Генетические и иммунологические параллели у больных раком легкого и бронхиальной астмой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Васильева, Мария Владимировна

• Васильева, Мария Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Васильева, Мария Владимировна

Оглавление- • -.

Список условны* сокращений

Введение,. .,.

ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 История развитая н современное состояние вопроса о вши чосвяэй аллергических и злокачественных заболеваний.,.,,.,,,.,.,,.„

Ll.l. За&олсвиемое1ь члокачеетвеннычи новообразованиями у лии. страдающих аллерлаей.-.,.„.,.

1.1.2. Экспериментальные модели влияния анафилаксии на развитое злокачественных новообразований.,.

1.1. Я. Клетки и молекулы реакций гинерчувствительности немедленного пша в противоопухолевой защите. . 1В

ГШ. Иммуноглобулин F. способствует естественному к специфическому противоопухолевому иммунитету .,.

1.1.3.2- Рать тучных клеток и жпкнофилов в противоопухолевой шлите

U. Влияние хронических юешкгелышх заболеваний легких на риск формирования paxa легкого.*.

1.2.1. Влияние хронической обстружтавной болезни легких на риск развития рока легкого.

1-2.2. Бронхиальная астма и рак легкою - вопрос о шшосшрн заболеваний остается дискуссионным.,.„„„.

1.3. Е'ены-моднфнгапоры метаболизма ксенобиотиков, апопгоза и иммунного ответ и этнологии и патогенезе рака легкого и бронхиальной астмы.

1.3,], Роль онкосупрессориого белка р53 в патогенезе рака легкого.,.

1.3.2. Хемокшы к их рецепторы в патогенезе рака левого . .,

1.3.3. Роль агонической конституции в формировании бронхиальной астмы.

1.3.4. Полиморфизм генов ферментов метаболизма ксенобиотиков у больных бронхиальной астмой.„

1.3.5. Хсмокины и их рецепторы а нато|снс*« атонической бронхиальной четны. „.„.„

13 6 Апонтоз и воспаление при бронхиальной астме

ГЛАВА 2, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1, Характеристика материала исследования.

2.2, Методы исследования."

2J2.I. Генотип нромиис аллелей генов CCR5, pjj, CSTTI н GSTMI.

2,2-1-1 Геиотннированне аллелей гена хемокинового рецептора CCRS.

2-2.1.2. Палимеразноя цепная реакция для анализа полиморфизма длин рспрмщиоинш фрагментов <Л1ИЧЩРФ> ген лр$$.

2.2.1.3. Ремонтирование аллелей генов ферментовбиотрансфориацин ксенобиотиков GSTT1 н GSTMI. .,.

222 Определение показателей периферической крови.

2.2-3. Опенка субпопуляциои Mora состава лимфоцит» периферической кропи методом непрямой нммуиофлюорссцсшцш.

2-2.4. Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови. „„«—. .S

2.2.5. Определение концентрации иммуноглобулинов

А. М и G в сыворотке крови.

2.2.6. Определение активности системы комплемента сыворотки крови

2.2.7. Определение функциональной активности нейгрофилов периферической

Крови—.

2.2.8. Цитологическое исследован ие инду пировал ной мокроты.

2.2.9. Исследование содержания шгтокннов в индуцированной мокроте н общего иммуноглобулина Е метолом твЛрдофазного нчм>нофермеи тою анализа.

2.2.10. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВА11ИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1 Полиморфизм генов ферментов бмотрансфорыаинн юнибнолипп второй фазы GS7TI и GSTMI. геиа-онкосунрессора р53 и гена хемокнноиою рецептора CCR5 у больных раком легкого и бронхиальной астмой

3.1.1, Связь нефункциональных генотипов гак» GSTT1 и GSTMi с риском заболевания раком легкого, ХОБЛ к броншпааП астмой различного генезл.

3.1.2, Полиморфизм гена р53 у больных раком легкою. ХОЬЛ н 6[№»ш1ын>й лсгмоП

3.1.3, Полиморфизм гена хемокннового рецептара CCR5 у больных раком легкого, ХОБЛ к бронхиальной астмой.«.««♦.-.*.

3.2. Особенности функционирования иммунной системы у больных раком легкого, бронхиальной астмой и ХОБЛ.,.,.„.—Я

3.2.1. Вторн'шыЛ иммунодефицит у больных бронхиальной астмой и ХОБЛ: ассоциации с особенностями лрсиорбндмого фона у больных раком легкого

3.2.2. Особенности иммунологических показателей кропи у больных раком легкого, бронхиальной астмой и ХОБЛ . ,.,

3.2.3. Особен иости воспаления в слизистой бронхиального дерева у больных раком легкого, бронхиальной астмой к ХОБЛ.

3.3, Ассоциация полиморфизма генов р53. CCR5, OSTT1 и GSTMI с особенностями воспаления в слизне той бронхиального дерева.

Заключен^-.,.,.„„^„.,„,„„.

Выводы.

Список л нтсратуры

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генетические и иммунологические параллели у больных раком легкого и бронхиальной астмой»

Актуальность р»6йты

Рак легкого I Pj'I ) занимает лидирующие позиции по смертности среди онкологических заболеваний, ее уровень не уступает суммарным нокам гелям с мер I ноет от таких злокачественных новообразований, как рак кншечника. рак молочной железы и рак простаты. Им явление РЛ на ранних стадиях позволяет существенно повысить эффективность лечения: показатели Элегией выжинаемое гп при постановке диагноза на станин с 15% возрастают до 70% при дютюстнке заболевания на I стадии.

Согласно л онолым большому ряду литературных данных, отражающих эпидемиологические и экспериментальные наблюдения. аллергические заболеяання. н частности. бронхиальная астм® (БД)сникают риск злокачественных новообразований, » частности, рака легкого (II. А, Адо. Н И. E1jcilh.ch, Л. А. Горяч кш и. 1982; Н. М- Нережная. С И- Ядкут, 1983; Н. В- Васильев и др. 1994; Н. М. Бережная, В. Ф. Чехун, Р. И. Сепиашиили. 2005; К. Е. Osann, 1991: Р- Mills el al. 1992; К. Mcllstnmd el al, 1997; E. Negri et d, 1999, MJM. Henderson el d. 2003. A, Talbot-Smith ct d. 2003; C, Bosctti et at., 2004; N LighifaN ct al, 2004; J. L. Wicmcls ct al., 2004). Однако немало и противоположных сведений о положительной взаимосвязи зтих заболеваний. Вопрос о взаимоотношении аллергических и злокачественных патологий был поставлен еще и первой половине 20 века А А Богомольцем, когда были сформированы представлении о различных наследственно конституционных гипах, один из которых был определен кик аллергический. В настоящее время на основании накопленных экспериментальных данных гг результатов клншко-тгнотеииалогнчеемл кд&полениЛ сформулирлммы 2 опиозигные теории взаимоотношения аллергии и рака, однако ни одна hi гшх не объясняет, почему в одних случаях аллергия препятствует развитию рака, а в других - способствует- Между тем, данные, полученные в процессе исследований в рамках '«той проблемы, мечут способствовать разработке подходов по пллркчноЛ профилактике злокачественных новообразований и новых методов иммунотерапии рака.

Для повышения эффективности нсслелошвй в плане прояснения вопроса о векторе тшиыоотошештй аллергии п рака, представляется целесообразным исследование различий или сходства иатогексгнчсскнх признаком бронхиальной астмы и рака легкого как мболепиий, ршаюиюшнхси из основе обшей ткани-мишени. Рак легкого и бронхиальная астма являются заболеваниями мультнфакгориальной природы, риск формирования которых у того нлн иного индивидуума обусловлен взаимодействием большого количества генов с этиологически значимыми ередовымн факторами Общим атрибутом и пусковым моментом канне роге нем, независимо от локализации злокачественного процесса. нарушение peiy,niuni клеточного цикла. Эффектниный контроль клеточного инкла прнволнт к репарации поврежденной ЛПК перед процессом репликации н предотвращает накопление генетических нарушений

My тин я гена опухолевого еунрессора р53 - одно из наиболее часго встречающихся генетических изменений в клетках различных опухолей, в частности. при раке легкого они отмечаются в 50-90%. случаев (N. /Нао el a) J 999; W N. Rom el al, 2000. J. Yofcota, T. Kohno. 2004). Инактивация генов н результате соматических мутаций в свою очередь может зависеть or регу.чигирного влияния гак внешних факторов, гак и генетических механизмов, определяющих отпет на ханцеротенные воздействия (I. Yofcoto, Т. Kohno, 2004) Нормальней бронхиальный зшггелнй подвергается риску повреждения вдыхаемыми ilih эндогенными окислительными метаболитами, а индивидуальная чувствительность к повреждению существенно зависит от различий в экспрессии ферментов бнотранеформаштн кееиобиошков (ФБЮ 2 фазы, а именно глугттгион-К-трансфераз. катализирующих реакцию инактивации высокоакшаных генотоксическнх areirroB путем их коныогашш е глутвтноиом (Е Crawford, 2000), Показано, что Нулевой генотип GSTМI и liS'ITI ассоциируется е повышенной чувствитсльностыо к генотокснческому действию продуктов табачното дыма, что выражается в пониптенин частоты хромосомных аберраций и хроматндиых обменов в клетках эпителия. а также частоты мутаций гена р53 в сим со снижением дсгоксикашкишого потенциала (II Norppa. 2004; К. Alexandrov el al., 2002).

QntcenQWl нногочнсаншж данные, с в ид с гел ьсгяу н>ш не о лажном значении хронического воспаления в патогенезе рака. в качестве подтверждения могут служить результаты когортаых исследований iw длительному применению нестеронлных противовоспалительных агентов, которое приводило к значимому снижению риска рака легкого, кишечника, желудка и пишеволл (J. Л. Baron, R, S. Sandler, 2000; L. A. Garcia-Rodriguez. С Huerta-Alvarez. 2001; M. M«tins-Green et aJ, 1994; R1J Ness. С. СоОпяш. J 999) Механизмы прплнферлннн, злойчествемной ■рлнеформацин тканей и хроническое воспаление тесно сопряжены е дисбалансом иммунитет» и реализуются через нарушения кооперации ичмунокомпегентных клеток и межклеточных взаимодействий на лругих уровнях (М Л, Пальцев. А. А. Иванов, 2003; П. М, Шварцбурд, 2006; М. Makarthur et aL 2004),

Анализ экспрессии ониомаркеров при различных днерегенерггорных изменениях легочного эгнггслия на фоне хронических воспалительных заболеваний легких позволяет говорить об нх предполагаемом злокачественном потенциале, Следует отмстить, что практически при всех вариантах днерегенераторных и прелраковых изменении обнаруживаются мутации р53 (I: А. Коган. 2001, 2003; W.N. Rom с( al. 2QOO). К предопу холевнм изменениям бропхяаяьносоэпнтешм, повышающего риск ыалнппшинн. относят плоскоклсточную метаплазию, л не плаз ию и гинер1Ьтазню эпителия. tnt сосгояння могут счигагьси прелраком легкого (Г. А. Франк, 2000. Е. А. Коган. 2003 Часто рак легкого возникает на фоне \ро1ИР1сской обегру ктнвиой болезни легких (ХОБЛ), для которой характерны днснластичсские изменения и метаплазия бронхиального эпителия.

ХОБЛ характеризуется наличием хронического нос паления в бронхолегочном тракте с преимущественным вовлечением CD8+ лимфоцитов. неГпрофилов и макрофагов (Ы. Sofer el aJ, (949: G. С Donaldson et aL 2004) Принципиальным различием патогенеза ЬЛ и XOBJI является эпизодические и реверсируемые нарушения функции бронхолеточною тракта к первом случае и прогрессирующая Легочная обструкция во втором на фоне рсмодслирования дыхательных путей, при котором наряду с метаплазией отмечается тинернаазня гладком ышечных волокон бронхов, базальноклет очная гиперплазия, фиброз, уменьшение числа альвеол в листальных отделах воздухоносных нулей, гипертрофии желез внешней секрешш слизистой оболочки и ангиотснез (Р. К,

Jeflery. 2001: F Cappcllo ci aL 2006), При исследовании биоггпатов бронхиального эпителия у больных ХОБЛ в 71,5% случаев были обнаружены различные изменения клеточной архитектоники: гиперплазия базольных клеил к, шюскоклегочная метаплазия и. в 22,8% случаев, днеллаэня бронхиального зпителня (F. Cappcllo el at., 2006). В настоящее время в литературе имеются лнвдь отдельные указания, позволяющие сделать вывод об ассоциации ХОБЛ с повышенным риском раки легкого. Так, многолетнее наблюдение когорты больных ХОБЛ исследователями Лексннгтонского университета (Северна» Америка) выявило повышенную частоту заболеваемости раком легкого у обследованных но сравнению с ггоиу.тяционныч контролем, причем показатели заболеваемости раком возрастали с усугублением стадии ХОБЛ (D. М. Mannino et at. 2004), Также показано, что ХОБЛ ассоциирована е формированием плоекоклеточного рака легких у курящих (Л. Pap el al. 2004) Кроме того, ряд исследований у казываст на высокий риск заболевания раком легких у пациентов, страдающих эмфиземой легких, которая является закономерным и необратимым компонентом патологических изменений легочной ткани при ХОБЛ {S, Т, Mayne el al,. 1999: К, Kishi el а!. 2002),

Таким образом, ХОБЛ является хроническим восналютльным заболеванием легких, которое протекает с участием иммунологических механизмов без формирования гинерчу вствнтельносгн немедленною тина и сопровождается днснласгическнми изменениями бронхоальвеолярнош иштслия. ассоциированными с повышенным онкогенным потенциалом.

