МикроРНК и полиморфизм генов их биогенеза в патогенезе атеросклероза

Щеглова, Наталья Евгеньевна

МикроРНК и полиморфизм генов их биогенеза в патогенезе атеросклероза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Щеглова, Наталья Евгеньевна

Щеглова, Наталья Евгеньевна
кандидат наук
2015

Специальность ВАК РФ14.03.03

Количество страниц 91

Щеглова, Наталья Евгеньевна. МикроРНК и полиморфизм генов их биогенеза в патогенезе атеросклероза: дис. кандидат наук: 14.03.03 - Патологическая физиология. Казань. 2015. 91 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Щеглова, Наталья Евгеньевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Сгр.

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о патофизиологии атеросклероза

1.2 Роль генетических полиморфизмов в патогенезе атеросклероза

1.3 МикроРНК — новые регуляторы экспрессии генов

1.4 Роль генов AGOI, DGCR8, GEMIN3, GEMIN4, DROSHA, вовлеченных в биогенез микроРНК, в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объект и дизайн исследования

2.2 Клиничсскнс и биохимические методы исследования

2.3 Молскулярно-гснстическис методы исследования

2.4 Методы статистической обработки

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Характеристика некоторых показателей липидного метаболизма у больных гипертонической болезнью и ИБС постинфарктным кардиосклерозом

3.2 Изучение полиморфизмов генов AGO/, DGCR8, GEMIN3, GEMIN4, DROSHA в группе контроля и у больных гипертонической болезиыо и ИБС постинфарктным кардиосклерозом

3.3. Показатели уровня экспрессии niiR-126, niiR-155, miR-221, miR-222 у больных гипертонической болезнью и ИБС ностпнфарктным кардиосклерозом

3.4. Качественные характеристики miR-126, miR-155, miR-221, miR-222 у больных гипертонической болезиыо и ИБС постинфарктным кардиосклерозом

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «МикроРНК и полиморфизм генов их биогенеза в патогенезе атеросклероза»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) лидируют в структуре причин смертности населения экономически развитых стран. Согласно данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), во всем мире от этой патологии ежегодно умирает более 17 млн. человек [149]. В Российской Федерации (РФ) болезни системы кровообращения обусловливают около половины всех смертельных исходов. По официальной статистике смертность от ССЗ остается одной из самых высоких в нашей стране, так за 2012 год она составила 737,1 случаев на 100 тыс. населения [16].

Основные типы болезней системы кровообращения включают цереброваскулярные заболевания, ишемическую болезнь сердца (ИБС), гипертоническую болезнь (ГЬ). Процессы атеросклероза, тромбоза и артериальной гипертензии составляют патоморфологическую основу заболеваний сердечно-сосудистой системы, а нарушение мозгового кровообращения и ИБС -наиболее частые причины летальных исходов [25, 44, 53].

В конце XX века на основе результатов ряда значительных эпидемиологических исследований была разработана концепция факторов риска развития атеросклероза и ИБС. Дальнейшее развитие этих представлений позволило признать, что болезни системы кровообращения являются результатом взаимодействия наследственных (генетических) факторов и внешних воздействий, реализующих генетическую предрасположенность [38].

Последнее десятилетие XX века стало временем активного внедрения молекулярно-генегических методов исследования в кардиологию. Это связано с тем, что знание генотипических характеристик пациента позволяет не только оценить риск развития жизнеугрожающих состояний, но и правильно определить тактику их профилактики. Кроме того, многочисленные исследования показали,

что изменение генной экспрессии играет важную патофизиологическую роль в развитии и прогрессировании ССЗ [66, 122, 131J.

В настоящее время особый интерес в молекулярно-генетических исследованиях уделяется изучению роли микрорибонуклеиновых кислот (микроРНК) в физиологических и патологических процессах.

МикроРНК - это малые некодирующие молекулы рибонуклеиновых кислот (РНК) специфической структуры, обычно длиной 19-24 нуклеотида, образуемые из более длинных РНК-предшественников [32, 40, 127].

Разработка и внедрение в лабораторную практику методов определения уровня и спектра специфических микроРНК в физиологических жидкостях, позволяет исследовать и использовать их потенциал в качестве новых потенциальных маркеров развития заболеваний [49]. Предполагается, что мутации, поражающие микроРНК, могут играть патогенетическую роль в болезнях человека, в том числе и в ССЗ [112, 145].

Степень разработанности темы

В настоящее время проводятся многочисленные исследования с целью изучения роли микроРНК в молекулярно-генетических механизмах развития ССЗ. Появляются новые данные о различных биологических эффектах микроРНК на компоненты сердечно-сосудистой системы. Согласно литературным источникам, нарушение функционирования определенных микроРНК может способствовать развитию таких патологических состояний как ИБС, постинфарктное ремоделирование миокарда, его сократительная дисфункция, хроническая сердечная недостаточность [72, 135, 136].

Вместе с тем, следует указать, что данные об уровне микроРНК в условиях агерогенеза в литературе противоречивы. В тоже время проведение подобного исследования представляется, безусловно, актуальным, особенно с учетом распространенности атеросклероза и его осложнений в популяции.

Цель исследования

Выяснить в условиях выраженного атеросклероза состояние экспрессии проангиогенных и антиангиогенных микроРНК, особенности полиморфизмов генов их биогенеза и представить патофизиологический анализ значения полученных данных.

Задачи исследования

1) Определить уровень экспрессии микроРНК в плазме крови у больных ГБ и ИБС постинфарктным кардиосклерозом (ИБС ПИКС).

2) Изучить характер изменения экспрессии проангиогенных (miR-126, miR-155) и антиангиогенных (miR-221, miR-222) микроРНК в плазме крови у человека в условиях атерогенеза.

3) Изучить качественные характеристики плазменных микроРНК у больных ГБ и ИБС ПИКС.

4) Определить существование взаимосвязи между частотой встречаемости полиморфизмов генов биогенеза микроРНК AGOl, DGCR8, GEMIN3, GEMIN4, DROSHA и частотой случаев ГБ и ИБС ПИКС.

5) Представить обоснование патофизиологической значимости выявленных изменений молекулярно-генетического аппарата в развитии атеросклероза и его осложнений.

Научная новизна работы

1) Впервые изучены количественные и качественные характеристики плазменных микроРНК в условиях выраженного атеросклероза у человека.

2) Впервые исследованы особенности полиморфизмов генов, регулирующих биогенез микроРНК, при осложненном развитии атеросклероза у человека.

3) Впервые обосновано представление об одном из вариантов конкретного участия микроРНК в патогенезе атеросклероза у человека.

Теоретическая и практическая значимость работы

Результаты настоящего исследования вносят вклад в учение о молекулярно-генетических механизмах развития ССЗ. Полученные данные расширяют представление о роли микроРНК в атерогенезе и его осложнениях.

Анализ результатов работы позволяет признать возможность их использования для поиска генетических предикторов осложненного течения атеросклероза и формирования новых представлений о профилактике и патогенетической терапии ГБ и ИБС.

Методология и методы исследования

Для решения поставленных задач проведено лабораторное и молекулярно-генетическое обследование 65 мужчин. Объект исследования - здоровые мужчины и пациенты кардиологического отделения ГБУЗ Областной клинической больницы города Тверь. Предмет исследования - особенности участия микроРНК и генов их биогенеза в молекулярно-генетических механизмах развития атеросклероза. Достоверность полученных данных подтверждена методами математической статистики.

Положения, выносимые на защиту

1) Длительное и осложненное развитие атеросклероза у человека сопровождается повышением в плазме крови экспрессии проангиогенной miR-126 и доминирующим нарастанием экспрессии ангиангиогенных miR-221 и miR-222.

2) Среди полиморфизмов генов AGOl, DGCR8, GEMIN3, GEMIN4 и DROSIIA, регулирующих биогенез микроРНК у человека, только генотип АА гена GEMIN4 коррелирует с частотой ГБ - ведущего фактора развития атеросклероза.

Степень достоверности результатов.

О достоверности представленных результатов диссертационного исследования свидетельствуют электронная база исходных данных (65 человек),

современные молекулярно-генетические методы исследования, корректные методы статистической обработки полученных данных.

