Эффективность препаратов янтарной кислоты в системе мер профилактики бактериального мастита у коров в сухостойный период тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Скибин, Юрий Валерьевич

• Скибин, Юрий Валерьевич
• кандидат наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат наук Скибин, Юрий Валерьевич

Содержание

Стр.

Общая характеристика работы

1. Обзор литературы

1.1. Проблемы патологии обмена веществ у коров в молочном скотоводстве

1.2. Иммуно дефициты у коров в молочном животноводстве: 15 характеристика, проблемы диагностики и коррекции

1.3. Маститы у коров: проблемы профилактики и лечения 19

1.4. Заключение по обзору литературы 30

2. Собственные исследования 32

2.1. Материал и методы исследований 32

3. Результаты собственных исследований 35 3.1 Анализ заболеваемости маститом коров в сухостойный период в 35

условиях молочного комплекса «Белгородские молочные фермы»

3.2. . Видовой состав микрофлоры при субклиническом мастите 42 3.2.1. Результаты испытания сукцината натрия на коровах при

алиментарном ацидозе и кетозе

3.3. Теоретическое и экспериментальное обоснование применения 46 средств метаболической направленности для профилактики заболевания маститом сухостойных коров

3.4. Эффективность применения сукцината натрия для коррекции 49 обменных иммунных процессов, профилактики заболевания маститом у сухостойных коров

3.4.1. Влияние сукцината натрия на обменные процессы коров 50

3.4.2. Влияние сукцината натрия на иммунный статус коров 53

3.4.3. Влияние сукцината натрия на показатели послеродовой 56 заболеваемости эндометритом и маститом

3.5. Теоретическое и экспериментальное обоснование разработки 57 комплексного иммунометаболического антисептического препарата (КАП)

3.5.1. Экспериментальная оценка антисептической активности низких 59 концентраций формалина

3.5.2. Влияние растворов формалина и сукцината натрия на молочную 61 железу здоровых коров

3.5.3. Экспериментальная оценка обезвреживающего действия 64 формалина на секрет молочной железы больных маститом коров

3.6. Теоретические и экспериментальные аспекты разработки 70 комплексного антисептического иммунометаболического препарата

3.6.1. Антимикробная активность водных и нейтральных растворов АСД 74

3.6.2. Эффективность комплексного антисептического препарата в 78 лечении клинических маститов у коров

3.7. Эффективность применения комплексного антисептического 79 препарата при субклиническом мастите коров в сухостойный период

3.8. Эффективность производственного испытания новых подходов 83 управления инфекционным и эпизоотическим процессами при мастите коров в сухостойный период

Обсуждение 87

Выводы 98

Практические предложения 101

Список использованной литературы Приложение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эффективность препаратов янтарной кислоты в системе мер профилактики бактериального мастита у коров в сухостойный период»

Общая характеристика работы

Актуальность темы. Вопросы обеспечения здоровья коров и увеличения периода их производственной эксплуатации являются важнейшими задачами ветеринарной науки и практики.

Среди множества причин, вызывающих преждевременное выбытие коров из стада, определяющее значение имеют глубокие нарушения обменных и иммунных процессов.

Решением проблемы нарушением обменных процессов и иммунодефицитов у коров занимались многие исследователи (Бирюков М.В. с соавт., 2005;Варкалис К., с соавт.,1994; Вишняков С.И., 1967; Денисенко В.Д. с соавт.,1997; Долинин Г.А.,1974; Иванов Б.И., 1995; Конопельцев И.Г., 2005; Масьянов Ю.Н.. 2009; Михалев В.И., Шушлебин В.И., 2005; Мищенко В.А. с соавт, 2006; Нежданов А.Г. с соавт., 1999; Париков В.А. с соавт., 2005; Попов Ю.Г. с соавт., 2005; Рязанский М.П., 1985; Савойский А.Г.с соавт., 1982; Самохин В.Т., с соавт., 1971; 1992, 1999;Слободяник В.И., 1995; 2005; Сисягин П.Н. с соавт., 2005; Топурия Л.Ю., 2005; Федоров Ю.Н., 1999; 2005 , Эрнст Л.К.,1999,Шарабрин И.Г.,1974; Шкуратова И.А. с соавт.,2007 и др.).

Несмотря на достижения в этой области, нарушения обмена веществ и иммунодефициты у коров имеют широкое распространение в молочном скотоводстве. На фоне глубоких нарушений обмена веществ развиваются многие патобиохимические и патофизиологические состояния, снижающие факторы естественной резистентности и повышающие чувствительность организма коров к условно-патогенной инфекции. Массовость гнойно-воспалительных заболеваний, проявляющихся послеродовым эндометритом и маститом является своего рода индикатором иммунодефицитных состояний у коров молочных стад (Александров И.Д., 1993; Андреева H.JL, 1997; Воронин Е.С., Дервишов Д.А, 1989; Гугушвили H.H., 2003; Дранник Г.Н, Гриневич

Ю.А., Дизик Г.М., 1994; Новиков О.Г., 2002; Слободяник В.И., Париков В.А., Сапожников H.A. и др., 1995; Топурия Г.М., 2002; Ostensson К., 1993; Reth М., 1995).

Учитывая широкое распространение нарушений обмена веществ, иммуно дефицитов, эндометритов и маститов, вопросы превентивной и оперативной терапии данных заболеваний носят актуальный характер и представляют практическую значимость для современного молочного скотоводства. Именно эти обстоятельства определили выбор темы диссертационного исследования.

Цель и задачи исследований. Коррекция иммунометаболического статуса и разработка нового подхода профилактики мастита коров в условиях интенсивной эксплуатации.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1.Провести анализ заболеваемости маститом высокопродуктивных

сухостойных коров.

2.Изучить влияние препарата на основе янтарной кислоты на обмен веществ, иммунный статус и профилактику заболеваний маститом коров в сухостойный период;

3.Разработать способ получения нового комплексного иммунометаболического препарата с антисептической активностью и изучить эффективность его применения для профилактики мастита коров в сухостойный период;

4.Провести производственное испытание новых подходов коррекции обмена веществ и профилактики мастита коров в сухостойный период.

Научная новизна. Теоретически и экспериментально обосновано применение препарата на основе янтарной кислоты для превентивной коррекции обменных процессов сухостойных коров.

Разработан состав нового комплексного иммунометаболического препарата с антисептической активностью и изучена эффективность его

применения для профилактики и лечения мастита у коров в сухостойный период.

Новизна подтверждена получением двух патентов РФ: - № 2361579 от 20.06.2009 г. и №2396978 от 20.08.2010г. Практическая значимость работы. Полученные результаты исследований обосновывают целесообразность применения сукцината натрия для коррекции иммунометаболического статуса и нового подхода профилактики мастита у сухостойных коров. Эффективность разработок подтверждается внедрением их в систему мер обеспечения здоровья коров в хозяйствах Курской области и молочном комплексе « Белгородские молочные фермы».

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- Анализ заболеваемости маститом коров в сухостойный период в условиях молочного комплекса «Белгородские молочные фермы

- Теоретическое обоснование и эффективность применения сукцината натрия для коррекции обменных процессов высокопродуктивных коров;

- Результаты исследований по разработке комплексного иммунометаболического препарата с антисептической активностью и эффективность его применения для профилактики и лечения мастита у коров в

сухостойный период.

- Оценка эффективности новых подходов превентивной коррекции иммунометаболических процессов и профилактики заболевания маститом коров

в сухостойный период.

Апробация и публикация результатов исследований. Материалы диссертационного исследования доложены и одобрены на ученом совете ГНУ Курского НИИ агропромышленного производства РАСХН (2008-2011г.); на международной НПК, посвященной 125-летию ветеринарии курской области.

Курск. 2008; на первом международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства». Санкт-Петербург. 2008 г.; на международной НПК, «Актуальные проблемы ветеринарного обеспечения Российского животноводства». Новочеркасск, 2010; на международной научно-практической конференции, посвященной 60-летию Курской ГСХА, Курск-2011.

По материалам, представленным к защите диссертации опубликовано 8 научных статей; в том числе 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Получено два патента РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, изложения результатов исследований с их обсуждением, выводов, списка используемой литературы. Работа изложена на 101 странице машинописного текста, содержит 19 таблиц. Список использованной литературы включает 197 источников, в том числе 30 зарубежных авторов.

1. Обзор литературы

1.1. Проблемы патологии обмена веществ у коров в молочном

скотоводстве

Практика современного молочного животноводства показывает, что именно у высокопродуктивных коров наблюдаются массовые нарушения обмена веществ и связанные с ними заболевания, приводящие к снижению или срыву продуктивности, развитию бесплодия и значительному сокращению производственной эксплуатации животных (Душкин C.B., 2009; Жаров А.В, 1999; Мищенко В.А. с соавт., 2004; Савойский А.Г. с соавт.,1982; Самохин В.Т. с соавт., 1999; Скоркин И.А. 1997; Соколов В.Д., 1997; Хазимухаметова И.Ф., Идрисова Р.Ф., 2008; Шкуратова И.А. с соавт., 2007, 2008; Эрнст Л.К., 1999 и

ДР-)-

Дисбаланс питания, гиподинамия, стрессы, вредоносное действие техногенных факторов внешней среды лежат в основе глубоких расстройств всех видов обмена веществ и в высоком уровне послеродовой заболеваемости эндометритами, маститами и гепатитами (Бороздин Э.К.,1993;Леонов К.В., 2006; Мутовин В.И.,1974; Нежданов А.Г. с соавт., 2005; Кожухин В.М. с соавт.2005; Оксалитный Н.К., 1979,1982,1984; Париков В.А. с соавт., 2005;

Трошин А.Н.,1996).

Именно эти патологии наносят наибольший экономический ущерб животноводческим хозяйствам. Ущерб от них достигает до 98 % от всех заболеваний коров ( ). Средний период эксплуатации коров на

молочных комплексах составляет 2-3, максимум 4 лактации (Мищенко В.А. с соавт., 2006)

Нарушения в обмене веществ вызывают патологические изменения в тканях и органах с интенсивным обменом, особенно в печени (Кузнецов С.Г. с

соавт., 2009; Попов Л.К., Сухов К.А., 2005).

В результате глубоких расстройств обмена веществ снижаются защитные силы и адаптационные способности организма: снижается естественная неспецифическая резистентность и иммунологическая реактивность, что создает фон повышенной чувствительности организма животных к эндогенной инфекции (Соколов В.Д., 1997).

Своевременное выявление начинающихся изменений в обмене веществ, выходящих за пределы физиологической нормы или находящихся у нижних её границ, и нормализация их определенными средствами составляют сущность работы ветеринарной службы.

Нарушения обмена веществ у продуктивных животных в подавляющем большинстве случаев протекают скрыто, без клинических симптомов (субклиническая форма). Однако, продолжительные, хотя и незначительные по величине нарушения обмена веществ, приводят к снижению воспроизводительной способности, к массовым болезням молодняка, снижению продуктивности и ухудшению качества животноводческой продукции (Алиев A.A., 1997; Багманов М.А. с соавт., 2005; Долинин Г.А., 1974; Жаров A.B., 1999; Иванов Г.И., Григорьева Т.Е., 1992; Мамаев Н.Х. с соавт., 2005; Нежданов А.Г.

с соавт., 1999 и др.).

Установлено, что в зимне- стойловый период изменяется щелочной резерв крови в сторону ацидоза, иногда значительно. Ацидотическое состояние продуктивных животных ведет к дистрофическим и дегенеративным изменениям в печени, нарушению воспроизводительной способности и ухудшению качества продукции, рождению слабого молодняка, часто болеющего токсической диспепсией (Варкалис К. с соавт., 1974; Савойский А.Г., 1982; Садыков Р.Э. с соавт., 1974; Смирнов A.M. с соавт., 1974; Шарабрин И.Г., 1975 и др.).

По данным Шарабрина И.К. (1974) у клинически здоровых животных

отмечаются сдвиги щелочного резерва в сторону ацидоза слабой, средней и сильной степени. В тяжелых случаях кетонолактия регистрируется у 65% лактирующих коров (Самохин В.Т. с соавт., 1992; 1997; 1999).

В настоящее время обеспечение здоровья коров в молочном скотоводстве, основано на общей плановой неспецифической профилактике нарушений обмена веществ. Дополняется эта система частной профилактикой наиболее распространенных незаразных болезней (Бузлама B.C., 1999; Шарабрин И .Г., 1974; Париков В.А. с соавт., 2005).

Общая плановая неспецифическая профилактика-это система мероприятий, направленных на создание здоровых, высокопродуктивных стад животных с крепкой конституцией, отличающихся высокой резистентностью к болезням и неблагоприятным факторам внешней среды, а также имеющих высокий уровень белкового, углеводного, витаминного и минерального обмена веществ. Такая профилактика имеет неспецифический характер, чем принципиально отличается от специфической профилактики при инфекционных болезнях Шарабрин И.Г., 1975).

Практическое осуществление неспецифической профилактики вызывает определенные трудности, часто связанные с несовершенством кормовой базы, структуры посевных площадей в кормовом севообороте, технологии приготовления кормов, гигиены содержания и видовых особенностей обменных реакций у животных (Самохин В.Т., 1992).

Частная профилактика-это система мероприятий, направленных на предупреждение болезней, имеющих значительное распространение.

Общая плановая неспецифическая профилактика взаимосвязана с частной профилактикой. В хозяйствах, где первая хорошо проводится, животные здоровы, повышается их естественная резистентность, там нет необходимости осуществлять мероприятия частной профилактики и лечить животных от некоторых болезней.

Согласно классификации Шарабрина И.Г. (1975) обмен веществ по интенсивности имеет разделение на: интенсивный (у верхней границы физиологической нормы), высокий (середина нормы), средний (у нижней границы нормы) и низкий (ниже физиологической нормы). Интенсивный обмен веществ наблюдается у высокопродуктивных животных; средний уровень-признак слабой продуктивности или беспородности скота, плохих условий кормления и содержания; низкий уровень обмена веществ - признак тех или иных патологических изменений в организме животного, хотя клинически, может быть, и не выраженных. .

