Экспериментальные, морфологические и клинические исследования для выбора тактики лечения бактериальных язв роговицы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.07, кандидат наук Голикова Виктория Алексеевна

• Голикова Виктория Алексеевна
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Голикова Виктория Алексеевна

Список сокращений

Введение

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Экспериментальные модели бактериальной язвы роговицы у кроликов

1.2 Эпидемиология язв роговицы

1.3 Региональные особенности в этиологии бактериальных язв

роговицы

1.4 Классификация язв роговицы

1.5 Современные представления о патогенезе язвенного процесса в роговице бактериальной этиологии

1.6 Основные принципы лечения бактериальных язв роговицы

1.7 Роль кортикостероидов в лечении бактериальной язвы роговицы

1.8 Кросслинкинг как метод лечения бактериальных язв роговицы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

2.1 Материал и экспериментальные методы исследования

2.1.1 Экспериментальная модель бактериальной язвы роговицы

2.1.2 Характеристика экспериментального материала исследования алгоритмов консервативного лечения бактериальной язвы

роговицы

2.1.3 Устройство для проведения локального ультрафиолетового кросслинкинга роговицы

2.1.4 Характеристика экспериментального материала исследования алгоритма лечения с помощью локального ультрафиолетового кросслинкинга

2.1.5 Методы оценки алгоритмов лечения бактериальных язв роговицы в эксперименте

2.1.6 Патогистологическая оценка эксперимента

2.2 Материал и клинические методы исследования

2.2.1 Характеристика клинического материала

2.2.2. Шкала оценки степени тяжести язв роговицы

2.2.3 Офтальмологические методы исследования

2.2.4 Оценка язвы роговицы на основе оптической когерентной томографии переднего отдела глаза

2.3 Статистические методы анализа результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ

ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Результаты оценки течения воспалительного процесса при различных алгоритмах лечения экспериментальных бактериальных язв роговицы

3.1.1 Оценка диаметра язвенного дефекта в эксперименте с помощью балльной шкалы

3.1.2. Оценка общего воспалительного процесса в эксперименте

3.1.3 Оценка язвенного дефекта в эксперименте с помощью оптической когерентной томографии переднего отдела глаза

3.1.4 Оценка интенсивности помутнения роговицы в исходе экспериментального лечения

3.1.5 Патогистологические результаты

3

3.1.6 Результаты лечения экспериментальных бактериальных язв роговицы с применением различных алгоритмов лечения

3.2 Результаты оценки алгоритма лечения бактериальных язв роговицы с помощью локального ультрафиолетового кросслинкинга

3.2.1. Оценка пропускания тканями глаза ультрафиолетового излучения, генерируемого устройством для локального кросслинкинга

3.2.2 Оценка диаметра язвенного дефекта в эксперименте с помощью балльной шкалы

3.2.3 Оценка общего воспалительного процесса в эксперименте с помощью балльной шкалы

3.2.4 Оценка интенсивности помутнения роговицы в исходе эксперимента

3.2.5 Патогистологическая оценка эксперимента

3.2.6 Результаты лечения бактериальных язв роговицы с помощью локального ультрафиолетового кросслинкинга

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.1 Сравнительное исследование результатов лечения бактериальных язв роговицы с учетом разработанной шкалы оценки степени их тяжести

4.2 Клинические примеры

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АБ - антибактериальная терапия БЯР - бактериальные язвы роговицы ВГД - внутриглазное давление

МКОЗ - максимальная корригированная острота зрения

ОКТ-ПОГ - оптическая когерентная томография переднего отдела глаза

ПБ - парабульбарные инъекции

УФА - ультрафиолетовый

ё - диаметр язвенного дефекта по данным оптической когерентной томографии переднего отдела глаза

Кг - коэффициент глубины язвенного дефекта по данным оптической когерентной томографии переднего отдела глаза

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальные, морфологические и клинические исследования для выбора тактики лечения бактериальных язв роговицы»

ВВЕДЕНИЕ

Язвенные поражения роговицы составляют от 47 до 70% всех заболеваний роговицы. По данным литературы, язвы роговицы в 23-25% случаев осложнены токсико-аллергическими реакциями, гипопионом, десцеметоцеле, угрозой перфорации роговицы, в 17% - заканчиваются энуклеацией (Leibovitch I. et al., 2005, Бржеский В. В., 2006, Каспаров А. А., 2010, Майчук Ю. Ф., 2010, Слонимский Ю. Б., 2010).

По данным ВОЗ роговичная слепота является четвертой причиной слепоты, составляя 5,1% во всем мире и 5,9% в Российской Федерации. Язвы роговицы в структуре роговичной слепоты занимают 9%. (Pascolini D., Mariotti S.P.M., 2010). Значимость проблемы подтверждает тот факт, что за двенадцатилетний период, начиная с 2000 года, в отделе инфекционных и аллергических заболеваний глаз МНИИ ГБ им. Гельмгольца находилось на лечении 1620 пациентов с диагнозом язва роговицы, в то время как за шестилетний период с 2013 по 2019 годы - уже 1918 пациентов. Наиболее распространенными являлись язвы бактериальной этиологии. Они составили 38% от всех язвенных поражений роговицы. (Нероев В.В, Яни Е.В., 2015).

Существует множество классификаций язв роговицы, основанных на патогенезе, степени тяжести, локализации воспалительного процесса, его глубине и протяженности, формах и фазах течения, наличии таких осложнений, как перфорации, гипопион и др. (Кунт, 1887, Скрипченко З.М. и соавт., 1978, Осташевский В.Л., Горгиладзе Т.У., 1984, Каспаров А. А. и соавт., 1987, Майчук Ю.Ф., 2000, Степанов В.К., 2006, Шаимова В.А., 2007). Но до сих пор отсутствует универсальная классификация, учитывающая все возможные параметры в шкале оценки тяжести течения, выражающая их в количественном отношении, классификация, создающая дополнительный информационный объем и позволяющая использовать наиболее эффективные схемы терапии. Проблема эффективного лечения бактериальных язв роговицы и регенерации роговичной

ткани остается актуальной, несмотря на большой арсенал лекарственных препаратов, как в России, так и за рубежом (Leibovitch I., et al., 2005).

Трудность лечения данного состояния обусловлена многогранностью

патогенеза язвенного процесса. Воспаление при бактериальном язвенном

поражении роговицы может стать мощным триггером ангиогенеза (Chang J.H. et

al., 2012, Shaik-Dasthagirisaheb Y.B. et al., 2013, Shintaro N. et al., 2012).

Привлеченные в очаг поражения лейкоциты продуцируют проангиогенные

цитокины, способствующие дальнейшему прорастанию сосудов и образованию

более грубого васкуляризированного бельма, снижая функциональный прогноз по

зрению. Таким образом, процессы, приводящие к рубцеванию и неоваскуляризации

при бактериальных язвах роговицы, требуют активного регулирования с помощью

консервативной терапии с самых ранних стадий заболевания. С учетом этиологии

в консервативном лечении бактериальных язв роговицы основное место занимает

антибактериальная терапия. Местные антибактериальные препараты, выбранные с

учетом чувствительности инфекционного агента, являются препаратами первой

линии терапии данного заболевания. (SchmackI. et al., 2018; Austin А., Lietman Т. et

al., 2017) Однако с современных позиций патогенеза общепринятые алгоритмы

лечения бактериальных язв роговицы требуют дополнительного включения

препаратов, влияющих на разные стадии патогенеза. На сегодняшний день

стероидная терапия является стандартным противовоспалительным и

антиангиогенным лечением пациентов с неоваскуляризацией роговицы после

трансплантации роговицы. Использование кортикостероидов при лечении

бактериального кератита и язв роговицы в литературе также обсуждается давно

(Acharya N.R. et al., 2009; Cohen E.J.M. et al., 2009; Hindman H.B. et al., 2009). Ранее

в отделе инфекционных и аллергических заболеваний глаз ФГБУ «НМИЦ глазных

болезней им. Гельмгольца» проводилось исследование системного клеточного

иммунного ответа на антигены роговицы у пациентов с центральными язвами

роговицы инфекционной природы. (Нероев В.В., Ковалева Л.А. и соав., 2016).

Выявлено, что 30% пациентов с центральными язвами роговицы имели

тканеспецифическую аутосенсибилизацию, в связи с чем было показано

7

клинически, что применение кортикостероидов у данной группы пациентов давало высокие результаты в лечении инфекционных язв и сокращало сроки выздоровления. Сторонники использования кортикостероидов утверждают, что они улучшают результаты лечения за счет уменьшения воспаления, рубцевания, неоваскуляризации и стромального расплавления (Den S. et al., 2004; Yi K. et al. 2011). Однако другие авторы утверждают, что кортикостероиды замедляют эпителиальное заживление и могут даже ухудшить течение инфекционного процесса (Chung J.H. et al., 1998, Tomas-Barberan S. et al., 1999; Gritz D.C. et al., 1992). Таким образом, целесообразность использования кортикостероидов и их включения в алгоритм лечения бактериальных язв роговицы остается спорной (Srinivasan M. et al., 2012). В настоящее время отсутствуют четкие схемы лечения бактериальных язв роговицы, включающие кортикостероидную терапию, а действие кортикостероидов на процессы репарации и регенерации роговичной ткани при язвенном процессе и характеристика новообразованной рубцовой ткани недостаточно изучены, что дает основание для проведения подобного рода исследований, поиска и разработки новых алгоритмов терапии бактериальных язв роговицы.

