Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Майстровский, Кирилл Валерьевич

• Майстровский, Кирилл Валерьевич
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Майстровский, Кирилл Валерьевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о роли иммунных механизмов в развитии

атеросклероза

1.1.1 .Участие врожденного иммунного ответа в атерогенезе

1.1.2. Участие адаптивного иммунного ответа в атерогенезе

1.1.3. Роль цитокинов в атеросклеротическом воспалении

1.2. Значение молекул адгезии в развитии атеросклероза

1.3. Иммунотерапия в комплексном лечении пациентов с ОАСНК

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА II. КОНТИНГЕНТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.. ГЛАВА III. ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО И ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

3.1. Характеристика состояния адаптивного клеточного иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.2. Характеристика состояния адаптивного гуморального иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.3. Характеристика состояния врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.4. Характеристика состояния цитокинового статуса у пациентов с ОАСНК

в зависимости от степени тяжести заболевания

ГЛАВА IV. ЭКСПРЕССИЯ МОЛЕКУЛ АДГЕЗИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

4Л. Уровень растворимых молекул адгезии (sVCAM-1, sICAM-1, sP-selectin, sE-selectin) в сыворотке крови у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

ГЛАВА V. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМНОЙ ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ РЕАКЦИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОБЛИТЕРИРУЮЩИМ АТЕРОСКЛЕРОЗОМ СОСУДОВ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ 1. 5.1. Использование плазменных уровней цитокинов для характеристики хронического системного воспаления с помощью интегральных критериев

у пациентов с ОАСНК

ГЛАВА VI. ИММУНО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ БУРОЙ ВОДОРОСЛИ В КОМПЛЕКСЕ С БАЗИСНОЙ ТЕРАПИЕЙ У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

6.1. Влияние Фуколама на показатели иммунного статуса у пациентов с ОАСНК

6.2. Влияние Фуколама на показатели цитокинового статуса у пациентов с ОАСНК

6.3. Влияние Фуколама на уровень растворимых молекул адгезии у пациентов с ОАСНК

6.4. Влияние Фуколама на состояние системы гемостаза и липидный обмен у пациентов с ОАСНК

6.5. Оценка эффективности терапии пациентов с ОАСНК с помощью

интегральных критериев

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И

ПРАКТИКУ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АПФ - ангиотензин- превращающий фермент

АПТВ - активированное парциальное тромбопластиновое время

АФК - активные формы кислорода

БАД - биологически активная добавка к пище

ГБ - гипертоническая болезнь

ГМК - гладкомышечные клетки

дас - диссеминированное внутрисосудистое свёртавание

дк - дендритные клетки

Днк - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИРИ - иммунорегуляторный индекс

КР - коэффициент реактивности

ЛПИ - лодыжечно-плечевой индекс

лик: - лимфоциты периферической крови

лпл - липопротеинлипаза

лпвп - липопротеиды высокой плотности

лпнп - липопротеиды низкой плотности

мЛПНП - модифицированные липопротеиды низкой плотности

ЛХАТ - лецитин — холестерол - ацилтрансфераза

лпс - липополисахарид

МДА - малондиальдегид

МКБ - международная классификация болезней

нет - нитросиний тетразолий

Нф - нейтрофилы

ОАСНК - облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей

охс - общий холестерин

РНК - рибонуклеиновая кислота

СВР - системная воспалительная реакция

ТВ - тромбиновое время

тг - триглицериды

УР - уровень реактивности

ФГ - фибриноген

ФП - фагоцитарный показатель

ФЧ - фагоцитарное число

ХрСВ - хроническое системное воспаление

CD - cell differentiation antigen или claster definition - антигены

кластеров дифференцировки клеток

C-FOS - ядерный транскрипционный фактор

С- Jun - ядерный транскрипционный фактор

CLR - лектиновые рецепторы С-типа

EGFR - рецепторы эпидермального фактора роста

ERK MARK - митогенактивирующая протеинкиназа

Fas/APO-1 - мембранный белок суперсемейства рецепторов TNF

HLA - human leukocyte antigens - антигены лейкоцитов человека

IFN - interferon - интерферон

IL - interleukin- интерлейкин

Ig - immunoglobulin - иммуноглобулин

INOS - индуцибельная NO- синтаза

LFA - лимфоцитарный функциональный антиген

MCP - моноритарный хемотаксический фактор

МНС - главный комплекс гйстосбвмёстймости

NF -kß - ядерный фактор транскрипции

NK - normal killer - нормальные киллеры

NKT - Т-лимфоциты с функцией натуральных киллерных клеток

N0 - оксид азота

РАМР - pathogen - associated molecular patters- патоген-ассоциирован-

ные молекулярные структуры

PPAR - паттерн-распознающие рецепторы

TCR -T-cell receptor - рецептор Т-лимфоцитов

TGF - трансформирующий фактор роста

TLR - Toll like receptors - ТоП-подобные рецепторы

Thl,2 - T-helper-1, 2- субпопуляции CD4+Т-лимфоцитов (хелперов)

TGF - трансформирующий фактор роста

TNF - tumor necrosis factor - фактор некроза опухолей

sE-selectin - sE-селектин

sICAM-1 - soluble ntercellular adhesion molecules type 1 - растворимая

молекула межклеточной адгезии 1 типа

sP-selectin - sP-селектин

VEGFR - vascular endothelial growth factor receptor - рецептор к

сосудистому эндотелиальному фактору роста

sVCAM-1 - soluble vascular cell adhesion molecule type 1 - растворимая

молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 - го типа

VLA-4 - very late antigen-4 - гетеродимерный интегриновый рецептор

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей»

ВВЕДЕНИЕ

Сердечно-сосудистые заболевания, вызванные развитием атеросклероза, являются главной причиной смертности в экономически развитых странах и России [21,37,38]. Облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей (ОАСНК) - один из вариантов атеросклероза, при котором поражаются преимущественно крупные артерии. По данным эпидемиологических исследований показатель распространенности окклюзионно-стенотических поражений артерий нижних конечностей среди взрослого населения составляет 2-3% в общей популяции, у пациентов старше 50 лет - более 20% [20]. При этом в действительности ОАСНК страдают гораздо больше людей: субклинические (асимптомные) формы встречаются в 3-4 раза чаще, чем клинические проявления (перемежающаяся хромота) [223]. К 2015 году прогнозируется увеличение смертности от атеросклероза еще на 10% [21].

На сегодняшний день существует много теорий, касающихся трактовки этиологии и патогенеза атеросклероза с позиций морфологии, биохимии, генетики, местных и системных воспалительных реакций, гиперплазии интимы, пролиферации гладкомышечных клеток [2,13,16,36,37,84,240]. Однако ни одна из них, даже самая популярная и аргументированная, не является общепризнанной и окончательно доказанной. Тем не менее, в настоящее время общепризнанно, что ведущим механизмом формирования атеросклеротического поражения сосудов является хроническое иммунное воспаление, на разных стадиях которого происходит активация клеток иммунной системы [19, 38, 150, 152, 153,177, 178].

При определении роли воспаления, лежащего в основе атерогенеза, различают локальное и системное воспаление. Локальное воспаление отражает процессы, происходящие в атеросклеротической бляшке. Системное воспаление проявляется накоплением в крови провоспалительных медиаторов (цитокинов, хемокинов, растворимых рецепторов цитокинов, молекул адгезии и др.), активацией клеточных элементов иммунной

системы, тромбоцитов [10, 32]. Системное воспаление, в отличие от локального, более демонстративно и доступно для исследования в условиях клиники. Доказана, в частности, сопряженность манифестации клинических симптомов атеросклеротической болезни и содержания активированных Т-лимфоцитов, растворимых молекул адгезии и проатерогенных цитокинов при ишемической болезни сердца, инфаркте миокарда, стабильной и нестабильной стенокардии [69, 73, 126, 204]. В то же время у пациентов с ОАСНК проявления системного воспаления изучены недостаточно, а данные о взаимосвязи количественного и функционального состояния циркулирующих Т-лимфоцитов и проатерогенных медиаторов воспаления — цитокинов, хемоадгезивных молекул, молекул адгезии, с тяжестью основного и сопутствующих заболеваний при ОАСНК немногочисленны и противоречивы [1, 7, 8, 31, 109].

Проблематичной остается и оценка степени выраженности воспалительной реакции при этом заболевании [10, 32], несмотря на обилие работ, посвященных использованию маркеров воспаления в качестве прогностических критериев при атеросклерозе [216]. В классификаторах болезней (МКБ-10 и национальных) отсутствуют синдромы, которые отражали бы понятие хронического системного воспаления, а критерии синдрома системной воспалительной реакции обладают в этом случае низкой специфичностью [10, 33]. Отсутствуют и формализованные критерии хронического воспаления, позволяющие качественно оценивать состояние пациента, эффективность проводимой терапии, прогнозировать возможные осложнения и при ОАСНК [56].

Несмотря на прогресс в медикаментозной терапии, атеросклероз

трудно поддается лечению, что диктует необходимость поиска новых

подходов к терапии. В настоящее время основным методом лечения больных

с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей является

консервативная терапия. Доказана важность амбулаторного этапа, уточнена

стратегия консервативной терапии, в частности, необходимость ее

7

непрерывности для всех больных ОАСНК, независимо от стадии артериальной недостаточности [1,4,21]. Развитие хронического иммунного воспаления при атеросклерозе сопряжено с изменениями в системе гемостаза и липидном обмене [3, 11, 12, 24, 59, 117]. В этой связи современный тактический подход к лечению больных с ОАСНК должен обеспечивать рациональное .сочетание, комплекса методов направленных, в числе прочего, на коррекцию липидного и углеводного обмена, тромбоцитарного гемостаза и иммунных нарушений [1, 3, 4, 6, 11, 19, 23]. Однако на практике у большинства пациентов с ОАСНК за рамками терапии остается терапия, направленная на подавление активации Т-лимфоцитов, гиперпродукции цитокинов и свободных радикалов.

Реализация этих направлений становится возможной при

использовании фармакологических средств, обладающих

многокомпонентным действием. В последнее время опубликовано много

работ, посвященных терапевтическому потенциалу фукоиданов

сульфатированных гомо- и гетерополисахаридов из бурых водорослей,

обладающих широким спектром биологической активности [63, 77, 78, 85,

141, 185, 196]. Полифункциональность их действия связана с особенностями

структуры (фукоиданы обладают некоторым структурным сходством с

компонентами внеклеточных тканей - гепарансульфатами, в т.ч. жидких

соединительных тканей - плазмы крови и лимфатической жидкости),

благодаря чему могут имитировать действие эндогенных факторов и

регулировать функции систем макроорганизма через важные ключевые

рецепторы клеток и ферментов [22]. Показано, что фукоиданы являются

мощными ингибиторами пролиферации гладкомышечных сосудистых клеток

(ГМКс) [137], уменьшают гиперплазию интимы [197], подавляют синтез

белка и коллагена V типа [108], препятствуют адгезии клеток к

фибронектину, блокируя сайты, которые распознаются лигандами

воспалительных клеток [135]. Антипролиферативные свойства фукоидана

связаны со способностью ингибировать синтез ДНК в гладкомышечных

8

клетках [262], а также снижать экспрессию и предотвращать ядерную транслокацию фосфорилированных митогенактивированных протеинкиназ [139]. Плейотропное противовоспалительное действие фукоидана включает ингибирование селектинов [71], комплемента и ферментов, участвующих в разрушении тканей при воспалении (таких как гепараназы и эластазы, . . металлопротеазы). [138, 220]. .Противовоспалительные свойства фукоидана в сочетании с антикоагулянтными [23], антитромботическими [235], липидемическими [81] свойствами предопределяют возможность его использования в лечении атеросклероза, в том числе и ОАСНК.

Вышеизложенное определяет актуальность и необходимость дальнейшего исследования иммунных механизмов в развитии и прогрессировании ОАСНК и определение эффективных лечебных подходов у пациентов, страдающих этим заболеванием.

Настоящая работа посвящена исследованию возможности коррекции дисфункции иммунной и цитокиновой системы, эндотелия, липидного обмена и гемостаза у пациентов с ОАСНК при включении в комплекс терапевтических мероприятий полисахаридов из бурых водорослей, а также перспективности использования метода оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции у пациентов с ОАСНК.

Цель исследования: на основании комплексной оценки иммунного статуса, цитокинового профиля и элементов гомеостаза пациентов с ОАСНК установить патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей для оптимизации базисной терапии.

Задачи исследования:

2. Исследовать состояние врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени тяжести заболевания.

3. Изучить особенности функционирования системы цитокинов у

пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости

9

от степени тяжести заболевания. Оценить перспективность использования плазменных уровней цитокипов для характеристики ХСВ с помощью интегральных критериев СВР у пациентов с ОАСНК.

4. Изучить состояние системы гемостаза, липидного обмена и адгезивной функции эндотелия у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости.от степени тяжести заболевания.

5. Изучить влияние полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной и цитокиновой системы, липидного обмена, гемостаза и адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК

Научная новизна: установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтену-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов адаптивного иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания.

Установлено, что состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтену-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по Thl-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (IFNy), снижением уровня противовоспалительных цитокинов (IL-10 и IL-4), выраженным увеличением хематтрактанта IL-8. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (sVCAM-1, sICAM-1, sE-selectin, sP-selectin) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК.

Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и

сопутствующих заболеваний, и усиливаются по мере прогрессировать заболевания.

Доказана иммуно-патогенетическая эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей, применяемых в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК: снижение экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализация уровня 1^0, сдерживание продукции проатерогенных цитокинов, модуляция окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов нейтрофилов, нормализация распределения холестерина между фракциями липопротеидов, снижение гиперкогуляционного потенциала крови.

Практическая значимость: Обоснована целесообразность применения полисахаридов из бурых водорослей для коррекции иммунной дисфункции, нормализации свободнорадикальных процессов и липидного обмена, снижения гиперкогуляционного потенциала крови у пациентов с ОАСНК. Разработана и внедрена в практическое здравоохранение Приморского края (ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток) методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК, (методические рекомендации «Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК» (утверждены Департаментом здравоохранения администрации Приморского края). Определена возможность использования плазменных уровней цитокинов с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера развития хронического системного воспаления у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние иммунной системы у пациентов ОАСНК характеризуется активацией провоспалительных механизмов иммунной системы и

сопутствующей интенсификацией оксидативного стресса: высокой частотой обнаружения повышенных уровней сывороточного №N7 и 1Ь-8, фибриногена, маркеров активации адгезивной функции эндотелия (растворимые молекулы адгезии) и лейкоцитов (активационные антигены), усилением продукции АФК, отсутствием развития 1Ь-10-зависимых механизмов. - .... ■ ■ .

2. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний и усиливаются по мере прогрессирования заболевания.

3. Интегральные показатели системной воспалительной реакции — коэффициент реактивности и уровень реактивности, рассчитанные на основе сывороточного содержания пяти цитокинов (1Ь-6, 1Ь-8, 1Ь-10, Т№а и №N7) являются более эффективными критериями оценки системной воспалительной реакции при сопоставлении с частными признаками и могут использоваться для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

4. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, нормализует распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.

Личный вклад автора:

Планирование исследований, анализ данных отечественной и

зарубежной литературы по теме диссертации, сбор материала для

исследований, участие в клиническом обследовании и исследовании

иммунного статуса пациентов с ОАСНК, анализ историй болезни,

12

статистическая обработка полученных результатов и их анализ, подготовка публикаций, написание диссертации выполнены лично автором.

Апробация материалов работы:

Результаты работы были представлены на научно - практических конференциях и симпозиумах международного, российского и регионального - уровня: II Объединенном иммунологическом форуме- (Санкт-Петербург, 2008); IV Всероссийской конфренции по клинической гемостазиологии и гемореалогии в сердечно-сосудистой хирургии с международным участием (. (Москва,2009), VIII Конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010); VII Дальневосточном региональном конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Владивосток, 2010). Методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК апробирована и внедрена в практику в отделениях сердечно-сосудистой хирургии ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток).

Публикации

Основные результаты диссертационной работы опубликованы в 10 печатных работах, в том числе — 5 статьей - в журналах, включенных в перечень рецензируемых научных журналов, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации основных положений диссертации.

Объем и структура диссертационной работы

Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзор литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 287 источников, из них 62 отечественных и 225 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 37 таблицами и 3 рисунками.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о роли иммунных механизмов в развитии атеросклероза

Объём публикаций в современной научной литературе свидетельствует о многогранности трактовки этиологии и патогенеза атеросклероза с позиций морфологии, биохимии, генетики, местных и системных воспалительных реакций, гиперплазии интимы, пролиферации гладкомышечных клеток и т.д. [2,13,16,36,37,84,240]. Наиболее ранние представления о механизме развития атеросклероза отражены в научных трудах Р. Вирхова [281], С. Рокитанского [238], Л. Ашоффа [79]. В последние 30 - 40 лет обсуждалось не менее 20 теорий патогенеза атеросклероза [30, 35, 36, 37, 38, 223, 245, 285]. Были сформулированы гипотезы, объясняющие возникновение и развитие атеросклероза как следствие повреждения эндотелия [37], моноклональной пролиферации гладкомышечных клеток (ГМК) [84, 240], дефектов функции рецепторов к липопротеидам низкой плотности (ЛПНП) [144], аутоиммунная теория [2,3,36], свободнорадикальная гипотеза, липидная гипотеза, макрофагальная теория [13], инфекционная теория,, Однако до настоящего времени ни одна из них, даже самая популярная и аргументированная, не является общепризнанной и окончательно доказанной.

Тем не менее, воспалительная теория атеросклероза, выдвинутая еще в середине XIX века, сейчас, как никогда, привлекает внимание многочисленных исследователей [35, 150,152, 153, 177, 178]. В соответствии с этой теорией атеросклероз рассматривается как ряд последовательно развивающихся клеточных и молекулярных нарушений, которые в совокупности могут быть описаны как хроническое воспалительное заболевание, развивающееся при участии как врожденного, так и адаптивного иммунитета [151,152, 153, 161, 177,235].

