Нарушения поведения при локальном ишемическом повреждении коры головного мозга крыс; фармакологическая коррекция тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Шакова, Фатимат Мухамедовна

• Шакова, Фатимат Мухамедовна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шакова, Фатимат Мухамедовна

ВВЕДЕНИЕ.4 стр

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 13 стр

1.1. Экспериментальные модели ишемических повреждений головного мозга.13 стр

1.2. Основные механизмы ишемического поражения головного мозга.17 стр

1.3. Фармакологическая коррекция мнестических расстройств при ишемическом повреждении мозга. 27 стр

1.3.1. Стратегия нейропротекции.27 стр

1.3.2. Нейропептиды - ноотропная и нейропротективная активность.35 стр

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.45 стр

2.1. Моделирование фотоиндуцированного тромбоза сосудов префронтальной коры.45 стр

2.2. Исследование двигательной активности и исследовательского поведения крыс в автоматизированном «открытом поле» РОДЭО-1.47 стр

2.3. Условный рефлекс пассивного избегания.47 стр

2.4. Изучение поведения крыс в Т-образном лабиринте.48 стр

2.5. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ с ЭД)

2.5.1. Определение содержания моноаминов в ткани мозга.48 стр

2.5.2. Определение содержания нейромедиаторных аминокислот в мозговых структурах.49 стр

2.6. Определение интегральных биохимических показателей сыворотки крови методом лазерной корреляционной спектроскопии.50 стр

2.7. Статистические методы обработки данных.51 стр

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.52 стр

3.1. Сравнительная оценка нарушений интегративной деятельности ЦНС при очаговом ишемическом повреждении префронтальной и теменной коры головного мозга крыс.52 стр

3.2.Функциональные нарушения, вызванные фототромбозом префронтальной коры головного мозга крыс; коррекция ноопептом.55 стр

3.3. Нейрохимические нарушения, вызванные фототромбозом префронтальной коры головного мозга крыс; коррекция ноопептом .66 стр

3.4.Влияние одностороннего фототромбоза заднефронтальной коры у крыс на поведение в Т-образном лабиринте; эффекты ноопепта.72 стр

3.5. Аитиамнестическое и нейропротективное действие сверхмалых доз антител к белку 8-100 (пропротен-100) на модели фототромбоза префронтальной коры.75 стр

3.6. Сопоставление изменений поведения крыс и интегральных биохимических показателей крови, оцененных методом лазерной корреляционной спектроскопии (ЛКС), после фототромбоза префронтальной коры; эффекты ноопепта.79 стр

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Нарушения поведения при локальном ишемическом повреждении коры головного мозга крыс; фармакологическая коррекция»

Ишемический инсульт (инфаркт мозга) - одна из наиболее тяжелых форм сосудистых поражений мозга, занимающая в России второе место в структуре общей смертности и первое место как причина стойкой утраты трудоспособности (Верещагин Н.В., Варакин Ю.Я., 2001). Ежегодно в России переносят инсульт более 450000 - 500000 человек (Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001). Высокая заболеваемость, частые неблагоприятные исходы, в том числе летальные, высокий процент инвалидизации трудоспособного населения - все это позволяет считать инсульт проблемой медицинской и социальной значимости.

В последние годы значительно расширился фронт исследований, направленных на изучение патогенеза ишемического поражения головного мозга и поиск фармакологических препаратов, предназначенных для стимуляции регенераторных процессов при данной патологии (Фишер М., Шебитц В., 2001; Оковитый С.В. и др., 2001; Островская Р.У., 2003; Brott Т., Bogousslavsky J., 2000; Kidwell C.S. et al, 2001). Эти исследования имеют не только теоретическое патофизиологическое значение, но и большую практическую значимость для неврологической клиники, поскольку известно, что тромбоз сосудов головного мозга является причиной приблизительно 75% инсультов у человека (Профилактика и лечение инсульта. Рекомендации Европейской инициативной группы по проблеме инсульта, 2001; Де Фританс Г.Р., Богуславский Д., 2001; Гусев Е.И.и др., 2003).

Изучение различных форм ишемического повреждения головного мозга основывается на применении экспериментальных моделей на животных, наиболее близко воспроизводящих клинические аналоги этой формы патологии (Hunter A.J. et al, 1995; Фишер M., Шебитц В., 2001). Различают две категории моделей церебральной ишемии: модели глобальной и локальной ишемии (Мирзоян Р.С., 2000; Lipton Р., 1999). В эксперименте глобальную ишемию моделируют путем окклюзии сонных артерий, снабжающих передний мозг, чаще в сочетании гипотензией (от 5 до 30 минут) и последующей рециркуляцией (Rosemary L., 1997). Этот тип ишемии вызывает гибель нейронов преимущественно «избирательно уязвимых» регионов мозга.

История экспериментального моделирования фокальной ишемии головного мозга насчитывает более 20 лет, когда в 1981 году A. Tamura предложил модель проксимальной окклюзии средней мозговой артерии (СМА) с использованием субтемпоральной краниотомии. При моделировании воспроизводится основной патофизиологический процесс - ишемия мозга в определенном бассейне кровоснабжения. Моделирование фокальной ишемии сводится к прекращению кровотока в определенном сосуде мозга, т.е. его окклюзии. Независимо от способа создания острая артериальная окклюзия приводит к резкому снижению объема мозгового кровотока, причем, если мозговой кровоток ниже 10мл/100г ткани в минуту, развивается церебральный инфаркт с гибелью всех элементов ткани мозга (Nedergaard М., 1988).

В настоящее время предпочтение при выборе экспериментального метода отдается моделям фокальной ишемии, воспроизводящим очаги локального повреждения. Основное требование, предъявляемое к моделям фокальной ишемии, состоит в создании воспроизводимого из опыта в опыт постоянного по локализации и объему ишемического очага, что необходимо для количественной оценки степени повреждения мозга и эффективности использования фармакологических препаратов. Этому требованию отвечает неинвазивный, позволяющий выбрать нужную локализацию, метод фотостимулируемого тромбоза сосудов коры головного мозга (Watson В. et al, 1985), наиболее адекватно воспроизводящий картину клинического ишемического инсульта.

Инсульт сопровождается не только прямым повреждением нервной ткани, но и вторичными повреждениями вследствие отсроченных метаболических и нейрохимических процессов. Для коррекции этих нарушений деятельности ЦНС используются как препараты, непосредственно действующие на мозговой кровоток, так и фармакологические вещества, влияющие на высшие интегративные функции мозга, поскольку нарушение этих функций является ведущим симптомом инфаркта мозга. К таким соединениям относятся прежде всего ноотропы (Воронина Т.А., Середенин С.Б., 1998; Островская Р.У. и др., 2002).

Ноотропные вещества, применяемые в настоящее время для лечения когнитивного дефицита, имеют ряд ограничений и недостатков. Родоначальник этой группы - пирацетам недостаточно эффективен, кроме того отсутствуют данные о специфических механизмах его действия. Недостаточность мнестических функций, возникающая на фоне инсультов, сенильных нарушений сосудистого и нейродегенеративного характера, сопровождается выраженными структурными изменениями мозговой ткани. Для лечения этих состояний целесообразно применение препаратов, сочетающих ноотропную активность с нейропротективной. Однако большинство нейропротективных веществ, применяемых в практической медицине (антиоксиданты, блокаторы кальциевых каналов), лишены прямого положительного влияния на мнестические функции.

В настоящее время в России и за рубежом при разработке фармакологических средств компенсации когнитивного дефицита и нарушений памяти большое внимание уделяется эндогенным регуляторам -аминокислотам и коротким нейропептидам, сочетающим антиамнестическую и нейропротективную активность, легко проникающим через ГЭБ и имеющим низкую токсичность (Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Островская Р.У. и др., 2002).

В НИИ фармакологии РАМН разработан дизайн коротких пептидов на основе имитации структуры непептидного нейротропного средства. Дизайн дипептидов, облегчающих когнитивные функции, основан на гипотезе о пептидергическом механизме действия пирацетама и о роли олигопептидов, содержащих одну из эндогенных пиролидин-карбоновых аминокислот, пироглютаминовую или пролин, в качестве эндогенных лигандов гипотетических мест связывания пирацетама. Наибольшей активностью среди более 30 ацилпролилсодержащих дипептидов обладает соединение ГВС-111 (этиловый эфир М-фенилацетил-Ь-пролилглицин), получивший название «ноопепт» (Seredenin S.B., Voronina Т.A., Gudasheva Т.A., Ostrovskaya R.U. et al., Patent USA N5,439,930,1995; Патент РФ 2119496 (1998). Использование модели локальной ишемии мозга позволило оценить как функциональные, так и морфологические эффекты ноопепта, свидетельствующие о перспективности использования этого соединения в комплексной патогенетической терапии мнестических нарушений при инсульте.

