Характеристика гемолизинов Bacillus anthracis тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Арасланова, Вера Алексеевна

• Арасланова, Вера Алексеевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Арасланова, Вера Алексеевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Возбудитель сибирской язвы и факторы его патогенности.

2.2. Общие сведения о бактериальных токсинах.

2.2.1. Роль гемолизинов в патогенезе и их биологическое действие.

2.2.2. Природа и физико-химические свойства гемолизинов.

2.2.3. Механизм действия бактериальных токсинов на клетку.

2.2.4. Стимуляторы и ингибиторы гемолитической активности.

2.2.5. Методы изучения гемолитической активности патогенных микроорганизмов.

2.3. Гемолизины микроорганизмов рода Bacillus.

2.3.1. Гемолизины Bacillus cereus.

2.3.2. Гемолизины Bacillus anthracis.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика гемолизинов Bacillus anthracis»

Актуальность работы. Одним из основных фундаментальных направлений современной микробиологии является изучение патогенности микроорганизмов. В настоящее время известно, что патогенные бактерии вырабатывают широкий спектр веществ, как непосредственно повреждающих или убивающих клетки макро- и микроорганизма, так и способствующих преодолению защитных систем организма хозяина для обеспечения своего проникновения. Эти соединения играют основную роль в патогенезе болезней бактериальной этиологии. (McDonel et al.,1986).

К числу наиболее важных факторов инвазивности, влияющих на тяжесть течения болезни при их взаимодействии с клетками и тканями восприимчивого организма, относят способность патогенов продуцировать протеазы, гемолизины, ферменты пигментосинтеза, пигментосорбции, способность к адгезии на поверхности клеток и другие. Среди многообразия этих веществ можно выделить токсины, которые в ряде случаев полностью определяют патогенез и клинические проявления болезни, например, столбнячный, дифтерийный, ботулинистический токсины, другие принимают более ограниченное участие в инфекционном процессе (а-токсин Staphylococcus aureus, гемолизин Escherichia coli, фосфолипаза С Clostridium perfringens и др.). Вместе с тем последние, нарушая целостность поверхностных структур клетки, повышая проницаемость тканей и подавляя фагоцитоз, способствуют проникновению бактерий в организм и их размножению, повышая вирулентность микробных культур.

Сибиреязвенный микроб в этом отношении также не является исключением. Установлено, что в основном вирулентность сибиреязвенного микроба связана с продукцией двух «классических» факторов — трехкомпонентного токсина и поли-Б-глютаминовой капсулы, структурные и регуляторные гены синтеза которых находятся в составе высокомолекулярных плазмид рХ01 и рХ02 (Mikesell P. et al., 1983; Green B.D. et al., 1985; Uchida I. et al., 1985, 1986, 1987). Однако анализ культурально-морфологических и биологических свойств полевых изолятов и их изогенных производных показывает, что в развитии инфекционного процесса при сибирской язве принимают участие и другие, на сегодняшний день, плохо изученные факторы патогенности, кодируемые хромосомой В. anthracis (Степанов А.С. и др., 1991; Цыганкова О.И., 1993; Еременко Е.И., 1997; Микшис Н.И. и др., 1999, Егорова И.Ю., Селянинов Ю.О., 2003). Об этом также свидетельствуют результаты изучения нуклеотидных последовательностей генов протективного антигена и капсульного оперона, в которых существенных отличий не было выявлено у изолятов с различной степенью патогенности.

Большинство из предполагаемых факторов патогенности B.anthracis довольно полно изучено, но работ посвященных исследованию гемолитических свойств сибиреязвенного микроба чрезвычайно мало. Так, в 40-х - 60-х годах прошлого столетия вопрос о гемолитических свойствах В. anthracis вызывал интерес микробиологов лишь возможностью использования их в одном из тестов, позволяющем дифференцировать его от близкородственных сапрофитов рода Bacillus. Но в связи с тем, что гемолиз на стандартном кровяном агаре, как правило, отсутствовал, а в бульоне с кровью происходил крайне медленно отсутствие гемолитической активности долгое время считалось классическим признаком B.anthracis (Михин Н.А., 1942; Гинсбург Н.Н., 1975; Коротич А.С. и др., 1976; Бургасов П.Н. и др., 1984; Лобзин Ю.В. и др., 2002).

Наиболее глубокое изучение гемолитической активности данного микроорганизма было проведено О.И. Цыганковой (1993) и О.В. Шевченко (1999). С помощью разработанных ими способов выявления гемолитической активности (луночный метод на двухслойном агаре и однослойная среда) все изученные штаммы B.anthracis были подразделены на две группы -гемолитически активные и неактивные, причем гемолиз эритроцитов барана в основном вызывали типичные по всем свойствам высоковирулентные сибиреязвенные штаммы.

Таким образом, учитывая данные литературы об участии гемолизинов в патогенезе болезней бактериальной этиологии, а также недостаточную изученность этого вопроса в отношении возбудителя сибирской язвы, изучение токсинов B.anthracis, обладающих цитолитической активностью, является важной задачей для понимания молекулярных основ патогенности данного микроорганизма.

Цели и задачи исследования. Основной целью данной работы являлось определение химической природы, изучение биохимических и биологических свойств гемолизинов сибиреязвенного микроба, а также их генетической структуры.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

-изучить влияние условий культивирования на продукцию гемолизинов клетками B.anthracis;

-изучить влияние физико-химических и биологических факторов на цитолитическую активность сибиреязвенных экзотоксинов;

-разработать технологию очистки сибиреязвенных гемолизинов и изучить их физико-химические свойства;

-определить первичную структуру гемолитических детерминант В. anthracis и сравнить ее с таковой у других представителей рода Bacillus;

-создать экспрессирующие рекомбинантные плазмиды, содержащие гены сфингомиелиназы и фосфолипазы С B.anthracis, изучить цитолитические и биологические свойства полученных рекомбинантных белков;

-получить иммуноглобулины кроликов к фосфолипазе С и сфингомиелиназе B.anthracis и изучить их влияние на проявление гемолитической активности сибиреязвенного микроба

Научная новизна работы.

- Определены оптимальные условия культивирования Bacillus anthracis для обеспечения высокого уровня секреции сибиреязвенных гемолизинов и получены новые данные об их свойствах и биологической активности.

Идентифицированы экзотоксины B.anthracis, обладающие гемолитическими свойствами, и проведен их структурно-функциональный анализ.

- Получены данные о первичной структуре гемолитических детерминант исследуемых штаммов B.anthracis и проведен их сравнительный анализ с целью определения степени родства с другими представителями рода Bacillus.

- Сконструирована оригинальная коллекция рекомбинантных клонов на основе прокариотических векторов, экспрессирующих сфингомиелиназу и фосфолипазу С В. anthracis в функционально активной форме.

- Экспериментально доказано участие сфингомиелиназы B.anthracis в проявлении гемолитических свойств сибиреязвенного микроба.

Практическое значение работы. Полученные результаты вносят вклад в понимание феномена гемолитической активности и, как следствие, в понимание молекулярных основ вирулентности B.anthracis. Эти данные являются необходимым этапом, закладывающим основу для дальнейших исследований гемолизинов/цитолизинов сибиреязвенного микроба, выяснения их участия в патогенезе, использования в качестве маркера при внутривидовом типировании, что в перспективе позволит осуществлять контроль над его патогенными свойствами.

Разработаны Методические рекомендации «Получение рекомбинантных белков фосфолипазы С и сфингомиелиназы B.anthracis», которые одобрены Советом по внедрению научных достижений в практику (протокол № 6 от 13 ноября 2008 г.) и утверждены директором ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН.

Апробация материалов исследований. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ГНУ ВНИИВВиМ (2003-2005 гг.), Международной научно-практической конференции «Болезни диких животных» (г. Покров, 2004г.),

Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов» (Щелково, 2005г.), Всероссийской научной конференции «Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология» (г. Киров, 2008г.).

Публикации. Основные результаты исследований изложены в 8 научных работах, в том числе 1 статья в журнале, рекомендуемом ВАК РФ.

Личный вклад соискателя. Представленные в диссертационной работе экспериментальные исследования, теоретический и практический анализ полученных результатов проведены автором самостоятельно. В выполнении работы по отдельным этапам оказывали практическую и консультативную помощь, заведующий лабораторией «Бактериологии» ГНУ ВНИИВВиМ, к.в.н. И.Ю. Егорова и заведующий отделом «Бактериальных инфекций» НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН, д.м.н. Белый Ю.Ф.

Положения, выносимые на защиту.

