Использование белково-полисахаридного антигена для выявления антител к микобактериям туберкулеза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Шимолина, Надежда Олеговна

• Шимолина, Надежда Олеговна
• кандидат ветеринарных наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Шимолина, Надежда Олеговна

ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Возбудители туберкулеза крупного рогатого скота.

2.2. Механизм иммунного ответа при туберкулезе крупного рогатого скота.

2.3. Роль ППД туберкулина для млекопитающих в аллергической диагностике туберкулеза

2.4. Серологические и другие методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота ..

2.5. Место ИФА в системе общепринятых методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

2.6. Технические варианты проведения ИФА„,..

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.1. Факторы, влияющие на специфичность и чувствительность непрямого варианта ИФА й их оптимальное сочетание.

4.2. Использование белково-полисахаридного антигена для выявления антител к микобактериям.туберкулеза.

4.2.1. Способы получения различных антигенов для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

4.2.2. Использование белково-полисахаридного антигена в непрямом варианте ИФА.

4.3. Результаты использования белково-полисахаридного антигена в ИФА и других серологических тестах.

4.3.1. Испытание непрямого варианта ИФА.

4.3.2. Испытание комбинированного иммунопреципитационного теста.

4.4. Результаты сравнения бактериологического исследования с показателями ИФА.

5. АНАЛИЗ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

6. ВЫВОДЫ.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Использование белково-полисахаридного антигена для выявления антител к микобактериям туберкулеза»

Из инфекционных болезней крупного рогатого скота туберкулез наносит наиболее значительный экономический ущерб за счет снижения продуктивности животных, ухудшения качества продукции, преждевременной выбраковки больного поголовья и высоких затрат на противотуберкулезные мероприятия.

Проблема профилактики и ликвидации туберкулеза актуальна для многих регионов России и, несмотря на осуществляемые ветеринарно-санитарные мероприятия ежегодная заболеваемость крупного рогатого скота туберкулезом составляет около 2% от имеющегося поголовья (В.М. Авилов, В.Ф. Пылинин, 1992).

Одной из особенностей туберкулеза является преобладание латентных форм бактерионосительства. Клинические признаки болезни у крупного рогатого скота проявляются при длительном течении инфекции и при неблагоприятных условиях содержания.

Для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в нашей стране используется аллергический способ выявления сенсибилизированных микобактериями туберкулеза организма животных при внутрикожном введении туберкулина. Недостатком этого способа является выявление значительного количества животных, неспецифически реагирующих на внутрикож-ное введение туберкулина из-за сенсибилизирования сапрофитными формами микробактерий. При этом для постановки диагноза , особенно в благополучных по туберкулезу хозяйствах, необходимо проведение бактериологических и пат-морфологических исследований с учетом эпизоотологических данных и клинических наблюдений. При послеубойном осмотре реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота не всегда удается установить туберкулезные изменения во внутренних органах и тканях животного (А.И. Кузин, 1980). Бактериологические исследования на туберкулез проводятся в срок до 3-х месяцев, а в некоторых случаях - до 6 месяцев. Кроме того, выявление инфекционного агента при туберкулезе может быть осложнено наличием ультрамелких и Л-форм ми-кобактерий (И.Г. Мальков, 1993).

Из серологических методов диагностики туберкулеза животных делались попытки апробации в ветеринарной практике реакции связывания комплемента с антигенами СибНИВИ и УкрНИВИ (Э.Д. Лакман, 1980; Ю.Я. Кас-сич, 1984).

Однако, эта реакция из-за невысокой чувствительности является ориентировочной и для массовых исследований не нашла применения, хотя некоторые исследователи использовали ее для уточнения диагноза и отбора животных для диагностического убоя с последующим бактериологическим исследованием биоматериала животных (А.Х. Найманов и др., 1990).

В связи с этим создание высокочувствительных экспресс-методов выявления инфицированных микобактериями туберкулеза животных до сих пор продолжает оставаться актуальной проблемой и является одним из важнейших направлений научных исследований по туберкулезу.

Высокочувствительный непрямой вариант иммуноферментного анализа (ИФА) для серологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота апробирован отечественными и зарубежными исследователями (Е.В. Маслов и др., 1986), однако широкого применения в ветеринарной практике еще не нашел.

Возможность выявления иммуноферментным методом малых количеств антигена в исследуемом материале, а также специфических антител в сыворотке крови представляет большой интерес при использовании ИФА для диагностики туберкулеза (Т.Р. Якупов, 1991).

Для получения достоверных результатов с помощью высокочувствительных методов исследования необходимо использование высокоспецифичных реагентов, основными из которых в ИФА являются антиген и коньюгат антивидовых антител.

Цель и задачи исследований.

Целью данной работы являлась разработка нового способа диагностики туберкулеза крупного рогатого скота на основе ИФА и моноклональных антител. Исходя из этой цели для выполнения ставились задачи:

1) Разработать методику изготовления специфических антигенов из ми-кобактерий бычьего вида, вакцинного штамма БЦЖ и атипичных.

2) Дать сравнительную оценку чувствительности и специфичности различных вариантов ИФА с полученными микобактериальными антигенами, а также с бактериологическим методом, включающим биопробу на морских свинках.

3) Определить оптимальные условия для проведения ИФА с полученными реагентами, а также возможность понижения интенсивности фоновых реакций.

4) Определить место экспресс-метода диагностики туберкулеза с использованием ИФА в системе противотуберкулезных мероприятий.

Научная новизна.

Получен комплексный белково-полисахаридный антиген из М.Ымб, обладающий высокой активностью в ИФА е контрольной положительной сывороткой. Непрямой вариант ИФА с указанным антигеном апробирован при исследовании сыворотки крови из неблагополучных по туберкулезу хозяйств Новосибирской области.

Разработан и апробирован новый комбинированный иммунопреципита-ционный тест на основе ИФА.

Показана высокая специфичность и информативность ИФА сыворотки крови крупного рогатого скота при выяснении эпизоотической ситуации хозяйств по туберкулезу.

Практическое значение работы.

Разработана методика изготовления специфических антигенов из мико-бактерий туберкулеза бычьего вида и вакцинного штамма БЦЖ. Белково-полисахаридный антиген из вакцинного штамма БЦЖ дает минимальные фоновые реакции в непрямом варианте ИФА.

Непрямой твердофазный вариант ИФА, как один из методов прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, показал удовлетворительные результаты при предварительных исследованиях сыворотки крови из неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйств. Экспресс-метод серологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в ИФА может быть использован для оценки эпизоотической ситуации в благополучных по этой инфекции хозяйствах, где отмечены случаи реагирования животных на ППД туберкулин для млекопитающих

Апробация работы.

Основные положения работы доложены и обсуждены на Научно-практической конференции «Основные научные исследования по проблеме туберкулеза и бруцеллеза сельскохозяйственных животных, профилактика и организация мероприятий по ликвидации болезней в регионе Сибири» ( г.Новосибирск, 1995); научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарии» (г.Новосибирск, 1997); на международной научно-практической конференции «Зооантропонозные болезни, меры профилактики и борьбы» (г.Гродно, 1997 ); на научно-практической конференции «Молодые ученые времени. Проблемы Сибирской аграрной науки» (Новосибирск, 1997); на Ш Межвузовской научно-практической конференции «День земли» (г.Бийск, 1997); на научной конференции, посвященной 50-летию Алтайской НИВС (г.Барнаул, 1997); на заседании подсекции инфекционной патологии ИЭВСиДВ (Новосибирск, 1997), межлабораторном заседании ИЭВСиДВ (2000).

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ.

Внедрение результатов исследований.

Результаты работы рассмотрены на подсекции инфекционной патологии ИЭВСиДВ и рекомендованы для производственной проверки с целью отбора реагирующих на туберкулин животных для диагностического убоя и последующего бактериологического исследования биоматериала животных в благополучных по туберкулезу хозяйствах .

На защиту выносится:

1) Режим изготовления белково-полисахаридного антигена из вакцинного штамма микобактерии (БЦЖ) и его использование для выявления антител к микобактериям туберкулеза в серологических реакциях (РИД, ИФА).

2) Усовершенствование техники выполнения непрямого варианта им-муноферментного анализа с разработанным нами антигеном для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

3) Результаты сравнения ИФА и бактериологического исследования, включающего биопробу на морских свинках, при постановке диагноза на туберкулез.

Структура и объем диссертации.

Материалы диссертации изложены на 131 странице машинописного текста и состоят из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований, заключение, выводы, практические предложения, литература и приложение.

Список литературы содержит 296 отечественных и зарубежных источников. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами.