Все больше привлекает внимание как исследователей фундаментальной науки, так и клиницистов применение малых и сверхмалых доз антител к ряду эндогенных субстанций (структурные белки, опиоиды, пептиды) при проведении комплексной фармакотерапии расстройств функций ЦНС. Принципиально новым направлением регуляторного воздействия на информационные и метаболические процессы в ЦНС является использование антител к белку S100 в сверхмалых дозах (СМД). В серии экспериментальных исследований было выявлено, что антитела к белку S100 в СМД обладают широким спектром психотропной и нейротропной активности, включая нейропротективную и ноотропную (Эпштейн О.И., 2003). В данной работе использован «Пропротен-100» - оригинальный отечественный препарат, представляющий собой потенцированные антитела к мозгоспецифическому белку S100, который является одним из важнейших регуляторов интегративной деятельности мозга и, как другие Са - связывающие белки, участвует в синаптических процессах, что послужило основанием использовать этот препарат при коррекции нарушений поведения, вызванных фототромбозом префронтальной коры головного мозга крыс.

Использование модели локальной ишемии мозга позволило оценить как функциональные, так и морфологические эффекты новых фармакологических средств, свидетельствующие о перспективности использования этих соединений в комплексной патогенетической терапии мнестических нарушений при инсульте.

Своевременное вмешательство в этапы патологического процесса с помощью новых фармакологических форм позволяет оптимизировать лечение больных с инсультами - более продуктивно оказать экстренную помощь, снизить летальность, сократить длительность острого периода, уменьшить инвалидизирующие последствия заболевания.

Целью настоящего исследования являлось изучение функциональных и нейрохимических показателей нарушений поведения при очаговом ишемическом повреждении коры головного мозга крыс различной локализации; патогенетическая терапия мнестических нарушений с помощью фармакологических препаратов, обладающих ноотропными и нейропротективными свойствами.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Используя метод фототромбоза, воспроизвести двустороннее локальное ишемическое повреждение префронтальной и теменной коры головного мозга крысы; сравнить нарушения поведения.

2. При фотохимическом повреждении префронтальной коры изучить изменения содержания биогенных аминов и нейромедиаторных аминокислот в коре и подкорковых структурах мозга.

3. Провести анализ антиамнестического и нейропротективного действия ацилпролилсодержащего дипептида - ноопепта и исследовать роль нейромедиаторов в этих эффектах на модели когнитивного дефицита.

4. Изучить влияние одностороннего фотохимического ишемического повреждения заднефронтальных отделов коры на поведение крыс в Т-образном лабиринте; оценить ноотропный эффект дипептида - ноопепта при таком повреждении.

5. Исследовать антиамнестические свойства сверхмалых доз антител к белку 8100 (пропротен-100) на модели фототромбоза префронтальной коры.

6. На модели фототромбоза префронтальной коры сопоставить нарушения поведения и изменения интегральных биохимических показателей сыворотки крови; оценить эффекты ноопепта.

Научная новизна. Впервые дана сравнительная характеристика поведенческих расстройств, возникающих при моделировании очага ишемического повреждения в префронтальной, заднефронтальной и теменной областях коры головного мозга крыс. Показаны отличия нарушений поведенческих реакций в зависимости от локализации фотохимического повреждения коры головного мозга животных. Проведена патогенетическая терапия когнитивных расстройств, возникших при экспериментальном ишемическом повреждении префронтальной коры, с помощью нового дипептида - ноопепта, подтверждено его ноотропное и нейропротективное действие. Впервые показано, что использование сверхмалых доз антител к белку Б100 (пропротен-100) на модели когнитивного дефицита способствует сохранению памятного следа, нарушенному локальным ишемическим повреждением коры головного мозга.

Впервые экспериментально сопоставлены изменения поведенческих реакций и суммарный показатель содержания в крови животных аутоантител и низкомолекулярных липопротеиновых комплексов, оцененный методом ЛКС, при локальной ишемии префронтальной коры и лечении ноопептом.

Теоретическое и практическое значение работы. Обоснована перспективность модели фотохимического тромбоза для экспериментального воспроизведения ишемического инсульта в разных областях коры головного мозга и изучения поведенческих расстройств, возникающих в зависимости от локализации очага ишемии в коре. При помощи исследования нарушений условного рефлекса пассивного избегания дана характеристика мнестических расстройств в остром периоде экспериментального ишемического инсульта и обоснована необходимость и возможность коррекции нарушений памяти на ранней стадии патологии, в критический период цереброваскулярной катастрофы. Показан лечебный и профилактический эффект ноопепта при нарушениях мозгового кровообращения, ухудшении сохранения выработанного навыка, что свидетельствует о целесообразности применения препарата для лечения инсульта. Установлен нейромодулирующий эффект сверхмалых доз антител к мозгоспецифическому белку Б100 (пропротен-100) при ишемическом повреждении коры префронтальной локализации.

Сопоставление динамики восстановления условных рефлексов, нарушенных фототромбозом префронтальной коры, с изменением содержания аутоиммунных и липопротеиновых компонентов сыворотки крови позволяет предположить, что такой подход является перспективным для оценки эффективности лечения при исследовании экспериментального и клинического материала.

Внедрение результатов работы.

На модели фотохимического повреждения префронтальной коры проведено доклиническое испытание ампульной формы дипептида - ноопепта. В эксперименте на животных показана высокая эффективность данного соединения (доза 0,5 мг/кг, внутрибрюшинно) при ишемическом повреждении мнестических функций мозга.

Экспериментально установлено, что сопоставление показателей содержания аутоиммунных и липопротеиновых компонентов сыворотки крови, оцененых методом лазерной корреляционной спектроскопии, с динамикой восстановления мнестических функций, нарушенных ишемическим повреждением коры, может быть перспективным подходом для раннего выявления групп риска и оценки эффективности лечения. Положения, выносимые на защиту.

1. Локальное двустороннее фотохимическое повреждение префронтальной коры приводит к нарушениям условнорефлекторной деятельности животных, тогда как фототромбоз теменной коры не вызывает мнестических расстройств.

2. Дизрегуляционные нарушения условнорефлекторной деятельности животных при локальном ишемическом повреждении префронтальной коры сопровождаются дисбалансом уровня биогенных аминов и нейромедиаторных аминокислот в структурах мозга.

3. Дипептид - ноопепт проявляет ноотропное и нейропротективное действие, оказывает модулирующее влияние на уровень биогенных аминов и нейромедиаторных аминокислот в коре и подкорковых структурах мозга.

4. При фототромбозе префронтальной коры нарушения условно-рефлекторного поведения крыс сопровождаются изменениями интегральных биохимических показателей сыворотки крови. Курсовое введение ноопепта наряду с антиамнестическим эффектом оказывает модулирующее влияние на интегральные биохимические показатели сыворотки крови этих животных.

5. Сверхмалые дозы антител к мозгоспецифическому белку 8100 (пропротен-100) оказывают нейромодулирующее действие при фокальном ишемическом повреждении префронтальной коры головного мозга крыс.

Апробация работы. Основные результаты и положения работы были доложены на: Международной конференции «Проблемы нейрокибернетики», Ростов-на-Дону, 2002; 3-ей Всероссийской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция», Москва, 2002; Всероссийской конференции «Нейрофармакология в XXI веке», Москва, 2002; Второй всероссийской научной конференции «Актуальные вопросы функциональной межполушарной асимметрии», Москва, 2003; 10th Meeting of European Behavioral Pharmacology Society (EBPS) Meeting, Antverpen, Belgium, 2003; Всероссийской конференции «Основные общепатологические и клинические закономерности развития критических, терминальных и постреанимационных состояний», Москва, 2003; III Конференции молодых ученых России с Международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины», Москва, 2004; 8th Multidisciplinary International Conference of Biological Psychiatry «Stress and Behaviour», St. Petersburg, Russia, 2004; 8th Congress of the European Federation of Neurological Societies, Paris, France, 2004.

Структура диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 6 глав результатов исследования, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 94 отечественных и 104 иностранных источника. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, содержит 5 таблиц и 19 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Шакова, Фатимат Мухамедовна

ВЫВОДЫ

1. Сравнение локального ишемического повреждения префронтальной и теменной коры головного мозга крыс методом фототромбоза показало, что нарушение выработки, сохранения и воспроизведения условного рефлекса пассивного избегания происходит при повреждении передних отделов фронтальной коры, тогда как фототромбоз теменной коры не вызывает мнестических расстройств.

2. При двустороннем ишемическом повреждении префронтальной коры показан выраженный антиамнестический эффект ацилпролилсодержащего дипептида - ноопепта. Хроническое введение препарата способствует сохранению навыка, выработанного до повреждения коры, повышает обучаемость в постишемический период и при исходном дефиците обучения. Нейропротективный эффект ноопепта обуславливает уменьшение объема ишемического очага, за счет сужения перифокальной зоны (пенумбры).