Механизмы патогенеза БА включают в себя взаимодействие иммунологической н воспалительной компонент, особсшюсги которых определяют реакцию на ксеногенные раздражители и выход в патологическое состояние, Механизм воспаления при классической атонической БА вовлекает Т челн еры 2 шпа и эозннофнлы как основные зффекзорные клегкн. В патогенезе инфекционно-адлергической формы бронхиальной астмы наряду с IgE-опосредуемым механизмом играют клегочно-опосрелусмые реакции но тину реакций гипер чувствительности замедленного типа к аллергенам микробного происхождения {Р. М. Хииюв. 2002), Хроническое воспаление в рееннраюрном факте у больных астмой ассоциировано с ремадвлнрованнеч дыхательных ну «ей. основными проявлениями которою являются >рочин дыхательного иипелня. пшерилазня м гипертрофия слизистых желез. гиперплазия клеток дыхательного эпителия и глалкомынзечмых волокон, еуб-нппелнальный фиброз н шгаокнез fJ. R. Reader el al-, 2003: L. Wang el al 2003; T. R, Bai et al., 2005). Однако, в отлнчие от ХОБЛ. при анализе литературы, посвященной опенке морфологически* изменений в тканях бронхиального дерева, нами не выявлено ни одного упоминания об обнаружении лиеплазии бро1зхналъного зпнтелия нрн атонической астме. HiTTcpeceH тот факт, что несмотря на полярные рахзнчия нмму нопатогенеза ЬА и ХОБЛ. около 1QK больных манифестируют признаки обоих заболеваний, что. скорее всего, следует рассматривать как НХ сочетание (P. J. Barnes, 2003).

Таким обратом, ряк легкого, ХОБЛ н астма ассоциированы е хронн'нхким воспалением, в формировании и поддержании которого вовлекаются участники воспалительного каскада, вкзючая цитокины. чемокнны, ростовые факторы, ферменты, рснепторы н адгезионные молекулы.

Прииичая во внимание, чго PJI, ХОБЛ н НА имеют общие гкани мишени, представляется целесообразным исследование различий или сходства гатненетичееккх признаков m заболеваний для выявления предпосылок, свидетельствующих о повышении нлн стсженнн риска рака легкого у больных бронхиальной астмой.

При этом следует особо отмстить, чю выявление объективных клинических и Лабораторных признаков аллергических состояний у больных со злокачественными новообразованиями не может рассматривания как непреложное доказательство связи аллергии и рака, так как в данном случае может сказываиля влияние роста опухоли либо противоопухолевого лечения U Schvsnrt/baum et al, 2005} Литературные сведения также не принимают во внимание широкий клинический полиморфизм бронхиальной астмы, который предполагает высокую генетическую гетерогенность, а. следовательно. и различия механизмов патогенета

При зп^'ючно^югнчеектк нсследакшмж влияния астмы ггл риск ршнктня рака легкою необходимо проводил, стандартизацию ipynn больных но фактору курения, что также представляет определенные сложности, поскольку 85-40% больных раком легкою являются курильщиками, а больные аегмой курят значитслызо реже в связи с гиперреактнвноезмо бронхов. Перечисленные обстоятельства свидетельствуют о необходимости поиска новых падто! к оценке влияния бронхиальной астмы на риск развития рака легкого.

Дня получения более объективных лонных о взаимосвязи ЬА и РЛ мы ссшн целесообразным изучение генетических полиморфизмов. для которых есть сведения о значимая ассоциации с РЛ. у больных ХОБЛ и Б А, Сравнение частоты встречаема>н отдельных аллелей, генотипов н их сочетаний у больных ЬА с соответствующими показателями у больных РЛ лаег возможность составить представление о сходстве или различии изучаемых генетических особенностей при этих заболеваниях. В качестве промежуточной группы сравнения между РЛ и ЬА была выбрана группа больных ХОБЛ ■ хроническим воспалительным заболеванием легких, которое протекает с участием иммунологических механизме» без формирования гнпсрчувствителыюстн немедленного типа и сопровождается метаплазией и дне пластическими изменениями бронхоальиеолярною 'лнттелня. предрасполагающими к ишшюашш.

Выбор полиморфизмов Осуществляли на остове литературных данных об их ассоциации со злокачественными новообразованиями, в частности, с РЛ. не менее, чем в 2 разных популяциях, а также вовлечении функционирования ТПТХ генов и патогенез аллер!нческнх заболеваний или физиологию бронхиального тракта (J. Schwartzbaum ci al, 2005) В литературе представлены данные о связи РЛ с полиморфизмом генов ФБК 2 фазы GSTTI и GSTM1 (J. Spit/ el al, 2000; р, Yang ет а!. 2004: A. WcnztafTct al. 2005; I. Snicker et aL 2002. E, V. Hclogubova ct al. 2004). гена он косу п рессора p53 в различных популяциях (В. В. Ляховнч и др., 1947; II. Р. Papadakis el а). 2002: D, Р, Miller et al, 2004; X, Wu d al. 2002), 'Ую свидетельствует, что указанные полиморфна тепы являются маркерами предрасположенности к онкопатолопш легкого. Изучение святи 1ена рецептора хемокиношло рецептора ССЯ5 с онкологическими заболеваниями началось недавно, в литературе есть сведения о его способности регулировать транскрипционную активности р53 н об ассоциации делстшонного адделя CCR5dd32. колирующего функционально неактивный бслок-рсцстир, с прогрессией рака молочной железы (S. Manes el al. 2003), В НИИ онкологии ■'.Томска были получены данные об ассоциации полиморфизма гена CCRS с прогрессией РЛ ДО. В, Севостьянона, -004)

Наряд}' с генетическим полны орфизмом мы уценивали состояние иммунологических факторов, включая клеточный состав н уровень шггпкинов в мокроте больных, стридмощнх ХОБЛ или БД » ершятелипм аспекте с РЛ,

Также был проведен анализ влияния различных генотипов изучаемых iснов на количественные признаки. патогенетически важные для act мы и ХОБЛ и характеризующие состояние факторов местного и системного иммунитет. Исследование связи различных генотипов изучаемых генов с патогенетически важными для астмы и ХОЬЛ качес(пеннымн и количественными признаками, характеризующими состояние факторов местного и системного иммунитета, позволит выявить их роль в развитии предрасположенности к РЛ и может быть полезным при формировании групп повышенного онкологического риска.

Для уменьшения гетераrailЮСТ н выборок, на наш взгляд, целесообразна было бы огдельио рассматривать разные формы астмы. Для понижения эффективности выявления ассоциаций полиморфизмов изучаемых генов с раком легкого. ХОБЛ и Б А необходима также стрпяфнкжщк контрольных выборок в соответствии с группами больных по поду, возрасту, географическому региону.

Цель исследования

Оценить в сравнительном аспекте частоту распре деления Генотипов патогенетически значимых для рака легкого генов (ферментов бнотрансформацни ксенобиотиков 2 фазы, аноптоза и рецептора хемокнков) и особенности местного иммунитета бронхиального тнгелии у больных хронической обструктивной болезнью легких, бронхиальной астмой и раком легкого,

Задачи исследования Провести сравнительную оценку распределения функциональных и «нулевых)» генотипов генов ферменгов бнотрансформацни ксенобиотиков второй фазы GSTTI и CSTMI у больных раком легкого. ХОБЛ н бронхиальной астмой 2. Сравним, распределение генотипов и час rot взлелей (BstUl- полинорфюм 72 колона 4 экюна) гена р53 у больных раком легкого. ХОБЛ и бронхиальной астмой.

3. Исследовать распределение генотипов н аллелей гена хсмокиноеого рецептора CCR5 (CCR5del32 полиморфизм) у больных бронхиальной астмой и ХОБЛ в сравнении с контрольной гру ппой и больными раком легкого.

4. Оценить особенности воспаления и цнгокннового профиля п слизистой бронхиального дерева у Сольных раком легкого, ХОБЛ и бодмшх бронхиальной астмой.

5. Исследовать иммунологические показатели на системном и местном у ренте у бакнш раком легкою, XObJI и бронхиальной лет мой в зависимости от полиморфизма изучаемых i сноп.

Научная новизна

Полуюта новые данные о повышенной частоте «нулевого» генотипа reira GSTM1, сравнимой с таковой у больных РЛ, у курящих бальных ХОБЛ по сравнению с иопуляшюнным контролем для л ни европеоидного происхождения Западно-Сибирского региона.

Показано, что частота «нулевых» генотипов генов ферментов бнотранеформаштн ксенобиотиков второй фазы GSTT1 н GSTMI и их сочетаний у больных БА смешанного геиеза существенно превышает уровень нопулацноиното контроля и сравнима с таковой у больных РЛ У больных е астмой атонического генеза не отмечено повышения частоты генотипа USTMI«0/Oh no сравнению с контролем,

Получены новые данные о повышенной частоте Arg аллеля tciia р53 (BslU]-нолиморфнзм 72 кодона 4 жюиа) у больных ХОБЛ. которая не отличалась от таковой у больных РЛ. Напротив, частота генотипа Pro/Pro у больных ХОБЛ. как и у больных РЛ. была более низкой по сравнению е ионул и инонным контролем, Одинаковое распределение генотипов гена р53 у больных ХОБЛ и РЛ можно рассматривать с одной стороны, как свидетельство сходства механизмов вовлечения р53 в патогенез ХОБЛ н РЛ. а е дру гой - как указание на повышенный риск формирования РЛ у больных ХОБЛ.

Выявлена связь Pro аллея* гена р53 е повышенным уровнем лимфоцитов в индуцированной мокроте у больных ХОБЛ и БА

Мол учет J приоритетные лип мыс о более низкой чип ore встречаемости делецнонного аллеля ran хемокнновою рецептара CC/tJ у больных ЬЛ iki сравнению с популяционным контролем в Западно-Сибирском pel ионе

Впервые в пределах одной популяции проведен сравнительный анализ полиморфизма патогенетически значимых язя формирования РЛ генов у больных К А различного генеэа, результаты которою свидетельствуют о различной степени предрасположенности к формированию РЛ у больных астмой с атоническим и смешанным генезом 'заболевания.

У 50% обследованных больных РЛ выявлены признаки вторичной иммунной недостаточности, которые предшествовали развитию злокачественного процесса, сходные со структурой инфекционного синдрома вторичною иммунодефицита у бальных ХОБЛ и БД

Теоретическая н практическая значимость

В работе выявлены сущее таенные различи* и распределении генотипов и частоте встречаемости вариантных аллелей между группами больных с дтопической астмой и больных старше 40 лет, в которой превалиру ют больные с астмой смешанного тенета. Во^нервых. >то свндетельсгвует о различной роли изучаемых генов в патогенезе разных форм НА. во-вторых, указывает на неоднородность группы БА и азане возможной предрасположенности к РЛ. '>то позволяет объяснил, хотя бы частично неоднозначность результатов проводившихся ранее клиннко-зпидемнологичсских исследований о взаимосвязи БА н РЛ.

В результате анализа полиморфизма гена онкосупрессорного белка р53 у больных БА полутены данные об асеоцнащш Pro аллеля и Pro Pro генотипа гена р53. а также сочетании тенотнпов CCR5CCR5-ProlPru с тяжелым течением ЬА смешанного геиеза, что свидетельствует о целесообразности исследования роли полиморфизма гена в формировании рсзистетиостн к кортмкостерондкой терапии

Сведения о наличии «нулевых» генотипов ФЬК 2 фазы и Arg аллеля гена р$3 (BstlJl-полиморфизм) у больных ХОБЛ могут быть использованы в качестве дополнительных критериев при формировании групп повышенного риска ею РЛ,

Полученные данные об ассоциации CCR5dd32 с низким риском формирования ЕЛ лшкешио п»юи указывают т шуишеп дальнейшего исследования евши полиморфизма CCRS с нредраегтоложениоеттио к ЬЛ у лиц с отягощенным семейным анамнезом

Основные положения, выносимые на защиту;

1, Одинаковое распределение генотипов генов ферментов бногрлнеформатшн ксенобиотиков 2 фаты, апогпоза и ренегттора хемокнноп у больных ХОЬ.Ч и PJ1 свидетельствует о сходстве механизмов вовлечении исследуемых генов и патогенез згих заболеваний и указывает на новы шейный риск формирования РЛ у больных ХОБЛ,

2, Результаты сравнительного анализа характера распределения алдсльных вариантов генов, патогенетически значимых для формирования РЛ (ферментов метаболизма кееиобнотикои GSTMI и GSTTI. оикосунрессора р53 и гена хемокнновоти рецептора CCR5) у (нижних бронхиальной астмой различною генеэа свидетельствуют о менее выраженной предрасположенности лиц с атонической астмой к развитию рака легкого по сравнению с больными астмой смешанного генета

3, Изменения системного и локального иммунитета, ассоциированные с формированием вторичной иммунной недостаточности, и клегочно-молскудяриые особенности бронхиального зпителия. сопряженные с выеокой вероятностью появления дне пластических изменений, наряду с выявлением взаимосвязи патогенетически значимых признаков с аллсльным полиморфизмом изучаемых генов, свидетельствуют о наличии молекулярно-генетнчеснЕХ предпосылок для реализации злогачесгвенной трансформации з(нг№1ня у больных ХОБЛ и бронхиальной астмой смененного icucua

Л проб л пня работы

Основные положения и результаты научных исследований были доложены на объединенном иммунологическом форуме с международным участием, г, Екатеринбург (2(К>4>; IX Всероссийском научном Форуме с межлународным участием имени академика В,И Иоффе «Лии иммунологии в Санкт-11етербурге», г.

