Исследование В-клеточной клональности и мутационного статуса гена SOCS1 у больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат наук Гаврилина, Ольга Александровна

• Гаврилина, Ольга Александровна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Гаврилина, Ольга Александровна

ДБККЛ

3.5. Детекция мутаций гена SOCS1 у больных ДБККЛ с факторами неблагоприятного прогноза

Глава 4. Обсуждение

Заключение

Выводы

Список литературы

Приложение

Список используемых сокращений:

Ауто-ТСКК - трансплантация аутологичных стволовых кроветворных клеток

БПВ - беспрогрессивная выживаемость

БРВ - безрецидивная выживаемость

БСВ - бессобытийная выживаемость

ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения

г/л - грамм в литре

ГНЦ - Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения Российской Федерации Да-Дальтон

ДБККЛ - диффузная В-крупноклеточная лимфома

КМ - костный мозг

ЛДГ - лактатдегидрогиназа

МПИ - Международный Прогностический Индекс НХЛ - Неходжкинская лимфома ОВ - общая выживаемость

00 - общий ответ (полные ремиссии + частичные ремиссии) ГТР - полная ремиссия

ПМБКЛ - первичная В-крупноклеточная медиастинальная (тимическая) лимфома

ПХТ - полихимиотерапия

ГТЦР - полимеразная цепная реакция

ПЭТ - позитронно-эмиссионная томография

СОЭ — скорость оседания эритроцитов

СЦИ - стандартное цитогенетическое исследование

УЗИ — ультразвуковое исследование

ЦНС - центральная нервная система

ФЛ - фолликулярная лимфома

ЧР - частичная ремиссия

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

ЭКГ - электрокардиография

ABC - Activated B-Cell

CD - cluster of differentiation

ECOG - Eastern Cooperative Oncology Group

GC - Germinal Center

GCB - Germinal Center B-Cell

GEL A - Group d' Etude des Lymphomes de Г Adulte

Ig - иммуноглобулин

IgVH - тяжелая цепь иммуноглобулинов

IPI - International Prognostic Index (международный прогностический индекс)

FISH - флюоресцентная гибридизация in situ

HR - соотношение рисков (Hazard ratio)

OR - отношение шансов

SWOG - South West Oncology Group

WT - wild type (дикий тип)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование В-клеточной клональности и мутационного статуса гена SOCS1 у больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДБККЛ) - наиболее частый вариант неходжкинских лимфом у взрослых и составляет 30-40% среди них[34] .

При использовании в лечении ДБККЛ стандартной полихимиотерапии (ПХТ), включающей схему CHOP, удается индуцировать полные ремиссии у 50-55% больных, а общая 5-летняя выживаемость пациентов не достигает 30% [92]. После включения в схемы терапии ДБККЛ моноклонального антитела ритуксимаб, отмечалось повышение эффективности лечения, частота полных ремиссий на терапии R-CHOP составила 75-80%, а общая 2-летняя выживаемость - 70% [22,94]. Однако, при анализе результатов терапии больных из группы с неблагоприятным прогнозом (с высоким международным прогностическим индексом (МПИ) оказалось, что результаты терапии R-CHOP неудовлетворительные: общая 5-летняя выживаемость составила 38% [6].

Интенсификация химиотерапии при ДБККЛ улучшила показатель выживаемости пациентов. Примерами такой химиотерапии являются схема R-DA-EPOCH [130,131], ACVBP [101], NHL-BFM-90 [6,54]. Общая 5-летняя выживаемость в результате интенсификации ПХТ достигла 80-85%. Однако, было показано, что даже при интенсивной терапии у пациентов с высоким МПИ и поражением костного мозга общая 5-летняя выживаемость не превышала 50% [6, 21]. Возможно, пациентам из этих групп необходимо включение трансплантации аутологичных стволовых клеток крови (аутоТСКК) в первую линию терапии, но исследований, четко отвечающих на этот вопрос, в настоящее время не существуют [3]. Интенсификация терапии приводит к повышению токсичности, в связи с чем необходим тщательный отбор пациентов для такой терапии.

Определение неблагоприятного прогноза при лимфомах основано преимущественно на МПИ [115]. Тем не менее, применение только клинических критериев не позволяет точно выделить группу пациентов, нуждающихся в интенсификации терапии, поэтому продолжается поиск молекулярно-генетических маркеров, что невозможно без детального изучения биологических особенностей В-лимфоцитов.

Согласно работам Alizadeh A.A., B-клетка в процессе дифференцировки меняет профиль экспрессии генов, в зависимости от нахождения внутри фолликула или вне его. Выделяют 2 молекулярных типа ДБККЛ [10]. ДБККЛ из активированных В-клеток (ABC-тип) имеет более агрессивное течение в сравнении с другим типом ДБККЛ, из клеток терминального центра (GCB-тип). Исследования, связанные с определением молекулярного типа по профилю экспрессии генов, являются перспективными, но их применение возможно пока лишь в клинических исследованиях в связи со сложностью методики [20,44,48], а иммуногистохимические аналоги остаются не столь точными.

Развитие опухолевого процесса как из терминальных, так и из постгерминальных B-лимфоцитов, возможно после появления мутаций, связанных с процессами клеточного деления, пролиферации, апоптоза, функционирования рецепторного аппарата. Изменения в функции B-клеточного, То11-подобного и цитокиновых рецепторов создают основу для патологических событий в работе опухолевой B-клетки. Так, если мутации, ассоциированные с сигнальными путями B-клеточного и То11-подобного рецепторов, носят прямой стимулирующий пролиферацию характер, то аномальное функционирование цитокиновых рецепторов осуществляется через другие механизмы. Известно, что любой клеточный сигнальный путь имеет негативную регуляцию, осуществляемую по типу обратной связи. Для сигнального пути, связанного с цитокиновыми рецепторами, негативным регулятором является SOCS1 (suppressor of cytokine signaling receptor).

Инактивирующие мутации S0CS1 приводят к чрезмерной пролиферации В-клетки на обычные цитокиновые воздействия, способствуя ее опухолевой трансформации и резистентности к цитостатикам. Активно изучать функционирование цитокиновых сигнальных путей при ДБККЛ стали только в течение последних нескольких лет. Стало известно, что мутации гена SOCS1 встречаются в 16-25% случаев ДБККЛ [85], и выявление этих изменений коррелирует с эффективностью терапии по CHOP и СНОР-подобным схемам [110]. Имеет значение не столько наличие самой мутации гена SOCS1, сколько eè характер. У больных ДБККЛ с «большими» (укорачивающими) мутациями SOCS1 5-летняя общая выживаемость достигала 90%, а у пациентов с «малыми» (точечными) - она составила 0%. Таким образом, пациенты с мутациями гена SOCS1 разделились на 2 принципиально разные группы, с благоприятным и крайне неблагоприятным прогнозом. Впервые был выявлен прогностический маркер - мутации гена SOCS1, который позволял фактически со 100% вероятностью определить пациентов, у которых стандартная химиотерапия неэффективна [110].

Наблюдаемая ассоциация между подтипами мутаций SOCS1 и общей выживаемостью больных делает анализ гена SOCS1 перспективным методом для определения прогноза у больных ДБККЛ. Представляется интересным исследовать влияние мутаций гена SOCS 1 на прогноз у пациентов ДБККЛ с факторами неблагоприятного прогноза, которым выполняется интенсифицированная терапия.

Вовлечение костного мозга (КМ) при ДБККЛ является независимым фактором неблагоприятного прогноза при выполнении как стандартных схем терапии, так и интенсифицированных [5,6,21,28,46,133]. Описано, что исследование В-клеточной клональности в пунктате костного мозга позволяет выявить дополнительные случаи вовлечения костного мозга при ДБККЛ [120], но прогностическое значение такого типа вовлечения не изучено. Предполагается, что минимальное вовлечение костного мозга,

которое часто не подтверждается при гистологическом и иммуногистохимическом исследовании, имеет такое же прогностическое значение, что делает исследование В-клеточной клональности в пунктате костного мозга перспективным.

