Физиологическая роль 28-кДа 1-Cys пероксиредоксина в эпителиальных тканях крысы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Новоселов, Сергей Владимирович

• Новоселов, Сергей Владимирович
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Новоселов, Сергей Владимирович

Список основных сокращений и обозначений.

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1. Общая характеристика и классификация эпителиальных тканей.

2.2. Структура некоторых эпителиев, основные свойства.

2.2.1. Обонятельный эпителий.

2.2.2 Эпителий органов дыхания.

2.2.3 Эпителий кожных покровов.

2.3. Механизмы белковой секреции эпителиальными клетками.

2.4. Некоторые секреторные белки и белки-протекторы эпителиев, контактирующих с окружающей средой.

2.4.1. Специфические белки кожи.

2.4.2. Белки воздухоносных путей.

2.4.3. Белки обонятельного эпителия.

2.5. Физиологическая роль пероксиредоксинов.

2.5.1. Введение.

2.5.2. Участие пероксиредоксинов в регуляции

ЫБ-кР активации.

2.5.3. Рецепторная сигнализация, белковое фосфорилирование.

2.5.4. Участие пероксиредоксинов в апоптозе.

3. Постановка задачи исследования.

4. Материалы и методы.

4.1. Материалы.

4.2.Методы

4.2.1. Выделение 28 кДа белка из обонятельного эпителия крысы.

4.2.2. Получение поликлональных антител против

28-кДа белка.

4.2.3. Световая иммуногистохимия.

4.2.4 Электронная микроскопия.

4.2.5. Трансплантация ткани обонятельного эпителия новорожденных крыс в переднюю камеру глаза.

4.2.6. In situ гибридизация.

4.2.7. Синтез аффинной колонки.

4.2.8 Измерение каталазной активности.

4.2.9. Измерение глутатион пероксидазной активности.

4.2.10. Измерение глутамин-синтетазной активности.

4.2.11. Определение протекторных свойств 28-кДа белка.

4.2.12. Определение цитотоксичности 28-кДа.

4.2.13. Определение влияния внеклеточного

28-кДа белка на пролиферацию Т лимфоцитов.

5. Результаты исследования и обсуждение.

5.1 Тканевая специфичность 28-кДа белка.

5.2 Локализация 28-кДа белка в тканях крысы световая иммуногистохимя).

5.3 In situ гибридизация 28-кДа белка в тканях крысы.

5.4 Локализация 28-кДа белка в тканях крысы электронно-микроскопическая иммуногистохимия).

5.5 Протекторные свойства неистощенных и истощенных по

28-кДа белку экстрактов обонятельного эпителия.

5.6 Пероксидазная активность 28-кДа белка.

5.7 Влияние внеклеточного 28-кДа белка на пролиферацию Т лимфоцитов.

5.8 Другие возможные функции 28-кДа белка.

5.9 Связь 28-кДа белка с другими секреторными белками эпителиальных тканей.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиологическая роль 28-кДа 1-Cys пероксиредоксина в эпителиальных тканях крысы»

Некоторые эпителиальные ткани организма, такие как обонятельная выстилка, ткани респираторного эпителия и некоторые другие, непосредственно контактируют с окружающей средой. Клетки этих тканей покрыты слизью, которая является первым барьером между ними и атмосферой и, фактически, обеспечивает нормальное функционирование клеток эпителия. Через слизь осуществляется транспорт многих важных для организма веществ (например, кислорода в респираторных тканях, пахучих стимулов в обонятельной выстилке и т.д.). Одновременно через слизь могут поступать и многие вещества, которые являются токсичными для клеток эпителия. В этом случае на первый план выдвигаются системы, нейтрализующие действие таких веществ. Эти системы интенсивно исследуются и к настоящему времени показана роль некоторых ее компонентов. В частности, в обонятельном эпителии идентифицирован ряд трансформационных ферментов, включая некоторые ферменты-антиоксиданты. Однако до полной картины еще далеко и постоянно открываются все новые ферменты, участвующие в нейтрализации токсических веществ в эпителиальных тканях.

