К вопросу экологического подхода биологии патогенных микробов Бурятии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Етобаева, Ирина Валерьевна

• Етобаева, Ирина Валерьевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Етобаева, Ирина Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ"

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные аспекты в вопросе персистенции патогенных микроорганизмов

1.1.1. Антилизоцимная активность

1.1.2. Антикомплементарная активность

1.1.3. Антиинтерфероновая активность

1.1.4. Дезоксирибонуклеодеполимеразная активность

1.1.5. Рибонуклеодеполимеразная активность

1.2. Существование некоторых патогенных микроорганизмов в почве

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.2. Биологическая характеристика микроорганизмов, выделенных из объектов окружающей среды, животных и птиц

2.3. Биологическая характеристика штаммов музейных культур в условиях продолжительного хранения

2.4. Персистентные характеристики микроорганизмов, выделенных из объектов окружающей среды, животных и птиц и микроорганизмов, пребывавших в условиях длительного хранения

2.4.1. Значение показателей персистенции исследуемых микроорганизмов

2.4.2. Некоторые результаты изучения зависимости между показателями персистентных характеристик и вирулентностью микроорганизмов

2.4.3. Влияние магнитно - лазерного излучения на механизмы персистенции микроорганизмов 97 2.4.4. Влияние химических веществ на механизмы персистенции микроорганизмов

2.5. Физико - химическая характеристика почв отдельных регионов Бурятии. Токсичность почв

2.6. Экологическая характеристика микроорганизмов

2.7. Антагонизм и антибиотические вещества

2.7.1. Антагонистические взаимодействия микроорганизмов

2.7.2. Чувствительность исследуемых микробных культур к некоторым антибиотикам

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «К вопросу экологического подхода биологии патогенных микробов Бурятии»

Вопросы эволюции патогенных микроорганизмов и возникновение инфекционных заболеваний привлекают внимание многих ученых. Однако, во всех этих трудах речь идет о завершенных паразитах, промежуточные этапы паразитизма не обсуждаются.

Особенностью большинства потенциально-патогенных микроорганизмов является высокая частота их обнаружения в окружающей среде, что отражает сохранившиеся у них черты сапрофитизма, а так же своеобразие «экологической ниши» - естественного постоянного и основного места пребывания микроба в окружающей среде [Калина Г.П., 1983а].

Если для патогенных микроорганизмов экониша - больной организм, то для условно - патогенных они еще не выявлены или предполагаются.

Практически же выявление экониши помогает установить связь того или иного микроба с определенным животным организмом, его возможность и частоту попадания в организм из пищевых продуктов, почвы, воды.

Возможно, что у потенциально патогенных микроорганизмов в процессе эволюции утрачивается связь с первичной эконишей и происходит формирование экониш 2-го и 3-го порядка. Происходит это под воздействием экологических факторов окружающей среды, к которым этот микроорганизм приспосабливается.

Такие микроорганизмы могут проявлять себя как сапрофиты, или как микроорганизмы, обладающие определенным потенциалом патогенности.

Потенциально-патогенные микроорганизмы не просто сапрофиты, случайно под влиянием создавшихся условий приобретающие временную патогенность, а стабилизированные на данном этапе эволюции звенья эволюционной цепи с присущим каждому из них уровнем потенциала патогенности. Особенностью таких микроорганизмов является высокая динамичность процессов катаболизма, определяющая амплитуды колебаний потенциала патогенности.

Не исключены появления и в наше время новых потенциально -патогенных микроорганизмов или повышение уровня потенциала патогенности уже существующих до степени, доступной для констатации новой нозологической единицы, а также регрессии их до уровня, приближающего ППМ к сапрофитам [Калина Г.П., 19836].

Актуальность работы.

Проведение персистентных мониторинговых анализов с изучением характеристик патогенных и потенциально-патогенных микроорганизмов позволяет не только определить эпизоотическую ситуацию в эндемичных условиях Бурятии, но и предвидеть вероятную вспышку инфекционной болезни. В то же время изучение биологии и экологии возбудителя инфекции дает картину его потенциальной возможности вызвать инфекционный процесс и возможность найти методы и средства коррекции вирулентности микробов в их эконише.

В целях прогнозирования инфекционных болезней возникает необходимость всестороннего исследования микроорганизмов, обладающих определенным потенциалом патогенности. До сих пор этот вопрос остается недостаточно изученным в Забайкальском регионе.

Цель исследований. Провести мониторинговый анализ микроорганизмов, выделенных на территории республики Бурятия, в их сапрофитической и паразитической фазе существования.

Задачи исследований:

1. Провести бактериологический мониторинг объектов окружающей среды, животных и птиц, природоохраняемых и приграничных зон Бурятии.

2. Дать биологическую, экологическую характеристику полученным микробным культурам.

3. Определить персистентные свойства выделенных микроорганизмов и их связь с вирулентностью.

4. Определить динамику численности микроорганизмов под воздействием физико-химических факторов.

5. Установить наличие токсичности почв Бурятии к патогенным микроорганизмам.

Научная новизна. Впервые в условиях Бурятии проведены экологические исследования биологии патогенных бактерий. Определены параметры существования таких микробов в криоаридных почвах Забайкалья и их диагностическая значимость. Выявлены токсические свойства определенных типов почв. Изучены ветеринарно-медицинские аспекты персистентных характеристик микроорганизмов, обладающих определенным потенциалом патогенности, и их изменчивость под воздействием биотических и абиотических факторов.

Разработан ряд оригинальных методик, пригодных для изучения экологии возбудителей инфекционных болезней в окружающей среде.

Практическое значение. Результаты исследований внедрены в практику в форме следующих разработок:

1. Материалы исследований используются при проведении лекционно-практических занятий на кафедре микробиологии Иркутской СХА, кафедре эпизоотологии Бурятской государственной СХА.

2. Разработанные методики применяются в диагностической работе Республиканской ветеринарной лаборатории Бурятии.

3. Полученный научный материал о 4 токсичных свойствах определённых типов почв республики Бурятии к сибиреязвенному микробу используется лабораторией экологии возбудителей зоонозных инфекций Иркутского научно-исследовательского противочумного института Сибири и Дальнего Востока и служит теоретической основой для разработки профилактических мер по борьбе с сибирской язвой в условиях Забайкалья.

Положения, выносимые на защиту:

1. При проведении бактериологического мониторинга особое внимание нужно уделять так называемым условно-патогенным микроорганизмам, обладающим определенным потенциалом патогенности.

2. Наличие у микроорганизмов, выделенных из различных объектов окружающей среды, высоких полиморфных персистентных характеристик указывает на их способность вызвать инфекционный процесс, а в некоторых случаях и гибель животного.

3. Влияние определенных биотических и абиотических факторов внешней среды способно вызывать повышение или регрессию потенциала патогенности уже существующих патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

4. Определенные типы почв Бурятии способны ингибировать рост и размножение сибиреязвенного микроба.

Апробация работы. Результаты исследований, представленные в данной диссертации, докладывались и обсуждались на Международной научной конференции, посвященной 125-летию Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Казань, 1998; Республиканской научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Биология на пороге XXI века», Улан-Удэ, 1998; научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова, Улан-Удэ, 1999; Международной научной конференции Дальневосточного государственного аграрного университета, Благовещенск, 1999.

Публикация результатов работы. По материалам диссертации опубликовано три работы, в печати находятся три работы.

Структура и объём диссертации. Диссертационная работа изложена на 169 страницах и состоит из введения, 2 глав, заключения, 8 выводов,

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Етобаева, Ирина Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Из объектов окружающей среды, животных и птиц, наряду с непатогенными микроорганизмами, были выделены типичные культуры патогенных и условно-патогенных микроорганизмов со свойствами, характерными для классических вариантов.

2. Наличие у исследуемых микробов полиморфных персистентных характеристик позволило предположить их выраженную адаптацию к защитно-регуляторным системам макроорганизма. Такие микроорганизмы, : по нашим данным, были способны вызвать инфекционный процесс и даже гибель животного. Не исключено, однако, снижение потенциала : патогенности данного микроорганизма под воздействием факторов противоинфекционной защиты, определяемых индивидуальным иммунологическим статусом.

3. При исследовании микроорганизмов, хранящихся в музее живых культур, были получены результаты, свидетельствующие о том, что в процессе длительного хранения многие микроорганизмы утрачивали свои : персистентные характеристики.