Работа была выполнена в лаборатории биотехнологии и лаборатории по разработке мер борьбы с туберкулезом животных ИЭВСиДВ СО РАСХН с 1993 8 по 2000 гг. В выполнении ряда фрагментов работы принимали участие В.М. Чекишев, доктор ветеринарных наук, профессор; A.C. Донченко, доктор ветеринарных наук, профессор, чл.-корр. РАСХН; Р.З. Файзуллин, кандидат биологических наук и другие сотрудники вышеназванных лабораторий, которым автор выражает глубокую благодарность и признательность.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Туберкулез крупного рогатого скота, как заболевание, был известен задолго до открытия возбудителя. В связи с разнообразием форм его проявления, значительной устойчивостью возбудителя во внешней среде и опасностью для человека, занимает особое положение среди хронических инфекционных болезней крупного рогатого скота. Туберкулезом заболевают все виды животных, особенно восприимчив крупный рогатый скот. В.Н. Матвеев (1938) указывает, что туберкулез наблюдали у 46 видов млекопитающих животных и 25 видов птиц. К 1963 году список млекопитающих животных, болеющих туберкулезом составил 54 вида (Я.А. Благодарный, 1971). Для диагностики туберкулеза человека В.Г. Гутман (1891) предложил использовать реакцию замедленной кожной гиперчувствительности при внутрикожном введении вытяжки из бактерий туберкулеза. При последующем совершенствовании способов изготовления ту-беркулинов, схем их применения, данный метод до настоящего времени является основным для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота (В.Г. Гутман, 1891),

Ряд исследователей доказали значение туберкулиновой пробы в прижизненной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота (С.Н. Вышелес-ский,1924; Н.Ф. Гамалея, 1953; В.П. Урбан, 1995; А.И. Кузин, 1987; A.C. Дон-ченко, 1980,1983; А.Ф. Кочмарский, 1982; Ю.Я. Кассич,1982, 1984; Н.П. Овди-енко, А.Х. Найманов, 1980; P.A. Barrow, 1981; B.V. Kollias, С.О. Thoen, 1982; S.W. Wilesmit, Т. Gnada, 1984; R. Gunning, 1985).

В ветеринарной практике в диагностических целях используют несколько методов: аллергический, клинический, патологоанатомический, гистологический, бактериологический, биологический, а в последнее время серологический. Кроме этого, учитывают эпизоотологические данные. В аллергической диагностике первоначально широкое применение получили подкожная и глазная туберкулиновые пробы, в дальнейшем - внутрикожная проба (С.Н. Вышелесский, 1924; П.П. Вишневский, 1937; М.К. Юсковец, 1963).

Установлено, что вследствие внутримакрофагального паразитирования микобактерии не доступны действию гуморальных факторов иммунитета. Сам туберкулезный процесс , сопровождающийся интоксикацией организма, напряжением всех звеньев системы иммунитета и развитием аутоимунных процессов (М.М. Авербах, 1980), является ложным фактором возникновения вторичных иммунодефицитных состояний , также сопровождающихся падением титров циркулирующих антител.

Познание иммунологических механизмов, основанных на этиологических и патогенетических принципах взаимодействия микро- и макроорганизма, является методической основой совершенствования средств и методов прижизненной диагностики заболевания (A.C. Донченко, В.А. Середин и др., 1984).

Совершенствование средств и методов прижизненной диагностики заболевания с учетом иммунной: системы организма, особенностей биологии возбудителя, будет способствовать, более, эффективному оздоровлению: животноводческих хозяйств от туберкулеза и возможно она путем применения в комплексе серологических и аллергических методов диагностики.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Шимолина, Надежда Олеговна

6. выводы

1. Получен высокоспецифичный бежово-полисахаридный антиген из вакцинного штамма БЦЖ (М.Ьомб) для непрямого варианта ИФА, обладающий высокой активностью и специфичностью при исследовании заведомо известных контрольных проб сыворотки крови крупного рогатого скота.

2. Оптимизирована схема выполнения ИФА с полученными нами реагентами, позволяющая не только инструментально, но н визуально отличать положительный и отрицательный сигнал при обнаружении специфических антител к М.Ьоу1з в исследуемых пробах сыворотки крови крупного рогатого скота.

3. Разработан комбинированный иммунопреципитационный тест (КИТ), который позволяет в ИФА в качестве антигена использовать цельную бактериальную клетку без неспецифической сорбции ее к лункам иммунологических планшет. По чувствительности и специфичности метод не уступает непрямому варианту ИФА, может быть использован при отсутствии водорастворимых антигенов, изготовленных специально для этих целей. КИТ позволяет изучать гуморальный иммунный ответ к поверхностным антигенам цельной бактериальной клетки, а не к ее отдельным фрагментам.

4. Рекомендуемый нами вариант ИФА может быть использован для оценки эпизоотической ситуации благополучных по туберкулезу стад, в которых регистрируются единичные случаи положительного реагирования животных на ППД туберкулин.

5. При инфицировании животных М.Ьоу1б лишь незначительная их часть (~ 25%) синтезируют специфические антитела, которые могут быть установлены с помощью высокочувствительного ИФА. Большая же часть животных генетически детерминирована на клеточную иммунную защиту. В связи с этим дальнейшие попытки разработать серологические тест-системы для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота мало перспективны.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Способ получения высокоспецифичного белково-полисахаридного антигена путем лизирования микобактерий туберкулеза бычьего вида (вакцинный штамм БЦЖ) в щелочной среде додецилсульфатом натрия в присутствии хлороформа, с последующим гидролизом в кислой среде и осаждением белково-полисахаридного комплекса этиловым спиртом. Антиген может быть использован для сенсибилизации иммунологических планшет в иммуноферментной тест-системе для выявления антител к микобактериям туберкулеза крупного рогатого скота.

2. Новый комбинированный иммунопрепиципитационный тест, не уступающий по чувствительности и специфичности ИФА, но позволяющий в качестве антигена использовать цельные бактериальные клетки, а не водорастворимые антигены.

3. Экспресс-метод серологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в ИФА может быть использован для оценки эпизоотичес-кой ситуации в благополучных по этой инфекции хозяйствах, где присутствуют животные, реагирующие на 1111Д туберкулин для млекопитающих.

Материалы работы рассмотрены и одобрены на заседании подсекции «Инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарии РАСХН от 25 ноября 1997 г.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Шимолина, Надежда Олеговна, 2000 год

1. Авербах М.М. Иммунология, иммунопатология туберкулеза. -М.: Медицина, 1976 С.55-60.

2. Авербах М.М., Литвинов В.И. Достижения и перспективы в изучении противотуберкулезного иммунитета. В кн.: Иммунология, иммунопатология туберкулеза.-М.: Медицина, 1976.-С.267-279.

3. Агеева Т.Н. Антитела, иммунные комплексы, антигены при туберкулезе крупного рогатого скота и инфицирование атипичными микобактериями: Автореф. дис. .канд. вет. наук. -Белор. НИИ экспериментальной ветеринарии им. С.М. Вышелесского,- Минск, 1993,- 16с.

4. Александров H.A. Сравнительная оценка показателей внутрикожной пробы разными туберкулиновыми аллергенами // Ветеринарно-санитарные меры по охране сельскохозяйственных животных,- Саратов, 1975. С.26-31.

5. Александров H.A. О некоторых причинах своеобразия внутрикожных туберкулиновых проб у крупного рогатого скота длительно неблагополучных хозяйств // Тр. Саратовской НИВС. 1977 - С. 13-22.

6. Александров H.A. Значение атипичных микобактерий в эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота // Тр. Саратовской НИВС. 1979. -Т. 13.-С. 15.

7. Андросова М.В., Алексеева Т.И. и др. Применение ИФА для видовой идентификации М.tuberculosis и М.bovis BCG с использованием моноклональных антител // Тез. докл. респ. научн. конф.- М., 1989,- С. 80.

8. Андрущенко B.B. Источники и резервуары микобактерильной инфекции // Мат. конф. ВАСХНИЛ. Южн. отд-ние- Киев, 1982.-С.28.

9. Баранов O.K., Белоусов Е.С., Таранин A.B., Чекишев В.М., Ходун Л.М., Кабанцев А.И., Файзрахманов Ш.Р. Изготовление реагентов для иммуноферментного анализа // Метод, рекомендации / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние; ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1984. - 16с.

10. Беклемишев Н.Д., Сухоедова Г.С. Аллергия к микробам, в клинике и эксперименте. М.: Медицина, 1979. - С.230- 262.

11. Благодарный Я.А., Сидоркина Э.В. Сравнительная характеристика некоторых методов титрования микобактерий туберкулеза // Пробл. туберкулеза. 1971. - №11. - С. 72-75.

12. Белоусов В.И., Гусев A.A. Актуальные проблемы лабораторной диагностики заразных болезней животных. Ветеринария.- 1999.- №7.- С. 3-6.

