Изменение экспрессии генов, активных в мозге крыс, в условиях фокальной церебральной ишемии под действием семакса и Pro-Gly-Pro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Дмитриева, Вероника Германовна

• Дмитриева, Вероника Германовна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Дмитриева, Вероника Германовна

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Развитие повреждения при церебральной ишемии.

Гемодинамика в ткани мозга при ишемии.

Морфология ткани мозга при ишемии.,.

Молекулярно-биологические аспекты ишемического повреждения.

Глутамат-кальциевый каскад.

Апоптоз.

Реакция генома на ишемию мозга.

Активация генов при ишемии.

Нейротрофины и их рецепторы.

Ген Egrl.

Ген SAISI.

Патогенетическая терапия при ишемии мозга.

Основные принципы терапии.

Семакс и PGP.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Объект исследования.

Реактивы и оборудование.'.

Растворы, буферы.

Дистальная окклюзия средней мозговой артерии у крыс.

Гистологическое исследование срезов мозга крыс.

Анализ экспрессии генов.

Выделение суммарной РНК и обработка ДНКазой I.

Спектрофотометрическое определение количества РНК.

Электрофоретическое разделение суммарной РНК в 1.5% агарозном геле.

Синтез одноцепочечной кДНК.

Подбор праймеров.

Обработка ДНК фага X рестрицирующей эндонуклеазой Pst 1.

Электрофорез продуктов ПЦР в полиакрнламидном геле.

Полу количественный анализ продуктов ПЦР.

Полимеразная цепная реакция.

Электрофорез продуктов ПЦР в агарозном геле.

Подбор условий для полукочичественного анализа экспрессии мРНК SMS1.

Статистический анализ данных.

ПЦР в реальном времени.

Полимеразная цепная реакция.

Обработка результатов.

Статистический анализ данных.

РЕЗУЛЬТАТЫ.

Гистологическое исследование срезов мозга крыс с окклюзией.

Анализ экспрессии мРНК генов, кодирующих нейротрофины и их рецепторы в отделах мозга крыс под действием семакса и PGP в условиях фокальной церебральной ишемии.

Экспрессия гена Bdnf.

Изменение содержания мРНК Bdnf при ишемии.

Содержание мРНК Bdnf при введении семакса.

Содержание мРНК Bdnf при введении PGP.

Экспрессия гена Nt-3.

Изменение содержания мРНК Nt-3 при ишемии.

Содержание мРНК Nt-3 в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНК Nt-3 в мозге крыс при введении PGP.

Экспрессия гена Ngf.

Ихиенение содержания MPHKNgf при ишемии.

Содержание мРНК Ngf в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНК Ngf в мозге крыс при введении PGP.

Экспрессия гена TrkB.

Изменение содержания мРНК TrkB при ишемии.

Содержание мРНК TrkB в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНК TrkB в мозге крыс при введении PGP.'.

Экспрессия гена TrkC.

Изменение содержания мРНК TrkC при ишемии.

Содержание мРНК TrkC в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНК TrkC в мозге крыс при введении PGP.

Экспрессия гена TrkA.

Изменение содержания мРНК TrkA при ишемии.

Содержание мРНК TrkA в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНК TrkA в мозге крыс при введении PGP.

Экспрессия генар75.

Изменение содержания мРНКр75 при ишемии.

Содержание мРНКр75 в мозге крыс при введении семакса.

Содержание мРНКр75 в мозгекрыс при введении PGP.

Анализ изменения экспрессии генов нейротрофинов и их рецепторов в мозге крыс с ишемией.

Анализ действия семакса и PGP на экспрессию генов нейротрофинов и их рецепторов в мозге крыс.

Анализ экспрессии мРНК Egrl в отделах мозга крыс под действием семакса и PGP в условиях фокальной церебральной ишемии.

Анализ экспрессии мРНК SMS1 в отделах мозга крыс под действием семакса и PGP в условиях фокальной церебральной ишемии.

Анализ действия семакса и PGP на экспрессию генов факторов роста и их рецепторов в условиях фокальной ишемии.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Дмитриева, Вероника Германовна

выводы

1. Фокальная церебральная ишемия вызывает изменения транскрипции генов нейротрофинов и их рецепторов не только в ишемизированной коре, но и в структурах мозга, отдаленных от очага повреждения, - коре контралатерального полушария, и в подкорковых структурах обоих полушарий мозга крыс.

2. В условиях фокальной ишемии мозга семакс и PGP воздействуют на экспрессию большого числа генов, кодирующих факторы роста и их рецепторы, - семакс изменил экспрессию 16-х, a PGP — 20-и из 77-и исследованных генов. Активация экспрессии генов, наблюдаемая при введении семакса, свидетельствует о его нейропротективном {Lif, Vgf, Gfral) и ноотропном (Galrl) действии, а также указывает на его роль в формировании сосудов {Nf-1, Npy2r). Снижение экспрессии гена Crhrl под действием семакса подразумевает анксиолитические свойства препарата. Выявленная активация экспрессии генов факторов роста и их рецепторов {Lif, Vgf, Gfral, Fgß, Ntf5 и др.) при введении PGP, обнаруживает нейропротективное действие этого пептида.

3. Действие семакса на транскрипцию генов нейротрофинов и их рецепторов проявляется преимущественно в участке лобной коры, включающем очаг повреждения. Действие PGP не является селективным и наблюдается в мозге крыс как при ишемии, так и у здоровых и ложнооперированных животных, при этом большая часть изменений исследованных генов выявляется в коре. В очаге повреждения семакс и PGP активируют транскрипцию генов нейротрофинов и их рецепторов через 3 и 24 часа после ишемической атаки, обеспечивая нейропротективное действие этих пептидов при ишемии.

4. Профиль изменения транскрипции гена SMS1, кодирующего фермент сфингомиелинсинтазу 1, в разных отделах мозга крыс позволяет отнести его к генам раннего реагирования. При ишемии транскрипция гена SMS1 снижается в очаге повреждения, внося свой вклад в накопление церамнда. Операционный стресс вызывает падение экспрессии SMS1 в подкорковых структурах мозга.

5. В мозге интактных животных семакс снижает экспрессию гена SMS1. У крыс с ишемией семакс действует на экспрессию этого гена спустя трое суток после оперативного воздействия, оказывая разнонаправленное действие в коре - снижение, и в подкорковых структурах — увеличение. В течение первых суток PGP способствует повышению транскрипции гена SMS1 в ишемизированной коре и подкорковых структурах контралатералыюго полушария мозга.

6. В коре мозга животных с ишемией семакс снижает экспрессию гена транскрипционного фактора Egrl через сутки и увеличивает через трое суток после операции, при этом его действие противоположно эффектам PGP. Активирующее воздействие PGP на транскрипцию гена Egrl проявляется в мозге всех исследованных групп животных, что может свидетельствовать о ноотропных свойствах этого пептида.

7. Один из механизмов нейропротективного действия семакса и PGP в мозге в условиях ишемии может быть связан с их воздействием на экспрессию генов системы факторов роста и их рецепторов, обеспечивающих функционирование клеток нервной ткани и сосудов. Эффекты семакса и PGP на транскрипцию генов нейротрофинов, факторов роста и их рецепторов в мозге крыс совпадают лишь частично, а на экспрессию генов SMS1 и Egrl существенно различаются. По-видимому, действие семакса и PGP на экспрессию генов осуществляется как через общие сигнальные пути, так и с использованием специфических для каждого пептида механизмов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В нашей работе впервые показано влияние еемакеа на экспрессию нейротрофинов, а также других факторов роста и их рецепторов при ишемии. Обнаружено действие PGP на экспрессию генов, кодирующих трофические факторы и их рецепторы в мозге крыс. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в ишемической коре мозга оба исследованных пептида, и семакс, и PGP, оказывают активирующее воздействие на транскрипцию системы нейротрофинов и их рецепторов, обеспечивающих нейропротекцию и выживание клеток нервной ткани при ишемии. Эта индукция экспрессии генов нейротрофинов и их рецепторов наблюдается, преимущественно, через 3 и 24 часа после ишемической атаки, когда клетки пенумбры еще сохраняют свою функциональную активность и имеют потенциал к выживанию (Lipton, 1999; Lu et al., 2003).