Включение иммунного компонента в атерогенез обусловлено реакцией на антигены, участвующие в инициировании и прогрессирования атеросклероза, на роль которых претендуют ЛПС, иммунные комплексы, белки теплового шока, факторы системы комплемента, лектины, вирусы, факторы роста, цитокины, окисленные липиды и липопротеины, тромбоцитарные факторы,.активные.радикалы кислорода, экосаноиды.и др. [153, 162, 254].

Иммунная система, включающая врожденный и адаптивный иммунитет, вовлечена во все стадии атеросклероза, от начала и прогрессирования до атеротромботических осложнений. Основными антигенами являются модифицированные липопротеины низкой плотности (мЛПНП), которые связываются со скевенджер-рецепторами макрофагов и Toll- подобными рецепторами (TLR) дендритных клеток [207,270,271] и презентируются антиген - специфическим С04+-Т-клеткам через МНС-белки II класса [217, 259]. Развитие адаптивного иммунного ответа включает клональную пролиферацию Т-клеток, продукцию цитокинов и иммуноглобулинов [74, 157].

Клеточные и гуморальные иммунные реакции, возникающие в ответ на мЛПНП, на начальном этапе выполняют защитную функцию, обеспечивая их удаление из крови [157,158,186,241]. При увеличении мЛПНП иммунное воспаление теряет защитные функции и приводит к повреждению стенки сосуда [10,12,13]. Исследования последних лет показывают, что каждая из субпопуляций гетерогенного пула иммунных клеток вносит свой вклад в направлении атерогенной или антиатерогенной оси [74,152,241,245]. Настоящий раздел обзора посвящен анализу роли моноцитов/макрофагов, ДК, лимфоцитов в инициации, развитии атеросклероза и его осложнений.

1.1. 1.Участие врожденного иммунного ответа в атерогенезе

К настоящему времени накоплены доказательства того, что

механизмы врожденного иммунитета могут участвовать в инициировании и

прогрессировании атеросклероза [13,93,231,279,286]. Врожденная иммунная

15

система состоит из эпителиально/эндотелиальных барьеров, циркулирующих клеток и неклоиальных наборов паттерн-распознающих рецепторов (pattern-recognition receptors (PRRs), которые связывают определенные молекулярные структуры (pathogen-associated molecular patterns (РАМР), характерные для больших групп патогенов [146]. Наиболее важными представителями семейства PRRS-являются толл-лодобные рецепторы, (Toll-like receptors TLR), экспрессирующиеся на клетках иммунной системы. Активация TLR эндогенными лигандами, сопровождающаяся быстрой дифференцировкой моноцитов в макрофаги и дендритные клетки, может быть одним из механизмов развития патологического повреждения тканей при атеросклерозе [89, 206, 270]. Выраженная экспрессия TLR наблюдается в эндотелиальных клетках и макрофагах в местах атеросклеротического поражения [89, 131], на моноцитах больных с острым коронарным синдромом и атеросклерозом коронарных артерий [128]. Растворимые TLRs обнаружены в атеросклеротических бляшках сонных артерий, гладкомышечных клетках и эндотелиальных клетках сосудов [129, 280].

Дендритные клетки, экспрессирующие сквенджер-рецепторы, рецепторы главного комплекса гистосовместимости (MHCII), лектиновые рецепторы С-типа (CLR), а также TLR и рецепторы для воспалительных цитокинов, играют связующую роль во взаимодействии врожденного и адаптивного иммунитета, обусловленную мощными антиген-представляющими свойствами ДК и способностью активировать Т-лимфоциты [270]. Незрелые и неактивированные ДК обнаруживаются в адвентиции [68] и интиме [213] кровеносных сосудов здоровых людей. Активированные дендритные клетки, экспрессирующие TLR, присутствуют вместе с Т-клетками н в атеросклеротических бляшках человека [124,130,133] и мышей [199,209], продуцируют большое количество 1L-12р40, TNP-a и ИФН-у, но не IL-10 [270], а также мигрируют в лимфоидные органы, активируя там Т-клетки [93,98]. Кроме того данные ряда авторов

указывают на определенную роль дендритных клеток в дестабилизации бляшки [92,124,272].

С другой стороны недавние данные свидетельствуют о критической роли ДК и TLR в подавлении иммунного ответа [287]. Показано, например, что стимуляция TLR2 зимозаном регулирует секрецию цитокинов в ДК и макрофагах, индуцируя иммунологическую толерантность (интенсивный синтез IL-10, незначительный - IL-6 и IL-12 (р70). Индукция IL-10 при этом зависит от Ш^-опосредованной активации ERK МАРК с помощью механизма, независимого от активации протеина 1 (АР-1) и фактора транскрипции c-Fos [287].

Ключевым моментом в атерогенезе является образование жировых

полосок, состоящих из нагруженных липидами «пенистых клеток» -

макрофагов, трансформированных из моноцитов, мигрировавших из

кровотока в субэндотелиальный слой интимы [13, 191, 266]. В свою очередь,

активированные макрофаги интимы секретируют в субэндотелиальное

пространство более ста активных молекул (факторы комплемента,

коагуляционные факторы, простагландины, лейкотриены, протеолитические

энзимы), поддерживающих воспаление. В обзорах [244,286] детально

рассматриваются вопросы взаимодействия макрофагов с липопротеидами,

особенности их рецепторного аппарата, механизмы синтеза медиаторов

воспаления. Нам представляется важным обратить внимание на работы,

связанные с исследованием неоднородности циркулирующих моноцитов и

тканевых макрофагов [145,245]. В обзоре [245] обобщены сведения о роли

«классически активированных» (М1) и «альтернативно активированных»

(М2) макрофагов, присутствующих в атеросклеротических бляшках.

Показано, что человеческие атеросклеротические бляшки содержат, помимо

классически активированных М1, макрофаги, экспрессирующие маннозный

рецептор - маркер альтернативных макрофагов М2, которые менее склонны к

преобразованию в пенистые клетки [158]. Сообщается, что классическая

активация моноцитов Thl-лимфоцитами в макрофаги М1, которые

17

вырабатывают провоспалительные цитокины, может переключаться на «альтернативную» активацию, индуцируемую ТЬ2 и формирующих пул М2. М2 снижают воспаление, синтезируя 1Ь-10, 1Ь1, (ТОР)-(З. Интересно, что макрофаги, выделенные из жировой ткани мышей, находящихся на постной диете, экспрессируют маркеры, характерные для "альтернативных" М2 фенотипов, в отличие от макрофагов, изолированных из жировой ткани получавших гиперхолестериновую диету и характеризующихся фенотипом "классически активированых» М1 клеток [200]. Приведенные выше данные интересны с точки зрения возможности использования подходов, связанных с активацией макрофагов "альтернативных" М2-фенотипов, а также дендритных клеток и субпопуляций регуляторных Т-лимфоцитов в терапевтическх стратегиях при атеросклерозе.

Нейтрофилы также участвуют в инициации и поддержании воспаления

сосудистой стенки, путем адгезии на мембране эндотелиальных клеток с

последующей активной инфильтрацией в интиму. Активированные

нейтрофилы участвуют в образовании супероксид-радикалов и активных

форм кислорода, усиливающих перекисное окисление белков и липидов,

денатурирующих белки и повреждающих ДНК [236]. Нейтрофилы

обладают гранулами, загруженными протеазами, способными к разложению

фагоцитированного материала и разрушению компонентов внеклеточного

матрикса, приводящему к расплавлению ткани [116]. Сведения об

изменениях функциональной активности циркулирующих нейтрофилов у

больных атеросклерозом немногочисленны и противоречивы [7, 47, 48]. Так,

в работе [47] установлено повышение активности циркулирующих

нейтрофилов при ишемической болезни сердца, связанное с увеличением в

крови концентрации ИЛ-1Ь, ФНО-а, накоплением продуктов перекисного

окисления липидов. М.В. Даниленко с соавт. [109] показали, снижение

фагоцитарной активности нейтрофилов на фоне увеличения способности к

продукции активных форм кислорода у пациентов с атеросклерозом артерий

нижних конечностей в стадии II. Умеренное снижение фагоцитарной

18

активности нейтрофилов у больных с атеросклерозом брюшной аорты и артерий нижних конечностей в предоперационном периоде документировано в исследовании [7]. Новицкий В.В. и др. [48], напротив установили, что течение ИБС сопровождается стимуляцией продукции нейтрофилами АФК и переваривающей способности клеток, угнетением .. -,: экспрессии CD 18-, Fey- и СЗЫрецепторов-на неитрофилах и выраженной деструкцией эндотелия.

Таким образом, на сегодняшний день нерешенным остается ряд вопросов, связанныех с участием клеток врожденного иммунитета в атерогенезе.

1.1.1 .Участие адаптивного иммунного ответа в атерогенезе

Участие адаптивного иммунитета в развитии атеросклероза определяется взаимодействием между антигенпредставляющими клетками (дендритные клетки, макрофаги, В-клетки, NK-клетки) и Т-клетками [237]; выделением целого ряда цитокинов из активированных Т-клеток, которые, в свою очередь, опосредуют дальнейшую атаку атеросклеротической бляшки; продукцией антител В-клетками Т- зависимым или Т- независимым образом [74, 157, 245].

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Майстровский, Кирилл Валерьевич

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно современным взглядам, атеросклероз рассматривается как ряд последовательно развивающихся клеточных и молекулярных нарушений, которые в совокупности могут быть описаны как хроническое воспалительное заболевание [35, 150,152, 153, 177, 178]. Активность воспаления при атеросклерозе является важной характеристикой процессов, способствующих развитию деструктивных изменений атеросклеротической бляшки.

Сопряженность систем иммунитеа, гемостаза с изменениями липидного обмена, лежащая в основе патогенеза атеросклероза предопределяет поиск препаратов, обладающих многоцелевым действием - противовоспалительным, антиатерогенным и иммуномодулирующим.

В этой связи мы провели оценку иммуно-патогенетической эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана у пациентов с ОАСНК, последовательно изучив состояние системы врожденного и адаптивного иммунитета, особенности функционирования системы цитокинов, состояние системы гемостаза, липидного обмена и функциональное состояние эндотелия при включении Фуколама в комплекс с базисной терапией.

Характеризуя состояние адаптивного и врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК, мы опирались на доказанное к настоящему времени положение об участии иммунной системы в атерогенезе [152, 153, 177, 178], и в частности, на факты, которые позволяют считать, что Т-лимфоциты могут выступать инициаторами иммунного воспаления в ответ на мЛГПТП, а их медиаторы - как растворимые, так и контактзависимые - играть решающую роль в формировании атеросклеротических поражений артерий [69, 129]. Приблизительно 30% Т-клеток в бляшках представляют собой CD3+CD4+, треть из них экспрессируют маркёры активации CD25, HLA-DR, -DQ [190]. Активированные Т-лимфоциты присутствуют на всех стадиях развития атеросклеротического поражения [114], секретируют IFN-y, IL-2, TNF-a и -ß,

которые приводят к сосудистой активации макрофагов и развитию иммунного воспаления. Показано, например, что увеличение активированных Т-клеток и макрофагов у АроЕ-нокаутных мышей с нарушенной TGF-ß сигнализацией на фоне гиперхолестеринемией сопровождается увеличением площади поражения [120]. Роль Thl в атерогенезе продемонстрирована и Zhou X. et. al. [274], показавших, что на ранних стадиях развития атеросклероза IgG-, антитела к окисленным ЛПНП представлены, главным образом, подтипом IgG2a, характерным для Thl-иммуного ответа, в то время как на поздних стадиях увеличивается уровень ТЪ2-специфических IgG [274]. Принимая во

внимание ключевую роль С04+-лимфоцитов в развитии активного воспаления в зоне повреждения интимы [44, 129], а также данные об увеличении активированных Т-лимфоцитов и уровня растворимых форм активационных антигенов по мере прогрессирования атеросклероза [126], мы провели сравнение показателей клеточного иммунитета у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени выраженности атеросклеротического процесса. Выполненные нами исследования позволили установить, что у пациентов с ОАСНК II-III стадии по Фонтейну -Покровскому показатели, характеризующие структуру основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови, находятся в границах значений, констатирующих удовлетворительную функцию иммунной системы. В то же время средние значения относительного содержания и абсолютного количества NK-клеток и NKT-клеток, обладающих спонтанной цитотоксической активностью, у пациентов с III стадией ОАСНК превышали таковые у здоровых доноров и пациентов с II стадией заболевания. Их повышение может быть связано с обострением аутоиммунных реакций, дестабилизацией атеросклеротической бляшки, приобретением ее компонентами антигенных свойств.

Увеличение абсолютного количества циркулирующих лимфоцитов, а

также усиление экспрессии рецептора к IL-2 (CD25), антигенов главного

комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR), апоптотического маркера

108

CD95/Fas на поверхности лимфоцитов свидетельствуют о том, что активация Т-клеток при ОАСНК не ограничивается зоной атеросклеротической бляшки. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов и выраженность активационных процессов, зависящих от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний, подтверждают участие циркулирующих активированных Т-лимфоцитов в патогенезе атеросклероза сосудов нижних конечностей.

Накопленные к настоящему времени данные доказывают, что апоптоз клеток играет важную роль в процессах, связанных нестабильностью бляшки. Следует подчеркнуть, что существуют фундаментальные различия между последствиями апоптоза эндотелиальных и воспалительных клеток (макрофагов/моноцитов и лимфоцитов) в зоне повреждения сосуда. Если апоптоз эндотелиоцитов и гладкомышечных сосудистых клеток является пусковым механизмом разрыва атеросклеротической бляшки, то гибель активированных Т-лимфоцитов и макрофагов, ограничивающая количество воспалительных клеток в зоне повреждения, стабилизирует процесс [253]. Анализ соотношения лимфоцитов, экспрессирующих активационные антигены, показал, что у пациентов с ОАСНК как II, так и III стадиями (у последних при более высоком уровне активационных антигенов) процессы активации клеток доминируют над процессами естественной гибели, поддерживая воспаление.

Повышенное содержание B-лимфоцитов у пациентов с заболеванием

III стадии, сопровождаемое значимым увеличением уровня IgG в сыворотке

крови, превышающим средние значения показателя среди всех

обследованных пациентов, отражает участие B-системы иммунитета в

развитии хронического воспалительного процесса у пациентов с ОАСНК и

может быть связано с усилением продукции анти-мЛПНП аутоантител.

Полученные результаты согласуются с литературными данными

отечественных и зарубежных авторов [109], демонстрирующих участие

гуморальных факторов иммунитета в атерогенезе указывает обнаружение в

109

[230] и свидетельствуют об активации гуморального звена иммунитета у исследуемой группы пациентов

При исследовании состояния клеточных элементов врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК, в частности, нейтрофилов, мы установили повышение показателей активности спонтанного НСТ-теста, отражающего

уровень.....продукции нейтрофилами супероксидного аниона и степень ..

функционального раздражения клеток in vivo, а также активность индуцированного НСТ-теста на фоне снижения индекса функционального резерва нейтрофилов снижался. Выявленные нами у пациентов с ОАСНК изменения функциональной активности нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности на фоне активации кислородзависимого метаболизма и связанной с ним генерации активных форм кислорода) свидетельствуют о развивающейся недостаточности эффекторных функций клеток и связанны с истощением на фоне длительной активации. Анализируя полученные результаты, мы принимали во внимание двоякую роль этих клеток в атерогенезе. С одной стороны, нейтрофилы участвуют в инициации и поддержании воспаления сосудистой стенки, адгезируясь на мембране эндотелиальных клеток с последующей активной инфильтрацией в субэндотелиальное пространство, образуя активные формы кислорода, супероксид-радикалов, усиливающих перекисное окисление липидов и белков, с другой - играют важную роль в очистке модифицированных липопротеинов, нежелательных или мертвых клеток и клеточных обломков с помощью фагоцитоза. В этой связи очевидным становится поддержание баланса физиологической активности нейтрофилов, обеспечивающего адекватную эффекторную функцию клеток.

Фундаментальные исследования последних лет свидетельствуют о

ведущей роли провоспалительных цитокинов в атерогенезе. В

экспериментальных и клинических исследованиях выявлены множественные

регуляторные эффекты провоспалительных цитокинов в очаге

атеросклеротического поражения, специфически связанные с патогенезом

110

атеросклероза [17]. Как источниками, так и мишенями действия цитокинов являются все клетки, присутствующие в зоне атеросклеротических повреждений -моноциты, макрофаги, нейтрофилы, клетки глии, эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки, фибробласты, кератиноциты, Т-и В-лимфоциты, №С-клетки. Основным продуцентом , цитокинов в .атеросклеротических бляшках являются макрофаги. Их репертуар включает провоспалительные цитокины ТЫБ-а, 1Ь-1, 1Ь-6, 1Ь-12, 1Ь-15 и 1Ь-18, противовоспалительные 1Ь-10 и ТОР-Р, целый ряд хемокинов. Эндотелиальные клетки продуцируют провоспалительные цитокины ТКГР-а, 1Ь-1(3, 1Ь-6, 1Ь-8 и 1Ь-15, противовоспалительный ТОБ-р, гемопоэтические факторы роста, в том числе для стволовых клеток (8СР), 1Ь-3, СМ-СЗБ, СБР и М-СБР, хемокины 1-309/ССЫ, МСР-1/ССЬ2, МСР-4/ССЫЗ, монокины, индуцированные ИФН-у (М^) / СХСЬ9, хемоаттрактант (1-ТАС) / СХС1Л 1, но не синтезируют 1Ь-10,1Ь-4 или 1Ь-13 [18, 179, 260, 261, 269]

При анализе пропорций оппозитных пулов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов нами обнаружены выраженные нарушения в соотношении П^ЬТу и ТЬ-4, отражающем состояние баланса Т1т1/ТЬ2- клеток и девиацию иммунного ответа в сторону ТЫ. Значительное увеличение концентрации 1БЫу - ключевого проатерогенного цитокина - выявлено в сыворотке крови пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС I и 11 степени, ГБ I и II степени. Сниженные сывороточные уровни 1Ь-10, свидетельствующие об отсутствии 1Ь-10-зависимых механизмов ограничения хронического системного воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, также могут быть обусловлены активацией ТЫ-ответа и повышенной продукцией активированными лимфоцитами ШЫу [10].