Настоящая диссертационная работа посвящена анализу мутационного статуса гена SOCS 1 и В-клеточной клональности у больных ДБККЛ, которым выполнены интенсифицированные схемы химиотерапии (по протоколу m-NHL-BFM-90 или схеме R-DA-EPOCHZR-HMA).

Цель работы. Определить прогностическое значение мутационного статуса гена SOCS1 и выявления В-клеточной клональности в костном мозге у пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой, которым выполнены интенсифицированные программы химиотерапии (по протоколу m-NHL-BFM-90 или схеме R-DA-EPOCH/R-HMA).

Задачи:

1. Охарактеризовать клинические, морфологические, иммуногистохимические особенности диффузной В-крупноклеточной лимфомы у больных, которым выполнена интенсифицированная ПХТ (по протоколу m-NHL-BFM-90 или схеме R-DA-EPOCH/R-HMA).

2. Выполнить исследование В-клеточной клональности методом фрагментного анализа в пунктате костного мозга у больных ДБККЛ и определить ее прогностическое значение.

3. Выполнить исследование мутаций гена SOCS1 методом секвенирования по Сэнгеру у пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой после подтверждения клональных изменений в исследуемых биоптатах.

4. Охарактеризовать клинические, морфологические, иммуногистохимические особенности диффузной В-крупноклеточной лимфомы с мутациями гена SOCS 1.

5. Определить прогностическое значение мутаций гена SOCS1 у пациентов ДБККЛ с факторами неблагоприятного прогноза, которым выполнена интенсифицированная ПХТ (по программе mNHL-BFM-90 и по схеме R-DA-EPOCH/R-HMA).

6. Определить факторы неблагоприятного прогноза, значимые при выполнении интенсифицированных программ ПХТ (по протоколу m-NHL-BFM-90 или схеме R-DA-EPOCH/R-HMA).

Научная новизна. Впервые проведено исследование мутаций гена SOCS1 у больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой с факторами неблагоприятного прогноза при применении интенсифицированных программ химиотерапии. Определены факторы неблагоприятного прогноза, значимые при выполнении интенсифицированных схем терапии (по программе mNHL-BFM-90 и R-DA-EPOCH/R-HMA). Показано, что выявление В-клеточной клональности в костном мозге является фактором неблагоприятного прогноза.

Научно-практическая ценность работы. Показано, что исследование В-клеточной клональности с помощью молекулярного метода в пунктате костного мозга позволяет выявить дополнительные 7% случаев вовлечения костного мозга, которые не диагностируются при гистологическом исследовании трепанобиоптата. Определено, что детекция В-клеточной клональности в костном мозге при первичной верификации диагноза ДБККЛ является независимым фактором неблагоприятного прогноза у пациентов, которым выполняется интенсифицированная ПХТ. Оценена эффективность интенсифицированной терапии по программе mNHL-BFM-90 и R-DA-EPOCH/R-HMA у больньтх ДБККЛ из группы неблагоприятного прогноза.

Объем и структура работы.

Диссертация построена по традиционному плану, изложена на 115 страницах и состоит из введения, четырех глав, обсуждения, заключения, выводов, списка литературы, а также 4 приложений. Иллюстративный материал представлен в виде 15 рисунков и 11 таблиц.

По теме диссертации опубликовано 6 статей (5 статей из списка ВАК) и 12 тезисных сообщений (из них 6 на английском языке и 6 на русском языке). Результаты исследования были представлены в постерных докладах на ЕВМТ 2013 London, ASH 2013 New Orlean, EHA 2014 Milan, ASH 2014 San Francisco, EHA 2015 Vienna, Конгрессе гематологов 2014 Москва. Результаты исследования были представлены в докладе на конференции с международным участием «Лейкозы и лимфомы. Терапия и фундаментальные исследования», Москва 6-7 ноября 2014 г. и 5-6 февраля 2015 г.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общие данные

В последние годы заболеваемость неходжкинскими лимфомами (НХЛ) имеет неизменную тенденцию к росту, причем она выше в развитых странах, где за последние 20 лет увеличилась более чем на 50%. Наиболее часто встречающимся вариантом агрессивных лимфом является диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДБККЛ)[117,138]. ДБККЛ представляет собой гетерогенную группу заболеваний, которые при схожих морфологических особенностях, имеют различные клинические, иммуногистохимические, цитогенетические, молекулярные признаки и ответ на терапию, что отражено в классификации Всемирной организации здравоохранения 2008 года [119].

1.2. Классификация

Впервые как нозологическая форма, а именно гетерогенная группа заболеваний лимфатической системы, ДБККЛ выделена в 1994 г в Пересмотренной Европейско-Американской Классификации Лимфом [50]. В дальнейшем, без каких либо изменений ДБККЛ вошла в классификацию заболеваний гемопоэтической и лимфатической систем Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) 2001 г [47]. В 2008 году при 4-м пересмотре классификации ВОЗ были выделены лишь некоторые новые формы ДБККЛ, с учётом иммуногистохимических и молекулярных характеристик опухоли ассоциированные с различным ответом на химиотерапию. Среди таких форм: В-клеточная лимфома, неклассифицируемая, занимающая промежуточное положение между ДБККЛ и лимфомой Ходжкина; В-клеточная лимфома, неклассифицируемая, занимающая промежуточное положение между ДБККЛ и лимфомой

Беркитта; первичная ДБККЛ с поражением центральной нервной системы; первичная кожная ДБККЛ, (leg-type); ДБККЛ, ассоциированная с хроническим воспалением; Эпштейна-Барр вирус позитивная ДБККЛ пожилых; В-крупноклеточная лимфома с богатым

Т-клеточным/гистиоцитарным окружением [119].

1.3. Эпидемиология

ДБККЛ составляет от 30 до 40% среди всех неходжкинских лимфом. Средний возраст больных на момент диагностики составляет 60 лет, диагностируется у детей и у взрослых. Болеют чаще мужчины, соотношение мужчины/женщины составляет 1,5/1 [47]. Частота встречаемости составляет 8 случаев на 100 000 населения [27]. В Европе число вновь диагностированных случаев ДБККЛ составляет 10-14 человек на 100 000 населения в год [41].

1.4. Патогенез

Развитие В-клеточных опухолей, в том числе ДБККЛ, связывают с нарушениями, происходящими в процессе дифференцировки наивных В-клеток в плазматические клетки или в долгоживущие В-клетки памяти. В-клеточный лимфопоэз начинается в костном мозге, где в ранних предшественниках В-лимфоцитов происходят перестройки ДНК, в результате чего в составе генома каждого из них формируется участок, кодирующий вариабельный регион локуса иммуноглобулинов. Вариабельный регион тяжелой цепи формируется при участии УН-, ЭН- и Ш-сегментов, а вариабельный участок легкой цепи каппа или лямбда кодируется УЬ- и ХЬ-сегментами, без участия Б-сегментов. В-клетки, в которых успешно завершены все перестройки, покидают костный мозг, и на

этом заканчивается антигеннезависимый этап созревания. Следующий этап, антигензависимый, происходит во вторичных лимфоидных органах (лимфатические узлы, миндалины, селезенка и другие), куда попадает наивная В-клетка после перестройки генов иммуноглобулинов. Здесь В-клетки подвергаются действию антигена и образуют фолликулы вместе с Т-клетками и дендритными клетками, так формируются зародышевые центры во вторичных лимфоидных фолликулах. При участии Т-клеток в специфическом микроокружении терминальных центров происходит размножение В-клеток, соматическая гипермутация (замена единичных нуклеотидов в гипервариабельных регионах иммуноглобулинов) и созревание аффинности антител В-клеток, селектированных антигеном. После этого В-клетки покидают фолликул, становясь дифференцированными плазматическими клетками или В-клетками памяти [65, 100, 129].