Анализ воздействия семакса и PGP в мозге исследованных групп животных (здоровые, ложнооперированные и крысы с ишемией) свидетельствует о том, что действие семакса на транскрипцию генов нейротрофинов и их рецепторов проявляется преимущественно в ишемической коре. В этих структурах наиболее выраженная активация экспрессии под действием семакса зафиксирована для генов Bdnf, Ngf, TrkC, ТгкА. Действие PGP на экспрессию генов нейротрофинов и их рецепторов наблюдается в мозге всех исследованных групп животных. При этом большая часть изменений транскрипции исследованных генов выявляется в коре мозга. У здоровых животных в этих структурах под действием PGP зафиксирована наиболее выраженная активация экспрессии генов, кодирующих высокоаффинные рецепторы нейротрофинов ТгкВ и ТгкА. В мозге крыс с окклюзией наиболее выраженная активация экспрессии под действием PGP в ишемизированной коре наблюдается для генов Bdnf, Ngf, ТгкВ, TrkC, ТгкА и р75, в коре контралатеральтерального полушария - для генов Ngf, ТгкА и р75.

Количество наблюдаемых эффектов обоих пептидов в мозге исследованных групп крыс возрастало с тяжестью физиологического состояния животных. Эффекты семакса и PGP во всех исследованных структурах мозга здоровых, ложнооперированных и животных с ишемией совпадали лишь частично. В случае транскрипции гена Egrl, действие PGP, в отличие от семакса, мы также наблюдали в мозге всех исследованных групп животных. Причем PGP способствовал значительной активации экспрессии гена Egrl в коре мозга здоровых и ложнооперированных крыс, а также в коре обоих полушарий мозга животных с окклюзией. Поскольку экспрессию этого гена связывают с запуском различных генных программ в нервной ткани, лежащих в основе обучения, формирования и распознавания долговременной памяти, а также синаптической пластичности, можно предположить, что PGP способствет активации этих процессов в мозге крыс.

При исследовании действия пептидов на экспрессию факторов роста и их рецепторов в ишемической коре мозга выявлено, что семакс и PGP воздействуют на представленность мРНК более 20% исследованных генов факторов роста и их рецепторов, повышая экспрессию одних и снижая уровень других. Среди генов, увеличивших уровень транскрипции под действием семакса, можно выделить гены, функция которых связана с выживанием клеток при ишемии - Lif Vgf, Gfral, гены раннего реагирования Fos и с-тус, гены Nf-1, Npy2r, участвующие в формировании сосудов, а также ген Galrl, играющий роль в обучении и формированием памяти. Ген транскрипционного фактора Stall, препятствующего апоптотической гибели клеток, и ген Crhrl, связанный с формированием поведенческого ответа типа депрессии, беспокойства, страха снизили свою экспрессию при введении семакса. Спектр генов, изменивших свою экспрессию под действием обоих препаратов, также как и в случае генов нейротрофинов и их рецепторов, перекрывался лишь частично. PGP оказывал действие, аналогичное таковому семакса, на экспрессию части перечисленных генов Lif, Vgf, Gfral, с-тус, Nf-1, Crhrl, однако также увеличивал транскрипцию и других факторов роста, имеющих нейропротектиьную функцию (Fgf2, Ntf5).

Принимая во внимание данные о том, что в живом организме семакс подвергается быстрой ферментативной деградации с образованием смеси пептидных дериватов, в которой уже через 1 час после введения семакса преобладает PGP (Шевченко и соавт., 2006), необходимо отметить, что эффекты, наблюдаемые нами при введении семакса, обусловлены действием смеси его дериватов. На основании наших результатов о частичном совпадении действия семакса и PGP в мозге крыс, мы предположили, что некоторые эффекты семакса могут быть опосредованы PGP. Разница в спектрах генов исследованной системы, изменивших свою экспрессию под воздействием семакса или PGP, свидетельствует о том, что механизмы их действия на нервную ткань, вероятно, имеют свои особенности. По-видимому, для семакса и PGP характерны специфические механизмы воздействия на транскрипцию исследованных генов.

Таким образом, семакс активирует транскрипцию нейротрофинов и их рецепторов при ишемии, наглядно демонстрируя нейропротекторное действие, благодаря которому его успешно применяют в клинике для лечения инсульта. Функции других исследованных генов факторов роста и их рецепторов, экспрессию которых активировал семакс, указывают на его ноотропное действие и роль в формировании сосудов. Снижение экспрессии гена Crhrl, связанного с формированием поведенческого ответа типа депрессии, беспокойства, страха генов, наблюдаемое при введении семакса, свидетельствуют о его анксиолитическом действии. Активация экспрессии генов нейротрофинов, других исследованных генов факторов роста и их рецепторов, а также гена Egrl в мозге крыс при введении PGP, обнаруживает нейропротективное и, по-видимому, ноотропное, действие этого пептида.

Один из механизмов действия семакса и PGP в мозге связан с их воздействием на экспрессию генов системы факторов роста и их рецепторов, обеспечивающих функционирование клеток нервной ткани и сосудов.

По результатам нашего исследования профиля транскрипции гена SMS] в мозге крыс этот ген можно отнести к генам раннего реагирования. На содержание транскриптов гена SMS1 в мозге крыс воздействуют как фокальная церебральная ишемия, так и хирургический стресс, при котором транскрипции гена SMS1 падает в подкорковых структурах мозга. Мы предполагаем, что снижение экспрессии гена SMS1, вызванное ишемическим повреждением, вносит свой вклад в накопление церамида, наблюдаемое при ишемии. Обнаружено ингибирующее влияние семакса на транскрипцию гена SMS1 в подкорковых структурах мозга здоровых животных.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Дмитриева, Вероника Германовна, 2009 год

1. Абрамова М.А., Самонина Г.Е., Ашмарин И.П. // Нейрохимия. 1996. Т. 13. С. 209214.

2. Абрамова М.А., Самонина Г.Е., Мамедов Ч.В., Копылова Г.Н. // Вест. Моск. Ун-та 1997. Т. 16.(2). С. 9-12.

3. Алесенко A.B., Красильников В.А., Бойков П.Я. Сфингомиелин участвует в формировании ДНК связей с ядерным матриксом при репликации // Докл Ак. Наук. 1983. Т. 264. С. 231-234.

4. Ашмарин И.П. Стукалов П.В. Нейрохимия. М. 1996. С. 372-413.

5. Ашмарин И.П., Каразеева Е.П., Ляпина Л.А., Самонина Г.Е. Регуляторная активность простейших пролинсодержащих пептидов PG, GP, PGP и GPGG и возможные источники их биосинтеза//Биохимия. 1998. Т. 63(2). С. 149-155.

6. Ашмарин И.П., Левицкая Н.Г., Каменский A.A. и др. // Фарматека. 1997. Т. 4. С. 3233.

7. Владыченская И.П. MOB (ТМЕМ 23) — новый ген человека: особенности строения и функционирования // Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. 2004.

8. Глазова Н.Ю., Левицкая Н.Г., Андреева Л.А., Каменский A.A., Мясоедов Н.Ф. Ноотропные эффекты нового аналога фрагмента АКТГ(5-10) гексапептида AKTT(5-7)PGP // Доклады Академии Наук. 1999. Т. 367(1). С. 137-140.