В ряде исследований продемонстрирована тесная связь между

повышением активности провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и

тяжестью хронической сердечной недостаточности ишемической и

неишемической этиологии [49, 73]. Выявленные в нашем исследовании

наиболее высокие уровни 1Ь-8, П^ТЧу в сыворотке крови пациентов с

111

сопутствующим диагнозом ИБС I и II степени, ГБ I и II степени, подтверждают значение иммуновоспалительной активации, обусловленной хронической сердечной недостаточностью, в прогрессировании атеросклероза сосудов нижних конечностей и могут быть предложены в качестве маркеров прогрессирования заболевания и будущих осложнений.

, В то же время уровень IL-6, которому в последнее время уделяется большое внимание в связи с его ролью в атерогенезе [184, 194] по нашим наблюдениям изменялся в меньшей степени, хотя и различался значимо у пациентов с заболеванием II и III стадии, а также у пациентов с сопутствующим диагнозом ишемическая болезнь сердца. Наши данные согласуются с выводами авторов о второстепенной роли IL-6 в прогностической значимости при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей [172].

К настоящему времени существуют доказательства значимости в атерогенезе, а также прогрессировании сердечной недостаточности уровня IL-4 [49, 83]. Однако механизмы участия IL-4 в поражении сердечно-сосудистой системы остаются неясными. Известно, что как противовоспалительный цитокин, IL-4 подавляет секрецию цитокинов моноцитарного происхождения, цитотоксичность макрофагов, ингибирует экспрессию молекул адгезии эндотелием [215]. С другой стороны есть предположение о том, что в русле сосуда IL-4 проявляет провоспалительную активность [177]. Полученные нами данные о повышенном уровне IL-4 у пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС. Стенокардия напряжения I - II ФК, ГБ I и II степени, возможно также ассоциированы с прогрессированием сердечной недостаточности.

Таким образом, выполненное исследование позволило установить, что у

пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей по мере

прогрессирования заболевания от II к III стадии усиливаются процессы Т-, В-

клеточной активации и синтеза провоспалительных цитокинов, диктующие

необходимость проведения противовоспалительной и иммуномодулирующей

112

терапии. Значимыми прогностическими маркерами, отражающими выраженность хронического воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, а также у пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС, являются концентрация ШЫу, 1Ь-8 в сыворотке крови и уровень экспрессии активационных антигенов СЭ25 и НЬЛ-ОЯ на циркулирующих лимфоцитах.

Хроническое системное воспаление вообще и при атеросклерозе в

частности имеет принципиальные отличия от острого системного воспаления

и длительное время развивается на фоне относительного равновесия между

повреждающими факторами и буферными противовоспалительными

системами [10]. Однако с определённого момента прогрессирование ишемии

тканей может приводить к форсированию основных патогенетических

феноменов, которые сопровождают хроническое системное воспаление,

усугубляя местные проявления, болевую реакцию и способствуя развитию

критических осложнений [43]. Важным моментом в этой связи является

количественная и качественная оценка выраженности системной

воспалительной реакции. Иммунные нарушения, наблюдающиеся при

атеросклерозе и отражающие процессы хронизации воспаления, определяют

интерес к поиску возможных маркеров, среди которых рассматриваются белки

острой фазы, активационные антигены, проатерогенные цитокины, молекулы

адгезии, аутоантитела, иммунные комплексы и др. [45]. Используемые для

выявления факторов риска развития и прогрессирования

атеросклеротического повреждения артерий маркёры воспаления не дают

представления о целостном процессе [32,56]. Метод, предложенный Ю.М.

Гусевым с соавт. [42], основан на интегральных критериях, доступных для

массового использования в клинике и позволяет определять наличие и

характер системной воспалительной реакции, установить её клинически

значимые пороговые уровни, отражающие трансформацию классического

воспаления в системное, а также оценивать риск осложнений и осуществлять

мониторинг терапии. В качестве главного звена (эталонного критерия)

113

системной воспалительной реакции авторы предложили использовать уровень цитокинов (IL-6, 8 и 10, TNFa) и С-реактивного протеина в сыворотке крови.

При прогрессировании атеросклероза гиперпродукция

провоспалительных цитокинов приводит к срыву регуляции каскадных реакций иммунной системы с последующим развитием системного воспаления [112] В ряде исследований продемонстрирована „ тесная _ связь между повышением активности провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и тяжестью хронической сердечной недостаточности ишемической и неишемической этиологии [45, 49, 73, 265]. Нами было показаны наиболее значимые изменения уровня IL-8 и IFND.

Значимо более высокие уровни IFND у пациентов с проявлением мультифокального атеросклероза, зарегистрированные нами, подтверждают значение иммуновоспалительной активации, обусловленной хронической сердечной недостаточностью, в прогрессировании атеросклероза сосудов нижних конечностей. Учитывая полученные результаты и данные литературы о значимости IFND в атерогенезе, мы использовали плазменные уровни этого цитокина в качестве одного из параметров при подсчёте коэффициента реактивности вместо С - реактивного белка. Включение IFND в качестве маркёра системной воспалительной реакции при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей отвечает принципу относительности включения показателей в коэффициент реактивности, постулируемому авторами метода и предлагающему возможность взаимозаменяемости маркёров, сопоставимых по биологической значимости при той или иной патологии, при сохранении общего принципа — суммирования трёх наибольших значений индекса реактивности.

С помощью интегральных критериев было установлено, что прогрессирование ишемии при атеросклерозе от II к III стадии сопряжено с развитием ХрСВ от первой (компенсированной) ко второй (неустойчивой компенсации) стадии. Наличие атеросклеротических поражений других

бассейнов (ншемическая болезнь сердца) ассоциируется с признаками третьей стадии хронического системного воспаления (субкомпенсированной).

Хроническое системное воспаление у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей характеризуется высокой частотой обнаружения, повышенных уровней сывороточного IFND и IL-8, фибриногена, маркёров активации эндотелия (растворимых, молекул адгезии) и лейкоцитов (активационные антигены), отсутствием развития IL-10-зависимых механизмов и наличием органной дисфункции. Устойчивость хронического системного воспаления к проводимому лечению диктует необходимость оптимизации патогенетической противовоспалительной терапии при облитерирующем атеросклерозе.

Таким образом, интегральные показатели - коэффициент и уровень реактивности, рассчитанные на основе сывороточных уровней пяти цитокинов (IL-6, 8, 10, TNFa, IFND), являются более эффективными критериями оценки системной воспалительной реакции при сопоставлении с частными признаками. В то же время индексы реактивности отдельных показателей, формирующих систему «коэффициент реактивности/ уровень реактивности», в частности индексы реактивности IL-8 и IFND, могут использоваться и в качестве самостоятельных маркёров при мониторинге заболевания. Метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей может быть рекомендован для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей.

С развитием знаний об атеросклеротическом процессе потенциальное

клиническое значение приобрели исследования молекул адгезии, в том числе

растворимых, открывающие новый взгляд на патофизиологию атеросклероза

и его последствия. Утверждение, что молекулы адгезии причинно связаны с

развитием атеросклероза поддерживается тем фактом, что нокаут мышей,

дефицитных по Е-селектину, Р-селектину или внутриклеточным молекулам

115

адгезии-1(1САМ-1) имеют пониженный ответ на атеросклеротические стимулы [229]. Кроме того, повышенная экспрессия молекул адгезии была обнаружена в человеческих атеросклеротических бляшках [189].

Оценка уровня молекул адгезии способствует пониманию механизмов, ответственных за инициирование, прогрессию и клинические проявления атеросклероза. Кроме того, другим потенциальным использованием растворимых молекул адгезии может быть мониторинг терапии, направленной на снижение воспалительного статуса и улучшения функции эндотелия.

1САМ-1 представляет собой интегральный мембранный белок с молекулярной массой 55 Ша, содержащий пять ^-подобных клеточных доменов - является лигандом для ЬРА-1, Мас-1 и СЭ43 и экспрессируется под влиянием провоспалительных цитокинов - 1Ь-1, ТМ^а и 1РЫу на различных типах клеток. В многофазном процессе взаимодействия лейкоцитов с сосудистым эндотелием 1САМ-1 обеспечивает фазу прочной адгезии лейкоцитов к эндотелиальным клеткам.

УСАМ-1 является лигандом интегрина УЬА-4 на лимфоцитах, моноцитах и эозинофилах. УСАМ-1/УЬА-4- взаимодействие опосредует прочное прилипание циркулирующих лейкоцитов (не относящихся к нейтрофилам) к эндотелию [113], обладает относительно селективной лейкоцитарной адгезией, обеспечивая накопление мононуклеарных клеток в процессе смены острой фазы воспаления хронической.

Е-селектин экспрессируется на сосудистом эндотелии при активации различных медиаторов, включая цитокины и эндотоксины. Р-селектин содержится в цитоплазме гранул тромбоцитов и быстро перемещаться к поверхности эндотелия после воздействия тромбина или гистамина.

Р-, Ь-и Е-селектины структурно похожи, представляют собой трансмембранные белки, связывающие углевод определенной структуры -тетрасахарид, известный как сиалил-Льюис X (81ех), который содержит сиаловую кислоту и остатки фукозы. Селектины рассматриваются в качестве

потенциально полезных маркеров для диагностики патологий, сопровождающихся развитием воспалительных реакций.

Недавние исследования [110] показали, что з1САМ-1 является значимым предиктором прогрессирования атеросклероза сосудов нижних конечностей в течение последующих 12 лет независимо от сердечно-сосудистых факторы риска. В другом исследовании [.70] в популяции пациентов с .облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей, плазменные уровни бУСАМ-1 были 618±258 нг/мл (у пациентов без ОАСНК 496±164 нг/мл (р=0,016), з1САМ-1 344±239 нг/мл и 275± 99 нг/мл (р=0,079). Увеличение сердечнососудистых рисков было связано с повышением плазменных уровней бУСАМ-1, но не б1САМ. Расхождение между этими двумя исследованиями трудно объяснить. Экспрессия 1САМ-1 значительно усиливается под действием воспалительных цитокинов в эндотелиальных клетках, фибробластах, эпителиальных клетках и мультипотентных гемопоэтических клетках. Напротив, действие УСАМ-1 в большей степени ограничено активированными эндотелиальными клетками в зоне поражения [212].

Таким образом, хотя 1САМ-1 и УСАМ-1 структурно и функционально похожи, плазменные уровни з1САМ-1 можно считать маркером системного воспалительного процесса, в то время как УСАМ-1 является индикатором активности воспаления в бляшке. Вследствие этих различий, бУСАМ-1 выступает как предиктор риска у пациентов с выраженным атеросклерозом, а з1САМ-1- у здоровых людей. Стоит отметить, что при ОАСНК, прогностическая ценность бУСАМ-1 не зависит от классических факторов риска, предыдущих инфарктов миокарда и инсультов и других ситуаций, связанных с повышением уровня циркулирующих молекул адгезии [249]. Еще более важно, бУСАМ-1 измерение усиливает прогностическую ценность плече-лодыжечного индекса, который на сегодняшний день является наиболее мощным прогностическим показателем риска ОАСНК [125].

В 2005 г. были опубликованы данные 12-летнего Эдинбургского исследования, показавшие связь между высоким уровнем С-реактивного белка, 1Ь-6, 1САМ-1 и УСАМ-1 и прогрессированием облитерирующего атеросклероза сосудов нижних конечностей. А. РгасШап е1 а1. [225], проведя исследование уровня растворимых молекул адгезии у мужчин с заболеваниями периферических. артерий, показали, что повышение уровня бУСАМ- 1 сопряжено с прогрессированием облитерирующего атеросклероза, в то время как повышение з1САМ-1 является независимым предиктором развития заболевания у клинически здоровых людей.

Для уточнения механизмов дисфункции эндотелия при ОАСНК мы провели изучение уровня растворимых молекул адгезии (зУСАМ-1, з1САМ-1, зР-Бексйп, зЕ-5е1ес1:т) и установили значимое повышение показателей по сравнению с таковыми у здоровых доноров. Концентрация з1САМ-1 в

сыворотке крови пациентов ОАСНК составляла 349,8±230,2 нг/мл -389,4±127,1 нг/мл зУСАМ-1 - 433,3±65,4 нг/мл, БР-селектина 241,8±108,0 нг/мл - 232,3± 124,0 нг/мл , БЕ-селектина - 54,2±9,0.

По мере прогрессирования заболевания от II к III стадии концентрация растворимых молекул адгезии в сыворотке крови увеличивалась. Уровень з1САМ-1 и бУСАМ-1 нарастал от 327,3±96,1 нг/мл и 428,3±81,0 нг/мл у пациентов с II стадией ОАСНК до 385,4±70,2 нг/мл и 533,7±,7 нг/мл у пациентов с III стадией соответственно (р>=0,000). При анализе уровней бР-селектина и БЕ-селектина выявлена схожая закономерность: концентрация молекулы эР-селектина (284±121,7 нг/мл) и БЕ-селектина (59,5±9,7) у пациентов с III стадией ишемии была значимо выше, чем у пациентов с II стадией (216,3±111,0 нг/мл, /?=0,027) и 52,3±14,0 (р=0,025).

Приведенные факты указывают, что молекулы адгезии с одной стороны отражают течение хронического воспалительного процесса при атеросклерозе, с другой - являются предикторами осложнений сердечно-сосудистых заболеваний.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что прогрессирование атеросклероза у пациентов с ОАСНК сопровождается активацией провоспалительных механизмов иммунной системы, сопутствующей интенсификацией оксидативного стресса, нарушениями функции эндотелия.

.....Актуальными остаются исследования в области, фармакологических

проблем, связанных с воспалением, включая разработку препаратов с целенаправленным действием на мишени, участвующие в реализации реакций врожденного и адаптивного иммунитета. Так, например, в экспериментах установлено, что статины снижают ФНО-а-индуцированную экспрессию ICAM-1 и VCAM-1 на поверхности эндотелиальных клеток человеческой пупочной вены [100], препятствуют рекрутированию и активации лимфоцитов и макрофагов, снижают индуцированную IFNy экспрессию антигенов MHCII на артериальных клетках, что приводит к подавлению дифференцировки Thl-клеточного ответа in vivo [218, 250]. В то же время К. Kröger et al. [121] не обнаружили количественных изменений маркеров клеточной активации (HLA-DR, CD25, CD69 и CD86) после терапии аторвастатином и клопидогрелем здоровых добровольцев и не установили значительных изменений в ответе лимфоцитов на митогены in vitro под действием аторвастатина

До недавнего времени при лечении воспалительных заболеваний основное внимание уделяли подавлению воспалительного процесса на стадии его инициации и/или развития. Несмотря на очевидные успехи, эта стратегия во многих случаях не приводит к полному излечению. Одна из центральных идей в тактике современного лечения воспаления заключается в эффективном разрешении _ воспаления: торможении притока нейтрофилов, усилении рекрутмента моноцитов, индуцировании апоптоза в нейтрофилах и быстрого их клиренса, восстановлении нарушенных структур тканей [239], а также модуляции апоптоза активированных Т-лимфоцитов [62, 232].

В этой связи, определенную значимость приобретает терапия, направленная на коррекцию клеточных нарушений в стенке сосуда и в сосудистом русле, сопряженных с развитием воспалительной реакции и деструктивных процессов. Проведены исследования, демонстрирующие, например, способность статинов оказывать противовоспалительное действие, ..-.сопряженное, с.иммуномодулирующими эффектами, снижением липидных и иммунологических маркеров атеросклероза [67], и предотвращать апоптоз эндотелиальных клеток [40].

Однако, на практике у большинства пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, как правило, используются препараты, направленные на улучшение микроциркуляции (чаще, трентал, актовегин) и на коррекцию гемостаза (гепарин, фраксипарин). За рамками терапии остается иммунотерапия, направленная на подавление активации Т-лимфоцитов, гиперпродукции цитокинов и свободных радикалов. В числе прочих факторов, одной из причин такого положения является высокая стоимость ■ фармакологических препаратов. Например, в последние годы в лечебной практике появились препараты простагландинов, в частности, вазапростан, имеющие выраженную противовоспалительную активность. Вместе с тем вазапростан - относительно дорогой препарат, что является основным препятствием для его широкого использования в клинической практике. Учитывая вышесказанное, одним из возможных подходов, направленных на подавление воспалительного процесса, эффективную коррекцию липидного и углеводного обмена, тромбоцитарного гемостаза и иммунных нарушений у больных с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, может явиться включение в комплексную терапию атеросклероза биологически активных веществ ...природного происхождения, обладающих многокомпонентным действием [203].

Сульфатированные полисахариды из бурых водорослей и их

синтетические аналоги, стратегия использования которых для управления

воспалением основывается на способности имитировать действие эндогенных

120

факторов, а также регулировать активность ключевых молекул, участвующих в воспалительном процессе [38], являются перспективными кандидатами на роль соединений, влияющих на течение и исход как острых, так и хронических воспалительных процессов. Считают, что отдельные участки полисульфатированных цепей фукоиданов способны выступать в качестве миметиков природных лигандов белковых рецепторов, обуславливая тем самым, например, противовоспалительную активность, антикоагулянтное и антиангиогенное действие [22].

