Экспериментальное изучение фармакокинетики оригинального противопаркинсонического препарата гимантана тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат биологических наук Петренко, Евгения Сергеевна

• Петренко, Евгения Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Петренко, Евгения Сергеевна

Список сокращений

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1. Паркинсонизм

2.1.1. Патофизиологические основы заболевания

2.1.2. Классификация, причины возникновения

2.1.2.1. Основные этиологические формы паркинсонизма

2.1.3. Принципы лечения, лекарственные препараты

2.1.3.1. Препараты, влияющие на обмен дофамина

2.1.3.2. Производные аминоадамантана

2.1.3.3. Ингибиторы МАО

2.1.3.4. Агонисты дофаминовых рецепторов

2.1.3.5. Антихолинергические средства

2.2. Лекарственные препараты - производные аминоадамантана

2.2.1. Сравнительная характеристика антипаркинсонического действия лекарственных препаратов аминоадамантано-вого ряда

2.2.1.1. Результаты доклинического исследования Гимантана

2.2.2. Фармакокинетика и метаболизм лекарственных препаратов - производных аминоадамантана

2.2.2.1. Фармакокинетика амантадина

2.2.2.2. Фармакокинетика мемантина

2.2.2.3. Фармакокинетика бемантана

2.2.2.4. Фармакокинетика бромантана

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Физико-химические свойства Гимантана

3.2. Методы количественного определения

3.2.1. Метод определения Гимантана с использованием радиоизотопной метки 3.2.1.1. Взятие биологического материала и подготовка проб к анализу

3.2.2. Метод определения Гимантана с использованием капиллярной газовой хроматографии t 3.2.2.1. Взятие биологического материала и подготовка проб к анализу

3.3. Идентификация метаболитов Гимантана в моче крыс 55 3.3.1. Взятие биологического материала и подготовка проб к анализу

3.4. Анализ фармакокинетических данных

3.5. Статистическая обработка данных 57 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Изучение фармакокинетики радиоактивного эквивалента

Гимантана в опытах на крысах

4.1.1. Фармакокинетика 3Н-Гимантана в крови крыс после однократного внутривенного и перорального введений 59 4.1.1.1. Расчет биодоступности

4.1.2. Распределение 3Н-Гимантана по тканям органов крыс

4.1.2.1. Распределение 3Н-Гимантана в крови и органах после однократного внутривенного и перорального введений

4.1.2.2. Анализ коэффициентов распределения 3Н-Гимантана в тканях органов крыс

4.1.2.3. Распределение 3Н-Гимантана в структурах мозга и вилочковой железе

4.1.3. Проверка гипотезы линейности фармакокинетики

3Н-Гимантана при однократном внутривенном введении различных доз

4.1.4. Кинетика выведения радиоактивного эквивалента

Гимантана с мочой крыс

4.2. Изучение фармакокинетики радиоактивного эквивалента

Гимантана в опытах на кроликах

4.2.1. Фармакокинетика 3Н-Гимантана у кроликов после однократного внутривенного и перорального введения субстанции и таблетки

4.2.1.1. Расчет биодоступности

4.2.2. Фармакокинетика 3Н-Гимантана у кроликов после многократного перорального введения

4.3. Изучение метаболизма Гимантана

4.3.1. Изучение содержания неизмененного Гимантана 94 4.3.1.1. Расчет биодоступности неизмененного препарата

4.3.2. Идентификация метаболитов Гимантана в моче крыс

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное изучение фармакокинетики оригинального противопаркинсонического препарата гимантана»

Актуальность проблемы. Фармакокинетические исследования проводятся на разных этапах создания лекарственных средств: на стадии доклинического экспериментального изучения на животных, при первичных и расширенных клинических испытаниях, а также после внедрения лекарства в практическую медицину.

Предметом экспериментальной фармакокинетики является изучение процессов всасывания, распределения, биопревращения и выделения препарата. Знание фармакокинетических свойств фармакологического средства позволяет обосновать выбор путей и методов его введения, выявить ткани, в которые оно проникает наиболее интенсивно и/или в которых удерживается наиболее длительно, установить основные пути элиминации фармакологического средства. По результатам экспериментального изучения фармакокинетики фармакологического средства возможна выработка ориентировочной схемы его дозирования и применения, обеспечивающей поддержание эффективной концентрации препарата в пределах терапевтического диапазона, которая может быть затем уточнена в ходе клинических испытаний. Важной задачей изучения фармакокинетики оригинального фармакологического средства является оптимизация выбора его лекарственной формы (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, 2000). Кроме того, фармакокинетические данные позволяют объяснить различия в реакции организма на лекарственное вещество, предупредить возникновение нежелательных эффектов препарата (Вальдман А.В., Жердев В.П., 1988; Жердев В.П. и др., 2003; Мирошниченко И.И., 2001).

Данная работа посвящена изучению фармакокинетических свойств нового потенциального противопаркинсонического средства - Гимантан в эксперименте на животных. Работа проводилась в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2000).

Интерес к данному веществу - потенциальному лекарственному средству для лечения болезни Паркинсона обусловлен тем, что среди хронических заболеваний центральной нервной системы паркинсонизм занимает одно из центральных мест, являясь наиболее часто встречающимся неврологическим заболеванием (Ортель В.Х., Коршунов A.M., 1997; Lewis et al., 2003). Паркинсонизм, независимо от этиологии и возраста, в котором он начался, значительно сокращает продолжительность жизни (Martin, 1999; Gutman et al., 2003).

В настоящее время комплексное лечение паркинсонизма использует препараты, относящиеся к разным классам фармакологических средств. Некоторые из них показаны практически при всех формах паркинсонизма, другие - имеют специальные показания. Основным способом лечения болезни Паркинсона является применение препаратов, содержащих предшественник дофамина, который, проникая через гематоэнцефалический барьер, в процессе биосинтеза катехоламинов при декарбоксилировании превращается в дофамин -леводопа (L-ДОФА). Однако, наряду с преимуществом перед антипаркинсоническими препаратами других фармакологических групп, ДОФА-содержащие препараты имеют ряд существенных недостатков: снижение эффективности в процессе лечения (Крыжановский Г.Н. и др., 1995) и развивающиеся клинически нежелательные явления (Карабань И.Н., 1996). Кроме того, в терапии паркинсонизма используются ингибиторы моноаминооксидаз и КОМТ, увеличивающие эффективность дофаминзамещающей терапии (Крыжановский Г.И. и др., 1995, Jorga, 1998), холиноблокаторы, агонисты дофаминовых рецепторов, антиоксиданты (Lewis et al., 2003; Gutman et al., 2003).

Многие используемые ныне подходы к лечению заболевания направлены на отдельные звенья его патогенеза и имеют целый ряд существенных недостатков, что требует продолжения поиска и создания новых антипаркинсонических средств, способных комплексно влиять на ряд составляющих патогенетического процесса заболевания.

В комплексной терапии паркинсонизма значительный удельный вес занимают препараты аминоадамантанового ряда, используемые в виде разных солей 1- и 2-аминоадамантана - гидрохлорида (адамантан, мидантан), сульфата (симметрел, вирегит), глюкоронида (глудантан) (Морозов И.С. и др., 2001).

