Изучение биологически активных веществ люцерны флоры Кабардино-Балкарской Республики тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Чеченов, Шамиль Шамилевич

• Чеченов, Шамиль Шамилевич
• кандидат фармацевтических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Чеченов, Шамиль Шамилевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ХИМИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ РАСТЕНИЙ РОДА ЛЮЦЕРНА-МЕРЮАбО 1. (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Степень изученности химии биологически активных веществ в растениях рода люцерна

1.2. Применение растений рода люцерна в народной и научной медицине.

1.3. Значение и использование биологически активных добавок к пище и функциональных продуктов питания в лечебно-профилактической практики.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1.

ГЛАВА 2 ХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ РАСТЕНИЙ РОДА ЛЮЦЕРНА.

2.1. Объекты и методы исследования.

2.2. Обследование распространения растений рода люцерна в КБР и хроматографическое изучение их флавоиоидного состава.

2.3. Химическое изучение биологически активных веществ люцерны посевной.

2.3.1. Установление строения флавонов и флавонолов.

2.3.2. Выделение и установление строения соединений производных 3-феиилхромона (изофлавонов).

2.3.3. Идентификация куместапов.

2.3.4. Выделение и установление строения антоцианов.

2.3.5. Идентификация оксикоричных кислот.

2.3.6. Установление строения тритерпеиовых соединений.

2.3.7. Определение содержания пектиновых веществ и установление их аналитических характеристик.

2.3.8. Определение содержания витаминов и аминокислот.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2.

ГЛАВА 3 ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ФРАКЦИЙ

ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ТРАВЫ ЛЮЦЕРНЫ ПОСЕВНОЙ.

3.1. Изучение гиполипидемической и гепатозащитной активности настойки люцерны посевной.

3.2. Изучение кардиотропного действия настоек люцерны, полученных на 40% и 70% этаноле.

3.3. Медико-биологические исследования, оценка эффективности водного экстракта люцерны — БАД «Долюцар» в производстве функциональных продуктов питания.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение биологически активных веществ люцерны флоры Кабардино-Балкарской Республики»

В последние годы достигнуты большие успехи в области химии и фармакологии природных флавоноидов и тритерпеновых сапонинов, широко распространенных в растительном мире.

Разнообразие химического строения и фармакологических свойств этих соединений представляет значительный интерес с точки зрения дальнейшего поиска новых сырьевых источников указанных групп соединений. Этот интерес обусловлен их выраженным гипохолестеринемическим, антигипертензивным, гипогликемическим, гепатотропным, противовоспалительным, сосудоукрепля-ющим действием. [9, 10]

В настоящее время достаточно остро стоит проблема укрепления отечественной сырьевой базы лекарственных растений. Это связано с резким ухудшением экологической обстановки в России, а также ограниченными возможностями использования естественных растительных ресурсов. Именно поэтому важная роль отводится культивируемым кормовым растениям, поскольку введение дикорастущих растений в культуру решает многие ресурсные проблемы.

Использование известных ценных сельскохозяйственных культур, особенно представителей семейства Бобовых, характеризующихся репрезентативным набором биологически активных соединений, представляется актуальным для отечественной фармации, в первую очередь с позиций расширения сырьевой базы для производства фармацевтической продукции.

Растения семейства бобовых, в том числе и представители рода люцерна издавна испоьзуются в народной медицине.

В научной медицине некоторые виды люцерны применяют для создания биологически активных добавок (БАД) к пище. Так, компании «Ныовейс», «Виталайн», «Инрич» (США) выпускают БАД к пище «Люцерна» (Alfalfa), под названием «Основа всех благ». Она рекомендована для профилактики и лечения атеросклероза, сердечных болей, артритов, ревматизма, аллергии, анемии, интоксикации печени, а также для нормализации водного обмена.

В Федеральном реестре БАД к пище (Москва, 2000) зарегистрированы

Эраконд»-жидкий и сухой экстракты люцерны посевной, рекомедованные как лечебно-профилактические средства при желудочно-кишечных, простудных, аллергических, гинекологических и других заболеваниях. Концентрат сиропообразный «Виолетта -3», «Виолетта-оригинальный» и «Виолетта-тонизирующий» (ТОО «Виолетта», Москва), в состав которых входит трава люцерны, обладают общеукрепляющим, мочегонным, успокаивающим действием.

Химические исследования видов рода люцерна, проведенные Бабаскиной Л.И., указывают на наличие в них некоторых групп флавоноидов, белков, аминокислот, минеральных веществ, липидов, стеринов, свободных жирных кислот, пигментов, восков, фосфолипидов, ди- и триацилглицидов. Разработаны и утверждены ТУ, проекты ФСП и ОПР на траву люцерны посевной и на экстракт люцерны жидкий. Предложена технология производства косметических средств, таких как «Крем для рук» и «Крем для ног», обладающих ранозажив-ляющим и бактерицидным действием, бальзам «Противовоспалительный», «Шисейкан» и др. Однако промышленное производство этих средств пока еще не налажено.

Несмотря на определенные успехи в изучении биологически активных веществ люцерны и разработке лечебно-профилактических средств на ее основе, все же пока не решены задачи научно-обоснованного подхода к расширению сырьевой базы лекарственных растений за счет использования кормовых культур с учетом содержания основных групп БАВ и их фармакологического действия.