3. Одностороннее фотохимическое повреждение заднефронтальной коры нарушает предпочтение стороны поворота в Т-образном лабиринте; курсовое введение ноопепта коррегирует это нарушение моторной асимметрии.

4. Мнестические расстройства сопровождаются дисбалансом уровня моноаминов в коре и подкорковых структурах мозга. При курсовом, 9-ти дневном введении ноопепта ишемизированным животным усиливается оборот серотонина и дофамина в коре и гиппокампе, что может свидетельствовать об участии моноаминергических систем мозга в опосредовании ноотропного эффекта ноопепта.

5. Фототромбоз префронтальной коры приводит к нарушениям условно-рефлекторного поведения крыс и изменениям интегральных биохимических показателей сыворотки крови. Курсовое введение ноопепта оказывает антиамнестическое действие и модулирует интегральные биохимические показатели сыворотки крови этих животных.

6. При мнестических расстройствах, вызванных фотохимическим ишемическим повреждением префронтальной коры, установлено л нейромодулирующее действие антител к белку 8-100 (10 М, пропротен-100): 9-ти дневное постишемическое введение пропротена-100 способствовало сохранению условного рефлекса пассивного избегания, выработанного до фототромбоза коры, и уменьшало размер ишемического очага.

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Основными причинами патологических изменений в ЦНС являются следующие факторы: деструктивные изменения нейронов в очаге повреждения, нарушение функциональных связей, разрушение физиологических систем и возникновение новых патологических систем на основе первично и вторично измененных структур мозга, а также отсроченные метаболические и нейрохимические реакции, которые являются эндогенными патогенными факторами и определяют дальнейшее развитие патологического процесса (Крыжановский Г.Н., 1997; 2002; Крупина H.A., 2002).

Одной из актуальных проблем современной неврологии и патофизиологии является поиск и обоснование путей патогенетической терапии нарушений основных когнитивных функций мозга (память, способность к обучению, пространственная ориентация и т.п.).

Фронтальная кора выполняет важную роль в организации сложных форм поведения (Лурия А.Р., 2000). Префронтальная кора вместе с гиппокампом играет ключевую роль в процессах обучения и памяти, а ее локальное повреждение приводит к избирательному нарушению когнитивных функций мозга без сопутствующих расстройств мышечного тонуса, двигательной координации и общего поведения животных (Романова Г.А., 2003).

В работе была использована модель фототромбоза сосудов префронтальной области коры головного мозга крыс, преимуществом которой является неинвазивность и возможность выбора нужной локализации повреждения, что позволило получить экспериментальный аналог ишемического инсульта, сопровождающийся стойким очаговым морфологическим дефектом мозговых структур (Watson et al., 1985; Викторов И.В., Барсков И.В., 1991; Романова Г.А. и др., 1994). Нарушения интегративной деятельности мозга крыс исследовали при помощи условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ). УРПИ представляет собой относительно простую оборонительную реакцию, с помощью которой можно исследовать основные закономерности формирования, хранения и воспроизведения условных рефлексов (Буреш Я. ег а1., 1991).

В наших экспериментах показано, что при локальном ишемическом повреждении префронтальной коры головного мозга существенно нарушаются выработанные до повреждения условные рефлексы, а если повреждение коры предшествует выработке условных рефлексов, то нарушается и обучаемость животных.

Для подтверждения избирательности мнестических расстройств при повреждении префронтальной коры было проведено исследование ишемического повреждения теменной сенсомоторной области коры, которое приводило к значительному снижению двигательной активности, при этом выработанный до повреждения УРПИ сохранялся.

Исследование влияния одностороннего фототромбоза заднефронтальной коры, т.е. области, отвечающей за сочетанный поворот головы и туловища животных (В. Л. Бианки, 1985), показало, что происходит изменение предпочтения стороны поворота, т.е. нарушается врожденная функциональная двигательная асимметрия. Следовательно, полученные результаты подтверждают зависимость нарушения условно-рефлекторной деятельности животных от локализации ишемического очага в коре.

Инсульт сопровождается не только прямым, непосредственным повреждением нервной ткани, но и вторичными повреждениями вследствие отсроченных метаболических и нейрохимических процессов. Такие явления развиваются в течение периода от нескольких минут и часов до нескольких дней и недель. В результате усиливается неврологический дефицит, снижается возможность реабилитации и повышается вероятность неблагоприятного исхода. Вторичные повреждения могут иметь обратимый характер в случае правильного лечения.

Значительный интерес представляет сопоставление нарушения условно-рефлекторного поведения крыс с изменениями содержания биогенных аминов и нейромедиаторных аминокислот в структурах мозга при ишемическом повреждении префронтальной коры. Установлено, что в основе формирования энграмм и их фиксации в долговременной памяти лежат события, обеспечиваемые классическими нейромедиаторами и изменениями метаболизма нуклеиновых кислот и белков. Участие нейропептидов в процессах обучения и памяти в значительной степени реализуется через их взаимодействие с нейромедиаторами и через их влияние на метаболизм макромолекул. Нейропептиды выполняют функции медиаторов и модуляторов, оказывающих действие на нейрохимические реакции в нейронах, способствуя консолидации и воспроизведению энграмм (Ашмарин И.П., Стукалов П.В., 1996).

Функциональные расстройства интегративной деятельности мозга сопровождаются изменениями метаболизма нейромедиаторных аминокислот и моноаминов не только в префронтальной коре, где был расположен очаг ишемии, но и в подкорковых структурах (гипоталамусе, гиппокампе, стриатуме), имеющих прямые и опосредованные связи с областью повреждения. При поражениях лобных отделов коры головного мозга значительно нарушается подвижность нервных процессов, соотношение реакций возбуждения и торможения, что неизбежно сказывается на осуществлении мнестических функций мозга (Раевский К.С., Романова Г.А. и др., 1997; И.В. Викторов, 2000; O.W. Witte, 1998.).

В последнее время большой исследовательский интерес вызывают вещества, нормализующие когнитивные функции мозга, нарушенные различными повреждающими воздействиями. Положительное влияние ряда известных нейропептидов (АКТГ, вазопрессин, семакс) на когнитивные процессы обусловило поиск средств коррекции среди эндогенных регуляторов.

Пирацетам остается одним из основных практически используемых ноотропов, хотя фармакологическая активность этого препарата недостаточно высока. Пирацетам - непептидный специфический стимулятор памяти -нормализует соотношение АТФ и АДФ, ускоряет обмен нейромедиаторов, блокирует активность потенциалзависимых калиевых и кальциевых каналов, а также нормализует когнитивные функции мозга в постишемическом периоде, однако эти эффекты осуществляются только при очень высоких дозах: 400-500 мг/кг при внутривенном введении (Воронина Т. А., Середенин С.Б., 1998).

Перспективным подходом к изысканию новых более активных ноотропов явилось создание дипептидных аналогов пирацетама на основе пироглютамата и пролина (Гудашева Т.А., Островская Р.У., Трофимов С.С. и др., 1985). Наибольшей активностью среди изученных соединений обладает соединение ГВС -111 (этиловый эфир М-фенилацетил-Ь-пролилглицина), созданный в НИИ фармакологии РАМН и получивший впоследствии название «ноопепт». По уровню эффективных доз ноопепт превосходит пирацетам на 3 порядка (Gudasheva Т.A. et al., 1996).

Полученные результаты показали, что при ишемическом повреждении префронтальной коры курсовое системное введение ноопепта в дозе 0,5 мг/кг/день в течение 9 дней, начиная с конца первого часа после фототромбоза, оказывает нейропротективный и антиамнестический эффект.

У животных с ишемией префронтальной коры применение ноопепта обусловило сохранение ЛП УРПИ, выработанного до фототромбоза коры, на уровне, достоверно не отличающимся от этого показателя в контрольной группе ложнооперированных крыс, тогда как в группе ишемизированных животных, получавших изотонический раствор по той же схеме, исследуемый показатель снижался. Антиамнестический эффект ноопепта значительно превышал антиамнестическое влияние пирацетама.

Установлено, что курсовое применение ноопепта восстанавливает способность к обучению, утраченную при ишемическом повреждении префронтальной коры, повышает обучаемость у плохо обучаемых животных («недоучки»). Как правило, 30-35% крыс не поддаются обучению УРПИ. Длительность периода пребывания в светлой камере у этих животных не достигала критерия обученности (300 сек). 9-ти дневное применение ноопепта в период доучивания обусловило возможность выработки УРПИ у 62,5% из необучившихся ранее животных, тогда как в контрольной группе, не получавшей ноопепт, доучившихся животных не было.

