Экспрессия регуляторных генов Fgf2, Pax6, Six3, Otx2, Pitx1 и Pitx2 в эпиморфной регенерации сетчатки глаза у тритона Pleurodeles waltl тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Авдонин, Петр Павлович

• Авдонин, Петр Павлович
• кандидат наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат наук Авдонин, Петр Павлович

Оглавление

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение и развитие сетчатк№глаза позвоночных

1.2. Потенции к регенерации сетчатки глаза у позвоночных животных

1.3. Исследования цитологических аспектов регенерации сетчатки глаза взрослого тритона (11гос1е1а)

1.3.1. Клеточные источники регенерации сетчатки тритона

1.3.2. Морфологические стадии регенерации сетчатки глаза тритона

1.3.3. Пролиферативная активность клеток РПЭ и регенерата сетчатки глаза тритона

1.3.4. Изучение изменений цитоскелета трансдифференцирующихся клеток в процессе регенерации сетчатки глаза у тритонов

1.4. Молекулярно-генетические механизмы развития и регенерации сетчатки глаза позвоночных

1.4.1. Транскрипционные факторы и их роль в контроле формирования глаза28

1.4.2. Сигнальные белки и их роль в контроле формирования пигментного эпителия и сетчатки

1.4.3. Взаимодействия и роль регуляторных генов «глазного поля» (транскрипционных факторов и сигнальных белков), контролирующих специализацию клеток пигментного эпителия и сетчатки на ранних стадиях эмбрионального развития

1.4.4. Взаимодействия регуляторных факторов (гомеобокссодержащих транскрипционных факторов, ЬНЬН-доменных факторов, сигнальных белков) в регуляции дифференцировки клеток сетчатки

1.4.5. Исследования молекулярно-генетических механизмов трансдифференцировки клеток пигментного эпителия сетчатки на моделях развития глаза позвоночных

1.4.6. Молекулярно-генетические аспекты трансдифференцировки клеток

пигментного эпителия при регенерации сетчатки у взрослых тритонов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2. Г. Животные и операции

2.2'. Приготовление гистологических препаратов

2.3. Фиксация тканей глаза и приготовление криосрезов

2.4. Иммуногистохимические исследования

2.5. Вестерн-блот гибридизация

2.6. Выделение тотальной РНК

2.7. Очистка РНК

2.8. Синтез первой цепи к ДНК

2.9. Конструирование праймеров

2.10. ПЦР и анализ нуклеотидных последовательностей

2.11. Агарозный электрофорез

2.12. ПЦР в реальном времени

2.13. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Идентификация гомологов генов Fgß и Pitxl в геноме тритона Pleurodeles waltl

3.1.1. Идентификация гомолога гена Fgß в геноме тритона Pleurodeles wältig

3.1.2. Идентификация гомолога гена Pitxl в геноме тритона Pleurodeles waltl^>5

3.2. Сравнительный анализ экспрессии регуляторных генов Fgß, Рахб, Six3, Otx2 и Pitxl в интактной и регенерирующей сетчатке

3.3. Количественный анализ уровня экспрессии генов Fgß, Рахб и Otx2 в ходе трансдифференцировки клеток пигментного эпителия глаза тритона

3.3.1. Количественный анализ уровня экспрессии гена Fgß в ходе трансдифференцировки клеток пигментного эпителия глаза тритона

3.3.2. Количественный анализ уровня экспрессии гена Рахб в ходе трансдифференцировки клеток пигментного эпителия глаза тритона

3.3.3. Количественный анализ уровня экспрессии гена Otx2 в ходе трансдифференцировки клеток пигментного эпителия глаза тритона

3.4. Изучение распределения сигнального белка Fgf2, рецептора Fgfr и транскрипционных факторов Рахб, Otx2 и Pitx2 в интактных тканях глаза тритона

3.4.1. Локализация белков Рахб и Otx2 в интактных тканях глаза тритона

3.4.2. Локализация белка Fgf2 и рецепторов Fgfr в интактных тканях глаза

тритона

3.4.3. Локализация белка Ркх2 в интактных тканях глаза тритона

3.5. Выявление транскрипционных факторов Рахб, 01x2 и РИх1 в пигментированных тканях неоперированного глаза тритона

3.6. Изучение распределения сигнального, белка Fgf2, рецептора Fgfr и транскрипционных факторов Рахб, СКх2, Ркх2 в тканях глаза тритона на 20 сут регенерации сетчатки

3.6.1. Локализация белков Рахб и (Хх2 в тканях глаза тритона на 20 сутки регенерации сетчатки

3.6.2. Локализация белков Fgf2 и Fgfr2 в тканях глаза тритона на 20 сутки регенерации сетчатки

3.6.3. Локализация белка Ркх2 в тканях глаза тритона на 20 сутки регенерации

3.7. Распределение сигнального белка Fgf2, рецептора Fgfi• и транскрипционных факторов Рахб, СИх2 и Р11х2 в тканях глаза тритона на 50 сутки регенерации сетчатки

3.7.1. Локализация белков Рахб и (Хх2 в тканях глаза тритона на 50 сутки регенерации сетчатки

3.7.2. Локализация белков Fgf и Fgfr в тканях глаза тритона на 50 сутки регенерации сетчатки

3.7.3. Локализация белка Ркх2 в тканях глаза тритона на 50 сутки

регенерации сетчатки

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Экспрессия регуляторных генов Рахб, ЗгхЗ, Otx2, РИх1 и РИх2 в ходе трансдифференцировки клеток пигментного эпителия при регенерации сетчатки у тритона

4.2. Экспрессия регуляторных генов /<£/2, Рахб, 57x3, 01x2, РИх1 и РИх2 в клетках интактной сетчатки и в регенерате сетчатки на стадии

дифференцировки

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений

ВКМ - внеклеточный матрикс

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

НФ-200 - Нейрофиламент

РНК - РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА

РПЭ - ретинальный пигментный эпителий

Трис - трисгидроксиметиламинометан

ТХУ - трихлоруксусная кислота

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

Ash - achaete-scute homolog

Bmp - bone morphogenic protein

BSA - Bovine serum albumin

Chx - ceh-10 homeobox

Cntf - ciliary neurotrophic factor

Cralbp - Cellular retinaldehyde binding protein

Crbp — cellular retinol binding protein

Crx - cone-rod homeobox

СТАВ - cetyltrimethylammonium bromide

Ef - elongation factor

Egf - endothelial growth factor

Erk - extracellular regulated MAP kinase

Fgf - fibroblast growth factor

Fgfr - fibroblast growth factor receptor

GAP - growth associated protein

Gapdh - glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

Gel - ganglion cells layer

Gdnf - glial cell derived neurotrophic factor

GFAP - glial fibrillary acidic protein

Gli - GLI family zinc finger

Hes - hairy and enhancer of split

Hhip - hedgehog interacting protein

Igf - insulin-like growth factor

INL - inner nuclear layer

Lhx - LIM homeobox

Lif - leukemia inhibitory factor

Mapk - mitogen activated protein kinase

Math - meprin-associated Traf homolog

Mek - MAP kinse-ERK kinase

Mitf - microphthalmia-associated transcription factor

Mmp - Matrix metalloproteinase

N-CAM - neural cell adhesion molecule

Ngn - neurogenin

Nrl - neural retina-specific leucine zipper

ONL - outer nuclear layer

Otx - Orthodenticle homeobox

Pax - Paired box

PBS - Phosphate buffered saline

Pdgf - platelet-derived growth factor

PI3K - phosphoinositide-3-kinase

Pitx - pituitary homeobox

PKC - protein kinase C

Prox - prospero homeobox

Ptc - patched

RA4 - Rheumatoid arthritis QTL

RIPA - Radio Immuno Precipitation Assay buffer

Rpe65 - retinal pigment epithelium-specific protein 65kDa

Rx - retinal homeobox

Shh - sonic hedgehog homolog

Six - sine oculis homeobox

Smad - mothers against decapentaplegic

SDS - sodium lauryl sulfate

TAE - Tris-acetate-EDTA

TGB - Tris glycine buffer

Tgf - transforming growth factor

Tgfr - transforming growth factor receptor

Trp - tyrosinase related protein

Tyr - tyrosinase

Vsx - Visual system homeobox

Wnt - wingless-type MMTV integration site family member

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия регуляторных генов Fgf2, Pax6, Six3, Otx2, Pitx1 и Pitx2 в эпиморфной регенерации сетчатки глаза у тритона Pleurodeles waltl»

Введение

Изучение молекулярно-генетических механизмов регенерации представляет собой одну из фундаментальных научных проблем биологии развития. Одним из наиболее эффективных путей изучения механизмов регенерации является идентификация и анализ экспрессии генов, контролирующих процессы восстановления органов и тканей у животных с ярко выраженными регенерационными потенциями. Генетические исследования регенерации стали возможными в результате внедрения в исследования восстановительных процессов методов молекулярной биологии. Данное направление исследований получило развитие с использованием разных объектов и моделей регенерации. Известно, что регенерационные потенции особенно выражены у хвостатых амфибий, у которых в совершенной степени регенерируют конечность, хвост, хрусталик и сетчатка (Миташов, 1968; Карлсон, 1986; Stocum, 1995; Del Rio-Tsonis et al., 1995; Brockes, 1997; Carlson, 1997; Eguchi et al., 1982; Mizuno et al, 1999, 2002; Hayashi et al., 2006).

Одной из наиболее ярких моделей регенерации является регенерация сетчатки глаза у взрослых тритонов (Urodela). Эти животные на протяжении всей жизни способны восстанавливать функционально и морфологически полноценную сетчатку глаза, даже в случае ее полного удаления или перерезки зрительного нерва и кровеносных сосудов. Большая часть сетчатки глаза после удаления восстанавливается в результате трансдифференцировки клеток ретинального пигментного эпителия (РПЭ) (Stone, 1950; Hasegawa, 1958; Миташов, 1968). После удаления сетчатки, в центральной части задней стенки глаза клетки РПЭ трансдифференцируются, формируя зачаток сетчатки, состоящий из нейробластов. В свою очередь, нейробласты зачатка сетчатки пролиферируют, а затем дифференцируются, образуя все типы клеток сетчатки. На периферии глаза в восстановлении сетчатки принимают участие малодифференцированные клетки ростовой зоны (pars ciliaris — ora serrata), которые в онтогенезе обеспечивают рост сетчатки у тритонов.

s

Выбор'сетчатки глаза взрослого тритона в качестве модели для1 изучения молекулярно-генетических механизмов регенерации не является* случайным. В нашей лаборатории за многие годы накоплена обширная информация о клеточных источниках регенерации сетчатки глаза, клеточных механизмах этого процесса (Миташов, 1968, 1996); пролиферативной активности*клеток-источников и клеток регенерирующей сетчатки (Миташов, 1969 а, б, 1980; Григорян, Миташов, 1979; Stroeva, Mitashov, 1983). Процесс трансдифференцировки при регенерации сетчатки у тритонов подробно описан и с точки зрения изменений в синтезе белков цитоскелета и компонентов внеклеточного матрикса (Григорян, 1995). Все это легло в основу представлений о цитологических механизмах процесса трансдифференцировки и регенерации сетчатки в целом и послужило основой для перехода к изучению ее молекулярных основ (Mitashov, 1997).

Основное направление в исследовании регенерации сетчатки глаза тритона связано с идентификацией, анализом экспрессии и взаимодействий генов, которые могут запускать и контролировать трансдифференцировку клеток РПЭ, а также пролиферацию и дифференцировку нейробластов зачатка сетчатки, что в итоге приводит к её восстановлению de novo. Очевидно, что в процессе регенерации любой ткани или органа экспрессируется сотни, а, возможно, и тысячи генов (Ahmad et al., 2004), что делает выявление генов, играющих основополагающую роль в регенерации сетчатки глаза процессом трудоёмким и сложным. Для поиска генов -потенциальных регуляторов регенерации сетчатки глаза тритона активно применяется стратегия, которая заключается в идентификации и изучении экспрессии в процессе регенерации сетчатки регуляторных генов, контролирующих процессы эмбрионального развития сетчатки. Применение данной стратегии в исследованиях молекулярно-генетических механизмов регенерации сетчатки глаза основывается на сходстве процессов клеточной дифференцировки, лежащих в основе развития и регенерации сетчатки с момента образования транзитной нейробластической популяции клеток.

Сходство этих процессов на клеточном и-ультраклеточном1 уровне позволяет предположить, что в основе развития^ и регенерации сетчатки глаза лежат сходные молекулярно-генетические механизмы. Однако, если в; ходе развития клеточным источником- будущей сетчатки является' внутренний, листок (слой нейробластов) глазного бокала, то при регенерации» сетчатки это слой РПЭ, клетки которого в результате трансдифференцировки образуют слой нейробластов, последующая пролиферация и дифференцировка которых приводит к восстановлению сетчатки (Stroeva, Mitashov, 1983; Миташов, 1996). Таким образом, процесс трансдифференцировки (смены клеточного фенотипа) является ключевым этапом, отличающим регенерацию сетчатки от ее развития. Несмотря на существенные отличия ранних этапов регенерации и развития сетчатки, нельзя исключить участия в регуляции процесса трансдифференцировки клеток РПЭ генов, контролирующих в эмбриогенезе образование внутреннего и наружного листков глазного бокала и последующую дифференцировку клеток сетчатки и РПЭ.