Альтернативным методом лечения бактериальных язвенных поражений

роговицы является ультрафиолетовый (УФА) кросслинкинг роговичного коллагена

(Alio J.L. et al., 2013). Противоречивые результаты, касающиеся эффективности и

безопасности лечения этого состояния с помощью кросслинкинга, пока

ограничивают его широкое применение в клинической практике. Это в первую

очередь объясняется неоднородностью проанализированных клинических

выборок, включающих когорты больных с различными исходными особенностями,

разными инфекционными возбудителями, различной длительностью течения и

тяжестью заболевания, включая выраженность язвенного дефекта роговицы, а

также отсутствием единого протокола лечения и крупных убедительных

рандомизированных контрольных исследований, что затрудняет обобщение и

сопоставление полученных результатов. Таким образом, в настоящее время нет

единого мнения о наиболее адекватном протоколе лечения бактериальных язв

8

роговицы с помощью коллагенового кросслинкинга. Недавно сотрудниками ФГБУ

«НМИЦ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава России при нашем

участии совместно с Елатомским приборным заводом было разработано новое

устройство для УФА кросслинкинга роговицы («Кросскор») с техническими

характеристиками излучения, соответствующими Дрезденскому протоколу (длина

волны - 365 нм, мощность излучения - 3,0 мВт/см2), которое позволяет варьировать

продолжительность и кратность его проведения, а также площадь зоны

воздействия, поскольку снабжено специальными сменными насадками,

предназначенными для ее формирования в зависимости от размера пораженного

участка роговицы. (Патент №2 199825 от 22.09.2020 «Устройство для кросслинкинга

роговицы».) В отличие от существующего протокола проведения УФА

кросслинкинга при кератоконусе или при гнойной язве роговицы, согласно

которому процедура проводится с помощью стационарной светодиодной

установки в условиях операционной и предусматривает неподвижное

горизонтальное положение пациента (положение лежа), а воздействие направлено

в основном на центральную зону роговицы (Wollensak G.2003, Ченцова Е.В. и

соовт.,2017, Каспарова Евг. А. и соавт., 2017, Shufang Wei et al., 2017),

разработанное портативное устройство позволяет в амбулаторных условиях в

ручном режиме целенаправленно осуществлять кросслинкинг зоны язвенного

поражения любой локализации. В доступной литературе мы нашли лишь

единичные экспериментальные работы, посвященные изучению in vivo

эффективности УФА кросслинкинга на моделях бактериального и грибкового

кератита (Tal K. et al., 2015, Cosar C.B. et al., 2015, Zhu Z. et al., 2018). Однако ни в

одном из этих исследований нет комплексной клинико-морфологической оценки

влияния УФА кросслинкинга на состояние роговицы при ее язвенном поражении,

в том числе описания формирования рубцовой ткани, замещающей язвенный

дефект. Кроме того, экспериментальные модели in vivo не применялись для оценки

технических средств, позволяющих оптимизировать параметры УФА воздействия

и варьировать его режимы для выбора наиболее эффективного лечебного

алгоритма. В связи с вышеизложенным исследование применения

9

кортикостероидных препаратов и локального УФА кросслинкинга для лечения бактериальных язв роговицы на экспериментальных моделях с последующим морфологическим исследованием процессов репарации и регенерации роговичной ткани является актуальным для разработки новых алгоритмов лечения для использования в клинической практике, что явилось основанием для проведения данного исследования.

Цель настоящей работы: выбор тактики лечения бактериальных язв роговицы на основании экспериментальных, морфологических и клинических исследований

Задачи исследования:

1. Разработать экспериментальную модель бактериальной язвы роговицы кролика

2. На экспериментальной модели бактериальной язвы роговицы провести клинико-морфологическое исследование алгоритмов лечения с применением кортикостероидного препарата

3. На экспериментальной модели бактериальной язвы роговицы провести клинико-морфологическое исследование алгоритмов лечения с применением локального ультрафиолетового кросслинкинга с помощью нового устройства «Кросскор».

4. По результатам экспериментальных и морфологических исследований изучить клинические подходы к лечению бактериальных язв роговицы. Разработать шкалу определения степени тяжести язв роговицы с учетом данных клинических, инструментальных и лабораторных исследований и алгоритм лечения бактериальных язв роговицы с учетом шкалы степени тяжести поражения для использования в клинической практике.

Научная новизна

1. Разработана новая патогенетически обоснованная модель бактериальной язвы роговицы кролика, позволяющая контролировать объем повреждения роговицы и не допускающая грубой травматизации ее глубоких слоев.

2. Впервые на экспериментальной модели бактериальной язвы роговицы изучено клинико-морфологическое воздействие различных алгоритмов лечения на процессы репарации и регенерации роговичной ткани.

3. Впервые на экспериментальной модели бактериальной язвы роговицы проведено клинико-морфологическое исследование применения локального ультрафиолетового кросслинкинга с помощью нового устройства «Кросскор» (Патент № 199825 от 22.09.2020 «Устройство для кросслинкинга роговицы») и показана его эффективность.

4. Впервые разработана балльная шкала оценки степени тяжести язв роговицы (Патент № 2718565 от 08.04.2020 «Способ определения степени тяжести язвы роговицы»).

5. Впервые в клинической практике проведено сравнительное исследование результатов лечения бактериальных язв роговицы с учетом разработанной балльной шкалы оценки степени тяжести поражения.

6. Предложенный алгоритм лечения с применением кортикостероидного препарата пациентов с бактериальными язвами роговицы различной степени тяжести патогенетически обоснован на основании полученных морфологических данных.

Практическая и теоретическая значимость

1. Новая экспериментальная модель бактериальной язвы роговицы максимально приближена к таковой у человека, легко воспроизводима, позволяет изучать особенности течения язвенного процесса, оценивать результаты различных методов лечения.

2. На основании клинико-морфологического исследования установлена

возможность действия лекарственных препаратов на процессы регенерации и

11

репарации роговичной ткани путем влияния на различные звенья патогенеза бактериальных язв роговицы и доказана эффективность алгоритма их лечения, включающего применение кортикостероидного препарата. С учетом предложенной балльной шкалы комплексной оценки степени тяжести язвы роговицы, объективно контролирующей течение язвенного процесса в роговице, алгоритм лечения с применением кортикостероидного препарата позволяет сокращать сроки лечения и обеспечивать лучшие функциональные результаты.

3. Полученные клинико-морфологические результаты показали высокую эффективность локального УФА кросслинкинга, проведенного с помощью нового устройства «Кросскор», в лечении экспериментальных бактериальных язв роговицы, что свидетельствует о безусловной перспективности использования этой технологии для лечения язв роговицы бактериальной этиологии в клинической практике.

Методология и методы исследования

Методологической основой диссертационной работы явилось последовательное применение методов научного познания. Работа выполнена в дизайне проспективного когортного открытого исследования с использованием экспериментальных, клинических, инструментальных и статистических методов.

Положения, выносимые на защиту

1. Новая экспериментальная модель бактериальной язвы роговицы патогенетически обоснована и максимально приближена к таковой у человека. Модель легко воспроизводима и позволяет изучать особенности патогенеза язвенного процесса, оценивать результаты различных экспериментальных методов лечения.

2. Учитывая неоднозначное мнение по поводу применения кортикостероидов,

изучен алгоритм экспериментального лечения с использованием

кортикостероидного препарата Дексаметазон. Алгоритм позволяет сократить

сроки выздоровления в сравнении со схемами только антибактериального

12

лечения язвы роговицы у кроликов. Данный эффект достигается за счет быстрого снижения общей воспалительной реакции и уменьшения диаметра язвенного дефекта, в результате чего в исходе заболевания идентифицируются бессосудистые рубцы с мономорфным волокнистым строением фиброзной ткани, что более благоприятно в оптическом отношении.

3. Наряду с консервативным лечением использование локального УФА-кросслинкинга для лечения экспериментальных бактериальных язв роговицы с помощью нового прибора «Кросскор» обеспечивает в короткие сроки формирование высокоупорядоченной новообразованной фиброзной ткани, что имеет большое значение для поддержания прозрачности роговицы и обосновывает перспективность использования данного метода лечения.

4. Разработанная балльная шкала определения степени тяжести язв роговицы позволяет количественно оценить различные параметры воспалительного процесса, помогает выбрать оптимальную терапию, прогнозировать ее продолжительность и объективно оценить результаты лечения.

5. Патогенетически обоснованный алгоритм лечения бактериальных язв роговицы, включающий применение кортикостероидного препарата Дексаметазон в парабульбарных инъекциях по 0,3 мл 1 раз в сутки ежедневно, учитывающий степень тяжести язвенного поражения, показатели толщины роговицы в зоне язвенного дефекта и его диаметра, в сроки от 15 до 25 дней, представляется эффективным при условии инструментального контроля предложенных параметров.