В этой связи исследование химии флавоноидов, тритерпеновых сапонинов, пектиновых веществ, витаминов и других БАВ содержащихся в люцерне, является актуальным и позволит решить ряд задач научно-практической фармации.

Цель н задачи исследований. Цель настоящей работы - научное обоснование возможности расширения сырьевой базы лекарственных растений и раз-роботка лечебно-профилактических средств на основе БАВ видах рода люцерна, произрастающих в Кабардино-Балкарской Республике (КБР).

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: провести исследования распространения растений рода люцерна на территории КБР; выявить наиболее перспективные виды этих растений, как источников БАВ и сырьевых запасов; изучить химический состав наиболее значимых видов рода люцерна как лекарственного растительного сырья; провести фармакологический скрининг суммарных фракций травы люцерны с целью дальнейшего их использования для производства различных лечебно-профилактических средств.

Научная новизна. Проведены ресурсные исследования дикорастущих и культивируемых видов люцерны флоры КБР, составлена карта их ареала. Установлено, что в качестве лекарственного сырья для разработки лечебно-профилактических средств, целесообразно рекомендовать сельскохозяйственную кормовую культуру - люцерну посевную (Medikago sativa L.), сорт Славянская, с урожайностью 100-120 ц\га, культивируемую в предгорных экологически чистых районах КБР.

Изучены полифенольные соединения, содержащиеся в люцерне посевной, представленные флавонами, флавонолами, изофлавонами, куместанами и ан-тоцианидинами.

Впервые из травы люцерны посевной (сорт Славянская) выделены и идентифицированы тритерпеновые сапонины - медикагеновая кислота и ее глюко-зид, хедерогенина-3-дигликозид; оксикоричные кислоты - паракумаровая, кофейная, феруловая; пектиновые вещества.

Проведен качественный и количественный анализ аминокислот, содержащихся в траве люцерны посевной (сорт Славянская), и витаминов в ее сублимационном порошке, полученном методом высоковакуумной сушки.

Определено количественное содержание флавоноидных соединений, три-терпеновых сапонинов, антоцианидинов и пектиновых веществ в траве люцерны посевной.

Проведены исследования на животных, фармакологического действия настоек люцерны посевной (сорт Славянская), полученной нами на 40% и 70% этаноле методом перколяции и молочнокислого продукта с БАД «Долюцар» (водный экстракт люцерны посевной), представленного НПФ ООО «Эраконд» г. Стерлитамак установлено, что: настойка люцерны посевной, полученная на 70% этаноле обладает гипохо-лестеринемическим и гепатозащитным действием; настойки люцерны посевной, полученные на 40% и 70% этаноле обладают кардиотропным действием; добавление водного экстракта люцерны «Долюцар» в молочнокислый продукт (кефир) повышает его антиоксидантные, иммуномодулирующие и ге-патозащитные свойства.

Практическая значимость работы и внедрение результатов в практику

В результате проведенных исследований показана возможность расширения сырьевых источников БАВ за счет люцерны посевной (сорт Славянская) культивируемой в КБР, и использования ее для производства лечебно-профилактических средств. Нами разработаны и внедрены БАД к пище и продукты питания функционального назначения: хлебобулочные изделия - булочка «Луговая» (2,5% муки травы люцерны и 2,5% муки травы клевера), рекомендована как гипохолестеринемический, витаминосодержащий продукт (акт внедрения от 10 октября 2000г.); молочнокислый продукт - кефир с БАД «Долюцар» рекомендован в качестве продукта питания общеукрепляющего действия и повышающего неспецифическую резистентность организма. Зарегистрирован в Гос. Реестр

Б АД к пище ТУ 9222-283-00419785-2002 (акт внедрения от 20 сентября 2002г.); сублимационный порошок, полученный из травы люцерны посевной (сорт Славянская), рекомендован для производства фиточаев общеукрепляющего действия (акт внедрения от 01 ноября 2002г.); материалы исследований кардиотропного действия настоек люцерны посевной (сорт Славянская), приготовленных на 40% и 70% этаноле, используются в лекционном курсе на кафедре фармакологии ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (акт внедрения от 17 ноября 2004 г.).

Положения, выдвигаемые на защиту: результаты исследований ареала растений рода люцерна на территории КБР и выявление перспективных видов, как сырьевых источников ценных биологически активных веществ; данные о результатах исследований химического состава и количественного содержания некоторых групп БАВ травы люцерны посевной (сорт Славянская); результаты фармакологического скрининга различных фракций из травы люцерны посевной и продуктов на их основе; обоснование использования люцерны посевной (сорт Славянская), в качестве сырья производства различных лечебно-профилактических средств.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ

ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№ гос. регистрации 01.20.0013406) и соответствует проблеме «Фармация» Ученого совета Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ, секция №38.