У многих позвоночных потенции к трансдифференцировке клеток РПЭ глаза проявляются в раннем эмбриогенезе и утрачиваются к моменту рождения. Подтверждением сходства молекулярных механизмов контроля развития и регенерации сетчатки могут служить следующие данные. К настоящему времени стало известно, что процессы пролиферации и дифференцировки клеток РПЭ и сетчатки в ходе эмбриогенеза контролируются эволюционно-консервативной сетью основного каскада транскрипционных факторов Рахб, Six3, Rx, Chx, Otx2, Mitf и сигнальных белков Fgf2, Tgfp2, Shh, Wnt, Bmp4 (Martinez-Morales et al., 2004; Sigulinsky et al., 2008; Ohsawa, Kageyama, 2008).

При регенерации сетчатки глаза у хвостатых амфибий выявлена экспрессия регуляторных генов Рахб, Proxl, Six3, Otx2, Mitf, Rx, ChxlO, Notch-1, Musashi-1, Fgf2, Shh, Wnt, Tgfb, что является подтверждением предположения о сходстве молекулярных механизмов, контролирующих

процессы.развития!и регенерации сетчатки у Urodela (Маркитантова и др., 2004; Spence et al, 2007; Susaki, Chiba, 2007; Nakamura, Chiba; 2007; Chiba, Mitashov, 2008; Kubo, Nakagawa, 2008; Sakami et al, 2008). В этих работах были изучены некоторые особенности экспрессии перечисленных выше генов в регенерирующей сетчатке глаза. Однако, приводимые в современной литературе данные об экспрессии регуляторных генов в регенерации сетчатки у разных видов взрослых тритонов, немногочисленны, не систематичны и имеют разрозненный характер.

В настоящей работе мы сосредоточили внимание на детальном сравнительном изучении экспрессии регуляторных генов, принадлежащих к семействам Fgf, Pax, Six, Otx, Pitx, в ходе регенерации сетчатки глаза у взрослых тритонов Pleurodeles waltl. Среди этих генов наибольшее значение придается генам Fgf2, Рахб, Six3, Otx2. В литературе приводятся данные, позволяющие предполагать, что эти гены могут играть основополагающую роль в регуляции трансдифференцировки клеток РПЭ тритона. На моделях in vitro продемонстрирована способность сигнального фактора Fgf2 и транскрипционного фактора Рахб к индукции трансдифференцировки клеток РПЭ в направлении ретинальных клеточных типов (Pittack et al, 1991; Azuma et al., 2005). Трансдифференцировка клеток РПЭ может быть вызвана выключением экспрессии генов Mitf и Otx2, продукты которых контролируют меланогенез (Mochii et al, 1998; Martinez-Morales et al, 2001/ Показано, что сигнальный фактор Fgf2 может запускать и стимулировать экспрессию гена Рахб, а транскрипционный фактор Рахб, в свою очередь, подавлять экспрессию гена Mitf, что приводит к остановке синтеза меланина в клетках РПЭ, и активировать экспрессию гена Six3 (Planque et al, 2001; Wargelius et al, 2003; Spence et al, 2007). Тем не менее, убедительных данных об участии этих генов в формировании генной сети, запускающей трансдифференцировку клеток РПЭ у тритона, в литературе пока нет. Мы предполагаем, что в процесс регуляции трансдифференцировки клеток РПЭ и нейрогенеза сетчатки могут быть вовлечены транскрипционные факторы

семейства Pitx. Из литературы известно, что представители этого семейства (Pitxl, Pitx2, Pitx3) принимают участие в контроле формирования глаза (Gage et al., 2005), однако данные об экспрессии генов семейства Pitx в процессе регенерации сетчатки в литературе отсутствуют. В связи с этим, изучение роли и места генов, принадлежащих к семействам Fgf, Pax, Six, Otx, Pitx, в системе контроля трансдифференцировки РПЭ и нейрогенеза сетчатки при ее регенерации, представляет большой интерес.

Актуальность и практическая значимость наших исследований обусловлена тем, что знание молекулярных механизмов эпиморфной регенерации сетчатки у хвостатых амфибий может помочь ответить на вопрос, почему осуществление регенерации этой крайне важной ткани глаза оказывается невозможным у высших позвоночных. В молекулярных исследованиях регенерации сетчатки глаза тритона, по-видимому, лежит ответ и на другой вопрос, а именно, почему у млекопитающих и человека, в отличие от Urodela, при некоторых заболеваниях сетчатки (отслойка сетчатки, пролиферативная ретинопатия) клетки РПЭ трансдифференцируются исключительно в клетки макрофагального и фибробластоподобного фенотипов — источников паталогий глаза. Полученная информация о молекулярно-генетических событиях в ходе эпиморфной регенерации сетчатки глаза тритона в совокупности с данными, накопленными при изучении развития и патологии сетчатки, в конечном итоге, должна способствовать поиску адекватных, научно-обоснованных решений для практического применения, с целью стимуляции регенерации и устранения развития патологии сетчатки глаза позвоночных и человека.

Цель и задачи исследования

Целью работы являлось исследование молекулярно-генетических механизмов регуляции регенерации сетчатки тритона Р1еигос1е1е5 \valtl.

В работе проведен сравнительный анализ экспрессии исследуемых регуляторных генов в регенератах сетчатки в ходе ее восстановления после удаления, а также в ретинальном пигментном эпителии и сетчатке глаза в норме. Результаты работы позволили не только уточнить данные, ранее полученные в нашей лаборатории и в мире, но и существенно пополнить сведения о молекулярно-генетических механизмах эпиморфной регенерации сетчатки у низших позвоночных.

Задачи исследования:

1. Создать библиотеки кДНК, комплементарные мРНК из интактных тканей глаза и тканей глаза на последовательных стадиях регенерации сетчатки тритона Р. \valtl.

2. Идентифицировать в геноме тритона Р. \valtl регуляторные гены и РНх1.

3. Провести сравнительный анализ экспрессии регуляторных генов Рахб, ЯгхЗ, ОЬс, РИх1 в интактных тканях глаза и тканях глаза на последовательных стадиях регенерации сетчатки тритона Р. \valtl методами ОТ-ПЦР и ПЦР в реальном времени.

4. Провести сравнительный анализ локализации белков Fgf2, Fgfr, Рахб, (Хх2, Ркх2 в интактных тканях глаза тритона Р. \valtl и при регенерации сетчатки методами иммунохимии.

ГЛАВА 1. Обзор литературы«

1.1. Строение и развитие сетчатки глаза позвоночных

Сетчатка глаза-позвоночных животных представлена тремя основными ядерными и двумя сетчатыми слоями. Наружный ядерный слой, расположенный склерально, сформирован телами фоторецепторов — палочек и колбочек. Внутренний ядерный слой представлен горизонтальными клетками, биполярами и амакриновыми клетками. Во внутреннем ядерном слое сетчатки также расположены клетки Мюллеровской глии, отростки которых тянутся к наружной и внутренней ограничивающим мембранам. Отростки фоторецепторных клеток образуют синаптические связи с горизонтальными и биполярными клетками внутреннего ядерного слоя, формируя наружный сетчатый слой. Внутренний сетчатый слой сформирован синапсами биполяров и амакриновых клеток внутреннего ядерного слоя и ганглиозных клеток наиболее витреально расположенного ядерного слоя. Таким образом, биполярные клетки опосредуют связи фоторецепторов с ганглиозными клетками, а горизонтальные и амакриновые клетки, являются интернейронами, которые опосредуют связи между типами клеток, расположенных в разных ядерных слоях сетчатки, то есть между фоторецепторами, биполярами и ганглиозными клетками. В свою очередь, отростки ганглиозных клеток формируют волокна зрительного нерва. Со стороны склеры к сетчатке прилегает пигментированный эпителиальный слой, представленный клетками кубической формы. В периферической области сетчатки позвоночных локализуется небольшое число малодифференцированных клеток ростовой зоны глаза {ora serrata), за счет которых происходит пополнение популяции клеток сетчатки в ходе ее развития, а у некоторых видов и во взрослом состоянии (Klassen et ai, 2004). В составе сетчатки взрослых тритонов различают те же слои. В направлении от базальной к апикальной поверхности сетчатки это слой ганглиозных

клеток, внутренний сетчатый слой, внутренний ядерный слой, наружный-сетчатый слой, наружный ядерный слой, фоторецепторный слой палочек, колбочек и двойных колбочек. Отростки фоторецепторов контактируют с однорядным слоем интенсивно пигментированных эпителиальных клеток, обычно называемым ретинальным пигментным эпителием (РПЭ).

Сетчатка глаза позвоночных, являясь производной нервной системы, в эмбриогенезе формируется рано. Клеточные события, происходящие на ранних стадиях эмбрионального развития сетчатки, также как и ее дефинитивное строение, проявляют черты сходства у разных позвоночных животных. В процессе развития глаза сетчатка и прилегающий к ней РПЭ, возникают в результате инвагинации глазного пузыря, являющегося латеральным выпячиванием нервной трубки, что приводит к образованию глазной чаши. Клетки наружного слоя глазной чаши (проксимальная часть глазного пузыря) продуцируют пигмент и в итоге образуют пигментированный слой, будущий РПЭ. Число клеток внутреннего слоя глазной чаши (дистальная часть глазного пузыря) быстро увеличивается. Эти клетки, называемые нейробластами, дают начало всем типам клеток, которые в совокупности составляют нейральную сетчатку: многочисленным светочувствительным нейронам (фоторецепторам), клеткам глии, промежуточным нейронам, ганглиозным клеткам. Выявлены общие закономерности в дифференцировке клеток сетчатки в эмбриогенезе разных позвоночных животных: первыми появляются ганглиозные клетки, затем горизонтальные клетки и колбочки фоторецепторов, позже возникают Мюллеровская глия и биполяры, а последними, как правило, дифференцируются палочки (Das et al., 2003). Самый длинный период дифференцировки обнаружен у всех позвоночных для биполяров сетчатки (Prada et al., 1991). Следует отметить, что периоды дифференцировки разных типов клеток сетчатки могут перекрываться, а интервалы времени между появлением того или иного типа клеток сетчатки различаются у разных видов животных (Kahn, 1974; Holt et al., 1988). Кроме того, у некоторых

позвоночных, например, у мышей-и крыс, дифференцировка клеток сетчатки продолжается1 и- в постнатальный период (Cepko et al, 1996). Получены данные о незавершенности процесса дифференцировки биполяров, локализованных во внутреннем ядерном слое сетчатки взрослых тритонов, и рыб (Григорян, 2003; Raymond et al., 2006).

1.2. Потенции к регенерации сетчатки глаза у позвоночных животных

Коротко отметим клеточные источники регенерации сетчатки глаза позвоночных. Способностью к наиболее полной регенерации сетчатки обладают взрослые тритоны (Urodela). Основным клеточным источником для восстановления сетчатки у тритона являются дифференцированные клетки РПЭ. У высших позвоночных способность восстанавливать разные типы нейронов сетчатки в результате трансдифференцировки клеток РПЭ проявляется только на ранних стадиях развития и утрачивается у взрослых животных. В восстановление сетчатки тритонов также вносят вклад малодифференцированные клетки, локализованные в периферической области глаза, которые являются клеточным источником роста глаза в течение всей жизни у тритонов и рыб. У высших позвоночных в периферической цилиарной области глаза, среди пигментированных клеток, обнаружены малодифференцированные клетки, которые in vitro способны продуцировать нейроны разных типов (биполяры, фоторецепторы) а также глиальные клетки, в зависимости от условий культивирования (Tropepe et al., 2000; Ahmad et al., 2000). С момента обнаружения малодифференцированных клеток цилиарной области глаза, активно изучаются их потенции к дедифференцировке и дифференцировке в различные типы нейронов, и продолжаются дискуссии относительно их принадлежности к стволовым клеткам. Результаты недавнего исследования свидетельствуют в пользу точки зрения, согласно которой клетки цилиарного пигментного эпителия представляют собой популяцию клеток-предшественников. Эти клетки в

условиях- in vitro способны пролиферировать, самообновляться и экспрессировать некоторые нейральные маркеры, сохраняя1 при- этом свойства, характерные для дифференцированных клеток пигментного эпителия (Cicero eí а/., 2009).

В сетчатке глаза позвоночных животных обнаружены. клетки, которые рассматривают в качестве внутреннего резерва для восстановления нейронов разного типа. Это клетки глии Мюллера, проявление регенерационного потенциала которых зависит от способа повреждения сетчатки, условий культивирования или генетической модификации, в результате которой активируется специфическая нейральная программа дифференцировки (Fischer et al., 2002; Osakada et al., 2007; Rehak et al., 2009). Помимо клеток глии Мюллера, внутренним клеточным источником для регенерации фоторецепторов сетчатки позвоночных являются не завершившие дифференцировку биполяры. Показано участие этих биполяро-подобных клеток в восстановлении фоторецепторов при частичном повреждении сетчатки у тритонов и рыб (Григорян, 2003; Raymond et al., 2006).