Таким образом, ноопепт обеспечивает восстановление способности к обучению и сохранение памятного следа у животных, перенесших ишемическое повреждение префронтальной коры. По-видимому, терапевтический эффект ноопепта может быть обусловлен не только его влиянием непосредственно на механизмы памяти, но и его нейропротективным действием. Морфологические исследования подтверждают это предположение. У ишемизированных животных, получавших ноопепт, выявлено уменьшение объема ишемического очага до 3,03 +0,5 мм 3, тогда как у крыс, не получавших ноопепт этот показатель был равен 6,2+1,14 мм (р<0,001; и~тест Манна-Уитни).

Противоишемическое действие ноопепта может быть связано с целым рядом свойств препарата, воздействующих на патогенез инсульта и механизмы нейрональной смерти. Как известно, нейроны обладают высокой чувствительностью к гипоксии. Нейрон коры головного мозга потребляет в норме 350-450 мкл кислорода в минуту. Существенные изменения в корковых нейронах возникают в течение 5-8 мин аноксии. Через 5-6 минут после начала асфиксии наступают глубокие, необратимые нарушения нейрональной активности. Существенную роль в повреждении нейронов при ишемии играет нарушение активного транспорта ионов Са2+, что способствует гиперпродукции свободных радикалов и усилению перекисного окисления липидов (ПОЛ). Усиленное ПОЛ вызывает накопление Са2+ в нейронах и проявление патогенного действия иона. Значительная роль в механизмах гибели нейронов коры принадлежит резкому повышению содержания глутамата во внеклеточной среде. Активация NMDA-рецепторов приводит к открыванию NMDA

1 2+ зависимых каналов, по которым Na и Са и устремляются из внеклеточного пространства в нейрон. В экспериментах на изолированных нейронах о виноградной улитки продемонстрирован блокирующий эффект ноопепта (10" -10"9 М) в отношении потенциал-зависимых кальциевых и калиевых каналов (Solntseva E.I. etal., 1997).

Терапевтический эффект ноопепта связан также с его влиянием на гемореологию. Установлена антикоагулянтная и фибринолитическая активность ноопепта, показан его дестабилизирующий эффект на фибрин (Островская Р.У. и др., 2002).

В механизмах действия ноопепта могут иметь значение его выраженные противовоспалительные свойства (Коваленко Л.П и др.,2002), наряду с антиоксидантным влиянием (Андреева Н.А. и др., 2000).

Раннее было показано, что повышение уровня дофамина в коре улучшает сохранение памятного следа (Newnan R.P. et al., 1984; Honsa R. et al.,1984), тогда как снижение активности дофаминергической системы нарушает выработку условных рефлексов и вызывает амнезию (Routenberg A., Kim H.-J, 1978).

Биохимические исследования выявили дисбаланс дофамина, серотонина, глутамата, ГАМК в префронтальной коре, гиппокампе и гипоталамусе после ишемического повреждения префронтальной коры. Показано, что при ишемии префронтальной коры отмечается тенденция к снижению уровня дофамина и понижение содержания серотонина и оборота 50ИУК/50Т. Под влиянием ноопепта у ишемизированных крыс в префронтальной коре повышается уровень дофамина, содержание его метаболита диоксифенилуксусной кислоты (ДОФУК) и индекс ДОФУК/ДА в гипоталамусе, что свидетельствует об активации дофаминергической системы в отделах мозга, обеспечивающих и регулирующих процессы обучения и памяти.

Имеются основания полагать, что корригирующий эффект ноопепта отчасти может быть связан с сохранением уровня глицина и ГАМК в гиппокампе. Романовой Г.А. с соавторами на модели когнитивного дефицита установлено участие этих тормозных нейротрансмиттеров в механизмах сохранения памятного следа. На моделях компрессионного и травматического повреждения префронтальной коры показано антиамнестическое действие глицина, которое сопровождается ускорением оборота ГАМК в структурах мозга, участвующих в процессах сохранения памятного следа (1998; 2001; 2003). Проведенные эксперименты показали, что курсовое применение ноопепта при ишемии префронтальной коры повышает содержание этих тормозных нейротрансмиттеров в гиппокампе по сравнению с их уровнем в этой структуре у нелеченных крыс. Как известно, тормозные механизмы особенно чувствительны к аноксии и нарушаются более значительно по сравнению с возбуждающими механизмами, что определяет важную роль дефицита торможения в нарушении функций ЦНС при ишемии (Крыжановский Г.Н., 1997).

Таким образом, корригирующее влияние ноопепта на когнитивные расстройства при ишемическом инсульте может быть связано с его воздействием на сложный комплекс механизмов обеспечения и регуляции когнитивных функций. Нейропротективное действие ноопепта выражается в уменьшении объема ишемического очага в префронтальной коре за счет сужения перифокальной зоны.

В работе также показан ноотропный и нейропротективный эффект препарата «пропротен». Препарат представляет собой сверхмалые дозы (СМД) антител (в концентрации 10" М) к мозгоспецифическому белку Б-100. Процедура приготовления больших разведений антител оказывает потенцирующий эффект на антитела к Б-ЮО (Эпштейн О.И., 2003).

Курсовое пероральное применение пропротена при ишемическом повреждении префронтальной коры способствовало сохранению ЛП УРПИ. Условнорефлекторное поведение этих животных не имело достоверных отличий от такового в контрольной группе ложнооперированных животных, тогда как у ишемизированных крыс, получавших изотонический раствор вместо пропротена, ЛП УРПИ значительно снижался.

В экспериментальных исследованиях показано, что антитела к белку 100 при пероральном введении обладают широким спектром нейротропной активности (Воронина Т.А. и др., 2003, Эпштейн О.И.и др., 2003), а препарат пропротен разрешен для применения в широкой медицинской практике. Однако значение иммунологических механизмов СМД антител к белку Б-100 недостаточно изучено. Трудность анализа в значительной мере связана с отсутствием сведений о природе изменения свойств антител при их потенциации посредством многократных разведений. Показано сохранение специфической активности антител. В то же время имеются данные о приобретении СМД антител к белку Б-100 способности оказывать однонаправленный эффект с действием антигена Б-100 (Эпштейн 0.и.,2002).

Мозгоспецифический белок Б-100 принимает участие в синаптических процессах, в реализации генерации и проведения нервного импульса (Штарк М.Б, 1985; Не12шапп С. е1 а1., 2002). Будучи Са - связывающим белком, 8-100 обеспечивает длительную посттетаническую потенциацию (ДПТП) гиппокампальных нейронов (Эпштейн О.И. и др., 1999; Штарк М.Б. и др., 2000). Как известно, ДПТП является нейрофизиологическим аналогом кратковременной памяти. Развитие ДПТП в срезах гиппокампа сопровождается увеличением мембраноевязанной формы белка S-100. При избыточной экспрессии S-100B нарушается этот вид памяти (Roder J.K et al., 1996).

Установлено, что в реализации анксиолитических эффектов СМД антител к белку S-100 принимает участие ГАМК-ергическая система. СМД антител к S-100 оказывают ГАМК-миметическое действие (Воронина Т.А. и др., 2003).

Высказано предположение о том, что антитела к белку S-100 в СМД могут оказаться перспективным средством терапевтического воздействия при патологических состояниях, для которых характерен дефицит ГАМК-ергической системы (Мартюшев - Поклад А.В. и др., 2004). Ишемическое повреждение мозга является одной из таких форм патологии ЦНС.

Учитывая однонаправленность эффектов физиологических концентраций белка S-100 и СМД антител к этому мозгоспецифическому белку, можно полагать, что антитела к белку S-100 в СМД при ишемии воспроизводят нейропротективный эффект, который оказывает S-100 в нанамолекулярных концентрациях (Rothermundt M. et al., 2003).

Проведенные эксперименты показали, что ноопепт и пропротен можно рассматривать как препараты патогенетической терапии когнитивных расстройств, возникающих при ишемическом повреждении префронтальной коры. Можно полагать, что их системное применение на стадии вторичной нейропротекции может способствовать быстрейшему восстановлению интегративной деятельности мозга.

В основе патогенеза нарушений когнитивных функций при ишемии лежат повреждения и дегенерация нейронов, приводящие к расстройствам обучения и памяти. Ноопепт и пропротен оказывают нейропротективный и антиамнестический эффект, однако, если фармакологические свойства ноопепта достаточно изучены, то вопрос о механизмах действия пропротена остается открытым.

В заключение следует отметить, что моделирование функциональных расстройств при ишемическом повреждении коры головного мозга разной локализации позволяет не только исследовать механизмы этих процессов, но и является необходимым условием для разработки и оценки эффективности новых лекарственных препаратов. С этой точки зрения, применение модели когнитивного дефицита, позволяющей оценить как функциональные, так и морфологические эффекты ноотропных и нейропротективных средств, способствует созданию новой эффективной комплексной патогенетической терапии мнестических расстройств.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шакова, Фатимат Мухамедовна, 2004 год

1. Адрианов В.В., Гайнутдинов X.JL и др. Мембранотропные эффекты малых доз антител к белку S-100// Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2003.-.Прил.1.- С. 24-27.