9. Гудашева Т.А., Бойко С.С., Акпаров В.Х., Островская Р.У., Розанцев Г.Г., Воронина Т.А. и др. Идентификация в мозге крыс цикло-пролилглицина, нового эндогенного пептида с ноотропной активностью //Доклады Академии Наук. 1996. Т. 350(6). С. 834-836.

10. Гусев Е.И., Коновалов А.Н., Бурд Г.С. Неврология и нейрохирургия. М. Медицина. 2000.

11. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга // М.: Медицина. 2001.

12. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Нейропротекторы в комплексной терапии ишемического инсульта // Лечение нервных болезней. 2002. Т. 3(8).

13. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Современные представления о лечении острого церебрального инсульта // Consilium medicum. 2000. Т.2(2). Доступно на http://www.consilium-medicum.com/media/consilium/n02/60.shtml.

14. Заец Т.Я., Потапова A.A., Руднева В.В., Лобанова И.В. Применение препарата Семакс 0,1% в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта // Кремлевская медицина. Клинический вестник. 2001. Т. 2.

15. Золотарев Ю.А., Жуйкова С.Е., Ашмарин И.П., Мясоедов Н.Ф., Васьковский Б.В., Самонина Г.Е. Метаболизм пептида PGP при разных способах введения // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. Т. 135(4). С. 423-426.

16. Ивашкин В.Т., Драпкина О.М. Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока. М. ГЭОТАР-МЕД. 2001.

17. Левицкая Н.Г., Себенцова Е.А., Глазова Н.Ю., Воскресенская О.Г., Андреева Л.А., Алфеева Л.Ю. и др. // ДАН. 2000. Т. 372(2). С. 268-271.

18. Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). М. Медицина. 2001.

19. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии, пер. с англ. М. Мир. 1984.

20. Манских В.Н. Морфологические методы верификации и количественной оценки апоптоза // Бюллетень сибирской медицины. 2004. Т.(1). С. 63-70.

21. Савочкина Л.П.; Скрыпина H.A., Тиофеева A.B., Бибилашвили Р.Ш. Количественное определение малых концентраций кДНК с использованием ПЦР и ампликона в качестве внутреннего стандарта // Молекулярная биология. 1996. Т. 30(4). С. 786800.

22. Сафарова Э.Р. Шрам С.И. Золотарев Ю.А. Мясоедов Н.Ф. Влияние пептида семакса на выживаемость культивируемых клеток феохромацитомы крысы при окислительном стрессе // Бюлл. Эксп. Биол. и Мед. 2003. Т. 135(3). С. 309-313.

23. Шевченко К.В. и др. Кинетика проникновения семакса в мозг и кровь крыс при интраназальном введении // Биоорганическая химия. 2006. Т. 32(1). С. 64-70.

24. Яковлева Е.В. Кузенков B.C., Федоров В.Н., Скворцова В.И., Кошелев В.Б., Гусев Е.И., Ашмарин И.П. Исследование эффективности семакса при глобальной ишемии мозга in vivo // Бюллетень Экспериментальной биологии и медицины. 1999. Т. 128(8). С. 172-174.

25. Abrous D.N., Koehl М., Le Moal М. Adult neurogenesis: from precursors to network and physiology// Physiol Rev. 2005. V. 85(2). P. 523-569.

26. Agapova T.Y., Agniullin Y.V., Shadrina M.I., Shram S.I., Slominsky P.A., Lymborska S.A., Myasoedov N.F. Neurotrophin gene expression in rat brain under the action of Semax, an analogue of ACTH 4-10 //Neurosci Lett. 2007. V. 417(2). P. 201-205.

27. Akins P.T., Liu P.H., Hsu C.Y. Immediate early gene expression in response to cerebral ischemia. Friend or foe? // Stroke. 1996. V. 27(9). P. 1682-1687.

28. Al-Bader M.D., A-Sarraf H.A. Housekeeping gene expression during fetal brain development in the rat-validation by semi-quantitative RT-PCR // Dev. Brain Res. 2005. V. 156(1). P. 38-45.

29. Albi E., Cataldi S., Bartoccini E., Magni M.V., Marini F., Mazzoni F. et al. Nuclear sphingomyelin pathway in serum deprivation-induced apoptosis of embryonic hippocampal cells // J Cell Physiol. 2006. V. 206(1). P. 189-195.

30. Albi E., Cataldi S., Rossi G., Magni M.V. A possible role of cholesterol-sphingomyelin/phosphatidylcholine in nuclear matrix during rat liver regeneration // J Hepatol. 2003. V. 38(5). P. 623-628. ' .

31. Albi E., Lazzarini R., Magni M.V. Reverse sphingomyelin-synthase in rat liver chromatin //FEBS Lett. 2003. V. 549(1-3). P. 152-156.

32. Albi E., Lazzarini R., Viola Magni M. Phosphatidylcholine/sphingomyelin metabolism crosstalk inside the nucleus // Biochem J. 2008. V. 410(2). P. 381-389.

33. Albi E., Magni M.V. Sphingomyelin synthase in rat liver nuclear membrane and chromatin 11 FEBS Lett. 1999. V. 460(2). P. 369-372.

34. Albi E., Micheli M., Viola Magni M.P. Phospholipids and nuclear RNA // Cell Biol Int. 1996. V. 20(6). P. 407-412.

35. Albi E., Viola-Magni M.P. Chromatin-associated sphingomyelin: metabolism in relation to cell function // Cell Biochem Funct. 2003. V. 21(3). P. 211-215.

36. Alessenko A.V. The role of sphingomyelin cycle metabolites in transduction of signals of cell proliferation, differentiation and death // Membr Cell Biol. 2000. V. 13(2). P. 303-320.

37. Alessenko A.V., Burlakova E.B. Functional role of phospholipids in the nuclear events // Bioelectrochemistry. 2002. V. 58(1). P. 13-21.

38. Arushanian E.B., Popov A.V. Chronotropic activity of semax // Eksp Klin Farmakol. 2008. V. 71(2). P. 14-16.

39. Ashmarin I.P., Liapina L.A., Pastorova V.E. The modulation of hemostatic reactions in vitro and in vivo by representatives of regulatory peptide families // Vestn Ross Akad Med Nauk. 1996. V. 6. P. 50-57.

40. Ashmarin I.P., Nezavibat'ko V.N., Levitskaya N.G., Kamensky A.A. Desing and investigation of ACTH(4-10) analog deprived of D-aminoacids and hydrophobic radicals // Neurosci. Res. Commun. 1995. V. 16. P. 105-112.

41. Asselin J., Knight C.G., Farndale R.W., Barnes M.J., Watson S.P. Monomeric (glyCine-proline-hydroxyproline)10 repeat sequence is a partial agonist of the platelet collagen receptor glycoprotein // VI. Biochem J. 1999. V. 15(339). P. 413-418.

42. Astrup J., Siesjo B.K., Symon L. Thresholds in cerebral ischemia the ischemic penumbra // Stroke. 1981. V. 12(6). P. 723-725.

43. Bankaitis V.A., Morris A.J. Lipids and the exocytotic machinery of eukaryotic cells // Curr Opin Cell Biol. 2003. V. 15(4). P. 389-395.

44. Barbacid M. The Trk family of neurotrophin receptors // J Neurobiol. 1994. V. 25(11). P. 1386-1403.

45. Barzilai A., Kennedy T.E., Sweatt J.D., Kandel E.R. 5-HT modulates protein synthesis and the expression of specific proteins during long-term facilitation in Aplysia sensory neurons //Neuron. 1989. V. 2(6). P. 1577-1586.

46. Bibel M., Barde Y.A. Neurotrophins: key regulators of cell fate and shape in the vertebrate nervous system//Genes&Development. 2000. V. 14. P. 2919-2937.