1.3. Исследования цитологических аспектов регенерации сетчатки глаза взрослого тритона (Urodela)

1.3.1. Клеточные источники регенерации сетчатки тритона

Регенерация сетчатки тритона осуществляется главным образом за счёт трансдифференцировки клеток РПЭ. Естественным маркером, позволившим проследить за постепенным преобразованием клеток РПЭ в нейроэпителий на морфологическом уровне, явился цитоплазматический компонент -меланиновый пигмент. После удаления сетчатки, клетки РПЭ постепенно депигментируются, пролиферируют и образуют зачаток нейроэпителия. Образующийся из РПЭ зачаток нейроэпителия на стадии 2-3-х рядов клеток, содержит достаточное количество пигмента, что позволяет на последовательных переходных стадиях регенерации проследить за

постепенным* перемещением клеток из слоя РПЭ1 в сторону полости глаза, заполненной стекловидным телом. На этой стадии хорошо видна граница между еще частично пигментированным нейроэпителием центральной^ части дна глаза, образующимся из клеток РПЭ, и нейроэпителием, образующимся из ростовой (цилиарной) области, клетки которого не пигментированы. Таким образом, малодифференцированные клетки цилиарной области также участвуют в процессе регенерации сетчатки, однако при удалении цилиарной области серьезных нарушений в процессе регенерации не наблюдается и сетчатка полностью восстанавливается за счет клеток РПЭ (Миташов, 1976). Это указывает на то, что основной функцией малодифференцированных и, как следствие, мультипотентных клеток цилиарной области является пополнение клеток сетчатки в процессе роста глаза, хотя за счет этого источника также происходит пополнение клеток зачатка сетчатки при ее регенерации. Если малодифференцированные (мультипотентные) клетки цилиарной области глаза в ходе регенерации сетчатки пролиферируют и уходят в дифференцировку, то клетки РПЭ являются дифференцированными. Это позволило говорить об их трансдифференцировке — феномене смены клетками типа дифференцировки. Обоснование роли клеток РПЭ в регенерации сетчатки было получено в экспериментах с использованием маркера синтеза ДНК, 3Н-тимидина (Миташов, 1968; Reyer, 1971, 1977; Keefe, 1973; Stroeva, Mitashov, 1983), а также цитоплазматических маркеров— окрашивание моноклональными антителами, специфическими для РПЭ (Klein et al., 1990). Удачным цитоплазматическим маркером, позволившим ориентировочно определить число клеток РПЭ, формирующих зачаток нейроэпителия, оказался радиоактивно меченый специфический предшественник синтеза меланина 3Н-дигидроксифенилаланин (3Н-ДОФА) (Миташов, 1976, 1980; Григорян, Миташов, 1979). При изучении изменения синтеза специфического продукта клеток РПЭ — меланина - в процессе регенерации сетчатки была обнаружена существенная особенность. Оказалось, что при образовании зачатка нейроэпителия не происходит

ч

I

включения 3Н-ДОФА в те клетки РПЭ в центральной зоне дна глаза, которые являются источником его формирования, т.е. в-определенной1 субпопуляции клеток ингибируется продукция меланина - компонента, специфичного для клеток РПЭ. При этом на периферии глаза, где нейроэпителиальный зачаток сетчатки образуется-за счет пролиферации малодифференцированных клеток ростовой (цилиарной) зоны глаза, клетки РПЭ не принимают участия в регенерации сетчатки, а их ограниченная пролиферация направлена на восстановление популяции клеток РПЭ. Соотношение регенерационных и ростовых потенций тканей глаза взрослых тритонов, вероятно, определяется межклеточными взаимодействиями (Григорян, Миташов, 1979). На периферии глаза при этом происходит частичная депигментация клеток РПЭ и сразу же в ответ на потерю пигментных гранул в этих клетках ресинтезируется меланин, что регистрируется на радиоавтографах по включению 3Н-ДОФА в цитоплазму клеток. На основе данных радиоавтографических исследований по оценке числа клеток пигментного эпителия, включающих 3Н-ДОФА (не участвующих в формировании нейроэпителия) и не включающих 3Н-ДОФА (участвующих в формировании нейроэпителия) был определен процент клеток пигментного эпителия, участвующий в восстановлении сетчатки. Результаты показали, что приблизительно 60-70% клеток пигментного эпителия принимают участие в формировании зачатка нейроэпителия после удаления сетчатки, при сохранении в периферической области популяции клеток-предшественников, обеспечивающих рост сетчатки. При этом в разных экспериментальных моделях (удаление сетчатки, перерезка зрительного нерва и кровеносных сосудов) число клеток РПЭ, продуцирующих нейроэпителий, является разным, что помимо типа повреждения, определяется также числом клеток предшественников, сохранившихся после операции в ростовой области (Григорян, Миташов, 1979).

1.3:2. Морфологические стадии регенерации, сетчатки глаза тритона

В целом, процесс регенерации сетчатки подразделяется на два ключевых этапа. На первом этапе после удаления сетчатки клетки РПЭ начинают терять гранулы, с пигментом и: пролиферировать, формируя слой клеток зачатка сетчатки (Wachs, 1920; Stone, 1950; Hasegawa, 1958; Keefe, 1973; Миташов, 1968; Stroeva, Mitashov, 1983). В ходе второго этапа клетки зачатка сетчатки продолжают пролиферировать и, после накопления необходимой численности этой клеточной транзитной популяции, образуют все типы нейронов и глии, которые в итоге составят новую сетчатку. Появление клеточных типов регенерата сетчатки, подробно описано на клеточном, иммунохимическом, физиологическом уровнях (Negishi, 1992; Saito, 1994; Chiba et al, 1997; Cheon, 1998; Chiba, 1998; Cheon, Saito, 1999; Chiba, Saito, 2000; Sakakibara, 2002; Oi et al., 2003; Chiba et al., 2005; Григорян и др., 2009).

По мере дифференцировки регенерата сетчатки клетки РПЭ постепенно редифференцируется — т.е. восстанавливает свою исходную морфологию и накапливает пигмент. Детальный анализ морфологических и гистологических изменений, сопровождающих оба описанных выше этапа, позволил выделить в процессе регенерации девять последовательных стадий (Рис.1 Chiba et al, 2006).

Е-0 Е-1 Е-2 Е-3 1-1 I-2 I-3

Рис. 1. Схема регенерации сетчатки глаза взрослого тритона. РПЭ —

ретинальный пигментный эпителий, НЯС — наружный ядерный слой, НСС -наружный сетчатый слой, ВЯС - внутренний ядерный слой, ВСС -внутренний сетчатый слой, СГК - слой ганглиозных клеток (из Chiba et al, 2006 с изменениями).

Непосредственно после удаления сетчатки, в связи с потерей внутриглазного давления, глаз сильно сжимается, однако клетки РПЭ при

этом не утрачивают контакты, с базальной- мембраной? (стадия^ Е-0). Постепенно у большей части* клеток РПЭ свойственная имг кубическая-' форма, меняется на овальную форму, увеличиваются межклеточные пространства. Гранулы.пигмента диффузно распределяются-по> цитоплазме, ядра отдельных клеток- увеличиваются- в размере, и они входят в клеточный- цикл. Спустя некоторое время клетки РПЭ образуют слой, толщиной в 1 - 3 ряда клеток (стадия Е-1). Образование подобного слоя является результатом миграции и/или вымещения клеток из слоя РПЭ. В результате, большая часть клеток РПЭ дедифференцируется и входит в клеточный цикл. При этом наблюдается снижение в клетках РПЭ количества гранул меланина. Тем не менее, отдельные клетки РПЭ сохраняют пигмент и демонстрируют макрофагальную морфологию (т.н. меланофаги, Keef, 1973).

В некоторых случаях на данной стадии клетки РПЭ формируют агрегаты вблизи волокон ампутированного зрительного нерва, в результате чего происходит уменьшение числа клеток РПЭ, выстилающих глазное дно. Клетки, входящие в состав подобных агрегатов, в основном являются фагоцитирующими, основная функция которых заключается в удалении фрагментов клеток удалённой сетчатки и волокон зрительного нерва (Keefe, 1973; Reh, Nagy, 1987). На этой стадии, как было описано в работах посвящённых исследованию регенерации сетчатки и хрусталика (Eguchi, 1963; Yamada, Dumont, 1972; Mitashov et al., 1979), пигментированные клетки, выполняющие фагоцитарную функцию, обнаруживаются и в полости стекловидного тела.

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Авдонин, Петр Павлович

Выводы

1. Впервые идентифицированы нуклеотидные последовательности участков мРНК генов Fgf2 и Pitxl в геноме тритона PL waltl, имеющие высокую степень гомологии с последовательностями этих генов у высших и низших позвоночных, что свидетельствует об их консервативности.

2. Впервые выявлена экспрессия регуляторного гена Pitxl как в интактной, так и в регенерирующей сетчатке глаза взрослого тритона.

3. Выявлены отличия в экспрессии регуляторных генов Рахб и Six3 между сетчаткой и пигментным эпителием глаза тритона в норме и на поздней стадии регенерации сетчатки (50 сут). В пигментном эпителии не экспрессируются регуляторные гены Рахб и Six3.

4. Начало трансдифференцировки клеток пигментного эпителия сопровождается активацией экспрессии гена Рахб и снижением уровня экспрессии генов Fg/2 и Otx2. На поздних стадиях трансдифференцировки пигментного эпителия уровни экспрессии генов Fgf2 и Рахб возрастают. При редифференцировке клеток пигментного эпителия возрастает уровень экспрессии гена Otx2 и выключается экспрессия гена Рахб.

5. Установлена локализация белка, кодируемого регуляторным геном Pitx2, в интактных тканях глаза тритона, а также на средней и поздней стадиях регенерации сетчатки (20 и 50 сут).

6. Интактная и регенерирующая сетчатка на поздней стадии восстановления обладают сходным пространственным распределением регуляторных факторов Fgf2, Рахб, Otx2 и Pitx2.

7. В ростовой зоне глаза, дополнительном источнике регенерации сетчатки, выявлены белки Fgf2, Рахб и Pitx2.

Заключение

Итак, при сопоставлении полученных нами результатов по-экспрессии-регуляторных генов Fg/2, Рахб; Six3, Otx2,< Pitxl и Pitx2 и/или локализации их продуктов нач основных стадиях регенерации от начала морфологической трансдифференцировки РПЭ до стратификации сформированного регенерата можно сделать следующее заключение. Во-первых, должна быть полностью исключена возможность участия в процессе регенерации сетчатки глаза тритона «генов регенерации», так, как это многими предполагалось в начале молекулярной эры исследования процесса (конференция Европейской Ассоциации Исследователей Регенерации в 1997 году в Кельне); Наши результаты, наряду с многочисленными данными литературы, свидетельствуют об участии на разных этапах регенерации сетчатки генной сети, отдельные составляющие которой мы изучали. Во-вторых, все эти участники без исключения являются молекулами, регуляционная роль которых показана в развитии сетчатки многих позвоночных. В-третьих, некоторые из них находятся в антагонистических отношениях (Рахб, Six3 Otx2, Mitf), другие (например, каждая из двух названных пар) — в отношениях взаимного усиления функции. Кроме этого, очевидна сложная система зависимости экспрессии генов транскрипционных факторов от ростовых факторов, обнаруженная нами на примере Fgf2 и Рахб. В четвертых, на каждом этапе регенерации сетчатки имеет место специфический, качественный (набор регуляторов) и количественный (уровень работы) паттерн экспрессии контролирующих регенерацию молекул. И, наконец, этот паттерн сходен на финальных стадиях регенерации сетчатки и в интактной ткани, где, по-видимому, те же транскрипционные и ростовые факторы, уже ответственны за поддержание терминальной дифференцировки клеток и клеточной жизнеспособности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Авдонин, Петр Павлович, 2010 год

Список литературы

1. Григорян Э.Н; Полная отслойка сетчатки вызывает изменения, экспрессии цитокератинов в клетках пигментного эпителия-сетчатки у тритонов // Изв. РАН. Сер: биол. 1995. № 4. С. 412-421.

2. Григорян■ Э.Н; Сетчатка.позвоночных: внутренний клеточныйрезерв для регенерации// Онтогенез. 2003. Т. 34. № 6. С. 417-431.

3. Григорян Э.Н., Антон Г.Дж. Анализ экспрессии кератинов в клетках пигментного эпителия сетчатки в процессе их трансдифференцировки у тритонов // Онтогенез. 1995. Т. 26. № 4. С. 310-323.

4. Григорян Э.Н., Антон Г.Дж. Появление и распределение белка нейрофиламентов НФ-200 в трансдифференцирующихся клетках пигментного эпителия сетчатки в процессе регенерации сетчатки у тритонов // Онтогенез 1993. Т. 24. №4. С. 39-51

5. Григорян Э.Н., Бажин A.B., Краснов. М.С., Филиппов П.П. Изучение экспрессии кальций-связывающего белка рековерина в нормальной, переживающей и регенерирующей сетчатке взрослого тритона Pleurodeles waltl // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2009. №3, С. 173-180.

6. Григорян Э.Н., Дольникова А.Э., Белкин В.М. Распределение фибронектина в процессе трансдифференцировки и пролиферации клеток глаза после отслойки сетчатки и удаления хрусталика у тритонов // Онтогенез. 1990. Т.21. № 4. С. 403-408.

7. Григорян Э.Н., Миташов В.И. Радиоавтографическое исследование пролиферации и синтеза меланина в клетках пигментного эпителия при регенерации глаза у тритонов // Онтогенез. 1979. Т. 10. № 2. С. 137—144.

8. Карлсон Б. Регенерация. М.: Наука 1986.

