Роль цитокинов и рецептора ССR5 в формировании предрасположенности и прогрессии рака молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Бабышкина, Наталия Николаевна

• Бабышкина, Наталия Николаевна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Бабышкина, Наталия Николаевна

Оглавление.

Список условных сокращений.

Введение.

Глава 1.Обзор литературы

1.1. Этиология и патогенез рака молочной железы.

1.1.1. Эпидемиология рака молочной железы.

1.1.2. Предопухолевые заболевания как фактор риска развития рака молочной железы.

1.1.3. Молекулярно-генетические аспекты развития злокачественных новообразований.

1.2. Полиморфизм гена хемокинового рецептора CCR5.

1.2.1. Генетический полиморфизм и его роль в детерминации онкологического риска.

1.2.2. Хемокиновый рецептор CCR5.

1.2.3. Биологическая роль хемокинового рецептора CCR5.

1.3. Цитокины иммунной системы: классификация и биологические функции

1.3.1. Общие представления об иммунорегуляторных цитокинах.

1.3.2. Роль хемокинов в иммунорегуляции.

1.3.3. Цитокины и злокачественный рост.

1.4. Роль иммунологических механизмов в развитии злокачественных новообразований.

Глава 2. Материал и методы исследования

2.1. Характеристика материала исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Генотипирование аллелей гена хемокинового рецептора CCR5.

2.2.2. Оценка уровня экспрессии мРНК гена хемокинового рецептора CCR5 в мононуклеарах периферической крови.

2.2.3. Оценка уровня экспрессии гена хемокинового рецептора CCR5 на мононуклеарах периферической крови иммуноцитохимическим методом.

2.2.4. Метод непрямой иммунофлюоресценции.

2.2.5. Реакция бластной трансформации лимфоцитов периферической крови.

2.2.6. Цитотоксический тест.

2.2.7. Определение циркулирующих иммунных комплексов.

2.2.8. Определение концентрации иммуноглобулинов.

2.2.9. Определение активности системы комплемента.

2.2.10. Определение функциональной активности нейтрофилов периферической крови.

2.2.11. Твердофазный иммуноферментный метод.

2.3. Методы статистической обработки.

Глава 3. Результаты собственных исследований

3.1. Полиморфизм гена хемокинового рецептора CCR5.

3.1.1. Сравнительная оценка частоты встречаемости аллелей и генотипов гена CCR5 у больных с патологией молочной железы.

3.1.2.Оценка экспрессии хемокинового рецептора CCR5 в мононуклеарных клетках периферической крови у больных РМЖ.

3.2. Продукция цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови и иммунный статус у больных РМЖ, ФА и ФКМ.

3.3. Иммунологические параметры и уровень продукции цитокинов у больных с пролиферативными заболеваниями и раком молочной железы в зависимости от выраженности патологического процесса.

3.4. Оценка взаимосвязи полиморфизма гена хемокинового рецептора CCR5 с клиническими особенностями и исходом заболевания у больных раком молочной железы.

3.5. Характеристика иммунологических параметров у больных с предопухолевой патологией и злокачественными новообразованиями молочной железы в зависимости от генотипа CCR5.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль цитокинов и рецептора ССR5 в формировании предрасположенности и прогрессии рака молочной железы»

Злокачественные новообразования молочных желез занимают лидирующее место в структуре онкологических заболеваний женщин. Статистические данные констатируют ежегодное увеличение числа диагностируемых случаев рака молочной железы (РМЖ). В мире выявляют около 1 млн. новых случаев за год, к 2010г. прогнозируется рост числа заболевших до 1,45 млн. В России абсолютное число женщин, впервые заболевших раком молочной железы, в 2002г. достигло 45857. Злокачественная опухоль молочной железы ежедневно диагностируется у 102 женщин [Давыдов М. И, Аксель Е. М., 2001].

Наряду с этим отмечается тенденция к увеличению доброкачественных заболеваний молочной железы, которые встречаются у каждой 4-й женщины в возрасте до 30 лет, а у женщин старшего возраста патологические состояния молочных желез выявляются в 60% случаев. При этом наиболее часто наблюдается диффузная форма фиброзно-кистозной мастопатии (ФКМ), которой, по данным различных авторов, страдает от 50% до 90% женщин. Установлено, что большинство злокачественных новообразований молочных желез развивается на почве длительно текущих дисгормональных доброкачественных процессов, характеризующихся пролиферацией эпителия железистой ткани и изменениями соединительной ткани. Сформировалось представление о мастопатии как предраковом состоянии, которое под влиянием определенных обстоятельств может трансформироваться в РМЖ. Принято считать, что РМЖ на фоне доброкачественных новообразований встречается в 3-5 раз чаще, а при узловой форме мастопатии с наличием пролиферации эпителия в 30-40 раз чаще, чем при отсутствии патологии в тканях молочной железы [Прилепская В.Н. и соавт., 2003; Габуния М.С., 2001; Певгова Г.Ю. и соавт., 2003; Чистяков С.С. и соавт., 2003; Hartmann, 2004].

РМЖ как мультифакториальное заболевание обусловлено изменениями функционирования множества генов, обеспечивающих структурно-функциональный гомеостаз организма, при этом необходимой молекулярной основой злокачественной трансформации является нарушение функций онкогенов и/или генов-супрессоров. Злокачественная трансформация клеток и развитие опухоли происходит в результате дисбаланса процессов пролиферации, апоптоза и дифференцировки клеток, в основе которого лежит комплексное взаимодействие наследственно-генетических, гормонально-метаболических, иммунологических, экзогенных факторов. При этом значимым в определении риска может быть и неблагоприятное сочетание аллелей вовлекаемых в патогенез РМЖ полиморфных генов [Имянитов Е. Н., Хансон К. П., 2004; Берштейн JI. М., 1998; Imyanitov Е:, Hanson К., 2004; Smith etal.,2004; Azmy etal.,2004; Jong et al., 2005].

Современные представления о важной роли системы иммунитета в регуляции пролиферации, дифференцировки и программируемой гибели клеток свидетельствуют о ее существенном вкладе в формирование предрасположенности к развитию неоплазий. Известно, что регуляция онтогенеза клеточных популяций осуществляется благодаря комбинированному воздействию нервной, эндокринной и иммунной систем, функционально тесно связанных друг с другом и практически равноправных [Корнева Е. А., 1993; Корнева Е. А., 2003; Абрамов В. В., 1996; Васильев Н. В. и соавт., 2005]. Это дает основания, несмотря на большие противоречия, имеющиеся в литературе, с полной уверенностью утверждать, что система иммунитета играет в этиопатогенезе злокачественного роста существенную роль. При этом цитокины как универсальные медиаторы межклеточных взаимодействий повсеместно вовлекаются в регуляцию этих процессов.

Исследованиями последних лет показаны взаиморегуляторные отношения цитокинов с эстрогенами, играющими важнейшую роль в патогенезе РМЖ. Результатом этих взаимодействий может быть как индукция пролиферативных процессов, так и активация проапоптотических сигнальных путей в клетках [Fanti et al., 2003; Aronica et al., 2004; Fernando et al., 2004; Huber et al., 2004]. Такая неоднозначность определяется вовлечением в процессы злокачественной трансформации кроме онкогенов и генов-онкосупрессоров множества факторов, способных модифицировать их функции и опосредованно влиять на чувствительность клеток к генотоксическим воздействиям эндогенного либо экзогенного происхождения и процессы опухолевой промоции. Очевидно, что особенности индивидуального генетического фона играют очень существенную роль в детерминации онкологического риска [Abba et al., 2004].

В число цитокинов входят хемокины, обладающие чрезвычайно широким спектром биологических эффектов, регулирующие активацию, миграцию иммунокомпетентных и других клеток и непосредственно участвующие в специфических и неспецифических реакциях иммунной системы. Следует отметить, что роль цитокинов и хемокинов, в частности, в процессах злокачественной трансформации и опухолевой прогрессии далеко неоднозначна. Имеется множество сведений как о противоопухолевой активности различных цитокинов, так и об их функционировании в качестве промоторов опухолевого роста [Liu et al., 1996; Luboshits et al., 1999; Azenshtein et al., 2002; Кадагидзе З.Г., 2002]. Данные ряда авторов свидетельствуют о связи цитокинов (ТФР-бета, ФНО-альфа, ИЛ-6, ИЛ-4, ИЛ-2, RANTES и др.) с прогнозом клинического течения РМЖ, однако представленные результаты достаточно неоднозначны и порой противоречивы. При этом принципиальным моментом является возможность диаметрально противоположной функциональной роли того или иного цитокина на этапах формирования злокачественного новообразования и в прогрессии опухоли, как, например, показано для ТФР-бета, который снижает риск РМЖ, но является фактором, способствующим прогрессированию заболевания [Nikolic-Vukosavljevic et al., 2004; Czeczuga-Semeniuk et al., 2004].

В этой связи изучение уровня продукции цитокинов может дать не только информацию о функциональной активности различных типов иммунокомпетентных клеток, соотношении процессов активации Т-хелперов I и II типов, но и позволяет рассматривать его в качестве одного из важных маркеров, характеризующих биологические особенности конкретной опухоли и, следовательно, имеющих прогностическую значимость. Подтверждением вовлечения цитокинов в патогенез РМЖ являются данные о том, что отдельные аллельные варианты их полиморфных генов ассоциированы с восприимчивостью, особенностями клинического течения, исходом онкологического процесса [Benson et al., 2004; Smith et al., 2004; Zafiropoulos et al., 2004].

