Генетическая трансформация половых клеток кроликов и хряков с использованием ретровирусных векторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Лоцманова, Наталья Сергеевна

  • Лоцманова, Наталья Сергеевна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2011, Дубровицы
  • Специальность ВАК РФ03.02.07
  • Количество страниц 102
Лоцманова, Наталья Сергеевна. Генетическая трансформация половых клеток кроликов и хряков с использованием ретровирусных векторов: дис. кандидат биологических наук: 03.02.07 - Генетика. Дубровицы. 2011. 102 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Лоцманова, Наталья Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Процесс формирования мужских половых клеток.

1.2. Стадии сперматогенеза у млекопитающих. ^

1.3. Типы клеток сперматогенного эпителия. ^

1.4. Использование половых клеток для получения трансгенных животных.

1.4.1. Использования спермиев для переноса рекомбинантной ДНК в клетки-мишени.

1.4.2. Трансплантация сперматогоний.

1.4.3. Использования ретровирусных векторов для генетической ^ трансформации половых клеток животных.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Материалы.

2.1.1 Реактивы и оборудование.

2.2. Генные конструкции.

2.3 Работа с культурой клеток.

2.3.1 Культивирование клеток.

2.3.2 Получение первичной культуры клеток семенника кроликов и хряков.

2.4. Трансформация клеток-мишеней ретровирусными векторами ^ 2.4.1. Трансформация культуры клеток семенников кроликов и хряков in vitro.

2.4.2 Введение ретровирусных векторов в семенники кроликов и хряков in vivo.

2.5. Анализ на наличие генной конструкции.

2.6 Анализ экспрессии рекомбинантных белков.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Эффективность трансфекции клеток семенников кролика и хряка ретровирусными векторами в культуре in vitro. ^

3.2. Трансформация клеток семенников кролика in vivo посредством прямого введения ретровирусных генных конструкции.

3.2.1. Введение в семенники кроликов генной конструкции pLN

3.2.2. Введение в семенники кроликов генных конструкций, содержащих кДНК инсулина человека.

3.3. Введение генных конструкций в клетки сперматогенного эпителия семенников хряков 1П vivo.

3.3.1. Введение в семенники хряков генной конструкции pLN-GFP

3.3.2. Введение в семенники хряков генной конструкции pX-Ins

3.4. Анализ факторов, влияющих на эффективность генетической трансформации сперматогенных клеток семенников животных.

3.4.1. Влияние генной конструкции на эффективность трансформации клеток-мишеней.

3.4.2. Влияние вида животного на эффективность интеграции рекомбинантной ДНК в сперматогенные клетки.

3.4.3. Влияние дозы введения генной конструкции и способа подготовки генной конструкции на эффективность переноса рекомбинантной ДНК в клетки-мишени.

4 ВЫВОДЫ.

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Генетика», 03.02.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генетическая трансформация половых клеток кроликов и хряков с использованием ретровирусных векторов»

Актуальность темы.

Разработка методов генетической модификации животных, основанных на использовании половых клеток в качестве векторов для переноса генов, рассматривается как альтернатива традиционному методу получения трансгенных животных - микроинъекции ДНК в пронуклеус зигот [Коржикова C.B., 2002; Савченкова И.П. и др., 2006; Новгородова И.П. и др., 2008; Эрнст JI.K. и др., 2008; Волкова H.A. и др., 2011]. Интерес к данному направлению связан, прежде всего, с природной способностью клеток сперматогенного эпителия самцов поглощать чужеродную ДНК (чДНК) и переносить ее в яйцеклетку посредством оплодотворения [Gandolfi F., 1998]. При этом интегрированная в геном организма чДНК может устойчиво передаваться в ряде поколений. Ввиду проведения манипуляций на:взрослых животных значительно сокращаются материальные и временные затраты на получение трансгенного потомства.

Несмотря на то, что для трансформации половых клеток (спермиев) используют ряд методов (липофекцию, электропорацию и вирусную трансдукцию), сегодня не разработаны системы, позволяющие эффективно доставлять рекомбинантную ДНК в данные клетки-мишени. Разработка эффективного метода генетической модификации половых клеток позволит получить простой и удобный способ создания трансгенных животных, т.к. искусственное осеменение давно успешно используется в сельскохозяйственной практике.