Степень достоверности и апробация результатов работы

Степень достоверности полученных результатов определяется достаточным и репрезентативным объемом выборки данных. Работа выполнена с использованием современных клинических, инструментальных и диагностических методов исследования. Методы статистической обработки полученных результатов адекватны поставленным задачам.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Экспертном Совете по «Красному глазу» в рамках научной конференции «Невские горизонты» (Санкт-Петербург, 2018), на научно-практических конференциях: РООФ (Москва, 2019) «Актуальные вопросы офтальмологии» (Москва, 2019).

Апробация диссертационной работы состоялась 23 сентября 2020 года на объединенной научной конференции отделений ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава России.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, в том числе - 6 в центральных рецензируемых журналах из списка ВАК, получено 2 патента РФ: патент № 2718565 от 08.04.2020, патент № 199825 от 22.09.2020.

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в клиническую практику отдела инфекционных и аллергических заболеваний глаз ФГБУ «НМИЦ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава России и в образовательные программы кафедры непрерывного медицинского образования ФГБУ «НМИЦ ГБ им. Гельмгольца».

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 132 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 27 рисунками и 18 таблицами. Список литературы содержит 165 источников (32 отечественных и 133 зарубежных).

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Бактериальные язвы роговицы составляют одну из наиболее тяжелых патологий глаз ввиду риска перфорации роговицы и инфицирования с развитием эндофтальмита. Инфекционные язвы роговицы, как правило, характеризуются роговичными эпителиальными дефектами, воспалением в строме и потенциальной потерей стромальной ткани с последующим помутнением роговицы и образованием рубцов. [17, 18, 20, 153]. Несмотря на интенсивное лечение, они обычно вызывают грубое рубцевание и, как следствие, ухудшение зрения.

Язвенные поражения роговицы составляют от 47 до 70% всех заболеваний роговицы. По данным литературы, язвы роговицы в 23-25% осложнены токсико-аллергическими реакциями, гипопионом, десцеметоцеле, угрозой перфорации роговицы. [10, 26, 101] Эвисцерация или энуклеация проводится у 21 - 65% пациентов с эндофтальмитом, вызванном язвой роговицы. [130]

1.1 Экспериментальные модели бактериальной язвы роговицы у кроликов

Интерес многих исследователей к углубленному изучению заболеваний переднего отдела глаза с помощью моделирования объясняется сложностью и многобразием патологических процессов, протекающих в роговице. Модели бактериальной язвы роговицы применяются исследователями не только для изучения эффективности новых препаратов, но и для изучения особенностей патогенеза, новых видов консервативного, хирургического и лазерного лечения язв роговицы.

Обзор литературы, проведенный нами, показал, что для экспериментальной модели бактериальных инфекций роговицы практически все зарубежные авторы используют схожие модели бактериального кератита. Практически во всех моделях для инфицирования использовался штамм золотистого стафилококка. Это объясняется тем, что Staphylococcus aureus в 25 - 31% является возбудителем бактериального поражения роговицы среди преобладающих в этиологии грамположительных микроорганизмов. [39]

15

Анализ моделей бактериальных язв роговицы у кролика. Среди существующих моделей можно выделить три основных направления моделирования:

• с помощью интрастромальных инъекций бактериальной суспензии,

• с использованием инфицированных контактных линз,

• с нарушением целостности роговицы.

1. Модели бактериальных язв роговицы, созданные с помощью интрастромальных инъекций бактериальной суспензии

Одним из первых исследований стафилококковой инфекции роговицы на модели кератита кроликов было определение эффективности антибиотиков. С помощью интрастромальных инъекций бактериальной суспензии создавалась модель кератита, далее наносились испытуемые антибактериальные препараты. A. Kupferman and H. M. Leibowitz [104] сообщили о модели кератита у кроликов с помощью интрастромальной инъекции стафилококковой суспензии как об очень воспроизводимой модели. В связи с этим стафилококковая модель кератита постоянно используется для изучения антимикробных препаратов [48, 147], а также факторов противоинфекционной защиты, участвующих в заболевании.[ 110] По данным литературы, для экспериментальной модели бактериальных инфекций роговицы подавляющее большинство зарубежных авторов используют схожие «инъекционные» модели язв роговицы. Baum J.L. и соавт. [46] для создания модели язвенного кератита под внутривенной анестезией (кетамин и хлорпромазин) интрастромально иглой вводили стафилококковую суспензию в роговицу кроликов. Глубину введения суспензии в строму авторы не указывают. Через 24 ч. начинали исследование эффективности разных способов доставки лекарственных средств. Sanders M.E. и соавт., Firat Zafer Mengeloglu и соавт. [57, 78] вводили кроликам интрастромально штаммы бактерий и начинали исследование действия лекарственных средств не через 24, а через 16 ч. Haoran Jiang и соавт. и Wu X. и соавт. точно так же, как и предыдущие исследователи, использовали интрастромальное введение Staphylococcus aureus но исследование действия

препаратов начинали уже через 8 часов. [80, 98] О том, какие признаки бактериального поражения роговицы (кератита или язвы) развиваются, зарубежные авторы интрастромальных моделей язв роговицы часто в статьях не указывали. Некоторые вышеуказанные модели бактериальных инфекций роговицы у кроликов привлекают внимание быстротой исполнения, ранним сроком начала исследования. Интрастромальная модель бактериального кератита также полезна для исследования химиотерапии и патологических реакций, которые происходят во время интрастромальной стадии инфекции. Для изучения начальных воспалительных процессов и приближения модели к истинному течению бактериального кератита необходима модель кератита, учитывающая все стадии патогенеза язвы роговицы бактериальной этиологии, модель, включающая начальные звенья патогенеза - нарушение целостности роговицы, повреждение ее эпителия. [5]

2. Модели бактериальных язв роговицы, созданные с использованием инфицированных контактных линз

Альтернативой интрастромальной модели кератита является модель с использованием в эксперименте замачивания контактных линз в суспензии S. aureus. перед размещением на скарифицированных роговицах кроликов [100, 136]. На данной модели были исследованы особенности патогенеза бактериального поражения роговицы, вызванного Staphylococcus aureus, Weinrauch и соавт. и Dominiecki и Weiss [72] сообщили, что фермент фосфолипаза A2 лейкоцитов у кроликов, содержащаяся в слезе, может быстро нейтрализовать Staphylococcus aureus. Этот фермент расщепляет арахидоновую кислоту из бактериальной мембраны, и при обширном расщеплении повреждение мембраны активирует бактериальные ферменты аутолизиса, которые способствуют разрушению стенки бактериальной клетки.[125] Исходя из этого сделано предположение, что бактерицидная активность фосфолипазы А2 в слезах человека должна быть частью системы защиты от стафилококковой инфекции. B. H. Hume и соавт. [136] предложили с помощью спермидина (ингибитора фосфолипазы A2) повысить

воспроизводимость модели стафилококкового кератита с использованием контактных линз. В эксперименте использовались новозеландские белые кролики. Для инфицирования применяли Staphylococcus aureus. Контактные линзы, предназначенные для глаз кроликов (Gelflex Laboratories, Перт, Австралия), инкубировали в 1,5 мл суспензии. Через 30 минут к каждой инфицированной линзе, уже пропитавшейся в бактериальной культуре, добавляли 1 мл 50 мМ спермидина (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Далее за 60 минут, 30 минут и во время нанесения контактных линз капали 40 мкл. Спермидина (50 мМ) на каждый глаз кролика. Скарификации на роговице кролика, используя иглу 22 калибра, делали путем трех параллельных царапины (8 мм в длину) в центре каждой роговицы. Затем инфицированные контактные линзы помещали на каждый глаз кролика под мигательную мембрану и оставляли на протяжении всего эксперимента. После установки линзы через 30, 60 и 90 минут глаза кролика снова обрабатывали 40 мкл спермидина (50 мМ). Оценку изменений проводили по шкале от 0-4 баллов по 7 параметрам (инъекция, хемоз, инфильтрат роговицы, отек роговицы, фибрин в передней камере, формирование гипопиона и ирит). Вышеуказанный способ моделирования язвы роговицы у кролика привлекателен для дальнейшего изучения факторов противоинфекционной защиты глаз и особенностей течения бактериальных поражений роговицы.

