Эффективность использования ретровирусных векторов для генетической трансформации клеток яйцевода кур in vivo тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Белоглазов, Денис Валерьевич

• Белоглазов, Денис Валерьевич
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Белоглазов, Денис Валерьевич

ВВЕДЕНИЕ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Органы размножения самок птиц.

1.2 Образование яйца в половых органах курицы.

1.3 Микроструктура слизистой оболочки белкового отдела яйцевода Gallus Domesticus.

1.3.1 Бакаловидные клетки.

1.3.2 Реснитчатые клетки.

1.3.3 Трубчатые железы.

1.4 Синтез секрета в клетках слизистой оболочки белкового отдела яйцевода птиц.

1.5 Формирование яйца.

1.6 Получение трансгенной сельскохозяйственной птицы

1.7 Использование ретровирусных векторов для трансгенеза сельскохозяйственной птицы.

1.7.1 Структура генома и жизненный цикл ретровирусов.

1.7.2 Перенос чужеродных генов с помощью ретровирусных векторов.

1.7.3 Получение трансгенной сельскохозяйственной птицы с использованием ретровирусных векторов.

1.8 Генетическая трансформация клеток яйцевода сельскохозяйственной птицы.

2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1 Реактивы и оборудование.

2.2 Животные.

2.3 Гистологические исследования.

2.3.1 Приготовление гистологических препаратов белкового отдела яйцевода.

2.3.2 Определение содержания ДНК в клетках белкового отдела яйцевода кур.

2.3.3 Изучение пролеферактивной активности клеток яйцевода кур под действием эстрогена.

2.4 Работа с культурой клеток.

2.5 Трансформация клеток яйцевода кур.

2.5.1 Генные конструкции.

2.5.2 Трансфекция клеток кур in vitro.

2.5.3 Введение генных конструкций в клетки яйцевода кур in vivo.

2.6 Анализ на наличие генной конструкции.

2.7 Анализ экспрессии рекомбинантных белков.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Особенности гистогенеза яйцевода кур в различные возрастные периоды.

3.2 Динамика изменения содержания ДНК в клетках эпителиального слоя белковой части яйцевода кур.

3.3 Трансфекция клеток кур ретровирусными векторами in vitro.

3.4 Трансформация клеток яйцевода кур in vivo.

3.4.1 Введение в яйцевод кур генной конструкции pLN-GFP.

3.4.2 Оптимизация условий введения рекомбинантной ДНК в клетки яйцевода кур in vivo.

3.4.3 Введение в яйцевод кур генной конструкции pLNins,содержащий кДНК инсулина человека.

3.4.4 Введение в яйцевод кур генной конструкции pX-RSVhgh содержащей кДНК гормона роста человека.

3.4.5 Разработка путей повышения эффективности трансгенеза яйцевода кур in vivo.

3.5 Анализ факторов, влияющих на эффективность генетической трансформации клеток яйцевода кур.

4 ВЫВОДЫ.

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

6 СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эффективность использования ретровирусных векторов для генетической трансформации клеток яйцевода кур in vivo»

Актуальность темы.

Изучение биологических основ создания трансгенных форм является актуальной задачей современной науки. Трансгенез является неотъемлемой частью биотехнологий будущего, направленных на решение широкого спектра задач фундаментального и прикладного характера. Одним из перспективных направлений в данной области является создание трансгенных кур-биореакторов [Mozdziak et al., 2003; Kamihira et al., 2005; Kawabe et al., 2006, Kwon. et al., 2008; Сураева, 2008]. Существенные физиологические различия между птицами и млекопитающими обуславливают значительное преимущество использования птиц в качестве продуктивной платформы при производстве рекомбинантных белков со сложной структурой: птицы являются иммунноустойчивыми к потенциальным терапевтическим протеинам, таким как эритропоэтин человека, экспрессия которых может негативно влиять на состояние здоровья трансгенных млекопитающих, продуцирующих такие лекарства на коммерческом уровне. К тому же при использовании трансгенных птиц в качестве продуктивной платформы существенно снижается стоимость получаемых протеинов по сравнению с другими методами производства, такими как микробиологическая ферментация E.coli, дрожжи или клетки млекопитающих [Ivarie, 2003].

Однако, несмотря на заметные успехи в области трансгенеза птиц, само создание трансгенных кур представляет сегодня определенную проблему. Особенности их воспроизводства и развития, а именно трудности в точности определения овуляции, большое количество желтка в яйцеклетке, сильное уплотнение цитоплазмы около пронуклеусов, значительно снижают эффективность традиционного метода введения экзогенной ДНК в клетки животных - микроинъекции, что ограничивает использование трансгенных технологий в птицеводстве. Все это требует поиска и разработки альтернативных методов направленного переноса генов, одним из которых является генетическая трансформация отдельных органов, в частности, яйцевода кур. Это позволяет значительно сократить материальные и временные затраты на получение трансгенных организмов по сравнению с использованием для адресной доставки ДНК других клеток-мишеней (клетки бластодермы,- примордиальные зародышевые клетки, эмбриональные стволовые клетки), проведение генно-инженерных манипуляций с которыми возможно только на эмбриональном материале. В этой связи, изучение механизмов доставки экзогенной ДНК в клетки яйцевода кур in vivo является актуальной задачей в рамках разработки и оптимизации отдельных этапов технологической цепочки создания трансгенной птицы.

