Экспериментальное изучение фармакокинетики и метаболизма оригинального селективного анксиолитика афобазола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат медицинских наук Виглинская, Анастасия Олеговна

• Виглинская, Анастасия Олеговна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Виглинская, Анастасия Олеговна

Общая характеристика работы.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Биотрансформация и фармакокинетика производных бензимидазола.

1.1 .Фармакологические свойства производных бензимидазола.

1.2.Ферментные системы метаболизма производных бензимидазола.

1.3.Основные направления биотрансформации производных бензимидазола.

1.4.Фармакокинетика производных бензимидазола.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования.

2.2. Реактивы.

2.3. Экспериментальные животные.

2.4. Методы.

2.4.1. Способ отбора крови.

2.4.2. Масс-спектрометрический анализ афобазола и его метаболитов в плазме крови крыс.

2.4.3. Метод количественного определения афобазола и его метаболитов в плазме крови и органах животных с применением ВЭЖХ.

2.4.4. Обработка биологических проб, экстракция афобазола и его метаболитов из биологических образцов.

2.4.5. Построение калибровочных кривых.

2.4.6. Метрологическая характеристика методик определения афобазола и его основных метаболитов.

2.4.7. Фармакокинетические параметры, используемые для интерпретации экспериментальных данных.

2.4.8. Статистическая обработка полученных результатов.

Глава 3. БИОТРАНСФОРМАЦИЯ АФОБАЗОЛА У КРЫС.

Глава 4. ФАРМАКОКИНЕТИКА АФОБАЗОЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ У КРЫС

4.1. Фармакокинетика афобазола после его внутрибрюшинного введения крысам в дозе 25 мг/кг.

4.1.1. Фармакокинетика афобазола и его метаболитов М-6 и М-7 после внутрибрюшинного введения препарата.

4.1.2. Фармакокинетика афобазола и его метаболита М-11 после внутрибрюшинного введения препарата.

4.1.3. Тканевая доступность афобазола и его основных метаболитов у крыс.

4.2. Фармакокинетика афобазола после его перорального введения крысам в дозе 25 мг/кг.

4.3. Абсолютная биодоступность афобазола у крыс.

Глава 5. ЭКСКРЕЦИЯ АФОБАЗОЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ С МОЧОЙ И

КАЛОМ КРЫС.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное изучение фармакокинетики и метаболизма оригинального селективного анксиолитика афобазола»

Актуальность проблемы

Проблема создания селективных анксиолитиков, сходных по противотревожным свойствам с бензодиазепинами, но не обладающих их гипноседативными, миорелаксантными, амнестическими эффектами, не вызывающих зависимости и синдрома отмены, является центральной в современной психофармакологии [19, 44].

Фундаментальные исследования генетических различий в действии типичных транквилизаторов и анализ механизмов диссоциации их анксиолитического и седативного влияния показали, что анксиоселективный эффект может быть достигнут при коррекции изменений в ГАМКд рецепторе, развивающихся при эмоционально-стрессовой реакции и приводящих к снижению связывающей способности бензодиазепинового участка [18,19,111]. Итогом этих работ явился целенаправленный синтез, выполненный под руководством В.Л. Савельева, и фармакологическое изучение соединения 5-этокси-2-[2-(морфолино)-этилтио]-бензимидазола дигидрохлорида, получившего название афобазол. Установлено, что афобазол предотвращает стресс индуцированное падение бензодиазепиновой рецепции в нейрональных мембранах и обладает селективными анксиолитическими свойствами [19,109].

Экспериментальные результаты подтверждены в клинических исследованиях [14]. Препарат зарегистрирован в РФ в качестве селективного анксиолитика 3 ноября 2005г, № ЛС - 000861.

Необходимым этапом разработки оригинального лекарственного средства является экспериментальное изучение его фармакокинетики и метаболизма. При этом выясняется, в каком количестве от введенной дозы препарат всасывается из места введения и поступает в системный кровоток и, соответственно, к месту его биологического действия. При введении внутрь важно знать, какая часть препарата подвергается биотрансформации, а какая попадает в системный кровоток в неизмененном виде. Необходимо изучить основные пути метаболизма исследуемого соединения с идентификацией и дальнейшим изучением фармакологической активности метаболитов. Другой задачей фармакокинетических исследований является изучение абсолютной и тканевой биодоступности соединений, что помогает выбрать оптимальный путь введения препарата и оценить интенсивность его проникновения в орган-мишень [6].

Диссертация выполнена в соответствии с плановой темой НИР ГУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН "Изучение механизмов эндо-и экзогенной регуляции функций ЦНС, разработка новых оригинальных нейропсихотропных средств" (№ госрегистрации 01.2006 06601).

Целью работы явилось экспериментальное изучение фармакокинетики афобазола и его метаболитов. Для ее достижения были поставлены следующие задачи:

1. Разработать аналитический метод количественного определения афобазола и его метаболитов в биологическом материале с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии.

2. Провести идентификацию метаболитов афобазола на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии.

3. Изучить фармакокинетику неизмененного афобазола и его основных метаболитов в плазме крови и органах крыс после однократного внутрибрюшинного введения.

4. Изучить фармакокинетику афобазола и его основных метаболитов в плазме крови крыс после однократного перорального введения.

5. Определить абсолютную биологическую доступность афобазола.

6. Изучить экскрецию неизмененного препарата и его метаболитов с мочой и калом в эксперименте.

7. На основании результатов проведенных исследований выработать рекомендации по фармакологическому изучению метаболитов афобазола.

Научная новизна работы Впервые изучена биотрансформация и фармакокинетика нового селективного анксиолитика афобазола у крыс, определены стандартные фармакокинетические параметры. Установлено, что при различных путях введения афобазол подвергается интенсивной биотрансформации, и уже в первые минуты в плазме крови и органах крыс регистрируются значительные концентрации его метаболитов. По данным масс-спектральных характеристик и встречного химического синтеза были идентифицированы 5 метаболитов афобазола. Установлено, что основными продуктами биотрансформации афобазола являются: метаболит М-3 (гидроксилированный по ароматическому кольцу бензимидазольного цикла) и метаболит 11 (окисленный по морфолиновому кольцу). Афобазол и его метаболиты определяются в плазме крови и органах животных в течение 3-х часов. В результате проведенного исследования установлено, что для афобазола характерна средняя степень проникновения в орган-мишень мозг и высокая абсолютная биодоступность.