Апробация работы

Основные материалы работы доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры патологической физиологии Государственного бюджетного учреждения высшего профессионального образования «Тверского государственного медицинского университета» Минздрава России (протокол № 11 от 01.06.2015).

Результаты исследования представлены на V Всероссийском с международным участием медико-биологическом конгрессе молодых ученых «Симбиоз-Россия 2012» (Тверь, 2012); V Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения - 2013» (Санкт-Петербург, 2013); I межвузовской научно-практической конференции молодых ученых «Молодежь и медицинская наука» (Тверь, 2013); IX международной научно-практической конференции «Внезапная смерть: от критериев риска к профилактике» (Санкт-Петербург, 2014); IX Международной научно-практической конференции «Внезапная смерть: от критериев риска к профилактике» (Санкт-Петербург, 2014); IV съезде физиологов СНГ (Сочи -Дагомыс, 2014).

Публикации по теме исследования

По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве образования и науки РФ для публикации основных результатов диссертационных исследований на соискание ученой степени.

Личный вклад диссертанта

Участие автора в диссертационном исследовании выразилось в планировании исследования, наборе материала, проведении молекулярно-

генетических исследований, обобщении и статистическом анализе полученных данных. Лично автором выполнены все молекулярно-генетические тесты, включая выделение общей микроРНК, проведение обратной транскрипции и полимеразно-цепной реакции (ГИДР) в режиме real-time.

Автором подготовлены статьи, опубликованные в изданиях, которые включены в перечень российских рецензируемых научных журналов для опубликования научных результатов диссертаций. Этический комитет Тверского государственного медицинского университета заключил, что проведение настоящего исследования соответствует этическим нормам, принятым для данного типа исследований.

Результаты исследования использованы в учебном процессе на кафедре патологической физиологии. Апробированные методики применяются в практической работе клинико-диагностической лаборатории Поликлиники Тверского государственного медицинского университета.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 91 странице машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, статистической обработки данных, результатов собственного исследования, а также заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и списка иллюстративного материала. Работа содержит 25 таблиц и 8 рисунков. Указатель литературы включает 151 источник (51 отечественный и 100 зарубежных).

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о патофизиологии атеросклероза

Патофизиологические основы заболеваний сердечно-сосудистой системы, за исключением достаточно редко встречающихся моногенных болезней, достаточно сложны. С эпидемиологической точки зрения, этиология заболевания включает комплексное взаимодействие многочисленных факторов окружающей среды (климата, диеты, физической активности, психологических особенностей личности и др.) и генетических факторов. Согласно ВОЗ, установлено свыше 3000 факторов риска, связанных с ИБС и инсультом, среди которых выделяют модифицируемые (такие как наследственная предрасположенность) и немодифицируемые (дислипоиротеинемия, артериальная гипертензия, сахарный диабет, избыточная масса тела) [17, 44].

Процессы атеросклероза, тромбообразования и артериальной гипертензии являются наиболее частыми патологическими процессами, поражающими сердечно-сосудистую систему, а ГБ и ИБС наиболее частыми ССЗ, приводящими к смертельному исходу [5, 53].

При этом известно, что глобальная эпидемия ССЗ обусловлена широким распространением атеросклероза в популяции [9, 13, 29, 129].

К настоящему времени сложилось четкое представление об атеросклерозе как о мультифакториальном заболевании, в основе которого лежат сложные нарушения биохимических, иммунологических и молекулярно-генетических процессов [5]. Современная теория атеросклероза формируется на основе огромного количества данных, полученных ранее и сегодня как путем экспериментального моделирования атеросклероза, так и на основе длительных клинических исследований [20, 34].

Приоритет в признании роли холестерина как основного фактора развития атеросклероза принадлежит русскому ученому II.II. Аничкову, который еще в

начале XX века в эксперименте доказал возможность развития атеросклероза у кроликов, получавших холестериновую диету. Результаты его опытов позволили сформулировать инфильтрационную теорию, ядро которой выражается в знаменитой формуле H.H. Аничкова: «Без холестерина не может быть атеросклероза». В дальнейшем по мере развития биохимии липидов данная формула была модифицирована в утверждение, что атеросклероз не может развиваться без атерогенной гиперлипопротеинемии, а именно, нарастания содержания в плазме крови атерогенных липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и содержащегося в них холестерина [18, 29].

В 1954 году было начато знаменитое многолетнее эпидемиологическое исследование ССЗ во Фремингеме (США). Ученые включили в анализ почти 8,5 тыс. участников в возрасте от 30 до 74 лет (средний возраст - 49 лет), которые на момент обследования не имели сердечно-сосудистой патологии. За 12 лет наблюдения у 1174 участников (из них 456 женщин) развилось первое ССЗ (ИБС, инсульт, облигерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей). Результаты данного исследования позволили количественно оценить абсолютный, относительный и определяющий риск многих факторов, способствующих развитию атеросклероза и его осложнений. В частности, было подтверждено ведущее значение в развитии атеросклероза расстройств обмена липидов, таких как гииерхолестеринемия и ожирение, а также артериальной гипертензии [38, 54, 92].

Все последующие теории атерогенеза в большей или меньшей степени, но обязательно включали холестериновый компонент, как главный фактор инициации формирования атероматозного процесса. В качестве примера остановимся на следующих из них.

А.Н. Климову и соавт. (1966, 1969) удалось получить атеросклеротические бляшки на аорте у кроликов путем длительного парентерального введения им гомологичной сыворотки, полученной от животных с экспериментальной гиперхолестеринемией [18].

Американские исследователи Ross R. и Glomset J.А. в середине 70-х годов XX века предложили гипотезу развития атеросклероза как ответ на повреждение эндотелия артерий. В качестве инициирующего фактора атеросклеротического процесса они рассматривали нарушение целостности эндотелия. К наиболее распространенным факторам, вызывающим повреждение эндотелия, были отнесены оксид углерода, артериальная гипертензия, дислипопротеинемия [5].

В 1980 году Ф. Куммероу воспроизвел перекисную теорию атеросклероза с помощью введения лабораторным животным больших количеств окисленных стеринов, что дало возможность в экспериментальной разработке получить основные признаки атеросклеротического поражения сосудов [18].

В перекисной теории атерогенеза ключевая роль отводится модифицированным окисленным липопротеинам низкой плотности (мЛПНП), которые образуются преимущественно в интиме артерий на начальных стадиях развития атеросклероза, и их концентрация увеличивается по мерс его прогрессирования. Считается, что мЛПНП стимулируют иммунное воспаление и образование пенистых клеток, причем именно эти липопротеины с высокой скоростью захватываются эндогелиальными и гладко-мышечными клетками стенки сосудов, что и приводит к накоплению холестерина в интиме артерий [5, 18, 77].

Тромбогенная теория атерогенеза предполагает активное участие компонентов системы гемостаза в формировании атеросклерогической бляшки. В настоящее время накоплены многочисленные клинические, патоморфологические и экспериментальные данные о взаимосвязи процессов атеро- и тромбогенеза [5, 15, 18].

В последние годы стала очевидной взаимосвязь между системой липопротеинов и факторами свертывания крови. Существуют данные, что липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП) и липопротеины промежуточной плотности (ЛППП) обладают способностью активировать тромбоциты и свертывающую систему крови, мЛПНП способны стимулировать спонтанную агрегацию тромбоцитов. Установлено также, что

гипертриглицеридемия сопровождается возрастанием активности X, IX, VII плазменных факторов свертывания и протромбина [15].

При этом свое атерогенное влияние данные факторы реализуют, как правило, через расстройства лигшдного обмена, проявляющиеся развитием гиперхолестеринемии, нарастания плазменных ЛПНП и ожирения. Данный вывод не противоречит большинству современных патогенетических концепций развития атеросклероза.

Таким образом, многочисленные исследования в области этиологии атеросклероза показывают большую роль внешних факторов. В тоже время, в свете современных представлений, в этиологию ССЗ и атеросклероза наряду с неблагоприятными факторами окружающей среды существенный вклад вносят генетические составляющие [2, 21, 44, 80, 93].

