Использование "искусственных семян" в технологии культивирования in vitro корней лекарственных растений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.05, кандидат биологических наук Прокофьева, Мария Юрьевна

• Прокофьева, Мария Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Прокофьева, Мария Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Метод «искусственных семян» в биотехнологии растений.

1.1.1. Строение искусственных семян.

1.1.2. Инкапсулируемый растительный материал.

1.1.3. Особенности получения искусственных семян.

1.1.4. Сохранение растительного материала с помощью искусственных семян.

1.2. Метод культивирования изолированно растущих генетически трансформированных корней растений.

1.3. Контаминация в культуре растительных клеток, тканей и органов в условиях in vitro.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Растительные объекты.

2.1.1. Получение культуры генетически трансформированных корней Rhodiola rosea.

2.1.2. Условия культивирования генетически трансформированных корней Ruta graveolens, Scutellaria baicalensis и Rhodiola rosea.

2.2. Инкапсулирование корневых фрагментов.

2.3. Условия проращивания «искусственных семян» и получение из них линий корневых культур.

2.4. Оценка физиологического состояния линий корневых культур, возобновленных из «искусственных семян».

2.5. Получение растений из «искусственных семян» Ruta graveolens в условиях освещения.

2.6. Исследование фотосинтетических параметров у зеленеющей в условиях освещения корневой культуры Scutellaria baicalensis.

2.7. Методы химического анализа.

2.7.1. Определение опинов.

2.7.2. Определение содержания флавонов в корнях Scutellaria baicalensis.

2.7.3. Определение содержания хлорофилла в корнях Scutellaria baicalensis.

2.8. Статистическая обработка данных.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Морфологическая характеристика генетически трансформированных корневых культур Ruta graveolens, Scutellaria baicalensis и Rhodiola rosea как исходного материала для получения «искусственных семян».

3.2. Жизнеспособность инкапсулированных корневых фрагментов, иммобилизованных в виде «искусственных семян».

3.2.1. Влияние длительности хранения «искусственных семян» на жизнеспособность инкапсулированных корневых фрагментов.

3.2.2. Влияние состава гелевого матрикса «искусственных семян» на жизнеспособность инкапсулированных корневых фрагментов.

3.3. Оценка физиологического состояния линий корневых культур, возобновленных из «искусственных семян».

3.3.1. Ростовая активность корней, возобновленных из «искусственных семян».

3.3.2. Содержание сухого вещества в корневых культурах, возобновленных из «искусственных семян».

3.3.3. Электропроводность и рН культуральных питательных сред.

3.4. Физиолого-биохимические особенности корневых культур, возобновленных из «искусственных семян» в условиях освещения.

3.4.1. Морфологические и физиологические особенности корневой культуры Ruta graveolens, полученной из «искусственных семян» в условиях освещения.

3.4.2. Морфологические и физиолого-биохимические особенности корневой культуры Scutellaria baicalensis, полученной из «искусственных семян» в условиях освещения.

3.5. Тестирование корневых культур на наличие инфекции и устранение контаминации в изолированно растущих корнях Scutellaria baicalensis и Rhodiola rosea.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование "искусственных семян" в технологии культивирования in vitro корней лекарственных растений»

С древних времен большинство растений используется человеком для лечения различных заболеваний. Натуральные средства и, в особенности, вторичные метаболиты растительного происхождения по-прежнему широко используются в терапевтической практике. Как показывают статистические данные, 28% новых химических соединений, полученных за период с 1981 г. по 2002 г., представляли собой натуральные компоненты, выделенные из растительного сырья, и 24% этих веществ обладали физиологической активностью (Raskin et al., 2002; Balunas & Kinghorn, 2005).

Получение медицинских препаратов на основе экстрактов диких или культивируемых растений в настоящее время лимитируется исчезновением ценных видов по мере заготовки лекарственного сырья, трудоемкостью культивирования растений на плантациях, а также геополитической ситуацией (Verpoorte et al., 2002). Для решения этой проблемы в течение последних десятилетий было предпринято множество попыток оценки возможности получения лекарственных препаратов из культивируемых в условиях in vitro культур растительных клеток и тканей (Berlin, 1986; Alfermann & Petersen, 1995). Однако в большинстве случаев вторичные соединения в культурах не обнаруживались или их содержание было очень низким. В связи с этим были разработаны такие стратегические приемы работы с клеточными культурами, как скрининг и отбор высокопродуктивных линий растительных клеток, клеточная иммобилизация, элиситация, а также получение культур дифференцированных тканей (Zenk et al., 1975; Bensaddek et al., 2008). Было отмечено, что практически в каждом случае возникали осложнения, которые не позволяли развивать коммерческое биотехнологическое получение вторичных соединений (Verpoorte et al., 2002). Многолетний опыт использования различными исследователями метода культуры тканей и клеток как модели изучения вторичного метаболизма растений привел к совершенствованию способов манипулирования растительными клетками и к обогащению их современными приемами генетической инженерии. Возможности для более углубленного изучения специфики метаболизма корней, включающего в себя весь комплекс процессов, характерных для корневых клеток, открыла модельная система — культура генетически трансформированных корней, так называемых «hairy roots», получаемых при инокуляции стерильных двудольных растений штаммами почвенной агробактерии Agrobacterium rhizogenes (Chilton et al., 1982).

Агробактериальная трансформация растительного материала позволила преодолеть значительные трудности в культивировании растительных органов в условиях in vitro. Это привело к получению быстрорастущих корней, характеризующихся интенсивным ветвлением и способностью к биосинтезу вторичных метаболитов, характерных для корней проростков или корней интактных исходных растений. Генетически трансформированные корни послужили основой для разработки перспективной технологии биотехнологического получения вторичных метаболитов, таких как алкалоиды, фенольные соединения и ряд других (Flores & Filner 1985; Hamill et al., 1987; Giri & Narasu, 2000; Oksman-Caldentey & Arroo, 2000; Georgiev et al., 2010).

Таким образом, копирование в лабораторных условиях давно известного явления - естественно происходящей в природе трансформации растений -привело к появлению в середине 80-х годов XX века метода культивирования генетически модифицированных корней растений, который моментально был взят на вооружение многочисленными исследователями в лабораториях различных стран (Mugnier, 1988). Поток публикаций, посвященных новым аспектам применения генетически трансформированных корней в физиологических и биохимических исследованиях, не ослабевает до настоящего времени (Veena & Taylor, 2007; Mishra & Ranjan, 2008; Mrosk et al., 2009). Основное направление исследовательских работ состоит в изучении биосинтетической активности клеток и тканей корневого происхождения, культивируемых в условиях in vitro, которая проявляется в их способности к сохранению биосинтеза корнеспецифичных низкомолекулярных метаболитов (алкалоидов, кумаринов, фенольных соединений, эфирных масел). Многие из этих корнеспецифичных соединений обладают высокой физиологической активностью, в связи с чем они играют существенную роль при установлении контактов корневой системы целого растения с почвенной микрофлорой и при взаимодействии растений в биоценозах. Кроме того, развитие метода генетической трансформации растений агробактерией Agrobacterium rhizogenes, а также культивирование корневых культур и их биотехнологическое использование для получения лекарственных средств открывают новые перспективы в фармацевтической и пищевой промышленности (Guillon et al., 2006; Georgiev et al., 2007; Srivastava & Srivastava, 2007).

