Механизм изменений иммунного статуса при экспериментальной термической травме в условиях применения новой лекарственной формы с эритропоэтином тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Саедгалина Оксана Тагировна

• Саедгалина Оксана Тагировна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Саедгалина Оксана Тагировна

ВВЕДЕНИЕ................................................................................................................................................5

ГЛАВА 1 Роль изменений иммунного статуса в патогенезе и современные направления его коррекции при термической травме

(обзор литературы)....................................................................................................................................13

1.1 Иммунный статус организма при термической травме............................13

1.1.1 Роль изменений локального и системного врожденного иммунитета в патогенезе термической травмы..............................................................14

1.1.2 Роль изменений адаптивного иммунитета в патогенезе термической травмы..............................................................................................................................................................17

1.1.3 Дизрегуляция иммунного ответа при термической травме............19

1.2 Эритропоэтин: общая характеристика, методы получения,

механизм действия, плейотропные эффекты..................................................................21

1.2.1 Анализ ассортимента лекарственных форм с эритропоэтином..........27

1.3 Фармацевтические аспекты терапии термической травмы........................28

1.4 Методы стандартизации лекарственных форм с эритропоэтином.... 32 ГЛАВА 2 Материалы и методы исследования....................................................................................36

2.1 Экспериментальная часть исследований........................................................................................36

2.1.1 Эксперименты в условиях in vivo........................................................................................................36

2.2 Методы исследования..............................................................................................................................................38

2.2.1 Иммунологические методы исследования..................................................................................38

2.2.2 Биохимические методы..................................................................................................................42

2.2.3 Морфологические методы исследования..............................................................46

2.2.4 Фармацевтические методы........................................................................................................................47

2.2.5 Статистические методы..............................................................................................................53

ГЛАВА 3 Результаты собственных исследований и их обсуждение. 54

3.1 Изменение иммунного статуса при экспериментальной

термической травме..................................................................................................................................54

3.1.1 Динамика показателей врожденного и адаптивного иммунитета

при экспериментальной термической травме................................. 54

3.1.2 Механизм изменений иммунного статуса при экспериментальной термической травме..............................................................................62

3.1.3 Морфология очага повреждения и репаративные процессы при экспериментальной термической травме....................................... 78

3.1.4 Концентрация эритропоэтина в сыворотке при экспериментальной термической травме....................................... 83

3.2 Влияние системного введения эритропоэтина на иммунный статус

при экспериментальной термической травме................................. 86

3.2.1 Концентрация эритропоэтина в крови в условиях его системного применения при экспреиментальной термической травме................. 86

3.2.2 Влияние системного введения эритропоэтина на показатели врожденного и адаптивного иммунитета при экспериментальной термической травме................................................................ 88

3.2.3 Механизм влияния эритропоэтина при системном введении на иммунный статус при экспериментальной термической травме.......... 99

3.2.4 Влияние системного применения эритропоэтина на морфологию очага повреждения и репаративные процессы при экспериментальной термической травме................................................................. 114

3.3 Экспериментально-теоретическое обоснование состава и стандартизация трансдермальной лекарственной пленки с эритропоэтином................................................................. 121

3.3.1 Фармакотехнологическое исследование составов пленок......... 121

3.3.2 Выбор дозы эритропоэтина для местного применения в составе трансдермальной пленки................................................... 123

3.3.3 Биофармацевтические исследования составов пленок с эритропоэтином..................................................................... 124

3.3.4 Фармацевтические исследования трансдермальной пленки с

эритропоэтином.............................................................. 131

3.3.5 Определение стабильности и микробиологической чистоты

трансдермальной пленки с эритропоэтином.................................. 137

3.4 Влияние локального применения трансдермальной пленки с эритропоэтином на иммунный статус при экспериментальной термической травме................................................................ 138

3.4.1 Влияние локального применения эритропоэтина в составе трансдермальной пленки на показатели врожденного и адаптивного иммунитета при экспериментальной термической травме.................. 138

3.4.2 Механизм изменений иммунного статуса в условиях местного применения эритропоэтина в составе трансдермальной пленки при экспериментальной термической травме....................................... 147

3.4.3 Морфология очага повреждения при экспериментальной термической травме в условиях применения трансдермальной пленки

с эритропоэтином.................................................................... 160

ЗАКЛЮЧЕНИЕ....................................................................... 169

ВЫВОДЫ...................................................................................................... 186

Практические рекомендации................................................... 188

Список используемых сокращений.......................................... 188

Список литературы............................................................... 191

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизм изменений иммунного статуса при экспериментальной термической травме в условиях применения новой лекарственной формы с эритропоэтином»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Ожоги представляют глобальную медико-социальную проблему. По оценкам ВОЗ, в мире ежегодно страдают от ожогов различной степени тяжести более 1 млн. человек. В России ежегодно регистрируется 400 тысяч пострадавших от ожогов. На долю термической травмы (ТТ) приходится более 90% ожогов, в т.ч. воздействие огнем, горячей водой, паром, горячими объектами и другие. 70% пострадавших от ожогов имеют ограниченные по площади поражения различной степени тяжести [4, 37, 58, 104, 175]. В литературе представлены обширные сведения об иммунологических аспектах патогенеза ТТ, включающие изменения активности клеточных и гуморальных факторов как в очаге повреждения (кератиноцитов, нейтрофилов, дендритных клеток, тканевых базофилов, макрофагов, Т-клеток, тромбоцитов, фибробластов), так и на системном уровне (нейтрофилов, моноцитов, субпопуляций Т- и В-лимфоцитов, системы комплемента, иммуноглобулинов, цитокинов). В большинстве случаев выраженность указанных изменений зависит от площади и глубины повреждения. Основной проблемой в лечении ТТ является развитие как системных (вторичный иммунодефицит, сепсис, септический шок, полиорганная недостаточность), так и местных осложнений (инфицирование раневой поверхности, образование патологических рубцов, нарушение двигательных функций), патогенез которых связан, в том числе, с изменениями иммунного статуса [193].

Имеются сведения о положительном применении некоторых факторов роста (ТСЕ-р3, гШаБ, КОБ, Бар) для лечения ран и ожогов [47, 90, 183, 184]. Не меньший интерес представляет возможность применения эритропоэтина (ЭПО) для терапии ТТ, который можно отнести по своим свойствам одновременно к медиаторам, факторам роста и гормонам. ЭПО и его биотехнологические производные могут инициировать и регулировать процессы репарации повреждений кожи, в том числе и термических, ускорять заживление.

Привлекают внимание обнаруженные антиоксидантные свойства ЭПО, которые при ТТ могут способствовать ограничению зоны вторичной альтерации. Ранее нами продемонстрированы нейротропные, нефроцитопротекторные, гемостазиологические и иммунотропные эффекты ЭПО при почечной недостаточности [41, 43, 44]. Последние обусловлены наличием рецепторов к ЭПО на иммунокомпетентных клетках, что является предпосылкой для системного и местного применения ЭПО для коррекции нарушений иммунного статуса при ТТ. Однако местное применение ЭПО ограничено из-за отсутствия соответствующих лекарственных форм. В связи с этим, актуальным может быть создание местной лекарственной формы с эритропоэтином.

Ассортимент лекарственных средств для местного лечения ТТ включает кремы, мази, линименты, аэрозольные препараты, порошки, растворы, эмульсии для наружного применения, содержащие антимикробные средства, антисептические средства, анальгетики и др. Несмотря на несомненные успехи, достигнутые в местном лечении ожоговых ран, сохраняется необходимость в постоянном совершенствовании и разработке новых методов и средств. В настоящее время трансдермальный путь доставки лекарств является одним из самых успешных и инновационных [75, 131]. Трансдермальные терапевтические системы нашли признание из-за простоты употребления и высокой эффективности. Трансдермальная лекарственная пленка (ТДП) на основе биополимера может способствовать равномерному постепенному дозированию ЭПО, препятствуя его инактивации в очаге ТТ.

Цель исследования

Исследовать механизм изменений иммунного статуса и разработать новую лекарственную форму, содержащую эритропоэтин, для локального применения при экспериментальной термической травме.

Задачи исследования

1. Исследовать показатели врожденного и адаптивного иммунитета, цитокиновый профиль крови, показатели гибели лимфоцитов крови, свободно-радикального

окисления в крови, клеточный состав и репарацию в очаге повреждения в динамике экспериментальной термической травмы.

2. Исследовать показатели врожденного и адаптивного иммунитета, цитокиновый профиль крови, показатели гибели лимфоцитов крови, свободно-радикального окисления в крови, клеточный состав и репарацию в очаге повреждения при экспериментальной термической травме в условиях системного применения эритропоэтина.

3. На основании проведения фармакотехнологических, биофармацевтических и фармацевтических исследований обосновать состав, разработать технологию получения и методики стандартизации новой трансдермальной лекарственной пленки с эритропоэтином для оценки степени высвобождения, качественного и количественного определения действующего вещества.

4. Исследовать показатели врожденного и адаптивного иммунитета, цитокиновый профиль крови, показатели гибели лимфоцитов крови, свободно-радикального окисления в крови, клеточный состав и репарацию в очаге повреждения в динамике экспериментальной термической травмы в условиях применения трансдермальной пленки с эритропоэтином.

Методология и методы исследования

Методология диссертационной работы была спланирована в соответствии с целью и задачами исследования. Организация исследования одобрена этическим комитетом ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России (протокол №11 от 17.11.2016). Экспериментальные исследования выполнены на 260 белых нелинейных крысах массой 220±20 г. в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS № 123 от 18.03.1986, Страсбург), Рекомендациями Европейской Комиссии 2007/526/ЕС от 18 июня 2007 года, Директивой 2010/63/^ европейского парламента и совета европейского союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях. Для создания модели ТТ ША степени и относительной площадью 3,50% использовали приспособление из термостойкого пластика с диаметром отверстия 38 мм, в

которое помещали животное, находящееся под общим наркозом. Подготовленный участок межлопаточной области кожи совмещали с отверстием приспособления, животное фиксировали. Обособленный участок кожи погружался в горячую очищенную воду с температурой 98-990 С на 12 с. Через 24 часа после ТТ проводили иссечение некротизированных участков раны. Глубину ожога проверяли с помощью морфологических методов исследования кожи в области травмы.

Забор крови осуществляли на 3, 5, 8 и 14 сутки после ТТ под общим наркозом («Золетил», МНН: тилетамина гидрохлорид, золазепама гидрохлорид, Франция) после вскрытия грудной клетки пункцией сердца в области левого желудочка. Исследование морфологии раны проводилось на 3, 5, 8 и 14 сутки, репарации - на 1, 3, 5, 8 и 14 сутки. Для достижения цели и решения поставленных задач исследования использованы следующие методы: иммунологические, биохимические, фармацевтические, статистические, экспериментальное моделирование.

Степень достоверности, апробация результатов, личное участие автора

Достоверность результатов работы, правомочность основных положений и выводов основаны на достаточном числе наблюдении экспериментального фрагмента работы, полноте и широте литературно-библиографическои справки, использовании современных методов статистическои обработки материалов исследования с применением программБ «Statistica 6.0 for Windows».

