Изучение нейрохимических и молекулярно-биологических механизмов противопаркинсонического действия препарата гимантан тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат биологических наук Абаимов, Денис Александрович

• Абаимов, Денис Александрович
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Абаимов, Денис Александрович

Список используемых сокращений.

1.ВВЕДЕНИ Е.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. ОБЩИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ПАРКИНСОНИЗМЕ. 2.2. COBPEMEIШЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ЭТИОЛОГИИ И ПАТОГЕНЕЗЕ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА.

2. 2.2.1. Нарушение баланса «дофамин-ацетилхолин».

2.2.2.2. Нарушение баланса «дофамин-глутамат» в базальных ядрах.

2.2.2.3. Нарушение баланса «дофамин-серотонин» и патогенез паркинсонизма.

2.3. ДОФАМНЕРГИЧЕСКАЯ СИСТЕМА МОЗГА. РОЛЬ РАЗЛИЧНЫХ ДОФАМИНЕРГИЧЕСКИХ ПОДСИСТЕМ В РЕГУЛЯЦИИ ДВИГАТЕЛЬНЫХ И ГОРМОНАЛЬНЫХ РЕАКЦИЙ ОРГАНИЗМА.

2.4. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ НЕЙРОХИМИЯ ДОФАМИНЕРГИЧЕСКОГО.

СИНАПСА.

2.4.1. Синтез дофамина и его регуляция.

2.4.2. Высвобождение дофамина.

2.4.3. Система обратного захвата дофамина и ее роль в регуляции дофаминергической трансмиссии. Дофаминовый транспортер (DAT).

2.4.3.1. Локализация и распределение белка-транспортера DAT в центральной нервной системе.

2.4.3.2. Молекулярная структура белка DAT.

2.4.3.3. Клеточная биология дофаминового транспортера.

2.4.3.4. Функциональная роль дофаминового транспортера.

2.4.3.5. Фармакология DAT.

2.4.4. Катаболизм катехоламинов.

2.4.5. Дофаминовые рецепторы центральной нервной системы.

2.5. ФАРМАКОТЕРАПИЯ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА.

2.5.6. Производные адамантана.

2.5.7. Фармакологические свойства нового противопаркинсонического препарата гимантан.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Материалы.

3.1.1. Животные:.

3.1.2. Вещества.

3.2. Методы.

3.2.1. Радйолигандное связывание in vitro.

3.2.2. Синаптосомальный захват [3Н]-ДА.

3.2.3. Определение активности Na,K-ATOa3bi путем измерения концентрации продукта реакции Фн методом Ратбуна и Бертлах.

3.2.4. Изучение влияния гимантана на содержание белка дофаминового транспортера DAT в гомогенатах стриатума крыс и культуре клеток PC-12.

3.2.4.1. Культивирование клеток РС12.

3.2.4.2. Подготовка культуральных планшетов.

3.2.4.3. Рассев клеток для постановки экспериментов.

3.2.4.4. Внесение гимантана в культуру клеток PC 12.

3.2.4.5. Методика Вестерн-блота.

3.2.5. Определение содержания моноаминов и их метаболитов в ткани мозга мышей.

3.2.6. Статистическая обработка результатов.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Изучение влияния гимантана на основные группы рецепторов вовлеченных в этиопатогенез болезни Паркинсона in vitro и ex vivo.

4.1.2. Изучение влияния гимантана на ДА-рецепторы в стриатуме и гиппокампальные глутаматные рецепторы NMDA-подтипа in vitro.

4.1.1.1. Изучение влияния гимантана на гиппокампальные глутаматные рецептороы NMDA-подтипа in vitro.

4.1.1.2. Радиолигандное связывание с Dl, D2 и D3 - рецепторами дофамина стриатума крыс in vitro.

4.1.2. Изучение влияния субхронического введения гимантана на характеристики связывания селективных лигандов с дофаминовыми рецепторами стриатума крыс их vivo.

4.2. Изучение влияния гимантана на обратный захват дофамина.

4.2.1. Изучение влияния гимантана и других производных адамантана на синаптосомальный захват [3Н]-ДА в стриатуме крыс in vitro.

4.2.1.1. Эффекты различных концентраций гимантана на захват [3Н]-ДА.

4.2.1.2. Сравнение ингибирующей активности мидантана и гимантана.

4.2.2. Изучение влияния гимантана на обратный синаптосомальный захват дофамина ех vivo.

4.3.Влияние веществ-анализаторов на захват [3Н]-ДА синаптосомами стриатума крыс.

4.3.1. Влияние избирательного конкурентного ингибитора захвата ДА — вещества GBR-12909 на синаптосомальный захват [3Н]-ДА.

4.3.2. Влияние антагонистов NMDA-рецепторов глутамата на обратный захват [ЗН]-ДА синаптосомами стриатума крыс.

4.3.3.Влияние агонистов глутаматных рецепторов на захват [3Н]-ДА синаптосомами стриатума крыс.

4.4. Изучение влияния гимантана на активность Na/K-АТФазы синаптосом стриатума крыс.

4.5. Изучение эффектов гимантана на уровень белка - дофаминового транспортера DAT в стриатуме крыс и культуре клеток.

4.6. Изучение влияния гимантана на уровни основных нейромедиаторов вовлеченных в патогенез болезни Паркинсона и синтез ДА.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение нейрохимических и молекулярно-биологических механизмов противопаркинсонического действия препарата гимантан»

Актуальность проблемы. Болезнь Паркинсона относится к числу наиболее распространенных заболеваний в современном обществе. Как показывают результаты многочисленных эпидемиологических исследований, с возрастом частота болезни Паркинсона в популяции неуклонно увеличивается. Так, в возрастной группе до 65 лет она составляет около 1%, от 65 до 75 лет - 2% и, наконец, у лиц старше 75 лет болезнь Паркинсона встречается с частотой 3-4% (Иллариошкин, 2006; Marion, 2001). Можно заключить, что в связи с общемировой тенденцией к постепенному постарению населения актуальность данной проблемы в будущем будет постоянно возрастать.

Паркинсонизм характеризуется брадикинезией, мышечной ригидностью, амимией, а также аффективными расстройствами (депрессией) и прогрессирующей деменцией (Ilamani and Lozano, 2003). Доказано, что болезнь Паркинсона вызывается дефицитом до-фаминергической передачи в стриатуме, который, в свою очередь, обуславливается дегенерацией нейронов компактной части черной субстанции (Piccirilli, 1984; Ilamani and Lozano, 2003). Дефицит дофаминергических влияний в свою очередь неизбежно влечет за собой нарушение баланса нейромедиаторов. Наиболее серьезный вклад в развитие пар-кинсонического симптомокомплекса вносит усиление активирующих влияний глутамата и ацетилхолина, при ослаблении ингибирующих влияний дофамина. При активации глута-матергической системы реализуются токсические эффекты глутамата (Lipton, 2004), что в еще большей степени способствует дегенерации нейронов (Beal, 1992; Blandini, 1996). Данное нарушение баланса нейромедиаторных систем стриатума вызывают существенные изменения в рецепторной архитектонике (Loschmann, 1997; Stoessl and de la Fuente-Fernandez, 2003). Таким образом, наиболее эффективным подходом к терапии паркинсонизма представляется одновременная стимуляция нарушенной дофаминергической передачи с ингибированием глутамат- и холинергических проекций.

В настоящее время существует большое количество противопаркинсонических препаратов, однако большинство из них относятся к симптоматическим средствам. В этой связи остается высокой актуальность создания новых средств патогенетической терапии. Ввиду наличия большого числа патогенетических звеньев БП, наиболее перспективными представляются лекарства с комплексным механизмом действия, обладающие как дофаминопозитивными, так и нейропротекторными свойствами. Такими препаратами являются » производные адамантана (мидантан, глудантан) (Schwab, 1972; Вайншток, 1978), которые воздействуют сразу на несколько нейрохимических систем и обладают выраженными нейропротективными свойствами (Ebadi, 1996; Danysz, 1997).

В НИИ Фармакологии РАМН был синтезирован новый потенциальный иротивопар-кинсонический препарат гимантан (Ы-адамант-2-ил гексаметиленимина гидрохлорид), который превосходит амантадин по противопаркинсонической эффективности. В экспериментах in vitro показано, что гимантан в концентрации 10"5 М оказывает ингибирующее влияние на активность фермента МАО-В (Вальдман, 2003). Установлено, что гимантан в микромолярпом концентрационном диапазоне обладает свойствами неконкурентного блокатора ионного канала глутаматных рецепторов NMDA-подтипа с IC50 = 11,8 ± 0,6 мкМ. (Вальдман, 2003). В экспериментах определен спектр противопаркинсонической активности гимантана, доказаны его преимущества перед амантадином (мидантаном), показана перспективность применения гимантана для лечения ригидных и дрожательных форм паркинсонизма (Неробкова, 2000; Вальдман, 2003). В микродиализных исследованиях на крысах показано что системное введение гимантана повышает уровень экстраклеточного дофамина и вызывает дозозависимое снижение содержания метаболитов дофамина и серотонина в стриатуме крыс (Андяржанова, 2001). Таким образом, гимантан оказывает комплексное воздействие на дофаминергическую передачу, улучшая ее эффективность. В настоящее время препарат изучается в клинике. Тем не менее, изучение нейрохимических и молекулярно-биологических механизмов действия гимантана не завершено. Проведение радиорецепторных исследований фармакодинамики препарата, изучение механизмов дофаминпозитивного эффекта, а также характера взаимодействия глутамат- и дофаминергической систем в процессе реализации противопаркинсониче-ского действия препарата позволяет углубить представления о фармакологических мишенях гимантана и открывает перспективы создания на его основе новых, более эффективных препаратов.

Цели и задачи исследования. Целью данного исследования явилось изучение нейрохимических и молекулярно-биологических механизмов действия и поиск новых фармакологических мишеней оригинального отечественного противопаркинсонического препарата гимантана. Для достижения указанной цели были сформулированы и поставлены следующие задачи:

1. Изучить с помощью метода радиолигандного связывания влияние гимантана на основные группы рецепторов участвующих в эгиопатогенезе болезни Парки неона - дофаминовые (Dl, D2 и D3) и глутаматные (NMDA) рецепторы.