1. Исследованные гемолизины сибиреязвенного микроба по механизму ферментативного действия относятся к фосфолипазам.

2. Нормальные сыворотки крови животных обладают блокирующей активностью в отношении проявления Р-гемолитической активности и не оказывают влияния на а-гемолитическую активность сибиреязвенного микроба.

3. Сконструированные плазмиды экспрессируют гемолизины B.anthracis в функционально активной форме, которые обладают антигенной активностью и вызывают образование специфических антител при иммунизации лабораторных животных.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: список сокращений, введение, обзор литературы, собственные исследования, материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение, заключение, выводы, практические предложения, список использованных источников и приложение. Список литературы включает 218 источников (из них 66 отечественных и 152 зарубежных). Работа содержит 28 рисунков и 9 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Арасланова, Вера Алексеевна

6. ВЫВОДЫ.

1. Питательные среды на основе панкреатического гидролизата казеина, сердечно-мозгового бульона и гидролизата кильки в достаточной мере обеспечивают ростовые потребности" исследуемых штаммов B.anthracis и высокий уровень секреции сибиреязвенных гемолизинов. Активная секреция гемолизинов B.anthracis в культуральную среду начинается после первых 6 часов культивирования и достигает максимума к 24-30 часам выращивания.

2. Установлено различие в регуляции генов, кодирующих гемолизины B.anthracis: при культивировании штаммов B.anthracis в атмосфере углекислого газа происходит активация генов, ответственных за продукцию цитотоксина, вызывающего лизис эритроцитов по Р-типу, а в аэробных условиях - по а-типу.

3. Гемолизины штамма Sterne отличаются от гемолизинов штамма СТИ наличием у первых способности восстанавливать после кратковременного прогревания при высоких температурах свою гемолитическую активность, утрачиваемую в результате воздействия "умеренных" (40-60°С) температур -эффект Аррениуса.

4. Характер динамики лизиса эритроцитов под действием гемолизинов B.cereus и B.anthracis отличается наличием у последних продолжительных фаз связывания и формирования «повреждений».

5. Гемолитическая активность B.anthracis не ингибируется холестерином, не активируется дитиотрейтолом и ионами Са2+, при добавлении ЭДТА активность снижается на 40 %. Нормальные сыворотки крови животных блокируют действие (3-гемолизинов и не предохраняют эритроциты от лизиса а-гемолизинами.

6. Культуральные фильтраты B.anthracis обладают не только гемолитической, но и цитотоксической активностью в отношении перевиваемой культуры клеток почки сибирского горного козерога.

7. Сконструированы плазмиды для экспрессии рекомбинантных белков сфингомиелиназы и фосфолипазы С B.anthracis в функционально активной форме.

8. Нуклеотидным секвенированием определены последовательности гемолитических детерминант штаммов СТИ и Sterne и проведен их сравнительный анализ. Установлено, что нуклеотидные последовательности гена регулятора plcR исследуемых штаммов идентичны.

9. Получены иммуноглобулины против рекомбинантной сфингомиелиназы и фосфолипазы С B.anthracis, с помощью которых показано, что в процессе разрушения эритроцитов экзопродуктами сибиреязвенного микроба преимущественная роль принадлежит сфингомиелиназе.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

На основании проведённых исследований разработаны, утверждены и рекомендуются в практику научно-исследовательских учреждений Методические рекомендации «Получение рекомбинантных белков фосфолипазы С и сфингомиелиназы B.anthracis».

Сконструированные рекомбинантные штаммы E.coli, содержащие нуклеотидные последовательности гемолитических детерминант В. anthracis и экспрессирующие фосфолипазу С и сфингомиелиназу в функционально активной форме, целесообразно использовать при изучении роли гемолизинов в патогенезе сибиреязвенной инфекции.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Патогенность В. anthracis в основном связана с образованием двух факторов — трехкомпонентного экзотоксина и капсулы, структурные и регуляторные гены которых находятся в высокомолекулярных плазмидах рХ01 и рХ02. Однако накопилось много наблюдений, указывающих на то, что в патогенезе сибирской язвы принимают участие и другие, на сегодняшний день, плохо изученные факторы патогенности (протеазы, гемолизины и др.), кодируемые хромосомой В. anthracis (Цыганкова О.И., 1993 и др., Егорова И.Ю., Селянинов Ю.О., 2003). О роли в проявлении патогенных свойств генов хромосомной детерминации может также свидетельствовать и факт циркуляции в природе «типичных» изолятов, имеющих в своем составе обе плазмиды, но значительно различающихся по степени вирулентности.

Недостаточная изученность и противоречивость данных литературы о гемолитических свойствах сибиреязвенного микроба свидетельствуют о необходимости ее дальнейшего изучения, а возросший в последние годы интерес к изучению гемолитически активных продуктов возбудителя сибирской язвы свидетельствует о возможном пересмотре их роли в патогенезе заболевания.

В данной работе нами представлены результаты исследований по определению химической природы, изучению биохимических и биологических свойств гемолизинов B.anthracis, а также их генетической структуры.

На первом этапе исследований для нас представляло интерес изучение зависимости экспрессии а- и /?-гемолизинов от состава питательной среды, наличия свободного кислорода воздуха, углекислого газа и времени культивирования сибиреязвенных бацилл.

В зависимости от исследуемого штамма и питательной основы среды культивирования в посевах наблюдали различия в интенсивности роста. Однако проявление гемолитической активности КФ не всегда совпадало с интенсивностью роста культуры микроорганизмов.

Экспрессия (З-гемолизинов в большей мере проявлялась на средах ПГРМ, ГРМ, ГК, ПГК, СМБ, а а-гемолизинов - на средах ГК, ПГК, СМБ и МПБ. Универсальными для получения релевантных количеств гемолитически активных веществ обоих типов можно считать среды на основе гидролизатов казеина (ПГК), сердца (СМБ) и кильки (ГК), которые и использовались нами для дальнейшего изучения гемолитически активных веществ B.anthracis.

Изучение динамики накопления гемолитически активных продуктов при выращивании сибиреязвенных бацилл в жидкой питательной среде показало, что гемолизины начинают выделяться в культуральную среду в интервале между 6-18 часами после внесения взвеси спор в бульон, достигая максимума к 24-30 часам. Кривые изменения гемолитической активности КФ у изученных штаммов носили однотипный характер.

Результаты экспериментов по изучению влияния свободного кислорода воздуха и углекислого газа на экспрессию гемолизинов сибиреязвенного микроба показали, что регуляция генов B.anthracis, ответственных за синтез гемолизинов, лизирующих эритроциты по а- и Р-типу, различна. Так, углекислый газ (10%) оказывал стимулирующее действие на продукцию гемолизинов штаммом СТИ. Для штамма Sterne отмечена обратная картина: присутствие свободного кислорода воздуха индуцировало выработку гемолитически активных веществ, вызывающих деградацию эритроцитов по а-типу.

Таким образом, уровень продукции гемолизинов B.anthracis зависит от состава питательной среды, времени культивирования сибиреязвенных бацилл, наличия свободного кислорода воздуха и углекислого газа.

На следующем этапе нами было проведено изучение влияния физико-химических и биологических факторов на литическую активность экзотоксинов сибиреязвенного микроба.

При определении влияния температуры на проявление литической активности а- и /^-гемолизинов B.anthracis для всех препаратов установлена обратно пропорциональная зависимость: с повышением температуры снижается гемолитическая активность КФ. Интересным является тот факт, что при прогревании при 60°С препарата экзотоксинов штамма Sterne наблюдалась полная ингибиция гемолитической активности, которая затем восстанавливалась после кратковременного прогревания при высоких температурах. Подобный феномен (эффект Аррениуса) использовался Кульбахом и Вильямсом в качестве одной из характеристик при идентификации гемолизинов и для отличия их от тиолзависимых гемолизинов, которым это свойство не присуще.

Результаты экспериментов по сравнительному изучению динамики лизиса эритроцитов экзотоксинами культур B.cereus 96 и B.anthracis штаммов Sterne и СТИ показали, что зоны гемолиза вокруг лунок с КФ B.cereus начинали формироваться уже через 1,5-2,0 часа инкубирования, тогда как с фильтратами B.anthracis - через 24 часа. При этом максимальный размер зоны гемолиза с КФ B.anthracis штамма СТИ наблюдался через 48 часов инкубирования, штамма Sterne через 72 часа, а у B.cereus 96 через 24 часа. Данное различие, по-видимому, связано с особенностями механизмов взаимодействия этих цитолизинов с мембранами эритроцитов.