Снижение обмена веществ у животного до среднего и тем более до низкого уровня, зачастую ведет к клинически выраженной патологии. Поэтому такие состояния обмена веществ у животного были, сначала названы предклиническими (Г.В. Домрачев, 1931), а в дальнейшем - субклиническими (Шарабрин И.Г., 1975).

«Субклиническая форма» нарушения обмена веществ в сущности, это скрытая патология.

В связи с этим положением в ветеринарии появилось направление -«профилактическая терапия». Последняя включает в себя приемы, предотвращающие ослабление обмена веществ и переход скрытого патологического состояния в клинически выраженное и повышающие сниженный обмен веществ до высокого или интенсивного (Шарабрин И.Г.,1975).

Длительное воздействие неблагоприятных факторов внешней среды приводит нередко к массовым тяжелым нарушениям обмена веществ, преждевременной выбраковке животных, а иногда и к гибели, особенно молодняка (Жаров A.B., 1999; Париков В.А. с соавт., 2005).

Выяснение причин нарушений обмена веществ в стадах животных в субклинической форме трудная, но необходимая задача в деятельности

ветеринарного врача (Жаров A.B., 1999).

По состоянию обмена веществ у отдельных животных можно установить фон обменных реакций у животных всего стада и определить причины нарушений белкового, углеводного, витаминного, жирового и минерального обмена. На общем фоне нарушений обменных процессов у животных диагностируются и отдельные заболевания, например остеодистрофия, рахит, кетоз, гиповитаминозы в субклинической стадии. В этиологии нарушений обмена веществ и отдельных заболеваний важное значение имеет рацион (Шарабрин И.Г., 1974).

Использование в рационах высококонцентрированных кормов ведет к дисбалансу питательных веществ в них, нарушению обмена веществ и накоплению недоокисленных продуктов в организме животных.

По данным Шарабрина И.Г. (1974) у клинически здоровых животных отмечаются сдвиги щелочного резерва в стороны ацидоза слабой, средней и сильной степени. В первую очередь это оказывает отрицательное влияние на печень - центральный орган, участвующий во всех видах обмена веществ и первый барьер на пути токсинов. Повышенные функциональные нагрузки печени часто вызывают развитие гепатодистрофических процессов, которые приводят к снижению продуктивности, резистентности, преждевременной выбраковке животных (Варкалис К. с соавт.,1974; Савойский А.Г. с соавт.,1982; Скоркин И.А.,1997;Хазимухамеиова И.Ф., Идрисова P.P., 2008).

Перспективной является разработка новых более эффективных средств и методов, направленных на повышение резистентности и продуктивности животных. С этой целью последние годы все чаще и чаще применяются естественные метаболиты, к которым относятся органические кислоты -фумаровая, лимонная, янтарная и др., которые играют ведущую роль в цикле Кребса.

Благотворное действие янтарной кислоты на функцию ряда органов

обусловлено ее энергизирующим влиянием на центральные регуляторные образования, в первую очередь, на гипоталамус и надпочечники ( Дильман В.М., АнисимовА.Н., Кондрашева М.Н., 1976; Дильман В.М., Остроумова М.Н., 1976).

Ивницкий Ю.Ю., Леккина О.Ф. (1994) на основании собственных исследований пришли к заключению, что применение сукцината натрия в дозе 7 мг на кг массы в сутки двукратно в утреннее и вечернее кормление позволяет увеличить среднесуточный удой на 12%. Авторы объясняют это нормализацией обмена веществ и повышением переваримости питательных веществ за счет дачи сукцината натрия. Введение в рацион глубокостельных коров янтарной кислоты обеспечивает увеличение живой массы телят на 12-17%.

Многочисленные работы научных сотрудников Казанской государственной академии ветеринарной медицины подтверждают бесспорную роль янтарной кислоты в профилактике различных патологий обмена веществ (Папуниди К.Х., Зухрабов М.Г., Трубникова O.A. и др., 1996; Папуниди К.Х, Зухрабов М.Г., Кадырова Р.Г., 1996;.Шагеев М.И., 1998;.Хисамов P.P., 2001; Малов Д.В., 2002; Березина О.В. 1999; и др.)

С повышением продуктивности животных, прежде всего, возрастают требования к полноценности рационов по всем питательным и биологически активным веществам (Кожухин В.М.,2005; Мищенко В.А. с соавт.,2004). Нарушения в обмене биологически активных веществ часто остаются незамеченными и становятся очевидными лишь при выраженных, часто необратимых патологических изменениях.

В последние годы для нормализации обменных процессов в организме животных большое внимание отводится кормовым добавкам и ветеринарным препаратам, в состав которых входят натуральные компоненты, обладающие высокой биодоступностью (Дорожкин В.И.,1997; Евглевский A.A. с соавт.,2009; Лапаев А.О., Гнездилова Л.А.,2010; Малков М.А. с соавт.,2004; Пчельников

Д.В., 2008; Распутина (Э.В.,2007; Топурия Г.М.,2002; Щвец О.М. с соавт., 2009; Яковлева С.В.,1997 и др.)

В настоящее время решению проблем патологии обмена веществ у молочного скота привлечено внимание многих ученых, как в нашей стране, так и за рубежом. Решению этих вопросов посвящено и наше диссертационное исследование.

1.2. Иммунодефициты у коров в молочном животноводстве: характеристика, проблемы диагностики и коррекции

В последние годы интерес к проблеме иммунодефицитов людей и животных обусловлен существенным ростом числа инфекционных заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, которые ранее самостоятельно редко могли вызвать клиническое развитие болезни (Воронин Е.С., Шахов А.Г., 1999; Джупина С.И., 2001,2002).

Ведущая роль в борьбе организма животных с любыми антигенами принадлежит макрофагам, Т- и В-лимфоцитам, NK- клеткам, иммуноглобулинам (Bunnell.S. е.а., 2002;. Lee К. е.а., 2002; Saad A., Ostensson К., 1990; Jaroskova L. е.а., 1978). Нарушения одного из звеньев иммунной системы приводит к иммунодефицитным состояниям (Федоров Ю.Н., 1999).

В настоящее время термином иммунодефициты (ИД) принято обозначать нарушения нормального иммунологического статуса организма, которые обусловлены дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа (Ефанова Л.И., Сайдулдин Е.Т., 2004; Игнатов П.Е., 1995; Коротяев А.И., 1998; Петрянкин Ф.П., 2009; Федоров Ю.Н., 1996 и др.).

По происхождению и механизмам развития различают первичные и вторичные ИД (Иванов В.И, 1995; Коротяев А.И., 1998; Масьянов Ю.Н., 2009; Петрянкин Ф.П., 2009; Федоров Ю.Н. с соавт., 1999 и др.). Иммунологическая недостаточность первичного происхождения обусловлена генетической неспособностью организма реализовать, то или иное звено иммунного ответа, а именно - фагоцитоза, гуморального и клеточного иммунитета. Первичные ИД называются врожденными, поскольку они проявляются вскоре после рождения, имеют четко выраженный наследственный характер. Вторичные ИД носят приобретенный характер и обусловлены воздействием на организм неблагоприятных факторов внешней среды, нарушением обмена

веществ, инфекционных патогенов. Они развиваются также под влиянием стрессов, химио- и антибиотикотерапии, ионизирующей радиацию, а также вследствие нарушений в передаче материнских антител потомству (Придыбайло Н.Д., 1991; Топурия Г.М., 2002; Федоров Ю.Н., Верховский O.A., 2006).

По мере старения организма главная функция иммунной системы -обеспечение генетического гомеостаза - постепенно ослабевает. Распознавание чужеродных и аутоантигенов становится менее точным, эффективность иммунных реакций снижается. Более всего снижается активность Т-системы иммунитета, уменьшается количество Т-хелперов. Изменяется соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров. Важнейшим следствием изменения функций иммунной системы у возрастных животных является повышение чувствительности к возбудителям эндогенной, в том числе гноеродной инфекции. При этом заболевания протекают более тяжело, нередко принимают затяжное течение с переходом в хроническое.

При развитии вторичных ИД необходимо учитывать причинно-следственные отношения. Нередко при анализе параметров иммунной системы выявляются изменения, которые являются следствием, а не причиной патологического процесса.

Особый интерес для практических врачей ветеринарной медицины представляют ИД беременных животных (Гугушвили H.H. с соавт., 2005; Лебедев А.Ф. с соавт., 2004; Лебедева М.Г., 2003). В организме матери в период беременности происходит угнетение клеточного и, в меньшей степени гуморального, звеньев иммунитета. Для вынашивания плода у беременных животных формируются адаптационно-иммунологические механизмы, характеризующиеся временным ИД, увеличением количества лимфоцитов-супрессоров, уменьшением цитотоксических лимфоцитов, снижается абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов без существенного изменения их соотношения, снижается уровень специфических иммуноглобулинов

(Гугушвили H.H., 2003, 2005). Угнетение специфических иммунных реакций у беременных животных не всегда компенсируется усилением факторов неспецифической защиты организма, что ведет к активации скрыто протекающих инфекционных процессов. Это обстоятельство выдвигает перед исследователями задачу по повышению неспецифической резистентности в прогнозируемые периоды снижения иммунобиологической реактивности организма коров (Лебедев А.Ф., 2004).

Для идентификации нарушенного звена иммунитета применяется сложный комплекс лабораторных исследований, включающих иммунологические, биохимические и молекулярно-генетические методы (Федоров Ю.Н., Верховский O.A., 2003).

Определение количества и функциональной активности Т-клеток и их основных субпопуляций является одним из главных методов оценки Т-системы иммунитета и диагностики всех форм ИД, связанных с нарушением клеточного иммунитета. При этом необходимо определить общее число лимфоцитов, % и абсолютное количество зрелых Т-лимфоцитов и их основные субпопуляции, % и абсолютное количество B-лимфоцитов и уровень, продуцируемых ими, иммуноглобулинов G, М и А-классов. Определение количества Ig является важнейшим критерием при диагностике ИД, связанных с биосинтезом антител. Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов необходимо определить абсолютное их число, интенсивность поглощения ими бактерий, способность к киллингу и разрушению.

Проблема восстановления иммунологических нарушений с использованием иммунокоррегирующих препаратов в настоящее время является актуальной, поскольку большинство хронических, соматических, инфекционных болезней у животных сопровождается вторичной иммунологической недостаточностью. Стратегия развития ветеринарии в настоящее время привела к пониманию того, что почти любая патология

является причиной или следствием иммунологических нарушений, которые способствуют хронизации основного заболевания и его осложнениям. Такая ситуация требует применения иммунокоррегирующих средств, без которых быстрое и полное излечение представляется затруднительным (Игнатов П.Е., 1995; Коляков А.Е., 1986; Федоров Ю.Н. с соавт., 1999).

• Иммунокоррекция (иммуномодуляция) предполагает использование фармакологических средств для изменения функциональной активности иммунной системы (Воробьев A.A., 2002; Лазарева Д.И., Алехин Е.К., 1985; Манько В.М., 2002). Они могут увеличивать (иммуностимуляция) и снижать (иммуносупрессия) уровень иммунного ответа. Применяя иммуномодуляторы важно учитывать исходный иммунный и метаболический статус и контроль за их изменениями в дальнейшем.

В настоящее время сфера применения средств, стимулирующих иммуную и метаболическую системы, весьма широка и разнообразна. Они не без успеха применяются при разного генеза иммунопатологических состояниях

1.3. Маститы у коров: проблемы профилактики и лечения

Одной из сложных проблем в молочном животноводстве, являются маститы. По данным академика РАСХН Воронина Е.С. (1996) мастит по экономическому ущербу, наносимому молочному животноводству, занимает первое место среди всех болезней.

Так, заболеваемость коров маститом в Бельгии и США составляет 40%, Англии и Норвегии - 39%, Дании -30%, Швеции - 28%, Финляндии - 19%, Голландии - 15% (Анакина Ю.Г.,1988, 1989; Карташова В.М., Ивашура А.И.,1988; Слободяник В.И.,1994; O'Rourke D.,1986).

Мастит регистрируется во все периоды эксплуатации дойного стада. Исследования Зверевой Г.В. (1971) показали, что у 36% коров мастит возникает в период лактации: 22,6%- во время запуска, у 15,8%- в сухостойный период, у 25,3% коров сразу после родов (в первую дойку).

По данным Federic F. (1982), Ивашура В.И.(1991) в период запуска заболевание маститом отмечалось у 47,7-65,7%) животных, в период лактации -35,8-53,4%>; в период сухостоя - 31,4-49,2%; после отела - у 15,2-30,5% животных.

По данным Полянцева Н.И. (1994) наиболее высокий показатель заболеваемости маститом у коров регистрируется в первые десять дней сухостоя (69,9%)). При этом у 14% из них болезнь протекает в клинически

выраженной форме.

Сухостой - период наибольшего риска возникновения мастита. Это объясняется снижением местных защитных реакций организма, так как в присутствии больших количеств белка, жира, клеточного детрита активность фагоцитирующих лейкоцитов понижена. С прекращением доения возрастает внутривымянное давление, при этом происходит укорочение соска и открытые соскового канала, что облегчает проникновение в молочную железу патогенных

бактерий. К середине сухостойного периода полностью прекращается инволюция молочной железы вязким секретом, который выполняет функцию механического барьера.

За две недели до отела ещё один критический период, когда происходит становление секреторной функции молочной железы, развивается её отек, возрастает внутривымянное давление, что благоприятствует проникновению патогенной микрофлоры через сосковый канал и её размножению.