9. Маркитантова Ю. В., Фирсова Н. В., Смирнова Ю. А., Панова И. Г., Сухих Г. Т., Зиновьева Р. Д., Миташов В.И. Локализация экспрессии гена PITX2 в клетках глаза человека в ходе пренатального развития // Изв. РАН. Серия биологическая. 2008. №2. С. 139-145

10. Маркитантова Ю. В., Смирнова Ю. А., Панова И'. Г., Сухих Г. Т., Зиновьева Р: Д., Миташов В. И. Исследование экспрессии регуляторных генов РАХ6, PROX1, PITX2 в дифференцирующихся клетках глаза плода человека // Изв. РАН. Серия биологическая. 2006. № 4. С. 421-429

11. Маркитантова Ю.В., Макарьев Е.О., Смирнова Ю.А., и др. Исследование паттерна экспрессии регуляторных генов Рахб, Proxl и Six3 в ходе регенерации структур глаза тритона // Изв. РАН. Сер.биол. 2004. № 5. С. 522-529.

12. Миташов В.И. Характеристика митотических циклов клеток пигментного эпителия и зачатка сетчатки у взрослых тритонов (Triturus cristatus, Triturus taeniatus) // Докл. АН СССР. 19696. Т. 189. № 3. С.666-669.

13. Миташов В.И. Авторадиографические исследования восстановления сетчатки у гребенчатых тритонов (Triturus cristatus) // Докл. АН СССР. 1968. Т. 181. С. 1510-1513

14. Миташов В.И. Динамика синтеза ДНК в клетках пигментного эпителия взрослых тритонов при восстановлении глаза после перерезки зрительного нерва и кровеносных сосудов // Цитология. 1970. Т. 12. № 12. С. 1521-1529.

15. Миташов В.И. Динамика синтеза ДНК в пигментном эпителии в процессе восстановления глаза после хирургического удаления сетчатки у взрослых гребенчатых тритонов (Triturus cristatus) // Цитология. 1969а. Т.П. №4. С. 434^146.

16. Миташов В.И. Ключевые источники, регуляторные факторы и экспрессия генов при регенерации хрусталика и сетчатки глаза у позвоночных животных. // Известия РАН. Серия биологическая. 1996. №6. С.298-318.

17. Миташов В.И. Радиоавтографическое исследование синтеза меланина в клетках пигментного эпителия сетчатки тритонов. // Онтогенез. 1980. Т.П. С.495-501.

г \

18. Миташов В.И. Радиоавтографическое исследование синтеза меланина в клетках- пигментного эпителия сетчатки у взрослых тритонов после хирургического удаления сетчатки. // Онтогенез. 1976. Т.7. №5. С.495-501.

19. Миташов В.И. Экспрессия регуляторных и тканеспецифических генов контролирующих способности к регенерации тканей глаза у позвоночных. // Онтогенез. 2007. Т.38. №4 С. 244-253

20. Новикова Ю.П. Выявление и активация in vitro скрытых регенерационных потенций сетчатки глаза позвоночных животных. // Автореферат дисс. на соискание степени к.б.н. Москва.2010. С.13-14

21. Новикова Ю.П., Поплинская В.А., Алейникова К.С., Григорян Э.Н. Исследование локализации и накопления клеток в S - фазе в сетчатке после искуственной отслойки от пигментного эпителия в глазах тритона Pleurodeles waltlii. // Онтогенез. 2008. Т.39. №2. С.143-150. .

22. Adler R., Canto-Soler M.V. Molecular mechanisms of optic vesicle development: complexities, ambiguities and controversies // Dev Biol, 2007. 305(1): p. 1-13.

23. Adler R., Belecky-Adams T.L. The role of bone morphogenetic proteins in the differentiation of the ventral optic cup // Development, 2002. 129(13): p. 3161-71.

24. Ahmad I., Das A.V., James J., Bhattacharya S., et al. Neural stem cells in the mammalian eye: types and regulation // Semin Cell Dev Biol, 2004. 15(1): p. 53-62.

25. Ahmad I., Tang L., Pham H. Identification of neural progenitors in the adult mammalian eye // Biochem Biophys Res Commun, 2000. 270(2): p. 517-21.

26. Altmann C.R., Chow R.L., Lang R.A., Hemmati-Brivanlou A. Lens induction by Pax-6 in Xenopus laevis // Dev Biol, 1997. 185(1): p. 119-23.

27. Altshuler D., Lo Turco J.J., Rush J., Cepko C. Taurine promotes the differentiation of a vertebrate retinal cell type in vitro // Development, 1993. 119(4): p. 1317-28.

28. Atwal J.K., Massie B., Miller F.D., Kaplan D.R. The TrkB-Shc site signals neuronal survival and local axon growth via MEK and P13-kinase // Neuron, 2000. 27(2): p. 265-77.

29. Azuma N., Tadokoro K., Asaka A., Yamada M., et al. Transdifferentiation of the retinal pigment epithelia to the neural retina by transfer of the Pax6 transcriptional factor // Hum Mol Genet, 2005. 14(8): p. 1059-68.

30. Baas D., Bumsted K.M., Martinez J.A., Vaccarino F.M., et al., The subcellular localization of Otx2 is cell-type specific and developmentally regulated in the mouse retina // Brain Res Mol Brain Res, 2000. 78(1-2): p. 26-37.

31. Bar-Yosef U., Abuelaish I. et al. CHX10 mutations cause non-syndromic microphthalmia/ anophthalmia in Arab and Jewish kindreds // Hum Genet, 2004. 115(4): p.302-9.

32. Belecky-Adams T., Adler R. Developmental expression patterns of bone morphogenetic proteins, receptors, and binding proteins in the chick retina // J Comp Neurol, 2001. 430(4): p.562-72.

33. Belecky-Adams T., Tomarev S., Li H.S., Ploder L. et al. Pax-6, Prox 1, and ChxlO homeobox gene expression correlates with phenotypic fate of retinal precursor cells // Invest Ophthalmol Vis Sci, 1997. 38(7): p. 1293-303.

34. Bernardos R.L., Barthel L.K., Meyers J.R., Raymond P.A. Late-stage neuronal progenitors in the retina are radial Muller glia that function as retinal stem cells // J Neurosci, 2007. 27(26): p. 7028-40.

35. Berry F.B., Lines M.A., Oas J.M., Footz T. et al. Functional interactions between FOXC1 and PITX2 underlie the sensitivity to FOXC1 gene dose in

! Axenfeld-Rieger syndrome and anterior segment dysgenesis // Hum Mol

Genet, 2006. 15(6): p. 905-19.

* 36. Bharti K., Nguyen M.T., Skuntz S., Bertuzzi S. et al. The other pigment cell:

( specification and development of the pigmented epithelium of the vertebrate

i

' eye // Pigment Cell Res, 2006. 19(5): p. 380-94.

i

37. Bibb L.C., HoltJ.K., Tarttelin E.E., Hodges M.D. et al. Temporal and spatial expression- patterns of the CRX transcription factor and its downstream targets. Critical differences during human and mouse eye development // Hum Mol Genet, 2001. 10(15): p. 1571-9.

38. Bone-Larson C., Basu S. et al. Partial rescue of the ocular retardation^ phenotype by genetic modifiers // J Neurobiol, 2000. 42(2): p. 232-47.

39. Borello U., Buffa V., Sonnino C., Melchionna R. et al. Differential expression of the Wnt putative receptors Frizzled during mouse somitogenesis // Mech Dev, 1999. 89(1-2): p. 173-7.

40. Bovolenta P., Mallamaci A., Briata P., Corte G. et al. Implication of OTX2 in pigment epithelium determination and neural retina differentiation // J Neurosci, 1997. 17(11): p. 4243-52.

41. Brockes J.P. Amphibian limb regeneration: rebuilding a complex structure // Science, 1997. 276(5309): p. 81-7.

42. Brown N.L., Kanekar S., Vetter M.L., Tucker P.K. et al. Math5 encodes a murine basic helix-loop-helix transcription factor expressed during early stages of retinal neurogenesis // Development, 1998. 125(23): p. 4821-33.

43. Brown N.L., Patel S., Brzezinski J., Glaser T. Math5 is required for retinal ganglion cell and optic nerve formation // Development, 2001. 128(13): p. 2497-508.

44. Bugra K., Jacquemin E., Ortiz J.R., Jeanny J.C. et al. Analysis of opsin mRNA and protein expression in adult and regenerating newt retina by immunology and hybridization // JNeurocytol, 1992. 21(3): p. 171-83.

45. Bugra K., Oliver L., Jacquemin E., Laurent M. et al. Acidic fibroblast growth factor is expressed abundantly by photoreceptors within the developing and mature rat retina // Eur J Neurosci, 1993. 5(12): p. 1586-95.

46. Bumsted K.M. Barnstable C.J. Dorsal retinal pigment epithelium differentiates as neural retina in the microphthalmia (mi/mi) mouse // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2000. 41(3): p. 903-8.

47. Burmeister M., Novak J., Liang M.Y., BasuS. et al. Ocular retardation mouse caused; by ChxlO homeobox null allele: impaired retinal progenitor proliferation and bipolar cell differentiation //Nat Genet, 1996. 12(4): p. 37684.

481 Burns C.J., Zhang J., Brown E.C1, Van Bibber A.M. et al. Investigation of Frizzled-5 during embryonic neural development in mouse // Dev Dyn, 2008. 237(6): p. 1614-26.

49. Cai Z., Feng G.S., Zhang X. Temporal requirement of the protein tyrosine phosphatase Shp2 in establishing the neuronal fate in early retinal development// JNeurosci, 2010. 30(11): p. 4110-9.

50. Calinescu A.A., Vihtelic T.S., Hyde D.R., Hitchcock P.F. Cellular expression of midkine-a and midkine-b during retinal development and photoreceptor regeneration in zebrafish // J Comp Neurol, 2009. 514(1): p. 1-10.

51. Canto-Soler M.V., Adler R. Optic cup and lens development requires Pax6 expression in the early optic vesicle during a narrow time window // Dev Biol, 2006. 294(1): p. 119-32.

52. Carlson B.M. Skeletal muscle regeneration during aging and after long-term denervation//Tsitologiia, 1997. 39(10): p. 965-8.

53. Carriere C., Plaza S., Martin P., Quatannens B. et al. Characterization of quail Pax-6 (Pax-QNR) proteins expressed in the neuroretina // Mol Cell Biol, 1993. 13(12): p. 7257-66.

54. Cepko C.L., Austin C.P., Yang X., Alexiades M., et al. Cell fate determination in the vertebrate retina // Proc Natl Acad Sci USA, 1996. 93(2): p. 589-95.

55. Chang J.T., Esumi N., Moore K., Li Y. et al. Cloning and characterization of a secreted frizzled-related protein that is expressed by the retinal pigment epithelium // Hum Mol Genet, 1999. 8(4): p. 575-83.

56. Chang W., Khosrowshahian F., Chang R., Crawford M.J. xPitxl plays a role in specifying cement gland and head during early Xenopus development // Genesis, 2001. 29(2): p. 78-90.

57. Chen C.M., Cepko C.L. Expression.of ChxlO-and ChxlO-T inthe developing-chicken,retinai// Mech Dev, 2000.90(2): p. 293-7.

58. Cheon E.W., Saito T. Choline acetyltransferase and acetylcholinesterase in the normal, developing and regenerating newt retinas // Brain Res Dev Brain-Res, 1999. M'6(l): p. 97-109:

59. Cheon E.W., Kaneko Y., Saito T. Regeneration of the newt retina: order of appearance of photoreceptors and ganglion cells // J Comp Neurol, 1998. 396(2): p. 267-74.

60. Chiba C., Mitashov V.I. Cellular and molecular events in the adult newt retinal regeneration // Retinal repair and regeneration, 2008. p.2-13

61. Chiba C., Saito T. Gap junctional coupling between progenitor cells of regenerating retina in the adult newt // J Neurobiol, 2000. 42(2): p. 258-69.

62. Chiba C., Hoshino A., Nakamura K., Susaki K. et al. Visual cycle protein RPE65 persists in new retinal cells during retinal regeneration of adult newt // J Comp Neurol, 2006. 495(4): p. 391-407.

63. Chiba C. Appearance of glutamate-like immunoreactivity during retinal regeneration in the adult newt // Brain Res, 1998. 785(1): p. 171-7.

64. Chiba C., Oi H., Saito T. Changes in somatic sodium currents of ganglion cells during retinal regeneration in the adult newt // Brain Res Dev Brain Res, 2005. 154(1): p. 25-34.

65. Chiba C., Matsushima O., Muneoka Y., Saito T. Time course of appearance of GABA and GABA receptors during retinal regeneration in the adult newt // Brain Res Dev Brain Res, 1997. 98(2): p. 204-10.

66. Cho S.H., Cepko C.L. Wnt2b/beta-catenin-mediated canonical Wnt signaling determines the peripheral fates of the chick eye // Development, 2006. 133(16): p. 3167-77.

67. Chow R.L., Lang R.A. Early eye development in vertebrates // Annu Rev Cell Dev Biol, 2001. 17: p. 255-96.

68. Chow R.L., Altmann C.R., Lang R.A., Hemmati-Brivanlou A. Pax6 induces ectopic eyes in a vertebrate // Development, 1999. 126(19): p. 4213-22.

