Моделирование молекулярных и клеточных механизмов регуляции тканевого гомеостаза кожи при сепсисе в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Маланичев Михаил Юрьевич

• Маланичев Михаил Юрьевич
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Маланичев Михаил Юрьевич

стр

РАЗДЕЛ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Морфологические и гистологические особенности 15 кожи человека

1.2. Моделирование сепсиса в эксперименте

1.3. Морфологические и иммуногистохимические аспекты влияния цитокинов в коже при генерализованном воспалении

1.4. Морфологический и иммуногистохимический анализ влияния макрофагов в коже при системном воспалении

1.5. Морфологические и иммуногистохимические аспекты влияния факторов роста на репаративные процессы кожи при системном воспалении

28

31

РАЗДЕЛ 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

37

2.1. Дизайн эксперимента, экспериментальная модель

38

2.2. Методы исследования

2.2.1. Протокол выполнения лигирования и пункции слепой кишки (CLP)

2.2.2 Лабораторное обоснование наличие сепсиса у экспериментальных животных (мышей)

2.2.3. Макроанатомический метод исследования

2.2.4. Морфологические методы исследования кожи

2.2.5. Иммуногистохимический метод

42

исследования

47

РАЗДЕЛ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Морфофункциональная характеристика внутренних органов после выполнения СЬР-модели

3.1.1 Общая клиническая характеристика животных после выполнения СЬР-модели

3.1.2 Морфологические изменения внутренних органов

при сепсисе

3.2. Морфологическая характеристика кожного покрова после выполнения СЬР-модели 70 3.2.1. Морфологическая характеристика кожного покрова экспериментальных животных I группы (после

70

выполнения СЬР-модели)

3.3. Морфологические и иммуногистохимические изменения кожного покрова после выполнения СЬР-модели

3.3.1. Морфологические изменения, про- и противовоспалительные процессы кожного покрова при

73

сепсисе (СЬР-модель)

3.3.2. Морфологическая, иммуногистохимическая характеристика влияния факторов роста на кожный покров при сепсисе (СЬР-модель)

РАЗДЕЛ 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

УСЛОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Моделирование молекулярных и клеточных механизмов регуляции тканевого гомеостаза кожи при сепсисе в эксперименте»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. Анализ литературы показал относительно малое количество исследований, изучающих механизмы регуляции пролиферативных компенсаторно-приспособительных и регенераторных процессов компонентов кожи при сепсисе, учитывая ее важную роль в обеспечении барьерной функции и поддержание гомеостаза.

Сепсис - это крайне опасная для жизни полиорганная дисфункция, вызванная нарушением иммунного статуса, при котором неадекватный иммунный ответ на инфекционный процесс может приводить к глубоким и необратимым повреждениям органов и тканей организма-хозяина (Fernando et al., 2018). Пусковым звеном в нарушении иммунного гомеостаза является выделение большого количества про- и противовоспалительных медиаторов, в первую очередь цитокинов и других биологически активных веществ (Venet et al., 2018).

По материалам Согласительной конференции Американского колледжа пульмонологов и Общества специалистов критической медицины (ACCP/SCCM) и Sepsis-3 (Fernando et al., 2018) в настоящее время принято выделять следующие патологические процессы: сепсис и септический шок.

Несмотря на то, что в последние годы описаны основные патоморфологические изменения при сепсисе и в значительной степени улучшились методы интенсивной терапии критических состояний, однако летальность при этом по-прежнему остается на высоком уровне - 30 - 90% (Fernando et al., 2018). Сепсис и его осложнения до сих пор являются одними из самых распространенных причин смерти в отделении реанимации и интенсивной терапии среди несердечных патологических состояний (Fernando et al., 2018).

Очевидно, что разработка новых методов в лечении и диагностики сепсиса невозможна без лабораторного экспериментального моделирования данного патологического состояния. Для моделирования сепсиса используют лабораторных животных различных видов (мыши, крысы,

хомяки, кролики, приматы и др.). Однако, их использование сопряжено с определенными недостатками. Так, практически у всех животных устойчивость к эндотоксину гораздо выше, чем у людей. Другой особенностью моделирования в лабораторных условиях является тот факт, что у животных в качестве инфекционного агента преобладает грамотрицательная флора, тогда как среди людей гораздо более распространенными считаются грамположительные микроорганизмы и грибы. В настоящее время применяется несколько основных моделей для получения искусственного сепсиса: инъекция липополисахарида (ЛПС); введение животным живых штаммов бактерий; имплантационные модели; CASP и др.

В последнее время для создания искусственного сепсиса наиболее предпочтительными считаются хирургические модели, так как именно они способны создать инфекционный очаг, способный к распространению и активации системного иммунного ответа. Эти модели обычно предполагают инвазию в асептических условиях содержимого толстого кишечника, которые массивно контаминированы патогенными микроорганизмами. Другие модели основаны на повреждении нормальных желудочно-кишечных барьеров для создания медленного воздействия смешанной популяции бактерий на организм.

В отечественной и зарубежной практике в лабораторных условиях в последние десятилетия активно внедряется модель лигирования и пункции слепой кишки (CLP-модель). Частота использования CLP-модели позволила накопить немало сведений о морфофункциональных изменениях во внутренних органах животных при сепсисе (Zhang et al., 2006).

При анализе специализированной литературы были обнаружены лишь единичные научные работы по исследованию механизмов адаптации кожного барьера при сепсисе.

Показано, что нарушение целостности лишь 15% площади кожного покрова уже достаточно для полного истощения барьерной функции кожи с

массивной потерей внеклеточной жидкости, развитием гиповолемического шока и возможного смертельного исхода (Comstedt et al., 2009). Помимо механического барьера, состоящего из плотных структур эпидермиса и дермы, кожа также является активным иммунологическим барьером за счет наличия противомикробных пептидов, низкой температуры и pH, клеток Лангерганса эпидермиса и др. (Bäsler et al., 2016).

Установлено, что минимальное повреждение кожи увеличивает риск развития инфекционного локального процесса при тяжелом сепсисе (Florin et al., 2006). Однако лишь отдельные предположения о молекулярных и клеточных механизмах прямого и опосредованного влияния сепсиса и/или его клинико-морфологических форм на эпидермис выявлены в научной литературе.

В последние годы особое внимание морфологи уделяют изучению более глубоких структур эпидермиса, которые, возможно, защищают от эндогенного действия.

Наружный и внутренний защитные барьеры эпидермиса, а также базальная мембрана предотвращают или снижают действия экзогенного фактора, благодаря наличию сложной системы взаимодействия кератиноцитов и межклеточных коммуникаций (Brandner et al., 2016).

Некоторые эндогенные или экзогенные факторы, такие как факторы роста, цитокины или бактериальные токсины могут оказывать влияние на проницаемость плотных контактов (Günzel et al., 2013).

Цитокиновое равновесие является одним из основных факторов стабильности кожного барьера, нарушение которого может приводить к дезорганизации эпидермального барьера, как это наблюдается при многих кожных заболеваниях, например, атопическом дерматите и псориазе (Guttman-Yassky et al., 2011). Так, изменение уровня TNF-a, ответственного за регенерацию, приводит к ослаблению барьерной функции (Terajima et al., 1998b), TGF-ß стимулирует миграцию эндотелиоцитов, а также ингибирует

пролиферацию кератиноцитов и замедляет реэпителизацию при заживлении ран (Mori et al., 2016).

Степень разработанности проблемы. На сегодняшний день доказано, что на пролиферативные и регенеративные процессы оказывает влияние морфофункциональное состояние компонентов кожи, их взаимодействие и иммунокомпонентные клетки.

Стоит отметить, что в настоящее время остается не ясной роль IL-10 и IL-12 в здоровой коже, однако имеются данные, в которых показана важность этих белков в патогенезе ряда воспалительных кожных заболеваний (Toichi et al., 2006; Asadullah et al., 2004).