Разные виды бурых водорослей значительно различаются по содержанию и составу фукоиданов, наиболее богатым их источником являются представители порядка Fucales [58]. Бурые водоросли Fucus evanescens имеют обширный ареал, легко доступны, встречаются вдоль всего побережья Курильских островов и Камчатки, а также в Приморском крае и на Сахалине и могут служить доступным источником фукоиданов [60]. С практической стороны использование этой водоросли является перспективным вследствие высокого содержания фукозсодержащих полисахаридов (до 15%) [382]. Кроме того, тщательный контроль источников морских водорослей, современные методы экстракции и идентификации полисахаридов, позволяющие получать воспроизводимые препараты, новые нормативные подходы к стандартизации, делают возможным получение фракций фукоидана, которые могут стать основой для разработки лекарственных форм [94].

В работе К. Tanaka [258] селектин-блокирующий эффект фукоидана

положен в основу потенциального метода профилактики постишемического

реперфузионного и аутоиммунного поражения сердца. Автором показано

снижение концентрации маркеров воспаления в сыворотке, уменьшение

инфильтрации миокарда макрофагами и С04+-Т-клетками, улучшение

функции сердечной мышцы после 3-недельного внутрибрюшинного введения

фукоидана мышам с аутоиммунным миокардитом, индуцированным

инъекцией кардиального миозина. P. Thomes et al. [96] обнаружили

121

выраженный протективный эффект фукоидана из Cladosiphon okamurcmus при пероральном введении мышам с инфарктом миокарда, индуцированным изопротеренолом. Lee N.Y. et al. [176] установили, что фукоидан из Laminaria gwyanovae ингибирует фосфорилирование рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) в мышиных клетках эпидермиса С141 JB6. .Тормозящее. влияние .фукоидана на фосфорилирование . EGFR обусловлено ингибированием EGFR-зависимого фосфорилирования внеклеточной сигналрегулирующей киназы 1/2 и C-Jun N-концевой киназы. Кроме того, фукоидан из Laminaria guiyanovae дозозависимо ослабляет C-FOS или C-Jun транскрипционную активность и тем самым препятствует связанную с активатором белка-1 (АТ-1) трансактивационную деятельность. In vitro анализ показал, что фукоидан непосредственно взаимодействует с EGFR. Ранее показано, что фукоидан из F. evanescens in vitro индуцирует апоптоз лимфоцитов периферической крови, обладает

иммуномодулирующими, противовоспалительными, антикоагулянтными свойствами [14, 23].

В настоящем исследовании мы установили, что включение полисахаридов из F. evanescens в комплекс с базовой терапией пациентов с ОАСНК сопровождается снижением уровня экспрессии активационных антигенов на клетках периферической крови, отражая процессы, способствующие подавлению активации Т- лимфоцитов и дифференциации Т - хелперов 1-типа, и приводящие в конечном итоге к снижению воспалительного ответа. Включение полисахаридов из F. evanescens в схему консервативной терапии также способствует восстановлению равновесиямежду процессами пролиферации-дифференцировки и апоптозом (ростом и гибелью клеток).

Учитывая способность фукоидана индуцировать апоптоз лимфоцитов

[14], снижение относительного содержания HLA-DR+", CD25+-, CD95+- Т-

лимфоцитов в группе пациентов, получавших в комплексе с базисной

терапией фукоидан, может быть связано с усилением апоптоза

122

активированных лимфоидных клеток, обусловленного потенциальными проапоптотическими свойствами фукоидана.

Применение полисахаридов из бурых водорослей оказывает положительный корригирующий эффект на показатели гуморального звена иммунитета пациентов с ОАСНК нормализует повышенный уровень IgG в сыворотке крови, а также способствовует благоприятной динамике. показателей фагоцитарной активности нейтрофилов - повышению ФП и ФЧ, модуляции окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов клеток

При оценке влияния Фуколама на уровень цитокинов мы обнаружили, что у пациентов опытной группы при отсутствии значимых различий в содержании TNFd, IL-4, IL-10, IL-8 в сыворотке крови (по сравнению с показателями до начала терапии), в отличие от пациентов контрольной группы, у которых наблюдалось увеличение содержания IL-6 и IFNy в сыворотке крови, концентрация этих цитокинов, а также индекс соотношения IFNy/IL-4 и IFNy /IL-Ю опытной группы не увеличивались. Эти результаты обнадеживают с точки зрения возможности сдерживания продукции проатерогенных цитокинов при включение полисахаридов бурых водорослей в комплес базовой терапии пациентов с ОАСНК при более длительном курсе лечения. Подтвержением являются исследования, выполненны в лаборатории иммунологии ФГБУ «НИИЭМ» им. Г.П.Сомова СО РАМН совместно с ФГБУЗ МО ДВО РАН, в которых установлено снижение провоспалительных цитокинов в сыворотке крови пациентов с заболеваниями сердечнососудистой системы при длительном приеме полисахаридов бурых водорослей (3-6 месяцев) в комплексе с базовой терапией (неопубликованные данные).

Способность фукоиданов блокировать воспаление при попадании в системный кровоток отражена в ряде сообщений [255, 256, 2577]. Как уже отмечалась выше, механизм противовоспалительного действия фукоиданов обусловлен связыванием с Р- и L-селектинами и препятствием

взаимодействия лимфоцитов и нейтрофилов с эндотелием сосудов, а также со специфическими рецепторами, участвующими в передаче сигнала к клеткам .

Однако в наших исследованиях мы не получили ожидаемого снижения уровня растворимых молекул адгезии у пациентов с ОАСНК при включении Фуколама в комплекс с базисной терапией. Отсутсвие изменений уровня растворимых молекул адгезии в системном, кровотоке у пациентов с ОАСНК по нашему мнению объясняется широкими вариациями показателей у отдельных лиц, а также тем обстоятельством, что эти молекулы являются локальными, короткодистантными и короткоживущими медиаторами и возможно, короткий период пребывания их в сыворотке крови в свободном состоянии и способность активно связываться с растворимыми рецепторами, не позволяют выявить значимых изменений в содержании молекул адгезии в анализируемых группах. В то же время, отсутствие изменений в содержании растворимых молекул адгезии на фоне терапии диктуют необходимость оптимизации противовоспалительной терапии, в том числе и исследуемыми полисахаридами.

К настоящему времени получены доказательства патогенетической

связи между изменениями обмена липидов и системным воспалением,

являющимся одним из важнейших и неотъемлемых компонентов атерогенеза

[157, 186, 241]. ЛПНП модифицируются посредством множественных

механизмов, включая оксидацию, энзиматическую деградацию и агрегацию

[35], среди которых основным является окисление под действием свободных

радикалов и ферментов. В результате окисления полиненасыщенных жирных

кислот в фосфолипидах и эфирах холестерина образуются изменённые

продукты (например, малондиальдегид (МДА), которые ковалентно

связываются с аминокислотами, содержащими свободные аминогруппы в

апоВ-100 [250, 251], приводя к его разрушению на многочисленные

пептидные фрагменты. На сегодняшний день идентифицировано более 100

специфичных антител к пептидным фрагментам МДА-апоВ-100 [214],

которые обнаруживаются иммунной системой [157]. Увеличениные

124

количества анти- мЛПШТ антител обнаружены на ранних стадиях у пациентов с заболеваниями периферических сосудов, при атеросклерозе сонных артерий и ишемической болезни сердца, (ИБС) инфаркте миокарда [186].

Молекулярные механизмы изменения липидного метаболизма в настоящее время также рассматриваются с учетом изменений функциональной активности макрофагов, трансформирующихся., в пеиистые клетки . и включающей, по меньшей мере, два механизма. Один из них обусловлен связыванием модифицированных липопротеинов рецепторами, доминирующими среди которых являются скевенджер-рецепторы, другой — с действием провоспалительных цитокинов [13] с участием ядерных гормональных рецепторов: PPARy (peroxisome proliferator-activated receptors -ядерных рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом), LXR, RAR и др.) и транскрипционных факторов - ядерного каппа-В и АР-1 [278].

Противовоспалительные и гиполипидемические свойства сульфатированных полисахаридов из F.evanescens могут быть обусловлены блокированием скевенджер-рецепторов, для которых они являются лигандами [193] а также установленной ранее способностью фукоидана снижать исходно высокий уровень провоспалительных цитокинов, продуцируемых макрофагами - TNFa, IL-8, IL-1, IL-6 [14] и ослаблять C-FOS или C-Jun транскрипционную активность, препятствуя связанной с активатором белка-1 (АТ-1) трансактивационной деятельности [176].

Гиполипидемическое действие фукоидана может быть связано с

влиянием на адипоциты - клетки, участвующие в жировом обмене и

обладающие способностью накапливать жиры. Известно, что адипоциты

секретируют значительное число регуляторных молекул, включая

эндокринные, паракринные и аутокринные факторы. Увеличение уровня

продукции адипоцитами TNFa, IL-6 может стимулировать, в частности,

развитие воспалительного процесса и изменения в сосудистой стенке, а

секреция моноцитарного хемотаксического фактора-1 и макрофаг-

колониестимулирующего фактора оказывает влияние на развитие атером,

125

стимулируя образование пенистых клеток и, как следствие, склеротизацию сосудов [160]. В работе [187] установлена способность фукоидана подавлять дифференцировку адипоцитов, опосредованную уменьшением экспрессии генов PPARy (peroxisome proliferator-activated receptors -ядерных рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом), а также генов белка, связывающего жирные кислоты (АР2ацетил-КоА-карбоксилазы). Показана способность фукоидана повышать активность липопротеинлипазы (ЛПЛ) и лецитин-холестерол-ацилтрансферазы (ЛХАТ) — фермента, превращающего свободный холестерин ЛПВП в эфиры холестерина, являющиеся его более гидрофобной формой и способные, в силу высокой гидрофобности, перемещаться с поверхности липопротеина в ядро, освобождая место на поверхности частицы для захвата нового свободного холестерина. Эта реакция является чрезвычайно важной для процесса очищения периферических тканей от холестерина (обратного транспорта холестерина). Действие фукоидана связано с индукцией экспрессии мРНК липопротеинлипазы, а также индукцией секреции аполипопротеина C-TI - кофактора, ответственного за активацию липопротеинлипазы в капиллярах. Эти данные объясняют способность фукоидана регулировать дислипидемию, ограничевая абсорбциию липидов (ОХС и желчных кислот), активируя метаболические ферменты (ЛП, TIL, ЛХАТ) и повышая экспрессию рецепторов ЛПНП на клетках печени [149].

Показано также, что фукоидан стимулирует внутриклеточный транспорт липопротеинлипазы и уменьшает деградацию этого фермента в адипоцитах, что позволяет использовать его для ингибирования накопление жира [166]. Действие фукоидана в этом случае связано с индукцией экспрессии мРНК липопротеинлипазы, а также индукцией секреции аполипопротеина C-II — кофактора, ответственного за активацию липопротеинлипазы в капиллярах.

Регулирующее липидный метаболизм действие фукоидана при

пероральном введении может быть обусловлено его способностью

ингибировать гидролиз жира липазой поджелудочной железы при

126

пероральном введении, а также снижать уровень печеночной триацилглицерол-липазы в плазме крови и замедлять всасывание пищевых жиров в кишечнике [149,166]. Кроме того, полисахариды, связываясь в просвете кишечника с желчными кислотами, способны прерывать рециркуляцию богатого холестерином пула желчных кислот и усиливать их экскрецию с фекалиями..[18.7]. В результате в печеночных клетках развивается дефицит холестерина, для компенсации которого увеличивается количество мембранных рецепторов к ЛПНГТ, обеспечивающих дополнительный клиренс ХС ЛПНП из плазмы, что, в свою очередь, ведет к снижению уровня ХС в плазме крови.

Гипохолестеринемический эффект фукоидана может быть также связан с тем, что полисахариды слабее связывают гидрофильные желчные кислоты, способствуя увеличению в плазме относительного содержания гидрофобных желчных кислот, которые сильнее, чем гидрофильные кислоты, ингибируют активность холестерин-7 -гидроксилазы в печени [103].

Важным моментом с-, точки зрения доказательной . медицины является

возможность осуществления эффектов фукоидана при пероральном

применении. Подтверждением возможности трансформации фукоидана в

организме человека являются результаты последних исследований по

детекции фукоидана в периферической крови после пероралыюго применения

полисахарида. Возможность появления производных фукоидана в

периферической крови после пероралыюго применения полисахарида

подтверждена исследованиями М.Я. МптеЬ е1 а1. [64] обнаруживших с

помощью монокланальных антител к высокосульфатированному фукоидану

его производные - галактофукана сульфат - в плазме здоровых добровольцев,

принимавших перорально в течение 12 дней по 3 г/сут порошок водоросли

ипйапа, содержавший 10% производных фукоидана, и очищенный

галактофукана сульфат. Средняя концентрация обнаруженного фукоидана в

плазме составила соответственно 4,002 мг/л и 12,989 мг/л. У. ТоШа е1 а1.

[119] также обнаружили фукоидан из С1айоз1ркоп окатигапш в сыворотке

127

крови и моче здоровых добровольцев через 6 и 9 ч после приема полисахарида внутрь. Эти факты указывают на возможность деградации молекул фукоидана в организме человека. Учитывая данные литературы, можно предположить участие описанных выше механизмов в реализации противоспалительных эффектов фукоидана из F. evanescens при его пероральном применении.

.К настоящему, времени установлено, что иммунная система и гемостаз составляют единую защитную систему организма [3,17,24,117]. Определение особенностей системы гемостаза, иммунологических показателей при ОАСНК открывает новые возможности для оптимизации диагностики и лечения пациентов, прогнозирования течения патологического процесса.

Выявленные нарушения гемостаза у пациентов с ОАСНК, свидетельствуют о нарушениях гемостаза, сопровождающегося активацией прокоагулянтного звена (снижение АПТВ, увеличение концентрации фибриногена, укорочение ТВ). Включение сульфатированных полисахаридов из F.evanescens в схему консервативной терапии привело к снижению гиперкогуляционного потенциала крови пациентов.

Обсуждая механизмы взаимодействия иммунной системы и системы гемостаза в развитии воспаления сосудистой стенки, мы принимали во внимание тот факт, что провоспалительные цитокины (IL-1, IL-6, 1L-8, IL-12, TNFa) индуцируют усиление экспрессии тканевого фактора свертывания крови на эпдотелиальных клетках, моноцитах и макрофагах, а также подавляют активность естественных антикоагулянтов, способствуя усилению свертывания крови, тромбообразованию и развитию ДВС-синдрома. Нарушения в системе гемостаза развиваются при участии фактора свертывания крови VII, фактора X и его активной формы Ха, фактора свертывания V [24].

В обзоре литературы мы привели данные исследователей, изучивших

мехнизм антикоагулянтного действия фукоидана из F. evanescens и

показавших его действие на факторы внутреннего и внешнего путей

свертывания, а также на конечный этап свертывания или превращение

128

фибриногена в фибрин под воздействием тромбина [23, 46]. Показано также, что фукоидан оказывает антикоагулянтный эффект при парентеральном и длительном (30-кратном) пероральном введении животным [23]. Принимая во внимание приведенные выше данные, можно полагать, что нормализация нарушений в системе гемостаза пациентов с ОАСНК при назначении - полисахаридов, из F., evanescens в комплексе с базовой терапией обусловлена антикоагулянтными свойствами фукоидана. Кроме того, в экспериментах in vitro и in vivo установлена способность фукоидана из F. evanescens активировать систему фибринолиза, связанная с повышением плазминового потенциала [23]. Эти данные позволяют рассматривать фукоидан из F. evanescens его как потенциальное средство с тромболитической активностью.

Таким образом, проведенное исследование позволило выявить особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК, уточнить роль иммунных механизмов в развитии и прогрессировании заболевания, оценить иммуно-патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов с ОАСНК для оптимизации базисной терапии, а также определить перспективы практического использования методики оценки ХрСВ с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера СВР, оценки риска осложнений и мониторинга терапии. Результаты исследования показывают, что полисахариды, полученные из бурой водоросли F. evanescens, не только снижают степень выраженности воспалительного процесса у пациентов с ОАСНК, но и обладают способностью нормализовать показатели липидного обмена, системы гемостаза, функциональной активности клеток врожденного иммунитета. Сочетание противовоспалительных, иммуномодулирующих, антикоагулянтных и гиполипидемических свойств делают включение Фуколама в комплексную терапию данной категории пациентов патогенетически обоснованным.

В современной мировой практике известны биопрепараты, по общему

действию аналогичные фукоидану, однако они ограниченно представлены на

129

отечественном рынке и обладают высокой стоимостью. В то же время уникальность химических структур, наличие сырьевой базы в Дальневосточном регионе, экологически чистые и экономичные технологии производства создают предпосылки для более широкого использования в клинической практике фу кои дана из бурой водоросли К емапезсет.

выводы

1. Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности- и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания.

2. Состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по Thl-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (IFNy), снижением уровня противовоспалительных цитокинов IL-10 и IL-4), выраженным увеличением хематтрактанта IL-8.

3. Значимыми прогностическими маркерами, отражающими выраженность хронического воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, являются концентрация IFNy, IL-8 в сыворотке крови и уровень экспрессии активационных антигенов CD25 и HLA-DR на циркулирующих лимфоцитах.

4. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (sVCAM-l, sICAM-1, sE-selectin, sP-selectin) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК.

5. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся снижением экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализацией уровня IgG, модуляцией окислительно-восстановительного потенциала и функционально-

метаболических резервов нейтрофилов, сдерживанием продукции проатерогенных цитокинов.

6. Полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК нормализуют распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижают гиперкогуляционный потенциал крови.

7. Для пациентов с ОАСНК с ишемией II стадии характерно наличие первой стадии хронического системного воспаления (компенсированной), при ишемии III стадии системное воспаление приобретает характер неустойчивой компенсации (2 стадия), наличие сопутствующих заболеваний сердечно-сосудистой системы у части пациентов сопровождается развитием субкомпенсированных (3-я стадия) форм хронического системного воспаления.

8. Метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей СВР может использоваться для регистрации наличия' и характера развития ХрСВ у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ

1. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД "Фуколам" в комплекс с базисной терапии пациентов ОАСНК с целью коррекции дисфункции иммунной системы, нормализации липидного обмена и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.. Режим приема - по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

2. Рекомендуется использовать метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Майстровский, Кирилл Валерьевич, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Андреев, В. В. Особенности клинического течения и выбор лечебной тактики при облитерирующем атеросклерозе артерий нижних конечностей в возрастном аспекте : дис. ... канд. мед. наук / Андреев Владимир Владимирович; [ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская гос. мед. академия им. И. И. Мечникова» Минздравсоцразвишя.России]. - СПб., 2011. -25 с.

2. Аутоиммунная теория патогенеза атеросклероза и новые пути его лечения / В. А. Нагорнев, В. О. Константинов, А. Н. Климов, А. Д. Денисенко // Вестн. РАММ. - 2003. - 12. - С. 29-34.

3. Баркаган, 3. С. Эндотелиоз и воспалительная концепция атеротромбоза - критерии диагностики и проблемы терапии / 3. С. Баркаган, Г. И. Костюченко, Е. Ф. Котовщикова // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2004. -№ 4.-С. 3-11.

4. Бырихин, Н. И. Комплексный подход к лечению больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.44 / Бырихин Николай Иванович ; [Яросл. гос. мед. акад.]. - М., 2002. - 37 с. : ил.

5. Влияние иммуномодулятора фукоидана из бурых водорослей Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы, липидного и

углеводного обмена у мышей / К. В. Майстровский, Т. С. Запорожец, Л. Н.

/

Федянина [и др.] // Тихоокеанский мед. журн. - 2009. - № 3. - С. 97-100.

6. Влияние окситерола и аторвастатина на ЛПС-индуцированную секрецию фактора некроза опухоли и интерлейкина-10 макрофагами мыши / М. И. Душкин, О. М. Хощенко, Е. Н. Кудимова, Я. Ш. Шварц // Бюл. эксперимен. биол. - 2006. - Т. 141, №2.-С. 194-197.

7. Восканян, Ю. А. Прогнозирование и профилактика инфекционно-воспалительных осложнений в реконструктивной хирургии облитерирующего атеросклероза брюшной аорты и артерий нижних конечностей : автореф. ...

канд. мед. наук : 14.00.27; 14.00.44 / Восканян Юрий Эдуардович ; [Ставроп. гос. мед. акад.]. - Ставрополь, 1996. — 24 с.

8. Гайковая, Л. Б. Иммунологический статус у больных облите-рирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей с осложнениями после реконструктивных операций / Л. Б. Гайковая, А. В. Светликов, Т. X. Гамзатов // Мед. иммунология. -.2004. -Х-6,.№.3/5. - С. 399..

9. Гитель, Е. П. Роль интерлейкинов в патогенезе атеросклероза / Е. П. Гитель, Д. Е. Гусев, Е. Г. Пономарь // Клиническая медицина. — 2006, № 6. — С. 10-15.

10. Гусев, Е. Ю. Системное воспаление с позиции теории типового патологического процесса / Е. Ю. Гусев, В. А. Черешнев, Л. Н. Юрченко // Цитокины и воспаление. - 2007. - № 4. - С. 9-21.

11. Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации. IV пересмотр [Электронный ресурс] / Комитет экспертов Всероссийского научного общества кардиологов (ВНОК). - М., 2009. - Режим доступа: http://www.solvay-pharma.ru/fi1es/articles/10046/ 1257496922390.pdf.] (Дата обращения: 20.10.2010).

12. Душкин, М. И. Интеграция сигнальных путей регуляции липидного обмена и воспалительного ответа / М. И. Душкин, Е. Н. Кудимова, Я. Ш. Шварц // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 12-18.

13. Душкин, М. И. Макрофаги и атеросклероз: патофизиологические и терапевтические аспекты / М. И. Душкин // Бюл. СО РАМН. - 2006. — № 2 (120).-С. 47-55.

14. Запорожец, Т. С. Клеточные и молекулярные механизмы им-муномодулирующего действия биополимеров морских гидробионтов : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Запорожец, Татьяна Станиславовна; [НИИ эпидемиол. и микробиол Сиб. отд. РАМН; Тихоокеан. ин-т биоорганич. химии Дальневост. отд. РАН]. - Владивосток, 2006. - 355 с.

15. Земсков, A. M. Иммунные нарушения и их коррекция у оперированных больных облитерирующим атеросклерозом / А. М. Земсков, В. Г. Самодай // Хирургия. - 2006. - № 6. - С. 38-41.

16. Иммуностимулирующая и антикоагулянтная активность фукоидана из бурой водоросли Охотского моря Fucus evanescens / T. А. Кузнецова,..Т. С. Запорожец, Н. ~Н. Беседнова [и др.] // Антибиотики и химиотерапия. - 2003. - Т. 48, № 4. - С. 11-13.

17. Казанцев, А. В. Диагностика прогрессирующего течения облитерирующего атеросклероза бедренно-подколенно-берцовой локализации / А. В. Казанцев, Е. А. Корымасов // Фундаментальные исследования. — 2011. — № 1. - С. 62-67.

18. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев. - СПб. : Фолиант, 2008. - 552 с.

19. Козлов, В. А. Вакцины против атеросклероза: состояние проблемы и перспективы её развития / В. А. Козлов, М. И. Душкин, Е. И. Верещагин // Цитокины и воспаление. - 2008. - Т. 7, № 1 . - С. 8-14.

20. Кошкин, В. М. Облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей: недостатки и перспективы консервативного лечения / В. М. Кошкин // Клиническая фармакология и терапия. - 2005. - № 14. - С. 72-75.

21. Кошкин, В. М. Стратегия и тактика консервативной терапии больных хроническими облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей / В. М. Кошкин, Ю. М. Стойко // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2005. - Т. 11, № 1.-С. 132-135.

22. Крылов, В. Б. Синтез низкомолекулярных углеводных миметиков гепарина / В. Б. Крылов, H. Е Устюжанина, Н. Э. Нифантьев // Биоорганическая химия. - 2011. - Т. 37, № 6. - С. 745-779.

23. Кузнецова, Т. А. Коррекция нарушений иммунитета и гемостаза биополимерами из морских гидробионтов (экспериментальные и клинические аспекты) : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Кузнецова Татьяна Алексеевна;

[ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН]. - Владивосток, 2009. - 296 с.

24. Кузник, Б. И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии / Б. И. Кузник. - Чита : Экспресс-издательство, 2010. - 828 с.

25. Куликова, А. Н. Облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей на фоне сахарного диабета II типа (этиопатогенез, клиника, диагностика, хирургическое и медикаментозное лечение, профилактика) : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.27 / Куликова Алла Николаевна ; ГОУ ВПО «Саратовский гос. мед. университет Фед. агенства по здравоохранению и соцразвитию». - Саратов, 2013. - 39 с.

26. Лапу нова, Л. Л. Иммунологические изменения при некоторых заболеваниях сердечно-сосудистой системы / Л. Л. Лапунова // Медицинские новости. - 1996. - № 11. - С. 3-8.

27. Лебедев, К. А. Иммунология в клинической практике / К. А. Лебедев, И. Д. Понякина. - М. : Наука, 1998. - 388 с.

28. Лисенков, А. Н. Математические методы планирования многофакторных медико-биологических экспериментов / А. Н. Лисенков. — М. : Медицина, 1979.-314 с.

29. Лутай, М. И. Ангиопротекторное, противоатеросклеротическое действие ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента / М. И. Лутай // Украинский кардиологический журн. - 2002. - № 6. - С. 6.

30. Лутай, М. И. Атеросклероз: современный взгляд па патогенез / М. И. Лутай // Украинский кардиологический журн. — 2004. - № 1. — С. 22-34.

31. Макаров, И. В. Клинико-экспериментальное обоснование применения гравитационной терапии в комплексном лечении больных с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.27 / Макаров Игорь Валерьевич ; [Самарского гос. мед. унта]. - Самара, 2004. - С. 21-39.

32. Методология изучения системного воспаления / Е. Ю. Гусев, Л. Н. Юрченко, В. А. Черешнев, Н. В. Зотова // Цитокины и воспаление. - 2008. - Т. 7, № 1. - С. 15-25.

33. Молекулы адгезии бУСАМ-1 и 81САМ-1 и атеросклероз у мужчин / Д. Е. Гусев, Е. М. Пальцева, Б. Г. Потиевский [и др.] // Кардиология и -сердечногсосудистая хирургия. - 2010. - № 2. - С. 33-35.

34. Молекулы адгезии бУСАМ-1 и б1САМ-1 при различных формах ишемической болезни сердца / Д. Е. Гусев, Е. М. Пальцева, Б. Г. Потиевский [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2009. - № 2. - С. 1114.

35. Нагорнев, В. А. Атерогенез как отражение развития иммунного воспаления в сосудистой стенке / В. А. Нагорнев, О. А. Яковлева, С. В. Мальцева // Вести. РАМН. - 2000. - № 10. - С. 45-50.

36. Нагорнев, В. А. Аутоиммунные и воспалительные механизмы развития атеросклероза / В. А. Нагорнев, С. В. Мальцева // Архив патологии. -2005.-№5.-С. 6-15.

37. Нагорнев, В. А. Современные представления о патогенезе атеросклероза. / В. А. Нагорнев, А. Н. Восканьянц // Вестн. РАМН. - 2006. - № 9-10.-С. 66-74.

38. Никитин, Ю. П. Новые фундаментальные и прикладные основы атерогенеза / Ю. П. Никитин // Бюл. СО РАМН. - 2006. - № 2. - С. 6-14.

39. Панин, Л. Е. Обмен липопротеинов и атеросклероз / Л. Е. Панин // Бюл. СО РАМН. - 2006. - № 2. - С. 16-22.

40. Парахонский, А.П. Индукция и регуляция апоптоза в атерогенезе / А.П.Парахонский // Фундаментальные исследования. — 2006. - № 3 - стр. 6768.

41. Парфенова, Е. В. Терапевтический ангиогенез: достижения, проблемы, перспективы / Е. В. Парфенова, В. А. Ткачу к // Кардиологический вестник. - 2007. - Т. 2, № 2. - С. 5-15.

42. Пат. № 2335771 РФ, МПК G01N. Способ диагностики и прогноза системного воспаления с верификацией фаз и стадий / Гусев Е. Ю., Юрченко JI. Н., Черешнев В. А., Зотова Н. В., Копалова Ю. А.; заявитель и патентообладатель Институт иммунологии и физиологии УрО РАН (RU). - № 2006124894; заявл. 11.07.2006; опубл. 10.10.2008, Бюл. № 28. - 56 с.

43______Патофизиологические феномены необратимой ишемии нижних

конечностей / JL Н. Юрченко, В. В. Кузьмин, Е. Ю. Гусев [и др.] // Клинич. анестезиология и реаниматология. - 2008. - № 4. - С. 24-28.

44. Пигаревский, П. В. Морфометрическое исследование клеток иммунорегуляторного и эффекторного звеньев иммунитета в аорте и парааортальных лимфатических узлов при атерогенезе у человека / П. В. Пигаревский // Цитокины и воспаление. - 2002. - Т. 1, № 4. - С. 21-26.

45. Прогнозирование фибрилляции предсердий по содержанию сывороточных маркеров воспаления при артериальной гипертензии / JI. М. Василец, А. В. Агафонов, О. В. Хлынова [и др.] // Казанский мед. журн. -2012. - Т. 93, № 4. - С. 642-646.

46. Противотромботическая и геморрагическая активности фукоидана, выделенного из водоросли Fucus evanescen / H. H. Дрозд, H. T. Мифтахова, E. Ю. Савчик [и др.] // Эксперимент, клин, фармакология. - 2011. — Вып.74, № 5. - С. 26-30.

47. Роль нейтрофилов в воспалительной реакции при ишемической болезни сердца / А. Е. Филиппов, А. В. Чечеткин, В. А. Данильченко [и др.] // Лабораторная диагностика. - 2004. - № 1.-С. 11-13.

48. Роль нейтрофилов в деструкции сосудистого эндотелия при операциях реваскуляризации миокарда в условиях искусственного кровообращения / В. В. Новицкий, С. П. Чумакова, О. И. Уразова [и др.] // Бюл. Сиб. медицины. - 2005. - № 4. - С. 49-53.

49. Серик, С. А. Про- и противовоспалительные цитокины у больных с ишемической болезнью сердца при прогрессировании хронической сердечной

недостаточности [Электронный ресурс] / С. А. Серик, С. В. Степанова, В. И.

139

Волков // Украинский кардиологический журнал. - 2004. - № 4. - С. 18-21. -Режим доступа: http://www.rql.kiev.ua/cardio_j /2004/4/serik.htm (дата обращения 10.03.2011).

50. Сульфатированные полисахариды как ингибиторы рецепторной активности Р-селектина и Р-селектинзависимого воспаления / А. В. Семенов, А. В. Мазуров, М. Е. Преображенская [и др.] // Вопр. мед. хим. - 1999. — Т. 44, Вып. 2.-С. 135-143.

51. Факторы риска системы гемостаза при заболеваниях аорты, магистральных и периферических сосудов : метод, пособие / А. JI. Мелкумян, К. М. Морозов, Н. Н. Самсонова, Е. Г. Тутов; НЦССХ им. А. Н. Бакулева РАМН. - М., 2001.-36 с.

52. Фенотипическая характеристика лимфоцитов периферической крови при коронарном и мультифокальном атеросклерозе / А. С. Гольдерова, И. Н. Николаева, А. Н. Романова, В. А. Козлов [и др.] // Бюлл. Сиб. отделения РАМН. - 2011. - Том 31, N 3. - С. 27-32.

53. Филиппов, А. Е. Сосудистые молекулы адгезии (VCAM-1) как маркеры активности коронарного атеросклероза. Фундаментальные и прикладные исследования в области атеросклероза / А. Е. Филиппов, Т. А. Шацева, А. С. Свистов // Мед. акад. журн. - 2006. - Т. 7, № 1, прил. - С. 23-29.

54. Филонова, Н. В. Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.03.09 / Филонова Наталья Владимировна; [ФГБУ «НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН»]. -Владивосток : Б. и., 2012. - 22 с. : ил.

55. Хаитов, Р. М. Экологическая иммунология / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, X. И. Истамов. -М. : ВНИРО, 1995. - 218 с.

56. Хроническое системное воспаление как типовой патологический процесс / Е. Ю. Гусев, JI. Н. Юрченко, В. А. Черешнев [и др.] // Цитокины и воспаление.-2008.-№4.-С. 3-10.

57. Швальб, П. Г. К вопросу о системной воспалительной реакции у больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей при различных методах оперативного лечения [Электронный ресурс] / П. Г. Швальб, Р. Е. Калинин, А. А. Никифоров // Науч.-мед. вестн. Центрального Черноземья. - 2007. — № 30. - С. 122-125. - Режим доступа: http://www.vsma.ac.ru/publ/vest/030/site/index39.html (дата обращения 20.09.2010).

58. Шевченко, Н. М. Строение, биологическая активность полисахаридов некоторых бурых водорослей и продуктов их ферментативной трансформации : дис. ... канд. хим. наук : 02.00.10 / Шевченко Наталья Михайловна; [Тихоокеан. ин-т биоорган, химии ДВО РАН]. - Владивосток, 2001.-296 с. : ил.

59. Ширинский, И. В. Механизмы действия статинов, их эффективность и безопасность у больных аутоиммунными заболеваниями : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Ширинский Иван Валерьевич ; [НИИ клинической иммунологии СО РАМН]. - Новосибирск, 2009. — 20 с.

60. Шунтов, В. П. Биология Дальневосточных морей России. Т. 1 / В. П. Шунтов. — Владивосток : ТИНРО-центр, 2001. — 579 с.

61. Щупакова, А. Н. Оценка взаимосвязи иммунного статуса и холестеринового профиля у пациентов с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей / А. Н. Щупакова, В. В. Лагутчев // Вестник ВГМУ. - 2011. - Т. 10, № 1.-С. 69-76.

62. Ярилин, А. А. Апоптоз: природа феномена и его роль в норме и при патологии: избранные лекции / А. А. Ярилин // Актуальные проблемы патофизиологии / под ред. Б. Б. Мороза. -М. : Медицина, 2001. - С. 13-56.

63. A comparative study of the anti-inflammatory, anticoagulant, antiangiogenic, and antiadhesive activities of nine different fucoidans from brown seaweeds / A. Cumashi, N. A. Ushakova, M. E. Preobrazhenskaya [et al.] // Glycobiology. - 2007. - Vol. 17, № 5. - P. 541-552.

64. A quantitative method to detect fucoidan in human plasma using a novel antibody / M. R. Irhimeh, J. H. Fitton, R. M. Lowenthal, P. Kongtawelert // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. - 2005. - Vol. 27, № 10. - P. 705-711.

65. A role for interleukin 4 in production of matrix metalloproteinase 1 by human aortic smooth muscle cells / T. Sasaguri, N. Arima, A. Tanimoto [et al.] // Atherosclerosis.-1998.-Vol. 13 8, №2.-P. 247-253. . ... .....

66. A sulfated polysaccharide, fucans, isolated from brown algae Sargassum vulgare with anticoagulant, antithrombotic, antioxidant and antiinflammatory effects / C. M. Dore, A. M. G. Faustino, L. S. Will [et al.] // Carbohydr. Polym. - 2013. - Vol. 2, № 91 (1). - P. 467-475.

67. Accumulation of plasma cells in atherosclerotic lesions of Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits / Y. Sohma, H. Sasano, R. Shiga [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1995. - Vol. 92, № 11. - P. 4937-4941.

68. Activation of arterial wall dendritic cells and breakdown of self-tolerance in giant cell arteritis / W. Ma-Krupa, M. S. Jeon, S. Spoerl [et al.] // J. Exp. Med. - 2004. - Vol. 199, №2.-P. 173-183.

69. Acute T-cell activation is detectable in unstable angina / G. G. Neri Serneri, D. Prisco, F. Martini [et al.] // Circulation. - 1997. - Vol. 95, № 7. - P. 1806-1812.

