Изоферменты альфа-амилазы и их генетический контроль у мягкой пшеницы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат наук Бондаренко, Людмила Сергеевна

• Бондаренко, Людмила Сергеевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Бондаренко, Людмила Сергеевна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 4 ГЛАВА 1. РАЗДЕЛЕНИЕ И ГЕНЕТИКА АМИЛОЛИТИЧЕСКИХ

ФЕРМЕНТОВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Общая характеристика амилолитических ферментов

1.2 Генетический контроль Р-амилазы зерна пшеницы

1.3 Полиморфизм и генетический контроль а-амилазы

1.4 Изменение активности амилаз в процессе созревания и прорастания зерна 26 Глава 2. УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Условия исследования

2.2. Материал исследования

2.3. Методы исследования

2.3.1. Методика фракционирования а-амилаз (К.Ф. 3.2.1.1)

2.3.2. Картирование локусов с помощью генетических маркеров

2

2.3.3. X - тест

2.3.4. Оценка сцепления между локусами самоопыляющихся популяций старших поколений

2.3.5. Оценка существенности разности выборочных средних по ^ критерию Стьюдента

ГЛАВА 3. ГЕНЕТИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ НЕКОТОРЫХ ИЗОФЕРМЕНТОВ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ ОЗИМОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ

3.1. Изучение наследования изоферментов а-амилазы прорастающего зерна озимой мягкой пшеницы

3.2. Полиморфизм изоферментов альфа-амилазы озимой мягкой пшеницы

ГЛАВА 4. СОПРЯЖЕННОСТЬ ЗИМОТИПОВ ФЕРМЕНТА АЛЬФА-АМИЛАЗЫ С КОЛИЧЕСТВЕННЫМИ ПРИЗНАКАМИ РАСТЕНИЙ

40

41

44

46

46

ОЗИМОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ 64 ГЛАВА 5. ВСТРЕЧАЕМОСТЬ ИЗОФЕРМЕНТОВ а-АМИЛАЗЫ В

КУЛЬТУРЕ ОЗИМОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ РОССИИ И УКРАИНЫ

5.1. Физико-географическая характеристика исследуемых регионов России и Украины

5.2. Географическое распределение частот встречаемости изоферментов а-амилазы в культуре озимой пшеницы. 75 ВЫВОДЫ 83 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 84 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 85 ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изоферменты альфа-амилазы и их генетический контроль у мягкой пшеницы»

ВВЕДЕНИЕ

Выращивание зерновых культур является одной из базовых составляющих России. Пшеница является основной возделываемой зерновой культурой, ценным злаком и играет главную роль в растениеводстве страны. Россия входит в тройку крупнейших поставщиков пшеницы в мире.

Качество зерна - сложное количественное свойство, которое показывает способность формировать различную хлебопекарную способность. Проблема повышения качества зерна является значимой проблемой при создании сортов пшеницы и зависит от особенностей белкового комплекса зерновки и её ферментативных систем. При селекции пшеницы наибольший интерес представляют количественные показатели, такие как: продуктивность, содержание и качество белка в зерне, устойчивость к абиотическим стрессам и т.д. Наряду со средовыми факторами, оказывающими непосредственное существенное влияние на качественные характеристики зерна, необходимо учитывать и генетическую составляющую сортов (Рибалка О.1. и др., 2012; Моргун Б.В. и др., 2013).

В настоящее время к технологическим свойствам зерна озимой пшеницы предъявляются повышенные требования. Новые сорта выделяются высокой урожайностью и, обычно, превосходят районированные по ряду показателей качества зерна (Калиненко И.Г., 1995). Но, зерно, полученное в производственных условиях, не всегда отвечает предъявляемым требованиям при его заготовках на производственные нужды (Ковтун В.И., 2006).

Развитие биохимических методов привело к тому, что перед генетикой открылись принципиально новые возможности. Одним из таких направлений стало выявление внутри- и межвидового полиморфизма белков и ферментов. Создание на основе этого полиморфизма генетических маркеров, позволяющих решать задачи чисто научного и прикладного характера. С использованием генетических маркеров могут решаться, практически, все задачи генетического анализа (Кудрявцев А., 2007).

Большим количеством работ подтверждена ценность белков и ферментов как генетических маркеров (Илличевский Н.Н, 1992). В пшенице наибольшие успехи были достигнуты при анализе запасных белков. Полиморфизм белков используют для идентификации сортов и изучения их генеалогии (Созинов, 1985). Для получения более обширных данных требуется наличие маркеров по большему количеству хромосом и плеч. Среди белковых систем пшеницы а-амилаза является одной из наиболее генетически полиморфных. Этот фермент участвует в процессе метаболизма веществ, которые определяют технологические качества зерна пшеницы. Повышение амилазной активности приводит к ухудшению качества хлеба. (Дарканбаев Т.Б., 1987; Фурсов О.В, 1987; Кг^ег Ш 1980). Знание разнообразия и закономерностей наследования различных форм а-амилазы можно использовать в селекционно-генетических исследованиях как для идентификации сортов, маркирования хромосом или их сегментов, так и для возможной непосредственной оценки связи между кодирующими а-амилазу аллелями и хозяйственно-ценными признаками пшеницы.

Цель: изучение изоферментов альфа-амилазы и их генетический контроль у пшеницы.

Задачи:

1. Изучить наследование полиморфных вариантов а-амилазы прорастающего зерна озимой мягкой пшеницы.

2. Идентифицировать и локализовать гены, контролирующие изоферменты а-амилазы прорастающего зерна озимой мягкой пшеницы быстро подвижной зоны электрофореграмм и определить расположение этих генетических факторов относительно других локусов.

3. Установить сопряженность между изоферментным составом а-амилаз и количественными признаками растений озимой мягкой пшеницы.

4. Оценить частоту встречаемости изоферментов а-амилазы в культуре озимой мягкой пшеницы в разных регионах России и Украины.

Научная новизна: Идентифицировано два новых изоэнзима а-амилазы мягкой пшеницы и установлен порядок расположения локусов, ответственных за их синтез, относительно друг друга в длинном плече хромосомы 6В озимой мягкой пшеницы. Показана связь зимотипов фермента альфа-амилазы с количественными признаками растений мягкой пшеницы. Выявлена неравномерность частот распространения некоторых вариантов а-амилазы и установлена закономерность изменения их встречаемости в разных регионах территории России и Украины.

Научно-практическое значение: На основании проведённых исследований полученные данные могут быть использованы для создания новых сортов озимой мягкой пшеницы, обладающих большей устойчивостью к прорастанию зерна на корню. Созданные генотипы озимой мягкой пшеницы используются в качестве исходного материала в селекции этой культуры ФГБНУ «Белгородский НИИСХ».

Апробация работы: Основные положения и результаты исследования, были представлены на Международных и Всероссийских научных и научно-практических конференциях: «Обогащение генетического разнообразия растений» (Харьков 2014); «Биологизация земель в адаптивно-ландшафтной системе земледелия» (Белгород, 2015); «Селекция растений: прошлое, настоящее и будущее» (Белгород, 2016).

Диссертационная работа выполнена при частичной финансовой поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 годы»

Личный вклад автора. Полевые и лабораторные исследования выполнялись лично автором или при непосредственном участии в составе научного коллектива. Автор лично проводил обработку, анализ и интерпретацию полученных результатов, подготовку публикаций и оформление рукописи.

Публикации: По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 7 - в изданиях, рекомендованных перечнем ВАК РФ.

Положения, выносимые на защиту:

1. Полиморфизм сортов по вариантам а-амилазы.

2. Генетический контроль изоферментов а-амилазы.

3. Связь наследственных факторов а-амилазы с хозяйственно-ценными признаками в культуре озимой мягкой пшеницы.

Структура и объем диссертации: Диссертация состоит из введения, пяти глав, выводов, библиографического списка и приложений. Работа изложена на 109 страницах машинописного текста, включает 14 рисунков и 12 таблиц. Библиографический список содержит 175 наименований, из них 86 - на иностранных языках.

Благодарности: Автор выражает глубокую благодарность за руководство диссертационной работы научному руководителю д.б.н., профессору В.П. Нецветаеву за постоянное внимание к работе. За помощь и поддержку сотрудникам лаборатории селекции и семеноводства озимой пшеницы.

ГЛАВА 1.РАЗДЕЛЕНИЕ И ГЕНЕТИКА АМИЛОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ (обзор литературы)

1.1. Общая характеристика амилолитических ферментов.

В основе всех жизненных процессов лежит работа биологических катализаторов белковой природы - ферментов, которые регулируют химические реакции в живой клетке. Биохимические процессы в зерне и продуктах его переработки при созревании, прорастании, хранении и переработки, выпечке хлеба происходят с обязательным участием ферментов (Казаков Е.Д и Карпиленко Г.П., 2005).

