Исследование экспрессии апоптоз-специфических генов семейства BCL-2 и системы FAS/FASL при новообразованиях желудка и толстой кишки человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Обухова, Варвара Владимировна

• Обухова, Варвара Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Обухова, Варвара Владимировна

СОДЕРЖАНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Апоптоз как общебиологический процесс

1.2. Белки семейства Вс1

1.3. Новообразования желудка и толстой кишки

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Исследование нарушений регуляции внешнего пути апоптоза при 60 новообразованиях желудка и толстой кишки

3.1.1.1. Экспрессия Fas ^трансформированными и атипическими клетками 60 желудка и толстой кишки

3.1.1.2. Уровень sFas в сыворотке периферической крови больных с 64 новообразованиями желудка и толстой кишки

3.1.1.3. Экспрессия Fas мононуклеарными и полиморфноядерными лейкоцитами 655 периферической крови

3.1.2. Экспрессия FasL при новообразованиях желудка и толстой кишки

3.1.2.1. Экспрессия FasL ^трансформированными и атипическими клетками 65 желудка и толстой кишки

3.1.2.2. Экспрессия sFasL при опухолях желудка

3.1.2.3. Экспрессия FasL мононуклеарными лейкоцитами периферической крови 67 больных с новообразованиями желудка и толстой кишки

3.2. Исследование нарушений регуляции внутреннего пути апоптоза при 69 новообразованиях желудка и толстой кишки

3.2.1. Исследование уровня белков Вс1-2 и Вах с помощью иммуноблоттинга

3.2.2. Иммуногистохимическое исследование уровня белков семейства Bcl-2: Вс1-2, 69 Вах и Вс1-Х

3.2.3. Выявление мутаций в октадезоксигуанозиновой последовательности 3 экзона 78 гена Вах

3.2.4. Локализация белков Вс1-2 и Вах до и после индукции апоптоза

3.1.1. Экспрессия Fas при новообразованиях желудка и толстой кишки

ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Нарушения регуляции внешнего пути апоптоза при новообразованях 95 желудка и толстой кишки

4.1.1. Изменения системы Fas/FasL со стороны опухолевой ткани желудка и 95 толстой кишки

4.1.1.1. Снижение экспрессии Fas атипическими клетками желудка и толстой 95 кишки

4.1.1.2. Снижение уровня sFas в сыворотке периферической крови у больных с 96 новообразованиями желудка и толстой кишки

4.1.1.3. Увеличение экспрессии FasL атипическими клетками желудка и толстой 97 кишки

4.1.1.4. Увеличение уровня sFasL в опухолевой ткани желудка

4.1.2. Изменения системы Fas/FasL со стороны лейкоцитов периферической крови 100 больных с новообразованями желудка и толстой кишки

4.1.2.1. Увеличение экспрессии FasL мононуклеарными лейкоцитами 100 периферической крови больных с новообразованями желудка и толстой кишки

4.1.2.2. Уменьшение экспрессии Fas мононуклеарными и полимофрноядерными 100 лейкоцитами периферической крови больных с новообразованями желудка и толстой кишки

4.2. Нарушения регуляции внутреннего пути апоптоза при новообразованях 103 желудка и толстой кишки

4.2.1. Увеличение экспрессии Вс1-2 атипическими клетками желудка и толстой 103 кишки

4.2.2. Увеличение экспрессии Вс1-Х атипическими клетками желудка и толстой 104 кишки

4.2.3. Увеличение экспрессии Вах атипическими клетками желудка и толстой 105 кишки

4.2.4. Мутации гена Вах - одна из возможных причин утраты проапоптотической 106 активности Вах

4.2.5. Общие тенденции изменения экспрессии апоптоз-специфических генов 108 системы Fas/FasL и семейства Вс1-2 при новообразованиях желудка и толстой кишки

4.3. Применение сканирующей зондовой микроскопии в молекулярной 114 биологии

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование экспрессии апоптоз-специфических генов семейства BCL-2 и системы FAS/FASL при новообразованиях желудка и толстой кишки человека»

Актуальность проблемы. В последние десятилетия во многих странах мира, в том числе в России, отмечается рост заболеваемости злокачественными новообразованиями органов пищеварения, а также увеличение смертности от этих заболеваний. Наиболее часто опухолевые заболевания выявляются в пожилом возрасте (60 лет и старше), однако, все чаще подобный диагноз ставят в более молодом возрасте (40-50 лет). Неудовлетворительное состояние онкологической помощи населению в Российской Федерации привело к росту числа лиц с IV стадией заболевания и увеличению уровня летальности на 1-ом году с момента установления диагноза. Около 80% злокачественных новообразований органов пищеварения приходится на рак желудка, поджелудочной железы и толстой кишки. Таким образом, острота проблемы рака желудка и толстой кишки не снижается на протяжении многих лет. Прогресс в борьбе со злокачественными новообразованиями напрямую зависит от понимания механизмов развития опухолей и их ранней диагностики [2,5,6, 14].

В основе развития опухоли лежит накопление онкотрансформированных клеток либо за счет увеличения их образования, либо за счет снижения уровня клеточной гибели, т.е. опухолевый рост является результатом дисбаланса между пролиферацией клеток и апоптозом [Branet F., 1996; Simonian P.L., 1996]. Эпителиальные клетки желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) относятся к быстроделящимся клеткам, поэтому большинство работ в этой области было сосредоточено на изучении пролифсративной активности опухолей ЖКТ. Однако в последние годы становится все более очевидным, что в развитии злокачественных новообразований ЖКТ важную роль играет нарушение регуляции апоптоза [159].

Апоптоз или программированная клеточная гибель (ПКГ) - общебиологический механизм, ответственный за поддержание постоянства численности клеток организма и элиминацию дефектных или поврежденных клеток. На настоящий момент выделяют два пути реализации программы клеточной гибели. Это рецептор-опосредованный путь апоптоза, который запускается посредством активации рецептора клеточной поверхности, такого как Fas, при связывании с физиологическим лигандом, FasL. Другой путь ПКГ развивается при попадании клетки в неблагоприятные условия. Это митохондриальный путь апоптоза, важную роль в регуляции которого играют белки семейства Вс1-2. Следует отметить, что в ряде случаев ПКГ является результатом комбинированного действия двух путей: с участием и рецепторов плазматической мембраны, и митохондрий [166].

В связи с вышеперечисленным целью настоящего экспериментального исследования явилось изучение экспрессии ключевых генов, белковые продукты которых опосредуют индукцию апоптоза, а также выявление мутаций апоптоз-специфических генов при новообразованиях желудка и толстой кишки человека.

При этом были поставлены следующие задачи исследования:

1. Исследовать содержание белков семейства Вс1-2 в нетрансформированной и опухолевой ткани желудка и толстой кишки человека.

2. Выявить мутации в гене Вах при некоторых новообразованиях человека.

3. Исследовать содержание белков системы Fas/FasL в нетрансформированной и опухолевой ткани желудка и толстой кишки, а также в лейкоцитах периферической крови больных.

4. Установить закономерности изменения содержания белков семейства Вс1-2 и системы Fas/FasL при новообразованиях желудка и толстой кишки человека.