3. Модели бактериальных язв роговицы, созданные с нарушением целостности роговицы

Во всех нижепредложенных моделях имеет место этап повреждения слоев роговицы разной площади и на разную глубину несколькими способами с последующим инфицированием, что дает возможность получить более выраженную картину язвенного процесса при бактериальном поражении роговицы, приближенную к таковой у человека. На развитие язвы роговицы у кроликов по данным авторов требуется от 24 ч до 3 суток. Аль Рашид З.Ж и соавт. [2] моделировали бактериальную язву роговицы путем травматической эрозии с последующей инстилляцией взвеси гемолитического стафилококка. Авторы

отмечают, что при условии одинакового содержания животных, через 48 ч. после инфицирования поврежденной роговицы развивалась язва размерами 4x4 - 5x5 мм с обильным гнойным отделяемым, инфильтрацией роговицы, хемозом, гипопионом, хотя объем эрозии, нанесенной первично на здоровую роговицу кролика, авторы не указывают. Казакова К. А. [8] в экспериментальной части работы по обоснованию применения диодного лазерного коагулятора использовала модель, созданную путем скарификации эпителия роговицы в центральной зоне и одномоментно интрастромального введения лабораторного штамма Staphylococcus aureus, полученную на кафедре микробиологии РУДН. На 2 сутки постепенно нарастала воспалительная реакция глаза у кроликов: появлялась инъекция конъюнктивы, обильное слизисто-гнойное отделяемое, отек роговицы, в зоне инфицирования роговицы формировался инфильтрат серо-желтого цвета, поверхность постепенно становилась неровной, формировался язвенный дефект, в передней камере образовывался гипопион. Исследование начинали после развития экссудативно-деструктивного воспаления, на 3 сутки после инфицирования. Заслуживают внимания модели, учитывающие количественно диаметр первичного дефекта роговицы при их создании и тем самым приводящие к возникновению язв роговицы качественно и количественно схожих. Так, например, Колесников А. В. и соавт. [13] выполняли исследования с использованием модели язвы роговицы у кролика по методике Адамовой Н.А. [1]: в центральных отделах роговицы у кролика трепаном диаметром 5 мм наносили насечку глубиной 150 мкм, в пределах которой роговицу расслаивали, отсепарованные слои удаляли. В полученный дефект втирали одну стандартную петлю чистой культуры Staphylococcus aureus. Через сутки у всех животных отмечался умеренный отек век, гнойное отделяемое и выраженная смешанная инъекция глазного яблока. В центре роговицы сформировался гнойный инфильтрат около 5 мм в диаметре желтоватого цвета, средней интенсивности. При закапывании метиленовой сини соответственно инфильтрату определялся дефект эпителия размером 4-4,5 мм. Вокруг инфильтрата был перифокальный отек, отмечалось появление диффузной инфильтрации стромы окружающих отделов роговицы. Влага передней камеры глаза опалесцировала,

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Голикова Виктория Алексеевна, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Адамова, Н. А. Эффективность лечения язвенных поражений роговицы фибронектином / Н. А. Адамова, Т. У. Горгиладзе, А. В. Артемов // Русский офтальмологический журнал. - 1990. - № 1 - С. 245-248.

2. Аль Рашид, З. Ж. Комплексное лечение бактериальной язвы роговицы с использованием субконъюнктивального введения натрия гипохлорита в эксперименте / З. Ж. Аль Рашид, А. И. Еременко, Э. А. Петросян // Вестник ОГУ.-2007. - № 78 - С. 6-7.

3. Альшабан, Л. А. Иммуномодулятор тамерит в комплексном лечении язвенных и проникающих повреждений: автореф. дис. ... канд. мед.наук: 14.01.07 / Альшабан Лоэй Айюб Абдул Фатах. - Краснодар, 2004. - с. 7.

4. Бикбов, М. М. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы / М. М. Бикбов, А. Р. Халимов, Э. Л. Усубов // Вестник российской академии медицинских наук.- 2016.

- Т. 71, № 3 - С. 224-327.

5. Волкович, Т. К. Экспериментальная модель бактериального кератита / Т. К. Волкович, И. В. Самсонова // Новости хирургии. - 2010. - Т. 18, № 3 - С. 26-31.

6. Влияние кортикостероидной терапии на процесс рубцевания бактериальной язвы роговицы / В.В. Нероев, И.П. Хорошилова - Маслова, Е.В. Яни Е.В., В.А. Голикова // Российский офтальмологический журнал. - 2020. - Т. 13, № 3. - С. 61-68

7. Иомдина, Е. Н. Применение ультрафиолетового корнеального кросслинкинга при язвах роговицы и других кератопатиях у животных / Е.Н. Иомдина, Л. Ф. Сотникова, А. В. Гончарова и др. // Российский офтальмологический журнал. - 2019.

- Т. 12, № 3 - С. 51-57.

8. Казакова, К. А. Экспериментально-клиническое обоснование применения диодного лазерного коагулятора 1,44 мкм в лечении язвы роговицы: дис. ... канд. мед. наук: 14.01.07 / Казакова Ксения Александровна; науч. рук. Фролов Михаил Александрович. - Москва, 2015. - с. 115

9. Каспаров, А. А. Лечение гнойных язв роговицы / А. А. Каспаров, А. К.

Садыхов, С. А. Маложен // Вестн. офтальмологии. - 1987. - № 6. - С. 67-71

116

10. Каспарова, Е. А. Гнойные язвы роговицы: этиология, патогенез, классификация / Е. А. Каспарова // Вестник офтальмологии. - 2015. - № 5 - С. 87-97.

11. Каспарова, Е. А. Модифицированный кросслинкинг в лечении гнойной язвы роговицы. Клинический случай / Каспарова, Евг. А., Ян Бяо, Собкова О.И. // Офтальмология. - 2019. - Т. 14, № 3 - С. 274-277.

12. Клинико-иммунологические особенности и тактика консервативного лечения центральных бактериальных язв роговицы затяжного течения / В. В. Нероев, Л. А. Катаргина, Л. А. Ковалева [и др. ]// XI Российский общенациональный офтальмологический форум: сб. науч. тр. науч.-практ. конф. с международ. участием: в 2 т. - Москва, 2018. - Т. 2. - С. 568-572.

13. Колесников, А. В. Анализ влияния ацетилцистеина на свободнорадикальный статус и состояние антиоксидантной системы роговицы при стафилококковой гнойной язве роговицы в эксперименте. / А. В. Колесников // Уфимский науч.-практ. ж. - 2017. - № 1 - С. 71-73.

14. Кросслинкинг роговичного коллагена в лечении экспериментального бактериального кератита / М.М. Бикбов, В. К. Суркова, Н.А. Никитин [ и др.]// Точка зрения. Восток-Запад. - 2013. - №1. - С. 75.

15. Лечение язв роговицы с помощью локального ультрафиолетового кросслинкинга (экспериментальное исследование) / В.В. Нероев, Е.В. Яни, Е.Н. Иомдина, И.П. Хорошилова-Маслова, В.А. Голикова, А.В. Кирюхин // Российский офтальмологический журнал. - 2020. - Т. 13, № 4. - С. 48-57.

16. Лорткипанидзе, М. М. Особенности клиники и современная терапия атопического кератоконъюнктивита.: автореф. дис. ... канд. мед.наук: 14.01.07 / Лорткипанидзе Мака Мамуковна. - Москва, 2007. - С. 14.

17. Майчук, Ю. Ф. Терапевтические алгоритмы при инфекционных язвах роговицы. / Ю.Ф. Майчук // Вестн. офтальмологии. - 2000. - № 3. - С. 35-37

18. Нероев, В. В. Бактериальные язвы роговицы / В. В. Нероев, Л. А. Катаргина, Е. В. Яни, Е. С. Вахова, В. В. Позднякова, Л. А. Ковалева, К. Е. Селиверстова, Л. Н. Якушина [Электронный ресурс]. - Федеральные клинические рекомендации. - 2017. URL: http://avo-portal.ru/doc/fkr/item/249-bakterialnye-yazvyrogovitsy 146 97.

117

19. Нероев, В. В. Оптимизация этиологической диагностики и повышение эффективности лечения инфекционных язв роговицы центральной локализации / В.

B. Нероев, Л. А. Ковалева, Г. И. Кричевская, Н. В. Балацкая // Х Российский общенациональный офтальмологический форум: сб.науч. тр. науч.-практ. конф. с международ. участием: в 2 т. - Москва, 2017. - Т. 1. - С. 344-348.

20. Нероев, В. В. Кросслинкинг роговичного коллагена в лечении трофических и бактериальных язв роговицы / В. В. Нероев, А. Б. Петухова, Д. Ю. Данилова, К. Е. Селиверстова, Р. А. Гундорова // Российский медицинский журнал. - 2013. - № 2. -

C. 25-28.

21. Нероев, В. В. Результаты работы по целевой программе «ликвидация устранимой слепоты вследствие роговичной и воспалительной патологии» / В. В. Нероев, Е. В. Яни // Сборник материалов VII Российского международного симпозиума «Ликвидация устранимой слепоты: всемирная инициатива ВОЗ. Ликвидация устранимой слепоты вследствие роговичной и воспалительной патологии». - 2015. - № 1 - С. 22 -31.

22. Оценка схем консервативного лечения бактериальных язв роговицы с применением глюкокортикостероидного препарата в эксперименте / В.В. Нероев, Е.В. Яни, В.А. Голикова, В.В. Позднякова // Российский офтальмологический журнал. - 2020. - Т. 13, № 2. - С. 71-77.

23. Осташевский, В. Л. Лечебное действие инстилляций контрикала при гнойном язвенном кератите / В. Л. Осташевский, Т. У. Горгиладзе // Офтальмологический журнал. - 1984. - № 6 - С. 350-353.