Биологические и технологические показатели качества зерна пшеницы в главной степени определяются содержанием и соотношением в нём запасных белков и углеводов, метаболизм которых при созревании и прорастании зерна находится под контролем соответствующих ферментных систем. Для формирования технологических и посевных характеристик зерна важное значение имеют амилолитические ферменты (Минеев В.Г. и Павлов А.Н., 1981; Карпиленко Г.П., 1994; Вгаг1епе Ъ., 2005).

Амилотические ферменты широко распространены в высших растениях. Они имеют большое значение для биохимических процессов, протекающих в зерне и оказывающих влияние на качественное состояние зерна при созревании, хранении зерна, а также в технологических процессах переработки растительного сырья. Под их действием происходит гидролиз крахмала с образованием декстринов и мальтозы (Ногуа1:оуа V. и др., 2000). То есть, амилазы расщепляют запасной углевод - крахмал, превращая его в легкоусвояемые продукты - растворимые сахара, которые включаются в обменные процессы любой живой клетки (Дарканбаев Т.Б. и Фурсов О.В, 1982). Злаки являются важным источником амилолитических ферментов. Их зерно, как в покоящемся, так и в проросшем состоянии содержит активные амилазы. Еще классиками биохимии Бахом А.Н. и Опариным А.И. была

установлена тесная корреляционная связь между свойствами выпекаемого хлеба и уровнем амилазной активности (Бах А.Н. и Опарин А.И., 1950). Эти ферменты гидролизируют неизменённые крахмальные зёрна и крахмальный клейстер. Гидролиз неизменённых крахмальных гранул сопровождается образованием мальтозы и постепенным изменением крахмальных зёрен (Казаков Е.Д. и Карпиленко Г.П., 2005).

Скорость расщепления амилазами зёрен крахмала разных сортов неодинакова и зависит от количества, активности фермента и от податливости крахмала действию амилазы (Кретович В.Л., 1991). Амилолитические ферменты зерна играют также важную роль в качестве муки, принадлежат к группе белков, которые по степени полиморфизма превосходят другие ферментные системы пшеницы (например, эстеразы, супероксиддисмутазы, алкогольдегидрогеназы и др.) и уступают по этому признаку только запасным белкам.

Амилазы (3.2.1.) - являются ферментами, катализирующими гидролиз крахмала и родственных полисахаридов. Они относятся к классу гидролаз (3.), подклассу гликозидаз (3.2.), подподклассу Б-гликозидаз (3.2.1.) (Шапкарин В.В., 2005).

Крахмал существует в форме а-амилозы и амилопектина. а-Амилоза состоит из длинных неразветвлённых цепей, в которых все Б-глюкозные единицы соединены а-1,4-связями. Молекулярный вес варьирует от нескольких тысяч до 500000. Полисахаридные цепи амилозы скручены в спираль. Цепи амилопектина сильно разветвлены. Ветви содержат в среднем по 12 остатков, и точки ветвления образуются приблизительно у каждого двенадцатого остатка. Остов молекулы амилопектина имеет глюкозидные связи а-1,4-типа, но связи в точках ветвления относятся к а-1,6-типу. Молекулярный вес амилопектина может достигать 1000000 (Ленинджер, 1985).

По свойствам, распространению в природе и характеру своего действия на крахмал амилолитические ферменты разделяются на несколько групп

амилазы: а-амилазы, ß-амилазы, а-глюкозидазы, фосфорилазы и ответвляющие ферменты (Hollo J., 1973). В обзоре по энзиматическому расщеплению крахмала Маннерс (Manners D.J., 1974) приводит следующие схемы возможных путей расщепления линейного и разветвлённого компонентов крахмала (рис.1):

Амилоза-

ß-Амилаза

а-Амилаза

V

Мальтоза+Мальтотриоза

Фосфорилаза

Мальтоза

Глюкозо-1 -фосфат

а-Глюкозидаза

а-Глюкозидаза

Глюкоза-^

Амилопекти»

Р-Амилаза+ +Ответвляющий энзим

Фосфорилаза+ Ответвляющий энзим

V

Мальтоза

v

Мальтоза+Мальтотриоза+а-Декстрины

а-Глюкозидаза

а-Глюкозидаза+ Ответвляющий энзим

>Глюкоза <г

V

Глюкозо-1 -фосфат

Рис. 1 Схема расщепления крахмала по Маннерсу.

Автор считает, что в энзиматическом расщеплении компонентов крахмала учавствуют пять типов ферментов. а-Амилаза (а-1,4-глюканогидролаза) занимает среди них особое место, гидролизуя вместе с другими ферментами

амилозу и амилопектин. Только а-амилаза способна расщеплять интактные гранулы крахмала (Manners D.J., 1974). Сваин и Деккер (Swain R.R. and Dekker E.E, 1966) предложили следующую схему деградации этих гранул (Рис. 2)

а-Амилаза Р-Амилаза а-Глюкозидаза

Крахмал-> Растворимые-> Мальтоза-> Глюкоза

олигосахариды

Рис.2 Схема расщепления гранул крахмала согласно Сваину и Деккеру.

На данной схеме показаны основные энзимы, которые участвуют в разрушении крахмальных гранул. Однако полный гидролиз невозможен в отсутствии девятвящих ферментов (а-1,6 - глюкозидаз), действующих на а-1,6 - глюкозидные связи полисахарида и а-декстринов (Дарканбаев Т.Б., 1982).

В зерне пшеницы присутствуют два специфичных фермента, которые участвуют в гидролизе крахмала (Pomeranz Y., 1971; Копусь М.М. и др. 2009):

1. а-Амилаза (а-1,4-глюканогидролаза, Е.С. 3.2.1.1.) является эндоамилазой, вызывающей гидролитическое расщепление а-1,4-глюкановых связей крахмала и родственных с ним углеводов до низкомолекулярных декстринов и частично до мальтозы (Казаков Е.Д., Карпиленко Г.П., 2005). Гидролиз а-1,4-глюкановых связей происходит случайно без определённого порядка. Фермент назван а-амилазой потому что он высвобождает глюкозу в а-мутамерной форме. Количество глюкозы, образуемой а-амилазой, зависит от концентрации фермента и рН среды (Tanaka Y. and Akazawa T, 1970).

2. Р-Амилаза (а-1,4-глюкан-мальтогидролаза Е.С. 3.2.1.2) расщепляет

амилозу, превращая ее в мальтозу. При действии её на крахмал образуется путем инверсии Р-мальтоза. Р-Амилаза в противоположность а-амилазе не действует на зерна нативного крахмала и слабо разжижает и декстринирует клейстеризованный крахмал. Осахаривание его происходит быстро, но прекращается при образовании около 60% мальтозы и 40 % предельного декстрина.

В зерне пшеницы Р-амилаза пребывает, главным образом, в неактивном состоянии или в связанном S-S-связями с молекулами белков глютенинов (Rowsel E. and Goad L.,1962). В процессе дозревания зерна активная р-амилаза постепенно инактивируется и переходит в латентное состояние. Выведение Р-амилазы из неактивного состояния возможно благодаря протеолизу, либо под действием химических веществ, которые восстанавливают -S-S- связи до сульфгидрильных групп -SH (Рибалка, О.1. 2011).

Основные компоненты крахмала гидролизуются ферментативным путём двумя разными способами. Амилоза может быть гидролизована ферментом а-амилазой. Этот фермент гидролизует а-1,4-связи амилозных цепей таким образом, что в конечном итоге получается смесь глюкозы и мальтозы. Продукты а-амилазного гидролиза превращаются в простые сахара под действием Р-амилазы. Этот фермент последовательно отщепляет остатки мальтозы с нередуцированного конца. Амилопектин также гидролизуется а- и Р-амилазами, но так как ни а-амилаза, ни Р-амилаза не способна расщеплять а-1,6-связи (в точках ветвления амилопектина), конечным продуктом при действии амилаз на амилопектин оказывается крупная, сильно разветвлённая "сердцевина" полисахарида, которая называется остаточный декстрин. а-1,6-Связи, находящиеся в точках ветвления, гидролизуются особыми ферментами а-1,6-глюкозидазами (Ленинджер А., 1985).

Таким образом, ни а-амилаза, ни ß-амилаза в отдельности не могут полностью гидролизировать крахмал или гликоген с образованием мальтозы. При одновременном действии обеих амилаз крахмал гидролизуется на 95%.

Активность гидролаз крахмала практически не обнаруживается в зародыше, она сосредоточена в эндосперме, в частности в его алейроновом слое, и щитке прорастающего зерна (Markert C.L., 1959, Briggs D.E., 1973).

