушений в кластере импринтированных генов, локализованных в области 15qll-ql3, в патологию развития человека не может считаться окончательно решенным.

В настоящем исследовании была поставлена цель определить спектр и фенотипическое проявление молекулярных нарушений в кластере импринтированных генов хромосомы 15 у больных с синдромами Прадера-Вилли и Энгельмана. Для решения этой цели мы, прежде всего, оценили полиморфизм ДНК-маркеров, расположенных как в пределах кластера импринтированных генов, так и за его пределами у жителей ЗападноСибирского региона России. В дальнейшем, мы провели исследование молекулярных вариантов двух указанных заболеваний у кагорты больных из того же самого региона и попытались ответить на вопрос об особенностях фенотипической изменчивости разных молекулярных вариантов синдрома Прадера-Вилли. И наконец, мы оценили вклад однородительской дисомии хромосомы 15, как одного из молекулярных вариантов синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана, в эмбриолетальность у человека.

Анализ полиморфизма 8 ДНК-маркеров, расположенных как внутри кластера импринтированных генов хромосомы 15 в области 15qll-ql3 (D15S11, D15S817, GABRB3, D15S172 и D15S113), так и вне границ этого района (D15S659, D15S642 и D15S643), показал, что у жителей ЗападноСибирского региона эти ДНК-маркеры отличаются высоким полиморфизмом и информативностью. Нами были выявлены новые, не описанные ранее для популяций Европы аллели для двух полиморфных локусов хромосомы 15 -D15S172 и D15S817. Показано, что гетерозиготность ДНК-маркеров D15S172 и D15S11 в исследуемом регионе более высокая, a D15S642 — более низкая, чем в европейских популяциях. Все исследованные нами ДНК-маркеры могут быть рекомендованы не только для использования в ДНК-диагностике СПВ и СЭ, но и для идентификации личности, определения биологического отцовства, поиска ассоциаций этих локусов с различной патологией.

Исследование спектра молекулярных форм, встречающихся при СПВ и СЭ, показало, что у больных с СПВ в 68,8% случаев имеется делеционный вариант заболевания, в 29,0% случаев - однородительская дисомия хромосомы 15 материнского происхождения, а 2,2% больных с нарушенным статусом метилирования, соответствующим СПВ, не имеют ни делеций 15ql l-ql3, ни ОРД хромосомы 15. Такое состояние характерно для мутаций в центре импринтинга хромосомы 15. Спектр молекулярной патологии у больных с СЭ отличается от СПВ. Пациенты с СЭ в 54,5% случаев имеют делеции кластера импринтированных генов хромосомы 15 на материнском гомологе, в 18,2% случаев - однородительскую дисомию хромосомы 15 отцовского происхождения и у 27,3% больных статус метилирования импринтированных генов соответствует норме. Последнее событие не является редким у больных с СЭ и встречается по данным литературы в 2025% случаев [Nichols and Knepper, 2001]. Полученные в настоящей работе данные, в основном, согласуются с имеющимися данными по этому вопросу [Mitchell et al., 1996; Laan et al., 1998; Jang et al., 1999]. Однако у наших больных с СЭ имелась более высокая частота ОРД15отц (18,2% против 5% по данным литературы) и более низкая встречаемость делеционного варианта заболевания.

В настоящем исследовании мы впервые описали больного с СПВ, имеющего сегментную гетеродисомию хромосомы 15 материнского происхождения по участку 15qll-ql3. Наличие сегментной ОРД по какой-либо хромосоме у человека является достаточно редким событием. Исключение составляет лишь хромосома 11, поскольку у 10-20% больных с синдромом Видемана-Беквита выявляется ОРД по сегменту 11р15.5 [Henry et al., 1993]. Для других хромосом описано всего 13 случаев сегментной ОРД, сопровождающихся фенотипическими проявлениями - по хромосоме 2 (сегмент 2р16), по хромосоме 4 (сегмент 4q21-q35), по хромосоме 6 (сегмент 6q24-qter) и по хромосоме 14 (сегмент q23-q24.2) [Martin et al., 1999; Stratakiset et al., 2001; Yang et al., 1999; Das et al., 2000]. Факт существования сегментной ОРД15мат при СПВ позволяет считать, что не только ошибки мейоза, но и митотический кроссинговер через формирование сегментной ОРД 15 также может детерминировать развитие заболевания. Вовлечение в ОРД только области кластера импринтированных генов хромосомы 15, по-видимому, объясняется наличием на концах этого кластера низкокопийных повторяющихся последовательностей (дупликонов), которые, вероятно, являются «горячими точками» не только мейотической, но и митотической рекомбинации.

Оценка связи между генотипом и фенотипом у лиц с клинической картиной СПВ впервые показала наличие статистически значимых отличий между тремя группами индивидов - с делеционным вариантом заболевания, с ОРД15мат и индивидами с фенотипом СПВ, но с нормальным статусом метилирования критического района хромосомы 15. Мы впервые выявили новые фенотипические признаки, отличающие разные молекулярные формы данного заболевания. Так, наличие у больных с СПВ, помимо основных клинических признаков, гидроцефалии и круглого лица, может свидетельствовать о возможном делеционном варианте заболевания. В то же врем, такой признак, как диастема отличает группу больных с СПВ, имеющих ОРД15мат. Высокий рост, микростомия, гипотиреоз, дефект сердечной перегородки и эпикант являются характерными признаками для лиц с СПВ-подобным фенотипом, но не имеющих данного заболевания.