Санкт-Петербург (2005), Всероссийской научно-практической конференции, посол шейной ! 5-легнему юбилею Красноярского Краевого Центра по профилактике и борьбе со Ct1ИД и инфекционными шГнмшшиин. «Дни иммунологии в Сибири», г. Красноярск (2005): научно-праггической конференции НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН «Иммунология на рубеже веков к 75-лстню со дня рождения академика РАМН Н.В. Васильева». г. Томск (2005); 15 ежегодном конгрессе Европейского респираторного общество, г. Копенгаген (2005); 111 ежегодном национальном конгрессе молодых исследователей в области сердечнососудистых и респираторных заболеваний, г, Внннинсг (2006); VII конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке», г Томск (2006); VI съезде аллергологов и иммунологов СНГ, Российском национальном конгрессе аллерголога» и иммунологов. Ill Российской конференции по иммунотерапии, г. Москва (2006); 16 ежегодном конгрессе Европейскою реснираторного общество, г-Мюнхеи (2006).

Обьгч н структура диссертации

Заключение диссертации по теме «Онкология», Васильева, Мария Владимировна

ВЫВОДЫ

1, У больных БЛ с дебютом заболевания после 40 лет (с прсвалнрованнем пациентов с астмой смешанною генеза) частота генотипа гена (1S1M1 кО/Он сравнима с иконой при РЛ н значительно нише, чем ь контрольной выборке и » группе больных БЛ с манифестацией заболевания в молодом возрасте (атоническая БЛ), У носителей генотипа (iS'I'M UO.'O» выявлено модифицирующее алшше курения на риск формирования ХОБЛ и РЛ, но не БА.

2, У больных ХОБЛ. как и у больных РЛ. выявлено повышение частоты Arc, аллсля (76.7%) гена р$J (Arg/PTO Нол иыорфизм 72 колона 4 ткзона) при снижении частоты Pro аллсля (23.2%) и Pro/Pro генотипа (1,7%) но сравнению с нопулянноннын контролем (65.9%. 34%. 12,7% соответствен но). Ассоциации БЛ с полиморфизмом р53 не выявлено,

3, У больных Б А смешанного генеза выявлена ассоциация полиморфизма р5$ с тяжестью течения заболевания: частота Pro аллеля составила 57,)% по сравнению с 29,8% в понуляцнонном контроле (р-0.0278). а доля |-oM03inot по Pro • 42.8% но сравнении» с 7.8% в популяционном контроле (р=0,0101) и 4,8% у лиц со средней степенью тяжести заболевания (р=0.007),

4, У бОЛЫШХ БА частота делецногнюго аллсля CCRSdei-32 существенна ниже, чем в популяционном коигрозс (6,4% пропев 10.9%, р-0,0364), и минимальна при астме атонического генеза. У больных ХОБЛ не выявлено изменений распределения генотипов гена хемокннового рецептора CCR5 по сравнению с иопуляцнонным контролем н РЛ.

5, Структура инфекционного синдрома вторичного иммунодефицита у больных ХОБЛ н БА сходна с особенностями ггреморбндного фонд у больных РЛ, Уровень общего IgE в крови превышал |раинцы нормы у шн тентов при всех патологических состояниях, значимых межгрупповых различий не выявлено

6, В индуцированной мокро iv больных ХОБЛ и Б А выявлен высокий уровень основного хсмотакснчсского фактора неГпрофндов ЦЛ-* и повышенное содержание нейтрофичов, более выраженное при ХОБЛ, У больных БЛ отмечено преобладание функциональной активности Th2 лимфоцитов, О котором судили по соотношению уровни шпокинов ИЛ-4 III [ф у н мокроте, но сравнению с бальными ХОБЛ и бальными РЛ.

Pro аллель га« р53 ассоциирован с повышенный уровнем лимфоцитов в индуцированной мокроте пациентов с ХОБЛ и БА. У больных БА и РЛ носителей «нулевого» генотипа GSTMI выявлено значимое повышение содержания эотннофнлов по сравнению с больными с нормальным генотипом Делецконный аллель гена OCRS не влияет на клеточный состав мокроты.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Постоянный прирост забо.1t с ва с мости раком легкого и смертности от него во всем мире делает чрезвычайно актуальным исследования по изучению факторов, аизеобегнуюшнх либо, напротив, препятствующих формированию этого заболевания. Эпидемиологические и фундаментальные молекулярно-тзетическнс исследования четко показали этнологическую роль целого ряда канцерогенных факторов среды, ведущее значение среди которых имеют связанные с курением метаболиты, а также вовлечение генетических факторов, в первую очередь ответственных за взанмолейеттше с экзогенными и эндогенными агентами, способствующими злокачественной трансформации, в патогенез рака легкого. Однако существует сше один аспект, на который мало обращается внимания, а именно, возможность снижения риска рака легкого при определенных патаэогнческих состояниях, в частности, при аллергических заболеваниях Свидетельством такой возможности являются довольно многочисленные сведения в литературе на протяжении нескольких десятилетий, указывающие на опп слитные взаимоотношения аллергических и раковых заболеваний (М. Sanchez-EJorgcs ег al. 191»; К, Е Osann, 1991; Р Mills ct at,, 1992; Е, Negri ct al,, 1999; A, Talbot-Smith el al. 2003: C. Bosctti el al. 2004; N. Lightfoot ct al. 204)4; J, L Wiemets et q]. 2004) Исследования взаимосвязи аллергии и злокачественных новообразований развивались в нескольких направлениях I) эпидемиологическое изучение связи между частотой развития злокачественных и аллергических заболеваний; 2) изучение на экспериментальных моделях взаимовлияния анафилаксии н опухоли; 3) исследование возможного ан шканнеротшого эффекта клеток и молекул, участвующих в аллергических реакциях немедленного тина. На основании проведенных исследований не было получено однозначных результатов, доказывающих защитную роль аллергических состояний в плане формирования злокачественных опухолей (В. Romanski сГ в!. 1999; Н McHuftic. 2001. А А, Santillan ct al„ 2003; A. Talbot^Smilh el al., 2003). Противоречивость результатов кдиннко-зпидсмиилогичсскнх исследований может быть обусловлена трудностями стандартизации групп обследуемых больных по пазу, возрасту, анамнезу курения и другим факторам, ВЛИЯЮЩИМ mi этнологию и патогенез аллергических и опухолевых заболеваний, а также некорректностью подхода по опенке частоты

ВЛЛСрТНЧССКНХ peUKHIlfl и OllflMimC у 011К0Л01 ИЧССКИХ бОЛЫТЫХ В СВЯЗИ С ВОЗМОЖНЫМ влиянием онкологического процесса или терапевтических воздействия (J. Schwartzbaum cl al. 2005). Ножным также является унификация гго ткани-мишени, которая задействована при аллергических и онкологических заболеваниях. и в этом плане очевидное преимущество имеет изучение взаимоотношений бронхиальной астмы и рака легкого, топографической и морфологической основой для развития которых является бронходег очный зннтелий.

Перечисленные обстоятельства свидетельствуют о необходимости поиска новых подходов к оценке влияния бронхиальной астмы на риск развкгтня рока легкого, что может способствовать обнаружению возможных антиканцерогенных факторов, ассоциированных с бронхиальной астмой МулмнфакториальныА характер аллергических 'заболеваний и злокачественных новообразований предполагает определенную генетическую дегермн н иро ва ш гость функционирования патогенетически важных звеньев, связанных с обссисченнем взаимодействия с ксенобиотиками, поддержания целостности генома н функционирования иммунной системы.

В качестве промежуточной группы сравнения между раком легкого и бронхиальной астмой была выбрана группа больных ХОБЛ, для которой выявлены существенные различия механизмов патогенеза по сравнению с астмой. Тем не менее, шдипшя литературы около 10% больных имеют сочетанмые клинические признаки ХОБЛ и Б А (P. J. Barnes, 2Q03). ХОБЛ является хроническим вослалнгсльным заболеванием легких, которое протекает с участием иммунологических механизмов без формирования гиперчувствителмюеш немедленного типа и сопровождается метаплазией и дне пластически ми изменениями бронхоальвеолярного эпителия. ассоциированными с повышенным онкогениым потенциалом, что указы влет на предрасположенность к малипшзащш

Для получения более объективных данных а взаимосвязи астмы и рака легкого мы изучали генетические полиморфизмы, для которых сеть сведения о значимой ассоциации с раком легкого, у больных ХОБЛ н астмой. В литерагурс представлены данные о связи рака легкого с полиморфизмом генов ферментов метаболизма ксенобиотиков 2 фазы GSTT1 и GSTMI (К. Spitz cl al. 2000; Р Yang et al. 2004; A. WcnvlaflTet al., 2005; I. Stuckcr ct al 2002, E. Belognbova et al, 2004>. гена онкосупресеора р53 а различных популяциях {В, В. Ляхович н лр-. 1997. Е. D. Papadakis et ul- 2002: 1>. Р. МШсг et al. 2004: X. Wu d al 2002). Это свидетельствует, что указанные полиморфные гены являются маркерами предрасположенное! н к онкопатодогии легкого. Сведения о связи гена чемокннового рецептора CCR5 с онкологнческнмн заболеваниями в литературе немногочисленны, однако есть информация о его влиянии на транскрипционную активность белка р53 и о связи CCR5(lel32 полиморфизма с прогрессией рака молочной железы <S. Manes с< al. 2003). В НИН онкологии г Томска были получены данные об ассоциации полиморфизма гена CCRS с раком легкого и его прогрессией (Н В. Севастьянова. 2005).

Мы проведи исследование распределений генотипов вышеу казанных генов у больных ХОЬЛ и бронхиальной астмой и сравнили их с популяционнмм контролем для получения информации об ассоциации изучаемых полиморфизмов с л ими заболеваниями. 11а основании сравнения частоты встречаемое!н отдельных аллелей, генотипов и нх сочетаний у больных ХОБЛ и астмой с соответствующими показателями у бальных раком легкого можно составить представление о сходстве нли ратлнчни изучаемых генетических особенностей. Сходство распределений генотипов или одинаковый характер изменения частоты встречаемости генотипов и аллелей у больных ХОЬЛ или бронхиальной астмой с таковым у больных раком легкого позволяет сулить о сходстве механизмов патогенеза и указывает на наличие генетических предпосылок для формирования рака легкого у таких индивидуумов.

Всею обследовано 420 больных с патологией легких, из них 1R0 первичных больных раком легкого. 158 больных атонической бронхиальной астмой и 83 больных ХОЬЛ. Работа проводилась с соблюдением принципов добровольности и конфиденциальности в соответствии с «Основами законодательства РФ об охране здоровья граждан* (указ Прсиглснга РФ or 24,12.1993 № 2288). Контролем послужили данные о полиморфизме генов GSTTI. GSTMI, р53 н CCRS среди здоровых лиц соответствующей популяции, при пом трупггы контроля были сформированы с учетом максимального соответствия составу иссдслуемых групп по полу и возрасту

Материалом ли исследования полиморфизма ггноц и показателей системного иммунитета служили венозная кровь, для исследования факторов локального иммунитета - индуцированная мокрота.