Практическая значимость работы На основании данных исследований методом высокоэффективной жидкостной хроматографии идентифицированы метаболиты афобазола. Синтезирован метаболит М-11, который предложен для дальнейшего фармакологического изучения. Перспектива создания лекарственных форм для орального применения афобазола подтверждена его высокой степенью абсолютной биодоступности в эксперименте. Фармакокинетические параметры, установленные в настоящей работе, использованы для разработки схем применения афобазола в клинике, для проведения работ по оценке безвредности препарата. Совокупность данных диссертационного исследования вошла в комплект документов, представленных для регистрации афобазола в качестве лекарственного средства в Министерство здравоохранения и социального развития РФ.

Положения, вынесенные на защиту:

1) Разработаны высокочувствительные методы ВЭЖХ и масс-спектрометрии для количественного определения афобазола и его метаболитов в биологических средах.

2) Идентифицированы основные метаболиты афобазола.

3) Установлены фармакокинетические параметры афобазола и его основных метаболитов при внутрибрюшинном и пероральном введении крысам в дозе 25 мг/кг.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на IV Международной конференции "Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам" (Москва, 2006г), XV Международном конгрессе по фармакологии "Pharmacology in the 21st Century: A Bridge between the Past and the New Molecular Frontiers" (Пекин, 2006г), научно-практической конференции "Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)" (Ростов-на-Дону, 2006г), XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 2007г), на лабораторной конференции лаборатории фармакокинетики ГУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН (Москва, 2007г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 статьи и 4 тезисов.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Виглинская, Анастасия Олеговна

Выводы:

1) На основе ВЭЖХ разработана высокочувствительная и селективная методика количественного определения афобазола и его метаболитов в биологическом материале.

2) В результате анализа масс-спектрометрических характеристик наряду с неизмененным препаратом идентифицировано 17 продуктов его биотрансформации. Встречным химическим синтезом подтверждены структуры следующих 5 метаболитов афобазола: гидроксилированного по бензимидазольному циклу, окисленного по гетероатому серы, гидроксилированного по алифатическому радикалу, окисленного по морфолиновому фрагменту и циклизованного по атому азота.

3) Установлены различия в количественном содержании и величинах дозозависимых фармакокинетических параметров афобазола и его метаболитов при разных путях введения. После перорального способа введения отмечена более интенсивная биотрансформация, что связано с выраженным "эффектом первого прохождения" препарата через печеночный барьер.

4) Определены основные пути и параметры выведения афобазола и его идентифицированных встречным химическим синтезом метаболитов. Установлено, что за 24 часа после внутрибрюшинного и перорального введения афобазола с мочой и калом крыс выводится не более 0,1% неизмененного соединения и 42,1% метаболитов от введенной дозы препарата.

5) На основе анализа структуры метаболитов афобазола в органах, тканях и экскрементах крыс определены основные пути биотрансформации препарата: гидроксилирование по ароматическому кольцу бензимидазольного цикла и окисление по морфолиновому фрагменту.

6) Целесообразность создания лекарственных форм для орального применения афобазола, в том числе и пролонгированного действия, подтверждена его высокой степенью абсолютной биодоступности в эксперименте (43,6%).

Ill

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящей диссертационной работе изучены биотрансформация и фармакокинетика производного бензимидазола - нового селективного анксиолитика афобазола, разработанного в ГУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН.

Из анализа литературы следует, что производные бензимидазолов подвергаются интенсивным метаболическим превращениям в организме человека и животных. Так, омепразол полностью метаболизируется в печени, в моче при этом регистрируются 6 метаболитов данного препарата [107,108]. Аналогично, ланзопразол интенсивно метаболизируется в печени, в сыворотке крови регистрируются его 2 основных метаболита [67]. После внутривенного введения 80% от введенной дозы пантопразола подвергается интенсивной биотрансформации с образованием метаболитов, выводимых с мочой [117]. Афобазол в данном случае не является исключением. В результате масс-спектрометрического анализа нами наряду с неизмененным препаратом идентифицировано 17 продуктов его биотрансформации. Ни для одного известного представителя бензимидазольного ряда не обнаружено столь большого числа метаболитов.

По данным масс-спектральных характеристик и встречного химического синтеза были идентифицированы основной метаболит афобазола - 2-[2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5этоксибензимидазол -М-11, а также метаболиты М-3, М-6, М-7 и М-14.

Следует отметить, что большинство метаболитов относятся к продуктам окисления афобазола. На основании идентифицированных метаболитов в плазме крови крыс очевидно, что основными направлениями биотрансформации афобазола являются гидроксилирование по ароматическому кольцу бензимидазольного цикла и окисление по морфолиновому кольцу. Полученные в данном исследовании результаты по биотрансформации афобазола в плазме крови крыс согласуются с литературными данными. Так, например, ланзопразол и Н259/31 интенсивно метаболизируются в печени с образованием основных гидрокслированных метаболитов вследствие окисления ароматического кольца бензимидазольного цикла [24,75,98].

Из литературных данных известно, что в катализ реакций сульфоокисления и гидроксилирования производных бензимидазола основной вклад вносят такие изоформы цитохромов, как CYP2C19, CYP3A4, CYP1A1 и CYP2C9. Abelo et al. [24] на примере родственного по химической структуре афобазолу соединения омепразола было показано, что образование гидроксилированной формы омепразола катализируется CYP2C19, тогда как в биотрансформацию сульфона омепразола в основном вовлечен CYP3A4, кроме того, омепразол - умеренный конкурентный ингибитор CYP2C9 [80]. Аналогично, реакция образования сульфона ланзопразола катализируется преимущественно изоформой CYP3A4 [98,101], также, показано, что ланзопразол является мощным конкурентным ингибитором CYP2C19 [80]. Для целого ряда производных бензимидазола: омепразола, тиабендазола, ланзопразола, карбендазима показана возможность активации транскрипции гена CYP1A1 [35].

