Персистенция стафилококков как модель системы "паразит-хозяин" тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, доктор биологических наук Чернова, Ольга Львовна

• Чернова, Ольга Львовна
• доктор биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации доктор биологических наук Чернова, Ольга Львовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Симбиотические отношения в системе «паразит-хозяин».

1.2. Морфо-функциональные особенности в персистенции стафилококков.

1.3. Механизмы персистенции стафилококков.

1.4. Прикладные аспекты персистенции стафилококков в медико-экологической практике.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика материала, использованного в исследовании.

2.2. Методики изучения патогенных и персистентных свойств выделенных стафилококков.

2.3. Методика проведения экспериментальной стафилококковой инфекции.

2.4. Методика определения лизоцима в молоке.

2.5. Методы изучения влияния абиотических факторов на биологические свойства стафилококков.

2.6. Методы статистической обработки материала.

Глава 3. НОВЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА В ПЕРСИСТЕНЦИИ СТАФИЛОКОККОВ. 55 3.1 .Способность стафилококков к инактивации карнозина. 56 3.1.1 .Разработка методики определения способности стафилококков к инактивации карнозина. 56 3.1.2.Экспериментальное изучение антикарнозиновой активности стафилококков. 59 3.2. Способность стафилококков к инактивации тромбоцитарного катионного белка.

3.2.1. Разработка методики определения способности стафилококков к инактивации тромбоцитарного катионного белка.

3.2.2.Экспериментальное изучение антикарнозиновой активности стафилококков.

Глава 4. МОДЕЛЬ «ЛИЗОЦИМ ХОЗЯИНА-АНТИЛИЗОЦИМНАЯ АКТИВНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ» ПРИ СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ У ЖИВОТНЫХ С МАСТИТОМ.

Глава 5. КЛИНИКО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РОЛИ ФАКТОРОВ ПЕРСИСТЕНЦИИ В ИНФЕКЦИОННОМ ПРОЦЕССЕ.

5.1. Связь биологических свойств стафилококков с течением гнойных синуситов.

5.2. Роль биологических характеристик стафилококков при разных формах течения маститов.

5.3.Использование факторов персистенции стафилококков для прогнозирования течения гнойно-воспалительных заболеваний.

Глава 6. РОЛЬ ПЕРСИСТЕНТНЫХ СВОЙСТВ

СТАФИЛОКОККОВ ПРИ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВЕ.

6.1. Персистенция патогена как этап формирования бактерионосительства.

6.2.Характеристика видового состава и биологических свойств микроорганизмов, выделенных со слизистой оболочки переднего отдела носа у бактерионосителей.

6.3.Характеристика персистентных свойств стафилококков при бактерионосительстве и разработка модели для дифференциации стафилококковой микрофлоры.

6.4.Резидентное стафилококковое бактерионосительство среди детей как универсальный тест микробиологического мониторинга в оценке загрязнения воздушной среды.

Глава 7. ИЗУЧЕНИЕ РЕГУЛЯТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ПЕРСИСТЕНТНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ СТАФИЛОКОККОВ IN VITRO И IN VIVO.

7.1 .Изменение биологических характеристик стафилококков в условиях микроклимата спелеошахты. 176 7.2.Динамика персистентных свойств микрофлоры молока у коров с маститом под воздействием лазерной терапии.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Персистенция стафилококков как модель системы "паразит-хозяин"»

АКТУАЛЬНОСТЬ ЙРОБЛЕМЫ. В настоящее время наблюдается изменение характера течения стафилококковых инфекций в сторону увеличения доли их затяжных и хронических форм. Патогенетические основы данного явления недостаточно расшифрованы, хотя, очевидно, что путь к решению этой задачи лежит через выяснение механизмов персистенции стафилококков. Персистенция микроорганизмов является базовым феноменом в инфек-тологии, определяющим неустойчивое равновесие в системе «паразит-хозяин», которое, как оказалось, в природе встречается значительно чаще, чем было принято считать [Беляков В. Д., 1983].

Наряду с известными исходами инфекционного процесса - гибель или выздоровление хозяина, как известно, возможен и третий вариант событий: бактерионосительство или хроническая инфекция, когда патоген надолго поселяется в новой для себя экологической нише, устанавливая паритетные отношения с хозяином.

Естественно, установление равновесного состояния между паразитом и хозяином предполагает наличие определенных характеристик у обоих участников инфекционного процесса.

Морфологической структурой, определяющей направление и исход взаимоотношений патогена и хозяина, у микроорганизмов является пепти-догликан, на базе которого микроорганизм формирует адаптивные механизмы своего существования, а у хозяина - его защитный потенциал, включающий факторы естественной резистентности и иммунитет [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., 1996].

В последнее время систематическое изучение бактериальных факторов, направленных на инактивацию защиты хозяина, позволило сформулировать понятие персистентный потенциал микроорганизмов [Бухарин О.В., 1999].

У стафилококков обнаружена и изучена способность к инактивации лизоцима, синтезируемого хозяином [Усвяцов Б.Я., 1986; Чернова О.Л., 1989;

Матюшина С.Б., 1996; Дерябин Д.Г.,1997], бактерицидного компонента интерферона [Соколов В.Ю., 1990; Матюшина С.Б., 1996; Дерябин Д.Г.,1997], иммуноглобулинов [Михайлова Е.А., Луда А.П., Бигеев М.И., 1990], комплемента [Брудастов Ю.А., 1992; Матюшина С.Б., 1996; Дерябин Д.Г.,1997] и других факторов, участвующих в инактивации соответствующих защитных факторов хозяина.

Оценивая стафилококковую инфекцию как результат паразит-хозяинных отношений нам представлялось возможным рассмотреть персистенцию стафилококков в качестве аналога (модели), описывающего природное явление (бактерионосительство и хронизация инфекции). Эта модель могла бы, по-нашему мнению, определить методологический подход к выявлению новых, ранее не известных механизмов персистенции стафилококков и быть полезной при разработке эффективных технологий при решении прикладных задач.

Вместе с тем, такая биологическая модель предполагает и возможность изучения влияния регуляторных факторов как биотической, так и абиотической природы, влияющих на персистентный потенциал патогена [Федосеева К.Е., 1985; Зыкова Л.С., 1986; Михайлов С.П.,1986; Первушина Л.А.,1990; Шеенков Н.В.,1993] в условиях системы «паразит-хозяин», что в конечном итоге отражается на исходе стафилококковой инфекции.

В связи с этим, рассмотрение персистенции стафилококков в качестве модели, т.е. аналога такого природного явления как бактерионосительство или хроническая инфекция в системе «паразит-хозяин» может оказаться перспективным как для изучения и понимания механизмов выживания патогена, так и разработки ряда новых методов клинической диагностики, прогнозирования, терапии стафилококковых инфекций в медицинской и ветеринарной практике, а также для осуществления экологического мониторинга различных территорий.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящего исследования является изучение возможности использования персистенции стафилококков в качестве биологической модели системы «паразит-хозяин» для выявления механизмов бактерионосительства и/или хронической инфекции и разработки новых технологий при решении прикладных задач.

Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

1 .Разработать методические подходы определения новых биологических свойств стафилококков (способность к инактивации карнозина, тромбо-цитарного катионного белка) и оценить роль этих признаков в персистенции возбудителя в системе «паразит-хозяин».

2.0ценить значение персистентных характеристик стафилококков при их взаимодействии с факторами естественной резистентности организма хозяина в процессе стафилококковой инфекции.

3.Изучить частоту, диапазон распространения и степень выраженности персистентных характеристик стафилококков, выделенных от больных гнойно-воспалительными заболеваниями и выявить их связь с характером течения заболевания.

4.Разработать модель дифференциальной диагностики резидентного и транзйторного бактерионосительства на основе информативных персистентных признаков стафилококков для использования в медико-экологической практике.

5.Исследовать влияние абиотических факторов (медико-биологического профиля) на персистентные свойства стафилококков в качестве регулирующего внешнего воздействия на систему «паразит-хозяин».

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые выявлена способность стафилококков инактивировать природный биологически активный дипептид карнозин и разработана методика количественного определения антикарнозиновой активности бактерий (Патент РФ № 2132879). На модели экспериментальной инфекции показана роль способности стафилококков к инактивации карнозина как свойства, определяющего возможность их длительного переживания (персистенции) во внутренней среде организма.

Обнаружено новое биологическое свойство стафилококков, направленное на инактивацию одного из факторов естественной резистентности хозяина - тромбоцитарного катионного белка (бета-лизина) и разработана методика определения антитромбоцитарной катионно-белковой активности (ан-тиТКБ) микроорганизмов. На клиническом материале показано участие ан-тиТКБ активности стафилококков в реализации феномена бактериальной персистенции (Патент РФ №2120999).