Возникновение изменений в структуре Д1Ж, приводящих нрн определенных условиях к злокачественной трансформации зннтелня. напрямую зависит от интенсивности воздействия мутагенов внешней среды и генотоксичсскнх агентов эндогенного происхождения, что, а свою очередь, определяется эффелп шностью функционирования систем контроля стабильности генома и ферментативной детокенкапнн, детерминированными генетическими особенностями индивидуума (D Palli ci al. 2004; i Yokow, T Kohi», 2004)

V больных ХОБЛ мы не выявили значимых огличнй в распределении генотипов генов (JSTTI и сочетаний GSTTI и GSTMI от контрольной выборки, нрн этом частота нулеяого генотипа GSJTJ была существенно ниже, чем у больных раком легкого. Частота нефункционального генотипа GSTM1"0''0" гак в обшей группе, так и среди курящих пациагтов с ХОБЛ была значимо повышена но сравнению с контролем и не отличалась от таковой в группе больных раком леткою, Дналит литературы и результаты собственного исследования позволяют предположить, что, по-видимому, нулевой генотип GSTTI не является важным фактором риска заболевания ХОБЛ. нри этом литературные сведения также свидетельствуют об отсутствии ассоциации нулевого генотипа GSTTI с раком легкого в большинстве популяций (Д. Г Янбаева и еоавт,. 2005. J-J, Yim el aL 2000). Влияние полиморфизма гена GSTMI ita предрасположенность к ХОБЛ было показано ДЛЯ европеоидов Великобритании и Франции (Н Baranova el a)., 1997. I) J. Harrison et al. 1997) и в Тайваньской популяции IS. L. Cheng ct ah. 2004)

Нами получены данные, не исключающие роли нарушения функши 6Щ1 и формировании ХОБЛ. что свидетельствует о необходимости дальнейших исследований с учетом повышения репрезентативности выборки. Показанная нами ассоциация генотипа GSTMI«0/0» с ХОБЛ и раком легкого свидетельствует об общих патогенетических механизмах формирования этих заболеваний и о наличии определенной генетической предрасположенности пациентов с ХОБЛ к формированию рака легкого

Оценка распределения генотипов гена GSTTI и сочетания генотипов GSTTI н GSTMI н общей труппе больных астмой показала существенное повышение частоты встречаемости нулевых генотипов ею сравнению с ионуляннонным контролем, стратифицированным но полу н возрасту'- Известно, что для истинно атонической астмы характерно раннее начало заболевания (до 40 лег), а в группе больных бронхиальной астмой с дебютом после 40 дет преобладает смешанный механизм формирования заболевания. Также есть литературные данные о различиях распределения вариантных аллелей iCHoB ферментов бнотрансформашш ксенобиотиков н хсмокиноного рецептора CCR5 у больных бронхиальной астмой разных возрастных групп (С. И Макарова и соавт,, 2002: Р Srivastava et al. 2003). В зтой связи мы сочли целесообразным оценить полиморфизм генов GSTT1 и GSTMt раздельно в вышеозначенных группах больных бронхиальной астмой. Оказалось, что у больных бронхиальной астмой в группе с превалированием пашчентов с астмой смешанною генез» частота генотипа GSTMJ wO/Ow сравнима с таковой, обнаруженной а группе больных раком легкою н значительно выше, чем у больных бронхиальной астмой с манифестацией заболевания в молодом возрасте (топическая астма), у которых пот показатель не отличается от контрольного уровня Согласно литературным данным, нулевой генотип tena GSTM! более строго, чем GSTTI«0'(K ассоциирован с риском немелквкдеточного рака легкого, особенно у некурящих н молодых индивидуумов (Е. V. Belogubova et aL 2004).

Принимая во внимание сведения о том, чго курение является ведущим этнологическим фактором развития рака леткою, а гакже модифицирует риск заболевания раком легкого и бронхиальной астмой у носителей нулевых генотипов ферментов бнотрансформашш ксенобиотиков, мы провел и анализ частот генотипов GSJTf и GSTMt у куряшнх больных бронхиальной an мой и ХОБЛ, в сравнении с группой больных раком легкого,

Для больных астмой мы не пыявили различий в частоте носитедьстиа генотипа GSTMlnO-Oiit в зависимости от статуса курения, тогда как ассоциация гсшшпш GSTM i bOi'O» с повышенным риском заболевания ХОБЛ показана только для ку рящих лиц. Это свидетельствует о модифицирующем аз нянин курения у (метелей нулевых генотипов GSTM I «0/0» на предрасположенность к ХОБЛ, а также указывает ш более высокий риск заболевания раком .теткою Поскольку н у курящих, и некурящих больных астмой различия частоты нулевого генотипа GSTMI«0/0» с контрольной группой одинаковы, можно говорить о незначимой роли курения как модифицирующею фактора повышения риска формирования рака легкого у таких больных

Полученные данные о повышении частоты нулевых генотипов генов глутатнон-$-трансфервз GSTTI и GSTMI у больных бронхиальной астмой не противоречат лизерагурным данным. В ЭТНОЛОГИИ бронхиальной астмы значимая роль также придается загрязнению окружающей среды ксенобиотиками и токсическими веществами, которые снижают барьерную функцию кожи и слизистых; при этом многие ксенобиотики сами являются аллер!снами или гаптенвми или приобретают свойство аллергенов после ферме»»гативной бнотрансформацнн in vivo (Л. Ф. Казначссва и др. 2002) Кроме тою. курение матери во время беременности и пассивное курение является фактором риска формирования бронхиальной астмы у детей {F. [>- Gillilind с( al., 2002; М. Kabesch et al. 2004). Исследования рази активного курения в формировании бронхиальной астмы у взрослых показан и, что курение не влияет на риск развития заболевания, однако способствует более тяжелому течению астмы (V. Sfroux ci al., 2ООО)

Согласно нашим данным, рисковая значимость GSTMI«№0h для формирования бронхиальной астмы повышается с возрастом, это согласуется с результатами других авторов (С. И, Макаром и др . 2002). Вероятно, здесь шрают роль временной фактор экспозиции ксенобиотиков у носителей GSTMI «ОЛЬ» а также щмсненис метаболизма эндогенных биологически активных веществ вследствие нарузиення фу нкции GSTMI. в том числе продуктов перекис но» о окисления и метаболитов арахидоноиой кислоты, которые участвуют в патогенезе хронического инфекционно! о воспаления у лиц со смешанным генезом бронхиальной астмы.

Для форчнрооан»гч рака легкого важное значение имеют нарушения фу нкции одного из ключевых генов, осуществляющих охрану целостности генома ■ он косу пресс ора р53. Его инактивация в клетках щи гелия в результате мутации -одно нз наиболее часто встречающихся событий, ассоциированных со злокачественной трансформацией (С. Витке el в1., 2005; W N. Rom el al. 2000; J Yokota, I Kohno, 2004), при этом важно, что такие нарушения р53 фиксируются же на стадии днсллзстичсскнх измененнй бронхиального эпителия. и частота их нарастает по мере Прогресс иромазшя сгеисми лненлазии (W. N. Rom el а!. 2000). Чувствительность р53 к генотокснческим повреждениям существенно зависит от функциональной активности генов детокснкацни. в число которых входят глутатион^-транферези Исследованиями последних лет у больших раком легкого показана прямая связь частоты мутаций р53 с наличием нсфункшюнальных rerroriHKiB GSTMJ "0/0" (AJcxandruv et al-. 2002), Важное значение в плане подверженное!и р53 повреждению генозокснческнмн агентами может имен» Arg/Pro полиморфном 72 иодоиаД зкзона, оказывающий модифицирующий эффект на чувствительность р53 к инактиваций путем мутаций (М, Bonal'e el al, 2003. М. Tada et al. 2001).

У больных ХОБЛ нами выявлено повышение частоты Arg аллсля гена р53 при снижении частоты Pro аллсля н Pro/Pro генотипа по сравнению с поиуляннонным контролем Различий и распределении геноззнюв н частоты аллелей в группе ХОБЛ с больными раком легкого не выявлено- Больные раком легкого демонстрнрутот повышение час юты Arg аллеля по сравнению с иопудяинонным контролем и тенденцию к снижению частоты Рго'Рго генотипа. В то же время отмечена относительно высокая частота генотипа Pro/Pro у неку рящих больных раком легкого: 20,0% по сравнению с [2,7% в контроле и 9.8% у курящих лиц. зто согласуется с литературными сведениями о повышенном риске зтого заболевания у носителей функционально неблагоприятного аллеля Pro (К. Kuwapn el al. 1993: G, Liu el al, 2001). Полиморфизм p53 у бальных ХОБЛ практически не изучен, В одной работе получены данные, свидетельствующие об ассоциации аллсля Pro с риском заболевания ХОБЛ у курящих лиц в популяции монголоидной расы (Y-Г, Wang ct aL 2005).

В результате проведенного в настоящем исследовании анализа нами не выявлено различий распределения генотипов и аллелей гена р53 в зависимости от фактора курения, вероятно я связи с небольшим числом наблюдений в выделенных подгруппах Памп наблюдалась тенденция к повышению доли лиц, гомозиготных >ю Arg, среди курящих,

Таким обратом, нами обнаружено сходство распределения генотипов гена р53 (Arg/Pro полиморфизм 72 кодона 4 зкзоца) у больших раком легкого н ХОБЛ: при обоих заболеваниях выявлено повышение частоты Arg аллеля и снижение частоты Рго/Рго генотипа ин сравнению с понуляпионным контролем Наши результаты находятся в согласии с пред ста впеннымн ранее В. ВЛяховнчем с соавторами данным и .'Ui« Западносибирской понулянни о повышении частоты Arg аллеля в группах бальных раком желудка и раком легкого (В.В Ляхович. и лр. 19971. а также ряда зарубежных авторов (F. D. Papadafcis ei al, 2002, t. Wang et al. 1999). Следует отметить, что литературные данные об ассоциации Агц/Рго полиморфизм 72 колона 4 экзона гена р$$ с раком легкого достаточно противоречивы, и это не является только следствием популяцнонныч различий. Показано, что в опухолях происходит селекция полиморфных аллелей рЗЗ с более высокой способностью к мутациям, в частности, для опухолей легкого. молочной железы, головы и шеи и ряда других было установлено селективное преимущество опухолевых клеток, несущих p53Arg. при згом отмечена ассоциация с низкими показателями выживаемости больных (М. Furihala el al,. 2002; fL Papadakis et al. 2002: A. Langerod et al,. 2002: M. ВонаГе ct al. 2003), Экспериментально было показано, что селекция в сторону Arg происходит только при наличии в гене рS3 рецессивных мутаций, необходимых для полного нарушения апонгогического пути через инактивацию гена р73, Для домина1ггнз.1х мутаций. способных самостоятельно инактнвнровать апозттотнческую активноегь дикого варнвнга р53, такой селекции не требуется (М. Tada et а!., 2001). По-видимому, но в какой-то мерс может обменить разноречивое п. данных разных авторов о связи полиморфизма рЗЗ с риском формирования рака легкого и чувствительностью р53 к генотохснческнм воздействиям (Т. Murala ct al. 19%, X, Jin el al. 1996, Y, Hu et al 2005).

Неизученные нами данные свндсгсльствузот об отсутствии ассоциации полиморфизма р53 с риском заболевания бронхиальной астмой, однако у больных бронхиальной астмой смешанного генсза выявлена ассоциация Pro аллеля с тяжестью течения заболевания. Поскольку известно, что степень тяжести бронхиальной астмы зависит от степени дефекта аполтоза лимфоцитов и юзннофилов, a Pro аллель менее эффективен в индукции молпщ, можно полазать, что юмозитотное состояние по аллелю Pro у больных бронхиальной астмой ассоциировано с нарушением нндукпни запрограммированной гибели им му нокомпстснт нмх клеток и способствует переипщуюцпу иммунному яжпалснкю в легких (В. А. Невзорова и лр. 2001; Т. В. Мамонтова. И II. Кайдашсв, 2004; К. L. Woolley cl al- 1996: Н, Kankaanranla ct al-, 200!>. Степень дефекта апогттоза при бронхиальной астчс прямо пропорциональна активности процесса и степени тяжести заболевания

При исследовании биоптатов бронхиального эпителия выявлено, что уровень экспрессии гена р53 у больных бронхиальной астмой меньше показателей здоровых лиц и наиболее низкий у больных с тяжелой степенью астмы (А. М VignoJa ei al. 200]; 1.1. Ivanchufc ci al,. 2005: A. E. Sa*onov a aJ 2005). Кроме тога в ряде исследований выявлен повышенный уровень хромосомных аберрашй в лимфоцитах, мнкроядрах в тритротггах и буккальных клетках у больных бронхиальной астмой, что косвенно свидетельствует о нарушении систем контроля стабильности генома при этом заболевании (О. К. Бугорнна и лр., 1992: А. В Семенов и др. 2003).

С другой стороны, геи pSi участвует в регуляции экспрессии рецептора глю ко кор гикостсрондо■ (G, I. Gatiguli ei al. 2002; А. С. Maiyar el al,, 2006). Базисная противовоспалительная терапия тяжелой бронхиальной астмы предполагает использование iлпжокортнкостероидныч препаратов в высоких дозах, а тяжелое течение астмы в ряде случаев ассоциировано с устойчивостью к стероидной терапии Возможно, вариантные генотипы р53 обладают различной функциональной активностью в отношении регул чини экспрессии рецептора глюкокортикостсрондов. при этом также вероятно снижение апоптотнчсскою потенциала клеток у лиц с Рто-'Рго генотипом (X, Wu el al. 2004), Su и соавторами (2003) было показано, «по в лейкоцитах носителей Pro адделя гена pSJ наблюдалось снижение экспрессии m РНК гена p2l(Wafi Cipl), одного из таргетных ;шя pSi генов, важною для осуществления апоитоза.

Полученные данные свидетельствуют о необходимости дальнейшего исследования роли функционального полиморфизма гена р53 в патогене тс (яжелой бронхиальной астмы.

Хсмокнновые рецепторы эксирессирутотся лейкоцитами, нейронами, миоцнтамн, фиброцитами, ииютелиоцнгамн и эпнтелноипгвмк Помимо соматических и нммунокомпетситкнх клеток, хсмокнны пролутшруютея опухолевыми jLirrxa.Mii. так же на опухолевых кдетхах обнаружены репс'?? горы для хсмокннов. Многочисленными исследованиями наказано, чго хемокнны непосредственно вовлечены в процесс нсоангногенеза, а также принимают участие в распространении метастазов в лимфатические узлы и в формировании органо* сиецифнчеекнх метастазов (R, М. Stricter el al. 2004; Г. Kakinuma et al. 2006, A. Ztotnik. 2006).