2. Оценить участие системы обратного захвата дофамина в механизме модуляции ги-мантаном дофаминовой нейропередачи в стриатуме мозга крыс in vitro

3. Проанализировать влияние гимантана на пресинаптический транспорт ДА в стриа-тумах крыс в условиях эксперимента ex vivo.

4. Изучить с использованием стандартных рецепторных анализаторов взаимосвязь глутаматных рецепторов с системой транспорта дофамина.

5. Исследовать эффекты гимантана на содержание белка дофаминового транспортера DAT в стриатуме крыс и культуре клеток феохромоцитомы РС-12.

6. Изучить влияние гимантана на ферментативную активность Ыа/К-АТФазы синап-тосом стриатума крыс.

7. Исследовать влияние гимантана на синтез нейромедиаторов и уровни основных биогенных аминов вовлеченных в патогенез паркинсонизма в различных структурах мозга.

Научная новизна. На основе статистически репрезентативной серии экспериментов методом радиолигандного связывания in vitro была обнаружена тропность препаратов ада-мантановго ряда к ОЗ-рецепторам дофамина. Впервые показано модулирующее воздействие 1< нового противопаркинсонического препарата гимантана на подсистемы дофаминовых рецепторов стриатума D1 и D3, проявляющееся в изменении плотности рецепторов Втах, без изменения их аффинности к селективным лигандам (Kj) в указанной структуре. Продемонстрирована способность гимантана модулировать обратный захват дофамина в экспериментах in vitro и ex vivo. Методом иммуноблоттинга изучено влияние однократного и субхронического введения гимантана на содержание белка дофаминового транспортера DAT в стриатуме крыс линии Wistar. Впервые обнаружено, что при однократном системном введении гимантан вызывает достоверное уменьшение содержания белка DAT в гомогенатах стриатума крыс. Продемонстрировано активирующее влияние гимантана на ферментативную активность Na/K-АТФазы. Выявлено, что гимантан в дозе 20 мг/кг оказывает мягкое ингибирующее влияние на синтез ДА в стриатуме. Обнаружено достоверное снижение 1 концентрации серотонина и его метаболита 5-ГИУК в стриатуме на фоне действия препарата.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты существенно расширяют имеющиеся представления о нейрохимических и молекулярно-биологических механизмах противопаркинсонического действия препаратов адамантанового ряда. Обнаруженные эффекты антагонистов NMDA-рецепторов глутамата на дофаминергическую нейропередачу свидетельствуют о перспективности поиска среди антагонистов NMDA-реценторов и, возможно, агонистов метаботропных рецепторов глутамата новых веществ с противонаркип-сонической активностью. В целом, полученные результаты определяют показания к применению гимантана при болезни Паркинеона как при монотерапии, так и при комбинированном применении.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Абаимов, Денис Александрович

6. выводы.

1. Гимантан оказывает прямое in vitro влияние на рецепторы нейромедиаторов мозга крыс: глутаматные рецепторы NMDA-подтипа в гиппокампе (IC50—5,5 мкМ) и дофаминовые ауторецепторы ОЗ-подтипа в стриатуме (1С5о=39 мкМ). Обнаружено модулирующее воздействие субхронического введения гимантана (7x20 мг/кг/день, в/б) на подсистемы дофаt миновых рецепторов D1 и D3, проявляющееся в изменении плотности рецепторов Втах без изменения их аффинности к селективным лигандам (Kj).

2. Гимантан в диапазоне концентраций от 10 мкМ до 500 мкМ достоверно ингибирует систему активного транспорта [3Н]-дофамина в синаптосомах стриатума мозга крыс in vitro. 1

Ингибирование захвата [ Н]-дофамина происходит по неконкурентному типу, о чем свидетельствует двукратное снижение величины Vmax по сравнению с контролем при неизменной величине Км

3. Системное введение гимантана (20 мг/кг, 40 мг/кг, в/б) существенно изменяет активность обратного захвата [3Н]-дофамина в синаптосомах стриатума крыс через изменения величины Vmax: однократное введение снижает плотность пресинаптических транспортеров дофамина, а субхроническое, напротив, приводит к их увеличению. 4. Гимантан при однократном системном введении (20 мг/кг, в/б) вызывает значительное уменьшение содержания белка DAT в стриатуме крыс. При субхроническом введении (7x20 мг/кг/день, в/б) в стриатуме отмечается постепенное восстановление содержания белка DAT. Аналогичные результаты были получены в эксперименте на культуре клеток РС-12 при внесении гимантана в микромолярной конечной концентрации.

5. Стандартные антагонисты NMDA-рецепторов и агонисты метаботропных глута-матных рецепторов mGluR оказывают ингибирующее влияние на обратный захват дофамина.

6. Гимантан in vitro в узком концентрационном диапазоне (250-400 мкМ) обнаруживает куполообразный стимулирующий эффект на ферментативную активность синаптосомальпой Na/K-АТФазы с экстремумом в области 300 мкМ. к 7. Гимантан при однократном системном введении (20 мг/кг, в/б) вызывает уменьшение уровня серотонина и его метаболита 5-ГИУК в стриатуме мышей.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Целью настоящего исследования стало изучение нейрохимических и молекулярно-биологических аспектов фармакодинамики противопаркинсонического препарата гимантан.

Болезнь Паркинсона является одним из наиболее распространенных нейродегенера-тивных заболеваний. Общая распространенность паркинсонизма в Европе среди людей старше 65 лет составляет 1,6-1,8 случая на 100 человек. Из-за старения населения Земли ожидается, что значение паркинсонизма как проблемы здравоохранения будет возрастать. (Федорова, 2001; Tanner and Aston, 2000; de Lau and Breteler, 2006).

Одним из перспективных направлений противопаркинсонической фармакотерапии являются производные адамантана, поскольку они воздействуют сразу на несколько нейрохимических систем и обладают выраженными нейропротективными свойствами (Ebadi, 1996). Из сказанного следует, что поиск и разработка новых, более эффективных III 1С в ряду производных адамантана представляет большой практический интерес.

В ГУ НИИ Фармакологии РАМН был синтезирован новый потенциальный III 1С гимантан (И-адамант-2-ил гексаметиленимина гидрохлорид), превосходящий мидантан (амантадина гидрохлорид) по противопаркинсонической эффективности и фармакологическому спектру действия. Антикаталептогенная эффективность гимантана превосходит таковую амантадина и L-DOPA. Кроме того, гимантан обладает выраженной аптитремор-ной активностью, что выгодно отличает его от амантадина, не проявляющего антагонизма по отношению к ареколину и оксотреморину (Вальдман, 1999). Гимантан способен устранять проявления паркинсонического синдрома, вызванного МФТИ - снижает тремор, ригидность и олигокинезию у крыс и у мышей. Препарат нормализует электрическую активность хвостатого ядра, сенсомоторной коры и гиппокампа, нарушаемую МФТИ: устраняет патологически медленную активность, пароксизмальные разряды и пачки высокочастотной активности. Гимантан превосходит по эффективности леводопу, усиливающую тремор, и циклодол, который не устраняет медленную активность (Неробкова, 2000).

Однако, относительно нейрохимических механизмов, лежащих в основе иротивопар-кинсонических эффектов гимантана известно сравнительно немного. Так, продемонстрировано ингибирующее влияние гимантана на активность МАО-В (Kj = 470 ± 70 мкМ) (Вальдман, 2003). Показано, что гимантан неконкурентно блокирует канал NMDA-рецептора по типу «trapping block» (IC5o= 11.8 ± 0.6 мкМ) (Елшанская, Соболевский, Вальдман, 2000). В микродиализных исследованиях на крысах показано увеличение внеклеточного содержания ДА в стриатуме (Андяржанова, 2001). Таким образом, гимантан оказывает комплексное воздействие на ДАЭ передачу, улучшая ее эффективность. Вместе с тем обнаруженные нейрохимические механизмы не позволяют в полной мере объяснить отдельные нротивопаркинсоничеекие эффекты препарата, например его антагонизм с нейролептиками галоперидолом и трифтазином (Вальдман, 1999), который предполагает влияние препарата на рецепторы дофамина. Невыясненным остается механизм, посредством которого препарат вызывает увеличение экстраклеточной концентрации дофамина, т. е. неизвестно, связан ли этот эффект с усиленным высвобождением медиатора, угнетением обратного захвата дофамина, либо это связано с увеличением синтеза ДА под действием гимантана.

В этой связи представляло существенный интерес исследовать возможные эффекты гимантана на различные пре- и постсинаптические нейрохимические звенья дофаминер-гического синапса - изучить влияние препарата на синтез, обратный захват и основные группы рецепторов дофамина.

Одной из важных задач данного исследования стало изучение влияния гимантана на основные группы ДА-рецепторов стриатума крыс. Также представлялось важным провести сравнительное исследование гимантана и амантадина по выраженности эффектов на гиппокампальные NMDA-рецепторы глутамата.

На первом этапе исследования нами было изучено влияние 1- и 2-аминопроизводных аминоадамантана на связывание селективного канального лиганда фен цикл идинового сайта

G-3H] (+)МК-801 (дизоцилпина) с глутаматными рецепторами NMDA-подтипа мембран гиппокампа крыс. Как амантадин, так и гимантан наиболее эффективно смещали меченый Лиганд в концентрационном диапазоне от 4 до 6 мкМ: величины констант полу-иигибирования IC50 соответствовали 5,5 мкМ у гимантана и 4,0 мкМ у амантадина. Поскольку именно с воздействием на NMDA-рецепторы связывают нейропротекторные свойства адамантанов, можно предположить, что благодаря этим характеристикам гимантан не будет уступать амантадину по способности подавлять глутаматную эксайтотоксич-ность (Lustig, 1992).