ДБККЛ является гетерогенной группой заболеваний по морфологии, клинической картине, ответу на лечение, что отчасти объяснено благодаря анализу профиля экспрессии генов. При сравнении профилей экспрессии генов оказалось, что ДБККЛ подразделяется на два варианта. Один несет характеристики В-клеток терминального центра (GCB тип), другой -активированных клеток постфолликулярных стадий (ABC тип). Первый вариант поддается терапии в 60%, второй - только в 35% случаев при проведении лечения по схеме R-CHOP. Состояние генов иммуноглобулинов при этих вариантах также различно. При ДБККЛ GCB типа механизм соматической гипермутации не выключен. При ABC типе внутриклоновой гетерогенности нет, то есть соматическая гипермутация завершена [114, 68]. Эти исследования подтвердили более ранние наблюдения, в которых отмечали гетерогенность проявления различных иммуногистохимических маркеров, например CD10 и BCL6 [48, 120].

Исследование профиля экспрессии генов позволило выделить в отдельную, третью группу ДБККЛ, первичную медиастинальную

В-крупноклеточную лимфому (ПМБКЛ). Данная лимфома характеризуется особенностями локализации, иммунофенотипа и биологических признаков. Данные молекулярных исследований свидетельствуют о происхождении ПМБКЛ из В-лимфоцитов тимуса, которые располагаются в мозговом слое вилочковой железы [20, 121].

Для GCB типа ДБККЛ характерным является наличие хромосомных транслокаций с участием локуса тяжелых и легких цепей иммуноглобулина (t(8;14), t(14;18), t(3;14)), а иммуногистохимически выявляется экспрессия антигенов BCL6 и CD 10, которые свойственны В-клеткам зародышевого центра. Другим ключевым механизмом патогенеза для данного типа ДБККЛ могут быть мутации гена р53 {protein 53), вследствие которых происходят нарушения процесса апоптоза.

Для ABC типа ДБККЛ основным механизмом лимфомогенеза считается активация сигнального пути NF-kB {nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated В cells) под воздействием СВМ-комплекса, включающего белки CARD 11 {caspase-associated recruitment domain 11), BCL10 {B-cell lymphoma 10), MALT1 {mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1). СВМ-комплекс постоянно активирован при ДБККЛ вследствие генетических аберраций. В качестве механизма активации этого комплекса рассматривают мутации в определенных доменах CARD11, CD79A {cluster of differentiation 79 alpha chain) и CD79B {cluster of differentiation 79 beta chain). Транскрипционный фактор NF-kB поступает в ядро и включает экспрессию множества генов-мишеней, таких как CCND2 {cyclin D2), IRF4 {interferon 4), BCL2 {B-cell lymphoma 2), LYN (Lck/Yes-related novel protein tyrosine kinase), NFKB1, что приводит к блоку апоптоза [25]. Описан другой механизм активации NF-kB, который включает мутации гена А20, кодирующего убиквитин-связывающий белок, который является негативным регулятором сигнального пути NF-kB [25, 64]. Другим механизмом активации NF-kB, который описан в литературе, является возникновение мутаций рецепторного

домена MYD88 (myeloid differentiation primary response gene 88), приводящих к активации NF-kB сигнального каскада, также как и JAK/STAT-сигнального пути, который опосредует выживание клеток лимфомы при ДБККЛ [29, 89]. Активация NF-kB индуцирует выработку цитокинов IL-6 и IL-10, которые также блокируют апоптоз в опухолевых клетках [26]. Для «активированных» B-клеток при ABC типе ДБККЛ соматических мутаций не выявляют, хромосомные транслокации с участием генов иммуноглобулинов также не характерны.

Для ПМБКЛ одним из ключевых механизмов в патогенезе является амплификация гена JAK2 (janus kinase 2), что приводит к активации JAK-STAT пути. При активации STAT (signal transducer and activator of transcription) его димеры покидают рецептор, транслоцируются в ядро, где активируют транскрипцию, изменяя рост и дифференцировку опухолевых клеток [80]. Еще одним из известных механизмом является повышение экспрессии STAT1 (IL-13 (interleukin 13) сигнальный путь) и TRAF1 (TNF receptor-associated factor J) в опухолевых клетках ПМБКЛ, что приводит к активации NF-kB и повышению выживаемости опухолевых клеток [103].

Участие сигнального пути JAK-STAT в лимфомогенезе описано как для GCB так и для АБС типа ДБККЛ. При стимуляции IL-4 {interleukin 4) имеются различия в ответе при этих типах ДБККЛ. При ABC типе в ответ на стимуляцию IL-4 происходит фосфорилирование АКТ, что не вызывает устойчивого роста фосфорилирования STAT6 в ядре, и, таким образом, не уменьшается пролиферация клеток путем остановки клеточного цикла. В отличие от этого, при GCB типе стимуляция IL-4 вызывает экспрессию белков, на которые направлено ее действие, активируется фосфорилирование STAT6, и увеличивается пролиферация клеток [73]. Негативными регуляторами JAK-STAT сигнального пути являются SOCS-белки (suppressor of cytokine signaling), которые блокируют передачу сигнала от цитокиновых рецепторов к STAT и, таким образом, контролируют пролиферацию клеток.

В целом, в патогенезе ДБККЛ еще многое остаётся неизвестным, в мировой литературе отражены лишь фрагменты, касающиеся отдельных генов или сигнальных путей.

1.5. Клиническая картина

Клиническая картина при ДБККЛ характеризуется быстрым ростом опухолевой массы. Опухоль может достигать больших размеров с вовлечением одного или нескольких нодальных или экстранодальных очагов поражения. Чаще течение заболевания характеризуется как бессимптомное, а при появлении симптомов, их проявление зависит от локализации поражения. Около 50% случаев протекают как локальные формы (I или II стадия по классификации Ann Arbor) [119]. При нодальных ДБККЛ чаще всего на момент диагностики процесс носит генерализованный характер, при этом вовлекаются как периферические, так и висцеральные лимфатические узлы [5, 49, 82]. При этой форме, генерализованной ДБККЛ, часто вовлекается в процесс один или несколько экстранодальных органов (селезенка, желудок, плевра, мягкие ткани), а также костный мозг. Поражение костного мозга определяется в 11-30% случаев, однако с применением иммуногистохимического и молекулярного исследований их количество увеличивается [1, 5, 21, 62, 97]. Изолированное поражение костного мозга встречается крайне редко, и имеются лишь единичные описания случаев [53]. Отсутствие изменений в гемограмме (анемия, тромбоцитопения, лейкоцитоз или лейкопения) не исключает поражение костного мозга. Опухолевые клетки в периферической крови по данным морфологического исследования определяются в 1/3 случаев ДБККЛ с поражением костного мозга [119], Таким образом, лейкемизация, появление опухолевых лимфоидных клеток в периферической крови, является крайне

редким событием при ДБККЛ и по данным классификации ВОЗ 2008 встречается в 5-7% [49].

Экстранодальные ДБККЛ составляют 40% и могут быть локализованными, без вовлечения лимфатических узлов. Чаще всего при экстранодальном течении заболевания вовлечены органы желудочно-кишечного тракта (желудок, толстая и тонкая кишка, печень), кожа, кости, легкие, мягкие ткани, центральная нервная система, почки [1, 4, 5, 82].

По данным литературы имеются достоверные различия в клиническом течение нодальных и экстранодальных форм. Для экстранодальных ДБККЛ характерен более старший возраст больных (старше 60 лет), тяжелый общесоматический статус на момент диагностики, а для нодальных - частое вовлечение костного мозга, наличие В-симптомов и повышение лактат дегидрогеназы (ЛДГ) [82].