47. Bonventre J.V., Sukhatme V.P., Bamberger M., Ouellette A.J., Brown D. Localization, of the protein product of the immediate early growth response gene, Egr-1, in the kidney after ischemia and reperfusion // Cell Regul. 1991. V. 2(3). P. 251-260.

48. Bozon B., Davis S., Laroche S. A requirement for the immediate early gene zif268 in reconsolidation of recognition memory after retrieval // Neuron. 2003. V. 40(4). P. 695701.

49. Brown AW. Structural abnormalities in neurones // J Clin Pathol Suppl (R Coll Pathol). 1977. V. 11. P. 155-169.

50. Buisson A., Lesne S., Docagne F., et. al. // Cell Mol Neurobiol. 2003. V. 4-5. P. 539-550.

51. Bustin S., Nolan T. Pitfalls of quantitative Real-Time Reverse-transcription polymerase chain reaction//Journal of biomolecular techniques. 2004. V. 15. P. 155-166. •

52. Bustin S.A. Absolute quantification of mRNA using rel-time reverse transcription polymerase chain reaction assays // J.Mol.Endocrinol. 2000. V. 25(2). P. 169-193.

53. Butte M.J., Hwang P.K., Mobley W.C., Fletterick R.J. Crystal structure of neurotrophin-3 homodimer shows distinct regions are used to bind its receptors // Biochemistry. 1998. V. 37(48). P. 16846-16852.

54. Cai F., Li C.R., Wu J.L., et. al. // Mediators Inflamm. 2006. V. 2006(5). P. 1-9.

55. Canossa M., Griesbeck O., Berninger B., Campana G., Kolbeck R., Thoenen H. Neurotrophin release by neurotrophins: implications for activity-dependent neuronal plasticity // Proc Natl Acad Sci USA. 1997. V. 94(24). P. 13279-13286.

56. Carmichael S.T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism and purpose // Neuro Rx. 2005. V. 2(3). P. 396-409.

57. Charriaut-Marlangue C., Margaill I., Plotkine M., Ben-Ari Y. Early endonuclease activation following reversible focal ischemia in the rat brain // J Cereb Blood Flow Metab. 1995. V. 15(3). P. 385-388.

58. Charriaut-Marlangue C., Margaill I., Represa A., Popovici T., Plotkine M., Ben-Ari Y. Apoptosis and necrosis after reversible focal ischemia: an in situ DNA fragmentation analysis // J Cereb Blood Flow Metab. 1996. V. 16(2). P. 186-194.

59. Chen J., Graham S.H., Zhu R.L., Simon R.P. Stress proteins and tolerance to focal cerebral ischemia // J Cereb Blood Flow Metab. 1996. V. 16(4). P. 566-577.

60. Chen S.C., Soares H.D., Morgan J.I. Novel molecular correlates of neuronal death, and regeneration//Advances in neurology. 1996. V. 71. P. 433-449.

61. Choi D.W. Glutamate receptors and the induction of excitotoxic neuronal death // Progress in brain research. 1994. V. 100(8). P. 47-51.

62. Chollangi S., Wang J., Martin A., Quinn J., Ash J.D. Preconditioning-induced protection from oxidative injury is mediated by leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) and its ligands in the retina // Neurobiol Dis. 2009. V. 34(3). P. 535-544.

63. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // Analytical Biochemistry. 1987. V. 162. P. 156-159.

64. Chopp M., Li Y. Apoptosis in focal cerebral ischemia // Acta Neurochir Suppl. 1996. V. 66. P. 21-26.

65. Christy B.A., Lau L.F., Nathans D. A gene activated in mouse 3T3 cells by serum growth factors encodes a protein with "zinc finger" sequences // Proc Natl Acad Sci USA. 1988. V. 85(21).P. 7857-7861.

66. Clarke P.G. Developmental cell death: morphological diversity and multiple mechanisms // Anat Embryol (Berl). 1990. V. 181(3). P. 195-213.

67. Cocco L., Martelli A.M., Billi A.M., Cataldi A., Miscia S., Mottola M.R., Manzoli L.f

68. Phospholipids as components of the nuclear matrix: their possible biological significance I I Basic Appl Histochem. 1987. V. 31(3). P. 413-419.

69. Cogswell P.C., Mayo M.W., Baldwin A.S. Jr. Involvement of Egr-l/RelA synergy in distinguishing T cell activation from tumor necrosis factor-alpha-induced NF-kappa B1 transcription // J Exp Med. 1997. V. 185(3). P. 491-497.

70. Collaco-Moraes Y., Aspey B.S., de Belleroche J.S., Harrison M.J. Focal ischemia causes an extensive induction of immediate early genes that are sensitive to MK-801 // Stroke. 1994. V. 25(9). V. 1855-1860.

71. Covey M.V., Levison S.W. Leukemia inhibitory factor participates in the expansion of neural stem/progenitors after perinatal hypoxia/ischemia//Neuroscience. 2007. V. 148(2). P. 501-509.

72. Crain B.J., Westerkam W.D., Harrison A.H., Nadler J.V. Selective neuronal death after transient forebrain ischemia in the Mongolian gerbil: a silver impregnation study // Neuroscience. 1988.V. 27(2). P. 387-402.

73. Curtis R., Adryan K.M., Stark J.L., Park J.S., Compton D.L., Weskamp G. et al. Differential role of the low affinity neurotrophin receptor (p75) in retrograde axonal transport of the neurotrophic// Neuron. 1995. V. 14(6). P. 1201-1211.

74. Davey F., Davies A.M. TrkB signalling inhibits p75-mediated apoptosis induced by nerve growth factor in embryonic proprioceptive neurons // Curr Biol. 1998. V. 8(16). P. 915918.

75. De Wied D. Behavioral effects of pituitary peptides // Acta Physiol Pol. 1977. V. 28(15). P. 77-91.

76. De Wied D. Behavioral pharmacology of neuropeptides related to melanocortins and the neurohypophyseal hormones // Eur J Pharmacol. 1999. V. 375(1-3). P. 1-11.

77. Devuyst G., Bogousslavsky J. Recent progress in drug treatment for acute stroke // J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1999. V. 67(4). P. 420-425.

78. Ding T., Li Z., Hailemariam T., Mukherjee S., Maxfield F.R., Wu M.P., Jiang X.C. -SMS overexpression and knockdown: impact on cellular sphingomyelin and diacylglycerol metabolism, and cell apoptosis // J Lipid Res. 2008. V. 49(2). P. 376-85.

79. Dirnagl U., Iadecola C., Moskowitz M.A. Patliobiology of ischaemic stroke: an integrated view//TrendsNeurosci. 1999. V. 22(9). P. 391-397.

80. Dobrowsky R.T., Werner M.H., Castellino A.M., Chao M.V., Hannun Y.A. Activation of the sphingomyelin cycle through the low-affinity neurotrophin receptor // Science. 1994. V. 265(5178). P. 1596-1599.

81. Dolotov O.V., Seredenina T.S., Levitskaya N.G. et. al. The heptapeptide SEMAX stimulates BDNF expression in different areas of the rat brain in vivo // Dokl. Biol. Sci.2003. V. 39l.P. 292-295.

82. Dragunow M., Faull R.L., Waldvogel H.J., Williams M.N., Leah J. Elevated expression of jun and fos-related proteins in transplanted striatal neurons // Brain Res. 1991. V. 558(2). P. 321-324.

83. El Alwani M., Usta J., Nemer G., El Sabban M., Nasser M., Bitar H. et al. Regulation of the sphingolipid signaling pathways in the growing and hypoxic rat heart // Prostaglandins Other Lipid Médiat. 2005. V. 78(1-4). P. 249-263.

84. El Alwani M., Wu B.X., Obeid L.M., Hannun Y.A. Bioactive sphingolipids in the modulation of the inflammatory response // Pharmacol Ther. 2006. V. 112(1). P. 171-183.