Одним из возможных путей решения данной проблемы является трансформация половых клеток на ранних стадиях их дифференцировки с использованием генных конструкций, полученных на основе рекомбинантных ретровирусов.

Цель и задачи.

Исходя из вышеизложенного, целью диссертационной работы явилось изучение эффективности использования ретровирусных векторов для генетической трансформации половых клеток хряков и самцов кроликов.

Для достижения указанной цели были поставлены и решены следующие задачи:

1. Изучить компетентность клеток сперматогенного эпителия семенников кроликов и хряков к ретровирусным векторам in vitro.

2. Осуществить трансформацию клеток сперматогенного ряда прямым введением генных конструкций в семенники кроликов и хряков in vivo.

3. Определить факторы, влияющие на эффективность трансформации клеток сперматогенного эпителия семенников кроликов и хряков in vivo (кратность введения, концентрация и тип используемого препарата).

4. Изучить результативность генетической трансформации сперматогенных клеток кроликов и свиней in vivo генными конструкциями, содержащими кДНК инсулина человека.

5. Исследовать характер интеграции и экспрессии рекомбинантной ДНК в клетках сперматогенного эпителия семенников кроликов и хряков.

Научная новизна.

Впервые исследованы механизмы доставки рекомбинантной ДНК в клетки сперматогенного эпителия кроликов и хряков посредством использования ретровирусных векторов. Изучены факторы, влияющие на эффективность генетической модификации клеток сперматогенного ряда in vivo. Дана характеристика паттернов интеграции и экспрессии рекомбинантных генов (GFP, инсулин) в половых клетках самцов кроликов и хряков.

Практическая значимость.

Отработан метод введения генных конструкций в семенники самцов кроликов и хряков in vivo, позволяющий трансформировать клетки сперматогенного ряда с эффективностью до 0,48±0,12 и 0,57±0,10%, соответственно. Оптимизированы условия введения ретровирусных векторов в органы-мишени: отработан способ подготовки генных конструкций для инъекций и определена концентрация генных конструкций, эффективная для интеграции рекомбинантной ДНК в клетки сперматогенного эпителия. Показана способность трансформированных сперматогоний к дальнейшей дифференцировке. Доказано наличие рекомбинантной ДНК в спермиях опытных животных по достижении ими половой зрелости.

Основные положения, выносимые на защиту

• Опосредованный ретровирусами перенос генов как способ генетической трансформации клеток сперматогенного ряда in vitro и in vivo.

• Способ подготовки, концентрация, кратность введения ретровирусных векторов в семенники кроликов и хряков in vivo как факторы, влияющие на результативность трансгенеза.

• Характер интеграции и экспрессии рекомбинантной ДНК в клетках сперматогенного эпителия кроликов и хряков.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на международной конференции: «ЕС-Россия: 7-я Рамочная программа в области биотехнологии, сельского, лесного, рыбного хозяйства и пищи»», Уфа, 2010 г.; на научных конференциях Центра биотехнологии и молекулярной диагностики животных ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии.

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы, в том числе в центральных научных журналах, рекомендованных ВАК (Достижения науки и техники АПК, Сельскохозяйственная биология) - 2.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 102 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты и обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Диссертационная работа содержит 11 таблиц и 16 рисунков. Библиографический список включает 161 источников, в том числе 121 на иностранных языках.

Похожие диссертационные работы по специальности «Генетика», 03.02.07 шифр ВАК

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Лоцманова, Наталья Сергеевна, 2011 год

1. Абдрахманов, И. К. Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих / Абдрахманов И. К. // Автореф. диссер. канд. биол. наук.- Дубровицы. 2001. С. 22.

2. Алиев, A.A. Экспериментальная хирургия / Алиев A.A.// М.: НИЦ Инженер. 1998. -445с.

3. Баранов, B.C. Включение макромолекул в половые клетки самцов мышей при помощи электропорации и диметилсульфоксида / Баранов B.C., Гапала И., Грияч П. // Цитология и генетика. 1990. - Т.24. - №3. - С.3-7.

4. Брем, Г. Экспериментальная генетика в животноводстве / Брем Г., Кройслих X., Штранцингер Г. // М.:РАСХН. 1995. С.326.