При верификации диагноза жалобы пациента соответствуют локализации поражения и чаще связаны с появлением опухоли или признаками сдавления опухолью прилежащих тканей. У 25-60% пациентов имеются неспецифические симптомы, симптомы интоксикации, которые носят название «В-симптомы». К этим симптомам относят лихорадку, потливость в ночное время, потерю веса [1, 4, 5, 49, 82, 97].

Наличие факторов неблагоприятного прогноза при верификации диагноза, таких как большой размер опухоли (более 10 см в диаметре), повышение ЛДГ, тяжелый соматический статус, оцениваемый по шкале ЕСОО, стадия заболевания Ш-1У, наличие более 1 экстранодального очага поражения и В-симптомов, определяется у около 50% всех больных ДБККЛ [6,113].

1.6. Диагностика

При наличии большого разнообразия клинических проявлений ДБККЛ определить распространенность процесса позволяет лишь применение большого количества диагностических исследований. В протоколы обследования пациентов с ДБККЛ включаются: клинический и биохимический анализ крови; иммунохимическое исследование сыворотки крови и мочи, УЗИ органов брюшной полости, почек, малого таза и периферических лимфатических узлов; КТ органов грудной клетки, брюшной полости, малого таза и головного мозга; эндоскопическое исследование органов ЖКТ; гистологическое, иммуногистохимическое, цитогенетическое, молекулярное исследования биоптата опухоли и трепанобиоптата; цитологическое исследование спинномозговой жидкости. При необходимости также выполняется магнитно-резонансная томография (чаще всего при вовлечении центральной нервной системы и костей), сцинтиграфия и позитронно-эмиссионная томография. Диагноз ДБККЛ устанавливается лишь при исследовании биоптата опухолевой ткани, вовлеченной в патологический процесс.

1.6.1. Гистологические и иммуногистохимические характеристики

ДБККЛ

Обязательным для подтверждения диагноза ДБККЛ является гистологическое и иммуногистохимическое исследования биоптата опухоли. При морфологическом исследовании опухоль, имеющая чаще всего диффузный характер роста, представлена крупными клетками с широкой цитоплазмой и округлыми или овальными ядрами. Редко характер роста может быть внутрифолликулярным или синусоидальным. Выделяют три различных морфологических типа ДБККЛ: иммунобластный, центробластный и анаплазированный.

Наиболее часто встречаемым вариантом является центробластный (75-80% случаев). Он представлен лимфоидными клетками среднего или крупного размера с овальными, округлыми ядрами с нежным ядерным хроматином и несколькими ядрышками под ядерной мембраной, везикулоподобными ядрышками. Цитоплазма опухолевых клеток скудная, узкая. Внутри данного варианта выделены еще четыре типа, в зависимости от клеточного состава: мономорфный (преимущественно только иммунобласты), полиморфный (состоит из центробластов, иммунобластов и неклассифицируемых клеток), многодольчатый (большое количество атипичных клеток с многодольчатыми ядрами) и центроцитоидный (центроцитоподобные клетки с грубым хроматином, крупным ядром) [2, 30, 49, 119].

Для иммунобластного варианта характерна пролиферация более 90% клеток с морфологией иммунобластов, то есть клеток, имеющих одно центрально расположенное ядро и значительно выраженную базофильную цитоплазму, при этом количество центробластов не превышает 10%. Данный вариант встречается в 15-20% случаев [2, 30]. Анапластический вариант ДБККЛ встречается в 10-15% случаев. Морфологически представлен крупными и гигантскими клетками с причудливыми ядрами. Могут встречаться дву- и многоядерные клетки, которые могут имитировать клетки Рид-Штернберга или клетки Ходжкина. Этот тип лимфомы может напоминать рак по характеру роста [2, 30, 49, 119].

Иммуногистохимическое исследование играет огромную роль при дифференциальной диагностике различных типов неходжкинских лимфом. Иммунофенотип при ДБККЛ вариабелен, в отличие от многих других лимфом. Опухолевые клетки при ДБККЛ экспрессируют общий лейкоцитарный антиген CD45 и общие В-клеточные антигены (CD 19, CD20, CD22 и CD79a). Поверхностный и/или цитоплазматический иммуноглобулин (IgM > IgG > IgA) может определяться в 50-75% случаев. Детекция

цитоплазматического иммуноглобулина не коррелирует с экспрессией маркеров плазматических клеток, таких как CD38 и CD138. Оба маркера могут быть ко-экспрессированы на С020-позитивных клетках. CD30 может быть экспрессирован при анапластическом варианте. Характерным для ДБККЛ является высокая пролиферативная активность: Ki-67 составляет 40-100% [1,2, 119].

Определение таких антигенов, как CD10, BCL2, BCL6, MUM1 (multiple myeloma-1), CMYC {myelocytomatosis viral oncogene homolog), CD5, имеет прогностическое значение при ДБККЛ и включается в диагностические панели при верификации диагноза [11, 13, 15, 132]. Экспрессия CD10 определяется в 30-60%, BCL6 - в 60-90% и IRF4/MUM1 - в 35-65% случаев ДБКЛЛ [11, 13, 119]. В 5-10% случаев диагностируются CD5+ ДБККЛ, при отсутствии экспрессии белков CCND1 (cyclin Dl) и SOX 11 (transcription factor SOX-11), характерных для лимфомы из клеток мантийной зоны [132]. Также встречаются редкие случаи ALK-позитивных {Anaplastic lymphoma kinase) ДБККЛ, которые составляют 1-2% [69].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гаврилина, Ольга Александровна, 2015 год

Список литературы.

1. Воробьев А.И. Руководство по гематологии. 2-е изд. Медицина. 1985; 2: 157-350.

2. Воробьев А.И., Кременецкая A.M. Атлас опухолей лимфатической системы. М.: Ныоамед; 2007. - 292.

3.Гаврилина O.A., Габеева Н.Г, и соавторы. Роль высокодозной химиотерапии и трансплантации аутологичных стволовых клеток крови у пациентов с диффузной В-крупноклеточной лимфомой. Тер. Арх. 2013; 7: 90-97.

4. Звонков Е.Е. Первичные экстранодальные B-клеточные лимфатические опухоли: клиника, диагностика и лечение. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук. 2009; 47.

5. Магомедова А.У. Диффузная В-крупноклеточная лимфосаркома лимфоидных органов: клинические формы, лечение. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук. 2008; 41.

6. Магомедова А.У., Кравченко С.К., Кременецкая A.M. и соавторы. Девятилетний опыт лечения больных диффузной В-крупноклеточной лимфосаркомой. Тер. Арх. 2011; 83 (7): 5-10.

7. Мационис А.Э., Повилайтите П.Е., Петров А.В. Молекулярно-генетическое исследование клональности В- и Т-лимфоцитов в диагностике неходжкинских лимфом. Архив патологии. 2012; 4:57-62.

8. Поддубная И.В., Савченко В.Г. и соавторы. Российские Клинические Рекомендации по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний. Современная Онкология. 2014. 9-10.

9. Ярилин А.А. Иммунология, М: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 752с.

10.Alizadeh А.А., Elsen М.В., Davis R.E. and et al. Distinct types of diffuse large B-cell lymphoma identified by gene expression profiling. Nature. 2000; 403: 503-511.

1 l.Aukema S.M., Siebert R., Schuuring E. et al. Double-hit B-cell lymphomas. Blood. 2011; 117 (8): 2319-2331.

12.Baetz A., Koelsche C., Strebovsky J., Heeg K., Dalpke A.H. Identification of a nuclear localization signal in suppressor of cytokine signaling 1. FASEB J. 2008;22:4296-305.

13.Barrans S., Crouch S., Smith A. and et al. Rearrangement of MYC is associated with poor prognosis in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated in the era of rituximab. J Clin Oncol. 2010; 28:33603365.

14.Barrans S., Connor S., Evans P. and et al. Rearrangement of the BCL-6 locus at 3q27 is an independent poor prognostic factor in nodal diffuse large B-cell lymphoma. British J. Hemat. 2002; 117: 322-332.