Реализация метода трансформации растительного материала с помощью почвенной бактерии Agrobacterium rhizogenes сотрудниками Института физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН привела в 1999 году к созданию коллекции генетически трансформированных корней (КГТК), которая к настоящему времени насчитывает около 40 штаммов корневых культур, полученных от 29 видов растений, относящихся к 13 семействам. Наибольшую часть коллекции составляют корни ценных лекарственных растений, в которых биосинтез физиологически активных вторичных соединений локализован в подземной части. Биохимический анализ основных штаммов корневых культур показал, что корни в условиях in vitro сохраняют способность к образованию корнеспецифичных низкомолекулярных метаболитов на уровне, сопоставимом с их содержанием в корнях целых или ювенильных растений. Эта особенность делает привлекательным их применение при исследовании пространственной и временной организации вторичного метаболизма в корнях растений (Kuzovkina et al., 2004; Thorpe, 2007). Различные способы культивирования корней (пролонгированное выращивание, действие стрессовых факторов, использование предшественников биосинтеза конечных продуктов) позволяют увеличивать содержание в них ценных вторичных метаболитов до уровня, сравнимого с их концентрациями в корнях целого растения. Способность генетически трансформированных корней к сохранению биосинтетической потенции в условиях in vitro и к синтезу вторичных метаболитов явилась предпосылкой для их крупномасштабного выращивания в биореакторах и сохранение ростовой активности ИС, полученных из корневых культур ценных лекарственных растений, позволяет использовать их в качестве резервного фонда, а также, в случае необходимости, как компактно упакованные стерильные корневые экспланты для транспортировки растительного материала на дальние расстояния. Новый способ оздоровления инфицированных корневых культур с помощью ИС позволяет существенно снизить риск потери ценных линий корневых культур и сохранить их продуктивность в течение многих лет выращивания. Выявленные физиологические и биохимические особенности корневых культур, возобновленных из ИС, рекомендуется учитывать при выборе условий последующего культивирования корней лекарственных растений. Метод альгинатного инкапсулирования способен дополнить и усовершенствовать технику сохранения растительных ресурсов. Полученные данные могут быть включены в материалы лекций по физиологии растений.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ИС - искусственные семена МС - среда Мурасиге и Скуга

Уг МС - среда Мурасиге и Скуга с уменьшенной вдвое концентрацией азота РИ - ростовой индекс ФСИ - фотосистема II нефотохимическое тушение Рт -максимальный выход флуоресценции хлорофилла Р„ - минимальны выход флуоресценции хлорофилла

Ру/Рш ~ квантовый выход ФСН (соотношение вариабельной и максимальной флуоресценции хлорофилла)

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Прокофьева, Мария Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. На примере корневых культур трех видов растений - Ruta graveolens, Scutellaria baicalensis и Rhodiola rosea - показано, что инкапсулированные в гелевую оболочку фрагменты корней сохраняют свою жизнеспособность в иммобилизованном при температуре 4°С состоянии в течение длительного времени (от 6 до 12 месяцев) и при обычных условиях культивирования дают начало обновленным, хорошо растущим линиям корневых культур.

2. Длительность хранения корневых фрагментов в иммобилизованном состоянии в виде ИС определяется, прежде всего, их жизнеспособностью после переноса в обычные условия культивирования, а также зависит от состава питательных веществ в гелевом матриксе ИС, возраста исходных корневых эксплантов, взятых для инкапсулирования, и от морфологических и физиологических особенностей исходных корневых культур.

3. Низкотемпературная иммобилизация корневых фрагментов в виде ИС не вызывает существенного изменения основных ростовых и физиолого-биохимических параметров возобновленных из них корневых культур.

4. Культивирование возобновленных из ИС линий корневых культур Ruta graveolens и Scutellaria baicalensis в условиях освещения приводит к проявлению стеблевого органогенеза в первом случае и к интенсивному образованию хлоропластов в клетках корней - во втором, что может быть обусловлено фенотипическими особенностями реакции этих растений на стрессовые факторы.

5. Впервые доказано, что иммобилизация фрагментов инфицированных корней в виде ИС, гелевый матрикс которых содержит антибиотик, является новым эффективным способом элиминирования бактериальной инфекции.

6. Длительное сохранение жизнеспособности ИС, позволяет использовать их в качестве резервного фонда, для транспортировки культур на дальние расстояния, а также при подготовке маточных инокулятов в случае перехода к крупномасштабному культивированию корней ценных лекарственных растений в биореакторах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Прокофьева, Мария Юрьевна, 2012 год

1. Бутенко Р.Г. (1985) Культура изолированных клеток и тканей в решении задач физиологии растений. Новые направления в физиологии растений. M.: Наука. С. 270.

2. Бутенко Р.Г. (1999) Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе. М.: ФБК-ПРЕСС. 160 с.

3. Быков В.А., Запесочная Г.Г., Куркин В.А. (1999) Родиола розовая (Rhodiola rosea L.): Традиционные и биотехнологические аспекты получения лекарственных средств (обзор). Хгш.-фармац. журнал. Т.ЗЗ, № 1. С.28-37.

4. Гавриленко В.Ф., Рубин Б.А. (1965) Влияние некоторых метаболитов на биосинтез железопорфиринов в изолированных корнях. Научные доклады высшей школы. Бнол. науки. № 9. С. 100-105.

5. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Литвиненко В.И., Попова Т.П., Суслов Н.И.1994) Шлемник байкальский. Фитохимия и фармакологические свойства. Томск: Изд-во Том. ун-та С. 9.

6. Гусева A.B. (2000) Введение в культуру трансформированных корней шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi.) и содержание в них флавоноидов. Дисс. канд. биол. наук, Томск, 116 с.

7. Загоскина Н.В., Дубравина Г.А., Запрометов М.Н. (2000) Особенности формирования хлоропластов и накопление фенольных соединений в фотомиксотрофных культурах чайного растения. Физиология растений. V.47. Р. 537-543.

8. Запрометов М.Н., Колонкова C.B. (1967) О биосинтезе фенольных соединений в хлоропластах чайного растения. Докл. АН СССР. Т. 176. С. 470473.

9. Заирометов M. H. (1996) Фенольные соединения и их роль в жизни растения: 56-е Тимирязевское чтение. М.: Наука. 45 с.

10. Запрометов М.Н., Николаева Т.Н. (2003) Способность изолированных хлоропластов из листьев фасоли осуществлять биосинтез фенольных соединении. Физиология растений. 2003. Т. 50. №5. С. 699-702.

11. Коноплева М.М. (2007) Фармакогнозия: Природные биологически активные вещества Витебск. 272 с.

12. Корнеев Д.Ю. (2002) Информационные возможности метода индукции флуоресценции хлорофилла. К.: «Альтпресс». 188 с.

13. Красилышков А.П. (1995) Справочник по антисептике. Минск: Выш. шк. 367 с.