5. Волкова, JT.A. Эффективность генетической трансформации соматических и эмбриональных клеток животных с использованием различных типов клеток — упаковщиц / Волкова JI.A. // Автореф. дисс. канд. биол. наук.- Дубровицы. 2005. С. 25.

6. Волкова, H.A. Генетическая трансформация сперматогоний петухов in vitro и in vivo / Н.А.Волкова, H.A. Зиновьева, JI.A. Волкова, Т.О. Котова, Л.К. Эрнст // Доклады РАСХН,- 2011. -№1.-С. 39-41

7. Галат, В.В. Методы микроинъекции спермиев как инструмент вспомогательной репродукции и изучения биологии оплодотворения / Галат В.В. //Онтогенез. 2000.- Т.31. - №1. - С.5-13.

8. Гвоздь, И.М. Изучение закономерностей и оптимизация экспрессии рекомбинантных белков в молоке соматических и генеративныхтрансгенных сельскохозяйственных животных / Гвоздь И.М. // Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Дубровицы. - 2004. - 21с.

9. Грезина, Н.М. Гистологические и цитологические особенности молочной железы кроликов как объекта генно-инженерных манипуляций / ГрезинаН.М. //Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Дубровицы. - 2004. - 21 с.

10. Данилова, Л.В. Сперматогонии, сперматоциты, сперматиды//В кн.: Современные проблемы сперматогенеза. / Данилова Л.В. // М: Наука. -1982. С.25-72.

11. Зиновьева, Н. А. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве / Н. А.Зиновьева, А. Н.Попов, Л. К. Эрнст, Н.С.Марзанов, В.В.Бочкарев, Н.И.Стрекозов, Г.Брем // Дубровицы, 1998.- 47 с.

12. Зиновьева, Н. А. Трансгенные животные и возможности их использования: молекулярно-генетические аспекты трансгенеза вживотноводстве / Зиновьева H. А., Эрнст JI. К., Брем Г. // Дубровицы: ВИЖ. 2001.С. 128.

13. Коржикова, C.B. Выделение, характеристика и транплантация сперматогоний типа А хряка / Коржикова C.B. //Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Дубровицы. - 2002. - 19с.

14. Кузнецов, А. В. Исследования переноса чужеродных генов сперматозоидами в яйцеклетки мидии Mytilus Galloprovincialis Lam. / Кузнецов А. В., Пиркова A.B., Дворянчиков Г.А. //Онтогенез. 2001. - Т.32. -№4. - С.309-318.

15. Меркурьева, Е.А. Генетика / Меркурьева Е.А. //М.: Агропромиздат. 1991. -247с.

16. Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д.С. Саркизова, Ю.П. Перова. М.: Медицина, 1996. - 544 с.

17. Новгородова, И.П. Характеристика половых клеток семенников кроликов как мишеней для генно-инженерных исследований / Новгородова И.П. // Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Дубровицы. - 2004. - 21с.

18. Новое в клонировании ДНК. Методы. / Под ред. Д. Гловера. М.: Мир, 1989. - 368с.

19. Прасолов, B.C. Ретровирусные векторы эффективная система переноса и экспрессии чужеродных генов в клетках млекопитающих / Прасолов B.C. // Молекулярная биология. 1989. Т. 23, вып. 2. С. 8-12.

20. Райцина, С.С. Регенерация семенников у млекопитающих//Бюл. эксперим. биологии и медицины / Райцина С.С. // 1956. №9. - С.51-55.

21. Райцина, С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции / Райцина С.С. // М.: Наука. 1985. - 207с.

22. Райцина, С.С. Травма семенника и аутоиммунитет / Райцина С.С. // М.: Медицина. 1970. - 182с.

23. Райцина, С.С. Цикл сперматогенного эпителия и кинетика сперматогенеза у млекопитающих//Успехи современной биологии./ Райцина C.C.II 1967. Т.63. - С.135-153.

24. Реунов, A.A. Сперматогенез многоклеточных животных/ Реунов A.A. // М.: Наука. 2005. - 123с.

25. Реунов, A.A. Ультраструктурные аспекты сперматогенеза многоклеточных животных/ Реунов A.A. //Автореф. дисс. канд. биол. наук. -Владивосток. -1998. 42с.