13. Боганец Н.С. Высеваемость кислотоустойчивых микобактерий из патологоанатомического материала после разных методов хранения // Совершенствование систем и методов в борьбе с бруцеллезом и туберкулезом животных. Новосибирск, 1987.-С. 107-113.

14. Бойко A.A., Хорьков И.А. Перспективы использования антивидовых иммуноглобулинов, меченных пероксидазой в ветеринарии и животноводстве // Вестник сельскохозяйственной науки,-1987. Т.9. - С. 96-100.

15. Бойко A.A., Самуйленко А.Я., Маслов Е.В., Матузенко В.А. Исследования методом ИФА интенсивности эпизоотического процесса при туберкулезе крупного рогатого скота // Науч. основы технологии пром. пр-ва вет. биол. препаратов.-М., 1991.- С. 131-132.

16. Бокун А.О., Гурко Л.Ф. Результаты исследований крупного рогатого скота, инфицированного микобактериями туберкулеза человеческого, птичьего типов атипичными: Сб. научн. работ; Сев.-Кавказ. ЗНИВИ.- 1977 (1978).1. Вып. 19.-С.З-6.

17. Борисенко Ю.В. Разработка иммуноферментных тест-систем для изучения бактериальных инфекций: Автореф. дис. . канд. вет. наук. -М, 1986.- С.5.-9.

18. Вейсман И.Л., Худ Л JE., Вуд У.Б. Введение в иммунологию.- М.: Высшая школа, 1983. 160 с.

19. Вишневский П.И. Туберкулез крупного рогатого скота. М.: Сельхозгиз., 1937.-173 с.

20. Воробьева З.Г., Лазовская А.П. Эффективные меры борьбы с туберкулезом животных. Казань, 1991,- 32с.

21. Воробьева З.Г., Лазовская А.П. Проблемы профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных. Н.-Новгород, 1993.- 28с.

22. Воробьева З.Г., Лазовская А.П., Лукин Ю.В. Реакция латекс-агглютинации для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. // Ветеринария.- 1996.-№4.- С.27-28.

23. Вышелесский С.Н. Туберкулин и его применение в диагностике туберкулеза домашних животных Яр. ГИЭВ.- М., 1924.- Т.2. Вып.1. - С.57-69.

24. Гамалея Н.Ф. Туберкулез.// Соч.- Т.5.- М.: Медгиз, 1953.- С. 63-67

25. Говоров A.M., Осташко Ф.И. Получение и производственное испытание сухого очищенного туберкулопротеина: Сб.науч.тр. / УНЭВ.- Т.23.- 1956.-С.15.

26. Гребенникова Т.В, Грабовецкий В.В., Кальнов С.Л., Непоклонов Е.А., Шумский Н.И. Дифференциальная диагностика микобактерий методом полимеразной цепной реакции // Ветеринария.-1999.- №3.- С.17-20.

27. Гуткин B.C., Востряков А.П., Горбатов В.А., Цапко P.A. Иммуногенность клеточных оболочек микобактерий туберкулеза : Бюлл. ВИЭВ.- 1987.- Вып.64.-С. 24-27.

28. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. ИФА и его физико-химические особенности //Журнал Всесоюзного химического общества им. Менделеева.- 1982.- Вып.24.-С.4.

29. Дзантиев Б.Б. Физико-химические закономерности ИФА биологически активных систем // Итоги науки и техники.- 1990.- Т. 24.- С.6-45.

30. Донченко A.C. Экономическая эффективность комплексных ветеринарных мероприятий, некоторые вопросы диагностики и эпизоотологии при искоренении туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук.- Фрунзе, 1971.- 16с.

31. Донченко A.C. О выделении микобактерий туберкулеза с молоком больных коров // Ветеринария.- М., 1972.- №6.- С.46-48.

32. Донченко A.C. Комплексная дифференциация неспецифических туберкулиновых реакций в условно благополучных по туберкулезу пунктах: Сб.науч.тр. /ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние.-Новосибирск, 1980.- С.32-34.

33. Донченко A.C., Сыртланов P.M., Дорожанский П.А. Причины рецидивов туберкулеза крупного рогатого скота в ранее оздоровленных хозяйствах: Науч.-техн.бюл. /ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние,-Новосибирск.- 1980.- Вып. 19,- С. 17-19.

34. Донченко A.C. Принципы организации и проведения мер борьбы и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота / Сибирский вестник с.-х. науки.- 1983.- №1.- С.67-71.

35. Донченко A.C. Установление параллергии на туберкулин у крупного рогатого скота в благополучных хозяйствах // Ветеринария.- 1987.- №12. С.37-38.

36. Донченко A.C., Смолянинов Ю.И., Никифоров И.П. Выяснение причин туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах // ВАСХНИЛ.Сиб. отд-ние.- Новосибирск, 1987.- С.8-9.

37. Донченко A.C. Основные научные положения организации мероприятий по профилактике и борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота в регионе Сибири и их практическое значение // Тез.докл. науч.-практ. конф.-Новосибирск, 1995,- С.6-7.

38. Донченко A.C., Шкиль H.A. Совершенствование методики оценки эпизоотической ситуации туберкулеза крупного рогатого скота // Тез.докл. науч.-практ. конф,-Новосибирск, 1995,- С.15-16.

39. Дорожко В.П. Специфическая стимуляция при серологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Киев, 1971.-16 с.

40. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилов Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа.- М.: Высшая школа, 1991.- 288с.

41. Ерошев А.И. ИФА при серологической дифференциальной диагностике туберкулеза // Пробл.науч.обеспечения животноводства Молдавии.- Кишинев, 1990.-С.110.

42. ИФА для диагностики туберкулеза животных: Приготовление реагентов тест-системы и методика постановки реакции: Метод, рекомендации // ВНИИ бруц. и туб-за животных / Мин. здрав. РСФСР. Моск. НИИ туб-за.- Омск, 1990.-11с.

43. Каграманов А.И., ТузоваР.В., Зубец Ф.М. Опыт комплексного изучения о возбудителе туберкулеза / Пробл. туб.- 1967,- №11.- С. 24-27.

44. Кадочкин A.M., Ткачев-Кузьмин A.B. Атипичные микобактерии и их роль в сенсибилизации животных к туберкулину// Бюлл. ВИЭВ,- 1983.- Вып.4.- 62с.

45. Каркадиновская И.А. О возможности использования РСК для диагностики активных форм туберкулеза крупного рогатого скота: Сб.тр./ Лен. НИВИ/-1951, Вып.4.-С.12.

46. Кассич Ю.Я. Реакция связывания комплемента и ее применение при оздоровлении стад крупного рогатого скота от туберкулеза: Автореф.дис. . докт. вет. наук.- М., 1979.- 29с.

47. Кассич Ю.Я., Целлариус И.К., Тесля А.Е. Рецидивы туберкулеза // Ветеринария.-1981.- № 4.- С. 38-39.

48. Кассич Ю.Я. Значение РСК при диагностике туберкулеза //Ветеринария.-1982,- № 5.- С.24-27.

49. Кассич Ю.Я., Тихонов Ü.M., Кочмарский В.А., Тесля А.Е., Харченко A.M., Завгородний А.И. Результаты иммунизации крупного рогатого скота и вакцинации против туберкулеза: Сб.науч.тр./ ВИЭВ.- 1984.- Т. 61,- С. 45-49.

50. Кассич Ю.Я., Кочмарский В.А., Тихонов П.М., Тесля A.C., Харченко A.M., Завгородний А.И. Изучение сенсибилизирующих свойств атипичных микобактерий // Ветеринария.- 1985.- № 2.- С. 29-30.

51. Кассич Ю.Я., Борзяк А.Т., Кочмарский А.Ф. и др. Туберкулез животных и меры борьбы с ним.- Киев: Урожай, 1990.- 230с.

52. Кассич Ю.Я., Кочмарский В.А., Завгородний А.И. Эффективность комплексного метода диагностики туберкулеза крупного рогатого скота // Проблемы науч. обеспечения животноводства Молдавии.- Кишинев, 1990.1. С. 111-112.

53. Козин А.И. Уточнение диагноза на туберкулез в условно благополучных хозяйствах//Науч.-техн. бюл./ВИЭВ.-М.,-1981.-Вып. 43.-С. 9-11.

54. Козин А.И., Нуратинов P.A. Применение внутривенной туберкулиновой пробы при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота// Науч.-техн. бюл./ ВИЭВ.- 1987.- №64.- С. 23-26.

55. Козин А.И., Овдиенко Н.П. Значение серологических методов в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота//Науч.-техн.бюл./ ВИИЭВ.- Вып. 65.1988- С.48-52.

56. Козин А.И. Серологические методы диагностики туберкулеза с.-х. животных // Вопр. вет. микробиологии, эпизоотологии и вет.-сан. экспертизы.-Ульяновск, 1990.- С.40-43.