Научная новизна. Впервые при иммуногистохимическом исследовании содержания белков в ткани проведена одновременная оценка двух параметров: количества клеток, экспрессирующих исследуемые белки, и уровня данного белка в клетке. Показано, что в дальнейших исследованиях можно опираться на один из этих двух параметров. Определено содержание белков семейства Вс1-2 и системы Fas/FasL в нетрансформированных и опухолевых клетках при новообразованиях желудка и толстой кишки человека.

При исследовании содержания белков семейства Вс1-2 и системы Fas/FasL у больных с новообразованиями желудка и толстой кишки выявлено статистически значимое увеличение уровня этих белков в опухолевых клетках по сравнению с нетрансформированными (р = 0,03). Установлены положительные корреляционные зависимости между количеством клеток, экспрессирующих исследованные белки, и уровнем белков как в нетрансформированных клетках (для Bcl-2, Вах, Fas и FasL), так и в опухолевых клетках (для Вс1-2, Вах).

Впервые обнаружено, что метастазирование в регионарные лимфатические узлы коррелирует с низким уровнем Fas-рецептора в опухолевой ткани, который, в свою очередь, связан с низким уровнем растворимого Fas (sFas) в сыворотке периферической крови больных с новообразованиями желудка и толстой кишки человека.

Научно-практическая значимость работы. Исследование имеет большое научно-практическое значение, так как в ходе работы проведено комплексное исследование нарушений регуляции рецептор-опосредованного и митохондриального пути апоптоза при новообразованиях желудка и толстой кишки человека. Установление механизмов блокирования процесса апоптоза в дальнейшем позволит установить причины нарушений и, следовательно, пути устранения последних при опухолевых заболеваниях.

Сделано предположение, что определение уровня sFas в сыворотке периферической крови может стать лабораторным тестом определения наличия метастазов при новообразованиях желудка и толстой кишки, а возможно и их ранней диагностики. Полученные данные позволяют провести дополнительные исследования на предмет создания лабораторного теста.

Обнаружена тесная корреляция (г = 0,91; р < 0,0001) между уровнем исследованных белков и количеством клеток, экспрессирующих данные белки, что свидетельствует о взаимозаменяемости этих двух параметров при оценке результатов иммуногистохимического исследования содержания белков в ткаии.

Апробация работы. Результаты исследований доложены на научной сессии факультета подготовки научных и научно-педагогических кадров ММА им. И.М. Сеченова (май 2000, Москва), на Всероссийском совещании «Клеточная биология на пороге XXI века» (октябрь 2000, Санкт-Петербург), на II и III Конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (апрель 2001 и январь 2004, Москва), на международной конференции «Scanning probe microscopy» (март 2002 и март 2003, Нижний Новгород), на Научно-практическом симпозиуме «Технологии генодиагностики в практическом здравоохранении» в рамках Международной конференции «Геномика, протеомика и биоинформатика для медицины» (июнь 2002, Москва), а также неоднократно обсуждалась на научно-практических конференциях кафедры биохимии ММА им. И.М. Сеченова. Апробация работы состоялась на совместном заседании кафедры биохимии ММА им. И.М. Сеченова и лабораторий НИИ молекулярной медицины ММА им. И.М. Сеченова 3 декабря 2003 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ в отечественных и зарубежных изданиях, 2 работы приняты в печать.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Обухова, Варвара Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В опухолевой ткани желудка и толстой кишки обнаружено увеличение уровня антиапоптотического белка Вс1-2 в 1,5 раза и проапоптотического белка Вах в 1,5 раза по сравнению с нетрансформированной тканью.

2. Выявлены соматические мутации в гене Вах у 20% больных с новообразованиями желудка и толстой кишки, а также в клеточных линиях SKOV3, IM9 и СЕМ. Показано, что клеточная линия SKOV3 имеет генотип G7/G9 в отличие от нативного гена Вах G8/G8.

3. Обнаружено уменьшение количества Fas-положительных клеток в метастазирующих опухолях желудка и толстой кишки по сравнению с неметастазирующими опухолями в 1,6 раза, а также снижение уровня Fas в клетках метастазирующих опухолей по сравнению с клетками нетрансформированной ткани в 2 раза и неметастазирующих опухолей в 3 раза.

4. Показано, что снижение уровня Fas в опухолевой ткани коррелирует со снижением уровня sFas в сыворотке периферической крови больных с новообразованиями желудка и толстой кишки.

5. При новообразованиях желудка и толстой кишки установлено увеличение количества FasL- положительных клеток в опухолевой ткани по сравнению с нетрансформированной, а также повышение уровня FasL в опухолевых клетках по сравнению с нетрансформированными и образование sFasL.

6. Обнаружена тесная корреляция (г = 0,91; р < 0,0001) между уровнем исследованных белков и количеством клеток, экспрессирующих данные белки, что свидетельствует о взаимозависимости этих двух параметров.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Обухова, Варвара Владимировна, 2004 год

1. Аббасова С.Г., Липкин В.М., Трапезников H.H., Кушлинский Н.Е. Система Fas-FasL в норме и при патологии // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1999.- №3.- С.3-17

2. Аксель Е.М., Казубская Т.П., Белев Н.Ф. и др. Генетика рака желудочно-кишечного тракта. 2001. - №4.-Т. 3.-С. 141-145

3. Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Иммунологические проблемы апоптоза. М.: Эдиториал УССР, 2002. - 320 с.

4. Белушкина Н. Н., Хасан Хамад А., Северин С. Е. Молекулярные основы апоптоза // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998. - №4.-С. 15-24

5. Воробьев Г.И., Одарюк Т.С., Шелыгин Ю.А. Диагностика и лечение рака толстой кишки//Русский медицинский журнал. 1998.-том 6.-№ 19.-е. 1244-1256

6. Гарькавцева Р.Ф., Давыдов М.И., Ушакова Т.И. и др. Злокачественные новообразования желудочно-кишечного тракта: основные статистические показатели и тенденции // Современная онкология. 2001. - №4. - Т. 3. — С. 151153

7. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. СПб.: Специальная литература, 1997. -287 с.

8. Зыкова Е.С. Разработка универсальной системы ДНК-диагностики, основанной на ПЦР, и ее использование для обнаружения мутаций LEIDEN у больных венозными тромбозами (диссертация), 1998

9. Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). М.: Медицина, 2001. -192 с.

10. Методы биологических исследований (липидный и энергетический обмен). Под редакцией проф. Прохоровой М.И. // Ленинград. Издательство Ленинградского университета. (1982), стр. 29-33; стр. 207-212

11. Молекулярная клиническая диагностика. Методы: Пер. с англ./ Под ред. С Херрингтона, Дж. Макги. М.: Мир, 1999. - 558 с.

12. Москалева Е.Ю., Сладкова Л.В., Обухова В.В. и др. Регуляция чувствительности опухолевых клеток с помощью антисмысловых олигонуклеотидов к гену Bcl-2 II Молекулярная медицина. 2003. - №. 1.-е. 45-51

13. Орлова Л.П. Клиническое значение ультрасонограффии в диагностике рака толстой кишки // Русский медицинский журнал. 1998. - том 6. - № 19. - с. 12581263

14. Практическая химия белка: Пер. с англ./ Под ред. А. Дарбле. М.: Мир, 1989. - 623 с.

15. Программированная клеточная гибель, под ред. Новикова B.C., С-Пб.: "Наука", 1996.

16. Северин С.Е. Биохимия и медицина новые подходы и достижения. - М.: Русский врач, 1998.-96с.

