ДНК-гидролизующая и протеолитическая активность анти-ВИЧ-антител (абзимов) в динамике ВИЧ-инфекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Харитонова, Марина Александровна

• Харитонова, Марина Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Харитонова, Марина Александровна

Оглавление.

Список сокращений.

Введение.

Глава I. Современные представления о роли каталитических антител при аутоиммунной патологии и ВИЧ-инфекции (обзор литературы).

Глава II. Материалы и методы исследования.

Глава III. Характеристика иммунного стату са и анализ каталитической активности антител у ВИЧ-инфицированных в стадии ГЛАП.

3.1. Оценка иммунного статусау ВИЧ-инфицированных в стадии ГЛАП.

3.2. Оценка иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных в стадии ГЛАП с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

3.3. Сопоставительный анализ количественных параметров антител к ВИЧ, к структурным белкам gag, env, pol, провирусной нагрузки у ВИЧ-инфицированных в стадии ГЛАП с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

3.4. Оценка иммунного статуса, ДНК-гидролизующей и протеолитической активности антител у ВИЧ-инфицированных в стадии ГЛАП с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

Глава IV. Характеристика иммунного стату са и анализ каталитической активиости антител у ВИЧ-инфицированных в стадии upe-СПИД.

4.1. Оценка иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных в стадии пре-СПИД.

4.2. Оценка иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных в стадии пре-СПИД с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

4.3. Сопоставительный анализ количественных параметров антител к ВИЧ, к структурным белкам gag, env, pol, провирусной нагрузки у ВИЧ-инфицированных в стадии пре-СПИД с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

4.4. Оценка иммунного статуса, ДНК-гидролизующей и протеолитической активности антител у ВИЧ-нфицированных в стадии пре-СПИД с медленно и быстро прогрессирующим вариантом течения заболевания.

Глава V. Изучение ассоциированности антигенов HLA-систсмы с высокой и низкой каталитической активностью антителу ВИЧ-инфицированных.

У1.3аключение.

УН.Практическис рекомендации.

VIII. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ДНК-гидролизующая и протеолитическая активность анти-ВИЧ-антител (абзимов) в динамике ВИЧ-инфекции»

Одной из важнейшей медико-социальной проблемой в России и во всем мире является неуклонный рост заболеваемости ВИЧ-инфекции (Покровский В.В., 1998, 2001). Несмотря на стремительное развитие исследований по этой проблеме (Наркевич М.И., 1993; Сизякина Л.П., 2002, 2004; Сидорович И.Г., Николаева И.А., 2003,2004; Montagnier L., 1992; Haynes В. Et al., 1998, 2000) и успехи медицинской науки и практики остановить развитие пандемии ВИЧ-инфекции, а также разработать эффективные методы профилактики до настоящего времени не удается (Покровский В.И., 2001, 2003; Vella et al., 1996, 1999). Кроме того, многочисленные исследования, посвященные проблеме ВИЧ-инфекции не находят однозначного решения (Орлова В.М., 1996; Покровский В.В., 2001; Tomes Н., 1999), в том числе и при расшифровке механизмов патогенеза ВИЧ-инфекции и особенностей формирования различных вариантов течения заболевания (Орлова В.М., 1999; Калинина Н.М., Кетлинский и др., 1998; Шемшура А.Б., 2000; Шестакова И.В., 2003; Cozzi Lepri А., 1996; Just J.J., 1997; Rozenberg Z.F., Fauci A.S., 1998). Неоднозначен и проблематичен подход к роли вируснейтрализующих антител при формировании гуморального иммунного ответа у ВИЧ-инфицированных. Однако характеристика этих параметров необходима в проведении объективных методов серологического скриннинга, определения клинической стадии заболевания, прогнозирования его течения с целыо выбора адекватных методов терапии, профилактики (Хаитов P.M., Глущенко М.В., 1992; Черноусов А.Д., Еремина О.Ф., 1993; Денисенко В.Б., 2000; Талеб Э. Т., 2001; Сизякина Л.П., 2003).