1.2 Роль генетических полиморфизмов в патогенезе атеросклероза

Генетика атеросклероза является сложным и до конца не изученным разделом учения о данной патологии. Так, в модельных исследованиях на мышах, трансгенных или подвергшихся генетическому «нокауту», было показано, что на формирование атеросклеротических поражений сосудов оказывают влияние более 100 генов [18].

Семейная гиперхолестеринемия была первым описанным моногенным заболеванием, приводящим к повышению уровня холестерина в плазме крови. Частота этого дефекта в гетерозиготном состоянии составляет 1 на 500 человек, в гомозиготном состоянии встречается намного реже - 1 на 1 млн. человек [146]. Гомозиготы страдают от тяжелого коронарного атеросклероза и, как правило, умирают в молодом возрасте от инфаркта миокарда. Тем не менее, для большинства заболеваний нельзя идентифицировать единичные генетические детерминанты, так как их манифестация связана сразу с изменениями сразу в нескольких генах [22].

Применительно к мультифакториальным заболеваниям наибольшее практическое значение имеет анализ полиморфизмов генов-кандидатов, представляющих собой отклонения в последовательности нуклеотидов дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), в относительно разной степени, влияющие на функцию кодируемых белков (ферментов). Генетические полиморфизмы распространены в популяции, как правило, достаточно широко и встречаются с частотой более 1% [12].

Полиморфные гены представлены в популяции несколькими разновидностями - аллелями, которые могут быть как протективными, так и аллелями генов высокого риска. Чаще всего мутантные аллели существенно влияют на риск заболевания только в присутствии определенных факторов внешней среды, модифицировав или исключив которые, можно существенно снизить вероятность развития патологии [21].

Эффективность изучения генов, участвующих в патогенезе многофакторных заболеваний, к числу которых относится и атеросклерогическое поражение сосудов, осложняется большим количеством генов-кандидатов и комплексным взаимодействием генетических и средовых факторов. Тем не менее, уже к настоящему времени идентифицирован полиморфизм десятков генов, претендующих на роль генетических маркеров атеросклероза [35].

К генетическим факторам риска атеросклероза относятся, прежде всего, изменения генов белков, связанных с регуляцией метаболизма липидов. Кроме того, разнообразные генетические дефекты генов, контролирующих структуру и функцию сосудистой стенки, а также генов, отвечающих за агрегацию тромбоцитов, воспаление, гипергомоцистеинемию, артериальную гипертензию, также ведут к ускоренному развитию атеросклероза [21, 35, 81].

В таблице 1 представлены изученные к настоящему времени множество генов, экспрессия которых играет роль в патогенезе ССЗ и атеросклероза. Данные гены разделены на группы, в зависимости от кодируемых ими веществ: белков, отвечающих за воспалительные процессы, липопротеинов крови, белков,

участвующих в метаболизме жировой ткани и играющих роль в регуляции сосудистого тонуса.

Таблица 1 - Наиболее часто изучаемые полиморфизмы генов-кандидатов

атеросклероза [21, 33, 44, 45, 46, 64]

Ген Локализация Полиморфизм Функция и роль в развитии атеросклероза

Гены воспаления

СВ8 Участвует в развитии

(ОМ1М 21q22.ll 833Т/С гомоцистеинемии (установленного

236200) фактора риска атеросклероза)

СЯР Ассоциирован с атеросклерозом,

(ОМ1М \q23.2 10590>С позволяет предсказывать повторный

123260) инфаркт миокарда

1САМ1 Играет важную роль в межклеточной

(ОМ1М 19р13.2 К469Е адгезии, образующей слой эндотелия,

147840) ассоциирован с атеросклерозом

МТНГЯ (ОМ1М 607093) 1р36.22 677С/Т Ассоциирован с гипергомоцистеинемией, тромбозами, атеросклерозом и другими ССЗ

Обмен линопротеинов

АВСА1 (ОМ1М 600046) 9ц31.1 С-\9\С, C-17g, Я219К Приводит к атерогенному липидному профилю

АРОВ (ОМ1М 107730) 2р24.1 8р 1п5/Т)е1, Т7П,ХЬа1 Ассоциированы с ИБС и, в частности, с инфарктом миокарда

Продолжение таблицы 1

Ген Локализация Полиморфизм Функция и роль в развитии атеросклероза

АРОСЗ (ОМ1М 107720) 11ц23.3 455Т/С, 482С/Т Ассоциированы с повышенными уровнями АРОСЗ и триглицеридов в плазме, с пониженными уровнями ЛПВГ1 и увеличением риска ИБС

АРОЕ (ОМ1М 107741) 19я13.32 СувША^ Связан с повышением уровня холестерина, возрастающим риском атеросклероза и инфаркта миокарда

шт (ОМ1М 606945) 19р 13.2 Т2052С, С1866Т Ассоциированы с гиперхолестеринемией и ИБС

ЬРЬ (ОМ1М 238600) 8р21.3 Э9Ы, N2918 Повышение уровня триглицеридов, ЛПОНП, низкий уровень ЛПВП и возрастание риска ИБС

Метаболизм жировой ткани

АЖВЗ (ОМ1М 109691) 8р11.23 W64R Ассоциирован с повышением уровня триглицеридов плазмы, ожирением и гипертонией

СССР (ОМ1М 138040) 5я31.3 ЫЗбЗБ Влияет на уровень холестерина в плазме и риск ожирения

Вазоконетрикция и вазодилатация

АОЯВ1 (ОМ1М 109630) 10я25.3 849С, Я3890 Ассоциированы с инфарктом миокарда

Продолжение таблицы 1

Ген Локализация Полиморфизм Функция и роль в развитии атеросклероза

АйЯВ2 (ОМ1М 109690) 5ц32 Аг§16С1у, С1п27С1и Предрасположенность к астме и артериальной гипертонии

СЫВЗ (ОМ1М 139130) 12р13.31 С825Т Ассоциирован с вазоконстрикцией и артериальной гипертонией

N083 (ОМ1М 163729) 7ц36.2 Влияет на стенки сосудов, агрегацию тромбоцитов, пролиферацию клеток гладкой мускулатуры сосудов и клеточную адгезию лейкоцитов

лет (ОМ1М 106150) 1 ц43 Т174М, М235Т Артериальная гипертония, утолщение стенки сонных артерий, жесткость аорты, ИБС

АСЕ (ОМ1М 106180) 17я23.3 1/В Ассоциирован с инфарктом миокарда, инсультом и солезависимой артериальной гипертонией

АвТЯ! (ОМ1М 106165) Зя24 А1166С Ассоциирован с ИБС, инфарктом миокарда и артериальной гипертонией

Не вызывает сомнения, что дальнейшее наиболее перспективное изучение роли генетических полиморфизмов в патологии сердечно-сосудистой системы может быть связано с поиском и изучением молекулярных регуляторов экспрессии генов.

1.3МикроРПК — новые регуляторы экспрессии генов

Многочисленные попытки изучить и доказать генетическую природу большинства заболеваний привели к открытию новых маркеров, в роли которых выступает класс некодирующих РНК, так называемые «малые РНК» или микроРНК [3, 77, 111, 112, 140].

В последнее время становится очевидной важная роль микроРНК - малых некодирующих молекул РНК, обеспечивающих репрессию трансляции и деградацию транскриптов-мишеней - мРНК. Они являются эффективными посттранскрипционными регуляторами генной экспрессии [55, 87, 142, 150].

МикроРНК - класс некодирующих РНК, обычно имеющих длину 19-24 нуклеотида, образуемые из более длинных РНК-предшественников и имеющих специфическую шпилечную структуру [63, 128]. Это одноцепочечные молекулы, подавляющие экспрессию белок-кодирующих генов на посттранскрипционной стадии. Действие микроРНК опосредовано их неполной гибридизацией с 3'-нетранслируемой областью целевой мРНК, имеющей комплементарные сайты [П4].

Впервые микроРНК были охарактеризованы исследовательской группой V. Ambros из Гарвардского университета в 1993 году при изучении ретровирусов [56]. На сегодняшний день они обнаружены во всех многоклеточных организмах, включая растения, червей, насекомых и позвоночных, что свидетельствует о раннем эволюционном происхождении этого механизма регуляции генной экспрессии [127, 128].