В последние годы внимание исследователей привлекает хемокиновый рецептор CCR5, для которого выявлен генетический дефект, характеризующийся гомозиготной делецией 32 пар оснований в гене CCR5, приводящий к синтезу функционально неактивного белка рецептора, который не способен экспрессироваться на поверхности клетки. Для лиц с описанной мутацией риск заражения ВИЧ (макрофаготропным вариантом вируса) существенно снижен, а развитие инфекционного процесса и клинической картины СПИДа носит более благоприятный характер. В общей популяции в разных этнических группах около 10-15% лиц являются носителями делеционного аллеля. Найдены ассоциации между делеционным полиморфизмом гена CCR5 и прогнозом при ряде инфекционных (ВИЧ-инфекция, туберкулез, грипп) [Dean et al., 1996; Liu et al., 1996] и соматических заболеваниий (сахарный диабет, ишемическая болезнь сердца, ревматоидный артрит) [Kalev et al., 2003; Gonzalez et al., 2001; Cooke et al., 1998].

Manes et al. в 2003 году было показано, что для осуществления эффективного апоптоза модифицированных клеток РМЖ, необходимо согласованное взаимодействие белка-рецептора CCR5 и онкосупрессора р53. Этими авторами получены данные, что носительство вариантного аллеля CCR5del32 ассоциировано с неблагоприятным прогнозом при раке молочной железы у пациенток испанской национальности только при отсутствии соматических мутаций в гене р53 в клетках опухоли.

Известно, что белок р53 является регулятором транскрипции гена р21, кодирующего ингибитор циклин-зависимых киназ CIP1 [Dyson et al., 1999]. Недавно было установлено, что белок р21 может взаимодействовать с транскрипционными факторами NF-AT, АР-1, NF-kB и ингибировать пролиферацию лимфоцитов и экспрессию провоспалительных цитокинов. Эти данные косвенно указывают на возможность регуляции функций иммунокомпетентных клеток CCR5-p53 опосредованным путем [Khanna et al., 2005].

Показано, что клетки рака молочной железы экспрессируют хемокины и хемокиновые рецепторы [Allinen, 2004]. СС хемокин RANTES продуцируется клетками рака молочной железы и действует аутокринно через свой рецептор CCR5, который также экспрессируется на поверхности злокачественных клеток. У больных при этом выявлена прямая корреляция высокого уровня RANTES в крови с более агрессивным течением РМЖ [Azenshtein et al., 2002; Luboshits et al., 1999; Walser, 2004]. В то же время экспрессия CCR5 на опухоль-инфильтрирующих лимфоцитах свидетельствует о возможности их дифференцировки по Th-1 типу и развития специфического противоопухолевого ответа [Qin et al., 1998; Siveke et al., 1998]. Получены данные о способности ряда цитокинов, таких как ИЛ-2, ИЛ-12, ФНО-альфа, регулировать экспрессию CCR5 и его лигандов на транскрипционном и посттранскрипционном уровнях [Wang et al., 1999].

В литературе практически нет сведений о взаимосвязи полиморфных вариантов гена CCR5 с традиционными прогностическими факторами при РМЖ, и отсутствуют данные об ассоциации его полиморфизма с дисгормональными гиперпластическими процессами в молочной железе. В то же время, как указано выше, CCR5 является одним из важных универсальных рецепторов, определяющих инфильтрацию иммуноцитов в очаги воспаления и опухоль, и тесно связан с развитием клеточно-опосредованного иммунного ответа, в том числе на опухолевые клетки, то есть может участвовать в регуляции противоопухолевого иммунитета и роста опухоли. С другой стороны, его экспрессия на клетках рака молочной железы может быть связана с плохим прогнозом. Все сказанное определяет актуальность исследований взаимосвязи полиморфизма гена CCR5, функциональной активности иммунокомпетентных клеток, их цитокинового баланса с патогенетически и клинически значимыми для рака молочной железы признаками с целью оценки участия изучаемых факторов иммунной системы в риске возникновения и прогрессии РМЖ.

Цель исследования:

Изучить полиморфизм гена хемокинового рецептора CCR5 по CCR5del32, уровень продукции регуляторных и эффекторных цитокинов и показателей иммунитета у больных с предопухолевыми заболеваниями и раком молочной железы и исследовать их взаимосвязь с характером клинического течения и исходом заболевания.

Задачи исследования:

1. Оценить частоту встречаемости полиморфных вариантов гена CCR5 у пациенток с раком молочной железы, фиброаденомой и фиброзно-кистозной мастопатией.

2. Оценить уровень экспрессии рецептора CCR5 на лимфоцитах периферической крови у больных раком молочной железы.

3. Изучить уровень продукции цитокинов и иммунный статус у больных с дисгормональными доброкачественными заболеваниями и злокачественными новообразованиями молочной железы.

4. Изучить продукцию цитокинов и показатели иммунитета у больных с ФКМ, ФА и раком молочной железы в зависимости от выраженности патологического процесса.

5. Оценить взаимосвязь полиморфизма гена хемокинового рецептора CCR5 с клиническими особенностями и исходом заболевания у больных раком молочной железы.

6. Изучить уровень продукции цитокинов и параметры системного иммунитета у больных с предопухолевой патологией и злокачественными новообразованиями молочной железы в зависимости от генотипа CCR5 гена.

Научная новизна

Впервые проведено исследование полиморфизма гена CCR5 у больных с дисгормональными доброкачественными заболеваниями и раком молочной железы и его взаимосвязи с характером клинического течения заболевания.

Получены новые данные о роли хемокинового рецептора CCR5 во взаимосвязи с иммунологическими параметрами и цитокиновым статусом организма в развитии и прогрессии злокачественных опухолей молочной железы.

Показано, что уже на стадии предопухолевых изменений в ткани молочной железы отмечаются выраженные изменения как функциональной активности иммуноцитов, так и их субпопуляционного состава, характерные и для больных со злокачественными новообразованиями.

Применение факторного анализа позволило выявить наиболее значимые иммунологические показатели, ассоциированные с характером клинического течения заболевания у больных РМЖ (уровень продукции ИЛ-4) и выраженностью патологического процесса в ткани молочной железы при ФА и ФКМ (уровень продукции ИЛ-2, ИЛ-4, количество лимфоцитов, имеющих рецептор к ИЛ-2).

Выявлена четкая ассоциация вариантного генотипа гена CCR5 и продукции ИЛ-4 с клинико-морфологическими признаками, характеризующими благоприятное клиническое течение РМЖ (отсутствие лимфогенного метастазирования, умеренная степень дифференцировки опухолевых клеток, благоприятный исход).

Выявлены различия продукции цитокинов и параметров иммунитета у больных с дисгормональными доброкачественными процессами и РМЖ в зависимости от генотипа CCR5, что свидетельствует об определенном вкладе иммунологической компоненты в риск возникновения и прогрессию РМЖ.

Теоретическая и практическая значимость

Полученные результаты расширяют представления об участии цитокинов и хемокиновых рецепторов в механизмах формирования злокачественных новообразований молочной железы.

Получены данные о вкладе хемокинового рецептора CCR5 в формирование состояния повышенного онкологического риска и прогрессию рака молочной железы.

Данные о взаимосвязи выраженности клинических проявлений заболевания у больных с доброкачественными дисгормональными процессами с уровнем продукции цитокинов, функциональной активности иммунокомпетентных клеток и генотипом CCR5 свидетельствуют о возможности использования изученных показателей в качестве дополнительных критериев при формировании групп повышенного риска.

Данные о связи уровня цитокинов и генотипа CCR5 с факторами, характеризующими прогрессию заболевания, и с его исходом указывают на возможную прогностическую значимость этих параметров при раке молочной железы.

Апробация диссертации Основные положения и результаты научных исследований были доложены на II конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» г. Томск (2001), Всероссийском научном форуме с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (2002, 2004); V молодежной научной конференции СО РАМН, г. Новосибирск (2004), объединенном иммунологическом форуме с международным участием, г. Екатеринбург (2004), конкурсах молодых ученых НИИ онкологии, г. Томск (2001-2005), Всероссийском научном симпозиуме с международным участием «Цитокины. Стволовая клетка. Иммунитет», г. Новосибирск (2005).

Публикации

Результаты исследования опубликованы в 25 печатных работах, отражающих основные положения диссертации.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Бабышкина, Наталия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Частота встречаемости генотипа CCR5/CCR5del32 у больных РМЖ составила 23,9%, что статистически значимо выше, чем в группе популяционного контроля (12,5%; р<0,02). У пациенток с предопухолевой патологией молочной железы выявлено значимое двукратное увеличение частоты генотипа CCR5/CCR5del32 по сравнению с популяционной нормой (24,3%; р<0,03).

2. В группе больных РМЖ, имеющих генотип CCR5/CCR5, относительное количество CCR5 положительных мононуклеарных клеток крови составило 21,5%; у пациенток с CCR5/CCR5del32 генотипом — 19,4% (р>0,05). Выявлено несоответствие между уровнем экспрессии мРНК в лимфоцитах и экспрессией белка CCR5 на мембранах клеток периферической крови.

3. В группе больных ФА и ФКМ выявлено увеличение уровня продукции провоспалительных цитокинов ФНО-а и ИЛ-ip, спонтанной пролиферации лимфоцитов, снижение индекса стимуляции пролиферации в ответ на митогенный стимул, активности нейтрофилов крови по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05).