Нарушение условий содержания, кормления коров, технологии и правил машинного доения снижает их общую и локальную резистентность к инфицированию патогенной и условно-патогенной микрофлорой, способствует размножению и накоплению её во внешней среде, на вымени, переносу от больных животных здоровым. Причем, чем больше факторов, отрицательно действующих на организм в целом и молочную железу коров, тем больше животных заболевает маститом, а значит, больше микроорганизмов выделяется во внешнюю среду с молоком и экссудатом. В результате не только патогенные, но и условно-патогенные бактерии повышают вирулентность и, попадая в молочную железу в больших количествах, обусловливают возникновение и развитие мастита, который может протекать, в виде энзоотии (Карташова В.М., Ивашура А.И., 1988; Кузьмин Г.Н, 1995; Париков В.А. и др. 2000).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Скибин, Юрий Валерьевич, 2012 год

- - - -

2 1%суквд наг натрия 356,7+14,9 - 308,5±14,3 - 312,5+6,4 - 324,5+17,4 —

368,2±13,4 324,8±17,1 3263±18,2 342,8119,3

- ± - -

3 0,6% формали н 1%сукци наг натрия 392,8±19,3 - 1087,5+21,3* - 574,5±24,3* - 396,5±11,8 -

389,7+118,6 405,7+19,4 398,6+21,2 342,7+19,4

Примечание: числитель - показатели опытных групп;

знаменатель - показатели контрольных групп * р < 0,05 по отношению к показателям контрольной группы

По результатам наших исследований установлено, что формалин вызывает определенное действие на ткани молочной железы. Так, количество соматических клеток в секрете опытных долей молочной железы спустя 8 часов увеличилось с 372,8±15,6 до 1572,6+143,5 тыс/мл. Незначительное увеличение наблюдалось в контрольных долях.

Напротив, введение формалина в сочетании с сукцинатом натрия (3-я группа), не только не сопровождалась повышенной реакцией тканей, но и, наоборот, количество соматических клеток даже снизилось по отношению к фоновому показателю. Следовательно, сукцинат натрия действует успокаивающе на ткани молочной железы, что предопределяет возможность его применения в составе противомаститных препаратов.

Дальнейшие исследования показали, что через 24 часа ответная раздражающая реакция тканей молочной железы на формалин приобрела выраженную тенденцию к редуцированию.

Количество соматических клеток после наивысшего подъема у коров первой группы (1572,6+143,5) через 24 часа снизилась до 812,5 + 71,4. Быстропроходящее раздражение тканей молочной железы на внутрицистернальное введение формалина свидетельствует о том, что его применение в данной концентрации является вполне безопасным.

При этом раздражающее действие формалина выражено снижается при сочетанном применении с сукцинатом натрия.

3.5.3. Экспериментальная оценка обезвреживающего действия

формалина на секрет молочной железы больных маститом коров

С учетом полученных результатов представилось возможным провести опыты по изучению антимикробного действия формалина на секрет молочной железы при разных клинических формах мастита. Экспериментальный опыт проводился как на больных маститом коровах так, и в лабораторных условиях.

По характеру выделяемого секрета из больных долей вымени коров раздели на 3 группы: больные серозным (п=3); катаральным (п=3) и гнойно-катаральным (п=3) маститом. Из больных долей в стерильные мерные пробирки был отобран секрет. В пробирке с секретом вымени внесли водные растворы 0,6% формалина с таким расчетом, что его концентрация составила 0,1%, 0,2% и 0,3%. До внесения формалина из содержимого этих пробирок были сделаны высевы на МПА и МПБ. В дальнейшем пробирки поместили в термостат и выдерживали при 37,5-38,5°С. Эти температурные условия соответствовали температуре в молочной железе. С кратностью раз в Зчаса из этих пробирок отбирали по 1,0мл содержимого для высева на МПА. У выросших культур определяли степень вирулентности.

Исследования in vitro.

Для проведения бактериологических исследований использовали секрет больных долей вымени с клинической формой гнойно-катарального мастита. Эта форма мастита является наиболее тяжелой. Выделяемые при ней возбудители отличаются наибольшей патогенностью.

Первые (фоновые) высевы секрета, разведенного 1:10 физиологическим раствором, на МПА обеспечивали сплошной рост микроорганизмов. В процессе отсева удалось идентифицировать несколько отдельных культур. Культура золотистого стафилококка была выделена от всех больных маститом коров. Кроме золотистого стафилококка были идентифицированы культуры Ps.

aeruginosa, E. coli, Str. agalactiae. Все выделенные культуры были патогенными для белых мышей. При этом средний уровень патогенности у культур золотистого стафилококка составил около 700тыс. микр. тел, а у Ps. aeruginosa и Е. coli в пределах 800тыс. микр. тел, у str. agalactiae около 1 млн. микр. тел (таблица 11).

Таблица 11. Влияние формалина на ростовую активность возбудителей

гнойно-катарального мастита (in vitro)

коро вы До контакта с формалином При контакте с формалином

Характер роста на МПА Уровень вирулентности идентифициров анных культур (млн.м.т.) Характер роста на МПА спустя Остаточна я вирулентн ость культур (млн.м.т)

3 часа 6 часов 9 часов

0,2% формалин

1 Сплошной рост 0,2% формалин S.aureus= 0,700 Sr. agalactiae >0,700 Сплошной рост Уменьшен ие ростовой активност и Единичны й рост S.aureus> 1,000 Str. agalactiae >1,500

2 Сплошной S.aureus= 0,700 Rs. aeruginosa =0,800 Сплошной рост то же то же S.aureus> 1,000 Rs. aeruginosa >1,200

3 Сплошной S.aureus= 0,700 E. coli> 0,800 Сплошной то же то же S.aureus= 1,000 E. coli> 1,000

0,4% формалина

1 то же Редкий рост Рост единичной колонии S.aureus> 1,000

2 то же то же Отсутстви е роста S.aureus> 1,000

3 то же то же Рост единичных колоний S.aureus> 1,000 E. coli> 1,000

0,6% формалина

1 то же - Рост единичны х колоний Отсутстви е роста S.aureus= 1,000

2 - - то же то же то же S.aureus= 1,000

3 то же то же то же S.aureus> 1,000 Е. coli> 1,000

Характер роста выражено изменился при высеве содержимого пробирок через 3 часа после внесения в них формалина ( таблица 11). При высеве содержимого пробирок, в которых была 0,2% концентрация формалина, на МПА образовывался еще сплошной рост микрофлоры. Однако он значительно уступал фоновому. Еще более выраженное угнетение ростовой активности наблюдали при высеве содержимого пробирок с 0,4% концентрацией формалина. Наиболее выраженное угнетение ростовой активности наблюдали при высеве содержимого пробирок с 0,6% концентрацией формалина. Выделялись лишь отдельные колонии роста микробов. При идентификации выросших культур не удалось определить видовую принадлежность у ранее выделенных Ps. aeruginosa и Str. agalactiae.

В ходе дальнейших контрольных высевов и бактериологических исследований (6 и 9 часов) во всех случаях наблюдали вполне закономерные снижение ростовой активности микрофлоры. Спустя 6 часов отсутствие роста микрофлоры наблюдалось при высеве содержимого пробирок с 0,6% концентрацией формалина и на 9 часу такой же результат получен и при высеве секрета, с 0,4% концентрацией формалина. Единичные колонии росли на МПА лишь при высеве секрета с 0,2% концентрацией формалина.

Вполне определенный интерес представляли результаты исследований по оценке степени патогенности у культур, выделенных из содержимого пробирок и у фоновых. Установлено, что продолжительный (9часовой) контакт

микроорганизмов в секрете, содержащем 0,2% концентрацию формалина, привел к наиболее выраженному уменьшению патогенности. Полученный результат представлял определенный интерес относительно закономерности этого явления, что обозначило перед нами ряд задач по изучению этого вопроса.

Параллельно лабораторным исследованиям в больные доли вымени после каждого доения коров осуществлялось внутрицистернальное введение, в объеме 5 мл 0,6% формалина.

Результаты органолептических и с пробой 2% мастидином исследований секрета вымени при разных клинических формах мастита представлены в таблице 12.

Таблица 12. Влияние внутрицистернального введения растворов фармолина на редуцирование воспалительного процесса в вымени при разных клинических формах мастита.

коровы до введения Характер секрета и показател с и димастиновой пробы в процессе применения юрмалина спустя

характер секрета Димастиновая проба 24 часа 32 часа 40 часов 48 часов 56 часов

секрет мастидиновая проба секрет мастидиновая проба секрет мастидиновая | проба секрет мастидиновая проба секрет мастидиновая проба

Серозный мастит

1 Слабоводаниста я консистенция + нормализация секрета + консистенция молока - консистенция молока - - -

2 тоже + тоже + нормализация консистенции секрета + тоже - - -

3 тоже + тоже + консистенция молока - I тоже - - -

катаральный мастит

1 воданистая консистенция + слабо-водянистая консистенция + нормализация секрета консистенции + нормализация консистенции + консистенция молока - -

2 тоже + тоже + тоже + консистенция молока - тоже - -

3 тоже + тоже + тоже + 1 нормализация консистенции + тоже - -

гнойно-катаральный мастит

1 воданистая консистенция с примесью гноя + водянистая консистенция с уменьшением гноя + слабо-воданисгая консистенция + нормализация консистенции + нормализация секрета + нормализация секрета +

2 тоже + тоже + нормализация секрета + тоже + тоже + нормализация секрета +

3 ТОЖЕ + тоже + слабо-водянистая консистенции + остаточные явления мастита + нормализация секрета + тоже +

Примечание: (+) - положительная проба; (+ -) - сомнительная; (-) - отрицательная.

При серозной форме мастита. Установлено, что в результате 2-3-х кратное, с интервалом в 8 часов, внутрицистернальное введение формалина обеспечило фактически полное клиническое выздоровление. Сомнительная проба с мастидином была лишь у одной коровы.

Выраженная тенденция к нормализации консистенции секрета вымени обозначалась после 2-х введений формалина при катаральной и гнойно-катаральной формах мастита.

После 4-х кратного введения формалина клиническое выздоровление коров было достигнуто при катаральной форме мастита. Тем не менее, у коров проба с 2% мастидином была сомнительной.

Для достижения клинического выздоровления при гнойно-катаральной форме мастита потребовалось сделать 6 введений формалина. Однако сомнительная проба с мастидином указывала на недостаточную нормализацию секрета.

Таким образом, по результатам проведенных экспериментальных опытов следует, что формалин обладает весьма высокой антиифекционной активностью. Именно это обстоятельство послужило основанием для изучения еще непознанных свойств формалина и расширения спектра его применения в инфекционной патологии животных. Применительно к нашей работе мы использовали полученные экспериментальные данные для разработки комплексного иммунометаболического препарата с антисептической активностью.

З.б.Теоретические и экспериментальные аспекты разработки комплексного антисептического иммунометаболического препарата

Идея создания новых средств химио-антибиотикотерапии, которые имели бы определенное преимущество перед известными, всегда привлекают научных исследователей. Научные исследования в данной области ведутся весьма интенсивно. В настоящее время уже синтезированы антибиотики и химические вещества, обладающие весьма антиинфекционной, в т.ч. противоопухолевой активностью (Коротяев А.И., Бабичев С.А., 1998). В основной своей массе это

чрезвычайно дорогостоящие препараты. Основная задача нашего диссертационного исследования состояла в поиске простых, доступных и в то же время эффективных средств для решения проблемы преодоления лекарственной резистентности возбудителей мастита у коров.

Как известно, основные возбудители мастита и эндометрита - ассоциации условно-патогенных микроорганизмов. В своем большинстве эти микроорганизмы (стафилококки, синегнойная палочка, кишечная палочка и др.) активно продуцируют экзотоксины. Бактериальные токсины, всасываясь в ткани, вызывают сильный воспалительный процесс, следствием которого являются дистрофические и деструктивные изменения этих органов.

Рассматривая полость молочной железы при мастите или матки при эндометрите как биореактор, в котором происходит бурное размножение микроорганизмов и выделение их токсических продуктов жизнедеятельности, представляется вполне возможным применение низких концентраций формалина не только в качестве антибактериального средства, но и качестве инактиватора бактериальных токсинов. Последние, утратив токсические свойства, частично диффундируя в ткани пораженного органа, неизбежно будут обеспечивать реализацию процесса быстрого индуцирования локального тканевого иммунитета. Собственно этот подход основан на использовании известного принципа получения инактивированных вакцин и анатоксинов. Ещё в 1924 году Г. Рамон доказал, что формалин в условиях тепла и во влажной среде не только обезвреживает микроорганизмы, но и переводит их токсические продукты жизнедеятельности в антитоксические, сохраняя при этом

иммуногенные качества.

Ещё одно обстоятельство, которое, по нашему мнению может быть использовано в качестве довода по применению формалина это то, что относительно «безнаказанная» доза, которую может переносить организм составляет 25 мл 0,2 % формальдегида на 1 кг массы тела животного. Введение

такого количества приводит лишь к умеренному снижению артериального давления, частоты сердечных сокращений, дыхания, угнетению деятельности головного мозга. Однако спустя 20-30 минут все вышеуказанные симптомы

полностью редуцируются.

Формалин, длительное время считавшийся клеточным ядом, оказывает защитное действие на живые клетки тканей. Это открывает совершенно новые возможности по применению формалина в инфекционной патологии. Появляется возможность воздействовать на микроорганизмы, не нанося вреда макроорганизму. Эта идея всегда привлекала научных исследователей.

В настоящее время способность формалина препятствовать росту микробов нашла широкое применение в гнойной хирургии и трансплантологии. Формалин оказывает бактериостатический эффект на микроорганизмы, устойчивые ко всем современным антибиотикам.

Следует отметить ещё один аспект относительно преимущества формалина перед антибиотиками. Формалин в низких концентрациях не представляет большой токсичности и в течение нескольких часов полностью выводится из организма (Мозгов И.Е., 1979). Напротив, противомаститные антибиотики в основной своей массе обладают пролонгирующим действием. С одной стороны это обеспечивает большую продолжительность антибактериального действия, а с другой обусловливает проблему качества молока. Нахождение антибиотиков в молоке недопустимо. Такое молоко, в соответствии с действующими нормативами должно выпаиваться телятам.

Следующий компонент, который мы решили использовать в качестве иммуностимулятора был АСД-второй фракции. АСД-Ф-№2 - уникальный тканевой препарат, разработанный в ВИЭВе талантливым ученым и изобретателем доктором ветеринарных наук Алексеем Васильевичем Дороговым. Более чем полувековой опыт применения АСД свидетельствует, что он обладает мощным иммуностимулирующим действием и это обеспечило

широкий спектр применения данного препарата в инфекционной патологии людей и животных. Большой положительный опыт применения препарата АСД накоплен при особо опасных для организма процессах: гнойно-септических и гнойно-некротических. Очень важно, что препарат АСД в рекомендованных наставлением дозах и способах применения не оказывает на организм какого-либо вредного действия. Однако наличие в АСД высокой концентрации аммиака сужает методы применения препарата. Препарат, в основном, применяется внутрь и наружно в разведенном виде. Внутримышечные инъекции препарата АСД разведенного 1:5 физиологическим раствором вызывают местное воспаление. Однако имеется большой и положительный опыт внутривенного применения препарата АСД 4% и даже 20% концентрации в клинике лечения чумы собак, мыта лошадей, эндометритов (Шакалов К.И., 1961). В настоящее время уникальные свойства АСД-Ф№2 используются в разработке целого ряда иммунотропных препаратов. Весьма эффективными оказались и инъекционные составы иммунотропных препаратов: мастим (Игнатов П.Е., 1994) и янтарный биостимулятор (Лебедев А.Ф. с соавт., 2005).

