Конструирование рекомбинантных белков для диагностики и терапии онкологических заболеваний тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.03, кандидат биологических наук Сыркина, Марина Сергеевна

• Сыркина, Марина Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сыркина, Марина Сергеевна

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

I. МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ В 15 ДИАГНОСТИКЕ И ТЕРАПИИ РАКА

1. Основные способы диагностики и терапии онкологических заболеваний

1.1. Способы терапии, реализуемые в практической медицине

1.1.1. Краткая характеристика

1.1.2. Трудности, возникающие при терапии

1.2. Основные способы диагностики онкологических заболеваний

1.3. Онкомаркеры как мишень для высокоселективных 22 противоопухолевых препаратов и диагностических средств

1.3.1. Злокачественная трансформация клетки и причины появления 23 онкомаркеров

1.3.2. Типы онкомаркеров

1.4. Методы молекулярной диагностики онкологических 26 заболеваний

1.5. Методы таргетной (направленной) терапии онкологических 28 заболеваний

1.5.1. Подавление экспрессии онкогенов на уровне трансляции.

1.5.2. Способы иммунотерапии рака.

1.5.3. Бинарные агенты в диагностике и терапии онкологических 35 заболеваний

2. Муцин миС1 как специфический маркер рака железистых 38 органов

2.1. Краткая характеристика муциновых гликопротеидов

2.2. Мембранный муцин МУС 1. Структура и свойства

2.3. Транспорт муцина MUC1 в ядро

2.4. Участие муцина MUC1 в передаче сигнала

2.5. Функционирование муцина MUC1 в здоровых тканях

2.6. Функционирование муцина MUC1 в опухолевой ткани

2.6.1. Сравнение нормального и опухоль-ассоциированного муцина 49 MUC

2.6.2. Модификация функций муцина MUC1 при злокачественной 51 трансформации клеток

2.7. Иммуногенность муцина MUC1 и роль области VNTR в 53 развитии естественного иммунного ответа организма

2.7.1. Аминокислотная последовательность и пространственная 53 организация области VNTR

2.7.2. Антигенные эпитопы области VNTR опухоль- 55 ассоциированного муцина MUC1 человека

2.8. Муцин MUC1 в адресной терапии и иммунотерапии рака

3. Интегрин avp3 как специфический маркер метастатической 57 меланомы человека

3.1. Краткая характеристика интегринов

3.2. Строение и свойства интегриновых рецепторов

3.3. Интегрин ауРз как член семейства интегриновых рецепторов

3.3.1. Экспрессия интегрина ау(3з при онкологических заболеваниях

3.3.2. Последовательность и пространственная организация 66 минимального интегрин ау(Зз-узнающего пептида

3.4. RGD-содержащие пептиды в диагностике и терапии рака

4. Энтеротоксины Staphylococcus aureus при создании препаратов для иммунотерапии рака

4.1. Общая характеристика энтеротоксинов S. aureus

4.2. Строение энтеротоксинов S.aureus и природа индукции Т- 73 клеточного ответа

4.3. Токсичность и участие костимуляторных молекул в развитии 77 суперантиген-индуцируемого Т-клеточного ответа

4.4. Мутантные формы суперантигенов, обладающие сниженным 79 «токсическим» действием на Т-лимфоциты.

ВЫВОДЫ 83 II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Материалы

1.1. Реактивы

1.2. Ферменты и антитела

1.3. Культуры клеток, бактериальные штаммы и плазмиды

2. Методы

2.1. Общие методы

2.2. Выделение суммарной ДНК из клеток S. aureus

2.3. Проведение полимеразной цепной реакции

2.4. Выделение и очистка Hisi0-VNTR

2.5. Выделение и очистка рекомбинантного SEH

2.6. Выделение и очистка рекомбинантных стрептавидин- 88 содержащих белков

2.7. Электрофоретический анализ белков

2.8. Масс-спектрометрический анализ белков

2.9. Иммуноблоттинг

2.10. Иммуноферментный анализ

2.11. УФ-спектроскопия

2.12. Количественное определение рекомбинантного белка Hisi0- 90 VNTR

2.13. Взаимодействие стрептавидин-содержащих белков с FITC- 90 биотином

2.14. Расщепление белков легкой цепью бычьей энтеропептидазы

2.15. Гель-фильтрация белков

2.16. Исследование связывания слитых белков БсШЛО, 8сШ.13, 8<Ж с клетками меланомных линий человека и мыши III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Выбор адапторной части при конструировании бинарного агента

1.1. Функции адаптора и требования к «идеальному» адаптору

1.2. Примеры молекул-адапторов и их характеристика

1.3. Молекула стрептавидина в роли адаптора 95 2. Получение «адресующей части» бинарного агента

2.1. Различные подходы к получению адресующих частей. 97 Бинарные агенты в иммунотерапии онкологических заболеваний

2.2. \nSiTR муцина МиС1 человека - онкомаркер и «адрес» для создания онковакцин

2.2.1. Подходы к получению VNTR муцина MUC

2.2.2. Иммуногенность рекомбинантного VNTR муцина MUC

2.2.3. Получение белка Hisi0-VNTR22 в клетках Escherichia coli

2.2.3.1. Создание генетических конструкций, содержащих ген vntr22 103 под контролем промотора уридинфосфорилазы Е. coli

2.2.3.2. Создание генетических конструкций, содержащих ген vntr22 105 под контролем промотора РНК-полимеразы бактериофага Т

2.2.3.3. Выделение и очистка белка Шбю-УШТ^

2.2.4. Определение структуры и свойств белка Шбю-УТЧЛИ^

2.2.4.1. Ультрафиолетовая спектроскопия

2.2.4.2. Иммуноблоттинг

2.2.4.3. MALDI масс-спектрометрия рекомбинантного белка His ю

2.2.5. Разработка метода количественного определения белка Hisi0- 111 VNTR

2.2.6. Использование белка Hisi0-VNTR22 при создании 115 диагностических и терапевтических агентов

2.3. Получение высокоселективных меланома-адресующих 119 белковых молекул

2.3.1. Способы получения RGD-пептидов.

2.2.1.1. Методы поддержания изогнутой конформации RGD-мотива

2.2.1.2. Подходы к получению поливалентных структур

2.3.2. Получение химерных белков SdRIO, SdR13, SdR15, 121 содержащих меланома-узнающие RGD-пептиды

2.3.2.1. Создание экспрессионных векторов pSdRIO, pSdR13 и pSdR15 122 для наработки белков SdR в клектах Е. coli

2.3.2.2. Выделение и очистка химерных белков SdRIO, SdR13 и SdR

2.3.3. Исследование структуры и свойств выделенных слитых белков 126 SdRIO, SdR13, SdR

2.3.3.1. Исследование способности слитых со стрептавидином белков 126 SdRI O, SdR13 и SdR15 к тетрамеризации

2.3.3.2. Исследование гомогенности белковых препаратов SdRIO, 127 SdR13 и SdR

2.3.3.3. MALDI масс-спектрометрия

2.3.3.4. Связывание химерных белков с FITC-биотином.

2.3.3.5. Расщепление слитых белков при помощи легкой цепи бычьей 131 энтеропептидазы

2.3.4. Исследование специфичности белков SdR по отношению к 133 клеткам меланомных линий

3. Получение «действующей» (терапевтической) части бинарного агента.