4. Для пациенток с РМЖ характерны следующие функциональные изменения в системе иммунитета: высокий уровень продукции ИЛ-ip, увеличение спонтанной пролиферации лимфоцитов, снижение митоген-индуцированного пролиферативного ответа Т-лимфоцитов, функциональной активности нейтрофилов, значимое повышение уровня С08+-лимфоцитов, уменьшение числа CD 16+- и С095+-лимфоцитов по сравнению с контрольной группой (р<0,05).

5. У пациенток с ФКМ с выраженными клиническими проявлениями заболевания выявлен более высокий уровень продукции ИЛ-2 (р<0,02), более низкий уровень продукции ИЛ-4 (р<0,03) и повышение абсолютного количества CD25+ (несущих рецептор к ИЛ-2) - лимфоцитов (р<0,01) по сравнению с больными ФКМ, имеющими клинические проявления умеренной степени выраженности. ФКМ как фоновая патология определяет изменения показателей иммунитета у больных с доброкачественными опухолями.

6. У больных РМЖ лимфогенное метастазирование статистически значимо ассоциировано с более низким уровнем продукции ИЛ-4 лимфоцитами крови (8,9±6,5 пг/мл у больных с метастазами против 41,4±13,5 пг/мл у пациенток с локализованным процессом, р<0,04).

7. Среди больных РМЖ с благоприятным исходом заболевания выявлен более высокий процент лиц с генотипом CCR5/CCR5del32 по сравнению с группой пациенток с неблагоприятным исходом (26,9% и 11,5% соответственно, р<0,02). У больных РМЖ с локализованным процессом в ткани молочной железы наблюдается увеличение частоты встречаемости вариантного генотипа гена CCR5 по сравнению с популяционным контролем (25,7% и 12,5% соответственно, р<0,01).

8. У больных с предопухолевыми заболеваниями молочной железы с нормальным генотипом CCR5 отмечено повышение числа активированных (CD25+)- клеток, спонтанной пролиферации лимфоцитов, их способности продуцировать ФНО-альфа в ответ на стимул по сравнению с показателями здоровых лиц.

9. У больных РМЖ с нормальным генотипом CCR5 отмечено снижение уровня Т-хелперов (CD4+), естественных киллерных (CD 16+) клеток крови, повышение способности лимфоцитов к стимулированной продукции ФНО-альфа по сравнению со здоровым контролем. При этом выявлено снижение ФГА-стимулированной пролиферации и повышение продукции ИЛ-4 по сравнению с больными РМЖ, несущими вариантный аллель CCR5del32.

153

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

РМЖ - гормонзависимая опухоль, в патогенезе которой важную роль играют эстрогены. Известно два механизма участия эстрогенов в канцерогенезе - промоторный, при котором в результате высокой продукции эстрогенов активируется пролиферация эпителия и повышается риск генетических повреждений, и генотоксический, связанный с непосредственным повреждением эпителиальных клеток при внегонадном синтезе эстрогенов и их метаболизме в ткани молочной железы. В последние годы получены фундаментальные данные о тесной взаимосвязи различных генов и их продуктов на уровне межсистемных, межорганных и межклеточных взаимодействий, а также выявлены тонкие механизмы регуляции клеточных функций на уровне внутриклеточных сигнальных путей при формировании и прогрессии РМЖ. Выявлены новые взаимоотношения эстрогенов и цитокинов в регуляции процессов пролиферации, программируемой гибели и дифференцировки клеток эпителия молочной железы.

При изучении связи полиморфизма генов цитокинов и их рецепторов с риском возникновения и прогрессией РМЖ было показано, что отдельные аллельные варианты генов ассоциированы с восприимчивостью, тяжестью течения, исходом онкологических заболеваний.

Взаимодействие иммунной системы и опухоли — вопрос чрезвычайно сложный в связи с амбивалентностью этих взаимоотношений, которые могут реализоваться в противоположные по результату события в зависимости от условий. Однако при этом четко показано, что иммунная система играет важную роль в опухолевой прогрессии и здесь определяющим является не только и не столько ее участие в специфическом ответе на опухоль, но и широкие регуляторные функции путем продукции цитокинов как на системном, так и особенно на местном уровне опухолевого микроокружения.

Хемокиновый рецептор CCR5 весьма многофункционален по своим свойствам, участвует в иммунных реакциях и экспрессируется воспалительными и опухолевыми клетками. В последние годы показаны высокие регуляторные способности CCR5, проявляющиеся как на уровне внутриклеточных каскадов, а именно вовлечение его в передачу сигнала на белок онкосупрессор р53, так и на уровне модуляции опухолевого микроокружения путем инфильтрации воспалительными клетками, а также непосредственно за счет экспрессии на опухолевых клетках.

Все эти данные, указывая на вовлечение CCR5 в патогенез РМЖ, не позволяют сделать однозначных выводов о роли CCR5 в развитии и прогрессии этого заболевания и делают актуальными исследования полиморфизма этого гена, а также возможных его взаимосвязей с продукцией цитокинов и функциональной активностью системы иммунитета у больных с предопухолевой патологией и больных со злокачественными новообразованиями молочной железы.

Все вышесказанное обусловило проведение исследований по оценке взаимосвязи полиморфизма гена CCR5 с активностью провоспалительных и противовоспалительных цитокинов как медиаторов межклеточных взаимодействий, регулируемых системой иммунитета, с предопухолевыми заболеваниями и злокачественными новообразованиями молочной железы в плане определения их возможной роли в формировании риска и механизмах прогрессии РМЖ.

Повышение частоты встречаемости гетерозиготного генотипа CCR5/CCR5del32 у больных предопухолевыми заболеваниями и раком молочной железы можно рассматривать как свидетельство его ассоциации с повышением риска РМЖ.

При исследовании функциональной активности иммунокомпетентных клеток посредством оценки их пролиферации и способности к продукции цитокинов получены результаты, указывающие на однонаправленность изменений изучаемых параметров у больных с предопухолевыми изменениями в ткани молочной железы и РМЖ. При этом следует обратить внимание на то, что выраженность отклонений показателей от нормального уровня (по сравнению с практически здоровыми женщинами) была более значимой у пациенток с ФКБ и ФА, чем с РМЖ, что может быть связано с сохранение резервов, которые обеспечивают выраженную реакцию иммунной системы на начальных этапах патологического процесса. Мы обнаружили, что именно ФКМ как фоновая патология, обусловливает изменения показателей иммунной системы у больных с ФА.

Ранее уже отмечалось, что риск РМЖ существенно возрастает при выраженной пролиферативной форме фоновой патологии. Поэтому мы разделили больных с дисгормональными заболеваниями на группы в зависимости от выраженности процесса с учетом пролиферативного потенциала эпителиальных клеток, который определялся на основании показателей инструментального, клинического обследования и цитологического заключения. Мы выявили, что при более тяжелой форме клинического течения ФКМ отмечается повышение продукции ИЛ-2 с одновременным усилением экспрессии рецептора к нему на лимфоцитах, что можно трактовать как активацию иммунокомпетентных клеток. При этом результат такой активации может быть неоднозначным. С одной стороны эти адаптационные изменения, очевидно, направлены на защиту организма при развивающемся патологическом процессе, на фоне гормонального дисбаланса, нарушения структурно-функционального гомеостаза, диспластических изменений эпителия молочной железы. С другой стороны, ИЛ-2 как ростовой фактор, может выступать стимулятором пролиферации диспластических клеток при наличии на них рецепторов к ИЛ-2 и промотировать тем самым развитие опухолевого процесса. В литературе имеются сведения о том, что если клетки рака молочной железы имеют рецепторы к ИЛ-2, наблюдается стимуляция опухолевого роста, при этом она может происходить и по аутокринному механизму, поскольку показана способность клеток опухоли к продукции этого цитокина. Одновременно выявленное нами снижение продукции ИЛ-4 также является фактором, способствующим развитию опухоли, поскольку показано, что он обладает способностью ингибировать опухолевый рост при наличии соответствующих рецепторов на опухолевых клетках [Бережная Н.М., Чехун В.Ф., 2000; Кадагидзе З.Г., 2002].

Поскольку делеционный аллель CCR5del32 может вносить свой вклад в повышение риска РМЖ, и, принимая во внимание данные о вовлечении хемокинов и хемокинового рецептора CCR5 в формирование противоопухолевого иммунного ответа, было целесообразным оценить функциональную активность иммунокомпетентных клеток у пациентов с предопухолевыми заболеваниями в зависимости от наличия вариантного аллеля. Согласно полученным данным, пациенты с нормальным генотипом (у которых риск РМЖ ниже) обладают способностью отвечать более высокой продукцией ФНО-альфа лимфоцитами крови на адекватный стимул, чем здоровые доноры. При этом у них также выявлена повышенная спонтанная пролиферация лимфоцитов и доля активированных - несущих на своей мембране рецептор к ИЛ-2 — клеток. Лимфоциты пациентов, несущих гетерозиготный генотип, не обладают способностью к повышенной продукции ФНО-альфа в ответ на стимул. Эти данные можно трактовать как опосредованное свидетельство вовлечения иммунной системы в защитную реакцию при ФКБ.