Основные положения диссертации представлены на VI международной (XIII итоговой) научно-практической конференции молодых учёных ЮУГМУ (Челябинск, 2015); Российской научно-практической конференции

«Зубаировские чтения: новое в коагулологии» «медицинская биохимия: достижения и перспективы» (Казань, 2015); на программе «УМНИК» Фонда содействия развития малых форм предприятий в научно-технической сфере (Челябинск, 2015); VII Международной (XIV-ой итоговой) научно-практической конференции молодых ученых ЮУГМУ (Челябинск, 2016); Всероссийской

научно - практической конференции с международным участием «Фармацевтическое образование, современные аспекты науки и практики» (Уфа, 2016); VIII Международной (XV-ой итоговой) научно-практической конференции молодых ученых ЮУГМУ (Челябинск, 2017); XIV конференции иммунологов Урала с международным участием (Челябинск, 2017).

Личный вклад соискателя состоит в непосредственном участии на всех этапах диссертационного исследования. Планирование научной работы, постановка цели и задач проводилось совместно с научными руководителями. Выбор методов и экспериментальных моделей, набор экспериментального материала, научно-информационный поиск, анализ и обобщение данных научной литературы, анализ и интерпретация полученных данных, статистическая обработка, представление результатов работы в научных публикациях и в виде докладов на конференциях, написание и оформление рукописи выполнены лично автором. Иммунологические, биохимические, морфологические и фармацевтические исследования выполнены автором лично и при участии научных сотрудников НИИ Иммунологии, Центральной научно-исследовательской лаборатории ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России и ГБУЗ «Многопрофильный центр лазерной медицины».

Основные положения, выносимые на защиту

1. В динамике экспериментальной термической травме повышается количество и функциональная активность нейтрофилов в крови и в очаге повреждения, снижается количество CD3+ и CD45RA+ лимфоцитов, концентрация иммуноглобулина G в крови, увеличивается концентрация интерлейкина-1р и интерферона-у, снижается концентрация интерлейкина-4 в сыворотке, наблюдается активация гибели лимфоцитов в крови, накопление продуктов перекисного окисления липидов в плазме и в лимфоцитах крови, изменение активности ферментов антиокисдантной защиты в крови.

2. Системное применение эритропоэтина при экспериментальной термической травме приводит к снижению количества нейтрофилов в крови и в очаге повреждения, их поглотительной и НСТ-редуцирующей способности,

увеличению количества СЭ3+ и СВ45ЯЛ+ в крови, концентрации иммуноглобулина О в сыворотке, снижению концентрации интерлейкина-1р, увеличению концентрации интерлейкина-4 в сыворотке, снижению гибели лимфоцитов в крови, продуктов перекисного окисления липидов в плазме и в лимфоцитах крови и частичному восстановлению активности ферментов антиоксидантной защиты.

3. Для оценки местного применения эритрпоэтина при термической травме разработана трансдермальная пленка с эритропоэтином на основе натрия карбоксиметилцеллюлозы, которая соответствует фармакотехнологическим, биофармацефтическим, микробиологическим и фармацевтическим показателям.

4. Применение трансдермальной пленки с эритропоэтином при экспериментальной термической травме приводит к снижению количества нейтрофилов в очаге повреждения, их поглотительной и НСТ-редуцирующей способности в крови, увеличению количества СЭ3+ и СВ45ЯЛ+ в крови, концентрации иммуноглобулина О в сыворотке, снижению концентрации интерлейкина-1р и интерферона-у, увеличению концентрации интерлейкина-4 в сыворотке, снижению гибели лимфоцитов в крови, продуктов перекисного окисления липидов в плазме и в лимфоцитах крови и частичному восстановлению активности ферментов антиоксидантной защиты.

Научная новизна исследования

Впервые оценены изменения врожденного и адаптивного иммунитета в динамике экспериментальной ТТ ША степени и площадью 3,5%, с учетом данных о цитокиновом профиле крови, гибели лимфоцитов в крови, процессах свободно -радикального окисления в плазме и в лимфоцитах, клеточном составе очага повреждения. Продемонстрировано, что при ТТ увеличение количества нейтрофилов и их функциональной активности, снижение количества СЭ3+ и СВ45ЯЛ+ лимфоцитов в крови, концентрации в сыворотке связаны с увеличением концентрации ИЛ-1Р и ИФН-у и снижением - ИЛ-4, активацией гибели лимфоцитов в крови, накоплением продуктов ПОЛ в лимфоцитах и в

плазме, снижением активности ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ) в крови. Впервые продемонстрировано влияние системного применения ЭПО на изменения иммунного статуса, механизм его изменения и репаративные процессы в динамике ТТ: снижение количества и функциональной активности нейтрофилов, увеличение CD3+ и CD45RA+ лимфоцитов в крови, увеличение концентрации IgG в сыворотке связаны со снижением концентрации ИЛ-1Р и увеличением концентрации ИЛ-4 в сыворотке, снижением гибели лимфоцитов в крови и ПОЛ-ограничивающим эффектом в лимфоцитах и в плазме, активацией ферментов АОЗ в крови, изменением морфологии и репарации в очаге повреждения. Впервые разработана ТДП с ЭПО для применения при ТТ, на состав которой получен патент: «Способ получения лекарственного средства для местного лечения ран в виде пленки с эритропоэтином». Впервые представлены данные о применении ТДП с ЭПО для коррекции иммунного статуса и репаративных процессов в динамике ТТ. Впервые продемонстрировано, что применение при ТТ ТДП с ЭПО приводит к снижению поглотительной и НСТ-редуцирующей способности нейтрофилов, увеличению количества CD3+ и CD45RA+ лимфоцитов в крови, концентрации IgG в сыворотке, снижению концентрации в сыворотке ИЛ-1Р, ИФН-у, увеличению - ИЛ-4, ограничению гибели лимфоцитов в крови, снижению содержания продуктов ПОЛ в лимфоцитах и плазме, частичному восстановлению активности ферментов АОЗ, увеличению представительства лимфоцитов, ускорению репарации в очаге повреждения.

Теоретическая и практическая значимость исследования

В ходе проведенного исследования в экспериментальных условиях уточнены закономерности изменений иммунного статуса при экспериментальной ТТ. Показано, что увеличение количества нейтрофилов и их функциональной активности, снижение количества лимфоцитов в крови, связано, в том числе, с увеличением концентрации ИЛ-1Р и ИФН-у, снижением концентрации ИЛ-4, активацией гибели лимфоцитов, накоплением продуктов ПОЛ в лимфоцитах и в плазме, снижением активности ферментов АОЗ в крови. Установлена роль ЭПО в

коррекции изменений иммунного статуса и репаративных процессов при ТТ. Показано, что механизм иммунотропного действия ЭПО в условиях системного и местного применения при ТТ связан с его ПОЛ-ограничивающим, антиапоптогенным, рост-клеток стимулирующим и другими эффектами. Полученные результаты являются предпосылкой для проведения дальнейших исследований по эффективности применения ТДП с ЭПО при ТТ с последующим внедрением нового лекарственного препарата в клиническую практику.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедр Патологической физиологии, Фармации и химии фармацевтического факультета, научную работу НИИ иммунологии, НОЦ «Проблемы фундаментальной медицины» ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России.

ГЛАВА 1

Роль изменений иммунного статуса в патогенезе и современные направления

его коррекции при термической травме. (обзор литературы)

1.1. Иммунный статус организма при термической травме

По определению ВОЗ, приведенному на официальном сайте, ожог — это травма кожи или других органических тканей, причиняемая, в основном, высокими температурами, а также излучением, радиоактивностью, электричеством, трением или контактом с химическими веществами [37]. Термическая (тепловая) травма происходит, когда клетки кожи или других тканей разрушаются под воздействием: жидкостей (ожоги горячей водой или паром); твердых предметов (контактные ожоги); пламени (ожоги пламенем).

В соответствии с международной классификацией болезней 10-го пересмотра выделяют 3 степени ожогов: 1-поверхностные, основным клиническим признаком которых является эритема, 11-пограничные, характеризуются образованием пузырей и потерей эпидермиса и Ш-глубокие, которые сопровождаются глубоким некрозом подлежащих тканей и утратой всех слоев кожи [32]. По классификации, принятой на XXVII съезде хирургов СССР в 1960 г., выделяют 4 степени ожогов: I, II - поверхностные, ША - пограничные, ШБ, IV - глубокие. Наибольший интерес представляют пограничные ожоги, нерациональное лечение которых приводит к ожоговой прогрессии, связанной, с одной стороны, с системными изменениями в организме, дисфункцией иммунной системы, которые могут привести к вторичной инфекции, с другой стороны - к образованию патологических рубцов, нарушениям функций и эстетическим дефектам [53, 169, 193].

ТТ представляет сложный процесс, который включает комплексные и динамичные взаимодействия между эпителиальными клетками (кератиноцитами),

фибробластами, эндотелиальными клетками и клетками иммунной системы [81, 172, 175].

1.1.1. Роль изменений локального и системного врожденного иммунитета в

патогенезе термической травмы

Важную роль в развитии ТТ играет воспаление, в ходе которого осуществляется активация иммунных клеток и выделение медиаторов, запускающих каскад местных и системных реакций организма на повреждение [101, 119, 126, 175].

Основными клетками врожденного иммунитета являются фагоциты, представленные моноцитами (тканевыми макрофагами), дендритными клетками (ДК) и нейтрофилами. На системном уровне в ранние сроки ТТ в зависимости от степени, глубины и площади повреждения концентрация полиморфноядерных нейтрофилов и моноцитов в периферической крови может как увеличиваться, так и снижаться. Так, при ожогах, сопровождающихся бактериальными осложнениями, наблюдается снижение содержания нейтрофилов и моноцитов в крови [74]. Это может быть связано с перераспределением клеток, участвующих в иммунных реакциях, повышением их концентрации в очаге повреждения. По некоторым данным, при ТТ в срок с 3-14 сутки в крови фиксируется увеличение количества нейтрофилов, что, по словам авторов, может быть связано, во-первых, с гемоконцентрацией, во-вторых, с избыточной стимуляцией миелоидного ростка костного мозга [42].

Как известно, в первые 24 часа в ране доминируют нейтрофилы, присутствие которых в разные фазы заживления, по данным некоторых авторов, может способствовать или тормозить процессы пролиферации. Нейтрофилы представляют первую линию защиты от микробных и немикробных агентов в ранние сроки ТТ. Однако дальнейшее избыточное присутствие нейтрофилов неблагоприятно влияет на закрытие раны за счет их способности к образованию супероксиданиона и других активных форм кислорода (АФК), участвующих в

процессах перекисного окисления липидов (ПОЛ). По данным Popescu et al., прогрессивное увеличение количества полиморфноядерных нейтрофилов и макрофагов в ране при ТТ наблюдается на 3-9 стуки, по мере образования грануляционной ткани их количество снижается [172]. Активация нейтрофилов и их миграция в очаг воспаления происходит под влиянием гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF), C5a фрагмента комплемента, CXCR2 рецепторов, FMLP хемотаксического фактора, ИЛ-8 и других биологически активных веществ [101].