Недавно в лаборатории биофизики рецепции Института биологической физики РАН из слизи обонятельной выстилки крысы были выделены белки, которые являются мажорными среди водорастворимых белков слизи (28-кДа белок и 45-кДа белок). Очень высокое содержание данных белков в обонятельной выстилке (2-4% от всех водорастворимых белков) предполагает их важное участие в функционировании клеток в данной ткани. Проведенные в лаборатории предварительные исследования некоторых свойств 28-кДа белка указывают на то, что он может участвовать в защите клеток обонятельного эпителия от повреждений, вызванных активными формами кислорода.

Настоящая работа посвящена выявлению физиологической роли 28-кДа белка как в обонятельной выстилке, так и в других тканях животного, и определение его места в общей системе защиты клеток эпителиальных тканей. Такого рода работы предполагают комплексный подход и должны включать в себя поиск гомологов данного белка с целью определения возможной функции, выявление субстратов и кофакторов для 28-кДа белка, определение его локализации в различных тканях животного и места его синтеза, исследования по функционированию ткани при дефиците данного белка, место 28-кДа белка в общей антиоксидантной системе и, наконец, связь 28-кДа-белка с другими секреторными белками эпителиальных тканей.

2. Обзор литературы.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Новоселов, Сергей Владимирович

7.Выводы.

1. 28-кДа белок из обонятельного эпителия крысы идентифицирован как секреторный 1-Суз пероксиредоксин (28 кДа 1-Суэ пероксиредоксин).

2. 28-кДа 1-Суэ пероксиредоксин присутствует во всех тканях крысы; максимальное его содержание наблюдается в обонятельном эпителии, трахее, бронхах легких.

3. 28-кДа 1-Суз пероксиредоксин локализован в слизи обонятельного и респираторного эпителиев, апикальных частях опорных и респираторных клеток, гранулярном слое эпидермиса и сальных железах волосяных фолликул.

4. В обонятельном и респираторном эпителиях 28-кДа 1-Суз пероксиредоксин синтезируется опорными и респираторными клетками и секретируется в слизь.

5. Истощение экстрактов ткани обонятельного эпителия по 28-кДа белку приводит к очень значительной (на 80%) потере антиоксидантных свойств данной ткани.

6. Протекторная активность 28-кДа 1-Суз пероксиредоксин определяется его пероксидазной активностью.

7. 28-кДа 1-СуБ пероксиредоксин в два раза увеличивает Конканавалин А -стимулируемую пролиферацию лимфоцитов.

76

Выражаю глубокую признательность сотрудникам Лаборатории биофизики рецепции ИБК РАН (руководитель Е.Е.Фесенко) И.В.Пешенко, М.Ф.Быстровой, Ю.В.Николаеву, С.С.Камзалову, С.Е.Амелиной, В.И. Попову и сотрудникам Лаборатории белков гормональной регуляции ИБХ РАН (руководитель В.М.Липкин) Т.М. Шуваевой и М.И. Меркуловой, принимавших непосредственное участие в работе и обсуждении результатов.

Выражаю благодарность В.И.Нестерову, И.В.Нестеровой, Р.Я.Гордон, Л.С.Бочаровой за любезно предоставленные реактивы и оборудование для гистологических исследований, благодарю В.А.Яшина и Вадима Рогаческого за техническую поддержку при проведении световой микроскопии, А.В.Куликова за практикум по трансплантации тканей в переднюю камеру глаза.

Также не могу не поблагодарить свою семью, оказавшую мне всестороннюю помощь, и без которой выполнение данной работы было бы невозможно.

б.Заключение

Итак, в эпителиальных тканях крысы идентифицирован первый секреторный тиол-специфический антиоксидант 28-кДа 1-Суз пероксиредоксин, при этом максимальная его концентрация обнаружена в тканях, непосредственно контактирующих с атмосферой (обонятельный эпителий, трахея, бронхи легких, эпидермис кожи). Как было показано в настоящей работе, в этих эпителиальных тканях 28-кДа 1-Суз пероксиредоксин является одним из основных антиоксидантов, защищающих клетки от токсического действия активных форм кислорода. Данное обстоятельство открывает широкие перспективы использования 28-кДа 1-Суз пероксиредоксина для диагностики и лечения некоторых болезней органов дыхания и кожи и, возможно, это приведет к созданию на основе 28-кДа 1 -Суз пероксиредоксин лекарственных препаратов. Кроме того, для реализации протекторных свойств 28-кДа 1-СуБ пероксиредоксина необходим кофактор (возможно, тиол), который к настоящему времени в организме еще не идентифицирован. Выявление этого естественного кофактора является первоочередной задачей, и он также может быть использован в медицинских целях.