В плане продукции цитокинов выявлены однонаправленные изменения по сравнению со здоровыми лицами у больных раком и преопухолевыми заболеваниями. Как уже отмечалось выше, более рельефны эти изменения у больных с предопухолевыми процессами в ткани молочной железы. По-видимому, у больных РМЖ преобладает угнетающее влияние на показатели иммунной системы ингибирующих факторов, продуцируемых опухолевыми клетками, или индуцированных опухолью иммуносупрессорных факторов организма. Согласно литературным данным, при наличии делеционного аллеля CCR5del32 у здоровых лиц не выявлено каких-либо серьезных нарушений иммунологической реактивности, несмотря на разный уровень его экспрессии на соответствующих клетках [Mueller et al., 2004]. Мы сочли целесообразным оценить уровень его экспрессии на мембранах иммунокомпетентных клеток у больных РМЖ, при этом не выявили существенных различий у пациентов с вариантным и нормальным генотипом. Мы оценивали также и экспрессию гена CCR5 путем детекции мРНК методом ОТ-ПЦР и сопоставили ее с выявлением белка CCR5 на клеточной поверхности иммуноцитохимическим методом с использованием моноклональных антител у этих же больных. Анализ полученных результатов свидетельствует о несоответствии этих показателей у большинства обследованных больных, которое заключалось в более низкой экспрессии белка при высоком уровне мРНК. Такое несоответствие может быть обусловлено рядом причин, среди которых наиболее вероятной и объяснимой является повышение уровня хемокинов — лигандов рецептора CCR5 (MIP-1 альфа, MIP-1 бета, RANTES), экранирующих рецептор при взаимодействии с ним, и низкая чувствительность метода детекции белка из-за специфичности антитела к сайту связывания в районе активного центра, обеспечивающего контакт с лигандом. Действительно, есть данные о том, что усиление экспрессии мРНК CCR5 в лимфоцитах под влиянием ИЛ-12 сочетается с уменьшением экспрессии белка на клеточных мембранах, что связано с одновременным увеличением продукции RANTES и его взаимодействием с рецептором. Полученные нами данные указывают на то, что экспрессия CCR5 у больных РМЖ обусловлена не столько наличием нормальных или вариантных аллелей этого гена, сколько регуляторным влиянием на посттранскрипционном уровне.

Опухолевая прогрессия - это процесс возникновения и отбора более злокачественных клонов опухолевых клеток. Злокачественность опухоли выражается в разных формах, которые имеют соответствующие клинико-морфологические проявления, такие, как лимфогенное или гематогенное метастазирование, мультифокусный характер роста опухоли, рецидивирование. Манифестация различных форм прогрессии у разных больных предполагает и различие обеспечивающих их механизмов. Мы оценили взаимосвязь полиморфизма гена CCR5 с прогрессией РМЖ. Одним из вариантов опухолевой прогрессии и одновременно фактором, связанным с плохим прогнозом, является метастазирование в регионарные лимфатические узлы. Согласно полученным нами данным, частота гетерозиготного генотипа CCR5/CCR5del32 в группе больных РМЖ, не имеющих лимфогенного метастазирования, статистически значимо превышала популяционный показатель, при этом OR составил 2,43 (С195% 1,02-5,64; р<0,02), что указывает на ассоциацию этого генотипа с более благоприятным прогнозом клинического течения заболевания.

Подтверждением этому являются и наши данные о повышении частоты встречаемости гетерозигот среди больных РМЖ, у которых морфологически подтверждена умеренная степень дифференцировки опухолевых клеток -достаточно благоприятный в прогностическом плане критерий злокачественности опухоли.

Интегральным показателем эффективности лечения является продолжительность жизни больного без признаков заболевания (благоприятный или неблагоприятный исход). Несомненно, важную роль при этом играет характер терапевтических воздействий, однако часто при сходных показаниях к лечению и использовании стандартных методов терапии у разных больных наблюдается совершенно разный исход. Очевидно, что при стандартных терапевтических подходах эффективность лечения больного, (по сути, определяющая исход заболевания), является результирующей целого ряда составляющих, среди которых важное значение имеет чувствительность опухоли к цитодеструктивным воздействиям, морфофункциональное состояние опухоли и генетически детерминированные особенности организма больного, определяющие взаимоотношения с опухолью и реакцию на терапевтические воздействия. Наши данные показали существенное статистически значимое повышение частоты встречаемости индивидуумов с гетерозиготным генотипом среди больных РМЖ с благоприятным исходом, который определялся на основании отсутствия гематогенного метастазирования или рецидивирования заболевания в период наблюдения от 2 до 5 лет. Различия с группой больных РМЖ с неблагоприятным исходом (у которых наблюдалось прогрессирование опухолевого процесса в виде рецидивов, отдаленных метастазов или летального исхода) были также значимы.

Мы не выявили значимых различий продукции цитокинов или других факторов системы иммунитета в зависимости от исхода заболевания, однако следует отметить, что у больных РМЖ с лимфогенными метастазами отмечен более низкий уровень продукции ИЛ-4 наряду с тенденцией к снижению стимулированной митогеном продукции ФНО-альфа.

Для оценки возможной роли иммунологических факторов в прогрессии РМЖ у пациентов с разными генотипами CCR5 мы изучили у них активность иммунокомпетентных клеток. При носительстве делеционного аллеля CCR5del32 (гетерозиготный генотип, связанный с более благоприятным клиническим течением заболевания) отмечена более низкая продукция ИЛ-4 и более высокий пролиферативный ответ лимфоцитов на ФГА по сравнению с соответствующими показателями у пациентов с нормальным генотипом. У больных РМЖ с диким генотипом, который ассоциирован с более высоким риском прогрессии, отмечается повышение продукции ФНО-альфа лимфоцитами в ответ на стимул при снижении доли Т-хелперов и естественных киллерных клеток по сравнению с уровнем здорового контроля. Эти результаты дают основания полагать, что факторы иммунной системы могут вовлекаться в механизмы прогрессии РМЖ. В частности, есть сведения о неблагоприятной прогностической значимости высокого уровня ФНО-альфа при злокачественных новообразованиях. На уровне опухолевого микроокружения ФНО обеспечивает ингибицию дифференцировки фибробластов стромы и развитию десмопластической реакции, обеспечивающей структурное и функциональное поддержание роста опухоли [Deb et al., 2004].

Примечательно, что ИЛ -А оказался достаточно информативным показателем, ассоциированным с тяжестью клинического течения как при оценке групп больных независимо от статуса гена CCR5, так и при учете наличия вариантного аллеля.

Таким образом, согласно полученным нами данным, гетерозиготный генотип гена хемокинового рецептора CCR5 ассоциируется с повышенным риском возникновения РМЖ, но при этом связан с благоприятным прогнозом течения заболевания. Неоднозначная роль гена CCR5 на этапах злокачественной трансформации и при опухолевой прогрессии связана, по-видимому, с различными механизмами, обеспечивающими малигнизацию и формирование опухоли с одной стороны, и развитие разных форм опухолевой прогрессии — с другой.

Вовлечение хемокинового рецептора CCR5 в формирование опухоли (т.е. на этапах инициации и промоции) может быть опосредовано двумя основными путями, а именно, влиянием его на становление специфического противоопухолевого ответа по Thl-механизму [Azenshtein et al., 2002; Luboshits et al., 1999], и способностью регулировать апоптоз модифицированных клеток р53-зависимым путем [Manes et al., 2003]. В этой связи у индивидуумов, несущих вариантный аллель CCR5del32, вероятна ингибиция иммунного ответа в связи со сниженной экспрессией CCR5 на иммунокомпетентных клетках. Косвенно это подтверждается нашими данными о том, что функциональная активность лимфоцитов повышается у больных с предопухолевой патологией, имеющих только нормальные аллели CCR5, при этом у пациентов с наличием делеционного аллеля такой активации не наблюдается. Более низкая экспрессия CCR5 также может отрицательно сказаться на реализации р53-зависимого апоптоза трансформированных клеток.

Участие CCR5 в опухолевой прогрессии может осуществляться посредством регуляции пролиферации опухолевых клеток по аутокринному механизму продуцируемыми опухолью соответствующими хемокинами.

Источником провоспалительных цитокинов (хемокинов) могут выступать и клетки системы иммунитета, инфильтрирующие опухоль. Можно ожидать, что у лиц-носителей делеционного аллеля CCR5del32 за счет снижения экспрессии CCR5 на иммунокомпетентных клетках инфильтрация воспалительными клетками ниже, чем при нормальном генотипе. Кроме этого вклад в благоприятный прогноз может вносить и тот факт, что более низкая экспрессия CCR5 на клетках опухоли в определенной степени предотвращает стимуляцию опухолевого роста воспалительными цитокинами.

Таким образом, полученные нами результаты указывают на увеличение частоты встречаемости CCR5/CCR5del32 генотипа у больных РМЖ, в большей степени у пациенток до 50 лет, по сравнению со среднепопуляционной нормой, и позволяют связать этот генотип с повышением риска развития РМЖ у женщин репродуктивного возраста. Однонаправленность изменений продукции цитокинов и иммунологических показателей у больных с дисгормональными доброкачественными заболеваниями и злокачественными новобразованиями свидетельствует о вовлечении иммунной системы в формирование риска развития рака. Четкая ассоциация вариантного гена CCR5 и продукции ИЛ-4 с клинико-морфологическими признаками, характеризующими благоприятное клиническое течение РМЖ (отсутствие лимфогенного метастазирования, умеренная степень дифференцировки опухолевых клеток, благоприятный исход), свидетельствуют о возможности считать их защитными факторами в плане прогрессии заболевания. Выявленные различия продукции цитокинов и параметров иммунитета у больных с предопухолевыми заболеваниями и РМЖ в зависимости от генотипа гена CCR5 свидетельствуют об определенном вкладе иммунологической компоненты в риск возникновения и прогрессию РМЖ.

151

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Бабышкина, Наталия Николаевна, 2005 год

1. Абелев Г. И. Иммунология опухолей человека / Г. И. Абелев // Под ред. Д. Г. Заридзе. Москва.: Научный мир, 2000. — 343 с.