Апробация работы и публикации

Основные фрагменты диссертациооной работы изложены в материалах 53-й, 54-й, 58-й региональных конференций по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск, 1998, 1999, 2001), V, VI, VIII Российских национальных конгрессов «Человек и лекарство» (Москва, 1998, 1999, 2003); 5 -ой международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 1998), международного симпозиума «Питание 21 века» (Владивосток, 1999), 7-го международного съезда «Фитофарм 2003» (Санкт - Петербург - Пушкин, 2003). По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 110 страницах компьютерного набора и состоит из введения; обзора литературы; 2-х глав собственных исследований; общих выводов, списка литературы, включающего 143 источника, в том числе 38 иностранных; содержит 22 таблицы, 10 рисунков и приложения.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Чеченов, Шамиль Шамилевич

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведена ресурсная оценка растений рода люцерна в Кабардино-Балкарской республике, составлена карта ареала видов этого рода. Установлено что сырьевые запасы всех семи видов дикорастущей люцерны ограниченны. В качестве сырьевого источника БАВ предложена сельскохозяйственная культура - люцерна посевная, сорт Славянская.

2. Проведено изучение химического состава травы люцерны посевной, установлено 25 соединений различных групп БАВ, которые представлены флавоноидами, фенолокислотами, тритерпеновыми сапонинами, пектиновыми веществами, витаминами, аминокислотами.

3. Проведен количественный анализ некоторых групп БАВ, установлено, что в траве люцерны посевной содержится (на воздушно-сухое сырье): флаво-ноидных соединений 0,73±0,06%, антоцианидинов 87мг%, выход тритер-пеновых сапонинов составил 2,55%, что говорит о возможности использования люцерны в качестве дополнительного источника сапонинсодержа-щего сырья.

4. Впервые определено содержание пектиновых веществ и исследованы их аналитические характеристики. Установлено, что в траве люцерны посевной содержится общего пектина 4,2%, протопектина - 3,15% и растворимого пектина - 1,05%. Общее содержание карбоксильных групп составляет 18,9%, общая степень этерификации 19,05%, что говорит о низкой степени этерификации (Е<40%) и высокой комплексообразующей способности пектиновых веществ, которые могут использоваться как детоксиканты.

5. В опытах на белых крысах изучена гиполипидемическая активность настойки люцерны посевной полученной на 70% этаноле и установлено, что она обладает выраженным гипотриглицеридемическим действием, что сопоставимо с препаратом «Гемфиброзил»;

- изучено гепатозащитное действие и установлено, что настойка оказывает положительное влияние на общее состояние печени в условиях острого токсического ССЦ-гепатоза и по ряду показателей согласуется с действием препарата гепатопротектора «Силибор»; выявлено кардиотропное действие настоек люцерны приготовленных на 40% и 70% этаноле, которое проявляется в снижении частоты сердечных сокращений при незначительном изменении их амплитуды и уменьшении минутного объема сердца;

Впервые из травы люцерны на базе НПП ООО «Биоритм» (г. Москва) получен сублимационный порошок методом высоковакуумной сушки. В нем установлено высокое содержание витаминов (250 мг%), что позволяет использовать его для производства фиточаев и фитосборов общеукрепляющего действия.

По результатам медико-биологических исследований, разработан и внедрен молочнокислый продукт на основе кефира, содержащий водный экстракт люцерны посевной - БАД «Долюцар». Продукт способен поддерживать в физиологических пределах функциональную активность многих органов и систем и может быть рекомендован в качестве профилактического общеукрепляющего, иммуномоделирующего, антиоксидантного средства. На основании химических и биологических исследований разработан и внедрен продукт питания функционального назначения на основе травы (муки) люцерны посевной хлебобулочные изделия — булочка «Луговая» и рекомендована для профилактики атеросклероза и авитаминозов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Чеченов, Шамиль Шамилевич, 2005 год

1. Аймухамедова, Г.Б. Пектиновые вещества и методы их определения. /Аймухамедова Г.Б., Шелухина Н.П. Фрунзе: Илим, 1964. - 120 с.

2. Артамонов, H.A. Исследование каротиноидов люцерны посевной (Medicago sativa) /H.A. Артамонов, М.И. Горяев, Л.Ф. Бурковская //Изв. АН КазССР. Сер. химия. 1982. - Т. 32, № 4. - С. 73-77.

3. Бабаскина, Л.И. Фармакогностическое ислледование родов люцерна, люпин, вика семейства бобовых, перспектива их практического использования: Ав-тореф. дис. д-ра фармац. наук/Л.И. Бабаскина. М., 1998-49 с.

4. Бандюкова, В.А. Качественный анализ флавоноидов в растительном материале при помощи хроматографии на бумаге: Метод, рекомендации /Бандюкова В.А., Шинкаренко А.Л. Пятигорск, 1972. - 21 с.

5. Бандюкова, В.А. Нео- и изофлавоноиды семейства бобовых. Лекарственные вещества /В.А. Бандюкова, А.Л. Казаков. Ростов н/Д: Изд-во РГУ, 1979. -С. 55-72.

6. Бандюкова, В.А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге /В.А. Бандюкова //Раст. ресурсы. 1965. - №4. - С. 591-596

7. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды /В.А. Бандюкова //Химия природ, соединений. 1983. - N3. - С.263-273.5

8. Бандюкова, В.А., Тонкослойная хроматография флавоноидов /В.А. Бандюкова, А.Л. Шинкаренко //Химия природ, соединений. 1973. - №1. С. 20-25.