Таким образом, на основании структурного сходства, а также сходства основных направлений биотрансформации афобазола с целым рядом производных бензимидазола, таких как ланзопразол, омепразол, пантопразол, альбендазол, тиабендазол и др., можно предположить, что в катализе реакций гидроксилирования, являющихся основными в метаболизме как афобазола, так и вышеперечисленных препаратов, задействованы те же изоформы цитохромов, а именно CYP2C19, CYP3A4, CYP1A1 и CYP2C9.

Если в ходе дальнейших экспериментов подтвердится данное предположение, то афобазол можно будет целенаправленно назначать совместно с метаболизируемыми системой CYP препаратами, изменяя активность микросомальных монооксигеназ в нужном направлении с целью повышения эффективности проводимой фармакотерапии.

Очень важно отметить, что для изоформ CYP2C9 и CYP2C19 выявлен полиморфизм, то есть распределение в популяции активности этих ферментов не является однородным, а характеризуется наличием двух или более групп, что отразится на эффектах лекарственных средств. Данная проблема межиндивидуальных различий при приеме препаратов, метаболизируемых полиморфными изоформами ферментов, является одной из центральных в клинической фармакологии.

В литературе, описывающей полиморфизм окисления лекарственных средств, часто употребляются другие характеристики фенотипов. Индивидуумов с недостаточным метаболизмом некоторых препаратов называют "poor metabolizers" (или РМ-фенотип) по сравнению с нормальными - " extensive metabolizers " (или ЕМ-фенотип) (U.A. Meyer, 1996) [92]. Метаболический путь, приводящий к полной элиминации лекарства, имеет большое значение. Если поврежденный метаболический путь является минорным, то другие метаболические пути, вовлекающие различные изоформы цитохрома Р-450, могут компенсировать эти потери, следовательно, больших различий в распределении между фенотипами не будет. Однако, если нарушения ассоциированы с основным путем, между фенотипами возникают существенные различия. Повышение концентрации препарата в плазме у пациентов с недостаточно интенсивным метаболизмом может сопровождаться усилением фармакологического эффекта.

Поэтому, базируясь на нашем предположении о вовлеченности полиморфных изоформ CYP2C9 и CYP2C19 в метаболизм афобазола, в клинике чрезвычайно перспективным является исследование количественного соотношения афобазола и его образующихся метаболитов, что позволит выявить и разделить пациентов на группы, характеризующиеся различной степенью интенсивности метаболизма.

Отсюда косвенно можно судить о фенотипе окисления: РМ-фенотип или ЕМ-фенотип.

Афобазол, как и многие другие производные бензимидазолов, характеризуется выраженными мембранотропными свойствами, поэтому при различных способах введения интенсивно проникает в органы и ткани, в том числе, участвующие в I фазе биотрансформации ксенобиотиков, следствием чего является его выраженная биотрансформация.

При внутрибрюшинном и пероральном введении афобазол, подобно другим производным бензимидазола, быстро всасывается, интенсивно биотрансформируется, распределяется по органам и элиминирует из организма с периодом полувыведения 0,53 ч. Из литературных источников известно, что многие производные бензимидазола с большой скоростью всасываются в системный кровоток, и в то же время характеризуются незначительными периодами полувыведения из организма. Например, элиминация бемитила из крови носит двухфазный характер с периодом полувыведения, составляющим в а-фазе 1,11ч, в Р-фазе - 1,86 ч [4], период полувыведения этомерзола составляет 2,43 ч [2,8], период полувыведения омепразола у здоровых лиц равен в плазме 0,5-1 ч [106,107], период полувыведения пантопразола - 1,9 ч [104].

В ходе настоящего исследования было установлено, что несмотря на эффект первого прохождения через печень, при пероральном способе введения для афобазола характерна высокая степень абсолютной биодоступности, которая составляет 43,6%, что еще раз указывает на значительную мембранотропность препарата. Поэтому перспективным является применение пероральных лекарственных форм селективного анксиолитика афобазола.

Установлено также, что афобазол и его метаболиты обладают средней интенсивностью проникновения в орган-мишень мозг.

Сравнительный анализ величин степеней превращения афобазола в основные метаболиты показал, что препарат интенсивнее метаболизируется в биопродукт М-11 при пероральном введении (0,680), чем при внутрибрюшинном (0,253). Таким образом, в данном случае очевиден эффект первого прохождения через печень при пероральном введении афобазола. В то же время величины степеней превращения афобазола в метаболиты М-6 и М-7 после перорального и внутрибрюшинного способов введения характеризуются приблизительно одинаковыми величинами. Для биопродукта М-6 величина степени превращения составляет при пероральном введении - 0,153, при внутрибрюшинном введении - 0,145. Для метаболита М-7 аналогичный параметр составляет при пероральном введении - 0,044, при внутрибрюшинном введении - 0,066. Из этого следует, что эффект первого прохождения афобазола через печень практически не влияет на интенсивность образования метаболитов М-6 и М-7.

Высокие величины степеней превращения афобазола в метаболит М-11 свидетельствуют о том, что один из основных путей биотрансформации препарата заключается в окислении морфолинового кольца.

Анализ абсолютных величин концентраций афобазола и его метаболита 11 при пероральном способе введения показал, что данные величины имели близкие значения, а в некоторых биологических образцах величины концентраций М-11 превышали таковые исходного соединения. Основываясь на полученных данных, можно предположить, что в случае наличия фармакологической активности у метаболита 11, данное соединение внесет соответствующий вклад в реализацию фармакологических эффектов афобазола.

В моче и кале животных, как показали проведенные исследования, основным метаболитом афобазола является М-3 (гидроксилированная форма по 5-му положению бензимидазольного цикла). Причем, содержание его в моче превышает содержание в кале в 17 раз. Кроме того, в моче крыс обнаружена глюкуроноконъюгированная форма метаболита М-3. Также в значительных количествах по сравнению с исходным соединением и метаболитом М-6 в моче регистрировались М-7 и сульфон афобазола. Метаболит М-6 (сульфоксид афобазола) вторично необратимо окисляется с образованием сульфона афобазола.