4. Проведенные иследования выявили явление ингибирования факторов персистенции патогенных и условно-патогенных микроорганизмов -воздействием магнитно- лазерными лучами.

5. Исследуемые микроорганизмы проявляли устойчивость к распространенным дезинфектантам, а некоторые дезинфицирующие вещества избирательно стимулировали их персистентные характеристики патогенных микробов.

6. По нашим данным, токсичным действием по отношению к вакцинным штаммам сибирской язвы обладали 40% изучаемых почв ; Бурятии. Эти почвы имели кислую реакцию среды и низкое содержание гумуса.

7. Наибольшим потенциалом антагонистического воздействия обладали споровые культуры рода Bacillus, относящиеся к типичным ; сапрофитам. Было отмечено явление антагонизма и среди патогенных . микроорганизмов, но оно было меньше выражено. По нашим данным токсичность патогенного агента реализовалась лишь по отношению к-какому-либо одному патогенному или условно-патогенному микробу, в ; отношении других исследуемых микроорганизмов этот эффект не проявлялся.

8. Микроорганизмы, выделенные из объектов окружающей среды, обладали незначительной чувствительностью к предложенным антибиотикам. Резистентные формы микроорганизмов, выделенные от -животных и птиц, не утрачивали своей патогенности. Не реагируя на ; антибиотики, они могли вызывать инфекцию такой же силы, как и . : чувствительные штаммы. |

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Разработана научно-обоснованная система мониторингового анализа объектов окружающей среды:

- материалы диссертации используются при проведении лекционно- ;;;■; практических занятий на кафедре микробиологии Иркутской СХА и кафедре -эпизоотологии БГСХА им В.Р. Филиппова;

- разработанные методики применяются в диагностической работе;:; Республиканской ветеринарной лаборатории Бурятии;

- полученный научный материал о токсичных свойствах определённых типов почв республики Бурятии к сибиреязвенному микробу используется лабораторией экологии возбудителей зоонозных инфекций Иркутского научно-исследовательского противочумного института Сибири и Дальнего Востока и служит теоретической основой для разработки профилактических \ мер по борьбе с сибирской язвой в условиях Забайкалья.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

К настоящему времени накоплено значительное количество фактов, свидетельствующих о возможности автономного существования возбудителей инфекционных заболеваний вне организма, в том числе о роли почвы, воды, растений, как сред обитания или временного «переживания» микроорганизмов патогенных для животных и человека. Результаты проведенных нами исследований дают возможность судить о влиянии некоторых экологических факторов: температуры, реакции среды, физико-химического состава почв, органического компонента, токсичности, антагонистического воздействия микрофлоры на патогенные микроорганизмы, а именно на изменчивость их персистентных-характеристик под воздействием физико-химических факторов.

Из объектов окружающей среды, животных и птиц, наряду с непатогенными микроорганизмами, были выделены типичные культуры патогенных и условно-патогенных микроорганизмов со свойствами, характерными для классических вариантов, в последствии эти культуры были идентифицированы, как гемолитические варианты кишечной палочки, протеи, клебсиеллы, салмонеллы, иерсинии, листерии.

Так, нами было выделено 74 штамма микробных культур. Из них 46 . штаммов, по Граму окрашивались положительно и были представлены как палочковидными бактериями - 21 шт., так и кокками - 25 шт. Грамотрицательных бактерий было 28 шт.: палочек и кокков, 27 шт. и 1шт., соответственно.

При изучении культуральных свойств выделенных микробных штаммов были получены следующие данные: 58 шт. имели колонии Б-формы разных размеров с ровными краями; 10 шт. - колонии Я-формы со складчатой или шероховатой поверхностью и локонообразными выростами по краям колоний.

Были идентифицированы роды грамположительных бактерий: Bacillus, Bacterium, Carnobacterium, Corynebacterium, Enterococcus, Erysiopelothrix, Listeria, Micrococcus, Staphylococcus, Streptococcus, Yagococcus.

Из грамотрицательных — роды: Citrobacter, Diplococcus, Edwardsiella,

Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, Vibrio, Yersinia.

По результатам постановки биохимических тестов провели анализ ферментации углеводов с образованием кислоты исследуемыми культурами. Так, большинство штаммов ферментировали глюкозу, мальтозу, лактозу, в меньшей мере - сахарозу, маннит, дульцит, рафинозу, салицин.

Сероводород образовывали 28 шт., индол - 20 шт. Образование фермента каталазы было отмечено у 37 шт. исследуемых культур, фермента уреазы - 17 шт. Наличие ферментативной активности, а в особенности, наличие фермента каталазы расценивалось рядом авторов, как потенциальная возможность вызвать микробами инфекционный процесс [Сомов Г.П., 1985а]. Незначительное количество культур обладали протеолитическими свойствами. Так, 22 шт. микробных культур разжижали желатину, 28 шт. свертывали молоко. На кровяной среде образовывали зону гемолиза 40 шт.

В условиях макроорганизма биологические свойства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, позволяющие им выживать в присутствии гуморальных и клеточных эффекторов, не определены. Очевидно, в преодолении возбудителями иммунологических барьеров, существенная роль принадлежит комплексу их фенотипических свойств, направленных против факторов потивоинфекционного иммунитета, к числу которых можно отнести AJIA, АИА, АКА [Соколов В.Ю., Тарасевич A.B., 1992], немаловажна и роль вирулентных свойств, ДНК-азной, РНК-азной и гемолитической активностей [Чистякова И.С., 1985; Ермолаева С.А. и др., 2000].

При исследовании микроорганизмов, хранящихся в музее живых культур, были получены результаты, свидетельствующие о том, что в процессе длительного хранения многие микроорганизмы утрачивали свои персистентные характеристики.

Соответственно литературным данным, Вас. megaterium шт. 89 имел ДНК-азную активность, а Вас. mycoides 79 и Вас. mesentericus 70, Вас. pseudoanthracis в процессе хранения её утратили [Юсупова Д.В. и др., 1972]. Гемолиз на кровяном агаре все перечисленные культуры не вызывали, АИА. АЛА, АКА не обладали. Вас. mesentericus шт. 70 образовывал каталазу Культура Вас. cereus обладала слабой гемолитической активностью.

У культуры Вас. cereus не было антикомплементарного фактора, а по данным Ю.А. Брудастова в соавт. [1996] этот штамм его продуцировал.

Вас. subtilis Л2 образовывал фермент каталазу, обладал сомнительной гемолитической активностью, имел АЛА согласно литературным источникам [Бухарин О.В. и др., 1985]. По данным Л.В. Юсуповой [1972] Вас. subtilis активно вырабатывал ДНК-азы, а в наших опытах он утратил ДНК-азную активность.

Cor. diphtheriae mitis 203-AT слабо лизировал эритроциты барана, продуцировал каталазу, ДНК-азу.

Е. coli 25922 образовывал каталазу, не обладал гемолитической активностью. АЛА, АКА, АИА была слабо выражена. Е. coli 08 оставался вирулентным для телят, белых мышей и продуцировал ДНК-азу, антиинтерфероновый фактор, что в принципе не противоречило результатам других исследователей [Гриценко В.А. и др., 1994].

Культура Listeria monocytogenes 1219 в процессе длительного хранения утратила свои персистентные характеристики и гемолитическую активность. Опыты О.В. Бойко [1998] доказывали, что возбудители листериоза, выделенные из внешней среды и из организма животного, обладали разной АКА, не имели АЛА. По нашим данным они этими свойствами не обладали.

Штаммы Salm. dublin (enteritidis), Salm. pullorum Z-12, Salm. typhimurium 79 процессе хранения утратили свои персистентные характеристики. Отмечалась лишь слабая АИА. Хотя эти культуры теоретически должны были обладать АКА, АЛА, ДНК-азной активностью [Нечмирёва Т.С., 1972; Чайникова И.Н. и др., 1997]

Sarcina проявляла АЛА, слабую ДНК-азную активность, гемолиз не вызывала, АКА, АИА не обладала.

По материалам многих ученых факторы персистенции были широко распространены среди стафилококков [Траценко А.Ф. и др., 1986; Дерябин Д.Г., 1994; Бухарин О.В. и др., 1996]. А по нашим данным St. albus и St. aureus персистентные свойства не имели. St. aureus кроме гемолитической активности другими свойствами не обладал. St. pyogenes aureus 209-R обладал АЛА, АИА, ДНК-азной активностью. St. pyogenes aureus R-209 также имеел АИА, АЛА, ДНК-азную активность.