69. Christiaen L., Bourrat.F., Joly J.S: A, modular cis-regulatory system controls isoform-specific pitx expression in ascidián stomodaeum // Dev Biol, 2005. 277(2): p. 557-66.

70. Cicero S.A., Johnson D., Reyntjens S., Frase S. et al. Cells previously identified as. retinal stenr cells: are pigmented- ciliary epithelial cells-// Proc Natl Acad Sci U S A, 2009. 106(16): p. 6685-90.

71. Close J.L., Gumuscu B., Reh T.A. Retinal neurons regulate proliferation of postnatal progenitors and Muller glia in the rat retina via TGF beta signaling // Development, 2005. 132(13): p. 3015-26.

72. Colvin J.S., Feldman B., Nadeau J.H., Goldfarb M. et al. Genomic organization and embryonic expression of the mouse fibroblast growth factor 9 gene // Dev Dyn, 1999. 216(1): p. 72-88.

73. Consigli S.A., Lyser K.M., Joseph-Silverstein J. The temporal and spatial expression of basic fibroblast growth factor during ocular development in the chicken // Invest Ophthalmol Vis Sci, 1993. 34(3): p. 559-66.

74. Cox C.J., Espinoza H.M., McWilliams B., Chappell K. et al. Differential regulation of gene expression by PITX2 isoforms // J Biol Chem, 2002. 277(28): p. 25001-10.

75. Cvekl A., Piatigorsky J. Lens development and crystallin gene expression: many roles forPax-6 //Bioessays, 1996. 18(8): p. 621-30.

76. Dakubo G.D., Wang Y.P., Mazerolle C., Campsall K. et al. Retinal ganglion cell-derived sonic hedgehog signaling is required for optic disc and stalk neuroepithelial cell development//Development, 2003. 130(13): p. 2967-80.

77. Das T., Payer B., Cayouette M., Harris W.A. In vivo time-lapse imaging of cell divisions during neurogenesis in the developing zebrafish retina // Neuron, 2003. 37(4): p. 597-609.

78. Davis A.A., Matzuk M.M., Reh T.A. Activin A promotes progenitor differentiation into photoreceptors in rodent retina // Mol Cell Neurosci, 2000. 15(1): p. 11-21.

79. de Iongh»R., McAvoy J.W. Spatio-temporal distribution of acidic and basic FGF indicates a role for FGF in-rat lens morphogenesis // Dev Dyn, 1993. 198(3): p. 190-202.

80. de Iongh R.U., Abud H.E., Hime G.R. WNT/Frizzled signaling in eye development and disease // Front Biosci, 2006. 11: p. 2442-64.

81. Del Rio-Tsonis K., Washabaugh C.H., Tsonis P.A. Expression of pax-6 during urodele eye development and lens regeneration // Proc Natl Acad Sci U S A, 1995. 92(11): p. 5092-6.

82. Denayer T., Locker M., Borday C., Deroo T. et al. Canonical Wnt signaling controls proliferation of retinal stem/progenitor cells in postembryonic Xenopus eyes // Stem Cells, 2008. 26(8): p. 2063-74.

83. Dhomen N.S., Balaggan K.S., Pearson R.A., Bainbridge J.W. et al. Absence of chxlO causes neural progenitors to persist in the adult retina // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2006. 47(1): p. 386-96.

84. Diehl A.G., Zareparsi S., Qian M., Khanna R. et al. Extraocular muscle morphogenesis and gene expression are regulated by Pitx2 gene dose // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2006. 47(5): p. 1785-93.

85. Doe C.Q., Chu-LaGraff Q., Wright D.M., Scott M.P. The prospero Gene Specifies Cell Fates in the Drosophila Central Nervous System // Cell, 1991. 65: p.451-464

86. Doh S.T., Hao H., Loh S.C., Patel T. et al. Analysis of retinal cell development in chick embryo by immunohistochemistry and in ovo electroporation techniques // BMC Dev Biol, 2010. 10: p. 8.

87. Dohrmann C.E., Hemmati-Brivanlou A., Thomsen G.H., Fields A. et al. Expression of activin mRNA during early development in Xenopus laevis // Dev Biol, 1993. 157(2): p. 474-83.

88. Dorval K.M., Bobechko B.P., Fujieda H., Chen S. et al. CHX10 targets a subset of photoreceptor genes // J Biol Chem, 2006. 281(2): p. 744-51.

89. Dorval K.M., Bobechko B.P., Ahmad K.F., Bremner R. Transcriptional activity of the paired-like homeodomain proteins CHX10 and VSX1 // J Biol Chem, 2005. 280(11): p. 10100-8.

90. Dyer M.A., Livesey F.J., Cepko C.L., Oliver G. Proxl function controls progenitor cell 'proliferation and horizontal cell genesis in the mammalian' retina//Nat Genet, 2003. 34(1): p. 53-8.

91. Eguchi G., Iton Y. Regeneration of the lens as a phenomenon of cellular transdifferentiation: Regulability of differentiated state of the vertebrate pigmented epithelial cells // Trans. Ophthalmol. Soc. UK. 1982. V. 102. P. 374-378.

92. Eguchi G. In vitro analyses of Wolffian lens regeneration: differentiation of the regenerating lens rudiment of the newt, Trituras pyrrhogaster // Embryologia (Nagoya), 1967. 9(4): p. 246-66.

93. Engelhardt M., Bogdahn U., Aigner L. Adult retinal pigment epithelium cells express neural progenitor properties and the neuronal precursor protein doublecortin // Brain Res, 2005. 1040(1-2): p. 98-111.

94. Esteve P., Bovolenta P. Secreted inducers in vertebrate eye development: more functions for old morphogens // Curr Opin Neurobiol, 2006. 16(1): p. 13-9.

95. Evans A.L., Gage P.J. Expression of the homeobox gene Pitx2 in neural crest is required for optic stalk and ocular anterior segment development // Hum Mol Genet, 2005. 14(22): p. 3347-59.

96. Ezzeddine Z.D., Yang X., DeChiara T., Yancopoulos G., et al. Postmitotic cells fated to become rod photoreceptors can be respecified by CNTF treatment of the retina//Development, 1997. 124(5): p. 1055-67.

97. Feijen A., Goumans M.J., van den Eijnden-van Raaij A.J. Expression of activin subunits, activin receptors and follistatin in postimplantation mouse embryos suggests specific developmental functions for different activins // Development, 1994. 120(12): p. 3621-37.

98. Ferda Percin E., Ploder L.A., Yu J.J., Arici K. et al. Human microphthalmia associated with mutations in the retinal, homeobox gene CHX10 // Nat Genet, 2000. 25(4): p. 397-401.

99. Filoni S. Retina and lens regeneration in anuran amphibians // Semin Cell Dev Biol, 2009. 20(5): p. 528-34.

100. Fischer A. J., Scott M.A., Tuten W. Mitogen-activated protein kinase-signaling stimulates Miiller glia to proliferate in acutely damaged chicken retina // Glia. 2009. 57(2): P. 166-181.

101.Fischer A.J., McGuire* C.R., Dierks B.D., Reh T.A. Insulin and fibroblast growth factor 2 activate a neurogenic program in Muller glia of the chicken retina // J Neurosci, 2002. 22(21): p. 9387-98.

102. Francis P.J., Berry V., Moore A.T., Bhattacharya S. Lens biology: development and human cataractogenesis // Trends Genet, 1999. 15(5): p. 191-6.

103.Franke W.W., Schmid E., Grund C., Geiger B. Intermediate filament proteins in nonfilamentous structures: transient disintegration and inclusion of subunit proteins in granular aggregates // Cell, 1982. 30(1): p. 103-13.

104.Frohns F., Mager M., Layer P.G. Basic fibroblast growth factor increases the precursor pool of photoreceptors, but inhibits their differentiation and apoptosis in chicken retinal reaggregates // Eur J Neurosci, 2009. 29(10): p. 1931-42.

105.Fuhrmann S., Levine E.M., Reh T.A. Extraocular mesenchyme patterns the optic vesicle during early eye development in the embryonic chick // Development, 2000. 127(21): p. 4599-609.

106. Gage P. J., Camper S.A. Pituitary homeobox 2, a novel member of the bicoid-related family of homeobox genes, is a potential regulator of anterior structure formation//HumMol Genet, 1997. 6(3): p. 457-64.

107. Gage P.J., Suh H., Camper S.A. Dosage requirement of Pitx2 for development of multiple organs //Development, 1999. 126(20): p. 4643-51.

108. Gage P.J., Rhoades W., Prucka S.K., Hjalt T. Fate maps of neural crest and mesoderm in the mammalian eye // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2005. 46(11): p. 4200-8.

109. Galy A., Neron B., Planque N., Saule S., et al. Activated MAPK/ERK kinase (MEK-1) induces transdifferentiation of pigmented epithelium into neural retina // Dev Biol, 2002. 248(2): p. 251-64.

110. Gao H., Hollyfield J.G. Basic fibroblast growth factor in retinal development: differential levels of bFGF expression and content in normal and retinal degeneration (rd) mutant mice // Dev Biol, 1995. 169(1): p. 168-84.

111.Garelli A., Rotstein N.P., Politi L.E. Docosahexaenoic acid promotes photoreceptor differentiation without altering Crx expression // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2006. 47(7): p. 3017-27.

112. Gehring W.J. The genetic control of eye development and its implications for the evolution of the various eye-types // Int J Dev Biol, 2002. 46(1): p. 65-73.

113. Gehring W.J. The master control gene for morphogenesis and evolution of the eye//Genes Cells, 1996. 1(1): p. 11-5.

114. Goding C.R. Mitf from neural crest to melanoma: signal transduction and transcription in the melanocyte lineage // Genes Dev, 2000. 14(14): p. 171228.

115.Goudreau G., Petrou P., Reneker L.W., Graw J. et al. Mutually regulated expression of Pax6 and Six3 and its implications for the Pax6 haploinsufficient lens phenotype // Proc Natl Acad Sci USA, 2002. 99(13): p. 8719-24.

116. Gould D.B., Smith R.S., John S.W. Anterior segment development relevant to glaucoma // Int J Dev Biol, 2004. 48(8-9): p. 1015-29.

117. Granadino B., Gallardo M.E., Lopez-Rios J., Sanz R. et al. Genomic cloning, structure, expression pattern, and chromosomal location of the human SIX3 gene//Genomics, 1999. 55(1): p. 100-5.

118. Green E. S., Stubbs J. L. et al. Genetic rescue of cell number in a mouse model of microphthalmia: interactions between ChxlO and G1-phase cell cycle regulators // Development, 2003. 130(3): 539-52.

119. Grindley J.C., Davidson D.R., Hill R.E. The role of Pax-6 in eye and nasal development//Development, 1995. 121(5): p. 1433-42.

120. Guilarducci-Ferraz C.V., da Silva G.M., Torres P.M., Dos Santos A.A. et al. The increase in retinal cells proliferation induced by FGF2 is mediated by tyrosine and PI3 kinases // Neurochem Res, 2008. 33(5): p. 754-64.

121. Guillonneau X., Regnier-Ricard F., Jeanny J.C., Thomasseau S., et al. Regulation of FGF soluble receptor type 1 (SRI) expression and distribution in developing, degenerating, and FGF2-treated retina // Dev Dyn, 2000. 217(1): p. 24-36.

122. Haider G., Callaerts P., Gehring W.J. Induction of ectopic eyes by targeted expression of the eyeless gene in Drosophila // Science, 1995. 267(5205): p. 1788-92.

123. Hasegawa M. Restitution of the eye after removal of the retina and lens in the newt Triturus pyrrhogaster // Embryologia, 1958. 4(1): p. 1-32

124. Hatakeyama J., Kageyama R. Retinal cell fate determination and bHLH factors // Semin Cell Dev Biol, 2004. 15(1): p. 83-9.

125. Hatakeyama J., Tomita K., Inoue T., Kageyama R. Roles of homeobox and bHLH genes in specification of a retinal cell type // Development, 2001. 128(8): p. 1313-22.

126. Haubst N., Berger J., Radjendirane V., Graw J., et al. Molecular dissection of Pax6 function: the specific roles of the paired domain and homeodomain in brain development // Development, 2004. 131(24): p. 6131-40.

127. Hayashi T., Mizuno N., Ueda Y., Okamoto M., Kondoh H. FGF2 triggers iris-derived lens regeneration in newt eye // Mechan. Develop. 2004. 121(6): p. 519-526

128.Hayashi> T., Huang J., Deeb S.S. RINX(VSXl), a novel homeobox gene expressed' in the inner nuclear layer of the adult retina // Genomics, 2000. 67(2): p. 128-39.

129.Hayashi T., Mizuno N., Kondoh Hi Determinative roles of FGF and Wnt» signals in iris-derived lens regeneration in newt eye // Dev Growth Differ, 2008. 50(4): p. 279-87.

130. Hayashi T., Mizuno N., Takada R., Takada S. et al. Determinative role of Wnt signals in dorsal iris-derived lens regeneration in newt eye // Mech Dev, 2006. 123(11): p. 793-800.

131. Hayes A.J., Dowthwaite G.P., Webster S.V., Archer C.W. The distribution of Notch receptors and their ligands during articular cartilage development // J Anat, 2003. 202(6): p. 495-502.