14. Кузовкина И.Н., Кузнецова Г.А., Смирнов A.M. (1971) Синтез кумаринов в корневой культуре Ruta graveolens L. Herba Himgarica. V. 10. P. 39-42.

15. Кузовкина И.Н. (1992) Культивирование генетически трансформированных корней растений: возможности и перспективы использования в физиологии растений. Физиология растений. Т. 39. С. 1208-1214.

16. Кузовкина И.Н., Мантрова О.В., Альтерман И.Е., Якимов С.А. (1996) Получение культуры генетически трансформированных корней марены красильной, продуцирующей антрахиноны. Физиология растений. Т.43. №2. С.121.

17. Кузовкина И.Н. Гусева A.B., Альтерман И.Е., Карначук P.A. (2001) Образование флавоноидов в трансформированных корнях Scutellaria baicalensis и пути их регуляции. Физиология растений. Т. 48. С. 523-528.

18. Кунах В.А. (1999) Изменчивость растительного генома в процессе дедифференцировки и каллусообразования in vitro. Физиология растений. Т.46, №6. С.919-929.

19. Пирузян Э.С, Андрианов В.М. (1994) Создание трансгенных растений. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. №5. С.36- 37.

20. Рубин Б.А., Гсрманова В.Ф. (1959) О синтезе пигментов в корнях. Докл. АН СССР. Т. 124. С. 940-943.

21. Смирнов A.M. (1970) Рост и метаболизм изолированных корней в стерильной культуре. М.: Наука. 455 с.

22. Agrios G.N. (1997) Plant pathology, 4th ed. London: Academic Press. 635 pp.

23. Aitken-Christie J., Kozal Т., Smith M.A.L. (1995) Glossary. In: Automation and environmental control in plant tissue culture. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, The Netherlands. P. 9-12.

24. Alfermann A.W., Petersen M. (1995) Natural product formation by plant cell biotechnology Results and perspectives. Plant Cell Tiss Org. V. 43. P. 199-205.

25. Aronen Т., Krajnakova J., Haggman H., Ryynanen L. (1999) Genetic fidelity of cryopreserved embryogenic cultures of open-pollinated Abies cephalonica. Plant Science. V. 142. P. 163-172.

26. Ash C., Priest F.G., Collins M.D. (1993) Molecular identification of rRNA group 3 bacilli (Ash, Farrow, Wallbanks and Collins) using a PCR probe test. Proposal for the creation of a new genus Paenibacillus. Antonie Van Leeuwenhoek. V.64. P.253-260.

27. Bajaj Y.P.S. (ed.) (1995) Biotechnology in agriculture and forestry 30: somatic embryogenesis and synthetic seed 1. Springer-Verlag, Berlin, Germany.

28. Ballester A., Janeiro L.V., Vieitez A.M. (1997) Cold storage of shoot cultures and alginate encapsulation of shoot tips of Camellia japonica L. and Camellia reticulata Lindley. Scientia Horticulturae. V. 71. P. 67-78.

29. Balunas M.J., Kinghorn A.D. (2005) Drug discovery from medicinal plants. Life Sci. V. 78. P. 431-441.

30. Bapat V.A., Mhatre M., Rao P.S. (1987) Propagation of Moms indica L. (mulberry) by encapsulated shoot buds. Plant Cell Reports. V. 6. P. 393-395.

31. Bapat V.A., Rao P.S. (1990) In vitro growth of encapsulated axillary buds of mulberry (Morus indica L.). Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V. 20. P. 69-70.

32. Bapat V.A. (1993) Studies on synthetic seeds of sandalwood (Santalum album L.) and mulberry {Moms indica L.) In: Synseeds: Applications of synthetic seeds to crop improvement. (Redenbaugh, K., Ed.). CRC Press Inc., Boca Raton, CA, USA. P. 381-407.

33. Barrett C., Cassells A.C. (1994) An evaluation of antibiotics for the elimination of Xanthomonas campestris pv. Pelargonii (Brown) from Pelargonium domesticum cv. Grand Slam explants in vitro. Plant Cell Tiss. Organ Cult. V. 36. P. 169-175.

34. Barrett C., Cobb E., McNicol R., Lyon G. (1997) A risk assessment study of plant genetic transformation using Agrobacterium and implications for analysis of transgenic plants. Plant Cell Tiss. Organ Cult. V. 47. P. 135-144.

35. Becard G., Piche Y. (1990) Physiological factors determining vesicular-arbuscular mycorrhizal formation in host and non-host Ri T-DNA transformed roots. Canadian Journal of Botany. V. 68. P. 1260-1264.

36. Berlin J. (1986) Secondary products from plant cell cultures. In: Biotechnology a comprehensive treatise, Rehm H.J. & Reed G. (eds). Verlag Chemie, Verlagsgesellschaft, Weinheim. V. 4. P. 630-658.

37. Beaumont M.D., Knorr D. (1987) Effects of immobilizing agents and procedures on viability of cultured celery (Apium graveolens) cells. Biotechnology Letters. V.9. No 6. P. 377-382.

38. Bhadra R., Morgan J.A., Shanks J.V. (1998) Transient studies of light-adapted cultures of hairy roots of Catharanthus roseus: Growth and indole alkaloid accumulation. Biotechnology and Bioengineering. V. 60. № 6. P. 670-678.

39. Bhattacharya R., Ray A., Gangopadhyay M., Bhattacharya S. (2007) In vitro conservation of Plumbago indica a rare medicinal plant. Plant Cell Biotechnol. Mol. Biol. V. 8. P. 39-46.

40. Bjorn L.O., Papageorgiou G.C., Blankcnship R.E., Govindjcc. (2009) A viewpoint: Why chlorophyll al Photosynth Res. V. 99. P. 85-98.

41. Bohidar S., Thirunavoukkarasu M., Rao T.V. (2008) Effect of plant growth regulators on in vitromicropropagation of «Garden rue» (Ruta graveolens L.). International Journal of Integrative Biology. V.3. №1. P. 36-43.

42. Boulanger F., Berkaloff A., Richaud F. (1986) Identification of hairy root loci in the T-regions of Agrobacterium rhizogenes Ri-plasmids. Plant. Mol. Biol. V. 6 (4). P. 271-279.

43. Brodelius P., Linse L., Nilsson K. (1982) Viability and biosynthetic capacity of immobilized plant cells. In: Fujiwara A. (ed) Plant Tissue Culture 1982, Proc. 5th Int. Cong, of Plant Tissue and Cell Culture Maruzen, Tokyo, pp. 371.

44. Bunn E., Tan B. (2002) Microbial contaminants in plant tissue culture propagation. Microorganisms in Plant Conservation and Biodiversity / Eds Sivasithamparam K., Dixon K.W., Barrett R.L. Kluwer Academic Publishers. P. 307-335.

45. Burstrom H., Hejnowicz Z. (1958) The formation of chlorophyll in isolated roots. Kgl. fysiorg sallskap. Lund forhandl. V. 28. P. 65-69.

46. Burstrom H. (1960) Influence of iron and gibberellic acid on the light sensivity of roots. Physiol. Plantarum. V. 13. P. 597-615.