2. Ашмарин И.П., Незавибатько В.Н., Мясоедов Н.Ф. и др. Ноотропный аналог адренокортикотропина 4-10-семакс.// Журн высшей нервн деятельн.-1997.- Т.47.-№2.- С. 420-430.

3. Ашмарин И.П., Стукалов П.В. Нейрохимия.// М.: Изд-во Инст Биомед Химии РАМН.- 1996.- 216 с.

4. Бажора Ю.И., Носкин Л.А. Лазерная корреляционная спектроскопия в медицине: Монография.-Одесса: «Друк», 2002.- 400 с.

5. Барсков И.В. Морфофункциональное исследование и фармакологическая коррекция фокальных ишемических повреждений коры головного мозга крыс на моделях компрессионной ишемии и фотоиндуцированного тромбоза. Дис. канд. мед. наук. М.-2000. 116 с.

6. Беляева И.А., Гусев Е.А., Чепахин В.П. Гематоэнцефалический барьер.// Журн неврол и психиат им С.С.Корсакова.- 1999.- Т.99. № 8.- С.57-61.

7. Бианки В.Л. Ассиметрия мозга животных.- Л.: Наука, 1985.- 295 с

8. Бойко С.С., Жерднев В.П., Дворянинов A.A. и др. Фармакокинетика дипептидного аналога пирацетама с ноотропной активностью ГВС-111 и его основных метаболитов.// Экспер и клин фармакол.-1997.-Т.6.-№2.-С.101-104.

9. Буреш Я. и др. Методики и основные эксперименты по изучению мозга иповедения: Под ред. Батуева А.С.-М.: Высш. шк., 1991.-399 е.: ил.в структурах головного мозга крыс. // Фармакол. токсикол. -1988. -Т.51. -N.2. -с.26-29.

10. Верещагин Н.В. и др. Патология головного мозга при атеросклерозе и артериальной гипертонии. Медицина.-М.- 1997.

11. Верещагин Н.В., Варакин Ю.Я. Регистры инсульта в России: результаты и методологические аспекты проблемы.// Журн неврол и психиатр.- 2001.-№1.- С.34-40.

12. Верещагин Н.В., Пирадов М.А., Суслина З.А. Инсульт. Принципы диагностики, лечения и профилактики.// М.: Интермедика, 2002.- 208 с.

13. Викторов И.В. Роль оксида азота и других свободных радикалов в ишемической патологии мозга.// Вестник РАМН.- 2000.- № 4,- С.5-10.

14. Викторов И.В., Андреева H.A., Барсков И.В. и др. Роль свободных радикалов и перекисного окисления липидов в патологии мозга при гипоксии и ишемии.// Информационный бюллетень РФФИ.- 1996.- Т.-4.-С.284.

15. Воробьев В.В., Ахметова Е.Р., Ковалев Г.И. Участие рецепторов N-метил-D-аспартата в модификации частотного состава ЭЭГ крыс.// Экспер и клин фармакол.-1997.-Т.6.-№5 .-С. 11-14.

16. Воронина Т.А. Роль синаптической передачи в процессах памяти, нейродегенерации и механизме действия нейротропных препаратов.// Эксперим. и клин, фармакол,- 2003.-Т. 66. № 2. - С. 10-14.

17. Воронина Т.А., Крапивин C.B. Новые аспекты нейрофизиологического механизма действия ноотропных препаратов.// Бюл. экспер. биол. и мед.-1986.- Т. 107.- № 12.- С. 721-724.

18. Воронина Т.А., Молодавкин Г.М., Сергеева С.А., Эпштейн О.И. ГАМК-ергическая система в реализации анксиолитического эффекта «Пропротена»: экспериментальное исследование // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2003.-Прил.1.-С. 37-39.

19. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Ноотропные препараты, достижения и новые проблемы.// Эксперим и клин фармакол.- 1998.- Т.61.- №4.- С.3-9.

20. Воронина Т.А., Смирнов Л.Д., Горяйнова И.И. Механизм действия и обоснование применения препарата мексидол в неврологии.// Материалы IX Всероссийского национального конгресса «Человек и лекарство».- 2002.

21. Галенко-Ярошевский П.А. Фармакологическая регуляция тонуса сосудов.-М.: РАМН, 1999.- 591с.

22. Ганнушкина И.В. Иммунологические аспекты травмы и сосудистых поражений мозга. М.: Медицина. 1994.

23. Гудашева Т.А., Островская Р.У., Максимова Ф.В. и др. О возможной структурно-функциональной связи пирацетама и вазопрессина. // Хим. Фарм журн. 1988.- №3.- С. 271-275.

24. Гудашева Т.А., Островская Р.У., Трофимов С.С. и др. Пептидные аналоги пирацетама как лиганды предполагаемых ноотропных рецепторов.// Хим-фарм. журн. 1985.- С. 1322-1329.

25. Гудашева Т.А., Островская Р.У.,Трофимов С.С., Воронина Т.А. и др. Новый эндогенный дипептид цикло-пролилглицин подобен пирацетаму поселективности мнемотропного эффекта. // Бюл. экспер. биол. и мед.- 1999. -Т.126.- № 10.- С. 411-413.

26. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга.// М.: Медицина, 2001.-328с.

27. Гусев И.Е., Скворцова В.И., Комиссарова И.А. и др. Нейропротективное действие глицина в остром периоде ишемического инсульта. Журн неврол и психиатр.-1991.- Т.99.- № 2.- С. 12-21.

28. Гусев И.Е., Скворцова В.И., Стаховская JI.B. Эпидемиология инсульта в России.// Журн неврол и психиатр (приложение «Инсульт»).-2003.- С 4-10.

29. Де Фританс Г.Р., Богуславский Д. Первичная профилактика инсульта.// Журн неврол и психиатр.- 2001.- №1.- С.7-20.

30. Девойно JI.H., Ильюченок Р.Ю. Моноаминэргические системы в регуляции иммунных реакций (серотонин, дофамин).// Новосибирск: Наука, 1983.

31. Дюмаев K.M., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС, Изд-во Института биомедицинской химии РАМН, Москва, 1995.

32. Дюмаев K.M., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.// М.: Издательство института биомед. химии РАМН, 1995.-271с.

33. Жданов Г.Г., Нечаев В.H., Нозель М.Л. Свободно-радикальные процессы, гипоксия и применение антиоксидантов в реаниматологии.// Журн анестезиол и реаниматол.-1989.- Т.4.- С.63-68.

34. Завалишин И.А., Захарова М.Н. Оксидантный стресс -общий механизм повреждения при заболеваниях нервной системы.// Журн невропатол и психиатр.- 1996.- Т.2.- С.111-114.

35. Калашникова Л.А. Лакунарные инфаркты мозга. Обзор.// Журн. невропатол. и психиатр.- 1988.-№1.-С.134-140.

36. Каменский A.A., Савельева К.В.Оксид азота и поведение. // М: Издательство НЦССХ им. А.Н.Бакулева, РАМН.- 2002.- 156 с.

37. Каплан А .Я., Каменский A.A., Ашмарин И.П. и др. Антиишемические свойства нейропептида семакс: электроэнцефалографический анализ.- В кн.: Применение малых регуляторных пептидов в анестезиологии и интенсивной терапии.- М.: 1991.- С.78-87.

38. Каплан А .Я., Кошелев В.Б., Ашмарин И.П., Незавибатько В.Н. Повышение устойчивости организма к гипоксии с помощью нейропептидного лекарственного препарата семакс.// Физиология человека.- 1992.- Т.8.- №5.-С. 104-107.

39. Коваленко Л.П., Мирамедова М.Г., Алексеева C.B., Гудашева Т.А., Островская Р.У., Середенин С.Б. Противовоспалительные свойства ноопепта (дипептидного ноотропа ГВС-111). // Экспер. и клин, фармакология.- 2002.-№2.- С. 53-55.

40. Комиссарова И.А., Гудкова Ю.А., Солдатенкова Т.Д. и др. Медицинский препарат антистрессового, стресс-протекторного и ноотропного действия.

41. Котов C.B., Исакова Е.В., Рябцева A.A., Лобов М.А., Рудакова И.Г. Комплексная терапия хронической ишемии мозга// Под ред. В.Я. Неретина.-М.- 2001.- С.5-32.

42. Крыжановский Г.Н. Общая патофизиология нервной системы. Руководство.//М.Медицина.- 1997.-С. 119-122.

43. Крыжановский Г.Н. Дизрегуляционная патология.// В книге: Дизрегуляционная патология. Руководство для врачей и биологов/Под ред. Г.Н. Крыжановского.- М.- Медицина, 2002.- С. 18-74.