9. Барабой, В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений /Барабой В.А. Киев: Наукова думка, 1976. - 260 с.

10. Барабой, В.А. Растительные фенолы и здоровье человека /В.А. Барабай. -М.: Наука, 1984.- 160 с.

11. П.Беликов, В.Г., Шрайбер М.С. Методы анализа флавоноидных соединений /В.Г. Беликов, М.С. Шрайбер //Фармация. 1970. - Т.21, №1 - С.66-72.

12. Билогически активные вещества пищевых продуктов /Петрушевский В.В., Казаков A.JL, Бандюкова В.А. и др. -Киев: Техшка, 1985 127 с.

13. Биологически активные вещества пищевых продуктов. Справочник. /Петрушевский В.В., Гладких В.Г., Винокурова Е.В. и др. Киев: Урожай, 1992.- 192 с.

14. Блажей, Н. Фенол ьные соединения растительного происхождения /Блажей Н., Шутый Л. М.: Мир, 1977. - 239 с.

15. Брехман, И.И. Человек и билогически активные вещества /Брехман И.И. -Л., Наука, 1976.- 111 с.

16. Бухарин, О.В. Фотонефелометрический метод определения бактерицидной активности сыворотки крови. Факторы естественного иммунитета /Бухарин О.В., Созыкин В.Л. Оренбург, 1979. - С. 43-45.

17. Великанов, И.И. Атеросклероз болезнь века /Великанов И.И. -Ставрополь: Ставроп. книж. изд-во, 1976. - 139 с.

18. Вехов, В.Н. Культурные растения СССР /Вехов В.Н. М.: Мысль, 1978. -336 с.

19. Влияние изофлавонов на липидный обмен при экспериментальной гиперхо-лестеринемии /Т.Н. Дорофеенко, А.Л. Шинкаренко, Л.И. Лисевицкая и др. //Hay1!, докл. высш. шк. Биол. науки. 1975. - №3. - С. 35-38.

20. Влияние флавоноидов клевера красного и некоторых синтетических аналогов на показатели липидного обмена у животных с экспериментальным атеросклерозом /Ю.К. Василенко, Г.Н. Дорофеенко, А.Л. Казаков и др. //Изв.

21. Сев.-Кавказ. науч. центра высш. шк. Сер.естеств.н. 1978. - №4. - С. 99101.

22. Вульф, Е.В. Мировые ресурсы полезных растений /Вульф Е.В., Малеева О.Ф.-Л., 1969.-565 с.

23. Газина, Т.П. Пища XXI века. Натуральные биокорректоры и лечебно-профилактические продукты сублимационной сушки /Газина Т.П., Дьяконов Л.П., Печерский В.И. М.: Домиург-АРТ, 2001. - 96 с.

24. Галкин, М.А. Дикорастущие полезные растения Северного Кавказа /Галкин М.А., Казаков А.Л. Ростов-н/Д.: Изд-во РГУ, 1980. - 128 с.

25. Гейсман, Т. Антоцианы, халконы, ауроны, флавоны и родственные им водорастворимые растительные пигменты /Гейсман Т. //Биохимические методы анализа растений М., 1960. - С. 453-519.

26. Гелчинская, Р.Б. Биохимия люцерны /Р.Б. Гелчинская //Биохимия культурных растений: В 8 т. М., Л., 1938. - Т.2. - С. 236-269.

27. Георгиевский, В.П. Физико-химические и аналитические характеристики флавоноидны соединений /Георгиевский В.П., Рыбаченко А.И., Казаков А.Л. Ростов-н/Д : Изд-во РГУ, 1988. - 143 с.

28. Георгиевский, В.П. Физико-химические методы анализа биологически активных веществ растительного происхождения /Георгиевский В.П., Казари-нов H.A., Каррыев М.О. Ашхабад: Ил им, 1976. - 239 с.

29. Гичев, Ю.Ю. Руководство по биологически активным пищевым добавкам /Гичев Ю.Ю., Гичев Ю.П. М.: Триада-Х, 2001. - 232 с.

30. Горяев, М.И. Исследование токоферолов люцерны посевной (Medicago sativa L.) и витаминного концентрата /М.И. Горяев, А.Ф. Бурковская, H.A. Артамонов //Изв. АН КазССР. Сер. хим. 1977. - Т. 27, № 6. - С. 42-45.

31. Государственная фармакопея СССР: В 2 т. 11-е изд, доп. - М.: Медицина, 1990.-Т. 2.-400 с.

32. Государственная фармакопея СССР: В 2 т. 11-е изд. - М.: Медицина, 1987. -Т. 1.-337 с.

33. Гроссгейм, A.A. Растительные богатства Кавказа. 2-е изд. /Гроссгейм A.A. -М, 1952.-631 с.

34. Дмитриев, А.Б. Спектрофотометрическое определение флавонолов и изо-флавонов при совместном присутствии. /А.Б. Дмитриев, A.JI. Казаков. //Химико-фармац. журн. 1981. - Т. 15, №12. - С. 90-93.