Возбудитель кишечного иерсиниоза, Y. enterocolitica, образовывал каталазу, вырабатывал значительное количество ДНК-аз и имел АЛА, АИА. Эта культура была патогенна для белых мышей [Габрилович И.М. и др., 1994].

Из грамположительных микроорганизмов (42 культуры), выделенных из объектов окружающей среды, АЛА проявляло 18 шт., АИА - 5шт., АКА -9шт., ДНК-азную активность - 12шт., гемолитическую - 9 шт.

Среди грамотрицательных микробов (18 шт.) АЛА была отмечена у 12 шт., АИА - 10 шт., АКА - 5 шт., ДНК-азная активность - 6 шт., гемолитическая - 8 шт.

Бактерии рода Bacillus - Вас. brachisporus, Вас. myxodens, Вас. retiformis имели невысокую АИА, ДНК-азную активность. Дикая культура В. aurantiacum вырабатывала ДНК-азы в больших количествах и продуцировала антикомплементарный фактор.

У культуры Citrobacter регистрировалось наличие персистентных факторов. Она синтезировала антилизоцимный и антиинтерфероновый фактор и в незначительных количествах ДНК-азы, и обладала высокой гемолитической активностью.

Дикий штамм Е. coli обладал лишь АЛА и АИА.

Патогенные штаммы Pr. mirabilis и Y. enterocolitica вырабатывали все исследуемые нами факторы противорезистентной природы.

Факторы персистенции регистрировались чаще у стафилококков, стрептококков, а у сальмонелл, микрококков и листерий были выражены слабее.

АЛА присуща как грамположительным, так и грамотрицательным микроорганизмам. Антиинтерфероновый фактор чаще продуцировали грамотрицательные микробы, а АКА была незначительно выражена как у тех, так и у этих. ДНК-азная и гемолитическая активности, рассматриваемые как факторы вирулентности, были выше у грамотрицательных бактерий.

Для изучения зависимости вирулентности от факторов персистенции, нами в условиях эксперимента были заражены лабораторные мыши из расчета по 2 мыши на каждую культуру. Для сравнения, при заражении использовали штаммы микробных культур, обладающие и не обладающие персистентными свойствами.

Так, штамм Enterobacter agglomerans после заражения не выделялся. Штамм 1219 List, monocytogenes и штамм 79 S. typhimurium, не обладали персистентными свойствами ни до заражения, ни после. Данные штаммы находились в условиях длительного хранения и утратили свои персистентные свойства. Патогенный штамм Pr. mirabilis, в одном случае, утрачивал свои свойства, в другом - очевидно достоверное снижение гемолитической активности и незначительное повышение ДНК-азной активности, что не противоречит литературным данным [Бикмухаметова А.В., 1974]. При выделении штамма St. hyicus, значения персистентных свойств микроба увеличились и появилась гемолитическая активность. Персистируя в макроорганизме, штамм St. pyogenes aureus 209-р утратил свою АИА, остальные характеристики у него незначительно повысились. У патогенного штамма Y. enterocolitica после пассирования не были выражены ДНК-азная и гемолитическая активности, АИА значительно возросла.

Из исследуемых культур наибольшей вирулентностью обладали штаммы микроорганизмов с высокой АИА, гемолитической активностью и незначительно выраженной ДНК-азной активностью. Так, штамм Citrobacter, Е. coli 08, Pr. mirabilis при высоком значении АИА , ДНК-азной активности и гемолитической активности вызывали гибель лабораторных мышей. Культура Y., enterocolitica с высокой активностью ДНК-аз и АИА, была также патогенна. А штаммы микробных культур, обладающие высокой гемолитической активностью, но с низкими показателями АИА, ДНК-азной активности не вызывали гибель мышей.

По нашим данным, микроорганизмы, обладающие полиморфными персистентными свойствами приобретали все признаки несомненно патогенного микроба, способного вызвать инфекционный процесс. Не исключено было, однако, снижение потенциала патогенности данных микроорганизмов под воздействием факторов противоинфекционной защиты, определяемых индивидуальным иммунологическим статусом макроорганизма.

Для изучения воздействия магнитно-лазерного излучения на персистентные характеристики микроорганизмов, мы провели эксперименты с использованием терапевтического магнитно-лазерного аппарата «Милта» с частотой импульсов ИК-лазера — 50 Гц, магнитной индукцией 35 мТл ± 10 мТл и экспозицией 1-5 мин.

Полученные данные дают основание предположить явление ингибирования факторов персистенции воздействием магнитно-лазерными лучами [Усвяцов Б.Я., Кирилличев А.И. и др., 1997; Куляш Ю.В., Лепилин А.В. и др., 1998]. Что раскрывает возможность для поиска эффективных методов терапии и профилактики микробных инфекций.

Так, гемолитический штамм кишечной палочки и иерсинии утрачивали ; свою АИА и ДНК-азную активность, а гемолитическая активность эшерихий " незначительно повышалась.

У штамма St. hyicus пассированного через белую мышь, выработка ДНК-аз снижалась, к тому же, патогенный вариант, вызывающий гибель мыши, утрачивал гемолитическую активность после 5 мин. экспозиции магнитно-лазерным лучом. При указанном режиме воздействия у; золотистого стафилококка не регистрировалась АИА и гемолитическая активность. ДНК-азная активность падала.

Бактерицидное действие химических веществ имеет огромное ; практическое значение, так как этот факт учитывают при использовании " химического вещества в качестве дезинфектанта. При бактериальном действии химический агент вызывает гибель клеток. В последнее время появились публикации о том, что некоторая часть штаммов ряда бактериальных популяций приобрела устойчивость к действию дезинфектантов в рекомендованных для дезинфекции концентрациях и ; экспозициях [Красильников А.П., Гудкова Е.И., 1993; Саямов С.Р., 1996].

К тому же имеются сведения о том, что под воздействием мутантов микроорганизмы становились гиперпродуцентами ДНК-азы, а-гемолизина, коагулазы и протеазы [Joenje M. et al, 1974]. Так, мутанты St. aureus, -потерявшие-экстрацеллюлярную нуклеазу, одновременно теряли способность синтезировать плазмокоагулазу и ß-гемолизин. При реверсии к исходному штамму все три свойства восстанавливались [Omenn G.S., Friedman J., 1970].

Одновременно проводили изучение в динамике АИА и ДНК-азной активности микроорганизмов, подвергаемых воздействию химическими веществами.

При изучении динамики ДНК-азной активности микроорганизмов, мы получили следующие данные: так, мутанты стафилококков, полученные под :: воздействием перекиси водорода, становились гиперпродуцентами ДНК-азы, иерсинии же наоборот выделяли ее в меньших количествах. Идентичное влияние оказывал и 6%-ный спиртовой раствор. Штамм Е. coli 08 утрачивал способность продуцировать ДНК-азу при воздействии разных дезинфектантов.

В итоге исследований получен высокий бактерицидный эффект в : отношении иерсиний, эшерихий, сальмонелл, стафилококков, листерий, протея, микрококка и коринебактерий растворами карболовой кислоты - 3%, хлорамина - 2%, перманганата калия - 1% [Догель JI.3. и др., 1984; Самойленко И.И., Васильева Е.И. и др., 1983; Самсонова А.П., Левашев B.C., 1993]. Перекись водорода обладала избирательным действием, стимулируя активную выработку противоинтерферонового фактора сибиреязвенным : микробом, эшерихиями, листериями, сальмонеллами и иерсиниями, и выделение ДНК-азы стафилококками.

Мутанты вакцинного штамма 55 Вас. anthracis, Е. coli 08, E.coli 25922, : Salm. typhimurium 79, Y. enterocolitica полученные под воздействием перекиси водорода, начинали продуцировать антиинтерфероновый фактор. Сходные данные были получены для гемолитического штамма Е. coli при воздействии на него раствора карболовой кислоты.

Раствор этилового спирта незначительно ингибировал АИА эшерихий, выделенных из природных источников и золотистого стафилококка, а при его воздействии на E.coli шт. 25922 и гемолитический штамм E.coli, Рг. mirabilis и Y. enterocolitica АИА микроорганизмов увеличивалась почти в 2-3 раза.