Цель и задачи.

Целью диссертационной работы явилось изучение эффективности использования ретровирусных векторов для генетической трансформации клеток яйцевода кур in vivo.

Для достижения указанной цели были поставлены и решены следующие задачи:

1. Изучить особенности гистогенеза белкового отдела яйцевода кур в различные возрастные периоды

2. Оценить пролиферативную активность клеток эпителиального слоя белкового отдела яйцевода разновозрастных кур.

3. Определить возраст, оптимальный для введения рекомбинантной ДНК в клетки яйцевода кур in vivo

4. Оценить компетентность клеток яйцевода кур к ретровирусным векторам in vitro.

5. Ввести генные конструкции в клетки яйцевода кур in vivo.

6. Выявить факторы, влияющие на эффективность локальной трансформации клеток яйцевода кур.

Научная новизна.

Впервые изучена пролиферативная активность и особенности гистогенеза клеток эпителиального слоя белкового отдела яйцевода кур в различные возрастные периоды в динамике. Исследованы механизмы доставки рекомбинантной ДНК в клетки белкового отдела яйцевода кур посредством использования ретровирусных векторов. Изучены факторы, влияющие на эффективность генетической модификации клеток яйцевода in vivo. Рассмотрено влияние полового гормона на пролиферативную активность клеток неполовозрелого яйцевода.

Практическая значимость.

Отработан метод введения генных конструкций в эпителиальный слой белкового отдела яйцевода кур in vivo, позволяющий трансформировать клетки эпителиального слоя до 57,3%. Установлен возраст кур, оптимальный для введения генных конструкций в клетки яйцевода in vivo. Предложена схема гормональной обработки кур в раннем возрасте, позволяющая повысить пролиферативную активность клеток неполовозрелого яйцевода. Доказано наличие рекомбинантной ДНК в секреторных клетках эпителия яйцевода подопытных кур по достижении ими половозрелости.

Основные положения, выносимые на защиту

• Клетки эпителия белкового отдела яйцевода могут быть трансформированы с использованием ретровирусных векторов.

• Оптимальным возрастом для эффективного введения генных конструкций в клетки яйцевода кур in vivo является период от 4 до 4,5 месяцев.

• Гормональная обработка кур в раннем возрасте 0,1% синэстролом позволяет повысить эффективность генетической трансформации клеток яйцевода in vivo.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на международных конференциях: «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных - БиоТехЖ-2008», Дубровицы, 2008 г., «Генетика и селекция в животноводстве: вчера, сегодня, завтра», С.Петербург, 2010 г.; научных конференциях Центра биотехнологии и молекулярной диагностики животных ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии, 2011, 2012 гг.

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 4 научные работы, в т. ч. в центральных научных журналах, рекомендованных ВАК РФ - 2.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 101 странице, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты и обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Диссертационная работа содержит 7 таблиц и 33 рисунка.

Библиографический список включает 151 источник, в том числе 101 на иностранных языках.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Генетика», Белоглазов, Денис Валерьевич

ВЫВОДЫ

1. Изучен гистогенез эпителиального слоя белковой части яйцевода кур в динамике. Показано, что в возрасте от 1 до 4,5 месяцев наблюдается постепенное увеличение высоты эпителиального слоя от 9,50±0,24 до 17,37±0,26 мкм. Значительный рост клеток белковой части яйцевода отмечается в период от 4,5 месяцев до 5 месяцев. Высота эпителиального слоя увеличивается до 27,93±0,52 мкм, изменяется структура клеток в сторону повышения доли цитоплазмы.

2. Установлена высокая пролиферативная активность клеток эпителиального слоя белковой части яйцевода кур в возрасте от 4 до 4,5 месяцев. Содержание ДНК в ядрах эпителиальных клеток яйцевода повышается в данный период с 14,9±1,2 до 18,3±1,7 отн. ед.

3. Определен оптимальный возраст кур для введения рекомбинантной ДНК в клетки яйцевода кур in vivo - от 4 до 4,5 месяцев. Эффективное введение генных конструкций в более раннем возрасте возможно при гормональной стимуляции кур 0,1% синэстролом, способствующего повышению пролиферативной активности клеток яйцевода.

4. Показана эффективность использования ретровирусных векторов для генетической трансформации клеток яйцевода кур in vitro с частотой трансформации данных клеток-мишеней до 3,8x10" .