В результате исследований по изучению влияния СаСЬ, ЭДТА и ДТТ на активность гемолизинов КФ B.anthracis установлено отсутствие выраженного влияния ДТТ и двухвалентных ионов металлов на гемолитическую активность фильтратов, означающее, что сибиреязвенные гемолизины не относятся к группе SH-токспнов. Снижение активности фильтратов на 40% при добавлении ЭДТА указывает на то, что цитолитическое действие фильтратов частично обусловлено ферментативной активностью, вызывающей разрушение белковых структур оболочек чувствительных клеток с последующим их лизисом.

Ещё одной из важнейших отличительных характеристик представителей группы SH-токсинов является ингибирование их активности холестерином. Результаты экспериментов показали, что обработка КФ B.anthracis холестерином не приводила к изменению гемолитической активности экзотоксинов, присутствующих в образцах.

Таким образом, сибиреязвенные гемолизины имеют рецепторные сайты, отличающиеся от таковых для SH-токсинов. Кроме этого, отсутствие ингибирующего влияния холестерина на гемолитическую активность исследуемых экзопродуктов свидетельствует об их нетождественности антролизину, описанному Shannon J.G. в 2003 году, а также о том, что данные гемолизины не принадлежат к группе тиолактивируемых токсинов.

Одним из важных факторов патогенности возбудителей инфекционных болезней является их способность противостоять бактерицидному действию нормальной сыворотки крови макроорганизма. Установлено, что нормальные сыворотки крови животных обладали высокой блокирующей активностью в отношении р-гемолизинов и не оказывали влияния, либо в незначительной степени ингибировали (лошадь, свинья) а-гемолитическую активность. Интересным является тот факт, что мышиная сыворотка полностью ингибировала действие как а- так и р-гемолизинов. Присутствие в сыворотках специфических противосибиреязвенных антител не изменяло характера взаимодействия эритроцитов и гемолизинов.

На следующем этапе было проведено изучение цитотоксической активности сибиреязвеных культуральных фильтратов in vitro. Установлено, что КФ B.anthracis проявляют цитотоксическую активность в отношении клеток ПСГК. Цитотоксическое действие выражалось в округлении клеток, стирании межклеточных границ, очаговом отслоении клеток от стекла и дегенеративных изменениях.

При подборе наиболее эффективного способа концентрирования и очистки сибиреязвенных цитолизинов использовали методы солевого и спиртового осаждения, а также обработку КФ хлороформом и трихлоруксусной кислотой.

В результате спиртового осаждения нами был получен препарат экзопродуктов, обладающий гемолитической активностью, превышающей исходную в 4 раза. Обработка экзопродуктов хлороформом не изменяла их гемолитической активности. Применение ТХУ приводило к денатурации интересующих нас цитолизинов и потере их активности.

При выделении экзопродуктов КФ методом ступенчатого насыщения сульфатом аммония (10-80%) гемолитически активные экзопродукты осаждались при 40-80% насыщения (NH^SO^ Наибольшей активностью обладали препараты, полученные при 60% насыщении (NH^SO^ Их активность превышала исходную в 16 раз.

Дальнейшую очистку гемолизинов мы проводили с использованием ионообменной хроматографии на анионо- и катионообменных колонках (Mono Q и Mono S) и гель-фильтрации на колонке с Superose 12.

Тестирование материала фракций на наличие гемолитической и лецитиназной активностей показало, что этими видами активностей обладали макромолекулы фракции м.м. 20-40 кДа. Пик лецитиназной активности экзопродуктов штамма СТИ был незначительно смещён относительно пика гемолитической активности данного штамма в сторону низкомолекулярных продуктов.

Результаты разделения материала этих фракций методом SDS-электрофореза показали, что они содержат три полипептида с относительной молекулярной массой 31, 37 и 41 к Д.

Поскольку даже концентрирование не позволило нам получить гемолитически активные экзотоксины в препаративных количествах, дальнейшие исследования мы проводили с применением молекулярно-биологических методов.

Нуклеотидное секвенирование гена регулятора транскрипции гемолизинов plcR показало, что последовательность гена plcR штамма СТИ не отличается от последовательности гена plcR штамма Sterne.

Далее был проведён комплекс экспериментов по клонированию и получению рекомбинантных SPH и PLC штамма Sterne. Выделенные с помощью никель-аффинной хроматографии рекомбинантные белки сфингомиелиназы и фосфолипазы С B.anthracis были исследованы методом электрофореза в полиакриламидном геле. Установлено, что очищенный белок фосфолипазы С мигрировал полосой с м.м. 30-31кД, а сфингомиелиназы - 41 и 37кД (плазмидные конструкции р279 и р293, соответственно).

Показано, что рекомбинантная SPH обладает высоким уровнем гемолитической и низким уровнем лецитиназной активностей, причём данные виды активности проявляются независимо от того, в каком виде использовались белки - в виде лизата клеток или хроматографически очищенных. Наличие или отсутствие сигнальной последовательности не влияло на ферментативные свойства рекомбинантной SPH.

Рекомбинантная PLC в виде лизата клеток обладала как гемолитической, так и лецитиназной активностями. Лизат клеток Е. coli, содержащий плазмиду р292 (pic), имел более низкую гемолитическую активность по сравнению с лизатом клеток Е. coli, несущих плазмиду р280 (pic), но при этом именно из этого лизата удалось выделить очищенный белок фосфолипазы С, обладающий гемолитической активностью.

Таким образом, полученные нами рекомбинантные SPH и PLC экспрессируются клетками E.coli в активной форме и способны вызывать лизис эритроцитов и расщепление лецитина.

Дополнительно на мышах и кроликах нами были получены сыворотки к рекомбинантным сфингомиелиназе и фосфолипазе С. В иммуноблоттинге сыворотки в разведении 1:20000 специфически взаимодействовали с препаратами очищенных белков и ультразвуковых лизатов рекомбинантных клеток.

При определении влияния нормальных сывороток крови человека и различных видов животных на проявление гемолитической активности рекомбинантных белков установлено, что сыворотки всех видов животных за исключением мышиной, в разведении 1:10 незначительно, а сыворотка козы полностью ингибировали гемолитическую активность рекомбинантных PLC и SPH. Сыворотка крови мыши полностью блокировала действие как сфингомиелиназы, так и фосфолипазы в разведении 1:320, что согласуется с ранее полученными нами результатами об ингибирующей активности мышиных сывороток.

Антисфингомиелиназные иммуноглобулины, выделенные из гипериммунных сывороток кроликов, в разведении 1:10 (16 мкг/мл) ингибировали лизис эритроцитов гемолизинами штамма СТИ, а в разведении 1:100 - штамма Sterne. Нормальные кроличьи и антифосфолипазные иммуноглобулины на проявление гемолитической активности не влияли.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют об экспрессии в E.coli рекомбинантных белков B.anthracis, обладающих гемолитической и лецитиназной активностями и преимущественной роли сфингомиелиназы в процессе разрушения эритроцитов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Арасланова, Вера Алексеевна, 2009 год

1. Адо, А.Д. Вопросы общей нозологии / А.Д. Адо. М:, 1985. - 285 с.

2. Акатова, Н.С. Гемолитические и летальные свойства экзотоксина Ps. aeruginosa / Н.С. Акатова, Н.П. Туркина // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1975. - №2. - С.80-85.

3. Байда, Т.Е. Гемолизин III Bacillus cereus: обнаружение, идентификация, характеристика: автореф. дис. . канд. биол. наук / Байда Глеб Евгеньевич. Москва, 1997. - 17 с.

4. Бейлбаева, M.JI. Простой метод очистки стафилококкового а-токсина и изучение его свойств / M.JI. Бейлбаева, Езепчук Ю.В. // Молекулярная генетика, микробиология, вирусология. — 1991. №9. - С.28-30.

5. Бондаренко, В.М. «Острова» и «островки» патогенности бактерий / В.М. Бондаренко // Аграрная Россия. 2002. - № 2. - С. 33-42.

6. Бондаренко, В.М. Гемолизины энтеробактерий и их связь с вирулентностью возбудителя / В.М. Бондаренко, А.В. Голубев // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1988. - №11. - С.102-109.

7. Бургасов, П.Н. Сибиреязвенная инфекция / П.Н. Бургасов, Г.И. Рожков. -М.: Медицина, 1984. 207 с.

8. Вертиев, Ю.В. Бактериальные токсины: биологическая сущность и происхождение / Ю.В. Вертиев // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. -1996. №3. - С.43-46.

9. Гемолизин Vibrio cholerae eltor: клонирование и экспрессия генов в Escherichia coli / В.П. Власов, Е.В. Монахова, И.Е. Ушакова и др. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1992. - №7-8. - С. 22-25.