Практически одновременно с нейтрофилами под воздействием сигналов хемокинов SDF-1/CXCR4 в очаг воспаления мигрируют моноциты/макрофаги, которые выполняют функции фагоцитов, а также являются источниками цитокинов и факторов роста. Выделяют несколько фенотипов макрофагов, из которых М1 (CAM) и М2 (AAM) фенотипы способствуют высвобождению провоспалительных и противовоспалительных медиаторов соответственно [119, 144, 172]. Экспрессируемая активированными макрофагами, эндотелиоцитами и фибробластами ЦОГ-2 приводит к образованию простагландинов, которые способствуют вазодилатации и образованию воспалительного экссудата, а также к угнетению функций антигенпрезентующих клеток [82, 119]. По данным N.Rani et al, в ранние сроки ТТ (3 сутки) вместо «традиционных» макрофагов с фенотипом CD11b+F4/80+ происходит инфильтрация очага повреждения супрессорными клетками с фенотипом CD11b+Gr1+ (MDSCs), которые способствуют развитию воспаления за счет высвобождения провоспалительных цитокинов (ИЛ-ip, ИЛ-6) и ФНО-а [177].

Циркулирующие в крови моноциты, помимо трансформации в макрофаги в тканях под влиянием различных транскрипционных факторов, таких как PU.1, MafB, KLF4, c-Maf, могут дифференцироваться в очаге воспаления в ДК [119]. ДК обеспечивают интегративную связь между врожденным и адаптивным иммунитетом за счет экспрессии на своей поверхности HLA рецепторов и TLR-4 рецепторов, которые обеспечивают их взаимодействие с другими иммунокомпетентными клетками [81]. Помимо этого, ДК способны

продуцировать некоторые цитокины (ИЛ-12), которые способствуют активации естественных киллеров (NK). NK, в свою очередь, могут экспрессировать провоспалительные цитокины, включая ИФН-у и ФНО-а, а также играть роль антигенпрезентующих клеток. При ТТ снижается количество и нарушаются функции ДК и NK, что увеличивает вероятность присоединения вторичной инфекции [109, 126].

Помимо фагоцитарных клеток в патогенезе ТТ продемонстрирована роль у5Т-клеток. В норме у5Т-клетки содержатся в небольшом количестве в периферических лимфоидных тканях, в кожном эпителии, интерстиции. После термического повреждения у5Т-клетки активируются, увеличивая экспрессию рецепторов TLR2, TLR4, CD69 на своей поверхности. Активированные у5Т-клетки продуцируют факторы роста и хемокины, а также способствуют активации Th2-, ^П-зависимого иммунного ответа в месте повреждения. [176, 178, 179, 190].

В процессе заживления раны при ТТ большинство соединительнотканных клеток кожи в процессе дифференцировки трансформируются в миофибробласты. Миофибробласты представляют гетерогенную популяцию, включающую профиброгенные, провоспалительные, проангиогенные и сократительные клетки. Они образуются в процессе активации и трансдифференцировки с участием моноцитов, мезенхимальных стволовых клеток и фиброцитов [113]. В недавнем исследовании Li G. et al. в эксперименте in vitro показали роль интегринсвязанной киназы в заживлении раны через активацию трансформирующего фактора роста p1 (TGFp1), который индуцирует экспрессию сократительного белка связанного мышечного актина - а (а-SMA) и дифференцировку фибробластов в миофибробласты [137].

Традиционно, патогенез ожогов рассматривается в контексте медиаторной теории, в которой цитокины секретируются иммунными клетками, циркулирующими в крови, и оказывают эффекты локально и системно. Макрофаги являются доминантными клетками в этом процессе, секретируя ФНО-а, ИЛ-1 и другие провоспалительные цитокины. В последнее время в патогенезе

ТТ популярность набирает «теория апоптоза». В ее основе - гибель клеток при ожоговых повреждениях [55, 119, 206]. Повреждение лейкоцитов, эндотелиоцитов и тромбоцитов в очаге ТТ приводит к «респираторному взрыву». В нейтрофилах локализован НАДФН--оксидазный мультикомпонентный ферментативный комплекс, приводящий к восстановлению молекулярного кислорода с образованием супероксидного аниона - родоначальника активных кислородных радикалов. Эндотелиоциты в условиях эндотелиальной дисфункции и активации ксантиноксидазы и НАДФ-оксидазы также могут быть поставщиком активных форм кислорода. Свободные радикалы приводят к инициации процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), повреждая мембранные фосфолипиды лимфоцитов. Последствиями активации ПОЛ в лимфоцитах являются их гибель путем некроза и апоптоза, лимфоцитопения, депрессия адаптивного иммунитета и дизрегуляция иммунного ответа [16].

1.1.2. Роль изменений адаптивного иммунитета в патогенезе термической

травмы

В процессе заживления раны немаловажную роль играют клетки адаптивного иммунитета. Как известно, после ТТ наблюдается снижение абсолютного содержания в периферической крови CD3+, CD4+, CD8+ лимфоцитов. Степень выраженности лимфоцитопении во многом зависит от глубины и площади ТТ. Можно обозначить несколько механизмов лимфоцитопении. Во-первых, увеличение миграции лимфоцитов в очаг воспаления. Во-вторых, активация гибели клеток путем некроза и апоптоза в условиях оксидативного стресса, повышения экспрессии CD95 (АРО-1) на цитоплазматической мембране. Кроме того, гибель лимфоцитов в первичных и вторичных лимфоидных органах может быть вызвана увеличение активности каспазы 3 и высвобождением глюкокортикоидных гормонов [16]. В-третьих, повышается концентрация супрессорных клеток [92, 167, 189]. Нарушение

функций Т-лимфоцитов, регулирующих иммунный ответ, и их гибель может являться важным механизмом системной иммуносупрессии при ТТ [88, 147, 167].

В ранние сроки ТТ (2-3 сутки) наблюдается снижение количества СЭ19+ лимфоцитов, и как следствие - снижение концентрация в крови ^О, ^А и ^М [66, 67, 91, 134, 173]. Однако, по данным некоторых авторов, при обширных глубоких термических повреждениях наблюдается увеличение концентрации ^О в крови [155]. Отмечают, что при ТТ наблюдается супрессия ТЫ- зависимого иммунного ответа и активация ТЪ2-зависимого выброса цитокинов и регуляторных Т-клеток (Тгеё) клеток [112]. Активация ТЪ2 -зависимого иммунного ответа приводит к дисфункции антигенпрезентующих клеток и повышает восприимчивость к инфекции. Среди ДК выделяют популяцию CD4-CD8a+cDCs, которая в норме экспрессирует СБ-205 и в комплексе с СБ8+ Т-клетками участвует в ТЫ - зависимом иммунном ответе. При ТТ угнетение ДК может влиять на «отзывчивость» Т-клеток при повреждении и активность ТЫ -зависимого иммунного ответа [194].

CD4+ БохР3+ регуляторные клетки способны блокировать воспалительную реакцию с помощью ИЛ-10, ИЛ-35 и TGF-P опосредованных механизмов. CD4+ БохР3+ могут активировать Тгеё клетки за счет воздействия на ТСЯ.- и CD28-зависимые сигнальные молекулы ядерного фактора активированных Т-клеток с1 (№АТс1), гликоген синтазу киназу - 3Р(ОБК-3Р), ассоциированную протеинкиназу 70 (7АР-70) и протеинкиназу С - 0 (РК^0) [112].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Саедгалина Оксана Тагировна, 2017 год

Список используемых сокращений

АОЗ - антиоксидантная защита

АФК - активные формы кислорода

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ДК - дендритная клетка

ЕФ - Европейская Фармакопея

ИЛ - интерлейкин

ИФН-у - интерферон-гамма

МНН - международное непатентованное название

НАДФ - Никотинамидадениндинуклеотидфосфат

НД - нормативный документ

ОФС - общая фармакопейная статья

ПАВ - поверхностно-активное вещество

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ПФ - подвижная фаза

ПЭГ - полиэтиленгликоль

РСО - рабочий стандартный образец

СОД - медь, цинк-зависимая супероксиддисмутаза

ТДП - трансдермальная пленка

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТТ - термическая травма

ТФУ - трифторуксусная кислота

ФС - фармакопейная статья

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

ЭПО - эритропоэтин

Bcl - B-cell lymphoma 2

CD - Cluster of Differentiation

FGF - Fibroblast Growth Factor

GSK - Glycogen Synthase Kinase

Ig - иммуноглобулин

KGF - Keratinocyte Growth Factor

MAPK - mitogen-activated protein kinase NaKMU, - натрия карбоксиметилцеллюлоза NK - Natural killer PI3K - Phosphatidylinositol-3-Kinase PKB - протеинкиназа В

rhEGF - recombinant human Epidermal Growth Factor

STAT - Signal transducer and activator of transcription

TGF - Transforming growth factor

TNF - Tumor Necrosis Factor

VEGF - Vascular endothelial growth factor

1. Агеев, Ю.И. Влияние эритропоэтина на показатели мммунного статуса при экспериментальной хронической почечной недостаточности [Электронный ресурс] / Ю.И. Агеев, М.В. Осиков, Л.Ф. Телешева [и др.] // Научное обозрение. Медицинские науки. - 2015. - № 1. - С. 35-36. - Режим доступа: http://medicine.science-review.ru/ru/article/view?id=561 (дата обращения: 23.08.2017).

2. Алексеев, А.А. Ожоговый сепсис: диагностика, профилактика, лечение: дис. ... д-ра мед. наук / А.А. Алексеев. - Москва, 1993. - 233 с.

3. Алексеев, А.А. Комплексное лечение глубоких ожогов на основе применения хирургической некрэктомии и современных биотехнологических методов / А.А. Алексеев, К. З. Салахиддинов, Б. К. Гаврилюк, Ю. И. Тюрников // Анналы хирургии. - 2012. - № 6. - C. 41-45.

4. Алексеев, А.А. Местное консервативное лечение ран на этапах оказания помощи пострадавшим от ожогов: клинические рекомендации / А.А. Алексеев, А.Э. Бобровников, М.Г. Крутиков, Ю.И. Тюрников, С.Б. Богданов // Общероссийская общественная организация «Объединение комбустиологов «Мир без ожогов. - 2014. - С. 17.

5. Алексеева, И.В. Разработка состава, технологии и оценка качества фитопленок на основе сухих растительных экстрактов [Электронный ресурс] / И.В. Алексеева, К.Л. Соловьева, Т.А. Веселкова // Современные проблемы науки и образования. - 2012. - № 5.; Режим доступа: URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=7174 (дата обращения: 26.09.2017).

6. Алмазов, И.А. Дермабразия в комбустиологии [Электронный ресурс] / И.А. Алмазов, Е.В. Зиновьев // Научно-практический журнал «Комбустиология». - 2015. - № 55. - Режим доступа: http://combustiolog.ru/iournal/razdel-1 -ozhogovaya-travma/ (дата обращения 31.08.2017).