Для а-амилазы зерна пшеницы была выделена мРНК из тотальной фракции мембранно-связанных полисом иммунопреципитацией с антителами к in vitro синтезированной а-амилазе (Mozer T.J., 1980). а-Амилазная мРНК составляла 5-10% от общего содержания РНК, её молекулярная масса - 5 х

л

10 кД. Основным индуктором биосинтеза а-амилазы зерновых является гибереллиновая кислота (Motojima K., 1982; Мамытова Н.С., 2014), однако окончательно не установлено влияет ли она на биосинтез фермента или на его секрецию. Имеются данные, указывающие на стимуляцию превращения фосфолипидов алейронового слоя и, как следствие, секрецию а-амилазы в зерне пшеницы под действием этой кислоты (Gale M.D., 1973; Мамытова Н.С., 2014). Кроме того, установлено существование в зерне пшеницы высокоспецифичных белковых ингибиторов а-амилазы, роль которых состоит в регуляции активности фермента (Warchaiewsky J.R., 1983).

Помимо субстратной специфичности а и ß-амилазы различаются по физическим и химическим свойствам. Действие ферментов зависит от ряда факторов, прежде всего от температуры и реакции среды (рН). а- и ß-Амилазы отличаются своим отношением к рН. ß- Амилаза может работать в более кислой среде (оптимальный рН 4,8), чем а-амилаза (рН 5,6-6,3). Вместе с тем ß-амилаза более термолабильна, она полностью теряет активность за 10 минут при температуре 70°С и за 20 минут при температуре 65°С, в то время как а-амилаза стабильна при этой температуре (Дарканбаев Т.Б. и Фурсов О.В., 1982, Castro G., 1999). Если ß-амилазу активируют суфгидрильные агенты, то для проявления активности а-амилазы необходимы ионы Са2+. Ряд авторов приходит к мнению, что Са2+ химически

связан с белком и эти связи придают молекуле фермента структурную жесткость, которая необходима для проявления каталитической активности (Tkachuk R., 1974; Кичакова Н. А., 1991; Saboury A.A., 2002). В отличие от р-амилазы, ферменты а-амилазы состоят из одной полипептидной цепочки с молекулярной массой 41 000 - 50 000 (Greenwood C.T., 1968; Kruger J. E., 1972). Положительное окрашивание а-амилазы в полиакриламидном геле Шифф-периодатным реактивом указывает на гликопротеиновую природу этого фермента (Okita T.W., 1979).

В литературе мало представлено сведений о содержании в различных злаках а и р - амилаз, позволяющих провести сравнение злаков между собой. Соотнесение имеющихся данных редко оказывается возможным в связи с различием использованных для анализа методов определения активности амилолитических ферментов.

Известно, что семена растений отличаются по содержанию в них а- и Р-амилазы. В не проросших семенах пшеницы и ячменя содержится только Р-амилаза; а-амилаза образуется при прорастании. Без активной а-амилазы зерно злаковых теряет способность к прорастанию. (Хакимжанов А.А., 1990). В ячмене Р-амилаза находится как в зрелом так и в прорастающем зерне.

Во ржи присутствуют оба фермента-а- и Р-амилазы, при прорастании количество и активность а-амилазы резко возрастает. В соевых бобах, не проросших и проросших встречается только Р-амилаза (Селихова О. А., 2003; Иваченко Л.Е., 2012). В не проросших семенах сорго имеется главным образом а-амилаза (Воробьева И.С., 2002).

Как и другие ферменты, амилазы могут находиться в клетке в связанном с белками виде, и тогда они лишаются гидролитической активности. Связывание амилаз с белками играет большую роль в регулировании их действия в прорастающем и созревающем зерне.

Для селекционных целей имеет важное значение то, что а-амилаза кодирующие локусы входят в группы сцепления с генами дефектов образования хролофила (сп-1), "мертвой пыльцы" (ki), реакции на

возбудителя бурой ржавчины (Lr), реакции на возбудителя мучнистой росы (Pm), восстановления фертильности при ЦМС (Rf), отзывчивости на яровизацию (Vrn) (Mcintosh R.A., 1988).

Синтез Р-амилазы кодируется тремя локусами (Рыбалка А.И., 1980), картированными в хромосомах 4А, 4D и 5А (Ainsworth C., 1983). Оказалось, что локусы, кодирующие изозимы этого фермента, находятся в одной группе сцепления с такими важными для селекции генами, как гены карликовости (Rht-1 и Rht-2), ингибитора остистости (B-1), типа развития, т.е. озимости или яровости (Vrn-1) (Mcintosh R.A., 1988).

Таким образом, а- и Р-амилазы в отличие от других ферментов расщепления крахмала и его компонентов представляют для изучения интерес в наибольшей степени. Большое внимание к исследованию амилолитических энзимов обусловлено их ролью в технологических процессах переработки зерна.

1.2.Генетический контроль р-амилазы зерна пшеницы

В настоящее время актуальным направлением генетики пшеницы является биохимико-генетическое изучение её признаков и свойств. Важным условием успешного применения методов биохимической генетики для исследования и селекционного улучшения сортов пшеницы является существование наследственных различий по каждому конкретному биохимическому признаку между сравниваемыми видами, сортами, линиями (Рыбалка А.И. и Созинов А.А. 1980).

Амилазы зерна пшеницы представляют собой сложный комплекс аллозимов, осуществляющих гидролитический распад крахмала, и кодируются несколькими мильтигенными локусами. (Nishikawa K. and Nobuchara M., 1971; Ainsworth C.C. еt al.1985.; Илличевский Н.Н., 1995).

При помощи электрофоретических и других методов исследований фракционирования учёными выявлены значительные различия между видами

пшеницы по составу ферментов. С развитием метода электрофореза запасных белков открывается возможность его использования для идентификации семенного материала (Kirkman M.A. at al. 1982; Mecham D. е1 al, 1985; Pogna N.E. еt al. 1988; Демкин П.П, 1988). У пшеницы для этой цели удобны ферменты а и ß-амилазы (Конарев В.Г., 1983; Cook R.J. and Morgan A.G, 1986; Большаков Н.В., 1997).

Наибольшие основательные исследования генетического полиморфизма ферментов а- и ß-амилазы зерна пшеницы были выполнены сотрудниками Института селекции растений (Кембридж, Великобритания). Для электрофоретического разделения амилаз они использовали метод изоэлектрофокусирования, имеющий большую разрешающую способность. (Gale M. and Baird S., 1983; Ainsworth C^t al, 1985).

Первые исследования генетического контроля ß-амилазы зерна пшеницы были выполнены учёными Национального Института Сельскохозяйственных Исследований Франции (Auriau P^t al., 1976; Joudrier P.M. and Acad. C. R., 1974,)

Фермент ß-амилаза относится к числу генетически полиморфных по электрофоретическому составу. P. M. Joudrier и M. Bernard исследовали методом электрофореза более 200 сортов мягкой пшеницы, обнаружили 6 отличающихся по составу типов зимограмм ß-амилазы (Joudrier P. M. and Bernard M., 1977).

Позднее, в Великобритании учёными Института селекции были проведены основательные исследования генетики ß-амилазы зерна пшеницы. Исследовав изоферментный состав ß-амилазыв зерне серии нуллисомно-тетрасомных и дителосомных линий пшеницы сорта Чайниз Спринг и изучив наследование изоферментов ß-амилазы у линий пшеницы с межсортовым замещением хромосом и гибридов от межсортовых скрещиваний, авторы пришли к выводу, что генетический контроль ß-амилазы осуществляется двумя группами локусов: ß-Amy-1 и ß-Amy-2. Локус, обозначенный ß-Amy-1, расположен в длинном плече хромосомы 4А (локус ß-Amy-A1) и 4D (ß-Amy-

D1). Локус ß-Amy-2 находится в длинном плече хромосомы 5А (локус ß-Amy-А2). В локусе ß-Amy-A1 было идентифицировано 2 аллеля, в локусе ß-Amy-D1 - пять аллелей, и два аллеля идентифицировано в локусе ß-Amy-A2 (Ainsworth C., е1 al, 1983). Авторами этого исследования была сделана попытка обозначить положения вариантов локусов ß-Amy на генетической карте соответствующих хромосом пшеницы относительно других маркерных признаков.

Украинские учёные А.И. Рыбалка и А.А. Созинов изучали характер наследования отдельных изоформ ß-амилазы с целью выяснения роли отдельных генов контроля синтеза ß-амилазы в связи с изменчивостью и ряда других признаков и свойств пшеницы. Ими на примере двух комбинаций скрещивания Чайниз Спринг и Элгин (США), Одесская 51 и Ликафен (Австралия), которые отличаются по компонентному составу ß-амилазы, было показано, что в зёрнах гибридов F1, присутствуют все характерные для родительских зимограмм компоненты ß-амилазы. Интенсивность проявления компонентов а-амилазы в F1 зависит от направления скрещивания и определяется дозой соответствующих материнских или отцовских генов в триплоидном эндосперме. Изучение расщепления по составу ß-амилазы в F2 показало, что различия между исследуемыми комбинациями обусловлены парой независимо наследуемых локусов с кодоминантным эффектом действия (Рыбалка А.И. и Созинов A.A., 1980).