Хлорамин в концентрации 2% вызывал увеличение значений АИА штаммов 25922 Е. coli и Y. enterocolitica, сходные данные получены для последнего при воздействии 1%-ного раствора перманганата калия.

Таким образом, масштабы распространения устойчивых к дезинфектантам вариантов бактерий, а по некоторым дезинфицирующим веществам и их избирательное стимулирование персистентных характеристик патогенных микроорганизмов, диктует необходимость принятия мер по торможению дальнейшего нарастания устойчивых к дезинфектантам вариантов, разработке доступных и экономичных методик : дезинфекции. Прежде всего должен быть установлен реальный надзор за циркуляцией их устойчивых вариантов с применением методик, определяющих персистентные возможности бактерий.

Из литературных источников оптимальными для переживания и -размножения сибиреязвенного микроба являлись почвы, содержащие более 3-5% гумуса с нейтральной или слабощелочной реакцией [Иванова Д.П. и др., 1985]. Рост возбудителя ингибировался в большей степени кислыми, чем щелочными условиями среды. Оптимум рН находился в узких границах в пределах от 7.1 до 7.5 [Найманов П.И., 1986]. Эти условия подтвердили наши опыты. По нашим данным, токсичным действием по отношению к вакцинным штаммам сибирской язвы обладали 40% изучаемых почв. Эти почвы имели кислую реакцию среды (рН 5.7 - 6.62) и низкое содержание: гумуса (1.75 - 2.34%). Дерново-луговая почва горизонта А при нейтральной рН проявляла токсическое свойство, возможно, из-за низкого содержания гумуса (0.48%>). Угнетение размножения возбудителя инфекции в остальных почвах компенсировалось нейтральными и слабощелочными условиями среды (рН 6.85 - 7.75), хотя почвы имели низкое процентное содержание гумуса (1.36 - 3.08%). Очевидно, этот факт указывает на экологическую пластичность сибиреязвенного микроба, обеспечивающую ему существование в среде с минимальным содержанием питательных веществ органического происхождения.

Почвы Иволгинского района Бурятии - каштановая среднесуглинистая ; и почвы Баргузинского района Бурятии - дерново-лесная выщелоченная, дерново-лесная типичная, дерново-луговая аллювиальная слоистая с погребенными горизонтами оказались токсичными и на них не росли сибиреязвенные микробы. На другие возбудители инфекций изученные типы почв токсического действия не оказывали, что при оптимальных экологических условиях давало возможность предположить рост, размножение и резервацию этих микроорганизмов в указанных типах почв. Вышеизложенные данные имеют значимость при разработке профилактических мероприятий в частности при сибирской язве.

При инкубировании микроба сибирской язвы в среде с нейтральной рН происходило быстрое отмирание вегетативных форм и интенсивное накопление спор. Активная реакция в пределах от 5.8 до 8.0 и концентрация : NaCl (от 0,05% до 5%) темпы развития возбудителя, не препятствуя его" размножению [Родзиковский А.В., 1989].

Размножение эшерихий ингибировалось щелочными нежели кислыми условиями среды, оптимальными условиями для развития Е. coli являлись: температура 4°С, рН 5.8 и низкие концентрации соли в среде.

Листерии были весьма чувствительны к смещению реакции среды в щелочную сторону. Низкие и высокие концентрации соли в среде сдерживали развитие данной культуры.

Интенсивный рост Y. enterocolitica отмечался в щелочных условиях ; при 37°С. Повышенная и пониженная концентрация соли в МПБ незначительно подавляла рост данного штамма по сравнению со средними значениями."

Высоким антагонистическим действием по отношению к патогенным бактериям обладали штаммы культур рода Bacillus, это штаммы Вас. cereus и Вас. subtilis Л 2. Так, они подавляли рост вакцинного шт. 55 Вас. anthracis, Е. coli 25922, List, monocytogenes 1219, S. typhimurium 79, Y. enterocolitica. Сенная палочка, Вас. subtilis, выделенная из внешней среды, оказывала подавляющее действие лишь на листерии, в отличии от своего музейного родственника. Шт. Вас. myxodens был токсичен по отношению к листериям, : а шт. Вас. megaterium 89 - сибиреязвенному штамму 55 и иерсиниям. Рост S. -typhimurium-79 подавлялся антибиотическими факторами, выработанными В. ochraceum.

Патогенные культуры также обладали антагонистическим действием в отношении друг друга. Так, эризипелоидный микроб проявлял-антимикробные свойства по отношению к иерсиниям, а возбудитель листериоза - по отношению к сальмонелле тифимуриум.

Бактерицидный эффект на вакцинный шт. СТИ Вас. anthracis имели культуры Diplococcus septicus 160, S. dublin, a патогенные штаммы Pr. mirabilis и St. hyicus угнетали рост шт 55 Вас. anthracis.

Шт St. kloosii и шт Str. milleri в одинаковой мере подавляли рост List, monocytogenes 1219.

Таким образом, наибольшим потенциалом антагонистического воздействия обладали споровые культуры рода Bacillus, относящиеся к Г: типичным сапрофитам. Было отмечено явление антагонизма и среди патогенных микроорганизмов, но оно было меньше выражено. По нашим данным токсичность патогенного агента реализовалась лишь по отношению к какому-либо одному патогенному или условно-патогенному микробу, в отношении других исследуемых микроорганизмов этот эффект не проявлялся.

Культуры, выделенных микроорганизмов, показали высокую : устойчивость к применяемым антибиотикам. Процент чувствительности к антибиотикам был не значительным, ряд микроорганизмов был чувствителен :;. ; к тетрациклину, эритромицину, стрептомицину, и незначительное количество - к левомицетину, мономицину, олеандомицину, неомицину.

Высокой резистентностью к полимиксину и бензилпенициллину обладали все выделенные культуры за исключением штаммов List, monocytogenes и St. aureus, соответственно.

Возбудители желудочно-кишечных заболеваний были мало чувствительны к предложенным антибиотическим препаратам. Шт. S aim. -typhimurium проявлял чувствительность лишь к эритромицину, а к остальным препаратам - промежуточную чувствительность. Шт. Е. coli обладал полирезистентностью. Патогенный вариант Pr. mirabilis в значительной мере был умеренно чувствительным к химиопрепаратам, рост культуры подавляли левомицетин, эритромицин, тетрациклин. У. enterocolitica был мало чувствителен к предложенным антибиотикам.

Рост возбудителя листериоза ингибировался эритромицином,.:: тетрациклином, стрептомицином, мономицином, это был единственный штамм чувствительный к полимиксину из всех выделенных культур.

Эризиопелоидный микроб проявлял множественную устойчивость, ни один из перечисленных антибиотиков не подавлял его роста в нашем опыте.

Таким образом, исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что микроорганизмы, выделенные из объектов окружающей среды, обладали незначительной чувствительностью к предложенным антибиотикам. Резистентные формы микроорганизмов, выделенные от животных и птиц, не утрачивали своей патогенности. Не реагируя на.:; антибиотики, они могли вызывать инфекцию такой же силы, как и чувствительные штаммы [Бриан J1.E., 1984].

Этот аспект имеет значение в свете изыскания новых антибиотических препаратов для лечения инфекционных заболеваний, поскольку очевидна тенденция «привыкания» отдельных микроорганизмов к классическим препаратам, применяемым для подавления их роста. С другой стороны, большое внимание при разработках следует уделить тому факту, что применение «ударных» доз антибиотических препаратов, вызывает массовую гибель как болезнетворной, так и естественной микрофлоры организма при ;: которой происходит освобождение в больших количествах эндотоксинов, вызывающих осложнения [Красильников Н.А., 1958].

Анализируя представленные литературные данные и результаты собственных исследований, можно прийти к выводу, что при определённой совокупности физико-химических, экологических характеристик, может

139 происходить не только резервация возбудителей болезней животных и человека в объектах окружающей среды, но и приобретение ими свойств несомненно патогенного микроба.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Етобаева, Ирина Валерьевна, 2000 год

1. Аглиуллина Д.Г., Беляева М.И. Микробиология, 45, 247.

2. Акайзин Э.С. Влияние pH среды на индуцированный автолиз популяций энтеробактерий //Журн. микробиол. 1998. - № 4. - С. 6-8.

3. Акатов А.К., Зуева B.C. Стафилококки. М., 1983. - С. 14-29.