7. Баркова, Э.Н. Эритропоэз и обмен железа при ожогах / Э.Н. Баркова, Л.Ф. Балабанова, Е.В. Жданова [и др.] // Общая реаниматология. - 2007. - Т. 3, № 1. - С. 32-36.

8. Белоцкий, С.М. Микробный фактор в хемилюминисценции нейтрофилов периферической крови больных с гнойной хирургической инфекцией / С.М. Белоцкий, Т.И. Снастина, О.Б. Филюкова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1988. - № 8. - С. 87-90.

9. Васютков, В.Я. Трофические язвы стопы и голени / В.Я. Васютков, Н.В. Проценко. - М. : Медицина, 1993. - 160 с.

10.Виксман, М.Е. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия : метод. рекомендации / М.Е. Виксман, А.Н. Маянский. - Казань, 1979. - 14 с.

11.Волчегорский, И.А. Сопоставление различных подходов к определению продуктов ПОЛ в гептан-изопропанольных экстрактах крови / И.А. Волчегорский, А.Г. Налимов, В.Г. Яровинский // Вопр. мед. химии. - 1989. -Т. 35, № 1. - С. 127-131.

12.Волчегорский, И.А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников [и др.]. - Челябинск : Изд-во ЧелГПУ, 2000. - 167 с.

13.Гаврилин, М. В. Оптимизация методики определения ципрофлоксацина гидрохлорида методом ВЭЖХ в растворе для инфузий / М. В. Гаврилин, С. А. Гонян, Л. П. Овчаренко, Е. В. Скребцова //Химико-фармацевтический журнал. - 2004. - Т. 38, №. 12. - С. 42-44.

14.Гордеев, Л. С. Математическое разделение перекрывающихся пиков в жидкостной хроматографии / Л. С. Гордеев, П. И. Лазарев, И. В. Хавруняк // Вестник Тамбовского государственного технического университета. - 2005. -Т. 11, № 2. - С. 348-354.

15. Долгушин, И.И. Иммунология травмы / И.И. Долгушин, Л.Я. Эберт, Р.И. Лифшиц. - Свердловск: Изд-во Урал. ун-та, 1989. - 188 с.

16.Дубинина, Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение) / Е.Е. Дубинина. - Санкт-Петербург: Мед. пресса, 2006. - 400 с.

17. Европейская конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях [Электронный ресурс]. -Страсбург, 1986. - Режим доступа: Шр8://гт.сое.т1/СоЕКМРиЬНсСоттоп8еагсЬ8егу1се8/В18р1ауВСТМСоп1еП:?ё осишепШ=090000168007а6а8 (дата обращения 08.09.17).

18.Еремеев, С.А. Сравнительная оценка эффективности способов лечения пострадавших с поверхностными ожогами кожи в условиях влажной среды / С.А. Еремеев, О.В. Чичков, А.В. Коваленко [и др.] // Фундаментальные исследования. - 2011. - № 10-2. - С. 288-294.

19.Жубанов, Б.А. Полимерные материалы с лечебным действием / Б.А. Жубанов, Е.О. Батырбеков, Р.М. Искаков. - Алматы : Комплекс, 2000. - Т. 2. - 220 с.

20.Земсков, В.М. Изменения иммунного статуса у пострадавших от ожогов, в том числе при массовых катастрофах / В.М. Земсков // Вестник экспериментальной и клинической хирургии. - 2013. - Т.6, № 1. - С. 9-18.

21. Илларионов, А.И. Оптические образцы сравнения в спектрофотометрическом анализе органических соединений / А.И. Илларионов, Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский. - Иркутск: Иркут. гос. ун-т путей сообщения, 2008. - 153 с.

22. Карелин, А.А. Энзиматическая продукция супероксида полиморфно-ядерными лейкоцитами человека при ожоговой болезни / А.А. Карелин, А.А. Алексеев, А.Г. Глоба [и др.] // Вопр. мед. химии. - 1988. - № 5. - С. 107-110.

23.Карякин, Н.Н. Технологии лечения ожогов в условиях влажной среды / Н.Н. Карякин, И.А. Клеменова // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2015. - № 9-3. - С. 495-499.

24.Ковальчук, А.О. Морфометрические показатели кожи животных с экспериментальной ожоговой травмой при проведении раннего

хирургического лечения с использованием гидрогелевых повязок и полиуретановых адсорбентов / А.О. Ковальчук // Новости хирургии. - 2016. -Т. 24, № 2. - С. 109-119.

25.Колкер, И.И. Актуальные вопросы проблемы «Инфекция и иммунитет при термических поражениях» / И.И. Колкер // Актуальные вопросы хирургии: сб. науч. трудов Ин-та хирургии им. А.В. Вишневского АМН СССР. -Москва, 1985. - С. 144-149.

26.Коралюк, М.А. Определение активности каталазы / М.А. Коралюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова // Лабораторное дело. - 1988. - № 1.- С. 16-19.

27.Коробейникова, Э.Н. Показатели липидного обмена в сыворотке крови практически здорового населения, проживающего в Южно-Уральском регионе в условиях адаптации к климатическим и техногенным воздействиям: методические указания / Э.Н. Коробейникова, А.В. Зурочка, Е.В. Евдокимова. - Челябинск: Изд-во ЧелГМА, 2002. - 50 с.

28.Костина, О.В. Роль некоторых биохимических показателей в особенностях метаболизма клеток при термической травме / О.В. Костина, А.Г. Соловьева, Ю.В. Зимин // Травматология и ортопедия. - 2012. - № 5 (24). - С. 178-180.

29.Кратнов, А.Е. Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов и антиоксидантная защита у больных со смертельным исходом инсульта и ишемической болезни сердца / А.Е. Кратнов // Иммунология, аллергология, инфектология. - 2007. - № 1. - С. 23-27.

30.Львовская, Е.И. Спектрофотометрическое определение конечных продуктов ПОЛ / Е.И. Львовская, И.А. Волчегорский, С.Е. Шемяков, Р.И. Лифшиц // Вопросы мед. химии. - 1991. - № 4. - С. 92-93.

31. Маянский, А.Н. Способы оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия : метод. рекомендации / А.Н. Маянский, М.К. Виксман. - Казань, 1979. - 11 с.

32. Международная классификация болезней 10-го пересмотра [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http: //mkb- 10.com/ (дата обращения 08.09.17).

33.Меркулов, В.А. Препараты рекомбинантных эритропоэтинов и их характеристика / В.А. Меркулов, А.А. Солдатов, Ж.И. Авдеева [и др.] // Профилактика^ диагностика^ лечение. - 2013. - № 3. - С. 4-11.

34. Мизина, П.Г. Введение лекарственных веществ через кожу-достижения и перспективы: обзор / П.Г. Мизина, В.А. Быков, Ю.И. Настина [и др.] // Вестн. ВГУ. - 2004. - № 1. - С. 176-183.

35.Никитин, И.Г. Пегилированные лекарственные препараты: современное состояние проблемы и перспективы / И.Г. Никитин, И.Е. Байкова, Л.М. Гогова // Лечебное дело. - 2005. - №. 4. - С. 18-24.

36. Николаев, В.М. Перекисное окисление липидов у больных с холодовой травмой разной степени тяжести / В.М. Николаев, С.Н. Алексеев, Р.З. Алексеев // Наука и образование. - 2006. - № 2. - С. 140-144.

37. Ожоги [Электронный ресурс] // Информационный бюллетень. - 2016. - № 365. - Режим доступа: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs365/ru/ (дата обращения 11.08.2016 г.).

38. Определение эритропоэтина в концентрированных фармакопейных растворах [Электронный ресурс] // Группа компаний «Люмэкс». Практические рекомендации. - Режим доступа: URL: http://www.lumex.ru/metodics/15AR03.15.04-1.pdf (дата обращения 11.08.2016 г.).

39. Орлова, Н.В. Валидация методики количественного определения эритропоэтина и дарбэпоэтина в культуральной жидкости с помощью обращено-фазовой хроматографии / Н.В. Орлова, Н.А. Гаврилова, Р.А. Хамитов // Биофармацевтический журн. - 2014. - Т. 6, № 6. - С. 54-59.

40.Осиков М.В. Патофизиологический анализ влияния эритропоэтина на психологический статус у больных с хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе / М.В. Осиков, К.В. Ахматов, Л.В. Кривохижина // Вестн. ЮУрГУ. - 2010. - № 19. - С. 110-116.

41.Осиков, М.В. Роль эритропоэтина в коррекции нарушений сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у больных с терминальной стадией хронической

почечной недостаточности [Электронный ресурс] / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев // Фундаментальные исследования. - 2011. - № 9-3. - С. 462-466. - Режим доступа: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28534 (дата обращения: 23.08.2017).

42.Осиков, М.В. Показатели врожденного иммунитета и морфология очага повреждения при экспериментальной термической травме [Электронный ресурс] / М.В. Осиков, А.Г. Лихачева, Л.Ф. Телешева // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 8-2. - С. 381-386. - Режим доступа: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30374 (дата обращения: 04.09.2017).

43. Осиков, М.В. Влияние эритропоэтина на активность системы плазменного протеолиза при экспериментальной почечной недостаточности / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. -2012. - Т.153, № 1. - С. 27-30.

44.Осиков М.В. Плейотропные эффекты эритропоэтина при хронической почечной недостаточности [Электронный ресурс] / М.В. Осиков, В.Ю. Ахматов, Л.Ф. Телешева [и др.] // Фундаментальные исследования. - 2013. -№ 7-1. - С. 218-224. - Режим доступа: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=31817 (дата обращения: 23.08.2017).

45.Осиков, М.В. Влияние эритропоэтина на процессы свободно-радикального окисления и эксперссию гликопротеинов в тромбоцитах при хронической почечной недостаточности / М.В. Осиков // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. - 2014. - Т. 157, № 1. - С. 30-33.

46. Осиков, М.В. Влияние эритропоэтина на показатели врожденного иммунитета в экспериментальных условиях in vitro [Электронный ресурс] / М.В. Осиков, Л.Ф. Телешева, К.С. Ожиганов [и др.] // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 1. - Режим доступа: https://science-education.ru/ru/article/view?id=12138 (дата обращения: 04.09.2017).

47.Осиков, М.В. Влияние локального применения эпидермального фактора роста на врожденный иммунитет и клеточный состав очага повреждения при экспериментальной термической травме / М.В. Осиков, Л.Ф. Телешева, А.Г. Лихачева // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. - 2014. - Т. 157, № 3. - С. 280-283.

48.Осиков, М.В. Влияние эритропоэтина на функциональную активность нейтрофилов в крови у недоношенных новорожденных с очень низкой массой тела / М.В. Осиков, О.Н. Альмухаметова, И.А. Федоров [и др.] // Журн. научных статей Здоровье и образование в XXI веке. - 2016. - Т. 18, № 10. - С. 24-27.

49.Пат. 2463078 Российская Федерация МПК МПК Л61Ы5/44, А61К38/22, 61Б13/00. Пластырь, высвобождающий активное соединение / Б. Аугустинус; заявитель и патентообладатель Б. Аугустинус. - № 2008127228/15; заявл. 07.07.08; опубл. 10.10.12, Бюл. № 28.