Несмотря на интенсивное изучение гуморального звена иммунного ответа к ВИЧ, все еще нет ясного понимания о значимости вируснейтрализующих антител в контролировании или предотвращении ВИЧ-инфекции.

Известно, что механизм нейтрализации вируса анти-ВИЧ-антителами характеризуется элиминацией вирусных частиц или растворимых вирусных белков из плазмы путем образования циркулирующих иммунных комплексов с последующей их утилизацией при участии комплемента и макрофагально-моноцитарной системы. Кроме того, анти-ВИЧ-антитела обеспечивают процесс антитело-зависимой клеточной цитотоксичности (Cao Y., 1998; Мс Inerney T.L., 1999; Zagury J.F. et al., 1999; Mofenson L.M., 2000).

Известно, что нейтрализующая способность антител зависит как от вирусных факторов (вариабельности первичной структуры антигенных детерминант, их пространственных конформационных характеристик, определяющих доступность эпитопов на поверхности вируса или клеточной мембраны), так и от особенностей Fab- и Fc- фрагментов специфических антител, образующихся в динамике ВИЧ-инфекции. Вирус-нейтрализующие свойства антител неоднозначны, зависят от стадии заболевания, скорости прогрессии ВИЧ-инфекции.

Открытие природной ферментативной активности антител у больных с аутоиммунной патологией (Власов А.В., 1999, 2001, 2002; Канышкова Т.Г., 1999, 2000, 2001; Барановский А.Г., Андриевская О.А., 1998, 1999, 2001, 2003; Бунева В.Н., Невинский Г.А., 1999, 2000, 2001, 2002, 2003, 2004; Сучков С.В., Габибов А.Г., Огнева Е.А., 2000, 2002, 2003; Lerner R., Tramontano А., 1987, 1988; Green В et al., 1999), лимфопролиферативными заболеваниями (Козырь А.В., Габибов А.Г., 1998), вирусными гепатитами и ВИЧ-инфекцией (Генералов И.И., Новиков Д.К., 1998, 1999; Габибов А.Г., Фрибуле А., Тома Д., 2002; Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., Семенов Д.В., Бунева В.Н., 2002, 2003, 2004), существенно изменило традиционные представления о роли и функции иммуноглобулинов в иммунной системе организма. Возможно, что появление антител с каталитической активностью является общей тенденцией ответа иммунной системы организма при тяжелых поражениях. Являются ли ферментативные свойства антител дополнительным источником поражения организма или это все-таки общая тенденция ответа иммунной системы при тяжелой патологии? Каков уровень активности абзимов, их субстратной специфичности? Обладают ли они сродством к гидролизуемым субстратам, зависят ли от ионов одно и двухвалентных металлов и как можно использовать эти критерии в клинической практике с целью диагностической и прогностической оценки течения заболеваний? Вот далеко не полный перечень вопросов, возникающих при оценке роли и значимости абзимов в иммунопатогенезе ВИЧ-инфекции.

Между тем в литературе практически отсутствуют данные о протеолитической и ДНК-гидролизующей активности анти-ВИЧ-антител (абзимов) в процессе развития ВИЧ-инфекции. Очевидно, что изучение этих свойств иммуноглобулинов является весьма актуальным и позволит прояснить некоторые аспекты иммунопатогенеза ВИЧ, обеспечит улучшение диагностических и прогностических критериев течения заболевания и контроля за эффективностью проводимой терапии.

Цель исследования

Изучить ДНК-гидролизующую и протеолитическую активность анти-ВИЧ-антител (абзимов) в динамике ВИЧ-инфекции при формировании различных вариантов течения заболевания.

Задачи исследования

1 .Определить особенности иммунного статуса в различные стадии ВИЧинфекции при формировании быстрого и медленного вариантов течения заболевания.

2.Выявить динамику содержания анти-ВИЧ-антител (абзимов), обладающих ДНК-гидролизующей и протеолитической активностью у пациентов в различные стадии ВИЧ-инфекции.

3.Определить особенности гидролизующих свойств абзимов при медленном и быстром вариантах течения ВИЧ-инфекции.