24. Скрипниченко, З. М. Кератопластика при инфицированных повреждениях роговой оболочки / З. М. Скрипниченко, И. М. Логай, Н. Н. Бушуева // Офтальмологический журнал. - 1978. - № 2 - С. 96-99.

25. Степанов, В.К. Комплексный подход к лечению гнойных поражений роговицы / В. К. Степанов, В. М. Малов, Н. И. Глазунова // Вестник Оренбургского государственного университета - 2004. - № 1. - С. 111-113.

26. Тарасова, Л. Н. Роль провоспалительных цитокинов в развитии бактериальных кератитов / Л. Н. Тарасова, В. А. Шаимова, А. С. Симбирцев //Вестник офтальмологии. - 2004. - Т. 120, № 6 - С. 16-18.

27. Федуненко, В. В. Экспериментальное обоснование комбинированного применения биологически активного полиморфного гидрогеля и диадинамотерапии в лечении язв роговицы: дис. ... канд. мед. наук: 14.01.07 / Казакова Виктория Владимировна; науч. рук. Арутюнова Ольга Валентиновна - Москва, 2008. - с. 115.

28. Ченцова, Е. В. Кросслинкинг в комплексном лечении язв роговицы и трансплантата / Ченцова Е.В., Вериго Е.Н., Макаров П.В., Хазамова А.И. // Российский офтальмологический журнал. - 2017. - Т. 10, № 3 - С. 93-100

29. Шаимова, В. А. Клинико-этиологические особенности различных типов течения гнойной язвы роговицы/ В. А. Шаимова // Вестник офтальмологии. - 2002. -№ 1. - С. 39 - 41.

30. Яни, Е.В. Комплексный подход к терапии бактериальных язв роговицы /Е.В. Яни, В.А. Голикова // Офтальмология. - 2020. - Т. 17, № 4. - С.796-803

31. Яни, Е.В. Особенности противовоспалительной терапии бактериальных язв роговицы / Е.В. Яни, В.А. Голикова // Вестник офтальмологии. - 2020. - Т. 136, № 6. - С. 205-210.

32. Яни, Е. В. Противовоспалительная терапия нейротрофических заболеваний роговицы / Е. В. Яни, Е. Н. Орлова, В. А. Голикова // Российский офтальмологический журнал - 2019. - Т. 12, № 4 - С.77-82.

33. Accelerated PACK-CXL for moderate therapy-resistant infectious keratitis / B. Knyazer, Y. Krakauer, Y. Baumfeld [et al.] // Cornea. - 2018. - Vol. 37. - Р. 528 - 531.

34. Accelerated photoactivated chromophore for keratitis-corneal collagen cross-linking as a first-line and sole treatment in early fungal keratitis / D. Tabibian, O. Richoz, A. Riat [et al.] //J. Refract. Surg. - 2014.- Vol. 30, № 12. - Р. 855 - 857.

35. Aetiological diagnosis of microbial keratitis in South India - a study of 1618 cases / M. J. Bharathi, R. Ramakrishnan, S. Vasu [et. al.] // Indian. J. Med. Microbiol. - 2002.-Vol. 20, № 1. - Р. 1257 - P.19-24.

36. An ex-vivo, whole-globe porcine model of corneoepithelail wound healing tested using immunomoculatory drugs / F. Flueckiger, L. Kodjikian, M. Halberstadt [et al.] // J. Ocul. Pharmacol. Ther. - 2005. - Vol. 21. - P. 367-375.

37. Anterior segment intraocular inflammation guidelines / ed. D. BenEzra. - Martin Dunitz, 2000. - 188 p.

38. Antibacterial efficacy of accelerated photoactivated chromophore for keratitis-corneal collagen cross-linking (PACK-CXL) / O. Richoz, S. Kling, F. Hoogewoud [et al.] // J. Refract. Surg. - 2014. - Vol. 30. - P. 850 -854.

39. Antibiotic Resistance in the Treatment of Staphylococcus aureus keratitis: A 20-Year Review / S. Victoria, M. D. Chang, K. D. Deepinder [et al.] // Cornea. - 2015. - Vol. 34, № 6. - P. 698-703.

40. Antimicrobial efficacy of corneal cross-linking in vitro and in vivo for Fusarium solani: a potential new treatment for fungal keratitis / Z. Zhu, H. Zhang, J. Yue [ et al.] // BMC Ophthalmol. - 2018.- Vol. 18, № 1. - P. 65.

41. Antimicrobial efficacy of riboflavin/UVA combination (365 nm) in vitro for bacterial and fungal isolates: a potential new treatment for infectious keratitis / S. A. Martins, J. C. Combs, N. Noguera [et al.] // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2008. - Vol. 49.

- P. 3402-3408.

42. Assessing efficacy of combined riboflavin and UV-A light (365 nm) treatment of Acanthamoeba trophozoites / R. T. Kashiwabuchi, F. R. S. Carvalho, Y. A. Khan [et al.] // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. - 2011. - Vol. 52. - P. 9333-9338.

43. Bacterial corneal ulcer associated with common variable immune deficiency / E. Tsui, J. Deng, A. N. Siedlecki, M.E. Zegans // J. Ophthalmic. Inflamm. Infect. - 2016.- Vol. 6, № 1. - P. 28.

44. Bacterial keratitis: a prospective clinical and microbiological study / F. Schaefer, O. Bruttin, L. Zografos, Y. Guex-Crosier // Br. J. Ophthalmol. - 2001. - Vol. 85, № 7. - P. 842-847.

45. Badenoch, P. R. A rat model of bacterial keratitis: effect of antibiotics and corticosteroid / P. R. Badenoch, G. J. Hay, P. J. McDonald, D. J. Coster // Arch. Ophthalmol.

- 1985. - Vol. 103, № 5.- P. 718-722.

46. Baum, J. L. Treatment of bacterial ulcers of the cornea in the rabbit: a comparison of administration by eye drops and subconjunctival injection / J.L. Baum, M.T. Barza // Amer. Ophthalmol. Soc. - 1982. - Vol. 80. - P. 369 -390.

47. Bertollo, C. M. Characterization of the antinociceptive and anti-inflammatory activities of riboflavin in different experimental models / C. M. Bertollo, A. C. Oliveira, L. T. Rocha // Eur. J. Pharmacol. - 2006. - Vol. 547. - P.184-191.

48. Bioadhesive sulfacetamide sodium microspheres: evaluation of their effectiveness in the treatment of bacterial keratitis caused by Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa in a rabbit model / D. Sensoy, E. Cevher, A. Sarici [et al.] // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2009. - Vol.72, № 3. - P. 487- 495.

49. Carmichael, T. R. Topical steroids in the treatment of central and paracentral corneal ulcers / T. R. Carmichael, Y. Gelfand, N. H. Welsh // Br. J. Ophthalmol. - 1990. -Vol. 74, № 9.- P. 528-531.

50. Chen, L. Human corneal epithelial extracellular matrix perlecan serves as a site for Pseudomonas aeruginosa binding / L. Chen, L. D. Hazlett // Curr. Eye Res. - 2001. - Vol. 22, № 1. - P.19 - 27.

51. Chung, J. H. Effect of 0.1% dexamethasone on epithelial healing in experimental corneal alkali wounds: morphological changes during the repair process / J. H. Chung, Y. G. Kang, H. J. Kim // Graefes Arch. Clin. Exp Ophthalmol. - 2001. - Vol. 236. - P. 537545.

52. Classifying the severity of corneal ulcers by using the "1, 2, 3" rule / M. C. Vital, M. Belloso, T. C. Prager, J. D. Lanier // Cornea. - 2007. - Vol. 26, № 1. - P.16 - 20.

53. Cohen, E. J. The case against the use of steroids in the treatment of bacterial keratitis / E. J. Cohen // Arch. Ophthalmol. - 2009. - Vol. 127. - P. 103-104.

54. Collagen cross-linking with photoactivated riboflavin (PACK-CXL) for the treatment of advanced infectious keratitis with corneal melting / D. G. Said, M. S. Elalfy, Z. Gatzioufas [et al.] // Ophthalmology. - 2014. - Vol. 121, № 7. - P. 1377 - 1382.

55. Combined treatment with antioxidants and immunosuppressants on cytokine release by human peripheral blood mononuclear cells—chemically injured keratocyte

reaction / K. Yi, T. Y. Chung, J.Y. Hyon [et al.] // Mol. Vis. - 2011. - Vol. 17. - P. 26652671.

56. Comparison of antibiotic-only and antibiotic-steroid combination treatment in corneal ulcer patients: double-blinded randomized clinical trial / J. Blair, W. Hodge, S. Al-Ghamdi [et al] // Can. J. Ophthalmol. - 2011. - Vol. 46. - P. 40-45.

57. Comparison of besifloxacin, gatifloxacin, and moxifloxacin against strains of pseudomonas aeruginosa with different quinolone susceptibility patterns in a rabbit model of keratitis / M. E. Sanders, Q. C. Moore, E. W. Norcross [et al.] // Cornea. - 2011. - Vol. 30, № 1. - P. 83 - 90.