75

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Новоселов, Сергей Владимирович, 1999 год

1. Бронштейн A.A. Обоняние: Структурная организация периферических отделов обонятельного анализатора и обонятельной луковицы, в: "Физиология сенсорных систем", 1971, часть 11, глава 14, стр. 515- 528, Наука, Ленинград.

2. Бронштейн A.A. Закономерности ультраструктурной организации обонятельных рецепторов в сравнительном ряду позвоночных. 1976, Цитология, т. 18, стр.535-538.

3. Бронштейн A.A. Обонятельные рецепторы позвоночных. 1977 Наука, Ленинград.

4. Винников Я.А. Титова Л.К. 1957 Морфология органов обоняния. Наука, Москва

5. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой., 1982, Медицина, Москва.

6. Камзалов С.С., Новоселов C.B., Евдокимов В.А., Пешенко И.В.Идентификация секреторного 28-кДа белка из обонятельного эпителия крысы как тиол-специфического антиоксиданта. III Пущинская конференция молодых ученых, 1998, 153-154, Пущино.

7. Меркулова М.И., Новоселов В.И., Камзалов С.С.Первичная структура секреторного 45-кДа белка из обонятельного эпителия крысы. IVПущинская конференция молодых ученых. Пущино, 1999, с. 13.

8. Микроскопическая техника. Руководства под редакцией Саркисова Д.С. и Перова Ю.Л., 1996, Медицина, Москва.

9. Новоселов В.И., Пешенко И.В., Новоселов C.B., Камзалов С.С., Быстрова М.Ф., Евдокимов В.А., Николаев Ю.В., Фесенко Е.Е.Протекторные свойства 2 8-к Да пероксиредоксина определяются его пероксидазной активностью. Биофизика, 1999а, 44, 568-570.

10. Новоселов C.B., Пешенко И.В., Новоселов В.И. О возможной физиологической функции секреторного 1-Cys пероксиредоксина крысы (28 кДа пероксиредоксин) в секретирующих органах. "Рецепция и внутриклеточная сигнализация", 19986, 105-107,Пущино.

11. Новоселов C.B., Камзалов С.С., Попов В.И., Новоселов В.И. О возможной физиологической функции секреторного тиол-специфического белка антиоксиданта 28-кДа из крысы. III Пущинская конференция молодых ученых, 1998в, 162-163, Пущино.

12. Пяткина Г.А. Электронно-микроскопическое исследование обонятельной выстилки свиньи. Сенсорные системы, 1982, т.2, стр. 27-32.

13. Романова JI.К., Регуляция восстановительных процессов. 1984, Медицина, Москва.

14. Световая микроскопия в биологии. Методы. Под редакцией Лейси А., 1992, Мир, Москва.

15. Фесенко Е.Е., 1977. Компоненты обонятельной слизи из обонятельной выстилки лягушки.

16. Хем А., Кормак Д. Гистология, т. 2-5, 1983, Мир, Москва.

17. Шубникова Е.А. Эпителиальные ткани. 1996, Издательство Московского университета, Москва.

18. Adamek, G.D., R.C. Gesteland, R.G. Mair, and В. Oakley. 1984. Transduction physiology of olfactory receptor cilia. Brain Res 310:87-97.

19. Alvarez, M.E., R.I. Pennell, P.J. Meijer, A. Ishikawa, R.A. Dixon, and C. Lamb. 1998. Reactive oxygen intermediates mediate a systemic signal network in the establishment of plant immunity. Cell 92:773-784.

20. Anderson, M.T., F.J. Staal, C. Gitler, and L.A. Herzenberg. 1994. Separation of oxidant-initiated and redox-regulated steps in the NF- kappa В signal transduction pathway. Proc Natl Acad Sci USA 91:11527-11531.

21. Bae, Y.S., S.W. Kang, M.S. Seo, I.C. Baines, E. Tekle, P.B. Chock, and S.G. Rhee. 1997. Epidermal growth factor (EGF)-induced generation of hydrogen peroxide. Role in EGF receptor-mediated tyrosine phosphorylation. J Biol Chem 272:217-221.