3.1. Различные подходы к выбору «действующих» частей при 136 создании бинарного агента. «Действующая» часть онковакцины

3.2.1.

3.2.2.

3.2.3.

3.2.4.

3.2.5.

3.2.6.

Получение энтеротоксинов S.aureus - энтеротоксина Н (SEH) и 137 гибридного белка SAV-SEB, содержащего энтеротоксин В (SEB) слитой со стрептавидином (SAV)

Создание экспрессионных векторов для наработки белка SEH в 137 клетках прокариот

Выделение белка SEH

Создание экспрессионных векторов для наработки слитого 141 белка SAV-SEB в клетках Е. coli

Выделение химерного белка SAV-SEB

Исследование структуры химерного белка SAV-SEB

Исследование митогенной активности и цитотоксичности 144 химерного белка SAV-SEB по отношению к Т-лимфоцитам

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Конструирование рекомбинантных белков для диагностики и терапии онкологических заболеваний»

Актуальность темы. Учитывая высокий уровень смертности от онкологических заболеваний (по данным ВОЗ, свыше 7,5 млн. человек в год (Jermal et al., 2011), что составляет более 13 % всех случаев смерти), а также ежегодный прирост заболеваемости, увеличивается потребность в разработке эффективных противораковых препаратов и диагностических средств нового поколения. Накопленные к настоящему времени знания о механизмах злокачественной трансформации, функционировании и молекулярном составе клеток, претерпевших такую трансформацию, а также определенные успехи в исследовании онкомаркеров - молекул, позволяющих различить нормальные и опухолевые клетки, - формируют прочную теоретическую базу для создания агентов, способных к селективному воздействию на раковые клетки.

Для отработки схемы конструирования рекомбинантных белков, которые могут быть использованы при создании бинарных противоопухолевых препаратов и диагностических средств, в качестве моделей нами были выбраны два типа онкологических заболеваний - рак железистых органов и метастазирующая меланома человека. Данные формы рака обладают высоким метастатическим потенциалом и с высокой степенью вероятности приводят к летальному исходу.

Терапия рака железистых органов при помощи методов, реализуемых в клинической практике, не всегда проходит успешно. Причиной этому, в частности, являются гиперэкспрессирующиеся на поверхности раковых клеток высокомолекулярные гликопротеиды (Bansil & Turner, 2006), создающие гидрофильный барьер для многих химиотерапевтических препаратов. Успехи в области таргетной терапии, в основном, связаны с использованием препарата Herceptin™ (Герцептин) производства Roche (Швейцария), представляющего собой антитело, специфически узнающее маркер рака молочной железы Нег-2/neu (Hudis, 2007). Однако данный онкомаркер присутствует только у 25-30 % больных раком молочной железы, что указывает на необходимость дополнительного поиска маркеров для клеток данного типа злокачественного новообразования.

Было установлено, что при раке железистых органов в опухолевых клетках наблюдается гиперэкспрессия муцина MUC1. Кроме того, для опухолевого MUC1 характерно нарушение апикальной локализации и аберрантное гликозилирование, приводящее к обнажению белкового кора в области тандемных повторов (VNTR) экстрацеллюлярного домена, в норме экранированного разветвленными олигосахаридами (Hanisch & Ninkovic, 2006). Учитывая тот факт, что VNTR опухоль-ассоциированного муцина обладает иммуногенностью, приводящей к выработке у ряда пациентов антител, взаимодействующих с дегликозилированной формой белка (von Mensdorff-Pouilly et al., 2006), можно было предположить, что VNTR, частично или полностью лишенный гликозилирования, применим при разработке противоопухолевых вакцин.

В настоящее время уже продемонстрирована эффективность вакцин, содержащих пептиды из области VNTR муцина MUC1 человека. В частности, липосомальная вакцина Stimuvax™ (Стимувакс) производства Merck KGaA (Германия) проходит клинические испытания как препарат для активной специфической иммунотерапии немелкоклеточного рака легкого (Sangha & Butts, 2007).

Однако при получении вакцин часто используют короткие пептиды, содержащие около 1,5 повторов из области VNTR. Во многом это обусловлено возможностями и особенностями химического синтеза пептидов. Тем не менее, в ряде работ было показано усиление иммунного ответа на вводимый антиген при полимеризации антигенных детерминант. В связи с этим, получение белков, содержащих не менее пяти повторов из области VNTR муцина MUC1 человека является весьма существенным для разработки противораковых вакцин.

Для усиления индукции иммунного ответа на вакцинирующий препарат применимы белки, обладающие характеристиками суперантигенов. С этой целью могут быть использованы бактериальные энтеротоксины, для которых продемонстрирована высокая способность к неспецифической активации Т-лимфоцитов. В настоящее время достаточно подробно изучены энтеротоксины Staphylococcus aureus - определена их структура, функции и механизм активации иммунной системы. В экспериментах на мышах слитые белки, содержащие энтеротоксин A (SEA), продемонстрировали высокую эффективность при терапии солидных опухолей (Sun et al., 2011). Результаты этих экспериментов позволяют рассматривать энтеротоксины из S. aureus как перспективный иммуностимулирующий компонент вакцин и адресующих (таргетных) белков, позволяющий существенно увеличить их эффективность.

Одной из основных проблем терапии онкологических заболеваний является метастазирование, т.к. метастазы и микрометастазы трудноидентифицируемы. Тем не менее, существует ряд молекулярных маркеров, позволяющих выявить опухолевые клетки, приобретшие способность к метастазированию. Одним из таких маркеров является маркер агрессивной фазы развития меланомы - интегрин av(33. Было продемонстрировано, что в клетках меланомных линий человека, обладающих высоким метастатическим потенциалом, экспрессия интегрина av(33 увеличена в 50-100 раз по сравнению с экспрессией в клетках меланомных линий с низким метастатическим потенциалом (Gehlsen et al., 1992).

Исследования взаимодействия интегрина ау(3з с внеклеточными лигандами позволили установить, что к высокоаффинному связыванию с экстрацеллюлярным доменом рецептора обладает трипептид Arg-Gly-Asp (RGD).

На данный момент существует ряд противоопухолевых препаратов на основе RGD, которые уже проходят клинические испытания (Mas-Moruno et al., 2010).

Однако экспериментальные данные, полученные к настоящему времени, выявили ряд требований к пространственной организации (Saudek et al., 1991) и аминокислотному окружению RGD-мотива (Hölig et al, 2004), выполнение которых обеспечивает высокую эффективность и селективность связывания агента на основе RGD с мишенью. Кроме того, необходимо подчеркнуть положительную роль «поливалентности» меланома-узнающего адреса (Kok et al., 2002) в увеличении эффективности связывания RGD-содержащего агента.

Резюмируя вышесказанное, следует отметить, что к настоящему времени при разработке противоопухолевых препаратов были достигнуты определенные успехи. Однако, результаты последних исследований открывают новые перспективы для создания эффективных терапевтических препаратов и диагностических средств, что определяет актуальность настоящей работы. Цель работы.

1) Конструирование генов и экспрессионных плазмид для микробиологического синтеза в клетках Е. coli рекомбинантных белков, применимых в диагностике и терапии онкологических заболеваний человека.