15.Barrans S.L., Carter I., Owen R.G. et al. Germinal center phenotype and BCL-2 expression combined with the International Prognostic Index improves patient risk stratification in diffuse large B-cell lymphoma. Blood. 2002; 99: 1136-1143.

16.Bea S., Colomo L., Lopez-Guillermo and et al. Clinicopathologic significance and prognostic value of chromosomal inbalances in diffuse large B-cell lymphomas. J. of Clin. Oncol. 2004; 22 (17): 3498-3506.

17.Bentink S., Wessendorf S., Schwaenen C., Rosolowski M. Pathway activation patterns in diffuse large B-cell lymphomas. Leukemia. 2008;22: 1746-1754.

18. Betticher D. C., Martinelli G., Radford J. A. and et al. Sequential high dose chemotherapy as initial treatment for aggressive sub-types of Non-Hodgkin Lymphoma: results of the international randomized phase III trial (MISTRAL). Annals of Oncol. 2006; 17(10):1546-1552.

19.Calabrese V., Mallette F.A. SOCS1 links cytokine signaling to p53 and senescence. Mol. Cell. 2009; 36:754-67;

20.Choi W.W., Weisenburger D.D., Greiner T.C. and et al. A new immunostain algorithm classifies diffuse large B-cell lymphoma into molecular subtypes with high accuracy. Clin. Cancer Res. 2009; 15: 5494-5502.

21.Chung R., Lai R., Wei P., Lee J., Hanson J., Belch A.R., Turner A.R., Reiman T. Concordant but not discordant bone marrow involvement in diffuse large B-cell lymphoma predicts a poor clinical outcome independent of the International Prognostic Index. Blood. 2007; 110(4): 1278-1282.

22.Coiffier B. Immunochemotherapy: The new standard in aggressive non-Hodgkin's lymphoma in elderly. Semin. Oncol. 2003; 30; (suppl 2): 21-27.

23.Coiffier B., Lepage E. Prognosis of aggressive lymphomas: a study of five prognostic models with patients included in the LNH-84 regimen. Blood. 1989:1; 74(2):558-564.

24.Coiffier B., Thieblemont C., Van Den Neste E. and et al. Long-term outcome of patients in the LNH-98.5 trial, the first randomized study comparing rituximab-CHOP to standard CHOP chemotherapy in DLBCL patients: a study by the Groupe d'Etudes des Lymphomes de l'Adulte. Blood. 2010;116(12):2040-2045.

25.Compagno M., Lim W.K., Grunn A. and et al. Mutations of multiple genes cause deregulation of NF-kappaB in diffuse large B-cell lymphoma. Nature. 2009; 459 (7247): 717-721.

26.Davis R. E., Brown K. D., Siebenlist U., Staudt L. M. Constitutive nuclear factor kappaB activity is required for survival of activated B cell-like diffuse large B cell lymphoma cells. J. Exp. Med. 2001; 194 (12):1861-1874.

27.Davydov M. I., Aksel E. M. Cancer statistics in Russia and CIS 2009. JOURNAL of N. N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS. 2011; 22, N3 (85), suppl. 1.

28.Dilhuydy M. S., Lamy T., Foussard C. and et al. Front-line high dose chemotherapy with Rituximab showed excellent long term survival in adults with aggressive large B-cell lymphoma: final results of a phase II GOELAMS study. Biol, of Blood and Marrow Transplantation. 2010; 16(5): 672-677.

29.Ding B.B., Yu J.J., Yu R.Y. et al. Constitutively activated STAT3 promotes cell proliferation and survival in the activated B-cell subtype of diffuse large B-cell lymphomas. Blood. 2008; 111 (3): 1515-1523.

30.Engelhard B.M., Brittinger G., Huhn D. and et al. Subclassification of diffuse large B-cell lymphomas according to the Keil classification: distinction of centroblastic and immunoblastic lymphomas is a significant prognostic risk factor. Blood. 1997; 89 (7): 2291-2297.

31.Feugier P., Van Hoof A., Sebban C. and et al. Long-term results of R-CHOP study in the treatment of elderly patients with diffuse large B-cell lymphoma: a study by the Groupe d'Etude des lymphomas de l'Adulte. J. Clin. Oncol. 2005; 23, (18): 4117-4126.

32.Fisher R.I., Gaynor E.R., Dahlberg S. and et al. A phase III comparision of CHOP vs. m-BACOD vs. ProMACE-CytoBOM vs. MACOP-B in patients with intermediate or high-grade non-Hodgkin's lymphomas: results of

SWOG-8516 (Intergroup 0067), the National High-Priority Lymphoma Study. Ann. Oncol. 1994; 5 (2): 91-92.

33.Fisher R.I., Gaynor E.R., Dahlberg S. and et al. Comparison of a standard regimen (CHOP) with three intensive chemotherapy regimens for advanced non-Hodgkin's lymphoma. N. Engl. J. Med. 1993; 328: 1002-1006.

34.Fisher S.G., Fisher R.I. The epidemiology of non-Hodgkin lymphoma. Oncogene. 2004; 23; 6524-6534.

35.Fitoussi O., Belhadj K., Mounier N. and et al. Survival impact of rituximab combined with ACVBP and upfront consolidation autotransplantation in high-risk diffuse large B-cell lymphoma for GELA. Haematologica. 2011; 96: 1136-1143.

36.Fukushima N, Sato N. and et al. Aberrant methylation of suppressor of cytokine signalling-1 (SOCS-1) gene in pancreatic ductal neoplasms. Br J Cancer. 2003;89: 338-343.

37.Galm O., YoshikawaH., Esteller M. and et al. SOCS-1, a negative regulator of cytokine signaling, is frequently silenced by methylation in multiple myeloma. Blood. 2003; 101: 2784-2788.

38.Gavrilina O., Zvonkov E. and et al. Long-term overall survival in diffuse large b-cell lymphoma with bone marrow involvement patients after highdose chemotherapy plus autologous stem cells transplantation. Blood. ASH 2013. [abstract 2169].

39.Gianni A. M., Bregni M., Siena S. and et al. High-dose chemotherapy and autologous bone marrow transplantation compared with MACOP-B in aggressive B-cell lymphoma. New Engl. J. of Med. 1997; 336(18):1290-1297.

40.Gisselbrecht C., Lepage E., Molina T. and et al. Shortened first line highdose chemotherapy for patients with poor-prognosis aggressive lymphoma. J. of Clin. Oncol. 2002; 20(10): 2472-2479.

41 .Glass A., Karnell L., Menck H. The national cancer date base report on non-Hodgkin's lymphoma. Cancer. 1997; 80 (12): 2311-2320.

42.Gomyo H., Shimoyama M.5 Minagawa K., Yakushijin K., Urahama N., Okamura A., Yamamoto K., Ito M., Chihara K., Hayashi Y., Matsui T. Morphologic, flow cytometric and cytogenetic evaluation of bone marrow in volvement inB-cell lymphoma. Haematologica. 2003;88(12): 1358-65.

43.Greb A., Bohlius J., Schiefer D. and et al. Highdose chemotherapy with autologous stem cell transplantation in the first line treatment of aggressive non-Hodgkin lymphoma (NHL) in adults. Cochrane Database Syst Rev. 2008 ;(1):[abstract].

44.Gutierrez-Garcia G., Cardesa-Salzmann T., Climent F. and et al. Geneexpression profiling and not immunophenotypic algorithms predicts prognosis in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with immunochemotherapy. Blood . 2011;117: 4836-4843.

45.Habermann T.M., Weller E.A., Morrison V.A. and et al. Rituximab-CHOP versus CHOP alone or with maintenance rituximab in older patients with diffuse large B-cell lymphoma.J Clin Oncol. 2006;24(19):3121-3127.