Исследования показали, что микроРНК регулируют экспрессию более чем 30% генов, кодирующих структуру белков человеческого организма [95]. Мишени большинства микроРНК не известны, но предполагают, что это широкий диапазон - от одного до сотен генов-мишеней. При этом, как правило, для каждой микроРНК можно предсказать множество мишеней, и, напротив, многие гены несут потенциальные сайты распознавания для различных микроРНК [112].

В тканях человека обнаружено более 500 различных микроРНК [57]. Около половины из них кодируются последовательностями, локализованными в интронах белоккодирующих генов, остальные - в межгенных участках и в некоторых других участках генома. Исследования опосредованной микроРНК-регуляции экспрессии генов на модельных животных и в культурах клеток человека показали, что эта регуляция играет ключевую роль в дифференцировке клеток и эмбриональном развитии [40].

Также установлена роль микроРНК в процессах гемопоэза, регуляции секреции инсулина, функционировании нервной системы, регуляции циркадных ритмов, онкогенезе, в пролиферации и дифференцировке миоцитов, а также, возможно, в клеточном ответе на вирусные инфекции. Так, например, повышение экспрессии микроРНК-208 в биоптате эндокарда связано с неблагоприятными исходами у пациентов с дилатационной кардиомиопатией [128].

С момента открытия такого влияния микроРНК на биологические процессы предполагается, что мутации, поражающие микроРНК, могут играть патогенетическую роль в болезнях человека [112, 127, 145].

1.4 Роль генов Л СО/, ОССИН, С,ЕМ1Ю, СЕМШ4, /)/?05//Л, вовлеченных в биогенез микроРНК, в патогенезе сердечно-сосудистых

заболеваний

В настоящее время известно, что микроРНК могут участвовать в патологических процессах, таких как онкогенез, ангиогенез, гипертрофия сердечной мышцы, аритмии [112, 142]. С одной стороны, точковые мутации в генах микроРНК приводят к изменению экспрессии соответствующих им генов-мишеней и тем самым вызывают патологические изменения. С другой стороны, мутационные изменения в них могут приводить к возникновению модифицированных микроРНК, соединяющихся с другими несвойственными мРНК-мишенями [77].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Щеглова, Наталья Евгеньевна, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Агейкин, А. В. Липопротеиды высокой плотности как главный антиатерогснный фактор развития атеросклероза / А. В. Агейкин, А. Д. Алмакаева//Молодой ученый. -2015. -№1. -С. 139-141.

2. Алекперов, Э.З. Современные концепции о роли воспаления при атеросклерозе / Э.З. Алекперов, Р.Н. Наджафов // Кардиология. - 2010. - №6. -С. 88-91.

3. Андреева, Т.В. Анализ регуляторных РНК, связанных с развитием болезней мозга. Методическое пособие к практикуму «Генетика поведения когнитивных способностей. Норма и патология» / Т.В. Андреева, С.С. Кунижева. - Москва: Цифровичок, 2012. - 42с.

4. Аничков, Д.А. Новые маркеры сердечно-сосудистого риска: от исследований к клиническим рекомендациям / Д.А. Аничков, H.A. Шостак // Клиницист. - 2014. - №1. - С. 4-8.

5. Аронов, Д.М. Некоторые аспекты патогенеза атеросклероза / Д.М. Аронов, В.П. Лупанов //Атеросклероз и дислипидемии. - 2011. - № 1. - С. 48-56.

6. Атеросклероз. Современные представления и принципы лечения. Рекомендации BHOK / ред. Ефремовой O.A. - Научные ведомости Белгородского государственного университета. - 2009. — Т 67, №8. — С. 84-96.

7. Афтанс, Л.И. Полиморфизм гена транспортера дофамина DAT1 и индивидуальная вариабельность оборонительного рефлекса сердца у человека / Л.И. Афтанас, К.В. Локтев, П.В. Мирошникова и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2013. - Т. 156, №12. - С. 815-819.

8. Безруков, Н.С. Автоматизированная система "Medical Toolbox" для диагностики бронхиальной астмы по показателям реоэнцефалографии / Н.С. Безруков, Е.Л. Еремин, Е.В. Ермакова и др. // Медицинская информатика. -2006.-№1(11).-С. 73-80.

9. Бойцов, С.А. Субклинический атеросклероз как фактор риска сердечнососудистых осложнений / С.А. Бойцов, В.В. Кухарчук, Ю.А. Карпов и др. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2012. - Т 11, №3. - С. 82-86.

10. Гаврилова, Н.Е. Взаимосвязь между выраженностью коронарного атеросклероза, факторами риска и маркерами атеросклеротического поражения каротидных и периферических артерий / U.E. Гаврилова, В.А. Метельская, Н.В. Перова и др. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2013. - Т 12, №1.-С. 40-45.

11. Георгиевский, А.Б. К истории закона Харди-Вейнберга / А.Б. Георгиевский // Историко-биологические исследования. - 2011. - Т 3, № 1. — С. 63-75.

12. Гинтер, Е.К. Медицинская генетика / Е.К. Гинтер. - М.: Медицина, 2003. -448 с.

13. Григорьева, И.Н. Полиморфизма гена Аполипоротеина Е, желчнокаменная болезнь и панкреатит / И.Н. Григорьева, Т.М. Никитенко, Т.И. Романова и др. // Бюллетень СО РАМН. - 2006. - №4 (122). - С. 80-87.

14. Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации V пересмотр. ВНОК, секция атеросклероза // Российский кардиологический журнал. - Приложение I. - 2012. - № 4(96).

15. Дислииидемии и атеросклероз. Биомаркёры, диагностика и лечение: руководство для врачей / под ред. Р. Г. Оганова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. -160 с.

16. Здравоохранение в России. 2013: статистический сборник. - М.: Росстат, 2013.-380 с.

17. Игонина, H.A. Уровень холестерина в популяции взрослого населения РФ 2070 лет / H.A. Игонина, Е.А. Журавлева, Е.А. Кондрашева и др. // Атеросклероз и дислииидемии. - 2012. - №4. - С. 67-71.

18. Калинкин, М.Н. Атеросклероз: патофизиология, лечение, первичная профилактика / М.Н. Калинкин, B.C. Волков, В.В. Заварин. - Тверь: РИЦ ТГМА, 2009.-215 с.

19. Карпинская, E.B. МикроРНК в диагностике и типировании опухолей щитовидной железы человека / Е.В. Карпинская, С.Е. Титов, Ю.А. Веряскина и др. // Сибирский онкологический журнал. - 2013. - Приложение № 1. — С. 4950.

20. Карпов, P.C. Атеросклероз: патогенез, клиника, функциональная диагностика, лечение / P.C. Карпов, В.А. Дудко. - Томск, 1998. - 672 с.

21. Катина, М.Н. Роль генетического полиморфизма в формировании атеросклероза сосудов нижних конечностей / М.Н. Катина, Р.Ф. Гайфуллина,

B.В. Валиуллин и др. // Казанский медицинский журнал. - 2012. - Т 93, № 3. -

C. 513-516.

22. Коновалов, Г.А. Семейная гиперхолестеринемия: скрининг, диагностика и лечение детей и взрослых пациентов: клиническое руководство, подготовленное группой экспертов по семейной гиперхолестеринемии при Национальной липидной ассоциации США / Г.А. Коновалов, перевод с англ. // Атеросклероз и дислипидемии. - 2012. - № 1. - С. 4-11.

23. Корнеев, A.A. Условия применимости критериев Стьюдента и Манна-Уитни / A.A. Корнеев, А.Н. Кричевец // Психологический журнал. - 2011. - Т 32, № 1. -С. 97-110.

24. Коробов, Г.А. Ишемическая болезнь сердца: регулирование с помощью микроРНК / Г.А. Коробов, М.А. Сазонова, H.A. Собенин и др. // Кардиологический вестник. - 2011. - Т VI (XVIII), №2. - С. 5-9.

25. Корягина, H.A. Возможность применения антисклеротической терапии в условиях клинической практики / H.A. Корягина, A.B. Петрищев // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2012. - №4. - С. 31-35.

26. Кочетов, А.Г. Перспективы применения микроРНК в диагностике и терапии сердечной недостаточности / А.Г. Кочетов, ИЛЗ. Жиров, В.П. Масенко и др. // Кардиологический вестник. - 2014. - №2. - С. 62-67.