Положительный эффект амантадина при паркинсонизме подтвержден многими исследователями (Schwab et al., 1966; Parkes et al., 1970; Fieschi et al., 1972; Кадыков A.C, 1976; Камянов И.М., 1976). Кроме того, многие производные адамантана имеют выраженную иммунотропную активность (Арцимович, 1990,

2000). Препараты данной группы обладают рядом преимуществ по сравнению с другими лекарственными средствами. Основным положительным моментом является сравнительно небольшое количество побочных эффектов, а также сохраняющаяся при длительном лечении эффективность.

В ГУ НИИ Фармакологии им. В.В. Закусова РАМН были синтезированы и изучены такие производные адамантана, как мемантин, бемантан, димантан, кемантан, бромантан и другие. В ходе дальнейшего изучения веществ данной группы был синтезирован целый ряд соединений, из которого по итогам первичного скрининга было выделено соединение с наиболее ярко выраженной противопаркинсонической активностью - гидрохлорид М-(адамант-2-ил)гексаметиленимина (А-7 или Гимантан). Доклиническое исследование данного соединения было проведено д.м.н. Е.А. Вальдман в лаборатории психофармакологии НИИ Фармакологии РАМН под руководством проф. Т.А. Ворониной.

Противопаркинсонические свойства А-7 были изучены на моделях акинетико-ригидных и дрожательных проявлений паркинсонического синдрома (Вальдман Е.А. и др., 1999). Результаты исследований показали, что изучаемое соединение обладает способностью устранять акинетико-ригидные проявления паркинсонического синдрома, имея преимущества перед применяемыми в медицинской практике препаратами (Вальдман Е.А. и др., 1999; Неробкова Л.Н. и др., 2000). Одним из основных преимуществ Гимантана перед другими лекарственными препаратами является отсутствие привыкания и синдрома отмены после длительного применения. Установлено, что Гимантан обладает высокой иммунотропной активностью в терапевтической дозе 10 мг/кг (Нежинская Г.И. и др., 2001), что может вносить вклад в реализацию симптоматического и нейропротекторного эффекта препарата.

Таким образом, была показана перспективность дальнейшей разработки Гимантана в качестве потенциального средства для лечения паркинсонизма.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось доклиническое изучение фармакокинетики Гимантана и путей его биотрансформации. Для достижения вышеуказанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать фармакокинетику и распределение радиоактивного эквивалента Гимантана в крови, по органам крыс после однократного внутривенного введения и введения внутрь.

2. Провести проверку гипотезы линейности фармакокинетики Гимантана при однократном внутривенном введении различных доз.

3. Изучить кинетику выведения радиоактивного эквивалента Гимантана из организма крыс.

4. Изучить фармакокинетику Гимантана у кроликов после однократного внутривенного введения субстанции и введения внутрь субстанции и таблетки.

5. Изучить фармакокинетику препарата у кроликов после многоразового введения.

6. Установить количественное содержание неизмененного Гимантана в крови крыс и кроликов, в моче крыс.

7. Изучить выведение Гимантана с мочой, пути биотрансформации и установить химические структуры возможных метаболитов.

Научная новизна. Разработан оригинальный, высокочувствительный и селективный метод определения Гимантана в биологическом материале с использованием капиллярной газовой хроматографии.

Впервые изучены фармакокинетические свойства нового потенциального противопаркинсонического средства - Гимантан. Выявлены абсорбционные свойства тканей организма; доказана линейность зависимости между уровнями содержания 3Н-Гимантана в крови и вводимой дозой; выявлены различия концентрации 3Н-Гимантана в крови и органах при различных способах введения у крыс. Показана особая тропность радиоактивного эквивалента препарата к органу-мишени - стриатуму. Найдено фармакокинетическое обоснование различий в динамике развития эффекта Гимантана при разных способах введения. Установлено, что исследуемое соединение подвергается биотрансформации, особенно активной при пероральном способе введения. Установлено, что количество продуктов метаболизма Гимантана в моче экспериментальных животных значительно превышает количество неизмененного вещества. Выявлены пути биотрансформации и качественный состав возможных метаболитов.

Научно-практическая значимость. Разработанный метод определения Гимантана с использованием капиллярной газовой хроматографии предложен для широкого применения в практике при проведении фармакокинетических исследований соединений класса адамантана.

Найденные фармакокинетические закономерности позволяют дать некоторые практические рекомендации при создании лекарственной формы. Разработанная в ГУ НИИ фармакологии им. В.В.Закусова РАМН таблетированная лекарственная форма Гимантана обладает высокой относительной биодоступностью и может быть рекомендована для клинических исследований.

Полученные результаты вошли в материалы доклинического изучения Гимантана, утвержденные Медико-биологической комиссией НИИ Фармакологии РАМН, для представления в Минздрав РФ и получения разрешения на проведение клинических испытаний в качестве средства лечения паркинсонизма.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. ПАРКИНСОНИЗМ

Паркинсонизм - хроническое заболевание нервной системы человека, которое проявляется нарушениями преимущественно двигательной сферы в виде симптомов гипокинезии, тремора и мышечной ригидности, к которым могут присоединяться вегетативные расстройства (гиперсаливация, гипергидроз), и нарушения психики (брадифрения, депрессия, деменция).

Среди хронических заболеваний центральной нервной системы паркинсонизм занимает одно из центральных мест, являясь одним из наиболее часто встречающихся неврологических заболеваний. Его частота составляет 100 - 200 больных на 100000 населения. Заболеваемость прогрессирует с возрастом: на 100000 населения в возрасте до 54 лет ежегодно приходится 5 новых случаев, в возрасте 55-64 года - 32, в возрасте 65-74 года - 113, 75 лет и более - 254 (Ортель В.Х., Коршунов A.M., 1997). Паркинсонизм, независимо от этиологии и возраста, в котором он начался, значительно сокращает продолжительность жизни. Смертность среди больных паркинсонизмом почти в 3 раза выше, чем в остальной популяции того же возраста, пола и расы (Вейн A.M. и др., 1981).

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Петренко, Евгения Сергеевна

6. выводы

1. Гимантан хорошо всасывается из ЖКТ крыс и кроликов, интенсивно распределяется по всем органам и тканям, активно метаболизируется в организме экспериментальных животных, особенно при введении внутрь.

2. В тканях стриатума и тимуса после введения Гимантана внутрь содержание радиоактивного эквивалента препарата в два раза больше, чем после внутривенного введения, что связано с различиями в биотрансформации Гимантана при введении внутрь и внутривенно.

3. Доказана линейная зависимость между вводимой дозой Гимантана и концентрацией вещества в плазме крови.

4. Установлено, что препарат выводится с мочой, в основном, в виде метаболитов, на протяжении 10 суток. Основная часть неизмененного препарата и его метаболитов выводится в течение первых суток.

5. Многократное введение Гимантана приводит к кумуляции препарата в крови кроликов.