35. Донченко, JI.B. Безопасность пищевого сырья и продуктов питания /Донченко JI.B., Надыкта В.Д. М.: Пищ. пром-сть, 1999. - 352 с.

36. Донченко, J1.B. Производство пектина /Донченко JI.B., Карпович Н.С., Сим-хович Е.Г. Кишинев: Штиница, 1994. - 182 с.

37. Дорофечук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом /ВТ. Дорофейчук //Лаб. дело. 1968. - №1. - С. 28-30.38.3апрометов М.П. Основы биохимии фенольных соединений /Запрометов М.П. М.: Высш. шк., 1974. - 214 с.

38. Запрометов, М.П. Биохимические методы анализа растений /Запрометов М.П. М.: Высш. шк., 1960. - 463 с.

39. Иванов, А.И. К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов /А.И. Иванов, Б.А. Чухловин //Лаб. дело. 1967. -№10.-С. 610-613.

40. Иванова, Л.В. Напитки безалкогольные /Иванова Л.В. М.: Аурика, 1994. -688 с.

41. Изучение безвредности экстракта люцерны «эраконд» /К.Л. Лукманова, Х.М. Насыров, Т.Б. Танирбергенов и др. //Человек и лекарство: Тез. докл. 4 Рос. нац. конгр. - М., 1997. - С. 76.

42. Изучение флавоноидного состава сырья травы люцерны хмелевидной /Т.В. Простодушева, Е.И. Барабанов, М.В. Киселевский, Л.И. Бабаскина //Фармация. 1998. - Т.47, №3 - С. 30-31.

43. Казаков, A.JT. Биологически активные вещества целебных и пищевых растений и их фармакологическая активность /Казаков A.JI., Хацуков Б.Х. -Нальчик: Изд-во КБНЦ РАН, 2000. 68 с.

44. Казаков, A.JI. Биоханин А и его глюкозид из некоторых видов клевера /А.Л. Казаков //Химия природ, соединений. 1973. - №2. - С. 274-275.

45. Казаков, А.Л. Изучение гиполипидемической активности природных изо-флавонов /А.Л. Казаков //Хим.-фармац. журн. 1979. - №1. - С. 58-60.

46. Казаков, А.Л. Изыскание новых антиатеросклеротических средств в ряду изофлавонов /А.Л. Казаков. //Съезд фармацевтов УССР (3, 1979; Харьков): Тез. докл. Харьков, 1979. - С. 168.

47. Казаков, А.Л. Люцерна перспективный источник лечебно-профилактических средств /А.Л. Казаков, Ш.Ш. Чеченов. //Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (53; 1998; Пятигорск): Материалы . - Пятигорск, 1998. - С. 16-17.

48. Казаков, А.Л. Перспективы использования растений семейства бобовых флоры Северного Кавказа /А.Л. Казаков, В.А. Бандюкова, М.А. Галкин //Изв. Сев.-Кавказ. науч. центра высш. шк. Сер. естеств. науки. 1979. №3. - С. 7781.

49. Казаков, А.Л. Фенолокислоты из Trifolium alpestre, Т. medium и Т. pratense /А.Л. Казаков, Д.М. Елисевич //Химия природ, соединений. 1976. - №2. -С. 253.

50. Карпович, Н.С. Пектин. Производство и применение /Карпович Н.С., Дон-ченко Л.В., Нелина В.В. Киев: Урожай, 1989. - 88 с.

51. Кемертелидзе, Э.П. Физико-химические методы анализа некоторых биологически активных веществ растительного происхождения /Кемертелидзе Э.П., Георгиевский В.П. Тбилиси: Мецниереба, 1976 - 222 с.

52. Клышев, JI.K. Флавоноиды растений /Клышев JI.K., Бандюкова В.А., Алю-кина JI.C. Алма-Ата: Наука КазССР, 1978. - 218 с.

53. Ковалев И.П. Инфракрасные спектры поглощения природных соединений. I. флавоноиды. Полосы поглощения карбонильных и гидроксильных групп /И.П. Ковалев, Е.В. Титов //Журн. общ. химии. 1963. - Т.ЗЗ, Вып. 5. - С. 1670-1677.

54. Ковалев, И.П. Инфракрасные спектры поглощения некоторых природных соединений: Атлас спектров /Ковалев И.П., Титов В.Е. -Харьков: Изд-во. ХГУ, 1966-273 с.

55. Ковалева, Н.Г. Лечение растениями /Ковалева Н.Г. М.: Медицина, 1971. -134 с.

56. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии /Колб В.Г., Камышников B.C. Минск: Беларусь, 1982. - 336 с.

57. Кормовые растения сенокосов и пастбищ СССР. /Под ред. И.В. Ларина М.-Л., 1951. С 623-659.

58. Куреннов, П.М. Русский народный лечебник /Куреннов П.М. М.: Северные просторы, 1993. — 287 с.

59. Леонтьева, Т.П. Влияние суммы флавоноидов из клевера красного и нута обыкновенного на содержание липидов в крови и печени крыс. /Т.П. Леонтьева, А.Л. Казаков, В.Е. Рыженков //Вопр. мед. химии. 1979. - №4 - С. 444447.