2) Отработка методов выделения и очистки рекомбинантных белков.

3) Исследование биологических свойств и оценка терапевтического потенциала полученных рекомбинантных белков.

Научная новизна.

1) Создана экспрессионная конструкция для получения в клетках Е. coli нового белка Hisi0-VNTR22. С помощью иммуноферментного анализа показано, что моноклональные антитела, ■ специфичные к природному дегликозилированному VNTR муцина MUC1, способны к связыванию рекомбинантного Hisio-VNTR22. Полученные данные указывают на подобие структуры и конформации данного белка опухоль-ассоциированному VNTR муцина MUC1 человека. Это дает возможность использования данного рекомбинантного белка при создании онковакцины.

2) Созданы экспрессионные конструкции для получения в клетках Е. coli новых синтетических гибридных белков SdR, содержащих RGD-пептид, слитой со стрептавидином. Продемонстрировано селективное связывание таких гибридных белков с меланомными клетками человека и мыши. Этот факт позволяет предложить данные гибридные белки в качестве адресующих агентов при создании противомеланомных препаратов и диагностических средств.

3) Создана генетическая конструкция для гетерологичной экспрессии в клетках Е. coli предшественника энтеротоксина Н из S. aureus (SEH). Продемонстрировано, что лидерный пептид SEH обеспечивает транслокацию рекомбинантного белка в периплазматическое пространство клеток E.coli. Отработана методика хроматографической очистки рекомбинантного SEH.

4) Создана экспрессионная конструкция для получения в клетках Е. coli энтеротоксина В из S. aureus, слитого со стрептавидином (SAV-SEB). Структурное подобие SEB-компонента в составе химерного белка SAV-SEB природному SEB подтверждено результатами конкурентного связывания с антителами, полученными на природный SEB. Продемонстрировано, что белок SAV-SEB проявляет митогенную активность, характерную для природных энтеротоксинов из S. aureus. Этот факт позволяет предложить данный гибридный белок в качестве иммуностимулирующего агента при создании препаратов для адресной иммунотерапии рака, в том числе, двухфазной.

Предложенные схемы получения и очистки вышеупомянутых рекомбинантных белков могут послужить основой для разработки способов получения противораковых терапевтических агентов и диагностических средств.

Практическая ценность работы.

Сконструированы экспрессионные векторы и получены штаммы-продуценты для наработки в клетках E.coli слитых белков Hisi0-VNTR22, содержащих 22 тандемных повтора из области VNTR муцина MUC1 человека. Продемонстрирована способность моноклональных антител, полученных на природный дегликозилированный VNTR муцина MUC1 человека, связывать полипептид His,0-VNTR22, что свидетельствует о наличии у полипептида His]0-VNTR22 способности презентировать опухоль-ассоциированные антигенные эпитопы. Полученные результаты раскрывают потенциал данного белка при создании диагностических средств и вакцинирующих препаратов для активной иммунотерапии и профилактики рака молочной железы. Предложена схема выделения и очистки полипептида Hísio-VNTR22. Данная схема может быть положена в основу разработки способа получения противоопухолевых вакцин.

Сконструированы экспрессионные векторы и получены штаммы продуценты для наработки в клетках E.coli энтеротоксинов из S. aureus Н (SEH) и В (SEB), слитого со стрептавидином (SAV-SEB). Для гибридного рекомбинантного белка SAV-SEB продемонстрирована способность к индукции пролиферации цитотоксических Т-лимфоцитов, сравнимая с природными SEB и SEA. Это предполагает использование данного гибридного белка в качестве иммуностимулирующего агента при создании противораковых препаратов. Предложены схемы выделения и очистки полипептидов SAV-SEB и SEH. Данные схемы могут быть положены в основу способа получения препаратов для иммунотерапии онкологических заболеваний.

Сконструированы экспрессионные векторы и получены штаммы продуценты для наработки в клетках Е. coli белков, содержащих RGD-пептид, слитой со стрептавидином (SAV). Продемонстрирована способность таких белков к узнаванию клеток меланомных линий человека и мыши. Таким образом, белки SAV-RGD могут быть использованы для создания противомеланомных терапевтических препаратов и диагностических средств посредством присоединения биотинилированного токсического или визуализирующего агента, соответственно. Предложенная схема получения и очистки белков SAV-RGD создает предпосылки для разработки способа получения терапевтических и диагностических средств.

I. МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ В ДИАГНОСТИКЕ

И ТЕРАПИИ РАКА (Обзор литературы)

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Сыркина, Марина Сергеевна

выводы

Методом гетерологичной экспрессии в клетках Е. coli получены рекомбинантные белки Hisio-VNTR22, SdRIO, SdR13, SdR15, SEH, SAV-SEB которые могут быть использованы как потенциальные компоненты противоопухолевых и диагностических агентов.

1. Установлено, что рекомбинантный белок Hisi0-VNTR22, содержащий 22 тандемных повтора из области VNTR муцина MUC1 человека, формирует антигенные эпитопы, характерные для VNTR природного дегликозилированного муцина. Белок Hisi0-VNTR22 может быть использован при получении онковакцины.

2. Продемонстрирована способность гибридных белков SdRIO, SdR13 и SdR15, содержащих слитой со стрептавидином меланома-адресующий пептид (RGD10, RGD13 или RGD15, соответственно), к селективному узнаванию клеток меланомных линий человека (MeWo) и мыши (B16F10). Данные рекомбинантные белки могут найти применение в диагностике меланомы, а также при создании противомеланомных терапевтических агентов.

3. Показана способность лидерного пептида энтеротоксина Н из S. aureus к транслокации рекомбинантного белка в периплазматическое пространство клеток Е. coli. Установлена идентичность иммунохимических характеристик рекомбинантного SEH и природного SEH. Рекомбинантный SEH может быть использован в качестве компонента при создании бинарных агентов для иммунотерапии рака.

4. Продемонстрирована идентичность иммунохимических характеристик рекомбинантного SEB в составе слитого белка SAV-SEB и природного SEB. Установлена способность белка SAV-SEB к индукции цитотоксических Т-лимфоцитов, что позволяет использовать его в качестве токсического агента при создании бинарных агентов для активной иммунотерапии различных видов онкологических заболеваний.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сыркина, Марина Сергеевна, 2012 год

1. Abe M., Kufe D. Structural analysis of the DF3 human breast carcinoma-associated protein. // Cancer Res. 1989. V. 49. P. 2834-2839.

2. Abrahmsen L., Dohlsten M., Segren S., Bjork P., Jonsson E., Kalland T. // Characterization of two distinct MHC class II binding sites in the superantigen staphylococcal enterotoxin A. EMBO J. 1995. V. 14. P. 2978-2986.

3. Albelda S.M., Mette S.A., Elder D.E., Stewart R., Damjanovich L., Herlyn M., Buck C.A. Integrin distribution in malignant melanoma: association of the beta 3 subunit with tumor progression. // Cancer Res .1990. V. 50. P. 6757-6764.

4. Allen T.M. Ligand-targeted therapeutics in anticancer therapy. // Nat. Rev. Cancer. 2002. V. 2. P.750-763.

5. Arnaout M.A., Goodman S.L., Xiong J.P. Structure and mechanics of integrin-based cell adhesion. // Curr Opin Cell Biol. 2007. V. 19. P. 495-507.