Сравнение двух групп индивидов с СПВ, имеющих делецию 15qll-ql3 и ОРД хромосомы 15, по совокупности всех изученных 57 клинических признаков заболевания показало, что больные с делеционным вариантом синдрома статистически достоверно не отличаются от больных с ОРД15мат. Однако, сравнительный анализ двух групп больных с разными молекулярными вариантами СПВ, проведенный после группировки клинических признаков в 12 систем аномалий развития, показал статистически значимые отличия по трем системам. У больных с делеционным вариантом СПВ с большей частотой встречались аномалии нервной системы, позвоночника и конечностей, по сравнению с больными, имеющими ОРД15мат. Полученные данные согласуются с имеющейся в литературе информацией о более «легкой» клинической картине СПВ у больных с однородительской дисомией хромосомы 15, по сравнению с делеционным вариантом синдрома [Gilessen-Caesbach et al., 1995; Mitchell et al., 1996; Cassidy et al., 1997]. В настоящем исследовании нам впервые удалось дифференцировать больных с СПВ от пациентов с СПВ-подобным фенотипом, не имеющих данного заболевания по данным молекулярного исследования.

Большой интерес представляет оценка вклада однородительской дисомии хромосомы 15, как одного из молекулярных вариантов синдромов Прадера-Вилли и Энгельмана, в эмбриолетальность у человека. На модельных объектах, в частности мыши, было показано, что импринтированные гены существенным образом контролируют процессы эмбриогенеза, поэтому нарушение функций этих генов может быть ассоциировано с патологией раннего периода онтогенеза. Так, показано наличие связи эмбриолетальности на ранних этапах развития у мышей с ОРД по хромосомам 2, 6, 7 и 12, которые, как известно, содержат импринтированные гены [Cattanach et al., 1994]. Что касается человека, то ОРД хромосомы 15 материнского и отцовского происхождения выявляется у живорожденных индивидов с СПВ и СЭ, однако не известно, все ли эмбрионы с такой генетической патологией нормально проходят начальные этапы внутриутробного периода развития. ОРД в большинстве случаев является следствием коррекции моносомии или трисомии до дисомии, произошедшей в мейозе или митозе [Kotzot, 1999]. Хромосома 15 у человека достаточно часто вовлекается в нерасхождение в оогенезе, поэтому риск формирования ОРД по этой хромосоме может быть достаточно высоким.

В настоящее время в литературе опубликовано всего лишь несколько работ по систематическому поиску ОРД у спонтанных абортусов человека. [Shaffer et al., 1998; Smith et al., 1998; Nazarenko et al., 1999]. В целом, по хромосомам 11 и 19 обследовано 223 эмбриона, по хромосомам 2, 16, 20, 21 и X — около 200, по хромосоме 9—173 абортуса, по остальным хромосомам набора - 147 погибших зародышей. Всего найдено 4 случая ОРД: один по хромосоме 9 и три - по хромосоме 21, из которых в одном случае ОРД21 сочеталась с трисомиями хромосом 7 и 9, и, вероятно, она не являлась основной причиной гибели зародыша. Известно, что хромосомы 9 и 21 не имеют импринтированных генов. Таким образом, вопрос о вкладе ОРД в эмбриональную летальность по хромосомам, несущим импринтированные гены, до настоящего времени остается открытым [Никитина, 1999]. Наше исследование показало, что все изученные нами 84 спонтанных абортуса I триместра беременности с нормальным кариотипом имели биродительское наследование двух гомологов хромосомы 15. Таким образом, мы не установили какого-либо вклада ОРД хромосомы 15 в нарушение процесса раннего эмбрионального развития человека. Исходя из полученных нами результатов, можно сделать вывод о том, что ОРД по хромосоме 15, имеющей синтенный с хромосомами мыши участок с ортологичными импринтированными генами, не оказывает заметного влияния на невынашивание беременности в I триместре у человека. Кроме того, эти результаты могут свидетельствовать о том, что механизмы, детерминирующие эмбриолетальность в результате нарушения экспрессии импринтированных локусов, существенно различаются у млекопитающих, далеко отстоящих друг от друга на эволюционной лестнице.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Саженова, Елена Александровна, 2003 год

1. Берман Р.Е., Воган В.К. Педиатрия // Москва. Медицина. — 1991. — С.43-56.

2. Боровиков В.П. Популярное введение в программу STATISTIC А // М.: КомпьютерПресс 1998. - 267с.

3. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний // С-П. -Специальная литература. — 1997. 283с.

4. Залетаев Д.В., Немцова М.В. Комплексный анализ изменений критических районов хромосом и разработка протоколов ДНК-диагностики Н Вестник РАМН. 2001№10. - С.48-52.

5. Козлова С.И.» Семанова Е., Демикова Н.С., Блинникова О.Е. Наследственные синдромы и медико-генетическое консультирование: Справочник.- Л.: Медицина. 1987. - 230с.

6. Льюин Б.М. Гены / Под ред. Георгиева Г.П. М.: Мир. 1987.544с.

7. Колчанов Н.А., Рогозин И.Б., Соловьев В.В. Теоретический анализ механизмов возникновения спонтанных и индуцированных мутаций в ДНК на основе повторов // Генетика. 1989. - Т.25. - N.9. - С.1690-1698.

8. Назаренко С.А. Изменчивость хромосом и развитие человека // Томск: изд-во Томского ун-та. 1993.- 200с.

9. Назаренко С.А. Нарушение эпигенетической активности генов и болезни человека // Вестник РАМН. 2001№10. - С.43-48.

10. Немцова М.В. Нарушение эпигенетической регуляции экспрессии генов как новый класс молекулярной патологии Н Автореф. дисс. д.б.н. Москва. 2002. - 47с.

11. Никитина Т.В. Исследование однородительской дисомии и микросателитной нестабильности при ранней эмбриональной гибели человека // Автореф. дисс. к.б.н. Томск. — 1999. — 24с.

12. Перепечина И.О., Гришечкин С.А. Вероятные расчеты в ДНК дактилоскопии: методические рекомендации.- М.: "ЭКЦ МВД России. -1996. -16с.

13. Пузырев В.П., Назаренко С.А. Болезни генетического импринтинга у человека // Вопросы мед. химии. 1997. - Т.43. - №5. - С.356-365.

14. Пузырев В.П., Степанов В.А. Патологическая анатомия генома // Новосибирск. Наука. - 1997. - С.99-132.