5. Установлена результативность введения ретровирусных векторов в клетки яйцевода кур in vivo. При введении генной конструкции pLN-GFP экспрессия рекомбинантной ДНК выявлена в 17,2±3,1% эпителиальных клеток белковой части яйцевода кур, при использовании генных конструкций pLNins и pX-RSVhgh - в 11,3±2,6 и 7,6±1,7% клеток, соответственно.

6. Изучены факторы, влияющие на эффективность локальной трансформации клеток белкового отдела яйцевода кур in vivo. Высокая эффективность трансформации данных клеток-мишеней установлена при введении генных конструкций в яйцевод кур в виде вирусного препарата в возрасте 2 месяцев после гормональной обработки 0,1% синэстролом -57,3±6,3%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Лабораториям, занимающимся созданием и изучением трансгенных форм животных и птиц, рекомендуем:

1. Для генетической трансформации клеток яйцевода кур использовать генные конструкции, полученные на основе рекомбинантных ретровирусов.

2. Для эффективной трансформации клеток яйцевода кур in vivo осуществлять введение ретровирусных векторов в виде вирусного препарата в возрасте 2 месяцев через 24 часа после гормональной стимуляции 0,1% синэстролом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Белоглазов, Денис Валерьевич, 2012 год

1. Абдрахманов И. К. Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих: автореф. диссер. канд. биол. наук.- Дубровицы.-2001.- С. 22.

2. Автондилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина.- 1990.384 с.

3. Алексеев Ф.Ф. , М.А. Асриян, Н.Б. Бельченко. Промышленное птицеводство -М.: Агропромиздат.-1991- 543 с.

4. Брем Г., Зиновьева H.A., Л.К. Эрнст Л.К. Генные фермы новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными // Биотехнология 1993. - №6 - С. 3-27.

5. Волкова Л.А. Эффективность генетической трансформации соматических и эмбриональных клеток животных с использованием различных клеток «упаковщиц»//Афтореф. дисс. . канд. биол. наук. -Дубровицы. - 2005.

6. Вракин В.Ф., Сидорова М.В. Анатомия и гистология домашней птицы. М.: Колос.- 1991.

7. Вракин В. Ф., Сидорова М. В., Панов В. П. Морфология сельскохозяйственных животных. Анатомия и гистология с основами цитологии и эмбриологии /М.:Гринлайт. -2008.- С. 510-516.

8. Гистология/Под редакцией Ю.И. Афанасьева, H.A. Юрина. М.: Медицина. - 2002. - С. 673-695.

9. Глебов O.K. Генетическая трансформация соматических клеток.-Л.: Наука.- 1989.-251 с.

10. Глик Б. Молекулярная биотехнология: принципы и применение / Пер. с англ. Дж. Пастернак.- М.: Мир.- 2002. 589с.

11. Гольдин JI.C. Основы гистологической техники электронной микроскопии. -М.: Государственное издат. медицинской литературы.-1963. -258 с.

12. Горбик Т.А.,Га-баева Н.С. О морфологических изменениях фолликулярного эпителия в оогенезе пекинской утки и других птиц //Архив АГЭ .-1975. Т.68. - Вып.6. - С. 16-24.

13. Грасгоф В.М. Цитологическое исследование яйцеводов кур // Материалы научно-методической конференции АГЭ с.-х. вузов. М.- 1963. -вып. 2. разд.2. - 24 с.

14. Грасгоф В.М. Цитологическое исследование железистого аппарата яйцеводов кур//Архив АГЭ.-1966. № 10. - С. 75-80.

15. Зиновьева Н. А., Эрнст J1. К., Брем Г. Трансгенные животные и возможности их использования: молекулярно-генетические аспекты трансгенеза в животноводстве // Дубровицы: ВИЖ,- 2001.-С. 128.

16. Зиновьева Н. А., Эрнст JI.K. Проблемы биотехнологии и селекции сельскохозяйственных животных // Дубровицы: ВИЖ.- 2004.- С. 316.

17. Зон Г. Влияние факторов внешней среды на организм птицы // Птицеводство.- 1992. -№10. С. 21-22.

18. Куликов J1. Еще раз о курином яйце.//Птицеводство.№6.-1999. М., Колос.С.54-55.

19. Куликов JI. Как образуется яйцо.//Птицеводство.№З.М.,Колос.-1998.-С.43-45.

20. Манухина, А.И, Столярова А.Г., Журавлева А.Г., Донченко Н.П. Развитие яйцевода цыплят, индуцированное эстроген-ном // Бюлл. ВНИИ физиология, биохимия и питание сельскохозяйственных животных. -1980. -Вып. 3. С. 25-28.

21. Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д.С. Саркизова, Ю.П. Перова. М.: Медицина,- 1996. 544 с.

22. Скопичев, В.Г., Шумилов Б.В. Морфология и физиология животных.- СПб.: Издательство «Лань».- 2005. С. 337.

23. Степина О.Ю. Особенности микроморфологии и гистохимии яйцевода кур после прекращения яйцекладки— Троицк.- 1997. — С. 56-58.