22. Baeuerle, P.A. and D. Baltimore. 1988.1 kappa B: a specific inhibitor of the NF-kappa В transcription factor. Science 242:540-546.

23. Baeuerle, P.A. and D. Baltimore. 1996. NF-kappa B: ten years after. Cell 87:1320.

24. Baldwin, A.S.J. 1996. The NF-kappa В and I kappa В proteins: new discoveries and insights. Annu.Rev.Immunol 14:649-683.

25. Basbaum, C.B. and W.E. Finkbeiner. 1988. Airway secretion: a cell-specific analysis. Horm.Metab.Res 20:661-667.

26. Bradford, M.M. 1967. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing of protein-dye binding. Anal.Biochem 72:248-254.

27. Burgess, T.L. and R.B. Kelly. 1987. Constitutive and regulated secretion of proteins. Annu.Rev.CellBiol 3:243-293.

28. Chae, H.Z., S J. Chung, and S.G. Rhee. 1994a. Thioredoxin-dependent peroxide reductase from yeast. J Biol Chem 269:27670-27678.

29. Chae, H.Z. and S.G. Rhee. 1994b. A thiol-specific antioxidant and sequence homology to various proteins of unknown function. Biofiactors 4:177-180.

30. Chanat, E. and W.B. Huttner. 1991. Milieu-induced, selective aggregation of regulated secretory proteins in the trans-Golgi network. J Cell Biol 115:15051519.

31. Chen, Q., N. Olashaw, and J. Wu. 1995. Participation of reactive oxygen species in the lysophosphatidic acid- stimulated mitogen-activated protein kinase kinase activation pathway. J Biol Chem 270:28499-28502.

32. Childs, G.V. 1986. A glossary of immunocytochemical terms. Am J Anat. 175:131-134.

33. Choi, H.J., S.W. Kang, C.H. Yang, S.G. Rhee, and S.E. Ryu. 1998. Crystal structure of a novel human peroxidase enzyme at 2.0 A resolution. Nat.Struct.Biol 5:400-406.

34. Claesson-Welsh, L. 1994. Platelet-derived growth factor receptor signals. J Biol Chem 269:32023-32026.

35. Creutz, C.E., J.H. Scott, C.J. Pazoles, and H.B. Pollard. 1982. Further characterization of the aggregation and fusion of chromaffin granules by synexin as a model for compound exocytosis. J Cell Biochem 18:87-97.

36. Cuschieri, A. 1974. Enzyme histochemistry of the olfactory mucosa and vomeronasal organ in the mouse. JAnat. 118:477-489.

37. Elazar, Z., L. Orci, J. Ostermann, M. Amherdt, G. Tanigawa, and J.E. Rothman. 1994. ADP-ribosylation factor and coatomer couple fusion to vesicle budding. J Cell Biol 124:415-424.

38. Finkel, T. 1998. Oxygen radicals and signaling. Curr.Opin.Cell Biol 10:248-253.

39. Getchell, M.L., J.A. Rafols, and T.V. Getchell. 1984. Histological and histochemical studies of the secretory components of the salamander olfactory mucosa: effects of isoproterenol and olfactory nerve section. Anat.Rec. 208:553565.

40. Getchell, T.V. 1974. Unitary responses in frog olfactory epithelium to sterically related molecules at low concentrations. J Gen.Physiol. 64:241-261.

41. Gill, S.R., T.A. Schroer, I. Szilak, E.R. Steuer, M.P. Sheetz, and D.W. Cleveland. 1991. Dynactin, a conserved, ubiquitously expressed component of an activator of vesicle motility mediated by cytoplasmic dynein. J Cell Biol 115:1639-1650.

42. Goerke, J. 1998. Pulmonary surfactant: functions and molecular composition. Biochim Biophys Acta 1408:79-89.

43. Gordon, R.Y., L.S. Bocharova, I.I. Kruman, V.I. Popov, A.P. Kazantsev, S.S. Khutzian, and V.N. Karnaukhov. 1997. Acridine orange as an indicator of the cytoplasmic ribosome state. Cytometry 29:215-221.

44. Hart, D.T., P. Baudhuin, F.R. Opperdoes, and C. de Duve. 1987. Biogenesis of the glycosome in Trypanosoma brucei: the synthesis, translocation and turnover of glycosomal polypeptides. EMBO J 6:1403-1411.