4. Акатов А.К., Хаттеневер М.Л. Стафилококки и стафилококковая-инфекция. Саратов: Изд-во Саратовск. ун-та, 1980. - С. 4-24.

5. Ананьин В.В. Лептоспирозы людей и животных. М., 1971.

6. Багрянцев В.Н., Кузнецов В.Г. К эпидемиологической значимости овощей при иерсиниозах на трассе БАМ //Иерсиниозы: Тез. Всесоюзн. науч-практ.: конф. Владивосток, 19896. - С. 71-73.

7. Багрянцев В.Н., Кузнецов В.Г. Эколого-эпидемиологические особенности иерсиниоза //Иерсиниозы: Тез. Всесоюзн. науч.-практ. конф. -Владивосток, 1989а.-С. 70-71.

8. Беляков В.Д., Ряпис Л.А. Сапрофиты медицинского значения и природа их полипатогенности на примере псевдомонад //Сб.: Экология возбудителей сапронозов /Отв. ред. д.б.н. В.Ю.Литвин. М., 1988. - С. 8085.

9. Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим ;:; методам исследования. М.: Медицина, 1983. - 445 с.

10. Бойко А.В., Бойко О.В. Рибонуклеазная активность бактерий как фактор персистенции некоторых возбудителей сапронозных инфекций //Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 71-73.

11. Бойко О.В. Персистентные характеристики Listeria monocytogenes, выделенных из различных источников //ЖМЭИ. 1998. - № 4. - С. 23-25. ;

12. Бриан JT.E. Бактериальная резистентность и чувствительность к химио- / препаратам. М.: Изд-во «Медицина», 1984. - 272 с.

13. Брудастов Ю.А., Валышев А.В., Брудастов А.Н. Антикомплементарная -активность производственного штамма Bacillus cereus IP 5832 и энтеробактерий при их совместном культивировании //Журн. микробиол.- 1996.-№3.-С. 91-93.

14. Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Биологическое значение антикомплементарной активности бактерий //Журн. микробиол. -Приложение. 1994. - С. 28-32. ■■

15. Бузолева Л.С., Чумак А.Д., Дзадзиева М.Ф. и др. Газотрофия патогенных :; бактерий //Журн. микробиол. 1997. -№ 5. - С. 63-67.

16. Бухарин О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий // Журн. микробиол. 1994. - Приложение. - С. 4-13.

17. Бухарин О.В. Лизоцим микроорганизмов. Киев, 1984. - С. 175-177.

18. Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как результат отношений в системе паразит хозяин //Журн. микробиол. - 1997. - № 4. -С. 3-9.

19. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Изучение антикомплементарной активности стафилококков //Клиническая:' лабораторная диагностика. 1992. - № 11-12. - С. 68-71.

20. Бухарин О.В., Васильев Н.В., Усвяцов Б.Я. Лизоцим микроорганизмов /Под ред. проф. Ю.В.Федорова. Томск, 1985. - 213 с.

21. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г. Таксономическое значение способности бактерий рода Staphylococcus к инактивации ряда факторов естественной противоинфекционной резистентности //Журн. микробиол. 1996. - № 4. -С. 30-33.

22. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г. Экологическая детерминированность маркеров персистенции стафилококков //Журн. микробиол. - 1997. - № 24. -С. 60-63.

23. Бухарин О.В., Соколов В.Ю. A.C. 1564191. Способ определения антиинтерфероновой активности микроорганизмов //Открытия. 1990. -№ 18.

24. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство. Екатеринбург, 1996.

25. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов //Журн.' микробиол. 1984. - № 2. - С. 27-28.

26. Валышев A.B., Зыкова JI.C., Коннова М.Е. Скрининговая диагностика дисбиоза кишечника //Журн. микробиол. 1994. - Приложение. - С. 7174.

27. Варвашевич Т.Н., Сидорова В.Е., Никифорова JI.C. Температурная регуляция некоторых ферментных систем иерсиний //Иерсиниозы. Л., 1983. - С. 5-6.

28. Венедиктов B.C., Тимченко Н.Ф., Булгаков В.П., Журавлев Ю.Н. Взаимодействие иерсиний с растительными клетками //Иерсиниозы: Тез.науч. практ. конф. /Отв. ред. академик АМН СССР Г.П.Сомов. -Владивосток, 1989. 4.1. - С. 12-14.

29. Воронцова Т.А., Шустрова Н.М., Вышивкина Н.В. Микробный пейзаж мест хранения и выращивания овощей //Сб.: Потенциально патогенные!: бактерии в природе /Отв. ред. д.б.н., проф. В.Ю.Литвин. М., 1991. - С. 42-50. 5

30. Гайдукова Н.Г. Лабораторный практикум по физико-химическим методам : анализа. Краснодар, 1993. - С. 60-65.

31. Гаузе Г.Ф. Пути изыскания новых антибиотиков. — М., 1958.

32. Герхард Ф. Методы микробиологических исследований. — М.: Мир, 1983. 535 с.

33. Гершун В.И. Влияние абиотических факторов на жизнеспособность : листерий в почве //Сиб. вестн. с-х. науки. 1980. - № 3. - С. 78-81.

34. Гершун В.И. Влияние температурного режима на популяцию листерий в! объектах внешней среды //Ветеринария. 1983. - № 8. - С. 29-30.

35. Гершун В.И. Листериоз сельскохозяйственных животных. Алма-Ата: ;;; Кайнар, Г981. - 96 с.

36. Гершун В.И. Экология листерий и пути их циркуляции в природном очаге //Экология возбудителей сапронозов: Сб. науч. тр. М., 1998. - С. 80-85.

37. Гинцбург А.Л., Романова Ю.М. Некультивируемые формы бактерий и их роль в сохранении возбудителей сапронозов во внешней среде //Журн. : микробиол,- 1997. -№3.-С. 116-121. ^

38. Гордейко В.А. Цепь циркуляции иерсиний в агроценозе и: эпидемиологическое ее проявление //Потенциально патогенные бактерии -в природе. -М., 1991.-С. 75-86. , :

39. Гордейко В.А., Шустрова Н.М. //Лаб. дело. 1989. - № 4. - С. 64-65.

40. Гордейко В.А., Шустрова Н.М. Существование иерсиний в почве после внесения их со сточными водами //Иерсиниозы (микробиология, эпидемиология, клиника, патогенез, лабораторная диагностика): Тез.

41. Всесоюзн. науч.-практ. конф. Владивосток, 1989. - Ч. 1. - С. 76-77.

42. Гриценко В.А., Брудастов Ю.А., Журлов О.С., Чертков K.JI. Свойства эшерихий, выделенных из организма мышей, при бактериальной транслокации после иммобилизационного стресса //Журн. микробиол. -2000. -№ 1.-С. 37-41.

43. Гриценко В.А., Ляшенко И.Э. Сравнительная оценка персистентных характеристик эшерихий, выделенных из различных экониш //Журн. микробиол. 1994. - Приложение. - С. 87-90.

44. Дерябин Д.Г. Маркеры персистенции стафилококковой аэромикрофлоры медицинского стационара //Журн. микробиол. 1994. - Приложение. - С. 91-94.

45. Дзюбак В.Ф. Эколого-эпидемиологические закономерности псевдотуберкулеза (по материалам Хабаровского края): Автореф. дисс. канд. мед. наук. Саратов, 1991. - 23 с.

46. Домарадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде //Журн. микробиол. 1997. - 4. - С. 31-35.

47. Ежов Г.И. Руководство к практическим занятиям по сельскохозяйственной микробиологии. -М.: Высшая школа, 1974.

48. Ермолаева С.А., Белый Ю.Ф., Тартаковский И.С. Изменение уровня экспрессии факторов вирулентности Listeria monocytogenes под влиянием внешних условий //Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2000. - № 1. - С. 17-19.

49. Звягинцев Д.Г., Голимбет В.Е. Изменения количества почвенных бактерий и гидротермический режим почвы //Микробиология. 1983. - Т. 52., Вып.6.-С. 999-1002.

50. Иванова Д.П., Соркин Ю.И., Хлебович И.А. Экспериментальные полевые наблюдения за размножением микроба сибирской язвы в черноземной почве юга Средней Азии и Сибири //Проблемы природной очаговости чумы. Иркутск, 1985. - С. 75-76.