85. Faiz M., Acarin L., Castellano B., Gonzalez B. Proliferation dynamics of germinative zone cells in the intact and excitotoxically lesioned postnatal rat brain // BMC Neurosci. 2005. V. 12. P. 6:26.

86. Ferrer I., Krupinski J., Goutan E., Marty E., Ambrosio S., Arenas E. Brain-derived neurotrophic factor reduces cortical cell death by ischemia after middle cerebral artery occlusion in the rat // Acta Neuropathol. 2001. V. 101. P. 229-238.

87. Fisher M., Finklestein S. Pharmacological approaches to stroke recovery // Cerebrovasc Dis. 1999. V. 9(5). P. 29-32.

88. Fisher N., Takano K. Ballieries clinical neurology cerebrovascular disease // (HachinskiV.Ed.) London. 1995. P. 723-725.

89. Franke T.F., Kaplan D.R., Cantley L.C. PI3K: downstream AKTion blocks apoptosis // Cell. 1997. V. 88(4). P. 435-437.

90. Frebel K, Wiese S. Signalling molecules essential for neuronal survival and differentiation // Biochem Soc Trans. 2006. V. 34(6). P. 1287-1290.

91. Friedman W.J., Greene L.A. Neurotrophin signaling via Trks and p75 // Exp Cell Res. 1999. V. 253(1). P. 131-142.

92. Futerman A.H., Hannun Y.A. The complex life of simple sphingolipids // EMBO Rep. 2004. V. 5(8). P. 777-782.

93. Gao X., Daugherty R.L., Tourtellotte W.G. Regulation of low affinity neurotrophin receptor (p75(NTR)) by early growth response (Egr) transcriptional regulators // Mol Cell Neurosci. 2007. V. 36(4). P. 501-514.

94. Garcia J.H., Liu K.F., Ho K.L. Neuronal necrosis after middle cerebral artery occlusion in Wistar rats progresses at different time intervals in the caudoputamen and the cortex // Stroke. 1995. V. 26(4). P. 636-642.

95. Garcia J.H., Yoshida Y., Chen H., Li Y., Zhang Z.G., Lian J., Chen S„ Chopp M. Progression from ischemic injury to infarct following middle cerebral arteryocclusion in the rat // Am J. Pathol.1993. V. 142(2). P. 623-635.

96. Geilen C.C., Wieder T., Orfanos C.E. Ceramide signalling: regulatory role in cell proliferation, differentiation and apoptosis in human epidermis // Arch Dermatol Res. 1997. V. 289(10). P. 559-566.

97. Giulian D., Corpuz M., Chapman S., Mansouri M., Robertson C. Reactive mononuclear phagocytes release neurotoxins after ischemic and traumatic injury to the central nervous system//J Neurosci Res. 1993. V. 36(6). 681-693.

98. Graham S.H., Chen J., Clark RS. Bcl-2 family gene products in cerebral ishemia and traumatic brain injury // J Neurotrauma. 2000. V. 17(10). P. 831 -841.

99. Grivennikov I.A., Dolotov O.V., Gol'dina Iu.I. Peptide factors in processes of proliferation, differentiation, and extended viability of mammalian nervous system cells // Mol Biol (Mosk). 1999. V. 33(1). P. 120-126.

100. Hallbook F. Evolution of the vertebrate neurotrophin and Trk receptor gene families // Curr Opin Neurobiol. 1999. V. 9(5). P. 616-621.

101. Hannun Y.A. The sphingomyelin cycle and the second messenger function of ceramide. // J Biol Chem. 1994. V. 269(5). P. 3125-3128.

102. Hannun Y.A., Luberto C., Argraves K.M. Enzymes of sphingolipid metabolism: from modular to integrative signaling // Biochemistry. 2001. V. 40(16). P. 4893-4903.

103. Hauger R., Risbrough V., Brauns O. et. al. Corticotropin releasing factor (CRF) receptor signaling in the central nervous system: new molecular targets // CNS Neurol. Disord. Drug. Targets. 2006. V. 5(4). P. 453-479.

104. Honkaniemi J., Sharp F.R. Global ischemia induces immediate-early genes encoding zinc finger transcription factors // J Cereb Blood Flow Metab. 1996. V. 16(4). P. 557-565.

105. Hossmann K.A. Disturbances of cerebral protein synthesis and ischemic cell death // Prog Brain Res. 1993. V. 96. P. 161-177.

106. Huang E.J., Reichardt L.F. Neurotrophins: roles in neuronal development and function // Annu.Rev.Neurosci. 2001. V. 24. P. 677-736.

107. Huang E.J., Reichardt L.F. Trk receptors: roles in neuronal signal transduction // Annu Rev Biochem. 2003. V. 72. P. 609-642.

108. Huggett J., Dheda K., Bustin S., Zumla A. Real-time RT-PCR normalisation; strategies and considerations // Genes Immun. 2005. V. 6(4). P. 279-284.

109. Huitema K., Van Den Dikkenberg J., Brouwers J.F., Holthuis J.C. Identification of a family of animal sphingomyelin synthases // EMBO J. 2004. V. 23(1). P. 33-44.

110. Iadecola C. Bright and dark sides of nitric oxide in ischemic brain injury // Trends Neurosci. 1997. V. 20(3). P. 132-139.

111. Iadecola C. Mechanisms of cerebral ischemic damage, in Cerebral ischemia by Walz W. Humana Press Totowa, New Jersey. 1999.

112. Iadecola C., Zhang F., Casey R., Clark H.B., Ross M.E. Inducible nitric oxide synthase gene expression in vascular cells after transient focal cerebral ischemia // Stroke. 1996. V. 27(8). P. 1373-1380.

113. Iadecola C., Zhang F., Xu X. Inhibition of inducible nitric oxide synthase ameliorates cerebral ischemic damage // Am J Physiol. 1995. V. 268(2). P. 286-292.

114. Inamura K., Olsson Y., Siesjo B.K. Substantia nigra damage induced by ischemia in hyperglycemic rats. A light and electron microscopic study // Acta Neuropathol. 1987. V. 75(2). P. 131-139.

115. Ipatova O.M., Torkhovskaya T.I., Zakharova T.S., Khalilov E.M. Sphingolipids and cell signaling: involvement in apoptosis and atherogenesis // Biochemistry (Mosc). 2006. V. 71(7). P. 713-722.

116. Ivanova D.M., Levitskaya N.G., Andreeva L.A., Kamenskii A.A., Myasoedov N.F. Comparative study of analgesic potency of ACTH4-10 fragment and its analog semax // Bull Exp Biol Med. 2007. V. 143(1). P. 5-8.

117. Jiang X.C., Paultre F.s Pearson T.A., Reed R.G., Francis C.K., Lin M. et al, Tall A.R. Plasma sphingomyelin level as a risk factor for coronary artery disease // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2000. V. 20(12). P. 2614-2618.

118. Jones M.W., Errington M.L., French P.J., Fine A., Bliss T.V., Garel S. et al. A requirement for the immediate early gene Zif268 in the expression of late LTP and long-term memories //Nat Neurosci. 2001. V. 4(3). P. 289-296.

119. Kamiya T., Jacewicz M., Nowak T.S. Jr, Pulsinelli W.A. Cerebral blood flow thresholds for mRNA synthesis after focal ischemia and the effect of MK-801 // Stroke. 2005. V. 36(11). P. 2463-2467.

120. Kaplan, A.Ya., Kochetova, A.G., Nezavibafko, V.N., Rjasina, T.V., Ashmarin, I.P., Synthetic ACTH analogue semax displays nootropic-like activity in humans // Neurosci. Res. Commun. 1996. V. 19. P. 115-123.