44. Кудрин B.C., Мирошниченко И.И., Раевский К.С. Различия в механизмах ауторецепторной регуляции биосинтеза и высвобождения дофамина в подкорковых структурах мозга крыс.// Нейрохимия.- 1988.- Т.7.- No.l .-С.3-8.

45. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия.// М.: Мир.- 1969.- 40 с.

46. Лурия А.Р. Высшие корковые функции человека и их нарушение при локальных поражениях мозга.- 3-е изд./ МГУ им. М.В. Ломоносова, Фак-т психологии; РАО.-М.: Акад.Проект.- 2000.- 505 с.

47. Лысенко A.B., Ускова Н.И., Островская Р.У. и др. Дипептидный ноотроп ГВС-111 предотвращает накопление продуктов перекисного окисления липидов при иммобилизации. // Экспер. и клин, фармакология,- 1997.- Т.60.-№5.- С.15-18.

48. Лысенко A.B., Ускова Н.И., Островская Р.У., Гудашева Т.В., Воронина Т.А. Дипептидный ноотроп ГВС-111 предотвращает накопление продуктов перекисного окисления липидов при иммобилизации.// Экспер. и клин, фармакология.- 1997.- Т. 60. № 5. - С. 15-18.

49. Манвелов Л.С. Клиника и диагностика начальных проявлений недостаточности кровоснабжения мозга.//Мед.помощь.- 2000.-№3.- С.7-10.

50. Мартюшев-Поклад A.B., Воронина Т.А. Белок S100В как потенциальная мишень нейромодуляции.// Вестник биол. психиатрии.- 2004.- №3.- С.3-8.

51. Миронов Н.В., Шмырев В.И. Первичная и вторичная профилактика ишемических инсультов.// Методические рекомендации Учебно-научного Медицинского центра Управления делами президента РФ. М.- 2002.

52. Мирошиниченко И.И., Кудрин B.C., Раевский К.С. Влияние карбиди-на,сульпирида и галоперидола на содержание моноаминов и их метаболитов

53. Мчедлишвили Г.И. Механизмы регулирования мозгового кровообращения.// Успехи физиологических наук.- 1980.- Т.11.-№4.- С.3-25.

54. Мясоедов Н.Ф., Скворцова В.И., Наносов Е. JI. и др. Изучение механизмов нейропротективного действия семакса в остром периоде ишемического инсульта.// Журн неврол и психиатр.- 1999.- Т.5.- С. 15-19.

55. Назаренко И.В., Каменский A.A., Гудашева Т.А. Постреанимационное восстановление функций ЦНС при системном введении нового дипептидного аналога пирацетама.// Бюл. экспер. биол. и мед.- 1998.- Т. 125.-№1.- С. 34-37.

56. Оковитый C.B., Смирнов A.B. Антигипоксанты.// Эксперим и клин фармакол.- 2001.- Т.64.- №3.- С.75-80.

57. Островская Р.У. Эволюция проблемы нейропропротекции.// Эксперим и клин фармакол.- 2003.- Т.66.- №2.- С.32-37.

58. Островская Р.У., Гудашева Т.А. Выявление активности ноотропов по показателю острого угашения ориентировочной реакции. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1991.- № 5.- С. 498-500.

59. Островская Р.У., Гудашева Т.А., Воронина Т.А., Середенин С.Б. Оригинальный ноотропный и нейропротективный препарат.// Эксперим и клин фармакол.- 2002.- Т.65.- №5.- С.66-72.

60. Профилактика и лечение инсульта. Рекомендации Европейской инициативной группы по проблеме инсульта.// 2001.- Инсульт.- № 4.- 3- 9.

61. Романова Г.А. Дизрегуляционные нарушения интегративной деятельности мозга при фокальной ишемии коры. // Дизрегуляционная патология.- М., «Медицина».- 2002.-С. 605-615.

62. Романова Г.А. Когнитивные расстройства при повреждении префронтальной коры и их коррекция (экспериментальное исследование).-Реферат докт. диссертации в виде научного доклада.- М., 2003.- 80 с.

63. Романова Г.А., Барсков И.В., Островская Р.У. и др. Поведенческие и морфологические нарушения, вызванные двусторонним фотоиндуцированным тромбозом мозговых сосудов лобной коры мозга крыс. // Патол. Физиол. и эксперим. терапия.- 1998.- №2.-С. 8-10.

64. Романова Г.А., Барсков И.В., Советов А.Н., Викторов И.В. Нарушения интегративной деятельности мозга при двусторонней фокальной компрессионной ишемии лобной коры. // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1994.-№ 12.- С.568-571.

65. Романова Г.А., Гудашева Т.А.,Островская Р.У. Нарушения обучения и памяти, вызванные фототромбозом префронтальной коры головного мозга крыс: эффекты ноопепта. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002.- Т. 134.- № 12.-С. 614-616.

66. Рябинская Е.А. О характере функциональной дифференциации различных отделов неокортекса крыс.// Журн высш нерв деят.- 1978.- Т.28.- №5.-С.1005-1010.

67. Светухина В.М. Цитоархитектоника новой коры мозга в отряде грызунов (белая крыса).// Архив анат гистол и эмбриол.- 1962.- Т.72.- №2.- С.31-43.

68. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ.- Волгоград: Изд-во «Семь ветров», 1999,- 640 с.

69. Скворцова В.И. Участие апоптоза в формировании инфаркта мозга.// Журн неврол и психиат.- 2001.- №2.- С.12-19.

70. Скворцова В.И., Наносов Е. Л. и др. Клинико-иммунобиохимический мониторинг факторов локального воспаления в остром периоде полушарного ишемического инсульта.// Журн неврол и психиатр.- 1999.-Т.5.- С.27-32.

71. Скворцова В.И., Раевский К.С., Коваленко A.B. и др. // Журн. неврол.и психиатр.- 1999.- №2.- С.34-39.

72. Смолина Т.Ю., Мирзоев Т.Х. Антикоагулянтно-фибринолитические и антитромботические эффекты пептидного препарата ГВС-111.// Тромбоз, гемостаз и реология.- 2002.- №1.- С. 120-122.

73. Фишер М., Шебитц В. Обзор подходов к терапии острого инсульта: прошлое, настоящее и будущее.// Журн неврол и психиат.- 2001.- №1.- С.21-33.

74. Хухо Ф. Нейрохимия: Основы и принципы: Пер. с анг.- М.: Мир, 1990.-384с.

75. Чехонин В.П., Лебедев С.В., Петров С.В. и др. Моделирование фокальной ишемии головного мозга. // Вестник АМН 2004.- №3.- С.47-54.

76. Штарк М.Б. Мозгоспецифические белки и функции нейрона.- М.: Медицина, 1985.-319с.

77. Эпштейн О.И. Фармакология сверхмалых доз антител к эндогенным регуляторам функций. Дисс. д-ра мед наук.- Томск.- 2003.- 352 с.

78. Эпштейн О.И., Гайнутдинов Х.Л., Штарк М.Б. Влияние гомеопатических доз антител к антигену S-100 на электрические характеристики нейрональных мембран. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1999.- Т. 127.- № 4.-С. 466-468.

79. Ashmarin I.P., Kamensky A.A., Myasoedov N.F., Skvortsova V.I. //Regulatory Peptides.- 2000.- V.89.- P.51.

80. Back T. Pathophysiology of the ischemic penumbra- revision of a concept.// Cell Mol Neurobiol.- 1998.-V.18.-№6.- P.2896-2903.

81. Brott T., Bogousslsvsky J. Treatment of acute ischemic stroke.// N Engl J Med.-2000.- V.343- №10.- P. 710-722.

82. Bures J., Buresova O., Huston J.P. Techniques and basic experiments for the study of brain and behaviour. // Amsterdam: Elsevier Science. 1983.

83. Cafe C., Torry C., Marzatico F. Cellular and molecular events of ischemic brain damage .// Funct. Neurol.- 1993.- V.8.- №2.- P. 121-133.

84. Castillo J., Davalos A., Naveiro J., Noya M. Neuroexcitatory amino acids and their relation to infarct size and neurological deficit in ischemic stroke. // Stroke.-1996.-№27.-P. 1060-1065.

85. Chang C.J., Ishii H., Yamamoto H. et al. Effects of cerebral ischemia on regional dopamine release and D1 and D2 receptors.// J Neurochem.- 1993.-V.60.- №4.- P. 1483-1490.

86. Chiuen C.C. Neuropretective properties of nitric oxide.// Annals of the New York Academy of Sciences.- 1999.-V.-890.- P.301-311.

87. Choi D.M., Koh J.Y.Zinc and brain injury.// Ann Rev Neurosci.- 1998.- V21.-P.347-375.

88. Culmsee C., Junker V., Wolz P. et al. Lubelusole protects hippocampalmneurons from excitotoxicity in vitro and reduces brain damage caused by ischemia. // Eur J Pharmacol.- 1998.- V.342.-№ 2-3.-P.193-201.