57. Козин А.И., Филимонов Ю.А. Дифференциация туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота// Актуальные проблемы медицины.- Ульяновск, 1994.-С. 71-73.

58. Кокуричев П.И., Домнин Т.Г., Ведерников В.А. Результаты послеубойного исследования крупного рогатого скота, реагировавшего на туберкулин// Болезни с.-х. животных и птиц, их профилактика и лечение.- Л., 1973.1. С. 66-70.

59. Колычев Н.М., Евтушенко Н.Г., Загайнова Н.В. К сравнительной оценке методов обработки материала при исследовании на туберкулез: Сб.науч.тр.// Омск.вет.ин-т.- 1983.- Т.28.- Вып.2.- С. 38-41.

60. Коромыслов Г.Ф. Достижения, проблемы и перспективы ветеринарной иммунологии: Сб.науч.тр. //ВИЭВ.- 1980.- Т. 57.- С. 3-14.

61. Коромыслов Г.Ф., Малахов А.Г., Щуревский В.Е., Устинова Г.И., Овдиенко Н.П., Якушева О.В. ППД-туберкулин, изготовленный из микробных клеток микобактерий туберкулеза: Сб.науч.тр.//ВИЭВ.- 1980.- Т. 52.- С.3-8.

62. Коромыслов Г.Ф., Щуревский В.Е., Устинова Г.И., Овдиенко Н.П., Шаров

63. B. А. Комплексный туберкулин ВИЭВа для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота// Тез. докл. Всесоюзн. конф. ВАСХНИЛ- Омск, 1980.- С. 31-35.

64. Коромыслов Г.Ф., Солодовников В.Л. Состояние Т и В - лимфоцитов при туберкулезе // Ветеринария.- 1982.- № 7.- С. 27-30.

65. Коромыслов Г.Ф., Овдиенко Н.П., Устинова Г.И., Шаров В.А., Шевырев Н.С. Состояние и перспективы научных разработок по туберкулодиагностике крупного рогатого скота: Науч.-техн.бюл.//ВИЭВ.- 1983.- Вып. 51.- С. 3-8.

66. Коршунова Л.Н., Ищенко Л.А. Аллергическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота: Сб.науч.тр. // ЛВИ.- Ленинград, 1988.- С. 51-53.

67. Кузин А.И. Латентная туберкулезная инфекция и ее значение в эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф.дис. . докт. вет.наук.- М., 1977.- 26с.

68. Кузин А.И. Латентный микробизм при туберкулезе крупного рогатого скота// Тез.докл.конф,- Омск, 1980.- С. 28-29.

69. Кузин А.И. Опыт ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота // Ветеринария.-1981. № 5. - С. 32-34.85 .Кузин А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза.- М.: Россельхозиздат, 1987.- С. 58-85.

70. Кузин А.И. Туберкулез с.-х. животных и его профилактика.- М.: Росагропромиздат, 1992.- 189с.

71. Лазовская А.Л., Яблокова Т.Б., Белоусова В.П. и др. Сопоставление иммунохимических свойств туберкулинов//Микробиология.- №5.- 1973.1. C. 94-97.

72. Лазовская А.Л., Белоусова В.П. Об антигенной структуре производственных штаммов микобактерий// Проблемы туб.- 1973.- № 1.- С. 65-68.

73. Лазовская А.Л., Блохина И.Н. Патогенные и условно-патогенные микобактерии.- Горький, 1976. С. 86-89.

74. Лазовская А.Л., Воробьева З.Г. Прогнозирование и диагностика заболеваний животных в МЗ РФ.: Сб.- 1994,- С.43-47.

75. Лакман Э.Д. Диагностическое значение РСК при туберкулезе крупного рогатого скота// Проблемы вет.-сан. обеспечения животноводческих ферм и комплексов.- Саратов, 1983.- С.13-17.

76. Лакман Э.Д., Кондратьев H.A., Селезнев B.C. Бактериологические исследования в комплексе диагностических мер при туберкулезе человека и животных// Проблемы вет.сан. обеспечения животноводческих ферм и комплексов. Саратов, 1983.-С.17-21.

77. Линникова М.А. Очищенный протеин дериват// Пробл. туберкулёза.-1939,-№12.-С. 10.

78. Лысенко А.П. Антигенные комплексы M.bovis и их значение в диагностике туберкулеза: Автореф. дис. . канд. вет. наук.- Минск, 1984,- 23с.

79. Лысенко А.П. Выявление антигенов Mycobacterium bovis// Ветеринария.-1991.- № 1.-С.26-27.

80. Лысенко А.П., Карпова Г.А., Агеева Т.Н. Специфичность антигенов Mycobacterium bovis при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в ЙФА// Ветеринария.- 1992.- № 3.- С.22-24.

81. Лысенко А.П., Карпова Т.А., Агеева Т.Н. Особенности серологической диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота: Инф. бюл.// Укр. акад. агр. наук. Ин-т эксперим. клинич. вет.- Киев .Медицина, 1994.-С.13.

82. Мальков И.Г. Нетрадиционные методы анализа в ускоренной диагностике патогенных микобактерий //Пробл.вет.санигарии.- М., 1992.- Вып. 2.- С. 3-17.

83. Мальков И.Г. Дифференциация культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов с помощью ДНК-зондов // Ветеринария.- 1993.-№ 2.- С.52-54.

84. Мартма О.В. Атипичные микобактерии и их диагностическое и эпизоотическое значение при туберкулезе крупного рогатого скота: Автореф. дис. . докт.вет.наук.- Тарту, 1971.- 46с.

85. Мартма О.В. О течении микобактериоза крупного рогатого скота в Эстонской ССР // Мат. конф. Южн. отд-ния ВАСХНИЛ.- Киев, 1982.- С.22-24.

86. Мартма О.В. Современное состояние проблемы атипичных микобактерий в ветеринарии //Ветеринария.- № 5.- 1982.- С.22-24

87. Мартма О.В., Тяхнас К.К. О системе ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота в Эстонской ССР// Совр. проблемы профилактики и лечения зоонозных заболеваний и лейкозов.- Минск, 1982.- С.87-88.

88. Мартма О.В., Тяхнас К.К. Парааллергические реакции на туберкулин и их дифференциация// Ветеринария.- № 6.- 1986.- С.35-38.

89. Маслов Е.Б., Бойко A.A., Хорьков И.А. Оптимизация непрямого иммуноферментного анализа для выявления антител к М. bovis // Ветеринария. -1986.- № 10.- С.64-68.

90. Матвеев В.Н. Опыт вакцинации крупного рогатого скота по Кальметту// Пробл. туберкулёза.- 1938.- № 1.- С. 24-36.

91. Методические основы лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота// Ветеринария. № 12.- 1987.- С.62-64

92. Выяснение причин туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах: Метод, рекомендации/ ИЭВСиДВ; Сост. А. С . Донченко и др.-Новосибирск, 1987.- 12с.

93. Лабораторная диагностика туберкулеза: Метод, рекомендации/ ВНИИБТЖ; Сост. Хайкин Б.Я., Колычев М.М. и др.- Омск, 1988.- 25с.

94. Выделение L-форм микобактерий туберкулеза из патологического материала животных: Метод, рекомендации/ ЛВИ; Сост. Урбан В.П., КеримжановаБ.Ф.-Л., 1989.-14с.

95. Метод, рекомендации по проведению лабораторных исследований при туберкулезе животных / ВИЭВ; Сост. Н. П. Овдиенко и др.- М., 1992.-18с.

96. Морфологические, биохимические и другие свойства M.fortuitum, выделенных от крупного рогатого скота/ Донченко A.C., Дорожанский П.А., Лисиченко Г.М., Сыртланов P.M.// Инфекц. и паразитар. болезни с.-х. животных.-Новосибирск, 1981.- С. 13-16.

97. Мусаева М.В., Калинина O.A., Медведева И.М., Черноусова Л.Н. Анализ специфичности гипериммунизированных антисывороток к различным штаммам микобактерий методом ИФА // Науч.-техн.бюл. / ВИЭВ.- 1990.- Вып. 73/74.- С. 61-65.

98. Найманов А.Х. Значение дозы, объема и места введения ППД-туберкулина для млекопитающих при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота // Тез. докл.науч.-практ.конф.- Омск, 1980.- С.29-31.

99. Найманов А.Х. Совершенствование аллергической диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота: Автореф. дис. .канд. вет. наук.- М., 1981, 20с.

100. Найманов А.Х., Нуратипов P.A., Дубовой И.С. Применение диагностических тестов в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах // Ветеринария.- 1990.-№ 1.- С.31-33.

101. Нечваль И.Т. и др. Роль различных типов микобактерий при изучении эпизоотической ситуации по туберкулезу // Сб. ветеринария.- Киев, 1974.- Вып. 39.- С. 8-9.