Важно отметить, что циклизованная форма метаболита М-7, присутствующая в плазме крови, в моче и кале крыс не обнаружена даже в следовых количествах.

Остальные метаболиты афобазола в суточной моче и кале определялись в чрезвычайно малых количествах, в том числе и метаболит М-11, являющийся основным метаболитом в плазме крови крыс. Связано это, скорее всего с тем, что 5-й атом углерода бензимидазольного цикла подвергается вторичной реакции гидроксилирования. Данное предположение подтверждается литературными примерами образования вторичного метаболита омепразола гидроксисульфона [32], а также двух гидроксилированных по алифатической цепи вторичных метаболитов альбендазола - 2-гидроксипропилсульфона и 3-гидроксипропилсульфона [61].

Таким образом, полученные в исследовании результаты подтверждают тот факт, что выведение производных бензимидазола в большей степени происходит за счет образования гидроксилированных метаболитов по ароматическому кольцу как в конъюгированных, так и в неконъюгированных формах [31, 32, 49, 67].

Следует также отметить, что за одни сутки от введенной дозы препарата с мочой выводится 40% идентифицированных метаболитов, тогда как с калом не многим более 1,3%, что подтверждается рядом литературных данных по изучению экскреции производных бензимидазола. Показано, например, что 80% метаболитов от введенной дозы омепразола экскретируются с мочой и лишь небольшая часть с калом [106]. После однократного перорального введения ланзопразола приблизительно 20% выводится с мочой в виде конъюгированных и неконъюгированных метаболитов [67]. Паитопразол подвергается интенсивной биотрансформации с образованием метаболитов, которые на 80% выводятся с мочой. Оставшаяся часть от введенной дозы подвергается желчной экскреции и выводится в виде метаболитов с калом [117].

Анализируя в целом результаты изучения экскреции афобазола и его метаболитов с мочой и калом крыс, важно отметить, что элиминация афобазола из организма крыс происходит главным образом за счет биотрансформации препарата в печени; суммарное выведение метаболитов с мочой крыс за сутки в среднем в 30 раз превышает выход за то же время метаболитов с калом; одним из главных направлений биотрансформации препарата является образование гидроксилированных по ароматическому кольцу бензимидазольного цикла метаболитов афобазола.

На основании проведенных фармакокинетических исследований, а также сопоставления полученных результатов с литературными данными, вследствие высокой абсолютной биодоступности афобазола можно рекомендовать применение его пероральных лекарственных форм.

Кроме того, подтверждена целесообразность применения афобазола в качестве дневного анксиолитика и средства премедикации, поскольку афобазол характеризуется быстрым всасыванием, распределением (в течение 15 мин) и выведением из организма (после 3-х часов определяются следовые количества в плазме как самого препарата, так и его метаболитов).

Полученные результаты по изучению фармакокинетики афобазола и его метаболитов при внутривенном, внутрибрюшинном и пероральном способах введения препарата позволяют заключить, что лекарственное вещество и его метаболиты элиминируют из организма животных с высокой скоростью. Поэтому для поддержания эффективных концентраций афобазола в системном кровотоке рекомендуется применение таблетированной лекарственной формы через короткие временные интервалы и в течение длительного времени. Это не может привести к передозировкам, так как афобазол вследствие особенностей своего химического строения и величин тканевой доступности не способен к кумуляции в органах. В то же время для упрощения режима дозирования афобазола необходима разработка лекарственной формы с пролонгированным действием.

В результате исследования количественного соотношения афобазола и его метаболитов возможна косвенная оценка фенотипа окисления (РМ/ЕМ-фенотип) в клинике.

Наконец, афобазол и его метаболит М-11 характеризуются близкими значениями абсолютных величин тканевой доступности в мозге, поэтому очевидна перспектива изучения фармакологической активности основного продукта биотрансформации афобазола - метаболита 11.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Виглинская, Анастасия Олеговна, 2007 год

1. Агафонов А.А., Пиотровский В.К. Программа M-ind системы параметров фармакокинетики модельно-независимым методом статистических моментов.//Хим.-фарм.журн., 1991, № 10,с. 16-19.

2. Александровский Ю.А., Лобастов О.С., Спивак Л.И., Щукин Б.П. Психогении в экстремальных условиях.-//М., 1991.

3. Бойко С.С., Бобков Ю.Г., Жердев В.П. Биодоступность бемитила у крыс.// Фармакология и токсикология, -1987,№5,с.54-56.

4. Бойко С.С., Бобков Ю.Г., Жердев В.П, Дворянинов А.А. Изучение фармакокинетики бемитила в эксперименте у крыс.// Хим.-фарм. журн., -1987,№11,с.1288-1291.

5. Бойко С.С., Бобков Ю.Г., Доброхотова Т.А. и др. Экспериментальные и клинические данные о способности бемитила проникать через гематоэнцефалический барьер.// Фармакология и токсикология, -1987,№3,с.79-81.

6. Жердев В.П., Литвин А.А. Роль и организация фармакокинетических исследований.// Клин.фармакокинетика, 2005, №2, с. 1-3.

7. Косолапов В.А., Островский В.А., Спасов А.А. Защитное действие этомерзола в случае острой гипобарической гипоксии и последующей реконвалесценции.// Экспер. и клин, фармакология, -1996,№6,с.51-53.

8. Кравцова О.Ю. Обоснование применения мексидола для фенотипирования глюкуроноконъюгации у животных и человека)/ Автореф. диссер. к.б.н., М., -2005, С.26.

9. Лакин К.М., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ. М.: Медицина - 1981 - С.344.

10. Миронова О.П., Зарубина И.В., Шабанов П.Д. Этомерзол как антиоксидантное средство.-// Биомед. химия 2003 - №5, с.434-442.

11. Морозов И.С. Методические рекомендации по применению бемитила в психиатрической практике.-//М., 1987, с. 120.