4.Провести корреляционный анализ ДНК-гидролизующей и протеолитической активности абзимов и параметров иммунного статуса.

5. Вычислить ассоциативную связь между HLA системой и свойствами анти-ВИЧ-антител (абзимов) IgM и IgG классов обладающих каталитической активностью при ВИЧ-инфекции.

Научная новизна работы

1. Впервые изучена ДНК-гидролизующая и протеолитическая активность абзимов IgM и IgG классов на различных стадиях ВИЧ-инфекции, а также при быстрой и медленной скорости прогрессии заболевания.

2. В динамике ВИЧ-инфекции возрастает содержание анти-ВИЧ-антител (абзимов) и степень их каталитической активности.

3. Абзимы IgM класса обладают более высокой степенью ДНК-гидролизущей и протеолитической активности в стадии ГЛАП, a IgG класса - в стадии пре-СПИД.

4. Абзимы усиливают комплемент-независимую цитотоксичность NK-клеток в динамике заболевания и служат дополнительным источником патологических поражений при ВИЧ-инфекции. Определение уровня активности абзимов и их субстратной специфичности может использоваться как один из признаков развития аутоиммунных реакций при ВИЧ-инфекции.

5. Установлено, что ВИЧ-инфицированные носители антигенов HLA В7, В27 ассоциированные со слабым иммунным ответом и медленным вариантом течения заболевания проявляют низкую каталитическую активность.

Больные ВИЧ, носители антигенов HLA В8—ассоциированны с сильным типом иммунного ответа, и у них возможно формирование быстро прогрессирующего варианта течения заболевания и высокой каталитической активности, увеличивающей возможность развития аутоиммунной патологии.

Практическая значимость работы

Уровень гидролизующей активности абзимов определяется стадией заболевания, его формой и может служить одним из диагностических критериев в оценке варианта течения ВИЧ-инфекции.

Материалы работы могут быть использованны в клинической практике для диагностической и прогностической оценки течения ВИЧ-инфекции, для разработки новых методов терапии и получения биокатализаторов с уникальной специфичностью.

Положения, выносимые на защиту

Установлено, что в стадии ГЛАП у ВИЧ-инфицированных абзимы IgM и IgG классов обладают ДНК-гидролизующей и протеолитической активностью. Причем ДНК-гидролизующая активность абзимов IgM класса обнаружена у большего количества пациентов, нежели абзимов с подобными свойствами IgG класса, что имеет место и при быстрой скорости прогрессии заболевания.

Протеолитическая активность абзимов IgM и IgG класса выявлена у одинакового количества пациентов.

В стадии пре-СПИД происходит увеличение количества пациентов, содержащих в сыворотке абзимы IgG класса с ДНК-гидролизующей и протеолитической активностью. Причем, количество пациентов с ДНК-гидролизующей активностью абзимов IgG класса, преобладает при быстрой скорости прогрессии течения ВИЧ-инфекции; в то время как абзимы IgM класса проявляют свои ДНК-гидролизующие свойства у ВИЧ-инфицированных при медленном течении заболевания. Количество пациентов с протеолитической активностью абзимов IgG класса выше при быстрой скорости течения заболевания, в то время как способность анти-ВИЧ-антител (абзимов) IgM класса к протеолизу незначительно повышается у обследованных при медленной прогрессии течении заболевания.

Установлено, что у ВИЧ-инфицированных носителей антигенов HLA В7, В27 обнаруживается более низкая каталитическая активность абзимов, чем у носителей антигенов HLA В8.

Внедрение результатов Материалы диссертации включены в лекции и семинарские занятия на кафедре клинической иммунологии и аллергологии ФПК и ППС ГОУ ВПО Ростовского государственного медицинского университета, используются в работе иммунологической лаборатории городской (для исследования на ВИЧ-инфекцию).

Апробация работы Материалы диссертации изложены в 9 печатных работах, а также представлены в форме докладов на 56 итоговой научной конференции студентов, молодых ученых и специалистов (Ростов-на-Дону, 2000 г., 2002 г.), Ill-научной сессии Рост.ГМУ (Ростов-на-Дону, 2000 г.), юбилейной научнопрактической конференции «Дни иммунологии и аллергологии в Донском крае» (Ростов-на-Дону, 2005 г.).