Следующим этаном стало изучение влияния гимантана на основные группы рецепторов дофамина стриатума крыс. В исследованиях по связыванию селективных меченых ли-гандов in vitro было обнаружено, что гимантан не оказывает прямого стимулирующего действия на ДА рецепторы подгрупп D1 и D2, поскольку значимого сродства к местам связывания стандартных лигандов данных рецепторов у препарата обнаружено не было. На этом основании хотелось бы подчеркнуть, что в механизмах облегчения ДА-ергической передачи, по всей видимости, наиболее важен пресииаптический компонент.

Однако, нами показано, что препарат обладает способностью смещать с рецепторных мест связывания селективный лиганд ОЗ-рецепторов [G3-H] 7-ОН DPAT с величиной IC50 = 39 мкМ, что свидетельствует о тропности препарата по отношению к ОЗ-рецепторам дофамина. По аффинности к D3 рецепторам гимантан значительно превосходил препарат сравнения амантадин, величина 1С5о которого равнялась 360 мкМ.

Полученные данные представляет особый интерес, поскольку пресинаптические дофаминовые ауторецепторы D3 играют важную роль в процессах регуляции синтеза и высвобождения дофамина из пресинаптических окончаний (Aretha, 1995; Gobert, 1995; Koeltzow, 1998), а, следовательно, оказывают модулирующее влияние на уровень синап-тически активного ДА. Кроме того, появились сведения о тесной взаимосвязи пресинаптических рецепторов D3 с системой обратного транспорта ДА (Joyce, 2004). Исходя из этого можно предположить, что связывание гимантана и амантадина с ОЗ-рецегпорами вносит определенный вклад в формирование ДА-позитивного профиля действия препаратов этого ряда.

В исследованиях на самцах крыс ex vivo было показано, что при субхроническом (7 дней) введении гимантан существенно изменял характеристики радолигандного связывания D1 и D3 рецепторов дофамина в стриатуме. Препарат вызывал увеличение количества мест связывания Втах для селективного антагониста D1 рецепторов [G-3H] SCII 23390 более чем на 20% по сравнению с контролем без изменения Kj Известно, что дофаминерги-ческая денервация неостриатума при болезни Паркинсона ведет к повышению активности структур, находящихся под контролем D2 рецепторов и снижению регулируемых D1 рецепторами (Miller, 1987; Gerfen, 1992). В результате происходит серия функциональных изменений в базальных ганглиях (Albin, 1992). Обнаруженные в эксперименте эффекты гимантана, по всей вероятности, могут предотвращать подобные патологические изменения в балансе подгрупп дофаминовых рецепторов дофамина.

Величина Bmax для селективного лиганда D3 рецепторов [G-3H] (+) 7-ОН DPAT в стриатуме, напротив, достоверно снижалась на 30% по сравнению с аналогичным значением в контроле. Величина K<j характеризующая аффинитет лиганда по отношению к рецептору, как и в первом случае, не претерпевала изменений под действием препарата. Подобное снижение количества активных рецепторов D3 в стриатуме может быть связано с прямыми эффектами гимантана на данную подгруппу рецепторов, что может вызывать их функциональную инактивацию. Поскольку известно, что ОЗ-рецеиторы имеют преимущественно пресинаптическую локализацию и оказывают регулирующее влияние на уровень экстраклеточного дофамина, можно предположить, что изменения их содержания иод действием гимантана положительно влиять на внеклеточную концентрацию нейромедиа-тора, тем самым повышая эффективность дофаминергической передачи. v

Считается, что патогенетической основой повреждения нигростриатных нейронов при паркинсонизме является окислительный стресс (Cohen, 1983). Эта гипотеза легла в основу формирования новых подходов к лечению паркинсонизма, направленных на устранение последствий окислительного стресса за счет блокады NMDA-рецепторов, индукции синтеза нейротрофинов, а также за счет ингибирования МАОВ и обратного захвата ДА (Крыжановский, 2002; Ebadi, 1996). Вместе с тем, действие гимантана на обратный захват в стриатуме до сих пор не изучено. В этой связи следующим этапом нашей работы стало изучение влияния гимантана на систему обратного захвата дофамина. Для решения данной проблемы представлялось важным оценить участие системы обратного захвата дофамина в механизме модуляции гимантаном дофаминовой нейропередачи в стриатуме мозга крыс in vitro, изучить кинетику ингибирования гимантаном обратного захвата in vitro и ex vivo, провести сравнительные исследования эффектов гимантана и других производных адамантана на процесс захвата ДА, а также изучить с использованием стандартных рецепторных анализаторов взаимосвязь глутаматных рецепторов с системой транспорта дофамина.

В результате проведенных исследований in vitro удалось установить, что гимантан ингибирует захват [3Н]-ДА в диапазоне 10-500 мкМ, причем 50%-ное ингибирование осуществляется в концентрации 200 мкМ.

Поскольку препаратом сравнения для гимантана является амантадин, нами было ! проведено сравнительное изучение влияния его и гимантана на захват [3Н]-ДА синапто-сомами стриатума. Этот интерес усиливался уже имеющимися сведениями о сопоставимости их эффектов по способности блокировать канал NMDA-рецептора (Елшанская, Соболевский, Вальдман, 2000; Sobolevsky and Yelshansky, 2000), а также новыми данными, полученными в результате экспериментов по радиорецепторному связыванию [G-3H| (+)МК-801, которые также свидетельствовали об эквивалентном влиянии обоих препаратов на NMDA-рецепторы. Сопоставление показало, что гимантан превосходит амантадин по способности ингибировать захват [ Н]-ДА синаптосомами - ингибирующий эффект гимантана обнаруживался уже в концентрации 10 мкМ, неактивной для амантадина. В концентрации ЮОмкМ захват [3Н]-ДА для гимантана и амантадина составлял 64±6% и \ 73±9%, соответственно.

При кинетическом анализе гимантан (100 мкМ) проявил неконкурентный характер ингибирования. Показатели кажущейся Vmax (пмоль/мин/мг белка) составляли 9.00 и 5.08 для контроля и гимантана, соответственно, что предполагает уменьшение вдвое числа активных переносчиков дофамина. Изменение величины Км не было статистически достоверным. Полученные данные согласуются с результатами Ю. Вахитовой и соавторов, которые продемонстрировали, что 67%-ное ингибирование экспрессии гена переносчика дофамина, оцененной методом RT-PCR, гимантаном (10 мг/кг, в/б) наступает на 2-м часу после введения, когда его уровень в ткани стриатума достигает максимума (Vakhitova, 2003).

Исходя из обоснованной на разных уровнях взаимосвязи ДАЭ и глутаматергиче-ской систем стриатума, представлялось целесообразным изучить действие антагонистов и агонистов глутаматных рецепторов на систему обратного захвата ДА стриатных сииаито-сом.

В экспериментах с веществами-анализаторами in vitro было обнаружено, что неконкурентный высокоаффинный канальный блокатор NMDA-рецепторов МК-801 достоверно ингибировал обратный захват 3Н-ДА уже в концентрации 1мкМ. При концентрации 10 мкМ значение захвата Н-ДА составляло 68±9% от контроля. В свою очередь, ЮОмкМ МК-801 иугибировали захват [3Н]-ДА на 88%.

Далее представлялось важным выяснить влияние конкурентных антагонистов NMDA-рецепторов на захват 3Н-ДА синаптосомами стриатума крыс. Конкурентные антагонисты NMDA-рецепторов взаимодействуют с глутамат-связывающим участком NMDA-рецептора и не позволяют нейромедиатору (L-глутамат) активировать ионный канал. Для оценки действия конкурентных антагонистов NMDA-рецепторов на захват 3Н-ДА синаптосомами стриатума крыс были проведены эксперименты с (+/-)-СРР - селективным конкурентным антагонистом глутаматных рецепторов NMDA-подтипа (Lehmann, 1987). В наших экспериментах концентрации (+/-)-СРР 0.1 и 1мкМ являлись неэффективными и практически не влияли на захват 3Н-ДА. Однако при концентрациях 10 и 100 мкМ величина захвата П-ДА составляла 24±2 и 10±2% от контроля (100±7), соответственно.

При сравнении характера ингибирования захвата [ Н]-ДА веществами (+/-)-СРР и МК-801 характерна скачкообразная зависимость ингибирующей активности от концентрации для СРР и более «пропорциональное» ингибирование для МК-801.

Важно подчеркнуть, что все соединения, которым свойствен антагонизм по отношению к рецепторам ВАК, в частности, к эффектам NMDA-рецепторов, оказывали инги-бирующее влияние на захват [3Н]-ДА синаптосомами стриатума крыс. Указанный факт подтверждает гипотезу о модулирующем значении глутаматных рецепторов NMDA-подтипа в регуляции активности DAT и ДА-нейропередачи в целом.

Учитывая, что по всей видимости, именно взаимодействие с NMDA-рецептором, было фактором, вызвавшим угнетение активности DAT, было предположено, что активация NMDA-рецептора будет, напротив, стимулировать обратный захват ДА. Для проверки этого предположения нами использовались агонист глутаматных рецепторов NMDA-подтипа - ^метил-О-аспартат и агонист рецепторов АМРА-подтипа, а также метабо-тропных глутаматных (mGluR) -квисквалат. Как оказалось, NMDA во всех концентрал циях не влиял на захват [ Н]-ДА синаптосомами. Квисквалат в концентрации ЮОмкМ достоверно ингибировал захват [3Н]-ДА: величина захвата составляла 63±8% от контроля. Выше уже отмечалось, что квисквалат является агонистом метаботропных глутаматных

95 рецепторов (mGluRs). Поэтому можно согласиться с предположением Page и соавторов о том, что указанный тип рецепторов осуществляет модуляцию активности DAT в стриату-» ме через механизм фосфорилирования участков молекулы DAT (Page, 2001).

В научной литературе широко представлено мнение относительно неспособности препаратов адамантанового ряда в физиологических концентрациях оказывать значимое влияние на дофаминергическую нейропередачу и на такое ее важное звено, как обратный захват медиатора в экспериментах in- и ex vivo. В частности считается, что амантадин может вызывать увеличение внеклеточной концентрации дофамина только при введении препарата в дозе, десятикратно превосходящей терапевтическую (Kornhuber, 1995; Danizs, 1997). В этой связи, полученные нами данные относительно влияния гимантана на обратный захват дофамина in vitro потребовали дальнейшего изучения и подтверждения на моделях ex vivo.