50.Пат. 2465003 Российская Федерация МПК Л61К38/18, Л61К9/10, Л61К47/38, Л61Р17/02. Местное нанесение и препараты эритропоэтина для заживления кожных ран / Б. Аугустинус; заявитель и патентообладатель Херойс Кульцер ГМБХ (ОЕ). - № 2010130890/15; заявл. 20.12.08; опубл. 27.10.12, Бюл. № 30.

51.Пат. 2611401 Российская Федерация МПК А 61 К 38/18, А 61 К 47/00. Способ получения лекарственного средства с эритропоэтином местного действия / М.В. Осиков, Е.В. Симонян, О.Т. Саедгалина; заявитель и патентообладатель ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. - № 2015146627; заявл. 28.10.15; опубл. 21.02.17, Бюл. № 6.

52.Полутова, Н.В. Активация свободно-радикального окисления - эфферентное звено реализации цитопатогенных эффектов ожоговой травмы / Н.В. Полутова, Н.П. Чеснокова // Островский вестн. новых мед. технологий. -2009. - Т. XVI, № 2. - С. 68-71.

53. Рахаев, А.М. Современные методы лечения пограничных ожогов ША степени и донорских ран / А.М. Рахаев, М.Г. Крутиков // Печатный орган

Секции термических поражений Ассоциации Хирургов им. Н.И. Пирогова. -2000. - №. 3. - С. 113.

54.Телешева, Л.Ф. Показатели врожденного иммунитета и морфология очага повреждения при экспериментальной термической травме [Электронный ресурс] / Л.Ф. Телешева, М.В. Осиков, А.Г. Лихачева // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 8-2. - С. 381-386. - Режим доступа: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30374 (дата обращения: 01.09.2017).

55.Тюкавкина, С.Ю. Роль апоптоза в формировании иммунопатологических процессов, способствующих развитию инфекционных заболеваний / С.Ю. Тюкавкина // Иммунология. - 2013. - Т. 34, № 1. - С. 52-57.

56.Усов, В.В. Оценка иммунного статуса у тяжелообожженных / В.В. Усов, Т.Н. Обыдейникова, А.Е. Тарасов [и др.] // Тихоокеанский мед. журн. - 2008. - № 1. - С. 53-55.

57. Фисталь, Э.Я. Нарушения детоксикационной системы эритроцитов в остром периоде ожоговой болезни / Э.Я. Фисталь, В.М. Носенко, А.А. Федорова // Медико-социальные проблемы семьи. - 2010. - Т. 15, № 3. - С. 84-87.

58.Федеральная служба государственной статистики. Демографический ежегодник России - 2017. - [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.gks.ru/bgd/regl/B15_16/Main.htm (дата обращения 20.08.17).

59.Чевари, С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / И. Чаба, И. Секей // Лабораторное дело. - 1985 .- № 11. - С. 678-681.

60.Шнайдер, А. Сопоставление распределения изоформ фармацевтических препаратов эритропоэтина с использованием двухмерного гель-электрофореза / А. Шнайдер // Клиническая нефрология. - 2010. - № 2. - С. 50-53.

61. Шохин, И. Е. Оценка возможности замены исследований биоэквивалентности in vivo на изучение сравнительной кинетики растворения in vitro (процедура «биовейвер») при определении

взаимозаменяемости лекарственных средств («дженериков») / И. Е. Шохин, Г. В. Раменская, Г. Ф. Василенко, Е. А. Малашенко // Химико-фармацевтический журнал. - 2010. - Т. 45, № 2. - С. 46-48.

62.Штыков, С.Н. Мицеллярная тонкослойная хроматография: особенности и аналитические возможности / С.Н. Штыков, Е.Г. Сумина, Н.В. Тюрина // Рос. хим. журн. - 2003. - Т. 47, № 1. - С. 119-126.

63. Agay, D. Interleukin-6, TNF-alpha and interleukin-1 beta levels in blood and tissue in severely burned rats / D. Agay, M. Andriollo-Sanchez, R. Claeyssen [et al.] // European cytokine network. - 2008. - Vol. 19, № 1. - P. 1-7.

64.Alexis, A. Immune responses in relation to the type and time of thermal injury: an experimental study / A. Alexis, D.P. Carrer, D.I. Droggiti [et al.] // Injury. - 2015. - Vol. 46, № 2. - P. 227-232.

65.Anagnostou, A. Erythropoietin receptor mRNA expression in human endothelial cells / A. Anagnostou, Z. Liu, M. Steiner [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. -1994. - Vol. 91. - P. 3974-3978.

66. Antonacci, A.C. T-cell subpopulations following thermal injury / A.C. Antonacci, R.A. Good, S. Gupta // Surgery, gynecology & obstetrics. - 1982. -Vol. 155, № 1. - P. 1-8.

67. Bariar, L.M. Serum levels of immunoglobulins in thermal burns / L.M. Bariar, A. Bal, A. Hasan [et al.] // J. of the Indian Medical Association. - 1996. - Vol. 94, № 4. - P. 133-134.

68.Boshkov, L.K. Recombinant human erythropoietin for a Jehovah's Witness with anemia of thermal injury / L.K. Boshkov, E.E. Tredget, A. Janowska-Wieczorek // American j. of hematology. - 1991. - Vol. 37, № 1. - P. 53-54.

69.Brines, M. Discovering erythropoietin's extra-hematopoietic functions: biology and clinical promise / M. Brines, A. Cerami // Kidney international. - 2006. - Vol. 70, № 2. - P. 246-250.

70.Broxmeyer, H.E. Erythropoietin: multiple targets, actions, and modifying influences for biological and clinical consideration / H.E. Broxmeyer // J. Exp. Med. - 2013. - Vol. 210, № 2. - P. 205-208.

71.Brubaker, A.L. Neutrophils and natural killer T cells as negative regulators of wound healing / A.L. Brubaker, D.F. Schneider, E.J. Kovacs // Expert review of dermatology. - 2011. - Vol. 6, № 1. - P. 5-8.

72.Caldwell, F.T. The effect of indomethacin on the cytokine cascade and body temperature following burn injury in rats / F.T. Caldwell, D.B. Graves, B.H. Wallace // Burns. - 1999. - Vol. 25, № 4. - P. 283-294.

73. Caliari-Oliveira, C. Xenogeneic mesenchymal stromal cells improve wound healing and modulate the immune response in an extensive burn model / C. Caliari-Oliveira, J.N.U. Yaochite, L.N.Z. Ramalho [et al.] // Cell transplantation. -2016. - Vol. 25, № 2. - P. 201-215.

74.Calum, H. Burn mouse models / H. Calum, N. Hoiby, C. Moser // Methods Mol Biol. - 2014. - Vol. 1149. - P. 793-802.

75.Cilurzo, F. Adhesive properties: a critical issue in transdermal patch development / Cilurzo F, Gennari CG, Minghetti P // Expert Opin Drug Deliv. - 2012. - Vol.9, № 1. - P. 33-45.

76.Chen, G. Development of an immunoassay kit for detecting the alteration of serum B cell activating factor in thermally injured mice / G. Chen, H. Du, D. Xu [et al.] // Molecular and cellular biochemistry. - 2006. - Vol. 281, № 1-2. - P. 185-188.

77.Choi, D. Erythropoietin: physico-and biochemical analysis / D. Choi, M. Kim, J. Park // J. of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. - 1996. -Vol. 687, № 1. - P. 189-199.

78.Coleman, T.R. Cytoprotective doses of erythropoietin or carbamylated erythropoietin have markedly different procoagulant and vasoactive activities / T.R. Coleman, C. Westenfelder, F.E. Togel [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2006. - Vol. 103, № 15. - P. 5965-5970.

79.Cornick, S.M. Toll like receptors gene expression of human keratinocytes cultured of severe burn injury / S.M. Cornick, S.A.A.C.D. Noronha, S.M.R.D. Noronha [et al.] // Acta Cirurgica Brasileira. - 2014. - Vol. 29. - P. 33-38.

80.Csontos, C. Effect of N-acetylcysteine treatment on oxidative stress and inflammation after severe burn / C. Csontos, B. Rezman, V. Foldi [et al.] // Burns. - 2012. - Vol. 38, № 3. - P. 428-437.

81.D'Arpa, N. Skin dendritic cells in burn patients / N. D'Arpa, L. D'Amelio, A. Accardo-Palumbo [et al.] // Annals of Burns and Fire Disasters. - 2009. - Vol. 22, № 4. - P. 175-178.

82.da Silva, N.T. Burn injury induces skeletal muscle degeneration, inflammatory host response, and oxidative stress in wistar rats / N.T. da Silva, H.T. Quintana J.A. Bortolin, D. A. Ribeiro, F. de Oliveira //Journal of Burn Care & Research. -2015. - Vol.36, № 3. - P. 428-433.

83.Danielczok, J. Does Erythropoietin Regulate TRPC Channels in Red Blood Cells? / J. Danielczok, L. Hertz, S. Ruppenthal [et al.] // Cellular Physiology and Biochemistry. - 2017. - Vol. 41, № 3. - P. 1219-1228.

84.Danigo, A. Neuroprotective Effect of Erythropoietin against Pressure Ulcer in a Mouse Model of Small Fiber Neuropathy / A. Danigo, L. Magy, L. Richard [et al.] // PloS one. - 2014. - Vol. 9, № 11. - P. e113454.

85.Deitch, E.A. A serial study of the erythropoietic response to thermal injury / E.A. Deitch, K.M. Sittig // Annals of surgery. - 1993. - Vol. 217, № 3. - P. 293-299.

86.Deveci, M. Effects of cerium nitrate bathing and prompt burn wound excision on IL-6 and TNF-a levels in burned rats / M. Deveci, M. Eski, M. Sengezer [et al.] // Burns. - 2000. - Vol. 26, № 1. - P. 41-45.

87.Dordal, M.S. The Role of Carbohydrate in Erythropoietin Action / M.S. Dordal, F.F. Wang, E. Goldwasser // Endocrinology. - 1985. - Vol. 116, № 6. - P. 22932299.

88.Entezami, K.Z. Immunophenotype of peripheral blood lymphocytes following thermal injury in patients / K.Z. Entezami, T. Mousavi, M.A. Bahar // Medical J. of The Islamic Republic of Iran (MJIRI). - 2010. - Vol. 24, № 2. - P. 96-102.

89. Erythropoietin Concentrated Solution [Electronic resourse] // European pharmacopoeia. - Mode of access:

http://www.newdruginfo.com/pharmacopeia/ep50/Erythropoietin%20concentrated %20solution.pdf (12.09.17).

90.Falanga, V. Classifications for wound bed preparation and stimulation of chronic wounds / V. Falanga // Wound repair and regeneration: official publication of the Wound Healing Society$ European Tissue Repair Society. - 1999. - Vol. 8, № 5.

- P. 347-352.

91.Fan, J. Effect of early enteral immune nutrition on immune function of intestine in mice with severe burn / J. Fan, Q.Y. Meng, G.H. Guo [et al.] // Zhonghua shao shang za zhi= Zhonghua shaoshang zazhi= Chinese journal of burns. - 2009. -Vol. 25, № 2. - P. 140-143.