26. Ромейс, Б. Микроскопическая техника / Б. Ромейс. Пер. с нем. В .Я. Александрова, З.И. Кроковой / Ромейс, Б // М.: Изд.-во иностр. лит.-ры, 1953.- 718с.

27. Рузен-Ранге, Э. Сперматогенез у животных / Рузен-Ранге Э //М.: Мир. 1980. -255с.

28. Сурикова, К.К. К вопросу о цитологических и гистохимических изменениях при сперматогенезе//Вестник ЛГУ / Сурикова K.K.// Т.15. 1957.- С.53-71.

29. Титова, В.А. Молекулярно-генетические аспекты использования ретровирусных векторов для трасгенеза в животноводстве /В.А.Титова // Автореф. дисс. канд. биол. наук. Дубровицы, 2001. - 22 с.

30. Фалин, JI.И. Развитие половых желез и происхождение половых клеток в эмбриогенезе человека//Архив анатомии, гистологии, эмбриологии/ Фалин Л.И.// 1968. Т.54. - №2,- С.3-27.

31. Филатов, Ф.П. Рекомбинантный поверхностный белок вируса гепатита В, экспонирующий иммунодоминанту мембранного белка вируса ВИЧ1/ Филатов Ф.П., Тугизов Ш.М., Савченкова И.П // ДАН. 1992. -Т.327(1). - С.172-175.

32. Хесин, Р.Б. Непостоянство генома / Хесин Р.Б// М.: Наука. 1984.-471с.

33. Хэм, А. Гистология: Пер. с англ./ Хэм А., Кормак Д// М.: Мир. -1983. -Т.5.- 296с.

34. Эрнст, Л. К. Некоторые аспекты использования ретровирусных векторов для переноса чужеродной ДНК in vivo и in vitro / Эрнст Л. К., Зиновьева Н. А., Волкова Н. А., Титова В. А // М.: РАСХН. 2003. 84 с.

35. Amann, R.P. Sperm production rates / Amann R.P //In: Johnson A.D., Gomes W.R., VanDemark N.L. The Testis. Academic Press, New York. 1970. -V.l. -P.433-482.

36. Archibald, A.L. Molekular Biological Approaches and their Possible Aplications / Archibald, A.L// in J.W. Owen and R.F.E. Axford (eds), Breeding for Disease Resistance in Farm Animals, C.A.B. International, UK. 1991. -P.100-122.

37. Arezzo, F. Sea urchin sperm as a vector of foreign genetic information / Arezzo F//Cell Biol. Int. Rep. 1989. - V.13(4). - P.391-404.

38. Bachiller, D. Liposome-mediated DNA uptake by sperm cells/ Bachiller D., Schellander K„ Peli J/ZMol. Reprod. Dev. 1991. - V.30(3). - P. 194-200.

39. Behr, J.P. Cene transfer with synthetic cationic amphiphiles: Prospects for gene therapy /Behr J.P//Bioconjugate Chemistry. 1994. - V.5. - P.382-389.

40. Berardino, M. Development and chromosomal constitution of nuclear transplants derived from male germ cells / Berardino M., Hoffher M//J. of Exper. Zoology. 1976. - V.176( 1). - P.61-72.

41. Boulo, V. Transient expression of luciferarase reporter gene after lipofection of oyster (Crassostrea gigas) primary cell cultures/ Boulo V., Cadoret J.P., Le Marrec F//Mol. Marine Biol. Biotech. 1996. - V.5(3). - P. 167-174.

42. Braskett, B.G. Uptake of heterologous genome by mammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization / Braskett B.G., Baranska W., Sawicki W //Proc. Natl. Acad. Sci. 1971. - V.68. - P.353-357.

43. Brinster, R.L. Germline transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation / Brinster R.L., Avarbock M.R//Proc. Natl. Acad. Sci. 1994a. -V.91. -P.l 1303-11307.

44. Brinster, R.L. Spermatogonial stem cell transplantation, cryopreservation and culture / Brinster R.L., Nagano M//Semin. Cell. Dev. Biol. -1998. V.9(4). - P.401-409.