2. Абрамов В. В., Абрамова Т. Я. Асимметрия нервной, эндокринной и иммунной систем / В. В. Абрамов, Т. Я. Абрамова. Н.: Наука, 1996. — 97 с.

3. Акмаев И. Г. От нейроэндокринологии к нейроиммуноэндокринологии / И. Г. Акмаев, В. В. Гриневич // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2001. - Т. 131, №1. - С. 22-33.

4. Белецкий И. П. Пути передачи цитотоксического сигнала рецепторами семейства TNF-Rs / И. П. Белецкий, А. Б. Мошникова, О. В. Прусакова // Биохимия. 2002. - Т. 67, вып. 4. - С. 377-395.

5. Бережная Н. М. Интерлейкины и формирование иммунологического ответа при злокачественном росте / Н. М. Бережная // Аллергология и иммунология. 2000. -Т.1, № 1. - С.45-61.

6. Берштейн Л. М. Механизмы старения репродуктивной системы и гормонального канцерогенеза: модификация под влиянием табачного дыма / Л. М. Берштейн // Рос. физиол. журн. им. И.М.Сеченова. 1998. - Т.84, № 3. - С.244-248.

7. Боровиков В. П. STATISTICA статистический анализ и обработка данных в среде Windows / В. П. Боровиков, П. П. Боровиков - М.: Филин, 1998.-608 с.

8. Бурдина JI. М. Диагностика и лечение доброкачественных патологических изменений молочных желез / Л. М. Бурдина // Терапевтический архив- 1998 -Т. 10. С. 37-41.

9. Бушуева Т. В. Сравнительная оценка иммунного статуса женщин с кистозными изменениями в молочной железе и яичниках / Т. В. Бушуева, С. В. Казанцева, Э. Л. Малик // Медицинская иммунология. 2004. - Т. 6, № 3-5.-С. 358.

10. Васильев Н. В. Иммунная система при повышенном онкологическом риске и злокачественном росте / Н. В. Васильев, Н. В. Чердынцева, Т. И. Коляда. Томск: Изд-во Томского университета, 2005. — 308 с.

11. Введение в иммунофизиологию/ Ред. Е. А. Корнева. СПб.: Наука, 2003.-48 с.

12. Влияние длительного введения синтетического дипептида на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в эксперименте in vivo / И. В. Нестерова, Н. В. Колесникова, А. С. Симбирцев, Л. В. Ломатидзе // Иммунология. 1999. - №6. - С.40-43.

13. Габуния М. С. Репродуктивное здоровье женщин и состояние молочных желез: Дис. . д-ра. мед. наук / М. С. Габуния. Москва, 2001 — 312 с.

14. Гарбуков Е. Ю. Исследование значимости клинических и патофизиологических критериев для оценки риска возникновения рака молочной железы: Автореф. дис .канд. мед. наук / Е. Ю. Гарбуков — Томск, 2000. — 22 с.

15. Герштейн Е. С. Тканевые маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы / Е. С. Герштейн, Н. Е. Кушлинский // Практическая онкология. 2002. - Т 3, № 1. - С. 38-44.

16. Горюшина О. Г. Современные взгляды на мастопатию / О. Г. Горюшина // ВНМТ. 2002. - T.IX, №4. - С.20-22.

17. Гриневич Ю. А. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных / Ю. А. Гриневич, А. В. Алферов // Лаб. дело. -1981.-№ 8. — С.493-496.

18. Давыдов М. И. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ/ М. И. Давыдов, Е. М. Аксель. Москва: 2002.- 120 с.

19. Дейчман Г. И. Естественный отбор и ранние изменения фенотипа опухолевых клеток in vivo: приобретение новых механизмов защиты / Г. И. Дейчман // Биохимия. 2000. - Т. 65, вып. 1. - С. 92-111.

20. Демьянов А. В. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике / А. В. Демьянов, А. Ю. Котов, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 20-35.

21. Деревнина Н. А. Нарушения в системе иммунитета при доброкачественных изменениях и РМЖ / Н. А. Деревнина, Е. Б. Полевая, Т. К. Бескова // Вопросы онкологии. 1989. - Т. 35, № 7. - С. 810-816.

22. Изучение VNTR-полиморфизма генов pah, е nos и делеции гена CCR5 у народов Северного Кавказа / Т. Ю. Коршунова, В. JI. Ахметова, И. А. Кутуев и др // Генетика человека. 2004. - Т. 40, №3. - С. 409-414.

23. Иммуногеннетические исследование рака молочной железы у женщин Западной Сибири / И. Ю. Короткова, М. М. Черенкова, В. Ф. Прокофьев, А. В. Шевченко //Вестн. Межрегион. Ассоц. "Здравоохранение Сибири". — 2002. №4. - С.57-59.

24. Иммунофизиология / Ред. Е. А. Корнева. СПб.: Наука, 1993 - 148 с.

25. Имянитов Е. Н. Геронтологические аспекты молекулярной онкологии / Е. Н. Имянитов // Успехи геронтологии 1999.- № 3. - С. 29-34.

26. Имянитов Е. Н. Молекулярные аспекты патогенеза первично-множественных опухолей / Е. Н. Имянитов, К. П. Хансон // Российский онкологический журнал. 1998. -№ 5. - С. 47-51.

27. Имянитов Е. Н. Молекулярная генетика в клинической онкологии / Е. Н. Имянитов, К. П. Хансон //Сибирский онкологический журнал. 2004. -№ 2-3.-С. 40-47.

28. Интерлейкин-2 и злокачественные новообразования / Бережная Н. М., Горецкий Б. А.- К.: Наукова думка, 1992. — 172 с.

29. Исаков И. В. Оценка функционального состояния лимфоцитов крови у ВИЧ-больных / И. В. Исаков // Медицинская иммунология. 2004. - Т.6, №3-5.-С. 310-311.

30. Кадагидзе 3. Г. Современные возможности клинической иммунологии в онкологии / 3. Г. Кадагидзе, Е. Г. Славина, Н. Н. Тупицын // Вестник РАМН. -2002.- № 1.-С.4-8.

31. Кадагидзе 3. Г. Цитокины / 3. Г. Кадагидзе // Практическая онкология. -2002. -Т.4, № 3. С.131-139.

32. Кадагидзе 3. Г. Цитокины и их использование в онкологии /3. Г. Кадагидзе // Int. J. Reabilitation. 1997. - № 6. - С. 47-56.

33. Ковальчук Л. В. Хемокины новое семейство, регулирующих миграцию лейкоцитов / В. В. Ковальчук, Р. Т. Сайгитов // Журнал микробиологии. -2000.-№ 1.-С. 90-94.

34. Козлов В. А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов / В. А. Козлов // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1, № 1. - С. 5-8.

35. Козлов В. К., Молчанов О. Е., Жаринов Г. М. Иммунотерапия рекомбинантными цитокинами в лечении онкологических больных // Успехи кл. иммунологии и аллергологии / Под ред. А.В. Караулова. Москва, 2002.- С. 263-279.

36. Летягин В. П. Мастопатия / В. П. Летягин // Русский медицинский журнал. 2002. - Т. 1, № 5. - С. 92-99.

37. Лихтенштейн А. В. Генодиагностика рака: реальность и перспективы / А. В. Лихтенштейн, Н. П. Киселёва // Биохимия. 2001. - Т.66, №3. - С. 191- 196.

38. Макаренко Н. П. Фиброзно-кистозная болезнь / Н. П. Макаренко, Г. П. Корженкова // Современная онкология. — 2004. — Т. 6, № 1. С. 37-41.

39. Малышев B.C. Динамика показателей клеточного иммунитета у больных раком молочной железы при разных схемах лечения и в последующий период / В. С. Малышев, Л. М. Ярыгин, Л. Е. Денисов // 1 съезд онкологов стран СНГ. Москва, 1996. - С. 23-25.

40. Мастопатия / Ред. В.Ф. Семиглазова. СПб.: Карэ, 2000. - 109 с.

41. МаянскийА. Н. Клинические аспекты фагоцитоза. / А. Н. Маянский, О. И. Пикуза. Казань, 1993. - 192 с.

42. Методы постановки реакции бласттрансформации в микромодификации / В. В. Хоробрых, А. В. Пронин А.В, А. Ф. Киркин и др // Иммунология. — 1983.-№3.-С. 76-79.

43. Минимальный рак молочной железы (профилактика, выявление, лечение)/ Семиглазов В.Ф., Веснин А.Г., Моисеенко В.М. СПб.: Гиппократ, 1992.-240 с.

44. Молекулярный патогенез рака молочной железы: Сб. науч. тр. / Материалы российской онкологической конференции. Москва, 2004. - 145 с.

45. Молчанов О. С. Современные тенденции применения препаратов рекомбинантного интерлейкина-2 в онкологии / О. С. Молчанов, М. И. Карелин, Г. М. Жаринов // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1, № 3. - С. 38-47.

46. Новая высокочувствительная техника тестирования нормальных киллеров / М. П. Рыкова, И. В. Спиранде, М. С. Зедгенидзе и др // Иммунология. 1981,-№3. - С. 88-90.

47. Новиков В. И. Иммунотерапия при злокачественных новообразованиях / В. И. Новиков, В. И. Карандашов, И. Г. Сидорович. М: Медицина, 2002. - 160 с.

48. ОгнерубовН. А. Мастопатия/ Н. А. Огнерубов-Воронеж: 2001 — 123 с.