102. Нечваль И.Т., Шеверенко П.С., Свиридов В.Д., Кованда С.И., Ляшенко Н.П., Федорова В.М. Опыт по уточнению диагноза в стадах крупного рогатого скота// Эффективность мероприятий по борьбе с туберкулезом животных.-Киев, 1982.- С.4-10.

103. Новак Д.Д. Пути профилактики и ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. .докт.вет.наук.-Воронеж, 1969.-20с.

104. Новак Д.Д., Барковский В.И., Холодович Г.В. О диагностике туберкулеза и дифференциации туберкулиновых реакций // Ветеринария.-1973.- №4.-С.48-50.

105. Новак Д.Д. Туберкулез сельскохозяйственных животных. Алма-Ата: Кайнар - 1977- 184с.

106. Новак Д.Д. Туберкулез крупного рогатого скота.- Алма-Ата: Кайнар, 1984.-158с.

107. Новак Д.Д., Сухомбаева Б.П. Механизм и критерии оценки поствакционального иммунитета при туберкулезе животных// Проблемы вет. иммунологии.- М.: Агропромиздат, 1985.- С.83-86.

108. Новак Д.Д.К вопросу о первичной диагностике туберкулеза в стадах крупного рогатого скота// Тез. докл.науч.-практ.конф,- Новосибирск, 1995.%^ С. 18-20.

109. Объедков Г. А. Механизм иммунного ответа при экспериментальном туберкулезе животных// Ветеринария.- 1983.- №12.- С.24-25.

110. Объедков Г.А., Сюсюкин В.А., Карлова Г.А. Механизм иммунного ответа при экспериментальном туберкулезе животных// Ветеринария.- 1983.- №12.-С.24-25.

111. Овдиенко Н.П., Козин А.И. Дифференциация неспецифических реакций на туберкулин млекопитающих у крупного рогатого скота// Тез. докл.науч.конф.-Омск, 1980.-С.14.

112. Овдиенко Н.П., Найманов А.Х. Сравнительное изучение диагностической ценности ППД- и альттуберкулина для млекопитающих: Сб.науч.тр.// ВИЭВ.-1983.- Т.50.- С.10-15.

113. Овдиенко Н.П., Найманов А.Х. Изучение динамики аллергических реакций на внутрикожное введение туберкулина для млекопитающих// Науч.-техн. Бюл./ ВИЭВ им. Я.Р. Коваленко.- М., 1983.- Вып. 51.- С.42-46.

114. Овдиенко Н.П., Горбатов В.А., Гуткин B.C., Востриков А.П., Косенко В.И., Цапко P.A. Противотуберкулезная резистентность, индуцированная микобактериями БЦЖ и фракцией их оболочек: Сб.науч.тр. // ВИЭВ .- 1984.-Т.61.-С.41-44.

115. Овдиенко Н.П., Щуревский В.Е., Найманов А.Х., Якушева О.В. Аллергическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота // Пути ликвидации инфекционных и инвазионных болезней сельскохозяйственных животных. Новосибирск, 1985.-С.12-13.

116. Овдиенко Н.П. Профилактика и ликвидация туберкулеза крупного рогатого скота// Ветеринария.- 1986.- №9.- С. 15-20.

117. Овдиенко Н.П., Щуревский В.Е., Найманов А.Х., Якушева О.В. О кратности введения туберкулина крупному рогатому скоту// Ветеринария. -1987.- №8.- С.29-33.

118. Овдиенко Н.П. Эпизоотопия туберкулеза крупного рогатого скота за рубежом: Обзор иност. лит-ры // Ветеринария.- 1989.- №8.- С.65-69.

119. Овдиенко Н.П, Ведерников В.А., Найманов А.Х. Мировое распространение туберкулеза крупного рогатого скота и основные принципы профилактических и противоэпизоотических мероприятий// Науч.-техн. бюл./ ВИЭВ,-1990.- Вып.73/74.- С.3-23.

120. Овдиенко Н.П., Косенко В.И., Найманов А.Х;, Кадочкин A.M. и др. Видовая принадлежность микобактерий, выделяемых от крупного рогатого скота и из объектов внешней среды//Пробл. туберкулёза.- 1990.- №2.- С.46-48.

121. Поддубский И.В. Вопросы борьбы и диагностики туберкулеза крупного рогатого скота и птицы// Ветеринария.- 1962.- №5.- С.45-50.

122. Поддубский И.В. Современное состояние ветеринарной науки и практики по борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота и птицы// Пробл. борьбы с туберкулезом и паратуберкулезом с.-х. животных.- Воронеж, 1965.- С. 14-29.

123. Профилактика и меры борьбы с бруцеллезом и туберкулезом сельскохозяйственных животных. Указ.отеч.лит-ры за 1989-1993 гг. 311 названий; иностр.- за 1989-1992 гг.-117 названий; М„ 1994, 54С. ЦНСХБ Рос. акад. с.-х. наук.

124. Романова Р.Ю., Павлова В.П. Иммунологическое значение фракций микобактерий, полученных с помощью ультрацентрифугирования// Основные направления повышения борьбы с туберкулезом.- М.: Медицина, 1975.1. С. 318-325.

125. Ротов В.П., Кокуричев П.И., Савченко П.Е. Туберкулез сельскохозяйственных животных.- Киев: Урожай.- 1973.- 384с.

126. Ротов В.П., Кокуричев ГШ., Шаров А.Н., Щуревский В.Е., Борзяк А.Т. Туберкулез крупного рогатого скота // Туберкулез животных и меры борьбы с ним.- Киев, 1990.- С. 189-220.

127. Румачик И.И. Методические основы лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота// Ветеринария.- 1987.- №12.- С.62-64.

128. Румачик И.И. Ускоренная дифференциация туберкулиновых реакций у скота//Тез. докл.науч.-практ.конф.- Новосибирск, 1995.-С.45-46.

129. Сафин М.А. Совершенствование диагностики, профилактики и мер ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф. дис. докт.вет.наук.- Казань, 1981.- 31с.

130. Сафин М.А. Вакцинация БЦЖ и противотуберкулезные мероприятия// Ветеринария.-1982.- №11.- С.39-40.

131. Сафин М.А. Состояние и перспективы научных исследований по специфической профилактике туберкулеза крупного рогатого скота: Сб.науч.тр. / Казанский Гос.вет.ин-т.- 1985,- С.17-19.

132. Сафин М.А. Состояние и перспективы научных исследований по специфической профилактике туберкулеза крупного рогатого скота// Ветеринария. -1984. №3.- С.26-30.

133. Сафин М.А., Харитонов Н.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных (диагностика, профилактика и меры борьбы). Учебн.пособие.// Казан.вет.ин-т им.М.Э.Баумана.- Казань, 1990.- 56с.

134. Сафин М.А., Идрисов Т.З. Современные методы диагностики и меры борьбы с туберкулезом животных.- Казань, 1992.- 168с.

135. Сафонова С.Г., Голышевская В.И., Мурзаахметова З.С., Искакова А.Ш. Совершенствование микробной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота//Науч.-техн.бюл./ ВИЭВ.- 1990.-Вып. 73/74.- С.45-48.

136. Сахно В.М. Иммуногенез и выраженность аллергических реакций при туберкулезе// Вестник ветеринарии.- 1998,- №8(2).-С. 11.

137. Субботина С.Г. Совершенствование экспрессной бактериологической диагностики туберкулеза: Метод.рекомендации / Воронеж.аграр.унив-т,-Воронеж, 1993.- 13с.

138. Сысоев В.Н. Патологоанатомическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота// Хронич.инфекции животных.- Новосибирск, 1983.- С. 17-19.

139. Ткачев-Кузьмин А.В. Роль отдельных видов атипичных микобактерий в сенсибилизации крупного рогатого скота к туберкулину// Науч.-техн.бюл./ ВИЭВ.-М., 1981,- Вып. 43.- С.29-31.

140. Ткачев-Кузьмин А.В. Комплекс методов при обследовании хозяйств условно благополучных по туберкулезу крупного рогатого скота// Науч.-техн.бюл./ВИЭВ.-М., 1981.-Вып. 43.- С.27-29.

141. ТузоваР.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц.- Минск: Урожай, 1983.-262с.

142. Урбан В.П., Широбокова М.М., Данко Ю.Ю. Эпизоотическая вспышка туберкулеза крупного рогатого скота// Инфекционные и паразитарные болезни сельскохозяйственных животных.- Л., 1981.- С. 131-135.

143. Урбан В.П. К диагностике туберкулеза // Тез.докл.науч.-произв.конф.-Новосибирск, 1995.- С.8-10.