46.Haioun C., Lepage E., Gisselbrecht C. and et al. Survival benefit of highdose therapy in poor-risk aggressive non-Hodgkin's lymphoma: final analysis of the prospective LNH87-2 protocol— a groupe d'etude des lymphomes de l'adulte study. Journal of Clinical Oncology. 2000; 18(16): 3025-3030.

47.Hanada T., Kobayashi T., Chinen T. and et al. IFNgamma-dependent, spontaneous development of colorectal carcinomas in SOCS1-deficient mice. J Exp Med. 2006; 203:1391-1397.

48.Hans C.P., Weisenburger D.D., Greiner T.C. and et al. Confirmation of the molecular classification of diffuse large B-cell lymphoma by immunohistochemistry using a tissue microarray. Blood. 2004; 103: 275282.

49.Harris N.L., Jaffe E.S„ Dielbold J. and et al. World Health Organization classification diseases of the hematopoetic and lymphoid tissues: report of the clinical advisory committee meeting. - Airline House, Virginia, 1997. J. Clin. Oncol. 1997; 17 (12): 3835-3849.

50.Harris N.L., Jaffe E.S., Stein H. and et al. A revised European-American Classification of Lymphoid Neoplasm's: a proposal from the International Lymphoma Study Group. Blood. 1994; 84 (5): 1301-1392.

51.Hasselblom S., Ridell B., Nilsson-Ehle H., Andersson P.O. The impact of gender, age and patient selection on prognosis and outcome in diffuse large B-cell lymphoma - a population-based study. Leuk. Lymphoma. 2007; 48(4):736-745.

52.Hasserjian R.P., Ott G., Elenitoba-Johnson K.S. and et al. Commentary on the WHO classification of tumors of lymphoid tissues (2008): "Gray zone" lymphomas overlapping with Burkitt lymphoma or classical Hodgkin lymphoma. J. Hematol. 2009;2(2):89-95.

53.Hishizawa M., Okamoto K., Chonabayashi K. and et al. Primary large B-cell lymphoma of the bone marrow. British J. of Hemat. 2006; 136:351.

54.Hoelzer D., Hiddemann N., Baumann A., et al. High cure rate of adult Burkitt's and other high-grade NHL by the combination of short intensive chemotherapy cycles with rituximab. Hematology. EHA. 2007; abstract 410.

55.Horn H., Ziepert M., Becher C. and et al. MYC status in concert with BCL2 and BCL6 expression predicts outcome in diffuse large B-cell lymphoma. Blood. 2013;121(12):2253-2263.

56.Hummel M., Bentink S., Berger H., Klapper W. A biologic definition of Burkitt's lymphoma from transcriptional and genomic profiling. N.Engl.J.Med. 2006;354: 2419-2430.

57Jiang S., Zhang H.W., Lu M.H., He X.H. and et al. MicroRNA-155 functions as an OncomiR in breast cancer by targeting the suppressor of cytokine signaling 1 gene. Cancer Res. 2010; 70: 3119-3127.

58.Johnson N, Slack G, Savage K, et al. Concurrent expression of MYC and BCL2 in R-CHOP treated diffuse large B cell lymphoma. J. Clin. Oncol. 2012.

59.Jost E., Dahl E., Maintz C.E., Jousten P., Habets L. Epigenetic alterations complement mutation of JAK2 tyrosine kinase in patients with BCR/ABL-negative myeloproliferative disorders. Leukemia. 2007;21: 505-510.

60.Kaiser U., Uebelacker I., Abel U. and et al. Randomized study to evaluate the use of high-dose therapy as part of primary treatment for aggressive lymphoma. J. of Clin. Oncol. 2002; 20(22): 4413-4419.

61.Kamura T., Sato S. Haque D., Liu L., Kaelin W.G.Jr., Conaway R.C., Conaway J.W. The Elongin BC complex interacts with the conserved SOCS-box motif present in members of the SOCS, ras, WD-40 repeat, and ankyrin repeat families. Genes Dev. 1998; 12(24): 3872-3881.

62.Kang B.W., Moon J.H., Chae Y.S., Lee S.J., Kim J.G., Kim Y.K., Lee J.J., Yang D.H., Kim H.J., Kim J.Y., Do Y.R., Park K.U., Song H.S., Kwon K.Y., Kim M.K., Lee K.H., Hyun M.S., Ryoo H.M., Bae S.H., Kim H., Sohn S.K. Clinical outcome of Rituximab-based therapy (RCHOP) in diffuse large B-cell lymphoma patients with bone marrow involvement. Cancer Res Treat. 2013; 45(2): 112-117.

63.Kasamon Y.L., Jones R.J., Piantadosi S. and et al. High-dose therapy and blood or marrow transplantation for non-Hodgkin lymphoma with central nervous system involvement. Biol Blood Marrow Transplant. 2005; 11(2): 93-100.

64.Kato M., Sanada M., Kato I. and et al. Frequent inactivation of A20 in B-cell lymphomas. Nature. 2009; 459 (7247): 712-716.

65.Kim S., Kim H., Kang H., Kim J., Eom H., Kim T.5 Yoon S.S., Suh C., Lee D.Clinical significance of cytogenetic aberrations in bone marrow of patient s with diffuse large Bcell lymphoma: prognostic significance and relevance t o histologic involvement. J Hematol Oncol. 2013 Oct 3;6:76.

66.Klein U., Rajewsky K., Kuppers R. Human immunoglobulin (Ig)M+IgD+ peripheral blood B cells expressing the CD27 cell surface antigen carry somatically mutated variable region genes: CD27 as a general marker for somatically mutated (memory) B cells. J. Exp.Med. 1998; 188:1679-1689.

67.Kluin-Nelemans H. C., Zagonel V., Anastasopoulou A. and et al. Standard chemotherapy with or without high-dose chemotherapy for aggressive non-Hodgkin's lymphoma: randomized Advances in Hematology 9 phase III EORTC study. Journal of the National Cancer Institute. 2001; 93(1): 22-30.

68.Lenz G., Staudt L.M. Mechanisms of disease aggressive lymphomas. N.Engl.J.Med. 2010; 362: 1417-1429.

69.Leval L., Harris N.L. Variability in immunophenotype in diffuse large B-cell lymphoma and it's clinical relevance. Histopath. 2003; 43: 509-528.

70.Li Z., Metze D., Nashan D., Miiller-Tidow C., Serve H.L., Poremba C. Expression of SOCS-1, suppressor of cytokine signalling-1, in human melanoma. J Invest Dermatol. 2004;123: 737-745.

71. Linch D. C., Yung L., Smith P. and et al. Final analysis of the UKLG LY02 trial comparing 6-8 cycles of CHOP with 3 cycles of CHOP followed by a BEAM autograft in patients <65 years with poor prognosis histologically aggressive NHL: research paper. British J. of Haematol. 2010;149(2):237-243.

72.Liu S., Ren S., Howell P., Fodstad O., Riker A.I. Identification of novel epigenetically modified genes in human melanoma via promoter methylation gene profiling. Pigment Cell Melanoma Res. 2008;21: 545558.

73.Lu X., Nechushtan H., Ding F. and et al. Distinct IL-4-induced gene expression, proliferation, and intracellular signaling in germinal center B-cell like and activated B-cell-like diffuse large-cell lymphomas. Blood. 2005; 105: 2924-2932.

74.Mallette F.A., Calabrese V., Ilangumaran S. And et al. SOCS1, a novel interaction partner of p53 controlling oncogene-induced senescence. Aging. 2010; 2 (7): 445-452.

75.Mansell A., Smith R., Doyle S.L. and et al. Suppressor of cytokine signaling 1 negatively regulates Toll-like receptor signaling by mediating Mai degradation. Nat Immunol. 2006;7: 148-155.