В качестве метаболического компонента мы использовали янтарную кислоту.

Янтарная кислота и ее соли обладают широким спектром воздействия на различные механизмы регуляции метаболической активности клеток (Ивницкий Ю.Ю. с соавт., 1998). В настоящее время уникальные свойства янтарной кислоты служат основанием для ее использования при разработке лечебно-профилактических препаратов нового поколения - к так называемым «умным лекарствам». Применительно к нашей разработке были все основания рассчитывать на положительный эффект янтарной кислоты в части нормализации обменных процессов тканей молочной железы при развитии в ней воспалительного процесса.

Таким образом, уникальные фармакологические свойства данных компонентов представляли для нас определенный практический интерес при разработке комплексного иммунотропного антисептического препарата. Отдельные методические и экспериментальные подходы при разработке данного препарата мы излагаем в следующем разделе нашего диссертационного исследования.

3.6.1. Антимикробная активность водных и нейтральных растворов

АСД

Руководствуясь наставлением по применению препарата АСД, нами были изготовлены исходные стартовые растворы 4 и 8% концентрации. При контрольном измерении рН установили, что препарат АСД даже в 4% концентрации обладает высокой (рН > 10) щелочной реакцией. Безусловно, столь высокий щелочной показатель препарата не мог не обеспечивать угнетение процесса размножения любых микроорганизмов. По всей видимости, именно это и обеспечивало его высокую локальную антисептическую активность при раневых инфекциях.

Чтобы убедиться в высказанном предположении параллельно были изготовлены растворы АСД 4% и 8% концентрации, в которых повышенную щелочность нейтрализовали янтарной кислотой. При этом было установлено, что на каждые 4% АСД требовалось 1% концентрация янтарной кислоты. К примеру, 40 мл АСД, растворенный в 960 мл дистиллированной воды, для доведения рН до нейтральной требовалось добавить 10 г янтарной кислоты.

Далее, используя тест определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам, пропитали бумажные диски диаметром 0,5 см водными и нейтральными растворами АСД 4% и 8% концентрации. После 5 минутного подсушивания пропитанные бумажные диски разложили на сплошь

засеянный культурой S.aureus агар. После 15 часовой выдержки чашек Петри в термостате при 37°С провели учет результатов зон задержки и угнетения роста микробов вокруг бумажных дисков, которые представлены в таблице.

Полученные данные убедительно свидетельствовали о том, что антимикробный эффект препарата АСД обусловлен высоким содержанием в нем аммиака. Это подтвердило наше предположение о том, что прямая антисептическая активность препарата АСД при раневых гнойно-септических процессах проявляется за счет приведения рН патологического очага в щелочную сторону, ингибируя размножение микроорганизмов. Нейтрализация щелочной реакции АСД привела к утрате бактерицидной активности препарата (таблица! 3).

Таблица 13. Результаты изучения бактерицидной и бактериостатической активности водных и нейтральных растворов АСД

Препарат Концентрация Зона задержки Зона угнетения

АСД роста в мм роста в мм

Водный раствор 4% 10-12

8% 16-18

Нейтральный 4% — —

раствор 8% — 5-10

Раздражающее действие на ткани вышеуказанных растворов провели на морских свинках. Путем выщипывания волосяного покрова у морских свинок было получено легкое поверхностное повреждение кожи. На свежедепилированные участки тела с одной стороны сделали аппликации водных растворов АСД, а с другой - нейтральный. Параллельно был поставлен опыт на морских свинках, на которых изучалось раздражающее действие 1% раствора янтарной кислоты (рН=4,0) и нейтрального раствора янтарной кислоты (рН=7,0) (сукцинат натрия).

Спустя 12 и 24 часа провели оценку степени раздражающего действия испытуемых растворов. При этом было установлено, что на участках тела, на

которые были сделаны аппликации 8% водного раствора АСД, имели хорошо выраженную гиперемию кожи с начинающими признаками воспаления в виде набухания эпидермиса. Значительно слабее было раздражающее действие водных растворов 4% АСД. На этих участках тела была обозначена лишь гиперемия кожи. Отсутствие гиперемии кожи было на участках тела, на которые были сделаны аппликации нейтральных растворов АСД как 8%, так и 4% концентрации. Отсутствовала какая-либо гиперемия кожи и на участках тела, на которые были сделаны аппликации сукцината натрия. В слабой, практически незаметной степени гиперемии была на участке тела, на которые наносился 1% раствор янтарной кислоты.

Таким образом, нейтрализация щелочной реакции АСД янтарной кислотой, привела утрате раздражающего действия данного препарата на ткани. Отсутствие гиперемии на аппликации сукцината натрия нами было расценено весьма позитивно, так как это позволяло надеяться на создание инъекционной формы комплексного препарата, который мог сочетать в себе положительные

качества АСД и янтарной кислоты.

В свою очередь, полученные в экспериментальном опыте данные подтвердили наше предположение о том, что нейтрализация щелочной реакции АСД янтарной кислотой приведет к утрате антисептической активности. В этой связи следующей задачей являлось включение в состав разрабатываемого комплексного препарата компонента, который обладал бы антибактериальной активностью. В качестве этого компонента нами выше обоснована возможность включения формалина. При изготовлении экспериментального варианта комплексного антисептического иммунотропного препарата установило, что добавление формалина 0,5-1% концентрации к нейтральному раствору АСД не приводило к выпадению осадка. Не выпадал осадок и после 30 минутного автоклавирования в режиме 1,2-1,3 атм. Все это свидетельствовало о том, что АСД, янтарная кислота и формалин являются совместимыми компонентами

комплексного препарата. И полученный комплексный препарат вполне мог обладать теми свойствами, которые мы планировали получить, а именно, обеспечить нормализацию обменных процессов в возбужденных тканях, обезвреживание микроорганизмов и нейтрализацию их токсичных продуктов жизнедеятельности, стимуляцию тканевого иммунитета.

Бактерицидную активность определили в опыте in vitro, стандартным методом, по тесту задержки роста микроорганизмов вокруг бумажных дисков, пропитанных выше указанными растворами комплексного препаратов. В качестве тест объекта использовали культуру золотистого стафилококка засеянного в бактериологические чашки на мясопептонный агар. После 24-часовой выдержки в термостате при 37оС диаметр зон задержки роста микроорганизмов составили: вокруг дисков, пропитанных комплексным препаратом, содержащим формалина 0,2% - 5-7 мм; 0,3% - 10-12 мм; 0,4% -1517 мм; 0,5% - 20-22 мм. Диаметр зон задержки 15 мм и более свидетельствовало о высокой бактерицидной активности.

Испытание безвредности провели на белых мышах. Ежедневное, на протяжении 5 дней внутрибрюшинное введение в объеме 0,5 мл испытуемых образцов препарата, содержащего 0,2%, 0,3% и 0,4% формалина не сопровождалось угнетением общего состояния подопытных животных. Введение препарата содержащего 0,5% формалина на 5 суток привело к снижению активности животных, тем не менее, гибели их не наблюдалось.

Таким образом, по результатам экспериментальных опытов установлено, что для обеспечения антисептической активности комплексного препарата наиболее оптимальной является концентрация формалина не ниже 0,4%, но и не выше 0,5%о.

Способ получения комплексного препарата осуществляется следующим образом:

Для приготовления комплексного препарата 10 г янтарной кислоты, 2,5 г

новокаина растворили в 35 мл дистиллированной воды. Добавлением 40 мл АСД № 2 обеспечивается получение нейтрального раствора (рН= 6,9 - 7,0). В нейтральный раствор добавили 10 мл формалина, что обеспечивало его концентрацию равную 0,4% (из расчета 40% формальдегида). Довели объем до 1000 мл добавлением воды. Полученный препарат расфасовали по флаконам емкостью 100 мл, и для обеспечения стерильности подвергли автоклавированию в режиме 1 атм. в течение 20 минут.

Полученный комплексный препарат, был испытан для лечения и профилактики мастита у коров.

3.6.2.Эффективность комплексного антисептического препарата в лечении клинических маститов у коров

Опыт провели на коровах с клиническими признаками мастита по окончании лактационного периода. Подопытные животные были разделены по принципу аналогов на две группы. Коровам первой группы (п=3) с 7-ю больными долями молочной железы внутрицистернально в объеме 5 мл ввели комплексный антисептический препарат ( КАП), содержащий 0,6%» формалина. Животным второй группы (п=3) с 5 больными долями, внутрицистернально был введен в аналогичном объеме препарат без формалина. Антиинфекционная активность и лечебная эффективность оценивалась на 5 и 10 сутки после применения препаратов. Результаты проведенного опыта представлены в таблице 14.

Результаты исследований свидетельствует о том, что включение в состав препарата формалина обусловило более ускоренный процесс обезвреживания микрофлоры в больных маститом долях молочной железы.

Таблица 14. Антиинфекционная эффективность КАП при лечении

клинического мастита у коров.

Коровы Препарат Видовой состав микрофлоры до и после введения препаратов

До введения Ha 5 день Ha 10 день

1. Е. coli Str. agalactiae -

2. КАП S. aureus Str. agalactiae S. aureus -

3. S. aureus Str. agalactiae -

1. E. coli Str. agalactiae Str. agalactiae -

2. Препарат без формалина S. aureus Str. agalactiae S. aureus Str. agalactiae -

3. S. aureus E. coli S. aureus -

3.7.Эффективность применения комплексного антисептического препарата при субклиническом мастите коров в сухостойный период

Оценку лечебно-профилактической эффективности комплексного антисептического препарата ( КАП) провели при интрацистернальном методе введения в сравнении с мастисаном-А. Придерживаясь принципа аналогов, по мере прекращения доения глубокостельных коров, были сформированы подопытные группы, включающие больных субклиническим маститом. У каждой коровы пробой на димастин были определены больные доли вымени. Одним коровам препараты вводили разово в начале сухостойного периода (таблица 14), с последующим трехкратным диагностическим исследованием на мастит через каждые 3-4 дня, а другим (таблица 14) за 14-15 дней до предполагаемого отела. Окончательно диагностировали воспалительный

процесс в долях вымени в первые дни после родов клинически и с помощью димастиновой пробы. Лечебная и профилактическая эффективность по данным двух опытов отражена в таблицах 15, 16.

Таблица 15. Эффективность КАП и мастисана-А при субклиническом мастите в сухостойный период в начале запуска

Группы больных и кол-во коров препараты положительная проба секрета на димастин (доли вымени) Заболело клиническим маститом после родов

ДО введения после введения на

3 день 7 день 14день коров %

1(п=36) КАП 86 36 26 7 4 11Д

2(п=32) Мастисан 83 54 32 28 9 28,1

3(п=30) контроль 52 48 47 48 12 40,0

Таблица 16. Эффективность КАП и мастисана-А при субклиническом мастите за 15 дней до родов

Группы больных и кол-во коров препараты Положительная проба секрета на димастин после родов Заболело клиническим маститом

коров долей вымени коров %

1(п=24) КАП 5 8 - -

2(п=26) Мастисан 7 14 3 11,5

3(п=24) контроль 12 19 8 30,0

Анализируя данные таблицы 16, следует, что разовое внутрицистернальное введение комплексного антисептического препарата позволило уже на 3 день выражено уменьшить количество пораженных воспалительным процессом долей вымени с 86 до 39. На 7 день количество коров, у которых была выявлена положительная проба секрета вымени на димастин, составило 12 голов при общем количестве больных долей - 26. На 14 сутки реакция секрета вымени на димастин была выявлена у 3 коров (7долей). Исходя из свойств формалина к обезвреживанию микрофлоры и переводе ее токсичных продуктов жизнедеятельности в антитоксические, обладающих

иммунизирующей активностью, можно было предположить о подобном эффекте непосредственно в пораженных долях вымени. Тем не менее, рассчитывать на то, что удастся таким образом индуцировать достаточно напряженный локальный иммунитет не приходится. Во-первых, количество возбудителя в долях вымени и их продуктов жизнедеятельности при субклиническом мастите не столь велико и, по всей видимости, недостаточно для проявления иммунизаторного действия. Во-вторых, основные возбудители мастита, как правило, закономерно переживают в организме животных, и свои патогенные свойства проявляют только в особых случаях, так называемых отрицательных факторных воздействий. Высказанное предположение отчасти подтвердилось. После отела у 4 коров этой группы был клинически диагностирован мастит, а из секрета больных долей выделены культуры: S.aureus; Str.dysgalactiae и E.coli. Им был проведен лечебный курс внутрицистернального применения КАП. После двух введений КАП в объеме 10,0мл исход заболевания оказался благоприятным. Количество соматических клеток из секрета леченых долей было практически таким же, что и здоровых.

Анализируя показатели эффективности применения КАП на другой подопытной группе коров (таблица 16) следует отметить, что нам удалось получить данные, подтверждающие наше высказанное предположение относительно недостаточной напряженности локального иммунитета. Внутрицистернальное введение КАП позволило быстро обезвредить микрофлору в больных долях вымени у 5 коров. Эффективность обезвреживающего действия КАП оказалась настолько высока, что в первые 7 дней после родов ни у одной коровы не было клинического заболевания маститом. Проба секрета вымени на димастин была отрицательной.