47. Burstrom H. (1965) Light in the regulation on root growth. / Proc. Internal Conf. Plant Tissue cultire. P. 45-60.

48. Butler M.S. (2005) Natural products to drugs: natural product derived compounds in clinical trials. Nat Prod Rep. V. 22. P. 162-195.

49. Cadiz N., Vivanco J., Flores H. (2000) Coculture of Pachyrhizus erosus (L.) hairy roots with Rhizobium spp. In Vitro Cellular and Development Biology Plant, V. 36. № 4. P. 238-242.

50. Cassclls A.C. (ed) (1997) Pathogen and microbial contamination management in micropropagation. Dordrecht: Kluwer Academic Publishers. 384 p.

51. Cassells A.C., Doyle B.M., Curry R.F. (2000) Methods and markers for quality assurance in micropropagation. Acta Hortic. P. 530.

52. Chabot S., Becard G., Piche Y. (1992) Life cycle of Glomus intraradix in root organ culture. Mycologia. V. 84. P. 315-321.

53. Chand S., Singhet A.K. (2004) Plant regeneration from encapsulated nodal segments of Dalbergia sissoo Roxb., a timber-yielding leguminous tree species. J. Plant Physiol. V. 161. P.237-243.

54. Chilton M.D., Tepfer D.A., Petit A., Casse-Delbart F., Tempe J. (1982) Agrobacterium rhizogenes inserts T-DNA into the genomes of the host plant root cells. Nature. V.295. P. 432-434.

55. Chithra M., Martin K.P., Sunadakumari C., Madhusoodanan P.V. (2005) Somatic embryogenesis, encapsulation, and plant regeneration of Rotula aquatica Lour., a rare rhoeophytic woody medicinal plant. In Vitro Cell. Dev. Biol Plant. V. 41. P. 28-31.

56. Cho H.J., Farrand S.K., Noel G.R., Widholm J.M. (2000) High-efficiency induction of soybean hairy roots and propagation of the soybean cyst nematode. Planta. V.210.1. 2. P. 195-204.

57. Christey M.C. (2001) Use of Ri-mediated transformation for production of transgenic plants. In Vitro Cell Dev. V. 37. P. 687-700.

58. Clemow S.R., Clairmont L., Madsen L.H., Guinel F.C. (2011) Reproducible hairy root transformation and spot-inoculation methods to study root symbioses of pea. Plant Methods. V. 7. P. 46.

59. Collier R., Fuchs B., Walter N., Kevin Lutke W., Taylor C.G. (2005) Ex vitro composite plants: an inexpensive, rapid method for root biology. Plant J. V.43(3). P. 449-457.

60. Curtis W.R. (1993) Cultivation of Roots in Bioreactors. Current Opinion in Biotechnology. V. 4(2). P. 205-210.

61. Curtis W.R. (2000) Hairy Roots: Bioreactor Growth / In: Encyclopedia of Cell Technology. V. 2 (Spier, R.E., ed.) John Wiley & Sons, New York. P. 827-841.

62. Datta S.K., Potrykus I. (1989) Artificial seeds in barley: encapsulation of mierospore-derived embryos. Theor Appl Genet. V. 77. P. 820-824.

63. Devi P., Radha P., Sitamahalakshmi L., Syamala D., Kumar S.M. (2004) Plant regeneration via somatic embryogenesis in mung bean Vigna radiata (L.) Wilczek. Scientia Horticulturae. V. 99. P. 1-8.

64. Doran P.M. (ed). (1997) Hairy roots: culture and applications. Harwood Academic Publishers, Amsterdam. 239 p.

65. Durand-Tardif M., Broglie R., Slightom J., Tepfer D. (1985) Structure and expression of Ri T-DNA from Agrobacterium rhizogenes in Nicotiana tabaciun. Organ and phenotype specificity. JMol Biol. V. 186. P. 557-564.

66. Eckardt N.A. (2006). The Role of Flavonoids in Root Nodule Development and Auxin Transport in Medicago tmncatula. The Plant Cell. V. 181. 7. P. 1539-1540.

67. Endrcss R. (1994) Immobilization of plant cells. Ch. 7. in: Plant cell biotechnology. Springer-Verlag, Berlin, 256-269.

68. Engelmann F. (1997) In vitro conservation methods. In: Callow JA., Ford-Lloyd & Newbury H.J. (eds) Biotechnology and Plant Genetic Resources. CAB International, Oxford. P. 119-161.

69. Esau K. (1977) Anatomy of Seed Plants. John Wiley & Sons, New York, USA.

70. Estruch J.J., Chriqui D., Grossmann K., Schell J., Spano A. (1991) The plant oncogene rolC is responsible for the release of cytokinins from glucoside conjugates. European Molecular Biology Organization Journal. V. 10. I. 11. P. 2889-2896.

71. Flores H.E. (1992) Roots as chemical factories. Chem. bid. V.10. P.374-377.

72. Flores H.E., Curtis W.R. (1992) Approaches to understanding and manipulating the biosynthetic potential of plant roots. Ann NY Acad Sci. V.65. P. 188209.

73. Flores H.E., Dai Y., Cuello J.L., Maldonado-Mendoza I.E., Loyola-Vargas

74. V.M. (1993) Green Roots: Photosynthesis and photoautotrophy in an underground plant organ. Plant Physiol. V. 101. P. 363-371.

75. Gamborg O.L., Miller R.A., Ojima K. (1968) Nutrient Requirements of Suspension Cultures of Soybean Root Cells. Exp. Cell Res. V. 50. P. 151-158.

76. Ganapathi T.R., Suprasanna P., Bapat V.A., Rao P.S. (1992) Propagation of banana through encapsulated shoot tips. Plant Cell Reports. V.l 1. P. 571-575.

77. Gelvin S.B. (1990) Crown Gall Disease and Hairy Root Disease. Plant Physiol. V.92. P. 281-285.

78. Georgiev M.I., Pavlov A.I., Bley Th. (2007) Hairy root type plant in vitro system as sources of bioactive substances. Appl. Microbiol. Biotechnol. V. 74. P. 11751185.

79. Georgiev M., Ludwig-Mueller J., Bley Th. (2010) Hairy root culture: copying nature in new bioprocesses, chapter 10, In: Medicinal Plant Biotechnology (R. Arora, Ed.), CAB International, Wallingford, United Kingdom, pp. 156-175.

80. Giri A., Narasu M.L. (2000) Transgenic hairy roots: recent trend and applications. Biotechnology' Advances. V. 18. P. 1-22.

81. Govindjee (1995) Sixty three years since Kautsky: Chlorophyll a fluorescence. Aust. J. Plant Physiol. V. 22. P. 131-160.

82. Govindjee (2004) Chlorophyll a fluorescence, a bit of basics and history. In: Papageorgiou, G.C., Govindjee (ed.): Chlorophyll Fluorescence: a Signature of Photosynthesis. Springer, Dordrecht. P. 1-42.

83. Gray D.J., Compton M.E., Harrell R.C., Cantliffe D.J. (1995) Somatic embryogenesis and the technology of synthetic seeds. In: Bajaj, Y.P.S. (Ed.) Biotechnology in Agriculture and Forestry 30. Springer-Verlag, Berlin, Germany. P. 126-151.