58. Comparison of UVA- and UVA/riboflavin-induced growth inhibition of Acanthamoeba castellani / K. Makdoumi, A. Backman, J. Mortensen [et al.] // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. - 2014. - Vol. 251, № 2. - P. 509-514.

59. Corneal collagen crosslinking as treatment for infectious and noninfectious corneal melting in cats and dogs: results of a prospective, nonrandomized, controlled trial / S. A. Pot, N. S. Gallhofer, F. L. Matheis [et al.] // Vet. Ophthalmol. - 2014. - Vol. 17. - P. 250260.

60. Corneal collagen cross-linking for infectious keratitis: an update of clinical studies / T. C. Chan, T. W. Lau, J. W. Lee [et al.] // Acta Ophthalmol. - 2015. - Vol. 93, № 8. - P. 689 - 696.

61. Corneal collagen crosslinking with riboflavin and ultraviolet A to treat induced keratectasia after laser in situ keratomileusis / F. Hafezi, J. Kanellopoulos, R. Wiltfang, T. Seiler // J. Cataract. Refract. Surg. - 2007. - Vol. 33, № 12. - P. 2035 - 2040.

62. Corneal crosslinking and infectious keratitis: a systematic review with a metaanalysis of reported cases / Alio J.L., Abbouda A., Valle D., [et al.] // J. Ophthalmic Inflamm Infect. - 2013. - Vol. 3, № 1. - P. 47

63. Corneal cross-linking as an adjuvant therapy in the management of recalcitrant deep stromal fungal keratitis: a randomized trial / M. Uddaraju, J. Mascarenhas, M. R. Das [et al.] // Am. J. Ophthalmol. - 2015. - Vol. 160, № 1. - P. 131 - 134.

64. Corneal cross-linking for the treatment of infectious keratitis: multicentre trial

results / Torres-Netto E., Abrishamchi R., Shetty R. [et al.] // Abstracts of 24th European

122

Society of Cataract and Refractive Surgeons Marrakech, Morocco. 2020. URL:

https://www.escrs.org/marrakech2020/Programme/free-papers-

details.asp?id=35223&day=0

65. Corneal fibroblast migration patterns during intrastromal wound healing correlate with ECM structure and alignment / W. M. Petroll, P. B. Kivanany, D. Hagenasr, E. K. Graham // Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2015. - Vol. 56. - P. 7352-7361.

66. Corneal neovascularization / J. H. Chang, E. E. Gabison, T. Kato, D. T. Azar // Curr.Opin. Ophthalmol. - 2001. - Vol. 12. - P. 242 - 249.

67. Corneal neovascularization: an anti-VEGF therapy review / J. H. Chang, N. Garg, E. Lunde [et al.] // Surv. Ophthalmol. 2012. - Vol. 57. - P. 415 - 429.

68. Corneal neovascularization: molecular events and therapeutic options / Y. Shakiba, K. Mansouri, D. Arshadi, N. Rezaei // Recent Pat. Inflamm. Allergy Drug. Discov. - 2009.

- Vol. 3. - P. 221-231.

69. ifbvjCorneal ulcers in a tertiary hospital in Northern Nigeria / K. Oladigbolu, A. Rafindadi, E. Abah, E. Samaila // Ann. Afr. Med. - 2013.- Vol. 12, № 3. - P.165-170.

70. Corticosteroids for bacterial keratitis: the Steroids for Corneal Ulcers Trial (SCUT) / M. Srinivasan, J. Mascarenhas, R. Rajaraman [et al.] // Arch. Ophthalmol. - 2012.- Vol. 130. - P. 143-150.

71. Den, S. Efficacy of early systemic betamethasone or cyclosporin A after corneal alkali injury via inflammatory cytokine reduction / S. Den, C. Sotozono, S. Kinoshita // Acta Ophthalmol. Scand. - 2004. - Vol. 82. - P. 195-199.

72. Dominiecki, M. E. Antibacterial action of extracellular mammalian group IIA phospholipase A2 against grossly clumped Staphylococcus aureus / M. E. Dominiecki // Infect. Immun. - 1999. - Vol. 67. - P. 2299 -2305.

73. Drobbin, M. T. Dexamethasone does not alter in vitro antibacterial efficacy of gentamicin / M. T. Drobbin, S.T. Phelan, P. J. Antonelli // Otolaryngol. Head Neck. Surg.

- 2007. - Vol. 136. - P.769-772.

74. Effect of topical anti-inflammatory drugs on corneal and limbal wound healing / K. R. Barba, A. Samy, C. Lai [et al.] // J. Cat. Ref. Surg. - 2000. - Vol. 26. - P. 893-897.

75. Effect of topical steroids on corneal epithelial healing after vitreoretinal surgery / F. Yulek, S. Ozdek, G. Gurelik [et al.] //Acta Ophthalmol. Scand. - 2006. - Vol. 84. - P. 319-322.

76. Effectiveness of specific antibiotic/steroid combinations for therapy of experimental Pseudomonas aeruginosa keratitis / L.S. Engel, M.C. Callegan, J. A. Hobden [et al.]// Curr. Eye Res.- 1995. - Vol. 14. - P. 229-234.

77. Efficacy of bromfenac sodium ophthalmic solution for treatment of dry eye disease / H. Fujishima, M. Fuseya, M. Ogata, D. Murat // Asia Pac. J. Ophthalmol. - 2015. - Vol. 4, № 1. - P. 9-13.

78. Efficacy of daptomycin on experimental methicillin-resistant staphylococcus aureus keratitis in rabbits / F. Z. Mengeloglu, A. Ku?ukbayrak, Y. Y. Bucak [et al.] // Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics. - 2013. - Vol. 29, № 10. - P. 893-899.

79. Efficacy of early systemic betamethasone or cyclosporin A after corneal alkali injury via inflammatory cytokine reduction / S. Den, C. Sotozono, S. Kinoshita, T. Ikeda // Acta Ophthalmol. Scand. - 2004. - Vol. 82. - P. 195-199.

80. Efficacy of gemifloxacin for the treatment of experimental Staphylococcus aureus keratitis / X. Wu, H. Jiang, Y. Xu [et al.] // J. Ocul. Pharmacol. Ther. - 2012. - Vol. 28, № 4. - P. 420-427.

81. Efficacy of primary collagen cross-linking with photoactivated chromophore (PACK-CXL) for the treatment of Staphylococcus aureus-induced corneal ulcers / K. Tal, O. Gal-Or, S. Pillar [et al.] // Cornea. - 2015. - Vol. 34. - P. 1281-1286.

82. Epidemiological and microbiological diagnosis of suppurative keratitis in Gangetic West Bengal, eastern India / S. K. Basak, S. Basak, A. Mohanta, A. Bhowmick // Indian. J. Ophthalmol. - 2005.- Vol. 53, № 1. - P.17 - 22.

83. Evaluation of antibacterial efficacy of photo-activated riboflavin using ultraviolet light (UVA) / K. Makdoumi, A. Backman, J. Mortensen, S. Crafoord // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. - 2010. - Vol. 248. - P. 207-212.

84. Evaluation of corneal collagen cross-linking as an additional therapy in mycotic keratitis / R. B. Vajpayee, S. N. Shafi, P. K. Maharana [et al.] // Clin. Experiment. Ophthalmol. - 2015. - Vol. 43, № 2. - P.103 - 107.

124

85. Evaluation of in vitro efficacy of combined riboflavin and ultraviolet A for Acanthamoeba isolates / M. A. Del Buey, J. A. Cristóbal, P. Casas [et al.] //Am. J. Ophthalmol. - 2012. - Vol. 153. - P. 399-404.

86. Evaluation of in vitro efficacy of combined riboflavin and ultraviolet-A (365 nm) for Acanthamoeba / J. Letsch, A. Abou-Bacar, E. Candolfi // J. Fr. Ophthalmol. - 2015. -Vol. 38. - P. 213-219.

87. Evans, D. J. Why does the healthy cornea resist Pseudomonas aeruginosa infection / D. J. Evans, S. M. J. Fleiszig // Am. J. Ophthalmol. - 2013. - Vol.155, № 6. - P. 961-970.

88. Fel, A. Eye and corticosteroid's use / A. Fel, E. Aslangul, C. Le Jeunne // Presse Med. - 2012. - Vol. 41. - P. 414 - 421.

89. Fleiszig, S. M. The pathogenesis of bacterial keratitis: studies with Pseudomonas aeruginosa / S. M. Fleiszig, D. J. Evans // Clin. Exp. Optom. - 2002. - Vol. 85. - P. 271278.

90. Fluoroquinolone and fortified antibiotics for treating bacterial corneal ulcers / N. Gangopadhyay, M. Daniell, L. Weih, H. R. Taylor // Br. J. Ophthalmol. - 2000. - Vol. 84, № 4. - P. 378 - 3843.

91. Global consensus on keratoconus and ectatic diseases / J. A. Gomes, C. J. Rapuano, M. W. Belin, R. Jr. Ambrosio // Cornea. - 2015. - Vol. 34, № 4. - P. 359-369.