49. Определение субпопуляций лимфоцитов с использованием моноклональных антител методом иммунофлюоресценции / Е. А. Афримзон, Н. В. Чердынцева, И. А. Дизер и др // Методические рекомендации. Томск, 1996.-25 с.

50. Пальцев М. А. Межклеточные взаимодействия / М. А. Пальцев, А. А. Иванов, С. Е. Северин. Москва: Медицина, 2003. - 288 с.

51. Певгова Г. Ю. Возрастная структура гиперпластических процессов молочных желез / Г. Ю. Певгова, Е. В. Брюхина, А. В. Важенин // Гинекология. 2002. - Т.4, № 5. - С. 224-226.

52. Прилепская В. Н. Доброкачественные заболевания молочных желез: принципы терапии / В. Н. Прилепская, О. Б. Швецова // Гинекология. -2003. Т.З, № 2. - С. 312 - 317.

53. Распространенность делеции 32 п.н. в гене рецептора хемокинов CCR5 в популяциях Волго-Уральского региона / А. Р. Галеева, Э. К. Хуснутдинова, П. А. Сломинский, С. А. Лимборская // Генетика. 1998. - Т.34, №8. - С. 1160-1162.

54. Резникова Л. С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях / Л. С. Резникова. — Москва: Медицина, 1967. 272 с.

55. Рожкова Н. И. Маммологическая служба Российской Федерации / Н. И. Рожкова // Вестн. рентгенологии и радиологии. 2002. - №5. - С.56-61.

56. Семиглазов В. Ф. Значение прогностических и предсказывающих факторов при выборе лечения у больных метастатическим раком молочной железы / В. Ф. Семиглазов // Практическая онкология. 2000. - № 2. - С. 2630.

57. Семичковский Л. А. Стандартизация фармакотерапии диффузных мастопатий / Л. А. Семичковский, Л. А. Путырский // Рецепт. 2003. - Т. 26, № 2. - С.72-78.

58. Серов В. Н. Состояние молочных желез при эндокринных формах бесплодия, сочетающегося с гиперпролактинемией / В. Н. Серов, О. Ю. Ермолаева, А. Т. Терешин // Маммология. — 1998. — № 1. — С. 3-6.

59. Сидоренко Л. Н. Мастопатия / Л. Н. Сидоренко. Л.: Медицина. 1991.— 264 с.

60. Симбирцев А. С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма / А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2002. - Т.1, № 1.-С. 9-16.

61. Симбирцев А. С. Интерлейкин -8 и другие хемокины / А. С. Симбирцев // Иммунология. 1999.- № 4. - С. 9-13.

62. Симбирцев А. С. Цитокины: классификация и биологические функкции /

63. A. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2004 - Т.З, № 2. - С. 16-21.

64. Система интерлейкинов и рак / Бережная Н.М, Чехун В.Ф. К.:ДИА, 2000. - 224 с.

65. Смит К. Пульс-электрофорез и методы работы с большими молекулами ДНК / К. Смит, Ф. Коллинз, Ч. Кантор. М.: Мир, 1990. - С. 58-94.

66. Современное лекарственное лечение местнораспространенного и метастатического рака молочной железы / В. М. Моисеенко, В. В. Семиглазов, С. А. Тюляндин. СПб.: Грифон, 1997. — 254 с.

67. Содержание цитокинов и антител к ФНО-альфа у больных раком молочной железы и фиброаденоматозом / А. И. Аутеншлюс, Г. Г. Иванова, С.

68. B. Сидоров и др // Иммунология. 2003. - №3. - С. 40-42.

69. Сойхет С. Заместительная гормональная терапия у женщин с доброкачественными заболеваниями молочной железы / С. Сойхет // Проблемы репродукции. 1998. - № 1. - С. 57-60.

70. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека / А. А. Тотолян, И. А. Балдуева, JI. Н. Бубнова и др // Иммунология. 2002. - №1. - С. 44-50.

71. Тагиева Т. Т. Негормональные методы лечения доброкачественных заболеваний молочных желез / Т. Т. Тагиева // Гинекология. 2002. — Т. 4, №2.-С. 292-317.

72. Тагиева Т. Т. Мастопатия: негормональные методы лечения / Т. Т. Тагиева // Гинекология. 2004. - Т.6, № 5. - С. 22-31.

73. Тихомиров A. JI. Местные гормональные препараты в лечении доброкачественных заболеваний молочной железы, сопровождающихсямасталгией / A. JI. Тихомиров, Д. М. Лубиии // Русский медицинский журнал.-2000.-Т.8,№ 8.-С. 768-771.

74. Тотолян А. А. Роль хемокинов и их рецепторов в иммунорегуляции / А. А. Тотолян // Иммунология. 2001. - № 5. - С. 7-16.

75. Факты и перспективы изучения Fas-FasL системы в норме и при патологии / С. Г. Аббасова, Н. Е. Кушлинский, В. М. Липкин, Н. Н. Трапезников // Усп. совр. биол. 2000. - Т. 120, вып. 2. - С. 303-318.

76. Чередеев А. Н. Клеточные и молекулярные аспекты иммунных процессов / А. Н. Чередеев, Л. В. Ковальчук. Итоги науки и техн. ВИНИТИ: Сер. Иммунология, 1989. - Т. 19. - 240 с.

77. Чистяков С. С. Комплексное лечение фиброзно-кистозной болезни / С. С. Чистяков, О. П. Гребенникова, В. Е. Шишкина // Русский медицинский журнал.-2003.-Т. 11, № 11.-С. 11-18.

78. Ярилин А. А. Система цитокинов и принцип ее функционирования в норме и патологии / А. А. Ярилин // Иммунология. 1997.- № 5. - С. 7-13.

79. A chemokine receptor antagonist inhibits experimental breast tumor growth / S. C. Robinson, K. A. Scott, J. L. Wilson et al.// Cancer Res 2003. - Vol. 63. -P. 8360-8365.

80. Adenovirus-mediated transfer of p33INGl with p53 drastically augments apoptosis in gliomas / N. Shinoura, Y. Muramatsu, M. Nishimura et al.//Cancer Res. 1999. - Vol. 59.- P.5521-5528.

81. A genetic model for colorectal tumorigenesis / E. F. Fearon, B. Vogelstein // Cell. 1990. - Vol. 61. - P. 759 - 767.

82. Aging, longevity, inflammation, and cancer / C. Caruso, D. Lio, L. Cavallone et al.//NY Acad Sci. 2004. - Vol. 1028.-P. 1-13.

83. Apoptosis and production of TNF-alpha by tumor-associated inflammatory cells in histological grade III breast cancer/ F. R. Estevam, S. F. Augusto, S. A. Rodrigues et al.// Immunol Immunother. — 2005. Vol. 54. - P.671-676.

84. Association between functional genetic polymorphisms of human sulfotransferases 1A1 and 1A2 / C. Engelke, W. Meinl, H. Boeing //Pharmacogenetics. 2000.- Vol.10.-P. 163-169.

85. Association of rheumatoid arthritis with a functional chemokine receptor, CCR5 / J. Gomez-Reino, J. Pablos, P. Carreira et al. // Arthritis Rheum. 1999. -Vol. 42.-P. 989-992.

86. Balkwill F. Inflammation and cancer: back toVirnov? / F. Balkwill // Lancet. -2001. Vol. 357.-P. 539-545.

87. Benson J. R. Role of transforming growth factor beta in breast carcinogenesis/ J. R. Benson // Lancet Oncol. 2004, - Vol.5. - P. 229-239.

88. Bokoch G. M. Chemoattractant signaling and leukocyte activation / G. M. Bokoch // Blood. 1995. -Vol. 86. - P. 1649-1660.

89. Cancer susceptibility genes.Gatekeepers and caretakers / K. Kinzler, B.Vogelstein //Nature. -1997. - Vol. 386. P. - 761-763.

90. Can transforming growth factor-beta 1 and retinoids modify the activity of estradiol and antiestrogens in MCF-7 breast cancer cells? / E. Czeczuga-Semeniuk, T. Anchim, J. Dzieciol // Act. Biochim Pol. 2004. -Vol. 51. - P. 733-745.

91. Characterization of chemokines and their receptors in the centralnervous system: physiopathological implications/ A. Bajetto, R. Bonavia, S. Barbero et al. // Journal of Neurochemistry. 2002.- Vol. 82.- P. 1311-1329.

92. Chemokines, chemokine receptors and small-molecule antagonists: recent developments / J. Onuffer, R. Horuk// Trends in Pharmacological Sciences. — 2002. Vol.23. - P. 459^467.

93. Chemokines chemotactic cytokines that mediate inflammation / F. H. Epstein, A. D. Luster // New. Engl. J. Med. - 1998. - Vol. 338, N 7. - P. 436-445.

94. C-C chemokines, but not the C-X-C chemokines interleukin-8 and interferon-gamma inducible protein 10, stimulate transendothelial chemotaxis of T-lymphocytes / S. J. Roth, M. V. Carr, T. A. Springer // Eur. J. Immunol. - 1995. -Vol. 25.-P. 3482-3487.

95. Chemokines in viral meningitis: chemotactic cerebrospinal fluid factors include MCP-1 and IP-10 for monocytes and active lymphocytes/ F. Lahrtz, L. Piali, D. Nadal et al. // Eur. J. Immunol. 1997. - Vol. 27. -P. 2484-2489.

96. Chemokine receptors: Gateways to inflammation and infection / B. A. Premack, T. J. Schall // Nat. Med. 1996. - Vol. 2. -P. 1174-1178.