144. Федосеев B.C., Рубцова И.Н. Значение измененных форм возбудителя в диагностике туберкулеза (у животных) // Науч.-техн.бюл./ ВАСХНИЛ. Сиб.отд-ние. ИЭВСиДВ.- 1985.-Вып.32.- С.22-27.

145. Федосеев B.C., Рубцова И.Н., Байгазанов А.И. Роль скота и птицы личных подсобных хозяйств в эпизоотологии и эпидемиологии туберкулеза//

146. Организация противотуберкулезных мероприятий. Тез. докладов / МЗ РСФСР. -ВАСХНИЛ Сиб.отд-ние.- Новосибирск, 1987.- С. 17.

147. Фримель Г. Иммуноферментный анализ// Иммунологические методы.- М.: Медицина, 1987,- С.89-96.

148. Хазипов Н.З., Сафин М.А., Идрисов Г.З. Туберкулез крупного рогатого скота.-М.: Агропромиздат, 1985.- 128с.

149. Хазипов Н.З., Тюрикова Р.П., Нуруллин A.A. Метод твердофазного иммуноферментного анализа для выявления туберкулезных микобактерий в суспензиях // Диагностика, профилактика и методы борьбы с туберкулезом с.-х. животных.- Казань, 1985.- С.29-32.

150. Хайкин Б.Я. Иммунохимические и морфологические реакции у телят, иммунизированных вакциной БЦЖ // Ветеринария,- 1983.- №12.- С.25-27.

151. Хамзин P.A. Иммуноферментный анализ и совершенствование специфической профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: Автореф.дис. .канд.вет.наук.-Казань, 1988.- 16с.

152. Харитонов М.В. О дифференциации неспецифических реакций на туберкулин от специфических // Ветеринария.-1983.- №1.- С.30-31.

153. Ходун Л.М. Проблема серологической диагностики туберкулеза // Профилактика и диагностика болезней животных. Новосибирск, 1983,-С.119-121.

154. Ходун Л.М., Курдюк В.П. О сезонной зависимости аллергических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота // Ветеринария,- 1987.- №12,- С.38-39.

155. Ходун Л.М. Современные проблемы научных исследований диагностики туберкулеза крупного рогатого скота// Методы диагностики и профилактикибруцеллеза и туберкулеза животных: Сб.научн.тр./ ВАСХНИЛ. ВНИИБТЖ,-Омск, 1988.- С.89-94.

156. Ходун Л.М., Цунская Н.И. Метод ИФА для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота// Туберкулез с.-х. животных.- Омск, 1989.1. С.31-34.

157. Ходун Л.М., Погуляева Л.В., Ильиных Л.А. Выделение атипичных микобактерий от не реагирующих на туберкулин животных // Ветеринария. -1990.- №6.- С.29-30.

158. Ходун Л.М., Цунская Н.И. Тест-система ELISA для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота и критерии оценки результатов метода // Разработка средств и методов борьбы с туберкулезом животных,- Новосибирск, 1990.-С.18.

159. Ходун Л.М., Овсянов М.Н., Погуляева Л.В. и др. Диагностика туберкулеза при массовых туберкулиновых реакциях у крупного рогатого скота // Ветеринария,-1991.-№11.-С.23-25.

160. Шаров А.Н. Парааллергические реакции на туберкулин у крупного рогатого скота: Сб.науч.тр. /ВГНКИ.- 1969.- Т. 16.- С. 159-166.

161. Шаров А.Н. К вопросу дифференциации специфических и парааллергических реакций на туберкулин: Автореф.дис. . канд.вет.наук.- М., 1970.- 19с.

162. Шаров А.Н., Шевырев Н.С., Гринев А.А., Плотников Э.С. Препараты, применяемые для диагностики туберкулеза животных // Ветеринария.- 1978.-№10.- С.40-50.

163. Шаров А.Н. К вопросу аллергической диагностики туберкулеза // Тез.докл.научн.конф.- Омск, 1980.- С. 15.

164. Шаров А.Н., Плотников Э.С. Комплексный аллерген из клеточных микобактерий // Ветеринария.- 1980.- №5.- С.41-43.

165. Шаров А.Н. К вопросу диагностики туберкулеза // Ветеринария.- 1982.-№9.-С. 16-17.

166. Шаров А.Н., Тырина B.C., Алехин В.А., Брезгин В.М. Качество туберкулина из одного штамма M.bovis // Ветеринария.- 1984.- №10.- С.24-25.

167. Шаров А.Н. Использование аллергии для определения степени антигенного различия микобактерий // Пробл.вет.иммунологии.- М.: Агропромиздат,1985.- С.78-81.

168. Шаров А.Н. Аллергическая диагностика туберкулеза у животных: повышение ее эффективности: Автореф.дис. докт.вет. наук.- М., 1989.- 37с.

169. Шаров А.Н., Лукава М.А., Лакман Э.Д. Антигены для реакции агглютинации при диагностике туберкулеза // Ветеринария.- 1996.- №1.-С.15-17.

170. Шаров А.Н., Седов В. А. Тест системы ПЦР при туберкулезе крупного рогатого скота // Ветеринария.- 1998.- №3.- С.20-22.

171. Шаров А.Н., Ерошенко Л.А., Суханов И.П., Канонов С.Л., Гребенникова Т.В., Грабовецкий В.В. Эффективность методов прижизненной диагностики туберкулеза // Ветеринария.- 2000.- №2.- С. 14-16.

172. Шлыгин И.В., Лакман Э.Д. Анергия у крупного рогатого скота при туберкулезе: Сб.науч.тр./ Омский вет.ин-т.- 1978.- Вып.З.- С.69-73.

173. Шляхов Э.П. Иммунология, иммунодиагностика, иммунопрофилактика инфекционных болезней.- Кишинев, 1977 421с.

174. Щуревский В.Е., Овдиенко Н.П., Кадочкин A.M. Атипичные микобактерии и их патогенность для сельскохозяйственных животных // Ветеринария.-1983.-№6.- С.32-35.

175. Щуревский В.Е. Значение неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота // Тез.докл.респ.науч.-произ.конф.- Одесса.- 1984.- 14с.

176. Юсковец М.К. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц.-Минск, 1963.-С. 159-160, 165-166, 187.

177. Юдин Г.А., Придниекс O.K., Юдин Н.Ф., Муцеюк Н.Ф. Эпизоотическое значение некоторых микобактерий в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота: Сб.науч.тр./ВИЭВ.- 1972.- Т.40.- С. 328-384.

178. Юдин Г. А. Парааллергические туберкулиновые реакции, обусловленные авирулентными микобактериями // Науч.-техн.бюл./ ВАСХНИЛ. Сиб.отд-ние.-Новосибирск, 1976.- №3,- С.3-6.

179. Юдин Г. А. Паратуберкулиновые реакции вследствие сенсибилизации крупного рогатого скота птичеподобными микобактериями: Сб.науч.тр./ Новосибирский институт биологии.- Новосибирск, 1977.- Вып.7.- С.20-21.

180. Юдин Г.А. О псевдоаллергических реакциях на туберкулин // Ветеринария.- 1983.-№10.-С.66-68.

181. Юдин Г. А. Причины, распространение, дифференциация и профилактика неспецифических реакций на туберкулин // Ветеринария.- 1987.- №12.- С.29-32.

182. Юдин Г. А. Совершенствование диагностики туберкулеза животных // Ветеринария.- 1990.- №6.- С.27-29.

183. Яблокова Т.Б., Кожевникова Т.П., Леви Д.Т. Иммуногенные и аллергенные антигены микобактерий // Микробиология.- 1970.- №2,- С.8-12.

184. Яблокова Т.Б. Характеристика препаратов для диагностики туберкулеза и микобактериозов //Пробл. туберкулёза.- 1972.- №4.- С.72-74.

185. Яблокова Т.Б., Розенбер A.M., Писаренко Н.П. Характеристика качества советской вакцины БЦЖ // Пробл.туберкулёза.- 1973,- №3.- С.69-72.

186. Яблокова Т.Б. Противотуберкулезная вакцинация // Иммунология и иммунопатология туберкулеза.- М.: Медицина, 1976.- С.249-270.

187. Якупов Г.Р. ИФА о диагностике туберкулеза крупного рогатого скота : Автореф.дис. .канд.вет.наук.-Казан.вет.ин-тим.Н.Э. Баумана.-Казань, 1991.-17с.

188. Ярбаев Н.Я. Индикация микобактерий туберкулеза в объектах внешней среды // Метод и средства борьбы с инфекционными болезнями животных.-Душанбе, 1984.-С.14-18.

189. Ярных B.C., Медведева И.М., Мальков И.Г., Черноусова JI.H. // Ветеринария, №5, С.59-61.

190. Arnasson В., Naksman В. Tuberculin sensitivity, immunological cousiderations //Awanc. Tubec. Res.- 1964.- 13h.- Vol.4.- № 39.- P. 123.