92. Global data on visual impairment in the year 2002 / F. Resnikoff, D. Pascolini, D. Etya'ale [et al.] // Bull. World Health Organ. - 2004. - Vol. 82. - P. 844-851.

93. Global survey of corneal transplantation and eye banking / P. Gain, R. Jullienne, Z. He, M. Aldossary // JAMA Ophthalmol. - 2016. - Vol. 134, № 2. - P. 167-173.

94. Guidelines for the management of corneal ulcer at primary, secondary and tertiary care health facilities in the South-East Asia region / WHO, Regional Office for South-East Asia. - 2004. - P. 25. URL: http: //whqlibdoc.who .int/searo/2004/SEA_Ophthal_ 126_eng.pdf

95. Hafezi, F. PACK-CXL: defining CXL for infectious keratitis / F. Hafezi, J. B. Randleman // J. Refract. Surg. - 2014. - Vol. 30. - P. 438-439.

96. Herretes, S. Topical corticosteroids as adjunctive therapy for bacterial keratitis / S. Herretes, X. Wang, J. M. Reyes // Cochrane Database Syst. Rev., - 2014. - Vol. 10, №10 -CD005430.

97. Hindman, H. B. Rationale for adjunctive topical corticosteroids in bacterial keratitis / H. B. Hindman, S. B. Patel, A. S. Jun // Arch. Ophthalmol. - 2009. - Vol. 127 -P. 97-102.

98. In vitro and in vivo effectiveness evaluation of balofloxacin in experimental staphylococcus aureus keratitis / H. Jiang, S. Han, C. Guo [et al.] // Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics. - 2014. - Vol. 30, № 6. - P. 482 - 488.

99. In vitro antimicrobial efficacy of riboflavin and ultraviolet light on Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa / A. Schrier, G. Greebel, H. Attla [et al.] // J. Refract. Surg. - 2009. - Vol. 25. - P. 799-802.

100. In vivo performance of melimine as an antimicrobial coating for contact lenses in models of CLARE and CLPU / N. Cole, E. B. Hume, A. K. Vijay [et al.] // Investigative Ophthalmology & Visual Science. - 2010. - Vol. 51, № 1. - P. 390-395.

101. Infectious keratitis in South Australia: emerging resistance to cephazolin / I. Leibovitch, T. F. Lai, L. Senarath [et al.] // Eur. J. Ophthalmol. - 2005. - Vol. 15, № 1. -P. 23-26.

102. Kozobolis, V. UV-A collagen cross-linking treatment of bullous keratopathy combined with corneal ulcer / V. Kozobolis, G. Labiris, M. Gkika // Cornea. - 2010. - Vol. 29, № 2. - P. 235 - 238.

103. Krachmer, J. H. Fundamentals, diagnosis and management. / J. H. Krachmer, M. J. Mannis., E. J. Holland // Cornea. Elsevier Mosby. - 2005. - Vol. 2. -P.1005-1033.

104. Kupferman, A. Quantitation of bacterial infection and antibiotic effect in the cornea. / A. Kupferman, H. M. Leibowitz //Archives of Ophthalmology. - 1976. - Vol. 94, № 11. - P. 1981-1984.

105. Larger Therapeutic Window for Steroid versus VEGF-A Inhibitor in Inflammatory Angiogenesis: Surprisingly Similar Impact on Leukocyte Infiltration / S.

Nakao, S. Zandi, N. Lara-Castillo // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2012. - Vol. 53, № 7. -P. 3296-3302.

106. Lee, H. S. Involvement of corneal lymphangiogenesis in a mouse model of allergic eye disease / H. S. Lee, D. Hos, T. Blanco [et al.] // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2015.- Vol. 56, № 5. - P. 3140-3148.

107. Leibowitz, H. M. Drug interaction in the eye. Concurrent corticosteroid-antibiotic therapy for inflammatory keratitis / H. M. Leibowitz, A. Kupferman //Arch Ophthalmol. - 1977. - Vol. 95. - P. 682-685.

108. Leibowitz, H. M. Topically administered corticosteroids. Effect on antibiotic-treated bacterial keratitis / H. M. Leibowitz, A. Kupferman // Arch. Ophthalmol.

- 1980. - Vol. 98. - P. 1287-90.

109. Lim, L. A review of corneal collagen cross-linking - current trends in practice applications / L. Lim, E.W. Lim // Open Ophthalmol. J. - 2018. - Vol. 23, № 12.

- P. 181-213.

110. Main pathogens and in vitro antimicrobial susceptibility in bacterial keratitis: 5-year study, 2005-2009 / G. A. Rocha, R. F. Silva, M. F. Lopes [et al.] // Arq. Bras. Oftalmol. - 2011. - Vol. 1. - P. 28 - 32.

111. Makdoumi, K. Infectious keratitis treated with corneal crosslinking / K. Makdoumi, J. C. Mortensen // Cornea. - 2010. - Vol. 29, № 12. - P. 1353-1358.

112. Makdoumi, K. Photodynamic UVA-riboflavin bacterial elimination in antibiotic resistant bacteria / K. Makdoumi, A. Backman // Clin. Exp. Ophthalmol. - 2016.

- Vol. 44, № 7. - P. 582-586.

113. Management of infective corneal ulcer: epidemiology needs to be evaluated as priority basis / A. K. Talukder, Z. Sultana, I. Jahan, [et al.] // Mymensingh Med J. -2006.- Vol. 25, № 3. - P. 415 - 420.

114. Management of infective corneal ulcers in a high-income developing country. / T. Al Mahmoud, M. Elhanan, M. H. Elshamsy // Medicine (Baltimore) - 2019.-Vol. 98, № 51. - P. 18243.

115. Marquart, M. E. Infectious keratitis: secreted bacterial proteins that mediate corneal damage. / M. E. Marquart, R. J. O'Callaghan // J. Ophthalmol. - 2013. - P. 369094.

127

116. Microbial keratitis at extremes of age / P. Parmar, A. Salman, C. M. Kalavathy [et al.] // Cornea. - 2006. -Vol. 25, № 2. - P. 153-158.

117. Microbial keratitis: aetiological diagnosis and clinical features in patients admitted to hospital universiti sains malaysia / T. J. Norina, S. Raihan, S. Bakiah [et al.] // Singapore Med J. . - 2008.- Vol. 49, № 1. - P. 67 - 71 .

118. Microbiologic, pharmacokinetic, and clinical effects of corneal collagen cross-linking on experimentally induced Pseudomonas keratitis in rabbits / C. B. Cosar, M. Kucuk, E. Celik [et al.]// Cornea. - 2015.- Vol. 34, № 10. - P. 1276 - 1280.

119. Ohadi, C. Anti-inflammatory therapy and outcome in a guinea pig model of Pseudomonas keratitis / C. Ohadi, K. L. Litwin, H. Moreira // Cornea. - 1992.- Vol. 11, № 5. - P. 398-403.

120. Ong, S. H. Corneal infections in the 21st century / S. H. Ong, M. C. Corbett // Postgrad. Med. J. - 2015. - Vol. 66. - P. 565-571.

121. Pandita, A. Microbial keratitis in Waikato, New Zealand / A. Pandita, C. Murphy // Clin. Exp. Ophthalmol. - 2011. - Vol. 39, № 5. - P. 393-397.

122. Papaioannou, L. Corneal Collagen Cross-Linking for Infectious Keratitis: A Systematic Review and Meta-Analysis / L. Papaioannou, M. Miligkos, M. Papathanassiou // Cornea. - 2016.- Vol. 35, № 1. - P. 62-71.

123. Photoactivated riboflavin treatment of infectious keratitis using collagen cross-linking technology / Price M.O., Tenkman L.R., Schrier A. [et al.] // J. Refract. Surg. - 2012. - Vol. 28, № 10. - P. 706 - 713.

124. Primary diseases of corneal perforation in Shandong Province, China: a 10-year retrospective study / L. Xie, H. Zhai, X. Dong, W. Shi // Am. J. Ophthalmol. - 2008.-Vol. 145, № 4. - P. 662-666.

125. Qu, X. D. Secretory phospholipase A2 is the principal bactericide for staphylococci and other gram-positive bacteria in human tears / X. D. Qu, R. I. Lehrer // Infect Immun. - 1998. - Vol. 66. - P. 2791-2797.

126. Recurrence of microbial keratitis concomitant with antiinflammatory treatment in an animal model / D. C. Gritz, S. Kwitko, M. D. Trousdale [et al.] // Cornea. -1992. - Vol. 11. - P. 404-408.

127. Review of epidemiological features, microbiological diagnosis and treatment outcome of microbial keratitis: Experience of over a decade Indian / U. Gopinathan, S. Sharma, P. Garg, G. N. Rao // J. Ophthalmol. - 2009.- Vol. 57, № 4. - P. 273-279.

128. Riboflavin and ultraviolet-A as adjuvant treatment against Acanthamoeba cysts / R. Lamy, E. Chan, S. D. Good [et al.] // Clin. Experiment. Ophthalmol. - 2015. -Vol. 44, № 3. - P. 181-187.