При анализе показателей эффективности мастисана в терапии субклинического мастита во второй группе коров установлено, что спустя 3 дня после введения препарата количество реагирующих долей вымени снизилось с

83 до 54 (на 65,0 %). При повторном исследовании на 7 день количество больных долей составило 32, а на 14 сутки -28. Эти данные свидетельствовали как о весьма хорошем антимикробном действии препарата, так и о том, что он недостаточно эффективен при разовом введении. У нас возникли сомнения о том, что длительный контакт антибиотиков мастисана с микрофлорой (препарат обладает пролонгированным действием) может обусловить и рост резистентности микрофлоры больных долей. На это указывает тот факт, что после родов эффективность лечения мастисаном клинически выраженного мастита была настолько низкой, что во избежание индурации пораженных долей пришлось изменить методику лечения, применив новокаиновую блокаду по Логвинову Д.Д. с одновременным введением гентамицина.

Практически схожие результаты получены и на другой группе коров, которым мастисан ввели в конце сухостойного периода. Клиническое заболевание маститом было диагностировано у 2 коров (12,5%). Следует отметить, что применение мастисана для лечения клинического мастита у коров этой группы был намного эффективнее, чем у животных предыдущей группы. После трех-четырех введений мастисана секрет больных долей не отличался от здоровых. Однако у животных все же отмечали сомнительную реакцию на димастин.

Прослеживая динамику показателя контрольных исследований секрета вымени на димастин, у коров контрольной группы отмечается тенденция роста заболеваемости субклиническим маститом в первый месяц запуска с 52 пораженных долей на 3 день, до 43 на 14 сутки запуска. Однако, во втором опыте, после родов хорошо выраженная реакция на димастин отмечена у 12 из 24 коров. Количество больных маститом долей составило 18.

Для лечения клинического мастита у 7 особей (12 долей) контрольной группы применяли КАП и мастисан - 4 особи (9 долей). Благоприятный исход воспалительного процесса получили после двух введений КАП коровам (11

больных долей). Против 4-5 - введений мастисана.

Таким образом, в ходе проведенных серий опытов нами получены вполне убедительные данные, свидетельствующие о перспективе применения КАП для профилактики и лечения воспалительных заболеваний молочной железы у коров. Следует отметить, что на основе КАП, в дальнейшем была разработана инъекционная форма препарата, получившая название формол-янтарный биостимулятор.

3.8. Эффективность производственного испытания новых подходов управления инфекционным и эпизоотическим процессами при мастите коров в сухостойный период

Основываясь на результатах собственных исследований, следует, что возникновение и развитие мастита происходит на фоне глубоких нарушений обменных процессов и расстройств иммунного статуса животных. Это обусловливает необходимость применения средств превентивной метаболической и иммунометаболической терапии как прогнозируемые периоды развития субклинических, так и клинических патофизиологических состояний.

Результаты проведенных биохимических и иммунологических исследований показали, что применяемый нами сукцинат натрия оказывает быстрое и эффективное корригирующее действие на метаболические процессы, что позволяет улучшить иммунное состояние глубокостельных коров. В свою очередь, внутрицистернальное введение комплексного антисептического препарата с иммунометаболической активностью, оказалось достаточно эффективным подходом для обезвреживания микроорганизмов при субклиническом мастите у сухостойных коров.

Исходя из обозначенной концепции стимулирования обменных процессов в системе профилактики мастита, порядок проведения научно-производственного опыта включал, на одних группах, внутрицистеральное введение формол-янтарного биостимулятора ( ФЯБ), мастисана, а на других -параллельное парентеральное введение сукцината натрия.

Основная задача научно-производственного опыта заключалась в получении данных эпизоотологической и экономической эффективности новых подходов профилактики мастита коров в сухостойный период.

Объектом для проведения научно- производственного опыта являлись глубокостельные коровы второго, третьего и четвертого отелов с первых дней сухостойного периода.

При проведении курса превентивной иммунометаболической терапии (январь-апрель 2010 года) мы руководствовались уже апробированной схемой применения сукцината натрия, предусматривающей трехкратное внутримышечное введение препарата глубокостельным коровам в объеме 10,0 мл с интервалом 14 дней. С лечебно-превентивной целью проводилась внутрицистернальное введение формол-янтарного биостимулятора в объеме 3,0 мл и мастисана в объеме 5,0 мл.

Итогом проведения опыта являлись показатели заболеваемости коров маститом в предверии отела и в первые дни после родов.

Диагностические исследования на мастит провели до введения препаратов, затем на 10 сутки, за 5-7 дней до и в первые дни после отела. Результаты исследований отражены в таблицах 17,18,19.

Таблица 17. Эффективность комплексного подхода профилактики мастита у сухостойных коров второго отела.

Группы коров Препарат для в/цистернального введения Парентеральное введение сукцината натрия Выявлено больных маститом коров/ Поражено долей Заболело клиническим маститом после отела

До введения Спустя 10 дней За 5-7 дней до отела Профилактиче екая эффективность Количество больных/пора жено долей ох

1(п=38) ФЯБ + 10/16 4/7 4/4 11,5 2/3 5,2

2(п=38) мастисан + 9/17 4/9 6/9 16,6 3/4 7,1

3(п=36) ФЯБ _ 9/14 4/6 5/8 13,8 2/5 5,5

4(п=36) мастисан _ 8/15 6/10 6/9 16,6 3/6 8,4

5(п=38) _ _ 9/13 14/19 14/17 36,8 5,8 13,2

Таблица 18. Эффективность комплексного подхода профилактики мастита

у сухостойных коров третьего отела.

Препа рат Парен тераль Выявлено больных маститом коров Поражено долей Заболело клиническим маститом после отела

Групп ы коров для в/цист ерналь ного введен ия ное введен ие сукцин ата натрия До введен ия Спустя 10 дней За 5-7 дней ДО отела Профи лактич еская эффек тивнос ть Колич ество больн ых/пор ажено долей %

1(11=42) ФЯБ + 15/21 5/9 5/8 11,9 3/5 7,1

2(п=42) мастиса н + 16/19 7/12 6/12 14,3 5/9 11,9

3(п=30) ФЯБ 16/22 6/11 6/14 20,0 4/6 13,3

4(п=30) мастиса н 15/19 5/12 7/15 23,3 4/8 13,3

5(п=30) _ 13/22 16/23 12/28 40,0 6/9 20,0

Таблица 19. Эффективность комплексного подхода профилактики мастита

у сухостойных коров четвертого отела.

Групп ы коров Препар ат для в/цисте рнальн ого введен ия парент еральн ое введен ие сукцин ата натрия Выявлено больных маститом коров Поражено долей Заболело клиническим маститом после отела

До введен ия Спустя 10 дней За 5-7 дней до отела Профи лактич еская эффект ивност ь Количе ство больны х/пора жено долей %

l(n=28) ФЯБ ■ 10/12 3/5 3/5 10,7 2/3 7,1

2(n=28) мастис ан + 11/13 4/7 4/8 14,6 2/4 7,1

3(n=26) ФЯБ 11/14 5/7 4/7 15,4 2/4 11,1

4(n=26) мастис ан 9/12 5/7 5/9 19,2 3/5 11,5

5(n=25) - 9/12 10/19 10/12 40,0 4/7 16,0

Обсуждение

Одной из главных задач современного молочного животноводства является обеспечение здоровья коров и профилактика факторных болезней алиментарного и инфекционного генеза. Такие заболевания как ацидоз, кетоз, гепатодистрофия, эндометриты, маститы, некробактериоз стали основными патологиями, по причине которых осуществляется преждевременное выбытие из стада высокопродуктивных коров. В настоящее время максимальный возраст производственного использования коров на молочных комплексах ограничивается 5-6 годами и в среднем составляет 2-3 лактации. Уже сам по себе этот показатель свидетельствует об огромном экономическом ущербе, который несут животноводческие хозяйства. В настоящее время стала четко просматриваться взаимосвязь между наиболее тяжелой формой нарушения обмена веществ коров кетозом и послеродовыми заболеваниями, проявляющимися задержанием последа, эндометритом, маститом. Эти заболевания не только снижают молочную продуктивность животных, но и обусловливают основное преждевременное выбытие коров. Исходя из того, что нарушения обмена веществ у коров на современных молочных комплексах и фермах приняли массовый и повсеместный характер, в попытке хоть как-то снизить остроту данной проблемы практикуется широкое применение разного рода кормовых премиксов. Ветеринарные специалисты стали больше уделять внимания применению гепатопротекторов, иммуностимуляторов, витаминов и других средств коррекции обменных и иммунных процессов. Несмотря на это выраженного улучшения ситуации не наблюдается. Совершенно очевидно, что в основу профилактики вышеуказанных заболеваний должна быть положена система организационно-хозяйственных, зоотехнических и ветеринарных мероприятий. При разработке системы мероприятий большое значение имеет выявление глубины развития патофизиологических состояний у животных и в

разные периоды их производственной эксплуатации. Именно решению данного вопроса и были посвящены наши исследования.

В качестве базового хозяйства при проведении диссертационного исследования было выбрано ОАО «Белгородские молочные фермы». Это современный молочный комплекс, введенный в эксплуатацию в - 2001 году. Молочное стадо комплекса представлено черно-пестрой породой. Поголовье коров составляет в среднем 5000 голов. Средняя продуктивность на одну фуражную корову более 6500 кг молока.

Принятое в хозяйстве технология содержания и кормления ориентирована на получение максимальных удоев, но при этом не обеспечивает на должном уровне физиологическое здоровье коров. Одним из проявлений такого несоответствия является то, что у подавляющей части коров возникают заболевания ацидозом, кетозом, остеодистрофией, эндометритами, маститами. Именно эти патологии определяют преждевременное прекращение производственной эксплуатации коров. Совершенно очевидно, что в данной ситуации требовалась организация системных мероприятий по обеспечению не только высокой молочной продуктивности коров, но и поддержание физиологического статуса животных при риске развития патофизиологических состояний. В этой связи, исходным началом нашего диссертационного исследования являлось изучение характера и глубины изменений в иммунометаболической системе глубокостельных коров. Как известно, в период беременности на развитие плода организм матери затрачивает до 60 % своего энергетического потенциала. Неизбежно развивающийся при этом энергетический криз обусловливает глубокие сбои в физиологическом статусе материнского организма. В последнюю треть беременности нарушаются практически все виды обменных процессов. В свою очередь, роды, с неизбежной родовой травмой, снижают иммунологическую реактивность материнского организма значительно ниже физиологически допустимых

значений. На таком фоне система иммунитета утрачивает способность обеспечить устойчивость организма к эндогенной инфекции. В благополучных продуктивных стадах это приводит к массовым заболеваниям коров послеродовым эндометритам и маститам. В этой связи главной задачей этого периода является целенаправленная коррекция обменных процессов и иммунологической реактивности материнского организма, что является важным условием в обеспечении благоприятного течения родов и профилактики послеродовых заболеваний.

Наши исследования показали, что у сухостойных коров второго отела как до, так и послеродовой периоды не выявлено нарушений в белковом обмене. Напротив, отдельных коров Зго и 4го отелов повышенное содержание белка в сыворотке крови было выявлено в до и послеродовый периоды.

У коров второго отела практически не было выявлено ацидозного состояния. Тем, не менее, показатель кислотно-щелочного баланса находился на нижней границе физиологической нормы. У коров третьего и четвертого отелов показатель резервной щелочности был на 18-20 % ниже, чем у более молодых особей. Это свидетельствовало как об ацидозном состоянии организма вследствие накопления недоокисленных продуктов метаболизма, так и о снижении функциональной активности печени. На это же указывает выраженный рост кетоновых тел в крови коров третьего и четвертого отелов.

Снижение функциональной активности печени у коров третьего и четвертого отелов отразилось на показателях глюконеогенеза и минеральном обмене. Так, концентрация глюкозы у них была значительно ниже, чем у более молодых коров, в то время как содержание фосфора выше. Фосфор и кальций в здоровом организме взаимодействуют как элементы-синергисты. Однако при избытке или недостатке одного из них становятся антагонистами. Если уровень кальция у коров второго отела был близок к нижней границе физиологической нормы, то и более возрастных особей он был на 20-25 % ниже ее. При этом

уровень содержания неорганического фосфора оставался в пределах физиологических показателей. Нарушение фосфорно-кальциевого соотношения клинически проявлялось размягчением последних хвостовых позвонков. Обращало на себя внимание, что у большинства коров четвертого отела были выявлены алопеции и шелушение эпидермиса.

Таким образом, на основании биохимических исследований установлено, что, у высокопродуктивных коров четвертого отела развиваются значительные нарушения обмена веществ, проявляющиеся гиперкетономией, гипогликемией, ацидозом и нарушением минерального обмена, Исходя из того, что обменные и иммунные процессы тесно взаимосвязаны можно было прогнозировать и о наличии иммунодефицитного состояния. Чтобы убедиться в наших предположениях мы провели исследования иммунного статуса данных коров.

Результаты проведенных иммунологических исследований показали, что содержание Т-лимфоцитов у коров четвертого отела было на 7-8 % ниже, чем у особей со вторым отелом. Это указывает на снижение активности клеточной системы иммунитета у более возрастных животных. Собственно это подтверждается и при сопоставлении индекса соотношения субпопуляций Т-лимфоцитов, выполняющих хелперную и супрессорную функции. Если у коров второго отела индекс соотношения Тх и Тс состовлял в среднем 2,0, то у более возрастных животных соответственно 1,6 и 1,3.

Снижение функционирования иммунометаболической системы организма у возрастных коров является неблагоприятным прогнозом в отношении чувствительности к гнойно-септической инфекции, что сопровождается большим количеством послеродовых эндометритов и маститов. Следует отметить, что такое состояние является присущим отечественному промышленному животноводству.

Фактическое отсутствие метаболических препаратов с гепатопротекторным действием обусловливает необходимость поиска средств,

стимулирующих обменные процессы. Подходя к практическому решению проблемы коррекции иммунометаболических нарушений алиментарного генеза мы полагали, что препаратом выбора может быть янтарная кислота. Эффект малых доз янтарной кислоты при алиментарном ацидозе и кетозе был обнаружен еще в 70е годы М.Н.Кондрашовой. После того, как в 1972 году Фармкомитет Минздрава СССР издал временное разрешение на препарат янтарной кислоты, накопилось большое количество исследований и клинических наблюдений о ее влиянии на функциональное состояние различных систем организма человека и животных (Коваленко A.JL, Белякова Н.В., 2000; Лебедев А.Ф., Евглевский A.A., 2005,2006,2008,2009,2010).