84. Giiillon S., Tremouillaux-Guiller J., Kumar P.P., Rideau M., Gantet P. (2006) Harnessing the Potential of Hairy Roots: Dawn of a New Era. Trends Biotechnol. V. 24. P. 403-409.

85. Haberlandt G. (1902) Kulturversuche mit isolierten Pflanzenzellen. G. Haberlandt. Sitzungsber. Akad. der Wiss., Wien, Math. Wiss. Reine. Bd.l 11. S. 69 92.

86. Hamill J.D., Parr A.J., Rhodes M.J.C., Robins R.J., Walton N.J. (1987) New routes to plant secondary products. BioTechnol. V. 5. P. 800-804.

87. Hammerschlag Q., Lui Q., Zimmerman R. H., Gercheva P. (2000) Generating apple transformants free of Agrobacterium tumefaciens by vacuum infiltrating explants with an acidified medium and with antibiotics. Acta Horde. V.530 P. 103108.

88. Hasan S.M.Z., Takagi H. (1995) Alginate coated nodal segments of yam (Dioscorea spp.) for germplasm exchange and distribution. Plant Gen. Res. Newsletter. V. 103. P. 32-35.

89. Hashem E.A., Davey M.R. (1992) Hairy root induction on Solatium nigrum plants by using Ri T-DNA of Agrobacterium rhizogenes. Egyptian J. of Appl. Sci. V. 7. P. 583-592.

90. Hashem E.A. (2009) Estimation of the Endogenous Auxins and Cytokinins in Hairy Roots Incited on Solanum Dulcamara Plants by Ri-Plasmid of Agrobacterium Rhizogenes. Australian Journal of Basic and Applied Sciences. V. 3. I. I. P. 142147.

91. Hawes M.C., Brigham L.A., Wen F., Woo H.H., Zhu Y. (1998) Function of root border cells in plant health: Pioneers in the Rhizospere. Annu.Rev.Phytopathol. V. 36. P. 311-327.

92. Herman E.B. (1990b) Bacterial contamination in micropropagation. Agricell Rep. V. 14. P. 41-43.

93. Herman E.B. (1990a) Non-axenic plant tissue culture: possibilities and opportunities. Acta Hortic. V. 280. P. 112-117.

94. Hilton M.G., Wilson P.D.G, Robins R.J., Rhodes M.J.C. (1988) Transformed root cultures fermentation aspects. In: Manipulating secondary metabolism in culture, ed. Robins R.J. and Rhodes M.J.C. - Cambridge:Cambridge University Press. -P.239-245.

95. Hirata K., Goda S., Phunchindawan M., Du D., Ishio M., Sakai A., Miyamoto

96. K. (1998) Cryopreservation of horseradish hairy root cultures by encapsulation-dehydration. J. Ferment. Bioeng. V. 86(4). P. 418-420.

97. Hirata K., Mukai M., Goda S., Ishio-Kinugasa M., Yoshida K., Sakai A., Miyamoto K. (2002) Cryopreservation of hairy root cultures of Vinca minor L. by encapsulation-dehydration. Biotechnology Letters. V. 24. P. 371-376

98. Honda H., Liu C., Kobayashi T. (2001) Large-scale plant micropropagation. Advances in Biochemical Engineering: Biotechnology. V. 72. P. 157-182.

99. Hoober J.K. (2007) Chloroplast Development: Whence and Whither. In: The Structure and Function of Plastids. Robert R. Wise and J. Kenneth Hoober (eds.). Springer. P. 27-51.

100. Hsueh P.R., Teng L.J., Yang P.C., Pan H.L., Ho S.W., Lull K.T. (1999) Nosocomial Pseudoepidemic Caused by Bacillus cereus Traced to Contaminated Ethyl Alcohol from a Liquor Factory. J. Clin. Microbiol. V.37.1.7. P.2280-2284.

101. Hung C.D., Trueman S.J. (2011) Encapsulation technology for short-term preservation and germplasm distribution of the African mahogany Khaya senegalensis. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V. 107. P. 397-405.

102. Ishimaru K., Arakawa H., Yamanaka M., Shimomura K. (1994) Polyacetylenes in Lobelia sessilifolia hairy roots. Phytochemistiy. V. 35. P. 365-369.

103. Jacob A., Malpathak N. (2004) Green hairy root cultures of Solatium khasianum Clarke a new route to in vitro solasodine production. Current science. V. 87.1. 10. P. 1442-1447.

104. Jayasree N., Devi B.P., Reddy P.V. (1997) Production of synthetic seeds and plant regeneration in Rosa hybrida L. cv. 'King's ransom'. Indian Journal of Experimental Biology. V. 35. P. 310-312.

105. Jaziri M. (1995) Establishment of normal and transformed root cultures of Artemisia annua L. for artemisinin production. Plant Phisiol. V.145, №1-2. P. 175177.

106. Jouanin L., Guerche P., Pamboukdjian N., Tourneur C., Casse-Delbart F., Tourneur J. (1987) Structure of T-DNA in Plants Regenerated from Roots Transformed by Agrobacterium rhizogenes Strain A4. Mol. Gen. Genet. V. 206. P. 387-392.

107. Kaity A., Ashmore S.E., Drew R.A., DuIIoo M.E. (2008) Assessment of genetic and epigenetic changes following cryopreservation in papaya. Plant Cell Rep. V.27. P. 1529-1539.

108. Kamada H., Okamura N., Satake M., Harada H., Shimomura K. (1986) Alkaloid production by hairy root cultures in Atropa belladonna. Plant Cell Reports. V.5. P.239-242.

109. Kamada H. (1987) Artificial seed. In: Tanaka R. (Ed.) Practical technology on the mass production of clonal plants. CMC Publisher, Tokyo, Japan (in Japanese, cited in Redenbaugh et al.). P. 48.

110. Kautsky H., Hirsch A. (1934) Chlorophyllfluoreszenz und Kohlensaureassimilation. Das Fluoreszenzverhalten grtiner Pflanzen. Biochem. Zeitschrift. V. 274. P. 423-434.

111. Khor E., Ng W.F., Loh C.S. (1998) Two-coat systems for encapsulation of Spathoglottis plicata (Orchidaceae) seeds and protocorms. Biotechnol. Bioeng. V. 59. P. 635-639.

112. Khor E., Loh C. (2005) Artificial seeds. In: Applications of Cell Immobilisation Biotechnology / Eds Nedovic V., Willaert R. Springer: Netherlands,. P. 527-537.

113. Kim, Y.H., Yoo, Y.J. (1996). Peroxidase production from carrot hairy root culture. Enzyme and Microbial Technology. V. 18. P. 531-535.

114. Kim Y.J., Wyslouzili B.E., Weathers P.J. (2002) Invited review: Secondary metabolism of hairy root cultures in bioreactors. Vitro. Cell. Dev. Biol. Plant. V.38. P. 1-10.

115. Kino-oka M., Nagatome H., Taya M. (2001) Characterization and application of plant hairy roots endowed with photosynthetic functions. Advances in Biochemical Engineering. Biotechnology. V. 72. P. 183-218.

116. Kinoshita I., Saito A. (1990) Propagation of Japanese white birch by encapsulated axillary buds 1. Regeneration of plantlets under aseptic conditions. J. Jpn. For. Soc. V. 72: P. 166-170.