17. Смирнов А.Б. Заболеваемость раком желудка. http://www.sci.aha.ru/ATL/ra531.htm. -1998

18. Федоров Н.А., Суханов Ю.С., Асади Мобархан А.Х., Артемьев М.И. Полимеразиая цепная реакция (ПЦР). Методическое пособие для начинающих/Принципы и практические рекомендации для ее постановки с целью детекции микроорганизмов. - 1996.- 33 с.

19. Хайкин М.С., Володин А.П., Трояновский A.M., Эдельман B.C. Сканирующие туннельные микроскопы. // Приборы и техника эксперимента. 1987. - № 4. - с. 231-232

20. Чемерис А.В., Ахунов Э.Д., Вахитов В.А. Секвенирование ДНК. М.: Наука, 1999. -429 с.

21. Ackermann Е. J., Taylor J. К., Narayana R. et al. The role of antiapoptotic Bcl-2 family members in endothelial apoptosis elucidated with antisense oligonucleotides // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 16. - P. 11245-11252

22. Adrain C., Creagh E. M., Martin S. J. Apoptosis-associated release of Smac/DIABLO from mitochondria requires active caspases and is blocked by Bcl-2 // The EMBO journal.- 2001. Vol. 20. - N. 23. - P. 6627-6636

23. Antonsson B. Bax and other pro-apoptotic Bcl-2 family "killer-proteins" and their victim the mitochondrion // Cell Tissue Res. 2001. - Vol. 306. - N. 3. - P. 347-361

24. Antonsson В., Montessuit S., Sanchez B. et al. Bax is present as a high molecular weight oligomer/complex in the mitochondrial membrane of apoptotic cells // The journal of biological chemistry.-2001.-Vol. 276.-N. 15-P. 11615-11623

25. Apte S.S., Mattei M.G. and Olsen B.R. Mapping of the human Bax gene to chromosome 19ql3.3 ql3.4 and isolation of a novel alternatively spliced transcript, Bax delta // Genomics. - 1995. - Vol. 26. - P. 592-594

26. Aschoff A. P., Ott U., Funfstuck R. ct al. Colocalisation of Bax and Bcl-2 in small intestine and kidney biobsies with different degrees of DNA fragmentation // Cell Tissue Res. 1999. - Vol. 296. - P. 351-357

27. Asoh S„ Nishimaki K., Nanbu-Wakao R. et al. A tracc amount of the human pro-apoptotic factor Bax induces bacterial death accompanied by damage of DNA // The journal of biological chemistry. 1998. - Vol. 273. - N. 18. - P. 11384-11391

28. Ayhan A., Yasui W., Yokozaki H. et al. Loss of heterozygosity at the Bcl-2 gene locus and expression of Bcl-2 in human gastric and colorectal carcinomas // Jpn. J. Cancer research. 1994. - Vol. 85. - N. 6. - P. 584-591

29. Bardelli A. HGF receptor associates with the anti-apoptotic protein Bag-1 and prevents cell death //The EMBO journal. 1996. - Vol. 15. - P. 6205-6212

30. Basanez G., Nechushtan A., Drozhinin O. et al. Bax, but not Bcl-XL, decreases the lifetime of planar phospholipid bilayer membranes at subnanomolar concentrations // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - N. 10. - P. 5492-5497

31. Basanez G., Zhang J., Chau B. N. et al. Pro-apoptotic cleavage products of Bcl-XL form cytochrome c-conducting pores in pure lipid membranes // The journal of biological chemistry. 2001. - Vol. 276. - P. 31083-31091

32. Bello D.B., Valentini M.A., Zunino F. et al. Cleavage of Bcl-2 in oxidant- and cisplatin-induced apoptosis of human melanoma cells // Oncogene. 2001. - Vol. 20. - N. 33. - P. 4591-4595

33. Bennett M.W., O'Connell J., Houston A. et al. Fas ligand upregulation is an early event in colonic carcinogenesis // J. Clin. Pathol. 2001. - Vol. 54. - N. 8. - P. 598-604

34. Bennett M.W., O'connell J., O'sullivan G.C. et al. Expression of Fas ligand by human gastric adenocarcinomas: a potential mechanism of immune escape in stomach cancer // Gut. 1999. - Vol. 44. - N. 2. - P. 156-162

35. Bosari S., Moneghini L., Graziani D. et al. bcl-2 oncoprotein in colorectal hyperplastic polyps, adenomas, and adenocarcinomas // Hum. Pathol. 1995. - Vol. 26. - N. 5. - P. 534-540

36. Brady H.J.M., Gil-Gomez G. Molecules in focus Bax. The pro-apoptotic Bcl-2 family member, Bax //The international journal of boichemistry and cell biology. 1998. - Vol. 30. - P. 6407-650

37. Branet F., Brousset P., Krajevski S. Expression of the cell death inducing gene Bax in carcinomas developed from the follicular cells of the thyroid gland // Journal of clinical endocrinology and metabolism. 1996. - Vol. 81. - N. 7. - P. P2726-P2730

38. Bukholm I.K., Nesland J. M. Protein expression of p53, p21 (WAF1/CIP1), Bcl-2, Bax, cyclin D1 and pRb in human colon carcinomas // Virchows Arch. 2000. - Vol. 436. -P. 224-228

39. Butler L.M., Hewett P.J., Butler W.J. et al. Down-regulation of Fas gene expression in colon cancer is not a result of allelic loss or gene rearrangement // Br. J. Cancer. 1998. - Vol. 77. - N. 9. - P. 1454-1459

40. Chandra D., Liu J.-W., Tang D. G. Early Mitochondrial activation and cytochrome c up-regulation during apoptosis // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. -N. 52. - P. 50842-50854

41. Chang B. S., Minn A. J., Muchmore S.W. et al. Identification of a novel regulatory domain in Bcl-XL and Bcl-2 // The EMBO journal. 1997. - Vol. 16. - N. 5. - P. 968977

42. Chao D. T., Korsmeyer S. J. Bcl-2 family: regulators of cell death // Annu. Rev. Immunol. 1998. - Vol. 16. - P. 395-419

43. Charalambous G. K., Gomatos I. P., Konstadoulakis M. M. et al. Protein expression of Bax, Bcl-2, and p53 in patients with non-Hodgkin's gastric lymphoma: prognostic significance // World j. Surg. 2000. - Vol. 24. - P. 608-614

44. Cheng S.C., Luo D., Xie Y. Taxol induced Bcl-2 protein phosphorylation in human hepatocellular carcinoma QGY-7703 cell line // Cell Biol. Int. 2001. - Vol. 25. - N. 3. -P. 261-265

45. Chinnaiyan A.M., O'Rourke K., Lane B.R., Dixit V.M. Interaction of Ced-4 with Ced-3 and Ced-9: a molecular frame for cell death // Science. 1997. - Vol. 275. - P. 1122-1126

46. Choi K.C., Kang S.K., Tai C.J. et al. Estradiol up-regulates antiapoptotic Bcl-2 messenger ribonucleic acid and protein in tumorigenic ovarian surface epithelium cells // Endocrinology. 2001. - Vol.142. - N. 6. - P. 2351-2360

47. Clem R. J., Cheng E. H.-Y., Karp C. L. et al. Modulation of cell death by Bcl-XL through caspase interaction // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95. - N. 2. - P. 554-559