15. Albrecht U., Sutdiffe J.S., Cattanach B.M., Beechey C.V. Armstrong, Eichele G., Beaudet A.L. Imprinted expression of the mutation Angelman syndrome gene, Ube3a, in gippocampal // Nat.Genet. 1997. - V. 17. - P. 75-78.

16. Avivi L., Korenstein A., Braier-Goldstein O., Goldman В., Ravia Y. Uniparental disomy of sex chromosomes in man // Am. J. Hum. Genet. Suppl. — 1992.-V.51.- P.33-35.

17. Bastepe M, Lane AH, Jtippner H. Paternal uniparental isodisomy of chromosome 20q-and the resulting changes in GNAS1 methylation as aplausible cause of pseudohypoparathyroidism. Am J Hum Genet 2001 ;68:1283-1289.

18. Beldjord C., Henry I., Bennani C., Vanhaeke D., Labie D. Uniparental disomy: a novel mechanism for thalassemia major // Blood 1992. — V.80. — P. 287-289.

19. Benlian P., Foubert L., Gagne, Bernard L., De Gennes J.L., Langlois S., Robinson W., Hayden M. Complete paternal isodisomy for chromosome 8 unmasked by lipoprotein lipase deficiency // Am. J. Hum. Genet. — 1996. — V.59. -P.431-436.

20. Bestor Т.Н. The DNA methyltransferases of mammals // Hum. Mol. Genet. 2000. - V.9. - P.2395-2402.

21. Bischoff F.Z., Feldman G.L., McCaskill C., Subramanian S. Singl cell analysis demonstrating somatic mosaicizm involving lip in patient with paternal isodisomy and Becwith-Wiedemann syndrome // Hum. Mol. Genet. — 1995. — V.4. -P.395-399.

22. Bjorck E.J., Anderlid B.M., Blennow E. Maternal isodisomy of chromosome 9 with no impact on the phenotype in a woman with two isochromosomes: i(9p) and i(9q) // Am. J. Med. Genet. 1999. - V.87. - P.49-52.

23. Blouin J.L., Avramopoulos D., Pangalos C., Antonarakis S.E. Normal phenotype with paternal uniparental isodisomy for chromosome 21 // Am. J. Hum. Genet.- 1993.-V.53.-P. 1074-1078.

24. Boccaccio I., Glatt-Deeley H., Watrin F. Roeckel N., Lalande M., Muscatelli F. The human MAGEL2 gene and its mouse homologue are paternally expressed and mapped to the Prader-Willi region // Hum. Mol. Genet. 1999. -V.8. - P.2497-2505.

25. Botstein D., White D., Skolnick M. et al. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms // Am. J. Hum. Genet. 1980. - V.32. - P.314-331.

26. Buchholz Т., Jackson J., Smith A. Methylation analysis at three different loci within the imprinted region of chromosome 15ql ЫЗ // Am. J. Med. Genet.- 1997. -V.72.-P.117-119.

27. Buiting K., Saitoh S., Gross S., Dittrich В., Schwartz S., Nicholls R.D., Horsthemke B. Inherited microdeletions in the Angelman and Prader-Willi syndromes define an imprinting centre on human chromosome 15// Nat. Genet. — 1995. — V.9. — P.395-400.

28. Buiting K., Farber C., Kroisel P. Et al. Imprinting centre deletions in two PWS families: implication for diagnostic testing and genetic counseling // Clin. Genet. 2000. - V.58. - P.384-290.

29. Buiting К., Barnicoat A., Lich C., Pembrey M., Malcolm S., Horsthemke B. Disruption of the bipartite imprinting center in a family with Angelman syndrome // Am. J. Hum. Genet. 2001. - V.68. -P.l290-1294.

30. Buiting K., Gross S., Lich C., Gillessen-Kaesbach G., El-Maarri O., Horsthemke B. Epimutations in Prader-Willi and Angelman syndromes: a molecular study of 136 patients with an imprinting defect // Am. J. Hum. Genet. -2003. — V.72 — P.571-577.

31. Burger J., Horn D., Tonnies H., Neitzel H., Reis A. Familial interstitial 570 kbp deletion of the UBE3A gene region causing Angelman syndrome but not Prader-Willi syndrome // Am. J. Med. Genet. 2002. — V.l 11. -P.233-237.

32. Cassidy S. В., Forsythe M., Heeger S., Nicholls R. D., Schork N., Benn, P., Schwartz S. Comparison of phenotype between patients with Prader-Willi syndrome due to deletion 15q and uniparental disomy 15 // Am. J. Med. Genet. 1997. - V.68. - P.433-440.

33. Cattanach B.M., Jones J. Genetic imprinting in the mouse: implications for gene regulation // J. Inherit. Metab. Dis. 1994. - V.l7. — P.403-420.

34. Cavaille J., Buiting K., Kiefmann M., La-lande M., Brannan C.I. Iden-tification of brain-specific and imprinted small nucleolar RNA genes exhibiting an unusual genomic organization // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000. V.97. — P.14311-14316.

35. Chakraborty R., Stivers D.N., Deka R., Yu L.M. Segregation distortion of the CTG repeats at the myotonic dystrophy locus // Am. J. Hum. Genet. 1996. - V.59. - P.109-118.

36. Chotai K., Payne S. A rapid PCR based test for differential molecular diagnosis of Prader-Willi and Angelman syndromes // J. Med. Genet. 1998. -V.35. -P.472-475.

37. Christian S.L., Fantes J.A., Mewborn S.K., Huang В., Ledbetter D.H. Large genomic duplicons map to sites of instability in the Prader-Willi/Angelman syndrome chromosome region (15qll-ql3) // Hum. Mol. Genet. 1999. — V.8. -P. 1025-103 7.

38. Clayton-Smith J., Laan L. Angelman syndrome: a review of the clinical and genetic acpects // J. Med. Genet. 2003. - V.40. - P.87-95.

39. Cotter P.O., Kaffe S., McCurdy L.D., Jhaveri M., Willner J.P., Hirschhom K. Paternal uniparental disomy for chromosome 14: a case report and review //Am. J. Med. Genet. 1999. - V. 70. - P.74-79.