76. Martelli M., Gherlinzoni F., De Renzo A. and et al. Early autologous stem-cell transplantation versus conventional chemotherapy as front-line therapy in high-risk, aggressive non- Hodgkin's lymphoma: an Italian multicenter randomized trial. J. of Clin. Oncol. 2003; 21(7): 1255-1262.

77.Martelli M., Vignetti M., Zinzani P. L. and et al. High-dose chemotherapy followed by autologous bone marrow transplantation versus dexamethasone, cisplatin, and cytarabine in aggressive non-Hodgkin's lymphoma with partial response to front-line chemotherapy: a prospective randomized Italian multicenter study. Journal of Clinical Oncology. 1996; 14(2):534-542.

78.Melzner I., Bucur A.J., Bruderlein S. and et. Biallelic mutation of SOCS-1 impairs JAK2 degradation and sustains phospho-JAK2 action in the MedB-1 mediastinal lymphoma line. Blood. 2005; 105: 2535-2542.

79.Melzner I., Weniger M.A., Bucur A.J., Bruderlein S., Dorsch K., Hasel C. Biallelic deletion within 16pl3.13 including SOCS-1 in Karpasll06P mediastinal B-cell lymphoma line is associated with delayed degradation of JAK2 protein. Int J Cancer. 2006; 118: 1941-1944.

80. Melzner I., Weniger M.A., Menz C.K. and et al. Absence of the JAK2 V617F activating mutation in classical Hodgkin lymphoma and primary mediastinal B-cell lymphoma. Leukemia. 2006; 20: 157-158,

81 .Merli M., Arcaini L., Boveri E., Rattotti S., Picone C., Passamonti F., Tenore A., Sozzani L., Lucioni M., Varettoni M., Rizzi S., Morello L., Ferretti V., Pascutto C., Paulli M., Lazzarino M.

Assessment of bone marrow involvement in nonHodgkin's lymphomas: com parison betweenhistology and flow cytometry. Eur J

Haematol. 2010;85(5):405-15.

82.Milpied N., Deconinck E., Gaillard F., et al. Initial treatment of aggressive lymphoma with high-dose chemotherapy and autologous stem-cell support. New England Journal of Medicine. 2004; 350(13): 1287-1295.

83.Moller M.B., Pedersen N.T., Christensen B.E. Diffuse large B-cell lymphoma: clinical implications of extranodal versus nodal presentation - a population-based study of 1575 cases. British J. of Hemat. 2004; 124: 151159.

84.Monti S., Savage K.J., Kutok J.L., Feuerhake F. Molecular profiling of diffuse large B-cell lymphoma identifies robust subtypes including one characterized by host inflammatory response. Blood. 2005; 105:18511861.

85.Mottok A., Renne C., Seifert M., Oppermann E. and et al. Inactivating SOCS1 mutations are caused by aberrant somatichypermutation and restricted to a subset of B-cell lymphoma entities. Blood. 2009; 114: 45034506.

86.Mounier N, Canals C, Gisselbrecht C et al. High-dose therapy and aoutologous stem cell transplantation in first relapse for diffuse large B cell lymphoma in the rituximab era: an analisis based on data from the European Blood and Marrow Transplantation Registry. Blood Marrow Transplant 2011.

87.Muller C., Murawski N., Wiesen M.H. and et al. The role of sex and weight on rituximab clearance and serum elimination half-life in elderly patients with DLBCL. Blood. 2012;119: 3276-3284.

88.Neuwirt H.5 Puhr M., Santer F.R., Susani M., Doppler W., Marcias G. Suppressor of cytokine signaling (SOCS)-l is expressed in human prostate cancer and exerts growth-inhibitory function through down-regulation of cyclins and cyclin-dependent kinases. Am J Pathol. 2009;174:1921-1930.

89.Ngo V.N., Young R.M., Schmitz R. et al. Oncogenically active MYD88 mutations in human lymphoma. Nature. 2011; 470 (7332): 115-119.

90.0ki Y., Westin J.R., Vega F. and et al. Prospective phase II study of rituximab with alternating cycles of hyper-CVAD and high-dose methotrexate with cytarabine for young patients with high-risk diffuse large B-cell lymphoma. Br. J. Haematol. 2013; 163(5):611-620.

91.01ivieri A., Santini G., Patti C. and et al. Upfront high-dose sequential therapy (HDS) versus VACOP-B with or without HDS in aggressive non-Hodgkin's lymphoma: long-term results by the NHLCSG. Annals of Oncol. 2005; 16( 12): 1941—1948.

92.Pettengell R., Radford J.A., Morgenstern G.R. and et al. Survival benefit from high-dose therapy with autologous blood progenitor-cell transplantation in poor-prognosis non-Hodgkin lymphoma. J. Clin. Oncol. 1996; 14;586-592.

93.Pfreundschuh M., Ho A.D., Cavallin-Stahl E. and et al. Prognostic significance of maximum tumor (bulk) diameter in young patients with good-prognosis diffuse large-B-cell lymphoma treated with CHOP-like chemotherapy with or without rituximab: an exploratory analysis of the MabThera International Trial Group (MInT) study. Lancet Oncol. 2008;9: 435-444.

94.Pfreundschuh M., Trumper L., Osterborg A. and et al. CHOP-like chemotherapy plus rituximab versus CHOP-like chemotherapy alone in young patients with good-prognosis diffuse large B-cell lymphoma: a randomized controlled trial by the MabThera International Trial (MinT) Group. Lancet Oncol. 2006; 7; 379-391.

95.Pfreundschuh M. How I treat elderly patients with diffuse large B-cell lymphoma. Blood. 2010;116(24):5103-5110.

96.Pfreundschuh M., Kuhnt E., Trumper L. and et al. CHOP-like chemotherapy with or without rituximab in young patients with good-prognosis diffuse large-B-cell lymphoma: 6-year results of an open-label randomised study of the MabThera International Trial (MInT) Group. Lancet Oncol. 2011; 12(11): 1013-1022.

97.Philip T., Blay B., Gomez F. and et al. The International Index Correlates to survival in patients with aggressive lymphoma in relapse: analysis of the PHARMA trial. Blood. 1998; 92 (10): 3562-3568.

98.Pichiorri F., Suh S.S., Ladetto M. and et al. MicroRNAs regulate critical genes associated with multiple myeloma pathogenesis. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008; 105: 12885-12890.

99.Raccurt M., Tam S.P., Lau P., Mertani H.C., Lambert A., GarciaCaballero T. Suppressor of cytokine signalling gene expression is elevated in breast carcinoma. Br. J. Cancer. 2003;89: 524-532.

100.Rajewsky K. Clonal selection and learning in the antibody system. Nature. 1996; 381: 751-758.

101. Reyes F., Lepage E., Ganem G. and et al. ACVBP versus CHOP plus radiotherapy for localized aggressive lymphoma. N. Engl. J. Med. 2005; 352: 1197-1205.

102.Richard A. Goldsby, Thomas J. Kindt. Immunology, 5th ed. 2003; 285286.

103.Rodig S.J., Savage K.J., Nguyen V. and et al. TRAF1 and c-REL activation are useful adjuncts in distinguishing classical Hodgkin Lymphoma from a subset of morphologically or immunophenotypically similar lymphomas. Amer. J. Surg. Pathol. 2005; 29: 196-203.

104.Rothlin C.V., Ghosh S., Zuniga E.I., Oldstone M.B., Lemke G. TAM receptors are pleiotropic inhibitors of the innate immune response. Cell. 2007; 131: 1124-1136.

105.Rottapel R., Ilangumaran S. The tumor suppressor activity of SOCS-1. Oncogene. 2002; 21: 4351-4362.

106.Sakamoto L.H., Camargo D.E. B., Cajaiba M., Soares F.A., Vettore A.L. MT1G hypermethylation: a potential prognostic marker for hepatoblastoma. Pediatr. Res. 2010;67: 387-393.