132.Heanue T.A., Davis R.J., Rowitch D.H., Kispert A. et al. Dachl, a vertebrate homologue of Drosophila dachshund, is expressed in the developing eye and ear of both chick and mouse and is regulated independently of Pax and Eya genes // Mech Dev, 2002. 111(1-2): p. 75-87.

133. Henderson E., Sakaguchi D. S. Imaging F-actin in fixed glial cells with a combined optical fluorescence/atomic force microscope //Neuroimage, 1993, 1(2): 145-50.

134. Hicks D., Courtois Y. Fibroblast growth factor stimulates photoreceptor differentiation in vitro // J Neurosci, 1992. 12(6): p. 2022-33.

135.Hirsch N., Harris W.A. Xenopus Pax-6 and retinal development // J Neurobiol, 1997. 32(1): p. 45-61.

136. Hitchcock P.F., Macdonald R.E., VanDeRyt J.T., Wilson S.W. Antibodies against Pax6 immunostain amacrine and ganglion cells and neuronal progenitors, but not rod precursors, in the normal and regenerating retina of the goldfish//J Neurobiol, 1996. 29(3): p. 399-413.

137. Hjalt T.A., Semina E.V., Amendt B.A., Murray J.C. The Pitx2 protein in mouse development // Dev Dyn, 2000. 218(1): p. 195-200.

138. Hocking J.C., McFarlane S. Expression of Bmp ligands.and receptors in the developing Xenopus retina // Int J Dev Biol, 2007. 51(2): p. 161-5.

139. Holmberg J., Liu C.Y., Hjalt T.A. PITX2 gain-of-function in Rieger syndrome eye model //Am J Pathol, 2004. 165(5): p. 1633-41.

140. Holt C.E., Bertsch T.W., Ellis H.M., Harris W.A. Cellular determination in the Xenopus retina is independent of lineage and birth date // Neuron, 1988. 1(1): p. 15-26.

141.Horsford D.J., Nguyen M.T., Sellar G.C., Kothary R. et al. ChxlO repression of Mitf is required for the maintenance of mammalian neuroretinal identity // Development, 2005. 132(1): p. 177-87.

142.Hsieh Y.W., Yang X.J. Dynamic Pax6 expression during the neurogenic cell cycle influences proliferation and cell fate choices of retinal progenitors // Neural Dev, 2009. 4: p. 32.

143. Hsieh Y.W., Zhang X.M., Lin E., Oliver G. et al. The homeobox gene Six3 is a potential regulator of anterior segment formation in the chick eye // Dev Biol, 2002. 248(2): p. 265-80.

144. Hunter D.D., Murphy M.D., Olsson C.V., Brunken W.J. S-laminin expression in adult and developing retinae: a potential cue for photoreceptor morphogenesis //Neuron, 1992. 8(3): p. 399-413.

145. Hyatt G.A., Schmitt E.A., Fadool J.M., Dowling J.E. Retinoic acid alters photoreceptor development in vivo // Proc Natl Acad Sci USA, 1996. 93(23): p. 13298-303.

146. Israsena N., Hu M., Fu W., Kan L. et al. The presence of FGF2 signaling determines whether beta-catenin exerts effects on proliferation or neuronal differentiation of neural stem cells // Dev Biol, 2004. 268(1): p. 220-31.

147. Ittner L.M., Wurdak H., Schwerdtfeger K., Kunz T., et al. Compound developmental eye disorders following inactivation of TGFbeta signaling in neural-crest stem cells //J Biol, 2005. 4(3): p. 11.

148.1wakiri R., KobayashiK., OkinamiS., Kobayashi H. Suppression of Mitf by small' interfering RNA induces dedifferentiation of chick embryonic retinal pigment epithelium // Exp Eye Res, 2005. 81(1): p. 15-21.

1491 Jin E.J., Burrus L.W., Erickson C.A. The expression patterns of Wnts and their antagonists during avian eye development // Mech Dev, 2002. 116(1-2): p. 173-6.

150.Kahn A.J. An autoradiographic analysis of the time of appearance of neurons in the developing chick neural retina // Dev Biol, 1974. 38(1): p. 30-40.

151.Keefe J.R. An analysis of urodelian retinal regeneration. IV. Studies of the cellular source of retinal regeneration in Triturus cristatus carnifex using 3 H-thymidine // J Exp Zool, 1973. 184(2): p. 239-58.

152.Khosrowshahian F., Wolanski M., Chang W.Y., Fujiki K. et al. Lens and retina formation require expression of Pitx3 in Xenopus pre-lens ectoderm I I Dev Dyn, 2005. 234(3): p. 577-89.

153'.Klassen H.J., Ng T.F., Kurimoto Y., Kirov I. et al. Multipotent retinal progenitors express developmental markers, differentiate into retinal neurons, and preserve light-mediated behavior // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2004. 45(11): p. 4167-73.

154. Klein L.R., MacLeish P.R., Wiesel T.N. Immunolabelling by a newt retinal pigment epithelium antibody during retinal development and regeneration // J Comp Neurol, 1990. 293(3): p. 331-9.

155. Koike C., Nishida A., Ueno S., Saito H. et al. Functional roles of Otx2 transcription factor in postnatal mouse retinal development // Mol Cell Biol, 2007. 27(23): p. 8318-29.

156.Konyukhov B.V., Sazhina M.V. Genetic control over the duration of G 1 phase//Experientia, 1971. 27(8): 970-1.

157.Koshiba-Takeuchi K., Takeuchi J.K., Matsumoto K., Momose T. et al. Tbx5 and the retinotectum projection // Science, 2000. 287(5450): p. 134-7.

158.Kubo F., Nakagawa S. Wnt signaling in retinal stem cells and regeneration // Dev Growth Differ, 2008. 50(4): p. 245-51.

159:Kubo F., Takeichi M., Nakagawa S., Wnt2b controls retinal cell differentiation at the ciliary marginal zone // Development, 2003. 130(3): p. 587-98.

160. Kubo F., Takeichi M., Nakagawa S. Wnt2b inhibits differentiation of retinal progenitor cells in the absence of Notch activity by downregulating the expression of proneural genes // Development, 2005. 132(12): p. 2759-70.

161. Kumar, J.P., Moses K. The EGF receptor and notch signaling pathways control the initiation of the morphogenetic furrow during Drosophila eye development // Development, 2001. 128(14): p. 2689-97.

162.Kuriyama F., Ueda Y., Araki M. Complete reconstruction of the retinal laminar structure from a cultured retinal pigment epithelium is triggered by altered tissue interaction and promoted by overlaid extracellular matrices // Dev Neurobiol, 2009. 69(14): p. 950-8.

163.Lagonigro M. S., De Cecco L. et al. CTAB-urea method purifies RNA from melanin for cDNA microarray analysis // Pigment Cell Res. 2004. V.17. №3 p. 312-315.

164. Lagutin O., Zhu C.C., Furuta Y., Rowitch D.H. et al. Six3 promotes the formation of ectopic optic vesicle-like structures in mouse embryos // Dev Dyn, 2001. 221(3): p. 342-9:

165. Lagutin O.V., Zhu C.C., Kobayashi D., Topczewski J. et al. Six3 repression of Wnt signaling in the anterior neuroectoderm is essential for vertebrate forebrain development // Genes Dev, 2003. 17(3): p. 368-79.

166.Lamba P., Hjalt T.A., Bernard D.J. Novel forms of Paired-like homeodomain transcription factor 2 (PITX2): generation by alternative translation initiation and mRNA splicing // BMC Mol Biol, 2008. 9: p. 31.

167. Lazarides E. Intermediate filaments as mechanical integrators of cellular space //Nature, 1980. 283(5744): p. 249-256.

168. Lee C.S., May N.R., Fan C.M. Transdifferentiation of the ventral retinal pigmented epithelium to neural retina in the growth arrest specific gene 1 mutant // Dev Biol, 2001. 236(1): p. 17-29.

169. Lee H.X., Ambrosio A.L., Reversade B., De Robertis E.M: Embryonic dorsalventral signaling: secreted frizzled-related proteins, as- inhibitors of tolloid proteinases // Cell, 2006. 124(1): p. 147-59.

1.70. Lee H.Y., Wroblewski E., Philips G.T., Stair C.N. et al. Multiple requirements for Hes 1 during early eye formation // Dev Biol, 2005. 284(2): p. 464-78.

171.Lengler J., Graw J. Regulation of the human SIX3 gene promoter // Biochem Biophys Res Commun, 2001. 287(2): p. 372-6.

172.Lengler J., Krausz E., Tomarev S., Prescott A. et al. Antagonistic action of Six3 and Proxl at the gamma-crystallin promoter // Nucleic Acids Res, 2001. 29(2): p. 515-26.

173. Levine E.M., Green E.S. Cell-intrinsicregulators of proliferation in vertebrate retinal progenitors // Semin Cell Dev Biol, 2004. 15(1): p. 63-74.

174. Levine E.M., Roelink H., Turner J., Reh T.A. Sonic hedgehog promotes rod photoreceptor differentiation in mammalian retinal cells in vitro // J Neurosci, 1997. 17(16): p. 6277-88.

175.Lister J.A., Robertson C.P., Lepage T., Johnson S.L. et al. nacre encodes a zebrafish microphthalmia-related protein that regulates neural-crest-derived pigment cell fate //Development, 1999. 126(17): p. 3757-67.

176. Lister J.A., Close J., Raible D.W. Duplicate mitf genes in zebrafish: complementary expression and conservation of melanogenic potential // Dev Biol, 2001. 237(2): p. 333-44.

177. Liu H., Mohamed O., Dufort D., Wallace V.A. Characterization of Wnt signaling components and activation of the Wnt canonical pathway in the murine retina // Dev Dyn, 2003. 227(3): p. 323-34.

178. Liu I.S., Chen J.D., Ploder L., Vidgen D. et al. Developmental expression of a novel murine homeobox gene (ChxlO): evidence for roles in determination of the neuroretina and inner nuclear layer // Neuron, 1994. 13(2): p. 377-93.

179.Livne-Bar I., Pacal M., Cheung M.C., Hankin M. et al. ChxlO is required to block photoreceptor differentiation but is dispensable for progenitor

proliferation in the postnatal retina // Proc Natl Acad Sci' USA, 2006.

. 103(13): p. 4988-93.

180. Locker M:, Agathocleous M., Amato M.A., Parain K. et al. Hedgehog signaling and the retina: insights into the mechanisms controlling the proliferative properties of neural precursors // Genes Dev, 2006. 20(21): p. 3036-48.

181.Loosli F., Winkler S., Wittbrodt J. Six3 overexpression initiates the formation of ectopic retina// Genes Dev, 1999. 13(6): p. 649-54.

182. Lyu J., Joo C.K. Wnt signaling enhances FGF2-triggered lens fiber cell differentiation//Development, 2004. 131(8): p. 1813-24.

183.Manavathi B., Peng S., Rayala S.K., Talukder A.H. et al. Repression of Six3 by a corepressor regulates rhodopsin expression // Proc Natl Acad Sci USA, 2007. 104(32): p. 13128-33.

184. Mao J., Liu S., Wen D., Tan X. et al. Basic fibroblast growth factor suppresses retinal neuronal apoptosis in form-deprivation myopia in chicks // Curr Eye Res, 2006. 31(11): p. 983-7.

185.Marquardt T., Gruss P. Generating neuronal diversity in the retina: one for nearly all // Trends Neurosci, 2002. 25(1): p. 32-8.

186.Marquardt T., Ashery-Padan R., Andrejewski N., Scardigli R. et al. Pax6 is required for the multipotent state of retinal progenitor cells // Cell, 2001. 105(1): p. 43-55.

187. Marquardt T. Transcriptional control of neuronal diversification in the retina // Prog Retin Eye Res, 2003. 22(5): p. 567-77.

188. Martinez-Morales J.R., Rodrigo I., Bovolenta P. Eye development: a view from the retina pigmented epithelium // Bioessays, 2004. 26(7): p. 766-77.

189. Martinez-Morales J.R., Signore M., Acampora D., Simeone A. et al. Otx genes are required for tissue specification in the developing eye // Development, 2001. 128(11): p. 2019-30.

190. Martinez-Morales J.R., Dolez V., Rodrigo I., Zaccarini R. et al. OTX2 activates the molecular network underlying retina pigment' epithelium differentiation// J Biol Chem, 2003. 278(24): p. 21721-31.

191. Mathers P.H., Jamrich M. Regulation of eye formation by the Rx and pax6 homeobox genes // CelPMol Life Sci; 2000. 57(2): p. 186-94.

192.McCabe K.L., McGuire C., Reh T.A. Pea3 expression is regulated by FGF signaling in developing retina // Dev Dyn, 2006. 235(2): p. 327-35.

193.McDevitt D.S., Brahma S.K., Courtois Y., Jeanny J.C. Fibroblast growth factor receptors and regeneration of the eye lens // Dev. Dyn. 1997. 208: 220226.

194.McFarlane S., Cornel E., Amaya E., Holt C.E. Inhibition of FGF receptor activity in retinal ganglion cell axons causes errors in target recognition // Neuron, 1996. 17(2): p. 245-54.

195.McFarlane S., Zuber M.E., Holt C.E. A role for the fibroblast growth factor receptor in cell fate decisions in the developing vertebrate retina // Development, 1998. 125(20): p. 3967-75.

196.McWhirter J.R., Goulding M., Weiner J.A., Chun J. et al. A novel fibroblast growth factor gene expressed in the developing nervous system is a downstream target of the chimeric homeodomain oncoprotein E2A-Pbxl // Development, 1997. 124(17): p. 3221-32.