Одну из ведущих ролей в реализации иммунной защиты компонентов кожи играют макрофаги, которые активно секретируют цитокины (TNF-a, IL-6, IL-12, IL-23) и воспалительные хемокины, выделяющиеся под действием провоспалительных интерлейкинов (IL-1), липополисахаридов и вирусов. К таким хемокинам относятся: CCL-10, CCL-11, CCL-2, CCL-3; в очаге воспаления они выполняют репрезентативную функцию для иммунных клеток (Bertani et al.; 2017; Liu et al., 2014). Специфическими маркерами М1-фенотипа макрофагов является: CD68, CD86, CD80, а М2-макрофагов -CD206 и CD163 (Murray et al., 2017).

Понимание степени и динамики поляризации макрофагов является одним из главных критериев для более точного описания и характеристики процессов в очаге воспаления.

Репарация и регенерация контролируются большим количеством цитокинов, факторов роста и дифференцировки (Tanaka et al., 2016). Среди них факторы роста фибробластов (FGF) и васкулярно-эндотелиальный фактор роста (VEGF-A), которые являются главными регуляторами как органогенеза, так и гомеостаза в дерме (Ornitz et al., 2015). Следовательно, роль FGF в репарации поврежденных тканей кажется одной из основополагающих, и действительно, многочисленные недавние исследования сообщили о роли FGF в регенерации и репарации тканей,

подчеркивая взаимодействие между FGF и другими ключевыми сигнальными молекулами (Maddaluno et al., 2017).

Взаимодействие макрофагов и фибробластов, ангиогенез оказывают потенцирующее действие на миграцию и пролиферацию клеток фибробластического ряда, приводят к миграции и дифференцировки кератиноцитов и играют ведущую роль в гистогенезе и активном фибриллогенезе.

Таким образом, увеличение числа пациентов с сепсисом, особенно с тяжелым его течением, небольшое количество научных исследований по изучению основных механизмов взаимодействия иммунокомпетентных клеток, фибробластов и кератиноцитов определяют актуальность данной темы и дают широкие возможности для дальнейших исследований.

Цель исследования - изучение молекулярных и клеточных механизмов регуляции тканевого гомеостаза кожи в эксперименте с использованием СЬР-модели полимикробного сепсиса.

Для достижения указанной цели были определены следующие задачи исследования:

1. Изучить морфологические и иммуногистохимические аспекты экспрессии цитокинов (ТОБ-а, TGF-P, ^-6, ^-10, ГЬ-12) эпидермиса при CLP-модели сепсиса.

2. Проанализировать морфологические и иммуногистохимические аспекты экспрессии макрофагальных маркеров (CD68, CD163, CD206) эпидермиса при CLP-модели сепсиса.

3. Изучить морфологические и иммуногистохимические особенности пролиферативного потенциала фибробластов (FGF-7, FGF-10) дермы при CLP-модели сепсиса.

4. Провести оценку экспрессии васкулярно-эндотелиального фактора роста (VEGF) на поверхности клеток кожи в условии CLP-модели сепсиса.

5. Изучить морфологические изменения кожного покрова при CLP-модели полимикробного сепсиса у лабораторных животных.

Научная новизна работы. В диссертационном исследовании проведен комплексный морфофункциональный анализ изменений кожи в условии СЬР-модели тяжелого полимикробного сепсиса у лабораторных животных.

Впервые при использовании гистологического и иммуногистохимического анализа получены следующие результаты:

• В коже при сепсисе увеличивается экспрессия провоспалительных

^-6, ^-12) и противовоспалительных (TGF-P, ^-10) цитокинов, которые могут нарушать гистоархитектонику эпидермиса и дермы, приводя к снижению защитных функций.

• Предложена оригинальная методика оценки цитокинового профиля, факторов роста, медиаторов регуляции тканевого гомеостаза эпидермиса и дермы с характеристикой поляризации тканевых макрофагов - клеток Лангерганса в условиях тяжелого сепсиса.

• На основании оценки интенсивности экспрессии макрофагов выявлено увеличение их фенотипов: CD68 - в 2,5 раза, CD163 - в 1,8 раза, CD206 - в 1,9 раза.

• При иммуногистохимической оценке экспрессии факторов роста фибробластов (FGF-7 и FGF-10) обнаружено увеличение пролиферативного потенциала фибробластов кожи в условии экспериментального сепсиса.

что указывает на отсутствие активного ангиогенеза, характерное для заболеваний кожи или заживления ран.

• Предложенный метод лигирования и пункции слепой кишки (CLP) для создания экспериментального сепсиса можно использовать в качестве модели изучения кожного покрова в условиях данной патологии.

Теоретическая и практическая значимость работы. Проведенное экспериментальное исследование существенно дополняет сложившиеся представления о патологических изменениях в коже при действии эндогенного фактора при сепсисе. Полученные в научной работе данные способствуют пониманию молекулярных механизмов действия цитокинов и макрофагов, а также формирования компенсаторно-приспособительных реакций, наблюдаемых в условиях сепсиса. С помощью морфологических, морфометрических и иммуногистохимических методов изучены особенности морфофункциональной реорганизации структур кожи на фоне воздействия про- и противовоспалительных факторов. Уточнены и расширены имеющиеся данные об иммунных, пролиферативных и репаративных процессах в коже при сепсисе и его закономерностях с точки зрения взаимодействия между макрофагальными и фибробластическими компонентами клеточной популяции при эндогенном воздействии в условии тяжелого системного воспаления. Количественная оценка экспрессии TNF-a, интерлейкинов, М1- и М2-макрофагов, фактора роста фибробластов (FGF) и васкулярно-эндотелиального фактора роста (VEGF-A), позволяет расширить понимание механизмов, лежащих в основе структурно-функциональных повреждений компонентов кожи в ответ на воздействие про- и противовоспалительных факторов. Подтверждена правомерность использования экспериментальной CLP-модели (лигирование и пункция слепой кишки) для изучения изменений кожи в условии сепсиса, а также состояние компенсаторно-приспособительных и регенераторных механизмов

данного органа. Результаты исследования - теоретическая база для клинического понимания развития патологических изменений в коже при сепсисе.

Установлено, что при сепсисе наблюдаются компенсаторно-адаптационные изменения компонентов кожи, приводящие к морфофункциональным изменениям. Аргументирована потребность в разработке и внедрении в хирургическую практику ранних превентивных мер по протекции и профилактики структурно-функциональных изменений кожи при сепсисе.

Методология исследования. Работа была выполнена на 40 образцах кожи экспериментальных животных (мыши линии C57BL/6; 30 - 35 г; 12 недель) в условии CLP - моделирования сепсиса, а также с использованием 10 фрагментов кожи контрольной группы животных.

Полученные фрагменты кожи фиксировали в 10% забуференном формалине (рН 7,2 - 7,4) при комнатной температуре. Затем материал заливали в парафин по стандартной методике и из него с помощью микротома изготавливали серийные срезы толщиной 2-3 мкм. Использование парафиновой заливки дало возможность сочетать количественные, морфологические и иммуногистохимические методы исследования в серийных срезах одного и того же парафинового блока (фрагмента кожи).

В настоящем экспериментальном исследовании использован комплексный подход, позволяющий оценить основные морфологические и иммуногистохимические особенности иммунных и репаративных процессов в коже при сепсисе и его закономерностях с точки зрения взаимодействия между макрофагальными и клетками фибробластического ряда на клеточном и тканевом уровнях организации, включая следующие методы исследования:

1. Гистологический метод с использованием окраски гематоксилином и эозином для общего морфологического анализа;

2. Иммуногистохимический метод исследования с использованием моно- и поликлональных антител к: TNF-a, TGF-P, IL-6, IL-10, IL-12, CD68, CD163, CD206, FGF-7, FGF-10, VEGF-A для анализа провоспалительной и противоспалительной активности иммунокомпетентных клеток, а также пролиферации и дифференцировки клеток фибробластического ряда;

3. Статистические методы.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Лигирование и пункцию слепой кишки (CLP - модель) можно использовать в качестве адекватной модели сепсиса на мышах линии C57BL/6 для изучения морфофункциональных изменений кожного покрова.