10. Груз, Е.В. Изучение и рационализация некоторых лабораторных методов индикации и идентификации В. anthracis: автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.В. Груз. Одесса, 1965. - 19 с.

11. Гущин, Г.В. Спектрофотометрическое определение гемолизинспецифической активности селезеночных клеток иммунизированных мышей / Г.В. Гущин, Е.Э. Яковлева // Иммунология. -1985,- №6. -С. 81-83.

12. Далин, М.В. Белковые токсины микробов / М.В. Далин, Н.Г. Фиш. -М.: Медицина, 1980. 224 с.

13. Дворецкий, Б.М. Феномен «растекания» эритроцитов на поверхности агара, вызываемый гемолитическим стафилококком / Б.М. Дворецкий // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1976. - №9. - С. 119-121.

14. Денисова, И. Количественный метод определения гемолитической активности бактерий / И. Денисова // Здравоохр. Башкорк. Спец. Вып. - №2. -2000.

15. Егорова, И.Ю. Фенотипические и генетические маркеры полевых изолятов B.anthracis: дис. . канд. вет. наук / Егорова Ирина Юрьевна. -Покров, 2003.- 137 с.

16. Егорова, И.Ю. «Методические рекомендации по определению гемолитической активности и её типа отдельных колониеобразующих единиц

17. B. anthracis» / И.Ю. Егорова, Ю.О. Селянинов. ГНУ ВНИИВВиМ, 2003.

18. Езепчук, Ю.В. О токсических и некоторых биохимических свойствах фильтратов B.anthracis и B.cereus / Ю.В. Езепчук, Е.Д. Бобкова, Н.К. Просветова // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1969. - №6.1. C.119-123.

19. Езепчук, Ю.В. Выделение и некоторые свойства токсина Bacillus cereus / Ю.В. Езепчук, Ф.С. Флуер // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1971. - №7. С.124-131.

20. Езепчук, Ю.В. Биомолекулярные основы патогенности бактерий / Ю.В. Езепчук. М.: Наука, 1977. - 209 с.

21. Езепчук, Ю.В. Патогенность как функция биомолекул / Ю.В. Езепчук. -М.: Медицина, 1985.-234 с.

22. Еременко, Е.И. Биологические и популяционные аспекты патогенности Bacillus anthracis: дис. . док. мед. наук / Е.И. Еременко. -Ставрополь, 1997.- 275 с.

23. Завирюха, А.И. Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы от ложносибиреязвенных бацилл / А.И. Завирюха, О.П. Степанюк // Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР. -М., 1978.-С. 130-131.

24. Закарян, JT.M. Типы гемолизинов и энтеротоксин у стафилококков, выделенных при желудочно-кишечных заболеваниях у детей / JI.M. Закарян // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1967. - №3. - С.56-57.

25. Коротич, А.С. Сибирская язва / А.С. Коротич, Л.И. Погребняк. -Киев.: Урожай, 1976. С.23, 29.

26. Лабораторная диагностика сибирской язвы у животных и людей, обнаружение возбудителя в сырье животного происхождения и объектах внешней среды / Методические указания. — М.: Агропромиздат, 1989. 32 с.

27. Ладаний, М.М. Получение очищенного стафилококкового энтеротоксина А / М.М. Ладаний // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1973. - №11. С.37-40.

28. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980. -293 с.

29. Литвин, В.Ю. Факторы патогенности бактерий: функции в окружающей среде / В.Ю. Литвин, В.Н. Пушкарева // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1994. - Приложение. - С. 83-87.

30. Лобзин, Ю.В. Сибирская язва / Ю.В. Лобзин, В.М. Волжанин, С.М. Захаренко // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. — 2002.- Т.4, №2. С. 104-127.

31. Мельников, Н.Н. Ферменты патогенности и токсины бактерий / Н.Н. Мельников, В.Н. Мельников, М.Г. Гримранов. М.: Медицина, 1969. - 248 с.

32. Меньшикова, Е.А. Гемолитическая активность токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов различных серогрупп: дис. . канд. биол. наук: 03.00.01 / Меньшикова Елена Аркадьевна. Ростов на Дону, 2003.- 133 с.

33. Микробиологическая диагностика сибирской язвы / Л.И. Маринин, Г.Г. Онищенко, А.В. Степанов и др. -М., 1999. С.104-105.

34. Микшис, Н.И. Корреляция вирулентности Bacillus anthracis с экспрессией признаков, кодируемых хромосомными генами / Н.И. Микшис, С.А. Еремин, М.Ф. Болотникова // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1999.-№4 - С. 25-29.

35. Михин, Н.А. Сибирская язва человека и сельскохозяйственных животных / Н.А. Михин. М.: Медгиз, 1942. - 98 с.

36. Нестерова, Г.Н. О гемолитической активности бактерий рода Proteus / Г.Н. Нестерова, Фролова С.М. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1969. - №8. - С.65-69.

37. Очистка и характеристика листериолизина О Listeria monocytogenes / Л.А. Карпова, Ю.Ф. Белый, И.С. Тартаковский, С.В. Прозоровский // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1994. - №4. - С. 3-7.

38. Очистка и некоторые свойства цитолизина Vibrio cholerae поп Ol / А.О. Цитцер, Ю.В. Езепчук, Н.О. Накисбеков и др. // Мол. генетика, микробиол. и вирусол. - 1990. - №9. - С.14-18.

39. Палкина, Н.А. Гетерогенность а-гемолизина Е. coli и антигемолитические свойства иммунной сыворотки / Н.А. Палкина, В.М. Кушнарев // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1975. - №7. -С.121-122.

40. Палкина, Н.А. Некоторые свойства а-гемолизина, продуцируемого гемолитическим штаммом Е. coli / Н.А. Палкина, В.М. Кушнарев, С .Я.

41. Мельников // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1975. - №5. - С.70-73.

42. Пархоменко, JI.B. О характеристике гемолизинов Proteus mirabilis / JI.В. Пархоменко, И.Г. Лукач, Д.Е. Дыховичная // Микробиологический журнал. 1986. - Т. 48, №6. - С.24-29.

43. Пат. № 2238316 от 20.10.04 г. Способ определения гемолитической активности и ее типа у В. anthracis / Ю.О. Селянинов, И.Ю. Егорова.

44. Руднев, И. А. Тиолзависимая гемолитическая активность Klebs. рпеит. и ее роль в патогенности: автореф. дис. . канд. биол. наук / Руднев Игорь Алексеевич. Москва, 1995. - 19 с.

45. Русакова, Е.В. Дифференциация а-5 гемолизинов стафилококка в опытах с тонизированными эритроцитами / Е.В. Русакова // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1967. - №7. - С. 101-104.

46. Селянинов, Ю.О. Новый способ определения гемолитической активности штаммов В.anthracis / Ю.О. Селянинов, И.Ю. Егорова // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2004. - №5. - С.42-45.

47. Сибирская язва / Под ред. Н.Н. Гинсбурга. М.Медицина, 1975. -158 с.

48. Сибирская язва / Под ред. С.Г. Колесова. -М., 1976. 228 с.

49. Супотницкий, М.В. Микроорганизмы, токсины и эпидемии / М.В. Супотницкий. М.: Вузовская книга, 2000. - 376 с.

50. Тафелыитейн, Э.Е. Гемолитические свойства холерных вибрионов / Э.Е. Тафелыптейн, Н.С. Блинова // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1979. - №10. - С. 91-93.

51. Термостабильный гемолизин Pseudomonas pseudomallei / И.И. Денисов, Н.И. Нарбутович, В.И. Илюхин, В.И. Каплиев // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол. 1996. - №1.- С.16-19.

52. Тимаков, В.Д. Микробиология / В.Д. Тимаков, B.C. Левашев, Л.Б. Борисов. -М: Медицина, 1983. С.324-332.

53. Ткаченко, В.В. Методика учета реакции гемолиза с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК М / В.В. Ткаченко // Доклады иркутского противочумного института. - Улан-Уде, 1961.-Вып. 1.-С. 63-64.

54. Ткаченко, В.В. О химической природе чумного гемолизина: дис. . канд. мед. наук / В.В. Ткаченко. Ростов, 1964. - 115 с.

55. Anaerobic induction of Bacillus anthracis hemolytic activity / V.I. Klichko, J. Miller, A. Vu, S.G. Popov, K. Alibek // Biochem. Biophys. Res.Commun. 2003. - Vol. 303. - P. 855-862.