6. Высокая степень относительной биодоступности таблетированной лекарственной формы Гимантана у кроликов позволяет рекомендовать ее для проведения клинических испытаний.

7. Масс-спектрометрический анализ выделенных метаболитов Гимантана позволил предложить схему его возможных превращений в организме, связанных с образованием окси-производного; окси,метокси- производного; метокси,М-окись-производного; диокси-М-окись-производного; карбокси -производного; конъюгатов Гимантана.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Среди хронических заболеваний центральной нервной системы паркинсонизм занимает одно из центральных мест, являясь одним из наиболее часто встречающихся неврологических заболеваний, затрагивающим около 2% населения старше 65 лет (Ортель В.Х., Коршунов A.M., 1997; Martin, 1999). Паркинсонизм, независимо от этиологии и возраста, в котором он начался, значительно сокращает продолжительность жизни (Lewis et al., 2003; Gutman et al., 2003).

Применяющиеся в настоящее время лекарственные препараты для лечения паркинсонизма имеют целый ряд существенных недостатков, что требует продолжения поиска и создания новых антипаркинсонических средств (Lewis et al., 2003; Gutman et al., 2003).

В комплексной терапии паркинсонизма значительный удельный вес занимают препараты аминоадамантанового ряда, используемые в виде разных солей 1- и 2-аминоадамантана - гидрохлорида (мидантан), сульфата (симметрел, вирегит), глюкоронида (глудантан).

В ГУ НИИ Фармакологии им. В.В. Закусова РАМН синтезированы и изучаются такие производные адамантана, как мемантин, бемантан, димантан, кемантан, бромантан и другие. В развитие данного направления был синтезирован целый ряд оригинальных соединений, из числа которых в ходе первичного скрининга было выделено соединение с наиболее ярко выраженной противопаркинсонической активностью - гидрохлорид Ы-(адамант-2-ил)гексаметиленимина (А-7 или Гимантан). Доклинически данное соединение было изучено д.м.н. Е.А. Вальдман в лаборатории психофармакологии под руководством проф. Т.А.Ворониной (Вальдман Е.А., 2001).

Противопаркинсонические свойства А-7 были изучены на моделях акинетико-ригидных и дрожательных проявлений паркинсонического синдрома (Вальдман Е.А. и др., 1999). Результаты исследований показали, что изучаемое соединение обладает способностью устранять акинетико-ригидные проявления паркинсонического синдрома, имея преимущества перед имеющимися в медицинской практике препаратами (Вальдман и др., 1999; Неробкова и др., 2000). Одним из основных преимуществ Гимантана перед другими лекарственными препаратами является отсутствие привыкания и синдрома отмены после длительного применения. Также было установлено, что Гимантан обладает высокой иммунотропной активностью в терапевтической дозе 10 мг/кг (Нежинская и др., 2001), что может вносить вклад в реализацию симптоматического и нейропротекторного эффекта препарата.

Таким образом, была показана перспективность дальнейшей разработки Гимантана в качестве потенциального средства для лечения паркинсонизма.

Одним их этапов создания лекарственных средств является проведение фармакокинетических исследований. Предметом экспериментальной фармакокинетики является изучение процессов всасывания, распределения, биопревращения и выделения препарата. Знание фармакокинетических свойств фармакологического средства позволяет обосновать выбор путей и методов его введения, выявить ткани, в которые оно проникает наиболее интенсивно и/или в которых удерживается наиболее длительно, установить основные пути элиминации фармакологического средства. По результатам экспериментального изучения фармакокинетики фармакологического средства возможна выработка ориентировочной схемы его дозирования и применения, обеспечивающей поддержание эффективной концентрации препарата в пределах терапевтического диапазона, которая может быть затем уточнена в ходе клинических испытаний. Важной задачей изучения фармакокинетики оригинального фармакологического средства является оптимизация выбора его лекарственной формы (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, 2000). Кроме того, фармакокинетические данные позволяют объяснить различия в реакции организма на лекарственное вещество, предупредить возникновение нежелательных эффектов препарата (Вальдман А.В., Жердев В.П., 1988; Жердев В.П. и др., 2003; Мирошниченко И.И., 2001).

В связи с вышеизложенным, целью данной работы, явилось доклиническое изучение фармакокинетики Гимантана и путей его биотрансформации. Для достижения вышеуказанной цели были поставлены следующие задачи: а) исследование фармакокинетики и распределения радиоактивного эквивалента Гимантана в крови, по тканям органов крыс после однократного внутривенного введения и введения внутрь; б) проведение проверки гипотезы линейности фармакокинетики Гимантана при однократном внутривенном введении различных доз; в) изучение кинетики выведения радиоактивного эквивалента Гимантана из организма крыс; г) изучение фармакокинетики

Гимантана у кроликов после однократного внутривенного введения субстанции и введения внутрь субстанции и таблетки; д) изучение фармакокинетики препарата у кроликов после многоразового введения; е) установление количественного содержания неизмененного Гимантана в крови крыс и кроликов, в моче крыс; ж) изучение выведения Гимантана с мочой, путей биотрансформации и установление химических структуры возможных метаболитов.

Для их выполнения был использован комплекс методических подходов, включающий радиоизотопный метод, специально разработанную методику с использованием капиллярной газовой хроматографии и метод хроматомасс-спеюрометрии. Работа проводилась в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2000).

Применяемый радиоизотопный метод дает сведения о содержании т.н. радиоактивного эквивалента Гимантана, т.е. суммарном содержании самого препарата и его возможных метаболитов. Использовали меченый по тритию Гимантан со специфической активностью 14 Ci/mmol. Минимально определяемая концентрация Гимантана соответствует 0,07 мкг/мл.

Для количественного определения неизмененного Гимантана применяли специально разработанный метод газовой хроматографии. Метод заключается в использовании капиллярной газовой хроматографии с пламенно-ионизационным детектированием. Минимально определяемая концентрация Гимантана составляла 0,08 мкг/мл.

Продукты биотрансформации Гимантана в моче изучали хроматомасс-спектрометрическим методом. С этой целью использовали комплексный метод, включающий газовую хроматографию и масс-спектрометрию.

Изучение фармакокинетики препарата в крови животных двух видов после внутривенного и перорального введений включало в себя изучение: (а) содержания радиоактивного эквивалента Гимантана (суммарное содержание самого препарата и его возможных метаболитов), и (б) концентрацию неизмененного Гимантана.

Характер поведения р.а.э. Гимантана в крови экспериментальных животных отличается длительной циркуляцией в организме и быстрым прохождением процесса распределения по органам и тканям, что является характерным для соединений данной группы (Морозов И.С.2001). Об этом свидетельствуют рассчитанные фармакокинетические параметры.

Фармакокинетические параметры 3Н-Гимантана для плазмы крови крыс были рассчитаны после внутривенного введения в рамках двухкамерной модели, после введения внутрь - в рамках двухкамерной модели с всасыванием первого порядка. Расчет фармакокинетических параметров после внутривенного введения препарата кроликам был осуществлен в рамках двухкамерной модели, после введения внутрь - в рамках однокамерной модели с всасыванием первого порядка. Фармакокинетические параметры для крыс представлены в таблице 7, для кроликов в таблице 24.