40. Coveler K.J., Yang S.P., Sutton R., Milstein J.M., Wu Y.O., Bois K.D., Beischel L.S., Johnson J.P., Shaffer L.G. A case of segmental paternal isodisomy of chromosome 14 // Hum. Genet. 2002. -V.l 10. -N.3. - P.251-256.

41. Coveler K.J., Sutton V.R., Knox-Dubois C., Shaffer L.G. Comprehensive microsatellite marker analysis contradicts previous report of segmental maternal heterodisomy of chromosome 14 // J. Med. Genet. 2003. -V.40. -P.26.

42. Driscoll D.J., Waters M. F., Williams C.A., Zori R.T., Glenn C.C., Avidano K.M., Nicholls R. D.A DNA methylation imprint, determined by the sex of the parent, distinguishes the Angelman and Prader-Willi syndromes // Genomics 1992. - V.13. — P.917-924.

43. Dufourcq-Lagelouse R., Lambert N., Duval M., Viot G., Vilmer E., Fischer A., Prieur M., de Saint Basile G. Chediak-Higashi syndrome associated with maternal uniparental isodisomy of chromosome 1 // Eur. J. Hum. Genet. — 1999. — V.7. — P.633-637.

44. Eggermann Т., Wollmann H. A., Kuner R., Eggermann K., Enders H., Kaiser P., Ranke M. B. Molecular studies in 37 Silver-Russell syndrome patients: frequency and etiology of uniparental disomy // Hum. Genet. 1997. - V.100. -P.415-419.

45. Eichler E.E. Masquerading repeats: aralogous pitfalls of the human genome // Genome Res. 1998. - V.8. - P.758-762.

46. Engel E. A new genetic concept: uniparental disomy and its potential effect isodisomy // Am. J. Med. Genet. 1980. - V.6. - P. 137-143.

47. Engel E., Delozier-Blanchet C.D. Uniparental disomy, isodisomy and imprinting: probable effects in man and strategies for their detection // Am. J. Med. Genet. 1991. - V.40. - P.432-439.

48. Engel E. Uniparental disomy in unselected population // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V.63. - P.962-966.

49. European Collaborative Research on Mosaicism in CVS (EUCROMIC). Trisomy 15CPM: probable origins, pregnancy outcome and risk for fetal UPD // Prenat. Diagn. 1999. - V.19. - P.29-35.

50. Fritz В., Hallermann C., Jlert J. Cytogenetic analyses of culture failures by comparative genomic hybridisation (CGH). Re-evalution on chromosome aberration rates in early spontaneiuus abortion // Eur. J. Hum. Genet.- 2001. V.9. - P.539-547.

51. Fritz В., Asian M., Kalscheuer V. Low incidence of UPD in spontaneiuus abortions beyond the 5th gestation week // Eur. J Hum. Genet. 2001.- V.9. P.910-916.

52. Fulmer-Smentek S., Francke U. Association of acetylated histones with paternally expressed genes in the Prader-Willi detection region // Hum. Mol. Genet. 2001. - V. 10. - P.645-652.

53. Fundele R.H., Surani M.A. Experimental embryological analysis of genetic imprinting in mouse development // Dev. Genet. — 1994. — V.15. — N.6. -P.515-522.

54. Gallagher R.C., Pils В., Albalwi M., Francke U. Evidence for the role of PWSR1/HBII-85 С/D/ box Small Nuclear RNAs in Prader-Willi syndrome // A. J. Hum. Genet. 2002. - V.71. - P.669-678.

55. Gelb B.D., Willner J.P., Dunn T.M., Kardon N.B. Paternal uniparental disomy for chromosome 1 revealed by molecular analysis of a patient with pycnodysostosis // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V.62. - P.848-854.

56. Gerard M., Hernandez L., Wevrick R., Stewart C.L. Disruption of the mouse Necdin gene results in early postnatal lethality // Nat. Genet. 1999. - V.23 -P. 199-202.

57. Gillessen-Kaesbach G., Gross S„ Kaya-Westerloh S. DNA methylation based testing of 450 patients suspected of having Prader-Willi syndrome // J. Med. Genet. 1995. - V.32. - P.88-92.

58. Gillessen-Kaesbach G., Robinsone W., Lohmann D., Kaya-Westerloh S., Passarge E., Horsthemke B. Genotype-phenotype correlation in series of 167 deletion and non-deletion patient with Prader-Willi syndrome // Hum. Genet. -1995. V.96. - P.638-643.

59. Glenn C.C., Nicholls R.D., Robinson W.P., Saitoh S., Niikawa N., Schinzel A., Horsthemke В., Driscoll D.J. Modification of 15qll-ql3 DNA methylation imprints in unique Angelman and Prader-Willi patients // Hum. Mol. Genet. 1993. - V.2 - P.1377-1382.

60. Glenn C.C., Driscoll DJ., Yang T.P., Nicholls, R.D. Genomic imprinting: potential function and mechanisms revealed by the Prader-Willi and Angelman syndromes // Mol. Hum. Reprod. 1997. - V. 3. - P.321-332.

61. Glenn C.C., Deng G., Michaelis R.C., Tarleton J., Phelan M.C., Surh L. DNA methylation analysis with respect to prenatal diagnosis of the Angelman and Prader-Willi syndromes and imprinting // Prenat. Diagn. 2000. - V.20. — P.300-306.

62. Golden W.L., Sudduth K.W., Burnet S.H., Kelly Т. E. Mosaicism in Prader-Willi syndrome: detection using fluorescence in situ hybridization // Am. J. Med. Genet. 1999. - V.85. - P.424-425.

63. Gray T.A., Saitoh S., Nicholls R.D. An imprinted, mammalian bicistronic transcript encodes two independent proteins // Proc. Natl. Acad. Sci. -1999. V.96. - P.5616-5621.

64. Griffin D.K., Millie E.A., Hassold T.J. Zaragoza M.V. Cytogenetic analisis of spontaneous abortions: comparison of techniques and assessment of the incidence of confined placental mosaicism // Am. J. Med. Genet. 1997. — V.72. — P.297-301.