45. Brinster, R.L. No simple solution for making transgenic mice/ Brinster R.L., Sandgren E.P., Behringer R.R., Palmiter A.F//- 1989. V.59. - P.239-241.

46. Brinster, R.L. Spermatogenesis following male germ-cell transplantation / Brinster R.L., Zimmerman W//Developmental biology. 1994b. -V.91.-P.l 1298-11302.

47. Cadoret, J.P. Microinjection of bivalve eggs: application in genetics / Cadoret J.P., Gendreau S., Delecheneau J.M //Mol. Marine Biol. Biotech. 1997b. - V.6(l).-P.72-77.

48. Capecchi, M.R. High efficiency transformation by direct microinjection of DNA into cultured mammalian cells/ Capecchi M.R //Cell. -1980. V.22(27). - P.9139-9143.

49. Capecchi, R.L. Science / Capecchi R.L// 1989. V.244. - P. 1288-1292.

50. Capel, B. The battle of the sexes/ Capel B //Mechanisms of Development. 2000. - V.92. - P.89-103.

51. Castrillon, D.H. The human VASA gene is specifically expressed in the germ cell lineage/ Castrillon D.H., Quade B.J., Wang T.Y., Quigley C., Crum C.P//Proceedings National Academy of Sciences. 2000. - V.97. - P.9585-9590.

52. Castro, F.O. Introduction of foreign DNA into the spermatozoa of farm animals/ Castro F.O //Theriogenology. 1990. - V.34. - P. 1099-1110.

53. Clermont, Y. Kinetics of spermatogenesis in mammals: Seminiferous epithelium cycle and spermatogonial renewal/ Clermont Y //Physiol. Rev. 1972. -V.52. - P.198-236.

54. Clermont, Y. The cycle of the seminiferous epithelium in man/ Clermont Y. //Am. J. Anat. 1963. - V.l 12. - P.35-51.

55. Clermont, Y. Two classes of spermatogonial stem cells in thr monkey (Cercopithecus aethiops)/ Clermont Y//Am. J. Anat. 1969. - V.l26. - P.57-72.

56. Clermont, Y., Bustos-Obregon E. Re-examination of spermatogonial renewal in the rat by means of seminiferous tubules mounted «in toto»/ Clermont Y //American J. of Anatomy. 1968. - V.122. - P.237-247.

57. Clermont ,Y. Spermatogonial stem cells and their behavior in the seminiferous epithelium of rats and monkeys//In: Stem cells of renewing cell populanions/ Clermont Y., Hermo L. //Acad. Press. 1976a. - P.273-287.

58. Clermont, Y. Effect of a spermatogonial chalone on the growing rat testis/ Clermont Y., Mauger A //Cell and Tissue Kinetics. 1976b. - V.9. - P.99-104.

59. Clouthier, D.E. Rat spermatogenesis in mouse testis/ Clouthier D.E., Avarbock M.R., Maika S.D., Hammer R.L //Nature. 1996. - V.381. - P.418-421.

60. De la Fuente, J.Sperm mediated foreign DNA transfer experiments in different species/ De la Fuente J., Castro F.O., Hernandez 0//Presented at Biotech. USA, Ramada Renaissance Tech. Wored. Washington, DC. - November 27-29. -1990. -P.247-262.

61. De Rooij, D.G. Proliferation and differentiation of spermatogonial stem cells/ De Rooij D.G//Reproduction. 2001. - V.121. - P.347-354.

62. De Rooij, D.G. All yor wanted to know about spermatogonia but were afraid to ask/ De Rooij D.G., Russel L.D //J. of Andrology. 2000. - V.21. - P.776-798.

63. De Rooij, D.G. Regulation of proliferation and differentiation of stem cells in the male germ line/De Rooij D.G., van Dissel-Emiliani F.M.P//Stem Cells. 1997. -P.283-313.

64. De Rooji, D.G. Spermatogonial stem cells/ De Rooji D.G., Grootegoed J.A//Curr. Opin. Cell Biol. 1998. - V.10. - P.694-701.

65. Dobrinski, I. Germ cell transplantation from large domestic animals into mouse testes/ Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L //Molecular Reproduction and Development. 2000. - V.57(3). - P.270-279.

66. Dobrinski, I. Transplantation of germ cells from rabbits and dogs into mouse testes/ Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L //Biol. Reprod. 1999a. -V.61. - P.1331-1339.