70. Adhesion molecules and cardiovascular risk in peripheral arterial disease. Soluble vascular cell adhesion molecule-1 improves risk stratification / A. Silvestro, G. Brevetti, V. Schiano [et al.] // Thromb. Haemost. - 2005. - Vol. 93, № 3.-P. 559-563.

71. Affinity of low molecular weight fucoidan for P-selectin triggers its binding to activated human platelets / L. Bachelet, I. Bertholon, D. Lavigne [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. - 2009. - Vol. 1790, №2.-P. 141-146.

72. An inflammatory pathway of IFN-y production in coronary atherosclerosis / H. Ranjbaran, S. Sokol, A. Gallo [et al.] // J. Immunol. - 2007. -Vol. 178, № l.-P. 592-604.

73. An overview of inflammatory cytokines cascade in chronic heart failure / J. T. Parissis, S. Adamopoulos, S. M. Karas [et al.] // Hellenic. J. Cardiology. -2002.-№43.-P. 18-28.

74. Andersson, J. Adaptive immunity and atherosclerosis / J. Andersson, P. Libby, G. K. Hansson // Clinical. Immunology. - 2010. - Vol. 134, № 1. - P. 33-46.

75. Anti-inflamantory drugs in experimental . . atherosclerosis. 7. Spontaneous atherosclerosis in WHHL rabbits and inhibitions by cortisone acetate / A. N. Maklieja, S. Bloom, R. Muesing [et al.] // Atherosclerosis. - 1989. - Vol. 76, №2-3.-P. 155-161.

76. Anti-inflammatory effect of fucoidan extracted from Ecklonia cava in zebrafish model / S. H. Lee, C. I. Ko, Y. Jee [et al.] // Carbohydr. Polym. - 2013. -Vol. 30, №92(1).-P. 84-89.

77. Anti-inflammatory effects of fucoidan through inhibition of NF-kB, MAPK and Akt activation in lipopolysaccharide-induced BV2 microglia cells / H. Y. Park, M. H. Han, C. Park [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2011. - Vol. 49, № 8. -P. 174578. Antitumor and antimetastatic activity of fucoidan, a sulfated

polysaccharide isolated from the Okhotsk sea Fucus evanescens brown alga / T. V. Alekseyenko, S. Y. Zhanayeva, A. A. Venediktova [et al.] // Bull. Exp. Biol. Med. -2007. - Vol. 143, № 6. - P.730-732.

79. Aschoff, L. Atherosclerosis : in lectures on pathology / L. Aschoff. -NY. rHoeber, 1924.-P. 131-153.

80. Association of soluable cell adhession molecules with Ancle-brachial index in a biethnic cohort of predominantly hypertensive individuals Mahyar Khaleghi / A. Zeenat, H. M. Thomas, Jr. Stephen [et al.] // Clin. Chem. - 2008. -Vol. 54, № 11.-P. 1788-1795.

81. Aviezer, D. Differential structural requirement of heparin and heparan sulfate proteoglycans that promote binding of basic fibroblast growth factor to its receptor / D. Aviezer, E. Levy, M. Safran [et al.] // J. Biol. Chem. - 1994. - Vol. 269, № l.-P. 114-121.

82. B cell depletion reduces the development of atherosclerosis in mice / H. Ait-Oufella, O. Herbin, J.-D. Bouaziz [et al.] // J. Exp. Med. - 2010. - Vol. 207, № 8.-P. 1579-1587.

83. Barks, J. L. TNF-alpha and IL-4 synergistically increase vascular cell adhesion molecule-1 expression in cultured vascular smooth muscle cells / J. L. Barks, J. J. McQuillan, M. F. Iademarco // J.. Immunol.,,- Vol. 159, № 9. - P. 45324538.

84. Benditt, E. P. The origin of atherosclerosis / E. P. Benditt // Sci. Am. -1977.-№236.-P. 74-85.

85. Berteau, O. Sulfated fucans, fresh perspectives: structures, functions, and biological priperties of sulfated fucans and overview of enzymes active toward this class of polysaccharide / O. Berteau, B. Mulloy // Glycobiology. - 2003. - Vol. 13, №6.-P. 29-40.

86. Bevilacqua, M. P. Interleukin 1 acts on cultured human vascular endothelium to increase the adhesion of polymorphonuclear leukocytes, monocytes and related leukocytes cell lines / M. P. Bevilacqua, J. S. Pober // J. Clin. Invest. — 1989.-Vol. 76, №5.-P. 2003-2011.

87. Bifunctional effects of fucoidan on the expression of inducible Nitric oxide synthase / J. W. Yang, S. Y. Yoon, S. J. Oh [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2006. - Vol. 346, № 1. - P. 345-350.

88. Biological effects of fucoidan isolated from Fiicus vesiculosis on thrombosis and vascular cells / K. W. Kwak, K. S. Cho, O. J. Hahn [et al.] // Korean J. Hematol.-2010.-Vol. 45, № l.-P. 51-57.

89. Bjorkbacka, H. Multiple roles of toll-like receptor signaling in atherosclerosis / H. Bjorkbacka // Curr. Opin. Lipidol. - 2006. - Vol. 17, № 5. - P. 527-533.

90. Blann, A. Soluble L-selectin in peripheral arterial disease: relationship with soluble E-selectin and soluble P-selectin / A. Blann, J. Morris, C. McCollum // Atherosclerosis. - 1996. - Vol. 126, № 2. - P. 227-331.

91. Blockade of Interleukin-12 function by protein vaccination attenuates atherosclerosis / A. D. Hauer, C. Uyttenhove, P. de Vos [et al.] // Circulation. -2005.-Vol. 112, №7. -P. 1054-1062.

92. Bobryshev, Y. V. Dendritic cells and their role in atherogenesis / Y. V. Bobryshev // Lab. Invest. - 2010. - Vol. 90, № 7. - P. 970-984.

93. Bobryshev, Y. V. Dendritic.cells in atherosclerosis: „current status of the problem and clinical relevance / Y. V. Bobryshev // Eur. Heart J. — 2005. — Vol. 26, № 17.-P. 1700-1704.

94. Botanical Drug Products : guidance for industry [Электронный ресурс] / US Department Health Human Services, FDA; Center Drug Evaluation Research (CDER). - 2004. 52 p. Режим доступа: http://www.fda.gov/cder/guidance/index.htm (дата обращения 20.05.2011).

95. Brevetti, G. Cellular adhesion molecules and peripheral arterial disease / G. Brevetti, V. Schiano, M. Chiariello // Vascular. Med. - 2006. - Vol. 11, № 1. -P. 39-47.

96. Cardioprotective activity of Cladosiphon okamuranus fucoidan against isoproterenol induced myocardial infarction in rats / P. Thomes, M. Rajendran, B. Pasanban, R. Rengasamy // Phytomedicine. - 2010. - Vol. 18, № 1. - P. 52-57.

97. CD8+ T lymphocytes regulate the arteriogenic response to ischemia by in!ltrating the site of collateral vessel development and recruiting CD4+ mononuclear cells through the expression of interleukin-16 / E. Stabile, T. Kinnaird, A. la Sala [et al.]// Circulation.-2006.- Vol.3.- P. 118-124.

98. CDllc(+) dendritic cells maintain antigen processing, presentation capabilities, and CD4(+) T-cell priming efficacy under hypercholesterolemic conditions associated with atherosclerosis / R. R. Packard, E. Maganto-Garcia, I. Gotsman [et al.] // Circ. Res. - 2008. - Vol. 103, № 9. - P. 965-973.

99. CDld-dependedent activation of NKT cells aggravates atherosclerosis / E. Tupin, A. Nicoletti, R. Ethage [et al.] // J. Exp. Med. - 2004. - Vol. 199, № 3. -P. 417-422.

100. Cerivastatin reduces cytokine - induced surface expression of ICAM-1 via increased shedding in human endothelial cells / M. Landsberger, B. Wolff, F. Jantzen [et al.] // Atherosclerosis. - 2007. - Vol. 190, № 1. - P. 43-52.

101. Changes in serum interleukin-8 and interleukin-12 levels in patients with ischemic heart disease in a Chinese population / R. H. Zhou, Q. Shi, H. Q. Gao, B. J. Shen // J. Atheroscler. Thromb. - 2001. - Vol. 8, № 1. - P. 30-32.

102. Chen, D. Sulfated polysaccharides and immune response: promoter or inhibitor? / D. Chen, X. Z. Wu, Z. Y. Wen // Panminerva Med. - 2008. - Vol. 50, № 2.-P. 177-183.

103. Cholesterol-lowering properties and safety of chitosan / R. Ylitalo, S. Lehtinen, E. Wuolijoki [et al.] // Drug Res. - 2002. - Vol. 52, № 1. - P. 1-7.

104. Circulating adhesion molecules VCAM-1, ICAM-1, and E-selectin in carotid atherosclerosis and incident coronary heart disease cases: the atherosclerosis risk in communities (ARIC) study / S. J. Hwang, C. M. Ballantyne, A. R. Sharrett [et al.] // Circulation. - 1997. - Vol. 96, № 12. - P. 4219-4225.

105. Circulating blood markers and functional impairment in peripheral arterial disease / M. M. McDermott, K. Liu, L. Ferrucci [et al.] // J. Am. Gere. Society. - 2008. - Vol. 56, № 8.-P. 1504-1510.

106. Circulating soluble adhesion molecules ICAM-1 and VCAM-1 and incident coronary heart disease: the PRIME Study / G. Luc, D. Arveiler, A. Evans [etal.]//Atherosclerosis.-2003.-Vol. 170, № l.-P. 169-176.

107. Circulating vascular cell adhesion molecule-1 correlates with the extent of human atherosclerosis in contrast to circulating intercellular adhesion molecule-1, E-selectin, P-selectin, and thrombomodulin / K. Peter, P. Nawroth, C. Conradt [et al.] // Arterioscler Thromb. Vase. Biol. - 1997. - Vol. 17, № 3. - P. 505-512.

108. Collagen synthesis by vascular smooth muscle cells in the presence of antiproliferative polysaccharides / D. Logeart, D. Letoumeur, J. Joze-fonvicz, P. Kern [et al.] //J. Biomed. Mater. Res. - 1996. - Vol. 30, № 4. - P. 501-508.

109. Correction by sodium nucleinate of immunologic disorders in patients with atherosclerotic lesions of the arteries of the lower limbs / M. V. Danilenko, V. M. Zemskov, A. N. Chugunov[et al.] // Khirurgiia (Mosk). - 1991. - № 4. - P. 108111.

110. C-reactive protein, interleukin-6, and soluble adhesion molecules as predictors..of ^progressive, peripheral »atherosclerosis in the general population: Edinburgh Artery Study / I. Tzoulaki, G. D. Murray, A. J. Lee [et al.] // Circulation. - 2005. - Vol. 112, № 7. - P. 976-983.

111. Cui, Y. Q. Fucoidan: advances in the study of it's antiinflammatory and antioxidative effects / Y. Q. Cui, D. Z. Luo, X. M. Wang // Yao Xue Xue Bao. -2008.-Vol. 43, № 12.-P. 1186-1189.

112. Curtiss, L. K. Emerging role of Toll-like receptors in athero-sclerosis / L. K. Curtiss, P. S. J. Tobias // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. 340-345.

113. Cytokines and cytokine receptors in advanced heart failure: an analysis of the cytokine database from the vesnarinone trial (VEST) / Deswal A., Petersen N.J., Feldman A.M. [et al.] // Circulation. - 2001. - Vol. 103, № 16. - P. 20552059.

114. Daugherty, A. T lymphocytes in atherosclerosis: the Yin-Yang of Thl and Th2 influence on lesion formation / A. Daugherty, L. Debra // Circ. Res. - 2002. -Vol. 90, № 10.-P. 1039-1040.

115. Davignon, J. Role of endothelial dysfunction in atherosclerosis / J. Davignon , P. Ganz // Circulation. -2004.- Vol.109.- P.III27-III32.

116. Mayranpaa, M.T. Desquamation of human coronary artery endothelium by human mast cell proteases: implications for plaque erosion / M.I Mayranpaa, H.M. Heikkila, K.A Lindstedt et al. // Coronary Artery Disease. — 2006. — Vol. 17. —P. 611-621.

117. Delvaeye, M. Coagulation and innate immune responses: can we view them separately? / M. Delvaeye, E. M. Conway // Blood. - 2009. - Vol. 114, № 12. -P. 2367-2374.

118. Determination of alginic sodium diester orally disintegrating tablets / L. J. Ren, F. Su, T. Zhang, L. Yu // Chin. J. Pharm. - 2008. - № 39. - P. 853-854.

119. Development of a fucoidan-specific antibody and measurement of fucoidan in serum and urine by sandwich ELISA / Y. Tokita, K. Nakajima, H. Mochida [et al.] // Biosci. Biotechnol. Biochem. - 2010. - Vol. 74, № 2. - P. 350........ 357...............

120. Disruption of TGF-beta signaling in T cells accelerates atherosclerosis / A. K. Robertson, M. Rudling, X. Zhou [et al.] // J. Clin. Invest. - 2003. - Vol. 112, №9.-P. 1342-1350.

121. Effect of atorvastatin and Clopidogrel on cellular immune function / K. Kröger, M. Lindemann, E. Kreuzfelder [et al.] // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids.-2003.-Vol. 68, №3.-P. 251-255.

122. Elevated soluble CD40 ligand is related to the endothelial adhesion molecules in patients with acute coronary syndrome / D. Q. Peng, S. P. Zhao, Y. F. Li [et al.]//Clin. Chim. Acta. - 2002. - Vol. 319, № l.-P. 19-26.

123. Elevation of serum levels of the anti-inflammatory cytokine inter-leukin-10 and decreased risk of coronary events in patients with unstable angina / I. Anguera, F. Miranda-Guardiola, X. Bosch [et al.] // Am. Heart J. - 2002. - Vol. 144, №5.-P. 811-817.

124. Emergence of dendritic cells in rupture-prone regions of vulnerable carotid plaques / A. Yilmaz, M. Lochno, F. Traeg [et al.] // Atherosclerosis. - 2004. -Vol. 176,№ l.-P. 101-110.

125. Endothelial dysfunction and cardiovascular risk prediction in peripheral arterial disease: additive value of flow-mediated dilation to ankle-brachial pressure index / G. Brevetti, A. Silvestro, V. Schiano, M. Chiariello // Circulation. -2003. - Vol. 108, № 17. - P. 2093-2098.

126. Evaluation of serum levels of solubilized adhesion molecules and cytokine receptors in coronary heart disease / M. Porsch-Oezcuememez, D. Kunz, LI. U. Kloer, C. Luley // J. Am. Coll. Cardiol. - 1999. - Vol. 34, № 7. - P. 19952001.

127. Exogenous interferon-y enhances atherosclerosis in apolipoprotein E-/- mice / S. C. Whitman, P. Ravisankar, H. Elam, A. Daugherty // Am. J. Pathol. -2000.-Vol. 157, № 6.-P. 1819-1824.

128. Expansion of circulating Toll-like receptor 4-positive monocytes in patients with acute coronary syndrome / H. Methe, J. O. Kim, S. Kofler [et al.] // Circulation. - 2005. - Vol. 111, № 20. - P. 2654-2661.

129. Expression of activation antigens on lymphocyte surface and circulating plateletleukocyte aggregates in ischaemic heart disease / A. Czyz, E. Kolacz, D. Angerer [et al.] // Kardiol. Pol. - 2005. - Vol. 62, № 3. - P. 189-200.

130. Expression of Toll-like receptors in human atherosclerotic lesions: a possible pathway for plaque activation / K. Edfeldt, J. Swedenborg, G. K. Hansson, Z. Q. Yan//Circulation. - 2002. - Vol. 105, № 10.-P. 1158-1161.

131. Expression of Toll-like receptors on human platelets / R. Shiraki, N. Inoue, S. Kawasaki [et al.] // Thromb. Res. - 2004. - Vol. 113, № 6. - P. 379-385.

132. Fonseca, R. J. Effects of polysaccharides enriched in 2,4-disulfated fucose units on coagulation, thrombosis and bleeding. Practical and conceptual implications / R. J. Fonseca, G. R. Santos, P. A. Mourao // Thromb. Haemost. -2009. - Vol. 102, № 5. - P. 829-836.

133. Frantz, S. Mechanisms of disease: Toll-like receptors in cardiovascular disease / S. Frantz, G. Ertl, J. Bauersachs // Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. - 2007. - Vol. 4, № 8. - P. 444-454.

134. Frostegard, J. Autoimmunity, oxidized LDL and corticovascular disease / J. Frostegard // Autoimmun. Rev. 2001. - Vol. 1, № 4. - P. 233-237.

135. Fucan inhibits Chinese hamster ovary cell (CHO) adhesion to fibronectin by binding to the extracellular matrix / H. A. Rocha, C. R. Franco, E. S. Trindade [et al.] // Planta Med. - 2005. - Vol. 71, № 7. - P. 628-633.

136. Fucans, sulfated polysaccharides extracted from brown seaweeds,

inhibit vascular smooth muscle cell proliferation. II. Degradation and molecular

weight effect / D. Logeart, S. Prigent-Richard, C. Boisson-Vidal [et al.] // Eur. J.

Cell Biol. - 1997. - Vol. 74, № 4. - P. 385-390.

149

137. Fucans, sulfated polysaccharides extracted from brown seaweeds, inhibit vascular smooth muscle cell proliferation. I. Comparison with heparin for antiproliferative activity, binding and internalization / D. Logeart, S. Prigent-Richard, C. Boisson-Vidal [et al.] // Eur. J. Cell Biol. - 1997. - Vol. 74, № 4. - P. 376-384.

.138. Fucoidan a sulfated polysaccharide from brown algae is a potent modulator of connective tissue proteolysis / K. Senni, F. Gueniche, A. Foucault-Bertaud [et al.] // Arch. Biochem. Biophys. - 2006. - Vol. 445, № 1. - P. 56-64.