Как уже говорилось, 3Н-Гимантан длительное время циркулирует в организме, при этом процесс распределения 3Н-Гимантана по органам и тканям крыс (а-фаза) протекает в 50 раз быстрее, чем выведение его из организма, а процесс распределения 3Н-Гимантана по органам и тканям кроликов после внутривенного введения протекает в 100 раз быстрее, чем процесс выведения. На это указывают такие фармакокинетические параметры, как среднее время пребывания препарата в организме (MRT), период полураспределения (Т1/2а) и период полувыведения (Ti/гр).

В протекании процессов распределения и выведения р.а.э. Гимантана у двух видов экспериментальных животных обнаружены межвидовые различия. Так, у крыс процесс распределения проходит в 17,5 раз, а процесс выведения -в 10 раз медленнее, чем у кроликов. То же и со временем удержания препарата в организме: для двух способов введения значение MRT у крыс больше значения MRT у кроликов примерно в 10 раз.

Для р.а.э. Гимантана характерно интенсивное распределение по тканям органов. У крыс величина кажущегося объема распределения (Vi) в 2,3 раза (после внутривенного введения) и в 2,7 раза (после перорального введения) ниже значений объема распределения в квазистационарном состоянии (Vss) -это свидетельствуют о том, что препарат интенсивно захватывается тканями. И у крыс, и у кроликов (после введения внутрь) значения кажущегося объема распределения (Vi) значительно превышают реальный объем крови, что также указывает на лабильность препарата, его метаболизм или интенсивный захват тканями организма. У кроликов значение объема распределения после внутривенного введения V = 0,370 л/кг соответствует 37,0 % от объема организма, что свидетельствует об объемном распределении препарата во внеклеточной жидкости.

Низкие значения клиренса (С1) у крыс дополнительно подтверждают факт низкого концентрационного освобождения организма от препарата. У кроликов значения клиренса на порядок выше, чем у крыс, что говорит о более быстром выведении препарата из организма. Об этом же упоминалось при сравнении таких параметров как среднее время пребывания препарата в организме и период полувыведения.

При введении кроликам таблетки и субстанции внутрь значимых различий не обнаружено, что подтверждается статистической обработкой данных с использованием t-критерия Стъюдента.

Относительная биодоступность при введении внутрь таблетки препарата составляет у кроликов 92,5 %. Кроме того, такие параметры, как полнота и скорость всасывания радиоактивного эквивалента 3Н-Гимантана из лекарственной формы «таблетки», оцениваемые по величинам AUCo-t и Смах/AUCo-t, соответственно, по своим значениям статистически незначимо отличаются от параметров всасывания субстанции (р < 0,05), что позволяет рекомендовать таблетированную лекарственную форму для клинических исследований.

При изучении неизмененного Гимантана в крови крыс после двух способов введения (рис. 20, 21) было установлено, что после внутривенного введения количество неизмененного препарата составляет 32,36 % от уровня радиоактивного эквивалента, после введения внутрь количество неизмененного препарата составляет 7,24 % от количества радиоактивного эквивалента. Таким образом, препарат активно метаболизируется в организме крыс, причем, интенсивность образования метаболитов Гимантана выше при пероральном пути введения.

Расчет величины абсолютной биодоступности неизмененного препарата у крыс показал, что она составляет 28,3 %.

Изучение количественного содержания неизмененного Гимантана в крови кроликов после внутривенного введения (рис. 22) показало, что количество неизмененного препарата составляет 42,91% от соответствующего количества радиоактивного эквивалента Гимантана. Это свидетельствует о том, что Гимантан подвергается в организме кроликов, также как и в организме крыс, интенсивным метаболитическим изменениям. Сравнение данных о количестве неизмененного препарата у крыс и кроликов показывает, что при внутривенном пути введения интенсивность образования метаболитов Гимантана у крыс несколько выше, чем у кроликов.

Как уже говорилось, препарат интенсивно распределяется по тканям органов.

Экспериментальные данные, полученные после изучения распределения радиоактивного эквивалента Гимантана в органах и тканях крыс после однократных внутривенного введения в дозе 10 мг/кг и введения внутрь в дозе 20 мг/кг (таб. 9 и 10) свидетельствуют, что наибольшие концентрации меченого Гимантана после двух способов введения достигается в выводящих органах: печени и почках. Также высокие значения концентрации 3Н-Гимантана наблюдаются после внутривенного введения в тканях селезенки, сальника, мышц, после введения внутрь в тканях мышц, стриатума, сальника, селезенки.

Время достижения максимальной концентрации (таб. 11) в тканях органов после двух способов введения отличается: после внутривенного введения достижение Смах меченого препарата приходится почти во всех органах на 1 час, после введения внутрь значительно позднее, в тканях мозга, стриатума, семенниках время достижения максимальной концентрации составляет 8 часов.

Для выяснения сорбционных особенностей тканей органов и изучения динамики выведения и накопления препарата во времени был рассчитан коэффициент распределения (Кр), представляющий собой отношение концентрации препарата в тканях органа к концентрации препарата в крови (таб. 14 и 15, рис. 13 (а,б) и 14 (а,б).

Коэффициент распределения во всех органах, кроме тимуса и мозга имеет значение больше единицы, это свидетельствует о том, что препарат хорошо насыщает органы. Характер кривых зависимости Кр от времени указывает, что

- меченый препарат наиболее интенсивно проникает в ткани печени, селезенки, сальников;

- после внутривенного введения в тканях сальника наблюдается накопление препарата, в остальных органах скорость выведения радиоактивного препарата равна скорости его выведения из системного кровотока;

- через 24 часа после введения внутрь в тканях селезенки, сальника, мышц, семенников наблюдается кумуляция препарата на протяжении 3-х суток, а затем начинается его выведение из тканей органов; в печени и почках скорость выведения препарата приблизительно равна скорости выведения из кровеносного русла; значения Кр у сальника приблизительно в 2 раза больше при внутривенном введении, чем при введении внутрь во всем периоде наблюдения;

- после введения внутрь в стриатуме наблюдается более значительное накопление препарата со временем, чем после внутривенного.

Отдельно рассмотрена динамика изменений Кр в тканях органов-мишеней. Поскольку Гимантан является потенциальным лекарственным средством для лечения болезни Паркинсона, а также обладает иммунотропной активностью, следо-вательно, органами-мишенями для него являются вилочковая железа (тимус), мозг и, в частности, стриатум. Еще две структуры мозга - мозжечок и гиппокамп были использованы для сравнения.

Полученные данные свидетельствуют, что наибольшие концентрации 3Н-Гимантана уже в ранний период после введения обнаруживаются в стриатуме (таб. 16, 17, рис. 15 а,б). Причем, идет увеличение значения Кр со временем. К 10-м суткам после введения концентрация меченого препарата в стриатуме после внутривенного введения превышает концентрацию в крови более, чем в 2, а при введении внутрь более, чем в 3 раза, что говорит о накоплении препарата в данной структуре мозга. Эта тропность характеризизуется значительной селективностью именно к ткани стриатума, степень которой более, чем в 100 раз превосходит таковую к тканям мозжечка и гиппокампа на всем интервале наблюдения. В целом мозге и тимусе после двух способов введения скорость выведения препарата равна скорости выведения из системного кровотока (рис. 15 а,б).