Структура и объем работы. Диссертация представлена на 124 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, трех глав материалов собственных исследований, заключения, практических рекомендаций, выводов и списка литературы, включающего 177 источников, в том числе 81 зарубежный. Работа иллюстрирована 30 таблицами и 23 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Харитонова, Марина Александровна

Выводы

1. Изменения показателей иммунного статуса при ВИЧ-инфекции заключались в выраженном уменьшении количества CD4+-лимфоцитов, увеличении С08+-лимфоцитов, инверсии иммунорегуляторного индекса, увеличении количества В-лимфоцитов и уровня циркулирующих иммунных комплексов, которые наиболее выражены в стадии пре-СПИД; интенсивность этих процессов характерна для неблагоприятного варианта течения заболевания.

2. В динамике ВИЧ-инфекции увеличивалось количество пациентов, содержащих абзимы и изменялась степень их каталитической активности. Абзимы IgM класса обладали более высокой по сравнению с абзимами IgG класса степенью ДНК-гидролизующей активности в стадии ГЛАП. Протеолитическая активность анти-ВИЧ-антител (абзимов) IgM и IgG классов выявлялась в стадии ГЛАП у одинакового количества пациентов.

В стадии пре-СПИД ДНК-гидролизующая активность абзимов IgM класса снижалась, а у абзимов IgG класса эта функция нарастала. Протеолитические свойства абзимов IgG класса в стадии пре-СПИД обнаружены у больных ВИЧ-инфекцией в большей мере, чем в стадии ГЛАП, но степень этой активности оставалась низкой во всех исследуемых случаях.

3. Установлено изменение каталитической активности в зависимости от скорости прогрессии заболевания. В стадии ГЛАП количество пациентов с ДНК-гидролизующей активностью абзимов IgM класса выше при быстрой скорости прогрессии. Абзимы с подобными свойствами IgG класса преобладали при медленной прогрессии ВИЧ-инфекции. Протеолитическая активность абзимов IgM и IgG классов не обнаруживала такой зависимости. В стадии пре-СПИД-указанные изменения в большей степени проявлялись при быстром варианте течения заболевания. Высокая ДНК-гидролизующая активность абзимов в стадии ГЛАП коррелировала с содержанием IgG- класса в сыворотке, высокой провирусной нагрузкой и наличием в фенотипе HLA - В8; низкая - с содержанием IgA, IgM классов в сыворотке, низкой провирусной нагрузкой и наличием в фенотипе HLA -В7, В27. Коррелятивных взаимосвязей высокой протеолитической активности абзимов IgM и IgG классов обнаружено не было, в то время как низкая коррелировала с содержанием IgM в сыворотке пациентов.

В стадии пре-СПИД отмечалась корреляция ДНК-гидролизующей активности абзимов IgM с содержанием CD8+ клеток и IgM. Абзимы IgG- класса коррелировали с содержанием CD4+; CD8+ лимфоцитов и IgG. Протеолитическая активность абзимов IgM класса в стадии пре-СПИД коррелировала с уровнем циркулирующих иммунных комплексов, абзимов IgG класса - с содержанием CD 16+ клеток и IgG.

Установлено, что у ВИЧ-инфицированных носителей антигенов HLA В7, В27 анти-ВИЧ-антитела (абзимы) обладали более низкой каталитической активностью. У больных ВИЧ, носителей антигенов HLA В8, абзимы обладали более высокой каталитической активностью.

Появление абзимов при ВИЧ-инфекции, увеличение их каталитической активности при изучаемой патологии, возможно отражает развитие аутоиммунных процессов и скорость прогрессии заболевания, что может служить одним из диагностических и прогностических критериев в оценке стадии и варианта течения ВИЧ-инфекции

Практические рекомендации

Определение ДНК-гидролизующей и протеолитической активности абзимов IgM и IgG классов может служить дополнительным диагностическим критерием в оценке тяжести течения заболевания, его прогнозе, а также в оценке эффективности проводимой противовирусной терапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Харитонова, Марина Александровна, 2006 год

1. Амман А.Д. Синдром приобретенного иммунодефицита у детей // Иммунология. - 1989. - №1. - С.20.