Впервые раскрыто патогенетическое значение персистентных характеристик стафилококков при их взаимодействии с факторами естественной резистентности организма в условиях модели «лизоцим хозяина-антилизоцим возбудителя» при стафилококковой инфекции.

Изучение роли персистентных свойств стафилококков при бактерионосительстве позволило охарактеризовать персистенцию возбудителя в организме «хозяина» как самостоятельный этап в патогенезе бактерионосительства.

Выявлена способность стафилококков, выделенных от больных гнойно-воспалительными заболеваниями и бактерионосителей, к инактивации факторов естественной резистентности хозяина и представлена сравнительная оценка диагностической значимости биологических свойств стафилококков. Полученные данные использованы при разработке математической диагностической модели для прогнозирования течения гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой этиологии (Патент РФ №2132558).

Разработан новый сйособ биоиндикации загрязнения воздушной среды (Патент РФ № 2108394), основанный на изучении показателя частоты резидентного стафилококкового бактерионосительства (по персистентному потенциалу выделенных штаммов) среди детей, проживающих на территориях с различным уровнем техногенной нагрузки.

Установлена возможность регуляции взаимоотношений симбионтов в системе «паразит-хозяин» и разработан новый способ санации стафилококковых бактерионосителей при помощи микроклимата спелеошахты, основанный на снижении персистентного потенциала стафилококков (Патент РФ №2100994).

Разработана селективная питательная среда для выделения стафилококков с персистентными характеристиками, созданная на основе выявленных различий в устойчивости к антибиотикам штаммов стафилококков с различными персистентными характеристиками (Патент РФ №2088668).

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНА ЧЕНИЕ РАБОТЫ.

Теоретическое значение работы определяется обоснованием возможности и целесообразности использования персистенции стафилококков в качестве биологической модели системы «паразит-хозяин», что способствует выявлению патогенетических особенностей стафилококковой инфекций.

Полученные результаты расширяют представление о роли факторов персистенции стафилококков в инфекционной патологии и являются основой для разработки новых практических решений по диагностике и профилактике стафилококковых инфекций, а также микробиологическому мониторингу загрязнения воздушной среды.

Практическое значение работы подтверждено разработкой ряда способов: «Способ санации стафилококковых бактерионосителей» (Патент РФ №2100994); «Способ биоиндикации загрязнения воздушной среды» (Патент РФ № 2108394); «Способ диагностики мастита коров без заметных симптомов болезни» (A.C. № 1389045); «Питательная среда для выделения стафилококков с персистентными характеристиками» (Патент РФ № 2088668); «Способ прогнозирования неблагоприятного течения гнойно-воспалительного заболевания стафилококковой этиологии» (Патент РФ № 2132558), которые апробированы и внедрены в работу медицинских и ветеринарных учреждений области.

Материалы работы использованы в отраслевых методических рекомендациях по оздоровлению условий и охране труда рабочих, занятых добычей и переработкой сероводородсодержащего природного газа (Министерство газовой промышленности СССР, 1988) и информационно-методическом письме ГУЗО Оренбургской области по диагностике и санации стафилококковых бактерионосителей (Оренбург, 1998).

Материалы диссертации экспонировались на тематических выставках ВВЦ: «Экологи - 850-летию Москвы», «Автотранспорт-конверсия-экология», «Наука России - агропромышленному комплексу» (1996-1997). Фрагмент работы, представленный на выставке «Наука России - агропромышленному комплексу» отмечен Дипломом и медалью ВВЦ (1997).

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1 .Персистенция стафилококков биологическая модель системы «паразит-хозяин» в выявлении механизмов бактерионосительства и хронической инфекции.

2.Качественный спектр персистентных признаков и их количественные параметры у стафилококков определяют взаимоотношения в системе «паразит-хозяин» и направление развития инфекционного процесса.

3.Изучение механизмов паразит-хозяинных взаимоотношений при пер-систенции стафилококков - основа решения диагностических, прогностических и терапевтических задач в инфекционной патологии стафилококкового генеза.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты проведенных исследований доложены и обсуждены на всесоюзной конференции «Актуальные проблемы химиотерапии бактериальных инфекций» (Москва, 1991); всероссийских научных конференциях «Персистенция микроорганизмов» (Оренбург, 1994, 1997); международной конференции «Иммунодиагностика и иммунотерапия» (Витебск, 1995); международной конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Саратов, 1996, 1998); международном симпозиуме по машинному доению сельскохозяйственных животных (Оренбург, 1997); всероссийской конференции «Актуальные вопросы инфекционной патологии и современные методы лечения» (Пенза, 1997); международной конференции «Проблемы загрязнения окружающей среды -98» (Москва,1998); VI международном симпозиуме «Урал атомный, Урал промышленный» (Екатеринбург, 1998); научно-технической конференции «Экология средних и малых городов: проблемы и решения» (Москва, 1998); международной научной конференции, посвященной 125-летию Казанской Государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана (Казань, 1998); всероссийской научно-практической конференции «Экологические аспекты в оториноларингологии» (Череповец, 1999).

Фрагменты работы были представлены на областных выставках научно-технического творчества молодежи, где отмечены Дипломом лауреата (Оренбург, 1995) и Дипломом I степени за лучшую научно-техническую разработку (Оренбург, 1996). Материалы диссертации представлены на региональных конкурсах научно-исследовательских работ по медицине и экологии и отмечены премией им. И.И. Мечникова (1995,1996).

ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 39 научных работ, получено 7 авторских свидетельств и патентов РФ.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Чернова, Ольга Львовна

ВЫВОДЫ

1. Выявлена способность стафилококков инактивировать природный дипептид карнозин - фактор естественной защиты хозяина и разработана методика количественного определения антикарнозиновой активности бактерий. Установлена высокая выраженность признака у стафилококков, выделенных от бактерионосителей по сравнению со штаммами, выделенными от больных гнойно-воспалительными заболеваниями. На клеточных моделях взаимодействия стафилококков с клетками эпителия слизистой оболочки воздухоносных путей крыс, отражающих паразит-хозяинные отношения, получены экспериментальные доказательства участия антикарнозиновой активности стафилококков в феномене персистенции.

2. Описано новое биологическое свойство микроорганизмов, направленное на инактивацию одного из факторов естественного иммунитета -тромбоцитарного катионного белка ((З-лизина) и разработана методика определения антитромбоцитарной катионно-белковой активности микроорганизмов. Способность к инактивации ТКБ зарегистрирована у 80-92 % стафилококков, выделенных от бактерионосителей и больных гнойно-воспалительными заболеваниями. Отмечена более высокая экспрессия признака у штаммов, выделенных от бактерионосителей по сравнению с контингентом больных.

3. Раскрыто патогенетическое значение персистентных свойств стафилококков при их взаимодействии с факторами резистентности хозяина в условиях модели «антилизоцимная активность возбудителя - лизоцим хозяина» при мастите у коров, что позволило разработать способ диагностики субклинических форм мастита.

4. Клинико-бактериоЛогический анализ стафилококков, выделенных от больных гнойно-воспалительными заболеваниями (гаймориты, маститы, постинъекционные абсцессы, флегмоны, лимфадениты, гнойные абсцессы мягких тканей) выявил зависимость характера течения заболевания от биологических свойств возбудителя. Микроорганизмы с вирулентными свойствами определяли острое течение заболевания, тогда как штаммы с персистентны-ми характеристиками преимущественно - хроническое или затяжное, что позволило разработать способ прогнозирования течения гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой этиологии под контролем персистентного потенциала патогенов.

5. Изучение биологических свойств стафилококков, выделенных от бактерионосителей, позволило определить информативные признаки, позволяющие патогену длительно персистировать в организме и создать модель, пригодную для дифференциальной диагностики резидентного и транзитор-ного бактерионосительства, используемую в медико-экологической практике. Показатель частоты резидентного стафилококкового бактерионосительства является универсальным тестом микробиологического мониторинга в оценке загрязнения воздушной среды.

6. В эксперименте установлена возможность модификации способности стафилококков к инактивации факторов естественной резистентности под воздействием физических (гелий-неоновый лазер) и химических (микроклимат спелеошахты) факторов. На основе полученных экспериментально-клинических данных разработан способ санации стафилококковых бактерионосителей микроклиматом спелеошахты под контролем персистентных характеристик микроорганизмов.

7.Теоретические и практические результаты исследований позволяют рассматривать персистенцйю стафилококков в качестве биологической модели системы «паразит-хозяйн» для выявления механизмов бактерионосительства и/или хронической инфекции. Модель может быть использована для решения диагностических, прогностических и терапевтических задач медико-экологической и ветеринарной практики.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Все живущие на планете организмы существуют в тесной связи друг с другом, находясь в симбиотических отношениях. В инфектологии основу этих симбиотических отнощений определяют взаимодействия между микро-и макроорганизмом, где биологическая система «паразит-хозяин», по-видимому, является базовой.