48. Dedkov V.G., Obukhova V.V., Belushkina N.N., Efimov A.E. // Physics of Low-Dimentional Stractures. 2002. - Vol. 5. - N. 6. - P. 75-78

49. Dewson G., Cohen G.M., Wardlaw A.J. Interleukin-5 inhibits translocation of Bax to the mitochondria, cytochrome c release, and activation of caspases in human eosinophils // Blood. 2001. - Vol. 98. - N. 7. - P. 2239-2247

50. Druilhe A., Wallaert B., Tsicopoulos A. et al. Apoptosis, proliferation, and expression of Bcl-2, Fas, and Fas ligand in bronchial biopsies from asthmatics // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1998. - Vol. 19. - N. 5. - P. 747-757

51. Eissa S., Seada L.S. Quantitation of Bcl-2 protein in bladder cancer tissue by enzyme immunoassay: comparison with Western blot and immenohistochemistry // Clinical chemistry. 1998. - Vol. 44. - N. 7. - P. 1423-1429

52. Eskes RM Antonsson B.,Osen-Sand A. et al. Bax-induced cytochrome c release from mitochondria is independent of the permeability transition pore but highly dependent on Mg2+ ions //The journal of cell biology. 1998. - Vol. 143. - P. 217-224

53. Eskes R., Desagher S., Antonsson B. Bid induces the oligomerization and insertion of Bax into the outer mitochondrial membrane // Molecular and cellular biology. — 2000. — Vol. 20.-N. 3.-P. 929-935

54. Farid P., Gomb S.Z., Peter I. et al. Bcl-2, p53 and Bax in thyroid tumors and their relation to apoptosis // Neoplasma. 2001. - Vol. 48. - N. 4. - P. 299-301

55. Ferrante A., Thong Y.H. A rapid one-step procedure for purification of mononuclear and polymorphonuclear leukocytes from human blood using a modification of the Hypaque-Ficoll technique // J. Immunol. Methods. 1978. - Vol. 24. - P. 389-393

56. Finucane D. M., Bossy-Wetzel E., Waterhouse N. J. et al. Bax induced caspase activation and apoptosis via cytochrome c release from mitochondria is inhibitable by Bcl-XL // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 4. - P. 2225-2233

57. Fortuno M. A., Zalba G., Ravassa S. et al. p53 mediated upregulation of Bax gene transcription is not involved in Bax a protein overexpression in the left ventricle of spontaneously hypertensive rats // Hypertension. 1999. - Vol. 33. - P. 1348-1352

58. Fracker P.J., King L.E., Lill-Elghanian D., Telfold W.G. Quantification of apoptotic events in pure and heterogeneous populations of cells using the flow cytometer // Methods in cell biology. 1995. - V. 46. - P. 57-76

59. Friess HM Lu Z., Graber H. U. et al. Bax, but not Bcl-2, influences the prognosis of human pancreatic cancer//Gut. 1998. - Vol. 43. - P. 414-421

60. Gaumann A., Tews D.S., Mayer E. et al. Expression of apoptosis-related proteins, p53, and DNA fragmentation in sarcomas of the pulmonary artery // Cancer. 2001. - Vol. 92.-N. 5.-P. 1237-1244

61. Germain M., Mathai J. P., Shore G. C. BH-3-only BIK functions at the endoplasmic reticulum to stimulate cytochrome c release from mitochondria // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. - P. 18053-18060

62. Gil J., Yamamoto H„ Zapata J. M. et al. Impairment of the proapoptotic activity of Bax by missense mutations found in gastrointestinal cancers // Cancer research. — 1999. — Vol. 59.-P. 2034-2037

63. Gobe G., Rubin M., Williams G. et al. Apoptosis and expression of Bcl-2, Bcl-XL, and Bax in renal cell carcinomas // Cancer Investigation. 2002. - Vol. 20. - P. 324-332

64. Gong B., Chen Q., Endlich B. et al. Ionizing radiation induced Bax mediated cell death is dependent on activation of cysteine and serine proteases // Cell Growth & Differentiation. 1999. - Vol. 10. - P. 491-502

65. Goping I.S., Gross A., Lavoie J. N. et al. Regulated targeting of Bax to mitochondria // The journal of cell biology. 1998. - Vol. 143. - N. 1. - P. 207-215

66. Griffiths G. J., Dubrez L., Morga C. P. et al. Cell damage-induced conformational changes of the pro-apoptotic protein Bak in vivo precede the onset of apoptosis // The journal of cell biology.- 1999. Vol. 144. - N. 5. - P. 903-914

67. Gross A., Jockel J., Wei M. C. et al. Enforced dimerization of Bax results in its translocation, mitochondrial dysfunction and apoptosis // The EMBO journal. 1998. -Vol. 17.-P. 3878-3885

68. Gross A., McDonnell J. M., Korsmeyer S. J. Bcl-2 family members and the mitochondria in apoptosis//Genes Dev.-1999.-Vol. 13.-N. 15.-P. 1899-1911

69. Guo B., Godzik A., Reed Y.R. Bcl-G, a novel pro-apoptotic member of the Bcl-2 family //The journal of biological chemistry. 2001. - Vol. 276. - N. 4. - P. 2780-2785

70. Guo Y., Srinivasula S. M., Druilhe A. et al. Caspase-2 induces apoptosis by releasing proapoptotic proteins from mitochondria // The journal of biological chemistry. — 2002. -Vol. 277.-P. 13430-13437

71. Gurin C. C., Federici M. G., Kang L.et al. Causes and consequences of microsatellite instability in endometrial carcinoma // Cancer research. 1999. - Vol. 59. - P. 462-466

72. Hansma P.K., Elings V.B., Marti O., Bracker C.E. Scanning tunneling microscopy and atomic force microscopy: application to biology and technology // Science. 1988. -Vol. 242.-P. 209-216

73. Harima Y., Harima K., Shikata N. et al. Bax and BcI-2 expressions predict response to radiotherapy in human cervical cancer// J. Cancer research. Clin. Oncol. 1998. - Vol. 124.-P. 503-510

74. Harris M. H., Heiden M. G. V., Kron S. J. et al. Role of oxidative phosphorylation in Bax toxicity // Molecular and cellular biology. 2000. - Vol. 20. - N. 10. - P. 3590-3596

75. Heiden M. G. V., Chandel N. S., Li X. X. et al. Outer mitochondrial membrane permeability can regulate coupled respiration and cell survival // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97. - N. 9. - P. 4666-4671

76. Hengartner M.O. The biochemistry of apoptosis // Nature. 2000. - Vol. 407. - P. 770776

77. Hirotani M., Zhang Y., Fujita N. et al. NH2-terminal BH4 domain of Bcl-2 is functional for heterodimerization with Bax and inhibition of apoptosis // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 29. - P. 20415-20420

78. Holler N., Tardivel A., Kovacsovics-Bankowski M. et al. Two adjacent trimeric Fas ligands are required for Fas signaling and formation of a death-inducing signaling complex // Molecular and Cellular Biology. 2003. - Vol. 23. - N. 4. - P. 1428-1440

79. Hsu Y.-T., Youle R. J. Nonionic detergents induce dimerization among members of the Bcl-2 family // The journal of biological chemistry. 1997. - Vol. 272. - N. 21. - P. 13829-13834