45. Hashimoto, S., G. Fumagalli, A. Zanini, and J. Meldolesi. 1987. Sorting of three secretory proteins to distinct secretory granules in acidophilic cells of cow anterior pituitary. J Cell Biol 105:1579-1586.

46. Hayashi, S., I.C. Gillam, A.D. Delaney, and G.M. Tener. 1978. Acetylation of chromosome squashes of Drosophila melanogaster decreases the background in autoradiographs from hybridization with 1251.- labeled RNA. J Histochem.Cytochem. 26:677-679.

47. Hecht, D. and Y. Zick. 1992. Selective inhibition of protein tyrosine phosphatase activities by H202 and vanadate in vitro. Biochem Biophys Res Commun 188:773-779.

48. Herzenberg, L.A., S.C. De Rosa, J.G. Dubs, M. Roederer, M.T. Anderson, S.W. Ela, and S.C. Deresinski. 1997. Glutathione deficiency is associated with impaired survival in HIV disease. Proc Natl Acad Sci USA 94:1967-1972.

49. Jacobson, M.D. 1996. Reactive oxygen species and programmed cell death. Trends.Biochem Sci 21:83-86.

50. Jacquot, J., A. Hayem, and C. Galabert. 1992. Functions of proteins and lipids in airway secretions. Eur Respir. J 5:343-358.

51. Jaschke, A., H. Mi, and M. Tropschug. 1998. Human T cell cyclophilinl8 binds to thiol-specific antioxidant protein Aopl and stimulates its activity. J Mol Biol 277:763-769.

52. Jeffery, P.K. and D. Li. 1997. Airway mucosa: secretory cells, mucus and mucin genes see comments. Eur Respir. J 10:1655-1662.

53. Jin, D.Y., H.Z. Chae, S.G. Rhee, and K.T. Jeang. 1997. Regulatory role for a novel human thioredoxin peroxidase in NF-kappaB activation. J Biol Chem 272:30952-30961.

54. Kang, S.W., I.C. Baines, and S.G. Rhee. 1998. Characterization of a mammalian peroxiredoxin that contains one conserved cysteine. J Biol Chem 273:6303-6311.

55. Katz, A.B. and L.B. Taichman. 1994. Epidermis as a secretory tissue: an in vitro tissue model to study keratinocyte secretion see comments. JInvest.Dermatol. 102:55-60.

56. Katz, A.B. and L.B. Taichman. 1999. A partial catalog of proteins secreted by epidermal keratinocytes in culture. J Invest.Dermatol. 112:818-821.

57. Keim, V., G. Rohr, H.G. Stockert, and F.J. Haberich. 1984. An additional secretory protein in the rat pancreas. Digestion 29:242-249.

58. Kim, K., S.G. Rhee, and E.R. Stadtman. 1985. Nonenzymatic cleavage of proteins by reactive oxygen species generated by dithiothreitol and iron. J Biol Chem 260:15394-15397.

59. Kim, K., I.H. Kim, K.Y. Lee, S.G. Rhee, and E.R. Stadtman. 1988. The isolation and purification of a specific "protector" protein which inhibits enzyme inactivation by a thiol/Fe(III)/02 mixed-function oxidation system. J Biol Chem 263:4704-4711.

60. Kowaltowski, A.J., L.E. Netto, and A.E. Vercesi. 1998. The thiol-specific antioxidant enzyme prevents mitochondrial permeability transition. Evidence for the participation of reactive oxygen species in this mechanism. J Biol Chem 273:12766-12769.

61. Krieger-Brauer, H.I. and H. Kather. 1995. Antagonistic effects of different members of the fibroblast and platelet-derived growth factor families on adipose conversion and NADPH- dependent H202 generation in 3T3 LI-cells. Biochem J307 (Pt 2):549-556.

62. Krishna, N.S., M.L. Getchell, S.S. Tate, F.L. Margolis, and T.V. Getchell. 1992. Glutathione and gamma-glutamyl transpeptidase are differentially distributed in the olfactory mucosa of rats. Cell Tissue Res 270:475-484.