27. Куранов, Л.Л. Некоторые аспекты патогенеза атеросклероза и факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний / A.A. Куранов, М.С. Балеев, H.H. Митрофанова, В.Л. Мельников // Фундаментальные исследования. - 2014. -№10.-С. 1234-1237.

28. Кухарчук, В.В. Липидно-инфильтрационная теория. Действительно ли меняется сценарий? / В.В. Кухарчук // Кардиологический вестник. - 2009. - Т l(XVI), № 1.-С. 63-66.

29. Кухарчук, В.В. Современные и нерешенные вопросы в проблеме атеросклероза в первой декаде XXI века / В.В. Кухарчук // Терапевтический архив. - 2009. - №5. - С. 14-20.

30. Кучер, А.Н. Роль микро-РНК, генов их биогенеза и функционирования в развитии патологических состояний у человека / А.Н. Кучер, I I.П. Бабушкина // Медицинская генетика. -2011. -№1. - С. 3-13.

31. Мамедов, М.Н. Суммарный сердечно-сосудистый риск: от теории до практики / М.Н. Мамедов, H.A. Чепурина. - М.: Из-ние компании Д-р Редди'с, 2008. - 39 с.

32. Мглинцев, В.А. Нейросенсорная глухота. Генетические нарушения микроРНК / В.А. Мглинцев // Медицинская генетика. - 2012. - №2. - С. 11-15.

33. Менделевское наследование у человека [электр. рее.] // Медицинская база данных. URL: http://vvww.ncbi.nlm.nih.gov/omim (дата обращения: 21.03.2015).

34. Нагорнев, В.А. Современные представления о патогенезе атеросклероза / В.А. Нагорнев, А.Н. Восканьянц // Вестник Российской АМН. - 2006. - №9 -10. - С. 66-74.

35. Назаренко, Г.И. Структурные маркеры атеросклероза и генетические полиморфизмы в прогнозировании риска коронарных событий / Г.И. Назаренко, Е.Б. Клейменова, Р.Г. Романов // Ультразвуковая и функциональная диагностика. - 2008. - № 6. - С. 119-127.

36. Национальные клинические рекомендации ВНОК / под ред. Оганова Р.Г., Мамедова М.Н. - М.: МЕДИ Экспо», 2009. - 389 с.

37. Ожирение и избыточный вес. Информационный бюллетень №311 [электр. рес.] // Всемирная организация здравоохранения [Офиц. сайт]. URL: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs311/ru/ (дата обращения: 11.05. 2015).

38. Оганов, Р.Г. Новый способ оценки сердечно-сосудистого суммарного риска для населения России / Р.Г. Оганов, С.Л. Шальнова, A.M. Калинина и др. // Кардиология. - 2008. - №5. - С. 87-91.

39. Программа DeFinetti [электр. рес.] // Институт генетики человека (Мюнхен, Германия) [Офиц. Сайт]. URL: http://ihg2.helmholtz-muenchen.de/cgibin/hw/hwal .pi (дата обращения: 02.06.2015).

40. Рогаев, Е.И. МикроРНК человека в норме и патологии / Е.И. Рогаев, С.А. Боринская, Д.В. Исламгулов и др. // Молекулярная биология. - 2008. - Т 42, №5.-С. 751-764.

41. Руководство по лечению дислипидемий Европейского общества кардиологов и Европейского общества атеросклероза // Атеросклероз и дислипидемии. — 2011.-№4-С. 4-72.

42. Соловьёв, В. А. Статистический анализ в медицинских исследованиях: учеб. пособие / Д. В. Баженов, В. А. Соловьёв, Т. В. Шинкаренко. — Тверь: Ред.-изд. Центр Твер. Гос. Мед. акад., 2011. - 329 с.

43. Сошникова, JI.A. Многомерный статистический анализ / JI.A. Сошникова, В.Н. Томашевич. - М.: ЮНТИ-ДАНА, 1999.-598с.

44. Торшин, ИЛО. Сосудистые заболевания сердца, мозга и молекулярные гены. Ассоциативные исследования и патофизиология сосудистых заболеваний / ИЛО. Торшин, O.A. Громова // Трудный пациент. - 2008. - №2-3. - С. 15-19.

45. Торшин, ИЛО. Сосудистые заболевания сердца, мозга и молекулярные гены. Часть 2: роль молекулярных генов в системе гемостаза и формировании атеросклероза / ИЛО. Торшин, O.A. Громова // Трудный пациент. - 2008. - №4. -С. 5-11.

46. Торшин, И.Ю. Сосудистые заболевания сердца, мозга и молекулярные гены. Часть 3: роль молекулярных генов в вазоконстрикции, вазодилатации, обмене электролитов и в васкулярном ремоделировании / И.Ю. Торшин, O.A. Громова // Трудный пациент. - 2008. - № 5-6. - С. 8-11.

47. Уразалина, С.Ж. Динамика факторов риска и признаков субклинического атеросклероза у лиц с низким и умеренным риском по шкале SCORE при различной врачебной тактике ведения: итоги двухлетнего наблюдения / С.Ж. Уразалина, С.А. Бойцов, Т.В. Балахонова и др. // Терапевтический архив. -2012.-№9.-С. 58-64.

48. Федоров, A.B. Перспективы использования микроРНК в качестве биомаркера ишемического повреждения миокарда / A.B. Федоров, A.A. Костарева, М.М. Галагудза и др. // Региональное кровообращение и микроциркуляция. - 2012. - Т 11, №3(43).-С. 69-75.

49. Федоров, A.B. Современные методы модулирования и визуализация эндогенных микроРНК / A.B. Федоров, A.A. Костарева // Бюллетень Федерального центра сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова. -2012. -№5. - С. 77-81.

50. Чазова, И.Е. Диагностика и лечение артериальной гипертензии (Рекомендации Российского медицинского общества по артериальной гипертонии и Всероссийского научного общества кардиологов) / И.Е. Чазова, Л.Г. Ратова, С.А. Бойцов//Системные гипертензии. -2010. -№ 3. - С. 5-27.

51. Шевченко, С. П. Современные клинические и молекулярно-генетические подходы к диагностике и лечению рака щитовидной железы: автореф. дис. ... д-ра мед. наук: 14.01.12 / Шевченко Сергей Петрович. - Новосибирск. — 2011. — 40 с.

52. Щеглова, Н.Е. Особенности полиморфизма генов AGOl, DGCR8, GEMIN4, DROSIIA у больных с гипертонической болезнью и постинфарктным кардиосклерозом / Н.Е. Щеглова, М.Н. Калинкин // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. - 2014. - №2. - С. 7-11.

53. Щеглова, Н.Е. Особенности экспрессии проангиогенных miR- 126 и miR-155 у больных с гипертонической болезнью и постинфарктным кардиосклерозом / Н.Е. Щеглова, М.Н. Калинкин // Врач-Аспирант. - 2015. - № 2(69). - С. 104 -108 .

54. Якушин, С. Профилактика сердечно-сосудистых заболеваний: курс на здоровый образ жизни / С. Якушин, Е. Филиппов // Врач. - 2011. - №9. - С. 2-7.

55. Alexiou, P. MiRGen 2.0: a database of microRNA genomic information and regulation / P. Alexiou, T. Vergoulis, M. Gleditzsch et al. // Nucleic Acids Research. -2010.-Vol. 38.-P. 137-141.

56. Ambros, V. MicroRNAs: Tiny Regulators with Great Potential / V. Ambros // Cell. 2001.-Vol. 107.-P. 823-826.

57. Backes, C. A dictionary on microRNAs and their putative target pathways / C. Backes, E. Meese, II. Lenhof, A. A. Keller // Nucleic Acids Research. - 2010. - Vol. 38(13).-P. 4476-4486.

58. Borel, C. Functional genetic variation of human miRNAs and phenotypic consequences / C. Borel, S.E. Antonarakis // Mamm. Genome. - 2008. - Vol. 19. - P. 503-509.

59. Bronze-da-Rocha, E. MicroRNAs Expression Profiles in Cardiovascular Diseases / E. Bronze-da-Rocha // BioMed Research International. - 2014. - ID 985408.