80. Huang C.-l., Kohno N., Inufusa H. et al. Overexpression of Bax associated with mutations in the loop-sheet-helix motif of p53 // American journal of pathology. 1999. -Vol. 155.-P. 955-965

81. Huang D.C.S., Hahne M., Schroeter M. et al. Activation of Fas by FasL induces apoptosis by a mechanism that cannot be blocked by Bcl-2 or Bcl-XL// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - P. 14871-14876

82. Huang D.C.S., O'Reilly L. A., Strasser A. et al. The anti-apoptosis function of Bcl-2 can be genetically separated from its inhibitory effect on cell cycle entry // The EMBO journal. 1997. - Vol. 16. - N. 15. - P. 4628-4638

83. Iimura M., Nakamura T., Shinozaki S. et al. Bax is downregulated in inflamed colonic mucosa of ulcerative colitis // Gut. 2000. - Vol. 47. - P. 228-235

84. Ilyas M., Hao X.P., Wilkinson K. et al. Loss of Bcl-2 expression correlates with tumour recurrence in colorectal cancer // Gut. 1998. - Vol. 43. - N. 3. - P. 383-387

85. Inohara N., Ekhterae D„ Garcia I. et al. Mtd a novel Bcl-2 family member activates apoptosis in the absence of heterodimerization with Bcl-2 and Bcl-XL // The journal of biological chemistry. - 1998. - Vol. 273. - N. 15. - P. 8705-8710

86. Ionov YM Yamamoto H., Krajewski S. et al. Mutational inactivation of the proapoptotic gene Bax confers selective advantage during tumor clonal evolution // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97. - N. 20. - P. 10872-10877

87. Jansson A., Sun X.F. Bax expression decreases significantly from primary tumor to metastasis in colorectal cancer// J. Clin. Oncol. 2002. - Vol. 20. - N. 3. - p. 811-816

88. Jia L., Patwari Y., Srinivasula S.M. et al. Bax translocation is crucial for the sensitivity of leukaemic cells to etoposide-induced apoptosis // Oncogene. 2001. - Vol. 20. — N. 35. -P. 4817-4826

89. Johnson A. L. Editorial: Mcl-1 just another antiapoptotic Bcl-2 homolog? // Endocrinology. - 1999. - Vol. 140. - N. 12. - P. 5465-5468

90. Kaklamanis L., Savage A., Whitehouse R. et al. Bcl-2 protein expression: association with p53 and prognosis in colorectal cancer // Br. J. Cancer. 1998. - Vol. 77. - N. 11.— P. 1864-1869

91. Khaled A. R., Kim K., Hofmeister R. et al. Withdrawal of IL-7 induces Bax translocation from cytosol to mitochondria through a rise in intracellular pH // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - N. 25. - P. 14476-14481

92. Kim T.-H., Zhao Y., Barber M. J. et al. Bid induced cytochrome с release is mediated by a pathway independent of mitochondrial permeability transition pore and Bax // The journal of biological chemistry. 2000. - Vol. 275. - N. 50. - P. 39474-39481

93. Kingham P. J., Pocock J. M. Microglial apoptosis induced by chromogranin A is mediated by mitochondrial depolarisation and the permeability transition but not by cytochrome с release // Journal of neurochemistry. 2000. - Vol. 74. - N. 4. - P. 14521462

94. Kirsch D.G., Doseff A., Chau B. N. et al. Caspase-3-dependent cleavage of Bcl-2 promotes release of cytochrome с // The journal of biological chemistry. 2001. - Vol.274.-N. 30.-P. 21155-21161

95. Kluck R.M., Bossy-Wetzel E., Green D.R. et al. The release of cytochrome с from mitochondria: a primary site for Bcl-2 regulation of apoptosis // Science. 1997. - Vol.275.-P. 1132-1136

96. Komatsu К., Suzuki S„ Ohara S. et al. Expression of Bcl-2 and Bax in human gastric cancer tissue // Nippon Rinsho. 1996. - Vol. 54. - N. 7. - P. 1929-1934

97. Kondo S., Shinomura Y., Kanayama S. et al. Over-expression of Bcl-XL gene in human gastric adenomas and carcinomas // Int. J. Cancer. 1996. - Vol. 68. - N. 6. - P. 727-730

98. Kornblau S.M., Vu H.T., Ruvolo P. et al. Bax and PKCa modulate the prognostic impact of Bcl-2 expression in acute myelogenous leukemia // Clinical cancer research. -2000. Vol. 6. - P. 1401-1409

99. Koyama S., Koike N., Adachi S. Fas receptor counterattack against tumor-infiltrating lymphocytes in vivo as a mechanism of immune escape in gastric carcinoma // J. Cancer research. Clin. Oncol. 2001. - Vol. 127. - N. 1. - P. 20-26

100. Krajewska M., Fenoglio-Preiser C.M., Krajewski S. et al. Immunohistochemical analysis of Bcl-2 family proteins in adenocarcinomas of the stomach // American journal of pathology. 1996. - Vol. 149. - N. 5. - P. 1449-1457

101. Krajewska M., Moss S.F., Krajewski S. et al. Elevated expression of Bcl-X and reduced Bak in primary colorectal adenocarcinomas // Cancer research. 1996. - Vol. 56.-N. 10.-P. 2422-2427

102. Krammer P. H. CD95's deadly mission in the immune system // Nature. 2000. -Vol. 407.-P. 789-795

103. Krueger A., Baumann S., Krammer P. H., Kirchhoff S. FLICE-inhibitory proteins: regulators of death receptor-mediated apoptosis // Molecular and cellular biology. 2001. - Vol. 21. - N. 24. - P. 8247-8254

104. Kurabayashi A., Furihata M„ Matsumoto M. et al. Expression of Bax and apoptosis-related proteins in human esophageal squamous cell carcinoma including dysplasia // Mol. Pathol. 2001. - Vol. 306. - N. 3. - P. 741-747

105. Lam M., Bhat M. B., Nunez G. et al. Regulation of Bcl-XL channel activity by calcium // The journal of biological chemistry. 1998. - Vol. 273. - N. 28. - P. 1730717310

106. Lee S.S., Cho K.J., Hong S.I. et al. Nuclear overexpression of Bcl-2 oncoprotein during the progression of human stomach cancer // J. Korean. Med. Sci. 1998. - Vol. 13.-N. 2.-P. 153-158

107. Leung W. K., Kim J. J., Kim J. G. et al. Microsatellite instability in gastric intestinal metaplasia in patients with and without gastric cancer // American journal of pathology. 2000. - Vol. 156. - P. 537-543

108. Li B., Dou Q. P. Bax degradation by the ubiquitin/proteasome-dependent pathway: Involvement in tumor survival and progression // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2000. Vol. 97. - N. 8. - P. 3850-3855

109. Li P.-F., Dietz R„ von Harsdorf R. p53 regulates mitochondrial membrane potential through reactive oxygen species and induces cytochrome c-independent apoptosis blocked by Bcl-2 // The EMBO journal. 1999. - Vol. 18. - P. 6027-6036

110. Liang Y., Nylander K. D., Yan C., Schor N. F. Role of caspase 3-dependent Bcl-2 cleavage in potentiation of apoptosis by Bcl-2 // Mol. Pharmacol. 2002. - Vol. 61. - P. 142-149

111. Lian-Jun Y., Wen-Liang W. Expression of Bcl-2 and Bax proteins in hepatocellular carcinoma tissue // J. Fourth Mil. Med. Univ. 2002. - Vol. 23. - P. 337340

112. Lim M.L., Minamikawa T., Nagley P. The protonophore CCCP induces mitochondrial permeability transition without cytochrome c release in human osteosarcoma cells // FEBS Lett. 2001. - Vol. 503. - N. 1. - P. 69-74

113. Lim S.C. Fas-related apoptosis in gastric adenocarcinoma // Oncol. Rep. 2003. -Vol. 10.-N. l.-P. 57-63

114. Lindblom B, Holmlund G. Rapid DNA purification for restriction fragment length polymorphism analysis // Gene Anal. Tech. 1988. - Vol. 5. - N. 5. - P. 97-101.