24. Стремоусов В.М. Морфофункциональная характеристика васкуляри-зации репродуктивных органов кур-молодок // Физиологические основы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных: Сборник научных трудов.- Саратов.- 1986. С.89-91.

25. Стрижиков В.К. Морфофункциональные особенности тазового пояса у домашних и некоторых других диких видов птиц // Тезисы докл. на-учн. конф. / Уральск, с.-х. ин-т,- Екатеринбург.- 1993. С.76.

26. Сураева Н. М., Самойлов А. В. Получение фармацевтическихгбелков с помощью трансгенной птицы// Вестник Р01ТЦ им. Н. Н. Блохина РАМН.- 2009.- Т. 20.- С. 19-23.

27. Тегза A.A. Анатомические особенности кровоснабжения половых органов у гусынь./ // Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных. Сб. статей. Вып. 3. Екатеринбург.- 1999. - С.222-225.

28. Тегза A.A. Микроморфология яичника и яйцевода гусынь в постнатальном онтогенезе: Автореф. дис. . канд.вет. наук. — Екатеринбург.-2000. 20 с.

29. Тельцов Л.П. Пути управления онтогенезом сельскохозяйственных животных // Ветеринарная и биологическая наука с/х производству: Матер. Всерос. научно-производственная конференция — IT-Новгород.-1997. С.73-76.

30. Тельцов Л.П.,Столяров В.АДЫигин Е.М. Наследственность и этапы развития в онтогенезе // Естественно-технические исследования: теория, методы, практика: Межвузовский сб. науч. тр. — Саранск.- 2000. С. 122-124.

31. Титова В. А., Зиновьева Н. А., Волкова Н. А. Использование ретровирусных векторов для переноса генов в органы-мишени у сельскохозяйственных животных// Международная конференция.- 2001. -С. 90.

32. Трайнис K.B. Электронно-микроскопическое исследование секреции белка, полисахаридов и кератина в эпителиальных клетках яйцевода кур //Архив АГЭ. -1968. Вып. 10. - Т.55. - С. 17-21.

33. Хохлов Р.Ю.,Кузнецов С.И. Закономерности развития яйцевода кур в постэмбриональном периоде онтагенеза // Морфология. С.Петербург.- 2002. -№2-3.-С. 168.

34. Хохолов Р.Ю., Кузнецов С.И. Морфогенез эпителия слизистой оболочки яйцевода кур при различных условиях освещенности в постнатальном онтогенезе / Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биологии. Оренбург.- 2003.

35. Хохлов Р.Ю. Морфологическая характеристика эпителиоцитов яйцевода кур //Морфология. -2008. т. 133. - №2. С. 147.36.,Хохлов Р.Ю. Периоды постэмбрионального морфогенеза яйцевода кур // Морфология. -2008. т. 133. №4. - С. 100.

36. Хрусталева H.H., Федорова // Эколого-экспериментальные аспекты функциональной и возрастной морфологии домашней птицы. Сб.науч.тр. Воронеж.- 1988. С. 79-82.

37. Хрусталева И.В.,Михайлов Н.В., Шнейберг Я.И. и др.: Анатомия домашних животных. М.: Колос. 1994. - С.636-675

38. Царева О.Ю. Структурно-функциональный гистогенез яйцевода цыплят// Эколого-экспериментальные аспекты функциональной, породной и возрастной морфологии домашних птиц. Межвузовский сб. науч.тр. Воронеж.-1989.- С. 67-69.

39. Царева О.Ю. Особенности морфологии и гистологии желез слизистой оболочки различных отделов яйцевода кур // Макро и микроморфология сельскохозяйственных животных и клеточных пушных зверей. Сб.науч.тр. Омск,.-1990. С. 49-51.

40. Циновый В.И. Куртасов B.C. Влияние эстрогенных гормонов на белковый и обмен у кур с различным уровнем продуктивно-сти.//Птицеводство.-1990.-Т.43 .-С. 44-46.

41. Шевелуха B.C.,Калашников Е.А.,Дегтярев С.В.,Кочиева Е.З.,Прокофьев М.И. Сельскохозяйственная биотехнология. -М.: Высшая школа.-1998. -416с.

42. Шихов И.Я., Лепнов А.Н. Методические рекомендации по количественному определению нуклеиновых кислот в клетках и тканях сельскохозяйственных животных.- Дубровицы -1985 -28с.

43. Чаплыгина H.A. Возрастные морфологические изменения яичников и яйцеводов яйцекладущих и неяйцекладущих кур // Физиолого-морфологические особенности животных в хозяйствах промышленного типа. Сб.науч.тр. Воронеж.-1986. С. 66-76.

44. Чечеткин A.B., Кранина Е.В. Обменные процессы в печени и яйцеводе кур. Куры-несушки породы белый леггорн: Интенсификация птицевод ства.-Харьков,- 1991 .-С. 52-5 8.

45. Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия. 4.2. -Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та.-1997. 400с.

46. Эрнст Л.К. Биотехнология сельскохозяйственных животных .-М.: РАСХН." 2002.- 192с.