92. Fayazov, A.D. Disorders of the immune system in severely burned patients / A.D. Fayazov, S.I. Shukurov, B.I. Shukurov [et al.] // Ann Burns Fire Disasters. - 2009.

- Vol. 22, № 3. - P. 126-130.

93.Fazal, N. T cell suppression in burn and septic injuries / N. Fazal // Immunosuppression Role in Health and Diseases. - 2012. url: https://cdn.intechopen.com/pdfs-wm/29072.pdf (дата обращения 09.09.17)

94.Fear, V.S. Timing of excision after a non-severe burn has a significant impact on the subsequent immune response in a murine model / V.S. Fear, W.P. Poh, S. Valvis [et al.] // Burns. - 2016. - Vol. 42, № 4. - P. 815-824.

95. Fenjves, E.S. Human, nonhuman primate, and rat pancreatic islets express erythropoietin receptors / E.S. Fenjves, M.S. Ochoa, O. Cabrera [et al.] // Transplantation. - 2003. - Vol. 75. - P. 1356-1360.

96.Ferguson, M.W.J. Scar-free healing: from embryonic mechanisms to adult therapeutic intervention / M.W.J. Ferguson, S. O'Kane // Philosophical Transactions of the Royal Society of London B: Biological Sciences. - 2004. -Vol. 359, № 1445. -P. 839-850.

97.Ferguson, M.W. Prophylactic administration of avotermin for improvement of skin scarring: three double-blind, placebo-controlled, phase I/II studies / M.W. Ferguson, J. Duncan, J. Bond [et al.] // The Lancet. - 2009. - Vol. 373, № 9671. -P. 1264-1274.

98. Fliser, D. Erythropoietin and treatment of non-anemic conditions—cardiovascular protection / D. Fliser, H. Haller // Semin. Hematol. - 2007. - Vol. 44. - P. 212217.

99. Foldi, V. Effects of fluid resuscitation methods on burn trauma-induced oxidative stress / V. Foldi, C. Csontos, L. Bogar [et al.] // J. of Burn Care & Research. -2009. - Vol. 30, № 6. - P. 957-966.

100. Frisman, E. Red cell antioxidant enzymes and prognostic indexes in patients with burns / E. Frisman, O. Racz, A. Chmelarova // Burns. - 2013. - Vol. 39, № 3.

- P. 458-464.

101. Galkin, A.A. Damage of protective functions of neutrophils in early stages of burn disease / A.A. Galkin, V.S. Demidova // Biology Bulletin Reviews. - 2012.

- Vol. 2, № 6. - P. 512-524.

102. Genc, S. Erythropoietin and the nervous system / S. Genc, T.F. Koroglu, K. Genc // Brain research. - 2004. - Vol. 1000, № 1. - P. 19-31.

103. Ghahary, A. Role of keratinocyte-fibroblast cross - talk in development of

hypertrophic scar / A. Ghahary, A. Ghaffari // Wound Repair and Regeneration. -2007. - Vol. 15, № 1. - P. 46-53.

104. Ghanime, G. Epidemiology of major burns at the Lebanese burn center in geitawi, Lebanon / G. Ghanime, N. Rizkallah, J.M. Said // Ann burns fire disasters. - 2013. - Vol. 26, № 2. - P. 59-62.

105. Giri, P. Skin regeneration in deep second-degree scald injuries either by infusion pumping or topical application of recombinant human erythropoietin gel / P. Giri, S. Ebert, U.D. Braumann [et al.] // Drug Design, Development and Therapy. - 2015. - Vol. 9. -P. 2565-2579.

106. Gragnani, A. Keratinocyte growth factor, tumor necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta gene expression in cultured fibroblasts and keratinocytes from burned patients / A. Gragnani, B.R. Müller, I.D.C.G.D. Silva [et al.] // Acta Cirurgica Brasileira. - 2013. - Vol. 28, № 8. - P. 551-558.

107. Günter, C.I. New strategies in clinical care of skin wound healing / C.I. Günter, H.G. Machens // European Surgical Research. - 2012. - Vol. 49, № 1. - P. 16-23.

108. Günter, C.I. A multi-center study on the regenerative effects of erythropoietin in burn and scalding injuries: study protocol for a randomized controlled trial / C.I. Günter, A. Bader, U. Dornseifer [et al.] // Trials. - 2013. -Vol. 14, № 1. - P. 124.

109. Haik, J. Increased serum NKG2D-ligands and downregulation of NKG2D in peripheral blood NK cells of patients with major burns / J. Haik, G. Nardini, N. Goldman [et al.] // Oncotarget. - 2016. - Vol. 7, № 3. - P. 2220-2228.

110. Hamed, S. Erythropoietin, a novel repurposed drug: an innovative treatment for wound healing in patients with diabetes mellitus / S. Hamed, C.L. Bennett, C. Demiot [et al.] // Wound Repair and Regeneration. - 2014. - Vol. 22, № 1. - P. 23-33.

111. Hand, C.C. Promises and Pitfalls in Erythopoietin-Mediated Tissue Protection: Are Nonerythropoietic Derivatives a Way Forward? / C.C. Hand, M. Brines // J. Investig. Med. - 2011. - Vol. 59, № 7. - P. 1073-1082.

112. Hanschen, M. Injury induces early activation of T cell receptor signaling pathways in CD4+ regulatory T cells / M. Hanschen, G. Tajima, F. O'Leary [et al.] // Shock (Augusta, Ga.). - 2011. - Vol. 35, № 3. - P. 252-257.

113. Hermanns-Le, T. Protomyofibroblast Pathway in Early Thermal Burn Healing / T. Hermanns-Le, G.E. Pierard, S. Jennes [et al.] // Skin pharmacology and physiology. - 2015. - Vol. 28, № 5. - P. 250-254.

114. Hong, J.P. The combined effect of recombinant human epidermal growth factor and erythropoietin on full-thickness wound healing in diabetic rat model / J.P. Hong, S.W. Park // Int. Wound J. - 2014. - Vol. 11, № 4. - P. 373-378.

115. Hu, L. Erythropoietin ameliorates renal ischemia and reperfusion injury via inhibiting tubulointerstitial inflammation / L. Hu, C. Yang, T. Zhao [et al.] // J. Surg. Res. - 2012. - Vol. 176, № 1. - P. 260-266.

116. Husain, R.D. Detection of cis-trans isomers of a synthetic peptide fragment of Erythropoietin / R.D. Husain, J. McCandless, P.J. Stevenson [et al.] // J. of chromatographic science. - 2002. - Vol. 40, № 1. - P. 1-13.

117. Jasiulewicz, A. Phenotype, proliferation and apoptosis of B lymphocytes in hemodialysis patients treated with recombinant human erythropoietin / A. Jasiulewicz, K.A. Lisowska, A. D^bska-Slizien [et al.] // International immunology. - 2016. - Vol. 28, № 11. - P. 523-532.

118. Jelkmann, W. Modulation of the Production of Erythropoietin by Cytokines: In vitro Studies and Their Clinical Implications1 / W. Jelkmann, M. Wolff, J. Fandrey // Erythropoietin in the 90s. - Karger Publishers. - 1990. - Vol. 87. - P. 68-77.

119. Jeschke, X.G. Perturbed mononuclear phagocyte system in severely burned and septic patientsfangming / X.G. Jeschke, M.G. Jeschke // Shock. - 2013. - Vol. 40, № 2. - P. 81-88.

120. Ji, M.H. Erythropoietin pretreatment attenuates seawater aspiration-induced acute lung injury in rats / M.H. Ji, J.H. Tong, Y.H. Tan [et al.] // Inflammation. -2016. - Vol. 39, № 1. - P. 447-456.

121. Joseph A. Molnaruse of Standardized, Quantitative Digital Photography in a multicenterweb-based Study / A. Joseph, W. K. Lew, D. A. Rapp [et al.] // Published January. - 2009. - № 12. - P. 19-26.

122. Jozsef, L. A rekombinans human erythropoietin-a fokozza a human laphamrak sugarerzekenyseget preklinikai modellben / L. Jozsef, K. Istvan, R. Erzsebet [et al.] // Hungarian Oncology. - 2007. - Vol. 51. - P. 53-61.

123. Kamolz, L.P. The use of erythropoietin in burns: sometimes good, sometimes not? / L.P. Kamolz, F. Smolle-Juettner, D. Parvizi // Critical care medicine. - 2013. - Vol. 41, № 4. - P. 1138-1139.

124. Katavetin, P. Antioxidative effects of erythropoietin / P. Katavetin, K. Tungsanga, S. Eiam-Ong // Kidney Int. Suppl. - 2007. - Vol. 107. - P. 10-15.

125. Kawakami, M. Measurement of interleukin-6, interleukin-10, and tumor necrosis factor-alpha levels in tissues and plasma after thermal injury in mice / M.

Kawakami, N. Kaneko, H. Anada [et al.] // Surgery. - 1997. - Vol. 121, № 4. - P. 440-448.

126. Kawasaki, T. Role of natural killer dendritic cells in host resistance against Pseudomonas aeruginosa infection after thermal injury in mice / T. Kawasaki, M. Kobayashi, D.N. Herndon [et al.] // Shock. - 2010. - Vol. 34, № 1. - P. 83-89.

127. Khodosovskii, M.N. Erythropoietin influence on the blood oxygen transport and prooxidant-antioxidant state during hepatic ischemia-reperfusion / M.N. Khodosovskii, V.V. Zinchuk // Rossiiskii fiziologicheskii zhurnal imeni IM Sechenova. - 2014. - Vol. 100, № 5. - P. 592-601.

128. Kilani, R.T. Keratinocyte conditioned medium abrogates the modulatory

effects of IGF - 1 and TGF - ß1 on collagenase expression in dermal fibroblasts /

R.T. Kilani, L. Guilbert, X. Lin [et al.] // Wound repair and regeneration. - 2007. -Vol. 15, № 2. - P. 236-244.

129. Kirkov, V. Evaluation of the Pharmacokinetics of Two Recombinant Human Erythropoietin Preparations: Epoetin Zeta and Epoetin Alfa / V. Kirkov, V. Dimitrova, M. Siebert-Weigel [et al.] // Arzneimittelforschung. - 2008. - Vol. 58, № 05. - P. 220-224.

130. Kraft, R. Predictive Value of IL-8 for Sepsis and Severe Infections After Burn Injury: A Clinical Study / R. Kraft, D.N. Herndon, C.C. Finnerty [et al.] // Shock (Augusta, Ga.). - 2015. - Vol. 43, № 3. - P. 222-227.

131. Kumar R. Modified Transdermal Technologies: Breaking the Barriers of Drug Permeation via the Skin / R. Kumar, A. Philip. // Tropical Journal of Pharmaceutical Research. - 2007. - Vol. 6, № 1. - P. 633-644.

132. Lagus, H. Prospective study on burns treated with Integra®, a cellulose sponge and split thickness skin graft: comparative clinical and histological study— randomized controlled trial / H. Lagus, M. Sarlomo-Rikala, T. Böhling [et al.] // Burns. - 2013. - Vol. 39, № 8. - P. 1577-1587.