Аналогичная закономерность была установлена ранее для ß-амилаз, выделяемых из эндосперма трис-HCI буфером (Dabrowska T. and Jakubiec. 1977). Авторами показано сцепленное наследование компонентов ß-амилазы общей. Причем из 110 изученных образцов гибридов F2 комбинации скрещивания Чайниз Спринг х Элгин не было обнаружено ни одного случая рекомбинации. Гены, контролирующие этот фермент, локализованы в хромосоме 4D.

Айнсворт и соавторы картировали гены ß-амилазы на хромосомах 4А,

4Dи 5А пшеницы. (Ainsworth C. еt al, 1983).

1.3. Полиморфизм и генетический контроль а-амилазы.

Среди белковых систем фермент а-амилаза является одной из наиболее генетически полиморфных систем, известных у пшеницы. Её можно использовать в селекционно-генетических исследованиях с целью идентификации сортов (генотипов), маркирования хромосом или их сегментов, изучения взаимосвязи между кодирующими амилазу аллелями и хозяйственно-ценными признаками и свойствами пшеницы.

Вопрос о функциональной и молекулярной гетерогенности а-амилаз представляет интерес как в плане возможности использования фермента в качестве маркеров полигенных признаков, так и в связи с его участием в формировании качества зерна.

Известно, что а-амилаза контролируется двумя сериями гомеологичных локусов, находящихся в 6 и 7 группах хромосом (Nishikawa K., 1971; Gale M.D., 1983). Согласно международной номенклатуре, запись a-Amy-B1 обозначает локус серии a-Amy-1, локализованный в хромосоме 6В, запись a-Amy-D2 -локус серии a-Amy-2, находящийся в хромосоме 7D и т.д. Изозимы а-амилазы обозначаются как а-AMY-1 для группы локусов a-Amy-1 ,a-AMY-1 для a-Amy-2 и т.д. В соответствии с общепринятыми нормами, обнаруженные локусы принято номеровать в порядке обнаружения (IUPAC-IUB, 1971).

Аллели конкретных локусов обозначаются строчными латинскими буквами, например a-Amy-B1b обозначает определённый аллельный вариант локуса a-Amy-B1 хромосомы 6В (Илличевский Н.Н., 1992).

Опубликован каталог аллелей, выявляемых с помощью метода изоэлектрофокусирования изозимов а-амилазы, а так же список сортов, имеющие те или иные аллели (Ainsworth C., 1985). Однако при использовании разных систем разделения белков возникает

проблема соответствия полученных экспериментальных данных опубликованным ранее.

Существует несколько форм этого фермента. Количество идентифицированных изоферментов а-амилазы зависит от конкретного сорта и от разрешающей способности используемых методов (Muralikrishana and Nirmala, 2005). Различными исследователями отмечается различная чувствительность а-амилаз зерна к нагреванию, увеличение термостабильности фермента по мере прорастания (Frydenberg O. and Nielsen G.- 1966; Hiev S.V. 1972; Castro G., 1999).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бондаренко, Людмила Сергеевна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Атлас Белгородской области. Природные ресурсы и экологическое состояние. - Белгород, 2005. 179 с.

2. Бах А.Н. Собрание трудов по химии и биохимии / Бах А.Н., Опарин А.Н., Венер Р.А. - Москва: Изд-во АН. СССР, 1950. - 615 с.

3. Бельтюков Л.П. Применение удобрений под зерновые культуры на Дону / Л.П. Бельтюков, А.А. Гриценко. - Зерноград, 1993. - 226 с.

4. Беркутова Н.С. Оценка и отбор зерновых культур на устойчивость к прорастанию в колосе / Беркутова Н.С., Буко О.А. - М., 1982. - 55 с.

5. Биохимия: сборник лабораторных работ / В.В. Шапкарин, А.П. Королев, С.Б. Гридина, Е.П. Зинкевич // Кемеровский технологический институт пищевой промышленности.- Кемерово, 2005.- 84 с.

6. Бишарев А.А. Исходный материал для селекции озимой ржи на продуктивность и качество зерна в Среднем Поволжье: Диссертация кандидата с.-х. наук: 06.01.05 / Бишарев Алексей Александрович. - Саратов, 2004. - 168 с.

7. Большаков Н.В. Пути ускоренного размножения и сохранения чистоты сортов зерновых культур в нечерноземном центре России: автореф. дис. доктора с.-х. наук: 06.01.05 / Большаков Николай Васильевич.- М., 1997.43 с.

8. Бушук В. Рожь. Производство, химия и технология / Бушук В., Кэмпбел У.П., Древе Э. - М., 1980. - 247 с.

9. Воробьева И. С. Оценка эффективности использования модифицированного метода определения числа падения для изучения углеводно-амилазного комплекса зерна ржи: диссертация ... кандидата биологических наук: 03.00.04. / Воробьева Ирина Сергеевна - Москва, 2002. -146 с.

10. Дарканбаев Т. Б. Ферменты и качествозерна: научное издание / ред. Дарканбаев Т.Б. - Алма-Ата: Наука, 1987. - 174 с.

11. Селихова О.А. Генетические и экологические особенности биохимического состава семян исходного материала для селекции сои: автореферат дис. ... кандидата сельскохозяйственных наук: 06.01.05 / Селихова Ольга Александровна/ Примор. науч.-исслед. ин-т сел. хоз-ва. - п. Тимирязевский, 2003. - 25 с.

12. Данилкин Н.М. Генетический анализ признаков продуктивности и устойчивости к прорастанию на корню у яровой тритикале (х ТгШсоБеса1е Wittm.): автореферат дис. ... кандидата биологических наук: 03.00.15, 06.01.05 / Данилкин Николай Михайлович; [Место защиты: Рос.гос. аграр. ун-т]. -Москва, 2009. - 15 с.

13. Копусь М.М. Генетический полиморфизм амилолитических ферментов зерна пшеницы и генетика ферментов биосинтеза крахмала /Копусь М. М., Н. Г. Игнатьева, Н. Е. Васюшкина, Н. С. Кравченко, Е. М. Копусь // Зерновое хозяйство России Зерновое хозяйство России. - 2009. - № 4. - С. 23-27.

14. ГОСТ 9383-90 Пшеница. Требования при заготовках и поставках.

15. ГОСТ 30498-97 Зерновые культуры. Определение числа падения.

16. Грабовец А. И. Итоги селекции и роль озимой тритикале при производстве зерна и кормов / А. И. Грабовец, А. В. Крохмаль // Вестн. РАСХН. - 2009. № 1.-С.7-10.

17. Давыдова Н. В. Селекция яровой пшеницы на урожайность и качество зерна в условиях Центра Нечернозёмной зоны Российской Федерации: диссертация ... доктора сельскохозяйственных наук: 06.01.05 / Давыдова Наталья Владимировна; [Место защиты: Науч.-исслед. ин-т сел. хоз-ва Центральных р-нов Нечерноземной зоны]. - Немчиновка, 2011. - 360 с.: ил. Селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений

18. Дарканбаев Т.Б., Фурсов О.В. - В кн.: Тез. докл. Второй конф. биохимиков республик Средней Азии и Казахстана / Дарканбаев Т.Б., Фурсов О.В.- Биохимия растений. Фрунзе: Илим, 1976, с.56.

19. Дарканбаев Т.Б.- В кн.: Тез.докл. 1-го Всесоюз. Совещ. По хемосистематике и эволюционной биохимии высших растений / Дарканбаев Т.Б., Фурсов О.В., Хайдарова Ж.С. М.: Наука, 1979, с.22.

20. Дарканбаев Т.Б. Изоферменты а-амилазы зерна некоторых злаковых / Дарканбаев Т.Б., Фурсов О.В., Хайдарова Ж.С. // Физиология и биохимия культурных растений 1980. Т. 12 №3. С. 258-262.

21. Дарканбаев Т.Б. Амилазы зерновых и регуляция их активности / Дарканбаев Т.Б., Фурсов О.В.// Успехи биологической химии. - М., 1982. -Т.22. - С.137-151.

22. Демкин П.П. Сортовая идентификация семян. В кн.: Семеноводство зерновых культур: агроэкология, организация, технология,-М.-1988.- С. 168-173.

23. Державний реестр сорив рослин придатних для поширення в Укра!ш на 2015 рш, Киш, 2015, С. 15-26.