121. Kidwell C.S., Liebeskind D.S., Starkman S., Saver J.L. Trends in acute ischemic stroke trials through the 20th century // Stroke. 2001. V. 32(6). P. 1349-1359.

122. Kim J.S. Bilateral perioral sensory symptom after unilateral stroke: does it have a localizing value?//J Neurol Sci. 1996. V. 140(1-2). P. 123-128.

123. Kim M.-W., Bang M.-S., Han T.-R., Ko Y.-J., Yoon B.-W. Exercise increased bdnf and trkB in contralateral hemisphere of the ischemic rat brain // Brain research. 2005. V. 1052. P. 16-21.

124. Kirino T., Sano K. Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia//ActaNeuropathol. 1984. V. 62(3). P. 201-208.

125. Knapska E., Kaczmarek L. A gene for neuronal plasticity in the mammalian brain: Zif268/Egr-1 /NGFI-A/Krox-24/TIS8/ZENK? // Prog Neurobiol. 2004. V. 74(4). P. 183211.

126. Koistinaho J., Hokfelt T. Altered gene expression in brain ischemia //Neuroreport. 1997. V. 8(2). P. 1-8.

127. Koroleva M.V., Meizerov E.E., Nezavibat'ko V.N., Kamenskii A.A., Dubynin V.A. Effect of the heptapeptide Semax on the human,electroencephalogram // Biull Eksp Biol Med. 1996. V. 121(1). P. 116-117.

128. Kubota M., Narita K., Nakagomi T., Tamura A., Shimasaki H., Ueta N., Yoshida S. Sphingomyelin changes in rat cerebral cortex during focal ischemia //Neurol. Res. 1996. V. 18(4). P. 337-341.

129. Kujubu D.A., Lim R.W., Varnum B.C., Herschman H.R. Induction of transiently expressed genes in PC-12 pheochromocytoma cells // Oncogene. 1987. V. 1(3). P. 257262.

130. Lang R., Gundlach A.L., Kofler B. // Pharmacology & Therapeutics. 2007. V. 115. P. 177-207.

131. Lawrence B.P., Brown W.J. Autophagic vacuoles rapidly fuse with pre-existing lysosomes in cultured hepatocytes // J Cell Sci. 1992. V. 102(3). P. 515-526.

132. Lee C.G., Cho S.J., Kang M.J., Chapoval S.P., Lee P.J., Noble P.W. et al. Early growth response gene 1-mediated apoptosis is essential for transforming growth factor betal-induced pulmonary fibrosis // J Exp Med. 2004. V. 200(3). P. 377-389.

133. Lee E., Michalkiewicz M., Kitlinska J. et. al. Neuropeptide Y induces ischemic angiogenesis and restores function of ischemic skeletal muscles // J. Clin. Invest. 2003. V. 111. P. 1853-1862.

134. Lee T.H., Kato H., Chen S.T., Kogure K., Itoyama Y. Expression of nerve growth factor and trkA after transient focal cerebral ischemia in rats // Stroke. 1998. V. 29(8). P. 16871696.

135. Lemaire P., Revelant O., Bravo R., Charnay P. Two mouse genes encoding potential transcription factors with identical DNA-binding domains are activated by growth factors in cultured cells // Proc Natl Acad Sci USA. 1988. V. 85(13). P. 4691-4695.

136. Lev S. Lipid homoeostasis and Golgi secretory function // Biochem Soc Trans. 2006. V. 34(3). P. 363-366.

137. Levitskaia N.G., Kleimenov A.N., Petrosian M.T., Rozenfel'd M.A., Kalikhevich V.N. Effect of low-molecular peptides on the transformation of fibrinogen into fibrin // Biull Eksp Biol Med. 1987. V. 104(8). P. 190-192.

138. Li J.M., Brackmann D.E., Hitselberger W.E., Linthicum F.H. Jr, Lim D.J. Coexpression of neurotrophic growth factors and their receptors in human facial motor neurons // Ann Otol Rhinol Laryngol. 1999. V. 108(9). P. 903-908.

139. Li Y., Chopp M., Jiang N., Yao F., Zaloga C. Temporal profile of in situ DNA fragmentation after transient middle cerebral artery occlusion in the rat // J Cereb Blood Flow Metab. 1995. V. 15(3). P. 389-397.

140. Linnik M.D., Miller J.A., Sprinkle-Cavallo J., Mason P.J., Thompson F.Y. et al. Apoptotic DNA fragmentation in the rat cerebral cortex induced by permanent middle cerebral artery occlusion // Mol. Brain Res. 1995. V. 32. P. 116-124.

141. Lipton P. Ischemic cell death in brain neurons // Physiological reviews. 1999. V. 79(4). P. 1431-1568.

142. Lu A., Tang Y., Ran R., Clark J.F., Aronow B.J., Sharp F.R. Genomics of the periinfarction cortex after focal cerebral ischemia // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2003. V. 23(7), P. 786-810.

143. Lu X.C., Williams A.J., Yao C., Berti R., Hartings J.A., Whipple R. et al. Microarray analysis of acute and delayed gene expression profile in rats after focal ischemic brain injury and reperfusion//J Neurosci Res. 2004. V. 77(6). P. 843-857.

144. Lyapina L.A,. Pastorova V.E., Obergan T.Y. Changes in hemostatic parameters after intranasal administration of peptide Pro-Gly-Pro // Bull Exp Biol Med. 2007. V. 144(4). P. 491-493.

145. Lyapina L.A., Pastorova V.E., Samonina G.E., Ashmarin LP. The effect of prolil-glycil-proline (PGP) peptide and PGP-rich substances on haemostatic parameters of rat blood // Blood Coagul Fibrinolysis. 2000. V. 11(5). P. 409-414.

146. MacManus J.P., Linnik M.D. Gene expression induced by cerebral ischemia: an apoptotic perspective // J Cereb Blood Flow Metab. 1997. V. 17(8). P. 815-832.

147. Marggraf W.D., Kanfer J.N. The phosphorylcholine acceptor in the phosphatidylcholinexeramide cholinephosphotransferase reaction. Is the enzyme a transferase or a hydrolase? // Biochim. Biophys. Acta. 1984. V. 793(3). P. 346-353.

148. Matsushima K., Hogan M.J., Hakim A.M. Cortical spreading depression protects against subsequent focal cerebral ischemia in rats // J Cereb Blood Flow Metab. 1996. V. 16(2). P. 221-226.

149. McBean D.E., Kelly A.T. Rodent Models of global cerebral ischemia: A Comparison of two-vessel occlusion and four-vessel occlusion // Gen. Pharmac. 1998. V. 30(4). P. 431434.

150. McDonald JR, Ko C, Mismer D, Smith DJ, Collins F. Expression and characterization of recombinant human ciliary neurotrophic factor from Escherichia coli // Biochim Biophys Acta. 1991. V. 1090(1). P. 70-80.

151. Medhurst A.D., Harrison D.C., Read S.J., Campbell C.A., Robbins M.J., Pangalos M.N. The use of TaqMan RT-PCR assays for semiquantive analysis of gene expression in CNS tissues and disease models// Journal of neuroscience methods. 2000. V. 98. P. 9-22.

152. Micheli M., Albi E., Leray C., Magni M.V. Nuclear sphingomyelin protects RNA from RNase action //FEBS Lett. 1998. V. 431(3). P. 443-447.

153. Milbrandt J. A nerve growth factor-induced gene encodes a possible transcriptional regulatory factor// Science. 1987. V. 238(4828). P. 797-799.

154. Miyamoto S., Murphy A.N., Brown J.H. Akt mediates mitochondrial protection in cardiomyocytes through phosphorylation of mitochondrial hexokinase-II // Cell Death Differ. 2008. V. 15(3). P. 521-529.