О скорости освобождения тканей от 3Н-Гимантана можно судить по такому параметру, как среднее время удержания препарата в организме (MRT) (таб. 11), располагающемуся в следующем порядке (по возрастанию): после внутривенного введения - печень, сальник, мышцы, тимус, семенники, селезенка, почки, стриатум, мозг; после введении внутрь - печень, почки, семенники, мозг, мышцы, тимус, селезенка, стриатум, сальник,.

Расчет тотального содержания 3Н-Гимантана в пересчете на весь орган показал, что наибольшее количество радиоактивного эквивалента Гимантана находится в мышцах и сальнике. На долю мышечной ткани приходится около 50 % препарата, в то время как его содержание в крови на порядок меньше.

Результаты, заслуживающие отдельного внимания, были получены при сравнении распределения 3Н-Гимантана после внутривенного и перорального введения.

В стриатуме и тимусе после введения внутрь количество р.а.э. Гимантана превышает таковое (с учетом дозы) после внутривенного введения в 1,62 и 1,66 раза, соответственно; у сальника, в отличие от первых двух органов, при введении внутривенно количество р.а.э. Гимантана в 2,19 раза больше, чем при введении внутрь. Эти данные были получены при сравнении площадей под фармакокинетическими кривыми (таб. 11).

Данные о разности во времени достижения максимальной концентрации, и данные о различном содержании 3Н-Гимантана в тканях органов свидетельствуют о разной степени связывания радиоактивного эквивалента Гимантана в зависимости от способа введения. По-видимому, происходит изменение структуры препарата благодаря метаболическим превращениям Гимантана при прохождении через ЖКТ. Вероятно, структура образующегося метаболита (-ов) более интенсивно преодолевает ГЭБ и селективно связывается с тканями стриатума, а также тимуса. Различия в интенсивности прохождения процессов метаболизма были подтверждены при изучении неизмененного препарата.

Полученные результаты позволяют дать фармакокинетическое обоснование особенностей в динамике развития эффекта после двух способов введения Гимантана: внутривенно и внутрь. Данные, полученные Е.А. Вальдман (2001), свидетельствуют о том, что эффект Гимантана оказался наиболее выраженным при введении внутрь. Поскольку стриатум является структурой мозга, имеющей непосредственное отношение к патогенезу паркинсонизма, то преобладание Гимантана в тканях этой структуры-мишени после перорального введения несет ответственность за эффект.

При исследовании влияния различных доз Гимантана на фармакокинетику у крыс установлено, что с увеличением дозы пропорционально увеличивается концентрация радиоактивного эквивалента в плазме крови. Величина площади под фармакокинетической кривой также увеличивается с ростом дозы в соответствующее число раз. Для дозы 5 мг/кг величина AUCO-t равняется 41,566 мкг*ч/мл, увеличение дозы в 2 и 6 раз изменяет площадь под концентрационной кривой до 76,511 мкг*ч/мл и 225,668 мкг*ч/мл. Значения дозонезависимых параметров не зависили от количества введенного препарата (таб. 19).

Концентрационные кривые и данные основного фармакокинетического параметра (площади под фармакокинетической кривой) (таб. 19, рис. 16) доказывают линейность уровней препарата в крови в зависимости от введенной дозы.

При изучении кинетики выведения Гимантана с мочой из организма крыс было установлено, что количество радиоактивного эквивалента Гимантана в 22,7 раза превышает количество неизмененного препарата (рис.17, 23). Так, за 10 суток выводится всего 39,71 % радиоактивного эквивалента Гимантана от введенной дозы, причем наибольшая часть препарата выходит за первые сутки наблюдения. Та же тенденция прослеживается в поведении неизмененного препарата. За 10 суток выводится 1,75 % неизмененного Гимантана, из них за первые сутки выходит также большая часть вещества. Это говорит о том, что препарат медленно выводится с мочой, в основном, в виде метаболитов.

Для возможности определения влияния многократного введения Гимантана на фармакокинетические параметры проводилось изучение его фармакокинетики после шестикратного введения в дозе 10 мг/кг с интервалом в 24 часа. Эти данные позволяют выявить возможные изменения активности метаболизирующих систем после многоразового введения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Петренко, Евгения Сергеевна, 2003 год

1. Арушанян Э.Б. // О нейрофизиологии паркинсонизма и поздней дискинезии и методах фармакологической коррекции этих патологических состояний //Ж. Невропатология и психиатрия, 1985, 2, с. 269-277.

2. Бархатова В.П. // Нейротрансмиттеры и экстрапирамидная патология. // М.: Медицина, 1988, 175 стр.

3. Богданов М.Г. // Изучение взаимодействия дофаминергической и серотонинергической систем стриатума в механизмах действия нейролептиков // Автореф. дисс., М., 1991, 19 стр.

4. Буданцев А.Ю. // Моноаминоэргические системы мозга // М.: Наука, 1976, 192 стр.

5. Вальдман Е.А., Воронина Т.А., Неробкова Л.Н. // Противопаркинсоническая активность нового производного адамантана. // Ж. Экспериментальная и клиническая фармакология, 62 (4), 1999, с. 3-6.

6. Вальдман Е.А. // Фармакологическая активность нового производного адамантана потенциального противопаркинсонического препарата при субхроническом введении. // Ж. Экспериментальная и клиническая фармакология, 63 (5), 2000, с. 3-6.

7. Вальдман Е.А. // Разработка фармакологического средства патогенетической терапии паркинсонизма на основе анализа механизмов действия производных аминоадамантана. // Автореф. Дисс. На соискание ученой степени доктора медицинских наук. Москва. - 2001.

8. Вейн A.M., Голубев В.А., Берзиньш Ю.Э. // Паркинсонизм. Клиника, этиология, патогенез, лечение // Рига: Зинатне, 1981, 328 стр.

9. Витолинь P.O., Кименис А.А. // Исследования центрального действия глудантана // Ж. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия, Рига: Зинатне, 1980, 2, стр. 99-103.

10. Волошин М.Я. // Экпериментальное воспроизведение катехоламин-дефицитных состояний и проблема паркинсонизма II Ж. Нейрофизиология, 1990, 22(3), с. 401-414.

11. Девойно Л.В., Ильюченок Р.Ю. // Нейромедиаторные системы в психонейроиммуномодуляции. Допамин. Серотонин. ГАМК. Нейропептиды. И Новосибирск: ЦЭРИС, 1993, 237 с.

12. Кадыков А.С. // Об эффективности амантадина (мидантана) при лечении паркинсонического синдрома // Ж. невропатологии и психиатрии, М.: "Медицина", 1976, 76(2), стр. 174-178.

13. Камянов И.М. // Мидантан в лечении и профилактике нейролептического паркинсонизма. // Сб. научных трудов: Побочные действия лекарственных средств, под ред. А.С.Лопатина, М., 1976, стр. 114-117.