12. Незнамов Г.Г., Сюняков С.А., Чумаков Д.В. и др. Результаты клинического изучения селективного анксиолитика афобазола.// Экспер. и клин, фармакология 2001- № 2, с. 15-19.

13. Пожарский А.Ф., Гарновский А.Д., Симонов A.M. Успехи химии имидазола.// Успехи химии, 1966, №35, с. 261-281.

14. Приходько А.З., Асташкин Е.И. Изучение влияния лекарственных препаратов имидазола и бензимидазола на ферментативные активности цитохрома Р-450 печени мышей).// Хим.фарм.журнал-1992-№3, С.23-25.

15. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. М.:ГЭОТАР-МЕД, 2001, - 256 с.

16. Середенин С.Б., Бадыштов Б.А., Егоров Д.Ю.// Исследование содержания продуктов перекисного окисления липидов у инбредных мышей с различным типом эмоционально-стрессовой реакции. Бюлл. эксп. фармакол. мед.- 1989.-N7.- С. 46-48.

17. Середенин С.Б., Воронина Т.А., Незнамов Г.Г. и др. Фармакогенетическая концепция анксиолитического эффекта.// Вестник РАМН. 1998-№11, С.3-9.

18. Смирнов А.В. Фармакологические средства повышения работоспособности.// Из-во Военно-медицинской академии им. А.В. Кирова, Ленинград-1984-с. 31-35.

19. Смирнова JI.А. Фармакокинетика производных бензимидазола как основа для создания новых лекарственных препаратов и оптимальных схем фармакотерапии./ Диссер. д.б.н., Волгоград, -2004, С.338.

20. Спасов А.А., Иежица И.Н., Бугаева Л.И., Анисимова В.А. Спектр фармакологической активности и токсикологические свойства производных бензимидазола (обзор).// Хим.-фарм. журн., -1999,№5,с.6-17.

21. Спасов А.А., Черников М.В., Анисимова В.А. и др. Поиск антигистаминных веществ среди имидазо- и триазолобензимидазолов. //Хим.-фарм. журн., -2000,№2,с.6-10.

22. Abelo A., Andersson Т.В., Bredberg U. et al. Stereoselective metabolism by human liver CYP enzymes of a substituted benzimidazole./ Drug metabolism and disposition, -2000, Vol. 28, № 1, p. 58-64.

23. Ali D.N., Chick B.F. The effect of an oil formulation on the systemic availability of oxfendazole./ Int. J. Parasitol., -1992, Vol. 22, № 4, p. 541543.

24. Ali D.N., Hennessy D.R. The effect of feed intake on the rate of flow of digesta and the disposition and activity of oxfendazole in sheep./ Int. J. Parasitol., -1993, Vol. 23, № 4, p. 477-484.

25. Alvarez-Bujidos M.L., Ortiz A.I., Negro A. et al. Pharmacokinetics of triclabendazole in rabbits./ Сотр. Biochem. Physiol. C., -1993, Vol. 106, № 3, p. 805-808.

26. Andersson Т., Cederberg C., Edvardsson G. et al. Effect of omeprazole treatment on diazepam plasma levels in slow versus normal rapid metabolizers of omeprazole./ Clin. Pharmacol. Ther./,- 1990, Vol.47, p.79-85.

27. Andersson Т., Holmberg J., Rohss K, Walan A. Pharmacokinetics and effect on caffeine metabolism of the proton pump inhibitors, omeprazole, lansoprazole, and pantoprazole./ Br. J. Clin. Pharmacol., -1998, Vol. 45, p. 369-375.

28. Andersson Т., Lagerstrom P.O., Miners J.O. et al. High-performance liquid chromatographic assay for human liver microsomal omeprazole metabolism./ J. Chromatogr.,- 1993 (a), Vol. 619, p. 291-297.

29. Andersson Т., Miners J.O., Tassaneeyakul W. et al. Identification of human liver cytochrome P450 isoforms mediating omeprazole metabolism./ Br. J. Clin. Pharmacol.,- 1993, Vol.36, p.521-530.

30. Andersson Т., Miners J.O., Veronese M.E., Birkett D.J. Identification of human liver cytochrome P450 isoforms mediating secondary omeprazole metabolism./ Br. J. Clin. Pharmacol.,- 1994, Vol.37, p.597-604.

31. Andersson T. Pharmacokinetics, metabolism and interactions of acid pump inhibitors: focus on omeprazole, lansoprazole and pantoprazole./ Clin. Pharmacol.,- 1996, Vol.31, p. 9-28.

32. Andersson Т., Regardh C.G., Dahl-Puustinen M.L., Bertilsson L. Slow omeprazole metabolizers are also poor S-mephenytoin hydroxylators./ Ther. Drug Monit.,- 1990, Vol.12, p.415-416.

33. Backlund M., Weidolf L., Ingelman-Sundberg M. Structural and mechanistic aspects of transcriptional induction of cytochrome P450 1A1 by benzimidazole derivatives in rat hepatoma H4IIE cells./ Eur. J. Biochem.,-1999, Vol.26 l,p.66-71.

34. Backman J.T., Wang J.S., Wen X. et al. Mibefradil but not isradipine substantially elevates the plasma concentrations of the CYP3A4 substrate triazolam./ Clin. Pharmocol. Ther., -1999, Vol. 66, № 4, p. 401-407.

35. Baro F., Brugmans J., Heykants J.J.P. Absorption, metabolism and excretion of pimozide in man./ Clin. Ther., -1972, Vol. 63, p. 239-249.

36. Barradell L.B., Faulds D., McTavish D. Lansoprazole: a review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties and its therapeutic efficacy in acid-related disorders./ Drugs,- 1992, Vol.44, p. 225-250.

37. Benet L., Zech K. Pharmacokinetics a relevant factor for the choice of a drug?/ Aliment. Pharmacol. Ther., -1994, Vol. 8, p. 25-32.

38. Bliesath H., Huber R., Hartmann M. et al. Pantoprazole does not influence the steady state pharmacokinetics of nifedipine Abstract./ Gastroenterology,- 1994, Vol.106, A55.