117. Kohmura H., Ikcda Y., Sakai A. (1994) Cryopreservation of apical meristems of Japanese shallot (.Allium wakegi) by vitrification and subsequent high plantregeneration. CtyoLetters. V. 15. P. 289-298.

118. Krause G.H., Weis E. (1991) Chlorophyll fluorescence and photosynthesis: The Basics. Annu. Rev. Plant Physiol. Plants Mol. Biol. V. 42. P. 313-349.122

119. Kruger G.H.J., TsimiHi-Michael M., Strasser R.J. (1997) Light stress provokes plastic and elastic modifications in structure and function of Photosystem II in camellia leaves. Physiology Plantarum. V. 101, №. 2. P. 265-277.

120. Kumar M.B.A., Vakeswaran V., Krishnasamy V. (2005) Enhancement of synthetic seed conversion to seedlings in hybrid rice. Plant Cell Tiss Organ Cult. V. 81. P. 97-100.

121. Kuzovkina I., Alterman I., Schneider B. (2004) Specific accumulation and revised structures of acridone alkaloid glucosides in the tips of transformed roots of Ruta graveolens. Phytochemistiy. V. 65. P. 1095-1100.

122. Kuzovkina I.N., Schneider B. (2006) Genetically Transformed Root Cultures-Generation, Properties and Application in Plant Sciences. Progress in Botany / Eds Esser K., Luttge U., Beyschlag W., Murata J. Berlin: Springer-Verlag, 2006. V. 67. P. 275-314.

123. Lam K.S. (2007) New aspects of natural products in drug discovery. Trends Microbiol. V. 15. P. 279-289.

124. Lambardi M., Fabbri A., Caccavale A. (2000) Cryopreservation of white poplar (Populus alba L.) by vitrification of in vitro-grown shoot tips. Plant Cell Reports. V. 19. P. 213-218.

125. Lambert E., Goossens A., Panis B., Van Labeke M.S., Geelen D. (2009) Cryopreservation of hairy root cultures of Maesa lanceolata and Medicago truncatula. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V.96.1. 3, P.289-296.

126. Lata H., Chandra S., Khan I.A., ElSohly M.A. (2009) Propagation through alginate encapsulation of axillary buds of Cannabis sativa L. an important medicinal plant. Physiol. Mol. Biol. Plants, V. 15.1. 1. P. 79-86.

127. Leifert C., Camotta H., Waites W. M. (1991c) Effect of antibiotics on micropropagated plant cultures. Plant Cell Tiss. Organ Cult. V. 29. P. 153-160.

128. Leifert C., Waites W. M. (1992) Bacterial growth in plant tissue cultures. J. Appl. Bacteriol. V.72. P.460-466.

129. Leifert C., Morris C., Waites W. M. (1994a) Ecology of microbial saprophytes and pathogens in tissue cultured and field grown plants. CRC Crit. Rev. Plant Sci. V.13. P.139-183.

130. Leifert C., Waites B., Keetley J.W., Wright S., Nicholas J.R., Waites W.M.1994b) Effect of medium acidification on filamentous fungi, yeasts and bacterial contaminants in Delphinium tissue cultures. Plant Cell Tiss. Organ Cult. V.36. P.149-155.

131. Leifert C., Berger F., Steward G.S.A.B., Waites W.M. (1994c) Plasmid profiles of Lactobacillus plantarum found as contaminants in Hemerocallis plant tissue cultures. Let. Appl. Microbiol. V.19. P. 377-379.

132. Leifert C., Woodward S. (1998) Laboratory contamination management, the requirement for microbiological quality assurance. Plant Cell Tiss. Organ Cult. V.52. P. 85-88.

133. Leifert C., Cassells A.C. (2001) Microbial Hazards in Plant Tissue and Cell Cultures. In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant. V. 37. P. 133-138.

134. Li Q., Wu Z., Wong M.L., Li S.J. (2002) The Ri Plasmid of Agrobacterium rhizogenes and Its Application in Plant Science. Biotechnology. V.5. P. 21-25.

135. Liere K., Borner T. (2006) Transcription of plastid genes: In Regulation of transcription in plants. Grasser K.D. (ed.) Oxford: Blackwell. P. 184-224.

136. Lopez-Juez E. (2007). Plastid biogenesis, between light and shadows. Journal of Experimental Botany. V. 58. P. 11-27.

137. Lulsdorf M.M., Tautorus T.E., Kikcio S.I., Bethune T.D., Dunstan D.I. (1993) Germination of encapsulated embryos of interior spruce (Picea glauca engelmannii complex) and black spruce (Picea mariana Mill.). Plant Cell Rep. V.12. P. 385-389.

138. Mamiya K., Sakamoto Y. (2001) A method to produce encapsulatable units for synthetic seeds in Asparagus officinalis. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V.64. P. 27-32.

139. Martin G.C., Miller A.N., Castle L.A., Morris J.W., Dandekar A.M. (1990) Feasibility studies using b-glucuronidase as a gene fusion marker in apple, peach and radish. J. Am. Soc. Hort. Sci. V.l 15. P.686-691.

140. Maruyama E, Hosoi Y., Ishii K. (2003) Somatic embryo culture for propagation, artificial seed production, and conservation of sawara cypress (Chamaecyparis pisifera Sieb. etZucc.). J For Res. V. 8. P. 1-8.

141. Mathur J., Ahuja P.S., Lai N., Mathur A.K. (1989) Propagation of Valeriana wallichii using encapsulated apical and axial shoot buds. Plant Sei. V. 60. P. 111116.

142. Maxwell K., Johnson G.N. (2000) Chlorophyll fluorescence a practical guide. J. of Experimental Botani. V. 51. №345. P. 659-668.

143. Mehrotra S., Rahman L., Kukreja A. (2010) An extensive case study of hairy-root cultures for enhanced secondary-metabolite production through metabolic-pathway engineering. Biotechnol. Appl. Biochem. V. 56. P. 161-172.

144. Mishra B., Ranjan R. (2008) Growth of hairy-root cultures in various bioreactors for the production of secondary metabolites. Biotechnol. Appl. Biochem. V. 49. P.l-10.

145. Mrosk C., Forner S., Hause G., Küster H., Kopka J., Hause B. (2009) Composite Medicago truncatula plants harbouring Agrobacterium rhizogenes-transformed roots reveal normal mycorrhization by Glomus intraradices. J Exp Bot. V.60(13). P.3797-807.

146. Mugnier J., Mosse B. (1987) Vesicular-arbuscular mycorrhizal infection in transformed root-inducing T-DNA roots grown axenically. Phytopathology. V.77. P. 1045-1050.

147. Mugnier J. (1988) Establishment of new axenic hairy root lines by inoculation with Agrobacterium rhizogenes. Plant Cell Reports. V. 7. P. 9-12.

148. Mukunthakumar S., Matur J. (1992) Artificial seed production in the male bamboo (Dendrocalamus strictus L.). Plant Science. V. 87. P. 109-113.