63. Land, L.J. 1973. Localized projection of olfactory nerves to rabbit olfactory bulb. Brain Res 63:153-166.

64. Land, L.J. and G.M. Shepherd. 1974. Autoradiographic analysis of olfactory receptor projections in the rabbit. Brain Res 70:506-510.

65. Lee, M.J. and D. Dinsdale. 1994. Immunolocalization of glutathione S-transferase isoenzymes in bronchiolar epithelium of rats and mice. Am J Physiol. 267:L766-L774

66. Lewis, M.J. and H.R. Pelham. 1990. A human homologue of the yeast HDEL receptor. Nature 348:162-163.

67. Lim, Y.S., M.K. Cha, C.H. Yun, H.K. Kim, K. Kim, and I.H. Kim. 1994. Purification and characterization of thiol-specific antioxidant protein from human red blood cell: a new type of antioxidant protein. Biochem Biophys Res Commun 199:199-206.

68. L0, Y.Y. and T.F. Cruz. 1995. Involvement of reactive oxygen species in cytokine and growth factor induction of c-fos expression in chondrocytes. J Biol Chem 270:11727-11730.

69. Lodish, H.F. 1988. Transport of secretory and membrane glycoproteins from the rough endoplasmic reticulum to the Golgi. A rate-limiting step in protein maturation and secretion. J Biol Chem 263:2107-2110.

70. Lopez-Vidriero, M.T. 1989. Mucus as a natural barrier. Respiration 55 Suppl 1:28-32.

71. Malinin, N.L., M.P. Boldin, A.V. Kovalenko, and D. Wallach. 1997. MAP3K-related kinase involved in NF-kappaB induction by TNF, CD95 and IL-1. Nature 385:540-544.

72. Mango, G.W., C.J. Johnston, S.D. Reynolds, J.N. Finkelstein, C.G. Plopper, and B.R. Stripp. 1998. Clara cell secretory protein deficiency increases oxidant stress response in conducting airways. Am J Physiol. 275:L348-L356

73. Margalit, T. and D. Lancet. 1993. Expression of olfactory receptor and transduction genes during rat development. Brain Res Dev.Brain Res 73:7-16.

74. Mayer, R.J., S.M. Russell, C.J. Wilde, R. Burgess, and P.A. Sinnett-Smith. 1982. Protein synthesis and degradation during development. Crit.Rev.Food Sci Nutr. 16:149-163.

75. Mellert, T.K., M.L. Getchell, L. Sparks, and T.V. Getchell. 1992. Characterization of the immune barrier in human olfactory mucosa. Otolaryngol Head.Neck Surg. 106:181-188.

76. Miyamoto, S., M. Maki, M.J. Schmitt, M. Hatanaka, and I.M. Verma. 1994. Tumor necrosis factor alpha-induced phosphorylation of I kappa B alpha is a signal for its degradation but not dissociation from NF-kappa B. Proc Natl Acad Sci USA 91:12740-12744.

77. Mosmann, T. 1983. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods 65:5563.

78. Moulton, D.G. and L.M. Beidler. 1967. Structure and function in the peripheral olfactory system. Physiol.Rev. 47:1-52.

79. Mozell, M.M. 1970. Evidence for a chromatographic model of olfaction. J Gen.Physiol. 56:46-63.

80. Munro, S. and H.R. Pelham. 1987. A C-terminal signal prevents secretion of luminal ER proteins. Cell 48:899-907.

81. Munz, B., S. Frank, G. Hubner, E. Olsen, and S. Werner. 1997. A novel type of glutathione peroxidase: expression and regulation during wound repair. Biochem J326 ( Pt 2):579-585.

82. Nakamura, H., K. Nakamura, and J. Yodoi. 1997. Redox regulation of cellular activation. Annu.Rev.Immunol 15:351-369.

83. Narula, N., I. McMorrow, G. Plopper, J. Doherty, K.S. Matlin, B. Burke, and J.L. Stow. 1992. Identification of a 200-kD, brefeldin-sensitive protein on Golgi membranes. J Cell Biol 117:27-38.

84. Novoselov, V.I., A.G. Bragin, J.V. Novikov, V.I. Nesterov, and E.E. Fesenko. 1983. Transplants of olfactory mucosa in the anterior chamber of the eye: morphology, electrophysiology and biochemistry. Dev.Neurosci. 6:317-324.