Лиганламн для CCR5 являются хемокшш RANTES, MlPl-a н p. MCP-2 и МСР-4. ССЯ5-опосредованныЛ сигнал ведет к активации нммунокомпетентных клеток и их миграции в очаг воспаления. Таким образом. CCRS и его лигакды функционально вовлечены в процессы естественного н специфического противоопухолевого иммунитета (I; Lovergne et а!,, 2004), С другой стороны, имеются свидетельства, указывающие на роль CCR5 в мстастазнрованнн злокачественных опухолей, в частности, получены данные о том, что повышенная экспрессия рецептора стромальнымн клетками ассоциирована с мсетно распространенным опухолевым процессом и способствует формированию отдаленных метастазов при раке легкого (II. W Ocvcnier el al. 2005). Важным представляются и уже упоминавшиеся выше данные о вовлечении CCR5 в регуляцию транскрипционной активности рЗЗ модифицированных клеток и связи CCR5<Scl32 полиморфизма с прогрессией рака молочной железы (S. Manes et al., 2003), а также о накоплении CCR5>'CCR5del32 генотипов у больных раком летного с метет азами в регионарные лимфоузлы (Н, В Севоегьинова и др. 2004). Вес вышесказанное послужило весомым основанием для исследования полиморфизма гена хемокннового рецептора CCR5 у больных ХОБЛ и бронхиальной астмой.

У больных ХОБЛ не выявлено изменений распределения генотипов гена CCRS по сравнению с популяционным контролем и раком легкого. Олняко отмечена более ишкая, чем в контроле, чае гота сочетаний генотипов CCR5/CCR5-Рго-'Рго, при зтом значимых различий с труппой рака легкого не выявлено. С одной стороны, это указывает на нротсктнвное значение данного сочетания киогииов в отношении формирования ХОБЛ и подтверждает данные, представленные выше, и отношении Рго-Рго генотипа и Pro аллеля. С другой стороны, это дает основания заключить об отсутствии различий в распределении генотипов CCRS (полиморфизм CCR5del32) у больных ХОБЛ н раком легкого.

У больных бронхиальной астмой частота лелешкинюго аллош CCR5dcr32 существенно ниже, чем н лопулиционном контроле, н минимальна при астме атонического генеза с легкой степенью тяжести, составляя всего 2,5% uptime I1% в популяннонном контроле, Интересно, что частота деледиоиного аллсля у больных астмой с вовлечением нескольких органое-мш&еиеП а аллергический процесс н у больных ХОБЛ с латентной сенсибилизацией была значительно снижена, а у больных эегмой бет других сопутствующих аллергических заболеваний и у больных ХОБЛ без латентной сенсибилизации не отличалась от показателя понудяционною контроля и больных раком легкого. Инверсная нллраазенноегь изменений частоты CCR5deL32 у больных раком легкого и атонической бронхиальной астмой указывает на защитное значение атонической конституции в плане предрасположениостн к развшию рака легкого.

В группе с атонической астмой частота сочетания генотипов CCR5rcCR5det32-AigMfg ниже, а комбинации генотипов CCR5'CCR5<lcl32-Pro-Pro выше, чем в контрольной группе, то есть можно говорить о ассоциации последней комбинации с повышенным риском формирования астмы агоническою гене и. Среди больных раком легкою вообще Не Найдено лиц с сонешннем CCR5/CCR5del32-PrO'lPro. при этом интересно, что для астмы и ХОБЛ выявлены ассоциации с разными сочетаниями генотипов Ото служит дополнительным указанием на различия механизмов вовлечения CCR5 в патогенез этих заболеваний и косвенно указывает на разный характер накопления генетических вменений в группах больных атопнческой бронхиальной астмой и раком легкого.

Инфильтрация тканей легких эоишофмламн у больных астмой ассоциирована с повышенной экспрессией хсмокиновСС семейства: МСР-3. МСР-4 и K.ANIliS Дефншп экспрессии CCR5 на клетках может снижать хемотакснчсский потенциал указанных хсмокннов. Установлено, что нейтрализация RANTES у мышей уменьшает гнпсрреактивность бронхов, а у мышей с нокаутом (удалением) гена CCRS. кодирующего белок-рецептор для R ANTES, ослаблена чунсгвнгельность к метахолину и понижен уровень воспалительных клеток и их медиаторов а респираторном тракге (J М, Schuh ei al, 2001). Эти данные подтверждают, «гго наличие дефектного аллсля CCR5del32 может снижать риск заболевания бронхиальной астмой и укатывают возможные механизмы такой связи.

Иол понятней «атоническая конституциям принято понимать совокупность генетических особенностей индивидуума. способствующих формировании* предрасположенности к развитию реакций гипсрчувствитсд ьностн немедленного типа. Убедительно покатано, что полиморфизм генов, регулирующих аллергснепеинфическнй иммунный ответ, а именно сцепленных с главным комплексом гнстосовместимости (HLA) и Т-щеточным рецептором, модифицирует риск развития бронхиальной астмы (I Rout ei al., 2000: А, Н. Ьоюрод и др. 2002).

Как показано выше, нами выявлены существенные различия в распределении генотипов и частоте встречаемости патогенетически значимых аллелей между группами бальных с атонической астмой и больных старше 40 лет, в которой превалируют больные с астмой смешанного 1снеза Во-первых, -по свидетельствует о различной рази изучаемых генов в патогенезе этих розных форм астмы, во-вторых, указывает на неоднородность труппы больных бронхиальной астмой в плане возможной предрасположенности к року легкого. Это позволяет объяснить хотя бы частично неоднозначность результатов проводившихся рапсе клнннкй-оцндсмиологических исследований о взаимосвязи бронхиальной астмы и рака легкого.

Согласно полученным данным, в 70% случаев при ХОБЛ и бронхиальной астме формируются вторичные иммунодефицитные состояния, проявляющиеся хроническими рецидивирующими инфекционными заболеваниями, которые также нередко отмечаются в анамнезе, предшествующем развитию опухоли у больных раком легкого. Структура клинических проявлений вторичного иммунодефицита сходна с особенностями преморбидного фонд у больных раком легкою В клинической картине иммунодефицита больных бронхиальной астмой и раком легкого с большей частотой, чем при ХОБЛ. встречаются заболевания, ассоциированные с дефектом клеточного звена иммунитета. Па основании результатов проведенного исследования можно нредгюдожнть, что вторичный иммунодефицит у бальных ХОБЛ и бронхиальной астмой может являться дополнительным фактором, способствующим развнппо рака легких.

Исследование показателей иммунной системы в периферической крови и мокроте было проведено у случайно выбранных бальных изучаемых нозологнй (по 25-40 человек), при этом последующий анализ группы пациентов с астмой показал преобладание пациентов ео смешанной формой бронхиальной астмы (б7г5%).Несмотря на различии нммунопатогенеза таких хронззческнх заболеваний легких как бронхиальная астма н ХОБЛ, выраженных различий на уровне системного иммунного статуса при данных патологических процессах нами не выявлено, Показатели клеточного звена иммунитета н фагоцитарной активности нейтрофилов при раке легкого были ниже, чем при бронхиальной астме и ХОБЛ, по-видимому, зто обусловлено иммуносупресснвным влиянием опухоли У пациентов всех обследованных групп вровень общего Igl- превышал границы нормы, при пом значимых межгрупповых различий не выявлено. Вероятно, повышение уровня IgE у больных ХОБЛ и раком легкого связано с высокой частотой латентной сенсибилизации, о чем свидетельствуют данные литературы (А. В. Зурочка и др. 2005) и полученные нами результаты, а также с активизацией локального иммунного ответа вследствие нарушения проницаемости слизистой бронхиального дерева.

Мы взаявндн дефицит С СМ + лимфоцита в иериферн чес кой крови, а ток же л нмфоци гонению и зозинофилию в индуцированной мокроте у больных раком легкого по сравнению с показателями здоровых лиц У больных ХОБЛ и больных бронхиальной астмой был обнаружен более высокий уровень CD8 + н CD 16* лнмфощггоа крови и солержания лимфоцитов в индуцированной мокроте

Выяшзсзю повышение содержания лимфоцитов в индуцированной мокроте у носителей аллеля Pro при астме и ХОБЛ, Кроме того, вызывает интерес факт снижения уровня эоэннофилон в мокроте больных бронхиальной астмой с генотипом Рго'Рго Согласно литературным сведениям, уровень зозинофилои в мокроте находизся в прямой зависимости от степени тяжести заболевания Обследованные нммунологнческн двое больных бронхиальной астмой с генотипом РгоТго имели легкую и среднюю степень тяжести заболевания. Результаты проведенного нами исследования полиморфизма гена pSi у больных бронхиальной астмой демонстрируют ассоциашио генотипа Prcu'Pro е тяжелым течением заболевании "Уто не может быть объяснено ассоциацией аллеля Pro с повышенной выживаемостью зозииофилов у больных с тяжелым течением астмы. Вероятно» здесь имеют место другие механизмы усугубления тяжести клинической картины заболевания, в том числе влияние белка р53 на экспрессию рецептора г,' но ко к ортн костс ро и л о в. «по может изменять индивидуальную чувствительность к противовоспалительной терапии у дни с различными генотипами/Ш

Хсмокнновый pcueirrop CCR5 является хсмоаттрактангом для активированных лимфоцитов, дендритных клеток, макрофигов, NK-клеток ц тозннофнлов, следовательно вовлечен в процесс клегоч1к>й инфилиреднн слизистой бронхов нрн воспалении В результате генети'кского полиморфизма гена, кодирующего рецептор, изменяется уровень зкспрссснн CCR5 на мембране иммунокомпетеитных клеток, что может влиять на характер вое паления в легких у дин с различными генотипами CCRS- В связи с низкой частотой делеционного аллеля гена CCR5 в общей популяции и у обследованных нами больных не представлялось возможным исследовать ассоциацию CCR5del32 с параметрами иммунной системы у больных раком депннв и бротгхняльной астмы, ffirrb из двадцати четырех обследованных нммунолотческн больных ХОБЛ имели гетерозиготное состояние но атлелю CCR5del32, показатели клеточного состава и цнтокнноного профиля индуцированной мокроты в згой подфушю не имели значимых различий с группой постелей нормального генотипа. По-видимому, нарушение зкспрссснн CCR5 не вносит существенный вклад в хемотаксис нммун0к0мнстс1гтных клеток и компенсируется участием других хемокнновых рецепторов в этом нроиессе.

Проведенное нами исследование связи полиморфизма гена (JSTMI с особенностями иммунного воспаления в слизистой бронхиального дерева больных бронхиальной астмой и раком легкого выявило более высокие показатели содержания юзинофилов в индузщрованной мокроле у носителей генотипа GSTMI«0'1>* но сравнению с функционально полноценным генотипом. По-видимому это обусловлена изменением метаболизма производных арахидоновой кис-юты (иростагдандннов и лейкотрнснов) и повышенным образованием нммуногенных (аллергенных) соединений в слизистой бронхиального дерева

В и илу титрованной мокроте больных ХОЬЛ и бронхиальной астмой выявлен высокий уровень основного хемотаксичес кого фактора нейтрофнлов VIJ1-8 и повышенное содержание нейтрофнлов, более выраженное при ХОБЛ. результаты согласуются с полученными ранее в НИИ онкологии данными (Л, В, Гердт, 2006) о том, что уровень экспрессии ИЛ-8 существенно повышен у больных хроническим бронхитом с днсидаегнческнмн изменениям и бронхиальног о эпителия I и 2 степени тяжести, что свидетельствует о его ассоциации с предраковыми состояниями эпителия слизистой. У больных астмой выявлено преобладание функциональной активности Th2 лимфоцитов, о котором судили по соотношению нитокинов ИЛ-4/ИФН-у но сравнению с больными ХОБЛ и больными раком легкого, что можно рассматривать как свидетельство относительного дефицита клеточно-оиосрсдованного иммунного ответа,

Таким образом, в настоящем исследовании впервые применен оригинальный полход к исследованию характера взаимосвязи рака легкого и бронхиальной астмы, основанный на анализе сходства и различия патогенетических признаков этих заболепаннй. В пределах одной популяции проведен сравнительный анализ полиморфизма патогеиетн'ссски значимых для формирования рака легкого генов фсрмсигов бнотрансформацнн (JSTT1 и GSTM1. гена онкосупрессорпого белка pSS и гена хсмокннового рецептора CCRS у больных бронхиальной астмой и больных раком легкого.

Сходство распределений генотипов или одинаковый характер изменения частоты встречаемости генотипов и аллелей у больных ХОБЛ нлн астмой с таковым у больных раком легкого позволяет сулигь о сходстве механизмов патогенеза и указывает на наличие генетических предпосылок для формирования рака легкого у таких индивидуумов.

Нами получены результаты о сходстве распределения генотипов генов ФБК CSTTI и GSTMI.pSS и CCRS у больных ХОБЛ и раком легкого, что ласт основания говорить о наличии генетической предрасположенности у индивидуумов, страдающих ХОБЛ. к формированию рака легкого.