47. Эрнст Л.К,Прокофьев М.И. Биотехнология сельскохозяйственных животных.- М.: Колос.- 1995. 192с.

48. Эрнст Л.К. Молекулярно-генетические аспекты в создании и использовании трансгенных сельскохозяйственных животных // Вестник РФФИ. 2002. №3(29). - С.56-65.

49. Эрнст Л. К., Зиновьева Н. А., Брем Г. Современное состояние и перспективы использования трансгенных технологий в животноводстве. М.: РАСХН.- 2002.- 341с.

50. Amsterdam A., Ohad I. & Schramm M. Dynamic changes in the ultrastructure of the acinarcell of the rat parotid gland during the secretion cycle// Journal of Cell Biology.-1969.-V. 41.-P. 753-773.

51. Andersen D. C., and Krummen L. Recombinant protein expression for therapeutic applications// Curr Opin Biotechnol.-2002.-V.13.-P.l 17-123.

52. Anderson E. Oocyte differentiation in the sea urchin, flrbucia punctuluta, particular reference to the origin of cortical granules and their participation in the cortical reaction.//Journal of Cell Biology.-1968.-V.37-P. 514-539.

53. Barna J.,Boldizsar H., and Harczi I.Z. Amino acid secretion of the hen's oviduct during egg formation cycle// Acta Veterinaria Hungarica.-1996-V.44.-P.233-241.

54. Blake J., Salinas P.S., Hughes S.M. Beta geo, a combined selection and reporter gene for retroviral and transgenic studies // Biotechnigues. — 1997. -V.23. P.690-695.

55. Bosselman R.A.,Hsu R.Y., Boggs T., Hu S., Bruszewski J.et al. Germline transmission of exogenous genes in the chicken Bosselman // Science.-1989. V.243 (4890). - P.533-535.

56. Brown W.R.A., Hubbard S.J., Tickle C., Wilson S.A. The chicken as a model for large-scale analysis of vertebrate gene function//Nature Reviews Genetics. -2003.-V. 4-P. 87-98.

57. Bull M. L., Martins M. R. F. B., Cesbrio M. D., Padovani C. R. & MendesA. A. Anatomical study on domestical fowl (Gallus domesticus) reproductive system International //Journal of Morphology.2007.-V.25(4).-P.709-716.

58. Chapman S.C, Lawson A., Macarthur W.C., Wiese R.J., et al. (2005). Ubiquitous GFP expression in transgenic chickens using a lentiviral vector// Development .--2005.-V.132.-P.935-940.

59. Chousalkar K.K., Roberts J.R. Ultrastructural changes in the oviduct of the laying hen during the laying cycle// Cell Tissue Res .-2008-V. 332-P.349-358.

60. Coffin J.M. Structure and classification of retroviruses. In 'The Retrovi-ridae' (ed. L.A. Levy) // Plenum Press, NY. -1992. P. 19-49.

61. Coffin J.M. , Hughes S.H. , Varmus H.E., Boeke J.D. , Stoye J.P. Retroviruses//Cold Spring Harbor Lab Press, Cold Spring Harbor.-1997- P. 343435.

62. Conzaler Moran G., Camacho Arroyo J. immunohistochemical localization of progesterone receptore isoforms in the chick prefollicular ovary // Anat, Histol., Embriol. - 2001. - V.30. - P. 153-158.

63. Cosset F.L. et al. A new avian leukosis virus-based packaging cell line that uses two separate transcomplementing helper genomes// Journal of Virology.1990-V. 64.-P. 1070-1078

64. Cosset, F.L. et al.Packaging cells for avian leukosis virus-based vectors with various host ranges// Journal of Virology.-1992.-V.- 66- P.5671-5676

65. Cosset F.L, Takeuchi Y., Battini J.L., Weiss R.A., Collins M.K., High-titer packaging cells producing recombinant retroviruses resistant to human serum//Journal of Virology-1995.-V. 69-P. 7430-7436

66. Crittenden L.B et al. Retroviral elements in the genome of the chicken:Implications for poultry genetics and breeding// Crit.Rev. Poult. Biol.1991-V.3-P.73

67. Das R. Production of therapeutic proteins from transgenic animals// Bio Business. -2001.- P. 60-62.

68. Dougherty D.C., Sanders M.M. Estrogen action: revitalization of the chick oviduct model.//Trends Endocrinol Metab.-2005.-V. 16-P.414-419.

69. Edwards N.A, Luttrell V., Nir I. The secretion and synthesis of albumen by the magnum of the domestic fowl (Gallus domesticus) //Comp Biochem Physiol B Biochem.- 1976-V.53(2).-P.183

70. Gao B., Song H.Q., Chen Q., Li B.C., Sun H.C.,Wang K.H., Dou T.C., and Ding C. 2003. Construction and in vivo expression of chicken oviduct-specific expression Vector// China Biotechnol.-2003-V. 8.-P.83-86.