67. Dolci, S. Combined action of stem cell factor, leukemia inhibitory factor and cAMP on in vitro proliferation of mouse primordial germ cells/ Dolci S., Pesce M., Felici M. de/Mol. Reprod. Dev. 1993. - V.35 - P. - 134-139.

68. Dym, M. Effects of x-rays on type A spermatogonia in the rat/ Dym M., Clermont Y//Anat. Rec. 1967. - V. 157 - P.238.

69. Dym, M. Role of the spermatogonia in the repair of the seminiferous epithelium following X-irradiation of the rat testis/ Dym M., Clermont Y//Amer. J. Anat. 1970. - V.128. - P.265-282.

70. Dym, M. Expression of c-kit receptor and its autophosphorylation in immature rat type A spermatogonia/ Dym M., Jia M.-C., Dirami G., Price J.M//Biology of reproduction. 1995 - Y.52. - P.8-19.

71. Ewing, L.L. Int. Rev. Physiol / Ewing L.L., Davis J.C., Zirkin B.R // 1980.-V.22.-P.41-115.

72. Forster, W. Gene transfer by electroporation/ Forster W., Neumann E//In: Electroporation and electrofiision in cell biology/Press. New York and London. 1989. - P.299-318.

73. Franca, L.R. Germ cell genotype controls cell cycle during spermatogenesis in the rat/ Franca L.R., Ogawa T., Avarbock M.R., Brinster R.L., Russell L.D//Biol. Reprod. 1998. - V.59(6). - P. 1371-1377.

74. Fransolini, M. Evidence for nuclear internalization of exogenous DNA into mammalian sperm cells/ Fransolini M //Mol. Reprod. and Dev. 1993. - V.34. - P.133-139.

75. Gähne, M.B. Electroporation of bovine spermatozoa to carry foreign DNA in oocytes/ Gähne M.B., Pothier F., Sirard M.A //Mol. Reprod. Dev. 1991. -V.29.-P.6-15.

76. Gandolfi, F. Spermatozoa, DNA binding and transgenic animals/ Gandolfi F//Trasgenic Research. 1998. - V.7. - P.147-155.

77. Gendreau, S. Transient expression of a luciferase reporter gene after ballistic introduction into Artemia franciscana (Crustacea) embrios/ Gendreau S., Lardans V, Cadoret J.P., Mialhe E //Aquaculture. 1995. - V.133. - P.199-205.

78. Gruendbaum, J. Sperm cells as vectors for generation of transgenic chickens / Gruendbaum J., Revel E., Yarns S., Fainsod A //J. Cell Biochem. -1991. Suppl.15. - P.194.

79. Hannah-Alava, A. Premeiotice studies of spermatogenesis/ HannahAlava A//Adv. Genet. 1965. - P.157-226.

80. Heller, C.G. Kinetics of the germinal epithelium in man/ Heller C.G., Clermont Y//Recent Progr. Hormone Res. 1964. - V.20. - P.545-571.

81. Hericson, B. Translocation heterozygoty in a boar/ Hericson B., Backstrom L//Herditas. 1964. - V.52. - P. 166-170.

82. Higashi, T. Hamster cell line suitable for transfection assay of transforming genes/ Higashi T., Sasai H., Suzuki F//Proc. Natl. Sci. 1990. - V.87.- P.2409-2413.

83. Hochi, S. Fate of exogenous DNA carried into mouse eggs spermatozoa/ Hochi S., Ninomiya T., Mizuno A., Honma M., Yulci A //Anim. Biotech. 1990. - V.l. - P.21-31.

84. Holstein, A.F. Organisation und Regulation der Gametenreifung /Holstein A.F //HVBG. 1999. - V.4. - P. 15-30.

85. Huguet, E. Foreign DNA introduced into the vas deferens is gained by mammalian spermatozoa/ Huguet E., Esponda P//Mol. Reprod. Dev. 1998. -V.51(l). - P.42-52.

86. Izadyar, F. Isolation and purification of type A spermatogonia from the bovine testis/ Izadyar F., Spierenberg G.T., Creemers L.B., den Ouden K., Dirk de Rooij D.G//Reproduction. 2002. - V.l24. - P.85-94.