В группе пациента» с бронхиальной астмой позднего дебюта, в которой преобладали больные с астмой смешанного генсза. распределение генотипов (снов ФБК евндетсдьегаовадо об ассоциации нулевых генотипов с формированием заболевания, при ном характер распределения не отличался от такового у больных раком легкого. V больных атонической астмой не найдено ассоциации с нулевым генотипом GSTM I. важная роль которого докатана в повышении предрасположенности к раку легкого, особенно у дин молодого возраста (Е. V. Belogubova ct at., 2004). При этом важными являются данные об инверсии связи полиморфизма CCRS с астмой, особенно выраженной для больных е ранннм дебютом заболевания (атоническая астма), по сравнению с полученными данными для рака легкого,

Характер генетических изменений у больных бронхиальной астмой атонического и смешанного генеза свидетельствует, во-первых, о различной роизн изучаемых генов в патогенезе разных форм астмы, во-вторых, указывает на неоднородность группы больных бронхиальной астмой в плане возможной предрасположенности к раку легкого. С одной стороны, зго объясняег противоречивость результатов кдинико-энидемнологичеекнх исследований влияния астмы на риск формирования рака легкого, с другой стороны, позволяет говорить о существовании факторов, как способсгвуюпшх. 1ак н не предрасполагающих к развитию рака легкого у бальных бронхиальной астмой.

Выявленные особенности системного и локального иммунитета, ассоциированные с формированием вторичной иммунной недостаточности клеточного звена иммунного ответа и клеточно-молекулярные особенности бронхиального зпнтелня. ассоциированные с высокой вероятностью появления днсгдастичсскнх изменений, свидетельствуют о наличии молекулярно-генстических предпосылок для реализации злокачественной транеформинии эпителия у больных бронхиальной астмой смешанного генеза,

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Васильева, Мария Владимировна, 2006 год

1. Ало. В. А, Аллергия и рак? / В, А, Ало. К. В. Васильев. Л. А Горячкина -Томск: Изд-во Томск. Ун-та, 1982, 142 с.

2. Анализ связи полиморфизма генов GSTTI. OS I'M I, сур2е!9 и CYP2Ele атонией у жителей г. Томска / М- Ь Фрейлин. Е, К). Брагнна, Ф И. Петровский и др. // Медицинская иммунология, 2003. - Т. 5. К> 1-2. - С. 107122.

3. Ассоциация полиморфизма г сноп ферментов био трансформации и детокенкаинн ксенобиотиков с особенностями бронхиальной астмы у детей С. М. Газнлов, О. А. Рябова. II. А. Вавилнн и лр. Н Аллергология. 2000. - Лэ З.-С. 14-20,

4. Бережная, Н. М. Биологическая роль иммуноглобулина Е/И.М. Бережная, С. И- Ялкут // Киев: Наук-думка, 1983- С, 90-10А.

5. Бережная. Н- М Индукция противоопухолевых механизмов нрн инкрнродукцнн иммуноглобулина Е > Н. М, Бережная. Е. Б, Ковольчук I) 'Экспериментальная онкология. -1991 Т. 13, № 2, - С- 41-43.

6. Бережная. Н М. 'Эозинофилы. базофнлы н иммуноглобулин Е в п ротн BOOl 1 ух ол с во й защите I И. М. Бережная, В Ф. Чехун, Р. И. Сениашвилн // Аллергопотя и иммунология. 2005 - № ! -С. 38-49.

7. Богорол. А. Е» Роль генетических факторов в развитии бронхиальной астмы у детей / А. Е Богорол И Пульмонология. 2002- - Jfo 1 - С. 47-56.

8. Брапнш, Е. Ю, Взаимосвязь полиморфных вариантов генов биотрансформацин с мулътнфакторнальны.чн заболеваниями ' EL Ю. Нрагнна, Е. С- Гусарсва, М. Б, Фрейлин // Генетика человека и патология. Выпуск 6. -2002.-С. 17-23.

9. Ьугори на. О- К. Одно- и двуннтевые разрывы ДМК в лейкоцитах периферической крови у больных бронхиальной астмой. В кн.: Генетика человека и патология > О. К Бугорннз, 3, П. Абрамова, В.В Семенов и ;ф ■■'■■" Томск: ТГУ 1992 . - С 53-54

10. Васильев, И В. Аллергия и экология, научно-познавательный очерк / Н. В. Васильев, Ю, Л. Волмюпй. В, А. Ало и др.// Харьков: Основа. 1994, С. 235250.

11. Влияние возраста н пода на предрасположенность к бронхиальной астме у детей с различными генотипами GSTM1, GSTTI и NAT2 / С. И. Макарова. В. Л, Ванилин, О. Б Чпеовникова и др, // Пульмонология, 2002. - № 5. - С. 4652.

12. Ганцев. ill. X, Онкология ' Ш, X, Ганиев К Издательство: МИЛ. 2004. 516 с.

13. I у лиева, С. А. Течение аллергических феноменов при экспериментальном раке t С, Л. Гулисва Н Сборник трудов азербайджанского государственного инстэттута усовершенствования врачей, Наку. 1962 ■ Т 5- С. 30-35.

14. К вопросу о роли IgE / Н. Н, Петрсня. Л. В. Сснькова. К. Г Добродеев и др. U Тезисы докладов объединенного иммунологического форума. Гкатсрннбур*. 31 моя 4 нюня, 2004 г Russian journal of immunology. - 2004. - T- 9. № I. -С. 119.

15. Коган, Е. А. Молекулярная патология прелрага и рака легкого t Б. А, Коган D Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохнна РАМН. 2003. - № 1, - С, 13-22.

16. Копннн. Б. П Мишени действия онкогенов и опухолевых супрссеоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза I Б. П. Копннн // Биохимия. -2000.-С. S-33.

17. Лихтенштейн. А В Генодиагностики рака реальность н перспективы / А. В Лихтенштейн, Г. И. Потапова И Патологическая физиолог им и экспериментальная терапия. 2005- -Ш,-С. 2-7.

18. Мамонтова. Т В Состояние CD95-. МСН1- и MCHIJ-опосреловянного апоптоза у больных атонической бронхиальной астмой / I 13. Мамонтова. И П. Кайдашсв Иммунология 2004. ■ № 4, -С. 198-201,

19. Мел коклет очный рак и карциионды легких: морфология апоптоза и экспресс и* бномолекудярных маркеров опухолевого роста / МЛ. Пальцев. С. А.Демура, Е- А. Коган и лр. // Архив патологии. 2000-11-17.

20. Механизмы аоспадения бронхов м легких и нротнвоиосшыктсльиая терапия. I Б. Федосеев и лр., иод рсл. Г, В. Федосеева СПб.: Норысд-Иэдат, 1998 468 с.

21. Нарушения генетического гомсостаза у детей бальных бронхиальной астмой / А. В. Семенов, А- П. Пягплов. ft. В. Семенов, Е- С. Конлтаева // Пульмонология. 2004.-Т.14.Х» 1.-С 105-109.

22. Невзорова, В, А. Аноптоз и воспаление при бранхнилмоИ астме / В. А. Невзорова, Т. Н. Суворенко, Е. Н Коновшшва // Терапевтический архив. -2001.-Jfc 12.-С. 92-96.

23. Некоторые юттологическне и биохимические показатели индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой и хроническим обструкгнвным бронхитом / В. А. Невзорова. Е. Н Коновалова. Л, В, Хоченко и лр. // Цитология. 2002.-Т.44.№ 12, С. 1212-1219.

24. Полиморфизм генов тдутатиогпраисфераз 0» и ji| (GSTT1 и GSTMI) у больных атонической бронхиальной астмой в Занално-Снбнрскоч pet ионе М. Б. Фрейлин. Н. Ю. Брвгина. Л. М. Оторолова, В. П. Пузырев // Молекулярная биология. 2002. - Т. 36. № 4 С 630-634

25. Полиморфизм генов семейства глутатнои-К-трансферазы (GST) при бронхиальной астме у детей / Л. А, Желсннна, Т. Э Ивашснко, Н, С. Ефимом и лр. // Аллергатотия. 2003- Х?2. - С. 13-16,

26. Полиморфизм С-703Т-гена IL-5 и маркеры эозимофильного воспаления у больных бронхиальной астмой н их родственников / Л, М. Огородова. В. П, Пуэырев, О. С. Кобякоаа н лр. Ч Пульмонология. 2(ЮЗ. - Хг 5- - С. 31-34,

27. Полиморфизм ферментов бнотрлнеформаннн кеенобнотнков у детей с атоническим дерматитом / Л. Ф. Казначеев*. В. А- Ванилин, А. А. Ляпунова и др. // Аллергология. 2002. - 4. - С. 15-17,

28. Прогностические маркеры рака легкого / Е, В Степанова. К, К. Лактионов. Б. Е Полоцкий и др. И Рос. онкол. жури 200J. • Л® 5. - С. 22-25.

29. Ройт, А. Иммунология. / А. Ройт, Дж . Бростофф. Д. Мснл; пер. В. И. Кондрора, А Н. Мапа. Л. A. IIcbhhiikoio, М А. Серовой М- Мир, 2000. 592 с,

30. Ссиостьяноиа, Н- В. Особенности и механизмы экспрессии молекудярно-бнологнческих маркеров опухолевого роста при раке легкого / Ссвостьянова 13. В Автореф, дис. д-ра мед. наук Томск. 2004. 42 с,

31. Спонтанный и глюкокортнкосгероид-нидуцированный апоггтоз лимфоцитов больных атонической бронхиальной атсмой: роль мзггохондрнй и CD95 (аро-I) / С. В. Бойчук. И. Г. Мустафнн, Р. С. Фасеахов. Д. В. Терещенко И Аллергология, 2002. - А 1 - С. 13-20.

32. Трахзенберг, А. X, Рак легкого I A. X, Трахтенберг // Избранные лекции но клинической онкологии I Под ред В, И. Чиссоиа, С. Л. Дирьяловой, М . 2000, - С. 297-33.

33. Тяжелая бронхиальная астма у детей: факторы риска и течения / Л М. Огородом, JO. А. Петровская, Е, М. Кошпыно» н др.)) Пульмонология 2002 -Х? I -С.68-71.

34. Флейс. Дж. Статистические методы для изучения таблиц долей и пропорций Дж. Флейс И М- Финансы И статистика, 1989. 319 с.

35. Франк, Г- Л. Прсдрак, диспдазня и рак / Г. Л. Франк и И игранные лекции по шшршой мкалогак / гвдд ред. В, И Чкссова. С, Л. ДарьяловоЛ. М 2000 -С, 52-63,

36. Xamoa, Р М Иммунологи* / Р. М Хаитов, Г. А, Игнатьева. И. Г Сидорчук, под ред. Р- М. Хлитова ti М: МЫПЦЯШ. 2002. 432 е.

37. Шаарцбурд, П. М- Хроническое воспаление повышает риск развития эпителиальных новообразований, индуцируя предраковое м нкроокружение анализ механизмов днсрс!улянпн /П- М Шаарцбурд. // {опросы онкологии. 2006. -Т. 52, №2. -С. 137-144.

38. Ярил ин, А. А. Аногпоз природа феномена и ею роль в целостном организме А. А. Ярилии / Пат, Фнзиол, 1998, № 8. -С, 38-40.

39. A phase II study of outpatient subcutaneous histamine difaydrochloride, interleukm-2 and interferon-alpha in patients with metastatic melanoma / 11 Schmidt, S Larsen. L. Bastholl ct al- //Ann, One, 2002, - Vol, 13. N 12, - p. 1919-1924,

40. Adams W. J Cimctidine inhibits in vivo growih of human colon cancer and reverses histamine stimulated in vitro and in vivo growth / W J Adams, J- A, Lawson, D. L Morris It Gut -1994 ■ Vol. 35. ■ P 1632-1636.

41. Airway and systemic inflammation and decline in lung Junction in patients with COPD / G. C. Donaldson, Г. A. R, Scemungal. I S, Patct et al. // Chest. 2005 -Vol. 128. P 995-2004,

42. Allergy and the risk of selected digestive and laryngeal neoplasms t C, Bosetti. R, Tatamim. S. Franeeschi et al. it Eur J, Cancer Prev 2004. - Vol. 13, N 3. - P. 173176

43. Apoptosis signals in atopy and asthma measured with cl>NA arrays / M. H. Bnitsche. I. C. Brutsche. P Wood et al. /Clin. Exp, Immunol. 2001. Vol. 123. N 2. -P. 18Ы87.

44. Apoptosis, proliferation. and expression of Bcl-2. Г as, and l as ligand in bronchial biopsies from asthmatics ' A, Droilhc. B. Walhvert, A Tsicopoulos et al. tt Am. J Respir. Се» MoL Biol. 1998. - Vol. 19, N 5 P 747-757.

45. Association of CCRS delta 32 with reduced risk of asthma i I. P. Hall. A. Whcailey. G, Christie ct at// Lancet, 1999. Vol, 354. - P 1264-1265.

46. Association of CCR5A32 with reduced risk of childhood bul not adull asthma i P Snvasiava. P.J. Helms. D, Stevatl et al. U Thorax. 2003. - Vol. 58. - P. 222-226.