2. В коже в условии экспериментального сепсиса у животных происходит смещение цитокинового равновесия в сторону провоспалительных медиаторов (TNF-a, IL-6, IL-12) с последующей миграцией, дифференцировкой и поляризацией моноцитов в сторону М1 -макрофагов и увеличением их количества в сосочковом слое дермы и эпидермиса, что приводит к усилению воспалительной реакции.

3. При сепсисе в эксперименте в коже происходит активация тканевой ремодулирующей системы за счет увеличение пролиферативного потенциала клеток фибробластического ряда (FGF-7+ и FGF-10+) и М2-макрофагов на фоне снижение экспрессии VEGF в этих клетках, что приводит к повышению сосудистой проницаемости.

Личный вклад автора. Автору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования, постановки цели и задач, в их клинико-морфологической реализации. Выполненные исследование, анализ и интерпретация, полученных данных экспериментальной научной работы проведены автором самостоятельно на базах кафедры гистологии Медицинской академии им. С. И. Георгиевского (директор - д.м.н., профессор Е.С. Крутиков) и Клиники пластической хирургии и

косметологии «Фрау Клиник» (директор центра - д.м.н., профессор С.Н. Блохин). Автором была выполнена процедура лигирования и пункции слепой кишки для моделирования сепсиса у лабораторных животных, освоены и применены методы гистологического, иммуногистохимического и компьютерного анализа; математическая обработка полученных данных; выбор и описание иллюстративного материала, написание выводов и практических рекомендаций. Вклад автора является определяющим в обсуждении результатов исследования в научных публикациях и их внедрения в практику. Автором установлены определённые патоморфологические механизмы влияния про- и противовоспалительных факторов на кожу в условии экспериментального сепсиса, а также иммунофенотипические признаки интраорганной регуляции в норме.

Степень достоверности и апробация работы. Проведенный анализ литературных данных позволяет в достаточной мере оценить и обосновать актуальность выбранной темы научного исследования и степень ее изученности. Этапы исследования, используемый материал и выбранные методы исследования соответствуют поставленной цели и задачам. Измерения осуществляли на базе центральной научно-исследовательской лаборатории Медицинской академии им. С. И. Георгиевского.

оличественные показатели, полученные в рамках комплексного морфологического исследования, обрабатывали параметрическими и непараметрическими методами статистического анализа, обеспечивающими достаточную степень достоверности представленных данных.

Основные результаты исследования докладывались на: Студенческой научно-практической конференции с международным участием «Путь в науку» (г. Москва, 2020 г.); Межвузовском научном конгрессе «Высшая школа: научные исследования» (г. Москва, 2020 г.); International University

Science Forum "Science. Education. Practice" (г. Торонто, Канада, 2020 г.); Semmelweis International Students' Conference (г. Будапешт, Венгрия, 2021).

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, собственных результатов, обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 135 источника отечественных (33) и зарубежных (102) авторов. Материалы диссертации изложены на 119 страницах машинописного текста и иллюстрированы 42 микрофотографиями, 2 графиками, 6 таблицами.

Внедрение результатов диссертации в практику. Результаты исследования используются в диагностике местных и системных воспалительных изменений кожного покрова в подразделениях холдинга «Клиники пластической хирургии и косметологии «Фрау Клиник» и Центре доклинических исследований Института трансляционной медицины и биотехнологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), при чтении лекций и проведении практических занятий на кафедре гистологии и эмбриологии Медицинской академии имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В.И. Вернадского» Минобрнауки России.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности.

Диссертация соответствует паспорту научной специальности 03.03.04. -леточная биология, цитология, гистология, а также области исследования согласно пунктам 6 и 7.

РАЗДЕЛ 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Морфологические и гистологические особенности кожи человека

ожный покров составляет до 2 м2 площади взрослого человека и состоит из эпидермиса, дермы и гиподермы, толщина которой различается и зависит от локализации в организме.

ожный покров является одним из основных защитных барьеров организма, который предотвращает отрицательные эффекты микроорганизмов снаружи или же защищает от излишней потери воды. Таким образом, в коже существует два различных механизма защиты, направленных против внутренних и внешних воздействий. В основном, защитная функция в коже реализуется за счет наличия рогового слоя эпидермиса (Marks, 2004), плотных контактов эпителиальных клеток (Basler et al., 2016) и базальной мембраны (Герке А.Н., 2014).

Одна из важнейших функций многослойного плоского ороговевающего эпителия (эпидермиса) - это поддержание пролиферативно-апоптотического баланса и обеспечение дифференцировки кератиноцитов кожи (Демяшкин Г.А. и др., 2020). В зависимости от толщины эпидермиса принято выделять толстую и тонкую кожу. В эпидермисе толстой кожи различают базальный, шиповатый, зернистый, блестящий и роговой слои.

Роговой слой кожи по большей части состоит из корнеоцитов, которые представляют собой высокодифференцированные кератиноциты (Murphrey et al., 2020), и межклеточных липидов. Корнеоциты наслаиваются друг на друга, скрепляясь фосфолипидами, которые продуцируют кератиноциты зернистого слоя. Тем самым образуется единый защитный барьер, состоящий из плотно сшитых белков, таких как: филагрин, лорикрин и инволюкрин. Единственным возможным путём для диффузии сквозь кожный барьер остаётся межклеточный липидный матрикс. Роговой барьер

является самым верхним слоем эпидермиса и долгое время считалось, что только он осуществляет защитную функцию кожи (Эрнандес Е. и др., 2005)

В последние годы особое внимание морфологи уделяют изучению более глубоких барьеров эпидермиса, которые, возможно, защищают от эндогенного действия.

Один из таких барьеров эпидермиса образован плотными контактами эпителлиоцитов, который предотвращает проникновение практически любого содержимого между слоями эпидермиса (Brandner et al., 2016). При этом локализация и количество белков межклеточных коммуникаций в настоящий момент плохо изучена и является объектом дальнейших изучений. Так, клаудин-1 обнаруживается во всех слоях эпидермиса, кроме рогового, окклюдин ограничивается только зернистым слоем, а ZO-1 (zonula occludens - 1, белок плотных контактов - 1, TJP1) присутствует в шиповатом и зернистом слоях (Brandner et al., 2009). Проницаемость плотных контактов может варьировать в зависимости от молекулярно-биологического состава, типа клеток, степени дифференцировки, влияния определенных физиологических и патологических сигналов (Юдинцена Н.Н. и др., 2008). Некоторые эндогенные или экзогенные факторы, такие как факторы роста, цитокины или бактериальные токсины могут оказывать влияние на проницаемость плотных контактов (Günzel et al., 2013).

В эпидермисе помимо кератиноцитов присутствуют клетки Лангерганса, лимфоциты, меланоциты и клетки Меркеля.

Базальная мембрана является не менее важным компонентом защитного кожного барьера. Базальная мембрана находится между дермой и эпидермисом и разграничивает эти два слоя. Базальная мембрана состоит из светлой (наружной) пластинки, образованной белками, и темной (внутренней) пластинки, образованной протеогликаном и коллагеновыми волокнами. Она определяет полярность эпидермиса, предотвращает миграцию биологических веществ из эпидермиса в дерму и обратно. роме того, базальная мембрана участвует в регуляции дифференцировки

эпидермальных кератиноцитов, которая осуществляется путём паракринной стимуляции или за счет взаимодействия кератиноцитов с белками базальной мембраны (Гомберг М.А. и др., 2012; Werner et al., 2007).

Дерма состоит из сосочкового и сетчатого слоя, которые образованы волокнистой соединительной тканью - рыхлой и плотной соответственно. На всем протяжении здесь в различных долях содержатся иммунокомпетентные клетки и клетки фибробластического ряда, множество кровеносных сосудов. Межклеточное вещество дермы представлено аморфным и волокнистом компонентами, соотношение которых диаметрально отличается в ее слоях.