87. Izadyar, F. Spermatogonia! stem cell transplantations/Molecular and Cellular Endocrinology/ Izadyar F., van Dissel-Emiliani F., van Pelt A., de Rooij D.G. // 2000. V.l69. - P.21-26.

88. Oakberg, E.F. Spermatogonial stem cell reneval in the mouse/ Oakberg E.F//Anat. Rec. 1971. - V. 169. - P.515-532.

89. Ogawa, T. Transplantation of testis germinal cells into mouse seminiferous tubules/ Ogawa T., Arechaga J.M., Avarbock M.R., Brinster R.L//International Journal of Developmental Biology. 1997. - V.41. - P. 111-122.

90. Ogawa, T. Leuorolide, a gonadotropin-releasing hormone agonist, enhances colonization after spermatogonial transplantation into mouse testes/ Ogawa T., Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L//Tissue Cell. 1998. -V.30(5). - P.583-588.

91. Ogawa, T. Transplantation of male germ line stem cells restores fertility in infertile mice/ Ogawa T., Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L//Nature Medicine. 2000. - V.6. - P.29-34.

92. Ogawa, T. Xenogeneic spermatogenesis following transplantation of hamster germ cells to mouse testes/ Ogawa T., Dobrinski I., Avarbock M.R., Brinster R.L //Biol. Reprod. 1999a. - V.60. - P.515-521.

93. Ogawa, T. Recipient preparation is critical for spermatogonial transplantation in the rat/ Ogawa T., Dobrinski I., Brinster R.L. //Tissue Cell. -1999b. V.31.-P.461-472.

94. Orsi, A.M. Definition of the stages of the cycle of the seminiferous epithelium of the opossum/ Orsi A.M., Ferreira A.L//Acta anat. 1978. - V.100. -P.153-160.

95. Ortavante, R. Action de la duree d' eclairment sur les processus spermatogenetuques chez le Bolier/ Ortavante R//C. r. Soc. Boil. 1956. - V.150.P.471-474.

96. Ortavante, R. Spermatogenesis and morphology of spermatozoon/ Ortavante R//In: Reproduction in domestic animals. 1959. - V.7. - P. 1-51.

97. Parreira, C.G. Development of germ cell transplants in mice/ Parreira C.G., Ogawa T., Avarbock M.R., Franca L.R., Brinster L.R., Russel L.D//Biology of Reproduction. 1998. - V.59. - P.1360-1370.

98. Passoni, L. Sperm cells mediated gene transfer: presence of foreign DNAinto bovine blastocyst obtained from in vitro fertilization/ Passoni L., Mauri L., Luciano A., Pocar P., Ajmone-Marsan//A preliminary report. 1995. - P.427-428.

99. Pittoggi, C. Complete culture system for the chick embryo / Pittoggi C., Beraldi R//Nature. 2006. Vol. 331. P. 70-72.

100. Reis, M.M. Xenogeneic transplantation of human spermatogonia/ Reis M.M., Tsai M.C., Schlegel P.N., Feliciano M., Raffaelo R., Rosenwaks Z., Palermo D//Zygote. 2000. - V.8. - P.97-105.

101. Rex, A. Hess. Spermatogenesis/ Rex A. Hess //Biol. Reprod. 1999. -V.4. - P.539-545.

102. Robertson, E.J. Using embryonic stem cell to introduce mutations into the mouse germ line/ Robertson E.J//Biol. Reprod. 1991. - V.44. - P.238-245.

103. Rodriguez, A. Exogenous cloned DNA can penetrate living sperm cells/ Rodriguez A., Castro F. O., Guillen J. et al. //Advances in Gene Technology: Feeding the World in the 21st Century. 1991. - P.53.

104. Roosen-Runge, E.C. The process of spermatogenesis in Animals/ Roosen-Runge E.C //Cembridge Univ. Press. 1977. - P.326-335.

105. Roosen-Runge, E.C. The process of spermatogenesis in mammals/ Roosen-Runge E.C//Biol. Rev. 1962. - V.37. - P.343.

106. Rose, J.K. A new cationic liposome reagent mediating nearly quantitative transfection of animal cells/ Rose J.K., Buonocore L. and Whitt M.A. //Biotechniques. 1991. - V. 10. - P.520-525.