Следует отметить, что эндогенно вводимая янтарная кислота, даже в абсолютно низких дозировках, тем не менее, обеспечивает нетипично высокий

метаболический эффект.

Применительно к нашему направлению исследований мы не без оснований полагали, что применение янтарной кислоты при глубоких нарушениях обменных процессов обусловленных алиментарным ацидозом, кетозом и гепатодистрофией сможет снизить остроту проблемы данных патологий в молочном животноводстве.

В своих опытах мы остановились на препарате, содержащем 1,9 % янтарной и 0,1 % лимонной кислот. Нами установлено, что 5 и 7 кратное ежедневное внутрибрюшинное введение сукцината натрия в объеме 0,25 мл белым мышам массой 19-20 г не вызывало у них ухудшения самочувствия.

При экспериментальной интоксикации белых мышей CCL4 в дозе 0,2 мг (LD100) и введении сукцината натрия в объеме 0,25 мл спустя 3, 6 и 12 часов показатели выживаемости составляли 50 %, 30 % , 0 % соответственно.

Таким образом, нами была установлена безвредность инъекционной формы сукцината натрия и гепатопротекторная активность при модулировании

острого токсикоза четыреххлористым углеродом. Это дало нам основание для проведения испытаний сукцината натрия непосредственно на коровах.

В ходе предварительного наблюдения было установлено, что ежедневное, в течение 7 дней, внутримышечное введение 2 % сукцината натрия в объеме 10,0 мл 5 коровам не вызвало у них отрицательного побочного эффекта. Более того, у них заметно улучшилось клиническое состояние и повысилось молочная продуктивность. Таким образом, у нас были все основания для проведения исследований непосредственно на коровах в прогнозируемые периоды развития патофизиологических состояний.

В ходе наших исследованиях установлено, что сукцинат натрия является эффективным препаратом для устранения алиментарного ацидоза. Уже после первого введения препарата у большинства коров достигался эффект нормализации показателя кислотно-щелочного баланса. Само по себе это указывало на позитивные изменения в обменных процессах. Наиболее показательно это проявилось в белковом обмене. Так, если до введения сукцината натрия фоновый показатель был выше верхнего предела физиологической нормы, то спустя 7 дней он выражено снизился до средних значений. В дальнейших исследованиях содержание белка было стабильным и в пределах средних значений. Это свидетельствовало о благоприятном влиянии сукцината натрия на функциональную способность печени. На это указывает незначительное повышение, а в дальнейшем и стабилизация показателя глюкозы в крови. Об улучшении работы печени можно было судить и о снижении показателя кетоновых тел в крови, в то время как этот показатель в контрольной группе не претерпел выраженных изменений.

Применение сукцината натрия положительно отразилось и на минеральном обмене. Показатель содержания кальция на 7 сутки повысился до физиологических значений и оставался таким во все периоды контрольных исследований. Физиологические показатели содержания кальция и фосфора

указывало на достигнутый баланс синергетического взаимодействия этих элементов. Следует отметить, что при ацидозном состоянии наблюдается повышенное выведение кальция из организма. В свою очередь в регуляции кислотно-щелочного равновесия определенную роль играет фосфор, который входит в состав фосфатного буфера крови.

. Проведенный курс применения сукцината натрия обеспечил выраженное улучшение метаболических процессов коров второго и третьего отелов и устранил у них состояние алиментарного ацидоза. В целом продолжительность влияния сукцината натрия на обменные процессы при ацидозе составляет не менее 10 дней.

При применении сукцината натрия на коровах четвертого отела позволило обеспечить тенденцию к улучшению обменных процессов, тем не менее, показатели биохимического статуса коров опытной группы не достигли значений, которые наблюдали у более молодых особей. Все это указывало на необратимость патобиохимических процессов в организме животных, которое являлось следствием интенсивной эксплуатации.

Следующую задачу, которую мы решали в диссертационном исследовании, - это разработка эффективного способа профилактики и лечения мастита у коров. Для управления инфекционным процессом при мастите коров широко практикуется внутрицистернальное введение антибиотиков. Такую обработку ветеринарные специалисты определяют как лечебно-профилактическую. Но такие систематические обработки привели к значительному снижению эффективности лечения этими препаратами. В конечном итоге, антибиотикотерапия становится неэффективной для профилактики инфекционного и сдерживания эпизоотического процесса. Совершенно очевидно, что в настоящее время антибиотикотерапия не может быть достаточно эффективной для управления эпизоотическим процессом при мастите коров.

Придавая важную роль в этиологии возникновения маститов инфекционным патогенам, по нашему мнению, упускается из виду весьма важные в инфекционной патологии факторы, такие как, состояние общей резистентности, иммунной реактивности , нарушение обменных процессов. По мнению Слободяника В.Щ2005) раскрытию роли и значения иммунологических механизмов в патогенезе маститов у коров, позволило бы обосновать и экспериментально подтвердить новые подходы лечения и профилактики болезней молочной железы с использованием как традиционных средств, так иммуномодулирующих препаратов. Многочисленные наблюдения свидетельствуют о том, что подъем заболеваемости маститом у коров наблюдается в сухостойный период. Вполне очевидно, что в этот период мало уделяется контролю состояния молочной железы. Однако проблема маститов сухостойных коров актуальна и в животноводческих хозяйствах, в которых постоянно практикуется лечебно-профилактическая противомаститная обработка. Не решает проблему применение самых эффективных лечебных препаратов. Это указывает на то, что локальное применение противомаститных препаратов не может считаться достаточно эффективным мероприятием.

В настоящее время вопросы разработки экономически выгодных и эффективных средств лечения гнойно-септических заболеваний, к числу которых относится и маститы, являются весьма сложной задачей инфекционной патологии. Сложность задачи состоит в том, что одновременно необходимо добиться решения ряда вопросов, в частности, подавить жизнедеятельность патогенной микрофлоры, нейтрализовать ее токсические продукты жизнедеятельности, восстановить нарушенную трофику тканей в

патологическом очаге.

Для подавления жизнедеятельности патогенной микрофлоры наиболее широко применяется химио-антибиотикотерапия. Однако рост лекарственной устойчивости микроорганизмов обусловливает задачу поиска средств

исключающих возникновение этого феномена. Кроме того, применение мощных средств химио-антибиотикотерапии вызывает угнетение иммунной системы. Важное значение имеют вопросы восстановления нарушенных метаболических процессов и механизмов иммунорегуляции в тканях патологического очага.

Исходя из вышеизложенного, мы поставили перед собой задачу провести направленный поиск по конструированию комплексного препарата, обладающего выраженной антисептической и иммуно-трофикостимулирующей активностью.

В настоящее время для подавления жизнедеятельности патогенной микрофлоры наиболее широко применяется химио-антибиотикотерапия. Однако рост лекарственной устойчивости микроорганизмов обусловливает задачу поиска средств исключающих возникновение этого феномена. Кроме того, применение мощных средств химио-антибиотикотерапии вызывает угнетение иммунной системы. Важное значение имеют вопросы восстановления нарушенных метаболических процессов и механизмов иммунорегуляции в тканях патологического очага.

Исходя из вышеизложенного, мы поставили перед собой задачу провести направленный поиск по конструированию комплексного препарата, обладающего выраженной антисептической и иммуно-трофикостимулирующей активностью и изучить эффективность его применения при мастите коров.

На основании литературных данных и результатов экспериментальных опытов у нас появилась идея разработать состав комплексного иммунометаболического препарата на основе янтарной кислоты, АСД фракции №-2 и формалина.

Уникальные фармакологические свойства данных компонентов представляли для нас определенный практический интерес при разработке комплексного иммунометаболического антисептического препарата.

По результатам экспериментальных опытов установлено, что для обеспечения антисептической активности комплексного препарата наиболее оптимальной является концентрация формалина не ниже 0,4%, но и не выше 0,5%. В ходе ограниченного экспериментального опыта на коровах, больных маститом, установлена весьма выраженная терапевтическая эффективность комплексного антисептического препарата (КАП), инъекционная форма которого в дальнейшем получила название формол-янтарный биостимулятор. Это дало нам основание для проведения испытания КАП для профилактики и лечения маститов у коров в сухостойный период. Оценку лечебно-профилактической эффективности КАП провели при интрацистернальном методе введения в сравнении с мастисаном-А. Придерживаясь принципа аналогов, по мере прекращения доения глубокостельных коров, были сформированы подопытные группы, включающие больных субклиническим маститом.

Исходя из свойств формалина к обезвреживанию микрофлоры и переводе ее токсичных продуктов жизнедеятельности в антитоксические, обладающих иммунизирующей активностью, можно было предположить о подобном эффекте непосредственно в пораженных долях вымени. Если такой иммунизирующий эффект имел место, тем не менее рассчитывать на то, что удастся таким образом индуцировать достаточно напряженный локальный специфический иммунитет не приходится. Во-первых, количество возбудителя в долях вымени и их продуктов жизнедеятельности при субклиническом мастите все же не столь велико и, по всей видимости, недостаточно для проявления иммунизаторного действия. Во-вторых, основные возбудители мастита повсеместно распространены, как правило, закономерно переживают в организме животных, и свои патогенные свойства проявляют только в особых случаях, так называемых отрицательных факторных воздействиях. Отсюда следует, что даже, несмотря на формирование состояния локального

иммунитета молочной железы, рано или поздно произойдет их неизбежное инфицирование. Высказанное предположение отчасти подтвердилось. После отела у отдельных коров опытной группы был клинически диагностирован мастит, а из секрета больных долей выделены культуры: S.aureus; Str.dysgalactiae и E.coli. Им был проведен лечебный курс внутрицистернального применения КАП. После двух введений КАП в объеме 10,0мл исход заболевания оказался благоприятным. Количество соматических клеток из секрета леченых долей было практически таким же, что и здоровых.

Анализируя показатели эффективности применения КАП на другой подопытной группе коров следует отметить, что нам удалось получить данные, подтверждающие наше высказанное предположение относительно недостаточной напряженности локального иммунитета. Внутрицистернальное введение КАП позволило быстро обезвредить микрофлору в больных долях вымени у 5 коров. Эффективность обезвреживающего действия формалина оказалась настолько высока, что в первые 7 дней после родов ни у одной коровы не было клинического заболевания маститом. Проба секрета вымени на димастин была отрицательной.

Таким образом, по результатам диссертационного исследования нами были раскрыты характер и глубина изменений в иммунометеболических процессов у коров высокопродуктивного молочного стада; разработаны и с положительным результатом апробированы в производстве экономически выгодные, простые и эффективные методы коррекции иммунометаболических процессов у высокопродуктивных коров; разработан эффективный безантибиотиковый способ профилактики и лечения мастита у коров исключающий селекцию резистентных штаммов микроорганизмов. Результаты проведенных исследований позволили нам сделать следующие выводы и практические предложения.

Выводы

1. Неадекватный потребностям организма тип кормления высокопродуктивных коров на комплексах по производству молока приводит к быстрому развитию патобиохимического состояния. Этот фон является благоприятным для активации жизнедеятельности эндогенной, в частности гноеродной инфекции, вызывающей заболевания послеродовым эндометритом и маститом.

2. Превентивное применение сукцината натрия на глубокостельных коровах позволяет вполне эффективно проводить коррекцию основных обменных процессов, что подтверждается устранением алиментарного ацидоза, нормализацией кальций-фосфорного соотношения, улучшением иммунного состояния.

3. Целенаправленное применение сукцината натрия коровам в сухостойный период снижает показатели заболеваемости послеродовым эндометритом на 28,9 %, клиническим маститом на 19,0 %.

4. Высокая лекарственная устойчивость основных возбудителей мастита, в частности золотистого стафилококка, обусловливает необходимость постоянного поиска новых средств химио-антибиотикотерапии к которым затруднен эффект быстрого привыкания микроорганизмов.

5. Внутрицистернальное применение сукцината натрия обеспечивает выраженное снижение количества соматических клеток, что может иметь важное значение в разработке противомаститных средств с улучшенной фармакологической характеристикой.

6. Теоретически обоснован и разработан комплексный антисептический иммунометаболический препарат на основе янтарной кислоты, АСД Ф №2 и формалина. Внутрицистернальное применение препарата при клиническом

мастите обеспечивает быстрое обезвреживание микрофлоры, перевод ее токсичных продуктов жизнедеятельности в антитоксические, что имеет определяющее значение в ускорении процесса формирования специфического

локального иммунитета.

7. Современная система обеспечения здоровья и профилактики заболевания маститом у сухостойных коров должна основываться на превентивной стимуляции общих иммунометаболических процессов и эффективности обезвреживания условно-патогенной микрофлоры в молочной железе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для превентивной терапии нарушенных обменных процессов у глубокостельных коров рекомендуем применение 2% сукцината натрия, обеспечивающего выраженную коррекцию метаболических и иммунных процессов.

2. Для лечения субклинического мастита у сухостойных коров рекомендуется комплексный препарат, на основе янтарной кислоты, АСД фракции №- 2, формалина обеспечивающего быстрое обезвреживание условно-патогенной и патогенной микрофлоры, инактивацию их токсичных продуктов жизнедеятельности, стимуляцию обменных процессов в тканях патологического

Практические предложения

Авторские научные разработки составили основу системы мероприятий по обеспечению здоровья коров и профилактики заболевания их маститом внедряемую на ряде молочных комплексов Курской и Белгородской областей.

Список использованной литературы

1. Алюшин.М.Т. Получение и исследование лекарственной формы для лечения мастита у коров / М.Т.Алюшин, Я.А.Ветра, Л.Л.Вайдерс, Н.И.Скопец // Ветеринария производству. - Рига: Знание, 1973, С. 42-49.

2. Анакина Ю.Г. Анализ зарубежных программ борьбы с маститами коров / Ю.Г.Анакина // Всесоюзный НИИ информации и ТЭ исследований Агропрома СССР - М., январь 1989.

3. Анакина Ю.Г. Решение проблемы мастита в некоторых странах мира / Ю.Г.Анакина // Информ. Материал., ВНИИТЭМ агропром № 1-9/ 366. - М., 1988.-С.14.