56. Arbuthnott, J.P. Physical states of staphylococcal a-toxin / J.P. Arbuthnott, J.H. Free, A.W. Bernheimer // J. Bacterid. 1967. - Vol. 94. -P.l 170-1177.

57. A thiol-activated hemolysin in gram-negative bactetia / I. Albesa, L.I. Barberis, M.C. Pajaro et al. // Canad. J. Microbiol.- 1985.- Vol 31.-P.297-300.

58. Alouf, J.E. The comprehensive sourcebook of bacterial protein toxins / J.E. Alouf, M.R. Popoff (eds). Third edition. - Elsevier Ltd, Oxford, UK., 2006. -1047 p.

59. Association of the encapsulation of Bacillus anthracis with a 60 megadalton plasmid / I. Uchida, T. Sekizaki, K. Hashimoto, N. Teracado // J. Gen. Microbiol. 1985. - Vol.131, № 2. - P.363-367.

60. Baida, G.E. Cloning and primary structure of a new hemolysin gene from Bacillus cereus / G.E. Baida, N.P. Kuzmin // Biochim. Biophys. Acta. 1995. -Vol. 1264.-P. 151-154.

61. Baida, G.E. Mechanism of action of hemolysin III from Bacillus cereus / G.E. Baida, N.P. Kuzmin // Biochim Biophys. Acta. 1996. - Vol. 1284. - P. 122124.

62. Baida, G.E. Hemolysin III from Bacillus cereus / G.E. Baida, I.A. Sidorov, N.P. Kuzmin // Abstracts of the First International Workshop on The Molecular Biology of B.cereus, B.anthracis and B.thuringiensis. May 23-25, Oslo, 1997. - P. 48.

63. Binary bacterial toxins: biochemistry, biology, and applications of common Clostridium and Bacillus proteins / H. Barth, K. Aktories, M.R. Popoff, B.G. Stiles // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2004. - Vol.68. - P.373-402.

64. Beall, F.A. Rapid lethal effect in rats of a third component found upon fractionating the toxin of Bacillus anthracis / F.A. Beall, M.J. Taylor, C.B. Thorne // J. Bacteriol. 1962. - Vol. 83, № 6. - P.1274-1280.

65. Beecher, D.J. Tripartite haemolysin BL: isolation and characterization of two distinct homologous sets of components from a single Bacillus cereus isolate / D.J. Beecher, A.C. Wong//Microbiology. 2000. - Vol. 146. - P.1371-1380.

66. Beecher, D.J. A novel bicomponent hemolysin from Bacillus cereus / D.J. Beecher, J.D. Macmillan // Infect.Immun. 1990. - Vol. 58. - P.2220-2227.

67. Beecher, D.J. Tripartite hemolysin BL from Bacillus cereus: hemolytic analysis of component interactions and a model for its characteristic paradoxical

68. Ткаченко, В.В. Сравнительное изучение гемолитических свойств некоторых микробов / В.В. Ткаченко // Известия Иркутского ПЧИ. 1963. -Т.25. - С.135.

69. Трансдукционная и коньюгационная передача плазмиды рХ02 В. anthracis / А.С. Степанов, О.Б. Пузанова, С.В. Гаврилов и др. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1989. - № 12. - С.39-43.

70. Цыганкова, О.И. Гемолитическая и протеолитическая активность сибиреязвенного микроба: дис. . канд. мед. наук / Цыганкова Ольга Ивановна. Саратов, 1993. - 179 с.

71. Цыганкова, О.И. Взаимосвязь гемолитических и протеолитических свойств возбудителя сибирской язвы / О.И. Цыганкова // Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций: тез. докладов науч. конф., Ставрополь, 1991. С.129-130.

72. Шевченко, О.В. Протеолитическая активность возбудителя сибирской язвы: дис. . канд. мед. наук / О.В. Шевченко. — Саратов, 1999. -99 с.

73. Acceleration of epithelial cell syndecan-1 shedding by anthrax hemolytic virulence factors / T.G. Popova, B. Mills, C. Bradburne et al. // DMS Miscrobiol. -2006.-Vol. 6, №1. P. 8.

74. Aktories, K. Reviews of physiology, biochemistry and pharmacology / K. Aktories, I. Just (eds.). Vol. 152. - Springer, Berlin, Germany, 2004.

75. Albesa, I. A new oxygen-labile hemolysin in Klebsiella pneumoniae / I. Albesa, L.I. Barberis, M.C. Pajaro // Rev. Argent Microbiol. 1985. - Vol. 17, №1.- P. 33-39.zone fenomenon / D.J. Beecher, A.C. Wong // J.Biol.Chem. 1997. - Vol. 272. -P. 233-239.

76. Beecher, D.J. Improved purification and characterization of hemolysin BL, a hemolytic dermonecrotic vascular permeability factor from Bacillus cereus / DJ. Beecher, A.C. Wong // Infect. Immun. 1994. - Vol. 62. - P. 980-986.

77. Beecher, D.J. Identification of hemolysin BL-producing Bacillus cereus isolated by a discontinuous hemolytic pattern in blood agar / D.J. Beecher, A.C. Wong// Appl. Environ. Microbiol. 1994. - Vol. 60. - P. 1646-1651.

78. Bernheimer, A.W. Cereolysin: production, purification and partial characterization / A.W. Bernheimer, P. Grushoff // J. Gen. Microbiol. 1967. -Vol.46. - P.143-150.

79. Bernheimer, A.W. Lytic effects of staphylococcal alpha-toxin and delta-hemolysin / A.W. Bernheimer, L.S. Avigad, P. Grushoff // J. Bacteriol. 1968. -Vol. 96, №2. -P. 487-491.

80. Bernheimer, A.W. Streptolysin O: Activation by Thiols / A.W. Bernheimer, L.S. Avigad // Infect. Immun. 1970. - Vol. 1, №5. - P. 509-510.

81. Bernheimer, A.W. Nature and properties of a cytolytic agent produced by Bacillus subtilis / A.W. Bernheimer, L.S. Avigad // J. Gen. Microbiol. 1970. -Vol. 61, №3.-P. 361-369.

82. Bhakdi, S. Mechanism of membrane damage by streptolysin О / S. Bhakdi, J. Tranum-Jensen, A. Sziegoleit // Infect. Immun. 1985. - Vol. 47. - P. 52-60.

83. Binding and uptace of anthrax toxin components and fusion proteins by eucaryotic cells / S.H. Leppla, K.R. Klimpel, V.M. Gordon et al. // Toxicon. -1996.-Vol. 34, № 3. P.296.

84. Biological properties of staphylococcal alpha- and beta-hemolysins / K. Kwarecki, S. Szmigielski, J. Jelijaszewicz, T. Wadstrom, R. Mollby // Contrib. Microbiol. Immunol. 1973. - Vol. 1. - P. 314-327.

85. Boehm, D.F. Domains of Escherichia coli hemolysin (Hly A) involved in binding of calcium and erythrocyte membranes / D.F. Boehm, R.A. Welch, I.S. Snyder//Infect. Immun. 1990. - Vol. 58. - P. 1959-1964.

86. Borderon, E. Effect of hemolysin from Pseudomonas aeruginosa on cell cultures / E. Borderon, J.C. Borderon, P. Maupas // C.R. Seances Soc. Biol. Fil. -1975.-Vol. 169, №1.-P. 189-193.

87. Bowman, M.N. Effects of phospholipase С on human erythrocytes / M.N. Bowman, A.C. Ottolenghi, C.E. Mengel // J. Membr. Biol. 1971. - Vol. 4. - P. 156-164.

88. Bradford, M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / M.M. Bradford // Anal. Biochem. 1976. - Vol. 72. - P. 248-254.

89. Bragg, T.S. Nucleotide sequence and analysis of the lethal factor gene (lef) from Bacillus anthracis / T.S. Bragg, D.L. Robertson // Gene. 1989. - Vol. 81, № 1. - P.45-54.

90. Brillard, J. Comparison of cytotoxin cytK promoters from Bacillus cereus strain ATCC 14579 and from a B.cereus food-poisoning strain / J. Brillard, D. Lereclus //Microbiology. 2004. - Vol. 150. - P. 2699-2705.

91. Calcium is required for the expression of anthrax lethal toxin activity in the macrophagelike cell line J774A.1 / R. Bhatnagar, J. Singh, S.H. Leppla, A.M. Friedlander // Infec. Immun. 1989. - Vol. 57, № 7. - P.2107-2114.

92. Carbon source regulation of virulence gene expression in Listeria monocytogenes / A.A. Milenbachs, D.P. Brown, M. Moors, P. Youngman // Mol. Microbiol. 1997.-Vol. 23.-P. 1075-1085.