24. Державний реестр сорив рослин придатних для поширення в Укра!ш у 2013 рощ, Кив, 2013 (10.11.2015 http://ldni.sumy.ua/downloads/reestreu-2013.pdf)

25. Иваченко Л.Е. Ферменты как маркеры адаптации сои к условиям выращивания: автореферат дис. ... доктора биологических наук: 03.02.08 / Иваченко Любовь Егоровна; [Место защиты: Моск. гос. обл. ун-т]. - Москва, 2012. - 46 с.

26. Игнатенко И.С. Влияние экологических условий года репродукции семян на развитие амилолитической активности в прорастающих семенах ярового ячменя / Игнатенко И.С.// Научный журнал КубГАУ, №70 (06). 2011 г. с. 171-180.

27. Илличевский Н.Н. Полиморфизм и генетический контроль а-амилазы у пшеницы : диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.15 / Илличевский Николай Николаевич - Москва, 1992. - 143 с.: ил.

28. Илличевский Н.Н. Полиморфизм и генетический контроль а-амилазы у отечественных сортов яровой мягкой пшеницы / Илличевский Н.Н, Метаковский Е.В, Созинов А.А. // Генетика .- 1989.- Т.15 №12 с. 21762186.

29. Илличевский Н.Н. Полиморфизм а-амилазы яровой твёрдой пшеницы / Илличевский Н.Н., Кудрявцев А.М., Метаковский Е.В. // Тезисы докладов VII Всесоюзный симпозиум «Молекулярные механизмы генетических процессов», 1990 г., (Москва 20-23 марта 1990 г.), с. 145.

30. Илличевский Н.Н Анализ родословных сортов мягкой пшеницы на основе изучения полиморфизма а-амилазы / Илличевский Н.Н., Кудрявцев А.М., Упелник В.П., Метаковский Е.В.// Генетика.- 1995,- Т. 31.- №12.-С.1650-1654.

31. Казаков Е.Д. Биохимия зерна и хлебопродуктов / Казаков Е.Д., Карпиленко Г.П. С-Пб.: ГИОРД, 2005. - 512с.

32. Калиненко И.Г. Селекция озимой пшеницы / И.Г.Калиненко - М.: Аграрная наука, 1995. - 220 с.

33. Карпиленко Г.П. Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пивоваренного ячменя и пшеницы на основе направленного изменения агрофона: дисс. докт. техн. наук. 05.18.02 / Карпиленко Геннадий Петрович. - 1994. 322 с.

34. Ковтун В.И. Селекция озимой пшеницы на юге России / В.И. Ковтун, Н.Е. Самофалова. - Ростов н / Д. 2006. - 480 с.

35. Костин В.И. Физиологический механизм воздействия пектина и

микроэлементов при прорастании семян зерновых культур / В.И.

Костин, В.А. Исайчев, О.Г. Музурова // Вестник РАСХН. - 2006, №4 (июль-август).- С 38-39.

36. Кретович В.Л. Основы биохимии растений /Кретович В.Л. - М.: «Высшая школа», 1971 , С. 81 ,87.

37. Кретович В.Л. Биохимия зерна и хлеба / Кретович В.Л. - М.: Наука, 1991. - 136с.

38. Козьмина Н.П. Биохимия зерна и продуктов его переработки / Козьмина Н.П. - М.: Колос, 1976.-359 с.

39. Кичакова Н.А. Выделение и изучение свойств термостабильной альфа-амилазы Bacillus sp. 86: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.07. / Кичакова Наталья Александровна. - Киев, 1991. - 16 с.

40. Конарев В.Г. Белки растений как генетические маркеры / Конарев В.Г. - М., 1983.-320 с.

41. Корочкин Л.И. Генетика изоферментов / Корочкин Л.И., Серов О.Л., Пудовкин А.И. и др. // М.: Наука, 1977, 278 с.

42. Крупнов В.А. Устойчивость к предуборочному прорастанию яровой мягкой пшеницы с 6Agi(6D)- хромосомой от Agropyron intermedium / Крупнов В.А., Антонов Г.Ю., Дружин А.Е., Крупнова О.В. // Вавиловский журнал генетики и селекции.- 2012.- Т. 16, № 2.- С. 444-450.

43. Крупнов В.А. Устойчивость к предуборочному прорастанию краснозерной и белозерной мягкой пшеницы / Крупнов В.А., Антонов Г.Ю., Сибикеев С.Н., Крупнова О.В. // Современные проблемы почвозащитного земледелия и пути повышения устойчивости зернового производства в степных регионах: Сб. докл. междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 50-летию РГП «НПЦ зернового хозяйства им. А.И. Бараева». МСХ РК - Шортанды, 2006. Ч. 2. С. 87-92.

44. Крупнова О.В. Качество зерна у устойчивых и восприимчивых к предуборочному прорастанию генотипов пшеницы / Крупнова О.В., Сибикеев С.Н., Крупнов В.А. и др. // Сб. науч. тр., посвящ. 135-летию со дня рождения Г.К. Мейстера и 100-летию со дня основания Аркадак. опыт. станции. ГНУ НИИСХ Юго-Востока Россельхозакадемии. Саратов: Ракус, 2009. С. 113-119.

45. Кудрявцев А.М. Создание системы генетических маркеров твердой пшеницы (T. durum Desf.) и ее применение в научных исследованиях и практических разработках : автореферат дис. ... доктора биологических наук : 03.00.15 / Ин-т общ.генетики им. Н.И. Вавилова РАН. / Кудрявцев Александр Михайлович - Москва, 2007. - 47 с.

46. Кудрякова Н.В. Генетика амилаз и устойчивость ржи к прорастанию в колосе / Кудрякова Н.В., Хорева В.И., Кобылянский В.Д., Лапиков Н.С. //Селекция ржи.- Л., 1990. С.120- 126, 260-265.

47. Ленинджер А. Основы биохимии. Том 1 Перевод с английского. -М.: Мир, 1985.- 369 с. - с ил.

48. Лобашев М.Е. Генетика. / Лобашев М.Е. - Л.: ЛГУ.- 1967.- 751 с.

49. Лялина Е.В. Использование генетически обусловленного полиморфизма запасных белков в семеноводстве ярового ячменя: автореферат дис. ... кандидата биологических наук: 06.01.05, 03.00.15 / Лялина Елена Владимировна. - Москва, 2000. - 19 с.

50. Мамытова Н.С. Роль различных молекулярных форм а-амилазы в формирование качества зерна сортов яровой пшеницы: диссертация кандидата биологических наук: 03.02.07 / Мамытова Нургуль Сабазбековна. -Казахстан, Алматы, 2014.- 102 с.

51. Мамытова Н.С. Гиббереловая и абсцизовая кислоты как регуляторы а-амилазы зародыша со щитком и алейронового слоя зерна пшеницы / Мамытова Н.С., Хакимжанов А.А., Фурсов О.В. // Физиология растений и генетика.- 2014.- № 2.- Т. 46 .- С 143-150.

52. МинеевВ. Г. Агрохимические основы повышения качества зерна пшеницы / В.Г. Минеев, А.Н.Павлов. - М.: Колос, 1981. -288 с.

53. Моргун Б.В. Молекулярно-генетический анализ сортообразцов озимой пшеницы, выращенных в различных экологических зонах Украины / Моргун Б.В., Степаненко А.И., Чугункова Т.В. // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2013.- Т 15.- № 3 (4).

54. Неттевич Э.Д. Качество зерна яровой мягкой пшеницы в связи с устойчивостью к прорастанию на корню / Неттевич Э.Д. // Докл. РАСХН.- 1999.- № 6.- С. 6 -8.

55. Нецветаев В.П. Расположение Р-амилазного локуса (Bmy 1) в хромосоме 4 ячменя / Нецветаев В.П. //Цитология и генетика.- 1993.- Т.27.-№ 5.- С. 74-78.

56. Нецветаев В. П. Распределение аллелей супероксиддисмутазного локуса, SodS, в культуре ярового ячменя по территории бывшего СССР / Нецветаев В. П., Поморцев А.А., Крестинков И.С. // Генетика.- 1995.- Т.31.-№12.- С. 1664-1670.

57. Нецветаев В.П. Селективная ценность и геногеография аллелей бета-амилазного локуса Bmy 1 у ячменя / Нецветаев В. П., Поморцев А.А., Чапля А.Е.// Генетика.- 2000.- Т.36.- №1.- С.62-70.

58. Нецветаев В.П. Выявление наследственной изменчивости зерновых по зимостойкости / Нецветаев В.П., Нецветаева О.В // Генетика. -2004.- Т. 40, №11.- С. 1502-1508.

59. Нецветаев В. П. Руководство по генетическому анализу растений: учебно-методическое пособие для студентов 4-5 курсов биол. спец. ун-тов, аспирантов и науч. сотрудников / В. П. Нецветаев; РАСХН, БелГУ, Белгород НИИСХ. - Белгород: БелГУ, 2008. - 36 с.