В результате серии экспериментов, проведенных на крысах-самцах линии Wistar, было обнаружено, что гимантан в дозе 40 мг/кг при остром введении достоверно снижает скорость обратного захвата [3Н]-ДА в синаптосомах стриатума крыс: величина Vmaxiia фоне действия препарата уменьшилась более чем на 30% - с 51,26 пмоль/мин/мг белка в контроле до 32,44 пмоль/мин/мг белка в опыте (статистически значимое отличие, р<0,05). Величина аффиности Кт оставалась неизменной (0,5 мкМ), что свидетельствует о неконкурентном характере ингибирования. При субхроническом введении в дозе 20 мг/кг в течение 7 дней гимантан, напротив, увеличивал кажущуюся величину Vmilx обратного захвата [3П]-ДА на 17%: с 51,49 пмоль/мин/мг в контрольной группе до 61,76 пмоль/мин/мг в опыте.

Полученные результаты могут быть связаны с компенсаторным механизмом, направ-\ ленным на поддержание гомеостаза дофамина в синаптической щели: известно, во-первых, что ауторецепторы дофамина подгруппы D2 в ответ на увеличение экстраклеточной концентрации дофамина могут вызывать увеличение обратного захвата нейромедиа-тора. Во-вторых, активация систем обратного захвата дофамина может быть индуцирована агонистами 02-рецепторов, например, квинпиролом (Ruiu and Pignatelli, 1988). Можно предположить, что увеличение обратного захвата дофамина, наблюдаемое в ответ на введение гимантана, является следствием непрямой модуляции активности DAT со стороны пресинаптических рецепторов дофамина 02-подгруппы в ответ на увеличение внеклеточной концентрации дофамина под действием препарата.

Таким образом, полученные в нашем исследовании результаты в целом свидетельствуют о важном участии дофаминового транспортера DAT в дофаминпозитивном механизме реализации противопаркиисонического действия препаратов адамантанового ряда, в частности, гимантана. Результаты острого эксперимента ex vivo также указывают на большую по сравнению с мидантаном (амантаднном) степень воздействия гимантана на процесс обратного захвата дофамина.

Следующей важной задачей настоящего исследования стало изучение клеточных и молекулярно-биологических механизмов, лежащих в основе ингибирующего действия гимантана на обратный захват дофамина.

Известно, что источником энергии для активного транспорта дофамина является трансмембранный концентрационный электрохимический градиент ионов Na. За формирование и поддержание градиента ионов натрия отвечает мембранный фермент - Na/K-АТФаза (натрий-калиевый насос). Показано, что ингибирование этого фермента селективным блокатором уабаином способно существенно угнетать обратный синаптосомальный захват катехоламинов (Santos, 1996). В этой связи, мы предположили, что угнетение обратного транспорта дофамина может осуществляться через ингибирование ферментативной активности Na/K-АТФазы. Однако, нами было обнаружено, что гимантан не ингиби-рует Ыа/К-АТФазу, а в концентрации 200 мкМ даже вызывает увеличение активности данного фермента на 40% относительно базальной активности. Полученные результаты можно объяснить с точки зрения обнаруженных у гимантана антиоксидантных свойств и свойств неконкурентного блокатора NMDA-рецепторов. Так, А.А. Болдыревым и соавторами показано, что агонисты глутаматных рецепторов, прежде всего М-метил-П-аспартат, способны вызывать ингибирование активности Na/K-АТФазы, которое легко купируется с помощью дизоцилпина (Болдырев, 2006). Авторы связывают подобные изменения со сво-боднорадикальными процессами, которые активизируются при входе Са2+-ионов внутрь клетки после открытия каналов NMDA-рецепторов. Можно предположить, что гимантан, блокируя NMDA рецепторы и оказывая антиоксидантное действие, снижает уровень сво-боднорадикального окисления Na/K- АТФазы, чем и вызывается активация фермента.

На следующем этапе исследования было изучено влияние острого и субхронического введения гимантана непосредственно на содержание молекул дофаминового транспортера DAT в стриатуме крыс. В результате проведенного исследования было обнаружено, что гимантан через 24 часа после однократного внутрибрюшинного введения в дозе 20 мг/кг, вызывал существенное уменьшение содержания белка DAT в гомогенатах стриатума крыс на 59% по сравнению с контролем (р<0.05, парный t-тест). При субхроническом введении содержание DAT также было сниженным по сравнению с контролем (на 35%). Однако наблюдалось статистически достоверное увеличение относительно аналогичного значения при однократном введении (более чем на 60%, р<0.05, t-тест Стьюдента), что но всей видимости, свидетельствует о тенденции к восстановлению первоначальной концентрации DAT, снизившейся под воздействием препарата.

Аналогичные результаты были получены в исследованиях на культуре дофаминпози-тивных клеток феохромоцитомы PC-12. Данные, полученные in vitro на культуре клеток при концентрации гимантана 10"6 М обнаруживают выраженную положительную корреляцию с таковыми, полученными на крысах линии Вистар с коэффициентом Спирмана равным 0,92 (р=0,0005). Обнаруженные данные хорошо согласуются с результатами относительно влияния гимантана на экспрессию DAT (Vakhitova, 2003) и позволяют сделать вывод о важном вкладе процессов экспрессии белка DAT в реализации дофаминпозитив-ного действия противопаркинсонического препарата гимантана. Известно, что элиминация гена DAT у мышей может приводить к увеличению уровня экстраклеточного дофамина в мозге животных. Можно предположить, что гимантан вызывает угнетение экспрессии гена белка дофаминового транспортера, последствием чего может являться многократное увеличение концентации медиатора в синаптическом пространстве, аналогично тому, как это имеет место у животных, нокаутных по гену DAT (Jones, 1998).

Завершающим этапом наших исследований стало изучение влияния гимантана на синтез ДА и содержание основных биогенных аминов в гомогенатах стриатума мышей линии С57В1аск/6 с помощью метода ВЭЖХ/ЭД, в результате которого было показано, что препарат в дозе 20 мг/кг оказывает умеренное ингибирующее действие на синтез ДА в стриатуме (при введении гимантана на фоне NSD1015 наблюдалась тенденция к снижению ДОФА (р=0.0781 по U-тесту Манна-Уитни). Кроме того, было обнаружено влияние гимантана на серотонинергические системы стриатума, которое выражалось в уменьшении тканевого уровня СТ и его метаболита 5-ГИУК. Полученные данные хорошо согласуются с результатами микродиализных исследований (Андяржанова, 2001), в которых было продемонстрировано уменьшение внеклеточного содержания 5-ГИУК. На основании этого авторы выдвинули предположение о влиянии гимантана на серотонинергическую систему стриатума в целом. Полученные нами результаты подтверждают это предположение и свидетельствуют о важности серотонинергического компонента в биохимических механизмах противопаркинсонического действия гимантана. Так, известно, что серотонин усиливает активность ключевых нейрохимических и нейропатофизиологических механизмов расстройства движения при паркинсонизме. Снижение сертонинергической передачи в системе базальных ганглиев оказывает выраженный противопаркинсонический эффект (Крыжановский, 1993). Следовательно, установленное влияние гимантана на серотонинергическую иннервацию может вносить определенный вклад в устранение проявлений паркинсонизма, включая дрожательную симптоматику.

Таким образом, результаты исследования подтверждают участие дофамин-, глутамат-и серотонинергической нейромедиаторных систем в реализации противопаркинсониче-ских эффектов гимантана, причем, наиболее важную роль в механизме регуляции пейропередачи играют, по-видимому, прееинаптичеекие компоненты дофаминергической и глутаматергической систем, такие как ДА-ауторецепторы группы D3, глутаматные гете-рорецепторы группы NMDA и дофаминовый транспортер DAT. Внутриклеточные механизмы данного ингибирующего воздействия могут быть опосредованы каскадом вторич

2 f ных посредников, таких как цАМФ, Са , ДАГ и системой протеинкиназ, что требует специальных исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Абаимов, Денис Александрович, 2007 год

1. Андрезиня Р. А., Камянов И.М. // Результаты применения глудантана в психиатрической практике. // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. 1985, (14), 1419.

2. Андяржанова Э. А., Вальдман, Е. А., Кудрин В. С., Раевский К. С., Воронина Т. А. //

3. Влияние нового потенциального противопаркинсонического средства гимантана на содержание моноаминов и их метаболитов в стриатуме крыс (микродиализное исследование) // Экспер. и клин, фармакол., 2001,64 (6), 13-16.

4. Багрий Е. И. //Адамантаны: Получение, свойства, применение // М.: Наука; 1989.

5. Болдырев А. А., Булыгина Е.Р., Казей В.И., Куликов А.В., Maxpo А.В., Соколова Н.А.,

6. Степанова М.С.: Молекулярные механизмы экзайтотоксичности глутамата. "Ней-роспецифические метаболиты и этимологические основы деятельности центральной /нервной системы", материалы конференции; Пенза: 2006:38-40.

7. Вайншток О. Б., Олейник Л.И. //Дифференциальная диагностика и современные методылекарственного лечения паркинсонизма // Киев; 1978.

8. Вальдман А. В., Козловская М. М., Германе С. К. // Экспериментальное исследованиеособенностей эмоцио- и психотропного действия некоторых производных аминоа-дамантана//Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. 1979, 8 (8), 143-154.

9. Вальдман Е. А., Воронина Т. А., Аксенова Л. Н., Бунеева О. А., Медведев А. Е. //

10. Влияние нового противопаркинсонического препарата гимантана на активность мо-ноаминокидаз. // Экспер. и клин, фармакол. 2003,66 (5), 3-5.

11. Вальдман Е. А., Воронина Т. А., Неробкова Л. Н. // Противопаркинсоническая активность нового производного адамантана. // Экспер. и клин, фармакол., 1999, 62 (4), 36.

12. Гехт А. Б. // Лечение болезни Паркинсона // Фарматека. 2001,50 (8), 20-28.