14. Карабань И.Н. // Современные лекарственные средства терапии паркинсонизма // Медицина Украины, Киев, "Медицина Украины", 1996, №1, с. 50-51.

15. Каркищенко Н.Н., Хоронько В.В., Сергеева С.А., Каркищенко В.Н. // Фармакокинетика // Ростов н/Д: Феникс, 2001, 384 с.

16. Кименис А.А., Клуша В.Е. // Токсикологическая и фармакологическая характеристика нового препарата адамантанового ряда (JP-76) в сравнении с мидантаном // Ж. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия, Рига, 1970, 2, стр. 3-5.

17. Крыжановский Г.Н., Карабань И.Н., Магаева С.В., Карабань Н.В. II Восстановительные и компенсаторные процессы при паркинсонизме // Киев, Ин-т геронтологии АМН Украины, 186 стр.

18. Крыжановский Г.Н., Магаева С.В., Трекова Н.А., Ветрилэ Л.А., Башарова Л.А., Атаджанов М.А. // Участие серотонинергического аппарата стриатума в паркинсоническом синдроме // Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1993, 5, с. 466-469.

19. Крыжановский Г.Н., Никушкин Е.В., Кучеряну В.Г., Черепов А.Б., Карабань И.Н., Маньковский Н.Б. // Перекисное окисление липидов у больных болезнью Паркинсона //Ж. Проблемы старения и долголетия, 1993, 3(1), с. 47-50.

20. Лакин К.М., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ. // М.: Медицина.-1981 .-342 стр.

21. Левин С.Л. // Дофаминергическая концепция паркинсонизма и лечение его L-Дофа II Ж. Невропатологии и психиатрии, 1977, 77(1), с. 127-134.

22. Любимов Б.И., Сколдинов А.П., Бойко С.С., Родионов А.П., Можаева Т.Я. // Изучение фармакокинетики 2-(М-бензиламино)-адамантана (бемантана)методом газожидкостной хроматографии. // Ж. Фармакологии и токсикологии, 1980, 4, с. 409.

23. Маньковский Н.Б., А.Б. Вайншток, J1.H. Олейник II Опыт длительного применения глудантана в гериатрической практике лечения больных паркинсонизмом II Ж. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия, Рига: Зинатне, 1981, 10, 74-80.

24. Машковский М.Д. // Лекарственные средства: в двух томах // Т.1, Изд. 11, М.: Медицина, 1988, 624 стр.

25. Медведкова С.А. // Фармакокинетика бромантана. // Дисс. на соискание уч. степени канд. биол. наук, 1984.

26. Мирошниченко И.И. Основы фармакокинетики. // М. ГЭОТАР Мед. -2002.-192 стр.

27. Морозов И.С., Петров В.И., Сергеева С.А. II Фармакология адамантанов // Волгоград, 2001.

28. Нежинская Г.И., Вальдман Е.А., Назаров П.Г., Воронина Т.А. // Иммунотропная активность потенциального противопаркинсонического средства Гимантана. //Ж. Экспериментальная и клиническая фармакология, 2001, 64 (2), с. 60-63.

29. Новиков Е.А. // Применение методов вариационной статистики в биологии и медицине//Ж. Проблемы репродукции, 1995, 1, стр. 20-22.

30. Ортель В.Х., Коршунов A.M. // Неврологический журнал // Москва, изд. "Медицина", 1997, 6, с. 4-8.

31. Петелин Л.С. // Современные проблемы паркинсонизма // Клиническая медицина, 1973, 51(4), с. 9-16.

32. Петелин Л.С., Шток В.Н., Пигарев В.А., Вартанян К.З., Жагалко В.К., Мамышева О.Д. // Глудантан в лечении паркинсонизма // Ж. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия, Рига: Зинатне, 1981, 10, с. 71-73.

33. Петренко Е.С., Вальдман Е.А., Родионов А.П., Ковалев Г.И. // Распределение Гимантана нового производного адамантана с противопаркинсонической активностью по тканям органов в эксперименте. //

34. Ведомости научного центра экспертизы и государственногоконтроля лекарственных средств // 2001, 3 (7), стр. 101-103.

35. Пигарев В.А., Вартанян К.З., Мамышева О.Д. II Сравнительная клиническая характеристика антипаркинсонического действия препаратов аминоадамантанового ряда II Ж. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия, Рига: Зинатне, 1984, 13, стр. 100-107.

36. Пикок К. II Новые нейромедиаторы при болезни Паркинсона. // В кн: Нейротрансмиттерные системы, М.: Мир, 1982, с. 102-117.

37. РЛС-Аптекарь // Изд. второе, Гл. ред. Ю.Ф.Крымов, М.: "РЛС-2000", 2000, 1376 стр.

38. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ // М.: ЗАО "ИИА "Ремедиум", стр. 107-114.

39. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. // Математическая статистика в клинических исследованиях. // М.: «Химия», 1983.

40. ТОП-медицина // Москва, изд. НЦМИ Универсимед, 2000, 2, с.10.

41. Трохачев А.И. // Импульсная активность мозга человека // Л., "Медицина", 1971, 152 стр.

42. Фарматека // изд. НЦМИ "Тимотек", 2000, №3, с. 44-52.

43. Фюльграфф Г., Пальм (под ред.) // Фармакотерапия, клиническая фармакология II Минск, "Беларусь", 1996.

44. Холодов Л.Е., Яковлев В.П. И Клиническая фармакокинетика. // М.: Медицина, 1985,464с., ил.

45. Черченко А.П. // Биологическая активность мозга кошек при введении серотонина и триптофана в хвостатое ядро, гиппокамп и гипоталамус. II В кн: Проблемы физиологии гипоталамуса, Киев, 22, 1988, с. 99-103.

46. Bartholini G., Scatton В., Worms P. // Interaction between GABA, dopamine, acetylcholine, and glutamate-containing neurons in the extrapyramidal and limbic system. // In: GABA and Basal Ganglia, ed. Chiara G.D. et al, New York, 1981, pp. 119-128.

47. Bleidner W.E., Harmon J.В., Hewes W.E., Lynes Т.Е., Hermann E.C. // Absorption, distribution and excretoin of amantadine hydrochloride. // J. Pharmacol. Exp. Ther., 1965, 150 (3), pp. 484-490.

48. Bormann J. // Memantine is a potent bloker of N-metyl-D-aspartate (NMDA) receptor channels. // Europ. J. Pharmacol., 1989, 166, pp. 591-593.

49. Bowery N.G., Hill D.R., Hadson A.L. // Baclofen decreases neurotransmitter release in mammalian CNS by an action at the novel GABA receptor. // Nature, 283, 1980, pp. 92-94.

50. Calne D.B. // Bromcriptine and the nigrostriatal system: parkinsonism // Triangle, 1978, 17(1), pp. 49-53.

51. Celesia G.G., Wannamaker W.M. II L-dopa-carbidopa: combined therapy for the treatment of Parkinson's disease // Dis. Nerv. Syst., 1976, 37(30), p. 123-126.