191. Audrews L. The control of bovine tuberculosis with special reference to Australia //Bull.Inst.Umon against Tubero.- 1982,- V.57.- N1,- P.31-33.

192. Barrow P. A., Gallagher I. Aspects of the epidemiology of bovine tuberculosis in badgers in two wild animal population in South-West England.// I.Hyg.-1981.-V.86.-N3.-P.237-245.

193. Beveridge W.I. Microbacterial diseases// Animal Health in Australia/- 1983.-V.4.-P.155-163.

194. Bhuyan U.N., Ramaligaswami V. Immune responses of the proteindificient guihea piq to BCG vaccination // Am. I. Path.- 1973.- V.72.- P.489-502.

195. Chaparas S.D. and Maloney C.I. American. Review of Respiratory Disease.-V.117.-1978- P.897-902.

196. Chatteijee D., Bozic C.M., Knisley C., Cho S.-N., Brennan P.I. Phenolic glycolipids of Mycobacterium bovis: new structures and syntesis of a corresponding seroreactive neoglicoprotein // Infec. And Immum.- 1989.- V.57.- N2.- P.322-330.

197. Chapparas S., Mallomu G., Medrik S. Specificity of tuberculins and antigens from variour species of Mycobacteria//Amer.Rew.resp.Dis.- 1970.- V.1011. P.74-83.

198. Cohen C., Ward I. Mechanisms of immunopathology. //Medical Reblication.-N. V.Toronto, 1983.-398p.

199. Collins F., Mackanes G. The relationship of delaget hypersensitivity to acguired antuberculosis immunity. Effect of tubercle bacilli.M.// Immunol.- 1970.- P.253-275.

200. Collins C.H. Revisedclassification of anonymous mycobacteria // J.clin.Path.-1966.- V. 19.- P.433-437.

201. Collins C.H., Graude I.M. The bovine tubercle bacillns/ J. Appl. Bacteriol.-1983.- V.55.-N1.-P.13-29.

202. Collins C.H. et al. //Cambrige: Butterworths, 1985.-P.21.

203. Costelnuvo C., Morellini M. The antigens of Mycobacteria and their identification by immunoclectrophoretic analysis// Amer.Rev.resp. Dis.- 1975.-V.92.- P.29-35.

204. Crowie A.I. The role of immunologic toberance in immunologic response // Ann. Allergy.-1966.- Vol.24.- № 6.- P. 195-214.

205. Daniel T.M., De Murillo G.L., Sanyer I.A., Griffen A.Mc. L., Pinto E., Debaune S.M., Espinosa P., Cespidis E.// American Review of Respivatory Disease.- 1986.-V.134.-P.662-665.

206. Daniel T.M. Observations in the antibodyrespouse of rabbits to mycobacterial antigens // J. Immunol.- 1965.-V.95.- P. 100-108.

207. Daniel T.M., Debaune S.M. // An. Rev. Resp.Dis.- 1987.- Vol. 135.- P.99-113.

208. Daniel T.M., Van Der-Knyp F., Anderson P. Spesificiti of tuberculins and antigens from various species of mycobacteria // Amer. Rev. Resp. Dis.-1981.-Vol. 123.-P. 517-520.

209. David J.R. Macrophage activations induced by lymphocyte mediators // Acta Endocrinol.- 1975.-Vol. 78.-P. 245-261.

210. Dick G. Immunological aspects of infection diseases I I London, Medical Publishers.- 1979.-P.575.

211. Donald B. Occlurrence of mycobacteria in normal lymphodes I I Amer. Vet. Jornal.- 1983.- Vol. 60.- P. 256-257.

212. Dorobantu R. Demers pentru o intelegere corecta a compaterii tuberculozei bovene//Med. Veter. Cresterea anim.-1994.-№1.-P. 16-17.

213. Dott R. Estimation of the sensitivity, specifity and predictivi value et the intradermal tuberculin test // Drish. Veter.- 1978.- Vol. 32.- № 5.- P. 81-89.

214. Feldman H. Types of tubercl bacilli in lesions et garbage fedswine // J.A.V.M.A.-1963.- Vol.92.- P.687.

215. Feldman H. Cell interactions in the immune response in vitro . V. Specific collaborations via complexes of antigen and thymus derived T-cell immunoglobulin // J. Exp. Med.-1972,- Vol. 136.- P.737-760.

216. Fodstad F. Tuberculin reactions in bulls and boars sensytized with atipical mycobacteria from Sawdust//Acta. Vet. Scaund.- 1977.- Vol.18.- P.374-383.

217. Galanos C., Luderitz E.T. Rietschel and O.Westphal Newer aspects of the chemistry and biology of bacterial lipopolysaccharides, with special reference to their Lipid A component // Inter. Rev. Bio. of Lip. II.- 1977.- Vol.14.- P.239-334.

218. Gorsky A. Superiority of corpusculare BCG to soluble PPG antigen in the lencocute migration assay // Clin.Exp. Immunol.- 1974.- Vol.18.- P. 149-154.

219. Granger G., Jamamoto K., Ribi E. Delayed hypersensivity and granulomations response after immunisations with a mycobacterial glucolipid and oil droplets // J. Immunol.- 1976.- Vol. 116.- P.482-485.

220. Green M., Meidgen P. Demonstration of the phenomenon of microbial persistence of bacterial L-forms // Infect. Immun.- 1974.- Vol.4.- P.889.

221. Gunning R.F. Bovine tuberculosis in roe deer // Vet.Rec.- 1985.- Vol. 16.- №11.-P.300-301.

222. Hanna J., Neilo S.D., O'Brien J.J. Use of PPD nud phosphatide antigens in an ELISA to detect the serological response in experimental bovine tuberculosis // Research Veterinary Science.- 1989.- Vol.47.- P.43-47.

223. Hosckmeyer W.T., Reich M. Futher characterization of M.bovis toxin // Infect, and Immunol.- 1988.-Vol.21-l.-P.124-128.

224. Hutchigs D.L., Wilson S.H. Evalution of Lypocyte Stimulation test for diagnosis of bovine tuberculosis in elkocervus elaphus //Am. J. veter. Res.-1995.- Vol.56.-№1.-P.27-33.

225. Kalbe P., Schöener W. Problematik parallergischer Tuberculinreactione in einer Industriegebit producireden. Anlage der Jungrinderautrucht // Monathefte für Veterinär. Medicin.- 1972.-H.13.-P.486-492.

226. Kollins G.V., Thoen C.O., Fowler M.E. Evaluation of comparative cervical tuberculin Skin testing in gervids naturally exposed to micobacteria // Am. Med. Assoc.- 1982.- Vol.181.-N 11.-P. 1257-1262.

227. Krambovitis E. // Serodiagnosis and Immunotherapy.- 1987.- Vol.1.

228. Kubin N.,Wisingerova E. Antigenic characteristics of avian and intracellular micobacterial antigens //Amer. Rev. resp. Dis.- 1965.- Vol.92.- P.54-82.

229. Kutze F., Taceda S., Maekano N. Sensitivities of atypical mycobacterium to various durgs // Kekkan.- 1974.- Vol.42.- P.151-156.

230. Lean R., Bonnet M., Dossa D. Le cycle initial de L'infection tubervuleuse // J.Med. Montpellier.-1971.- Vol.6.- P.53-65.

231. Lesslie I. Tuberculosis in affected herds caused by the human type tubercle bacillus // The Veterinary Record.- 1963. -Vol.72.- P.213.

232. Lightbody K.A., Skuct R.A., Neill S.D., Pollock J.M. Mycobacterial antigen-specific antibody responses in bovine tuberculosis // Veter. Rev.- 1998.- Vol. 142.-№2.-P. 295-300.

233. Lind A. Immunological analysis of mycobacterial antigens // Amer. Rev. Resp. Dis.- 1965.-Vol.92.-P.54-62.

234. Long E., Seibert E.,Aronson J. A standardized tuberculin (purified protein derivative) for uniformity in diagnosis and epidemiologiy // Tuber.- 1935.-P.304-332.

235. Mathiassen T. Die Bekämpfung und Anstoftung der Rine der tbk in Dänemark // Aarhus.- 1952.-316p.

236. Mattman L.M. Cell wall-defficient from of mycobacteria // Am. N.-Y. Acad. Sei.- 1970.- Vol. 174.- P.852-862.

237. Middlebrooke D., Dubos R., Pierce C. The effect of water soluble Lipids on the growth and biological properties of tubercle bacilli // J. Exp. Med.- 1947.- P. 175.

238. Meyers D., Stelle D. Tuberculosis eradication veterinarians Lead the way // Sixty-first Annual Proceedings.- U.S., 1966.- P.207.