6. Bafna S., Kaur S., Batra S.K. Membrane-bound mucins: the mechanistic basis for alterations in the growth and survival of cancer cells. // Oncogene. 2010. V. 29. P. 2893-2904.

7. Baker M.D., Acharya K.R. Superantigens: Structure, Function, and Diversity. // Methods Mol Biol. 2003. V. 214. P. 1-31

8. Bakker A.B., Marland G., de Boer A.J., Huijbens R.J., Danen E.H., Adema

9. G.J., Figdor C.G. Generation of antimelanoma cytotoxic T lymphocytes from healthy donors after presentation of melanoma-associated antigen-derived epitopes by dendritic cells in vitro. // Cancer Res. 1995. Vol. 55. P. 5330-5334.

10. Bansil R., Turner B.S. Mucin structure, aggregation, physiological functions and biomedical applications. // Current Opinion in Colloid & Interface Science. 2006. V. 11. P. 164-170

11. Baxevanis C.N., Papamichail M., Perez S.A. Toxicity profiles of HER2/neu peptide anticancer vaccines: the picture from Phase/I and II clinical trials. //

12. Expert Rev Vaccines. 2012. V. 11. P. 637-640.

13. Bayer E.A., Ben-Hur H., Hiller Y., Wilchek M. Postsecretory modifications of streptavidin. // Biochem J. 1989. V. 259. P. 369-76.

14. Belmont H.J., Price-Schiavi S., Liu B., Card K.F., Lee H.I., Han K.P., Wen J., Tang S., Zhu X., Merrill J., Chavillaz P.A., Wong J.L., Rhode P.R., Wong

15. H.C. Potent antitumor activity of a tumor-specific soluble TCR/IL-2 fusion protein. // Clin Immunol. 2006. V. 121. P. 29-39.

16. Bette M., Schafer M.K., van Rooijen N., Weihe E., Fleischer B. Distribution and kinetics of superantigen-induced cytokine gene expression in mouse spleen. // J Exp Med. 1993. V. 178. P. 1531-1539

17. Beum P.V., Bastola D.R., Cheng P.W. Mucin biosynthesis: epidermal growth factor downregulates core 2 enzymes in a human airway adenocarcinoma cell line. // Am J Respir Cell Mol Biol. 2003. V. 29. P. 48-56.

18. Bitler B.G., Menzl I., Huerta C.L., Sands B., Knowlton W., Chang A., Schroeder J.A. Intracellular MUC1 peptides inhibit cancer progression. // Clin Cancer Res. 2009. V. 15. P. 100-109.

19. Brayman M., Thathiah A., Carson D.D. MUC1: a multifunctional cell surface component of reproductive tissue epithelia. // Reprod Biol Endocrinol. 2004. V. 2. P. 4-13.

20. Bringmann A., Held S.A., Heine A., Brossart P. RNA vaccines in cancer treatment. // J Biomed Biotechnol. 2010. V. 2010 P. 1-12.

21. Buckle A.M., Schreiber G., Fersht A.R. Protein-protein recognition: crystal structural analysis of a barnase-barstar complex at 2.0-A resolution. // Biochemistry. 1994. V. 33. P. 8878-8889.

22. Burchell J, Taylor-Papadiiiiitriou J. Boshell M, Gendler S, Duhig. T. A short sequence, within the amino acid tandem repeat of a cancer-associated mucin, contains immunodominant epitopes. // Int J Cancer. 1989. V. 44. P. 691 -696.

23. Ceballos C. Adopting Molecular Tools for Diagnosis and Monitoring Malignant Hematological Disease: From Morphology to Genetic-Molecular Profile. //Cancerologia. 2007. V. 2. P. 121-136.

24. Chuang KH, Wang HE, Chen FM, Tzou SC, Cheng CM, Chang YC, Tseng WL, Shiea J, Lin SR, Wang JY, Chen BM, Roffler SR, Cheng TL. Endocytosis of PEGylated Agents Enhances Cancer Imaging and Anticancer Efficacy. // Mol Cancer Ther. 2010. V. 9. P. 1903-1912.

25. Conrads T.P, Zhou M, Petricoin E.F, Liotta L. and Veenstra T.D. Cancer diagnosis using proteomic patterns. // Expert Rev. Mol. Diagn. 2003. V. 3. P. 411-420.

26. Croce M.V, Isla-Larrain M.T, Capafons A, Price M.R, Segal-Eiras A. Humoral immune response induced by the protein core of MUC1 Mucin in pregnant and healthy women. // Breast Cancer Res. Treat. 2001, V. 69. P. 1-11.

27. Dalerba P, Cho R.W, Clarke M.F. Cancer stem cells: models and concepts. // Annu Rev Med. 2007. V. 58, P. 267-84.

28. Decoster L., Wauters I., Vansteenkiste J.F. Vaccination therapy for non-small-cell lung cancer: review of agents in phase III development. // Ann Oncol. 2012 V. 23. P. 1387-1393.

29. Deyev S.M., Waibel R., Lebedenko E.N., Schubiger A.P., Pluckthun A. Design of multivalent complexes using the barnase*barstar module. // Nature Biotechnology. 2003. V. 21. P. 1486-1492.

30. Dinges M.M., Orwin P.M., Schlievert P.M. Exotoxins of Staphylococcus aureus. // Clin. Microbiol. Rev. 2000. V. 13. P. 16 34.

31. Dong, Y.; Walsh, M.D.; Cummings, M.C.; Wright, R.G.; Khoo, S.K.; Parson, P.G.; McGuckin, M.A. Expression of MUC1 and MUC2 mucins in epithelial ovarian tumors. //J. Pathol. 1997. V. 183. P. 311-317

32. Dubey P.K., Mishra V., Jain S., Mahor S., Vyas S.P. Liposomes modified with cyclic RGD peptide for tumor targeting. // J Drug Target. 2004. V. 12. P. 257264.

33. Edelhoch H. Spectroscopic determination of tryptophan and tyrosine in proteins. //Biochemistry. 1967. V. 6. P. 1948-54.

34. Farlow S.J., Wang R.J., Pandori M.W., Sano T. A chimera of a gelatinase inhibitor peptide with streptavidin as a Afunctional tumor targeting reagent. // FEBS Lett. 2002. V. 516. P. 197-200.

35. Finn O.J. Cancer Immunology. // N Engl J Med. 2008. V. 358. P. 2704-2715.

36. Fioretti D., Iurescia S., Fazio V.M., Rinaldi M. DNA vaccines: developing new strategies against cancer. // J Biomed Biotechnol. 2010 V. 2010. P. 174378.

37. Fong L., Brockstedt D., Benike C., Wu L., Engleman E.G. Dendritic cells injected via different routes induce immunity in cancer patients. // J Immunol. 2001. V. 166. P. 4254-4259.

38. Fraser J.D. Clarifying the mechanism of superantigen toxicity. // PLoS Biol. 2011. V. 9. P. el001145.

39. Gehlsen K.R., Davis G.E., Sriramarao P. Integrin expression in human melanoma cells with differing invasive and metastatic properties. // Clin Exp Metastasis. 1992. V. 10. P. 111 -120.