52. Chinaglia G., Landwehrmeyer В., Probst N. & Palacios J.M. // Serotoninergic terminal transporters age differently affected in Parkinson's disease and progressive supranuclear palsy. // Neuroscience, 1993, 54, pp. 691-700.

53. Cohen M.M., Scheife R.T. // Pharmacotherapy of Parkinson's desease. // Amer. J. Hosp. Pharm., 1977, vol. 34, N 5, pp. 535-538.

54. Dewar K.M., Soghomonian J.J., Bruno J.P. // Elevation of dopamine D2 but not D1 receptors in adult rat neostriatum after neonatal 6-hydroxydopamine degeneration. // Brain Res., 1990, p. 536.

55. Dray A. // Serotonin in the basal ganglia: Function and interaction with other neuronal pathways // J. Phisiol (Paris), 1981, 77, pp. 393-403.

56. Ennis C., Kemp J.D. & Cox B. // Characterization of ingibitory 5-hydroxy-tryptamine receptors that modulate dopamine release in the striatum. // J. Neurochem.,1991, 36, pp. 1515-1520.

57. Euler G. & Von L.Y. // Dopamine inhibits 3H MK-801 binding in membrane preparations from rat cerebral cortex and caudate putamen. // Asta Physiol., Scand., 1992, 146, pp. 547-548.

58. Factor S.A., Molho E.S., Brown D.L. // Acute delirium after withdrawal of amantadine in Parkinson's desease. // Neurology, 1998, vol. 50, N 5, pp. 1456-1458.

59. Feldman R.S., Meyer J.S., Quenzer L.F. // Principles of Neuropsychopharmacology. // Sinauer Associates, Inc. Pablishers, Sunderland, Massachusets, 1997, 909 p.

60. Freedman A. // Pizotifen (sandomigran) used for treatment of parkinsonian tremor premilinary communication//Neurol. Neurochir., Pol., 1978, 12, p.263-267.

61. Gelders Y.G., Heylen S.I.E., Wanden, Bussche et al. // Pilot clinical investigation of risperidone in the treatment of psychotic patients. // Pharmacopsychiatry, 23, 1990, pp. 206-211.

62. Glowinski J., Iversen L.L. // Regional studies of catecholamines in the rat brain I. The disposition of H3-norepinephrin, H3-dopamine and H3-DOPA in various regions of the brain. / J. Neurochem., 1966, 13, p. 655-669.

63. Goldstein J.M., Litwin L.C. & Malick J.K. // Ritanserin increases spontaneous activity of A9 and A10 dopamine neurons. // Fed. Proc., 46, 1987, p. 966.

64. Goldwin-Austen R.R., Smith N.J. If Comparison of the effects of bromocriptine and levodopa in Parkinson's disease //J. Neurol. Neurosurg. Psychiat., 1977,40(5), pp. 479-482.

65. Greenwood C.E., Tatton W.G., Seniuk N.A. & Biddle F.G. // Increased dopamine synthesys in aging substuntia nigra neurons. // Neurobiol. Aging, 12, 1991, pp. 557-566.

66. Grossmann W. // memantine and neurogenic bladder disturbunces in patients with multiple sclerosis. // In: Memantin-chemistry, pharmacology, clinical results, p. 43-44, Scatton W. (ed.), Merz Pharma Internal Report, Frankfurt, 1981.

67. Hallberg H. // Blockade of central beta-adrenoreceptor attenuates tremor induced by 5-hydroxytryptamine (5HT)-receptor activation in rat. // Acta Physiol., Scand., 1987, 129,pp. 421-428.

68. Hassler R. // Zur Pathologie der Paralysis agitans und des postencephatitischen Parkinsonismus, J. Psychol. Neurol., 1938, 48(516), pp. 387486.

69. Hekkila R., Manzino L., Cabbat F.S. et al. // Protection against the dopaminergic neurotoxicity of MPTP, by monoamine oxidase ingibitors // Nature, 1984, 311, pp. 467-469.

70. Hokfelt Т., Rehfeld J.F., Skorboll L. // Evidence for coexistence of dopamine and cholecystokinin in mesolimbic neurons. // Nature (London), 1980, 285, pp. 476-478.

71. Horadan V.W., Sharp J.G., Smilack J.D. et al. // pharmacokinetics of amantadine hydrochloride in subjects with normal and impaired renal function. // Ann. Intern. Med., 1981, 94, 4, part 1, pp. 454-458.

72. Hornykiewicr О. II Neurochemical pathology and the etiology of Parkinson's disease: basic facts and hypothetical possibilities // Mount Sinai J., Med., 1988, 55, pp. 11-20.

73. Jankovic J. // Emerging strategies for the treatment of Parkinson's disease. // In: Parkinson's Disease, Symposium Review, ed M.Sandler, 1993, pp.3-30.

74. Kita H. & Kitai S.T. // Glutamate decarboxylase immunoreactivity neurons in rat neostriatum: their morpholigical types and populaitions. // Brain Res., 1988, 44, pp. 346-352.

75. Klein P., Lees A. & Stern G. // Consequences of chrome 5-hydroxy-tryptophan in Parkinsonism instability of gait and balance and other neurological disorders. // In: Advances in Neurology, ed. Yahr M.D. et al, New York, 1986, 45, pp. 603-604.

76. Klitenick M.A., De Witte Ph. & Kalvias P.W. II Regulation of somatodendritic dopamine release in the ventral tegmental area by opioids and GABA: an in vivo microdialysis study. //J. Neurosci., 1992, 12, pp. 2623-2632.

77. Knoll J. // The pharmacological basis of the therapeutic effect of deprenil in age-related neurological disease. // In: Inhibitors of Monoamine Oxidase B, ed I. Szelenyli, Birkhauser, Basel, 1975, pp. 145-168.

78. Koppel CM Tenczer J., Rutten E. Klaschka F. The metabolism of tromantadine // Biomed. Mass. Spektrom. 1985. - 12 (9). - P. 497-498.

79. Kornhuber J., Weller H. // Psychotogenicity and N-methyl-D-aspartate receptor antagonism: implications for neuroprotective pharmacotherapy. // Biol. Psychiatry, 1997, 41, pp. 135-144.

80. Kornhuber J., Weller H., Schoppnieyer K., Riederer P. // Amantadine and memantine as NMDA receptor antagonists whith neuroprotective properties. // J. Neural. Transm., 1994, 43, pp. 91-104.

81. Lehmann J. & Langer S.Z. // Muscarinic receptors on dopamine terminals in the caudate nucleus: neuromodulation of 3H-dopamine release in vitro by endogenous acetylcholine. // Brain Res., 1982, 248, pp. 61-69.

82. Lindefors N., Brodin E., Tossman U. & Ungerstedt U. II Striato-nigral tachikinin neurons and influence from striatal dopamine and GABA. // In: Substance P and Neurokinins, ed Henry J.L. et al, New York & Berlin, 1987, pp. 356-358.