65. Gunay-Aygun M., Schwartz S., Heeger S., Riordan M. A., Cassidy S. B. The changing purpose of Prader-Willi syndrome clinical diagnostic criteria and proposed revised criteria// Pediatrics 2001. - V.108. - P.l-5.

66. Hannula К., Lipsanen-Nyman M., Kontiokari Т., Kere J. A narrow segment of maternal uniparental disomy of chromosome 7q31-qter in Silver-Russell syndrome delimits a candidate gene region // Am. J. Hum. Genet. — 2001.- V.68. — P.247-253.

67. Hataga I., Mukai T. Genomic imprinting and Becwith-Wiedemann syndrome // Histol. Histopatol. 2000. - V.15. - P.309-312.

68. Henderson D. J., Sherman L.S., Loughna S.C. Early embrionic failure associated with uniparental disomy for human chromosome 21 // Hum. Mol. Genet. 1994. - V.3. - P.1373-1376.

69. Hitchins M.P., Moore G.E. Genomic imprinting in fetal growth and development // 2002 Exp. Rev. Mol. Med. 9 May, http://www.expertreviews. org/0200457Xh.htm.

70. Hoglund P., Holmberg C., de la Chapelle A., Kere J. Paternal isodisomy for chromosome 7 is compatible with normal growth and development in a patient with congenital chloride diarrea II Am. J. Hum. Genet. 1994. - V.55.- N.4. P.747-752.

71. Holliday R. Genomic imprinting and allelic exclusion // Dev. Suppl. -1990. P. 125-129.

72. Holm V.A., Cassidy S.B., Butler M.G., Hanchett J.M., Greenswag L.R., Whitman B.Y., Greenberg F. Prader-Willi syndrome: consensus diagnostic criteria // Pediatrics. 1993. - V.91. - P.398-402.

73. Hug M., Silke J., Georgiev O., Rusconi S., Schaffner W., Matsuo K. Transcriptional repression by methylation: cooperativity between a CpG cluster in the promoter and remote CpG-rich regions // FEBS Lett. 1996. - V.379. - P.251-254.

74. Huntriss J., Daniels R., Bolton V., Monk M. Imprinted expression of SNRPN in human preimplantation embryos // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V.63. -P.1009-1014.

75. JaenischR., Bird A. Epigenetic regulation of gene expression: how the genome integrates intrinsic and environmental signals // Nat. Genet. 2003. -V.33. Suppl. — P.245-254.

76. Ji Y., Eichler E.E., Schwartz S., Nicholls R.D. Structure of chromosomal duplicons and their role in mediating human genomic disorders // Genome Res. 2000. - V.l0. - P.597-610.

77. Ji Y., Rebert N.A., Joslin J.M., Higgins M.J., Schultz R.A., Nicholls R.D. Structure of the highly conserved HERC2 gene and of multiple partially duplicated paralogsin human // Genome Res. 2000. - V.l0. - P.3193-3229.

78. John R.M., Surani M.A. Genomic imprinting, mammalian evolution, and the mystery of egg-laying mammals // Cell. 2000. - V.l 01. - P.585-588.

79. Jong M.T., Gray T.A., Ji Y., Glenn C.C., Saitoh S. A novel imprinted gene, encoding a RING zinc-finger protein, and overlapping antisense transcript in the Prader-Willi syndrome critical region // Hum. Mol. Genet. 1999. - V.8. -P.783-793.

80. Juyal R C., Greenberg F., Mengden G. A. Smith-Magenis syndrome deletion: a case with equivocal cytogenetic findings resolved by fluorescence in situ hybridization // Am. J. Med. Genet. 1995. - V.l 1. - P.286-291.

81. Kajii Т., Ohama K. Androgenetic origin of hydatidiform mole // Nature. 1977. - V.268. - P.633-634.

82. Kalscheuer V.M., Mariman E.C., Schepens M.T., Rehber H. The insulin-like grow factor type-2 receptor gene is imprinted in the mouse but not in human // Nat. Genet. 1993. - V.5. - P.74-78.

83. Kishino Т., Lalande M., Wagstaff J. UBE3A/E6-AP mutations cause Angelman syndrome // Nat. Genet. 1997. - V. 15. - P.70-73.

84. Knoll J.H., Wagstaff J., Lalande M. Cytogenetic and molecular studies in the Prader-Willi and Angelman syndromes: an overview // Am. J. Med. Genet.- 1993.-V.46.-P.2-6.

85. Kokkonen H. Genetic changes of chromosome region 15qll-ql3 in Prader-Willi and Angelman syndromes in Finland // http://herkules.oulu.fi/ isbn9514270274.

86. Korenstein A., Ravia Y., Avivi Y. Uniparental disomy of chromosome 16 in offspring of familial mediterranean (FMF) patients treater with colchicin // Am. J. Hum. Genet. Suppl. 1994. - V.55. - P.616-618.

87. Kotzot D. Abnormal phenotypes in uniparental disomy (UPD): fundamental aspects and a critical review with bibliography of UPD other than 15 // Am. J. Med. Genet. 1999. - V.82. - P.265-274.

88. Krawczak M., Cooper D.N. The human gene mutation database // Trends. Genet. 1997.-V.13. - P.121-122.

89. Kubota Т., Das S., Christian S.L., Baylin S.B., Herman J.G., Ledbetter D.H. Methylation-specific PCR simplifies imprinting analysis // Nat. Genet. 1997. - V.6. - P.16-17.

90. Kuslich C.D., Kobori J.A., Mohapatra G. Prader-Willi syndrome is caused by disraption of the SNRPN gene // Am. J. Hum. Genet. 1999. - V.64. -P.70-76.

91. Laan L.A., Halley D.J., Boer A.Th., Hennekam R.C. Angelman syndrome without detectable chromosome 15qll-ql3 anomaly: clinical study of familial and is plated cases // A. J. Med. Genet. 1998. - V.76. - P.262-268.