13. Гусев Е.И. Г. А. Б. // Болезнь Паркинсона. Основные направления лечения. // Media

14. Consilium. 2000,2(2), 12-16.

15. Ещенко Н. Д. //Биохимия психических и нервных болезней // СПб.: Издательский дом1. СПбГУ; 2004.

16. Иллариошкин С. Н. // Паркинсонизм с ранним началом. // Атмосфера. Нервные болезни., 2006, (3), 14-20.

17. Кадыков А. С. // Лечение мидантаном больных паркинсонизмом // Советская медицина. 1973,(9), 143-146.

18. Кадыков А. С., Кистенев Б. А. // Значение мидантана в комплексной фармакотерапиипаркинсонизма. // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. 1984, 13 (13), 92-94.

19. Крыжановский Г. Г., Магаева С.В., Трекова Н.А. // Участие серотонинергического аппарата стриатума в паркинсоническом синдроме // Бюлл. экспер. биол. мед., 1993, (5), 466-469.

20. Крыжановский Г. Н., Атаджанов М.А., Воронина Т.А., Неробкова J1.H. // Синдром

21. Паркинсона после введения ацетилхолина в хвостатые ядра // Бюлл. экспер. биол и мед., 1989, (5), 522-527.

22. Крыжановский Г. Н., Карабань И.Н., Магаева С.В., Карабань Н.В. //Компенсаторные ивосстановительные процессы при паркинсонизме //. Киев; 1995.

23. Крыжановский Г. II., Карабань И.П., Магаева С.В., Кучеряну В.Г., // Болезнь Паркинсона (этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение, профилактика) // М.: Медицина; 2002.

24. Крыжановский Г. П., Трекова Н.А., Башарова J1.A. // Влияние активной иммунизацииконьюгатом серотонин-белок на развитие экспериментального паркинсонического синдрома//Бюлл. экспер. биол. мед., 1996, (4), 392-395.

25. Морозов И. С., Петров В.И., Сергеева С.А. //Фармакология адамантанов // Волгоград:

26. Волгоградская медицинская академия; 2001.

27. Нежинская Г. И., Вальдман Е. А., Назаров П. Г., Воронина Т. А. // Иммунотропная активность потенциального противопаркинсонического средства гимантана. // Экспер. и клин, фармакол. 2001, 64 (2), 60-63.

28. Петелин JI. С., Шток В. Н., Пигарев В. А. // Глудантан в лечении паркинсонизма. //

29. Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. 1981,10 (10), 71-73.

30. Пигарев В. А., Вартанян К. 3., Мамышева О. Д. // Сравнительная клиническая характеристика антипаркинсонического действия препаратов аминоадамантанового ряда. // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. 1984,4 (4), 100-108.

31. Подосиновикова Н. П., Космачев А. Б., Тонкопий В. Д., Загребин А. О., Евдокимова Е.

32. А., Маслов А. М., Петров В. В., Долго-Сабуров В. Б. // Новые подходы к анализу взаимоотношений холинергической и дофаминергической систем. // Экспер. и клин, фармакол., 2001,64 (6), 18-24.

33. Ратнер А. В., Коротаев Г. К., Гендель В. Г. // Тетродотоксин. // Фармация. 1991, (3), 7882.

34. Садеков Р. А., Вейн A.M. //Лечение паркинсонизма. //. М.: МИА.; 2001.

35. Федорова Н. В., Шток В.Н. // Стратегия и тактика лечения болезни Паркинсона //

36. Consilium medicum. 2001, 3 (5), 237 242.

37. Шток В. Н., Федорова II.В.: Болезнь Паркинсона. Экстрапирамидные расстройства.

38. Руководство по диагностике и лечению. Edited by: МЕДпресс-информ,; 2002:87-124.

39. Agid Y., Blin J. // Nerve cell death in degenerative diseases of the central nervous system:clinical aspects. // Ciba Found Symp. 1987, 126 3-29.

40. Albin R. L., Makowiec R. L., Hollingsworth Z. R., Dure L. S. t., Penney J. В., Young A. B. //

41. Excitatory amino acid binding sites in the basal ganglia of the rat: a quantitative autoradiographic study. //Neuroscience. 1992,46 (1), 35-48.

42. Amara S. G., Sonders M. S., Zahniser N. R., Povlock S. L., Daniels G. M. // Molecularphysiology and regulation of catecholamine transporters. // Adv Pharmacol. 1998, 42 164168.

43. Andersen P. H. // The dopamine inhibitor GBR 12909: selectivity and molecular mechanismof action. //Eur J Pharmacol. 1989, 166 (3), 493-504.

44. Arbuthnott G. W., Fairbrother I. S., Butcher S. P. // Brain microdialysis studies on the controlof dopamine release and metabolism in vivo. // J Neurosci Methods. 1990, 34 (1-3), 73-81.

45. Arbuthnott G. W., Fairbrother I. S., Butcher S. P. // Dopamine release and metabolism in therat striatum: an analysis by 'in vivo' brain microdialysis. // Pharmacol Ther. 1990, 48 (3), 281-293.

46. Bach A. W., Lan N. C., Johnson D. L., Abell C. W., Bembenek M. E., Kwan S. W., Seeburg

47. P. H., Shih J. C. // cDNA cloning of human liver monoamine oxidase A and B: molecular basis of differences in enzymatic properties. // Proc Natl Acad Sci USA. 1988, 85 (13), 4934r4938.

48. Balcioglu A., Zhang K., Tarazi F. I. // Dopamine depletion abolishes apomorphinc- and amphetamine-induced increases in extracellular serotonin levels in the striatum of conscious rats: a microdialysis study. //Neuroscience. 2003, 119 (4), 1045-1053.

49. Barik S., de Beaurepaire R. // Evidence for a functional role of the dopamine D3 receptors inthe cerebellum. // Brain Res. 1996,737 (1-2), 347-350.

50. Bauman A. L., Apparsundaram S., Ramamoorthy S., Wadzinski В. E., Vaughan R. A.,

51. Blakely R. D. // Cocaine and antidepressant-sensitive biogenic amine transporters exist in regulated complexes with protein phosphatase 2A. // J Neurosci. 2000,20 (20), 7571-7578.

52. Bergman H., Wichmann Т., DeLong M. R. // Reversal of experimental parkinsonism by lesions of the subthalamic nucleus. // Science. 1990,249 (4975), 1436-1438.

53. Berry M. D., Juorio A. V., Paterson I. A. // The functional role of monoamine oxidases A and

54. В in the mammalian central nervous system. // Prog Neurobiol. 1994,42 (3), 375-391.

55. Blakely R. D., Defelice L. J., Galli A. // Biogenic amine neurotransmitter transporters: justwhen you thought you knew them. // Physiology (Bethesda). 2005, 20 225-231.

56. Brown E. E., Damsma G., Cumming P., Fibiger H. C. // Interstitial 3-methoxytyramine reflects striatal dopamine release: an in vivo microdialysis study. // J Neurochem. 1991, 57 (2), 701-707.

57. Calabresi P., Lacey M. G., North R. A. // Nicotinic excitation of rat ventral tegmental neurones in vitro studied by intracellular recording. // Br J Pharmacol. 1989,98 (1), 135-140.

58. Calabresi P., Picconi В., Parnetti L., Di Filippo M. // A convergent model for cognitive dysfunctions in Parkinson's disease: the critical dopamine-acetylcholine synaptic balance. // Lancet Neurol. 2006, 5(11), 974-983.

59. Carneiro A. M., Ingram S. L., Beaulieu J. M., Sweeney A., Amara S. G., Thomas S. M.,

60. Caron M. G., Torres G. E. // The multiple LIM domain-containing adaptor protein IIic-5 synaptically colocalizes and interacts with the dopamine transporter. // J Neurosci. 2002,22 (16), 7045-7054.

61. Casarejos M. J., Solano R. M., Menendez J., Rodriguez-Navarro J. A., Correa C., Garcia de

62. Yebenes J., Mena M. A. // Differential effects of 1-DOPA on monoamine metabolism, cell survival and glutathione production in midbrain neuronal-enriched cultures from parkin knockout and wild-type mice. // J Neurochem. 2005, 94 (4), 1005-1014.

63. Chase T. N. // Serotonergic mechanisms in Parkinson's disease. // Arch Neurol. 1972, 27 (4),354.356.

64. Chen C. P., Alder J. Т., Bray L., Kingsbury A. E., Francis P. Т., Foster O. J. // Post-synaptic

65. HT1A and 5-HT2A receptors are increased in Parkinson's disease neocortex. // Ann N Y AcadSci. 1998,861 288-289.

66. Chesselet M. F., Delfs J. M. // Basal ganglia and movement disorders: an update. // Trends

67. Neurosci. 1996,19 (10), 417-422.

68. Clarke C., Moore A. P. // Parkinson's disease. // Clin Evid. 2005, (13), 1658-1677.

69. Collins M. A., Neafsey E. J. // Beta-carboline analogues of N-methyl-4-phenyI-l,2,5,6tetrahydropyridine (MPTP): endogenous factors underlying idiopathic parkinsonism? // Neurosci Lett. 1985,55 (2), 179-184.

70. Collins M. A., Neafsey E. J., Matsubara K., Cobuzzi R. J., Jr., Rollema H. // Indole-Nmethylated beta-carbolinium ions as potential brain-bioactivated neurotoxins. // Brain Res. 1992,570(1-2), 154-160.

71. Cummings J. L. // Depression and Parkinson's disease: a review. // Am J Psychiatry. 1992,149 (4), 443-454.

72. Daly S. A., Waddington J. L. // Behavioural effects of the putative D-3 dopamine receptoragonist 7-OH-DPAT in relation to other "D-2-like" agonists. // Neuropharmacology. 1993, 32 (5), 509-510.

73. Daniels G. M., Amara S. G. // Regulated trafficking of the human dopamine transporter.

74. Clathrin-mediated internalization and lysosomal degradation in response to phorbol esters. Hi Biol Chem. 1999,274 (50), 35794-35801.

75. Danyss W., Parsons C. G., Kornhuber J., Schmidt W. J., Quack G. // Aminoadamantanes as

76. NMDA receptor antagonists and antiparkinsonian agents-preclinical studies. // Neurosci Biobehav Rev. 1997,21 (4), 455-468.