149. Murashige T. (1978) Plant growth substances in commercial uses of tissue culture. In: Frontiers of Plant Tissue Culture. Ed. Thrope T. Calgary: International Association of Plant Tissue Culture. P. 15-26.

150. Ooms G., Twell D., Bossen M.E., Hoge J.H.C., Burrell M.M. (1986) Development regulation of Ri T-DNA gene expression in roots, shoots and tubers of transformed potato {Solatium tuberosum cv. Desiree). Plant Mol Biol. V. 6. I. 5. P. 321-330.

151. Padmaja G., Reddy L.R., Reddy G.M. (1995) Plant regeneration from synthetic seeds of groundnut, Arachis hypogaea L. Indian Journal of Experimental Biology. V. 33. P. 967-971.

152. Parr A.J., Hamill J.D. (1987) Relationship between Agrobacterium rhizogenes transformed hairy roots and intact, uninfected Nicotiana plants. Phytochemistiy. V.26. P.3241-3245.

153. Parsons T.J., Sinkar V.P., Stettler R.F. Nester E.W., Gordon M.P. (1986) Transformation of poplar by Agrobacterium tumefaciens. BioTechnology. V.4(6). P. 533-536.

154. Patel A.V., Pusch I., Mix-Wagner G., Vorlop K.D. (2000) A novel encapsulation technique for the production of artificial seeds. Plant Cell Reports. V.19. P. 868874.

155. Pattnaik S., Chand P.K. (2000) Morphogenic response of the alginate-encapsulated buds from in vitro shoot cultures of six mulberries. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V. 60. P. 177-185.

156. Pattnaik S.K., Sahoo Y., Chand P.K. (1995) Efficient plant retrieval from alginateencapsulated vegetative buds of mature mulberry trees. Scientia Horticulturae. V. 61. P. 227-239.

157. Paulet F., Endgelmann F., Glaszmann J.-C. (1993) Cryopreservation of apices of in vitro plantlets of sugarcane {Saccharum spp. hybrids) using encapsulation-dehydration. Ciyo-lett. V. 12. P. 525-529.

158. Petit A., David C., Dahl G.A. (1983) Further Extension of the Opine Concept: Plasmids in Cooperate for Opine Degradation. Mol. Genet. V. 190. P. 204—214.

159. Piccioni E., Standardi A. (1995) Encapsulation of micropropagated buds of six woody species. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V. 42. P. 221-226.

160. Phunchindawan M., Hirata K., Sakai A., Miyamoto K. (1997) Cryopreservation of encapsulated shoot primordia induced in horseradish (Armoracia rusticana) hairy root cultures. Plant Cell Reports. V.16. P.469-473.

161. Plessis P., Leddet C., Collas A., Dereuddre J. (1993) Cryopreservation of Vitis vinifera L. cv. 'Chardonnay' shoot tips by encapsulation-dehydration: Effect of pretreatment, cooling and postculture conditions. Cryo-lett. 14: 309-320.

162. Plovie E., De Buck S., Goeleven E., Tanghe M., Vercauteren I., Gheysen G.2003) Hairy roots to test for transgenic nematode resistance: think twice. Nematology. V. 5.1. 6. P. 831-841.

163. Pond S.E., Cameron S.I. (2003) Artificial seeds. In: Encyclopedia of Applied Plant Sciences. B. Thomas, D. Murphy and B. Murray (eds.). Elsevier Ltd. P. 1379-1388.

164. Pype J., Everaert K., Debergh P. C. (1997) Contamination by micro-arthropods. In: Cassells, A. C., ed. Pathogen and microbial contamination management in micropropagation. Dordrecht: Kluwer Academic Publishers. P. 259-266.

165. Rafferty S.M., Williams S., Falkiner F.R., Cassells A.C. (2000) Persistence of human food poisoning pathogens {Escherichia coli and Serratia marcescens) in micropropagated cabbage. Acta Hortic. P. 530.

166. Rao P.V.L., Singh B. (1991) Plantlet regeneration from encapsulated somatic embryos of hybrid Solatium molengena L. Plant Cell Rep. V.10. P.7-11.

167. Redenbaugh K., Fujii J.A., Slade D. (1988) Encapsulated plant embryos. In: Mizrahi, A. (Ed.) Advances in biotechnological processes. Liss, New York, USA. V. 9. P. 225-248.

168. Redenbaugh K. (1990) Application of artificial seeds to tropical crops. Hort Science. V. 25. P. 251-255.

169. Redenbaugh K., Fujii J., Slade D., Vîss P., Kossler M. (1991) Artificial seeds -encapsulated somatic embryos. In: Biotechnology I Agriculture and Forestry, V. 17 (ed. Y.P.S. Bajaj), Springer-Verlag Berlin, Heidelberg;. P. 395-415.

170. Redenbaugh K. (1992) Synseeds: Applications of Synthetic Seeds to Crop Improvement. CRC Press, Boca Raton, USA.

171. Repunte V.P., Taya M., Tone S. (1996) Conservation of root regeneration potential of cell aggregates from horseradish hairy roots used as artificial seeds. Journal of Chemical Engineering of Japan. V. 29. P. 874-880.

172. Roder F.T., SchmuIIing T., Gatz C. (1994) Efficiency of the tetracycline-dependent gene expression system: complete suppression and efficient induction of the rolB phenotype in transgenic plants. Mol Gen Gene. V. 243. P. 32-38.

173. Rutala W.A., Cole E.C. (1984) Antiseptics and disinfectants safe and effective? Infect. Control. V. 5. P. 215-218.

174. Rutala W.A., Cole E.C. (1987) Ineffectiveness of hospital disinfectants against bacteria: a collaborative study. Infect Control. V. 8(12). P. 501-506.

175. Saderquist R., Lee J.M. (2005) Plant cell immobilisation application. In: Applications of Cell Immobilisation Biotechnology. Eds. V. Nedovic and R. WillaertSpringer, Netherlands. P.469-478.

176. Saito K. (1974) Possible site of flavonoid synthesis in the photosynthetic apparatus. Biochem. J. V.144, N 2, P. 431-432.

177. Sajina A., Minoo D., Gcetha S.P., Samsudeen K., Rema J., Nirmalbabu K., Ravindran P.N. (1997) Production of synthetic seeds in few spice crops. Biotechnology of Spices, Medicinal & Aromatic Plants. P. 65-69.

178. Sakai A., Matsumoto T., Hirai D., Niino T. (2000) Newly developed encapsulationdehydration protocol for plant cryopreservation. Cryo-lett. V.21. P.53

179. Sakamoto Y., Mashiko T., Suzuki A., Kawata H. (1992) Development of encapsulation technology for synthetic seeds. Acta Horticulturae. V. 319. P.71-76.

180. Sanchez M., Pena M. (1996) Changes in dehydrodiferulic acides and peroxidase activity against ferulic acid associated with xell walls during groeth of pinus pinaster hypocotyl. Plant physiology. Vol. 111,1. 3, P. 941-946.

181. Schreiber U., Neubauer C., Klughammer C. (1989) Devices and Methods for Room Temperature Fluorescence Analysis. Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological Sciences. V. 323. P. 241-251.

182. Scowcroft W.R. (1984) Genetic variability in tissue culture: impact on germplasm conservation and utilization. Technical Report, IBPGR. Rome, Italy. 41 p.