Наиболее часто наблюдаемый исход инфекционного процесса имеет достаточно четкую альтернативу: либо процесс заканчивается выздоровлением организма, либо его гибелью. Однако, известно и третье состояние, когда оба участника инфекции «соглашаются» на мирное сосуществование и микроорганизм надолго поселяется в новой для себя экологической нише, то есть персистирует.

Персистенцию бактерий определяют как биологические свойства возбудителя, так и иммунный статус хозяина [Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., 1996].

В связи с этим, не случайно персистенцию стафилококков связывают с образованием патогенами факторов, направленных на специфическую инактивацию факторов естественной противоинфекционной резистентности макроорганизма.

Среди этих факторов бактериальной персистенции стафилококков определенное место отводится секретируемым началам: антилизоцимной [Усвяцов Б.Я., 1986]; «антиинтерфероновой» [Соколов В.Ю., 1990]; антикомплементарной [Брудастов Ю.А.,1990]; антигистоновой [Соколов В.Ю., 1993] и другим видам бактериальной активности [Михайлова Е.А. с соавт., 1990; Валышев A.B., 1997].

Не исключено, что круг этих секретируемых стафилококком факторов, значительно шире, однако; выявление новых механизмов персистенции бактерий, вероятно, возможно при использовании этой биологической модели в рамках системы «паразит-хозяин».

В связи с этим, было логично предположить, что персистенцию патогенных бактерий - этот базовый феномен инфектологии, следует рассматривать как результирующую отношений в системе « паразит-хозяин».

Эта посылка вкупе с данными литературы [Бухарин О.В., 1994; 1997] была нами использована в экспериментальной работе, где персистенцию стафилококков мы рассмотрели в качестве модели системы «паразит-хозяин».

В качестве защитного субстрата хозяина, который могли бы инактиви-ровать стафилококки для собственного переживания в новой экологической нише (хозяине) мы использовали дипептид карнозин (¡З-аланил-Ь-гистидин), способный не только регулировать развитие регенерационных и иммунных реакций, но и осуществлять комплексные регуляторные воздействия с включением многообразных адаптационных механизмов целостного организма [Гуляева Н.В.с соавт., 1989; 8Ытапака 1989; Северин С.Е.,1990].

Были разработаны методические подходы к определению способности стафилококков к инактивации карнозина, основанные на классическом принципе «отсроченного антагонизма» бактерий. Проведено сравнительное изучение антикарнозиновой активности у стафилококков, выделенных при гнойно-воспалительных заболеваниях и у бактерионосителей, позволившее установить не только широкое представительство данного свойства у изученных патогенов, но и зависимость его выраженности от источника выделения. Оказалось, что стафилококки, выделенные от бактерионосителей, обладали наиболее высокой способностью к инактивации карнозина по сравнению с изолятами при гнойно-воспалительных заболеваниях. Данный факт, по-видимому, можно объяснить высокой концентрацией карнозина в обонятельном эпителии слизистой оболочки передних носовых ходов [Мш^оКб Р., 1974], что способствует селекции штаммов, способных адаптироваться к защитным системам организма хозяина и формированию устойчивых пато-микробиоценозов слизистой оболочки переднего отдела носа [Бухарин О.В.,

Литвин В.Ю., 1997].

Способностью стафилококков к инактивации карнозина, оказывающего противоалергическое действие [Адо А.Д., Алексева Т.А., Лукманова Ф.Ф., 1977], вероятно, наряду с другими факторами, можно объяснить высокую частоту встречаемости аллергических заболеваний органов дыхания (респираторный аллергоз, бронхиальная астма, астматический бронхит) у резидентных бактерионосителей [Кулагина Е.П., 1995; ДимоваС.Г., 1996].

В плане расшифровки биологической роли антикарнозиновой активности у стафилококков, мы получили прямые доказательства о связи антикарнозинового признака с персистированием штаммов в дополнение к уже имеющимся материалам по рапространению данного признака у стафилококков, выделенных от бактерионосителей и больных гнойно-воспалительными заболеваниями.

На модели экспериментальной стафилококковой инфекции на крысах с использованием изогенных клонов стафилококков, отличающихся по антикарнозиновому признаку (АКрА+, АКрА-) показано, что характер и объем структурно- функциональной реорганизации эукариотов в ответ на интервенцию различных штаммов стафилококков дифференцирован и определяется биологическими особенностями последних. Аргументом в пользу участия антикарнозиновой активности стафилококков в их персистенции можно, по-видимому, рассматривать данные по изучению взаимодействия изогенных клонов стафилококков с клетками эпителия слизистых оболочек воздушных путей крыс: количество стафилококков с антикарнозиновой активностью увеличивалось к 6 суткам наблюдения (5,9±0,31), тогда как число штаммов без признака достоверно уменьшалось (2,6±0,07).

Полученные нами прямые экспериментальные доказательства в опытах на крысах о связи антикарнозиновой активности с персистирующей способностью стафилококков вкупе с данными о высокой частоте распространения стафилококков с антикарнозиновым признаком среди бактерионосителей, вероятно, позволяют отнести антикарнозиновую активность к маркерам персистенции стафилококков.

О том же свидетельствуют и экспериментальные материалы по выявлению активности стафилококков в отношении антимикробного белка тромбоцитов, известного в литературе под названием бета-лизин.

Работы последних лет, связанные с изучением молекулярных свойств тромбоцитарного катионного белка (ТКБ) и клинические наблюдения доказывают, что биологическая активность ТКБ не ограничивается бактерицидной функцией, а проявляется вовлечением его в широкий спектр защитно-приспособительных реакций: ТКБ повышает иммунный и общий гомеостаз путем стабилизации мембран лимфоцитов, тромбоцитов, эритроцитов, а также стимулируя реакции перекисного распада мембран дефектных клеток [Сулейманов К.Г., 1998].

В эксперименте была установлена способность микроорганизмов инактивировать бактерицидное действие ТКБ и разработана методика определения антитромбоцитарной катионно-белковой активности стафилококков, основанная на принципе «отсроченного антагонизма» бактерий.

Для расшифровки биологической роли данного признака нами были изучены штаммы стафилококков, выделенные от бактерионосителей и больных гнойно-воспалительными заболеваниями (синуситы, маститы и т.д.) с целью регистрации наличия и выраженности антитромбоцитарной катионно-белковой активности.

Оказалось, что уровень выраженности антитромбоцитарной катионно-белковой активности у штаммов, выделенных при гнойно-воспалительных заболеваниях, был в 1,4 раза ниже, по сравнению со стафилококками, выделенными от бактерионосителей, у которых антиТКБ оценивалась как фактор контролирующий длительность переживания возбудителя в организме хозяина.

Таким образом, выявление новых, ранее не описанных биологических свойств стафилококков, определяющих их персистенцию в организме хозяина и расширяющих наши представления о патогенетических особенностях стафилококковой инфекции, оказалось возможным в условиях модельной системы «паразит-хозяин».

В качестве иллюстрации этого положения, по-видимому, следует рассматривать и ранее проведенные экспериментальные работы по изучению персистентного потенциала стафилококков с использованием системы «паразит-хозяин» [Шеенков Н.В., 1993; Дерябин Д.Г., 1997].

Не исключено, что персистенция стафилококков может служить базовой моделью системы «паразит-хозяин» и при решении большого круга прикладных задач.

Так, решение диагностической задачи иллюстрируют наши материалы по созданию математической диагностической модели дифференциации резидентной стафилококковой микрофлоры от транзиторной, позволяющих отличать персистирующие культуры от вариантов, не способных к длительному переживанию в тесном контакте с защитными механизмами организма хозяина.

Разработка этой диагностической модели имела ряд преимуществ по сравнению с аналогичными: она опиралась не на один [Михайлова Е.А., Луда А.П., Бигеев М.И., 1990; Бухарин О.В.с соавт., 1993; Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., 1994] или два [Кулагина Е.П.,1995] информативных параметра; позволяла дифференцировать не только золотистый [Дерябин Д.Г., 1994], но и эпидермальный стафилококк и, наконец, в отличие от разработанных частных моделей [Матюшина С.Б., 1996] была представлена обобщенная математическая модель.

В нашей работе впервые с применением математического анализа были определены ведущие информативные признаки для дифференциации резидентной микрофлоры золотистых и эпидермальных стафилококков от транзиториой и на основе полученных данных разработаны общие математические модели, позволяющие одновременно определять вид стафилококка и дифференцировать 95% штаммов, выделенных от бактерионосителей.

Существенным моментом на пути повышения точности диагностики инфекционных заболеваний нам представляется интеграция данных о перси-стентных потенциях стафилококков, раскрытых на примере способностей к инактивации факторов естественной резистентности через параметры иммунологического статуса организма.