115. Ling Y.-H., Tornos C., Perez-Soler R. Phosphorylation of Bcl-2 is a marker of M fhase events and not a determinant of apoptosis // The journal of biological chemistry. -1998. Vol. 273. - N. 30. - P. 18984-18991

116. Liu X.-H., Castelli J. C., Youle R. J. Receptor-mediated uptake of an extracellular Bcl-XL fusion protein inhibits apoptosis // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - Vol.96. -N. 17. - P. 9563-9567

117. Lock R. B. Bcl-2 inhibits a Fas induced conformational change in the Bax N-terminus and Bax mitochondrial translocation // The journal of biological chemistry. -2000. Vol. 275. - N. 23. - P. 17225-17228

118. MacFarlane M., Merrison W., Bratton S. B. et al. Proteasome-mediated degradation of Smac during fpoptosis: XIAP promotes Smac ubiquitination in vitro // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. - P. 36611-36616

119. Marani M„ Tenev T., Hancock D. et al. Identification of novel isoforms of the BH3 domain protein Bim which directly activate Bax to trigger apoptosis // Molecular and cellular biology. 2002. - Vol. 22. - N. 11. - P. 3577-3589

120. Marone M., Scambia G.f Mozzetti S. et al. Bcl-2, Bax, Bcl-XL, and Bcl-XS expression in normal and neoplastic ovarian tissues // Clinical cancer research. 1998. -Vol.4.-P. 517-524

121. Martin A. G., Fearnhead H. O. Apocytochrome c blocks caspase-9 activation and Bax-induced apoptosis // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. - P. 50834-50841

122. Martin S., Toquet C., Oliver L. et al. Expression of Bcl-2, Bax and Bcl-XL in human gliomas: a re-appraisal // J. Neurooncol. 2001. - Vol. 52. - N. 2. - P. 129-139

123. Marzo I., Brenner C., Zamzami N. et al. Bax and adenune nucleotide translocator cooperate in the mitochondrial control of apoptosis // Science. 1998. - Vol. 281. - P. 2027-2030

124. Matsuyama S., Schendel S. L., Xie Z. et al. Cytoprotection by Bcl-2 requires the pore-forming a5 and a6 helices // The journal of biological chemistry. 1998. - Vol. 273. - N. 47. - P. 30995-31001

125. Maurer C.A., Friess H„ Buhler S.S. et al. Apoptosis inhibiting factor Bcl-XL might be the crucial member of the Bcl-2 gene family in colorectal cancer // Dig. Dis. Sei. 1998. - Vol. 43. - N. 12. - P. 2641-2648

126. McDonnel J., Bechm A., Sarkiss M. et al. Importance of the Bcl-2 family in cell death regulation // Experientia. 1996. - Vol. 52. - P. 1008-1017

127. McGinnis K. M., Gnegy M. E., Wang K. K. W. Endogenous Bax translocation in SH-SY5Y human neuroblastoma cells and cerebellar granule neurons undergoing apoptosis //Journal of neurochemistry. 1999. - Vol. 72. - N. 5. - P. 1899-1906

128. Medema J. P., Scaffidi C., Krammer P. H., Peter M. E. Bcl-XL acts downstream of caspase-8 activation by the CD95 death-inducing signaling complex // The journal of biological chemistry. 1998. - Vol. 273. - P. 3388-3393

129. Meijerink J. P.P., Mensink E. J.B.M., Wang K. et al. Hematopoietic malignancies demonstrate loss-of-function mutations of Bax // Blood. 1998. - Vol. 91. - N. 8. - P. 2991-2997

130. Mercatane D.R., Bortner C.D., Cidlowski J.A. et al. Modification of alternative splicing of Bcl-X pre-mRNA in prostate and breast cancer cells // The journal of biological chemistry. 2001 - Vol. 276. - P. 16411-16417

131. Micheau O., Solary E., Hammann A. et al. Fas ligand-independent, FADD-mediated activation of the Fas death pathway by anticancer drugs // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 12. - P. 7987-7992

132. Misao J., Hayakawa Y., Ohno M. et al. Expression of Bcl-2 protein an inhibitor of apoptosis and Bax an accelerator of apoptosis in ventricular myocytes of human hearts with myocardial infarction // Circulation. 1996. - Vol. 94. - P. 1506-1512

133. Мок C.-L., Gil-Gómez G., Williams O. et al. Bad can act as a key regulator of T cell apoptosis and T cell development // The Journal of Experimental Medicine. 1999. -Vol. 189.-N.3.-P. 575-586

134. Shinoura N., Yoshida Y., Nishimura M. et al. Expression level of Bcl-2 determines anti or proapoptotic function // Cancer research. 1999. - Vol. 59. - P. 41194128

135. Narasimhan S. R., Yang L., Gerwin В. I. et al. Resistance of pleural mesothelioma cell lines to apoptosis relation to expression of Bcl-2 and Bax // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 1998. - Vol. 275. - N. 1. - P. L165-L171

136. Narita M., Shimizu S., Ito T. et al. Bax interacts with the permeability transition pore to induce permeability transition and cytochrome с release in isolated mitochondria // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95. - N. 25. - P. 14681-14686

137. Nechushtan A., Smith C. L., Hsu Y.-T. et al. Conformation of the Bax C-terminus regulates subcellular location and cell death //The EMBO journal. 1999. - Vol. 18. - P. 2330-2341

138. Nechushtan A., Smith C.L., Lamensdorf I. et al. Bax and Bak coalesce into novel mitochondria-associated clusters during apoptosis //The journal of cell biology.- 2001. -Vol. 153.-N. 6.-P. 1265-1276

139. Nomura M., Shimizu S„ Ito T. et al. Apoptotic cytosol facilitates Bax translocation to mitochondria that involves cytosolic factor regulated by Bcl-2 // Cancer research. 1999. - Vol. 59. - P. 5542-5548

140. O'Connell J., Bennett M.W., Nally K. et al. Altered mechanisms of apoptosis in colon cancer: Fas resistance and counterattack in the tumor-immune conflict // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. - Vol. 910. - P. 178-192

141. Ogura E., Senzaki H., Yamamoto D. et al. Prognostic significance of Bcl-2, Bcl-XL/S, Bax and Bak expressions in colorectal carcinomas // Oncol. Rep. 1999. - Vol. 6. -N. 2.-P. 365-369

142. Osaki M., Kase S., Kodani I. et al. Expression of Fas and Fas ligand in human gastric adenomas and intestinal-type carcinomas: correlation with proliferation and apoptosis // Gastric cancer. 2001. - Vol. 4. - N. 4. - P. 198-205