71. Gheri G., Noci I., Sgambati E., Borri P., Taddei G., Bryk S.G. Aging of the human oviduct: lectin histochemistry//Histol Histopathol.- 2001-V. 16.-P.21-28.

72. Gilbert A.B. The binding of very low density and low density lipoproteins to the plasma membrane of the hen's oocyte//Experimental Cell Research.-1984.-V. 151-P. 433-446.

73. Goff S. P. Retroviridae: the retroviruses and their Replication// In Fields' Virology, 4th Ed (Knipe D. M., and Howley P. M. eds).-2001.- P. 1871-1939

74. Han J.Y. Germ cells and transgenesis in chickens.// Comp. Immunol Microbiol. Infect. Dis.- 2009.-V.32-P.61-80.

75. Hajkova P., El-Maarri O., Engemann S., Oswald J. DNA-methylation analysis by the bisulfite-assisted genomic sequencing method // Methods in Molecular Biology.- 2002. -V.200-P. 143-154.

76. Harvey A.J, Speksnijder G., Baugh L.R., Morris J.A., et al. Expression of exogenous protein in the egg white of transgenic chickens// Nature Biotechnology.-2002.-K20-P. 396-399.

77. Harvey A., Ivarie R. Validating the hen as a bioreactor for the production of exogenous proteins in egg white//Journal of Poultry Science.- 2003. -V.82.-P. 927-930.

78. Harvey A., Speksnijder G., Bough L., Morris J. Consistent production of transgenic chickens using replication-deficient retroviral vectors and high throughput screening procedures // Journal of Poultry Science .-2002a.-V. 81-P.202-212.

79. Helminen H. J. & Ericsson J. L. E. Studies on mammary gland involution. 2. Ultrastructural evidence for auto- and heterophagocytosis// Journal of Ultrastructure Research.-1968a.-V. 25.-P. 214-227.

80. Helminen H. J. & Ericsson J. L. E. Studies on mammary gland involution. 3. Alterations outside auto- and heterophagocytic pathways for cytoplasmic degradation//Journal of Ultrastructure Research -1968b.-V.25.-P.228-239.

81. Houdebine L.M. Production of pharmaceutical proteins by transgenic animals//Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis.-2009.- V.32-P. 107-121.

82. Hunter E., Swanstrom R.// Curr. Top. Microbiol. Immunol.,-1990.-V. 157.-P. 187-253.

83. Isola J. J. Distribution of estrogen and progesterone receptors and steroid-regulated gene products in the chick oviduct.// Molecular and Cellular Endocrinology.-1990-V. 69-P.235-243.

84. Ivarie R. Avian transgenesis: progress towards the promise//Trends Biotechnol.-2003.-V. 21.-P. 14-19

85. Jin, H. Expression of porcine endogenous retrovirus in peripheral blood leukocytes from ten different breeds / H. Jin, Y. Inoshima, D. Wu, A. Morooka, H. Sentsui // Transplant Infectious Disease. 2000. V.2. - P. 11-14.

86. Joensuu T. K. Chick oviduct differentiation. The effect of estrogen and progesterone on the expression of progesterone receptor. Cell Differ. Dev.-1990.-V. 30.-P.207-218.

87. Johnson A.L., Dori C. Woods. Dynamics of avian ovarian follicle development: Cellular mechanisms of granulosa cell differentiation// 9th International Symposium on Avian Endocrinology. 2009.-V.163.- P. 12-17

88. Kaleri H.A., Xiang L., Juken A. and Shiyong X. Oviduct-specific expression of tissue plasminogen activator in laying hens//Genetics and Molecular Biology-2011.-V. 34.-P. 231-236.

89. Kalina J., Filip S., Alena M., Jitk M., Jana B., Yan Ii., Martin P., Hejnar J., Pavel T . Retrovirus-mediated in vitro gene transfer into chicken male germ line cells//Reproduction-2007.-V.134-P.445-453.

90. Kamihira M., Ono K. I., Esaka K., Nishijima K. I., Kigaku R., Komatsu H., Yamashita T., Kyogoku K., and Iijima S.High-level expression of single-chain

91. Fv Fc fusion protein in serum and egg white of genetically manipulated chickens by using a retroviral vector.// Journal of Virology-2005- V. 79.-P. 10864-10874

92. Kamihira M., Kawabea Y., Shindob T., Onoc K., Esakac K, Yamashitab T., Nishijimac K., Iijimac S. Production of chimeric monoclonal antibodies by genetically manipulated chickens//Journal of Biotechnology.-2009.-V. 141.-P.18-25.

93. Koo B., Koo B., Choi B., Lee H. Development of transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein// Biochemical and Biophysical Research Communications.- 2006.- V.320-V. 442-448.

94. Kuiper G. G.,Carlsson B.,Grandien K.,Enmark E.,Haggblad J., Nilsson S., Gustafsson J.A.Comparison of the ligand binding specicifity and transcript tissue distribution of estrogen receptors a and (3// Endocrinology-1997.-V.138-P.863-870.