47. Autonomous histamine metabolism in human melanoma cells > Z. Darvas, E. Sakurai. H,G. Schwetberger et at. // Melanoma Res. 2003. - Vol, 13. N 3. - P 239246,

48. Bat. T, R. Structural changes in the airways in asthma: observations and consequences / T R, Bai, D A. Knight U Clin. Sci, (Lond), ■ 2005. Vol. 108. N 6.1. P. 463-477

49. Barnes. P. J Glucocortieosteroids l P. J. Barnes н Drugs for the treatment of respiratory disease / D, Spina, С. P Page, W. J. Metxger et al. Cambridge, UK Cambridge University Press. - 2003 - P. 32-55.

50. Boron, J. A. Nonsteroidal ami-inflammatory drugs and cancer prevention / J. A, Baron, R. S. Sandler tt Ann, Rev. Med. 2000. Vol. 51. P. 5| 1-523.

51. Bcl-cxpression in sputum eosinophils in patients with acute asthma / A- S Jong. L S. Choi. S. L« ei al. U Thorax 2000 - Vol. 55, N 5 P. 370-374.

52. Bennett. W Molecular epidemiology of human cancer risk: gene environment interactions and p53 mutation spectrum in human lung cancer W Bennett. S. Hussatn, K- Vahakangas //J.Palhol. 1999. - Vol. 187. - P. 8-18.

53. Uiebcr. T. Fc epsilon R1 -expressing antigen-presenting cells: new players in theatopic game T, Bicber // Immunol. Today. 1997, Vol, 18. № 7 - P 311-313.

54. Briggs, N. C. Allergies and risk of non-Hodgkin's lymphoma by subtype t N. С Briggs. R, S, Levinc, E. A- Bratrn // Cancer Epidemiol. Biomarkers Pre v. 2002. -Vol. II -P.401-407.

55. C-C chemokine rcccpior 5 on stromal cclls promotes pulmonary metastasis ! H, W. van Deventer, W. Jr O'Connor W. j, Brickcy ei al. t Cancer Res 2005, Vol, 65- P. 3374-3379.

56. CCR5 expression influences the progression of human brcasi cancer in a p53-dependent manner / S. Manes, H. Mira. R. CoEomer el al. i! J. Exp. Med. 2003. -Vol 198.N3.-P 1381-1389,

57. Cellular and molecular mechanisms in chronic obstructive pulmonary disease: on overview / A Di Stcfano, Ci- Caramori, I-'. L Kicciardolo et al.! Clin. Exp, Allergy- 2004. Vol 34, N 8. - P I156-1167,

58. Cervical intraepithelial neoplasia is associated with increased poly amine oxidase and diamine oxidase concentrations in cervical mucus / M, S, Rogers, S, F. Yim. K, C. Li ct al. U Gynecol. Oncol. 2002. - Vol. 84. N 3. - P, 383-387

59. Changes in smoking habits and risk of asthma: a longitudinal population based study / N. S. Godtfrcdsen. P. I angc. E. Prescott ct al. // Eur. Rcspir. J. 2001. -Vol. 18. - P. Я9-554.

60. SO. Chcmokines and their receptors guiding T lymphocyte recruitment in tung foflammtttkm ' D. 1УАтЬгг1<?(>. М- Mariani. P. Ралгпд. F. Sinigagfia •"' Am. J Rcspir. Crit. Can? Med. 2001. - Vol. 164. N 7 - P. 1266-1275.

61. Chung. К F. Cytokines in asthma t К F- Chung. P. J, Barnes H Thorax 1999 -Vol. 54. P 825-857.

62. Combinations of the variant genotypes of GSTPI, GSTMI. and p53 arc associated with an increased lung cancer risk / D. P, Miller. G, Liu. t. De Vivo et al. И Cancer Res 2002. - Vol. 62, N 10. - P 2819-2823.

63. Comparison of IgE and IgG antibody-dependent cytotoxicity in vitro and in a SCI J) mouse xenograft model of ovarian carcinoma I H, J. Gould. G, A. Mackay. S. N, Karagiaruiis ct al. tt Eur. J. Immunol. 1999. - Vol. 29. N 11, - P. 3527-3537.

64. COPD increases the risk of squamous histological subtype in smokers who develop non-small ccll lung carcinoma ! A. Papi. G, Casoni. G. Caramori et al. H Thorax 2004. Vol. 59, - P. 679-681,

65. Correlation of tissue and plasma RANTES levels with disease course in patients with breast or cervical cancer / Y. Niwa, II Akamatsn. H. Niwa ei al tt Clinical Cancer Research. -2Q0I.- Vol. 7, P. 285-289

66. Crawford. E. Normal bronchial epithelial ccll expression of glutathione transferase PI. glutathione transferase M3. and glutathione peroxidase is low in subjects with bronchogenic carcinoma t E, Crawford. A Sadik tt Concer Research 2000,-PJ609-16IR

67. CXC chcmokines in angiogenesis / J. A, Belperio. M P. К cane. D. A, Arenberg et al, U J, Leukoc. Biol- 2000, - Vol. 68. - P. 1-Я.

68. CXC chemokines: angiogenesis. immunoangioslasis. and metastases in lung cancer t R, M. Stricter. J, A. Belperio. M, D Burxlick d al. tt Ann. N, Y Acad. Sci, 2004 -Vol. 1028. P. 351-360,

69. Eosinophil apoptosis and the resolution of airway inflammation in asthma / K. L. Wool ley. P- G. Gibson, K. Carty ct al- II Am. J. Respir. Cm. Care Med 1996 -Vol. 154. N I P. 237-243

70. Eouun in induced sputum of osthnunies: relationship with eosinophils and eosinophil cationic protein in sputum / H Yamada. M. Yamaguchi, К Yamamoto et al. // Allergy 2000, Vol, 559. N 4 P. 392-397

71. Fvaluation of apoptosis of eosinophils, macrophages, and Г lymphocytes ш mucosal biopsy spaciments of patients with asthma and chronic bronchitis / A. M Vignola. P. Chanel G. Chiappara et al. // J. Allergy Clin. Immunol 1999 Vol. 103. N 4. P. 563-573.

72. Expression and function of P-selectin glycoprotein ligand I (CO 162) on human basophils ! M. L. Taylor. M. E. Bmmroet. S. A. Hudson ef // J. Allergy Clio. Immunol. 2000. - Vol. 106. N 5. - P. 918-924.

73. Expression of functional FcRI on rut eosinophils arid macrophages I I) Dombrowic?, B. Quatannens, J-P- Papin et al. // J. Immunol. 2000 Vol, 165 -P. 1266-1271,

74. JfW. Expression of wtcrlcukfn-H correlates with vascularity in human gastric carcinomas IY- Kitadai. К Haruma, К Rumii ct al. // Am J. Pathol. 1998. Vol 152. - P, 93-100,

75. Expression of the C-C chemokinc receptor CCR3 in human airway epithelial cells t C. Stellate. M. E. Brummet. i, R. Plitt ct at. H J. Immunol. 2001. - Vol. 166. P. 1457-1461.

76. Expression of transforming growth factors-alpha and beta 1 messenger RNA and product by eosinophils in nasal polyps/ A. Elovie. D. T, Wong. P. F. Weller d aJ. // J. Allergy Clin. Immunol 1994. - Vol. 93. N 5. - P «64 -869.

77. Further support for the association of CCR5 allelic variants with asthma susceptibility / R. McGinnis. F. Child. S. Clayton et al. tt Eur, J. Immunogenel 2002. Vol. 29. N 6, - P. 525-528.

78. Garcia-Rodrigucz, L. A- Reduced risk of colorectal cancer among long-term users of aspirin and nooaspirin nonsteroudal anti-inflammatory drugs / L A. Gaftia-RodrigUcZ. C. Hucrta-Alvarez tt Epidemiology. 2001. Vol. 12. - !\ 88-93

79. Gene-gene interaction jn asthma: I14RA arid JLJ3 in о Dutch populaiiim with asthma / "Г. D. Howard. G- H. Koppelman. J Xu ct al. " Am. J Hum. Genet.2002. Vol. 70. - P. 230-236.

80. HO. Genetic polymorphism of epoxide hydrolase and glutathione S-transfemsc in COPD / S L. Cheng. C-J. Yu. C-J. Chen, PC, Yang H Fait. Respir. 1 2004. Vol. 23,-P. R18-824.

81. Genetic polymorphisms of glutathione S-iransfcrascs as modulatory of lung eaneer susceptibility / I. Stueker. A. Hirvonen. I. de Waziers et al. H CafctnogencsB, 2002. - Vol, 23, N 9 - P. 1475-1481

82. Genetie variants of 1L-13 signaling and human asthma and atopy i a. lleinzmann. X. Q, Mao, M Akaiwa ct al // Hum Mol. Genet 2000. - Vol 9. - p 549-559

83. Global initiative on obstructive lung diseases (GOLD) classification of COPD and incident lung cancer: findings from a cohort study / D M Mannino. D. t>ahcrty, A. S Buis*, F. Holguin И Chest Meeting Abstract* Chesl. - 2004, - Vol. 126. - P «53.

84. Global Strategy for asthma management and prevention Г^сстронный ресурс. National Institutes of Health, National Heart. 1-ung and Blood Institute- Revised2003. NJH publication Nt 02-3659. Режим доступа : hllpjVwww.ginasthma.com.

85. Glutathione paUtway genes and lung cancer risk in young and old populations / P Yang. W. R. Bamlet. J. O. Fbbert ct al. >!Carcinogenesis. 2004. - Vol, 25, N 10, -P 1935-1944,

86. В Glutathione S transferase deficiency and passive smoking increase childhood asthma 1 M Kxbexh. С. НоеЛсг, 15. Cm ef al. U Thorax. 2004. - Vol. 59, 1* 569-573.

87. Glutathione S-tmnsfcrasc Ml gene polymorphism and susceptibility to endometriosis in a French population f H Banmova. К Boihonshvilli. M Cams et al. // Mol. Hum. Reprod. 1997. - N 3. - P. 775-780.

88. Haematopoietic cancer and mcdical history: a multicentre case control study / P. Vineis, P. Crosignani. C. Sacerdote ct a) H J, Epidemiol. Community Health. -2000, Vol, 54. - P 431-436.

89. Harrison. 17 J. Frequency of glutathione ^-transferase Ml deletion in smokers with emphysema and lung cancer I D. J Harrison. Л M, Cantlay. F. Rae et al, It Hum. Exp Toxicol. 1997. - Vol, 16. N 7, - P. 356-360.

90. Hellstrand. K. Histamine in cancer immunotherapy: a preclinical background / K. Uellstrand // Semin. Oncol. 2002. - Vol. 29. N Sup. 7. - P. 35-40.

91. Higher lung cancer risk for younger aFrican-americans whh the Pro-'Pro p53 genotype! X. Jin, X. Wu. J. A. Rotli et al. // Carcinogenesis 1995. Vol. 16. N 9- P, 2205-2208.

92. Histamine in canccr immunotherapy K. Ilellslrand, S. Hermodsson. M Brune et al. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1997. - Vot. 57, N 3. - P. 193-202,

93. Histological typing of lung and pleural tumors I cd W I), Travis. 3 rd. ed -Geneva ; World Health Organisation. - 1999.

94. Holly, E. Л, Prior History of Allergies and Panercatic Cancer in the San Francisco Bay Arco / E, A. Holly. C. A Ebcrlc. P M Bracci H Am. J. Epidemiol 2003 -Vol. 158.- P. 432-441.

95. Hu, Y. The p53 codon 72 proline allele is associated with p53 gene mutations in non-small cdl lung cancer i Y, Hu. M, P. McOermott, S. A. Ahrcndt // Clin. Canccr Res 2005, - Vol. M. N 7. - 2502-2509.

96. Human eosinophils сап express the cytokines tumor necrosis factor-alpha and macrophage inflammatory pnleiR-i alpha J J J. Costa. К Шшш. М- В Resoick ct «I. If J. Clin. Invest. -1993.-Vol, 91, N 6. P. 2673-2684

97. IgEs targeted on tumor cells: therapeutic activity and potential in design of tumor vaccines / E. Reali. J. W. Greincr. A. Corti ct at. / Cancer Research, 2001. Vol. 61, N14,- P. 5517-5522.

98. IL-5 production by NK cells contribute to eosinophil infill rat ion in a mouse model of allergic inflammation / C. Walker. J. Checkcl. S. Cammisuli ct al. • J. Immunol. 1998- - Vol-161. P. 1962-1969.

99. Immune responses in broncho-pulmonary cancer / Л, P. Mcert, I Berghmans, C. Mascaux. 1. P. Sculier ''' Rev. Mai. ftespir. 2003, ■ Vol, 20. №4. - P. 566-579,

100. Intmunopathology of the small-oirway submucosa in smokers with and w ithout chronic obstructive pulmonary disease / В, E, A- Lams, A. R. Sousa. P. J. Rces et al. H Am, J. Rcspir. Crit. Care Med 1998 - Vol. 158 P. 1518-1523.

101. Increased airway epithelial and T-ccll apaptosis in CQPD remains despite smoking cessation < S. Hodge. O, l lodge. M. Holmes. P. N. Reynolds // Eiiur, Respir J, 2005. - Vol. 25. - P 447-454.