40. Gendler S.J., Spicer A.P., Lalani E.N., Duhig T., Peat N., Burchell J., Pemberton L., Boshell M., Taylor-Papadimitriou J. Structure and biology of a carcinoma-associated mucin, MUC1. //Am. Rev. Respir. Dis. 1991. V. 144. P. 42 47.

41. Gendler S., Taylor-Papadimitriou J., Duhig T., Rothbard J., Burchell J. A highly immunogenic region of a human polymorphic epithelial mucin expressed by carcinomas is made up of tandem repeats. // J.Biol. Chem. 1988. V. 263. P. 12820- 12823.

42. Greaves M., Maley C.C. Clonal evolution in cancer. // Nature. 2012. V. 481. P. 306-313.

43. Green N.M. Avidin. 3. The nature of the biotin-binding site. // Biochem J. 1963. V. 89. P. 599-609.

44. Gurrath M., Millier G., Kessler H., Aumailey M., Timple R. Conformation/activity studies of rationally designed potent anti-adhesive RGD peptides. //Eur J Biochem 1992. V. 210. P. 911-921.

45. Haluskovâ J. Epigenetic studies in human diseases. // Folia Biol. 2010. V. 56. P. 83-96.

46. Han Y., Albericio F., Barany G. Occurrence and Minimization of Cysteine Racemization during Stepwise Solid-Phase Peptide Synthesis(l)(,)(2). // J Org Chem. 1997. V. 62. P. 4307^312.

47. Hanisch F.-G., Muller S. MUC1: the polymorphic appearance of a human mucin. // Glycobiology. 2000. V. 10. P. 439-449.

48. Hanisch F.G.; Ninkovic T. Immunology of O-glycosylated proteins: Approaches to the design of a MUC1 glycopeptide-based tumor vaccine. // Curr. Protein Pept. Sci. 2006. V. 7. P. 307-315.

49. Hartley R.W. Barnase-barstar interaction. // Methods Enzymol. 2001. V. 341. P. 599-611.

50. Hilkens J., Ligtenberg J.L., Vos H.L., Litvinov S.V. Cell membrane-associated mucins and their adhesion-modulating property. // Trends Biochem Sei. 1992. V. 17. P. 359-363.

51. Hofmann K., Wood S.W., Brinton C.C., Montibeller J.A., Finn M. Iminobiotin affinity columns and their application to retrieval of streptavidin. // Proc Natl Acad Sei USA. 1980. V. 77. P. 4666-4668.

52. Hölig P., Bach M., Völkel T., Nahde T., Hoffmann S., Müller R., Kontrmann R.E. Novel RGD lipopeptides for the targeting of liposomes to integrin-expressing endothelial and melanoma cells. // Protein Eng Des Sei. 2004. V. 17. P. 433-441.

53. Hollingsworth M.A., Swanson B.J. Mucins in cancer: protection and control of the cell surface. // Nat Rev Cancer. 2004. V. 4. P. 45-60.

54. Hoption Cann S.A., van Netten J.P., van Netten C. Dr William Coley and tumour regression: a place in history or in the future. // Postgrad Med J. 2003. V. 79. P. 672-680.

55. Huang L., Liao X., Beckett M., Li Y., Khanna K.K., Wang Z., Kharbanda S., Weichselbaum R., Kufe D. MUC1-C Oncoprotein Interacts Directly with ATM and Promotes the DNA Damage Response to Ionizing Radiation. // Genes Cancer. 2010. V. 1. P. 239-250.

56. Huang L.^Ren J., Chen D., Li Y., Kharbanda S., Kufe D. MUC1 cytoplasmic domain coactivates Wnt target gene transcription and confers transformation. // Cancer Biol Ther. 2003. V. 2. P. 702-706.

57. Huang Z.H., Shi L., Ma J.W., Sun Z.Y., Cai H., Chen Y.X., Zhao Y.F., Li Y.M. A totally synthetic, self-assembling, adjuvant-free MUC1 glycopeptide vaccine for cancer therapy. // J Am Chem Soc. 2012. V. 134. P. 8730-8733.

58. Hudis C.A. Trastuzumab — Mechanism of Action and Use in Clinical Practice. // N Engl J Med. 2007. V. 357. P. 39-51.

59. Hynes R.O. Integrins: bidirectional, allosteric signaling machines. // Cell. 2002. V. 110. P. 673-687.

60. Inouye S., Sato J., Sasaki S., Sahara Y. Streptavidin-aequorin fusion protein for bioluminescent immunoassay. // Biosci Biotechnol Biochem. 2011. V. 75. P. 568-571.

61. Ito K., Bassford P.J. Jr., Beckwith J. Protein localization in E. coli: is there a common step in the secretion of periplasmic and outer-membrane proteins? // Cell. 1981. V.24. P. 707-717.

62. Izard J.W., Kendall D.A. Signal peptides: exquisitely designed transport promoters. // Mol. Microbiol. 1994. V.13. P. 765 773.

63. Jemal A., Bray F., Center M.M., Ferlay J., Ward E., Forman D. Global cancer statistics. // CA Cancer J Clin. 2011. V. 61. P. 69-90.

64. Joshi B.P, Wang T.D. Exogenous Molecular Probes for Targeted Imaging in Cancer: Focus on Multi-modal Imaging. // Cancers. 2010. V. 2. P. 1251-1287.

65. Julian J, Dharmaraj N, Carson D.D. MUC1 is a substrate for gamma-secretase. // J Cell Biochem. 2009. V. 1084. P. 802-815.

66. Jungbluth A.A, Chen Y.T, Stockert E, Busam K.J, Kolb D, Iversen K, Copian K, Williamson B, Altorki N, Old L.J. Immunohistochemical analysis of NY-ESO-1 antigen expression in normal and malignant human tissues. // Int J Cancer. 2001. V. 92. P. 856-860.

67. Kaminskas L.M, Kelly B.D, McLeod V.M, Sberna G, Owen D.J, Boyd B.J, Porter C.J. Characterisation and tumour targeting of PEGylated polylysine dendrimers bearing doxorubicin via a pH labile linker. // J Control Release. 2011. V. 152. P. 241-248.

68. Kay B.K, Thai S, Volgina V.V. High-throughput biotinylation of proteins. // Methods Mol Biol. 2009. V. 498. P. 185-196.

69. Kempf A.C., Zanger U.M., Meyer U.A. Truncated human P450 2D6: expression in Escherichia coli, Ni(2+)-chelate affinity purification, and characterization of solubility and aggregation. // Arch. Biochem. Biophys. 1995. V. 20. P. 277-288.

70. Khodarev NN, Pitroda SP, Beckett MA, MacDermed DM, Huang L, Kufe DW, Weichselbaum RR. MUC1-induced transcriptional programs associated with tumorigenesis predict outcome in breast and lung cancer. // Cancer Res. 2009. V. 69. P. 2833-2837.

71. Koivenen E., Wang B., Ruoslahti E. Phage libraries displaying cyclic peptides with different ring sizes ligand specificities of the RGD-directed integrins. // Biotechnology. 1995. V. 13. P. 265-70.

72. Krakauer T. Immune response to staphylococcal superantigens. // Immunol. Res. 1999. V.20. P. 163- 173.

73. Kramer R.H., Vu M., Cheng Y.F., Ramos D.M. Integrin expression in malignant melanoma. // Cancer Metastasis Rev. 1991. V. 10. P. 49-59.