51. Калина Г.П. Условно-патогенные микроорганизмы как функция эволюционно-экологического комплекса //Гигиена и санитария. 19836. -№7.-С. 51-53.

52. Карпов В. //Ветеринария. 1985. - № 11. - С. 79-80.

53. Кирьянов Е.А. Природно-очаговые болезни животных. Владивосток: Изд-во ГАУ, 1990.

54. Колесникова В.В. Новые факты в эпидемиологии псевдотуберкулеза //Иерсиниозы. Новосибирск, 1983. - С. 50-55.

55. Колесникова В.В. Роль почвы в экологии псевдотуберкулезного микроба //Психрофильность патогенных микроорганизмов. Новосибирск, 1986. -С. 68-73.

56. Колешко О.И. Влияние влажности на развитие микроорганизмов и биологическую активность почвы //Вестн. Белорус, ун-та. 1980. - Сер. 2, №2.-С. 38-40.

57. Котляров В.М., Бакулов И.А. Некоторые биологические свойства Listeriamonocytogenes //Ветеринария. 1973. - № 1. - С.112-114.

58. Красильников А.П., Гудкова Е.И. Исследование чувствительности энтеробактерий к дезинфектантам //Журн. микробиол. 1993. - № 5. - С. 22-28.

59. Красильников Н.А. Антагонизм микробов и антибиотические вещества. — М.: Советская наука, 1958.-С.167-169.

60. Кудрина Н.В., Беседнова Н.В., Вавилова JI.M. Система комплемента при бактериальных инфекциях //Журн. микробиол. 1997 - № 5. - С. 74-77.

61. Кудрина Н.В., Беседнова Н.Н. Роль системы комплемента в патогенезе иерсиниозов //Журн. микробиол. —1997. № 5. - С. 41-44.

62. Кузнецов В.Г. К экологии бактерий Y. pseudotuberculosis //Иерсиниозы (микробиология, эпидемиология, клиника, патогенез, иммунология): Тез. Всеосюзн. науч-практ. конф. Владивосток, 1986. - С. 116-118.

63. Кузнецов В.Г. Роль местообитаний внеорганизменных популяций возбудителя в эпидемиологии псевдотуберкулеза //Журн. микробиол. -1997.-№5.-С. 17-21.

64. Куляш Ю.В., Лепилин А.В., Семенова О.П., Куцемало Р.Т. Комбинированное влияние лазерных излучений и переменных магнитных полей на стафилококки //Журн. микробиол. 1998. - № 5. - С. 33-36.

65. Левин А.Б., Гаткин Е.Я., Голубенко Ю.В. и др. Бактерицидное действие УФ-лазера на микроорганизмы возбудители острой гнойной деструктивной пневмонии у детей // Журн. микробиол. - 1988. - № 7. - С. 99-100.

66. Литвин В.Ю. Категории общей эпидемиологии в связи с проблемой сапронозов //Журн. микробиол. 19886. - № 3. - С. 93-99.

67. Литвин В.Ю. Механизмы устойчивого сохранения возбудителя чумы в окружающей среде (новые факты и гипотезы) //Журн. микробиол. 1997. -№ 4.-С. 26-31.

68. Литвин В.Ю. Общие закономерности и механизмы существованияпатогенных микроорганизмов в почвенных и водных экосистемах //Сб.: Экология возбудителей сапронозов /Отв. ред. д.б.н. В.Ю.Литвин. М., 1988а.-С. 20-24.

69. Литвин В.Ю. Потенциальная патогенность и случайный паразитизм микроорганизмов //Сб.: Потенциально патогенные бактерии в природе /Отв. ред. д.б.н., проф. В.Ю.Литвин. М., 1991. - С. 9-30.

70. Литвин В.Ю. Природноочаговые инфекции: ключевые вопросы и новые позиции //Журн. микробиол. 1999. - № 5. - С. 26-33.

71. Литвин В.Ю. Сапрофитическая фаза в экологии возбудителей инфекционных заболеваний //Журн. микробиол. 1985. - № 6. - С. 98-103.

72. Литвин В.Ю. Эколого-эпидемиологические аспекты случайного паразитизма некоторых патогенных бактерий //Журн. микробиол. 1986 . -№ 1.с. 85-91.

73. Литвин В.Ю., Гинцбург А.Л., Пушкарева В.И. и др. Эпидемиологические аспекты экологии бактерий. М., 1998.

74. Максименкова И.А. Популяционная динамика псевдотуберкулезного микроба в почве: Автореф. дисс. канд. биол. наук. М., 1987. - 18 с.

75. Мац Л.И., Перцовская М.И., Тарков М.И. Определение токсикоза почв //Руководство по санитарной охране почвы. М.: Медицина, 1972.

76. Мека-Меченко Т.В. Биологическая характеристика листериоза в Кахахстане и совершенствование его лабораторной диагностики: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Алматы, 1997. - 25 с.

77. Мирзоева В.А. Бактерии группы сенной и картофельной палочек (Вас. subtilis и Вас. mesentericus). -М.: Изд-во АН СССР, 1959. 176 с.

78. Мишустин E.H. Микробные ассоциации почв и подходы к их изучению //Микробиология. 1955. - Т. 24. Вып. 4. - С. 471-485.

79. Найманов П.И. Влияние некоторых физических и химических факторов на рост сибиреязвенного микроба в условиях периодического культивирования //Актуальные вопросы профилактики сибирской язвы:

80. Тез. докл. XII Пленарн. заседания Межведомств, науч.-метод, комиссии по борьбе с сибирской язвой.-Воронеж, 1986.-С. 109-110.

81. Немцева- Н.В. Взаимодействие Escherichia coli, обладающих антилизоцимным признаком, с инфузориями //Журн. микробиол. 1997. -№4.-С. 123-126.

82. Немцева Н.В., Мисетов И.А., Алехина Г.П. Определение свежего фекального загрязнения воды поверхностных водоемов //Журн. микробиол. 1997. - № 24. - С. 120-123.

83. Никитина 3-Й., Мамитко A.B. Использование мембранных камер для микробиологической диагностики почв. -М.: Наука, 1976. С. 183-184.92.0бгольц A.A. Механизмы персистирования бактерий //Журн. микробиол. 1992.-№ 2.-С. 70-72.

84. Павлов И.Б., Куликовский A.B. и др. //Вестник сельскохозяйственных наук. 1990. -№ 2.-С. 75-78.

85. Панасюк Д.И. Закономерности взаимоотношений сочленов паразитоценоза //В сб.: Паразитоценозы и ассоциативные болезни. М.: Колос, 1984.-С. 27-45.

86. Петруев Д.Н. Биологическая и экологическая характеристика микроорганизмов, выделенных у диких птиц: Дисс. канд. вет. наук. Улан-Удэ, 2000,- 157 с.

87. Печеркина С.А., Малеева Л.И., Щицина И.В. О влиянии интерферона на стафилококки //Журн. микробиол. 1982. - № 2. - С. 54-56.

88. Погорелова Н.П. Распространение бактерий Yersinia enterocolitica в регионе дельты Волги и совершенствование методов их идентификации: Автореф. дисс. канд. биол. наук.-Л., 1986.-24 с.

89. Подболтов К.В. Некоторые данные о выживаемости и размножении возбудителя кишечного иерсиниоза в воде //Профилактика особо опасных инфекций /Отв. ред. П.И.Анисимов. Саратов, 1980. - С. 89-91.

90. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. М.:

91. ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. 1200 с.

92. Покровский В.И. Руководство по зоозонам. М., 1983.

93. Пручкииа З.В., Бузолева JI.C. Влияние гумусовых веществ бентонитовых глин на размножение иерсиний //Иерсиниозы: Тез. всесоюзн. науч.-практ. конф. Владивосток, 1989. - С. 46-47.

94. Пушкарева В.И. Листерии и эризипелотриксы в ассоциации со свободноживущими простейшими //Журн. микробиол. 1996. - № 5. - С. 93-94.

95. Пушкарева В.И. Патогенные бактерии в почвенных и водных сообществах (экспер.-экол. исследование): Автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 1994.

96. Пушкарева В.И., Литвин В.Ю., Троцкая В.В. Листерии в растениях: экспериментальное изучение колонизации, численности и изменчивости //Журн. микробиол. 1996. - № 5. - С. 10-12.