107.Santini G., Salvagno L., Leoni P. and et al. VACOP-B versus VACOP-B plus autologous bone marrow transplantation for advanced diffuse non-Hodgkin's lymphoma: results of a prospective randomized trial by the non-Hodgkin's lymphoma cooperative study group. J. of Clin. Oncol. 1998;16(8): 2796-2802.

108.Sasi W., Jiang W.G., Sharma A. and et al. Higher expression levels of SOCS 1,3,4,7 are associated with earlier tumour stage and better clinical outcome in human breast cancer. BMC Cancer. 2010; 10: 178.

109.Savage K.J., Johnson N.A., Ben-Neriah S. and et al. MYC gene rearrangements are associated with a poor prognosis in diffuse large B-cell lymphoma patients treated with R-CHOP chemotherapy. Blood. 2009; 114: 3533-3537.

llO.Schif B, Lennerz J, Kohler C, Bentink S, et al. SOCS1 mutation subtypes predict divergent outcomes in diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) patients. Oncotarget, 2013; 4: 35-47.

11 l.Schif B., Lennerz J.K., Kohler C.W., et al. SOCS1 mutation subtypes predict divergent outcomes in diffuse large B-cell lymphoma patients. Oncotarget 2012;2012;1-13.

112.Sehn L.H., Scott D.W., Chhanabhai M. and et al. Impact of concordant and discordant bone marrow involvement on outcome in diffuse large B-cell lymphoma treated with R-CHOP. J Clin Oncol. 2011;29: 1452-1457.

113.Shipp M.A., Harrington D.P., Anderson J.R. et al. The International Non-Hodgkin's Lymphoma Prognostic Factors Project: a predictive model for aggressive non-Hodgkin's lymphoma. New Engl. J. of Medicine. 1993, 329 (14): 987-994.

114.Shipp M.A., Ross K.N., Tamayo P. and et al. Diffuse large B-cell lymphoma outcome prediction by gene-expression profiling and supervised machine learning. Nat. Med. 2002; 8: 68-74.

115.Shipp V.F., Harrington D.P. A predictive model for aggressive non-Hodgkin's lymphoma. N. Engl. J. Med. 1993; 329 (14): 987-994.

116. Stiff P.J., Unger J.M., Cook J. and et al. Randomized phase III US/Canadian intergroup trial (SWOG S9704) comparing CHOP ± R for eight cycles to CHOP ± R for six cycles followed by autotransplant for patients with high-intermediate (H-Int) or high IPI grade diffuse aggressive non-Hodgkin lymphoma (NHL). J. Clin. Oncol. 201 l;29(suppl):8001. Abstract.

117.Strebovsky J., Walker P., Lang R., Dalpke A.H. Suppressor of cytokine signaling 1 (SOCS1) limits NFkappaB signaling by decreasing p65 stability within the cell nucleus. FASEB J. 2011;25: 863-874.

118.Sutherland K.D., Lindeman G.J., Choong D.Y. and et al. Differential hyper-methylation of SOCS genes in ovarian and breast carcinomas. Oncogene. 2004; 23: 7726-7733.

119.Swerdlow S, Campo E, Harris NL, et al. International Agency for Research on Cancer. WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissue. Geneva, Switzerland: World Health Organization; 2008.

120.Talaulikar D., Shadbolt B., Dahlstrom J.E., McDonald A. Routine use of ancillary investigations in staging diffuse large B-cell lymphoma improve s the International Prognostic Index (IPI). J. Hematol. Oncol. 2009; 22 (2):49.

121.Tarella C., Zanni M., Magni M. and et al. Rituximab improves the efficacy of high-dose chemotherapy with autograft for high-risk follicular and diffuse large B-cell lymphoma: a multicenter Gruppo Italiano Terapie Innovative nei Linfomi survey. J. Clin. Oncol. 2008; 26(19):3166-3175.

122.Uherova P., Ross C.W., Schnitzer B. and et al. The clinical significance of CD 10 antigen expression in diffuse large B-cell lymphoma. Am. J. Clin. Pathol. 2001; 115: 582-588.

123 .Van Besien K., Kelta M., Bahaguna P. Primary mediastinal B-cell lymphoma: a review of pathology and management. J. Clin. Oncol. 2001; 19: 1855-1864.

124.Van Dongen J.J., Langerak A.W., Bruggemann M. Design and standardization of PCR primers and protocols for detection of clonal immunoglobulin and T-cell receptor gene recombinations in suspect lymphoproliferations: report of the BIOMED-2 Concerted Action BMH4-CT98-3936. Leukemia. 2003; 17: 12: 2257—2317.

125.Verdonck L. F., Van Putten W. L. J., Hagenbeek A.and et al. Comparison of chop chemotherapy with autologous bone marrow transplantation for slowly responding patients with aggressive non-Hodgkin's lymphoma. New Engl. J. of Medicine. 1995; 332(16): 1045-1051.

126.Vitolo U., Chiappella A., Angelucci E. and et al. Dose-dense and high-dose chemotherapy plus rituximab with autologous stem cell transplantation for primary treatment of diffuse large B cell lymphoma with a poor prognosis: a phase II multicenter study. Haematologica. 2009; 94(9): 1250-1258.

127.Vitolo U., Liberati A. M., Cabras M. G. and et al. High dose sequential chemotherapy with autologous transplantation versus dose-dense chemotherapy MegaCEOP as first line treatment in poor-prognosis diffuse large cell lymphoma: an "Intergruppo Italiano Linfomi" randomized trial. Haematologica. 2005; 90(6):793-801.

128.Weniger M.A., Melzner I., Menz C.K., Wegener S., Bucur A. J., Dorsch K. Mutations of the tumor suppressor gene SOCS-1 in classical Hodgkin lymphoma are frequent and associated with nuclear phospho-STAT5 accumulation. Oncogene. 2006;25: 2679-2684.

129.Wilson P.C., de Bouteiller O., Liu Y.J. and et al. Somatic hypermutation introduces insertions and deletions into immunoglobulin V genes. J.Exp.Med. 1998; 187: 59-70.

130.Wilson W.H., Dunleavy K., Pittaluga S. and et al. Phase II study of dose-adjusted EPOCH and rituximab in untreated diffuse large B-cell lymphoma with analysis of germinal center and post-germinal center biomarkers. J. Clin. Oncol. 2008;26: 2717-2724.

131.Wilson W.H., Jung S.H., Porcu P. and et al. A Cancer and Leukemia Group B multi-center study of DA-EPOCH-rituximab in untreated diffuse large B-cell lymphoma with analysis of outcome by molecular subtype. Haematologica. 2012; 97(5):758-765.

132.Xu-Monette Z.Y., Tu M., Jabbar K.J. and et al. Clinical and biological

+

significance of de novo CD5 diffuse large B-cell lymphoma in Western countries. Oncotarget. 2015; 6 (8): 5615-5633.

133.Yi S., Liu W., Lyu R., Li Z., Xu Y., Sui W., Huang W., Wang T., Deng S., Liu H., Fu M., Zou D., Qiu L. Dose-intensive immunochemotherapy with or without autologous hematopoietic stem cell transplantation in the treatment of 29 newly diagnosed young patients with medium/high risk diffuse large B-cell lymphoma. Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2014; 35(6):546-50.

134.Yoshida T., Ogata H., Kamio M. and et al. SOCS1 is a suppressor of liver fibrosis and hepatitis-induced carcinogenesis. J Exp. Med. 2004;199:1701-1707.

135.Yoshimura A, Suzuki M, Sakaguchi R, Hanada T, Yasukawa H. SOCS, Inflammation, and Autoimmunity. Front Immunol. 2012;3:20.

136.Yoshimura A. Signal transduction of inflammatory cytokines and tumor development. Cancer Sci.2006;97: 439-447.

137.Zhang J., Li H., Yu J.P., Wang S.E., Ren X.B. Role of SOCS1 in tumor progression and therapeutic application. Int J Cancer. 2012;130:1971— 1980.