155. Morioka T., Kalehua A.N., Streit W.J. Characterization of microglial reaction after middle cerebral artery occlusion in rat brain // J Comp Neurol. 1993. Y. 327(1). P. 123132.

156. Napoli C., Lerman L., Nigris F. et. al. c-Myc oncoprotein: a dual pathogenic role in neoplasia and cardiovascular diseases? // Neoplasia. 2002. Y. 4(3). P. 185-190.

157. Nedergaard M., Hansen A.J. Characterization of cortical depolarizations evoked in focal cerebral ischemia//J Cereb Blood Flow Metab. 1993. V. 13(4). P. 568-574.

158. Neuvians T.P., Jascaw I. et al. Standardization strategy for quantitative PCR in human seminoma and normal testis // J. Biotechnol. 2005. V. 117(2). P. 163-171.

159. Nikam S.S., Tennekoon G.I., Christy B.A., Yoshino J.E., Rutkowski J.L. The zinc finger transcription factor Zif268/Egr-1 is essential for Schwann cell expression of the p75 NGF receptor // Mol Cell Neurosci. 1995. V. 6(4). P. 337-348.

160. Nikolaev E., Kaminska B., Tischmeyer W., Matthies H., Kaczmarek L. Induction of expression of genes encoding transcription factors in the rat brain elicited by behavioral training // Brain Res Bull. 1992. V. 28(3). P. 479-484.

161. Nogawa S., Zhang F., Ross M.E., Iadecola C. Cyclo-oxygenase-2 gene expression in neurons contributes to ischemic brain damage // J Neurosci. 1997. V. 17(8). P. 2746-2755.

162. Norton K., Xu J., Gutmann D.H. Expression of the neurofibromatosis I gene product, neurofibromin, in blood vessel endothelial cells and smooth muscle // Neurobiol. of disease. 1995. V. 2. P. 13-21.

163. Ohtani R., Tomimoto H., Kondo T., Wakita H., Akiguchi I., Shibasaki H., Okazaki T. Upregulation of ceramide and its regulating mechanism in a rat model of chronic cerebral ischemia// Brain Res. 2004. V. 1023(1). P. 31-40.

164. Okuno H., Miyashita Y. Expression of the transcription factor Zif268 in the temporal cortex of monkeys during visual paired associate learning // Eur J Neurosci. 1996. V. 8(10). P. 2118-2128.

165. Olney J.W. New mechanisms of excitatory transmitter neurotoxicity // Journal of neural transmission. Suppl. 1994. V. 43. P. 47-51.

166. Orrenius S., McCabe M.J.Jr., Nicotera P. Ca2+-dependent mechanisms of cytotoxicity and programmed cell death // Toxicology Letters. 1992. V. 64-65. P. 357-364.

167. Park T.S., Panek R.L., Mueller S.B., Hanselman J.C., Rosebury W.S., Robertson A.W. et al. Inhibition of sphingomyelin synthesis reduces atherogenesis in apolipoprotein E-knockout mice // Circulation. 2004. V. 110(22). P. 3465-3471.

168. Park T.S., Panek R.L., Rekhter M.D., Mueller S.B., Rosebury W.S. et al. Modulation of lipoprotein metabolism by inhibition of sphingomyelin synthesis in ApoE knockout mice // Atherosclerosis. 2006. V. 189(2). P. 264-272.

169. Patapoutian A., Reichardt L.F. Trk receptors: mediators of neurotrophin action // Curr opin Neurobiol. 2001. Y. 11(3). P. 272-280.

170. Paxinos G., Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates. Acad. Press, San Diego. 1997.

171. Pera J., Malgorzata Z., Kaminska B., Szczudlik A. Neurotrophic factor expression after focal brain ischemia preceded by different preconditioning strategies // Cerebrovascular Diseases. 2005. V. 19. P. 247-252.

172. Petito C.K., Pulsinelli W.A. Delayed neuronal recovery and neuronal death in rat hippocampus following severe cerebral ischemia: possible relationship to abnormalities in neuronal processes // J Cereb Blood Flow Metab. 1984. V. 4(2). P. 194-205.

173. Petzold G.C., Haack S., von Bohlen O., Priller J., Lehmann T.N., Heinemann U., Dirnagl U., Dreier J.P. Nitric oxide modulates spreading depolarization threshold in the human and rodent cortex // Stroke. 2008. V. 39(4). P. 1292-1299.

174. Pfaffl M.W. A new mathematical model for ralative quantification in real-time RT-PCR // Nucleic Acids Research. 2001. V. 29(9). P. 2002-2007.

175. Pfaffl M.W., Horgan G.W., Dempfle L. Relative expression software tool (REST) for group-wise comparison and statistical analysis of relative expression results in realtime PCR // Nucleic Acids Res. 2002. V. 30(9). P. e36.

176. Portera-Cailliau C., Price D.L., Martin L.J. Excitotoxic neuronal death in the immature brain is an apoptosis-necrosis morphological continuum // J Comp Neurol. 1997. Y. 378(1). P. 70-87.

177. Potaman V.N., Alfeeva L.Y., Kamensky A.A., Nezavibatko V.N. Degradation of ACTH/MSH(4-10) and its synthetic analog semax by rat serum enzymes: an inhibitor study//Peptides. 1993. V. 14(3). P. 491-495.

178. Potaman V.N., Antonova L.V., Dubynin V.A., Zaitsev D.A., Kamensky A.A., Myasoedov N.F., Nezavibatko V.N. Entry of the synthetic ACTH(4-10) analogue into the rat brain following intravenous injection //Neurosci Lett. 1991. V. 127(1). V. 133-136.

179. Ridgway N.D. Interactions between metabolism and intracellular distribution of cholesterol and sphingomyelin // Biochim Biophys Acta. 2000. Y. 1484(2-3). P. 129-141.

180. Robinson R.C., Radziejewski C., Stuart D.I., Jones E.Y. Structure of the brain-derived neurotrophic factor/neurotrophin 3 heterodimer// Biochemistry. 1995. V. 34(13). P. 41394146.

181. Rodriguez-Tebar A., Dechant G., Barde Y.A. Binding of brain-derived neurotrophic factor to the nerve growth factor receptor // Neuron. 1990. V. 4(4). P. 487-492.

182. Rossi G., Magni M.Y., Albi E. Sphingomyelin-cholesterol and double stranded RNA relationship in the intranuclear complex // Arch Biochem Biophys. 2007. V. 459(1). P. 2732.

183. Ruvolo P.P. Ceramide regulates cellular homeostasis via diverse stress signaling pathways//Leukemia. 2001. V. 15(8). P. 1153-1160.

184. Samonina G.E., Kopylova G.N., Sergeev V.I., Zhuikova S.E., Bakaeva Z.V. Correction of the stomach blood flow as a mechanism of anti-ulcer effects of short proline-containing peptides // Ross Fiziol Zh Im I M Sechenova. 2001. V. 87(11). P. 1488-1492.

185. Schabitz W.R., Schwab S., Spranger M., Hacke W. Intraventricular brain-derived neurotrophic factor reduces infarct size after focal cerebral ischemia in rats // J Cereb Blood Flow Metab. 1997. V. 17(5). P. 500-506.

186. Sgambato V., Pages C., Rogard M., Besson M.J., Caboche J. Extracellular signalregulated kinase (ERK) controls immediate early gene induction on corticostriatal stimulation//JNeurosci. 1998. V. 18(21). P. 8814-8825.

187. Silverman ES, Collins T. Pathways of Egr-1-mediated gene transcription in vascular biology. Am J Pathol. 1999. V. 154(3). P. 665-670.

188. Soriano M.A., Tessier M., Certa U., Gill R. Parallel gene expression monitoring using oligonucleotide probe arrays of multiple transcripts with an animal model of focal ischemia // J Cereb Blood Flow Metab. 2000. V. 20(7). P. 1045-1055.