97. Радчук H.A. Ветеринарная микробиология и иммунология. М.: Агропромиздат. - 1991.

98. Реброва Р.Н., Тарарышкин А.П., Царев Г.В. и др. Выделение Y. enterocolitica из речной и озерной воды //Журн. микробиол. 1985. - № 10. -С. 109-110.

99. Родзиковский A.B. Популяционная динамика сибиреязвенного микроба в некоторых почвах: Дисс. канд. мед. наук. Иркутск, 1989. - 113.с

100. Родзиковский A.B., Соркин Ю.И. и др. Возможность жизнедеятельности сибиреязвенного микроба при пониженных температурах //Психрофильность патогенных микроорганизмов.

101. Новосибирск, 1986. С. 24-27.

102. Романова Ю.М., Алексеева Н.В., Гинцбург А.И. Некультивируемое состояние у патогенных бактерий на модели Salmonella typhimurium: феномен и генетический контроль //Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 35-41.

103. Романова Ю.М., Гинзбург A.J1. //Мол. генетика, микробиология, вирусология. 1993. - № 6. - С. 34-37.

104. Рыгзынова О.Б. Эпизоотологический, бактериологический и серологический мониторинг долины реки Селенги: Дисс. канд. вет. наук. -Улан-Удэ, 2000.- 129 с.

105. Сагимбеков У.А., Рапопорт Л.П., Меняйкин А.К. и др. Изучение роли субстрата нор Rhombomys opimus licht в энзоотии чумы //Сб.: Экология возбудителей сапронозов /Отв. ред. д.б.н. В.Ю.Литвин. М., 1988. - С. 131-140.

106. Самойленко И.И., Васильева Е.И., Павлова И.Б., Туманян М.А. Механизмы бактерицидного действия перекиси водорода //Журн. микробиол. 1983. - № 12. - С. 30-33.

107. Самсонова А.П., Левашев B.C. Чувствительность к дезинфектантам штаммов Escherichia coli, содержащих плазмиды множественной лекарственной устойчивости //Журн. микробиол. 1993. - № 6. - С. 33-34.

108. Саямов С.Р. Связь соотношения активности экстра- и интрабактериальной каталазы Yersinia pestis с их устойчивостью к перекиси водорода и уровнем вирулентности //Журн. микробиол. 1996. -№6.-С. 60-61.

109. Смирнова A.M., Трояшкина A.A., Падерина Е.М. Микробиология и;;; профилактика стафилококковой инфекции. Л., 1977.

110. Соколов В.Ю., Тарасевич A.B. Ускоренный метод определения антиинтерфероновой активности бактерий //Журн. микробиол. 1982. - № 11-12.-С. 10-11.

111. Сомов Г.П. Варвашевич Т.Н. Ферментативные механизмы'--психрофильности псевдотуберкулезного микроба //Журн. микробиол. -1984.-№2. С. 42-47.

112. Сомов Г.П. Значение феномена психрофильности патогенных бактерий для обоснования возможности их размножения в окружающей среде //Сб.: Экология возбудителей сапронозов /Отв. ред. д.б.н. В.Ю.Литвин. М., 1988.-С. 35-47.

113. Сомов Г.П. Новые аспекты экологии внеорганизменных популяций патогенных микроорганизмов //Вестник АМН СССР. 1985а. - № 1. — С. 45-49.

114. Сомов Г.П. Новые аспекты экологии патогенных микроорганизмов //Бюлл. Сиб. отд. АМН СССР. 1982,- № 2. - С. 55-62.

115. Сомов Г.П. Особенности экологии внеорганизменных популяций патогенных бактерий и их отражение в эпидемиологии инфекций //Журн. микробиол. 1997.-№ 5. - С. 7-11.

116. Сомов Г.П. Психрофильность патогенных бактерий и ее значение для решения вопроса о возможности размножения их в окружающей среде //Психрофильность патогенных микроорганизмов. Новосибирск, 1986. -С.3-7.

117. Сомов Г.П. Психрофильность патогенных микроорганизмов и ее эпидемиологическое и патогенетическое значение //Вестник АМН СССР. 19856. - № 1. - С. 58-65.

118. Сомов Г.П., Беленева И.А., Бузолева Л.С. и др. Экологические аспекты листериоза в приморском крае //Журн. микробиол. 1997. - № 5. - С. 7882.

119. Сомов Г.П., Бурцева Т.П., Бузолева Л.С. Биохимические механизмы энергообеспечения клеток Yersinia pseudotuberculosis при низкой; температуре культивирования //Журн. микробиол. 2000. - № 1. - С. 3-6.

120. Сомов Г.П., Варвашевич Т.Н. Влияние низкой температуры навирулентность некоторых патогенных бактерий //Журн. микробиол. -1992. -№4.-с. 62-66.

121. Сомов Г.П., Литвин В.Ю. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий: Экологические аспекты /Отв. ред. к.м.н. Е.Ф.Бочаров. -Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1988. 208 с.

122. Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседнова H.H. Псевдотуберкулез. М.: Медицина, 1990.-240 с.

123. Сомов Г.П., Тиченко Н.Ф. Основные итоги изучения психрофильности патогенных бактерий //Журн. микробиол. 1997. - № 5. - С. 12-16.

124. Соркин Ю.И., Родзиковский A.B. Экология сибиреязвенного микроба в естественных биоценозах почв различных природных зон СССР //Экология возбудителей сапронозов. М., 1988. - С. 65-79.

125. Сучков Ю.Г., Худяков И.В., Емельяненко E.H. и др. О возможности сохранения возбудителя чумы в почве в покоящейся (некультивируемой) форме //Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 42-46.

126. Тарков М.И., Тимченко Л.А., Меренюк Г.В.Токсичность почв к микроорганизмам в отдельных районах СССР //Охрана природы Молдавии. Кишинев, 1973. - Вып. IL - С. 119-125.

127. Тимофеева Л.А., Головачева В.Я., Смирнова Л.А. и др. Роль почвы в сохранении чумного микроба //Доклады Иркутского противочумного института. Кызыл, 1969. - Вып. 8. - С. 64-66.

128. Тимченко Н.В., Булгаков В.П., Булах Е.В. и др. Взаимодействие Yersinia, Listeria и Salmonella с растительными клетками //Журн. микробиол. 2000. -№ 1.- С. 6-10.

129. Траценко А.Ф., Варвашевич Т.Н. Особенности штаммов

130. Staphylococcus, выделенных из холодильников //Сб.: Психрофильность патогенных микроорганизмов; Отв. ред. чл.-корр. АМН СССР Г.П.Соколов. Новосибирск, 1986. - С. 19-23.

131. Троцкая В.В., Четина Е.В., Аляпкина Ю.С. и др. Некультивируемые формы Yersinia pseudotuberculosis в почвах природного очага псевдотуберкулеза //Журн. микробиол. 1996. - № 5. - С. 13-15.

132. Усвяцов Б.Я., Кирилличев А.И., Воронина Л.Г. и др. Подавляющее действие магнитно-лазерного луча и электролизного раствора гипохлорида натрия на факторы персистенции возбудителя //Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 102-105.

133. Филичкин С.Е., Лебедева Т.В. О методике определения ДНК-азной активности стафилококков //Лаб. дело. 1980. - № 6. - С. 371-372.

134. Фролов А.Ф., Зарицкий A.M., Фельдман Ю.М. Еще раз об условной патогенности микроорганизмов (ответ оппоненту) //Журн. микробиол. -1989. -№ 5.-С. 96-98.

135. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П., Стейли Дж., Уильяме С. Определитель бактерий Берджи. М.: Мир, 1997. - Т. 1. - 432 с.

136. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П., Стейли Дж., Уильяме С. Определитель бактерий Берджи. М.: Мир, 1997. - Т.2. - 368 с.

137. Цион Р.А. Определитель бактерий. М.: ОГИЗ-СЕЛЬХОЗГИЗ, 1948.

138. Чайковская С.М., Гивенталь Н.И., Резван С.П. Стандартизация методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам //Лаб. дело. 1984.-№ 5. - С. 299-302.

139. Чайникова И.Н., Смолягина А.И., Попова Е.В., Бовбас Е.И. Особенности экспериментальной инфекции у мышей, вызванной сальмонеллами с различными персистентными характеристиками //Журн. микробиол. 1997. - № 24. - С. 77-80.