60. Макаров, В.А. Здоровье. Защитные системы и силы организма /Макаров В.А. Пятигорск: Рекламно-информац. агенство на КМВ, 1999. - 207 с.

61. Максютина, Н.П. Методы выделения и исследования флавоноидных соединений. /Н.П. Максютина, В.И. Литвиненко //Фенольные соединения и их биологические функции. М.: Наука, 1968. - С .

62. Махлаюк, В.М. Лекарственные растения в народной медицине /Махлаюк В.М. Саратов, 1967. - 258 с.

63. Мацку, Я. Атлас лекарственных растений /Мацку Я., Крейча И. Братислава.: Изд-во Словац. акад. наук, 1970. - 464 с.

64. Мешкова, Н.П. Практикум по биохимии /Мешкова Н.П., Северина, С.Е. -М.: Изд-во Моск. ун-та, 1979. С. 157-158.

65. Минеджян, Г.З. Сборник по народной медицине и нетрадиционным способам лечения /Минеджян Г.З. М.: Багира, 1994. - 508 с.

66. Михайлов, И.А. Современные препараты из лекарственных растений: Справочник /Михайлов И.А., Шретер А.И. М.: Изд. дом МСП, 1999. - 336 с.

67. Некоторые итоги изучения растений семейства Бобовые /В.А. Бандюкова, А.Л. Казаков, Т.П. Леонтьева и др. //Всесоюз. съезд фармацевтов (3; 1980; Кишинев): Тез. докл. Кишинев, 1980. - С. 188.

68. Пектин. Применение пектина. /Костенко Т.И., Нелина В.В., Донченко Л.В., Карпович Н.С. Киев: Пектин, 1992. - 52 с.

69. Перспективы использования лекарственных и пищевых растений для разработки лечебно-профилактически средств /А.Л. Казаков, Л.И. Бабаскина, B.C. Бабаскин и др. //Человек и лекарство: Тез докл. 8 Рос. нац. конгр. 2-6 апреля 2001 г.-М., 2001.-С. 572

70. Питание человека: Основы нутрициологии /Под ред. А.Н. Мартынчика. -М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2002. 576 с.

71. Природные и модифицированые изофлавоноиды /Казаков А.Л., Хиля В.П., Межерицкий В.В., Литкеи Ю. Ростов-н/Д.: Изд-во РГУ, 1985. - 184 с.

72. Простодушева, Т.В. Ботанико-фармакогностическое изучение и оценка биологической активности люцерны хмелевидной: Автореф. дис. .канд. фар-мац. наук /Т.В. Простодушева М., 1998 - 23 с.

73. Разработка биологический активных пищевых добавок /В.А. Компанцев, А.Л. Казаков, И.И. Самокиш и др. //Человек и лекарство: Тез. докл. 5 Рос. нац. конгр. 21-25 апр. 1998 г. М., 1998. - С. 374-375.

74. Разработка оздоровительных пищевых растительных биодобавок /А.Л. Казаков, В.А. Компанцев, Б.Х. Хацуков и др. //Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (53; 1998; Пятигорск): Материалы . Пятигорск, 1998.-С. 101-102.

75. Разработка парафармацевтических средств для профилактики экологически обусловленных заболеваний. /А.Л. Казаков, В.А. Компанцев, И.И. Самокиш и др. //Человек и лекарство: Тез. докл. 6 Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999 г. -М., 1999.-С. 297-298.

76. Растительные лекарственные средства /Под ред. Н.П. Максютиной. Киев: Здоров'я, 1985. - 280 с. Í

77. Растительные ресурсы СССР. Цветковы растения, их химический состав, использование. Род Medicago L. Л.: Наука, 1987. - С. 156-157.

78. Сентебова, H.A. Предложения по унификации методов определения тригли-церидов в сыворотке крови /H.A. Сенебова, Н.В. Салицкая //Унификация лабораторных методов исследования 1978. - Вып. 8. - С.67-75.

79. Танчев, С.С. Антоцианы в плодах и овощах /Танчев С.С. М.: Пищевая пром-сть. - 1980. - 304 с.

80. Тимбекова, А. Э. Тритерпеновые гликозиды люцерны II. Медикозид С / А.Э.i

81. Тимбекова, Н.К. Абубакиров //Химия природ, соединений. 1985. - №6 - С. 805-808.

82. Тимбекова, А.Э. Тритерпеновые гликозиды люцерны: III. Медикозид I /А.Э. Тимбекова, Н.К. Абубакиров //Химия природ, соединений. 1986. - № 5 -С. 607-610.

83. Тимбекова, А.Э. Тритерпеновые гликозиды люцерны: VI. Медикозид J/А.Э. Тимбекова, Н.К. Абубакиров //Химия природ, соединений. 1986. - № 5 -С.610-613.

84. Тимбекова, А.Э, Тритерпеновые гликозиды люцерны: Медикозид G новый бисдесмозид из Medicago sativa /А.Э. Тимбекова, Н.К. Абубакиров //Химия природ, соединений. - 1984. - № 4. - С. 451-458.

85. Томпсон K.P. Люцерновая мука и другие виды муки из листьев /K.P. Томпсон //Растительные белковые корма. М., 1965. - С. 471-480.