85. Novoselov, V.I., I.V. Peshenko, V.A. Evdokimov, J.V. Nikolaev, E.A. Matveeva, and E.E. Fesenko. 1996. 45-kDa GTP-binding protein from rat olfactory epithelium: purification, characterization and localization. Chem Senses 21:181-188.

86. Pahl, H.L. and P.A. Baeuerle. 1994. Oxygen and the control of gene expression. Bioessays 16:497-502.

87. Pelham, H.R. 1989. The selectivity of secretion: protein sorting in the endoplasmic reticulum. Biochem Soc. Trans. 17:795-802.

88. Pelham, H.R. 1990. The retention signal for soluble proteins of the endoplasmic reticulum. Trends.Biochem Sci 15:483-486.

89. Peshenko, I.V., V.I. Novoselov, V.A. Evdokimov, Y. Nikolaev, T.M. Shuvaeva, V.M. Lipkin, and E.E. Fesenko. 1996. Novel 28-kDa secretory protein from rat olfactory epithelium. FEBS Lett 381:12-14.

90. Pfeffer, S.R. and J.E. Rothman. 1987. Biosynthetic protein transport and sorting by the endoplasmic reticulum and Golgi. Annu.Rev.Biochem 56:829-852.

91. Power, J.H. and T.E. Nicholas. 1999. Immunohistochemical localization and characterization of a rat Clara cell 26-kDa protein (CC26) with similarities to glutathione peroxidase and phospholipase A2 In Process Citation. Exp.Lung Res 25:379-392.

92. Rees, T.S. 1965. Olfactory cilia in the frog. J Cell Biol 25:209-230.

93. Ressler, K.J., S.L. Sullivan, and L.B. Buck. 1993. A zonal organization of odorant receptor gene expression in the olfactory epithelium. Cell 73:597-609.

94. Ressler, K.J., S.L. Sullivan, and L.B. Buck. 1994. Information coding in the olfactory system: evidence for a stereotyped and highly organized epitope map in the olfactory bulb. Cell 79:1245-1255.

95. Rhein, L.D. and R.H. Cagan. 1980. Biochemical studies of olfaction: isolation, characterization, and odorant binding activity of cilia from rainbow trout olfactory rosettes. Proc Natl Acad Sci USA 77:4412-4416.

96. Sandstrom, P.A., P.W. Tebbey, S. Van Cleave, and T.M. Buttke. 1994. Lipid hydroperoxides induce apoptosis in T cells displaying a HIV- associated glutathione peroxidase deficiency. J Biol Chem 269:798-801.

97. Sandstrom, P.A., J. Murray, T.M. Folks, and A.M. Diamond. 1998. Antioxidant defenses influence HIV-1 replication and associated cytopathic effects. Free Radio Biol Med 24:1485-1491.

98. Sappey, C., S. Legrand-Poels, M. Best-Belpomme, A. Favier, B. Rentier, and J. Piette. 1994. Stimulation of glutathione peroxidase activity decreases HIV type 1 activation after oxidative stress. AIDS Res Hum.Retroviruses 10:1451-1461.

99. Sauri, H., L. Butterfield, A. Kim, and H. Shau. 1995. Antioxidant function of recombinant human natural killer enhancing factor. Biochem Biophys Res Commun 208:964-969.

100. Scheele, G., B. Dobberstein, and G. Blobel. 1978. Transfer of proteins across membranes, Biosynthesis in vitro of pretrypsinogen and trypsinogen by cell fractions of canine pancreas. Eur J Biochem 82:593-599.

101. Scheele, G. and A. Tartakoff. 1985. Exit of nonglycosylated secretory proteins from the rough endoplasmic reticulum is asynchronous in the exocrine pancreas. J Biol Chem 260:926-931.

102. Schreck, R., P. Rieber, and P.A. Baeuerle. 1991. Reactive oxygen intermediates as apparently widely used messengers in the activation of the NF-kappa B transcription factor and HIV-1. EMBO J10:2247-2258.

103. Schroer, T.A. and M.P. Sheetz. 1991. Two activators of microtubule-based vesicle transport. J Cell Biol 115:1309-1318.

104. Shantha, T.R. and Y. Nakajima. 1970. Histological and histochemical studies on the rhesus monkey (Macaca mulatta) olfactory mucosa. Z Zellforsch. MikroskAnat. 103:291-319.