140. Челпаченко О.Е., Зыкова Л.С. Влияние лекарственных препаратов на выражение персистентных свойств уропатогенных штаммовэнтеробактерий //Журн. микробиол. 1996 - № 3. - С. 84-86.

141. Чернова О.П., Матюшкина С.Б., Воляник М.Н. и др. Динамика переистентных характеристик стафилококков под воздействием микроклимата спелеошахты //Журн. микробиол. 1996. - № 3. С. 78-80.

142. Чистякова И.С. О некоторых биологических свойствах иерсиний энтероколитика и псевдотуберкулезис //Микробиология и иммунология иерсиниозов: Сб. науч. тр. Рязань, 1985. - Т. 84 /Под ред. проф. Р.Н.Ребровой. - С. 27-30.

143. Шапиро А.Д. //В мире науки. 1988. - № 8. - С. 46-54.

144. Шестаков В.И., Пак И.Ч., Колесникова В.В. и др. Экологические аспекты возбудителей иерсиниозов на восточном участке Байкало-Амурской магистрали //Психрофильность патогенных микроорганизмов. -Новосибирск, 1986. С. 73-77.

145. Шубин Ф.Н. Эпидемиологические аспекты псевдотуберкулёзной поликлональной инфекции //Журн. микробиол. 1997. - № 5. - С. 22-25.

146. Шустрова Н.М., Гордейко В.А., Мисуренко E.H. и др. Иерсинии в растениях: экспериментальное исследование //Потенциально патогенные бактерии в природе. -М., 1991. С. 86-92.

147. Шустрова Н.М., Дубровский Ю.А. Природные резервуары условно-патогенных бактерий //Потенциально патогенные бактерии в природе. -М., 1991.-С. 30-41.

148. Шустрова Н.М., Мисуренко E.H., Литвин В.Ю. О возможности передачи Yersinia enterocolitica по цепочке почва растение - животное (предварительное сообщение) //Журн. микробиол. - 1992. - № 4. - С. 1012.

149. Юсупова Д.В. Нуклеодеполимеразная активность бактерий в связи с; некоторыми особенностями их физиологии. Казань: Изд-во Казанск. унта, 1978.-204 с.

150. Юсупова Д.В., Степанова Л.Т. Некоторые подходы к изучениюбиологической роли нуклеаз. Казань: Изд-во КГУ, 1972. - 108 с.

151. Adelle Е., Levett P.N. //Int. J. Food Microbiol. 1990. - 11. - №3-4. - P. 345-360.

152. Bielecka Z., Jakubczak A., Andziak J., Stypulkovska-Misiurewicz H. Temperature-depended production of enterotoxin by Yersinia enterocolitica isolated from healthy swines //Med. dosw. i microbiol. 1988. - 40, №3. - C. 124-129.

153. Bodnar L., Bodnar S., Szita J. et al. Yersinia enterocolitica tulelese felszini vizben es talajban //Egeszsegtudowäny. 1980. - V.24, №2. - P. 136-140.

154. Bom J., Bhandi S. //Immunology. 1986. - Vol. 59. - № 1. - P. 139-145.

155. Brackett Robert E. Effects of various acids and pH on growth and survival of Yersinia enterocolitica //Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol. -Washington.- 1986.-282.

156. Brackett Robert E. Growth and survival of Y. enterocolitica at acidis pH //Int. Y. Food microbiol. 1986. - 3, №5. - P. 243-251.

157. Brown E.J. //Bacteria and complement. Berlin, 1985. - P. 159-187.

158. Buckeridge S. et al. In: Microbial Growth and Survival in Extremes of Environment. London, 1980. - P. 290-297.

159. Chandra s., Low//PNAS.- 1995.-V. 92.-P. 4120-4123.

160. Eyles M.J., Dabey G.R. Vibrio choleral and enteric bacteria in oyster -producing areas of two urban estuaries in Australia //Inf. J. Food Microbiol. — 1998. V.6. - №3. - P. 207-218.

161. George Adelle E., Levett P.N. Effect of temperature and pH on Survival of Listeria monocytogenes in coloslow //Int. J/ food microbiol. 1990. - 11, № 3-4.-c. 345-360/

162. Grossman N., Svenson S.B., Leive L. et al. //Mol. Immunol. 1990. - Vol. 27. -№9.-P. 859-865.

163. Heim F., Fehlhaber К., Schneibner G. Untersuchungen über das Verhalten von Yersinia enterocolitica bei unterschiedlichned temperaturen undverschiedenen Pökelsalzkonzentrationen //Arch. exp. Veterinär. 1984. — Bd 38, №5. - S. 729-734.

164. Joenije H., Konings W., Venema G. //J. Bacteriol. 1974. - 119, 784.

165. Kaya Mükerrem, Schmidt Udo # Behaviour of Listeria monocytogenes on vacuum-packed beef //Fleisch. 1991. - 45, №5. - c. 424-426.

166. Kirschfink M. //Dtsch. med. Wochenschrift. 1994. - Bd. 119. - № 9. - S. 307-310.

167. Kovacsne Domjan Hajnalka. Listeriak elofordulasa husipara alapanyadokban es kesztermekekben //Konzew es paprikaip. 1989. - № 3. -C. 81-84.

168. Listeriosis /Brightman C.A., Dumbreck Z.A. //Brit. J. Hosp. Med. 1998. -42, №5.-p. 366, 368-370.

169. Macda Miroshi, Molla Akhterus-Zaman //Clin. Chim. Acta. 1989. - Vol. 185.-№3.-P. 357-368.

170. Manjula B.N. //Eur. J. Epidemiol. 1988. - Vol. 4. - № 3. - P. 289-300.

171. Mezrioui N., Baleux B. Effects of la temperature, du pH et du rayonnement solaire sur la survie de différentes bactéries d'intérêt sanitaire dans une eau usée épurée par lagunage //Rev. sei. eau. 1992. - 5, №4. - c. 573-591.

172. Mollaret H., Karimi Y., Eftekhari M. et al //Bull. Soc. Pathol. Exot. 1963. -V.56.-P. 1186-1193.

173. Omenn G.S., Friedman J. //J. Bacteriol. 1970. - 101, 921.

174. Roberts I.S., Saunders F.K., Boulnois G.J. //Biocham. Soc. Trans. 1989. -Vol. -№3.- P. 462-464.

175. Roszak D.B., Grimes D.J., Colwell R.R. //Can. J. Microbiol. 1984. - Vol. 30.-P. 334-338.

176. Skarnes R. Infect, a. Immun. 1978. - 19. - №2. - P. 512-522.

177. Stemmer F., Clas F., Loos M. //Complement. 1985. Vol. 2., № 1. - P. 7576.

178. Tashiro Kazuko, Kubokura Yeko, Kato Yukio, Kaneko Kenichi, Ogawa159

179. Masuo. Survival of Yersinia enterocolitica in soil and water //J. Vet. Med. Sei. Jap. J. Vet. sei J. - 1991. - 453, № 1. -P.23-27.

180. Vukajlovich S.W., Haffman J., Morroson D.C. //Mol. Immunol. 1987. -Vol. 24. №4.-P. 319-331.

181. Weiner E.M. //Scand J. Immunol. 1998. - Vol. 28. - №4. - P. 425-430.

182. Wolf Isabel D., Lechowich Richard V. Current issues in microbiological food safety //Cereal foods world. 1989. - 34, №6. - C. 468-472.

183. Xu H.-S., Roberts N., Singleton F.L. et al //Microb. Ecol. 1982. - Vol. 8. -P. 313-323.

184. Yakabezak A., Maleszewski J. Przezywalnose Yersinia enterocolitica w miesie Wiepzowum w zalznosci odwielkosci inoculum i temperatury zamrazania //Med. wet. 1992. - 48, № 10. - c. 466-468.

185. Рис. 1. Рост культур микроорганизмов на среде Клиглера: 1- Micr.candidus;2 S. typhimurium 79; 3-Е. coli 08; 4 - Salm, dublin

186. Рис.2. Газообразование в столбике скошенного агара 5, 6; отсутствие газообразования - 7шт. Е. соН 08

187. Рис.4. Зоны деполимеризации ДНК вокруг колоний шт. 81. Ьуюив

188. Рис.5. Почва токсичная для вакцинного штамма Вас. апШгаЫз

189. Рис.6. Почва нетоксичная для вакцинного штамма Вас. апШга^Б