77. Di Giovanni G., Di Matteo V., Esposito E. // Serotonin/dopamine interaction-focus on 5

78. HT2C receptor, a new target of psychotropic drugs. // Indian J Exp Biol. 2002, 40 (12), 1344-1352.

79. Di Matteo V., Cacchio M., Di Giulio C., Esposito E. // Role of serotonin(2C) receptors in thecontrol of brain dopaminergic function. // Pharmacol Biochem Behav. 2002, 71 (4), 727734.

80. Ding J., Guzman J. N„ Tkatch Т., Chen S., Goldberg J. A., Ebert P. J., Levitt P., Wilson C.

81. J., Hamm H. E., Surmeier D. J. // RGS4-dependent attenuation of M4 autoreceptor function in striatal cholinergic interneurons following dopamine depletion. // Nat Neurosci. 2006, 9 (6), 832-842.

82. Dray A. // Serotonin in the basal ganglia: functions and interactions with other neuronalpathways. // J Physiol (Paris). 1981,77 (2-3), 393-403.

83. Dray A., Nunan L. // Supraspinal and spinal mechanisms in morphine-induced inhibition ofreflex urinary bladder contractions in the rat. // Neuroscience. 1987, 22 (1), 281-287.

84. Ebadi M., Srinivasan S. K., Baxi M. D. // Oxidative stress and antioxidant therapy in Parkinson's disease. // Prog Neurobiol. 1996,48 (1), 1-19.

85. Eckert 'Г., Sailer M., Kaufmann J., Schrader C., Peschel Т., Bodammer N., Heinze 11. J.,

86. Schoenfeld M. A. // Differentiation of idiopathic Parkinson's disease, multiple system atrophy, progressive supranuclear palsy, and healthy controls using magnetization transfer imaging. // Neuroimage. 2004,21 (1), 229-235.

87. Emre M., Aarsland D., Albanese A., Byrne E. J., Deuschl G., De Deyn P. P., Durif F., Kulisevsky J., van Laar Т., Lees A. // Rivastigmine for dementia associated with Parkinson's disease. //N Engl J Med. 2004, 351 (24), 2509-2518.

88. Fagervall I., Ross S. B. // A and В forms of monoamine oxidase within the monoaminergicneurons of the rat brain. // J Neurochem. 1986,47 (2), 569-576.

89. Fauchey V., Jaber M., Bloch В., Le Moine C. // Dopamine control of striatal gene expressionduring development: relevance to knockout mice for the dopamine transporter. // Eur J Neurosci. 2000, 12 (9), 3415-3425.

90. Feldman S., Weidenfeld J. // Norepinephrine depletion in the amygdala inhibits CRF-41,

91. ACTH, and corticosterone responses following photic simulation. // Brain Res Bull. 1996, 41 (2), 83-86.

92. Fernandez-Espejo E. // Pathogenesis of Parkinson's disease: prospects of neuroprotective andrestorative therapies. // Mol Neurobiol. 2004, 29 (1), 15-30.

93. Fink J. S., Smith G. P. // Mesolimbicocortical dopamine terminal fields are necessary fornormal locomotor and investigatory exploration in rats. // Brain Res. 1980, 199 (2), 359384. '

94. Fletcher G. H., Starr M. S. // Intracerebral SCH 23390 and catalepsy in the rat. // Eur J Pharmacol. 1988, 149(1-2), 175-178.

95. Forno L. S., Alvord E. C., Jr. // Depigmentation in the nerve cells of the substantia nigra andlocus ceruleus in Parkinsonism. // Adv Neurol. 1974, 5 195-202.

96. Foster J. D., Pananusorn В., Cervinski M. A., Holden H. E., Vaughan R. A. // Dopaminetransporters are dephosphorylated in striatal homogenates and in vitro by protein phosphatase 1. // Brain Res Mol Brain Res. 2003,110 (1), 100-108.

97. Fox S. H., Brotchie J. M. // 5-HT(2C) receptor antagonists enhance the behavioural responseto dopamine D(l) receptor agonists in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat. // Eur J Pharmacol. 2000,398 (1), 59-64.

98. Frechilla D., Cobreros A., Saldise L, Moratalla R., Insausti R., Luquin M., Del Rio J. // Serotonin 5-HT(lA) receptor expression is selectively enhanced in the striosomal compartment of chronic parkinsonian monkeys. // Synapse. 2001, 39 (4), 288-296.

99. Freed C., Revay R., Vaughan R. A., Kriek E„ Grant S., Uhl G. R., Kuhar M. J. // Dopaminetransporter immunoreactivity in rat brain. // J Comp Neurol. 1995, 359 (2), 340-349.

100. Fuxe K., Hokfelt Т., Olson L., Ungerstedt U. // Central monoaminergic pathways with emphasis on their relation to the so called 'extrapyramidal motor system'. // Pharmacol Ther В. 1977,3 (2), 169-210.

101. Gainetdinov R. R., Caron M. G. // Monoamine transporters: from genes to behavior. // Annu

102. Rev Pharmacol Toxicol. 2003,43 261-284.

103. Gandhi S., Wood N. W. // Molecular pathogenesis of Parkinson's disease. // Hum Mol Genet.2005, 14 Spec No. 2 2749-2755.

104. Garris P. A., Ciolkowski E. L., Wightman R. M. // Heterogeneity of evoked dopamine overflow within the striatal and striatoamygdaloid regions. //Neuroscience. 1994, 59 (2), 417427.

105. Gelb D. J., Oliver E., Gilman S. // Diagnostic criteria for Parkinson disease. // Arch Neurol.1999,56(1), 33-39.

106. Gerfen C. R. // The neostriatal mosaic: multiple levels of compartmental organization in thebasal ganglia. // Annu Rev Neurosci. 1992,15 285-320.

107. Giros В., Caron M. G. // Molecular characterization of the dopamine transporter. // Trends

108. Pharmacol Sci. 1993,14 (2), 43-49.

109. Giros В., Jaber M., Jones S. R., Wightman R. M., Caron M. G. // Hyperlocomotion and indifference to cocaine and amphetamine in mice lacking the dopamine transporter. // Nature. 1996,379 (6566), 606-612.

110. Glowinski J., Iversen L. L. // Regional studies of catecholamines in the rat brain. I. The disposition of 3H.norepinephrine, [3H]dopamine and [3H]dopa in various regions of the brain. //J Neurochem. 1966, 13 (8), 655-669.

111. Gobert A., Rivet J. M., Audinot V., Cistarelli L., Spedding M., Vian J., Peglion J. L, Millan

112. Gobert A., Rivet J. M., Lejeune F., Newman-Tancredi A., Adhumeau-Auclair A., Nicolas J.

113. Gray J. A., Joseph M. II., Hemsley D. R., Young A. M., Warburton E. C., Boulenguez P.,

114. Grigoryan G. A., Peters S. L., Rawlins J. N., Taib С. T. // The role of mesolimbic dopaminergic and retrohippocampal afferents to the nucleus accumbens in latent inhibition: implications for schizophrenia.//Behav Brain Res. 1995,71 (1-2), 19-31.

115. Greenamyre J. Т. // Glutamate-dopamine interactions in the basal ganglia: relationship to

116. Parkinson's disease. // J Neural Transm Gen Sect. 1993, 91 (2-3), 255-269.

117. Gu H., Wall S. C., Rudnick G. // Stable expression of biogenic amine transporters reveals differences in inhibitor sensitivity, kinetics, and ion dependence. // J Biol Chem. 1994, 269 (10), 7124-7130.

118. Guttler F., Kaufman S., Milstien S. // Phenylalanine has no effect on dihydropteridine reductase activity in phenylketonuria fibroblasts. // Lancet. 1977,2 (8048), 1139-1140.

119. Guttrrian M., Kish S. J., Furukawa Y. // Current concepts in the diagnosis and management of Parkinson's disease. // Cmaj. 2003,168 (3), 293-301.

120. Haavik J., Martinez A., Flatmark T. // pH-dependent release of catecholamines from tyrosine hydroxylase and the effect of phosphorylation of Ser-40. // FEBS Lett. 1990, 262 (2), 363-365.

121. Hallett P. J., Standaert D. G. // Rationale for and use of NMDA receptor antagonists in Parkinson's disease. // Pharmacol Ther. 2004, 102 (2), 155-174.

122. Ilamani C., Lozano A. M. // Physiology and pathophysiology of Parkinson's disease. // Ann N Y Acad Sci. 2003,991 15-21.

123. Ilassler R. G. // Chairman's introduction: role of the pallidum and its transmitters in the therapy of parkinsonian rigidity and akinesia. // Adv Neurol. 1984,40 1-14.

124. Haycock J. W., Wakade A. R. // Activation and multiple-site phosphorylation of tyrosine hydroxylase in perfused rat adrenal glands. //J Neurochem. 1992, 58 (1), 57-64.

125. Herblin W. F. // Amantadine and catecholamine uptake. // Biochem Pharmacol. 1972, 21 (14), 1993-1995.

126. Hillefors M., von Euler G. // Pharmacology of 3H.R(+)-7-OH-DPAT binding in the rat caudate-putamen. //Neurochem Int. 2001,38 (1), 31-42.

127. Horn A. S. // Dopamine uptake: a review of progress in the last decade. // Prog Neurobiol. 1990, 34 (5), 387-400.

128. Hornykiewicz O. // Biochemical aspects of Parkinson's disease. // Neurology. 1998, 51 (2 Suppl 2), S2-9.

129. Hornykiewicz O. // Dopamine miracle: from brain homogenate to dopamine replacement. // Mov Disord. 2002,17 (3), 501-508.

130. Hornykiewicz O. // The discovery of dopamine deficiency in the parkinsonian brain. // J Neural Transm Suppl. 2006, (70), 9-15.

131. Huang Z., de la Fuente-Fernandez R., StoessI A. J. // Etiology of Parkinson's disease. // Can J Neurol Sci. 2003,30 Suppl 1 SI0-18.