При изучении взаимоотношения биологических свойств возбудителей мастита у коров с содержанием лизоцима в секрете вымени при разных формах заболевания было установлено преобладание стафилококков, способных инактивировать лизоцим при субклинической форме заболевания и выявлена обратная зависимость между уровнем антилизоцимной активности патогена с содержанием лизоцима в молоке от больных животных. Полученные данные позволили не только осуществлять диагностику субклинических форм мастита на основе информативных параметров (антилизоцимная активность ста-филококков-лизоцим молока), но и раскрыли особенности патогенеза мастита у коров при использовании системы «паразит-хозяин».

В последнее время изучение модельной связки «лизоцим хозяина-антилизоцим патогена» шйроко используется не только в инфекционной патологии при сальмонеллезной [Михайлов С.П., 1986] и шигеллезной инфекциях [Прусс В.Ф., 1989], но и в работах гидробиологического профиля, где установлено, что система «лизоцим-антилизоцим» определяет попу-ляционные и межпопуляционные связи [Соловых Г.Н.,1995], определяя условия выживания микроорганизмов в естественных биоценозах водоемов [Немцева Н.В.,1997].

Приведенные фактические материалы по использованию персистент-ных характеристик бактериальных патогенов в диагностических целях не исчерпывают всех возможностей этого прикладного направления в медико-биологической практике, они лишь отражают возможности рассматриваемой модельной системы.

Достаточно высокая информативность факторов персистенции была отмечена и при прогнозировании (ранней диагностики) хронического и затяжного течения гнойно-воспалительных заболеваний в рамках системы «паразит-хозяин».

Об этом же свидетельствует и установленная связь биологических свойств возбудителей синусита (S.epidermidis), гнойных воспалений мягких тканей (S.aureus) , мастита у коров (S.aureus) с особенностями клинического течения заболеваний.

Способность представителей рода Staphylococcus к инактивации факторов естественной резистентности, определяющая длительность их переживания в организме хозяина, способствовала хронизации и затяжному течению процесса, что находит подтверждение в работах других авторов по оценке диагностической значимости персистентных характеристик при хронических воспалительных процессах в условиях инфекционной патологии [Первушина Л.А., 1987; Вялкова А.А.с соавт.,1994; Фадеев С.Б., 1998].

Результаты проведенных исследований позволили построить модель прогноза длительности течения гнойно-воспалительного процесса, основанную на использовании комплекса факторов персистенции и позволяющую с достоверностью 95% прогнозировать характер течения гнойно-воспалительного процесса. Полученные данные о возможности стафилококков, обладающих комплексом факторов персистенции, обусловливать затяжное течение гнойно-воспалительных заболеваний согласуются с результатами работ по использованию персистентного потенциала стафилококков для оценки характера течения гнойно-воспалительного процесса и прогнозирования неблагоприятного течения постинъекционных абсцессов [Дерябин Д.Г., Курлаев П.П., Брудастов Ю.А.,1996].

-¡Jppw • •

Оценивая итоги работы по прогнозированию осложнений инфекционного процесса следует отметить, что факторы персистенции стафилококков, контролирующие длительность пребывания возбудителя в организме в системе «паразит-хозяин», являются методическим ключом для построения математических моделей прогнозирования этих состояний.

Выявление персистентных свойств микроорганизмов и разработка методических приемов по их определению способствовали направленному поиску путей управления этими информативными признаками (свойствами) патогенов через их регуляцию при помощи физических, химических и биологических факторов. Подавление персистирующих свойств возбудителя затрудняет его паразитирование внутри клеток и тем самым повышает эффективность лекарственных воздействий.

В этом убеждает нас имеющийся фактический материал по отбору эффективных лекарственных средств для борьбы с внутриклеточно паразитирующими возбудителями [Федосеева К.Е., 1985; Михайлов С.П.,1986; Зыкова JI.C., 1986; Первушина Л.А.,1990]. О том же свидетельствуют и наши материалы, где рассматривая абиотические факторы ( спелеошахта, гелий-неоновый лазер) в качестве регулирующих в системе «паразит-хозяин», мы смогли оценить влияние микроклимата спелеошахты и луча лазера на перси-стентные свойства стафилококков.

Оказалось, что спелеотерапия не только способствовала снижению персистентных характеристик стафилококков in vitro, но и изменяла степень тяжести заболевания у больных бронхиальной астмой, что позволило разработать способ санации бактерионосителей. Применение гелий-неонового лазера снижало персистентные характеристики стафилококков в экспериментальных условиях и позволило достигнуть полного выздоровления у 83% больных маститом коров.

Таким образом, проведенные экспериментально-клинические исследования по снижению персистентных характеристик стафилококковой

201 микрофлоры, вероятно, можно рассматривать в качестве возможного механизма положительного эффекта воздействия изученных абиотических факторов на организм за счет элиминации стафилококков.

При обсуждении этого вопроса следует обратить внимание еще на один момент.

Выявление совпадения результатов направленности действия регулирующего фактора на персистентные свойства стафилококков в условиях in vitro и in vivo имеет большое практическое значение, так как позволяет в лабораторных условиях подбирать эффективные оптимальные терапевтические воздействия (независимо от их природы), направленные на снижение персистентного потенциала возбудителя и, следовательно, способствующие выведению патогена из организма в условиях рассматриваемой системы «паразит-хозяин».

Подводя общий итог проделанной работе, следует заключить, что персистенция стафилококков, рассматриваемая как результат паразит-хозяинных взаимоотношений, способствует как выявлению новых механизмов реализации этого феномена, так и может служить базовой моделью системы «паразит-хозяин» при решении диагностических, прогностических и терапевтических задач.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Чернова, Ольга Львовна, 1999 год

1. Адо А.Д., Алексеева Т.А., Лукманова Ф.Ф. Торможение пассивной кожной анафилаксии дипептидами. //Бюлл.экспер.биол.мед.-1977.-№10. С.460-466.

2. Акатов А.К. Белок А золотистого стафилококка. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1977. - № 5. - С.5-10.

3. Акатов А.К., Зуева B.C. Стафилококки. М.: "Медицина", 1983. - 256 с.

4. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л., 1962.

5. Бабаянц A.A., КаграноваГ.Г. Антитоксическое действие лейкоцитарного интерферона в опытах in vitro.// Антибиотики и мед.биотехнология.-1984.-№11.-С.834-836.

6. Беляков В.Д. Проблема саморегуляции паразитарных систем и механизм развития эпидемического процесса.//Вестн.АМН СССР. 1983.-№ 5. - С.3-9.

7. Беляков В.Д., Каминский Г.Д., Голубев Д.Б. Саморегуляция паразитарных систем (молекулярно-генетйческие механизмы).-Л.: «Медицина», 1987.-240 с.

8. Беляков В.Д., Колесов А.П., Остроумов П.Б., Немченко В.И. Госпитальная инфекция. Л., «Медицина», - 1976. - 232с.

9. Болдырев А.А.О биологическом значении гистидинсодержащих дипепти-дов.//Биохимия.-1986.-Т.5 lL-№ 12.- С.1930-1943.

10. Борисов С.Д. Антилизоцимная активность менингококков и ее применениев диагностике менингококковой инфекции.:Автореф.дис. .канд.мед.наук.-ЧелябинскД988.

11. Брилис В.И., Брилене Т. А., Ленцнер Х.П., Ленцнер A.A. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов. //Лаб.дело.-1986.-№4.-С. 210-212.

12. Брудастов Ю.А. Антикомплементарная активность бактерий. // Перси-стенция бактерий. / Под ред. О.В.Бухарина. Куйбышев, 1990. - С. 100-107.

13. Брудастов Ю.А. Антйкомплементарная активность бактерий.: Авто-реф.дис. . канд.мед.наук. Челябинск, 1992.

14. Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Биологическое значение антикомплементарной активности бактерий //Журн. микробиол, эпидемиол. и иммунобиол.-1994.-Приложение.-С.27-32.

15. Бухарин О.В. Механизмы бактериальной персистенции. //Персистенция бактерий. / Под ред. О.В.Бухарина. Куйбышев, 1990. - С. 5-14.

16. Бухарин О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий.// Журн.микробиол.,эпидемиол.и иммунобиол.-1994.- Приложение.-С.4-13.

17. Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как результат отношений системы паразит хозяин. // Журн. микробиол., эпидемиол.и иммунобиол. - 1997. - № 4. - С. 3-9.

18. Бухарин О.В. Персистенция бактерий. Актовая речь. Оренбург, 1992.

19. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Изучение антикомплементарной активности стафилококков. //Клин.лаб.диагностика.-1992.-№ 11-12.-С.68-71.

20. Бухарин О.В., Васильев Н.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. Томск :ТГУ, 1974.-208 с.

21. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г. Дифференциация резидентной и транзитор-ной стафилококковой микрофлоры при бактерионосительстве.//Клин. и лаб. диагностика.-1994.-№ 1 .-С.44-46.

22. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г. Экологическая детерминированность маркеров персистенции стафилококков.//Журн.микробиол., эпидемиол. и иммуно-биол.-1997.-№ 4.-С.60-63.

23. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., Бойко В.И. /Характеристика микрофлоры воздушной среды и верхних дыхательных путей человека при проведении буровых работ.//Гиг.и сан.-1991.-№ 11 .-С.З 9-41.

24. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., Немцева Н.В. Бактерионосительство стафилококка у работающих на Астраханском газоконденсатном месторождении // Гиг. и сан.- 1993.- № 7.- С. 44-47.

25. Бухарин О.В., Литвин В.Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. Екатеринбург: Уро РАН, 1997.- 269 с.

26. Бухарин О.В., Сулейманов К.Г. Роль тромбоцитарного катионного белка (ТКБ) бета-лизина в противоинфекционной защите. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.- 1997.- № 1.- С.3-7.

27. Бухарин О.В., Сулейманов К.Г. Свойства и функции тромбоцитарного катионного белка.//Успехи современной биологии.-1998.-Т.118.-Вып. 2.-С.194-203.

28. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Антилизоцимный тест как маркер персистенции микроорганизмов.// Теоретическая и прикладная иммунология: Тез. докл.1 Всесоюз.конф.-М., 1982.-С.87-88.

29. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург: УрО РАН, 1996.-207с.

30. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.- 1984.- № 2.-С.27-28.

31. Бухарин О.В., Чернова О.Л., Матюшина С.Б. Построение диагностической модели дифференциации резидентной и транзиторной стафилококковой микрофлоры при бактерионосительстве. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.-1996.-№ 3. С.68-70.

32. Валышев A.B. Факторы персистенции энтеробактерий и влияние на них пробиотиков при дисбиозе кишечника.: Автореф. дис. . канд.мед.наук. Оренбург, 1997.

33. Веселов А.Я. Значение исходного иммунологического фона у хирургических больных для прогноза осложнений.//Хирургия.-1986.-№ 6. С.29-33.

34. Веселов А.Я., Бахлыкова С.Е. Иммунный ответ у доноров разных фенотипов ABO на введение стафилококкового анатоксина.// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1990. - № 12. - С.106-107.

35. Влияние препарата интерферона а/Ь и g-типов на функциональную активность макрофагов при экспериментальной стафилококковой инфек-ции./Вихоть Н.Е., Спивак Н.Я., Черная Л.Н., Пастер Е.У.//Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.-1989.-№ 4.-С.57-60.

36. Влияние препаратов стероидных гормонов на персистентные и ростовые характеристики стафилококков. /Иванов Ю.Б., Черкасов C.B., Кузьмин М.Д., Константинова О.Д.// Журн.микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.-1997.-№4.-С.92-95.

37. Войно-Ясенецкий М.В. Биология и патология инфекционных процессов.-Л. :Медицина, 1981.- С.208.

38. Гейдрих Г., Рейн В. Маститы сельскохозяйственных животных и борьба с ними.- М., Колос,1968.-375 с.

39. Герасимов В.Е. Роль антилизоцимной активности во внутриклеточном па-разитировании шигелл.: Автореф.дис. .канд.мед.наук.-Челябинск,1989.

40. Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Д.: "Медицина", 1973. -С.18-19, 70-86.

41. Гуляева Н.В., Обидин А.Б., Левшина И.П. Влияние карнозина на показатели свободнорадикального окисления липидов при остром стрессе у крыс.//Биол.науки,-1989.-№ 8. С.5-16.

42. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. М.: Изд-во МГУ, 1992. - С. 16-20.

43. Денисенко В.Н. Активность лизоцима в биологических жидкостях крупного рогатого скота в норме И при патологии.//Сельскохозяйственная биология.-1995,-№ 6,- С, 129-135.

44. О.Дерябин Д.Г. Антилизоцимная активность бактерий как фактор их фагоре-зистентности.: Автореф. дйс. . канд.мед.наук. Челябинск, 1989.

45. Дерябин Д.Г. Маркеры персистенции стафилококковой микрофлоры медицинского стационара.//Журн.микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.-1994.-Приложение.-С.91 -95.

46. Дерябин Д.Г. Способность к инактивации факторов естественной резистентности в биологии и экологии стафилококков.: Автореф. дис. . .докт.мед.наук. Челябинск, 1997.

47. Дерябин Д.Г., Бухарин О.В., Гриценко В.А. Место внутривидового фено-типического разнообразий в экологии Escherichia coli и Staphylococcus aureus.// Вестн. АМН.-1997.-№ 3.-С.34-40.

48. Дерябин Д.Г., Курлаев П.П., Брудастов Ю.А. Роль персистентных характеристик возбудителя в определении зятяжного течения гнойновоспалительного процесса. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1996.-№3.-С.74-77.

49. Димова С.Г. Динамика стафилококкового бактерионосительства у детей с респираторным аллергозом в условиях спелеотерапии.: Автореф. дис. . канд.мед.наук. Оренбург, 1996.

50. Догель В.А. Общая паразитология.-Л.: Изд-во ЛГУ, 1962.- 464с.

51. Дроздов В.В., Руденко В.Н., Макарова С.С. Аннотация к алгоритму «Дис-криминантный анализ». //Информация программ для ЭВМ, разработанных в странах членах СЭВ с целью решения геологических задач: Сб. науч.трудов. - ГДР, Берлин, 1975. - С.143-145.

52. Дроздов В.В., Руденко В.Н., Пригодич В.М. Аннотация алгоритма и программы "Распределение". //Информация программ для ЭВМ, разработанных в странах членах СЭВ с целью решения геологических задач: Сб. науч.трудов. - ГДР, Берлин, 1975. - С.137-138.

53. Дупин A.M., Болдырев A.A., Архипенко Ю.В., Каган В.Е. Защита карно-зином транспорта Са2+от повреждений, вызываемых перекисным окислением липидов. //Бюлл. экспер. биол. и мед.-1984.-Т.97.-№ 5.-С.186-188.

54. Ивашура А.И. Гигиена производства молока. М.: Россельхозиздат, 1984.240 с.

55. Ивашура А.И. Система мероприятий по борьбе с маститами коров. М.: Росагропромиздат, 1991.- С.140-166.

56. Изменение биологических свойств стафилококков под воздействием природных сероводородсодержащих газов. / Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., Усвя-цов Б.Я., Шеенков Н.В. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1994.-№ 5.-С.72-74.

57. Иммунологические и физико-химические эффекты действия лазера на биологические объекты./ Шабалин В.Н., Иваненко Т.В., Скокова Т.В., Ольшанский А.Я.//Иммунология.-1990.-№ 6.-С.30-32.

58. Иноземцев В.П., Балковой И.И. Лазеры в ветеринарную практику .//Ветеринария.-1997.-Ж 4.-С.З-7.

59. Кабанов Н.Я., Осинцев Е.Ю. Контроль и прогнозирование течения раневого процесса у больных с хирургической инфекцией мягких тканей по данным жидкокристаллической термографии.//Вестник хирургии.-1994.-№ 3-4.-С.97-99.

60. Калугин В.В. Действие низкоэнергетического лазерного излучения и монохроматического поляризованного красного света на стафило-кокк.У/Здравоохр. Казахстана.-1986.-С.45-47.

61. Карташова В.М., Ивашура А.И. Маститы коров. М.: Агропромиздат, 1988.256 с.

62. Касымов К.Т. Иммунологическая толерантность в патогенезе «злостного» носительства патогенных стафилококков.// Лаб. дело. 1981. - № 5 - С. 300304.

63. Кеннеди K.P. Экологическая паразитология. М.: Мир, 1978.- 230 с.

64. Клинико-бактериологическая характеристика инфекции мочевой системы у детей./ Вялкова A.A., Гордиенко Л.М., Слюсарева Л.Ю., Перепелкина Н.Ю.// Журн.микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.-1994.-№ 4. (Приложе-ние).-С.77-79.

65. Козлов Г.Г., Акназаров Б.К. Определение факторов местной защиты матки и влияние на них препаратов, применяемых внутриматочно при лечении эндометритов у коров.//Методические указания.-М., 1989.-25 с.

66. Козлов М.Я. Воспаление придаточных пазух носа у детей. М.: Медицина, 1985.-189 с.

67. Кокряков В.Н. Катионные белки лизосом нейтрофильных гранулоцитов при фагоцитозе и воспалении.//Вопр.мед.химии.-1990.-№ 6.-С. 13-16.

68. Кокряков В.Н. Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов.-Л.: Наука, 1988.-С.12.

69. Королюк А.М. Так победим? (Взгляд микробиолога на проблему хирургической инфекции).// Вестн. хирургии.-1998.-№ 5.-С. 148-151.