60. Нецветаев В.П. Генетический контроль некоторых изоферментов альфа-амилазы озимой мягкой пшеницы / Нецветаев В.П., Акиншина О.В. Бондаренко Л.С.// Генетика.- 2012.- Т. 48.- №3.- С. 401-404. (Netsvetaev V.P., Akinshina O.V., Bondarenko L.S. Genetic control of several a-amylase isoezymes in winter hexaploid wheat // Russian J. of Genetics.- 2012.- V. 48.- No. 3.- P. 401404.

61. Нецветаев В.П. Особенности изоферментов альфа-амилазы у цитогенетически различных пшениц / Нецветаев В.П., Бадаева Е.Д. // Генетика.- 2014.- Т. 50.- №7.- С. 825-830. (Netsvetaev V.P., Badaeva E.D.

Characteristics of Alfa-Amylase Isozymes in Cytogeneticaly Different Wheat Cultivars // Russian Journal of Genetics, 2014, Vol. 50 No 7, pp. 722-727.)

62. Нецветаев В.П. Генетический контроль вариантов альфа-амилаз мягкой пшеницы и сопряженность зимотипов фермента с количественными признаками растений / Нецветаев В.П., Бондаренко Л.С., Моторина И.П.// Научные ведомости БелГУ Серия. Естественные науки. - Белгород: БГУ.-2015.- №9 (206).- Вып. 31.- С. 80-91.

63. Нецветаев В.П. Полиморфизм альфа-амилаз мягкой пшеницы и сопряженность зимотипов фермента с количественными признаками растений / Нецветаев В.П., Бондаренко Л.С. Моторина И.П. // Цитоголия и генетика.- 2015.- Т. 49.- №6.- С. 21-29. (V. P. Netsvetaev, L. S. Bondarenko, and I. P. Motorina. Polymorphism of Alpha_Amylase and Conjugation in Common Wheat Enzyme Types with Quantitative Traits of Plants // Cytology and Genetics, 2015, Vol. 49, No. 6, pp. 364-371.

64. Нецветаева О. В. Наследственная дифференциация сортов зерновых колосовых культур по зимостойкости: автореф. дис. ...канд. биол. наук: 03.00.15: 06.01.05 / Нецветаева Ольга Васильевна. - Москва, 2005. - 20 с.

65. Плохинский Н.А. Алгоритмы биометрии /под ред. акад. АН УССР Б. В. Гнеденко. - М.: Изд-во Московского государственного университета, 1980. - 150 с.

66. Попереля Ф.А. Прибор для электрофореза белков в геле / Попереля Ф.А., Асыка Ю.А., Лазарев Ю.Д.- Авторское свидетельство СССР. 1991. № 1682899 от 7.10.1991.

67. Рибалка О.1. Сучасш дослщження якост зерна пшенищ у свт: генетика бютехнолопя та харчова щннють запасних бшюв / Рибалка О.1., Моргун Б.В., Починок В.М. // Физиология и биохимия культурных растений.- 2012.- T. 44.- № 1.- С. 3-22

68. Рибалка, О. I. Яюсть пшенищ та п полшшення: моногр. / О. I. Рибалка ; НАН Украши, 1н-т фiзюлогriрослин i генетики, НААН Украши,

Селекц.-генет. ш-т, Нац. центр насшнезнавства та сортовивч. - Кшев : Логос, 2011. - 495 с.: рис., табл.

69. Рокицкий П.Ф. Введение в статистическую генетику / Рокицкий П.Ф. - Минск: Вышейшая школа.-1974.-442 с.

70. Рыбалка А.И.Генетический анализ альфа-амилазы зерна пшеницы / А.И. Рыбалка, О.П. Боделан, Н.А. Литвиненко // Генетика. - 1989.Т. 25. - № 12. - С. 2187 - 2198.

71. Рыбалка А.И. Генетический анализ Р-амилазы зерна пшеницы / Рыбалка А.И., Созинов А.А. // Генетика.- 1980.- Т. 16.- №6.- с. 1059-1067.

72. Самофалова Н.Е. Сорта и гибриды. Каталог / Н.Е.Самофалова,

0.В. Скрипка, Д.М.Марченко, Е.Г.Филиппов, А.А.Донцова, П.И.Костылев, Г.Я. Кривошеев, Н.А. Ковтунова, В.В. Ковтунов, С.А. Игнатьев .- Ростов-на-Дону: ЗАО «Книга», 2016.- С. 29-30.

73. Симонова Е.Н. Активность ферментов в прорастающих семенах мягкой озимой пшеницы после обработки электроактивированными растворами / Симонова Е.Н., Игнатьева Н.Г. // Агрономия, лесное хозяйство и биологические науки. - 2011.- № 3(15).- С. 81-86.

74. Созинов А. А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / А. А. Созинов; АН СССР, Ин-т общ.генетики им. И. Вавилова; отв. ред. Л. И. Корочкин. - Москва: Наука, 1985. - 271 с.

75. Соловиченко, В. Д. Изменение гумусного состояния почвы при антропогенезе / В. Д. Соловиченко, В. Н. Самыкин, И. В. Логвинов // Биологизация адаптивно-ландшафтной системы земледелия - основа повышения плодородия почвы, роста продуктивности сельскохозяйственных культур и сохранения окружающей среды: материалы всерос. науч.-практ. конф. Белгор. НИИСХ Россельхозакадемии, Белгород, 12-13 июня 2012 г.: в 2 т. / РАСХН, Белгор. НИИСХ; гл. ред. С. И. Тютюнов. - Белгород, 2012. - Т.

1. - С. 282-286.

76. Соловов Д.П. Устойчивость яровой мягкой пшеницы к предуборочному прорастанию в Нижнем Поволжье: Автореф. дис. ... канд.

с.-х. наук. 06.01.05 / Соловов Дмитрий Петрович. - Саратов: ГНУ НИИСХ Юго-Востока, 2003. 23 с.

77. Тучковенко Ю.С. Оценка влияния антропогенных источников на качество вод одесского района Северо-западной части Черного моря / Тучковенко Ю.С., Иванов В.А., Сапко О.Ю.; НАН Украины, Морской гидрофизический институт, Одесский государственный экологический университет.- Севастополь, 2011. - с. 169, ил. 61, табл. 43, библ. 74.

78. ФГБУ «Госсорткомиссия Российской Федерации по испытанию и охране селекционных достижений» реестры растений, 10.11.2015 (gossort@gossort. com)

79. Фоменко М.А. Трансгрессивная изменчивость и селекция на продуктивность у озимой мягкой пшеницы на Дону / Фоменко М.А., Грабовец А.И. // Зерновое хозяйство России.- 2013.- № 1.- С. 34-39.

80. Фурсов О.В. Способ электрофоретического разделения изоферментов а-амилазы. / Фурсов О.В., Дарканбаев Т.Б. Авторское свидетельство 681362 - Бюл. Изобрет., 1979, №31.

81. Фурсов О.В., Дарканбаев Т.Б. Аникеева Л.А., Хайдарова Ж.С. - В кн.: Тр. 14-го Международного генетического конгресса / Фурсов О.В., Дарканбаев Т.Б. Аникеева Л.А., Хайдарова Ж.С. - М.: Наука, 1978, т. 1, с. 164

82. Фурсов О. В. Свойства и особенности амилаз зерна злаковых. Ферменты и качество зерна. / Фурсов О. В., Кузовлев А.А., Акаева М.М.-Алма-ата: Наука, 1987, с. 41-61.

83. Фурсов О.В. Компонентный состав а-амилазы как показатель генетических и технологических различий образцов пшеницы / Фурсов О.В., Хайдарова Ж.С., Дарканбаев Т.Б. - Сельскохозяйственная биология.- 1984.-№ 9.- С. 35-38.

84. Хакимжанов А.А. Амилолитические ферменты зерна риса и их регуляция автореферат дис. ... кандидата биологических наук : 03.00.04. / Хакимжданов Айдар Атымтаевич. - Алма-Ата, 1990. - 24 с.: ил.

85. Хакимжанов А.А. Очистка и некоторые свойства ингибитора эндогенной а-амилазы зерна пшеницы / Хакимжанов А.А., Кузовлев В.А., Мамытова Н.С., Фурсов О.В. // Известия национальной академии наук Республики Казахстан. Серия биологическая и медицинская.- 2014.- № 5.- С. 94-97.

86. Хорева В.И. Генотипическая изменчивость альфа-амилазы у клонов с различной устойчивостью к прорастанию в колосе / ХореваВ.И., Кудрякова Н.В., Кобылянский В.Д.,Лапиков Н.С. // С.-х. биология.- 1985. -№2. - С.43-45.

87. Чапля А.Э. Зв'язок генотишчно1 мшливост бета-амшазного локусу Bmy 1 та кшьюсних ознак продуктивност i пивоварности ярого ячменю (Hordeum vulgare) / Чапля А.Э., Нецветаэв В.П. // Доповщи Нацiональноi академп наук Украши.- 1999.- №10.- С. 196-203.