132. Jacobs B. L., Fornal С. A. // 5-HT and motor control: a hypothesis. // Trends Neurosci. 1993, 16(9), 346-352.

133. Jenner P., Olanow C. W. // The pathogenesis of cell death in Parkinson's disease. // Neurology. 2006, 66 (10 Suppl 4), S24-36.

134. Jones S. R., Gainetdinov R. R., Jaber M„ Giros В., Wightman R. M., Caron M. G. // Profound neuronal plasticity in response to inactivation of the dopamine transporter. // Proc Natl Acad Sci USA. 1998, 95 (7), 4029-4034.

135. Jones S. R., Gainetdinov R. R., Wightman R. M., Caron M. G. // Mechanisms of amphetamine action revealed in mice lacking the dopamine transporter. // J Neurosci. 1998, 18 (6), 1979-1986.

136. Joyce J. N., Woolsey C., Ryoo H., Borwege S., Hagner D. // Low dose pramipexole is neuroprotective in the MPTP mouse model of Parkinson's disease, and downregulates the dopamine transporter via the D3 receptor. // BMC Biol. 2004,2 22.

137. Kadota Т., Yamaai Т., Saito Y., Akita Y., Kawashima S., Moroi K., Inagaki N., Kadota K. // Expression of dopamine transporter at the tips of growing neurites of PC 12 cells. // J His-tochem Cytochem. 1996,44 (9), 989-996.

138. Khoshbouei II., Sen N., Guptaroy В., Johnson L., Lund D., Gnegy M. E., Galli A., Javitch J. A. // N-terminal phosphorylation of the dopamine transporter is required for amphetamine-induced efflux. // PLoS Biol. 2004, 2 (3), E78.

139. Kim К. Т., Park D. H., Joh Т. H. // Parallel up-regulation of catecholamine biosynthetic enzymes by dexamethasone in PC 12 cells. //J Neurochem. 1993,60 (3), 946-951.

140. Klockgether Т., Turski L. // Excitatory amino acids and the basal ganglia: implications for the therapy of Parkinson's disease. // Trends Neurosci. 1989, 12 (8), 285-286.

141. Koeltzow Т. E., Xu M., Cooper D. С., Ни X. Т., Tonegawa S., Wolf M. E., White F. J. // Alterations in dopamine release but not dopamine autoreceptor function in dopamine D3 receptor mutant mice. //J Neurosci. 1998, 18 (6), 2231-2238.

142. Kopin I. J. // Catecholamine metabolism: basic aspects and clinical significance. // Pharmacol Rev. 1985,37(4), 333-364.

143. Kornhuber J., Weller M., Schoppmeyer K., Riederer P. // Amantadine and memantine are NMDA receptor antagonists with neuroprotective properties. // J Neural Transm Suppl. 1994,43 91-104.

144. Krueger В. K. // Kinetics and block of dopamine uptake in synaptosomes from rat caudate nucleus. // J Neurochem. 1990, 55 (1), 260-267.

145. Kuhn D. M., Lovenberg W. // Inactivation of tyrosine hydroxylase by reduced pterins. // Biocbem Biophys Res Commun. 1983,117 (3), 894-900.

146. Lang A. E., Obeso J. A. // Time to move beyond nigrostriatal dopamine deficiency in Parkinson's disease. // Ann Neurol. 2004,55 (6), 761-765.

147. Lange K. W., Kornhuber J., Riederer P. // Dopamine/glutamate interactions in Parkinson's disease. // Neurosci Biobehav Rev. 1997,21 (4), 393-400.

148. Laprade N., Radja F., Reader T. A., Soghomonian J. J. // Dopamine receptor agonists regulate levels of the serotonin 5-HT2A receptor and its mRNA in a subpopulation of rat striatal neurons. // J Neurosci. 1996, 16(11), 3727-3736.

149. Lavoie В., Parent A. // Immunohistochemical study of the serotoninergic innervation of the basal ganglia in the squirrel monkey. // J Comp Neurol. 1990, 299 (1), 1-16.

150. Lee F. J., Liu F., Pristupa Z. В., Niznik H. B. // Direct binding and functional coupling of alpha-synuclein to the dopamine transporters accelerate dopamine-induced apoptosis. // FasebJ. 2001, 15 (6), 916-926.

151. Leentjens A. F. // Depression in Parkinson's disease: conceptual issues and clinical challenges. // J Geriatr Psychiatry Neurol. 2004,17 (3), 120-126.

152. Lewis S. J., Caldwell M. A., Barker R. A. // Modern therapeutic approaches in Parkinsons disease. // Expert Rev Mol Med. 2003,2003 1-20.

153. Lipton S. A. // Failures and successes of NMDA receptor antagonists: molecular basis for the use of open-channel blockers like memantine in the treatment of acute and chronic neurologic insults. // NeuroRx. 2004,1 (1), 101-110.

154. Lucas G., Spampinato U. // Role of striatal serotonin2A and serotonin2C receptor subtypes in the control of in vivo dopamine outflow in the rat striatum. // J Neurochem. 2000, 74 (2), 693-701.

155. Lustig H. S., Ahern К. V., Greenberg D. A. // Antiparkinsonian drugs and in vitro excito-toxicity. // Brain Res. 1992, 597 (1), 148-150.

156. Maeda Т., Kannari K., Shen H., Arai A., Tomiyama M., Matsunaga M., Suda T. // Rapid induction of serotonergic hyperinnervation in the adult rat striatum with extensive dopaminergic denervation. //Neurosci Lett. 2003,343 (1), 17-20.

157. Marion S. A. // The epidemiology of Parkinson's disease. Current issues. // Adv Neurol. 2001,86 163-172.

158. Matsubayashi H., Swanson K. L., Albuquerque E. X. // Amantadine inhibits nicotinic acetylcholine receptor function in hippocampal neurons. // J Pharmacol Exp Ther. 1997, 281 (2), 834-844.

159. McMillen B. A., German D. C., Shore P. A. // Functional and pharmacological significance of brain dopamine and norepinephrine storage pools. // Biochem Pharmacol. 1980, 29 (22), 3045-3050.

160. Melttyi S. Т., Kirkwood С. K., Ghaemi S. N. // Pharmacotherapy of HIV dementia. // Ann Pharmacother. 1997,31 (4), 457-473.

161. Mitra K., Gangopadhaya P. K., Das S. K. // Parkinsonism plus syndrome~a review. // Neurol India. 2003,51 (2), 183-188.

162. Moore К. E., Dominic J. A. // Tyrosine hydroxylase inhibitors. // Fed Proc. 1971, 30 (3), 859-870.

163. Morari M., Marti M., Sbrenna S., Fuxe K., Bianchi C., Beani L. // Reciprocal dopamine-glutamate modulation of release in the basal ganglia. // Neurochem Int. 1998, 33 (5), 383397.»

164. Morelli M., Mennini Т., Di Chiara G. // Nigral dopamine autoreceptors are exclusively of the D2 type: quantitative autoradiography of 125I.iodosulpride and [125IJSCH 23982 in adjacent brain sections. // Neuroscience. 1988,27 (3), 865-870.

165. Morgante L., Salemi G., Meneghini F., Di Rosa A. E., Epifanio A., Grigoletto F., Ragonese P., Patti F., Reggio A., Di Perri R. // Parkinson disease survival: a population-based study. // Arch Neurol. 2000,57 (4), 507-512.

166. Mortensen О. V., Amara S. G. // Dynamic regulation of the dopamine transporter. // Eur J Pharmacol. 2003,479 (1-3), 159-170.

167. Nagatsu T. // Genes for human catecholamine-synthesizing enzymes. // Neurosci Res. 1991, 12 (2), 315-345.

168. Nakano I., Hirano A. // Parkinson's disease: neuron loss in the nucleus basalis without concomitant Alzheimer's disease. // Ann Neurol. 1984, 15 (5), 415-418.

169. Namura I., Douillet P., Sun C. J., Pert A., Cohen R. M., Chiueh С. С. // MPP+ (l-mcthyl-4-phenylpyridine) is a neurotoxin to dopamine-, norepinephrine- and serotonin-containing neurons. II Eur J Pharmacol. 1987, 136 (1), 31-37.

170. Narita M., Mizuo K., Mizoguchi II., Sakata M., Narita M., Tseng L. F., Suzuki T. // Molecular evidence for the functional role of dopamine D3 receptor in the morphine-induced rewarding effect and hyperlocomotion. // J Neurosci. 2003,23 (3), 1006-1012.

171. Numan S., Lundgren К. H., Wright D. E., Herman J. P., Seroogy К. B. // Increased expression of 5HT2 receptor mRNA in rat striatum following 6-OHDA lesions of the adult ni-grostriatal pathway. // Brain Res Mol Brain Res. 1995,29 (2), 391-396.

172. Obeso J. A., Rodriguez-Oroz M. C., Rodriguez M., Lanciego J. L., Artieda J., Gonzalo N., Olanow C. W. // Pathophysiology of the basal ganglia in Parkinson's disease. // Trends Neurosci. 2000,23 (10 Suppl), S8-19.

173. Page G., Peeters M., Maloteaux J. M., Hermans E. // Increased dopamine uptake in striatal synaptosomes after treatment of rats with amantadine. // Eur J Pharmacol. 2000, 403 (1-2), 75-80.

174. Palmowski-Wolfe A. M., Perez M. Т., Behnke S„ Fuss G., Martziniak M., Ruprecht K. W. // Influence of dopamine deficiency in early Parkinson's disease on the slow stimulation multifocal-ERG.//Doc Ophthalmol. 2006,112 (3),209-215.

175. Patel A. P., Cerruti C., Vaughan R. A., Kuhar M. J. // Developmentally regulated glycosyla-tion of dopamine transporter. // Brain Res Dev Brain Res. 1994, 83 (1), 53-58.

176. Peeters M., Page G., Maloteaux J. M., Hermans E. // Hypersensitivity of dopamine transmission in the rat striatum after treatment with the NMDA receptor antagonist amantadine. // Brain Res. 2002,949 (1-2), 32-41.