60. Cerda, A. Role of microRNAs 221/222 on Statin Induced Nitric Oxide Release in Human Endothelial Cells / A. Cerda, C.M. Fajardo, R.G. Basso et al. // Arq Bras Cardiol. - 2015. - Vol. 104(3). - P. 195-200.

61. Charroux, B. Gemin4: A Novel Component of the SMN Complex That It Found in both Gems and Nucleoli / B. Charroux, L. Pellizzoni, R.A. Perkinson et al. // J. Cell Biol.-2000.-Vol. 148(6). - P. 1177-1 186.

62. Chen, K. Polymorphisms in microRNA targets: a gold mine for molecular epidemiology / K. Chen, F. Song, G., Calin et al. // Carcinogenesis. - 2008. - Vol. 29(7).-P. 1306-1311.

63. Chen, L. Role of mieroRNAs in atherosclerosis and restenosis / L. Chen, S.H. Lim, Y. Yeh et al. // Journal of Biomedical Science. - 2012. - Vol. 19(79). - doi: 10.1186/1423-0127-19-79.

64. Chen, S. Candidate genetic analysis of plasma high-density lipoprotein-cholesterol and severity of coronary atherosclerosis / S. Chen, M. Cilingiroglu, J. Todd et al. // BMC Medical Genetics. - 2009. — Vol. 10(111). — doi: 10.1186/1471 -2350-10-111.

65. Cirera, S. Expression profiles of miRNA-122 and its target CAT1 in Minipigs (Sus scrofa) Fed a high-cholesterol diet / S. Cirera, M. Birck, P.K. Busk, M. Fredholm // Comparative Medicine. - 2010. - Vol. 60(2). - P. 136-141.

66. Companioni, O. Genetic Variants, Cardiovascular Risk and Genome-Wide Association Studies / O. Companioni, F.R. Esparragorn, A.M. Fernarndez-Aceituno, J. C. Rodrirguez Perreza // Rev. Esp. Cardiol. -2011.- Vol. 64(6). - P.509-514.

67. Dentelli, P. MicroRNA-222 controls neovascularization by regulating signal transducer and activator of transcription 5A expression / P. Dentelli, A. Rosso, F. Orso et al. //Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. -2010. - Vol. 30.-P. 1562-1568.

68. Donners, M. Hematopoetic miR155 Deficiency Enhances Atherosclerosis and Decreases Plaque stability in Hyperlipidemic Mice / M. Donners, I. Wolfs, L.J. Stoeger et al. // PLos ONE. - 2012. - Vol. 7:e35877.

69. Elton, T.S. Cardiovascular Disease, Single Nucleotide Polymorphisms: and the Renin Angiotensin System: Is There a MicroRNA Connection? / T.S. Elton, S.E. Sansom, M.M. Martin // International Journal of Hypertension. - 2010. - Vol. 2010. -doi: 10.4061/2010/281692.

70. Fan, P. MiRNA Biogenesis Enzyme Drosha Is Required for Vascular Smooth Muscle Cell Survival / P. Fan, Z. Chen, P. Tian et al. // PLos ONE. - 2013. - Vol. 8(4) - e60888.

71. Fang, Y. MicroRNA-10a regulation of proinflammatory phenotype in athero-succeptible endothelium in vivo and in vitro / Y. Fang, C. Shi, E. Manduchi et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2010. - Vol. 107(30). - P. 13450-13455.

72. Fasarano, P. MicroRNA: Emerging therapeutic targets in acute ischemic diseases / P. Fasarano, S. Greco, M. Ivan et al. // Pharmacology & Therapeutics. - 2010. — Vol.125.-P. 92-104.

73. Fuller, A.M. MiRiad Roles for MicroRNAs in Cardiac Development and Regeneration / A.M. Fuller, L. Qian // Cells. - 2014. - Vol. 3. - P. 724-750.

74. Georges, M. Polymorphism MicroRNA-Target Interactions: A Novel Source of Phenotypic Variation / M. Georges, A. Clop, F. Marco et al. // Cold. Spring. Harb. Symp. Quant. Biol. - 2006. - Vol. 71. - P. 343-350.

75. Gibbings, D. Selective autophagy degrades DICER and AG02 and regulates miRNA activity / D. Gibbings, S. Mostowy,F. Jay et al. // Nat. Cell. Biol. - 2012. -Vol. 14(12). - P. 1314-1321.

76. Gong, M. Caspases cleave and inhibit the microRNA processing protein DiGeorge Critical Region 8 / M. Gong, Y. Chen, R. Senturia et al. // Protein Science. - 2012. -Vol.21.-P. 797-808.

77. Grundtman, C. The autoimmune concept of atherosclerosis / C. Grundtman, G. Wick // Curr. Opin. Lipidol. -2011. - Vol. 22(5). - P. 327-334.

78. Haas, U. MicroRNA-mediated regulation of gene expression is affected by disease-associated SNPs within the 3'-UTR via altered RNA structure / U. Haas, G. Sczakiel, S.D. Laufer // RNA Biology. - 2012. - Vol. 9(6). - P. 924-937.

79. Herbert, K.M. Phosphorylation of DGCR8 Increases Its Intracellular Stability and Induces a Progrowth miRNA Profile / K.M. Herbert, G. Pimienta, S.J. DeGregorio et al. // Cell Reports. - 2013. - Vol. 5(4). - P. 1070-81.

80. Hold, L.M. From genotype to phenotype in human atherosclerosis - recent findings / L.M. Hold, D. Teupser // Curr. Opin. Lipidol. - 2013. - Vol. 24(5). - P. 410-418.

81. Hopkins, P. N. Molecular biology of atherosclerosis / P. N. Hopkins // Physiol. Rev.-2013.-Vol. 93(3).-P. 1317-542.

82. Horie, T. MicroRNAs and Lipoprotein Metabolism / T. Horie, O. Baba, Y. Kuwabara et al. //J. Atheroscler. Thromb. - 2014. - Vol. 21(1). - P. 17-22.

83. Hu, J. MiR-126 promotes angiogenesis and attenuates inflammation after contusion spinal cord injury in rats / J. Hu, L. Zcng, J. Huang et al. // Brain Research. - 2015. -Vol. 1608.-P. 191-202.

84. Hulsmans, M. MicroRNA-containing microvcsicles regulating inflammation in association with atherosclerotic disease / M. Hulsmans, P. Holvoet // Cardiovascular Research.-2013.-Vol. 100.-P. 7-18.

85. Jamaluddin, S. MiRNAs: roles and clinical applications in vascular disease / S. Jamaluddin, S.M. Weakley, L. Zhang et al. // Expert. Rev. Mol. Diagn. - 2011. -Vol. 11(1). - P. 79-89.

86. Jiang, Y. Peripheral blood miRNAs as a biomarker for chronic cardiovascular diseases / Y. Jiang, H. Wang, II. Cao et al. // Sei. Rep. - 2014. - Vol. 4. -doi: 10.1038/srep05026.

87. John, B. Human MicroRNA Targets / B. John, A.J. Enright, A. Aravin et al. // PLoS Biol. - 2004. - Vol. 2(11). — P. 1862-1879.

88. Kalozoumi, G. MicroRNAs in heart failure: Small molecules with major impact / G. Kalozoumi, M. Yacoub, D. Sanoudou // Global Cardiology Science and Practice. -2014.-Vol. 30.-P. 79-102.

89. Keller, A. MiRNA in lung cancer - Stadying complex fingerprints in patient's blood cells by microarray experiments / A. Keller, P. Leidinger, A. Borries et al. // BMC Cancer. - 2009. - Vol. 9(353). - doi: 10.1186/1471-2407-9-3.

90. Keller, A. Stable serum miRNA profiles as potential tool for non-invasive lung cancer diagnosis / A. Keller, P. Leidinger, R. Gislefoss et al. // RNA Biology. -2011.-Vol. 8(3).-P. 506-516.

91. Keller, A. Toward the blood-borne miRNome of human diseases / A. Keller, P. Leidinger, A. Bauer et al. // Nature Methods. - 2011. - Vol. 8( 10). - P. 841 -845.