93. Characterization of macrophage sensitivity and resistanse to anthrax lethal toxin / A. Friedlander, R. Bhatnagar, S.H. Leppla et al. // Infection Immunity. 1993. - Vol. 61, №1. - P.245-252.

94. Characterzation of anthrolysin О Bacillus anthracis cholesterol-dependent cytolysin / J.G. Shannon, C.L. Ross, R.F. Koehler, R.F. Rest // Infect. Immun.-2003.-Vol. 71.-P. 3183-3189.

95. Chorvath, D. Nephrotoxic and pneumotoxic antibodies and their acute action on lunqs I. Preparation, isolation and characterizationof antibodies / D. Chorvath, M. Brozman // Exp. Pathol (Jena). 1974. - Vol. 9, №4. - P. 199-207.

96. Cloning and sequensing of the gene encoding the phosphatidylcholine-preferring phospholipase С of Bacillus cereus / T. Johansen, T. Holm, P.H. Guddal, K. Sletten, F.B. Haugli, C. Little // Gene. 1988. - Vol. 65. - P. 293-304.

97. Comparison of bacterial cardiotoxins: thermostable direct hemolysin from Vibrio parahaemolyticus, streptolysin О and hemolysin from Listeria monocytogenes / Y. Takeda, T. Takeda, T. Honda, T. Miwatani // Biken J. 1978. -Vol. 21, №1.-P. 1-8.

98. Coolbaugh, J.C. Production and characterization of two hemolysins of Bacillus cereus / J.C. Coolbaugh, R.P. Williams // Can.J.Microbiol. 1978. - Vol. 24,- P.1289-1295.

99. Cooper, L.Z. Heat stability and species range of purified staphylococcal a-toxin / L.Z. Cooper, M.A. Madoff, L. Weinstein // J. Bacteriol. 1966. - Vol. 91.-P. 1686-1692.

100. Cooper, L.Z. Hemolysis of rabbit erythrocytes by purified staphylococcal alpha-toxin. II. Effects of inhibitors on the hemolytic sequence / L.Z. Cooper, M.A. Madoff, L. Weinstein // J. Bacteriol. 1964. - Vol. 87. - P. 136-144.

101. Costlow, R.D. Lecithinase from Bacillus anthracis / R.D. Costlow // J. Bact. 1958. - Vol. 76, №3. - P. 317-325.

102. Cowell, J.L. Purification of cereolysin and the electrophoretic separation of the active (reduced) and inactive (oxidized) forms of the purified toxin / J.L. Cowell, P.S. Grushoff-Kosyk, A.W. Bernheimer // Infect. Immun. 1976. - Vol. 14. p. 144-154.

103. Cowell, J.L. Antigenic relationships among thiol-activated cytolysins / J.L. Cowell, A.W. Bernheimer // Infect. Immun. 1977. - Vol. 16, №1. - P. 397399.

104. Craescu, C.T. Characterization of a synthetic calmodulin-binding peptide derived from Bacillus anthracis adenylate-cyclase / C.T. Craescu, O. Barzu // J. of boil. chem. 1993. - Vol. 268, № 3. - P. 1695-1701.

105. Cytotoxiciti of filtrates of haemolytic Escherichia coli / U.C. Chaturvedi, A. Mathur, A.M. Khan, R.M. Mehrotra // J. Med. Microbiol. 1969. - Vol. 2, №3. -P. 211-218.

106. Demonstration of a Capsule plasmid in Bacillus anthracis / B.D. Green, L. Battisti, T.M. Koehler et al. // Infect. Immun. 1985. - Vol. 49, № 2. - P. 291297.

107. Demonstration of the cardiotoxicity of the thermostable direct hemolysin (lethal toxin) produced by Vibrio parahaemolyticus / T. Honda, K. Goshima, Y. Takeda, Y. Sugino, T. Miwatani // Infect. Immun. 1976. - Vol. 13, №1. - P. 163-171.

108. Dolly, J.O. The structure and mode of action of different botulinum toxins / J.O. Dolly, K.R. Aoki // Eur. J. Neurol. 2006. - Vol. 13, № 4. - P. 1-9.

109. Duncan, C. A paracrystalline inclusion formed during sporulation of enterotoxin-producing strain of Clostridium perfringens type A / C. Duncan, G. King, W. Frieben // J. Bact. 1973. - Vol. 114. - P.845-859.

110. Effect of lectins on the hemolysis of rabbit erythrocytes by staphylococcal alpha-toxin / I. Kato, K. Sakoda, M. Saito, Y. Suzuki // Microbiol. Immunol. 1977. - Vol. 21, №9. - P. 517-524.

111. Elek, S.D. The nature of discrepancies between haemolysins in culture filtrates and plate haemolysin patterns of staphylococci / S.D. Elek, E. Levy // J. Pathol. Bacteriol. 1954. - Vol. 68. - P. 31-40.

112. Evidence for Plasmid- Mediated Toxin Production in Bacillus anthracis / P. Mikesell, B.E. Ivins, J.D. Ristroph, T.M. Dreier // Infect. Immun. 1983. - Vol. 39. - P.371-376.

113. Finlay, B.B. Common themes in microbial pathogenicity / B.B. Finlay, S. Falkow//Microbiol. Rev. 1989. - Vol. 53. - P. 210-230.

114. Fitzgerald, D. Essential role of calcium in cellular internalization of Pseudomonas toxin / D. Fitzgerald, R.E. Morris, C.B. Saelinger // Infect. Immunol. 1982.-Vol.35.-P. 715-720.

115. Fossum, K. The heat sensitivity of Bacillus cereus hemolysin / K. Fossum//Acta Path. Microbiol. Scan. 1964. - Vol. 60. - P. 523-527.

116. Fossum, K. Separation of hemolysin and egg yolk turbidity factor in cell-free extracts of Bacillus cereus / K. Fossum, M.N. Bowman // Acta Paph. Microbiol. Scand. 1963. - Vol. 59. - P. 400-406.

117. Genetic and functional analysis of the cytK family of genes in Bacillus cereus / A. Fagerlund, O. Ween, T. Lund, S.P. Hardy, P.E. Granum // Microbiology. 2004. - Vol. 150. - P. 2689-2697.

118. Geoffrey, C., Gaillard J.L., Alouf J.E., Berche P. // Ibid. 1986. - Vol. 52. -P. 50-55.

119. Gill, D.M. Studies on transferase II using diphtheria toxin / D.M. Gill, A.M. Pappenheimer, J.B. Baseman // Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. -1969.-Vol. 34.-P. 595-602.

120. Ginsburg, I. Oxygen-stable hemolysins of group a streptococci. 3.The relationship of the cell-bound homolysin to streptolysin S / I. Ginsburg, Z. Bentwich, T.N. Harris //J. Exp. Med. 1965. - Vol. 121, №1. - P. 633-645.

121. Ginsburg, I. Oxygen-stable hemolysins of group a streptococci. IV. Studies on the mechanism of lysis by cell-bound hemolysin of red blood cells and ehrlich ascites tumor cells / I. Ginsburg, T.N. Harris // J. Exp. Med. 1965. -Vol. 121, №1.-P. 647-656.

122. Haemolytic activity and action on the surface tension of aqueous solution of synthetic melittins and their derivatives / E. Schroder, K. Lubke, M. Lehmann, I. Beetz // Experientia. 1971. - Vol. 27, №7. - P. 764-765.

123. Haemolytic activity of Klebsiella pneumoniae on rabbit erythrocytes / I. Albesa, L.I. Barberis, M.C. Pajaro, A.J. Eraso // Rev. Latinoam. Microbiol. -1985. Vol. 27, №2. - P. 83-87.

124. Hardy, S.P. CytK toxin of Bacillus cereus forms pores in planar lipid bilayers and is cytotoxic to intestinal epithelia / S.P. Hardy, T. Lund; P.E. Granum //FEMS Microbiol. Lett. 2001.- Vol. 197.- P. 47-51.

125. Hemolysin of Propionibacterium avidum / S. Fujimura, H.L. Ко, G. Pulverer, J. Jeljaszewicz // Zentralbl. Bakteriol. Mikrobiol. Hyg. A. 1982. - Vol. 252, №1.-P. 108-115.

126. Honjo, T. Diphtheria toxin-dependent adenosine diphosphate ribosylation of aminoacyl transferase II and inhibition of protein synthesis / T. Honjo, Y. Nishizuka, O. Hayaishi // J. Biol. Chem. 1968. - Jun 25. - Vol. 243, №12.-P. 3553-3555.