177. Peeters M., Maloteaux J. M., Hermans E. // Distinct effects of amantadine and memantine on dopaminergic transmission in the rat striatum. // Neurosci Lett. 2003,343 (3), 205-209.

178. Piccirilli M., Piccinin G. L., Agostini L. // Dopamine deficiency in Parkinson's disease. // Neurology. 1984,34 (2), 265-266.

179. Pocker Y., Stone J. T. // The catalytic versatility of erythrocyte carbonic anhydrase. VI. Kinetic studies of noncompetitive inhibition of enzyme-catalyzed hydrolysis of p-nitrophenyl acetate. // Biochemistry. 1968, 7 (8), 2936-2945.

180. Pondal M., Del Ser Т., Bermejo F. II Anticholinergic therapy and dementia in patients with Parkinson's disease. // J Neurol. 1996,243 (7), 543-546.

181. Pradhan S. N., Dutta S. N. // Behavioral effects of arecoline in rats. // Psychopharmacolo-gia. 1970,17(1), 49-58.

182. Przedborski S. // Pathogenesis of nigral cell death in Parkinson's disease. // Parkinsonism Relat Disord. 2005,11 Suppl 1 S3-7.

183. Quik M. // Smoking, nicotine and Parkinson's disease. // Trends Neurosci. 2004, 27 (9), 561-568.

184. Rabey J. M., Nissipeanu P., Korczyn A. D. // Efficacy of memantine, an NMDA receptor antagonist, in the treatment of Parkinson's disease. // J Neural Transm Park Dis Dement Sect. 1992,4 277-282.

185. Ribeiro P., Wang Y., Citron B. A., Kaufman S. // Regulation of recombinant rat tyrosine hydroxylase by dopamine. // Proc Natl Acad Sci USA. 1992, 89 (20), 9593-9597.

186. Ricci A., Collier W. L., Rossodivita I., Amenta F. // Dopamine receptors mediating inhibition of the cyclic adenosine monophosphate generating system in the rat renal cortex. // J Auton Pharmacol. 1991,11 (2), 121-127.

187. Riederer P., Sofic E., Heuschneider G., Benedetti M. S., Dostert P. // Secondary (toxic) parkinsonism as model of Parkinson's disease. // Funct Neurol. 1988, 3 (4), 449-457.

188. Rivet^ A. J., Francis A., Roth J. A. // Distinct cellular localization of membrane-bound and soluble forms of catechol-O-methyltransferase in brain. // J Neurochem. 1983, 40 (1), 215219. .

189. Robledo P., Feger J. // Excitatory influence of rat subthalamic nucleus to substantia nigra pars reticulata and the pallidal complex: electrophysiological data. // Brain Res. 1990, 518 (1-2), 47-54.

190. Rodriguez M. C., Obeso J. A., Olanow C. W. // Subthalamic nucleus-mediated excitotoxic-ity in Parkinson's disease: a target for neuroprotection. // Ann Neurol. 1998,44 (3 Suppl 1), S175-188.

191. Roth G. S. // Changes in tissue responsiveness to hormones and neurotransmitters during aging. // Exp Gerontol. 1995, 30 (3-4), 361-368.

192. Sammet S., Graefe К. H. // Kinetic analysis of the interaction between noradrenaline and Na+ in neuronal uptake: kinetic evidence for CO-transport. // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 1979,309 (2), 99-107.

193. Schapira A. H. // Neuroprotection and dopamine agonists. // Neurology. 2002, 58 (4 Suppl 1), S9-18.

194. Schapira A. H. // Present and future drug treatment for Parkinson's disease. // J Neurol Neu-rosurg Psychiatry. 2005, 76 (11), 1472-1478.

195. Scherman D., Desnos C., Darchen F., Pollak P., Javoy-Agid F., Agid Y. // Striatal dopamine deficiency in Parkinson's disease: role of aging. // Ann Neurol. 1989,26 (4), 551-557.

196. Scholtissen В., Verhey F. R., Steinbusch H. W., Leentjens A. F. // Serotonergic mechanisms in Parkinson's disease: opposing results from preclinical and clinical data. // J Neural Transm. 2006, 113 (1), 59-73.

197. Schwab R. S., Poskanzer D. C., England A. C., Jr., Young R. R. // Amantadine in Parkinson's disease. Review of more than two years' experience. // Jama. 1972, 222 (7), 792-795.

198. Seeman P. // Brain dopamine receptors. // Pharmacol Rev. 1980, 32 (3), 229-313.

199. Self D. W., Barnhart W. J., Lehman D. A., Nestler E. J. // Opposite modulation of cocaine-seeking behavior by DI- and D2-like dopamine receptor agonists. // Science. 1996, 271 (5255), 1586-1589.

200. Sellal F., Hirsch E., Lisovoski F., Mutschler V., Collard M., Marescaux C. // Contralateral disappearance of parkinsonian signs after subthalamic hematoma. // Neurology. 1992, 42 (1), 255-256.

201. Shohamy D., Myers С. E., Grossman S., Sage J., Gluck M. A. // The role of dopamine in cognitive sequence learning: evidence from Parkinson's disease. // Behav Brain Res. 2005, 156 (2), 191-199.

202. Silbergeld E. K., Hruska R. E. // Tremor: role of striatal cholinergic neurons and the effect of intrastriatal kainicacid.//Neurosci Lett. 1979, 15 (2-3), 235-242.

203. Sorkina Т., Hoover B. R., Zahniser N. R., Sorkin A. // Constitutive and protein kinase C-induced internalization of the dopamine transporter is mediated by a clathrin-dependent mechanism. // Traffic. 2005,6 (2), 157-170.

204. Sotnikova T. D., Beaulieu J. M., Gainetdinov R. R., Caron M. G. // Molecular biology, pharmacology and functional role of the plasma membrane dopamine transporter. // CNS Neurol Disord Drug Targets. 2006, 5 (1), 45-56.

205. Spehlmann R., Stahl S. M. // Dopamine acetylcholine imbalance in Parkinson's disease. Possible regenerative overgrowth of cholinergic axon terminals. // Lancet. 1976, 1 (7962), 724-726.

206. Steece-Collier K., Maries E., Kordower J. H. // Etiology of Parkinson's disease: Genetics and environment revisited. // Proc Natl Acad Sci USA. 2002, 99 (22), 13972-13974.

207. Stoessl A. J., de la Fuente-Fernandez R. // Dopamine receptors in Parkinson's disease: imaging studies. // Adv Neurol. 2003,91 65-71.

208. Su H. S. // Crossed nigrostriatal dopaminergic pathway. // Chin Med J (Engl). 1986,99 (3), 215-220.

209. Sulzer D., Chen Т. K., Lau Y. Y., Kristensen П., Rayport S., Ewing A. // Amphetamine redistributes dopamine from synaptic vesicles to the cytosol and promotes reverse transport. Hi Neurosci. 1995,15 (5 Pt 2), 4102-4108.

210. Sun W., Ginovart N., Ко F., Seeman P., Kapur S. // In vivo evidence for dopamine-mediated internalization of D2-receptors after amphetamine: differential findings with 3H.raclopride versus [3H]spiperone. // Mol Pharmacol. 2003,63 (2), 456-462.

211. Sved A. F., Baker H. A., Reis D. J. // Dopamine synthesis in inbred mouse strains which differ in numbers of dopamine neurons. // Brain Res. 1984,303 (2), 261-266.

212. Tanner С. M., Aston D. A. // Epidemiology of Parkinson's disease and akinetic syndromes. // Curr Opin Neurol. 2000,13 (4), 427-430.

213. Thoenen II., Mueller R. A., Axelrod J. // Increased tyrosine hydroxylase activity after drug-induced alteration of sympathetic transmission. // Nature. 1969,221 (5187), 1264.

214. Torres G. E., Gainetdinov R. R., Caron M. G. // Plasma membrane monoamine transporters: structure, regulation and function. // Nat Rev Neurosci. 2003,4 (1), 13-25.

215. Trifaro J. M., Rodriguez del Castillo A., Vitale M. L. // Dynamic changes in chromaffin cell cytoskeleton as prelude to exocytosis. // Mol Neurobiol. 1992, 6 (4), 339-358.

216. Ungerstedt U. // Stereotaxic mapping of the monoamine pathways in the rat brain. // Acta Physiol Scand Suppl. 1971,367 1-48.

217. Vaughan R. A., Brown V. L., McCoy M. Т., Kuhar M. J. // Species- and brain region-specific dopamine transporters: immunological and glycosylation characteristics. // J Neurochem. 1996, 66 (5), 2146-2152.

218. Voigtlander P. F., Moore К. E. // Nigro-striatal pathway: stimulation-evoked release of ( 3 H)dopamine from caudate nucleus. // Brain Res. 1971, 35 (2), 580-583.

219. Wallace D. R., Owens J., Booze R. M. // 3H.(+)-7-OII-DPAT and [3H]pramipexole binding in the striatum and nucleus accumbens of Sprague-Dawley and Fischer-344 rats. // Life Sci. 1998, 63 (19), PL275-280.

220. Wanibuchi F., Usuda S. // Synergistic effects between D-l and D-2 dopamine antagonists on catalepsy in rats. // Psychopharmacology (Berl). 1990,102 (3), 339-342.

221. Wersinger C., Prou D., Vernier P., Sidhu A. // Modulation of dopamine transporter function by alpha-synuclein is altered by impairment of cell adhesion and by induction of oxidative stress. // Faseb J. 2003, 17 (14), 2151-2153.

222. Westerink В. H., de Vries J. B. // On the origin of dopamine and its metabolite in predominantly noradrenergic innervated brain areas. // Brain Res. 1985, 330 (1), 164-166.

223. Wilson R. S., Bennett D. A., Gilley D. W., Beckett L. A., Schneider J. A., Evans D. A. // Progression of parkinsonism and loss of cognitive function in Alzheimer disease. // Arch Neurol. 2000,57 (6), 855-860.

224. Zigmond R. E., Schwarzschild M. A., Rittenhouse A. R. // Acute regulation of tyrosine hydroxylase by nerve activity and by neurotransmitters via phosphorylation. // Annu Rev Neurosci. 1989,12 415-461.