83. Lipton S.A. & Rosenberg P.A. // Mechanisms of desease: exitatory amino acid as a final common pathway for neurological disorder. // New Engl. J. Med., 1994, 330, pp. 613-622.

84. Luts R.J., Dedrick R.L., Matthews H.B., Eling Т.Е., Anderson M.W. // A preliminary pharmacokinetic model for several chlorinated biphenil in the rat. II Drug. Metab. and Disposit.: Biol. Fale Chem., 1977, 5, pp 386-396.

85. Marsden C.D. // Parkinson's desease. // Lanset, 1990, pp. 948-952.

86. Miltner F.O. // Wertigkeit der symptomatischen therapie mit memantin beim zerebralen Koma. // Arzneim., Forsch./Drug Res., 1982, 32 (11), pp. 1271-1273.

87. Morelli M., Mennini T. & Di Chiara G. // Nigral dopamine autoreceptors are exclusively of D2 type: quantitative autoradiography of 125 I iodosulpride and 125 ISCH-23982 in adjacent brain section. II Neuroscience, 1988, 27, pp. 865-870.

88. Murray A.M. & Waddington J.L. // Age relatad changes in the regulation of behavior by D1:D2 dopamine receptor interactions. // Neurobiol. Aging, 1991, 12, pp. 431-436.

89. Natura I., Douillet P., Sun C.J. et. al. // MPP+ (1-methyl-4-phenylpyridine) is a neurotoxin to dopamine-, norepinephrine-, and serotonin-containing neurons. // Europ. J. Pharmacol., 1987, 136, pp. 31-37.

90. Nicolaou N.M., Garcia-Munoz M., Arbuttnott G.M. & Eccleston D. // Interactions between serotoninergic and dopaminergic system in rat brain demonstrated by small and lateral lessions of the raphe neuclei. // Europ. J. Pharmacol., 1979, 57, pp. 295-305.

91. Osborne N.N., Beale R., Golombiowska-Nikitin K., Sontag K.N. // The effect of memantine on various neurobiological processes. // Arzneim., Forsch./Drug Res., 1982, 32 (11), p. 1246.

92. Parkes J.D., Debono A.G., Marsden C.D. // Bromcriptine in parkinsonism: long-term treatment, dose response, and comparison with levodopa. II J. Neurosurg. Psichiat., 1976, 39(11), pp. 1101-1108.

93. Parkinson Study Group // Effect of tocopherol and deprenyl on the progression of disability in early Parkinson's disease. // New Eng. J. Medicine, 1993, 328, pp. 176-183.

94. Pearse J.M.S. // Parkinson's Disease and its Management. // Oxford Univ., Press., Oxford, New York & Tokyo, 1992.

95. Pinder R.M., Brogden R.N., Sawyer P.R. // Levodopa and decarboxylase inhibitors: a review of their clinical pharmacology and use in the treatment of Parkinsonism. // Drugs (Basel), 1976, 11, pp. 329-377.

96. Rapier C., Lunt G.G. & Wonnacott S. // Stereoselective nicotine-induced release of dopamine from striatal synaptosomes: concentration of dependence and repetitive stimulation. //J. Neurochem., 1980, 50, pp.1123-1130.

97. Ribak C.E. II The GABA-ergic neurons of the extrapyramidal system as revealed by immunocytochemistry. // In: GABA and the Basal Ganglia, ed G. Di Chiara et al, New York, 1987, pp. 23-36.

98. Santiago M. & Westerink B.H. // The regulation of dopamine release from nigrostriatal neurons in conscious rats: the role of somatodendritic autoreceptors. // Eur. J. Pharmacol., 1991, 204, pp.79-85.

99. Scatton W. // Metabolism of memantine. // In: Memantin-chemistry, pharmacology, clinical results, Scatton W. (ed.), Merz Pharma Internal Report, Frankfurt, 1981, p. 12-14.

100. Scatton W. // Excitatory amino acid and GABA influence on rat striatal cholinergic transmission. // In: Neurotransmitter Interactions in the Basal Ganglia, ed Sandler M. etal., New York, 1987, pp. 121-132.

101. Schneider J.S. // Chronic exposure to low doses of MPTP. // Neurochemical and pathological consequences in cognitively-impaired motor asymptomatic monkey., Brain Res., 1990, 543, pp. 25-36.

102. Spehlman R., Stephen M.S. // Dopamine acetylcholine imbalance in Parkinson's desease. Possible regenerative overgrowth of cholinergic axon terminals. // Lancet, 1976, vol. 1, N 7962, pp. 724-726.

103. Stern M.B., Koller W.C. II Parkinson's Disease. // In: Parkinsonian Syndromes II ed M.B. Stern, W.S. Koller II Marcel Dekker, New York, 1992, pp. 3-32.

104. Turski L., Bressler K., Retting L.J. // Protection of substantia nigra from MPP+ neurotoxicity by N-methyl-D-aspartate antagonist. // Nature, 1991, 349, pp. 414418.

105. Waldmeier P.С. & Delini-Stula A.A., Serotonin-dopamine interactions in nigrostriatal system. Europ. J. Pharmacol., 1979, 55, pp. 363-373.

106. Wesemann W., Schollmeyer J.D., Sturm G. // Gaschromatographische und massenspektrometrische Untersuchungen uber harnpflichtige Metabolite von Adamantananaminen. //Arzneim., Forsch./Drug Res., 1977, 27 (11), 7, pp. 1471-1477.

107. Wesemann W., Dette-Wildenhahn G., Fellehner H. // In vitro studies on the possible effects of 1-aminoadamantanes on the serotonergic system in M.Parkinsons. // J. Neural. Transm., 1979, 44, pp. 263-285.

108. Wesemann W., Sturm G., Funfgeld E.W. II Distribution and metabolism of the potential anti-parkinson drug Memantine in thr human. // J. Neural. Transm., 1980, Suppl. 16, pp. 143-148.

109. Wesemann W., Schollmeyer J.D., Sturm G. // Distribution of Memantine in brain, liver and blood of the rat. //Arzneim., Forsch./Drug Res., 1982, 32 (11), 10, pp. 1243-1245.

110. Wesemann W., Sontag K.H., Maj J. // Zur pharmakodinamik und pharmakocinetic des Memantine. // Arzneim., Forsch./Drug Res., 1983, 33 (11), 8, pp. 1122-1134.

111. Westfall T.C. & Tittermary V., Ingibition of the electrically induced release of 3H-dopamine by serotonin from superfused rat striatal slises. J. Neurosci. Lett., 1982, 28, pp. 205-209.

112. Wirtshafter D., Stratford T.R. & Asin K.E., Evidence that serotoninergic projections to the substantia nigra in the rat arise in the dorsal, but not median raphe nucleus, Neurosci., Lett., 7, 1987, pp. 261-266.

113. Wooten G.F. // Neurochemistry. II In: Handbook of Parkinson's desease, ed. Koller W.C., Basel & New York, 1987, pp. 237-251.

114. Zeevalk G.D., Nicklas W.J. & Sonsalla P.K. // NMDA receptor involvement in two animal model of Parkinson's desease. II Neurobiol. Aging, 1994, 15, pp. 269270.