70. Корочкин И.М., Бабенко Е.В. Механизмы терапевтической эффективностиизлучения гелий-неонового лазера.//Сов.медицина.-1992.-№3.-С.З-8.

71. Кулагина Е.П. Клиническое значение резидентного и транзиторного стафилококкового бактерионосительства у детей.: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Оренбург, 1995.

72. Курлаев П.П., Дерябин Д.Г., Брудастов Ю.А., Бухарин О.В. Связь длительности течения постинъекционных абсцессов с биологическими особенностями, вызывающих их микроорганизмов.//Вест.хирургии.-1996.-№ 6.-С.54-56.

73. Кучма В.Р. Проблемы мониторинга состояния здоровья детского населения в связи с факторами окружающей среды. //Журн. гиг. труда. 1993. - № 4.-С. 4-7.

74. Лазерная терапия животных это эффективно и экологически безопас-но./Иноземцев В.П., Балковой И.И., Таллер Б.Г. и др.//Молочное и мясное скотоводство.-1997.-№ 2.-С.30-33.

75. Лейквешвили Н.В. Изменение некоторых иммунобиологических показателей в зависимости от естественной резистентности организма.: Автореф. дис. . .канд.вет.наук. -Ереван, 1973.-21 с.

76. Магомедов М.М., Лапченко А.С. Сравнительная характеристика воздействия низкоинтенсивного гелий-неонового и полупроводникового лазеров в лечении воспалительных заболеваний наружного уха.//Вест. оториноляринго-логии.-1993.-№ 2.-С. 18-20.

77. Мальцева В.В., Сергиейко В.И., Стволинский С.Л. Влияние карнозина на активность гемопоэтических стволовых клеток у облученных живот-ных.//Биохимия.-1992.-Т.57.-С.1378.

78. Мамотенко С.И., Бигеева Р.И. Влияние природного сероводородсодержа-щего газа на антилизоцимную активность микроорганизмов. //Персистенция микроорганизмов. /Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1987.- С.107-110.

79. Матюшина С.Б. Роль факторов персистенции стафилококков при бактерионосительстве.: Автореф. дис. канд. биол. наук. Оренбург, 1996.

80. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.- Новосибирск: Наука, Сиб.отд-ние, 1989.-344с.99 .Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий рода 81ар11у1ососси8.-М.: МЗ СССР, 1990.-21с.

81. ЮО.Методические указания по вопросам сбора, обработки и порядка представления данных об изменениях состояния здоровья населения, связанных с загрязнением окружающей среды.- М., 1985.

82. Методы бактериологического исследования в клинической микробиологии: Метод, рекомендации МЗ РСФСР,- М., 1983.-28с.

83. Михайлов С.П. Патогенетическое значение антилизоцимной активности возбудителя при сальмонелл езной инфекции.: Автореф. дис. канд.мед.наук.-Челябинск, 1986.

84. ЮЗ.Михайлова Е.А., Луда А.П., Бигеев М.И. Антииммуноглобулиновая активность бактерий и ее диагностическая ценность. // Персистенция бактерий. /Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1990.- С. 107-111.

85. Могиленко А.Ф. Уровень лизоцима у телят при острой бронхопневмонии и в норме.//Ветеринария.-1972.-№ 6.-С.88-89.

86. Мутовин В.И. Борьба с маститами коров. М.: Колос, 1974.-254с. Юб.Немцева Н.В. Взаимодействие Escherichia coli, обладающих антилизо-цимным признаком, с инфузориями. // Журн. микробиол., эпидемиол.и имму-нобиол. - 1997. - № 4. - С. 123-126.

87. ПЗ.Охрана окружающей среды в Оренбургской области в 1994 году. //Статистический сб. Оренбург, 1994. - С. 28.-

88. Пальчун B.T., Устьянов Ю.А., Дмитриев Н.С. Параназальные синуиты. М.: Медицина, 1982.- 152 с.

89. Первушина JI.A. Значение антилизоцимной активности микроорганизмов в этиологической диагностике и клинике воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов. //Персистенция бактерий. /Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1987. С.89-94.

90. Первушина Л.А. Антилизоцимный признак микроорганизмов в бактериологической диагностике и лечении воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов.: Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1990.

91. Первушина Л.А., Бухарин О.В. Усвяцов Б.Я. Лечение эндометрита и сальпингоофорита под контролем антилизоцимной активности возбудите-ля.//Акушерство и гинекология.- 1991.-№ 6.-С.48-50.

92. Перельман М.И., Корнилова З.Х., Пауков B.C. Влияние карнозина на заживление раны легкого.//Бюлл.эксп.биол. и мед.- 1989.- № 9.- С.352- 355.

93. Петров O.E. Среда обитания паразитов и генетическая изменчивость.// Успехи соврем, биологии.-1993 .-Т. 113.4.-С.702-716.

94. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика.- М.: Медицина, 1976.- 338 с.

95. Петровская В.Г. Общие закономерности взаимодействия в системе паразит-хозяин и проблема смешанных инфекций.//Журн. микробиол. -1982.- № 8. -С. 24-31,

96. Печеркина С.А., Малеева Л.И., Щицина И.В. О влиянии интерферона на стафилококки.//Журн.микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.- 1982.-№ 2.-С.54-56.

97. Печеркина С.А., Яхлакова Г.В., Патрушева Ф.М. Методика титрования интерферона по тест-бактериальной культуре.//Лаб. дело.-1979.-№ 5.- С.272-274.

98. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства.-М.: Медицина,1978.-144с.

99. Плахотин М.В., Фомин К.А., Копенкин Е.П. Показатели активности ли-зоцима слезной жидкости у коров и телят в норме и при заболевании глаз.//Сб.науч.тр. Московской вет.академии. М., 1973.-Вып.68.-С.23-24.

100. Плужников М.С., Лавренева Г.В. Воспалительные и аллергические заболевания носа и околоносовых пазух.- Киев.: Наукова Думка, 1990. С. 66-74.

101. Поликарпов H.A., Шилов В.М., Красноголовец В.Н. Биологические свойства условно-патогенных энтеробактерий, выделенных из крови больных.// Журн.микробиол. 1985 .-№ 10.-С. 107-116.

102. Применение лазерного ветеринарного аппарата «Вега -MB» при мастите коров./Демидова Л.Д., Юрков В.М., Балковой И.И. и др.//Ветеринария.-1996.-№5.-С.9,11-12.

103. Применение метода акупунктуры для профилактики и терапии акушер-ско-гинекологических заболеваний коров и импотенций быков. Рекоменда-ции.-М., 1994.-17с.

104. Прозоровский C.B., Кац Л.Н., Каган Г.Я. L- формы бактерий (механизм образования, структура, роль в патологии).- М.: Медицина, 1981. 240 с.

105. Прохоров В.Я., Акатов А.К., Хатеневер М.Л. Капсулообразование у золотистых стафилококков госпитального происхождения. // Журн. микробиол. 1976. - № 7. - С. 124-127.

106. Пути прогнозирования и профилактики гнойных осложнений внутри-брюшных операций./ Слесаренко С.С., Блувштейн Г.А., Додин C.B., Еременко С.М. //Вестник хирургии.-1994.-№ 5-6.- С.50-54.

107. Рафель О.Б., Попов Ю.П., Ярцева H.H. Влияние атмосферных загрязнений и заболеваемость детей дошкольного возраста.//Гиг. и сан.-1991.-№ 1.-СЛ1-14.

108. Рищук C.B. Факторы персистенции сальмонелл при их внутриклеточном паразитировании.: Автореф. дис. .канд.мед.наук. Челябинск, 1993.

109. Родионов Д.А. Статистические методы разграничения геологических объектов по комплексу признаков. М.: "Недра", 1968. - 158 с.

110. Роль комплемента в защите макроорганизма от бактерий. /Игнатов С.Г., Драгунова С.Ф., Перелыгин В.В., Воробьев А.А.//Журн.микробиол., эпиде-миол. и иммунобиол.-1987.-№ 5.-С.97.

111. Сафронов A.A., Желтова В.И. Антилизоцимная активность и биологические свойства стафилококков при гнойно-септических заболеваниях.//Персистенция бактерий.-Куйбышев,1990.-С. 19-22.

112. МЗ.Сафронов A.A., Желтова В.И. Значение антилизоцимной активности микроорганизмов в диагностике осложнений открытых переломов. // Перси-стенция бактерий/Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев,1987.-С.58-61.

113. Северин С.Е., Болдырев A.A., Стволинский C.JI. О радиомодифицирую-щих свойствах карнозина. //Радиобиология,-1990.-Т.39.- С.765.

114. Сидоренко Г.И., Меркурьева Р.В. Принципы научного обоснования системы критериев для гигиенической оценки предпатологических состояний (по метаболическим реакциям организма человека).//Гиг.и сан.-1983.- № 6.-С.4-7.