139. Fucoidan inhibits smooth muscle cell proliferation and reduces mitogen-activated protein kinase activity / P. Religa, M. Kazi, J. Thyberg [et al.] // Eur. J. Vase. Endovasc. Surg. - 2000. - Vol. 20, № 5. - P. 419-426.

140. Fucoidan, a sulfated polysaccharide from brown algae, against myocardial ischemia-reperfusion injury in rats via regulating the inflammation response / C. Li, Y Gao, Y Xing [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2011. - Vol. 49, №9.-P. 2090-2095.

141. , Fucoidan: advances in the study of its antiinflammatory and antioxidative effects / Y. Q. Cui, D. Z. Luo, X. M. Wang // Acta Pharmaceutica Sinica.-2008.-Vol. 43, № 12.-P. 1186-1189.

142. Gearing, A. J. H. Circulating adhesion molecules in disease / A. J. H. Gearing // Immunol. Today. - 1993. - Vol. 14, №» 10. - P. 506-511.

143. Girn, I I. R. An overview of cytokine interactions in atherosclerosis and implications for peripheral arterial disease / H. R. Girn, N. M. Orsi, S. Iiomer-Vanniasinkam // Vase. Med. - 2007. - Vol. 12, № 4. - P. 299-309.

144. Goldstein, J. L. Atherosclerosis: the lowdensity lipoprotein receptor hypothesis / J. L. Goldstein, M. S. Brown // Metabolism. - 1977. - Vol. 26, № 11. -P. 1257-1275.

145. Gordon, S. Monocyte and macrophage heterogeneity / S. Gordon, P. R. Taylor // Nat. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 5, № 12. - P. 953-964.

146. Gordon, S. Pattern recognition receptors: doubling up for the innate

immune response / S. Gordon // Cell. - 2002. - Vol. 111, № 7. - P. 927-930.

150

147. Grainger, D. J. Transforming growth factor beta and atherosclerosis: so far, so good for the protective cytokine hypothesis / Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2004. - Vol. 24. № 3. - P. 399-404.

148. Guan, H. S. Study on the new drug Polysaccharide sulfate sodium / H. S. Guan // Med. Res. - 1999. - № 28. - P. 8-9.

149. Han, L-K. Anti-obesity effects of fucoidan prepared from Cladosiphon .. -Okamuranus tokida (Okinawamozuku) / L-K. Han, G. Kensaku, O. Hiromichi // Japan. J. Constitution. Med. - 2004. - Vol. 66, № 1-2. - P. 55-60.

150. Hansson, G. K. Accumulation of IgG and complement factor C3 in human arterial endothelium and atherosclerotic lesions / G. K. Hansson, J. Holm, J. G. Krai // Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. A. - 1984. - Vol. 92, № 6. - P. 429-435.

151. Hansson, G. K. Inflammation and atherosclerosis / G. K. Hansson, A. L. Robertson, C. Soderberg-Naucler //Ann. Rev. Pathol. Mech. Dis. - 2006. - № 1. - P. 297-329.

152. Hansson, G. K. The immune response in atherosclerosis: a double-edged sword / G. K. Hansson, P. Libby // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - Vol. 6, № 7.-P. 508-519.

153. Hansson, G. K. The immune system in atherosclerosis / G. K. Hansson, A. Hermansson // Nat. Immunol. - 2011. - Vol. 12, № 3. - P. 204-212.

154. Harvey, E. J. Interferon-gamma and atherosclerosis: pro- or antiatherogenic? / E. J. Harvey, D. P. Ramji // Cardiovasc. Res. - 2005. — Vol. 67, № l.-P. 11-20.

155. Hasdai, D. Increased serum concentration of interleukin 1(3 in patient with coronary artery disease / D. Hasdai, M. Scheinowitz // Heart. — 1996. — Vol. 76,№ l.-P. 24-28.

156. Harikrishnan, R. Immunomodulatory effect of sodium alginate enriched diet in kelp grouper Epinephelus brneus against Streptococcus iniae / R. Harikrishnan, M. Kim, J.Kim .// Fish Shellfish Immunol. -2011.- Vol. 30, № 2,-P.543-549.

157. Horkko, S. Immunological responses to oxidized LDL / S. Horkko, C. J. Binder, P. X. Shaw // Free Radic. Biol. Med. - 2000. - Vol. 28, № 12. - P. 1171 -1179.

158. Human atherosclerotic plaque alternative macrophages display low cholesterol handling but high phagocytosis because of distinct activities of the PPAR and LXRa pathways / G. Chinetti-Gbaguidi, M. Baron, M. A. Bouhlel [et al.] // Circ. Res. - 2011. - Vol. 108, № 8. - P. 985-995.

159. Hypercholesterolemia is associated with a T helper (Th) 1/Th2 switch of the autoimmune response in atherosclerotic apo E-knockout mice / X. H. Zhou, G. Paulsson, S. Stemme, G. K. Flansson // J. Clin. Invest. - 1998. - Vol. 101, № 8. -P. 1717-1725.

160. Hypolipidemic effect of fucoidan from Laminaria japonica in hyperlipidemic rats / L. Huang, K. Wen, X. Gao, Y. Liu // Pharm. Biol. - 2010. -Vol. 48, № 4. - P. 422-426.

161. Immune mechanisms in atherosclerosis / G. K. Hansson, L. Jonasson, P. S. Seifert, S. Stemme // Arteriosclerosis (Dallas, Tex.). - 1989. - Vol. 9, № 5. -P. 567-578.

162. Immunology of atherosclerosis. Demonstration of heat shock protein 60 expression and T lymphocytes bearing alpha/beta or gamma/delta re-ceptor in human atherosclerotic lesions / R. Kleindienst, Q. Xu, J. Willeit [et al.] // Am. J. Path.- 1993.-Vol. 142, №6.-P. 1927-1937.

163. Immunomodulation of atherosclerosis with a vaccine / P. K. Shah, K. Y. Chyu, G. N. Fredrikson, J. Nilsson // Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. - 2005. -Vol. 2, № 12.-P. 639-646.

164. Immunomodulatory function of murine NK cell activity by alginate / E.-W. Son, K. Yang, D. Rhee, S. Pyo //Archives of Pharmacal. Research . -2005.-Vol.28,№ 11.- P. 1282-1286.

165. In vitro antioxidant and in vivo antiinflammatory potential of crude polysaccharide from Turbinaria ornata (Marine Brown Alga) / S. Ananthi, H. R.

Raghavendran, A. G. Sunil [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2009. - Vol. 48, № 1. -P. 187-192.

166. Increased effect of fiacoidan on lipoprotein lipase secretion in adipocytes / T. Yokota, M. Nagashima, M. Ghazizadeh, O. Kawanami // Life. -2009.-Vol. 84, № 15-16.-P. 523-529.

167. Increased inflammatory status and. higher prevalence of threevessel coronary artery disease in patients with concomitant coronary and peripheral atherosclerosis / G. Brevetti, F. Piscione, A. Silvestro [et al.] // Thromb. Haemost. -2003.-Vol. 89, №6.-P. 1058-1063.

168. Increased soluble E-selectin levels in type 2 diabetic patients with peripheral arterial disease / M. S. Boulbou, G. N. Koukoulis, K. G. Vasiou [et al.] // Int. Angiol.-2004.-Vol. 23, № l.-P. 18-24.

169. Induction of interferon-gamma production in Thl CD4+ T cells: evidence for two distinct pathways for promoter activation / J. Yang, T. L. Murphy, W. Ouyang, K. M. Murphy // Eur. J. Immunol. - 1999. - Vol. 29, № 2. - P. 548555.

170. Induction of regulatory T cell type 1 response reduces the development of atherosclerosis in apolipoprotein E- knockout mice / Z. Mallat, A. Gojova, V. Brun [et al.] // Circulation. - 2003. - Vol. 108, № 10. - P. 1232-1237.

171. Inflammatory status and endothelial function in asymptomatic and symptomatic peripheral arterial disease / A. Silvestro, .F. Scopacasa, A. Ruocco [et al.] // Vase. Med. - 2003. - Vol. 8, № 4. - P. 225-232.

172. Inflammatory, haemostatic, and rheological markers for incident peripheral arterial disease: Edinburgh Artery Study / I. Tzoulaki, G. D. Murray, A. J. Lee [et al.] // Eur. Heart. J. - 2007. - Vol. 28, № 3. - P. 354-362.

173. Influence of interferon-gamma on the extent and phenotype of dietinduced atherosclerosis in the LDLR-deficient mouse / C. Buono, C. E. Come, G. Stavrakis [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2003. - Vol. 23, № 3. - P. 454-460.

174. Inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses by Sargassum hemiphyllum sulfated polysaccharide extract in RAW 264.7 macrophage cells / P. A. Hwang, S. Y. Chien, Y. L. Chan [et al.] // J. Agric. Food Chern. - 2011. - Vol. 59, № 5. - P. 2062-2068.

175. Inhibitory effect of fucoidan on Nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated primary ..microglia. L Y. Q. Cui, L. J.. Zhang, T. Zhang [et al.] // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. - 2009. - Vol. 16, № 4. - P. 422-428.

176. Inhibitory effects of fucoidan on activation of epidermal growth factor receptor and cell transformation in JB6 C141 cells / N. Y. Lee, S. P. Ermakova, T. N Zvyagintseva [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2008. - Vol. 46, № 5. - P. 17931800.

177. Innate and acquired immunity in atherogenesis / C. J. Binder, M. K. Chang, P. X. Shaw [et al.]//Nat. Med. - 2002.-Vol. 8,№ ll.-P. 1218-1226.

178. Innate and adaptive immunity in the pathogenesis of atherosclerosis / G. K Hansson, P. Libby, U. Schonbeck, Z. Q. Yan // Circ. Res. - 2002. - № 91. - P. 281-291.

179. Interleukin-1 receptor antagonist expression in human endothelial cells and atherosclerosis / R. Dewberry, H. Holden, D. Crossman, S. Francis // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2000. - Vol. 20, № 11. - P. 2394-2400.

180. Interleukin-17 producing CD4+ effector T cells develop via a lineage distinct from the T helper type 1 and 2 lineages / L. E. Harrington, R. D. Hatton, P. R. Mangan [et al.] // Nat. Immun. - 2005. - Vol. 6, № 11. - P. 1123-1132.

181. Interleukin-4 augments acetylated LDL-induced cholesterol esterification in macrophages / J. A. Cornicelli, D. Butteiger, D. L. Rateri [et al.] // J. Lipid. Res. - 2000. - Vol. 41, № 3. - P. 376-383.

182. Interleukin-6 exacerbates early atherosclerosis in mice / S. A. Huber, P. Sakkinen, D. Conze [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19, № 10.-P. 2364-2367.

183. Interleukin-8 as a sensitive marker of unstable coronary artery dis-ease / T. Kanda, Y. Hirao, S. Oshima [et al.] // Amer. J. Cardiol. - 1996. - Vol. 77, № 4. -P. 304-307.

184. Interleukins in atherosclerosis: molecular pathways and therapeutic potential / J. H. von der Thusen, J. Kuiper, T. J. van Berkel, E. A. Biessen // Pharmacol. Rev..-2003.v-.Vol.-55, №1. - P. -133-166.. -

185. Janet, H. Fitton therapies from Fucoidan: multifunctional marine polymers /H. Janet//Mar. Drugs. -2011. - Vol. 9, № 10. - P. 1731-1760.

186. Kearney, J. F. Immune recognition of OxLDL in atherosclerosis / J. F. Kearney//J. Clin, Invest.-2000.-Vol. 105,№ 12.-P. 1683-1685.

187. Kim, M. J. Inhibitory effects of fucoidan in 3T3-L1 adipocyte differentiation / M. J. Kim, U. J. Chang, J. S. Lee // Mar. Biotechnology. - 2009. -Vol. 11, №5.-P. 557-562.

188. Kinetic analysis of heparin and glucan sulfates binding to P-Selectin and its impact on the general understanding of selectin inhibition / D. Simonis, J. Fritzsche, S. Alban, G. Bendas // Biochemistry. - 2007. - Vol. 46, № 20. - P. 61566164.

189. Levels of expression of P-selectin, E-selectin, and intercellular adhesion molecule-1 in coronary atherectomy specimens from patients with stable and unstable angina pectoris / A. N. Tenaglia, A. J. Buda, R. G. Wilkins [et al.] // Am. J. Cardiol. - 1997. - Vol. 79, № 6. - 742-747.

190. Libby, P. Vascular endothelium and atherosclerosis /P.Libby, M.Aikawa , M.K.Jain // Handb. Exp. Pharmacol. - 2006. - Vol. 176 .- P. 285-306.

191. Libby, P. Inflammation in atherosclerosis / P. Libby // Nature. - 2002. — Vol. 420, № 6917. - P. 868-874.

192. Libby, P. Vascular endothelium and atherosclerosis / P.Libby, M. Aikawa, M.Jain // Handb Exp Pharmacol. - 2006.- Vol. 176.- P.285-306.

193. Ligand of scavenger receptor class A indirectly induces maturation of human blood dendritic cells via production of tumor necrosis factor / J.-O. Jin, H.Y. Park, Q.Xu [et al.]//Blood. - 2009. - Vol. 113, №23.-P. 5839-5847.

155

194. Long-term interleukin-6 levels and subsequent risk of coronary heart disease: two new prospective studies and a systematic review / J. Danesh, S. Kaptoge, A. G. Mann [et al.] // PLoS. Med. - 2008. - Vol. 5, № 4. - P. 78.

195. Low molecular weight fucoidan increases VEGF165-induced endothelial cell migration by enhancing VEGF165 binding to VEGFR-2 and NRP1 / A. C. Lake, R. Vassy, M. di Benedetto [et al.] // J. Biol. Chem. - 2006. - Vol. 281, №49.-P. 37844-37852.

196. Low molecular weight fucoidan prevents intimal hyperplasia in rat injured thoracic aorta through the modulation of matrix metalloproteinase-2 expression / H. Hlawaty, N. Suffee, A. Sutton [et al.] // Biochem. Pharmacol. -2011.-Vol. 81, №49.-P. 233-243].

197. Low molecular weight fucoidan prevents neointimal hyperplasia in rabbits iliac artery instent restenosis model / J.-F. Deux, A. Meddahi-Pelle, A. F. L. Blanche [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2002. - Vol. 22, № 10. - P. 1604-1609.

198. Low numbers of FOXP3 positive regulatory T cells are present in all developmental stages of human atherosclerotic lesions / O. J. de Boer, J. J. van der Meer, P. Teeling [et al.] // PLoS ONE. - 2007. - Vol. 2. - P. 779.

199. Low-grade chronic inflammation in regions of the normal mouse arterial intima predisposed to atherosclerosis / J. Jongstra-Bilen, M. Haidari, S.-N. Zhu [et al.] // J. Exp. Med. - 2006. - Vol. 203, № 9. - P. 2073-2083.

200. Lumeng, C. N. Obesity induces a phenotypic switch in adipose tissue macrophage polarization / C. N. Lumeng, J. L. Bodzin, A. R. Saltiel // J. Clin. Invest. - 2007. - Vol. 117, № 1. - P. 175-184.

201. Major, A. S. B-lymphocyte deficiency increases atherosclerosis in LDL receptor-null mice / A. S. Major, S. Fazio, M. F. Linton // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.-2002.-Vol. 22, № 11.-P. 1892-1898.

202. Mallat, Z. Regulatory T-cell immunity in atherosclerosis / Z. Mallat, H. Ait-Oufella, A. Tedgui // Trends Cardiovasc. Med. - 2007. - Vol. 17, № 4. - P. 113-118.

203. Marine Pharmacology in 2009-2011 : marine compounds with antibacterial, antidiabetic, antifungal, anti-Inflammatory, antiprotozoal, antituberculosis, and antiviral activities; affecting the immune and nervous systems, and other miscellaneous mechanisms of action : review / A. M. S. Mayer, A. D. Rodriguez, O. Taglialatela-Scafati, N. Fusetani // Mar. Drugs. - 2013. - Vol. 11, № 7.-P. 2510-2573.

204. Markers of inflammation and rapid coronary artery disease progression in patients with stable angina pectoris / E. Zourdidakis, P. Avanzas, R. Arroyo-Espliguero [et al.] // Circulation. - 2004. - Vol. 110,№ 13.-P. 1747-1753.

205. Matsui, M. S. Sulfated polysaccharides from red microalgae have antiinflammatory properties in vitro and in vivo / M. S. Matsui, N. Muizzuddin, S. Arad// Appl. Biochem. Biotechnol. - 2003. -Vol. 104, № l.-P. 13-22.

206. Michelsen, K. S. Toll-like receptor signaling and atherosclerosis / K. S. Michelsen, M. Arditi // Curr. Opin. Hematol. - 2006. - Vol. 13, № 3. - P. 163-168.

207. Minimally modified LDL binds to CD 14, induces macrophage spreading via TLR4/MD-2, and inhibits phagocytosis of apoptotic cells / Y. I. Miller, S. Viriyakosol, C. J. Binder [et al.] // J. Biol. Chem. - 2003. - Vol. 278, № 3.-P. 1561-1568.

208. Mitjatovic, T. Interleukin-4 and-12 inhibit tumor necrosis factor-alpha mRNA translational activation in lipopolysaccharide-induced mouse macrophages / T. Mitjatovic, V. Kruys, D. Caput // J. Biol. Chem. - 1997. - № 272. - P. 1439414398.

209. Monocyte subsets differentially employ CCR2, CCR5, and CX3CR1 to accumulate within atherosclerotic plaques / F. Tacke, D. Alvarez, T. J. Kaplan [et al.]//J. Clin. Invest.-2007.-Vol. 117, № 1.-P. 185-194.

210. MS80, a novel sulfated polysaccharide, inhibits CD40-NF-kappa B pathway via targeting RIP2 / X. Du, S. Jiang, X. Xin [et al.] // Mol. Cell Biochem. -2010.-Vol. 337, № 1-2.-P. 277-285.