2. Барановский А.Г., Канышкова Т.Г., Невинский Г.А., и др. Поликлональные антитела из крови и спинномозговой жидкости больных рассеянным склерозом эффективно гидролизуют ДНК и РНК // Биохимия.- 2001. -Т.63. -№11.- С.1459-1469.

3. Барановский А.Г., Матюшин В.Г., Власов А.В. и др. ДНК- и РНК-гидролизующие антитела из крови больных различными формами вирусного гепатита//Биохимия. 1997. -Т.62. - №12. - С.1590-1599.

4. Бернет Ф. Клеточная иммунология.- М.: Мир,197. 123 с.

5. Бунева В.Н., Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., и др. Каталитические антитела и их возможная биологическая функция // Вестник РАМН. — 2002. Т.2. - №3. - С.38-45.

6. Бунева В.Н., Невинский Г.А., Семенов Д.В., и др. Каталитически активные антитела (абзимы), индуцированные химически стабильными аналогами переходных состояний // Биохимия. 2001. - Т.65. - №11. -С.1459-1472.

7. Бунева В.Н., Невинский Г.А., и др. Биологические функции молока человека и его компонентов // Молекуляр. Биология. -2003. Т. 122. - №3.1. С.259 —271.

8. Бунева В.Н., Невинский Г.А., и др. РНК гидролизующие антитела из крови больных системной красной волчанкой // Биохимия. -1999. Т.62. -№5. - С.556-562.

9. Бунева В.Н., Невинский Г.А., и др. ДНК и РНК гидролизующие антитела из молока человека и их возможная биологическая роль // Молекуляр. Биология. -1999. Т.31. -№ 6. - С. 1082-1091.

10. Бунева В.Н., Невинский Г.А., и др. Моноклональные антитела к ДНК лучше гидролизуют РНК, чем ДНК // Молекуляр. Биология. -1999. -Т.355. № 3. - С.401-403.

11. Бунева В.Н., Андриевская О.А., Забара В.Г., и др. Иммуноглобулины класса М из сыворотки крови больных системной красной волчанкой эффективно расщепляют РНК // Молекуляр. Биология. — 2000. Т.32. - № 5. -С.908-915.

12. Бунева В.Н., Невинский Г.А., Канышкова Т.Г. Природные каталитически активные антитела (абзимы) в норме и при патологии // Биохимия. -2001.- Т.65. -№11. — С.1473-1487.

13. Власов А. В., Хельм М., Наумов В.А. и др. Особенности гидролиза тРНК аутоантителами из сыворотки крови больных некоторыми аутоиммунными и вирусными заболеваниями // Молекуляр. Биология. — 1999. -Т.ЗЗ. №5. - С.866-872.

14. Власов А. В., Андриевская О. А., Канышкова Т. Г. и др. Субстратная специфичность ДНК-и РНК-гидролизующих антител из крови больных полиартритом и аутоиммунным тиреоидитом // Биохимия. -1998. Т.32.- № 3. С.559-569.

15. Вогралик М.В., Ковальчук JI.B. Вторичные иммунодефицитные состояния. Иммунные заболевания системы крови. Горький, 1986. - С. 86.

16. Гараев М.М. Закономерности изменчивости основной нейтрализующей детерминанты ВИЧ: Автореф. дис. д-ра.биол. наук. -М., 1993.-48 с.

17. Габибов А.Г., Фрибуле А., Тома Д., и др. Антитела протеазы: подходы к индукции каталитического ответа // Биохимия. -2002. - Т.67. - №10. — С.1413-1427.

18. Денисенко В.М. Клинико-иммунологическая характеристика ВИЧ-инфекции у детей. Автореф. на соиск.к.м.н., Ростов-на-Дону, 1997. -23 с.