1.2. Моделирование сепсиса в эксперименте

По современным представлениям, сепсис - это крайне опасная для жизни полиорганная дисфункция, вызванная нарушением иммунного статуса, при котором неадекватный иммунный ответ на инфекционный процесс повреждает органы и ткани организма-хозяина (Fernando et al., 2018). Пусковым звеном в нарушении иммунного гомеостаза является выделение большого количества про- и противовоспалительных медиаторов, в первую очередь цитокинов и других биологически активных веществ (Venet et al., 2018).

Для понимания и дальнейшего изучения сепсиса необходимо дать определение некоторым терминам, которые будут использоваться в данном исследовании. В настоящее время, несмотря на большое количество научных работ, посвященных изучению сепсиса, имеются некоторые расхождения в понимании септического состояния. По материалам Sepsis-3 (Fernando et al., 2018) и Согласительной конференции Американского колледжа пульмонологов и Общества специалистов критической медицины (ACCP/SCCM) принято выделять следующие патологические процессы: сепсис и септический шок. По данным представлениям сепсис является жизнеугрожающей дисфункцией органов, вызванной нарушением иммунного ответа при встрече организма с инфекцией. Септический шок является

разновидностью сепсиса, при котором сердечно-сосудистые и клеточно-метаболические нарушения являются достаточно серьёзными для существенного увеличения смертности.

Стоит отметить, что разработка новых методов в лечении и диагностики сепсиса невозможно без лабораторного моделирования. Для моделирования сепсиса используют различных лабораторных животных. Однако их использование иногда сопряжено с определенными недостатками. Так, практически у всех животных устойчивость к эндотоксину гораздо выше, чем у людей, имеется стабильный гемодинамический профиль и довольно ограниченный объём крови по сравнению с человеком. Другой особенностью лабораторного моделирования является тот факт, что у животных в качестве инфекционного агента преобладает грамотрицательная флора, тогда как среди людей гораздо более распространенным считаются грамположительные организмы и грибы. Это не позволяет отразить в экспериментальном исследование разнообразие инфекционных агентов, мест инфицирования и путей развития инфекции, с которыми приходится сталкиваться в клинической практике (Poli-de-Figueiredo et al., 2008).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Маланичев Михаил Юрьевич, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1991

- 380 с.

2. Белова О.В., Арион В.Я., Сергиенко В.И., 2008. Роль цитокинов в иммунологической функции кожи. Иммунопатология, аллергол, инфектол. 2008; 1:41-55

3. Боровая Т.Г., Жуховицкий В.Г., Андреевская С.Г., Черкасова М.Н., 2017. Гистологические изменения печени и почек при экспериментальном сепсисе в аспекте специфики строения их микроциркуляторного русла. Патогенез 15(4):32-37.

https://doi.org/10.25557/GM.2018.4.9746

4. Боташев А.А., Терещенко О.А., Сергиенко В.И., Петросян Э., 2013. Современные взгляды на патогенетическую взаимосвязь между системным воспалением и иммунной системой при желчном перитоните, осложненном абдоминальным сепсисом. Иммунология 34(3):164-167.

5. Герке А.Н., 2014. Кожный барьер и его дисфункция при болезнях кожи. VetPharma 22 (6).

6. Гланц С. «Медико-биологическая статистика», 1998. 459 с.

7. Гомберг М.А., Брагина Е.Е., Гетлинг З.М., Стовбун С.В., 2012. Зона дермо-эпидермального контакта кожи человека в разные возрастные периоды. Клиническая дерматология и венерология 10: 18-23.

8. Гублер Е.В., Генкин А.А. «Применение непараметрических методов статистики в медико-биологических исследованиях», 1973. 144 с.

9. Демяшкин Г., Шаповалова Е., Погосян Д., Батов М., Зорин И., Щекин В., 2020. Молекулярно-биологическая характеристика промежуточных филаментов кератиноцитов интактной кожи в условии системного воспаления. Патологическая физиология и экспериментальная терапия 64(3):34-39.

10. Знаменская Л.Ф., Егорова Ю.Ю., Зитнер С.В., 2011. Механизм реализации биологического действия фактора некроза опухоли-альфа при

псориазе. Вестник дерматологии и венерологии 87:13-17. https://doi.org/10.25208/vdv974

11. Кобзарь А.И. «Прикладная математическая статистика: для инженеров и научных работников», 2012. 820 с.

12. Коржевский Д.Э., Морфологическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии.// Руководство под редакцией Д.Э. Коржевского. С-Пб; СпецЛит., 2013. 218 с.

13. Коржевский Д.Э., Теоретические основы и практические применения методов иммуногистохимии.// Руководство под редакцией Д.Э. Коржевского. С-Пб; СпецЛит., 2012. 110 с.

14. Корнеев К.В., 2019. Мышиные модели сепсиса и септического шока. Молекулярная биология. https://doi.org/10.1134/S0026898419050100

15. Кубатиев A.A., Боровая Т.Г., Жуховицкий В.Г., Черкасова М.Н., Андреевская С.Г., Шевлягина Н.В., 2018. Современные аспекты физиологии эндотелиального барьера и его нарушений при сепсисе. Патогенез 16:5-13. https://doi.org/10.25557/2310-0435.2018.03.5-13

16. Лазанович В.А., Степанюк В.Н., Смирнов Г.А., Маркелова Е.В., Костюшко А.В., 2012. Биомаркеры воспаления в прогнозе исхода абдоминального сепсиса. Фундаментальные исследования 4 (2):311-315.

17. Лямина С.В., Малышев И.Ю., 2014. Поляризация макрофагов в современной концепции формирования иммунного ответа. Фундаментальные исследования. - 2014. - № 10 (часть 5) - С. 930-935.

18. Маркина А.А., 2012. Комплексное экспериментальное моделирование шоковых состояний. Иммунология 33(5):250-254.

19. Михайличенко, В.Ю., 2010. Роль Vegf в ангиогенезе при норме и патологии. Новообразование. 1(5): 174-181.

20. Нечай В.В., Харибова Е.А., 2006. Методика гистологического исследования кожи. Современные проблемы науки и образования. - 2006. -№ 2 - С. 72-73.

21. Обернихин C.C., Яглова Н.В., 2014. Структурно-функциональные изменения органов иммунной системы при развитии системного воспалительного ответа у потомства самок мышей, перенесших стимулирующее воздействие на иммунную систему в ранние сроки беременности. Иммунология 35(1):9-14.

22. Продеус А.П., Устинова М.В., Корсунский А.А., Гончаров А.Г., 2018. Новые аспекты патогенеза сепсиса и септического шока у детей. Система комплемента как мишень для эффективной терапии. Инфекция и иммунитет. 8(1):19-24. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-1-19-24

23. Семченко В.В., Барашкова С.А., Ноздрин В.И. Гистологическая техника. Омск, 2006. 289 с.

24. Соболев В.В., Стародубцева Н.Л., Соболева А.Г., Рахимова О.Ю., Корсунская И.М., Пирузян Э.С., Миннибаев М.Т., Кривощапов Л.Г., Брускин С.А., Воронько О.Е, 2010. Роль интерлейкинов в патогенезе псориаза. Современные проблемы дерматовенерологии, иммунологии и врачебной косметологии 12 (5), 79-84.

25. Стрелков Р.Б., 1980 «Статистические таблицы для экспресс-обработки экспериментального и клинического материала: методические рекомендации». 46 с.

26. Франциянц Е.М., Комарова Е.Ф., Бандовкина В.А., Позднякова В.В., Черярина Н.Д., 2015. Сравнительная оценка экспрессии факторов роста в пигментных новообразованиях кожи. Молекулярная Медицина - №1, 14-16.