211. Natural regulatory T cells control the development of atherosclerosis in mice / H. Ait-Oufella, B. L. Salomon, S. Potteaux [et al.] // Nat. Med. - 2006. - № 12. - P. 178-180.

212. Neovascular expression of E-selectin, intercellular adhesion molecule-1, and vascular cell adhesion molecule-1 in human atherosclero-sis and their relation to intimal leukocyte content / K. D. o'Brien, T. O. McDonald, A. Chait [et al.] // Circulation. - 1996. - № 93. - P. 672-682.

213. Network of vascular-associated dendritic cells in intima of healthy young individuals / G. Millonig, H. Niederegger, W. Rabl [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2001. - Vol. 21, № 4. - P. 503-508.

214. Nilson, J. Immunomodulation of atherosclerosis. Implication for vaccine development / J. Nilson, G. K. Hansson, P. K. Shah // Artherioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2005. - Vol. 25, № 1. - P. 18-28.

215. Opal, S. M. Anti-Inflammatory cytokines / S. M. Opal, V. A. de Palo // Chest.-2000.-Vol. 117, №4.-P. 1162-1172.

216. Packard, R. R. S. Inflammation in atherosclerosis: from vascular biology to biomarker discovery and risk prediction // R. R. S. Packard, P. Libby // Clinical Chemistry. - 2008. - Vol. 54, № 1. - P. 24-38.

217. Palinski, W. Immune response to oxidative neoepitopes on LDL and phospholipids modulate the development of atherosclerosis / W. Palinski, J. L. Wirtztum // J. Intern. Med. - 2000. - Vol. 247, № 3. - P. 371-380.

218. Palinski, W. Immunomodulation: a new role for statins? / W. Palinski //Nat. Med.-2000.-Vol. 6, № 12.-P. 1311-1312.

219. Palinski, W. Low density lipoprotein undergoes oxidative modification in vivo / W. Palinski, M. E. Rosenfeld, S. Yla-Hertuala // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1989.-Vol. 86, №4.-P. 1372-1376.

220. Parish, C. R. Heparanase: a key enzyme involved in cell invasion / C. R. Parish, C. Freeman, M. D. Hulett // Biochim. Biophys. Acta. - 2011. - Vol. 1471, № 3. - P. M99-M108.

221. Parums, D. V. The localization of immunoglobulin in chronic periaortitis / D. V. Parums, D. R. Chadwick, M. J. Mitchinson // Atherosclerosis. -1986.-Vol. 61, №2. -P. 117-123.

222. Paul, W. Interleukin-4: a prototypic immunoregulatory lymphokine / W. Paul. // Blood.- 1991.- Vol. 77.- P. 1859-1870.

223.. Peripheral arterial disease in the elderly: the Rotterdam Study / W. T. Meijer, A. W. Hoes, D. Rutgers [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1998. -Vol. 18, №2.-P. 185-192.

224. Peripheral blood mononuclear cell production of interleukin-8 and IL-8-dependent neutrophil function in hypercholesterolemic patients / E. Porreca, R. Sergi, G. Baccante [et al.] // Atherosclerosis. - 1999. - Vol. 146, № 2. - P. 345-350.

225. Pradhan, A. D. Soluble intercellular adhesion molecule-1, soluble vascular adhesion molecule-1, and the development of symptomatic peripheral arterial disease in men / A. D. Pradhan, N. Rifai, P. M. Ridker // Circulation. - 2002. - Vol. 106, № 7. - P. 820-825.

. 226. Prognostic value of serum cytokines in patients with congestive heart failure Orus J., Roig E., Perez-Villa F. [et al.] // J. Heart. Lung Transplant. - 2000. -Vol. 19, №5.-P. 419-425.

227. Protective immunity against atherosclerosis carried by B cells of hypercholesterolemic mice / G. Caligiuri, A. Nicoletti, B. Poirier, G. K Hansson // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol. 109, № 6. - P. 745-53.

228. Protective role of interleukin-10 in atherosclerosis / Z. Mallat, S. Besnard, M. Duriez [et al.] // Circ. Res. - 1999. - Vol. 85, № 8. - P. 17-24.

229. P-selectin or intercellular adhesion molecule (ICAM)-l defi-ciency substantially protects against atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice / R. G. Collins, R. Velji, N. V. Guevara [et al.] // J. Exp. Med. - 2000. - Vol. 19, № 1. -P. 189-194.

230. Qouzi, A. Immunophenotyping of perepheral blood lymphocytes in

Saudi Men / A.A. Qouzi, A.l. Salamah, R. Rasheed [et al.] // Clin. Diagn. Lab.

Immunol. - 2002. - Vol.9, №2. - P. 279-281.

159

231. Rabbit and human atherosclerotic lesions contain IgG that recognizes epitopes of oxidized LDL / S. Yla-LIerttuala, W. Palinski, S. W. Butler [et al.] // Arterioscler. Thromb. - 1994. - Vol. 14, № 1. - P. 32-40.

232. Ranjit, S. Potential role of dendritic cells for progression of atherosclerotic lesions / S. Ranjit, L. Dazhu // Postgrad. Med. J. - 2006. - Vol. 82, №971.-P. 573-575. .

233. Rathmell, J. C. Apoptosis and B cell tolerance / J. C. Rathmell // Curr. Dir. Autoimmun. - 2003. - Vol. 6. - P. 38-60.

234. Regulatory T cells and immune tolerance / S. Sakaguchi, T. Yamaguchi, T. Nomura, M. Ono // Cell. - 2008. - Vol. 133, № 5. - P. 775-787.

235. Relationship between antithrombotic activities of fucans and their structure / C. Boisson-Vidal, F. Chaubet, L. Chevolot [et al.] // Drug. Devel-opment. Research. - 2001. - Vol. 51, № 4. - P. 216-224.

236. Roberts, C.K. Oxidative stress and dysregulation of NAD(P)H oxidase and antioxidant enzymes in diet-induced metabolic syndrome / C.K. Roberts // Metabolism. — 2006. — Vol. 55. — P. 928-934.

237. Robertson, A. K. T cells in atherogenesis: for better or for worse? / A. K. Robertson, G. K. Hansson // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2006. - Vol. 26, № 11.-P. 2421-2432.

238. Rokitansky, von. C. A manual of pathological anatomy. Vol. 4. Sydenham Society / C. von Rokitansky. - London, 1852. - 261 p.

239. Role of neutrophil apoptosis in the resolution of inflammation / D. El Kebir, J. G. Filep//Scientific World J.-2010.-№. 10.-P. 1731-1748.

240. Ross, R. Atherosclerosis and the arterial smooth muscle cell: Proliferation of smooth muscle is a key event in the genesis of the lesions of atherosclerosis / R. Ross, J. A. Glomset // Science. - 1973. - Vol. 180, № 4093. - P. 1332-1339.

241. Samson, S. Immune response to lipoproteins in atherosclerosis : review article / S. Samson, L. Mundkur, V. V. Kakkar // Cholesterol. - 2012. - №. 2012. -P. 1-12.

242. Schachinger, V. Z Atherosclerosis-associated endothelial dysfunction / V. Schachinger, A.Zeiher // Kardiol.- 2000.- Vol. 89, № 1.- P. 70-74.

243. Serum levels of the antiinflammatory cytokine interleukin-10 are decreased in patients with unstable angina / D. A. Smith, S. D. Irving, J. Sheldon [et al.] // Circ. -2001.- Vol. 104, № 7. - P. 746-749.

244. Shibata, N. Regulation of macrophage function in inflammation and atherosclerosis / N. Shibata, C. K. Glass // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. S277-S281.

245. Shimada, K. Immune system and atherosclerotic disease heterogeneity of leukocyte subsets participating in the pathogenesis of atherosclerosis / K. Shimada//Circ. J.-2009.-Vol. 73, №6.-P. 994-1001.

246. Shimizu, T. Lipid mediators in health and disease: enzymes and receptors as therapeutic targets for the regulation of immunity and inflammation / T. Shimizu // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 2009. - № 49. - P. 123-150.

247. Soluble adhesion molecules and prediction of coronary heart disease: a prospective study and meta-analysis / I. Malik, J. Danesh, P. Whincup [et al.] // Lancet. - 2001. - Vol. 358, № 9286. - P. 971-975.

248. Soluble P selectin in peripheral vascular disease: relationship to the location and extent of atherosclerotic disease and its risk factors / A. D. Blann, M. Seigneur, M. R. Boisseau [et al.] // Blood Coagul. Fibrinolysis. - 1996. - Vol. 7, № 8.-P. 789-793.

249. Soluble vascular cell-adhesion molecule-1 and soluble intercellular adhesion molecule-1 correlate with lipid and apolipoprotein risk factors for coronary artery disease in children / T. Ohta, K. Saku, K. Takata, N. Adachi // Eur. J. Pediatr. - 1999. - Vol. 158, № 7. - P. 592-598.

250. Statins (HMG-CoA Reductase Inhibitors) as a novel type of immunosuppressor / B. Kwak, F. Mulhaupt, S. Myit, F. Mach // Nat. Med. - 2000. -№6.-P. 1399-1402.

251. Steinberg, L. Oxydative modification of LDL and atherosclerosis / L.

Steinberg//Circulation. - 1997.-№95.-P. 1062-1071.

161

252. Steinberg, U. Role of superoxide in endothelial cell modification of lowdensity lipoproteins / U. Steinberg // Biochim. Biophys. Acta. - 1988. - № 959. -P. 20-30.

253. Stoneman, V. E. Role of apoptosis in atherosclerosis and its therapeutic implications / V. E. Stoneman, M. R. Bennett // Clin Sci (Lond). - 2004. -Vol. 107, №4.-P. 343-354. ......- ...

254. Subendotelial retention of atherogenic lipoproteins in early atherosclerosis / K. Skalen, M. Gustaffson, E. K. Rydberg [et al.] // Nature. - 2002. -Vol. 417, №6890.-P. 750-754.

255. Sugawara, I. Fucoidan blocks macrophage activation in an induc-tive phase but promotes macrophage activation in the effector phase /1. Sugawara, K. C. Lee // Microbiol. Immunol. - 1984. - Vol. 28, № 3. - P. 371-377.

256. Sulfated fucans extracted from algae Padina gymnospora have antiinflammatory effect / C. T. Marques, T. C. G. de Azevedo, M. S. Nascimento [et al.] // Rev. Bras. Farmacogn. - 2012. - Vol. 22, № 1. - P. 115-122.

257. Sulfated galactofucan from Lobophora variegata: anticoagulant and anti-inflammatory properties / V. P. Medeiros, K. C. Queiroz, M. L. Cardoso [et al.] // Biochemistry (Mosc.). - 2008. - Vol. 73, № 9. - P. 1018-1024.

258. Sulfated polysaccharide fucoidan ameliorates experimental autoimmune myocarditis in rats / K. Tanaka, M. Ito, M. Kodama [et al.] // J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. - 2011. - Vol. 16, № 1. - P. 79-86.

259. T lymphocytes from human atherosclerotic plaques recognize oxi-dized LDL / S. Stemme, B. Faber, J. Holm [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1995. -Vol. 92, №9.-P. 3893-3897.

260. Takahashi, M. Inflammatory cytokines in the pathogenesis of atherosclerosis / M. Takahashi // Nihon Rinsho. - 2011. - Vol. 69, № 1. - P. 30-33.

261. Tedgui, A. Cytokines in atherosclerosis: pathogenic and regulatory pathways / A. Tedgui, Z. Mallat // Physiol. Rev. - 2006. - Vol. 86, № 2. - P. 515581.

262. The antimitogenic action of the sulphated polysaccharide fiicoidan differs from heparin in human vascular smooth muscle cells / B. Mulloy, K. L. Gallagher, L. O'Brien, A. D. Hughes // Thromb. Haemost. - 2002. - Vol. 87, № 1. -P. 149-154.

263. The inhibitory effects of fucoidan on delayed-type hypersensitivity suggested that it may be potential medication for chronic inflammatory diseases in the future / Z. Quanbin, L, Zhien, Z. Gefei // Chin. J. Oceanology Limnology. -2003. - Vol. 21, № 4. - P. 324-328.

264. The role of adaptive T cell immunity in atherosclerosis / Z. Mallat, S. Taleb, H. Ait-Oufella, A. Tedgui // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. S364-S369.

265. The role of CD4+CD25+ regulatory T cells in macrophage-derived foam-cell formation / J. Lin, M. Li, Z. Wang [et al.] // J. Lipid. Res. - 2010. - Vol. 51,№ 5.-P. 1208-1217.

266. The role of the macrophage in atherosclerosis. Deficiency of TGF-P signaling in CDllc positive dendritic cells, macrophages and NK cells accelerates atherosclerosis by inducing inflammatory cell influx / D. Lievens; A.-K. Robertson; L. Beckers [et al.] // Circulation. - 2008. - № 118. - P. S510.

267. The Thl7/ Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome / X. Cheng, X. Yu, Y. J. Ding [et al.] // Clin. Immunol. - 2008. - Vol. 127, № 1. - P. 89-97.

268. Thrombogenesis and endothelial damage/dysfunction in peripheral artery disease. Relationship to ethnicity and disease severity / A. J. Makin, N. A. Chung, S. H. Silverman, G. Y. Lip // Thromb. Res. - 2003. - Vol. 111, № 4-5. - P. 221-226.

269. Thusen, von der J. H. Interleukins in atherosclerosis: molecular pathways and therapeutic potential / J. H. von der Thusen, J. Kuiper // Pharmacol. Rev.-2003.-Vol. 55, № ]._p. 133-166.

270. TLR activation triggers the rapid differentiation of monocytes into macrophages and dendritic cells / S. R. Krutzik, B. Tan, H. Li [et al.] // Nat. Med. -2005. - Vol. 11, № 6. - P. 653-660.

271. Toll-like reeeptor-4-dependent and -independent cytokine secretion induced by minimally oxidized low density lipoprotein in macrophages / Y. I. Miller, S. Viriyakosol, D. S. Worrall [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. -2005. - Vol. 25, № 7. - P. 1213-1219.

272. Toll-like receptor-4 and mitogen-activated protein kinase signal system are inolved in activation of dendritic cells in patients -with acute coronary syndrome / L. Wang, D. Li, K. Yang [et al.] // Immunology. - 2008. - Vol. 125, № 1. - P. 122-130.

273. Transcriptional inhibition by interleukin-6 of the class A macro-phage scavenger receptor in macrophages derived from human peripheral monocytes and the THP-1 monocytic cell line / H. S. Liao, A. Matsumoto, H. Itakura [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19, № 8. - P. 1872-1880.

274. Transfer of CD4+-T cells aggravates atherosclerosis in immunode-ficient apolipoprotein knockout mice / X. Zhou, A. Nicoletti, R. Elhage, G. K. Hansson // Circulation. - 2000. - Vol. 102, № 24. - P. 2919-2922.

275. Use of ankle brachial pressure index to predict cardiovascular events and death: a cohort study / G. C. Leng, F. G. Fowkes, A. J. Lee [et al.] // Br. Med. J. - 1996.-313, №7070.-P. 1440-1444.

276. Vaccination using oxidized low-density lipoprotein-pulsed dendritic cells reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficient mice / K. L. L. Habets, G. H. M. van Puijvelde, L. M. van Duivenvoorde [et al.] // Cardiovasc. Res. - 2010. - 85, № 3. - P. 622-630.

277. Validity of duplex scanning in the detection of peripheral arterial disease in the general population / F. G. Fowkes, P. L. Allan, C. Tsampoulas [et al.] // Eur. J. Vase. Surg. - 1992. - Vol. 6, № 1. - P. 31-35.

278. Varga, T. Nuclear receptors, transcription factors linking lipid metabolism and immunity: the case of peroxisome proliferators - activated receptor gamma / T. Varga, L. Nagy // Eur. J. Clin. Invest. - 2008. - Vol. 38, № 10. - P. 695-707.

279. Vessel wallembedded dendritic cells induce T-cell autoreactivity and initiate vascular inflammation / J. W. Han, K. Shimada, W. Ma-Krupa [et al.] // Circ. Res. - 2008, № 5. - Vol. 102. - P. 546-553.

280. Vessel-specific Toll-like receptor profiles in human medium and large arteries / O. Pryshchep, W. Ma-Krupa, B. R. Younge [et al.] // Circulation. - 2008. -Vol. 118, № 12.-P. 1276-1284.

281. Virchow, R. Die cellularpathologie / R. Virchow. - Berlin : Verlag von August Hirschwald, 1871. - 400 p.

282. Wang, S. Z. Clinic observation of fucoidan on patients with hyperlipidemia / S. Z. Wang, A. F. Bi // Med. J. Qilu. - 1994. - Vol. 16. - P. 173174.

283. Weber, C. Chemokines: key regulators of mononuclear cell recruitment in atherosclerotic vascular disease / C. Weber, A. Schober, A. Zernecke // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2004. - Vol. 24, № 11. - P. 1997.

284. Whitman, S. C. Interferon-y deficiency exerts gender-specific effects on atherogenesis in apolipoprotein E -/- mice / S. C. Whitman, P. Ravisankar, A. Daugherty // J. Interferon Cytokine Res. - 2002. - Vol. 22, № 6. - P. 661-670.

285. Wick, G. Autoimmune and inflammatory mechanisms in atherosclerosis / G. Wick, M. Knoflach, Q. Xu // Ann. Rev. Immunol. - 2004. -Vol. 22.-P. 361-403.

286. Yan, Z. Q. Innate immunity, macrophage activation, and atherosclerosis / Z. Q. Yan, G. K. Hansson // Immunol. Rev. - 2007. - Vol. 219. - P. 87-203.

287. Yeast zymosan, a stimulus for TLR2 and dectin-1, induces regulatory antigen-presenting cells and immunological tolerance / S. Dil-lon, S. Agrawal, K. Banerjee [et al.] // J. Clin. Invest. - 2006. - Vol. 116, № 4. - P. 916-928.