95. Kusuhara S., and Ohashi T.Immunohistochemical detection of estrogen receptors in the magnum and shell gland of the chicken oviduct. //Jpn. Poult. Sci.-1991.-V. 28,P.328-334.

96. Kwon M.S., Koo B.C., Choi B.R., Lee H.T., Kim Y.H., Ryu W.S., Shim H., Kim J.H., Kim N.H., Kim T. Development of transgenic chickens expressing enhanced green fluorescent protein//Biochem. Bioph. Res. Co.-2004.-V. 320.-P. 442-448.

97. Li J.J. and Lu L.Z. Recent progress on the technologies and applications of transgenic poultry// African Journal of Biotechnology -2010- V.9.-P. 3481-3488.

98. Lillico S.G., McGrew M.J., Sherman A. and Sang H.M. Transgenic chickens as bioreactors for protein-based drugs// Drug Discoveiy Today -2005.-V. 10.-P. 191-196.

99. Ling L., Lee Y.L., Lee K.F., Tsao S.W., Yeung W.S., Kan F.W. Expression of human oviductin in an immortalized human oviductal cell line// Fertil Steril.- 2005.-V.84.-P.1095-1103.

100. Mann R., Mulligan R.C., Baltimore D., Overview of the Retrovirus Transduction System// Cell-1983-V. 33-P. 153-159

101. Mclelland J. A colour Atlas Avian Anatomy (Department of Preclinical veterinary Sciences university of Edinburg Scotland.-Wolfe Publishing Ltd.-P. 1991.-127.

102. Mcleod W.M., Frotter D.M.,Lumb J.W. Avian anatomy .-Burgess.-1992.-P.2.-44,71 -83.

103. Michailidis G.,Argiriou A.,Kalivas A., Melpomeni Avdi and V. Pappa Expression of P-Defensins in the chicken (Gallus domesticus) reproductive tract//Archiva Zootechnica.-2008.-V.l 1-P.3, 33-40

104. Miller A.D., Law M.F.,Verma I.M. Generation of helper-free amphotropic retroviruses that transduce a dominant-acting, methotrexate-resistant dihydrofolate reductase gene// Molecular and Cellular Biology .-1985. V.5. -P.431-437.

105. Miller A.D., Buttimore C. Redesign of retroviral packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production // Molecular and Cellular Biology .-1986. V.6. - P.2895-2902.

106. Miller A.D. Retroviral packaging cells // Human Gene Therapy .-1990.-V.1.-P.5-14.

107. Mohammadpour A.A., Keshtmandi M. Histomorphometrical Study of Infundibulum and Magnum in Turkey and Pigeon// World Journal of Zoology .-2008.-V.3 (2)-P. 47-50, 2008

108. Mozdziak P.E., S. Borwornpinyo S., McCoy D.W., Petitte J.N. Development of transgenic chickens expressing bacterial beta-galactosidase // Developmental Dynamics.- 2003. V.226 (3). - P.439-445.

109. Mozdziak P.E.,Petitte J.N. Status of transgenic chicken models for developmental biology//Developmental Dynamics.- 2004.-V. 229-P. 414-421.

110. Mozdziak P.E., Wysocki R., Angerman-Stewart J., Pardue S.L., Petitte J.N. Production of chick germline chimeras from fluorescence-activated cellsorted gonocytes//Poultry Science -2006.-V.85.-P. 1764-1768.

111. Mozdziak P.E. and Petitte J.N. Status of transgenic chicken models for developmental biology// Developmental Dynamics.-2004.-V. 229.-P. 414-421.

112. Ochiai H., Park H.M., Nakamura A.,Sasaki R.,Okumura J.I.jMuramatsu N. Synthesis of human erythropoietin in vivo in the oviduct of laying hens by localized in vivo gene transfer using electroporation//Poultry Science .-1998- V.77.-P. 299-302.

113. Otten et al.The MMTV LTR Promoter is Induced by Progesterone and Dihydrotestosterone but not by Estrogen// Molecular Endocrinology .-1988.-V.2(2).-P. 143-147.

114. Palmiter, R. D. , and Gutman, G. A. Fluoriscent antibody localization of ovalbumin, conalbumin, ovomukoid, and lizocim in chik ovidukt magnum.The Journal of Biological Chemistry-1972.-V. 247,- P.6459 .

115. Park S.H., Kim J.N., Park T.S., Lee S.D., Kim T.H., Han B.K., Han J.Y. CpG methylation modulates tissue-specific expression of a transgene in chickens//Theriogenology.- 2010.-V. 74.-P.805-816.

116. Petitte J.N., Karagenc L., M. Ginsburg M .The origin of the avian germ line and transgenesis in birds// Poultry Science .- 1997. V.76 (8). - P. 10841092.