27. Шаповалова Е. Ю., Демяшкин Г. А., Бойко Т. А., Барановский Ю. Г., Морозова М. Н., Барановский А. Г., Агеева Е. С., 2019a. Влияние ауто- и ксеногенных фибробластов и дермального эквивалента на содержание макрофагов в грануляционной ткани ишемизированной раны кожи на 12 сутки регенеративного гистогенеза. Медицинский вестник Северного Кавказа; 14(1.2):255-260. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2019.14028

28. Шаповалова Е.Ю., Бойко Т.А., Барановский Ю.Г., Лугин И.А., Купша Е.И., 2019b. Ультраструктурная характеристика компонентов

регенерационного гистиона на 12 сутки после трансплантации дермального эквивалента в ишемизированную рану кожи. Вестник новых медицинских технологий; 26(3) - стр. 75-80

29. Шаповалова Е.Ю., Бойко Т.А., Барановский Ю.Г., Морозова М.Н., Барановский А.Г., 2019c. Макрофаги и морфологическая характеристика репарации ишемизированного кожного дефекта через 19 суток после трансплантации ксеногенных фибробластов. Морфология. 155(2):323.

30. Шаповалова Е.Ю., Бойко Т.А., Барановский Ю.Г., Морозова М.Н., Барсуков Н.П., Барановский А.Г., 2020. Влияние фибробластов в сочетании с коллагеновой губкой на морфоз ишемизированной раны кожи на II стадии раневого процесса. Морфология. 157(2):242.

31. Эрнандес Е., Марголина А., Петрухина А., 2005. Липидный барьер кожи и косметические средства. осметика и медицина, 397 с.

32. Юдинцена Н.М., Блинова М.И., Пинаев Г.П., 2008. Особенности организации цитоскелета у фибробластов нормальной, рубцовой и эмбриональной кожи человека, распластанных на белках внеклеточного матрикса. Цитология 50 (10), 861-867.

33. Яглова, Н.В., Обернихин, С.С., Яглов, В.В., 2020. Изменения секреторных процессов в мастоцитах кожи крыс при развитии системного воспалительного ответа. рымский журнал экспериментальной и клинической медицины 10 (2):60-67.

34. Allavena P., Chieppa M., Bianchi G., Solinas G., Fabbri M., Laskarin G., Mantovani A., 2011. Engagement of the Mannose Receptor by Tumoral Mucins Activates an Immune Suppressive Phenotype in Human Tumor-Associated Macrophages. Clinical and Developmental Immunology 2010, e547179. https://doi.org/10.1155/2010/547179

35. Asadullah K., Sabat R., Friedrich M., Volk H.D., Sterry W., 2004. Interleukin-10: an important immunoregulatory cytokine with major impact on

psoriasis. Curr Drug Targets Inflamm Allergy 3, 185-192. https://doi.org/10.2174/1568010043343886

36. Ayala A., Song G.Y., Chung C.S., Redmond K.M., Chaudry I.H., 2000. Immune depression in polymicrobial sepsis: the role of necrotic (injured) tissue and endotoxin. Crit. Care Med. 28, 2949-2955. https://doi.org/10.1097/00003246-200008000-00044

37. Bae O.-N., Noh M., Chun Y.-J., Jeong T.C., 2015. Keratinocytic Vascular Endothelial Growth Factor as a Novel Biomarker for Pathological Skin Condition. Biomol Ther (Seoul) 23, 12-18. https://doi.org/10.4062/biomolther.2014.102

38. Ballaun C., Weninger W., Uthman A., Weich H., Tschachler E., 1995. Human keratinocytes express the three major splice forms of vascular endothelial growth factor. J. Invest. Dermatol. 104, 7-10. https://doi.org/10.1111/1523-1747.ep12613450

39. Barros M.H.M., Hauck F., Dreyer J.H., Kempkes B., Niedobitek G., 2013. Macrophage Polarisation: an Immunohistochemical Approach for Identifying M1 and M2 Macrophages. PLOS ONE 8, e80908. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0080908

40. Basile D.P., Anderson M.D., Sutton T.A., 2012. Pathophysiology of Acute Kidney Injury, in: Terjung, R. (Ed.), Comprehensive Physiology. John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, NJ, USA, p. c110041. https://doi. org/10.1002/cphy.c110041

41. Basler K., Bergmann S., Heisig M., Naegel A., Zorn-Kruppa M., Brandner, J.M., 2016. The role of tight junctions in skin barrier function and dermal absorption. Journal of Controlled Release, International Conference on Dermal Drug Delivery by Nanocarriers, Berlin 14-16 March 242, 105-118. https://doi.org/10.1016/jjconrel.2016.08.007

42. Bellon T., Martinez V., Lucendo B., del Peso G., Castro M.J., Aroeira L.S., Rodriguez-Sanz A., Ossorio M., Sanchez-Villanueva R., Selgas R., Bajo M.A., 2011. Alternative activation of macrophages in human peritoneum:

implications for peritoneal fibrosis. Nephrol Dial Transplant 26, 2995-3005. https://doi.org/10.1093/ndt/gfq771

43. Bertani F.R., Mozetic P., Fioramonti M., Iuliani M., Ribelli G., Pantano F., Santini D., Tonini G., Trombetta M., Businaro L., Selci S., Rainer A., 2017. Classification of M1/M2-polarized human macrophages by label-free hyperspectral reflectance confocal microscopy and multivariate analysis. Sci Rep 7, 8965. https://doi.org/10.1038/s41598-017-08121-8

44. Brandner J.M., 2016. Importance of Tight Junctions in Relation to Skin Barrier Function. Curr. Probl. Dermatol. 49, 27-37. https://doi.org/10.1159/000441541

45. Brandner J.M., 2009. Tight junctions and tight junction proteins in mammalian epidermis. Eur J Pharm Biopharm 72, 289-294. https://doi.org/10.1016/j.ejpb.2008.08.007

46. Broadley K.N., Aquino A.M., Woodward S.C., Buckley-Sturrock A., Sato Y., Rifkin D.B., Davidson J.M., 1989. Monospecific antibodies implicate basic fibroblast growth factor in normal wound repair. Lab. Invest. 61, 571-575.

47. Buras J.A., Holzmann B., Sitkovsky M., 2005. Animal models of sepsis: setting the stage. Nat Rev Drug Discov 4, 854-865. https://doi.org/10.1038/nrd1854

48. Cavaillon J.-M., 2018. New Approaches to Treat Sepsis: Animal Models «Do Not Work» (Review). General Reanimatology. 2018;14(3):46-53. https://doi.org/10.15360/1813-9779-2018-3-46-53.

49. Chousterman B.G., Swirski F.K., Weber G.F., 2017. Cytokine storm and sepsis disease pathogenesis. Semin Immunopathol 39, 517-528. https://doi.org/10.1007/s00281-017-0639-8

50. Clowes G.H., Zuschneid W., Turner M., Blackburn G., Rubin J., Toala P., Green G., 1968. Observations on the pathogenesis of the pneumonitis associated with severe infections in other parts of the body. Ann. Surg. 167, 630-650. https://doi.org/10.1097/00000658-196805000-00003

51. Comstedt P., Storgaard M., Lassen A.T., 2009. The Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) in acutely hospitalised medical patients: a cohort study. Scandinavian Journal of Trauma, Resuscitation and Emergency Medicine 17, 67. https://doi.org/10.1186/1757-7241-17-67

52. Coondoo A., 2012. The Role of Cytokines in The Pathomechanism of Cutaneous Disorders. Indian J Dermatol 57, 90-96. https://doi.org/10.4103/0019-5154.94272

53. Copeland S., Warren, H.S., Lowry, S.F., Calvano, S.E., Remick, D., Inflammation and the Host Response to Injury Investigators, 2005. Acute inflammatory response to endotoxin in mice and humans. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 12, 60-67. https://doi.org/10.1128/CDLI.12.1.60-67.2005

54. Dabbs D.J., 2010. Diagnostic Immunohistochemistry - 3rd Edition.

55. Das L., Levine A.D., 2008. TGF-beta inhibits IL-2 production and promotes cell cycle arrest in TCR-activated effector/memory T cells in the presence of sustained TCR signal transduction. J. Immunol. 180, 1490-1498. https://doi.org/10.4049/jimmunol.180.3.1490

56. Deitch E.A., 1998. Animal models of sepsis and shock: a review and lessons learned. Shock 9, 1-11. https://doi.org/10.1097/00024382-199801000-00001

57. Dejager L., Pinheiro I., Dejonckheere E., Libert C., 2011. Cecal ligation and puncture: the gold standard model for polymicrobial sepsis? Trends in Microbiology 19, 198-208. https://doi.org/10.1016/j.tim.2011.01.001

58. Detmar M., 2000. The role of VEGF and thrombospondins in skin angiogenesis. J. Dermatol. Sci. 24 Suppl 1, S78-84. https://doi.org/10.1016/s0923-1811(00)00145-6

59. Ebong S., Call D., Nemzek J., Bolgos G., Newcomb, D., Remick, D., 1999a. Immunopathologic alterations in murine models of sepsis of increasing severity. Infect. Immun. 67, 6603-6610.