86. Тритерпеновые гликозиды люцерны: V. Медикозид Н /А.Э. Тимбекова, М.Ф. Ларин, М.Р. Ягудаев, Н.К. Абубакиров //Химия природ, соедин. 1989. - № 5.-С. 673-677.

87. Тритерпеноиды новые гиполипидемические и противоатеросклеротиче-ские вещества /Ю.К. Василенко, Э.Т. Оганесян, Л.И. Лисевицкая и др. //Съезд фармацевтов Армении (2; 1979; Ереван): Тез. докл. - Ереван, 1979. -С.62-64.

88. Федеральный реестр биологически активных добавок к пище /Под. ред. Пилат Т.Л. М.: Когелет, 2000. - 327 с.

89. Харборн, Д. Биохимия фенольных соединений. /Харборн Д. М.: Мир, 1968. -120 с.

90. Чепурной, И.П. Питание и здоровье. /Чепурной И.П. Ставрополь: Кавказский край, 1999. - 276 с.

91. Чеченов, Ш.Ш. Поиск и разработка природных антисклеротических средств. /Ш.Ш. Чеченов, М.Д. Токумаев //Конф. Молодых ученых. Курск. Гос. мед. уни-т, апр. 1997 г. (№.; 1997; Курск): Материалы . Курск, 1997.-С. 37

92. Шамшурин, A.A. Проблема фитоэстрагенов в животноводстве /A.A. Шамшурин. //Журн. Всесоюз. хим. о-ва им. Д.И. Менделеева. 1966. - Т. II. -№5.-С. 516-520.

93. Шинкаренко, А.Л. Методы исследования природных флавоноидов: Метод, рекомендации для студентов науч. студ. о-ва /А.Л. Шинкаренко, В.А. Бан-дюкова, А.Л. Казаков Пятигорск: Б.И., 1977. - 70 с.

94. Экологически обусловленные заболевания и пути их профилактики с помощью биодобавок к пище. /А.Л. Казаков, В.А. Компанцев, Б.Х. Хацуков и др. //Загрязнение окружающей среды и здоровье населения: Материалы ме-ждунар. науч. конф. Смоленск, 1999. - С. 84.

95. Яворская, М.В. Лекарственные растения. Их применение в современной и народной медецине /Яворская М.В. Нальчик: Эль-Фа, 1998 - 320 с.

96. Buttery, R.G. Volatile components of alfalfa flowers and pods /R.G. Buttery, J.A. Kamm, L.C. Ling //J. Agr. and Food Chem. 1982. - Vol. 30, N 4. - P. 739742.

97. Canzler, H. Medikamentöse therapie der hypar-cholestarinämien. /Н. Canzler //München, med. Wochenschr. 1980. - Jg. 122. H. 13 - S. 467-470.

98. Chandler, B.V. Identification of sacchary des in anthocyanins and other flavon-oids /B.V. Chandler, К.A. Harper. //Austral. J. Chem. 1961. - N 14. - P. 586589.

99. Characterization of coumestrol, a naturally occuring plant estrogen. /Е.М. Bikoff, R.L. Lyman, A.L. Livingston, A.N. Booth //J. Amer. Chem. Soc. 1958. - Vol.80, N 15. - P. 3969-3971.

100. Coulson, C.B. Triterpenoid saponins from lucerne and other species /С.В. Coul-son //J. Sei. Food and Agr. 1958. - Vol. 9, N 5. - P. 281—288.

101. Coumestrol, a new estrogen isolated from forage crops /Е.М. Bikoff, A.N. Booth, R.L. Lyman et al. //Science. 1957. - Vol. 126. - P. 969-970.

102. Dean, F.H. Flavones and flavonol. /F.H. Dean //Naturally occuring oxygen ring compounds. London, 1963. - P. 280-332.

103. Detection of coumestrol in leguminous plants /R.L. Lyman, E.M. Bikoff, A.N. Booth, A.L. Livingston //Arc. Biochem. and Biophys. 1959. - Vol. 80. P. 61-67.

104. Dewick, P.M. Biosynthesis of pterocarpan, isoflavan and coumestan metabolites of Medicago sativa /P.M. Dewick, M. Martin //Phytochemistry. 1979. - Vol. 18, N 4. - P. 597-602.

105. Geissman, T.A. The Chemistry of flavonoid compounds /T.A. Geissman //Oxford: Pergamon Press, 1962. 666 p.

106. Gestetner, B. Structure of a saponin from lucerne (Medicago saliva) /B. Gesten-ter//Phytochemistry. 1971. - Vol. 10, N 9. - P. 2221-2223.

107. Green, D.G. Soluble sugar changes occurring during cold hardening of spring wheat, fall rye and alfalfa /D.G. Green //Can. J. Plant Sci. 1983. - Vol. 63. N 2. -P. 415-420.

108. Guggolz, J. Detection of daidzein, formononetin, genistein and biochanin A in forages /J. Guggolz, A.L. Livingston, E.M. Bikoff //J. Agr. and Food Chem. -1961.-Vol. 9.-N2.-P. 135.

109. Gupta, S. B. Biochemical aspects of the inheritance of floral anthocyanins in diploid alfalfa /S.B. Gupta //Genetics. 1970. - Vol. 65, N 2. - P. 267-278.