92. Latham K.E., Rambhatla L., Hayachizaki Y., Chapman V.M. Stage-specific induction and regulation by gemomic impfinting of the mouse U2afbp-rs gene during pteimplantation development // Dev. Biol. 1995. - V.168. - P.670-676.

93. Lee S., Wevrick R. Identification of novel imprinted transcripts in the Prader-Willi syndrome and Angelman syndrome deletion region: further evidence for regional imprinting control //Am. J. Hum. Genet. 2000. - V.66. - P.848-858.

94. Ledbetter D.H., Engel E. Uniparental disomy in humans: development of an imprinting map and its implications for prenatal diagnosis // Hum. Mol. Genet. 1995. - V.4. - P.1757-1764.

95. Li E. Chromatin modification and epigenetic reprogramming in mammalian development // Nat. Rev. Genet. 2002. - V.3. - P.662-673.

96. Marquis E., Robert J. J., Benezech C., Junien C., Diatloff-Zito C. Variable features of transient neonatal diabetes mellitus with paternal isodisomy of chromosome 6 // Europ. J. Hum. Genet. 2000. - V.8. - P. 137-140.

97. Martin R.H., Ко E., Rademaker A. Distribution of aneuploidy in human gametes: comparison between human sperm and oocytes // Am. J. Hum. Genet.- 1991.-V.39.-P.321-331.

98. Martin R.A., Sabol D.W., Rogan P.K. Maternal uniparental disomy of chromosome 14 confined to an interstitial segment (14q23-14q24.2) // J. Med. Genet. 1999. - V.36. - P.633-636.

99. Matsuura Т., Sutcliffe J.S., Fang P., Galjaard R.J., Jiang Y.H., Benton C.S., Rommens J.M., Beaudet A.L. De novo truncating mutations in E6-AP ubiquitin-protein ligase gene (UBE3A) in Angelman syndrome // Nat. Genet. 1997. V.15. - P.74-77.

100. McDonald H.R., Wevrick R. The necdin gene is deleted in Prader-Willi syndrome and is imprinted in human and mouse // Hum. Mol. Genet. 1997. - V.6. - P. 1873-1878.

101. McEndagart M.E., Web Т., Hardy C. Familial Prader-Willi syndrome: case report and a literature review // Clin. Genet. 2000. - V.58. -P.216-223.

102. McFadden D.E., Kwong L.C., Yam I.Y., Langlois S. Parental origin of triploidy in human fetuses: evidence for genomic imprinting // Hum. Genet. -1993. — V.92. — P.465-469.

103. McGrath J., Solter D. Completion of mouse embryogenesis requires both the maternal and paternal genomes // Cell. 1984. - V.37. - P. 179-183.

104. Moncla A., Malzac P., Voelcker M., Auguier P. Phenotype-genotype correlation in 20 deletion and 20 non-deletion Angelman syndrome patients // Eur. J. Hum. Genet. 1999. - V.7. - P.131-139.

105. Mowery-Rushton P.A., Hancchett J.M., Zipf W.B., Rogan P.K., Surti U. Identification of mosaicism of Prader-Willi syndrome using Fluirescent In Situ Hybridization // Am. J. Med. Genet. 1996. - V.66. - P.403-412.

106. Munier F., Spense M.A., Pescia G., Balmer A. Paternal selection favoring mutant alleles of the retinoblastoma susceptibility gene // Hum. Genet. -V.89.-P.508-512.

107. Murphy S.K., Jirtle R.L. Imprinted genes as potential genetic and epigenetic toxicologic targets // Environ. Health Perspect. 2000. - V.108. - V.l. -P.5-11.

108. Mutirangura A., Kuwano A., Ledbetter Dinucleotide repeat polymorphism at the D15S11 locus in the Angelman/Prader-Willi region (AS/PWS) of chromosome 15 // Hum. Mol. Genet. 1992. - V.l. - P. 139.

109. Nagai Т., Matsuo N., Kayanuma Y., Tonoki H., Fukushima Y., Ohashi H., Murai Т., Hasegawa Т., Kuroki Y., Niikawa N. Standard growth curves for Japanese patients with Prader-Willi syndrome // Am. J. Med. Genet. 2000. -V.95. — P.130-134.

110. Nazarenko S.A., Nikitina T.V. Seach for uniparental disomy in spontaneous abortions from Russian population of West Sibiria // Cytogenet. Cell Genet. 1999. - V.85. - P.158.

111. Ngo K.Y., Lee J., Liu D. Paternal uniparental disomy in a hydrops fetalis alfatalassemia fetus // Am. J. Hum. Genet. Supplement 1993. — V.53. -P.1207.

112. Nicholls R.D., Ohta Т., Gray ТА. Genetic abnormalities in Prader-Willi syndrome and lessons from mouse models // Acta Paediatr. 1999. —V.88. -P.99-104.

113. Nicholls R.D. Mosaicism for deletion 15qll-ql3 // Cytogenet. Cell Genet. 2000. - V.90. - P. 154-155.

114. Nicholls R.D., Knepper J.L. Genome organization, function, and imprinting in Prader-Willi and Angelman syndromes // Annu. Rev. Genomics. Hum. Genet. 2001. - V.2. - P.153-175.

115. Ohta Т., Saiton S., Buiting K., Gabriel J. M., Schwartz S., Cassidy S. B. Imprinting mutation in Prader-Willi (and Angelman) syndrome exemplify a new genetic mehanism // Am. J. of Med. Genet. 1997. - V. 73. - P.394-398.

116. Ozcelik Т., Leff S., Robinson W., Donlon Т., Lalande M., Sanjines E., Schinzel A., Francke U. Small nuclear ribonucleoprotein polypeptide N (SNRPN) an expressed gene in the Prader-Willi syndrome critical region // Nature Genet. -1992.-V.2.- P.265-269.

117. Paulsen M., Ferguson-Smith A.C. DNA methylation in genomic imprinting, development, and disease // J. Pathol. 2001. - V.195. - P.97-110.