107. Rossi, P. A novel c-kit transcript, potentially encoding a truncated receptor, originates within a kit gene intron in mouse spermatids/ Rossi P., Marziali G., Albanesi C//Dev. Biol. 1992. - V.152. - P.203-207.

108. Roth, E. Untersuchungen zur Keimdrusenentwicklung bei mannlichen Veredelten Landschweinen/ Roth E., Smidt D//Zuchtungs kunde. 1970. - B.2. -S. 144-160.

109. Rottman, O. Liposomemediated gene transfer via spermatozoa into avian egg cells/ Rottman O., Antes R., Hofer P., Maierhofer G //J. Anim. Breed. Genet. 1991. - V. 109. - P.64-70.

110. Rottman, O. A method for transferring organic and inorganic substances to egg cells and somatic cells of animals and composition for use therein/ Rottman O., Hoffer P//World patent WO 87/05325. 11.09.1987. P.227-236.

111. Ruysschaert, J.-M. A novel cationic amphiphile for transfection of mammalian cells/ Ruysschaert J.-M., Ouahabi A., Willeaume V//Biochem. and Bioph. Res. Comm. 1994. - V.203(3). - P. 1622-1628.

112. Sato, M. Direct injection of foreign DNA into mouse testis as a possible alternative of sperm-mediated gene transfer/ Sato M., Iwase R., Kasai K., Tada N//Animal Biotechnology. 1994. - V.5(l). - P.19-31.

113. Spadafora, C. Sperm cells and foreign DNA: a controversial relation. Bioassays/ Spadafora C// 1998. P.302-324.

114. Sperandio, S. Sperm-mediated DNA transfer in bovine and swine species/ Sperandio S., Lulli V., Bacci M., Forni M., Maioni B//Anim. Biotech. -1996. -V.7. -P.59-77.

115. Stewart, C.L. Stem cells from primordial genu cells can reenter the germ line/ Stewart C.L//Dev. Biol. 1994. - V.161. - P.626-628.

116. Swierstra, E.E. Cytology and kinetics of spermatogenesis in the rabbit/ Swierstra E.E., Foote R.H//J. Reprod. Fertil. 1963. - V.5. - P.309-322.

117. Tan, J.C. The dominant W42 spoting phenotype results from a missence mutation in the c-kit receptor kinase/ Tan J.C., Nocka K., Ray P., Traktman P., BesmerP //Science. 1990. - V.247. - P.209-212.

118. Tsai, H.J. Sperm as a carrier to introduce an exogenous DNA fragment into the oocyte of Japanese abalone (Haliotis divorsicolor suportexta/ Tsai H.J., Lai C.H., Yang H.S //Transgenic Res. 1997. - V.6(l). - P.85-95.

119. Uckert, W. Retrovirus-mediated gene transfer in cancer therapy/ Uckert W., Walther W//Pharmac. Ther. 1994. - V.63. - P.323-247.

120. Van der Kooy, D. Why stem cells?/ Van der Kooy D., Weiss S//Science. 2000. - V.287. - P.1439-1441.

121. Watt, F.M. Out of Eden: stem cells and their niches/ Watt F.M., Hogan B.L//Science. 2000. - V.287. - P. 1427-1430.

122. Wheeler M.B. Development and validation of swine embryonic stem cells: a review/ Wheeler M.B//Reprod. Fertil. Dev. 1994. - V.6. - P.563-568.

123. Yamazaki, Y. In vivo gene transfer to mouse spermatogenic cells by deoxyribonucleic acid injection into seminerous tubules and subsequent electroporation/ Yamazaki Y., Fujimoto H., Ando H//Biol. Reprod. 1998. - V.59. - P.1439-1444.

124. Yamazaki, Y. In vivo gene transfer to mouse spermatogenic cells using green fluorescent protein as a marker/ Yamazaki Y., Yagi T., Ozaki T., Imoto K//J. Exp. Zool. 2000. - V.286(2). - P.212-218.

125. Yu, Z. Gene expression profiles in different stages of mouse spermatogenic cells during spermatogenesis/ Yu Z., Guo R., Ge Y //Biol. Reprod. -2003.-V.69(l).-P.37-47.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.