74. Krivenko M.S., Voyushin K.E., Gul'ko L.B., Okorokova N.A., Levitsky S.A., Mukharyamova K.Sh., Veiko V.P. Cloning of mucin (MUC1) gene and studing of its expression in eucaryotic cells// Conference for young scientists,

75. PhD students and students on molecular biology and genetics. Kyiv (Ukraine). 2003. P.171.

76. Kuroda K., Liu H., Kim S., Guo M., Navarro V., Bander N.H.Saporin toxin-conjugated monoclonal antibody targeting prostate-specific membrane antigen has potent anticancer activity. // Prostate. 2010. V. 70. P. 1286-1294.

77. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. // Nature. 1970. V. 227. P. 680-685.

78. Lambert L.A., Gibson G.R., Maloney M., Durell B., Noelle R.J., Barth R.J. Intranodal immunization with tumor lysate-pulsed dendritic cells enhances protective antitumor immunity. // Cancer Res. 2001. V. 61. P. 641-646.

79. Lamphear J.G., Bohach G.A., Rich R.R. Structural dichotomy of staphylococcal enterotoxin C superantigens leading to MHC class II-independent activation of T lymphocytes. // J Immunol. 1998. V. 160. P. 21072114.

80. Leng Y., Cao C., Ren J., Huang L., Chen D., Ito M., Kufe D. Nuclear import of the MUC1-C oncoprotein is mediated by nucleoporin Nup62. // J Biol Chem. 2007. V.- 282. P. 19321-19330.

81. Levitin F., Stern O., Weiss M., Gil-Henn C., Ziv R., Prokocimer Z., Smorodinsky N.I., Rubinstein D.B., Wreschner D.H. The MUC1 SEA module is a self-cleaving domain. // J Biol Chem. 2005. V. 280. P. 33374-33386.

82. Li H., Llera A., Malchiodi E.L., Mariuzza R.A. The structural basis of T cell activation by superantigens. // Annu Rev Immunol. 1999. V. 17. P. 435-466.

83. Li Y., Ren J.,Yu W., Kuwahara H., Yin L., Carraway K.L. 3rd, Kufe D. The epidermal growth factor receptor regulates interaction of the human DF3/ MUC1 carcinoma antigen with c-Src and h-catenin. // JBiol Chem. 2001 V. 276. P.35239-35242.

84. Lillehoj E.P., Kim H., Chun E.Y., Kim K.C. Pseudomonas aeruginosa stimulates phosphorylation of the airway epithelial membrane glycoprotein Mucl and activates MAP kinase. // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2004. V. 287P. L809-815.

85. Limacher J.M., Quoix E. TG4010: A therapeutic vaccine against MUC1 expressing tumors. // Oncoimmunology. 2012. V. 1. P. 791-792.

86. Linde S.K., Sheng Y.H., Every A.L., Miles K.M., Skoog E.C., Florin T.J,. Sutton P., McGuckin M.A. MUC1 Limits Helicobacter pylori Infection both by Steric Hindrance and by Acting as a Releasable Decoy // PLoS Pathog. 2009. V. 5.P. el000617.

87. Lu S.Y., Sui Y.F., Li Z.S., Ye J., Dong H.L., Qu P., Zhang X.M., Wang W.Y., Li Y.S. Superantigen-SEA gene modified tumor vaccine for hepatocellular carcinoma: an in vitro study. // World J Gastroenterol. 2004. V. 10. P. 53-57.

88. Malhotra V., Perry M.C. Classical chemotherapy: mechanisms, toxicities and the therapeutic window. // Cancer Biol Ther. 2003. V. 2. P. S2-S4.

89. Mas-Moruno C., Rechenmacher F., Kessler H. Cilengitide: the first anti-angiogenic small molecule drug candidate design, synthesis and clinical evaluation. // Anticancer Agents Med Chem. 2010. V. 10. P. 753-768.

90. Millard M., Odde S., Neamati N. Integrin targeted therapeutics. // Theranostics. 2011. V. 1. P. 154-88.

91. Mittrucker H.W., Shahinian A., Bouchard D., Kundig T.M., Мак T.W. Induction of unresponsiveness and impaired T cell expansion by staphylococcal enterotoxin В in CD28-deficient mice. // J Exp Med. 1996. V. 183. P. 2481-2488.

92. Morrison R., Schleicher S.M., Sun Y., Niermann K.J., Kim S., Spratt D.E., Chung C.H., Lu B. Targeting the mechanisms of resistance to chemotherapy and radiotherapy with the cancer stem cell hypothesis. // J Oncol. 2011. V. 2011. P.941876.

93. Mosolits S., Ullenhag G., Mellstedt H. Therapeutic vaccination in patients with gastrointestinal malignancies. A review of immunological and clinical results // Ann. Oncol. 2005. V. 16. P. 847-862.

94. Morse M.A., Coleman R.E., Akabani G., Niehaus N., Coleman D., Lyerly H.K. Migration of human dendritic cells after injection in patients with metastatic malignancies. // Cancer Res. 1999. V. 59. P. 56-58.

95. Mukhopadhyay P., Chakraborty S., Ponnusamy M.P., Lakshmanan I., Jain M., Batra S.K. Mucins in the pathogenesis of breast cancer: Implications in diagnosis, prognosis and therapy. // Biochim Biophys Acta. 2011. V. 1815. P. 224-240.

96. Nestle F.O., Alijagic S., Gilliet M., Sun Y., Grabbe S., Dummer R., Burg G., Schadendorf D. Vaccination of melanoma patients with peptide- or tumor lysate-pulsed dendritic cells // Nat. Med. 1998. V. 4. P. 328-332.

97. Nilsson H., Bjork P., Dohlsten M., Antonsson P. Staphylococcal enterotoxin H displays unique MHC class II-binding properties. // J Immunol. 1999. V.163. P. 6686-6693.

98. O'Donoghue J.A., Bardies M., Wheldon T.E. Relationships between tumor size and curability for uniformly targeted therapy with beta-emitting radionuclides. // J Nucl Med. 1995. V. 36. P. 1902-1909.

99. Ozaki H., Matsuzaki H., Ando H., Kaji H., Nakanishi H., Ikehara Y., Narimatsu H. Enhancement of metastatic ability by ectopic expression of ST6GalNAcI on a gastric cancer cell line in a mouse model. !L Clin Exp Metastasis. 2012. V.29. P. 229-238.

100. Pace C.N. Vajdos F., Fee L., Grimsley G., Gray T. How to measure and predict the molar absorption coefficient of a protein. // Protein Science. 1995. V. 4. P. 2411-2423.

101. Palasek S.A., Cox Z.J., Collins J.M. J. Limiting racemization and aspartimide formation in microwave-enhanced Fmoc solid phase peptide synthesis. // J Pept Sci. 2007. V. 13. P. 143-148.

102. Patton S., Gendler S.J., Spicer A.P. The epithelial mucin, MUC1, of milk, mammary gland and other tissues. // Biochim Biophys Acta. 1995. V. 1241. P. 407-423.

103. Pattillo C.B., Sari-Sarraf F., Nallamothu R., Moore B.M., Wood G.C., Kiani M.F. Targeting of the antivascular drug combretastatin to irradiated tumors results in tumor growth delay. // Pharm Res. 2005. V. 22 P. 1117-1120.