115. Силаева С.А., Гуляева H.A., Хацернова М.В. Влияние 4-метилурацила и карнозина на заживление кожных ран у крыс.//Бюлл.эксп.биол. и мед.- 1990.-№2.-С. 180-182.

116. Слюсарев A.A., Жуков C.B. Биология.- Киев: «Вища школа», 1987.-С.312-322.

117. Смирнова A.M., Трояшкин A.A., Падерина Е.М. Микробиология и профилактика стафилококковых инфекций.-Л. Медицина, 1977.-216с.

118. Соколов В.Ю Микробиологические критерии оценки экологического риска. //Бюл.экспер.биол. -1994. № 6. - С. 636-638.

119. Соколов В.Ю. Антигистоновая активность бактерий.// Бюлл.экспер. биологии и медицины.-1993.-№ 2.-С. 180-183.

120. Соколов В.Ю. Антиинтерфероновая активность микроорганизмов.// Пер-систенция бактерий/Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1990.-С.83-93.

121. Соколов В.Ю., Бухарин О.В. Связь структуры и функции бактерий в явлении микробной персистенции. //Успехи соврем, биологии. 1994. - Т. 114. -№2.-С. 183-195.

122. Соловых Г.Н. Система «лизоцим-антилизоцим» микроорганизмов в формировании водных сообществ пресных водоемов. : Автореф. дис. . докт.биол. наук. Челябинск, 1995.

123. Сохин A.A. Парадокс инфекционного иммунитета // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол.- 1988.- № 1.- С.73-80.

124. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования./ М.О.Биргер.-М., 1982.- 254 с.

125. Стафилококк (биологически активные субстанции, иммунный ответ на антигены) / Под ред. В.В.Смирнова, А.Е. Вершигора.- Киев: Наукова думка, 1988.-248 с.

126. Струков А.И., Серов ВВ., Саркисов Д.С. Общая патология человека.-М.:Медицина,1982.- 655 с.

127. Сулейманов К.Г. Роль бактерицидного тромбоцитарного катионного белка (ТКБ) в инфекционной патологии и гомеостазе.: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Челябинск, 1998.

128. Сурикова Е.В. Факторы персистенции клебсиелл.: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Челябинск, 1992.

129. Терновская Л.Н. Сравнительное использование бактериологического и цитоскопических методов исследования для выявления носителей золотистого стафилококка.// Лаб.дело.-1984.-№ 11.- С.666-668.

130. Терновская Л.Н. Стафилококковое носительство: Метод.рекомендации. Свердловск, 1983.-15 с.

131. Турсунова A.A., Боровик Э.Б., Семина H.A. Проблемы стафилококковых инфекций. Саратов, 1986. - 4.1. - С. 148-149.

132. Усвяцов Б.Я. Лизоцимная и антилизоцимная активность патогенных кокков.: Дис. докт.мед.наук. Оренбург, 1986. - 328 с.

133. Физико-химические особенности взаимодействия лазерного излучения с биологическими объектами./ Фролов Е.П., Каламкарян A.A., Ракчеев А.Н. и др.// Вест.дерматол.-1979.-№ 5.-С.10-15.

134. Фоменко Г.А. Количественные определения белка А у штаммов стафилококка, выделенных при различных клинических состояниях и локализациях процесса.// Журн. микробиол, эпидемиол. и иммунобиол.-1980.-№ 10.- С.57-61.

135. Фролов Б. А. Бактериоциногения стафилококков.: Автореф. дис. . .канд.мед.наук. Челябинск, 1970.

136. Чернова О.Л. Антилизоцимная активность стафилококков при бактерионосительстве. // Персистенция бактерий./Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1987.- С.22-30.

137. Шеенков Н.В. Роль антилизоцимной активности бактерий в развитии инфекционного процесса и пути ее регулирования.: Дис. . канд.мед.наук. -Оренбург, 1993. 215 с.

138. Шульга И.А. Фурункул носа.: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Самара,1996.

139. А1асат Т., Alacam A., Sultan N. Slime production by coagulase-negative staphylococci in the infected pulps.//J.Clin.Pediatr.Dent.-l995.-V.19.-№ 2. P.l 17119.

140. Albus A., Arbeit R.D., Lee J.C. Virulence of Staphylococcus aureus mutants altered in 5 capsule production.// Infect. Immun.- 1991. V.59. - № 3.- P. 10081014.

141. Antibacterial actions of carnosine and homocarnosine. French Patent №71.07856 of March 1,1971.

142. Aruoma O.I., Hallivell В., Aeschbach R. Antioxidant and pro-oxidant properties of active rosemary constituents: carnosol and carnosic acid.//Xenobiotica.-1992.- V.22, № 2.- P.257-268.

143. Baselga R., Albizu I., Amorena B. Staphylococcus aureus capsule and slime as virulence factors in ruminant mastitis.//Vet.Microbiol.-1994.-V.39.- № 3-4.-P.195-204.

144. Betley M.J., Harris Т.О. Staphylococcal enterotoxins: Genetic characterization and relationship between structure and emetic activity.// Food Microbiol.-1994.-11, №2.-P. 109-121.

145. Branger C., Fournier J.M., Loulergue J. Epidemiology of Staphylococcus aureus in patients with cystic fibrosis.//Epidemiol.Infect.-1994.-V.112.-№ 3.-P.489-500.

146. Brawn E.J. Interaction of gram-positive microorganisms with comple-ment.//Curr.Top.Microbiol.Itnmunol.- 1985.-V. 121.- P. 159-187.

147. Brenley A,J. Aetology and pathogenese of summer mastitis.//J.Current Topicsis Veterin medecine and animal acience.//1987.-V.45.- P.81-82.

148. Brown EJ. Interaction of gram-positive microorganisms with complement.// Curr.Top.Microbiol. Immunol.-1985.-V. 121.- P. 159-187.

149. Buswell J., CTRourke D., Craven N. L-forms of staphylococci and streptococci. //Vet. Rec -1995. V.136. - № 12. - P.304.

150. Cheung A.L., Yeaman M.R., Sullum P.M. Role of the sar locus of Staphylococcus aureus in induction of endocarditis in rabbits.//Infect.Immun.-1994.-V.62.-№5.-P.1719-1725.

151. Colburn K.K., Wing L.G., Ashman R.F. Effect of immunoglobulin G on the responsiveness of human neutrophils to soluble staphilococcal protein A induced neutrophil migration inhibition factor from T-lymphocytes.//Infect.Immun.- 1980.-V.30.- P.647-677.

152. Cole R.M. Some implications of the comparative ultrastructure of bacterial Informs. In: Mycoplasma and L-Forms of Bacteria (S.Madoff).- New York, 1971.-P.49-83.

153. Czuprynski C.J. Bacterial Evasion of Cellular Defense Mechanisms//Virulence Mechanisms of Bacterial Pathogenes/Ed. J. A.Roth. Washington, 1988. P.141-160.

154. Donaldson D.M., Roberts H.S., Tew J.G. Beta-lysin, lysozyme, and antibody-complement.// Infect. Immunol. 1974.- V.41.-№ 10. - P.563.

155. Dziarski R. Effects of Peptidoglycan on the Cellular Components of the Immune systems Biological Properties of Peptidoglycan// Biological Peptidoglycan. Berlin,1986. P.229-247.

156. Eda T., Kanda Y., Mori S. Extracellular membranous structures in a stable L-form of Staphylococcus aureus.//J.Gen.Microbiol.- 1977.-V. 103.-P. 189-191.

157. Egan J. Mastitis a revtow.//Irich.ver.news.-1984.-V.l.- № 3.- P.5-18.

158. Forsgren A. Protein A from Staphylococcus aureus. Production of protein A by bacterial and L-forms of Staphylococcus aureus.//Acta Pathol. Microbiol. Scandi-nav.-1969.-V.75. P.481-490.

159. Forsgren A., Nordstrom K. Protein A from staphylococcus aureus: the biological significance of its reaction with IgG// Ann. N.Y. Acad.Sci.-1974.- V.2367-P.252-265.

160. Forsgren A., Quie P. Effect of staphylococcal protein A on heat-labile op-sonin.//J.Immunol.-1974.-V. 112.- P.l 177-1180.

161. Forsgren A., Svedjelung A., Wigzell H. Lymphocyte stimulation by protein A of Staphylococcus.//Europ J.Biochem.-1976.-V.6.- P.207-213.

162. Gille J.J., Pasman P., Van Bercel C.G. Effect of antioxidants on hyperoxia-induced chromosomal breakade in Chinese hamster ovary cells: protection by car-nosine.//Mutagenesis.-1991 -V.6.-P.313-318.

163. Grov A. Human colostrâl IgA interacting with staphylococcal protein A.//Acta path.microbiol.scand.- 1976>Sect. C.-V.84.-P.71-72.