118. Patterson M. Spermatogenesis. Give me a break // Nat. Rev. Genet. -2000. — V.2. P.89.

119. Pentao L., Lewis R.A., Ledbetter D.H., Patel P.I., Lupski J.R. Maternal uniparental isodisomy of chromosome 14: association with autosomal recessive rod monochromacy // Am. J. Hum. Genet. 1992. — V.50. — N.4. — P.690-699.

120. Perk J. Makedonski K., Lande L. The imprinting mechanism of the Prader-Willi/Angelman region // EMBO J. 2002. - V.21. - P.5807-5814.

121. Planchart A., You Y., Schimenti J.C. Physical mapping of male fertility and meiotic drive quantitative trait loci in the mouse t complex using chromosome deficiencies // Genetics 2000. - V. 155. - P.803-812.

122. Preece M., Moore G.E. Genomic imprinting, uniparental disomy and foetal Grow // ТЕМ 2000. - V. 11. - N.7. - P.270-275.

123. Prows C.A., Hopkin R.J. Prader Willi and Angelman syndromes: exemplars of genomic imprinting // J. Perinat. Neonatal. Nurs. — 1999. — V.13. -P.76-89.

124. Quan F., Janas J., Toth-Fejel S., Johnson D.B., Wolford, J.K., Popovich B.W. Uniparental disomy of the entire X chromosome in a female with Duchenne muscular dystrophy // Am. J. Hum. Genet. 1997. - V. 60. - P.160-165.

125. Reik W., Walter J. Imprinting mechanisms in mammals // Curr. Opin. Genet. 1998.- V.8.-P.154-164.

126. Reik W., Walter J. Genomic imprinting: parental influence on the genome // Nat. Rev. Genet. 2001. V.2. -P.21-32.

127. Rio M., Ozilou C., Cormier-Daire V., Turleau C., Prieur M., Vekemans M., Chauveau P., Munnich A., Colleaux L. Partial maternal heterodisomy of chromosome 17q25 in a case of severe mental retardation // Hum. Genet. 2001. - V. 108. - N.6. - P.511 -515.

128. Robinson W.P., Bernasconi F., Basaran S. et al. A somatic origin of homologous Robertsonian translocation and isochromosomes // Am. J. Hum. Genet. 1994. - V.54. - P.290-302.

129. Robinson W.P., Langlois S., Schuffenhauer S., Horsthemke B. Cytogenetic and age-dependent risk factors associated with uniparental disomy 15 // PrenatDiagn. 1996. - V.16. - P.837-844.

130. Robinson W.P., Christian B.D., Kuchinka B.D. Somatic segregation errors predominantly contribute to the gain or loss of a paternal chromosomeleading to uniparental disomy for chromosome 15 // Clin. Genet. 2000. — V.57. — P.349-358.

131. Rogan P.K., Sabol D.W., Punnet H.H. Maternal uniparental disomy of chromosome 21 in normal chald // Am. J. Med. Genet. 1999. - V.83. - P.69-71.

132. Roof E., Stone W., MacLean W., Thompsone Т., Butler M.G. Intellectual characteristics of Prader-Willi syndrome: comparison of genetic subtypes //J. Intellectual. Disability Reseach. 2000. - V.44. - P.25-30.

133. Rooney D.E., Czepulkowski B.H. Human cytogenetics. A practical approach. New York.: Oxford University Press, 1992.- V.l.- P.157-192.

134. Rountree M.R., Bachman K.E., Baylin S.B. DNMT1 binds HDAC2 and a new co-repressor, DMAP1, to form a complex at replication loci // Nat. Genet. 2000. — V.25.-P.269-277.

135. Rubinsztein D.C., Leggo J. Non-Mendelian transmission at the Machado-Joseph disease locus in normal females: preferential transmission of alleles with smaller CAG repeats // J. Med. Genet. 1997. - V.34. -N.3. - P.234-236.

136. Runte M., Farber C., Lich C., Zeschnigk, Buchholz Т., Smith A., Comprehensive methilation analysis in typycal and atypical PWS and AS patients with normal biparental chromosome 15 // Eur. J. Hum. Genet. — 2001. -V.9. -P.519-526.

137. Russo D., Cogliati F., Viri M., Cavalleri F., Selicorni A. Novel mutationsof ubiquitin protein ligase ЗА gene in Italian patients with Angelman syndrome // Hum. Mutat. 2000. - V. 15. - P.387.

138. Salafsky I.S., MacGregor S.N., Claussen U., von Eggeling F. Maternal UPD 20 in an infant from a pregnancy with mosaic trisomy 20 // Prenat. Diagn.- 2001. — V.21. — P.860-863.

139. Santos Т., Schweizer J., Rees C.A., Francke U. Small evolutionarily conserved RNA, resembling C/D box small nucleolar RNA, is transcribed from

140. PWCR1, a novel imprinted gene in the Prader-Willi deletion region, which ishighly expressed in brain // Am. J. Hum. Genet. 2000. - V.67. -P. 1067-1082.

141. Schaid D.J., McDonnell S.K., Blute M.L., Thibodeau S.N. Evidence for autosomal dominant inheritance of prostate cancer // Am. J. Hum. Genet. —2000. V.62. - P.1425-1438.

142. Seabright M. A rapid banding technique for human chromosome // Lancet.-1971. V.2. - P.971-972.

143. Shafer L.G., Agan P.N., Goldberg J.d. American college of medical genetics statement on diagnostic testing for uniparental disomy // Genet. In Med.2001. V.3. —P.216-211.

144. Simon I., Tenzen Т., Reubinoff B.E., Hillman D., McCarrey J.R., Cedar H. Asynchronous replication of imprinted genes is established in the gametes and maintained during development // Nature 1999. — V.401. - P.929--932.

145. Silva F., Gusmao L., Amorim A. Segregation analysis of tetra- and pentnucleotide short tandem repeat polymorphisms: deliation from mendelian expectations // Electrophoresis - 1999. - V.20. - P. 1697-1701.