117. Petitte J. N., and Mozdziak P. E. Transgenic chickens as bioreactors for protein-based drugs In Transgenic Animal Technology// 2nd Ed (Pinkert, C. A., ed) -2002.-P. 279-306

118. Rapp J. C.,Harvey A.J.,Speksnijder G.L.,Hu W., and Ivarie R. Biologically active human interferon a-2b produced in the egg white of transgenic hens //Transgenic Research.-2003.-V. 12.-P.569-575.

119. Renkawitz R., Beug H., Graf T., Matthias P., Grez M., Schutz G. Expression of a chicken lysozyme recombinant gene is regulated by progesterone and dexamethasone after microinjection into oviduct cells.//Cell 1982.-V. 31-P.-167-176.

120. Renoir J.M., Radanyi C., Yang C.R., Baulieu E.E. Antibodies against progesterone receptor from chick oviduct. Cross-reactivity with mammalian progesterone receptors//European Journal of Biochemistry.- 1982.-V.27.-P.81-86.

121. Robert I. Competitive bioreactor hens on the horizon// Trends Biotechnol-2006.-V. 24-P. 99-101.

122. Rohdewohld H., Weiher H., Reik W., Jaenisch R., Breindl M. Retrovirus integration and chromatin structure: Moloney murine leukemia proviral integration sites map near DNase I-hypersensitive sites// Journal of Virology .-1987.-V. 61-P. 336-343.

123. Rose M. E., Orlan E. & Butree N. Immunoglobin classes in the hen's egg: their segregation in yolk and white// European Journal of Immunology -1974.-V.4-P.521-523.

124. Salter A. M., Fisher S. C. and Brindley D. N.Interaction of triiodothyronine,insulin and dexamethasone on the binding of human LDL to rat hepatocytes in monolayer culture//Atherosclerosis.- 1988-V. 71.-P.77-80

125. Sanders et al.Chicken Egg White Genes: Multihormonal Regulation in a Primary Cell Culture System// Endocrinology.-1985.-V. 116(1 ).-P.398-405

126. Sang H. Prospects for transgenesis in the chick// Mechanisms of Development.-2004.- V. 121 -P. 1179-1186.

127. Sang H. Transgenesis sunny-side up//Nature Biotechnology.-2006-V. 24-P.955-956.

128. Schweers et al.The Steroid-dependent Regulatory Element in the Ovalbumin Gene Does Not Function as a Typical Steroid Response Element// Journal of Biological Chemistry .-1990.-V.265(13).-P.7590-7595

129. Schweers et al.A Protein with a Binding Specificity Similar to NF-.kappa.B Binds to a Steroid-dependent Regulatory Element in the Ovalbumin Gene// Journal of Biological Chemistry -199 l.-V.266(16)-P. 10490-10497

130. Shepherd J.H., Mulvihill E.R., Thomas P.S., Palmiter R.D. Commitment of chickoviduct tubular gland cells to produce ovalbumin mRNA during hormonal withdrawal and restimulation//The Journal of Cell Biology-1980.-V. 87-P.142-151.

131. Smith A. H., Hooverg N., Nordstrom O. & Winget C. M. Quantitative changes in the hen's oviduct associated with egg formation. Poult. Sci.-1957-V.36.-P. 353-357.

132. Surface F.M.,The histology of the oviduct of the domestic hen// Bull Maine. Agric. Exp. Stn.-2012.-V.206.-P.395-430.

133. Temin H. M. Retrovirus vectors for gene transfer: efficient integration into and expression of exogenous DNA in vertebrate cell genomes// In Gene Transfer (Kuchelapati, R., ed)-1987.- P. 149-187

134. Thoraval P. et al. (1995) Germline transmission of exogenous genes in chickens using helper-free ecotropic avian leukosis virus-based vectors//Transgenic Research.-1995.-V.4-P. 369-377

135. Walter I, Bavdek S. Lectin binding patterns of porcine oviduct mucosa and endometrium during the oestrous cycle// Journal of Anatomy .-1997.-V.190,-P.299-307.

136. Wyburn G.M., Johnston H.S., Draper M.H. The magnum of the hen's oviduct as a protein secreting organ// Journal of Anatomy.- 1970.-V. 106.-P.174.

137. Yu J. Y.-L., Campbell L D. & Margaret R. Sex hormone control mechanisms. I. Effect of estrogen and proges terone on major cellular componentsin chicken (Gallus domesticus) oviducts// Comparative Biochemistry and Physiology.-197l.-V. 49.-P. 348-356.

138. Yu J. Y.-L, Campbell L D. & Margaret R .Interaction of estradici and testosterone in the regulation of growth and development of the chicken (Callus domesticus) oviduct.// Comparative Biochemistry and Physiology.-1973.-V.44.-P. 769-777.

139. Zhu L, van de Lavoir M.C, Albanese J, Beenhouwer D.O, Cardarelli P.M,Cuison S, Deng D.F, Deshpande S, Diamond J.H, Green L, et al. Production of human monoclonal antibody in eggs of chimeric chickens// Nature Biotechnology .-2005- V.23.-P.1159-1169.