197. Miller D.L., Ortega S., Bashayan O., Basch R. et al. Compensation by fibroblast growth factor 1 (FGF1) does not account for the mild phenotypic defects observed in FGF2 null mice // Mol Cell Biol, 2000. 20(6): p. 2260-8.

198.Mitashov V.I., Arsanto J.P., Markitantova Y.V., Thouveny Y. Remodeling processes during neural retinal regeneration in adult urodeles: an immunohistochemical survey // Int J Dev Biol, 1995. 39(6): p. 993-1003.

199. Mitashov V.I. Mechanisms of retina regeneration in urodeles // Int J Dev Biol, 1996. 40(4): p. 833-44.

200. Mitashov V.I. Retinal regeneration in amphibians // Int J Dev Biol, 1997. 41(6): p. 893-905.

201.Mitashov V.I., Starostin V.I., Sludskaia A.I., Parshina E.F. 3H-thymidine incorporation into the macrophages in the process of eye regeneration in» adult tritons // Ontogenez, 1979. 10(4): p. 365-71.

202. Mitsuda S., Yoshii C., Ikegami Y., Araki M.' Tissue interaction between the retinal pigment epithelium and the* choroid triggers retinal regeneration of the newt Cynops pyrrhogaster // Dev Biol, 2005. 280(1): p. 122-32.

203.Mizuno N., Agata K., Sawada K., Mochii M. et al. Expression of crystallin genes in embryonic and regenerating newt lenses // Dev Growth Differ, 2002. 44(3): p. 251-6.

204. Mizuno N., Mochii M., Yamamoto T.S., Takahashi T.C. et al. Pax-6 and Prox 1 expression during lens regeneration from Cynops iris and Xenopus cornea: evidence for a genetic program common to embryonic lens development // Differentiation; 1999. 65(3): p. 141-9. r

205. Mochii M., Ono T., Matsubara Y., Eguchi G. Spontaneous transdifferentiation of quail pigmented epithelial cell is accompanied by a mutation in the Mitf gene//Dev Biol, 1998. 196(2): p. 145-59.

206. Moon R.T. Teaching resource. Canonical Wnt/beta-catenin signaling // Sci STKE, 2004. 2004(240): p. tr5.

207. Moustakas A. Smad signalling network // J. Cell. Sci. 2002. 115 (Pt 17): 3355-6.

208.Murali D., Yoshikawa S., Corrigan R.R., Plas D.J. et al. Distinct developmental programs require different levels of Bmp signaling during mouse retinal development // Development, 2005. 132(5): p. 913-23.

209. Nakamura K., Chiba C. Evidence for Notch signaling involvement in retinal regeneration of adult newt // Brain Res, 2007. 1136(1): p. 28-42.

, 210. Nakamura R.E., Hunter D.D., Yi H., Brunken W.J. et al. Identification of two

novel activities of the Wnt signaling regulator Dickkopf 3 and

T characterization of its expression in the mouse retina // BMC Cell Biol, 2007.

r

8: p. 52.

211.Nakayama A., Nguyen M.T., Chen'C.C., Opdecamp K. et al. Mutations in microphthalmia,, the mouse homolog of the human deafness gene MITF, affect neuroepithelial and' neural crest-derived melanocytes differently // MechDev, 1998. 70(1-2): p. 155-66.

212*.NegishL K., Shinagawa S., Ushijima M., Kaneko Y. et al. An immunohistochemical study of regenerating newt retinas // Brain Res Dev Brain Res, 1992. 68(2): p. 255-64.

213.Neill J.M., Barnstable C.J. Expression of the cell surface antigens RET-PE2 and N-CAM by rat retinal pigment epithelial cells during development and in tissue culture // Exp Eye Res, 1990. 51(5): p. 573-83.

214. Nelson B.R., Gumuscu B., Hartman B.H., Reh T.A. Notch activity is downregulated just prior to retinal ganglion cell differentiation // Dev Neurosci, 2006. 28(1-2): p. 128-41.

215. Nguyen M., Arnheiter H. Signaling and transcriptional regulation in, early mammalian eye development: a link between FGF and MITF // Development, 2000. 127(16): p. 3581-91.

216.Nishida A., Furukawa A., Koike C., Tano Y. et al. Otx2 homeobox gene controls retinal photoreceptor cell fate and pineal gland development // Nat Neurosci, 2003. 6(12): p. 1255-63.

217.0'Driscoll C., O'Connor J., O'Brien C.J., Cotter T.G. Basic fibroblast growth factor-induced protection from light damage in the mouse retina in vivo // J Neurochem, 2008. 105(2): p. 524-36.

218. Ohkubo Y., Chiang C., Rubenstein J.L. Coordinate regulation and synergistic actions of BMP4, SHH and FGF8 in the rostral prosencephalon regulate

; morphogenesis of the telencephalic and optic vesicles // Neuroscience, 2002.

111(1): p. 1-17.

219. Ohsawa R., Kageyama R. Regulation of retinal cell fate specification by multiple transcription factors // Brain Res, 2008. 1192: p. 90-8.

ty

220. Ohtsuka T., Sakamoto M., Guillemot F., Kageyama R. Roles of the basic helix-loop-helix genes Hesl and Hes5 in expansion of neural stem cells of the developing brain // J Biol Chem, 2001. 276(32): p. 30467-74.

221L.Op Hi, Ghiba- G. et at. The: appearance; and; maturation, of excitatory and inhibitory neurotransmitter sensitivity during retinal regeneration of the adult newt //Neurosci Res, 2003.47(1): 117-29.

222. Oliver G., Mailhos A., Wehr R., Copeland N.G. et at. Six3, a murine homologue of the sine oculis gene, demarcates the most anterior border of the developing neural plate and is expressed during eye development // Development, 1995. 121(12): p. 4045-55.

223. Oliver G., Loosli F., Koster R., Wittbrodt J. et al. Ectopic lens induction in fish in response to the murine homeobox gene Six3 // Mech Dev, 1996. 60(2): p. 233-9.

224. Osakada F., Ooto S., Akagi T., Mandai M. et al. Wnt signaling promotes regeneration in the retina of adult mammals // J Neurosci, 2007. 27(15): p. 4210-9.

225. Pan Y., Martinez-De Luna R.I., Lou C.H., Nekkalapudi S. et al. Regulation of photoreceptor gene expression by the. retinal homeobox (Rx) gene product // Dev Biol. 339(2): p. 494-506.

226. Park C.M., Hollenberg M.J. Induction of retinal regeneration in vivo by growth factors // Dev Biol, 1991. 148(1): p. 322-33.

227.Patstone G., Pasquale E.B., Maher P.A. Different members of the fibroblast growth factor receptor family are specific to distinct cell types in the developing chicken embryo//Dev Biol, 1993. 155(1): p. 107-23.

228. Perron J.C., Bixby J.L. Distinct neurite outgrowth signaling pathways converge on ERK activation // Mol Cell Neurosci, 1999. 13(5): p. 362-78.

229. Perron M., Opdecamp K., Butler K., Harris W.A. et al. X-ngnr-1 and Xath3 promote ectopic expression of sensory neuron markers in the neurula ectoderm and have distinct inducing properties in the retina // Proc Natl Acad Sci USA, 1999. 96(26): p. 14996-5001.

23(K Perron- M*l, Kanekar S., Vetter MiE., Harris W. A. The genetic sequence of retinal' development in the ciliary margin' of the Xenopus eye // Dev Biol -. 1998. 199(2): p. 185-200.

231. PetersM-A*:, Cepko;ClE. The dorsal-ventral axis of the neural retina is divided into?multiple domains;of restricted gene: expression* which exhibit features of lineage compartments // Dev Biol; 2002. 251(1): p. 59-73:

232. Pfaffl M. W., Horgan G. W., et al. Relative expression software tool (REST) for group-wise comparison and statistical analysis of relative expression results in real-time.PCR'// Nucleic Acids Res. 2002.30(9): e36.

233.Pittack C., Grunwald G.B., Reh T.A. Fibroblast growth factors are necessary for neural retina but not pigmented epithelium differentiation in chick embryos // Development; 1997. 124(4): p. 805-16:

234.Pittak G., Jones M., Reh T.A. Basic fibroblast growth factor induces retinal pigment epithelium to generate neural retina in vitro // Development. 1991. 113: p. 577-588.

235.Planque N., Leconte L., Coquelle F.M., Martin V. et al. Specific Pax-6/microphthalmia transcription factor interactions involve their DNA-binding domains and inhibit transcriptional properties of both proteins // J Biol Chem, 2001. 276(31): p: 29330-7.

236.Planque N., Turque N., Opdecamp K., Bailly M. et al. Expression of the microphthalmia-associated basic helix-loop-helix leucine zipper transcription factor Mi in avian neuroretina cells induces a pigmented phenotype // Cell Growth Differ, 1999. 10(7): p. 525-36.

237.Prada C., Puga J., Perez-Mendez L., Lopez. Spatial and Temporal Patterns of Neurogenesis in the Ghick Retina // Eur J Neurosci, 1991. 3(11): p. 1187.

238. Pressman C.L., Chen H., Johnson R.L. LMX1B, a LIM homeodomain class transcription factor, is necessary for normal development of multiple tissues in the anterior segment of the murine eye // Genesis, 2000. 26(1): p. 15-25.

239. Pujic Z., Malicki J. Retinal pattern and the genetic basis of its formation in zebrafish // Semin Cell Dev Biol, 2004. 15(1): p. 105-14.

240. Quiring R., Walldorf U., Kloter U., Gehring W.J. Homology of the eyeless gene of Drosophila.to the Small eye gene in mice and Aniridia in humans // Science, 1994. 265(5173): p. 785-9.

241. Rath M.F., Morin F., Shi Q., Klein D.C. et ah Ontogenetic expression of the Otx2 and Crx homeobox- genes in the retina of the rat // Exp Eye Res, 2007. 85(1): p. 65-73.

242. Raymond P.A., Barthel L.K., Bernardos R.L., Perkowski J.J. Molecular characterization of retinal stem cells and their niches in adult zebrafish // BMC Dev Biol, 2006. 6: p. 36.

243. Reh T.A., Nagy T. A possible role for the vascular membrane in retinal regeneration in Rana catesbienna tadpoles // Dev Biol, 1987. 122(2): p. 47182.

244. Reh T.A., Nagy T., Gretton H. Retinal pigmented epithelial cells induced to transdifferentiate to neurons by laminin //Nature, 1987. 330(6143): p. 68-71.

245. Rehak M., Hollborn M., Iandiev I., Pannicke T. et al. Retinal gene expression and Muller cell responses after branch retinal vein occlusion in the rat // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2009. 50(5): p. 2359-67.

s

246.Reyer R.W. The amphibian eye: development and regeneration // In: Handbook of Sensory Physiology. V.II. Part 5: The visual system in vertebrates (F.Crescitelli, ed.), Springer-Verlag, Berlin - Heidelberg - New-York. 1977. P. 309-390.

247. Reyer R.W. DNA synthesis and the incorporation of labeled iris cells into the lens during lens regeneration in adult newts // Dev Biol, 1971. 24(4): p. 533-58.

248.Reza H.M., Takahashi Y., Yasuda K. Stage-dependent expression of Pax6 in optic vesicle/cup regulates patterning genes through signaling molecules // Differentiation, 2007. 75(8): p. 726-36.

249. Robinson M. L. An essential role for FGF receptor signaling in lens development// Semin Cell Dev Biol, 2006, 17(6): 726-40.

250. Rossi E., Siwiec F., Yan C.Y. Pattern of Wnt ligand expression-during chick eye development // Braz J Med'Biol Res, 2007. 40(10): p. 1333-8.

251. Rothermel A., Layer P.G. GDNF regulates chicken rod photoreceptor development and survival in reaggregated histotypic retinal spheres // Invest Ophthalmol1 Vis Sci; 2003. 44(5): p. 2221-8.

252. Rowan S., Cepko C.L. Genetic analysis of the homeodomain transcription factor ChxlO in the retina using a novel multifunctional BAC transgenic mouse reporter // Dev Biol, 2004. 271(2): p. 388-402.

253.Rutherford A.D., Dhomen N., Smith H.K., Sowden J.C. Delayed expression of the Crx gene and photoreceptor development in the ChxlO-deficient retina // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2004. 45(2): p. 375-84.

254. Saito T., Kaneko Y., Maruo F., Niino M. et al. Study of the regenerating newt retina by electrophysiology and immunohistochemistry (bipolar- and cone-specific antigen localization) // J Exp Zool, 1994. 270(6): p. 491-500.

255. Sakaguchi D.S., Janick L.M., Reh T.A. Basic fibroblast growth factor (FGF-2) induced transdifferentiation of retinal pigment epithelium: generation of retinal neurons and glia // Dev Dyn, 1997. 209(4): p. 387-98.

256. Sakakibara S., Hiramatsu H., Takahashi Y., Hisatomi O. et al. Opsin expression in adult, developing, and regenerating newt retinas // Brain Res Mol Brain Res, 2002. 103(1-2): p. 28-35.

257. Sakami S., Hisatomi O., Sakakibara S., Liu J. et al. Downregulation of Otx2 in the dedifferentiated RPE cells of regenerating newt retina // Brain Res Dev Brain Res, 2005. 155(1): p. 49-59.