127. Identity of hemolysins produced by Bacillus thuringiensis and Bacillus cereus / T. Honda, A. Shiba, S. Seo, J. Yamamoto, J. Matsuyama, T. Miwatani // FEMS Microbiol. Lett. 1991. - Vol. 79. - P. 205-210.

128. Inhibition by gangliosides of hemolysis induced by streptolysin О and Listeria monocytogenes hemolysin proceedings. / Y. Takeda, T. Takeda, T. Honda, T. Miwata // Jpn. J. Med. Sci. Biol. 1978. - Vol. 31, №2. - P. 198-200.

129. Interaction of thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus with human erythrocytes / J. Sakurai, M.A. Bahavar, Y. Jinguji, T. Miwatani // Biken J. 1975. - Vol. 18, №4.-P. 187-192.

130. In vivo studies with two phospholipase С fractions from Pseudomonas aeruginosa / R.S. Berk, D. Brown, I. Coutinho, D. Meyers // Infect Immun. -1987. -Vol. 55, №7,- P. 1728-1730.

131. Isolation and some properties of an enterotoxin produced by Bacillus cereus / N.E. Thompson, M.J. Ketterhagen, M.S. Bergdoll, E.J. Schantz // Infect. Immun. -1984. Vol. 43. - P.887-894.

132. Jank, T. Structure and mode of action of clostridial glucosylating toxins: the ABCD model / T. Jank, K. Aktories // Trends Microbiol. 2008. - Vol. 16. -P. 222-229.

133. Jenkins, E.M. Purification of the soluble hemolysins of Listeria monocytogenes / E.M. Jenkins, Njoku-Obian, E.W. Adams // J. Bacteriol. 1964. -Vol. 88.-P. 418-424.

134. Kalsow, С. M. Comparison of hemolysin, hemolysin-destructive factor and hemodigestive enzyme production by strains of Vibrio cholerae and Vibrio cholerae El Tor / С. M. Kalsow, F.S. Newman // Tex. Rep. Biol. Med. 1968. -Vol. 26, №4.-P. 507-515.

135. Kapral, F.A. Inhibition of Staphylococcus aureus delta hemolysin by phospholipids / F.A. Kapral // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1972. - Vol. 141, №2. -P. 519-521.

136. Krueger, K.M. The family of bacterial ADP-ribosylating exotoxins / K.M. Krueger, J.T. Barbieri // Clin. Microbiol. Rev. 1995. - Vol. 8. - P. 34-47.

137. Krug, E.L. Phospholipase С from Clostridium perfringens\ preparation and characterisation of homogenous enzyme / E.L. Krug, C. Kent // Arch. Biochem. Biophys. 1984.- Vol.231. - P. 400-410.

138. Ladant, D. Bordetella pertussis adenylate cyclase: a toxin with multiple talents / D. Ladant, A. Ullmann // Trends Microbiol. 1999. - Vol. 7. - P. 172176.

139. Laemmli, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. 1970. - Vol. 227. - P. 680— 685.

140. Lantz, M.S. Are bacterial proteases important virulence factors /M.S. Lantz // J. Periodont. Res. 1997. - Vol. 32. - P. 126-132.

141. Leppla, S.H. Agar plate methods for screening B. anthracis for mutants / S.H. Leppla //Bacteriology Division. 1988. - Vol. 301. - P. 663-677.

142. Lethal effects and cardiovascular effects of purified a and 0 toxins / D.L. Stevens, B.E. Troyer, D.T. Merrick, J.E. Mitten, R.D. Olson // J. Infect. Dis. -1988.-Vol. 157. P. 272-279.

143. Light and electron microscopic study of the livers of pregnant mice infected with Listeria monocytogenes / I.H. Siddique, B.E. McKenzie, W.J. Sapp, P. Rich // Am. J. Vet. Res. 1978. - Vol. 39, №5. - P. 887-892.

144. Lund, T. A new cytotoxin from Bacillus cereus that may cause necrotic enteritis / T. Lund, M.L. De Buyser, P.E. Granum // Molecular Microbiology. -2000.- Vol.38. P. 254-261.

145. Marcus, Z. Oxygen-stable hemolysins of group A streptococci. V. Effect on rat heart and kidney cells grown in tissue culture / Z. Marcus, A.M. Davies, I. Ginsburg // Exp. Mol. Pathol. 1966. - Vol. 5, №2. - P. 93-107.

146. Masure, H.R. Mechanisms of bacterial pathogenicity that involve production of calmodulin sensitive adenilate cyclases / H.R. Masure, R.L. Shattuck, D.K. Storm //Microbiol. Rev. 1987. - Vol. 51, №1. - P. 60-65.

147. Mattoo, S. Molecular pathogenesis, epidemiology, and clinical manifestations of respiratory infections due to Bordetella pertussis and other Bordetella subspecies / S. Mattoo, J.D. Cherry // Clin. Microbiol. Rev. 2005. -Vol. 18.-P. 326-382.

148. McDonel, J.L. The role of toxins in bacterial pathogenesis / J.L. McDonel, F. Dorner, J. Drews // Pharmacology of Bacterial Toxins. Dorner F. and Drews J. (eds.). - Pergamon Press, Oxford., 1986. - P. 1 - 4.

149. Miller, M.M. Neutralization of Staphylococcus aureus exfoliatin by antibody / M.M. Miller, F.A. Kapral // Infect. Immun. 1972. - Vol. 6, №4. - P. 561-563.

150. Mitsui, K. Clostridium perfringens exotoxins I. Purification and properties of the a-toxin / K. Mitsui, N. Mitsui, J. Hase // Jpn. J.Exp. Med. 1973. - V.43. - P. 65-80.

151. Miwatani, K. Clostridium perfringens exotoxins. Purification and properties of the a-toxin / K. Miwatani, N. Mitsui, J. Hase // Jpn. J. Exp. Med. -1973.- Vol.43. P.65-80.

152. Miyake, M. Purification and characterization of Vibrio metschnikovii cytolysin / M. Miyake, T. Honda, T. Miwatani // Infect Immun. 1988. - Vol. 56, №4.-P. 954-960.

153. Molecular alternation of the 140-megadalton plasmid associated with loss of virulence and congo red binding activity in Shigella flexneri / Ch. Sasakawa, K. Kamata, T. Sakai et al. // Infect. Immun. 1986. - Vol. 51, №2. - P. 470-475.

154. Mosser, E.M. The Bacillus anthracis cholesterol-dependent cytolysin, Anthrolysin O, kills human neutrophils, monocytes and macrophages / E.M. Mosser, R. F. Rest // BMC Microbiology. 2006. - Vol. 6. - P. 56.

155. Nakagawa, S. Bacteriocin and hemolysin from Streptococcus faecium / S. Nakagawa, Y. Matsuo // Antimicrob Agents Chemother. -1981.- Vol. 20, №4. -P. 542-544.

156. Nesterenko, M.V. A simple modification of Blum's silver stain method allows for 30 minute detection of proteins in polyacrylamide gels / M.V. Nesterenko, M. Tilley, S J. Upton // Biochem. Biophys. Meth. 1994. - Vol. 28, №3. - P. 239—242.

157. Obernesser, H.J. Extracellular toxins of Pseudomonas aeruginosa. I. Purification and characterization of two exoproteases / H.J. Obernesser, G. Doring, K. Botzenhart // Zentralbl Bakteriol A. 1981. - Vol. 249, №1. - P. 76-88.

158. O'Brien, A.D. Shiga and Shiga-like toxins / A.D. O'Brien, R.K. Holmes //Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1987. - Vol. 51. - P. 206-220.

159. Ohta, K. Trace metal analysis of rocks by flameless atomicabsorption spectrometry with a metal micro-tube atomizer / K. Ohta, M. Suzuki // Talanta. -1975. Vol. 22, №4-5. - P. 465-469.

160. Park, S.F. Expression of listeriolysin and phosphatidyl-inositol specific phospholipase С is repressed by the plant-derived molecule cellobiose in Listeria monocytogenes / S.F. Park, R.G. Kroll // Mol. Microbiol. 1993. - Vol. 8. - P. 653-661.

161. Pathogenicity islands of virulent bacteria: structure, function and impact on microbial evolution / J. Hacker, G. Blum-Oehler, I. Muhldorfer, H. Tschape // Mol. Microbiol. 1997. - Vol. 23, № 6. - P. 1089-1097.

162. Paton, J.C. Pathogenesis and diagnosis of Shiga toxin-producing Escherichia coli infections / J.C. Paton, A.W. Paton // Clin. Microbiol. Rev. -1998.-Vol. 11.-P. 450-479.