60. Ebong S.J., Call D.R., Bolgos G., Newcomb D.E., Granger J.I., O'Reilly M., Remick D.G., 1999b. Immunopathologic responses to non-lethal sepsis. Shock 12, 118-126. https://doi.org/10.1097/00024382-199908000-00005

61. Eming S.A., Martin P., Tomic-Canic M., 2014. Wound repair and regeneration: Mechanisms, signaling, and translation. Science Translational Medicine 6, 265sr6-265sr6. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3009337

62. Ettehadi P., Greaves M.W., Wallach D., Aderka D., Camp R.D., 1994. Elevated tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) biological activity in psoriatic skin lesions. Clin. Exp. Immunol. 96, 146-151. https://doi.org/10.1111/j.1365-2249.1994.tb06244.x

63. Feig J.A., Cina S.J., 2001. Evaluation of characteristics associated with acute splenitis (septic spleen) as markers of systemic infection. Arch. Pathol. Lab. Med. 125, 888-891. https ://doi .org/10.1043/0003-9985(2001)125<0888:E0CAWA>2.0.C0;2

64. Fernando S.M., Rochwerg B., Seely A.J.E. Clinical implications of the Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). CMAJ. 2018;190(36):E1058-E1059. doi:10.1503/cmaj.170149

65. Feterowski C., Emmanuilidis K., Miethke T., Gerauer K., Rump M., Ulm K., Holzmann B., Weighardt H., 2003. Effects of functional Toll-like receptor-4 mutations on the immune response to human and experimental sepsis. Immunology 109, 426-431. https://doi.org/10.1046/j.1365-2567.2003.01674.x

66. Feterowski C., Mack M., Weighardt H., Bartsch B., Kaiser-Moore S., Holzmann B., 2004. CC chemokine receptor 2 regulates leukocyte recruitment and IL-10 production during acute polymicrobial sepsis. Eur. J. Immunol. 34, 36643673. https://doi.org/10.1002/eji.200425294

67. Fink M.P., 2014. Animal models of sepsis. Virulence 5, 143-153. https://doi.org/10.4161/viru.26083

68. Fink M.P., Heard, S.O., 1990. Laboratory models of sepsis and septic shock. J. Surg. Res. 49, 186-196. https://doi.org/10.1016/0022-4804(90)90260-9

69. Florin L., Knebel J., Zigrino P., Vonderstrass B., Mauch C., Schorpp-Kistner M., Szabowski A., Angel P. Delayed wound healing and epidermal hyperproliferation in mice lacking JunB in the skin. J Invest Dermatol. 2006 Apr;126(4):902-11. doi: 10.1038/sj.jid.5700123. PMID: 16439969.

70. Gilbert R.W.D., Vickaryous M.K., Viloria-Petit A.M., 2016. Signalling by Transforming Growth Factor Beta Isoforms in Wound Healing and Tissue Regeneration. J Dev Biol 4. https://doi.org/10.3390/jdb4020021

71. Goldfarb R.D., Glock D., Kumar A., Mc Carthy R.J., Mei J., Guynn T., Matushek M., Trenholme G., Parrillo J.E., 1996. A porcine model of peritonitis and bacteremia simulates human septic shock. Shock 6, 442-451. https://doi.org/10.1097/00024382-199612000-00009

72. Gunzel D., Yu A.S.L., 2013. Claudins and the modulation of tight junction permeability. Physiol. Rev. 93, 525-569. https://doi.org/10.1152/physrev.00019.2012

73. Guo L., Degenstein L., Fuchs E., 1996. Keratinocyte growth factor is required for hair development but not for wound healing. Genes Dev. 10, 165-175. https://doi.org/10.1101/gad.10.2.165

74. Gurtner G.C., Werner S., Barrandon Y., Longaker M.T., 2008. Wound repair and regeneration. Nature 453, 314-321. https://doi.org/10.1038/nature07039

75. Gutcher I., Donkor M.K., Ma Q., Rudensky A.Y., Flavell R.A., Li M.O. Autocrine transforming growth factor-01 promotes in vivo Th17 cell differentiation. Immunity. 2011;34(3):396-408. doi:10.1016/j.immuni.2011.03.005

76. Guttman-Yassky E., Nograles K.E., Krueger J.G., 2011. Contrasting pathogenesis of atopic dermatitis and psoriasis--part I: clinical and pathologic concepts. J. Allergy Clin. Immunol. 127, 1110-1118. https://doi.org/10.1016/jjaci.2011.01.053

77. Han G., Li F., Singh T.P., Wolf P., Wang X.-J., 2012. The proinflammatory role of TGF01: a paradox? Int. J. Biol. Sci. 8, 228-235. https://doi.org/10.7150/ijbs.8.228

78. Hubbard W.J, Choudhry M., Schwacha M.G., Kerby J.D., Rue L.W., Bland K.I., Chaudry I.H., 2005. Cecal ligation and puncture: Shock 24, 52-57. https://doi.org/10.1097/01.shk.0000191414.94461.7e

79. Hubbard W.J., Choudhry M., Schwacha M.G., Kerby J.D., Rue L.W., Bland K.I., Chaudry I.H., 2005. Cecal ligation and puncture. Shock 24 Suppl 1, 52-57. https://doi.org/10.1097/01.shk.0000191414.94461.7e

80. Imamura M., Clowes G.H., 1975. Hepatic blood flow and oxygen consumption in starvation, sepsis and septic shock. Surg Gynecol Obstet 141, 2734.

81. Jacobson N., 1995. Interleukin 12 signaling in T helper type 1 (Th1) cells involves tyrosine phosphorylation of signal transducer and activator of transcription (Stat)3 and Stat4. J Exp Med 181, 1755-1762.

82. Jameson J., Ugarte K., Chen N., Yachi P., Fuchs E., Boismenu R., Havran W.L., 2002. A role for skin gamma-delta T cells in wound repair. Science 296, 747-749. https://doi.org/10.1126/science.1069639

83. Johnson K.E., Wilgus T.A., 2014. Vascular Endothelial Growth Factor and Angiogenesis in the Regulation of Cutaneous Wound Repair. Adv Wound Care (New Rochelle) 3, 647-661. https://doi.org/10.1089/wound.2013.0517

84. Kim B.E., Howell M.D., Guttman E., Gilleaudeau P.M., Cardinale I.R., Boguniewicz M., Krueger J.G., Leung D.Y.M., 2011. TNF-a Downregulates Filaggrin and Loricrin through c-Jun N-terminal Kinase: Role for TNF-a Antagonists to Improve Skin Barrier. Journal of Investigative Dermatology 131, 1272-1279. https://doi.org/10.1038/jid.2011.24

85. Kim H.J., Kim T.-Y., 2005. Regulation of vascular endothelial growth factor expression by insulin-like growth factor-II in human keratinocytes, differential involvement of mitogen-activated protein kinases and feedback inhibition of protein kinase C. Br. J. Dermatol. 152, 418-425. https://doi.org/10.1111/j.1365-2133.2004.06397.x

86. Kinasewitz G.T., Chang A.C., Peer G.T., Hinshaw L.B., Taylor F.B., 2000. Peritonitis in the baboon: a primate model which stimulates human sepsis. Shock 13, 100-109. https://doi.org/10.1097/00024382-200013020-00003

87. King A., Balaji S., Louis D. Le, Timothy M. Crombleholme, and Sundeep G. Keswani.Advances in Wound Care.Apr 2014.315-323. http://doi.org/10.1089/wound.2013.0461

88. O'Kane S., Ferguson M.W. Transforming growth factor beta s and wound healing. Int J Biochem Cell Biol. 1997 Jan;29(1):63-78. doi: 10.1016/s1357-2725(96)00120-3. PMID: 9076942.