39. Blohme I., Idstrom J.P., Andersson T. A study of the interaction between omeprazole and cyclosporine in renal transplant patients./ Br. J. Clin. Pharmacol.,- 1993, Vol.35, p. 156-160.

40. Blume H., Donath F., Warnke A., Schuq. B.S. Pharmacokinetic drug interaction profiles of proton pump inhibitors./ Drug Saf.,- 2006, Vol.29, p.769-784.

41. Borowski P., Deinert J., Schalinski S. et al. Halogenated benzimidazoles and benzotriazoles as inhibitors of the NTPase/helicase activities of hepatitis С and related viruses./ Eur. J. Biochem., 2003, Vol. 270, № 8, p. 1645-1653.

42. Briley M., Nutt D.(eds.) Anxiolytics Birkhauser Verlag - 2000.- P.181

43. Capece В., Perez В., Castells E. et al. Liquid chromatographic determination of fenbendazole residues in pig tissues after treatment with medicated feed./ J. AOAC Int., -1999, Vol. 82, № 5, p. 1007-1016.

44. Caraco Y., Tateishi Т., Wood A.J. Interethnic difference in omeprazole's inhibition of diazepam metabolism./ Clin. Pharmacol. Ther.,- 1995, Vol.58, p.62-72.

45. Cashman J. Stereoselectivity in S- and N-oxygenation by the mammalian flavin-containing and cytochrome P450 monooxygenases./ Drug Metab. Rev., -1998, Vol. 30, p. 675-707.

46. Cavanaugh J.H., Winters E.P., Cohen A., Braeckman R. Lack of effect of lansoprazole on steady state warfarin metabolism./ Gastroenterology,- 1991, Vol.100, A 40.

47. Cederberg C., Andersson Т., Skanberg I. Omeprazole: pharmacokinetics and metabolism in man./ Skand. J. Gastroenterol.,- 1989, Vol.24, p.33-40.

48. Chen С., Andrade J.D. Pharmacokinetic model for simultaneous determination of drug levels in drug and tissues./ J. Pharm. Sci., -1976, Vol. 65, №5, p. 717-724.

49. Chiba K., Kobayashi K., Manabe K. et al. Oxidative metabolism of omeprazole in human liver microsomes: cosegregation with S-mephenytoin 4^-hydroxylation./ J. Pharmacol. Exp. Ther.,- 1993, Vol.266, p. 52-59.

50. Corsini A., Bellosta S., Baetta R. New insights into the pharmacodynamic and pharmacokinetic properties of statins./ Pharm. Ther., -1999, Vol. 84, p. 413-428.

51. Dareer S.M., Tillery K.F., Rose L.M. et al. Metabolism and disposition of a thiazolobenzimidazole active against human immunodeficiency virus-1./ Drug Metab. Dispos., -1993, Vol. 21, № 2, p. 231-235.

52. Davies В., Morris T. Physiological parameters in laboratory animals and humans./ Pharmaceutical Research, 1993, Vol. 10, № 7, p. 1093-1095.

53. Dipiro J.T., Blouin R.A., Pruemer J.M., Sprvill W.J. Concepts in clinical pharmacokinetics. Bethesda: American Society of Health-System Pharmacists 1996. - 200 p.

54. Domagala F., Ficheux H., Hourin G., Barre J. Pharmacokinetics of tenatoprazole, a newly synthesized proton pump inhibitor, in healthy male caucasian volunteers./ Arzneim. Forsch.,- 2006, Vol.56,№ 1, p.33-39.

55. Du Souich P., Besner J., Clozel J. et al. Nonlinear kinetics and pharmacologic response to tiabendazole./ J. Clin. Pharmacol. Ther., -2000, Vol. 67, № 3, p. 249-257.

56. Evans G. A handbook of bioanalysis and drug metabolism. CRC Press -2004. 390 p.

57. Funk H.B., Nathan H.A. Inhibition of growth of microorganisms by benzimidazoles./ Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,- 1958, Vol.99, p. 394-397.

58. Gugler R., Jensen J.C. Omeprazole inhibits oxidative drug metabolism: studies with diazepam and phenytoin in vivo and 7-ethoxycoumarin in vitro./ Gastroenterology,- 1985, Vol.89, p.1235-1241.

59. Gyurik R.J., Chow A.W., Zaber B. et al. Metabolism of albendazole in cattle, sheep, rats and mice./ Drug Metab. Dispos., 1981, Vol.9, p.503-508.

60. Hanauer G., Graf U., Meissner T. In vivo cytochrome P450 interactions of the newly developed H+/K(+)-ATPase inhibitor pantoprazole (BY 1023/SK&F 96022) compared to other antiulcer drugs./ Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol.,- 1991, Vol.13, p.63-67.

61. Hartmann M., Bliesath H., Zeck K. et al. Pantoprazole does not influence CYP1A2 activity in man Abstract./ Gastroenterology,- 1995, Vol.108, A109.

62. Hennessy D.R., Ali D.N., Tremain S.A. The partition and fate of soluble and digesta particulate associated oxfendazole and its metabolites in the gastrointestinal tract of sheep./ Parasitol., -1994, Vol. 24, № 3, p. 327-333.

63. Hennessy D., Prichard R., Steel J. Biliary secretion and enterohepatic recycling of fenbendazole metabolites in sheep./ J. Vet. Pharmacol. Ther., -1993, Vol. 16, p. 132-140.

64. Hobrecker F. Uber Peductionsproducte der Nitramidverbindungen./ Ber.Dtsch.Chem.Ges., 1872, № 5, p. 920-924.

65. Hongo M., Ohara S., Hirasawa Y. et al. Effect of lansoprazole on intragastric pH: comparison between morning and evening dosing./ Dig. Dis. Sci., 1992, Vol.37, p. 882-890.

66. Horst A., Wiltshire H., Bullingham R. Clinical pharmacokinetics of mibefradil./ Clin. Pharmacokinet., -1998, Vol. 35, № 6, p. 405-423.