89. Danbolt N.C. Glutamate uptake.// Progress in Neurobiology.- 2001.-V.65.-P.l-105.

90. Dawson V.L., Dawson T.M., London E.D. et al. Nitric oxide mediates glutamate neurotoxicity in primary cortical culture.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1991.- V.88.- P.6368-6371.

91. De Wied D. Neurochemical and psychopharmacological approaches to cognitive enhancers.// Kyoto.-1995.- 48 p.

92. Diener H.C., Hacke W., Hennerichi M. et al. Lumbezole in Acute Ischemic Stroke. // Stroke.-1996.- V.27.- P.76-81.

93. Donato R. S 100: a multigenic family of calcium-modulated proteins of the EF-hand type with inracellular and extracellular functional roles// Int J Biochem Cell.-2001-N.33.-P. 637-668.

94. Erecinka M., Silver I.A. Loss of neuronal calcium homeostasis, in ischemia .//In: Primer on Cerebrovascular Diseases ( Welch K.M.A., Reis D., Caplan L. R, Siesjo B.K., Weir B., eds.). New York, Academic.- 1997.- P. 178-183.

95. Faraci F.M., Heistad D.D. Regulation of cerebral circulation: role of endotelium and potassium chanells.// Pharmacol Rev.- 1998.- V.78.- №1.- P.53-97.

96. Fieschi C., Mac Kenzie E., Lenzi G.L. et al. Facts and Trends in Cerebral Blood Flow and Metabolism: Synopsis of Brain ' 89.// J Cereb Blood Flow Metab.-1989.- № 9.- P. 573-578.

97. Fisher M.,Takano K. et al. Ballierie's clinical neurology, cerebrovascular disease. London. 1995.- P. 279-296.

98. Frontczak-Baniewicz M., Gadamski R., Barskov I., Gajkowska B. Beneficial effects of GM1 ganglioside on photochemically-induced microvascular ingury in cerebral cortex and hipophysis in rat.// Exp Toxicol Pathol.- 2000.- V.52.- S.2.-P. 111-118.

99. Glasier M.M. et al. Effects of unilateral entorhinal cortex lesion and ganglioside GM1 treatment on performance in a novel water maze task.// Neurobiol. Learn. Mem .- 1995.- V.64.- S.3.- P.203.

100. Glick S.D. Lateralization of function in the rat brain// Trends Neurosci.-1981.-V.4.-№8.-P. 196-199.

101. Gudasheva T.A., Boyko S.S., Akparov V.Kh. et al.- Identification of a novel endogenous memory facilitating cyclic dipeptide cyclo-prolylglycine in rat brain. //FEBS Letters.- 1996.- V.391.- 149-151.

102. Gudasheva T.A., Voronina T.A., Ostrovskaya R.U. et al. Synthesis and antiamnesic activity of series of N acylprolyl - containing dipeptides.// Eur. J. Med. Chem.- 1996.- V.31.-№2.-P. 151-157.

103. Gusev E.I., Skvortsova V.l., Burd G.S. et al. The metabolic therapy of ischemic stroke: the use of nootropil. // J Neurol Psikhiatr. Im. S.S. Korsokova -1997.- V. 97 № 10.- P.24-28.

104. Gusev E.I.,Skvortsova V.l., Dambinova S.A. et al. Neuroprotective effects of glycine for therapy of acute ischaemic stroke . // Cerebrovasc Dis.- 2000.-V.10.- P.49-60.

105. Hashimoto N., Matsumoto T., Mabe H., Hashitani T. Dopamine has inhibitory and acceleratating effects on ischemia-induced neuronal cell damage in the rat stritum.// Brain Res Bull.- 1994.- V.33.- №3.- P. 107-112.

106. Hattori K., Lee H., Hum P. et al. Cognitive Defficits after focal cerebral ischemia in mice.// Stroke.-2000.-V.31.- P. 1939-1944.

107. Heizmann C.W., Cox J.A. New perspectives on SI00 proteins: a multifunctional Ca2+-, Zn2+- and Cu2+-binding protein family. Biometals. 1998.-№ll(4).-383-97.

108. Honsa R. et al. Effects of apomorphine on retention of a brightness discrimination in dopamine supersensitive rats// Behav Neural Biol.-1984.- V.41.-P. 23-29.

109. Hossman K.-A. Experimental models for the investigation of brain ischemia.// Cardiovascular Res.- 1998.- V.39.- P. 106-120.

110. Hossman K.A. Periinfarct depolarization.// Cerebrovasc Brain Metab Rev.-1996.- V.8.- P.195-208.

111. Hunter A.J., Green A.R., Cross A.J. Animal models of acute ischemic stroke: can they predit clinically successful neuroprotective drugs?// TiPS.- 1995.- V.16.- P. 123-128.

112. J Neurol Transm Suppl.- 1994.- V.43.- P.47-51.

113. Juurlink B.H., Sweeney M.I. Mechanisms that result in damage during and following cerebral ischemia.// Neurosci Biobehav Rev.- 1997.- V.21.- №2.-P.121-128.

114. Kharlamov A., Uz T., Joo J., Manev H. Pharmacological characterization of apoptotic cell death in a model of photothrombotic brain injury in rats.// Brain Res.- 1996.- V. 734.-P. 1-9.

115. Kidwell C.S., Libeskind D.S., Starkman S., Saver J.L. Trends in acute ischemic stroke trails through the 20th century.// Stroke.- 2001.- V.32.- P. 1349-1359.

116. Kiss J.P., Vizi E.S. Nitric oxide: a novel link between synaptic and nonsinaptic transmission.// Trends in Neurosci.- 2002.- V.24.- S.4.- P.211-215.

117. Kitagawa K., Matsumoto M., Tsujimoto Y., et al. Amelioration of hippocampal neuronal damage after global ischemia by neuronal overexpression of Bcl-2 in transgenic mice. // Stroke.- 1998.- V.29.- P.2616-2621.

118. Kolb B. Brain Plasticity and Behaviour. // Erlbaum Associates, New York. 1995.

119. Kolb B.Functions of the frontal cortex of the rat: a comperative review. // Brain Res. Rev.- 1984.- V.8.- P. 65-98.

120. Kondoh T., Korosue K., Lee S.H., Heros R.S., Low W.C. Evaluation of monoaminergic neurotrasmitters in the rat striatum during varied global cerebral ischemia.// Neurosurgery.- 1994.- V.35.- №2.- P.278-285.

121. Kontur P., Dawson R., Monjan A. Manipulation of mobile phase parameters for the HPLC separatin of endogenous monoamines in rat brain tissue.// J.Neurosci Methods.-1984.-V.l 1.- P.5-8.

122. Kristian T., Siesjo B.K. Calcium in ischemic cell death.// Stroke.- 1998.- N29.-P.705-718.

123. Kurkvilla A., Cherian R. et al. Changes in the content of dopamine and its metabolites in the basal ganglia following right middle cerebral artery occlusion and reflow in monkey.// Clin Exp Pharmacol Physiol.- 1987.-V.-14.-№1.-P.15-21.

124. Lee J.-M., Zipfel G.J., Park K.H. et al. Zink Translocation accelerates infarction after mild transient focal ischemia.// Neurosci.-2002.-V.l 15.-№ 3.- P.871-878.

125. Linde R. et al. Is Calcium Accumulation Post-Injury an Indicator of cell damage. In: Mechanisms of Secondary Brain Damage in Cerebral ischemia and trauma.// Adv Neurol.- 1996.- V.71.- P. 419-426.

126. Linnik M.D., Hatfield M.D. Evidence supporting a role for programmed cell death in focal cerebral ischemia in rats// Stroke.- 1993.- V.24.- P. 2002-2008.

127. Lipton P. Ischemic cell death in brain neurons.// Physiol Rev.-1999.- V.79.-P.1431-1568.

128. Manev H. et al. Delayed increase of Ca2+ influx elicited by glutamat: role in neuronal death.// Mol Pharmacol.-1989.-V.4.- №2.- P.96-113.

129. Mattson M.P., Chan S.L., LaFerla F.M. et al. Endoplasmatic reticulum signaling in neuronal plasticity and neurodegenerative disorders.// Trends Neurosci.-2000.-23.

130. Mcintosh T., Smith D., Garde E. Therapeutic approaches for the prevention of secondary brain injury.// Eur J Anaesthesiol.- 1996.- 13.- P.291-309.

131. Melani A., Pantoni L., Corsi C., Bianchi L. et al. Striatal outflow of adenosine, excitatory amino acids, y-aminobutyric acid, and taurine in awake freely moving rats after middle cerebral artery occlusion.// Stroke.- 1999.- V.30.- P.2448-2455.

132. Meldrum B.S. Exitotoxicity in ischemia: An overview. //In: Cerebrovasc Dis-16th Research Conf, New York, Raven Press.- 1989.- P.47-60.