133. Lai, P.H. Structural characterization of human erythropoietin / P.H. Lai, R. Everett, F.F. Wang [et al.] // J. of Biological Chemistry. - 1986. - Vol. 261, № 7. -P. 3116-3121.

134. Lebedev, M.J. Peripheral blood lymphocytes immunophenotype and serum concentration of soluble HLA class I in burn patients / M.J. Lebedev, M.A. Krizhanova, S.A. Vilkov [et al.] // Burns. - 2003. - Vol. 29, № 2. - P. 123-128.

135. Leff, J.A. Increased serum catalase activity in rats subjected to thermal skin injury / J.A. Leff, L.K. Burton, E.M. Berger [et al.] // Inflammation. - 1993. - Vol. 17, № 2. - P. 199-204.

136. Li, J. Effects of erythropoietin pretreatment on pro-and anti-inflammatory balance in rats with severe acute pancreatitis / J. Li, Y. Luo, Z. Li [et al.] // Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. - 2012. - Vol. 32, № 1. - P. 93-96.

137. Li, G. ILK-PI3K/AKT pathway participates in cutaneous wound contraction by regulating fibroblast migration and differentiation to myofibroblast / G. Li, Y.Y. Li, J.E. Sun [et al.] // Laboratory Investigation. - 2016. - Vol. 96, № 7. - P. 741-751.

138. Lisowska, K.A. Erythropoietin receptor is expressed on human peripheral blood T and B lymphocytes and monocytes and is modulated by recombinant human erythropoietin treatment / K.A. Lisowska, A. Debska-Slizien, E. Bryl [et al.] // Artif. Organs. - 2010. - Vol. 34, № 8. - P. 654-662.

139. Lisowska, K.A. Flow cytometric analysis of STAT5 phosphorylation and CD95 expression in CD4+ T lymphocytes treated with recombinant human erythropoietin / K.A. Lisowska, A. Dçbska-Slizien, A. Jasiulewicz [et al.] // J. of Receptors and Signal Transduction. - 2011. - Vol. 31, № 3. - P. 241-246.

140. Lisowska, K.A. Changes in the Expression of Transcription Factors Involved in Modulating the Expression of EPO-R in Activated Human CD4-Positive Lymphocytes / K.A. Lisowska, J.E. Frackowiak, A. Mikosik [et al.] // PLoS One. - 2013. - Vol. 8, № 4. - P. e60326.

141. Lisowska, K.A. The influence of recombinant human erythropoietin on apoptosis and cytokine production of CD4+ lymphocytes from hemodialyzed

patients / K.A. Lisowska, A. Debska-Slizien, A. Jasiulewicz [et al.] // J. Clin. Immunol. - 2013. - Vol. 33, № 3. - P. 661-665.

142. Liu, Q.Y. Naturally existing CD11c low CD45RB high dendritic cells protect mice from acute severe inflammatory response induced by thermal injury / Q.Y. Liu, Y.M. Yao, S.W. Zhang [et al.] // Immunobiology. - 2011. - Vol. 216, № 1. - P. 47-53.

143. Liu, L. The impact of sialic acids on the pharmacokinetics of a PEGylated erythropoietin / L. Liu, H. Li, S.R. Hamilton [et al.] // J. of pharmaceutical sciences. - 2012. - Vol. 101, № 12. - P. 4414-4418.

144. Liu, H. A novel subpopulation of peripheral blood mononuclear cells presents in major burn patients / H. Liu, J. Ding, Z. Ma [et al.] // Burns. - 2015. -Vol. 41, № 5. - P. 998-1007.

145. Liu, J. Downregulation of let7b promotes COL1A1 and COL1A2 expression in dermis and skin fibroblasts during heat wound repair / J. Liu, C. Luo, Z. Yin [et al.] // Molecular medicine reports. - 2016. - Vol. 13, № 3. - P. 2683-2688.

146. Lombardero, M. Erythropoietin: a hormone with multiple functions / M. Lombardero, K. Kovacs, B.W. Scheithauer // Pathobiology. - 2011. - Vol. 78, № 1. - P. 41-53.

147. Maekawa, T. Impairment of splenic B and T lymphocytes in the early period after severe thermal injury: immunohistochemical and electron microscopic analysis / T. Maekawa, H. Kajihara, K. Okabayashi [et al.] // Burns. - 2002. - Vol. 28, № 4. - P. 329-339.

148. Maiese, K. Erythropoietin: New Directions for the Nervous System / K. Maiese, Z.Z. Chong, Y.C. Shang [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2012. - Vol. 13, № 9. - P. 11102-11129.

149. Maiese, K. Erythropoietin and diabetes mellitus / K. Maiese // World journal of diabetes. - 2015. - Vol. 6, № 14. - P. 1259-1273.

150. Maiese, K. Charting a course for erythropoietin in traumatic brain injury / K. Maiese // J. of translational science. - 2016. - Vol. 2, № 2. - P. 140-144.

151. Mausberg, A.K. Erythropoietin ameliorates rat experimental autoimmune neuritis by inducing transforming growth factor-beta in macrophages / A.K. Mausberg, G.M. Zu Hörste, T. Dehmel [et al.] // PloS one. - 2011. - Vol. 6, № 10.

- P. e26280.

152. Meyer, F.R.L. Expression of platelet-derived growth factor BB, erythropoietin and erythropoietin receptor in canine and feline osteosarcoma / F.R.L. Meyer, R. Steinborn, H. Grausgruber [et al.] // The Veterinary J. - 2015. -Vol. 206, № 1. - P. 67-74.

153. Mogo§anu, G.D. Natural products locally modulators of the cellular response: therapeutic perspectives in skin burns / G.D. Mogo§anu, F.C. Popescu, C.J. Busuioc [et al.] // Rom J. Morphol Embryol. - 2012. - Vol. 53, № 2. -P. 249262.

154. Möller, I. Synthesis, characterisation, and mass spectrometric detection of a pegylated EPO - mimetic peptide for sports drug testing purposes / I. Möller, A.

Thomas, H. Geyer [et al.] // Rapid Communications in Mass Spectrometry. - 2011.

- Vol. 25, № 15. - P. 2115-2123.

155. Molloy, R.G. The humoral immune response after thermal injury: an experimental model / R.G. Molloy, M. Nestor, K.H. Collins [et al.] // Surgery-Saint Louis - 1994. - Vol. 115. - P. 341-348.

156. Mühl, D. Comparison of oxidative stress & leukocyte activation in patients with severe sepsis & burn injury / D. Mühl, G. Woth, L. Drenkovics [et al.] // The Indian j. of medical research. - 2011. - Vol. 134, № 1. - P. 69.

157. Nagasawa, K. The influence of artificially introduced N-glycosylation sites on the in vitro activity of Xenopus laevis erythropoietin / K. Nagasawa, M. Meguro, K. Sato [et al.] // PloS one. - 2015. - Vol. 10, № 4. - P. e0124676.

158. Nassar, M.A. Time-dependent morphological and biochemical changes following cutaneous thermal burn injury and their modulation by copper nicotinate complex: an animal model / M.A. Nassar, H.M.S. Eldien, H.S.A. Tawab [et al.] // Ultrastructural pathology. - 2012. - Vol. 36, № 5. - P. 343-355.

159. Navarro, J.C. Endothelial nitric oxide synthase mediates the cerebrovascular effects of erythropoietin in traumatic brain injury / J.C. Navarro, S. Pillai, L.L. Ponce [et al.] // Frontiers in immunology. - 2014. - Vol. 5. - P. 494.

160. Nishiya, D. Effects of erythropoietin on cardiac remodeling after myocardial infarction / D. Nishiya, T. Omura, K. Shimada [et al.] // J. of pharmacological sciences. - 2006. - Vol. 101, № 1. - P. 31-39.

161. Niu, H.S. Erythropoietin ameliorates hyperglycemia in type 1 -like diabetic rats / H.S. Niu, C.H. Chang, C.S. Niu [et al.] // Drug Des Devel Ther. - 2016. -Vol. 3, № 10. - P. 1877-1884.

162. Nogawa-Kosaka, N. Structural and biological properties of erythropoietin in Xenopus laevis / N. Nogawa-Kosaka, T. Hirose, N. Kosaka [et al.] // Experimental hematology. - 2010. - Vol. 38, № 5. - P. 363-372.

163. Nucera, S. The interplay between macrophages and angiogenesis in development, tissue injuryand regeneration / S. Nucera, D. Biziato, M. De Palma // Int J Dev Biol. - 2011. - Vol. 55, № 4-5. - P. 495-503.

164. Occleston, N.L. Prevention and reduction of scarring in the skin by transforming growth factor beta 3 (TGFß3): from laboratory discovery to clinical pharmaceutical / N.L. Occleston, H.G. Laverty, S. O'Kane [et al.] // J. of Biomaterials Science, Polymer Edition. - 2008. - Vol. 19, № 8. - P. 1047-1063.

165. Omlor, G.W. Increased bone formation in a rabbit long-bone defect model after single local and single systemic application of erythropoietin / G.W. Omlor, K. Kleinschmidt, S. Gantz [et al.] // Acta orthopaedica. - 2016. - Vol. 87, № 4. -P. 425-431.

166. Patel, N.S.A. Bench-to-bedside review: Erythropoietin and its derivatives as therapies in critical care / N.S.A. Patel, K.K. Nandra, C. Thiemermann // Critical Care. - 2012. - Vol. 16, № 4. - P. 229.

167. Patenaude, J. Burn injury induces a change in T cell homeostasis affecting preferentially CD4+ T cells / J. Patenaude, M. D'Elia, C. Hamelin [et al.] // J. of leukocyte biology. - 2005. - Vol. 77, № 2. - P. 141-150.

168. Patil, N.K. IL-15 superagonist expands mCD8+ T, NK and NKT cells after burn injury but fails to improve outcome during burn wound infection / N.K. Patil, L. Luan, J.K. Bohannon [et al.] // PloS one. - 2016. - Vol. 11, № 2. - P. e0148452.

169. Penn, J.W. The role of the TGF-ß family in wound healing, burns and scarring: a review / J.W. Penn, A.O. Grobbelaar, K.J. Rolfe // Intjburns Trauma. -2012. - Vol. 2, № 1. - P. 18-28.

170. Peter, F.W. The effect of severe burn injury on proinflammatory cytokines and leukocyte behavior: its modulation with granulocyte colony-stimulating factor / F.W. Peter, D.A. Schuschke, J.H. Barker [et al.] // Burns. - 1999. - Vol. 25, № 6. - p. 477-486.

171. Polutova, N.V. Positive effect of cytoflavin on metabolic status changes in patients with burn disorder / N.V. Polutova, N.V. Ostrovskii, M.G. Romantsov [et al.] // Eksperimental'naia i klinicheskaia farmakologiia. - 2011. - Vol. 74, № 7. -P. 33-37.

172. Popescu, F.C. Macrophage response in experimental third-degree skin burns treated with allograft. Histological and immunohistochemical study / F.C. Popescu, G.D. Mogo§anu, C.J. Busuioc [et al.] // Romanian j. of morphology and embryology= Revue roumaine de morphologie et embryologie. - 2012. - Vol. 53, № 4. - P. 1027-1036.