110. Gupta, S.B. Thin-layer chromatographic separation of anthocyanins and antho-cyanidins in Medicago /S.B. Gupta //J. Chromatogr. 1968. - Vol. 36, N 1. - P. 115-119.

111. Gupta, S.B. Thin-layer chromatographic separation of flavonoids in Medicago (Papiliona-ceae) /S.B. Gupta //J. Chromatogr. 1968. - Vol. 36, N 2. - P. 258261.

112. Harborne, J.B. Comparative biochemistry of the flavonoids /J.B. Harborne. -London, New York: Acad, press, 1967. 383 p.

113. Harborne, J.B. Destribution of flavonoids in the leguminosa. /J.B. Harborne //Chematoxonomy of the Leguminosas. London - N. Y., 1971. - P. 31 -71.

114. Hattori, Sh. Glykosides of flavones and flavonols. //Sh. Hattori //The chemistry of flavonoid compounds. Oxford, 1962. - P. 317-352.

115. Hayashi, K. The Anthocyanins /K. Hayashi //The chemistry of flavanoid compounds. Oxford, 1962. - P. 248-295.

116. Horovitz, R.M. Spectral studies on flavonoid compounds. II. Isoflavones and flavanones /R.M. Horovitz, L. Jurd. //J. Org. Chem. 1961- Vol. 26, N 7. - P. 2446-2449.

117. Isolation of hederagenin and its saponin from alfalfa (Medicago sativa) /S. Shany, B. Gestetner, Y. Birk, A. Bondi //Isr. J. Chem. 1972. - Vol. 10, - N 4. -P. 881.

118. Ito, S. Sterols and triglycerides in alfalfa leaves /S. Ito, Y. Fujino //Obihiro Chi-kusan Daigaku Qakujutsu Kenkyu Hokoku, Dai-l-Bu. 1976. - Vol. 9, N 4. P. 817-824.

119. Jurzysta, M. Saponins of the genus Medicago /M. Jurzysta, E. Nowacki // Acta Agrobot. 1979. - Vol. 32, N 1. - P. 13-17.

120. Method experimental hyperlipidemia caused by triton WR 1339 /S. Larrattini, R. Paoletti, L. Bizzi et al //Drugs affecting lipid metabolism. Amsterdam, 1961. -P. 144-147.

121. Monties, B. Occurrence of flavonoids in alfalfa /B. Monties, I.C. Rambourg //Ann. techn. agr. 1978. - Vol. 27, N 3. - P. 629-654.

122. Ohkawa, H. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction /H. Ohkawa, N. Ochini, K. Vagi //Anal. Biochem. 1979. - Vol. 5, №2. -P. 351-358.

123. Ollis, W.D. Isoflavonoids /W.D. Ollis //The Chemistry of flavonoid compounds. Oxford, 1962. - P. 353-405.

124. Piretti, M.V. Flavonoid polyphenols in alfalfa (Medicago sativa) /M.V. Piretti, P. Zeli, R. Pistore //Gazz. chim. ital. 1982. - Vol. 112 N1-2. - P. 47-50.

125. Sakagami, Y. Isolation and structure of medicarpin-p-D-glucoside in alfalfa /Y. Sakagami, S. Kumai, A. Suzuki //Agr. and Biol. Chem. 1974. - Vol. 38, N 5. -P. 1031-1034.

126. Schopke, Th., Triterpenoid saponins. P.VI. / Th., Schopke, K. Hiller //Pharmazie. 1980. - Vol.45, N5. - S.313-342.

127. Seikel, M.K. Chromatographic methods of separation, isolation and identification of flavonoid compounds /M.K. Seikel. //The Chemistry of flavonoid compounds. Oxford, 1962. - P. 34-69.

128. Seshadri, T.R. Isolation of Flavonoid Compounds from plant materials /T.R. Se-shadri //The Chemistry of flavonoid compounds. Oxford, 1962, - P. 6-33.

129. Sharma, R.D. Effect of varios isoflavones on lipid levels in triton-treated rats. /R.D. Sharma //Atherosclerosis. 1979. - Vol.33, N 3. - P. 371-375.

130. Shaw, G.J. Synthesis and structural proof of wairol, a new coumestan from Medicago sativa / G.J. Shaw, M.K. Yates, D.R. Biggs //Phytochemistry. 1982. -Vol. 21, N 1.-P. 245-250.

131. Structure and synthesis of medicanine, a new amino acid from Medicago sativa /I.F. Shinji, T. Tokuhiro, T. Takashi, N. Shigeo // heterocycles. 1984. - Vol. 22, N5.-P. 1039-1040.

132. The isolation and identification of vitamin D2 and vitamin D3 from Medicago sativa /R.L. Horst, T.A. Reinhardt, J.R. Russell, J.L. Napoli //Arch. Biochem. and Biophys. 1984. - Vol. 231, N 1. - P. 67-71.

133. West, L. Identification of oleanolic acid from saponins present in lucerne (alfalfa) root /L. West //J. Sci. Food and Agr. 1979.-Vol. 30, N 5. - P. 540-542.