133. Missler U., Wiessman M. et al. S-100 protein and neuron-specific enolase concentrations in blood as indicators of infarction volume and prognosis in acute ischemic stroke// Stroke.-1997 C)ct.-V.28.-N.10.-P. 1956-60.

134. Morikawa E. Et al. L-Arginine dilates rat pial arterioles by nitric oxide -dependent mechanisms and increases blood flow during focal cerebral ischemia.// Br J Pharmacol.- 1992.- V.107.- P. 905-907.

135. Morley P., Tauskela J.-S., Hakim A.M. Cerebral ischemia (Wolfgang Wolz ed.).1999.-New Yersey, Totowa.- Humana Press.- P. 69-105.

136. Narita K., Kubota M., Nakane M., Kitahara S., Nagagomi T. et al. Therapeutic time window in the penumbra during permanent focal ischemia in rats: changes of free acids and glycerophospholipids.// Neurol Res.- 2000.- V.22.- №4.- P.393-400.

137. Nedergaard M. Mechanisms of brain damage in focal cerebral ischemia.// Acta Neurol. Scand.- 1988.-V.77.-P. 81-101.

138. Nedergaard M., Hansen A J. Characterization of cortical depolarization evoked in focal cerebral ischemia.// J Cerebr Blood Flow Metab.-1993.- V. 13.- P. 568574.

139. Newman R.P. et al. Effortful and automatic memory: effects of dopamine// Neurology.-1984.-V. 34.- P.805-807.

140. Nicholls D.G., Budd S.I. Mitochondria and neuronal survival.// Physiol Rev.2000.-V.80.-P.-315-360.

141. Olney J.W. New mechanisms of excitotory transmitter neurotoxicity.// Neurol Trans Suppi.- 1994.- V.43.-P.47-51

142. Ostrovskaya R.U., Kovalev G.I., Romanova G.A. et al. Neurochemical and behavioral evidences for the neuroprotective effect of the novel acylprolyl dipeptide, GVS-111. // J. Neurochem. 1998. - V. 71.- Suppl. 1.- S54B.

143. Ostrovskaya R.U., Romanova G.A., Barskov I.V. et al. Memory restoing and neuroprotective effects of the proline-containing dipeptide, GVS-111, in a photochemical stroke model. // Behavioural Pharmacology.-1999.-V. 10.-№ 5.-P.549-553.

144. Parsons C.G. et al. Glutamate in CNS desorders as a target for drug development: An Update.// Drug News Perspect.- 1998.- V.l 1.- №9.- P.523-568.

145. Pascual J.M., Carceller F., Roda J.M., Cerdan S. Glutamate, glutamine, and GABA as substrates for the neuronal and glial compartments after focal cerebral ischemia in rats.// Stroke.- 1998. V.-29.- P. 1048-1057.

146. Paxinos G., Watson C. Atlas of anatomy of rat brain. //In.: The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. 3nd San Diego, Calif. Academic Press Inc; 1997.

147. Pearson S.J., Czudek C., Mercer K., Reynolds G.P. Electrochemical detection of human brain transmitter amino acids by high-performance liquid chromatography of stable o-phtalaldehyde-sulphite derivatives. J.Neuronal.Transm.,1991; 86: 151-157.

148. Pelsman A., Hoyo-Vadillo C., Gudasheva T.A. GVS-111 prevents oxidative damage and apoptosis in normal and Down's syndrome human cortical neurons.// Int. Devi. Neuroscience.- 2003.- V. 21.- P. 117-124.

149. Petty M.A., Wettstein J.G. Elements of cerebral microvascular ischemia.// Brain Res Rev.- 2001.- V.36.- P.23-34.

150. Phillis J.W., O'Regan M.N. GM1 ganglioside inhibits ischemic release of amino acid neurotransmitters from rat cortex.// Neuroreport.- 1995.- V.6.- P.2010-2012.

151. Proskuryakov S. Ya., Konoplyannikov A.G., Gabai V.L. Necrosis: a specific form of programmed cell death? // Exper. Cell Research.- V.283.- P. 1-16.- 2003.

152. Robinson R.G. The clinical neuropsychiatry of stroke. Cognitive, behavioural and emotional disorders following vascular brain injury// Cambridge University Press.-1998.- P.30-41.

153. Roder J.K. et al. Conspecific exploration in the T-maze: abnormalities in S-100 beta transgenic mice// Physiol Behav.- 1996.- V. 60(1)- P.31-36

154. Rosemary L. Experimental neuronal protection in cerebral ischemia//J Clin Neuroscience.-1997.- V.5.-N.3.-P.290-302.

155. Rothermundt M. et al. S-100B in brain damage and neurodegeneration// Microsc Res Tech.- 2003.- V.60(6)- P.614-632.

156. Routenberg A., Kim H.-J. The substantia nigra and neostriatum: substrates for memory consolidation // Cholinergic-monoaminergic interaction in the brain/ Ed. L. Butcher. New York: Acad Press.- 1978.- P. 305-311.

157. Sadoul R. et al. Mechanisms of neuronal cell death.// Adv. Neurol. 1996.-V.71.- P. 419-424.

158. Schiene K., Bruehl C., Witte O.W. Enlargement of cortical vibrissa representation in the surround of an ischemic cortical lesion.// J Neurol Sci.-1999.- V.162.- S.I.- P.6-13.

159. Schiene K., Bruehl C., Witte O.W. Oscillations after a photothrombrombotic infarct in the somatosensory cortex of the rat.// Eur J Neurosci.-1998.- V.10.-P.37.

160. Seredenin S.B., Voronina T.A., Gudasheva T.A. et al., USA Patent 5,439,930 (1995).

161. Siesjo B.K. Pathophysiology and treatment of fokal cerebral ischemia: Part I. Pathophysiology.// J Neurosurg.-1992.- V.U.- P. 169-184.

162. Siesjo B.-K., Bengtsson F. Free radicals and brain damage.// Cerebrovasc Brain MetabRev.- 1989.-V.l.- P. 165-211.

163. Siesjo B.K., Siesjo P. Mechanisms of secondary brain injury.// Eur J Anaesth.-1996.- V.13.- P.247-268.

164. Silv R. et al. Effects of neonatal ganglioside GM1 adminisration on memory in adult and old rats.// Pharmacol Toxicol.- 2000.- V.87.- S.3.- P. 120.

165. Skvortsova V.l., Gusev E.I., Ashmarin I.P. et al. // Regulatory Peptides.-2000.-V.89.-P.81.

166. Skvortsova V.l., Raevsky K.S., Kudrin V.S. et al. Levels of neurotransmitter amino acids in the cerebrospinal fluid of patients with acute ischemic insult. // Neurosci Behav Physiol. 2000.- V. 30. - № 5 .- P.491-495.

167. Solntseva E., Bukanova J., Ostrovskaya R. et al. The effects of piracetam and its novel peptide analogue GVS-111 on neuronal voltage-gated calcium and potassium channels.// Gen. Pharmacol.- V.29.- № 1.- P. 85-89.

168. Tamura A., Graham D.I., McCulloch J., Teasdale G.M. Focal cerebral ischemia in the rat: Destription of techniqe and early neuropathological conceqences following middle cerebral artery occlusion.// J Cereb Blood Flow Metab.- 1981.-V.I.- P.53-60.

169. Tibor K., Siesjo B.K. Calcium in ischemic cell death.// Stroke.- 1998.- V. 29.-P.705-718.

170. Watson B.D., Dietrich W.D., Busto R. et al. Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.// Ann Neurol.- 1985.- V.17.-P.497-504.

171. Weinberger J., Nieves-Rosa J. Metabolism of monoamine neurotransmitters in the evolution of infarction in ischemic striatum.// J Neural Transm.- 1987.- V.69-S.3-3.- P.265-275.

172. Weiss J.H., Hartley D.M., Koh J.Y., Choi D.W. AMPA Receptor Activation Potentiates Zinc Neurotoxicity. //Neuron.- 1993.- V.10.- P.43-49.

173. Witte O.W. Lesion-induced plasticity as a potential mechanism for recovery and rehabilitative training.// 1998.- Current Opinion in Neurology.- V.l 1.- P.655-662.

174. Zhang F., Iadecola C. Nitroprusside improves blood flow and reduces brain damage after focal ischemia.//NeuroReport.- 1993. V.4, № 5.- P. 559-562.

175. Zhang J., Niu X. Changes of monoamines, purines and amino acids in rat striatum as measured by intercerebral microdialysis during ischemia/reperfusion.// Chin Med Sci J.- 1994.- V.9.- S.4.- P.225-229.

176. Zilles K., Wree A. Cortex: area and laminar structure. // In: The rat nervous system. Paxinos G. (editor). Sydney: Academic Press, 1985.- P.375-416.