164. Jiang H.Q., Chen Y.F., Li A.N. Clinical burn wond infection caused by L-forms of Staphylococcus aureus.// Burns. 1994. - V.20. - № 1. - P. 83-84.

165. Karamanos N.K., Panagiotopoulou H.S., Syrokou A. Identity of macromole-cules present in the extracellular slime layer of Staphylococcus epidermi-dis.//Biochimie.-1995.-V.77.-№ 3.-P.217-224.

166. Kolawole D.O., Adedayp O. Resistence of mouse-virulent encapsulated nasal isolated of Staphylococcus aureus to disinfectants and antiseptics.//Biomed.Lett.-1994.-50, № 198,- P.151-156.

167. Koo S.P., Yeaman M.R., Bayer A.S. Staphylocidal action of thrombin-induced platelet microbicidal protein! is not solely dependent on transmembrane potential.// Infect. Immun.-1996.-V.64 (3).- P.1070-1074.

168. Kotowaki K. Flora bacteriana wyosobnina z klinicrnych prrypadkow mastitis krow orar jej wrazliwose na antybiotyki.//Med.Veter.-1987.-V.43.- № 5.- P.278-280.

169. Kuo W.N., Ganesan U., Davis D.L. Regulation of Staphylococcus protease using complement, interferon and immunoglobulin as substrates. //Cytobios. -1992.-V.71.-№ 284.-P.29-36,

170. Lederberg J. Lederberg E.M. Replica plating and indirect selection of bacterial mutants. //J.Bacteriol., -1952.-V.63.-P.399-406.

171. Lehrer R.I., Lichtenstein A.K., Yans T. Defensis: Antimicrobial and cytotoxic peptides of mammalian cells.// Ann. Rev. Immunol. -1993 .-V. 11 .-P. 105-128.

172. Mahmud A.A. Some studies of subclinical mastitis in dairy cat-tis.//Asslut.veter.sed.-1988.-V.20.- № 39.-P.150-155.

173. Mamo W., Froman G. Staphylococcus aureus to bovine mammary epithelial cells induced by growth in milk whey .//Microbiol. Immunol.-1994.-V.38.-№ 4.-P.305-308.

174. Mandell G.L. Catalase, superoxide dismutase and virulence of Staphylococ-cusaureus. In vitro and in vivo studies with emphasis on staphylococcal-leukocyteinteraction.//J.Clin.Infect. -1975.-V.55.-P.561-566.

175. Margolis F.L. Carnosine in the primary of olfactory pathway.// Science.-1974.- V.184.-P.909-911.

176. Matsunaga T., Kamatâ S., Kakiichi N. Characteristics of Staphylococcus aureus isolated from peracute, acute and chronic bovine mastitis.//J.Vet.Med.Sci.-1993.-V.55.-№ 2.-P.297-300.

177. Michael Janda J. Elastolytic Activity among Staphylococci.// Journal of Clinical Microbiology.- 1986, 26 August.- P.945-946.

178. Millonig G. The advantages of a phosphate buffer for 0s04 solutions in fixa-tion.//J.Appl.Physics.-1961.-№ 32.- P.1637-1642.

179. Movitz J., Masuda S., Sjoquist J. Physico- and immunochemical properties of staphylococcal proteun A extracellulary produced by a set of mutants from Staphylococcus aureus Cowan 1.//Microbiol. Immunol.-1979.-V.23.-P.51-60.

180. Prokesova L., Potuznicova B., Potempa J. Cleavage of human immunoglobulins by proteinase from Staphylococcus aureus.//Adv.Exp.Med.Biol. -1995.-V.371A.-P.613-616.

181. Pulverer G., Peters G., Schumacher-Perdreau F.//Zbl. Bakt. 1 Abt.- 1987.-Bd 264.-P.1-28.

182. Râsânen L., Karhumaki Ë., Krohn K. Elaboration of leucocyte migration factor by human lymphocyte subpopulations stimulated with mitigens.//Cell.Immunol.-1978.-V.37.-P.221-228.

183. Ratliff T., McCool R., Catalona W. Interferon induction and augmintation of natural killer activity by staphylococcal protein A.//Cell.Immunol.- 1981.-V.57.-P.l-12.

184. Ren Keyong, Bannan Jason D., Pancholi Vijaykumar. Characterization and biological properties of a new staphylococcal exotoxin.// J.Exp.Med.-1994.-180, № 5.-P.1675-1683.

185. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electron opaque stain inelectron microscopy.//J.Cell.Biol.-1963.-V.17.- № 1.-P.208-212.

186. Roben Paul W., Salem Aram N., Silverman Gregg J. Vh3 family antibodies bind domain D of staphylococcal protein A.//J.Immunol.-1995.-154, № 12.-P.6437-6445.

187. Rodgers J., Phillips F., Olliff C. The effects of extracellular slime from Staphylococcus epidermidis on phagocytic ingestion and killing.//FEMS Immunol. And Med.Microbiol.- 1994.-9, № 2.-P. 109-116.

188. Romagnani S., Gluidzi G., Alimerigogna F. Protein A of Staphylococcus aureus is mitogenic for IgG-bearing but also for a subpopulation of IgM and/or IgD-bearing human lymfocytes.//Immunology.-1980.-V.39.-P .417-425.

189. Rupp M.E., Han J., Gatermann S. Hemagglutination by Staphylococcus aureus strains responsible for human bacteremia or bovine mastitis.// Med.Microbiol.Immunol.Berl.-1995.-V. 184.- № 1.-P.33-36.

190. Sasaki Minori, Kaneko Masaru. Ultrastructural organization and regulation of a biomaterial adhesion of Staphylococcus epidermidis.// J.Bacteriol.-l 996.-178, № 2.-P. 537-541.

191. Sato T., Shamoto M. A simple rapid polychrome stain for epoxy-embedded tissue.//Stain Technol.-1973.-V.48.- № 5.-P.223-227.

192. Schleifer K.H., Kroppenstedt R.M. Chemical and molecular classification of staphylococci.//!, of Applied Bacteriology Symposium Supplement.-1990.-P.9-24. 310.Schmitt-Slomska J., Michailova L., Ivanova E. Adhesion and phagocytosis of

193. Staphylococcus aureus L-forms.//J. Basic Microbiol. 1986.-V.26.-P.429-440. 311.Severin S.F. //Proc. 6-th Int.Congr.Biochem., Plenary Sessions, N.Y., 1964.-P.45-61.

194. Shimanaka S. Treatment of cancer with carnosine.// Abstr. XXXI Inter. Congr.Physiol. Sci., Helsinki, Finland. 1989.-P.3306.

195. Shiro H., Muller E., Gutierrez N. Transposon mutants of Staphylococcus epi-dermidis deficient in elaboration of capsular polysaccharide/adhesin and slime are avirulent in a rabbit model of endocarditis.//J.Infect.Dis.-1994.-V.169.-№ 5.-P.1024-1049.

196. Smith H. Bacterial subversion rather then suppression of immune de-fences.//Bacterial and viral inhibition and modulation of host defences.-Acad.Press, London,1984.-P.171-189.

197. Tabarya D., Hoffman W.L. Staphylococcus aureus nasal carriage in rheumatoid arthritis: Antibody response to toxic shock syndrome toxin-1.// Ann.Rheum. Diseases.-1996.-55, № 11,- P. 822-828.

198. Takeuchi S., Matuda K., Sasano K. Protein A in Staphylococcus aureus isolates from pigs.//J.Vet.Med.Sci.-1995-V.57.-№ 3.-P.581-582.

199. Towe J., Neumayer E., Stark K.H., Rach G.H "Zbl. Gynak". 1976. - Bd. 98, №.21.-P. 1287-1295.

200. Umeda A.T., Ikebuchi T., Amako K. Localization of bacteriophage receptor,228clumping factor and protein A on the cell surface of Staphylococcus aureus .//Bacteriol. 1980.-V.141.-P.838-844.

201. Verhoef J., Peterson P.K., Quie P.G. Immunology of Staphylo-cocci.//Immunology.Human.Infection.-N.Y.,London.-1981 .-Pt.2-P.93 -111.

202. Yeaman M.R., Soldan S.S., Ghannoum M.A. Platelet microbicidal protein alone and in combination with antibiotics reduced Staphylococcus aureus adherence to platelets in vitro.// Infect. Immun.- 1996.- Vol.64, № 4.- P.1379-1384.

203. Zavizion B., Bramley A.J., Politis I. Effects of Staphylococcus aureus toxins onthe growth of bovine mammary epithelial cells (MAC-T) in cul-ture.//J.Dairy.Sci.-1995.-V.78.-N2.-P.277-284.

204. Zelger A.R. Soluble Peptidoglycans: Lymphocyte-Activating Bacterial Products Found in Man.//Biologieal Properties of Peptidoglycan. Berlin, 1986.P. 145166.