92. Kinch, S.H. Risk factors in ischemic heart disease / S.H. Kinch, J.T. Doyle, II.E. Hilleboe // Am J Public Health Nations Health. - 1963. - Vol. 53(3). - P. 438-442.

93. Kovacic, S. Genetic Susceptibility to Atherosclerosis / S. Kovacic, M. Bakran // Stroke Research and Treatment. - 2012. - Vol. 2012. - doi: 10.1155/2012/362941.

94. Kroh, E.M. Analysis of circulating microRNA biomarkers in plasma and serum using quantitative reverse transcription-PCR (qRT-PCR) / E.M. Kroh, R.K. Parkin, P.S. Mitchell, M. Tewari // Methods. - 2010. - Vol. 50. - P. 298-301.

95. Kukreja, R.C. MicroRNAs: New Players in Cardiac Injury and Protection / R.C. Kukreja, C. Yin, F.N Salloum // Molecular Pharmacology. - 2011. - Vol. 80. - P. 558-564.

96. Lai, E.C. Predicting and validating microRNA targets / E.C. Lai // Genome Biology. - 2004. - Vol. 5(9). - doi:10.1186/gb-2004-5-9-l 15.

97. Lamba V. Identification of suitable reference genes for hepatic microRNA quantitation / V. Lamba , Y. Ghodke-Puranik , W. Guan , J.K. Lamba // BMC Research Notes. - 2014. - Vol. 7(129) - doi: 10.1186/1756-0500-7-129.

98. Leidinger, P. High-throughput miRNA profiling of human melanoma blood samples / P. Leidinger, A. Keller, A. Borries et al. // BMC Cancer. - 2010. - Vol. 10(262) - doi: 10.1186/1471 -2407-10-262.

99. Leidinger, P. Specific peripheral miRNA profiles for distinguishing lung cancer from COPD / Leidinger P., A. Keller, A. Borries et al. // Lung Cancer. — 2011.— Vol.74.-P. 41-47.

100. Lenkala, D. MicroRNA biogenesis and cellular proliferation / D. Lenkala, E.R. Gamazon, B. LaCroix et al. // Trans. Res. - 2015. - doi: 10.1016/j.trsl.2015.01.012

101. Leung, A. Novel Long Non-Coding RNAs Are Regulated by Angiotensin II in Vascular Smooth Muscle Cells / A. Leung, C. Trac, W. Jin et al. // Circ. Res. -2013.-Vol. 113(3).-P. 266-278.

102. Life technologies [Electronic resource]. URL: https://www.lifetechnologies.com (accessed: 22.12.2014).

103. Liu, J. Genetic variants in the microRNA machinery gene GEMIN4 are associated with risk of prostate cancer: a case-control study of the Chinese han population / J. Liu, Jin. Liu, M. Wei et al. // DNA and Cell Biology. - 2012. - Vol. 31(7). - P. 1296-1302.

104. Liu, X. A necessary role of miR-221 and miR-222 in vascular smooth muscle cell proliferation and neointimal hyperplasia / X. Liu, Y. Cheng, S. Zhang et al. // Circ. Res. - 2009. - Vol. 104(4). - P. 476-487.

105. Liu. X. Cell-specific effects of miR-221/222 in vessels: molecular mechanism and therapeutic application / X. Liu, Y. Cheng, J. Yang // J. Mol. Cell. Cardiol. - 2012. -Vol. 52(1).-P. 245-255.

106. Liu, Z.R. Detection of miR-122a and miR-224 expression in hepatocellular carcinoma by real-time fluorescence quantitative RT-PCR / Z.R. Liu, X.W. Chen, X.H. Qiao et al. // Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. - 2009. - Vol. 29(4). -P.751-753.

107.Livak, K. J. Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real- Time Quantitative PCR and the 2-AACt Method / K. J. Livak, T. D. Schmittgen // Methods. - 2001. - Vol. 25(4) - P. 402-408.

108. Long, G. Circulating miR-30a, miR-126 and let-7b as biomarker for ischemic stroke in humans / G. Long, F. Wang, II. Li et al. // BMC Neurology. - 2013. - Vol. 13(178)-doi:10.1186/1471-2377-13-178.

109. Macias, S. DGCR8 IIITS-CLIP reveals novel function for the Microprocessor / S. Macias, M. Plass, A. Stajuda // Nat. Struct. Mol. Biol. - 2012. - Vol. 19(8). - P. 760766.

110. Mattiske, S. Tap63 regulates oncogenic miR-155 to mediate migration and tumor growth / S. Mattiske, K. Ho, J. Noll // Oncotarget. - 2013. - Vol. 4(11). - P. 19841903.

111. Meder, B. MicroRNA signatures in total peripheral blood as novel biomarkers for acute myocardial infarction / B. Meder, A. Keller, B. Vogel et al. // Basic Res. in Cardiol.-2011.-Vol. 106(1).-P. 13-23.

112.Meola, N. MicroRNAs and genetic diseases / N. Meola, V.A. Gennarino, S. Banfi // PathoGenetics. - 2009. - Vol. 2(7). - doi: 10.1186/1755-8417-2-7.

113. Mestdagh, P. A novel and universal method for microRNA RT-qPCR data normalization / P. Mestdagh, P.V. Vlierberghe, A.D. Weer et al. // Genom. Biology. -2009. - Vol. 10(6):R64. - doi: 10.1186/gb-2009-10-6-r64.

114.Mishra, P.J. MicroRNA polymorphisms: the future of pharmacogenomics, molecular epidemiology and individualized medicine / P.J. Mishra, J.R. Bertino // Pharmacogenomics. - 2009. - Vol. 10(3). - P. 399-416.

115. Moore, K.J. The role of microRNAs in cholesterol efflux and hepatic lipid metabolism / K.J. Moore, K.J. Rayner, Y. Suarez, C. Fernandez-Hernando // Annu.Rev.Nutr. - 2011. - Vol. 31. - P. 49-63.

116. Navidshad, B. Correlation Coefficients Between Different Methods of Exspressing Bacterial Quantification Using Real Time PCR / B. Navidshad, J.B. Liang, M.F. Jahromi // Int. J. Mol. Sci. - 2012. - Vol. 13. - P. 2119-2132.

117. Nishiguchi, T. MicroRNAs and Cardiovascular Diseases / T. Nishiguchi, T. Imanishi, T. Akasaka // BioMed Research International. - 2015. - Vol. 2015. -doi:10.1155/2015/682857

118. Obsteter, J. Genetic variability of microRNA regulóme in human / J. Obsteter, P. Dove, T. Kunej // Molecular Genetics & Genomic Medicine. - 2015. - Vol. 3(1). -P. 30-39.

119. Ono, K. MicroRNAs and cardiovascular diseases / K. Ono, Y. Kuwabara, J. Han // FEBS. J.-2011.-Vol. 278( 10). - P. 1619-1633.

120. Port, J.D. Role of microRNAs in cardiovascular disease: therapeutic challenges potentials / J.D. Port, C. Sucharov // J. Cardiovasc. Pharmacol. - 2010. - Vol. 56(5). -P. 444-453.

121. Raitoharju, E. MicroRNAs in the Atherosclerotic Plaque / E. Raitoharju, N. Oksala, T. Lehtimaeki // Clinical Chemistry. -2013. - Vol. 59 (12).-P. 1708-1721.

122. Roberts, R. Genetics of coronary artery disease: an update / R. Roberts // Methodist Debakey Cardiovasc. J. - 2014. - Vol. 10( 1). - P. 7-12.

123. Sanders, I. Evaluation of reference genes for the analysis of serum miRNA in patients with prostate cancer, bladder cancer and renal cell carcinoma / I. Sanders, S. Holdenrieder, G. Walgenbach-Brunage et al. // International Journal of Urology. -2012.-Vol. 19. - P. 1017-1025.

124. Schofield, C.M. Monoallelic deletion of the microRNA biogenesis gene Dgcr8 produces deficits in the development of excitatory synaptic transmission in the prefrontal cortex / C.M. Schofield, R. Hsu, A.J. Barker et al. // Schofield et al. Neural. Development. - 2011. - Vol. 6(11). - doi: 10.1186/1749-8104-6-11.

125. Sethupathy, P. MicroRNA target site polymorphisms and human disease / P. Sethupathy, F.S. Collins // Trends in Genetics. - 2008. - Vol. 24(10). - P. 489-497.