189. Sukhatme V.P., Cao X.M., Chang L.C., Tsai-Morris C.H., Stamenkovich D., Ferreira P.C. et al. A zinc finger-encoding gene coregulated with c-fos during growth and differentiation, and after cellular depolarization // Cell. 1988. V. 53(1). P. 37-43.

190. Sukhatme V.P., Kartha S., Toback F.G., Taub R., Hoover R.G., Tsai-Morris C.H. A novel early growth response gene rapidly induced by fibroblast, epithelial cell and lymphocyte mitogens // Oncogene Res. 1987. V. 1(4). P. 343-355.

191. Suzuki S., Tanaka K., Suzuki N. Ambivalent aspects of interleukin-6 in cerebral ischemia: inflammatory versus neurotrophic aspects // J Cereb Blood Flow Metab. 2009. V. 29(3). P. 464-479.

192. Tenniswood M.P., Guenette R.S., Lakins J., Mooibroek M., Wong P., Welsh J.E. Active cell death in hormone-dependent tissues // Cancer Metastasis Rev. 1992. V. 1(2). P. 197220.

193. Tischmeyer W., Grimm R. Activation of immediate early genes and memory formation // Cell Mol Life Sci. 1999. V. 55(4). P. 564-574.

194. Tomassoni M.L., Albi E., Magni M.V. Changes of nuclear membrane fluidity during rat liver regeneration//Biochem Mol Biol Int. 1999. V. 47(6). P. 1049-1059.

195. Tureyen K., Brooks N., Bowen K., Svaren J., Vemuganti R. Transcription factor early growth response-1 induction mediates inflammatory gene expression and brain damage following transient focal ischemia // J Neurochem. 2008. V. 105(4). P. 1313-1324.

196. Viola Magni M.P., Gahan P.B., Albi E., Iapoce R., Gentilucci P.F. Chromatin phospholipids and DNA synthesis in hepatic cells // Basic Appl Histochem. 1985. V. 29(3). P. 253-259.

197. Vladychenskaya I.P., Dergunova L.V., Dmitrieva V.G., Limborska S.A. Human gene MOB: structure specification and aspects of transcriptional activity // Gene. 2004. V. 338(2). P. 257-265.

198. Vladychenskaya I.P., Dergunova L.V., Limborska S.A. In vitro and in silico analysis of the predicted human MOB gene encoding a phylogenetically conserved transmembrane protein //Biomol. Eng. 2002. V. 18(6). 263-268.

199. Voelker D.R., Kennedy E.P. Cellular and enzymic synthesis of sphyngomyelin // Biochemistry. 1982. V. 21(11). P, 2753-2759.

200. V'yunova T.V., Shevchenko K.V., Shevchenko V.P., Bobrov M.Y., Bezuglov V.V., Myasoedov N.F. Specific binding of semax in different regions of the rat brain // Dokl Biol Sci. 2006. V. 410. P. 376-377.

201. Wang X., Shimizu-Sasamata M., Moskowitz M.A., Newcomb R., Lo E.H. Profiles of glutamate and GABA efflux in core versus peripheral zones of focal cerebral ischemia in mice//Neuroscience letters. 2001. V. 313(3). P. 121-124.

202. Wang X., Yue T.L., Barone F.C., Feuerstein G.Z. Demonstration of increased endothelial-leukocyte adhesion molecule-1 mRNA expression in rat ischemic cortex // Stroke. 1995. V. 26(9). P. 1665-1668.

203. Watts C., McConkey H., Anderson L., Caldwell M. Anatomical perspectives on adult neural stem cells // J Anat. 2005. Y. 207(3). P. 197-208.

204. Wisden W., Errington M.L., Williams S., Dunnett S.B., Waters C., Hitchcock D. et al. Differential expression of immediate early genes in the hippocampus and spinal cord // Neuron. 1990. V. 4(4). P. 603-614.

205. Wishcamper C.A., Brooks D.M., Coffin J.D., Lurie D.I. Focal cerebral ischemia upregulates SHP-1 in reactive astrocytes in juvenile mic e// Brain Research. 2003. V.1 974 P. 88-98.

206. Wu D. Neuroprotection in experimental stroke with targeted neurotrophins // NeuroRx.2005. V. 2(1). P. 120-128.

207. Yamaoka S., Miyaji M., Kitano T., Umehara H., Okazaki T. Expression cloning of a human cDNA restoring sphingomyelin synthesis and cell growth in sphingomyelin synthase-defective lymphoid cells // J Biol Chem. 2004. V. 279(18). V. 18688-18693.

208. Yan P., Liu N., Kim G.M., Xu J., Xu J., Li Q. et al. Expression of the type 1 and type 2 receptors for tumor necrosis factor after traumatic spinal cord injury in adult rats // Exp Neurol. 2003. V. 183(2). P. 286-297.

209. Yan S.F., Fujita T., Lu J., Okada K., Shan Zou Y., Mackman N. et al. Egr-1, a master switch coordinating upregulation of divergent gene families underlying ischemic stress // Nat Med. 2000. V. 6(12). P. 1355-1361.

210. Yan S.F., Lu J., Zou Y.S., Soh-Won J, Cohen D.M., Buttrick P.M. et al. Hypoxia-associated induction of early growth response-1 gene expression // J Biol Chem. 1999. V. 274(21). P. 15030-15040.

211. Yang Z., Khoury C., Jean-Baptiste G., Greenwood M.T. Identification of mouse sphingomyelin synthase 1 as a suppressor of Bax-mediated cell death in yeast // FEMS Yeast Res. 2006. V. 6(5). P. 751-762.

212. Yi J.H., Park S.W., Kapadia R., Vemuganti R. Role of transcription factors in mediating post-ischemic cerebral inflammation and brain damage // Neurochem Int. 2007. V. 50(7-8). P. 101410-27.

213. Yoon S.O., Casaccia-Bonnefil P., Carter B., Chao M.V. Competitive signaling between TrkA and p75 nerve growth factor receptors determines cell survival // J Neurosci. 1998. V. 18(9). P. 3273-3281.

214. Yuen E.C., Howe C.L., Li Y., Holtzman D.M., Mobley W.C. Nerve growth factor and the neurotrophic factor hypothesis // Brain Dev. 1996. V. 18(5). P. 362-368.

215. Zhuikova S.E., Badmaeva K.E., Samonina G.E., Plesskaia L.G. Semax and some glyproline peptides accelerate the healing of acetic ulcers in rats // Eksp Klin Gastroenterol. 2003. V. 4. P. 88-92.

216. ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

217. Vladychenskaya I.P., Dergunova L.V., Dmitrieva V.G., Limborska S.A. Human gene MOB\ structure specification and aspects of transcriptional activity // Gene. 2004. V. 338 (2). P. 257-265.

218. Dmitrieva V.G., Torshina E.V., Yuzhakov V.V., Povarova O.V., Skvortsova V.I., Limborska S.A., Dergunova L.V. Expression of sphingomyelin synthase 1 gene in rat brain focal ischemia.// Brain Research. 2008. V. 1188. P. 222-227.

219. Особенно хочу поблагодарить заведующую Отделом молекулярных основ гентики человека профессора Лимборскую Светлану Андреевну - за высокий профессионализм, постоянный интерес, ценные советы и помощь в подготовке публикаций и диссертационной работы.

220. Хотелось бы выразить глубокую признательность Мясоедову Николаю Федоровичу за своевременную помощь, оказанную при выполнении настоящей работы.

221. Одновременно я хочу поблагодарить всех сотрудников Отдела молекулярных основ генетики человека, у которых я нашла полное понимание, за теплую атмосферу в коллективе.

222. В заключение хочется выразить благодарность дирекции и Ученому совету Института молекулярной генетики РАН за оказанную поддержку в подготовке диссертационной работы.