258. Sakami S., Etter P., Reh T.A. Activin signaling limits the competence for retinal regeneration from the pigmented epithelium // Mech Dev, 2008. 125(1-2): p. 106-16.

259. Sakuta H., Suzuki R., Takahashi H., Kato A. et al. Ventroptin: a BMP-4 antagonist expressed in a double-gradient pattern in the retina // Science, 2001.293(5527): p. 111-5.

260. Sanford L.P., Ormsby I., Gittenberger-de Groot A.C., Sariola* H. et al. TGFbeta2 knockout mice have multiple developmental defects that are non-overlapping with other TGFbeta knockout phenotypes // Development, 1997. 124(13): p. 2659-70.

261. Sapieha P.S., Peltier' M., Rendahl K.G., Manning W.C. et al. Fibroblast growth factor-2 gene delivery stimulates axon growth by adult retinal ganglion cells after acute optic nerve injury // Mol Cell Neurosci, 2003. 24(3): p. 656-72.

262. Sapieha P.S., Hauswirth W.W., Di Polo A. Extracellular signal-regulated kinases are required for adult retinal ganglion cell axon regeneration induced by fibroblast growth factor-2 // J Neurosci Res, 2006. 83(6): p. 98595.

263.Sasagawa S., Takabatake T., Takabatake Y., Muramatsu T. et al. Axes establishment during eye morphogenesis in Xenopus by coordinate and antagonistic actions of BMP4, Shh, and RA // Genesis, 2002. 33(2): p. 86-96.

264. Schmitt S., Aftab U., Jiang C., Redenti S. et al. Molecular characterization of human retinal progenitor cells // Invest Ophthalmol Vis Sei, 2009. 50(12): p. 5901-8.

265. Schuurmans C., Guillemot F. Molecular mechanisms underlying cell fate specification in the developing telencephalon // Curr Opin Neurobiol, 2002. 12(1): p. 26-34.

266. Schwarz M., Cecconi F., Bernier G., Andrejewski N. et al. Spatial specification of mammalian eye territories by reciprocal transcriptional repression of Pax2 and Pax6 // Development, 2000. 127(20): p. 4325-34.

267. Semina E.V., Reiter R., Leysens N.J., Alward W.L. et al. Cloning and characterization of a novel bicoid-related homeobox transcription factor gene, RIEG, involved in Rieger syndrome //Nat Genet, 1996. 14(4): p. 392-9.

268. Shi X., Bosenko D.V., Zinkevich N.S., Foley S. et al. Zebrafish pitx3 is necessary for normal lens and retinal development // Mech Dev, 2005. 122(4): p. 513-27.

269. Shi Y., Sun G., Zhao C., Stewart R. Neural stem, cell-self-renewal // Crit Rev Oncol Hematol, 2008. 65(1): 43-53.

270. Sigulinsky C.L., Green E.S., Clark A.M., Levine E.M. Vsx2/Chxl0 ensures the correct timing and magnitude of Hedgehog signaling in the mouse retina // Dev Biol, 2008. 317(2): p. 560-75.

271.Simeone A., Acampora D. The role of Otx2 in organizing the anterior patterning in mouse // Int J Dev Biol, 2001. 45(1): p. 337-45.

272. Sjogreen B., Wiklund P., Ekstrom P.A. Mitogen activated protein kinase inhibition by PD98059 blocks nerve growth factor stimulated axonal outgrowth from adult mouse dorsal root ganglia in vitro // Neuroscience, 2000. 100(2): p. 407-16.

273. Smith W. C. TGF beta inhibitors. New and unexpected requirements in vertebrate development//Trends Genet, 1999, 15(1): 3-5.

274. Soto I., Marie B., Baro D.J., Blanco R.E. FGF-2 modulates expression and distribution of GAP-43 in frog retinal ganglion cells after optic nerve injury // J Neurosci Res, 2003. 73(4): p. 507-17.

275. Spence J.R., Madhavan M., Aycinena J.C., Del Rio-Tsonis K. Retina regeneration in the chick embryo is not induced by spontaneous Mitf downregulation but requires FGF/FGFR/MEK/Erk dependent upregulation of Pax6 // Mol Vis, 2007. 13: p. 57-65.

276. Spence J.R., Madhavan M., Ewing J.D., Jones D.K. et al. The hedgehog pathway is a modulator of retina regeneration // Development, 2004. 131(18): p. 4607-21.

277.Stocum D.L. Wound repair, Regeneration, Artifitial Tissues. 1995. SpringerVerlag. 230 pp

278. Stone L.S. The role of retinal pigment cells in regenerating neural retina of adult salamander eye // J. Exp. Zool. 1950. V.l 13-P. 9-31.

279.Stroeva O.G., Mitashov V.I. Retinal pigment epithelium: proliferation and differentiation during development and regeneration // Int Rev Cytol, 1983. 83: p. 221-93.

280. Susaki K., Chiba C. MEK mediates in vitro neural transdifferentiation of the adult newt retinal pigment epithelium cells: Is FGF2 an induction factor? // Pigment Cell Res, 2007. 20(5): p. 364-79.

281.Takeda K., Yasumoto K., Kawaguchi N., Udono T. et al. Mitf-D, a newly identified isoform, expressed in the retinal pigment epithelium and monocyte-. lineage cells affected by Mitf mutations // Biochim Biophys Acta, 2002. 1574(1): p. 15-23.

282. Tcheng M., Fuhrmann G., Hartmann M.P., Courtois Y. et al. Spatial and temporal expression patterns of FGF receptor genes type 1 and type 2 in the developing chick retina // Exp Eye Res, 1994. 58(3): p. 351-8.

283.Tomarev S.I., Sundin O., Banerjee-Basu S., Duncan M.K. Chicken homeobox gene Proxl related to Drosophila prospero is expressed in the developing lens and retina // Dev.Dyn. 1996. 206: p.354-367

284.Tomarev S.I., Callaerts P., Kos L., Zinovieva R. et al. Squid Pax-6 and eye development // Proc Natl Acad Sci USA, 1997. 94(6): p. 2421-6.

285. Toy J., Norton J.S., Jibodh S.R., Adler R. Effects of homeobox genes on the differentiation of photoreceptor and nonphotoreceptor neurons // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2002. 43(11): p. 3522-9.

286. Tropepe V., Coles B.L., Chiasson B.J., Horsford D.J. et al. Retinal stem cells in the adult mammalian eye // Science, 2000. 287(5460): p. 2032-6.

287. Trousse F., Esteve P., Bovolenta P. Bmp4 mediates apoptotic cell death in the developing chick eye // J Neurosci, 2001. 21(4): p. 1292-301.

288. Tsukiji N., Nishihara D., Yajima I., Takeda K. et al. Mitf functions as an in ovo regulator for cell differentiation and proliferation during development of the chick RPE // Dev Biol, 2009. 326(2): p. 335-46.

289.Tyas D.A., Simpson T.I., Carr C.B., Kleinjan D.A. et al. Functional conservation of Pax6 regulatory elements in humans and mice demonstrated with a novel transgenic reporter mouse // BMC Dev Biol, 2006. 6: p. 21.

290. Van Raamsdonk C.D., Tilghman S.M. Dosage requirement and allelic expression of PAX6i during lens placode, formation // Development, 2000. 127(24): p. 5439-481

291". Van Raay T.J:, Moore K.B., Iordanova I., Steele M; et al. Frizzled 5'signaling governs the neural-potential of progenitors in'the developing Xenopus retina // Neuron; 2005. 46(1): p. 23-36.

292. Vergara M.N., Del Rio-Tsonis K. Retinal regeneration in the Xenopus laevis tadpole: a new model system // Mol Vis, 2009. 15: p. 1000-13.

293. Viczian A.S., Vignali R., Zuber M.E., Barsacchi G. et al. XOtx5b and XOtx2 regulate photoreceptor and bipolar fates in the Xenopus retina // Development, 2003. 130(7): p. 1281-94.

294. Vogel-Hopker A., Momose T., Rohrer H., Yasuda K., et al. Multiple functions of fibroblast growth factor-8 (FGF-8) in chick eye development // Mech Dev, 2000. 94(1-2): p. 25-36.

295. Wachs H. Restitution des Auges nach Extirpation von Retina and Linse bei Triton (Neue Versuche zur Wolffschen Linsenregeneration, 2. Teil) // Roux' Arch. Entwicklungsmech. Organismen. 1920. Bd. 46. S. 328-390.

296. Wallace V. A., Raff M. C. A role for Sonic hedgehog in axon-to-astrocyte signalling in the rodent optic nerve // Development, 1999, 126(13): 2901-9.

297. Wanaka A., Milbrandt J., Johnson E.M. Jr. Expression of FGF receptor gene in rat development // Development, 1991. 111(2): p. 455-68.

298. Wang S.W., Kim B.S., Ding K., Wang H. et al. Requirement for math5 in the development of retinal ganglion cells // Genes Dev, 2001. 15(1): p. 24-9.

299. Wang Y., Dakubo G.D., Thurig S., Mazerolle C.J. et al. Retinal ganglion cell-derived sonic hedgehog locally controls proliferation and the timing of RGC development in the embryonic mouse retina // Development, 2005. 132(22): p. 5103-13.

300. Wargelius A., Seo H.C., Austbo L., Fjose A. Retinal expression of zebrafish six3.1 and its regulation by Pax6 // Biochem Biophys Res Commun, 2003. 309(2): p. 475-81.

301. Wenzel A., Grimm C., Samardzija M., Reme G.E. Molecular mechanisms of light-induced- photoreceptor apoptosis and neuroprotection for retinal degeneration // Prog Retin Eye Res, 2005. 24(2): p: 275-306.

302. Wiklund-P., Ekstrom P.A., Edstrom A. Mitogen-activated protein kinase inhibition reveals differences im signalling1 pathways' activated by neurotrophin-3 and other growth-stimulating conditions of adult mouse dorsal root ganglia neurons // J Neurosci Res, 2002. 67(1): p. 62-8.

303. Wilke T.A., Gubbels S., Schwartz J., Richman J.M. Expression of fibroblast growth factor receptors (FGFR1, FGFR2, FGFR3) in the developing head and face // Dev Dyn, 1997. 210(1): p. 41-52.

304. Wilson S.W., Houart C. Early steps in the development of the forebrain // Dev Cell, 2004. 6(2): p. 167-81.

305. Xia K., Wu L., Liu X., Xi X. et al. Mutation in PITX2 is associated with ring dermoid of the cornea // J Med Genet, 2004. 41(12): p. el29.

306. Xu H., Sta Iglesia D.D., Kielczewski J.L., Valenta D.F. et al. Characteristics of progenitor cells derived from adult ciliary body in mouse, rat, and human eyes // Invest Ophthalmol Vis Sci, 2007. 48(4): p. 1674-82.

307. Yamada T., Dumont J.N. Macrophage activity in Wolffian lens regeneration // J Morphol, 1972. 136(3): p. 367-83.

308. Yang E.V., Wang L., Tassava R.A. Effects of exogenous FGF-1 treatment on regeneration of the lens and the neural retina in the newt, Notophthalmus viridescens // J Exp Zool A Comp Exp Biol, 2005. 303(10): p. 837-44.

309. Yang X. J. Roles of cell-extrinsic growth factors in vertebrate eye pattern formation and retinogenesis // Semin Cell Dev Biol, 2004, 15(1): 91-103.

310. Zhang S. Sh., Fu X-Yu., Barnstable C.J. Molecular Aspects of Vertebrate Retinal Development // Molecular Neurobiology. 2002. 26: p. 136 - 152.

311. Zhang L., Mathers P.H., Jamrich M. Function of Rx, but not Pax6, is essential for the formation of retinal progenitor cells in mice // Genesis, 2000. 28(3-4): p. 135-42.

312. Zhang, X.M., Yang X.J. Temporal and spatial effects of Sonic hedgehog signaling in chick eye morphogenesis // Dev Biol, 2001. 233(2): p. 271-90.

313. Zhao S., Overbeek P.A. Tyrosinase-related protein 2 promoter targets transgene expression to ocular and neural crest-derived tissues // Dev Biol, 1999. 216(1): p. 154-63.

314. Zhao S., Hung F.C., Colvin J.S., White A. et al. Patterning the optic neuroepithelium by FGF signaling and Ras activation // Development, 2001. 128(24): p. 5051-60.

315. Zhao S., Thornquist S.C., Barnstable C.J. In vitro transdifferentiation of embryonic rat retinal pigment epithelium to neural retina // Brain Res, 1995. 677(2): p. 300-10.

316. Zhou Y., Opas M. Cell shape, intracellular pH, and fibroblast growth factor responsiveness during transdifferentiation of retinal pigment epithelium into neuroepithelium in vitro // Biochem Cell Biol, 1994. 72(7-8): p. 257-65.

317. Zhou Z.D., Kumari U., Xiao Z.C., Tan E.K. Notch as a molecular switch in neural stem cells // IUBMB Life. 62(8): p. spcone.

Автор выражает благодарность своему научному руководителю, д. б. н. Элеоноре Норайровне Григорян, а также к. б. н. Юлии Владимировне Маркитантовой, д.б.н. Рине Дмитриевне Зиновьевой, д.б.н., проф. Ольге Георгиевне Строевой, д.б.н. Любови Михайловне Кожевниковой.