129. Richoz, O. Corneal collagen cross-linking for the treatment of acanthamoeba keratitis/ O. Richoz, Z. Gatzioufas, F. Hafezi // Cornea. - 2013. - Vol. 32, № 10. - P. 189.

130. Risk factors for endophthalmitis requiring evisceration or enucleation/ X. Lu, D. S. Ng, K. Zheng [et al.] // Sci Rep. - 2016. - Vol. 15, № 6. - P. 28100.

131. Role and interaction of connective tissue growth factor with transforming growth factor-beta in persistent fibrosis: A mouse fibrosis model / T. Mori, S. Kawara, M. J. Shinozaki [et al.] // Cell. Physiol. - 1999.- Vol. 181, № 1. - P. 153-159.

132. Segreti, J. Challenges in assessing microbial susceptibility and predicting clinical response to newer-generation fluoroquinolones / J. Segreti, R.N. Jones, J. S. Bertino // J. Ocul. Pharmacol. Ther. - 2012. - Vol. 28, № 1. - P. 3-11.

133. Sonal, S. Topical Corticosteroids in the Management of Bacterial Keratitis / S. Sonal, M. D. Tuli // Curr. Ophthalmol. Rep. - 2013. - Vol. 1, № 4.

134. Spoerl, E. Increased resistance of crosslinked cornea against enzymatic digestion / E. Spoerl, G. Wollensak, T. Seiler // Curr. Eye Res. - 2004. - Vol. 29. - P. 3540.

135. Srinivasan, M. Corticosteroids for bacterial corneal ulcers / M. Srinivasan, P. Lalitha, R. Mahalakshmi // Br. J. Ophthalmol. - 2009. - Vol. 93, № 2. - P. 198-202.

136. Staphylococcus corneal virulence in a new topical model of Infection / B. H. Hume, J. J. Dajcs, J. M. Moreau [et al.] // Investigative Ophthalmology & Visual Science.

- 2001. - Vol. 42, № 12 - P. 2904-2908.

137. Suppression of inflammatory corneal lymphagniogenesis by application of topical corticosteroids / D. Hos, D. R. Saban, F. Bock [et al.] // Arch. Ophthalmol. - 2011.

- Vol. 129. - P. 445 - 452.

138. Tabibian, D. PACK-CXL: Corneal cross-linking in infectious keratitis / D. Tabibian, C. Mazzotta, F. Hafezi // Eye Vis. (Lond). - 2016. - Vol. 3. - P. 11.

139. The corneal wound healing response: Cytokine-mediated interaction of the epithelium, stroma, and inflammatory cells / S. E. Wilson, R. R. Mohan, R. Ambrosio [et al.] // Prog. Retin. Eye Res. - 2001.- Vol. 20. - P. 625-637.

140. The effects of oral and topical corticosteroid in rabbit corneas / K. Araki-Sasaki, O. Katsuta, H. Mano [et al] // BMC Ophthalmol. - 2016.- Vol. 16, № 1. - P. 160.

141. The persistent dilemma of microbial keratitis: Global burden, diagnosis, and antimicrobial resistance / L. Ung, P. J. M. Bispo, S. S. Shanbhag [et al.] // Surv. Ophthalmol. - 2019.- Vol. 64, № 3. - P. 255-271.

142. The steroid controversy in bacterial keratitis / Acharya N.R., Srinivasan M., Mascarenhas J. [et al.] // Arch. Ophthalmol. - 2009. - Vol. 127. - P.1231.

143. Thomas, P. A. Infectious keratitis / P.A Thomas, P. Geraldine // Curr. Opin. Infect. Dis. - 2007. - Vol. 20. - P. 129-41.

144. Tomas - Barberan, S. Influence of topical treatment on epithelial wound healing and pain in the early postoperative period following photorefractive keratectomy / S. Tomas - Barberan, P. Fagerholm // Acta Ophthalmol. Scand. - 1999. - Vol. 77. - P.135-138.

145. Topical antibiotics for the management of bacterial keratitis: an evidence-based review of high quality randomised controlled trials / E. M. McDonald, F. S. Ram, D. V. Patel, C. N. McGhee // Br. J. Ophthalmol. - 2014. - Vol. 98, № 11. - P. 1470-1477.

146. Topical anti-inflammatory agents in an animal model of microbial keratitis / Gritz D. C., Lee T. Y., Kwitko S., McDonnell P. J. // Arch Ophthalmol. - 1990. - Vol. 108. - P. 1001-1005.

147. Topical levofloxacin 1.5% overcomes in vitro resistance in rabbit keratitis models / R. P. Kowalski, E. G. Romanowski, F. S. Mah [et al.] // Acta Ophthalmologica. -2010.- Vol. 88, № 4. - P. 120-125.

148. Topical steroids in the treatment of central and paracentral corneal ulcers / T. R. Carmichael, Y. Gelfand, N. H. Welsh [et al] // Br. J. Ophthalmol. - 1990. - Vol. 74. -P. 528-531.

149. Treatment of Acanthamoeba keratitis by corneal cross-linking / M. Berra, G. Galperin, G. Boscaro [et al.] // Cornea. - 2013. - Vol. 32, № 2. - P. 174 - 178.

150. Treatment of fungal keratitis from Fusarium infection by corneal cross-linking / G. Galperin, M. Berra, J. Tau [ et al.] // Cornea. - 2012.- Vol. 31, № 2. - P. 176 -180.

151. Treatment results of corneal collagen cross-linking combined with riboflavin and 440 Nm blue light for bacterial corneal ulcer in rabbits / S. Wei, C. Zhang, S. Zhang // Current. Eye Research. - 2017.- Vol. 42, № 10. - P. 1401-1406.

152. Trends in microbiological and antibiotic sensitivity patterns in infectious keratitis: 10-year experience in Mexico City / J.C. Hernandez-Camarena, E.O. Graue-Hernandez, M. Ortiz-Casas [et al.] // Cornea. - 2015.- Vol. 34, № 7. - P. 778-785.

153. Tuli, S. S. Science and strategy for preventing and managing corneal ulceration / S. S. Tuli, G. S. Schultz, D. M. Downer // Ocul. Surf. - 2007. - Vol. 5. - P. 2339.

154. Twelve-year analysis of microbial keratitis trends at a UK tertiary hospital / S. Tan, A. Walkden, L. Au [et al.] // Eye. - 2017.- Vol. 31, № 8. - P. 1229-1236.

155. UVA-Riboflavin photochemical therapy of bacterial keratitis: a pilot study / K. Makdoumi, J. Mortensen, O. Sorkhabi [et al.] // Graefs Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. -2012. - Vol. 250. - P. 95-102.

156. Vascular endothelial growth factor (VEGF), mast cells and inflammation / Y. B. Shaik-Dasthagirisaheb, G. Varvara, G. Murmura / Int. J. Immunopathol. Pharmacol. // 2013. - Vol. 26. - P. 327-335.

157. Whitcher, J. P. Corneal blindness: a global perspective / J. P. Whitcher, M. Srinivasan, M. P. Upadhyay // Bull. World Health Organ. - 2001. - Vol. 5. - P. 214-221.

158. Wilhelmus, K. R. Indecision about corticosteroids for bacterial keratitis: an evidence-based update / K. R. Wilhelmus // Ophthalmology. - 2002.- Vol. 109, № 5. - P. 835-842.

159. Williams, R. N. The influence of topical corticosteroid therapy upon polymorphonuclear leukocyte distribution, vascular integrity and ascorbate levels in

endotoxin-induced inflammation of the rabbit eye / R. N. Williams, C. A. Paterson // Exp. Eye Res. - 1987. - Vol. 44, № 2. - P. 191-198.

160. Wollensak, G. Crosslinking treatment of progressive keratoconus: new hope / G. Wollensak // Curr. Opin. Ophthalmol. - 2006. - Vol. 127 - P. 356-360.

161. Wollensak, G. Long-term biomechanical properties of rabbit cornea after photodynamic collagen crosslinking / G. Wollensak, E. Iomdina // Acta Ophthalmologica Scandinavica. - 2009. - Vol. 87, № 1. - P. 48-51.

162. Wollensak, G. Treatment of keratoconus by collagen cross linking / G.Wollensak, E. Sporl, T. Seiler // J. Ophthalmology - 2003. - Vol. 100, № 6. - P. 44-49.

163. Wound-Healing Studies in Cornea and Skin: Parallels, Differences and Opportunities / A. Bukowiecki, D. Hos, C. Cursiefen, S. A. Eming // Int. J. Mol. Sci. -2017.- Vol. 18, № 6. - P. 1257 - 1260.

164. Yi, K. Combined treatment with antioxidants and immunosuppressants on cytokine release by human peripheral blood mononuclear cells - chemically injured keratocyte reaction / K. Yi, T.Y. Chung // Mol Vis. - 2011. - Vol. 17. - P. 2665-2671.

165. Zieske, J. D. Extracellular matrix and wound healing / J. D. Zieske // Curr. Opin. Ophthalmol. - 2001. - Vol. 12. - P. 237-241.