4. Андреева Н.Л. Общность действия иммуностимуляторов, адаптогенов, стимуляторов продуктивности и антистрессовых средств / Н.Л.Андреева // Мат. 9-й Межгос. Межвуз. НПК, С-Петербург, 1997, 100 с.

5. Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии / Б.И.Антонов // М.: Агропромиздат., 1991, с. 8-9.

6. Багманов М.А. Научные разработки кафедры акушерства -производству/ М.А.Багманов, Н.Ю.Терентьева, Ю.Б.Никульшина // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С.20-24.

7. Багманов М.А. Этиологические факторы мастита у коров / М.А.Багманов, Ю.Б.Никульшина // Вест.Рос.ак.с/х н.,2003,№2,С.75-76.

8. Балковой И.И. Влияние УВЧ терапии на молочную железу коров / И.И.Балковой, В.П.Иноземцев, И.П.Даниленко и др. // Ветеринария. - 1993, №7,

с.зз.

9. Балковой И.И. Биологические принципы лечения электромагнитным полем УВЧ коров при маститах / И.И.Балковой, В.П.Иноземцев, А.Г.Самоделкин // Ветеринария - 1993, №6 - С.40

Ю.Балковой И.И. Влияние электромагнитного излучения ультравысокой частоты на микрофлору молока коров / И.И. Балковой , А.Г.Самоделкин, В.И.Лопарев // Ветеринария - 1994, № 9 - с.37-40.

П.Баюн Ю.К. Применение программируемых микрокалькуляторов для биометрических расчетов / Ю.К.Баюн // Метод.указ. М.: МВА. 1988.

12.Бияшев К. Этиологическая структура маститов у коров и вакцинопрофилактика маститов стафилококковой этиологии / К.Бияшев // Автореф.дис...к.в.н., Алма-Ата, 1971, С.20.

1 З.Бороздин Э.К. Влияние стрессов на восприимчивость коров к маститу / Э.К.Бороздин // Экономические проблемы вет. санитарии: Тез. докл. науч,-конф., 1993. 4.1- С.93-95.

14.Варкалис К. Изменение некоторых показателей обмена веществ у высокопродуктивных коров / К.Варкалис, А.Лабутис, Римавичус // Научные труды ВАСХНИЛ, 1974.-С. 97-98.

15.Васильев В.Г. Терапия коров, больных маститом, в сухостойный период / В.Г.Васильев // Вет., 1998, №1, С.38-40.

16.Вишняков С.И. Обмен макроэлементов у сельскохозяйственных животных / С.И.Вишняков // М.: «Колос».- 1967.

17.Воловенко О.С. Эффективность лечения коров, больных маститом / О.С.Воловенко // Вет., 1977, №1, С. 82-84.

18.Воробьева Н.В. Теоретическое и практическое обоснование новых подходов профилактики и лечения бактериальных маститов у коров в сухостойный период // Автореферат дис.к.в.н., Курск. 2006.

19.Воронин Е.С. Иммуномодуляторы в ветеринарии / Е.С.Воронин, Д.А., Д.А.Дервишов // Проблемы экологии в вет. медицине: Тез.докл. Всес.науч,-

техн.конф. - М., 1989, С. 15.

20.Гончаров В.П. Профилактика и лечение мастита у животных / В.П.Гончаров, В.А.Карпов, И.Л.Якимчук//М., 1980, 174 с.

21.Государственная фармакопея СССР -11-е // изд.,-М.: Медицина, 1990,т. 1,С.286-287; т.2,С.147-148,160-161,193-197.

22.Грабовский И.И. Цеолиты и бентониты в животноводстве / И.И.Грабовский, Г .И. Калачнюк // Ужгород, 1984. - 44с.

23.Грибанов В.М. Влияние ультразвука на регенерацию тканей ран вымени у коров и применение его для их лечения / В.М.Грибанов // Автореф.дис...к.в.н. - Воронеж, 1971, 21с.

24.Гринкевич Н.И. Лекарственные растения / Н.И.Гринкевич // М.: Высш.шк., 1991,С.5-14, 108-110.

25.Гугушвили H.H. Методические рекомендации иммунологических методов исследования в ветеринарии / Н.Н.Гугушвили // Краснодар,2001.

26.Гуртовой Б.Л. Клиника и лечение послеродового мастита / Б.Л.Гуртовой, В.П.Глащенко // Акушерство и гинекология, 1973, №8, С.51-54.

27.Демидова Л.Д. Обсемененность молока патогенными стрептококками на фермах промышленного типа / Л.Д.Демидова // Гигиена содержания с/х. ж-х., вет. микробиология и получение продуктов животноводства высокого санит. Качества.,Тр. ВНИИВС - М., 1980, С.98-100.

28.Демидова Л.Д. Лизомастновое средство для лечения при мастите коров / Л.Д.Демидова, В.М.Юрков и др. //Вет., 1998, №6, С.42-44.

29.Денисенко В.Н. Влияние сезонности на естественную резистентность организма коров-матерей и приплода / В.Н.Денисенко, О.Н.Грызлова, Г.Н.Печникова, П.А.Емельяненко//Ветеринария.- 1987.-№12.- С. 53-56.

30.Дильман В.М. Действие янтарной кислоты на систему гипоталамус-гипофиз-надпочечники / В.М.Дильман, М.Н. Остроумова // В сб.: Терапевтическое действие янтарной кислоты. - Пущино, 1976. - С. 214-215.

31.Долинин Г.А. Нарушение обмена веществ у стельных коров и его влияние на физиологическое состояние новорожденных телят / Г.А.Долинин // Научные труды ВАСХНИЛ, 1974.-С. 77-78.

32.Дорожкин В.И. Действие биокоордициоииых соединений на оьмен веществ и физиологическое состояние животных/ В.И.Дорожкин //Мат.9-й межвуз.НПК. Санкт-Петербург, 1997. С 152-153.

33.Дранник Г.Н. Иммунотропные препараты / Г.Н.Дранник, Ю.А.Гриневич, Г.М.Дизик//Киев: Здоровье, 1994, 288 с.

34.Евглевский А.А. Разработка комплексного иммуномодулятора -металлосукцината / А.А.Евглевский, В.С.Попов, Е.П.Евглевская, и др. // Материалы первого международного конгресса ветеринарных фармакологов. -Санкт-Петербург, 2008. - С.63-64.

35. Ермолова Т.Г. Состояние энергетического обмена у здоровых животных и животных с послеродовой патологией / Т.Г.Ермолова // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 70-73.

36.Ефанов Л.И. Защитные механизмы организма, иммунодиагностика, иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Л.И.Ефанов, Е.Т.Сайдулдин // Научное издание. Воронеж.- 2004.С. 4-7, 45-51, 160-170.

37.Зверева Г.В. Диагностика, терапия маститов у коров при различном функциональном состоянии вымени / Г.В.Зверева //Докл.советских ученых к XIX Всемир.вет.конгрессу.- М., 1971, С.13-15.

38.3авражнов В.И. Лекарственные растения: Лечебное и профилактическое использование / В.И.Завражнов, Р.И.Китаева, К.Ф.Хмелев // Изд.4-е, Воронеж, 1993,480с.

39.3енкин А.П. Применение безмедикаментозных методов терапии / А.П.Зенкин, Д.С.Войлошников // Ветеринария, 2001, №3, С.12-13.

40.3ибров М.А. Причины низкого уровня воспроизводства крупного рогатого скота в хозяйствах Липецкой области / М.А.Зибров, И.В.Жуков, М.Н.Аргунов // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 276-278.

41.Иванов В.В. Лечение коров, больных гнойно-катаральными эндометритами, препаратом прополиса / В.В.Иванов // Автореф. дисс.... канд.вет.наук. - Оринбург, 1996. - 50 с.

42.Иванов В.И. Иммунодефицитное состояние айширского скота и его последствия / В.И.Иванов // Ветеринария.- 1995.-№12.- С. 19-22.

43.Иванов Г.И. Профилактика нарушения минерального обмена у нетелей //Г.И.Иванов, Т.Е.Григорьева // Ветеринария,- 1992.-№3.- С. 45-47.

44.Ивашура В.И. Система мероприятий по борьбе с маститами коров / В.И.Ивашура // М., 1991,240 с.

45.Ивченко В.М. Эпизоотология и этиология маститов у коров на крупных молочных фермах и система противоэпизоотических мероприяий./ В.М.Ивченко // Автореф.дис.. .д.в.н. - Кишинев, 1991, 39с.

46.Идрисова Р.В. Диагностика и коррекция иммунного и биохимического статуса продуктивных коров при гепатозе // Автореф.дисс.к.в.н. Екатеринбург, 2008.

4 7. Ильинский Е.В. Обоснование усовершенствования лечебно-профилактических мероприятий при мастите у коров / Е.В.Ильинский, И.А.Родин//Тез.докл. Всесоюз.научно-техн.конф. - Воронеж, 1988, С. 198-199.

48.Казеев Г.А. Терапия маститов коров путем комплексного воздействия на точки иглоукалывания магнитным полем, инфракрасным и лазерным излучением / Г.А.Казеев, А.В.Старченкова // Мат. Всерос.науч. и учебно-метод.конф. по акуш., гинек. и биотехн. размнож. - Воронеж, 1994, С. 224.

49.Карташова В.М. Гигиена получения молока / В.М.Карташова // Л.: Колос, 1980, 230 с.

50.Карташова В.М Маститы у коров / В.М.Карташова, А.И.Ивашура // М.: Агропромиздат., 1988, 255с.

51.Карташова В.М. Экологически чистый препарат стрептоэколакт для лечения коров, больных маститом / В.М.Карташова, В.В.Касянчук //

Экологические проблемы вет.санитарии: Тез.докл.научно-техн.конф. - М., 1993, 4.1.

52.Кожухии В.М. Рациональное кормление как фактор долголетия высокопродуктивных коров / В.М.Кожухин, Г.И.Кожухина, Н.Н.Баженова // Мат.третьего межд.симпозиума «Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии. Санкт-Петербург, 2005. С. 137-139.

53.Кондрахин И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П.Кондрахин, Н.В.Курилов, А.Г.Малахов и др. // М.: Агропромиздат, 1985, 287с.

54.Конопатов Ю.В. Биологическая оценка иммунотропных препаратов в животноводстве / Ю.В.Конопатов, Ю.В.Туляев, П.Ф.Сонин // Мат. 9-й Межгос.межвуз. НПК, С-Петербург, 1997, 115 с.

55.Конопельцев И.Г. Иммунобиохимические показатели крови отелившихся коров при разных системах содержания / И.Г.Конопельцев // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 99-103.

56.Конопельцев И.Г. Эффективность применения биосана при лечении и профилактике мастита у коров / И.Г.Конопельцев // Автореф.дис...к.в.н. -Воронеж, 1994, 27с.

57.Коромыслов Г.Ф. Применение иммуностимуляторов в ветеринарии / Г.Ф.Коромыслов, Д.Д.Попов, Н.Н.Крюков // Актуальные проблемы инфекционной патологии с/х ж-х: Сб.науч.тр., ВИЭВ - М., 1985, Т.62, С.3-7.

58.Коротяев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология / А.И.Коротяев, С.А.Бабичев С. // Петербург, 1998, С. 161-163, 184, 199-210.

59.Костромитинов H.A. Современные представления о возникновении резистентных штаммов микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам / Н.А.Костромитинов // Вестник российской академии с/х наук, 2001, №3, С.73-

60.Красочко П.А. Биотехнологические основы конструирования и использования иммунобиологических препаратов для молодняка крупного рогатого скота// Автореф.дисс.д.б.н., Щелково-2009.

61.Кузьмин Г.Н. Мастит кокковой этиологии у коров и рациональные способы его терапии и профилактики / Г.Н.Кузьмин // Автореф.дис...д.в.н., Воронеж, 1995.

62.Кузьмин Г.Н. Профилактическая эффективность стафилококкового анатоксина при бактериологическом мастите у коров / Г.Н.Кузьмин, С.М.Казаков // Меж.НПК, Воронеж, 1999.

63.Кузьмин Г.Н. Инфекционные аспекты мастита у коров / Г.Н.Кузьмин, С.Н.Семенов // Экологич.аспекты эпизоотологии и патологии ж-х., МежНПК, Воронеж, 19-21-мая 1999.

64.Кушнир И.Ю. Влияние препарата плацента активное начало на состояние гомеостаза у коров после родов // И.Ю.Кушнир, К.А.Лободин // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 108-113.

65.Ладынина Е.А. Фитотерапия / Е.А.Ладынина, Р.С.Морозова // М., 1989, С.5-12.

66.Лазарев Д.И. Стимуляторы иммунитета / Д.И.Лазарев, Е.К.Алехин // М.: Медицина, 1985, 256с.

67.Лавренов В.К. Полная энциклопедия лекарственных растений / В.К.Лавренов, Г.В.Лавренова // СПб; М.Д999-Т.1-2.

68.Лаппо A.B. Лекарственные растения при лечении телят больных диспепсией / А.В.Лаппо // Тр.Белорус.НИИ эксперим.ветеринарии. - 1983. Вып.20 - С.172-176.

69.Лапаев А.О. Гуминовые препараты для улучшения адоптации импортных стельных коров / А.О.Лапаев, Л.А.Гнездилова // Ветеринария, №1,

2010.-С. 8-10.

70.Ласкавый В.Н. Способ предотвращения вирусных заболеваний с/х животных / В.Н.Ласкавый // Патент РФ №2035190, 20.05.1995.

71.Ласкавый В.Н. Иммуномодулирующее средство / В.Н.Ласкавый, В.В.Рыбин // Патент РФ, № 2077882, 29.11.95г.

72.Лебедев А.Ф. Программа по обеспечению здоровья животных и повышению продуктивности / А.Ф.Лебедев, А.А.Евглевский, А.В.Епифанов, О.М.Швец, Е.П.Евглевская, Е.Ю.Тарасов, И.В.Ермилов//Курск, 2007.

73.Лебедев А.Ф. Разработка препаратов на основе янтарной кислоты /

A.Ф.Лебедев, О.М.Швец, А.А.Евглевский, Е.П.Евглевская, А.В.Епифанов,

B.С.Попов, И.В.Ермилов, Е.Ю.Тарасов, Ж.А.Кудряшова. С.Ю.Щепихин,

C.М.Коломейцев//Ветеринария,- 2009.- № 3.- С. 48-51.