143. Oto M., Miyake S., and Yuasa Y. Optimization of nonradioisotopic single strand conformation polymorphism analysis with a conventional minislab gel electrophoresis apparatus // Analytical biochemistry. 1993. - Vol. 213. - P. 19-22

144. Ouyang H., Furukawa T., Abe T. et al. The Bax gene, the promoter of apoptosis, is mutated in genetically unstable cancer of the colorectum, stomach, and endometrium // Clinical cancer research. 1998. - Vol. 4. - P. 1071-1074

145. Peiro G., Diebold J., Mayr D. et al. Prognostic relevance of hMLHl, hMSH2, and Bax protein expression in endometrial carcinoma // Mol. Pathol. 2001. - Vol. 14. - N. 8.-P. 777-783

146. Perfettini J.L., Reed J.C., Israel N. et al. Role of Bcl-2 family members in caspase-independent apoptosis during chlamydia infection // Infect. Immun. 2002. -Vol. 70.-N. l.-P. 55-61

147. Perlman H., Sata M., Le Roux A. et al. Bax mediated cell death by the Gax homeoprotein requires mitogen activation but is independent of cell cycle activity // The EMBO journal. 1998. - Vol. 17. - P. 3576-3586

148. Pinkoski M. J., Brunner T., Green D. R. et al. Fas and Fas ligand in gut and liver // Gastrointestinal and liver physiology. 2000. - Vol. 278. - N. 3. - P. G354-G366

149. Potten C.S., Wilson J.W., Booth C. Regulation and significance of apoptosis in the stem cells of the gastrointestinal epithelium // Stem cells. 1997. - Vol. 15. - N. 2. -P. 82-93

150. Proussakova O.V., Rabaya N.A., Moshnikova A.B. et al. Oligomerization of soluble Fas antigen induces its cytotoxicity//The journal of biological chemistry. — 2003. Vol. 278. - N. 38. - P. 36236-36241

151. Pryde J. G., Walker A., Rossi A. G. et al. Failure of Bax insertion into mitochondria at 15 °C prevents the release of cytochrome c // The journal of biological chemistry. 2000. - Vol. 275. - N. 43. - P. 33574-33584

152. Radmacher M„ Fritz M., Hansma H.G., Hansma P.K. Direct observation of enzyme activity with the atomic force microscope // Science. 1994. - Vol. 265. - P. 1577-1579

153. Rampino N., Yamamoto H., lonov Y., Li Y., Sawai H., Reed J.C., Perucho M. Somatic frameshift mutations in the Bax gene in colon cancers of the microsatellite mutator phenotype // Science. 1997. - Vol. 275. - P. 967-969

154. Reed J. C. Balancing cell life and death: Bax, apoptosis, and breast cancer // J. Clin. Invest. -1996. Vol. 97. - N. 11. - P. 2403-2404

155. Roya S., Nicholsona D. W. Cross-talk in cell death signaling // The Journal of Experimental Medicine. 2000. - Vol. 192. - N. 8. - P. F21-F26

156. RudnerlJ., Lepple-Wienhues A., Budachl W. et al. Wild-type, mitochondrial and ER-restricted Bcl-2 inhibit DNA damage-induced apoptosis but do not affect death receptor-induced apoptosis // Journal of Cell Science. 2001. - Vol. 114. - P. 4161-4172

157. Ruvolo P.P., Deng X., May W.S. Phosphorylation of Bcl-2 and regulation of apoptosis // Leukemia. 2001. - Vol. 15. - N. 4. - P. 515-522

158. Saegusa M., Takano Y., Okayasu I. Bcl-2 expression and its association with cell kinetics in human gastric carcinomas and intestinal metaplasia//J. Cancer research. Clin. Oncol. 1995. - Vol. 121. - N. 6. - P. 357-363

159. Saeterdal I., Bjorheim J., Lislerud K. et al. Frameshift-mutation-derived peptides as tumor-specific antigens in inherited and spontaneous colorectal cancer // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - N. 23. - P. 13255-13260

160. Sahara S., Aoto M„ Eguchi Y. et al. Acinus is a caspase-3-activated protein required for apoptotic chromatin condensation // Nature. 1999. - Vol. 401. - N. 6749. -P. 168-173

161. Saleh H.A., Jackson H., Khatib G. et al. Correlation of Bcl-2 oncoprotein immunohistochemical expression with proliferation index and histopathologic parameters in colorectal neoplasia // Pathol. Oncol. Res. 1999. - Vol. 5. - N. 4. - P. 273-279

162. Schaich M., Illmer T., Seitz G. et al. The prognostic value of Bcl-XL gene expression for remission induction is influenced by cytogenetics in adult acute myeloid leukemia // Haematologica. 2001. - Vol. 86. - N. 5. - P. 470-477

163. Schelwies K., Sturm I., Grabowski P. et al. Analysis of p53/Bax in primary colorectal carcinoma: low Bax protein expression is a negative prognostic factor in UICC stage III tumors // Int. J. Cancer. 2002. - Vol. 99. - N. 4. - P. 589-596

164. Schendel S. L., Xie Z., Montal M. O. et al. Channel formation by antiapoptotic protein Bcl-2 // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 5113-5118

165. Schlesinger P. H., Gross A., X.-M. Yin et al. Comparison of the ion channel characteristics of proapoptotic Bax and antiapoptotic Bcl-2 // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 11357-11362

166. Schwandner O., Schiedeck T.H., Bruch H.P. et al. p53 and Bcl-2 as significant predictors of recurrence and survival in rectal cancer // Eur. J. Cancer. 2000. — Vol. 36. -N. 3.-P. 348-356

167. Sharma S., Saltz L. B. Oral chemotherapeutic agents for colorectal cancer // The Oncologist. 2000. - Vol. 5. - N. 2. - P. 99-107

168. Sheehan K.M., O'Donovan D.G., Fitzmaurice G. Prognostic relevance of Fas (Apo-l/CD95) ligand in human colorectal cancer // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. -2003. Vol. 15. - N. 4. - P. 375-380

169. Shibasaki T., Kondo E., Akagi T., McKeon F. Suppression of signalling through transcription factor NF-AT by interaction between calcineurin and Bcl-2 // Nature. -1997.-Vol. 386.-P. 728-731

170. Shilkaitis A., Graves J., Mehta R. R. et al. Bcl-2 and Bax are differentially expressed in hyperplastic premalignant and malignant lesions of mammary carcinogenesis // Cell Growth Differ. 2000. - Vol. 11. - P. 437-445

171. Shimoyama M., Kanda T., Liu L. et al. Expression of Fas ligand is an early event in colorectal carcinogenesis //J. Surg. Oncol. 2001. - Vol. 76. - N. 1. - P. 63-68

172. Shiraki K., Tsuji N., Shioda T. et al. Expression of Fas ligand in liver metastases of human colonic adenocarcinomas // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol. 94. - P. 6420-6425

173. Simonian P.L., Grillot D.A.M., Andrews D.W. et al. Bax homodimerization is not required for Bax to accelerate chemotherapy-induced cell death // The journal of biological chemistry. 1996. - Vol. 271. - N. 50. - P. 32073-32077