173. Posluszny Jr, J.A. Burn injury dampens erythroid cell production through reprioritizing bone marrow hematopoietic response / J.A. Posluszny Jr, K. Muthumalaiappan, A. Kini [et al.] // The J. of trauma. - 2011. - Vol. 71, № 5. - P. 1288.

174. Ramos, A.S. Biological evaluation of recombinant human erythropoietin in pharmaceutical products / A.S. Ramos, C.A. Schmidt, S.S. Andrade [et al.] // Brazilian j. of medical and biological research. - 2003. - Vol. 36, № 11. - P. 1561-1569.

175. Rani, M. Aging and the pathogenic response to burn / M. Rani, M.G. Schwacha // Aging dis. - 2012. - Vol. 3, № 2. - P. 171-180.

176. Rani, M. Burn wound y5 T-cells support a Th2 and Th17 immune response / M. Rani, Q. Zhang, M.G. Schwacha // J. of burn care & research: official publication of the American Burn Association. - 2014. - Vol. 35, № 1. - P. 46-53.

177. Rani, M. Gamma delta (y5) T-cells regulate wound myeloid cell activity after burn / M. Rani, Q. Zhang, M.G. Schwacha // Shock (Augusta, Ga.). - 2014. -Vol. 42, № 2. - P. 133-141.

178. Rani, M. Activated skin y5 T-cells regulate T-cell infiltration of the wound site after burn / M. Rani, Q. Zhang, M.R. Scherer [et al.] // Innate immunity. -2015. - Vol. 21, № 2. - P. 140-150.

179. Rendon, J.L. Th17 cells: critical mediators of host responses to burn injury and sepsis / J.L. Rendon, M.A. Choudhry // J. of leukocyte biology. - 2012. - Vol. 92, № 3. - P. 529-538.

180. Ribeiro, S. Impaired renal endothelial nitric oxide synthase and reticulocyte production as modulators of hypertension induced by rHuEPO in the rat / S. Ribeiro, P. Garrido, J. Fernandes [et al.] // Life sciences. - 2016. - Vvol. 151. - P. 147-156.

181. Ringheim, G.E. Teriflunomide attenuates immunopathological changes in the dark agouti rat model of experimental autoimmune encephalomyelitis / G.E. Ringheim, L. Lee, L. Laws-Ricker [et al.] // Frontiers in neurology. - 2013. - Vol. 4. - P. 169.

182. Roberts, D. Erythropoietin: induction of synthesis to signal transduction / D. Roberts, D.J. Smith // J. of molecular endocrinology. - 1994. - Vol. 12, № 2. - P. 131-148.

183. Robson, M.C. Growth factors as wound healing agents / M.C. Robson // Current opinion in biotechnology. - 1991. - Vol. 2, № 6. - P. 863-867.

184. Robson, M.C. The safety and effect of topically applied recombinant basic fibroblast growth factor on the healing of chronic pressure sores / M.C. Robson, L.G. Phillips, W.T. Lawrence [et al.] // Annals of surgery. - 1992. - Vol. 216, № 4. - P. 401-406.

185. Rocha, J. Erythropoietin reduces acute lung injury and multiple organ failure/dysfunction associated to a scald-burn inflammatory injury in the rat / J. Rocha, M. Eduardo-Figueira, A. Barateiro [et al.] // Inflammation. - 2015. - Vol. 38, № 1. - P. 312-326.

186. Rolfing, J.H.D. The effect of erythropoietin on bone / J.H.D. Rolfing // Acta Orthopaedica. - 2014. - Vol. 85, № 353. - P. 1-29.

187. Sandhi, A. The effect of erythropoietin administration in experimental burns wound healing: an animal study / A. Sandhi, A. Wardhana // Jurnal Plastik Rekonstruksi. - 2016. - Vol. 3, № 1. - P. 1-8.

188. Sayan, H. Erytropoietin stimulates wound healing and angiogenesis in mice /

H. Sayan, V.H. Ozacmak, A. Guven [et al.] // J. of investigative surgery. - 2006. -№ 19. - P. 163-173.

189. Sayed, S. Effect of major burns on early and late activating markers of peripheral blood T lymphocytes / S. Sayed, R. Bakry, M. El-Shazly [et al.] // Annals of burns and fire disasters. - 2012. - Vol. 25, № 1. - P. 17-25.

190. Schwacha, M.G. Mitochondrial damage-associated molecular patterns activate y5 T-cells / M.G. Schwacha, M. Rani, Q. Zhang [et al.] // Innate immunity. - 2014. - Vol. 20, № 3. - P. 261-268.

191. Schneider, D.F. Innate lymphocyte subsets and their immunoregulatory roles in burn injury and sepsis / D.F. Schneider, C.H. Glenn, D.E. Faunce // J. of burn care & research. - 2007. - Vol. 28, № 3. - P. 365-379.

192. Schneider, D.F. Prevention of NKT cell activation accelerates cutaneous wound closure and alters local inflammatory signals / D.F. Schneider, J.L. Palmer, J.M. Tulley, E.J. Kovacs [et al.] // J. of Surgical Research. - 2011. - Vol. 171, №

I. - P. 361-373.

193. Shalom, A. Protective effect of human recombinant copper-zinc superoxide dismutase on zone of stasis survival in burns in rats / A. Shalom, E. Kramer, M. Westreich // Ann plastsurg. - 2011. - Vol. 66, № 6. - P. 607-609.

194. Shen, H. Burn injury triggered dysfunction in dendritic cell response to TLR9 activation and resulted in skewed T cell functions / H. Shen, P.E. de Almeida, K.H. Kang [et al.] // PloS one. - 2012. - Vol. 7, № 11. - P. e50238.

195. Shen, L. Anti-inflammative effect of glycyrrhizin on rat thermal injury via inhibition of high-mobility group box 1 protein / L. Shen, Z. Cui, Y. Lin [et al.] // Burns. - 2015. - Vol. 41, № 2. - P. 372-378.

196. Sherwood, J.B. The chemistry and physiology of erythropoietin / J.B. Sherwood // Vitamins & Hormones. - 1984. - Vol. 41. - P. 161-211.

197. Singer, A.J. Apoptosis and necrosis in the ischemic zone adjacent to third degree burns / A.J. Singer, S.A. McClain, B.R. Taira [et al.] // Academic Emergency Medicine. - 2008. - Vol. 15, № 6. - P. 549-554.

198. Sorg, H. Effects of erythropoietin in skin wound healing are dose related / H. Sorg, C. Krueger, T. Schulz [et al.] // The FASEB Journal. - 2009. - Vol. 23, № 9.

- P. 3049-3058.

199. Strunk, T. EPO inhibitscytokine production of neonatal and adult leukocytes / T. Strunk, C. Härtel, P. Temming [et al.] // ActaPaediatr. - 2008. - Vol. 97, № 1.

- P. 16-20.

200. Struzyna, J. Serum Cytokine Levels (Il-4, Il-6, Il-8, G-Csf, Gm-Csf) in Burned Patients / J. Struzyna, Z. Pojda, B. Braun [et al.] // Burns. - 1995. - Vol. 21, № 6. - P. 437-440.

201. Tobalem, M. Erythropoietin in the prevention of experimental burn progression / M. Tobalem, Y. Harder, T. Schuster [et al.] // British J. of Surgery. -2012. - Vol. 99, № 9. - P. 1295-1303.

202. Tobalem, M. Secondary burn progression decreased by erythropoietin / M. Tobalem, Y. Harder, F. Rezaeian [et al.] // Critical care medicine. - 2013. - Vol. 41, № 4. - P. 963-971.

203. Todosenko, N.M. Erythropoietin exerts direct immunomodulatory effects on the cytokine production by activated human T-lymphocytes / N.M. Todosenko, V.A. Shmarov, V.V. Malashchenko [et al.] // International immunopharmacology.

- 2016. - Vol. 36. - P. 277-281.

204. Trincavelli, M.L. Regulation of Erythropoietin Receptor Activity in Endothelial Cells by Different Erythropoietin (EPO) Derivatives: An in Vitro Study / M.L. Trincavelli, E. Da Pozzo, O. Ciampi [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2013. - Vol. 14, № 2. - P. 2258-2281.

205. Turhan, A.H. Erythropoietin may attenuate lung inflammation in a rat model of meconium aspiration syndrome / A.H. Turhan, A. Atici, N. Mu§lu [et al.] // Experimental lung research. - 2016. - Vol. 42, № 4. - P. 199-204.

206. Vaki, I. An early circulating factor in severe sepsis modulates apoptosis of monocytes and lymphocytes / I. Vaki, H. Kranidioti, V. Karagianni [et al.] // J. of leukocyte biology. - 2011. - Vol. 89, № 3. - P. 343-349.

207. Volkova, N. Application of Cryopreserved Fibroblast Culture with Au Nanoparticles to Treat Burns / N. Volkova, M. Yukhta, O. Pavlovich [et al.] // Nanoscale research letters. - 2016. - Vol. 11, № 22. - P. 1-6.

208. Wang, F.F. Some Chemical Properties of Human Erythropoietin* / F.F. Wang, C.K.H. Kung, E. Goldwasser // Endocrinology. - 1985. - Vol. 116, № 6. -P. 2286-2292.

209. Wang, J. Improved scar in postburn patients following interferon-a2b treatment is associated with decreased angiogenesis mediated by vascular endothelial cell growth factor / J. Wang, H. Chen, H.A. Shankowsky [et al.] // J. of Interferon & Cytokine Research. - 2007. - Vol. 28, № 7. - P. 423-434.

210. Wang, G. Erythropoietin attenuates cardiopulmonary bypass-induced renal inflammatory injury by inhibiting nuclear factor-KB p65 expression / G. Wang, H. Huang, H. Wu [et al.] // Eur. J. Pharmacol. - 2012. - Vol. 689, № 1-3. - P. 154159.

211. Wen, D. Erythropoietin Structure-Function Relationships: High Degreeof Sequence Homology Among Mammals / D. Wen, J.P. Boissel, T.E. Tracy [et al.] // Blood. -1993. - Vol. 82, № 5. - P. 1507-1516.

212. Werner, A. Glycoengineering the N-acyl side chain of sialic acid of human erythropoietin affects its resistance to sialidase / A. Werner, R. Horstkorte, D. Glanz [et al.] // Biol. Chem. - 2012. - Vol. 393. - P.777-783.

213. Woo, S. Population pharmacokinetics and pharmacodynamics of peptidic erythropoiesis receptor agonist (ERA) in healthy volunteers / S. Woo, W. Krzyzanski, A.M. Duliege [et al.] // The J. of Clinical Pharmacology. - 2008. -Vol. 48, № 1. - P. 43-52.

214. Zhang, J. Recombinant human erythropoietin (rhEPO) alleviates early brain injury following subarachnoid hemorrhage in rats: possible involvement of Nrf2 -ARE pathway / J. Zhang, Y. Zhu, D. Zhou // Cytokine. - 2010. - Vol. 52, № 3. -P. 252-257.