146. Shaffer L.G., McCaskill C., Adkins K., Hassold T.J. Systematic search for uniparental disomy in early fetal losses: the results and a review of the literature // Am. J. Med. Genet. 1998. - V.79. - P.366-372.

147. Shaw S.H., Kelly M., Smith A.B. A genome-wide seach for schizophrenia susceptibility genes // Am. J. Med. Genet. 1998. - V.81. - P.364-376.

148. Slatter R.T., Elliott M., Welham K., Carrera M. Mosaic uniparental disomy in Beckwith-Wiedemann syndrome // J. Med. Genet. 1994. - V.31. -P.749-753.

149. Smith A. The diagnosis of Prader-Willi syndrome // J. Pediatr. Chald Health 1999. - V.35. - P.335-337.

150. Smish M.J., Creasy M.R., Ckarce A. Sex ratio and absence of uniparental disomy in spontsneous abortion with a normal kariotype // Clin. Genet. 1998. - V.53. - P.258-261.

151. Spence J.E., Perciaccante R.G., Greig G.M., Willard H.F., Ledbetter

152. D.H., Hejtmancik J.F., Pollack M.S. O'Brien W.E., Beaudet A.L. Uniparental disomy as a mechanism for human genetic disease // Am. J. Hum. Genet. — 1988. -V.42.-P.217-226.

153. Sprritz R.A., Nocholls R.D., Lee S.T. Hypopigmentation in the Prader-Willi syndrome correlates with P gene deletion but not with haplotype of the hemizygoues P allele // Am. J. Med. Genet. 1997. - V.71. - P.57-62.

154. Stratakis C, Taymans SE, Schteingart D, Haddad BR. Segmental uniparental isodisomy (UPD) for 2pl6 without clinical symptoms: implications for UPD and other genetic studies of chromosome 2 // J. Med. Genet. — 2001. — V.38. -P. 106-109.

155. Streisinger G., Okada J., Emrich J., Newton Т., Tsugita A., Terzaghi

156. E., Inouy M. Frameshift mutation and the genetic code. Cold Spring. Harpor. Symp. Quant. Biol. - 1966. - V.31. - P.77-84.

157. Sulisalo Т., Makitie O., Sistonen P., Ridanpaa M., Rifai W., Ruuskanen O., de la Chapelle A., Kaitila I. Uniparental disomy in cartilage-hair hypoplasia // Eur. J. Hum. Genet. 1997. - V.5. - N. 1. - P.35-42.

158. Surez B.K., Jennifer L., Burmester J.K. A genome screen of multiplex sibships with prostate canser // Am. J. Genet. 2000. - V.66. - P.933-944.

159. Surani A. Imprinting and the initiation of gene silencing in the germ line // Cell. 1998. - V.93. - P.309-312.

160. Sutcliffe J.S., Nakao M., Christian S., Orstavik K.H., Tommerup N., Ledbetter D.H., Beaudet A.L. Deletions of a differentially methylated CpG island at the SNRPN gene a putative imprinting control region // Nature Genet. 1994. -V.8. - P.52-58.

161. Szabo P.E., Mann J.R. Allele-specific expression and total expression levels of imprinting mechanisms // Genes Dev. 1995. - V.9. - P.3097-3108.

162. Szpecht-Potocka A., Obersztyn E., Karwacki M., Bocian E., Bal J. Molecular and clinical studies of Polish patients with Prader-Willi syndrome // Acta Genet. Med. Gemellol (Roma). 1996. - V.45. - P.273-276.

163. Szulman A.E. Syndromes of hydatiform moles. Partial vs. complete // J. Reprod. Med. 1984. - V.29. - P.788-791.

164. Tekin M., Jackson-Cook C., Buller A., Ferreira-Gonzalez A., Pandya A., Garrett C.T., Bodurtha J. Fluorescence in situ hybridization detectable mosaicism for Angelman syndrome with biparental methylation // Am. J. Med. Genet. 2000. - V.95. - P.145-149.

165. Temple I.K., Gardner R.J., Robinson D.O. Further evidence for an imprinted gene for neonatal diabetes localised to chromosome 6q22-q23 // Hum. Mol. Genet. 1996. - V.5. - P.l 117-1121.

166. Tiranti V., Lamantea E., Uziel G. Et al. Leigh syndrome transmitted by uniparental disomy of chromosome 9 // J. Med. Genet. 1999. - V.36. - P.927-928.

167. Tomkins D.J., Roux A.F., Waye J., Freeman V.C., Cox D.W., Whelan D.T. Maternal uniparental isodisomy of human chromosome 14 associated with a paternal t(13ql4q) and precocious puberty // Eur. J. Hum. Genet. 1996. - P.153-159.

168. Tompson S.W., Ruiz-Perez V.L., Wright M.J., Goodship J.A. Syndrome resulting from segmental uniparental disomy of chromosome 4 // J. Med. Genet. 2001. - V.38. - P.l-2.

169. Vidaud M., Lavergne J.M. Prenatal diagnosis of hemophilia A and В // Rev. Prat. 1989. - V.39. - P.2689-2696.

170. Welch T.R., Beischel L.S., Choi E., Balakrishnan K., Bishof N.A. Uniparental isodisomy 6 associated with deficiency of the fourth component of complement // J. Clin. Invest. 1990. - V.86. - P.675-678.

171. Wevrick R., Francke U. Diagnostic test for the Prader-Willi syndrome by SNRPN expression in blood // Lancet 1996. - V.348. - P. 1068-1069.

172. Wirth J., Back E., Huttenhofer A., Nothwang H.G., Lich С. A translocation breakpoint cluster disrupts the newly defined 3end of the SNURF

173. SNRPN transcription unit on chromosome 15 // Hum. Mol. Genet. 2001. - V.10. -P.201-210.

174. Woodage Т., Prasad M., Dixon J.W., Selby R.E., Romain D.R., Columbano-Green L.M., Graham D., Rogan P.K., Seip J.R., Smith A. Bloom syndrome and maternal uniparental disomy for chromosome 15 // Am. J. Hum. Genet. 1994. - V.55. - P.74-80.