97. Chemokine receptor gene polymorphisms and risk of human T-lymphotropic virus type I infection in Jamaica / M. Hisada, R. B. Lai, S. Masciotra et al. // J. Infect. Dis. 2002. - Vol. 185.-P. 1351-1354.

98. Chemokine receptors: signposts to brain development and disease / B. Phuong, R. Miller // Nature Reviews Neuroscience. 2003. - Vol. 4, N 6. - P.444 -455.

99. CC chemokine receptor 5 and renal trasplantat survival / M. Fischereder, B. Luckow, B. Hocher et al. // Lancet. 2001. - Vol. 357. - P. 1758-1761.

100. CCR5 delta32, matrix metalloproteinase-9 and disease activity in multiple sclerosis / F. Sellebjerg, H. Madsen, C. Jensen et al. // J. Neuroimmunol. 2000. -Vol. 102.-P. 98-106.

101. CCR5 expression influences the progression of human breast cancer in a p53- dependent manner / S. Manes, E. Mira, R. Colomer // J. Exp. Med. 2003. -Vol. 198, N9.-P. 1381-1389.

102. CC chemokine receptor 5 and interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism in patients with primary Sjogren's syndrome / M. Petrek, Z. Cermakova, B. Hutyrova et al. // Clin. Exp. Rheumatol. 2002. - Vol. 20, N 5. -P. 701-703.

103. CC-chemokine receptor CCR5-del32 mitation as a modifying patogenetic factor in type I diabetes / I. Kalev, K. Oselin, P. Parlist et al. // J. Diabetes Complications. -2003. Vol. 17, N 6. - P. 387-391.

104. CCR5 (chemokine receptor-5) DNA polymorphism influences the severity of rheumatoid arthritis /1. Zapico, E. Coto, A. Rodrigues et al. // Genes Immun. -2000.-Vol. l.-P. 288-289.

105. CC chemokine receptor gene polymorphisms in Czech patients with pulmonary sarcoidosis / P. Drabek, V. Kolek, J. Zmala et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000.-Vol. 162.-P. 1000-1003.

106. Cytokine gene polymorphisms and breast cancer susceptibility and prognosis/ K. Smith, A. Bateman, H. Fussell et al. // Eur J Immunogenet. 2004. -Vol. 31.-P. 167-73.

107. Cytokine Reference / J. Oppenheim, M. Feidman // Academic Press. -2000. -P.2015.

108. C-X-C chemokine receptor desensitization mediated through ligand-enhanced receptor phosphrylation on serine residues / A Richmond, S. Mueller, J. White et al. // Academic Press. 1997. - P. 3-15.

109. Differentional transcriptional regulation of CD161 and a novel gene, 197/15a, by IL12, IL15, and IL2 in NK and T cells/ L. Azzoni, O. Zatsepina, B. Abebe// J Immunol. 1998. - Vol. 161. - P. 3493-3500.

110. Distribution of CCR5-delta 32 gene deletion across the Russian part of Eurasia. / N. Yudin, S. Vinogradov, T. Potapova et al. // Human Genetics. 1998. -Vol. 102.-P. 695-698.

111. Elevated expression of the CC chemokine regulated on activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES) in advanced breast carcinoma/ G. Luboshits, S. Shina, S. Kaplan et al.//Cancer Res. 1999. - Vol. 59. - P.4681-4687.

112. Expression of the Chemokine Receptors CCR4,CCR5, and CXCR3 by Human Tissue-Infiltrating Lymphocytes /Е. Kunkel, J. Boisvert, K. Murphy// American Journal of Pathology .-2002.- Vol. 160, N1.- P. 347-355.

113. Estradiol abrogates apoptosis in breast cancer cells through inactivation of BAD: Ras-dependent nongenomic pathways requiring signaling through ERK and Akt/ R. Fernando, J. Wimalasena // Mol Biol Cell. 2004. - Vol. 15. - P. 32663284.

114. Estrogen and the risk of breast cancer/ M. Clemons, P. Goss// Nev. Engl. J. Med. -2001. -Vol. 344. P. 276-285.

115. Estrogen decreases chemokine levels in murine mammary tissue: implications for the regulatory role of MIP-1 alpha and MCP-l/JE in mammary tumor formation / P. Fanti, M. Nazareth, R. Bucelli et al. // Endocrine. 2003. -Vol. 22.-P. 161-168.

116. Estrogen regulates expression of tumor necrosis factor receptors in breast adipose fibroblasts/ S. Deb, S. Amin, A. G. Imir et al.// J Clin Endocrinol Metab.- 2004. Vol. 89. -P.4018-4024.

117. Feigal E.G. AIDS-associated malignancies: research perspectives / E. G. Feigal // Biochim. Biophys. Acta. 1999. - Vol. 1423. - P. 1 - 9.

118. Genes other than BRCA1 and BRCA2 involved in breast cancer susceptibility / M. M. de Jong, I. M. Nolte, G. J. te Meerman et al. // J Med Getet.- 2005. Vol. 39. - P. 225-242.

119. Genetic acceleration of AIDS progression by a promoter variant of CCR5 / M. P. Martin, M. Dean, M. W. Smith et al. // Science. 1998. - Vol. 282. - P. 1907-1911.

120. Genetic instabilities in human cancers /С. Lengauer, K. Kinzler // Nature. -1998. Vol. 396. - P. 643 - 649.

121. Genetic restriction of HIV-1 infection and progression to AIDS by a deletion allele of the CKR5 structural gene / M. Dean, M. Carrington, C. Winkler et al. // Science. 1996. - Vol. 273. - P. 1856-1862.

122. Genetic variation at the chemokine receptors CCR5/CCR2 in myocardial infarction / P. Gonzalez, R. Alvarez, A. Batalla et al. // Genes Immun. 2001. -Vol. 2.-P. 191-195.

123. Global distribution of the CCR5 gene 32-basepair deletion / J. J. Martinson, N. H. Chapman, D. C. Rees et al. // Nature Genet. 1997. - Vol. 16. - P. 100-103.

124. Greenberg P.D. Adoptive T-cell therapy of tumors: Mechanisms operative in the recognition and elimination of tumor cells/ P.D. Greenberg // Adv.Immunol. -1991.-Vol. 49. -P.281-355.

125. Guenderich F.P. Metabolism of chemical carcinogens / F. R. Guenderich // Cancer Res. 2000. - Vol. 21. - P.345-351.

126. Hartmann J. T. Metastatic seminoma treated with either single agent carboplatin or cisplatin-based combination chemotherapy: a pooled analysis of two randomised trials/J. T. Hartmann // Br J Cancer. 2004. - Vol. 91. - P. 683-687.

127. Hidh levels of interleukin 8 in the blood and alveolar spaces of patients with pneumonia and aduit respiratory distress syndrome / S. Chollet-Martin, P. Montavers, C. Gibert et al. // Infec. Immunol. - 1993. -Vol. 61. - P.4553-4559.

128. Homozygous defect in HTV-l-coreceptor accounts for resistance of some multiply-exposed individuals to HTV-1 infection / R. Liu, W. Paxton, S. Choe et al. // Cell. 1996. - Vol. 86. - P. 367-377.

129. Human mammary NAT and SULT enzymes metabollicaly activate N-hydroxylated heterocyclic amines, but NAT enzyme activity is not influenced by NAT genotype / J. A. Williams, E. M. Stone, G. Fakis et al.// Proc Am Assoc Cancer Res.- 2000.- Vol. 41.- P.551.

130. Human monocyte chemotactic proteins-2 and-3: structural and functional comparison with MCP-1 / P. Proost, A. Wuyts, J. van Damme // J. Leukoc. Biol.- 1996.-Vol. 599.-P. 67-72.

131. Immune dysfunction and micrometastases in women with breast cancer/ M. J. Cambell, J. Scott, H. T. Maecker et al. //J Breast Cancer Res Treat — 2005. -Vol. 91.-P. 163-171.

132. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion / C. Mancini, A. O. Carbonare, I, F. Heremans // Immunochemistry. 1965. - Vol.2.- P.235-254.

133. Inhibition of CCR5 Expression by IL-12 Through Induction of P-chemokines in Human T Lymphocytes / J. Wang, E. Guan, G. Roderiquez et al. // The Journal of Immunology. 1999. - Vol. 163. - P. 5763-5769.

134. IL-lbeta suppresses prolonged Akt activation and expression of E2F-1 and cyclin A in breast cancer cells / W. H. Shen, S. T. Jackson, S. R. Broussard et al.// J Immunol. -2004. Vol. 172. - P. 7272-81.

135. IL-4 protects tumor cells from anti-CD95 and chemotherapeutic agents via up-regulation of antiapoptotic proteins / C. Conticello, F. Pedini, A. Zeuner et al. // J Immunol. 2004. - Vol. 172. - P. 5467-5477.

136. Interleukin-6 (IL-6) as an anti-inflammatory cytokine: induction IL-1 receptor antagonist and soluble tumor necrosis factor receptor р55/ H. Tilg, E. Trehu, M. Atkins // Blood.- 1994. Vol. 83. - P. 113.

137. Involvement of proinflammatory cytokines IL-lbeta and IL-6 in progression of human gastric carcinoma / H. Kai, Y. Kitadai, M. Kodama et al. //Anticancer Res. 2005. - Vol. 25. - P. 709-713.

138. Luster A. D. Chemokihes: chemotactic cytokines that mediate inflammation / A. D. Luster // New Engl. J. Med. -1998. Vol. 388. - P.436-445.