183. Sevon N., Oksman-Caldentey K.-M. (2002) Agrobacterium rhizogenes-mcdiated transformation: root cultures as a source of alkaloids. Planta Med. V. 68. P. 859868.

184. Shen W.H., Petit A., Guern J., Tempe J. (1988) Hairy roots are more sensitive to auxin than normal roots. Proc Natl Acad Sci USA. V. 35. P. 3417-3421.

185. Shigeta J., Mori T., Sato K. (1993) Storage of encapsulated somatic embryos of carrot. Biotechnology Techniques. V. 7(3). P. 165-168.

186. Signs M.W., Flores H.E. (1990) The biosynthetic potential of plant roots. BioEssays. V.12. P.7-13.

187. Singh A.K., Varshney R., Sharma M., Agarwal M.S., Bansal K.C. (2006) Regeneration of plants from alginate-encapsulated shoot tips of Withania somnifera (L.) Dunal, a medicinally important plant species. Journal of Plant Physiology. V. 163. P. 220-223.

188. Soukupova J., Cvikrova M. (2000) Histochemical and Biochemical Approaches to the Study of Phenolic Compounds and Peroxidases in Needles of Norway Spruce (Picea abies). Research New Phytology. V. 146. P.403-414.

189. Spano. L., Wullems G.J., Schilperoort R.A., Costantmo P. (1981) Hairy root: in vitro growth properties in tissues induced by Agrobacterium rhizogenes on tobacco-Plant. Sci. Lett. V. 23. P. 299-305.

190. Srivastava S., Srivastava A.K. (2007) Hairy root culture for mass-production of high-value secondary metabolites. Crit Rev Biotechnol. V. 27. P.29-43.

191. Strasser B.J., Strasser R.J. (1995) Measuring fast fluorescence transients to address environmental questions: The JlP-test. In: Mathis P (ed) Photosynthesis: From Light to Biosphere. Kluwer Academic Publishers. Dordrecht. P. 977-980.

192. Street H.E. (1957) Exciesed root culture. Biol. Revs Cambridge Philos. Soc. V.32. P. 117-187.

193. Tan T.K., Loon W.S., Khor E., Loh C.S. (1998) Infection of Spathoglottis plicata (Orchidaceae) seeds by mycorrhizal fungus. Plant Cell Rep. V. 18. P. 14-19.

194. Teoh K.H., Weathers P.J., Cheetham R.D., Walcerz D.B. (1996) Cryopreservation of transformed (hairy) roots of Artemisia annua. Ciyobiology. V.33(l). P.106-17.

195. Tepfcr D., Casse-Delbart F. (1987) Agrobacterium rhizogenes as a vector for transforming higher plants. Microbiol. Sci. V. 4. P. 24-28

196. Tepfer D. (1990) Genetic transformation using Agrobacterium rhizogenes. Physiol. Plant. V. 79. P. 140-146.

197. Thorpe T. (2007) History of Plant Tissue Culture. Molecular Biotechnology. V.37. P. 169-180.

198. Tone S., Taya M., Kino-oka M. (1997) Alteration of metabolite formation and morphological properties of hairy roots by environmental stimuli. In: Hairy Roots: Culture and Application. Ed. Doran P.I. Australia: Harwood Academic. P. 65- 72.

199. Torrey J.G., Clarkson D.T., eds (1975) The development and function of roots. Academic Press, New York. 618 pp.

200. Towill L.E., Jarret R.L. (1992) Cryopreservation of sweet potato (.Ipomoea batatas (L.) Lam.) shoot tips by vitrification. Plant Cell Rep. V.l 1. P. 175-178.

201. Uozumi N., Asano Y., Kobayashi T. (1992) Production of artificial seed from horseradish hairy root. J. Ferment. Bioeng. V. 74. P. 21-26.

202. Uozumi N., Nakasbimada Y., Kato Y., Kobayasbi T. (1992) Production of artificial seed from horseradish hairy root. J. Ferment. Bioeng. V. 74. P. 21-26.

203. Uozumi N., Asano Y., Kobayashi T. (1994) Micropropagation of horseradish hairy root by means of adventitious shoot primordial. Plant Cell, Tissue and Organ Culture. V. 36. P. 183-190.

204. Uozumi N., Ohtake A., Nakashmada Y., Morikawa Y., Tanaka N., Kobayashi

205. T. (1996) Efficient Regeneration from GUS-Transformed Ajuga Hairy Roots. J. Ferment Bioeng. V. 81. P. 374-378.

206. Uozumi N., Kobayashi O. (1997) Artificial Seed Production through Hairy Root Regeneration. In: Hairy Roots: Culture and Application. Ed. Doran P.I. Australia: Harwood Academic. P. 113- 121.

207. Vcena V., Taylor C.G. (2007) Agrobacterium rhizogenes: recent developments and promising applications. In Vitro Cell.Dev.Biol. Plant. V. 43. P. 383-403.

208. Verpoorte R., Contin A., Memclink J. (2002) Biotechnology for the production ofsplant secondary metabolites. Phytochem Rev. V. 1. P. 13-25.

209. Wang Q., Tanne E., Arav A., Gafny R. (2000) Cryopreservation of in v/7/-o-grown shoot tips of grapevine by encapsulation-dehydration. Plant Cell, Tissue and Organ Culture V. 63. P. 41-46.

210. Wardell W.L., Skoog F. (1969) Flower formation in excised tobacco stem segments; I. Methodology and effect of plant hormones. Plant Physiol. V. 44. P. 1402-1406.

211. Williams E.G., Maheswaran G. (1986) Somatic embryogenesis: factors influencing coordinated behaviour of cells as an embryogenic group. Ann. Bot. V.57. P. 443-462.

212. Winkelmann T., Heintz D., Dorsselaer A., Serek M., Braun H.-P. (2006) Proteomic Analyses of Somatic and Zygotic Embryos of Cyclamen persicum Mill. Reveal New Insights into Seed and Germination Physiology. Planta. V. 224. P. 508-519.

213. Wintermans J.F., De Mots A. (1965) Spectrophotometric characteristics of chlorophyll a and b and their pheophytins in ethanol. Biochimica et Biophysica Acta. V. 109. P. 448-453.

214. Wysokinska H., Chmicl A. (1997). Transformed root cultures for biotechnology. Acta Biotechnologica. V. 17. P. 131-159.

215. Yamada T., Sakai A., Matsumura T., Higuchi S. (1991) Cryopreservation of apicalmeristems of white clover (Trifolium repens L.) by vitrification. Plant Sci. V.78.P. 81-87.

216. Yonemitsu H. (1995) Production by hairy root culture of Lobelia inflata L. Plant Cell Repts. V. 9, № 10. P.307-310.

217. Zenk M.H., El-Shagi H., Schulte U. (1975) Anthraquinone production by cell suspension cultures of Morinda citrofolia. Planta Med. P.79-101.

218. Zhang D., Shelby R., Savka M.A., Dessaux Y., Wilson M. (1998) Separation, detection, and quantification of imine-liked opines by high-performance liquid chromatography. J. Chromatography A. V. 813. P. 247-253.