105. Singh, L. and K.W. Jones. 1984. The use of heparin as a simple cost-effective means of controlling background in nucleic acid hybridization procedures. Nucleic. Acids.Res 12:5627-5638.

106. Solovieva, O.V., D.I. Kakuev, S.V. Novoselov, and V.M. Lipkin. 1999. Functional expression and sellular distribution of the bovine retina guanilate cyclase GC-B. J.Neurochemistry 73:169A

107. Staal, F.J., M. Roederer, P.A. Raju, M.T. Anderson, S.W. Ela, and L.A. Herzenberg. 1993. Antioxidants inhibit stimulation of HIV transcription. AIDS Res Hum.Retroviruses 9:299-306.

108. Stancovski, I. and D. Baltimore. 1997. NF-kappaB activation: the I kappaB kinase revealed? Cell 91:299-302.

109. Streicher, S.L. and B. Tyler. 1980. Purification of glutamine synthetase from a variety of bacteria. JBacteriol 142:69-78.

110. Sundaresan, M., Z.X. Yu, V.J. Ferrans, K. Irani, and T. Finkel. 1995. Requirement for generation of H202 for platelet-derived growth factor signal transduction. Science 270:296-299.

111. Sundberg, L. and J. Porath. 1974. Preparation of adsorbents for biospecific affinity chromatography. Attachment of group-containing ligands to insoluble polymers by means of bifuctional oxiranes. J Chromatogr. 90:87-98.

112. Thannickal, V.J. and B.L. Fanburg. 1995. Activation of an H202-generating NADH oxidase in human lung fibroblasts by transforming growth factor beta 1. J Biol Chem 270:30334-30338.

113. Tooze, J. 1991. Secretory granule formation. The morphologist's view. Cell Biophys 19:117-130.

114. Ullrich, A. and J. Schlessinger. 1990. Signal transduction by receptors with tyrosine kinase activity. Cell 61:203-212.

115. Verma, I.M., J.K. Stevenson, E.M. Schwarz, D. Van Antwerp, and S. Miyamoto. 1995. Rel/NF-kappa B/I kappa B family: intimate tales of association and dissociation. Genes Dev. 9:2723-2735.

116. Verma, I.M. and J. Stevenson. 1997. IkappaB kinase: beginning, not the end. Proc Natl Acad Sci USA 94:11758-11760.

117. MO.Watabe, S., H. Hasegawa, K. Takimoto, Y. Yamamoto, and S.Y. Takahashi. 1995. Possible function of SP-22, a substrate of mitochondrial ATP-dependent protease, as a radical scavenger. Biochem Biophys Res Commun 213:1010-1016.

118. Wen, S.T. and R.A. Van Etten. 1997. The PAG gene product, a stress-induced protein with antioxidant properties, is an Abl SH3-binding protein and a physiological inhibitor of c-Abl tyrosine kinase activity. Genes Dev. 11:24562467.

119. Wysocki, L.J. and V.L. Sato. 1978. "Panning" for lymphocytes: a method for cell selection. Proc Natl Acad Sci USA 75:2844-2848.

120. Yao, X.L., S.J. Levine, M.J. Cowan, C. Logun, and J.H. Shelhamer. 1998. Tumor necrosis factor-alpha stimulates human Clara cell secretory protein production by human airway epithelial cells. Am JRespir. Cell Mol Biol 19:629635.

121. Zhang, P., B. Liu, S.W. Kang, M.S. Seo, S.G. Rhee, and L.M. Obeid. 1997. Thioredoxin peroxidase is a novel inhibitor of apoptosis with a mechanism distinct from that of Bcl-2. J Biol Chem 272:30615-30618.

122. Zhuo, S., J.C. Clemens, R.L. Stone, and J.E. Dixon. 1994. Mutational analysis of a Ser/Thr phosphatase. Identification of residues important in phosphoesterase substrate binding and catalysis. J Biol Chem 269:26234-26238.92

123. Zor, U., E. Ferber, P. Gergely, K. Szucs, V. Dombradi, and R. Goldman. 1993. Reactive oxygen species mediate phorbol ester-regulated tyrosine phosphorylation and phospholipase A2 activation: potentiation by vanadate. BiochemJ295 ( Pt 3):879-888.