88. Янковский Н.Г. Влияние сроков посева и предшественников на урожайность и посевные качества семян твердой озимой пшеницы / Янковский Н.Г., Попов А.С., Вахрушев Н.А., Кудашкина Е.Б. // Зерновое хозяйство России.- 2013.- № 1.- С. 46-50.

89. Якушкина Н.И. Физиология растений: учебник для студентов вузов, обучающихся по специальности 032400 «Биология» / Н.И. Якушкина, Е.Ю. Бахтенко. - М.: Гуманитар. Изд. центр ВЛАДОС, 2005. 321 с.

90. AlexandrescuV., MichailescuF. - Rev. Roum. Biochim., 1970, 7, 3.

91. AlexandrescuV., MichailescuF. - Rev. Roum. Biochim., 1973, 10, 89.

92. Alexandrescu V., MichailescuF. - Rev. Roum. Biochim., 1975, 12,1.

93. Alexandrescu V., MichailescuF. - Rev. Roum. Biochim., 1975, 12,

261.

94. Ainsworth C. Alelic variation of а-amylase loci in hexaploid wheat / Ainsworth C., Doherty P., Erwards K.G.K. et al. // Theor. Appl. Genet.- 1985.- V. 70.- № 4.- P. 400-406.

95. Ainsworth C. The genetics of P-amylase isozymes in wheat. 1. Alelic variation among hexaploid varieties and intrachromosomal gene locations / Ainsworth C., Gale M., Baird S. // Theor. Appl. Genet. - 1983.- V. 66.- P. 39-49.

96. Alard R.W. Formulas and tables to facilitate the calculation of recombination values in heredity / Alard R.W. // Hilgardia.- 1956.- V. 24.- No.10.-P. 235-278.

97. Auriau P. Variabilite genetiq ue delacomposition des gliadines, glutenines, P-amylases, a-esterases, peroxydases, et phosphanatases acides duble (Triticum aestivum) / Auriau P., Autran J-C., Charbonnier L., Doussinault G., Feillet P., Godon B., Grignac P., Joudrier P., Kobrehel K., Koller J., Rousset M., Rivalant S. // Ann. Amelior. Plantes. - 1976. - V. 26.- P. 51-66.

98. Braziene Z. Paplausriene V. Salyrliniumieziugrududerlius, jororybesrodir-liaiirjuossalygojantysveirsniai / Braziene Z., // Zemesvriomorslai.-2005.- № 1.- P. 31- 39.

99. Briggs D.E. Generation of a-amylase in germinating Hordeum Diction / Briggs D.E, Glutenbuck V.J. // Phytochemistry.- 1973. - v.12. - №5.- P. 10471053.

100. Bouaziz, A. Consumption of wheat seed reserves during germination an dearly grow this affected by soil water potential / A. Bouaziz, D.R. Hicks // Plant and Soil. - 1990. - Vol. 128. - № 2.- P. 161 - 165.

101. Castro G. Studies on a-amylase production by Bac. Licheniformis MIR-61 / Castro G., Baigori M., Sinerir F. // Acta Biotechnol. — 1999. — V. 19. -N 3. - P. 263

102. Cook R. J. A revised classification on barley cultivars using a standard reference electrophoresis method / Cook R. J., Morgan A. G. // J. Nat. Inst. Agr. Bot. - 1986. - V. 17. - P. 169-178.

103. Dabrowska T., Jakubiec. Inheritance of P-amylases in wheat (Triticum asetivum). - Genet. Pol. - 1977. - V. 18. - P. 135-139.

104. Frydenberg O., Nielsen G.- Heredilas.- 1966.- V. 54.- P.123.

105. Fursov O.V. Purification, separation and some properties of a-amylase components of germinating wheat grains / Fursov O.V., Khaydarova J.S., Darkanbaev T.B. // Biochem. Phisiol. Pflanzen. - 1986. - Vol. 81. - P. 177-787.

106. Gale M. D. Genetic control of a-amylase production in wheat / Gale M. D., Law C. N., Chojecky A. // Theor. and.Appl. Genet.- 1983.- V. 64.- № 4.- P. 309-316.

107. Gale M.D. An aamylase gene from Aegilops ventricosa transferred to bread wheat together with a factor for eyespot resistance / Gale M.D., Scott P.R., Law C.N. et al // Heredity.- 1984.- V.52.- №3.- P. 431-436

108. Groat J.I. Genetic control of gibberellic acid / Groat J.I., Briggs D.E. // Phytochemistry.- 1969. - V. 8.- P. 1615-1627.

109. Gale M.D. Intensiviti to gibberellin in draw wheat / Gale M.D., Marshal G.A. // Ann. of Botany.- 1973.- V.37.- № 152.- P. 729-732.

110. Greenwood C.T., Milne E.A. Adv. Carbohydr. Chem., 1968, 23, 281.

111. Joudrier P M Spesificite genetiq ue de la P-amylases chez Triticum aestivum: existence de cing types varietaux de zymogrammes / Joudrier, P M Acad C. R. Sci. Paris. 1974, v. 278. p. 1777-1780.

112. Joudrier P. M. Responsabilite du genome D surcertaines isozymes P-amylase du grain debletender / Joudrier P. M., Bernard M. // Ann. Amelior. Plantes.- 1977.- V. 27.- 35.

113. Hiev S. V. -Докл. Болг. АН, 1972, 25, с. 883

114. Hollo J., Laszlo E., Hoschke A. Starke, 1973, V. 25, № 1.

115. Horvatova V. Review Amy lolytic enzymes: the yr specicities, origins and properties / Horvatova V., Janecek S., Sturdik E. // Biologia, Bratislava, 2000.-№55(6).- P.605-615.

116. Humphreys D.G. Methods for characterization of preharvest sprouting tolerance in a wheat breeding program / Humphreys D.G., Noll J // Euphytica.-2002.- V. 126.- P. 61-65.

117. IUPAC-IUB Comission on biochemical nomenclature. // Arch. Biochem. Biophys. - 1971.- V. 147.- P. 1-3.

118. King, R.W. Water uptake in relation to pre-harvest sprouting damage in wheat: grain characteristics / R.W. King // Australian Jounal of Agricultural Resesearch.- 1984. - Vol. 35. - № 3.- P. 337 - 345.

119. Kirkman M.A. The affect nitrogen nutrition on the lysine content and protein composition of barley seeds / Kirkman M.A., Shewry P.R., Miflin B.J. // J. Sci. Food Agr.- 1982.- V. 33. - №2. - P. 115-127.

120. Kruger J. E., Tkachuk R. - Cereal Chem.- 1969.- V. 46.- P. 219.

121. Kruger J. E. - Cereal. Chem.- 1972.- V. 49.- P. 391.

122. Kruger J. E. Progress in the chemistry of some quality-affecting enzymes resulting from preharvest sprouting damage / Kruger J. E. // Cereal Res. Cummun.- 1980.- V. 8.- P. 39-48.

123. Lazarus C.M. a-Amylase genes of wheat are two multigene families which are differentialy expressed / Lazarus C.M., Baulcombe D.C., Martienssen R.A. // Plant. Mol. Biol.- 1985.- V.5.- P. 13-24.

124. Lenton J.R. Gibberellins and a-amylase gene expression in germinating wheat grains / Lenton J.R., Appleford N.E.J., Croker S.J. // Plant Growth Regulation. - 1994. - Vol. 15. - P. 261 - 270.

125. Livesley M.A. a-Amylase izoenzymes in aged wheat aleurone layers / Livesley M.A. // Biochem. Soc. - Trans. - 1991 - V 19. - №4.- P 360-364.

126. Lunn I.D. Ann. Appl. Biol. / Lunn I.D., Kettlewell P.S., Major B.J., and Scott R.K. - 2001.- V. 138.- No. 2.- P. 207-214.

127. Lunn G.D. Mechanisms leading to excess alpha-amylase activity in wheat (Triticum aestivum) grain in the U.K. J. / Lunn G.D., Major B. J., Kettlewell P. S., and Scott R. K. // Cereal Sci. - 2001.- V. 33.- P. 313-329.

128. Mamytova N. S. The Contribution of Different a-Amylase Isoenzymes of the Commodity Grain Spring Wheat in the Formation of Faling Number Values / Mamytova N. S., Kuzovlev V. A., Khakimzhanov A. A., and Fursov O. V. // Applied Biochemistry and Microbiology.- 2014.- Vol. 50.- No. 5.-P. 531-537.

129. MacGregor A. W. Multiple a-amylase Components in germinated cereal grains determined by isoelectric focusing and chromatofocusing / MacGregor A. W., Marchylo B. A., Kruger J. E. // Cereal Chem. - 1988.- V. 65.-P. 326-333.