102. Increased expression of the chemoatlracianl cytokines cotaxin. monocyte chemotactic protcin-4. and intcrleukin-16 in induced sputum in asthmatic patients >' R. A. Taha. S, Labcrge. Q- Ham id, R Olivenslein И Chest 2001 Vol, 120. P. 595-601.

103. Inducible expression of a Th2-type CC chcmokine thymus- and activation-regulated chcmokiiie by human bronchial epithelial cells / T Sekiya, M. Miyamasu, M Imanishi ct al. HI Immunol. 2000, Vol. 165. - P, 2205-2213.

104. Inhibition of interleukin 8 attenuates angiogenesis in bronchogenic carcinoma / D, R. Smith. P. J. Polvcrini. S. I. Kunltcl et al. Hi. Exp. Med. 1994. Vol. 179. - P, J409-I415,

105. Intcrleukin-8 as a macrophage-denvcd mediator of angiogenesis ; Л Е- Koch. P. J. Pohcrini, S. L. Kunkel el a lit Science J 992 - Vol 258 - P, 1798-1801.

106. Intracellular expression and release of Fe epsilon КI alpha by human eosinophils / M. C. Semi nana. S. S. Sain». D. W. Jr. MocGlashan, 13. S. Bochner l! У Immunol. -1999. Vol. 162. N II,- P 6893-6900

107. IntraiumoraJ CC ehemokine hgand 5 ovcrexpresston delays tumor growth and increases tumor cell infiltration t E Lavergnc. С Combadicre. M, Iga et al, if L Immunol. 2004. - Vol. 173. N 6. - P 3755-3762

108. J tilery. P. K. Remodeling in asthma and chronic obstructive lung disease ' P. К Jcffeiy H Am. J. Respir Crit. Care Med 2001. Vol, 164. Ne 10. - P 28-38

109. Kakinuma, T. Chcmokines. ehemokine receptors, and cancer metastasis I T. kakimimu. S T. Hwang ft Journal of Leukocyte Biology, 2006 Vol. 79. - P 639-651.

110. Keskincgc, A. Possible implications of arginase and diamine oxidase in prostatic carcinoma / A. Keskinegc. S. Elgun, E, Yitmaz II Cancer Detect. Prev. 2001, ■ Vol. 25. N I. - P- 76-79.

111. Lawson, J. A, Ranitidine and cimetidine differ in their in vitro and in vivo effects on human colonic cancer growth t J. A. l-awsan, W. J. Adams. I). L Morris и Иг. J. Cancer. 1996. - Vol. 73, - P. 872-876,

112. Lin, C. W. Elevation of histaminose and ils concurrence with Regan isoenzyme in ovarian cancer / C, W, Lin. M. L, Orcutt, L, L, Stolbach tt Cancer Res. 1975, -Vol, 35. N 10 P. 2762-2765,

113. J.ukacs. N. W. Chcmokines and asthma: redundancy of function or a coordinated effort? IN W. Lukacs. S. H. Oliveira. С M Hogaboam // J. Clin Invest. 1999. -Vol. 104. - P 995-999

114. Martins-Green. M. Inflammation is re&ssponsiblc for (he development of wound-induced tumors in chikens infected with Rous sarcoma virus / M Martins-Green, N. Boudrcau. M. I. Bissel // Canccr Res. 1994. Vol. 54. - P 4334-4341,

115. McDnffie, 11 Atopy ami primary Jung cancer. Histology and sex diiiribuUon J II. McDuflic // Chest. 1991. - Vol. 99. - P. 404^107

116. McWhortcr, W P Allergy and risk of cancer, A prospective study using NHANESI foltowup data W P McWhortcr // Cancer 198» - Vol. 62. N 2- - P 451-455.

117. Medical history and risk of llodgkin's and non-1 lodgkin's lymphomas / A. Гаг am. C. La Vecchia, S. Eranceschi et al. ft Eur, J. Canccr Prev 2000, - Vol. 9. - P 5964.

118. Medical history, sexual, and maturation.it factors and prostate cancer risk / N. Lighlfoot. M. Conlon. N. Kreiger et al. // Ann, Epidemiol. 2004. - Vol. 14. N 9. -P. 655-662.

119. Molecular and genetic aspects of tung cancer I W. N. Rom. J. G- Hay. Г. С L ee ct ah U Am. i Rcspir, Crit. Care Med 2000. - Vol 161.-P 1355-1367.

120. Morcillo, E J. Oxidative stress and pulmonary inflammation' pharmacological intervention with antioxidants / H- J- Morcillo. J. Esliela, J, Cortojo Pharmacol Res 1999. - Vol. 40. N 5, - P. 393-404

121. Mukaida, N lnterleukin-8- an expanding universe beyond neutrophil ehemotaxis and activation I N. Mukaida tf Int. L Hematol. 2000. - Vol. 72. - P. 391-398.

122. Ness. R. B. Possible role of ovarian epithelial inflammation in ovarian cancer i R. B. Ness, C. Cottrcau tt J. Natl. Cancer Inst. 1999. - Vol. 91. - P 1459-1467

123. Norppa, 11 Cytogenetic biomarkcrs and genetic polymorphisms ! H. Noippa II Toxicol. Lett 2004 - Vol. 149. N 1-3. - P 309-334,

124. Osann. К. E. Lung cancer in women: the importance of smoking, family history of cancer, and medical history of respiratory disease / К. E. Osann // Cancer Research 1991. -VoL 51. N 18. - P. 48934897.

125. P53 (codon 72) and P2I (codon 31) polymorphisms alter in vivo mRNA expression of p21 / L. Su, Y. Sai. R. Fan ct al, // Lung Cancer. 2003 Vol, 40, N 3. - P. 259-266.

126. P53 genotypes and haplotypcs associated with lung cancer susceptibility and ethnicity IX. Wu. И. /Jiao, С. I. Amos et aL US. Natl. Cancer Inst. 2002, Vol. 94. N9. P 681-690

127. Palli. D. ГЬе effects of diet on DNA bulky adduct levels are strongly modified by GSTMl genotype: a study on 634 subjects / O. Palli. G, Masala. M. Pcluso II Carcinogenesis. 2004. - Vol. 25. N 4. - P 577-584.

128. Pathogenesis of mucous cell metaplasia in a murine asthma model J R. Reader. J. S, Teppcr. E, S. Scbeleglc ct al, И American Journal of Pathology. 2003. Vol. 162 - P. 2069-2078.

129. Arellano et at. И Clin. Immunol. Immunoputhol. 19Й6. - Vol. 41. N 3. - P. 314-3t9.

130. Previous lung disease and risk of lung cancer among men and women nonsmokcrs t S Г Mayne. J. Buenconsejo, D. T. Janerich ct al. American Journal of Epidemiology 1999. Vol. 149. P IJ3-I20.

131. Prognoslic significance ot scrum IgE levels in primary breast cancer / D. R Own by; H, E. Ownby. L. D. Roi ct al- U Breast Cancer Res Treat 1982- ■ Vol. 2. N 3. - P. 221-226.

132. Reduced immunoglobulin li and attergy among adults with glioma compared with controls / J. L. Wiemels. 1. K, Wicneke. J. Patoka et al, // Cancer Res, 2004. - Vol, 64.-P 8468-84 73

133. Relationship between peripheral airway dysfunction, airway obstruction, and neutrophilic inflammation in COPD t R A O'Donnell, C. Peebles. J. A. Ward et al It Thorax. 2004, Vol. 59. - P. 837-842.

134. Relationships of active smoking to asthma and asthma severity in the EGEA study Epidemiological study on the Gcncttcs and Environment of Asthma ' V. Siroux, I-Pin, М- P Oryszczyn et al. ft Eur, Respir, i 2000. Vol. 15. N 3 P, 470-477

135. Reynolds. J.L. In vitro effeet of histamine and histamine HI and H2 leceplor antagonists on се/Mar proliferation of human malignant melanoma cell tines / J.L, Reynolds. I Akhter, D.L. Morris iiMelanoma Res. -1996. Vol. 6, - P. 95-99,

136. Romanski, tt. The frequency of atopy in lung cancer patients t D, Romanski. A Sfowik-Gabryclska. E. Gavrionska-Ukleja tt Pol Merkuriusz. Lek. 1999- - Vol. 6, N35. -P. 256-258.

137. Salivary l*GF regulates eosinophil-dcrived TGI--alpha expression in hamster oral wounds / J. Yang. L W, Tyler, R. B. DonolTet al. tt Am, J. Physiol. 1996, Vol. 270. N l,Pt, I P 191-202,

138. Samowuk, M Eosinophils and human cancer M Samoszuk <" Mistol Histopathol, -1997. Vol. 12, N 3. -P 807-812,

139. Santillan, A. A. A meta-analysis of asthma and risk of lung cancer (United States) t A. A. Santillan. C. A. Jf- Camargo, G. A, Cold it/ H Cancer Causes Control. -2003, Vol. 14. N 4. - P. 327-334,

140. Schuh, J. M- Hie rote of CC chemokinc receptor 5 (CCRS) and RANTES/CCLS during chronic fungal asthma in mice IУ M, Schuh. K, Blease, С. M, Hogaboam tt FASEB J 2002. - Vol. 16. N 2. - P, 228-230

141. Sebwartsburd. P M Chronic inflammation as inductor of pro-cancer microcnviroiuneot: pathogenesis of dysrcgulated feedback control / P. M. Schwartsburd It Cancer Metastasis Rev 2003. - Vot, 22. N I . - P. 95-102.

142. Serum immunoglobulin levels in patients will» head and neck cancer (IgE, IgA. IgM. IgG) t K- Vinzen/, R. Pavelka, E. Schonthal. E. 2ckert И Oncology. 1986. -Vol. 43, N5 - P. 316-322

143. Shinkat. K- Helper T celts regulate type-2 innate immunity in vivo / K, Shinkai, M Mohrs, R M. Locksley ft Nature 2002 - Vol. 420, N 6917 - P. 825-829

144. Soini, Y. Extent of apoptosis in relation to p53 and bet-2 expression in germ cell tumors I Y. Soiui. P. Poakko II Hum. Pathol. 1996. Vol. 27, N 11. - P. 12211226,

145. Sputum dysplasia, related (o bacterial load, oxidative stress, and ainvay inflammation in COPD / P. E. SilkolT, A. Busaekcr. J- Trudeau ct al. U Chest. -2004 -Vol. 125.-P. 151

146. Target-specific activation of most cells by immunoglobulin Г reactive with a renal cell carcinoma-associated anligen ' R M I,mien, G. J. Fleuren, S. O, Warnnar. S. V. J.itvinon it Lab. Invest. 1996. - Vol. 74. N 2. - P. 467475.

147. Telomcrase expression in respirator)' epithelium during the multistage pathogenesis of lung carcinomas / K, Yashima. L. A. Litzky. L. Kaiser, et al. ■ Cancer Res J997 Vol. 57. P. 2373-2377,

148. Hie CC ehemokine RANTF.S in breast carcinoma progression regulation of expression and potential mechanisms of promalignant activity / F Azenshtein. (j, Luboshits. S. Shina ct al.// Cancer Research. 2002. • Vol. 62, N 4. - P. 1093-1102.

149. The C-C ehemokine receptors CCR4 and CCRS identify airway T cells of aHcrgerr-chalJenged atopic asthmatics P. Panina-BoRb'gnon, A. Papi, M. Marian. et al. Hi. Clin. Invest. 2001 Vol. 107. - P 1357-1364.

150. The correlation of emphysema or airway obstruction with the risk of lung cancer a matched case-conuolied study t K, Kishi. J. W. Gumey. D. R. Sehroetkr et al. tt Eur. Respir. J. 2002. Vol. 19, N6. - P 1093-1098

151. The genetic variation and the express™ of human glutathrtme transferase ittu f J. Scidepard. W R Vorachek, R. W. Pero. W. R. Pearson V Klin. Wochensehr 1988. Vol. 66, N ll.-P. 125-126.

152. The high affinity IgE receptor (Fc epsilon Rl) mediates gE-dcpcndent allergen presentation / D. Maurer. C, Ebncr. B. Reininger ct a., UJ. Immunol. 1995. Vol I54.W 12- P 6285-6290

153. Two polymorphic variants of wild-type p53 differ biochemically and biologically M. Thomas, A. Kalita. S. Labrecqoe ct at. " Molecular and cellular biology. 1999. -Vol. 19. N2.-P. 1092-1100.

154. Wild-type human p53 and a temperature-sensitive mutant induce Fas/APO-l expression t L. B. Ovven-Schaub, W. Zhang, J C. Cusacic et al, // Molecular and Cellular Biology, 1995, Vol. 15. N 6 P, 3032-3040.

155. Yokota, J. Molecular footprints of human lung cancer progression t У Yofcota. . Kohno tt Cancer Sei. 2004. - Vol. 95, N 3. - P, 197-204.

156. ZLotnik. A Involvement orehemokine receplors in organ-specific metastasis / A. Zfotnik //Contrib, Microbiol, 2006. - Vol, I J. - P 191-199.

157. Zurer. 1 The role of p53 in base excision repair following genotoxie stress / I. Zurer. L. Hofscth. Y. Cohen I) Carcinogenesis. 2004. - Vol. 25. N 1. - P. 11-19.