139. Molecular characterization of the tumor microenvironment in breast cancer / M. Allinen, R. Beroukhim, L. Cai et al. // Cancer Cell. 2004. - Vol. 6. - P. 17-32.

140. Molecular cloning and functional expression of a new human CC-chemokine receptor gene / M. Samson, O. Labbe, C. Mollereau et al. // Biochemistry. -1996. Vol. 35. - P. 3362-3369.

141. Monocyte chemoattractant protein-3 is a functional ligand for CC chemokine receptors 1 and 2B / C. Combadiere, S. K. Ahuja, J. van Damme et al. // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. - P. 29671-29677.

142. NF-kappaB is essential for epithelial-mesenchymal transition and metastasis in a model of breast cancer progression/ M. A. Huber, N. Azoitei, B. Baumann et al.//J Clin Invest. 2004. -Vol. 114. - P. 569-581.

143. Nicola N. A. Guidebook to cytokines and their receptors / N. A. Nicola // Oxford University Press. 1994. - P.284.

144. Oncogenes and cell proliferation / N. Dyson, A. Baiman// Current ooinion in genetics and development. 1999. - Vol. 9. P. - 11-14.

145. Pathways for internalization and recycling of the chemokine receptor CCR5/ A. Mueller, E. Kelly, P. Strange/ZBlood.- 2002,- Vol.99.- P. 785-791.

146. P19/ARF links the tumor suppressor p53 to ras /1. Palmero, C. Pantoja, M. Serrano// Nature. -1998. -Vol. 395. P. -125-126.

147. Perez E. A. HER-2 as a prognostic, predictive and therapeutic target-in breast cancer / E. A. Perez // Cancer. Control. 1999. - Vol. 6. - P. 233-240.

148. Phosphorylation of the retinoblastoma gene product is modulated during the cell cycle and cellular differentiation./ P.Chen, P. Scully P, J. Shew et al.// Cell -2002.-Vol. 58. -P.l 193- 1198.

149. Plasma TGF-betal -related survival of postmenopausal metastatic breast cancer patients / D. Nikolic-Vukosavljevic, N. Todorovic-Rakovic, M. Demajo et al.// Clin Exp Metastasis. 2004. -Vol. 21. - P. 581-585.

150. Primary prognostic factors in invasive breast cancer with special reference to ductal carcinoma and histologic malignancy grade/ J. P. Game, K. Aspegren, F. Linell // Cancer. 1994. -Vol. 73. - P. 1438-1448.

151. Quantification of CCR5 mRNA in human lymphocytes and macrophages by real-time reverse transcriptase PCR assay / J. Lai, J. Yang, S. Douglas et al. // Clin, and diagnosticImmun. -2003. -Vol. 10,N6. -P. 1123-1128.

152. Rebbeck T. R. More about: modification of clinical presentation of prostate tumors by a novel genetic variant in CYP3A4 /Т. R. Rebbeck // J Natl Cancer Inst. -2000.-Vol. 92.-P.76.

153. Recombinant p21 protein inhibits lymphocyte proliferation and transcription factors / A. K. Khanna, M. Plummer, V. Nilakantan et al. // The Journal of Immunology.-2005. -Vol. 174. P. 7610-7617.

154. Relative importance of CCR5 and antineutrophil cytoplasmic antibodies in patients with Wegener's granulomatosis / Y. Zhou, D. Huang, C. Farver et al. // J. Rheumatol. 2003.- Vol. 30, N 7. - 1541-1547.

155. Role of tumour necrosis factor gene polymorphisms (-308 and -238) in breast cancer susceptibility and severity/ I. A. Azmy, S. Balasubramanian, A. Wilson et al. // Breast Cancer Res. 2004. - Vol. 6. - P. 395-400.

156. Rollins B. J. Chemokines / B. J. Rollins // Blood. 1997. - Vol. 90, N 3. -P.909-928.

157. Romagnani S. Human Th-1 Th-2 subsets: «Eppur si muove!» / S. Romagnani // Eur. Cyt. Network. - 1994. - Vol. 5. - P. 7-12.

158. Schall T. J. Biology of the RANTES/SYS cytokine family / T. J. Schall // Cytokine.-1991.-Vol.3.-P. 165- 183.

159. Searching for cancer-associated gene polymorphisms: promises and obstacles/ E. N. Imyanitov, A.V. Togo, K. P.Hanson// Cancer. Lett. 2004. - Vol. 204.-P. 3-14.

160. Serum levels of tumor necrosis factor alpha correlate with response to neoadjuvant chemotherapy in locally advanced breast cancer / U. Berberoglu, E. Yildirim, O. Celen // Serum Int J Biol Markers. -2004. Vol. 19. -P.130-134.

161. Signaling through the hematopoietic cytokine receptors / J. Inle, B. Witthuhn, F. Quelle et al. // Ann. Rev. Immunol. 1995. - Vol. 13. - P.369-398.

162. Significant involvement of CCR2-641 and CXCL 12-3a in the development of sporadic breast cancer / A. Zafiropoulos, N. Crikas, A. M. Passam et al. // J. Med. Genet. 2004. - Vol. 41. - P.59.

163. Singletary S.E. Rating the risk factors for breast cancer/ S. E. Singletary S.E. // An. Surg. 2003. -Vol. 237. - P. 474-482.

164. Shedding of gangliosides by human medullloblastoma cells / F. Chang, R. Li, S. Ladisch // Exp. Cell. Res. 1997. - Vol. 234, N 2. - P. 341-346.

165. Structure-activity relationships of interleukin-8 determined using chemically synthesized analogs / I. Clark-Lewis, C. Schumacher, M. Baggiolini et al.//J. Biol. Chem. 1991. - Vol. 266. - P. 23128-23134.

166. Structure and functional expression of a human interleukin-8 receptor / W. Holmes, J. Lee, W. Kuang et al. // Science. 1991. -Vol. 253. - P. 1278-1280.

167. Sulfotransferases: genetics and role in toxicology/ H. Glatt, U. Pabel, W. Teubner //Toxicol Lett. 2000. - Vol. 112-113. - P.7341-48.

168. The Breast Cancer Linkage Consortium / D. Ford, D. Easton, D. Bishop et al.// Lancet. -1994. Vol. 343. P. - 692-695.

169. The chemokine receptor CCR5 /А. Mueller, P.G. Strange // The International Journal of Biochemistry' and Cell Biology. 2004. - Vol. 36. P. - 3538.

170. The CC chemokine RANTES in breast carcinoma progression: regulation of expression and potential mechanisms of promalignant activity / E. Azenshtein, G. Luboshits, S. Shina et al. // Cancer Research. 2002. - Vol. 62. - P. 10931102.

171. The chemokine receptors CXCR3 and CCR5 mark subsets of T cells associated with certain inflammatory reactions / S. Qin, J. Rottman, P. Myers et al. //J. Clin. Invest. 1998. - Vol. 101. - P. 746-754.

172. The cytokine production cancer: IL-la, IL-lp, IL-6, TNF-a and soluble ILR in the serum and in the PBMC culture supernatants in a serums of 90 cancer patients / G. Mantovani, A. Maccio. P. Lai et al.// Eur. Cyt. Netw. 1996. - Vol. 5.-P. 230.

173. The delta32 deletion of CCR5 receptor in rheumatoid arthritis / S. Cooke, G. Forrest, P. Venables et al. // Arthritis Rheum. 1998. - Vol. 41. - P. 1135-1136.

174. T helper 1 and T helper 2 cells respond differentially to chemokines / J. T. Siveke, A. Hamann // J. Immunol. 1998. - Vol. 160. - P. 550-554.

175. The HER-2 neu oncogene in breast cancer: prognostic factor, predictive factor and target for therapy / J. Ross, J. Fletcher // Strem Cells.- 1998.-Vol. 16-P. 413-428.

176. The influence of IL-6 on the growth of human esophageal cancer cell lines / M. Oka M, N. Iizuka, K. Yamamoto et al.// J. Interfer. Cytokine Res. 1996. -Vol. 16.-P. 1001-1006.

177. The role of chemokines in inflammation / P. Proost, A. Wuyts, J. van Damme // Int. J. Clin. Lab. Res. 1996. - Vol. 26. - P. 211-223.

178. The role of chemokines in the biology and therapy of breast cancer/ Т. C. Walser, A. M. Fulton // Breast Dis. 2004. -Vol. 20. - P. 137-143.

179. Thelen M. Dancing to the tune of chemokines/ M. Thelen // Nature Immunology. 2002. - Vol.2.- P. 129-134.

180. TNF-^- induced secretion of C-C chemokines modulates C-C chemokine receptor 5 expression on peripheral blood lymphocytes / F. Hornung, G. Scala, M. Lenardo et al. // The Journal of Immunology.- 2000. -Vol. 164. P. 61806187.

181. Transcriptomic changes in human breast cancer progression as determined by serial analysis of gene expression / M. C. Abba, J. A. Drake, K. A. Hawkins et al.// Breast Cancer Res. 2004. -Vol. 6. - P. 499-513.

182. Tumour necrosis factor-alpha, interleukin-6, and fasting serum insulin correlate with clinical outcome in metastatic breast cancer patients treated with chemotherapy/ H. Bozcuk, G. Uslu, M. Samur et al. // Cytokine. 2004. - Vol. 27. - P.58-65.

183. Van de Vijver M.J. Molecular epidemiology of human cancer: contribution of mutation spectra studies of tumour suppressor genes/ M. J. Van de Vijver// Cancer Research. 1998. -Vol. 15. - P. 4023-4034.