130. Manners D.J. - In: Plant carbohydrate biochemistry / Proc. Phytochem. Soc. Symp. Edinburgh, 1974, p. 109.

131. Mares D.J. Enzyme activities / Mares D.J., Mrva K., Fincher I.B. // C. Wrigley, H. Corke, C.E. Walker (eds.). Encyclopedia of Grain Science. - Oxford: Elsevier Acad. Press, 2004. -P. 357-365.

132. Markert C.L. Multiple forms of enzymes: tissue, ontogenetic and species specific patterns / Markert C.L., Moller F. // Proc. Natl. Acad. Sci., 1959, v.45, p. 753-763.

133. Mcintosh R.A. Catalogue of gene symbols for wheat: Proc. 7th Intern. Wheat Genet. Symp. 1988, p. 893-937.

134. Mcintosh R.A. Catalogue of gene symbols for wheat: Supplement / Mcintosh R.A., Dubcovsky J., Rogers W.J. et al. // Annu. Wheat Newslett., KSU, USA.- 2009.- V. 55.- P. 256-278.

135. Mecham D. Identification of western U.S. wheat varieties by polyacrilamide gel electrophoresis of gliadin proteins / Mecham D., Kasarda D.D., Qualset C.O. // Hilgardia.- 1985. - V. 53. - №7. - P.l-32.

136. Mos M.. The effect of seeds prouting damage on field emergence and yield of spring triticale / Mos M., Wojtowicz T. // J. Cent. Eur. Agric.- 2004. - Vol. 4.1.- P.251-258.

137. Motojima K. Characterization of the mRNA for a-amylase from wheat / Motojima K., Sakaquchi K. // Plant Cell Physiol.- 1982.- V. 23.- №7.- P. 11971203.

138. Mozer T.J. Partial purification and characterization of the mRNA for a-amylase from barley aleurone layers / Mozer T.J. // Plant Phyiol.- 1980.- V. 65.-№4.- P. 833-837.

139. Mrva K. Regulation of high pI alpha-amylase synthesis in wheat aleurone by a gene(s) located on chromosome 6B / Mrva K., Mares D.J. // Euphytica. - 1999.- V.109.- P.17-23.

140. Muralikrishna G. Cereal a-amylases-an overview / Muralikrishna G., and Nirmala M. // Carbohyd. Polym. - 2005.- V.60.- P. 163-173.

141. Nagaoshi T. - Sci. ReptsFac. Appl. KobeUniv., 1976, 12, 49.

142. Netsvetaev V.P. Distribution of B-amylase aleles in cultured barley for the Euro-Asia regions (The former USSR). V Intern.Oat Conf. & VII Intern. Barley Genet. Sym., Saskatchevan. 1996. V.1. P.197-199.

143. Netsvetaev V.P. Genotypic variability of malt quality in spring barley // Cereal Research Communication.- Hungary.- 1994.- V.22.- No.1-2.- P. 65-70.

144. Nishikawa K. - In: Proc. 4thInter. Wheat Genet. Symp. Columbia, 1973, p. 851.

145. Nishikawa K. Chromosome mapping by use of aneuploids in wheat // Wheat Information Service. - 1991.- No. 72.- P. 60-63.

146. Nishikava K. Telocentric mapping of alpha-amylase loci in wheat / Nishikava K., Ban T., Furuta Y. // Wheat Inform. Service.- 1993.- № 77.- P. 39-45.

147. Nishikawa K., Furuta Y., Goshimo H. - Japan. J. Genet.- 1975.- P. 405-409.

148. Nishikawa K., Furuta Y.,Hina Y., Fuli S. - Wheat Inform. Serv. -1978.- № 47-48.- p. 47.

149. Nishikawa K., Hina Y., Oonishi S., 1976, № 41-42, p. 36.

150. Nishikawa K. Genetic studies of a-amylase izozymes in wheat. I. Location and variation in tetra- and hexaploid wheat / Nishikawa K., Nobuchara M. // Jap. J. Genet.- 1971.- V. 46.- № 5.- P. 345-353.

151. Nishikawa K. Genetic studies of a-amylase izozymes in wheat. I. Genetic analysis in hexaploid wheat / Nishikawa K., Furuta Y., Hina Y. // Japan J. Genet.- 1981.- V. 56.- № 4.- P. 385-395.

152. Okita T.W., De Caleya R., Rappaport L. - Plant Physiol.- 1979.- V. 63.- P.-195.

153. Olered R.L. a-Amylase isozymes in cereal sand their influence on starch properties/ Olered R.L. // CerealRes. Commun. - 1976.- V. 4. - № 2. - P. 195-201.

154. Olered R.- Cereal Res. Communs.- 1986.- 4.- P. 195.

155. Persson G. An attempt to find suitable genetic markers for dense ear loci in barley I / Persson G. // Hereditas.- 1969.- V. 62.- No. 3.- P. 25-96.

156. Pike P.R. Protein composition and quality of some new hard white winter wheats / Pike P.R., MacRitchie F. // CropSci. - 2004.- V. 44.- P. 173-176.

157. Pogna N.E. Evidence for a direct causal effect of low molecular weight subunits of glutenins on gluten viscoelasticity in durum wheat / Pogna N.E., Lafiandra D.M., Feillet P., Autran J.C. // J. Cereal Sci. -1988.- №7.- P. 211214.

158. Pomeranz Y. Wheat chemistry and technology Enzymes / Pomeranz Y. .AACC, St. Paul, Minnesota, USDA, ARS. 1971, p. 453-469.

159. Pukhalskiy V.A. Inheritance of pre-harvest sprouting tolerance in the Triticum aestivum L. Cultivar VIR52548 / Pukhalskiy V.A., Iordanskaya I.V. // Proc. of the 9thIntern. Wheat Genet. Symp., Saska-toon, Saskatchewan, Canada 27 August 1998. P. 34-36.

160. Rowsel E. The constituent of wheat binding latent ß-amylase / Rowsel E., Goad L. // Biochem. J. - 1962. - V. 84.- P. 73-78.

161. Saboury A.A. Stability, activity and binding properties study of a-amylase upon interaction with Ca and Co / Saboury A.A. // Ibid. -2002. - V. 11. - P. 221-228.

162. Silvanovich M.P., Hill R. D. - Cereal. Chem.- 1977.- V. 54.- P. 1270.

163. Stoy V. Progress and Prospect in Sprouting Research / Stoy V. // Third International symposium Pre-Harvest Sprouting in Cereals. Boulder, Colorado, 1983, - p. 3-7.

164. Swain R.R. Biochim. et biophys. Acta. / Swain R.R., Dekker E.E.-1966.- P. 87.

165. Takeda Y., Hizukuri S., Shimada J. - J. Agric. Chem. Soc. Japan,-1972.- V. 46.- P. 367.

166. TanakaY. Plant Physiol. / TanakaY., Akazawa T..- 1970.- V. 46.-P. 586.

167. Tkachuk R. Wheat alpha-amylases. II. Physical characterization / Tkachuk R. and Kruger J. E. // Cereal Chem. - 1974. - V. 51.- P. 508-529.

168. Tomos A.D. The control of mobilization and metabolism in the aleurone tissue during germination / Tomos A.D.,LaidmanD.L.// Recent Adv. In Biochem. Cereals / EdsLaidman D. M., Jones R. G. N. Y.; Acad. Press, 1979. P. 119-146.

169. Upadhyay M.P. Characterization of pre-harvest sprouting resistance in Clark's Cream white winter wheat / M.P. Upadhyay, C.F. Morris, G.M. Paulsen // Euphytica.- 1988. - Vol. 38. - № 1. - P. 85-92

170. Wagennaar S., Lugetenborg T. E. - Phytochemistry.- 1973.- V. 12.- P.

1243.

171. Weintraub B.D., Hamilton G. A. - Arch. Biochem. and Biophys..-1969. - V. 127.- P. 224.

172. Wendel J.F. Plant isozymes: Enzymes studied and buffer systems for their electrophoretic resolution in starch gels / Wendel J.F., Stuber C.W. // Isozyme bulletine.- 1984.- V. 17.- P. 4-11.

173. Woodbury W. Temperature-moisture interactions as a factor in germination and dormancy. Third international symposium on pre harvest sprouting in cereals: / Woodbury W.; Wiebe T. J./ 1983, p. 43-50

174. Warchaiewsky J.R. Presenday studies on cereal protein nature alpha-amylase inhibitors/ Warchaiewsky J.R. // Die Nahrung.- 1983.- V. 27.- № 2.- P. 103-117.

175. Zanetti S. Genetic analysis of pre-harvest sprouting resistance in a wheat spelt cross. / Zanetti S, Winzeler M, Keller M, Keller B, Messmer M. // Crop Sci. - 2000. -Vol.40. - P. 1406-1417.