67. Huber R., Kohl В., Sachs G. et al. Review article: the continuing development of proton pump inhibitors with particular reference to pantoprazole./ Aliment. Pharmacol. Ther.,- 1995, Vol.9, p.363-378.

68. Janssen P.A.J., Niemegeers C.J.E., Schellekens K.H.L. et al. Pimozide, a chemically novel, highly potent and orally long-acting neuroleptic drug./ Arzneim. Forsch., -1968, Vol. 18, p. 261-279.

69. Janssens M.M. Astemizole. A nonsedating antihistamine with fast and sustained activity./ Clin. Rev. Allergy, -1993, Vol. 11, p. 35-63.

70. Jung F., Richardson Т.Н., Raucy J.L., Johnson E.F. Diazepam metabolism by cDNA-expressed human 2C P450s: identification of P4502C18 and P4502C19 as low Km diazepam N-demethylases./ Drug Metab. Dispos.,-1997, Vol.25, p.133-139.

71. Kaiser H.B. Hl-receptor antagonist treatment of seasonal allergic rhinitis./ Clin. Immunol., -1990, Vol. 86, № 6, p. 1000-1003.

72. Kamilli I., Gresser U., Zollner N. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of different doses of irtemazole in repeated application./ Z-Rheumatol., -1991, Vol. 50, № l,p. 23-28.

73. Karol M.D., Granneman G.R., Alexander K. Determination of lansoprazole and five metabolites in plasma by high-performance liquid chromatography./ J. Chromatogr.,- 1995, Vol. 668, p. 182-186.

74. Karol M.D., Mukherji D., Cavanaugh J.H. Lack of effect of concomitant multidose lansoprazole on single-dose phenytoin pharmacokinetics in subjects./ Gastroenterology,- 1994, Vol.106, A 103.

75. Katsuki H., Nakamura C., Arimori K. et al. Genetic polymorphism of CYP2C19 and lansoprazole pharmacokinetics in Japanese subjects./ Eur. J. Clin. Pharmacol.,- 1997, Vol.52, p. 391-396.

76. Kelly Т., Doble P., Dawson M. Chiral analysis of methadone and its major metabolites (EDDP and EMDP) by liquid chromatography mass spectrometry./ J. Chromatogr. В Analyt. Technol. Biomed. Life Sci.,- 2005, Vol.814, p. 315-323.

77. Knobloch W., Winkelmann G., Rintelen K. Pharmacological action of benzimidazole. I. 1. 2-Mercaptobenzimidazoles// Arch. Pharmaz., 1958, Vol. 291/63, №3,p.l 13-116.

78. Ко J.W., Sukova N., Thacker D. et al. Evaluation of omeprazole and lansoprazole as inhibitors of cytochrome P-450 isoforms. / Drug Metab. Dispos.,- 1997, Vol.25, p. 853-862.

79. Kolars J., Lown K., Schmiedlin-Ren P. et al. CYP3A gene expression in human gut epithelium./ Pharmacogenetics, -1994, Vol. 4, p. 247-259.

80. Kromer W. Similarities and differences in the properties of substituted benzimidazoles: a comparison between pantoprazole and related compounds./ Digestion, -1995, Vol. 56, № 6, p. 443-454.

81. Krosky P.M., Borysko K.Z., Nassiri M.R. et al. Phosphorylation of beta-D-ribosylbenzimidazoles is not required for activity against human cytomegalovirus./ Antimicrob. Agents Chemother., 2002, Vol. 46, № 2, p. 478-486.

82. Kupfer A., Preisig R. Pharmacogenetics of mephenytoin: a new drug hydroxylation polymorphism in man./ Eur. J. Clin. Pharmacol.,- 1984, Vol.26, p. 753-759.

83. Levron J., Gillardin J., Sabbah A. Astemizole: its pharmacokinetics and pharmacologic properties./ Allerg. Immunol. Paris, -1990, Vol. 22, № 6, p. 233-241.

84. Levy R.H., Thummel K.E., Trager W.F. et al. (eds.). Metabolic drug interactions. Lippincott Williams&Wilkins, 2000. - P.793.

85. Li G., Klotz U. Inhibitory effect of omeprazole on the metabolism of midazolam in vitro./ Arzneimittelforschung,- 1990, Vol.40, p.l 105-1107.

86. Lind Т., Andersson Т., Skanberg I., Olbe L. Biliary excretion of intravenous 14C. omeprazole in humans./ Clin. Pharmacol. Ther.,- 1987, Vol.42, p.504-508.

87. Marinac J.S., Balian J.D., Foxworth J.W. et al. Determination of CYP2C19 phenotype in black Americans with omeprazole: correlation with genotype./ Clin. Pharmacol. Ther.,- 1996, Vol.60, p. 138-144.

88. McCreadie R.G., Heykants J J., Chalmers A., Anderson A.M. Plasma pimozide profiles in chronic schizophrenics./ Br. J. Clin. Pharmacol., 1979, Vol. 7, №5, p. 533-534.

89. McNeil Pharmaceutical. Orap (pimozide) tablets hospital formulary information. -Sprin House PA, London, 1984. P. 500.

90. Meyer U.A. Interaction of proton pump inhibitors with cytochromes P450: consequences for drug interactions. / Yale J. Biol. Med.,- 1996, Vol.69, p. 203-209.

91. Miller J. The imidazoles as immunosuppressive agents./ Transplant. Proc., -1980, Vol. 12, № 2, p. 300-303.

92. Miura M. Enantioselective disposition of lansoprazole and rabeprazole in human plasma./ Yakugaku Zasshi., -2006, Vol. 126, p. 395-402.

93. Murray M., Hudson A., Yassa V. Hepatic microsomal metabolism of the anthelmintic benzimidazole fenbendazole: enhanced inhibition of cytochrome P 450 reactions by oxidized metabolites of the drug./ Chem. Res.Toxicol.,-1992, Vol.5,p.60-66.

94. Paine M., Shen D., Kunze K. et al. First-pass metabolism of midazolam by the human intestine./ Clin. Pharmacol. Ther., -1996, Vol. 60, p. 14-24.