89. Koskela M., 2016. Wound healing and skin in severe sepsis 98.

90. Kovacs D., Falchi M., Cardinali G., Raffa S., Carducci M., Cota C., Amantea A., Torrisi M.R., Picardo M., 2005. Immunohistochemical analysis of keratinocyte growth factor and fibroblast growth factor 10 expression in psoriasis. Exp Dermatol 14, 130-137. https://doi.org/10.1111/j.0906-6705.2005.00261.x

91. Kulig P., Musiol S., Freiberger S.N. IL-12 protects from psoriasiform skin inflammation. Nat Commun. 2016;7:13466. Published 2016 Nov 28. doi:10.1038/ncomms13466

92. Kulkarni A.B., Huh C.G., Becker D., Geiser A., Lyght M., Flanders K.C., Roberts A.B., Sporn M.B., Ward J.M., Karlsson S., 1993. Transforming growth factor beta 1 null mutation in mice causes excessive inflammatory response and early death. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90, 770-774. https://doi.org/10.1073/pnas.90.2.770

93. Lee W.J., Lee M.H., Kim H.T., Won C.H., Lee M.W., Choi J.H., Chang S.E., 2019. Prognostic significance of CD163 expression and its correlation with cyclooxygenase-2 and vascular endothelial growth factor expression in cutaneous melanoma: Melanoma Research 29, 501-509. https://doi.org/10.1097/CMR.0000000000000549

94. Lewis A.J., Seymour C.W., Rosengart M.R., 2016. Current Murine Models of Sepsis. Surg Infect (Larchmt) 17, 385-393. https://doi.org/10.1089/sur.2016.021

95. Li J.-L., Li G., Jing X.-Z., Li Y.-F., Ye Q.-Y., Jia H.-H., Liu S.-H., Li X.-J., Li, H., Huang R., Zhang Y., Wang H., 2018. Assessment of clinical sepsis-associated biomarkers in a septic mouse model. J Int Med Res 46, 2410-2422. https://doi.org/10.1177/0300060518764717

96. Liu Y.-C., Zou X.-B., Chai Y.-F., Yao Y.-M., 2014. Macrophage Polarization in Inflammatory Diseases. Int. J. Biol. Sci. 10, 520-529. https://doi.org/10.7150/ijbs.8879

97. Lustig M.K., Bac V.H., Pavlovic D., Maier S., Gründling M., Grisk O., Wendt M., Heidecke C.-D., Lehmann, C., 2007. Colon ascendens stent peritonitis-- a model of sepsis adopted to the rat: physiological, microcirculatory and laboratory changes. Shock 28, 59-64. https://doi.org/10.1097/SHK.0b013e31802e454f

98. Maddaluno L., Urwyler C., Werner S., 2017. Fibroblast growth factors: key players in regeneration and tissue repair. Development 144, 40474060. https://doi.org/10.1242/dev.152587

99. Maier S., Traeger T., Entleutner M., Westerholt A., Kleist B., Hüser N., Holzmann B., Stier A., Pfeffer K., Heidecke C.-D., 2004. Cecal ligation and puncture versus colon ascendens stent peritonitis: two distinct animal models for polymicrobial sepsis. Shock 21, 505-511. https://doi.org/10.1097/01.shk.0000126906.52367.dd

100. Marks R., 2004. The stratum corneum barrier: the final frontier. J. Nutr. 134, 2017S-2021S. https://doi.org/10.1093/jn/134.8.2017S

101. Mori H.-M., Kawanami H., Kawahata H., Aoki M., 2016. Wound healing potential of lavender oil by acceleration of granulation and wound contraction through induction of TGF-ß in a rat model. BMC Complement Altern Med 16, 144. https://doi.org/10.1186/s12906-016-1128-7

102. Murphrey M.B., Miao J.H., Zito P.M., 2020. Histology, Stratum Corneum, in: StatPearls. StatPearls Publishing, Treasure Island (FL).

103. Murray P.J., 2017. Macrophage Polarization. Annual Review of Physiology 79, 541-566. https://doi.org/10.1146/annurev-physiol-022516-034339

104. Nardini M., Perteghella S., Mastracci L. Growth Factors Delivery System for Skin Regeneration: An Advanced Wound Dressing. Pharmaceutics. 2020;12(2):120. Published 2020 Feb 3. doi:10.3390/pharmaceutics12020120

105. Nemzek J.A., Hugunin K.M., Opp M.R., 2008. Modeling Sepsis in the Laboratory: Merging Sound Science with Animal Well-Being. Comp Med 58, 120-128.

106. Numata Y., Terui T., Okuyama R., Hirasawa N., Sugiura Y., Miyoshi I., Watanabe T., Kuramasu A., Tagami H., Ohtsu H., 2006. The Accelerating Effect of Histamine on the Cutaneous Wound-Healing Process Through the Action of Basic Fibroblast Growth Factor. Journal of Investigative Dermatology 126, 1403-1409. https://doi.org/10.1038/sj.jid.5700253

107. Orecchioni M., Ghosheh Y., Pramod A.B., Ley K., 2019. Macrophage Polarization: Different Gene Signatures in M1(LPS+) vs. Classically and M2(LPS) vs. Alternatively Activated Macrophages. Front Immunol 10. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.01084

108. Ornitz D.M., Itoh N., 2015. The Fibroblast Growth Factor signaling pathway. WIREs Developmental Biology 4, 215-266. https://doi.org/10.1002/wdev. 176

109. Piper R., Cook D., 1996. Introducing Critical Appraisal to studies of animal models investigating novel therapies in sepsis. - Abstract - Europe PMC (WWW Document). URL https://europepmc.org/article/med/8968277 (accessed 8.13.20).

110. Poli-de-Figueiredo L.F., Garrido A.G., Nakagawa N., Sannomiya, P., 2008. Experimental models of sepsis and their clinical relevance: Shock 30, 53-59. https://doi.org/10.1097/SHK.0b013e318181a343

111. Proksch E., Brandner J.M., Jensen J.-M., 2008. The skin: an indispensable barrier. Exp. Dermatol. 17, 1063-1072. https://doi.org/10.1111/j.1600-0625.2008.00786.x

112. Ramirez H., Patel S.B., Pastar, I., 2014. The Role of TGF0 Signaling in Wound Epithelialization. Adv Wound Care (New Rochelle) 3, 482-491. https://doi.org/10.1089/wound.2013.0466

113. Remick D., Newcomb D.E., 2000. Comparison of the mortality and inflammatory response of two models of sepsis: lipopolysaccharide vs. cecal ligation and puncture - PubMed (WWW Document). URL https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10670840/ (accessed 8.13.20).