74.Лебедева М.Г. Микробиологические, иммунологические, эпизоотологические и превентивные аспекты послеродового эндометрита у коров// Автореф.дисс.к.в.н. Курск. 2003.

75.Леонов К.В. Возможность коррекции репродуктивной функции у коров при различных состояниях естественной резистентности// Автореф.дисс.д.в.н. Москва, 2006.

76.Малков М.А. Препарат для усиления обменных процессов и иммунитета у сельскохозяйственных животных и птицы. Патент РФ №2259832. 2004. М.А.Малков, Г.В.Барабанщикова, Т.В.Данькова, Л.Е.Львова.

77.Манько В.М. Иммуномодуляторы: история, тенденции развития, современное состояние и перспективы / В.М.Манько, Р.В.Петров, Р.М.Хаитов // Иммунология. 2002.-№3.-С.132-135.

78.Маршак А.Н. Клиническая фармакология / А.Н.Маршак // М., Медицина, 1978.

79.Масьянов Ю.К. Иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространенных болезнях и его коррекция // Автореф. дис.д.в.н.

Воронеж. 2009.

80.Машковекий М.Д. Лекарственные средства / М.Д.Машковский // М.,

1978.

81.Методические указания по диагностике, лечению и профилактике мастита у коров / ГУВ МСХ СССР, 1977., Ветеринарное законодательство т.З, М.: Колос. 1981.-С.322-339.

82.Мещерякова М.Ф. Сравнительное изучение методов диагностики маститов у коров / М.Ф.Мещерякова, Г.Е.Аленичкина // Актуальные вопросы акушерско-гинекологической и хирургической патологии с/х ж-х., 1982, С. 7273.

83.Мищенко В.А. Основные причины выбытия высокопродуктивных коров / В.А.Мищенко, Н.А.Яременко, Д.К.Павлов // Ветеринария.-2004.-№ 10. С.15-17.

84.Мозгов И.Е. Фармакология / И.Е.Мозгов // М., Агропромиздат., 1985,

416 с.

85.Мутовин В.И. Борьба с маститами коров / В.И.Мутовин // М.: Колос, 2-е изд., 1974,254 с.

86.Нахабин И.М. Разработка концепции создания бактериальных препаратов для лечения и профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных / И.М.Нахабин, В.В.Перелыгин // Научные основы технологии промышленного производства ветеринарно-биологических препаратов. Тез. докл. 5 Всеросийской конференции. Щелково, 14-17 мая 1996, С. 128-129.

87.Нежданов В.А. Болезни органов размножения у коров и проблемы их дианостики, терапии и профилактики / В.А.Нежданов, В.Д.Мисайлов, А.Г.Шахов // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С.8-11.

88.Николаев В.Н. Медико-биологические и гигиенические проблемы использования природных цеолитов/ В.Н.Николаев // В сб.: Природные

цеолиты в социальной сфере и охране окружающей среды. Использование природных цеолитов в народном хозяйстве. Новосибирск, 1991. - С. 85-95.

89.Нимацыренов Г.Г. Мониторинг микрофлоры неспецифических маститов у коров Забайкалья и влияние на них бактериофунгицида и убералина нативного / Г.Г.Нимацыренов // Благовещенск, 2003.

90.Новиков О.Г. Этиология пневмоэнтеритов телят, мастита и эндометритов у коров, разработка средств и методов их профилактики и терапии / О.Г.Новиков // Дис.. .д.в.н., Воронеж, 2002, 285 с.

91.0ксалитный Н.К. Профилактика мастита при промышленной технологии производства молока / Н.К.Оксалитный // Вет., 1984, №2, С. 52-53.

92,Оксалитный Н.К. Субклинические маститы у коров / Н.К.Оксалитный //Автореф.дис...д.в.н. - Львов, 1982, 32 с.

93.0ксалитный Н.К. О принципах разработки противомаститных препаратов, содержащих вещества, усиливающие фагоцитоз лейкоцитов / Н.К.Оксалитный, Я.А.Литерс // Ветфармация для промышл. жив-ва. Материалы докл. Всесоюз.конф. - Рига, 1979, С. 41-44.

94,Оксалитный Н.К. Биологическая диагностика мастиа / Н.К.Оксалитный, Э.Т.Мохамед//Вет., 1989, №7, С. 50-52.

95.Папуниди К.Х. Обоснование применения янтарной кислоты в свиноводстве / П К.Х.апуниди, М.Г.Зухрабов, Р.Г. Кадырова // Тезисы докладов первого съезда ветеринарных врачей РТ. Казань, 1996. - С.272-274.

96.Папуниди К.Х. При менение янтарной кислоты в качестве кормовой добавки для свиней / К.Х.Папуниди, М.Г.Зухрабов, О.Д.Трубникова, A.B. Иванов //Тезисы докладов 1 межд.научно-практич.конф. Витебск, 1996 - С. 163.

97.Парахин A.B. Субклинический мастит у коров в хозяйствах Орловской области и эффективность электропунктурой терапии / А.В.Парахин, Ю.В.Корягина // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 285-288.

98.Париков В.А. Комплекс мероприятий по терапии и профилактике мастита и восстановлению воспроизводительной функции у коров / В.А.Париков, В.И.Михалев, Н.В.Притыкин // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК-Воронеж, 2005, С. 372-375.

99.Париков В.А. Разработка и совершенствование методов диагностики, терапии и профилактики мастита у коров / В.А.Париков //Дис. В форме науч. Доклада. Докт.в.н. - Воронеж, 1990, 52 с.

100.Париков В.А. Мастит у коров / В.А. Париков, Н.Т. Климов, А.И. Романенко, О.Г.Новиков, Д.М. Пониткин, И.В. Игнатов, В.И.Почкун // Ветеринария, 2000, № 11, с.34-37.

101.Париков В.А. Противомаститные препараты без антибиотиков / В.А.Париков, Г.Н.Кузьмин, В.И.Слободяник, В.Ф.Городцов // Мат. в помощь с.ж. производству (Зоотехния и ветеринария). - Воронеж, 1978, вып.5, ч. 3, С. 33-34.

102.Париков В.А. Факторы естественной резистентности вымени коров и их роль при мастите / В.А.Париков, Н.А.Сапожников // С/х за рубежом, М.: Колос, 1984, №8, С.54-58.

103.Париков В.А. Перспективыные пути решения проблемы мастита у коров / В.А.Париков, В.И.Слободяник, А.Н.Савостин // Вопросы вет. фармации и фармакотерапии: Тез. докл. науч.-практ. совещ. - Сигулда, 1991, С. 55-57.

Ю4.Пастушенко Л.В. Лекарственные растения / Л.В.Пастушенко, В.Л.Пастушенко, А.Л.Пастушенко // Л.: Лениздат. - 1990 - 383с.

105.Петров В.А. Роль микробного фактора в этилогенезе и частота одновременно протекающих субклинического мастита и эндометрита у коров / В.А.Петров, А.Парахин //Мат.межд. МПК, Воронеж, 2002, С. 483-485.

Юб.Петрянкин Ф.П. Иммунотропные препараты для лечения и профилактики болезней животных / Ф.П.Петрянкин // Ветеринарная патология

.-№2,- 2009.- С. 98-105.

Ю7.Подберезный В.В. Биотерапия и биопрофилактика мастита у коров / В.В.Подберезный // Автореф.дис...д.в.н., Воронеж, 1995, 45 с.

10 8. По лишу к JI.B. Перспективное направление повышения экономической эффективности производства в мясном и молочном скотоводстве / Л.В.Полищук, Р.В. Казарян, А.Н.Турченко // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 145-151.

Ю9.Полянцев Н.И. Система оздоровительных мероприятий при мастите коров с использованием биологических средств / Н.И.Полянцев, В.В.Подберезный //Метод.рекоменд. -Ростов-на-Дону, 1994,С. 17.

1 Ю.Попов Л.К. Роль гепатозов в развитии бесплодия у коров / Л.К.Попов, К.А.Сухов // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 156-159.

Ш.Попов Л.К. Скрытая форма мастита и гинекологические болезни у коров / Л.К.Попов, Н.П.Смагин, Ю.Л.Попов // Ветеринария, 1998, С. 39-40.

112.Попов Ю.Г. Решение проблем болезней матки и молочной железы у крупного рогатого скота / Ю.Г.Попов, Н.А.Шкиль, Н.А.Дровосеков // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 159-163.

ПЗ.Придыбайло Н.Д. Иммунодефициты у сельскохозяйственных животных и птицы, профилактика и лечение их иммуномодуляторами / Н. Д.Предыбайло // М., 1991 .-67с.

114. Пчельников Д.В. Биокоординационные соединения гемовит при лечении эндомического зоба / Д.В.Пчельников // Ветеринарная патология №1, 2008. С. 210-215.

115.Рабинович М.И. Лекарственные травы при желудочно-кишечных болезнях телят / М.И.Рабинович // Ветеринария - 1988.-№2. С. 16-21.

Пб.Радчук H.A. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н.А.Радчук // М.: Агропромиздат., 1991, С.182-186.

1 П.Распутина О.В. Применение гинодисина при акушерско-гинекологических патологиях у коров / О.В.Распутина // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 163-167.

118.Распутина О.В. Разработки и применение лекарственных средств на основе ароксиалканкарбоновой кислоты при болезни животных, вызываемых условно-патогенной микрофлорой // Автореф.д.в.н., Новосибирск. 2007.

119.Ростовский А. Универсальный справочник - лечебник / А.Ростовский // Ростов-на-Дону: Феникс, 2000, 320 с.

Ш.Русаков Р.В. Профилактика сезонного снижения спермопродукции быков-производителей / Р.В.Русаков, Т.В.Агалакова, А.В.Вылегжанин // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных. Мат. межд. НПК- Воронеж, 2005, С. 167-173.

Ш.Савойский А.Г. Метаболизм у коров с нарушением функции печени / А.Г.Савойский, А.М.Кушнирская, В.Н.Байматов // Ветеринария.- 1982.-№8,- С. 50-52.

122.Садиков Р.Э. Воспроизводительная способность маток и жизнеспособность телят при различных типах кормления / Р.Э.Садиков, М.И.Иманалиев, С.И.Мишаков, Ф.У.Укуев // Научные труды ВАСХНИЛ, 1974.-С. 94-96.

123 .Салахутжинов P.A. Естественная резистентность и иммунобиологическая реактивность коров в молочных комплексах / Р.А.Салахутжинов// Автореф.дис...к.в.н., Казань, 1984, 18 с.

124.Самоделкин А.Г. Влияние электромагнитного поля УВЧ на число соматических клеток в молоке коров / А.Г.Самоделкин, Е.А.Тялугин, И.И.Балковой, В.П.Иноземцев // Вет., 1994, №3, С.39.

125.Самохин В.Т. Проблемы патологии обмена веществ у сельскохозяйственных животных в современной животноводстве /В.Т.Самохин. Б.В.Уша, Н.Х.Мамаев, И.Н.Джамалутдинова, А.А.Кабыш// Сб.мат.науч.сессии РАСХН. М.: 1999.- С. 141-144.

126.Самохин В.Т. Профилактики и лечение болезней микроэлементозов сельскохозяйственных животных / В.Т.Самохин, Шахов А.Г. // тезисы докладов НПК, посвящ. 110-летию Курской биофабрики.-Курск, 1996. С. 255-257.

127.Сандаков А.И. Зеленая аптека на ферме / А.И.Сандаков // Ветеринария.- 1982. №4. С. 17-18.

128.Скоркина И. А. Длительность хозяйственного использования, молочная продуктивность и резистентность симментальского и голштинского скота различного генотита к субклиническим формам мастита / Автореф. дис. к.с-х.н.-Вологда, 1997.

129.Слободяник В.И. Иммунный статус у коров при субклиническом мастите//В.И.Слободяник Вет., 1995, №10, С.34-38.

130.Слободяник В.И. Иммунологические аспекты патогенеза, новые ринципы и средства лечения и профилактики мастита у коров / В.И.Слободяник //Автореф.дис...д.в.н., Воронеж, 1994, 38 с.

131.Слободяник В.И. Роль микрофлоры в возникновении мастита у коров / В.И.Слободяник // Мат. Всерос.науч.-учебно-метод.конф. по акушер, и биотехн. размнож. - Воронеж, 1994, С. 238-239.

132.Слободяник В.И. Терапевтическая эффективность нитрофуранов и ультразвука при скрыто протекающем и хроническом катаральном мастите у коров / В.И.Слободяник // Автореф.дис...к.в.н. - Воронеж, 1982.

133.Слободяник В.И. Иммунологические аспекты патогенеза и перспективные пути борьбы с маститами коров / В.И.Слободяник, В.А.Париков, Н.А.Сапожников, Л.М.Смирнова, Г.И.Сергеев // Мат. науч. конф. «Проблемы патологии ж-х и разработка средств и методов терапии и профилактики».-

Воронеж, 1995, С. 246.

134.Слободяник В.И. Новый способ лечения больных маститом коров / В.И.Слободяник, Г.И.Сергеев, Н.А.Сапожникова // Мат. Всерос.науч. и учебно-метод.конф. по акуш. гинек. и биотехн. размн. ж-х. - Воронеж, 1994, С. 241-242.

135.Смирнов А.М. Анализ данных клинико-лабораторных исследований у высокопродуктивных коров и родившихся от них телят / А.М.Смирнов, В.С.Кондратьев, И.В.Никишина //Научные труды В АСХНИЛ, 1974.-С. 92-94.

136.Смирнов Л.В. Перекисное окисление и аминокислотная активность липидов в организме коров при мастите / Л.В.Смирнов // Автореф. дис.. .к.б.н. -Воронеж, 1990, 18 с.

137.Соколов В.Д. Корректоры обмена веществ/ В.Д.Соколов// Мат.9-й межвуз.НПК. Санкт-Петербург, 1997. С. 4-5.

138.Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология / С.Я.Соколов // М.,2000.

13 9. Сперанский А.П. Ультразвук и его лечебное применение / А.П.Сперанский, В.Н.Ракитянский под ред.член.корр. АМНСССР Обросова А.Н. // М.: Медицина, 1970,287с.