174. Simonian P.L., Grillot D.A.M., Nunez G. Bcl-2 and Bcl-XL can differentially block chemotherapy-induced cell death // Blood. 1997. - Vol. 90. - N. 3. - P. 12081216

175. Soini Y., Kinnula V., Kaarteenaho-Wiik R. et al. Apoptosis and expression of apoptosis regulating proteins Bcl-2, Mcl-1, Bcl-X and Bax in malignant mesothelioma // Clinical cancer research. 1999. - Vol. 5. - P. 3508-3515

176. Song E., Chen J., Ouyang N. et al. Soluble Fas ligand released by colon adenocarcinoma cells induces host lymphocyte apoptosis: an active mode of immune evasion in colon cancer // Br. J. Cancer. 2001. - Vol. 85. - N. 7. - P. 1047-1054

177. Srinivas G., Kusumakumary P., Krishnan M. et al. Mutant p53 protein, Bcl-2/Bax ratios and apoptosis in paediatric acute lymphoblastic leulaemia II J. Cancer research. Clin. Oncol. 2000. - Vol. 126. - P. 62-67

178. Steinman H. M. The Bcl-2 oncoprotein functions as a pro-oxidant // The journal of biological chemistry. 1995. - Vol. 270. - N. 8. - P. 3487-3490

179. Sundararajan R., Cuconati A., Nelson D. et al. Tumor necrosis factor-alpha induces Bax-Bak interaction and apoptosis, which is inhibited by adenovirus E1B 19K // The journal of biological chemistry. -2001. Vol. 276. - N. 48. - P. 45120-45127

180. Tan K. O., Tan K. M. L., Yu V. C. A novel BH3-like domain in Bid is required for intramolecular interaction and autoinhibition of pro-apoptotic activity // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 34. - P. 23687-23690

181. Tan S., Sagara Y., Liu Y. et al. The regulation of reactive oxygen species production during programmed cell death // The journal of cell biology.- 1998. Vol. 141.-N. 6.-P. 1423-1432

182. Tapia-Vieyra J.V., Mas-Oliva J. Apoptosis and cell death channels in prostate cancer// Arch. Med. Res. -2001. Vol. 32. -N. 3. - P. 175-185

183. Uesugi H., Saegusa M., Takano Y. et al. Different expression of Bcl-2 protein in gastric adenomas and carcinomas // Pathol. Int. 1996. - Vol. 46. - N. 4. -P. 274-280

184. Ulvik A., Aarskog N.K., Ogreid D. Detection and identification of Ki-ras exon 1 mutations by minigel single-strand conformation polymorphism // Analytical biochemistry. 1995. - Vol. 232. - P. 137-138

185. Wang X. The expanding role of mitochondria in apoptosis // Genes Dev. 2001. -Vol. 15. - N. 22. - P. 2922-2933

186. Werner A.B., Vries E., Tait S.W.G. et al. Bcl-2 family member Bfl-l/Al sequesters truncated Bid to inhibit its collaboration with pro-apoptotic Bak or Bax // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. - P. 22781-22788

187. Williams T., Smith C.A. Molecular regulation of apoptosis: genetic controls on cell death // Cell. 1993. - Vol. 74. - P. 777-779

188. Wolf H.K., Stober C., Hohenfellner R. et al. Prognostic value of p53, p21/WAFl, Bcl-2, Bax, Bak and Ki-67 immunoreactivity in pTl G3 urothelial bladder carcinomas // Tumour Biol. 2001. - Vol. 22. - N. 5. - P. 328-336

189. Wolter K.G., Hsu Y.-T., Smith C. L. et al. Movement of Bax from the cytosol to mitochondria during apoptosis//The journal of cell biology. 1997.-Vol. 139. -N. 5. -P. 1281-1292

190. Wu M.-S., Lee C.-W., Shun C.-T. et al. Clinicopathological significance of altered loci of replication error and microsatellite instability-associated mutations in gastric cancer// Cancer research. 1998. - Vol. 58. - P. 1494-1497

191. Xiang H., Kinoshita Y., Knudson C. M. et al. Bax involvement in p53 mediated neuronal cell death //The journal of neuroscience. 1998. - Vol. 18. - N. 4. - P. 13631373

192. Xiang J., Chao D.T., Korsmeyer S.J. Bax induced cell death may not require interleukin ip converting enzyme like proteases // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. -Vol. 93.-P. 14559-14563

193. Yagi O.K., Akiyama YM Nomizu T., Iwama T., Endo M., and Yuasa Y. Proapoptotic gene Bax is frequently mutated in hereditary nonpolyposis colorectal cancers but not in adenomas// Gastroenterology. 1998. - Vol. 114. - P. 268-274

194. Yamaguchi H., Wang H.-G. Bcl-XL protects BimEL-induced Bax conformational change and cytochrome c release independent of interacting with Bax or BimEL // The journal of biological chemistry. 2002. - Vol. 277. - P. 41604-41612

195. Yamamoto HM Sawai HM Weber T.K. et al. Somatic frameshift mutations in DNA mismatch repair and proapoptotic genes in hereditary nonpolyposis colorectal cancer // Cancer research. 1998. - Vol. 58. - P. 997-1003

196. Yamamoto K., Ichijo H., Korsmeyer S. J. Bcl-2 is phosphorylated and inactivated by an ASKl/Jun N-terminal protein kinase pathway normally activated at G2/M // Molecular and cellular Biology. 1999. - Vol. 19. - N. 12. - P. 8469-8478

197. Yang H.B., Chow N.H., Sheu B.S. et al. The role of Bcl-2 in the progression of the colorectal adenoma-carcinoma sequence // Anticancer Res. 1999. - Vol. 19. - N. IB.-P. 727-730

198. Yang J., Liu X., Bhalla K. Et al. Prevention of apoptosis by Bcl-2: release of cytochrome c from mitochondria blocked // Science. 1997. - Vol. 275. - P. 1129-1132

199. Yokota J. Tumor progression and metastasis // Carcinogenesis. 2000. - Vol. 21. -N.3.-P. 497-503

200. Zha J., Harada H., Osipov K. et al. BH3 domain of Bad is required for heterodimerization with Bcl-XL and pro-apoptotic activity // The journal of biological chemistry. 1997. - Vol.272 . - N. 39. - P. 24101-24104

201. Zha J., Harada H., Yang E., Jokct J., Korsmeyer S.J. Serine phosphorylation of death agonist Bad in response to survival factor results in binding to 14-3-3 not Bcl-XL // Cell. 1996. - Vol. 87. - P. 619-628

202. Zhang H., Xu Q., Krajewski S. et al. Bar: An apoptosis regulator at the intersection of caspases and Bcl-2 family proteins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97. - P. 2597-2602

203. Zhou M., Demo S. D., McCIure T. N. et al. A novel splice variant of the cell death-promoting protein Bax // The journal of biological chemistry. 1998. - Vol. 273. -N. 19.-P. 11930-11936

204. Zhu L., Ling S., Yu X.-D. et al. Modulation of mitochondrial Ca2+ homeostasis by Bcl-2 // The journal of biological chemistry. 1999. - Vol. 274. - N. 47. - P. 3326733273

205. Zoltan N. Oltvai, Curt L. Milliman, and Stanley J. Korsmeyer. Bcl-2 hcterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programed cell death // Cell. 1993. - Vol. 74. - P. 609-619