95. Pearce R.E., Rodrigues A.D., Goldstein J.A., Parkinson A. Identification of the human P450 enzymes involved in lansoprazole metabolism./ J. Pharmacol. Exp. Ther.,- 1996, Vol.277, p. 805-816.

96. Pedini M., Bistocchi G.A., De Meo G. New heterocyclic derivatives of benzimidazole with germicidal activity HPLC detection of S-fluoro^-^-nitro-2*-fuiyl)benzimidazole (F-0-N02) in biological samples./ Farmaco., -1991, Vol. 46, № 3, p. 509-520.

97. Physicians Desk Reference. 47th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, 1997.

98. Pichard L., Curi-Pedrosa R., Bonfils C. et al. Oxidative metabolism of lansoprazole by human liver cytochromes P450./ Mol. Pharmacol.,- 1995, Vol.47, p. 410-418.

99. Pinder R.M., Brogden R.N., Sawyer et al. Clonazepam: a review of its pharmacological properties and therapeutic efficacy in epilepsy./ Drugs, -1976, Vol. 12, № 1, p. 37-40.

100. Plein K., Hots J., Wurzer H. et al. Pantoprazole 20 mg is an effective maintenance therapy for patients with gastro-esophageal reflux disease./ Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., -2000, Vol. 12, № 4, p. 425-432.

101. Pue M.A., Laroche J., Meineke I., De Mey C. Pharmacokinetics of pantoprazole following single intravenous and oral administration to healthy mail subjects./ Eur. J. Clin. Pharmacol., -1993, Vol. 44, № 6, p. 575-578.

102. Rawden H., Kokwaro G., Ward S., Edwards G. Relative contribution of cytochromes P450 and flavin-containing monoxygenases to the metabolism of albendazole by human liver microsomes./ Br. J. Clin. Pharmacol., -2000, Vol. 49, p. 313-322.

103. Regardh C.G., Andersson Т., Lagerstrom P.O. et al. The pharmacokinetics of omeprazole in humans: a study of single intravenous and oral doses./ Ther. Drug Monit.,- 1990, Vol.12, p. 163-172.

104. Regardh C.G. Pharmacokinetics and metabolism of omeprazole in man./ Skand. J. Gastroenterol.,- 1986, Vol.21, p.99-104.

105. Renberg L., Simonsson R., Hoffmann K.J. Identification of two main urinary metabolites of 14C. omeprazole in humans./ Drug Metab. Dispos.,-1989, Vol.17, p.69-76.

106. Rosenzweig P., Thebault J.J., Caplain et al. Pharmacodynamics and pharmacokinetics of mizolastine (SL 85.0324), a new nonsedative HI antihistamine./ Ann. Allergy, -1992, Vol. 69, № 2, p. 135-139.

107. Sellersville P.A. Orap (pimozide) prescribing information./ Lemmon Company London, 1988, P. 120.

108. Seredenin S.B. Genetic differences in response to emotional stress and tranquilizers./ Psihofarmakol. Biol. Narkol.,- 2003, Vol.3, № 1-2, p. 494-509.

109. Simon W.A. Pantoprazole which cytochrome P450 isoenzymes are involved in its biotransformation./ Gut,- 1995, Vol. 37(Suppl 2), A135.

110. Simons F.E. Recent advances in HI-receptor antagonist treatment. / Clin. Immunol., -1990, Vol. 86, № 6, p. 995-999.

111. Smith D.A., Ackland M.J., Jones B.C. Properties of cytochrome P450 isoenzymes and their substrates. Part 2: Properties of cytochrome P450 substrates./ Drug Discovery Today, -1997, Vol. 2, p. 479-486.

112. Souhaili-el Amri, H, Fargetton, X, Benoit E. et al. Inducing effect of albendazole on rat liver drug-metabolizing enzymes and metabolite pharmacokinetics./ Toxicol. Appl. Pharmacol,- 1988, Vol. 92, p. 141-149.

113. Steinijans V.W, Huber R, Hartmann M. et al. Lack of pantoprazole drug interactions in man./ Int. J. Clin. Pharmacol. Ther,- 1994, Vol.32, p.385-399.

114. Tateishi T, Graham S.G, Krivoruk Y, Wood A.J. Omeprazole does not affect measured CYP3A4 activity using the erythromycin breath test./ Br. J. Clin. Pharmacol,- 1995, Vol.40, p.411-412.

115. Thummel K, Kunze K, Shen D. Enzyme-catalyzed process of first-pass hepatic and intestinal drug extraction./ Adv. Drug Deliv. Rev, -1997, Vol. 27, p. 99-127.

116. Tucker G.T. The interaction of proton pump inhibitors with cytochromes P450. / Aliment. Pharmacol. Ther,- 1994, Vol.8, p. 33-38.1. О №

117. Tybring G., Bottiger Y., Widen J., Bertilsson L. Enantioselective hydroxylation of omeprazole catalyzed by CYP2C19 in Swedish white subjects./ Clin Pharmacol Ther.,-1997, Vol.62, №2, p.129-137.

118. VandenBranden M., Ring B.J., Binkley S.N., Wrighton S.A. Interaction of human liver cytochromes P450 in vitro with LY307640: a gastric proton pump inhibitor./ Pharmacogenetics,- 1996, Vol.6, p.81-91.

119. Virkel G., Lifschitz A., Sallovitz J. et al. Comparative hepatic and extra hepatic enantioselective sulfoxidation of albendazole and fenbendazole in sheep and cattle./ Drug metabolism and disposition, -2004, Vol. 32, № 5, p. 536-544.

120. Wilson B.V., Knudsen T. Pantoprazole. A new acid pump inhibitor against peptic ulcer and reflux esophagitis./ Ugeskr. Laeger., -1996, Vol. 158, № 12, p. 1695-1697.

121. Woodward J.K. Pharmacology of antihistamines./ J. Allergy Clin. Immunol., -1990, Vol. 86, № 4, p. 606-612.

122. Zimmermann A.E., Katona B.G. Lansoprazole: a comprehensive review. / Pharmacotherapy,- 1997, Vol.17, p. 308-326.