114. Remick D.G., Bolgos G.R., Siddiqui J., Shin J., Nemzek J.A., 2002. Six at six: interleukin-6 measured 6 h after the initiation of sepsis predicts mortality over 3 days. Shock 17, 463-467. https://doi.org/10.1097/00024382-200206000-00004

115. Rivollier A., He J., Kole A., Valatas V., Kelsall B.L., 2012. Inflammation switches the differentiation program of Ly6Chi monocytes from antiinflammatory macrophages to inflammatory dendritic cells in the colon. J Exp Med 209, 139-155. https://doi.org/10.1084/jem.20101387

116. Roszer, T., 2015. Understanding the Mysterious M2 Macrophage through Activation Markers and Effector Mechanisms (WWW Document). Mediators of Inflammation. https://doi.org/10.1155/2015/816460

117. Schabbauer G., 2012. Polymicrobial sepsis models: CLP versus CASP. Drug Discovery Today: Disease Models 9, e17-e21. https://doi.org/10.1016/j.ddmod.2011.10.002

118. Schmid P., Cox D., Bilbe G., Mc Master G., Morrison C., Stahelin H., Luscher N., Seiler W., 1993. TGF-beta s and TGF-beta type II receptor in human epidermis: differential expression in acute and chronic skin wounds. J. Pathol. 171, 191-197. https://doi.org/10.1002/path.1711710307

119. Shapovalova Ye., Baranovskiy Yu, Ilchenko F., Boyko T., Vaschenko P., 2019. Dynamics of Regenerative Processes in Patients with Trophic Ulcers against the Background of Chronic Venous Hemodynamic Disturbances Using Therapy with Polydesoxyrinobonucleotides. International Journal of Biomedicine. 9. 139-143. 10.21103/Article9(2)_0A12.

120. Singleton K.D., Wischmeyer P.E., 2003. Distance of cecum ligated influences mortality, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6 expression following cecal ligation and puncture in the rat. Eur Surg Res 35, 486-491. https://doi.org/10.1159/000073387

121. Svensson-Arvelund J., Mehta R.B., Lindau R., Mirrasekhian E., Rodriguez-Martinez H., Berg G., Lash G.E., Jenmalm M.C., Ernerudh J., 2015. The Human Fetal Placenta Promotes Tolerance against the Semiallogeneic Fetus by Inducing Regulatory T Cells and Homeostatic M2 Macrophages. The Journal of Immunology 194, 1534-1544. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1401536

122. Takao K., Miyakawa T., 2015. Genomic responses in mouse models greatly mimic human inflammatory diseases. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 112, 1167-1172. https://doi.org/10.1073/pnas.1401965111

123. Tanaka E.M., 2016. The Molecular and Cellular Choreography of Appendage Regeneration. Cell 165, 1598-1608. https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.05.038

124. Tanaka T., Narazaki M., Kishimoto T., 2014a. IL-6 in Inflammation, Immunity, and Disease. Cold Spring Harb Perspect Biol 6. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a016295

125. Tanaka T., Narazaki M., Kishimoto T., 2014b. IL-6 in Inflammation, Immunity, and Disease. Cold Spring Harb Perspect Biol 6. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a016295

126. Tassi E., Mc Donnell K., Gibby K.A., Tilan J.U., Kim S.E., Kodack D.P., Schmidt M.O., Sharif G.M., Wilcox C.S., Welch W.J., Gallicano G.I., Johnson M.D., Riegel A.T., Wellstein A., 2011. Impact of fibroblast growth factor-binding protein-1 expression on angiogenesis and wound healing. Am. J. Pathol. 179, 2220-2232. https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2011.07.043

127. Terajima, S., Higaki, M., Igarashi, Y., Nogita, T., Kawashima, M., 1998a. An important role of tumor necrosis factor-a in the induction of adhesion molecules in psoriasis. Arch Dermatol Res 290, 246-252. https://doi.org/10.1007/s004030050299

128. Terajima S., Higaki M., Igarashi Y., Nogita T., Kawashima M., 1998b. An important role of tumor necrosis factor-a in the induction of adhesion molecules in psoriasis. Archives of Dermatological Research 290, 246-252. https://doi.org/10.1007/s004030050299

129. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). Critical Care Medicine. JAMA. JAMA Network (WWW Document), n.d. URL https://jamanetwork.com/journals/jama/fullarticle/2492881 (accessed 6.21.20).

130. Toichi E., Torres G., Mc Cormick T.S., Chang T., Mascelli M.A., Kauffman C.L., Aria N., Gottlieb A.B., Everitt D.E., Frederick B., Pendley C.E., Cooper K.D., 2006. An Anti-IL-12p40 Antibody Down-Regulates Type 1 Cytokines, Chemokines, and IL-12/IL-23 in Psoriasis. J Immunol 177, 4917-4926. https://doi.org/10.4049/jimmunol.177.7.4917

131. Toscano M.G., Ganea D., Gamero A.M., 2011. Cecal Ligation Puncture Procedure. JoVE 2860. https://doi.org/10.3791/2860

132. Trompezinski S., Berthier-Vergnes O., Denis A., Schmitt D., Viac J., 2004. Comparative expression of vascular endothelial growth factor family members, VEGF-B, -C and -D, by normal human keratinocytes and fibroblasts. Exp. Dermatol. 13, 98-105. https://doi.org/10.1111/j.0906-6705.2004.00137.x

133. Venet F., Monneret G., 2018. Advances in the understanding and treatment of sepsis-induced immunosuppression. Nature Reviews Nephrology 14, 121-137. https://doi.org/10.1038/nrneph.2017.165

134. Wang X.-P., Schunck M., Kallen K.-J., Neumann C., Trautwein C., Rose-John S., Proksch E., 2004. The Interleukin-6 Cytokine System Regulates Epidermal Permeability Barrier Homeostasis. Journal of Investigative Dermatology 123, 124-131. https://doi.org/10.1111/j.0022-202X.2004.22736.x

135. Weighardt H., Kaiser-Moore S., Vabulas R.M., Kirschning C.J., Wagner H., Holzmann B., 2002. Cutting edge: myeloid differentiation factor 88 deficiency improves resistance against sepsis caused by polymicrobial infection. J. Immunol. 169, 2823-2827. https://doi.org/10.4049/jimmunol.169.6.2823

136. Weninger W., Uthman A., Pammer J., Pichler A., Ballaun C., Lang I.M., Plettenberg A., Bankl H.C., Stürzl M., Tschachler E., 1996. Vascular endothelial growth factor production in normal epidermis and in benign and malignant epithelial skin tumors. Lab. Invest. 75, 647-657.

137. Werner S., Grose R., 2003. Regulation of wound healing by growth factors and cytokines. Physiol. Rev. 83, 835-870. https://doi.org/10.1152/physrev.2003.83.3.835

138. Werner S., Krieg T., Smola H., 2007. Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing. J. Invest. Dermatol. 127, 998-1008. https://doi.org/10.1038/sj.jid.5700786

139. Wichterman K.A., Baue A.E., Chaudry I.H., 1980. Sepsis and septic shock--a review of laboratory models and a proposal. J. Surg. Res. 29, 189-201. https://doi.org/10.1016/0022-4804(80)90037-2

140. Yano K., Liaw P.C., Mullington J.M., Shih S.-C., Okada H., Bodyak N., Kang P.M., Toltl L., Belikoff B., Buras J., Simms B.T., Mizgerd J.P., Carmeliet P., Karumanchi S.A., Aird W.C., 2006. Vascular endothelial growth factor is an important determinant of sepsis morbidity and mortality. J. Exp. Med. 203, 1447-1458. https://doi.org/10.1084/jem.20060375

141. Zantl N., Uebe A., Neumann B., Wagner H., Siewert J.R., Holzmann B., Heidecke C.D., Pfeffer K., 1998. Essential role of gamma interferon in survival of colon ascendens stent peritonitis, a novel murine model of abdominal sepsis. Infect. Immun. 66, 2300-2309. https://doi.org/10.1128/IAI.66.5.2300-2309.1998

142. Zhang H., Zhi L., Moore P.K., Bhatia M., 2006. Role of hydrogen sulfide in cecal ligation and puncture-induced sepsis in the mouse. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 290, L1193-1201. https://doi.org/10.1152/ajplung.00489.2005

143. Zhu W., Bao R., Fan X., Tao T., Zhu J., Wang J., Li J., Bo L., Deng X., 2013. PD-L1 Blockade Attenuated Sepsis-Induced Liver Injury in a Mouse Cecal Ligation and Puncture Model. Mediators of Inflammation 2013, 1 -7. https://doi.org/10.1155/2013/361501