104. Pellet-Many C, Frankel P, Jia H, Zachary I. Neuropilins: structure, function and role in disease. Biochem J. 2008 Apr 15;411(2):211-26.

105. Pleasance E.D., Cheetham R.K., Stephens P.J., McBride D.J., Humphray S.J., Greenman C.D. et al. A comprehensive catalogue of somatic mutations from a human cancer genome // Nature. 2010. V. 463. P. 191-196.

106. Pochampalli M.R., el Bejjani R.M., Schroeder J.A. MUC1 is a novel regulator of ErbBl receptor trafficking. // Oncogene. 2007. V. 26. P. 1693-1701.

107. Rabinovich G.A., Gabrilovich D., Sotomayor E.M. Immunosuppressive strategies that are mediated by tumor cells. // Annu Rev Immunol. 2007. V. 25. P. 267-296.

108. Rahn J.J., Chow J.W., Home G.J., Mah B.K., Emerman J.T., Hoffman P., Hugh J.C. MUC1 mediates transendothelial migration in vitro by ligating endothelial cell ICAM-1. // Clin Exp Metastasis. 2005. V. 22. P. 475-^83.

109. Rajabi H., Jin C., Ahmad R., McClary C., Joshi M., Kufe D. Mucin 1 oncoprotein expression is supressed be the miR-125b oncomir // Genes Cancer. 2010. V. 1. P. 62-68.

110. Ranelli D.M, Jones C.L, Johns M.B, Mussey G.J, Khan S.A. Molecular cloning of staphylococcal enterotoxin B gene in Escherichia coli and Staphylococcus aureus. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. V.82. P. 58505854.

111. Rasku M.A, Clem A.L, Telang S, Taft B, Gettings K, Gragg H, Cramer D, Lear S.C, McMasters K.M, Miller D.M, Chesney J. Transient T cell depletion causes regression of melanoma metastases. // J Transl Med. 2008. V. 6. P. 1-18.

112. Reardon D.A, Nabors L.B, Stupp R, Mikkelsen T. Cilengitide: an integrin-targeting arginine-glycine-aspartic acid peptide with promising activity for glioblastoma multiforme. // Expert Opin Investig Drugs. 2008. V. 17. P. 12251235.

113. Ren J, Bharti A, Raina D, Chen W, Ahmad R, Kufe D. MUC1 oncoprotein is targeted to mitochondria by heregulin-induced activation of c-Src and the molecular chaperone HSP90. // Oncogene. 2006. V. 25. P. 20-31.

114. Ren K, Bannan J.D, Pancholi V, Cheung A.L, Robbins J.C, Fischetti V.A, Zabriskie J.B. Characterization and biological properties of a new staphylococcal exotoxin. // J. Exp. Med. 1994. Y.180. P. 1675-1683.

115. Ries F, Klastersky J. Nephrotoxicity induced by cancer chemotherapy with special emphasis on cisplatin toxicity. // Am J Kidney Dis. 1986. V. 8. P. 36879.

116. Saha B., Harlan D.M., Lee K.P., June C.H., Abe R. Protection against lethal toxic shock by targeted disruption of the CD28 gene. // J Exp Med. 1996. V. 183. P. 2675-2680.

117. Saline M., Rodstrom K.E., Fischer G., Orekhov V.Y., Karlsson B.G., Lindkvist-Petersson K. The structure of superantigen complexed with TCR and MHC reveals novel insights into superantigenic T cell activation. // Nat Commun. 2010. V. 1 P. 119.

118. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Vol. 1, 2, 3; 2nd edition // New York; Cold Spring Harbor Laboratory Press. 1989. V.l-3.

119. Sangha R., Butts C. L-BLP25: a peptide vaccine strategy in non small cell lung cancer. // Clin Cancer Res. 2007. V. 13. P. s4652-s4654.

120. Sano T., Glazer A.N., Cantor C.R. A streptavidin-metallothionein chimera that allows specific labeling of biological materials withmany different heavy metal ions. // Proc Natl Acad Sci USA. 1992. V. 89. P. 1534-1538.

121. Saudek V., Atkinson R.A., Pelton J.T. Three-dimensional structure of echistatin, the smallest active RGD protein. // Biochemistry. 1991. V. 30. P. 7369-7372.

122. Senapati S., Das S., Batra S.K. Mucin-interacting proteins: from functions to terapeutics. // Trends Biochem Sei. 2010. V. 35. P. 236-45.

123. Schmitz, M.L., Baeuerle, P.A. Bacterial expression, purification, and potential use of His-tagged GAL4 fusion proteins. // Methods Mol. Biol. 1997. V. 63. P. 129-137.

124. Schreiber G. Methods for studying the interaction of barnase with its inhibitor barstar. // Methods Mol. Biol. 2001. V. 160. P. 213-226.

125. Schroeder J.A., Adriance M.C., Thompson M.C., Camenisch T.D., Gendler S.J. MUC1 alters ß-catenin-dependent tumor formation and promotes cellular invasion. // Oncogene. 2003. V. 22. P. 1324-1332.

126. Siddiqui M.A., Perry C.M. Human papillomavirus quadrivalent (types 6, 11, 16, 18) recombinant vaccine (Gardasil). // Drugs. 2006. V. 66. P. 1263-1271.

127. Steinman R.M. The dendritic cell system and its role in immunogenicity. // Annu Rev Immunol. 1991. V. 9. P. 271-296.

128. Studier F.W., Rosenberg A.H. Dunn JJ, Dubendorff JW. Use of T7 RNA polymerase to direct expression of cloned genes. //Methods in Enzymology. 1990. V. 185. P. 60-89.

129. Su Y.C., Wong A.C. Identification and purification of a new staphylococcal enterotoxin, H. // Appl Environ Microbiol. 1995. V.61. N.4. P. 1438-1443.

130. Sugahara K.N., Teesalu T., Karmali P.P., Kotamraju V.R., Agemy L., Girard O.M., Hanahan D., Mattrey R.F., Ruoslahti E. Tissue-penetrating delivery of compounds and nanoparticles into tumors. // Cancer Cell. 2009. V. 16. P. 510520.

131. Sun J., Zhao L., Teng L., Lin F., Zhang H., Li Z., Gao Q. Solid tumor-targeted infiltrating cytotoxic T lymphocytes retained by a superantigen fusion protein. // PLoS One. 2011. V. 6. P. el6642.

132. Sundaram R., Dakappagari N.K., Kaumaya P.T. Synthetic peptides as cancer vaccines. // Biopolymers. 2002. V. 66. P. 200-216.

133. Suntharalingam G., Perry M.R., Ward S., Brett S.J., Castello-Cortes A., Brunner M.D., Panoskaltsis N. Cytokine storm in a phase 1 trial of the anti-CD28 monoclonal antibody TGN1412. // N Engl J Med. 2006. V. 355. P. 1018-1028.

134. Szarewski A. Cervarix®: a bivalent vaccine against HPV types 16 and 18, with cross-protection against other high-risk HPV types. // Expert Rev Vaccines. 2012. V. 11. P. 645-57.

135. Tjalsma H., Bolhuis A., Jongbloed J.D., Bron S., van Dijl J.M. Signal peptide-dependent protein transport in Bacillus subtilis: a genome-based survey of the secretome. // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2000. V.64. P. 515-547.