239. Myara I.A., Briggs I.F. Tuberculosis Amisundersteal disease // Munch. Med.-1971.-Vol.54.-P.605-607.

240. Nathan C.F., Karnoisky M.L., David J.R. Interactions of macrophage functions by mediators from Lymphocytes // J. exp. Med.-1971.- Vol. 133.- P. 1356-1376.

241. Ouchterlony O. Antigen-antibody reactions in gels // Acta pathol. Microbiol. Scandinav.- 1949.- N 26.- P.507.

242. Oellerich // Clin. Chem. and Clin. Biochem.- 1984.- Vol.22.- P. 12.

243. Paviss M., Patiokova V. Occurrence of mycobacterium in saundus, straw, hay and episootelegical significance // Acta. Veter. Brno.- 1985.- Vol.54.- N 1-2.- P.85-90.

244. Peterson A. The tuberculin test in tuberculosis free cattle // Proc. R. Soc. Med.-1957.-Vol.50.-P.253-256.

245. Plackett P., Ripper J., Corner L.A. et. al. An ELISA for the detection of anergic tuberculosis cattle // Austral. Vet.J.- 1989.- Vol.66.- N 1.- P. 15-19.

246. Popluhar L.K. Diferencialnej diagnostike tuberculouze u hovadciego do butca // Veterinarstvi.- 1973.- P. 459-460.

247. Radin, Zeiss, Phair. // Inf. Arch. Allergy Appl. Immunol.- 1983,- Vol.70.- P.70.

248. Ramirez Casillas C., Valero Elizendo G., Arriage Diaz C. Comparacion del ELISA con la tuberculinizacion en el diägnostico de la tuberculosis bovina // Teen, pec. en Mexico.- 1995.-Vol.33.-N3.-P. 148-158.

249. Reggiardo Z. and Middlebrook G. // Adv. Tuberc. Res.- 1975.- Vol. 100,-P. 469-476.

250. Ritacco V., Lopez B., Barrera L. et. al. Further evaluation of an indirect enzyme- linked immunosorbent assay for the diagnosis of bovine tuberculosis // J. vet. Med.- Set. B.- 1990.- Vol. 37.- N 1.- P.19-27.

251. RunionE.M. Pathologenetic mycobacteria //Adv. Tubercul. Res.- Vol. 14.-P.235-237.

252. Saifelder F., Sohlister T., Jungbluth H. Folgerungen ans dem derseitigen Vorkommen von Micobucterion bovis bei Menseh und Tier // Fortschr. Der Veterinärmedizin Beihefte zum ztntialbl Veterinärmedizin.- 1983.- Vol.37.- P.141-145.

253. Saunders G.C., Climard E. M., Bartled, Sauders W. Application of the indirect enzyme-labeled antibody microtest to the defection and surveillance et animal diseases // J. Infect Dis.- 1977.- Vol. 136.- №4.- P.258-266.

254. Silva E., Gonzales N., Regelado L., Alfonso M.J., Barcenas J., Menendez J. Espesificidad del ELISA para el diagnostice serologico de la tuberculosis bovina en ereas Libres//Rev. Salud. Anim.- 1997.-Vol.19.-N 1.-P.9-13.

255. Silcex V.A., Good R.C., Floyd M.M. Identification of clinically significant Mycobacterium Fortuitum Complex isolates // J. Clin. Microbiol.- 1982.- Vol. 14.-N 6.- P.686-691.

256. Stanford I., Grange I. The meaning and structure of species as Applied to Mycobacteria //Tuberkle.- 1974.-Vol.55.-P. 143-152.

257. Steele T., Ronney A. Animal Tuberculosis // Amer. Rev. TBC.- 1958.- N 77.-P.908-922.

258. Switzky D. Procedures not pegs suffer from tuberculosis // National Hog. Farmer.- 1983.- Vol.28.- N 5.- P.73.

259. Rico: a Laboratory Summary //Am. Vet. Res.- 1979.- Vol.40.- P. 118-120.

260. Thuen C.O.Steele J.H. Mycobacterium bovis infection in animals and humans // Jowa State univ. press.- 1995.- Vol.XXVII.- P. 335.

261. Tsucamura M., Toyama M. Studies on the cretin and clinical significance of smear- positive and culture-negative tubercle pacilli // Kekkaky.- 1984.- Vol.50.-N 8.-P.451-459.

262. TsukamuraM. Source and infective Rout to mycobacteria //Kekkaky.- 1987.-Vol.75.- N12.- P.87-101.

263. Voncec G., Veitia F., Remon S., Delgado L. Mickbacterius aistlandas de bo vinos gue reactionarona Laspruedas tuberculicac // Rev. Tub. Ciens. Veter.-1983.- Vol.l4(3).- P.173-178.

264. Watter A. Grundlagen der Diagnostic der Tuberculose // In Bd. Allgemeine Grundlagen der Tuberculosebekämpiung.- 1956.-P.87-88.

265. Weiszfieler J.G., Karaseva V. Mixed mucobacterial infertions // Rev. Infect. Dis.-1981.- Vol.3.- N 5.- P.1081-1083.

266. Willsmit S.W., Onada T. Tuberculosis in animals // Vet. Record.- 1984.-Vol.134.-N 10,-P.317-324.

267. Wolinsky E., Rynerson T. Mycobacterium in Soil and their relation to disease associated strains //Am. Rev. Resp. Dis.- 1968.- P. 1032-1034.

268. Zeiss C.R., Radin R.C., Williams I.E. et. al. Detection of immunoglobulin G antibody to purified protein derivative with tuberculosis by RIA and ELISA // Clin. Microbiol.- 1982,- Vol.15.- N 1.- P.93-96.

269. Присутствовали: Донченко A.C.,д.в.н.,профессор, чл. -корр,;

270. В обсуждении приняли участие: Чекишев З.М.Димов С.К.Хлыстунов А.Г.Прудников С.И.Смирнов П.Н.,Шкиль H.A.Донченко В.Н.Смолянинов Ю. И.,Самоловов A.A.

271. Г— <-r Г". T*T.TTTT-»,TJ ГТ/Г-» Г-Г"! trr * ТГТ.ГГ/

272. VÍC, i ицл^иКУШ г сКимсгш^щпЙ.у!ммунофэрментныи анализ сыворотки крови крупного рогатого скота для выявления инфицированных микобактериями туберкулеза животных.

273. Проведение непрямого варианта ИФА на твердой фазе. 2.1. Оборудование и реактивы

274. Специфический' иммунопероксидазный конъюгат;

275. Отрицательный контроль(сыворотка из благополучного хозяйства HC0);

276. Положительный контроль (контроль 31 и 39 Курской биофабрики);4. 95-луночный иммунологический.планшет отечественного производства (Красноярский к/к );

277. Блокирующий молочный буфер,-рН-8,5;

278. Карбонатный буфер для сорбции(pH-12); 7. Отмывающий бикарбонатный буфер с твином-20; 3. Цитратно-фосфатный буфер для разведения 0ФД;9. Ортофе'нилендиамин (0ФД);

279. Дозаторы полуавтоматические на 100,50,10,5 мкл; 2.2. Буферные растворы и реактивы1M МаКСОЗ с 0,05%-м тзин-20 (8,4 г МаНСОЗ на 1QQG мл Н20 + 50 мкл твин-20 );

280. Конпентрат красителя (50 мг ОФД + 600 мкл 40% этанола + 900 мкл диет, воды + 100 мкл уксусной кислоты );

281. Подготовка материала к исследованию.

282. Каждую пробу сыворотки разводят 1:50 10% раствором МаСХ.Для исследования берут 10 мкл указанного разведения на каждую лунку иммунологического планшета.Контрольные сыворотки готовят к работе по этой же схеме.

283. Приготовление субстратной смеси.

284. Приготовление блокирующего молочного буфера ,рН-3,6.

285. Приготовление рабочего разведения конъвгата.

286. Проведение иммуноферментного .анализа СИФА)

287. Визуальная оценка результатов.

288. При визуальной оценке результатов ИФА положительными считают пробы.которые имеют более выраженное желто-коричневое окрашивание.чем окраска в лунке с отрицательным -контролем.

289. Инструментальная регистрация результатов.

290. Измеряют оптическую плотность в каждой лунке спектрофо-тометрически при 490 нм на приборах,преднааанченных для фотометрии иммунологических планшетов.

291. Ноль прибора устанавливают по лунке AI.

292. Тест-система считается пригодной для анализа,если оптическая плотность в лунке с отрицательным контролем (С1) не превышает значение G.l 0Е .а в лунке с положительным контролем (31) превышает значение в лунке с отрицательным контролем (С1) в 2,5 раза.

293. Реакцию считают положительной если оптическая плотность в лунке с исследуемой пробой в 2,5 раза Еыше .чем в лунке с отрицательным контролем (С1).

294. Животных,в пробах от которых получены положительные результаты ИФА,считают инфицированными М.bovis.