126. Shah, A.A. MiRNA expression patterns in Tff2 knock-out mice correlate with cellular pathways of neoplastic development and caloric metabolism / A. A. Shah, P. Leidinger, A. Keller // Int. J. Mol. Med. - 2012. - Vol. 29(4). - P. 637-643.

127. Shah, A.A. MiRNA: Small molecules as potential novel biomarkers in cancer / A.A. Shah, P. Leidinger, N. Blin, E. Meese // Current Medicinal Chemistry. - 2010. -Vol. 17.-P. 4427-4432.

128. Shah, A.A. Profiling of regulatory microRNA transcriptomes in various biological processes: a review / A.A. Shah, E. Meese, N. Blin // J. Appl. Genet. - 2010. - Vol. 51 (4). - P. 501-507.

129. Silvestre-Roig, C. Atherosclerosis Plaque Destabilization: Mechanism, Models, and Therapeutic Strategies / C. Silvestre-Roig, M.P. Winther, C. Weber et al. // Circ. Res. -2014. - Vol. (114). - P. 214-226.

130. Singhm I.M. High-density lipoprotein as a therapeutic target: a systematic review / I.M. Singh, M.H. Shishehbor, B.J. Ansell // JAMA. - 2007. - Vol. 298 (7). - P. 786-798.

131. Sivapalaratnam, S. Genome-Wide Association Studies in Atherosclerosis / S. Sivapalaratnam, M. M. Motazacker, S. Maiwald et al. // Curr. Atheroscler. Rep. -2011.-Vol. 13. - P.225-232.

132. Sluijter, J. P. Circulating MicroRNA Profiles for Detection of Peripheral Arterial Diseases / J.P. Sluijter, P. A. Doevendans // Circ. Cardiovasc. Genet. - 2013. - Vol. 6. -P. 441-443.

133. Song, J. Identification of Suitable Reference Genes for qPCR Analysis of Serum microRNA in Gastric Cancer Petients / J. Song, Z. Bai // Dig. Dis. Sci. -2012. -Vol. 57(4). - P. 897-904.

134. Staszcl, T. Role of microRNAs in endothelial cell pathophysiology / T. Staszel, B. Zapala, A. Polus et al. // Pol. Arch. Med. Wewn. - 2011. - Vol. 121 (10). - P. 361367.

135.Stather, P.W. Differential MicroRNA Expression Profiles in Peripheral Arterial Disease / Stather P.W., Sylvius N., Wild J.B. et al. // Circ. Cardiovasc. Genet. -2013. - Vol. 6 (5).-P. 490-497.

136. Stefano, V.D. MicroRNAs as peripheral blood biomarkers of cardiovascular disease / V.D. Stefano, G. Zaccagnini, M.C. Capogrossi, F. Martelli // Vascular Phannacology.-2011. - Vol. 55. - P. 111-118.

137. Sun, X. Circulating microRNA-126 in patients with coronary artery disease: correlation with LDL cholesterol / X. Sun, M. Zhang, A. Sanagawa et al. // Thrombosis Journal. - 2012. - Vol. 10( 16) - doi: 10.1186/1477-9560-10-16.

138. Sun, X. Endothelial MicroRNAs and Atherosclerosis / X. Sun, N. Belkin, M.W. Feinberg // Curr Atheroscler Rep. - 2013. - Vol. 15(12):372.

139. Tevfik Dorak, M. Real-time PCR / M. Tevfik Dorak. - Taylor & Francis Group, an informa business, 2006. - 333 p.

140. Toba, I I. Application of miRNA Technology for Atherosclerosis / H. Toba, M.L. Lindsey, R.J. Chilton et al. // Curr Atheroscler Rep. - 2014. - Vol. 16 (2). -doi:10.1007/sl 1883-013-0386-9.

141.Topkara, V.K. Role of microRNAs in cardiac remodeling an heart failure / V.K. Topkara, D.L. Mann // Cardiovasc. Drugs Ther. - 2011. - Vol.25. - P. 171-182.

142. Thum, T. MicroRNA therapeutics in cardiovascular medicine / T. Thum // EMBO Mol. Med. -2011. - №4. -P. 3-14.

143. Thum, T. MicroRNAs in the Human Heart: A Clue to Fetal Gene Reprogramming in Heart Failure / T. Thum, P. Galuppo, C. Wolf et al. // Circulation. - 2007. - Vol. 116. - P. 258-267.

144. Turchinovich, A. Distinct AGOl and AG02 associated miRNA profiles in human cells and blood plasma / A. Turchinovich, B. Burwinkel // RNA Biology. — 2012. — Vol. 9 (8).-P. 1066-1075.

145. Urbich, C. Role of microRNAs in vascular diseases, inflammation, and angiogenesis / C. Urbich, A. Kuehbacher, S. Dimmeier // Cardiovascular Research. -2008.-Vol. 79. -P. 581-588.

146. Vogt, A. The genetics of familial hypercholesterolemia and emerging therapies / A. Vogt // Appl Clin Genet. - 2015. - Vol. 28 (8). - P. 27-36.

147. Wilfred, B.R. Energizing miRNA research: a review of role of miRNAs in lipid metabolism, with a prediction that miR-103/107 regulates human metabolic pathways / B.R. Wilfred, W-X. Wang, P.T. Nelson // Mol Genet Metab. - 2007. -Vol.91 (3).-P. 209-217.

148. Wilker, E.H. Black Carbon Exposures, Blood Pressure, and Interactions with Single Nucleotide Polymorphisms in MicroRNA Processing Genes / E.H. Wilker, A. Baccarelli, H. Sun et al. // Environmental Health Perspectives. - 2010. - Vol. 118 (7). - P. 943-948.

149. World health statistics 2014 [Electronic Resource] / M. Ali, K. Aseel, E. Bertherat et al.; ed. T. Waddell. - Italy: WHO, 2014. - 180 p. - URL: http:// http://apps. who.int/iris/bitstream/10665/112738/1/978924069267 l_eng.pdf (date accessed: 15.05.2014).

150. Zhang, B.K. Epigenetics in atherosclerosis: a clinical perspective / B.K. Zhang, X. Lai, S.J. Jia // Discov Med. - 2015. - Vol. 19 (103). - P. 73-80.

151. Zhang, Y. Profiling of 95 MicroRNAs in Pancreatic Cancer Cell Lines and Surgical Specimens by Real Time PCR Analysis / Y. Zhang, M. Li, H. Wang et al. // World. J. Surg. - 2009. - Vol. 33 (4). - P. 698-709.

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

Таблица - 1 Наиболее часто изучаемые полиморфизмы генов-

кандидатов атеросклероза................................... 15

Рисунок - 1 Рисунок 1 - Биогенез микроРНК 23

Таблица - 2 Полиморфизмы изученных генов-кандидатов,

участвующих в биогенезе микроРНК..................... 31

Таблица - 3 Числовые характеристики выборки «Контрольная

группа»........................................................... 33

Таблица - 4 Числовые характеристики выборки

«Гипертоническая болезнь»................................... 33

Таблица - 5 Числовые характеристики выборки «ИБС

постинфарктный кардиосклероз».......................... 34

Рисунок - 2 Распределение контрольной группы и больных ГБ и

ИБС ПИКС по ИМТ, абс. (%).............................. 37

Таблица — 6 Сравнительные характеристики средних показателей ИМТ в группе контроля, группах больных ГБ и ИБС

ПИКС (М±т).................................................. 37

Таблица - 7 Содержание ОХС и ХС ЛПВП в плазме крови в группах контроля, больных ГБ и ИБС ПИКС

(М±т)................................................................. 38

Рисунок - 3 Сравнительные показатели концентрации ОХС в контрольной группе и в группах больных ГБ и ИБС

ПИКС............................................................ 38

Таблица - 8 Сравнительная характеристика средних показателей КА в группе контроля, больных ГБ и ИБС ПИКС

(М±ш)............................................................ 39

Таблица - 9 Частота генотипов полиморфизмов исследуемых генов AGOl, DGCR8, GEMIN3, GEMIN4, DROSHA у

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

больных ГБ и ИБС ПИКС............................................................41