163. Phosphatidylcholine-Specific Phospholipase С and Sphingomyelinase Activities in Bacteria of the Bacillus cereus Group / A.P. Pomerantsev, K.V. Kalnin, M. Osorio, S. Leppla // Infect. Immun. 2003. - Vol. 71, №11. - P. 65916606.

164. Phosphatidylinositol-Specific Phospholipase С of Bacillus anthracis Down-Modulates the Immune Response / L. Zenewicz, Z. Wei, H. Goldfine, H. Shen// J. Immunol. -2005. -Vol. 174, №12. P. 8011-8016.

165. Picard, B. Effect of sodium ribonucleate on the growth and the hemolytic activity of Treponema hyodysenteriae / B. Picard, L. Massicotte, S.A. Saheb // Experientia. 1979. - Vol. 35, №4. - P. 484-486.

166. PlcR is a pleiotropic regulator of extracellular virulence factor gene expression in Bacillus thuringiensis / H. Agaisse, M. Gominet, O.A. Okstad, A.B. Kolsto, D. Lereclus // Mol. Microbiol. 1999. - Vol. 32. - P. 1043-1053.

167. Proceeding: Morphological changes of FL cells induced by thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus / J. Sakurai, T. Honda, Y. Jinguji, M. Arita, T. Miwatani // Jpn. J. Med. Sci. Biol. 1975. - Vol. 28, №5-6. - P. 334-337.

168. Purification and properties of in vitro-produced anthrax toxin components / D. Fish, B. Mahlandt, J. Dobbs, R. Lincoln // J. Bacteriol. 1968. -Vol.95, №3.-P. 907-918.

169. Restriction map of a capsule plasmid of Bacillus anthracis /1. Uchida, K. Hashimoto, S.-I. Makino et al. //Plasmid. 1987. - Vol. 18. - P. 178-181.

170. Role of macrophage oxidative burst in the action of anthrax lethal toxin / P.C. Hanna, B.A. Kruskal, R.A.B. Ezekowitz et al. // Mol. Med. 1994. - Vol. 1, № 3. - P. 7-18.

171. Sambrook, J. Molecular cloning: a laboratory manual / J. Sambrook, E. Fritsch, T. Maniatis. Cold Spring Harbor Lab. Press, New York, 1989.

172. Sandhu, T.S. Production and characterization of Moraxella bovis hemolysin / T.S. Sandhu, F.H. White // Am. J. Vet Res. 1977. - Vol. 38, №6. -P. 883-885.

173. Schirmer, J. Large clostridial cytotoxins: cellular biology of Rho/Ras-glucosylating toxins / J. Schirmer, K. Aktories // Biochim. Biophys. Acta. 2004. -Vol. 1673.-P. 66-74.

174. Short, E.C. Properties of the Hemolytic Activities of Escherichia coli / E.C. Short, H.J. Kurtz // Infect. Immun. 1971. - Vol. 3, №5. - P. 678-687.

175. Skin necrotizing property of Pseudomonas aeruginosa exotoxin / K. Takeshi, J.Y. Homma, I. Kato, H. Saito // Jpn. J. Exp. Med. 1977. - Vol. 47, №4. -P. 323-325.

176. Spangler, B.D. Structure and function of cholera toxin and the related Escherichia coli heat-labile enterotoxin / B.D. Spangler // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1992. - Vol. 56. - P. 622-647.

177. Spano, S. A novel pathway for exotoxin delivery by an intracellular pathogen / S. Spano, J.E. Galan // Curr. Opin. Microbiol. 2008. - Vol. 11. - P. 15-20.

178. Soda, S. Production and properties of theta-toxin of Clostridium perfringens with special reference to lethal activity / S. Soda, A. Ito, A. Yamamoto // Jpn. J. Med. Sci. Biol. 1976. - Vol. 26, №6. - P. 335-349.

179. Some properties of staphylococcal alpha-toxoid / A.W. Bernheimer, J.H. Freer, I. Lominski, G. Sessa // J. Bacteriol. 1968. - Vol. 96, №4. - P. 1429-1430.

180. Souckova, A. Inhibition of the hemolytic action of a and |3 lysins of Staphylococcus pyogenes by Corynebacterium hemolyticum, C.ovis and C. ulcerans / A. Souckova, A. Soucek // Toxicon. 1972. - Vol.10. - P. 501-509.

181. Stanley, J. L. The three factors of anthrax toxin: their immunogenicity and lack of demonstrable enzymic activity / J. L. Stanley, H. Smith // J. gen. Microbiol. 1963. - Vol. 31. - P. 329-337.

182. Takahashi, T. Phospholipase С from Clostridium perfringens / T. Takahashi, T. Sugahara, A. Ohsaka // Methods Enzymol. 1981. - Vol. 71. - P. 710-725.

183. Takeda, Y. Effect of zinc ion on the hemolytic activity of thermostable direct hemolysin from Vibrio parahaemolyticus, streptolysin O, and Triton X-100 / Y. Takeda, Y. Ogiso, T. Miwatani // Infect. Immun. 1977. - Vol. 17, №2. - P. 239-243.

184. Takeuchi, S. Purification and some properties of hemolysin produced by Corynebacterium pyogenes / S. Takeuchi, R. Azuma, T. Suto // Nippon Juigaku Zasshi.- 1979.-Vol. 41, №5.-P. 511-516.

185. Titball, R.W. Bacterial Phospholipases С / R.W. Titball // Microbiological Reviews. 1993. - June. - P. 347-366.

186. Tomita, M. Sphingomyelinase of Bacillus cereus as a bacterial hemolysin / M. Tomita, I.R. Taguchi, H. Ikezava // J. Toxicol. Toxin Rev. 1991. -Vol. 10. - P.169-207.

187. Tetanus and botulism neurotoxins: a novel group of zinc-endopeptidases / F. Tonello, S. Morante, O. Rossetto et al. // Adv. Exp. Med. Biol. 1996. - Vol. 389.-P. 251-260.

188. Tetanus and botulinum neurotoxins: turning bad guys into good by research. / O. Rossetto, M. Seveso, P. Caccin et al. // Toxicon. 2001. - Vol. 39. -P. 27-41.

189. The Yersinia pseudotuberculosis cytotoxic necrotizing factor (CNFY) selectively activates RhoA / C. Hoffmann, M. Pop, J. Leemhuis et al. // J. Biol. Chem.- 2004. Vol. 279. - P. 16026-16032.

190. Thorsell, W. Comparison of the haemolytic properties of Bacillus cereus and Bacillus anthracis / W. Thorsell, B.K. Nordberg // Acta vet. scand. 1961. -Vol. 2, № l.-P. 15-21.

191. Towbin, H. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications / H. Towbin, T. Staehelin, J. Gordon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1979. Vol. 76, №9. - P. 4350-^354.

192. Trbic, B.V. Haemolytic activity of Bacillus anthracis / B.V. Trbic, B.H. Mihajlovic//Acta vet. Beograd. 1953. - Vol.3. - P. 151-156.

193. Turk, B.E. Manipulation of host signalling pathways by anthrax toxins / B.E. Turk // Biochem. J. 2007. - Vol. 15. - P. 405-417.

194. Turnbull, P.C. Bacillus cereus toxins / P.C. Turnbull // Pharmacology of Bacterial Toxins. Dorner F., Drews J. (eds). - Pergamon Press, Oxford, 1986. - P. 397-448.

195. Uchida, I. Virulence and immunogenicity in experimental animals of Bacillus anthracis strains harbouring or lacking 110 Mda and 60 Mda plasmids /1. Uchida, K. Hashimoto, N. Teracado // J. Gen. Microbiol. 1986. - Vol. 132. - P. 557-559.

196. Ultrastructural changes in HEp-2 cells treated with staphylococcal alpha-toxin / F. Paradisi, P. Barsotti, A. Cifarelli, G. Pepe // Ric. Clin. Lab. 1976. -Vol. 6, №2.-P. 136-148.

197. Waite, M. The phospholipases. Handbook of lipid reseach / M. Waite, D J. Hanahan (ed.). Vol. 5. - Plenum Press, New York, London, 1987.

198. Welch, R.A. Pore-forming cytolysins of Gram-negative bacteria / R.A. Welch//Mol. Microbiol. 1991. - Vol. 5. - P. 521-528.

199. Young, J.A. Anthrax toxin: receptor binding, internalization, pore formation, and translocation / J.A. Young, R.J. Collier // Annu. Rev. Biochem. -2007. Vol. 76. - P. 243-265.