136. Thornton D.J., Rousseau K., McGuckin M.A. Structure and function of the polymeric mucins in airways mucus. // Annu. Rev. Physiol. 2008. V. 70. P. 459-486.

137. Varner J.A., Cheresh D.A. Integrins and cancer. // Curr Opin Cell Biol. 1996. V. 8. P. 724-730.

138. Vermeer P.D., Einwalter L.A., Moninger T.O., Rokhlina T., Kern J.A., Zabner J., Welsh M.J. Segregation of receptor and ligand regulates activation of epithelial growth factor receptor. // Nature. 2003. V. 422. P. 322-326.

139. Wegener K.L., Partridge A.W., Han J., Pickford A.R., Liddington R.C., Ginsberg M.H., Campbell I.D. Structural basis of integrin activation by talin. // Cell. 2007. V. 128. P. 171-182.

140. Wei X., Xu H., and Kufe D. Human MUC1 oncoprotein regulates p53-responsive gene transcription in the genotoxic stress response. // Cancer Cell. 2005 V. 7. P. 167-178/

141. Wei R.D. // Methods Enzymol. 1970. V. 18A. P. 424 427.

142. Wesseling J., van der Valk S.W., Hilkens J. A mechanism for inhibition of E-cadherin-mediated cell-cell adhesion by the membrane-associated mucin episialin/MUC 1. // Mol Biol Cell. 1996. V. 7. P. 565-577.

143. Wülfing C., Plückthun A. Correctly folded T-cell receptor fragments in the periplasm of Escherichia coli. Influence of folding catalysts. // J Mol Biol. 1994. V. 242. P. 655-669.

144. Xia H.P. Great Potential of MicroRNA in Cancer Stem Cell MicroGene. // J. Cancer Mol. 2008. V. 4. P. 79-89.

145. Xiong J.P., Stehle T., Zhang R., Joachimiak A., Frech M., Goodman S.L., Arnaout M.A. Crystal structure of the extracellular segment of integrin alpha Vbeta3 in complex with an Arg-Gly-Asp ligand. // Science. 2002. V. 296. P. 151-155.

146. Xu M., Wang X., Cai Y., Zhang H., Yang H., Liu C., Zhang C. An engineered superantigen SEC2 exhibits promising antitumor activity and low toxicity. // Cancer Immunol Immunother. 2011. V.60. P. 705-713.

147. Xue L.Y., Chiu S.M., Oleinick N.L. Atg7 deficiency increases resistance of MCF-7 human breast cancer cells to photodynamic therapy. // Autophagy. 2010. V. 6. P. 248-255.

148. Zhou X., Hu W., Qin X. The role of complement in the mechanism of action of rituximab for B-cell lymphoma: implications for therapy. // Oncologist. 2008. V. 13. P. 954-966.

149. Вейко В.П., Гулько Л.Б., Окорокова H.A., Дьяков H.A., Дебабов В.Г. Клонирование гена стрептавидина из Streptomyces avidinii и его экспрессия в Escherichia coli. Секреция стрептавидина клетками Е. coli. // Биоорган, химия. 1999. Т.25. №3. С. 184-188.

150. Вейко В.П., Сипрашвили 3.3., Ратманова К.И., Гулько Л.Б., Андрюхина Р.В., Дебабов В.Г. Клонирование и экспрессия в Escherichia coli тимидинфосфорилаэы под контролем промотора урдинфосфорилазы // Биотехнология. 1994. № 4. С. 2-4.

151. Волченко H.H., Славнова E.H. Цитологические критерии диагностики рака щитовидной железы. // Сибирский онкологический журнал. 2006. Т. 19. №3. С. 5-7.

152. Гулько Л.Б., Воюшин К.Е., Окорокова H.A., Кривенко М.С., Ратманова К.И., Вейко В.П., Дебабов В.Г. // Биотехнология. 2003, №5, 81-87.

153. Гулько Л.Б., Окорокова H.A., Воюшин К.Е., Дьяков H.A., Честухина Г.Г., Вейко В.П., Дебабов В.Г. Получение полипептидного препарата VNTR{22}(MUC1) с потенциальной вакцинирующей противоопухолевой активностью // Биотехнология. 2000. № 3. С. 3-8.

154. Дыхно Ю.А, Селин С.М, Батухтина Ю.В. Результаты хирургического лечения больных кардиоэзофагеальным раком. // Сибирский онкологический журнал. 2003. Т.6. №2 С. 30-32.

155. Имянитов Е.Н, Хансон К.П. Молекулярная генетика в клинической онкологии. // Сибирский онкологический журнал 2004. Т. 10-11. №2-3. С. 40-47.

156. Лукашина М.И., Смирнова A.B., Алиев В.А., Самойленко И.В., Семенов H.H., Вейко В.П., Михайлова И.Н., Барсуков Ю.А., Барышников А.Ю. Дендритные вакцины в терапии колоректального рака. // Вестник РОНЦ им. H. Н. Блохина РАМН, 2008. Т. 19, №3. С. 35-42.

157. Миронов А.Ф. Фотодинамическая терапия рака новый эффективный метод диагностики и лечения злокачественных опухолей. // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. № 8. С. 32-40.

158. Поляновский O.JL, Лукаш C.B., Стремовский O.A., Карпенко Д.В., Деев С.М. Экспрессия рекомбинантных генов противораковых IgE- и IgG-подобных антител в эукариотических клетках. 2008. Т. 44. № 8. С. 10231028.

159. Порханова Н.В. Значение биомаркеров для формирования групп риска и ранней диагностики опухолей (на примере рака яичников и рака молочной железы). // Практическая онкология 2011. Т. 12. № 4. С. 155165.

160. Сакаева Д.Д. Адъювантное и неоадъювантное лечение больных раком ободочной и прямой кишки. // Практическая онкология. 2005. Т. 6. № 2. С. 103-111.

161. Степанов В.М. Молекулярная Биология. Структура и функции белков./Под ред. A.C. Спирина // М.: Высш. шк. 1996. С. 111-113.

162. Суслова В.А. Поздние лучевые осложнения у больных раком шейки матки после сочетанной лучевой и химиотерапии с использованием брахитерапии низкой мощностью дозы в импульсном режиме. // Онкологический журнал 2010. Т. 4. №1. С. 61-65.

163. Тюбиана М., Дютрекс Ж., Дютрекс А. Физические основы лучевой терапии и радиобиологии. // Медицина М.1969.

164. Дарьялова C.J1., Бойко A.B., Черниченко A.B. Современные возможности лучевой терапии злокачественных опухолей. //Рос. онкол. журн. 2000. № 1 С. 48-55.

165. Флуер Ф.С., Вейко В.П., Гулько Л.Б., Воюшин К.Е., Веткова Л.Г., Прохоров В.Я. Получение энтеротоксической сыворотки к стафилококковому энтеротоксину типа Н (SEH). // VI Российский съезд врачей-инфекционистов. Санкт-Петербург (Россия). 2003.

166. Якубовская Р.И., Кармакова Т.А., Манзюк Л.В., Артамонова Е.В. Результаты І-ІІ фазы клинических испытаний препарата Имутеран. // Российский биотерапевтический журнал. 2006. N 2. С. 93-97.