19. Земсков A.M., Земсков В.М., Караулов А.В., Новикова J1.A. Клиническая иммунология и аллергология. Краткий справочник: Учебн. пособие.-Воронеж.: ВГУ, 1997. С.223-233.

20. Земсков A.M., Земсков В.М. // Клиническая лабораторная диагностика. -1994. №4. - С.42.

21. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология. -СПб: Питер, 2001.- С.576.

22. Йегер JI., Клиническая иммунология и аллергология.-М.:Медицина,1994,Т.З. С. 177-192.

23. Караулов А.В. Клиническая иммунология и аллергология. М.: Медицинское информационное агенство, 2002. - С.651.

24. Канышкова Т., Семенов Д., Власов А. и др. ДНК- и РНК-гидролизующие антитела из молока человека и их возможная биологическая роль // Мол. биол. 1999. - Т.31, № 6. - С. 1082-1091.

25. Клиническая иммунология и аллергология // Под ред. Л.Йегера; Пер. с нем под ред. Р.В. Петрова. М.: Медицина, 1990. - Т.З. — С.3-98.

26. Клиническая иммунология и аллергология /Под редакцией Г.Лолора, Т.Фишера, А.Адельмана- М.:Практика, 2000. С.121-123.

27. Ковальчук Л.В. и др. Авт.св. №1 498498, 08.04.89 г.

28. Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Актуальные проблемы оценки иммунной системы человека на современном этапе // Иммунология. 1990. - N5. - С. 4-7.

29. Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Иммунодефицитные заболевания человека: Обзорная информация. М.: ВНИИМИ, 1984. - С.84. - (Сер. Терапия; Вып. 4.).

30. Ковальчук J1.B., Чередеев А.Н. Иммунорегуляторная роль моноцитов в норме и при иммунопатологии. М.: ВИНИТИ, 1991. - С.211 - (Итоги науки и техники. Сер. Иммунология; т. 27).

31. Козлов B.A. Клиническая иммунология в клинике внутренних болезней.-Новосибирск.: тип. СО РАМН, 1998.-С.30.

32. Козлов В.К., Егорова В.Н. Применение цитокинов в терапии ВИЧ-инфекции.-СПб.: изд.СпбГУ, 2000.-С.26.

33. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий.- М.,1995. С.ЗЗ.

34. Колесникова И.Н. Некоторые особенности механизмов апоптоза при ВИЧ- инфекции. Автореф. на соиск.к.м.н. Ростов-на-Дону.2000. -23 с.

35. Кузьменок О.И., Романовский А.А., Данилова Л.И., Пешняк Ж.В., Шкода О.П., Смольникова В.В., Кузьменкова Е.И., Кравчук В.Г., Потапнев М.П. Нарушения Т-клеточного звена иммунитета // Иммунология. — 2000. — № 2. С.44-48.

36. Кульберг А.Регуляция иммунного ответа.- М.: Медицина, 1986. 88 с.

37. Лабораторные методы исследования в клинике:Справочник/ Под ред.В.В. Меньшикова.- М.:Медицина,1987. -С. 1-29.

38. Леонов В.Л., Гордеев А.Н., Горлина И.К., Новоженов В.Г.Клиническая иммунология для врачей.- М.: 1997. -С. 45-97.

39. Лесков В.П., Чередев А.Н., Горлина Н.К., Новоженов В.Г. Клиническая иммунология для врачей. — Москва «Фармарус Принт», 1997. — С. 120.

40. Львов Н.Д. Никитина А.А. Свешников П.Г. и др.//Методы исследования в молекулярной, общей и медицинской вирусологии.- М.,1987.-С.176.

41. Новые даные о механизме действия и клиническом применении иммуномодулятора полиоксидония (для врачей всех специальностей). Выпуск второй // Под ред. Б.В. Пинегина. Москва, 2002. - С.150.

42. Новые методы иммуноанализа // Ред.У.П. Коллинз.- М.,1991. -С.39.

43. Орлова В.М. Иммунологическая и серологическая характеристика динамики ВИЧ-инфекции у детей. Автореф. на соиск. к.м.н. Краснодар, 1996.-24 с.

44. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1987. - С.415.

45. Петров Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев А.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: Метод, рекомендации. М., 1984. - С.35.

46. Петров Р.В., Манько В.М. Иммунодепрессоры.- М.,1972. -С. 79-121.

47. Петров Р.В., Михайленко А.А. Оценка состояния здоровья практически здоровых лиц с помощью иммунологических показателей // Иммунология. 1990.-№1.-С. 60-64.

48. Петров Р.В., Хаитов P.M., Искусственные антигены и вакцины.-М.:Медицина.-1988.- С.288.

49. Петров Р.В., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова А.А. Контроль и регуляция иммунного ответа. Л.:Медицина.-1981.- С.311.

50. Петров Р.В., Хаитов P.M., Орадовская И.В. Иммунологический мониторинг больших групп населения страны // Иммунология. 1992. -N4. - С. 43-45.

51. Петров Р.В., Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В. Клиническая иммунология: сегодняшние проблемы и будущие перспективы // Иммунология. 1982. -N6.-С. 21-25.

52. Покровский В.И., Покровский В.В., Потекаев С.Н. и др. Первый случай СПИД у гражданина СССР//Тер.архив.-1998.-№7.-С.10-14

53. Покровский В.И., Покровский В.В., Юрин О.Г. Клиничекая классификация ВИЧ- инфекции // Эпидемиология и инфекц. Болезни.-2001.-№1.-С.7-10.

54. Покровский В.И., Покровский В.В., Потекаев С.Н. и др. Первый случай СПИД у гражданина СССР//Тер.архив.-1998.-№7.-С.10-14.

55. Покровский В.И., Покровский В.В., Юрин О.Г. Клиничекая классификация ВИЧ- инфекции // Эпидемиология и инфекц. Болезни.-2001.-№1.-С.7-10.

56. Ройт А. Основы иммунологии. М.: Мир, 1991. - С.324.

57. Сапин М.Р. Иммунная система человека.- М. :Медицина, 1996. -С. 12-43.

58. Сизякина Л., Чернышов В.Н., Симованьян Э.Н. ВИЧ- инфекция у детей.-Ростов-на-Лону, 2001.- С.231.

59. Сизякина Л.П. ВИЧ-инфекция: проблемы и перспективы.Южно-Российский медицинский журнал. 2002. - №4 - С. 18.

60. Сизякина Л.П. Эффекты МП-1 на функциональную активность полинуклеаров больных ВИЧ-инфекцией. Иммунология, 2003, №1, т.24, С.4-6.

61. Сизякина Л.П., Амбалов Ю.М., Пушкарева С.Д., Думбадзе О.С., Пшеничная Н.Ю., Хоменко О. Клинико-иммунологические особенности коинфекции ВИЧ и хронического гепатита С. Южно-Российский медицинский журнал, 2002., №4, С. 22.

62. Сизякина Л.П., Андреева И.И., Шемшура А.Б., Чумакова Н.А. Особенности функционирования фагоцитов в динамике ВИЧ-инфекции у детей. Медицинская иммунология, 2001, т.З, №2, С.238-239.

63. Сизякина Л.П., Денисенко В.В. Перспективы использования современных иммуномодуляторов в терапии ВИЧ Int. jornal of immunoreabilitation 2000. - т.2. - №1. - C.67-73.

64. Сизякина Л.П., Докукина И.Л.,Плаван В.В. Эффективность использования полиоксидония в терапии ВИЧ-инфекции. Иммунология.-2002.- №5.- С.9 -11.

65. Сизякина Л.П., Докукина И.Л., Шемшура А.Б. Возможность использования гранулоцитарного колонистимулирующего факторафимрастина) в течении ВИЧ-инфекции.Иммунология, 2000., №6. С. 1012.

66. Сизякина Л.П., Коненков В.И., Талеб Э. Роль аллельного полиморфизма генов ИЛ-4 в формировании иммунной недостаточности при ВИЧ. Медицинская иммунология. 2001. - т.З. - № 2. - С.238.

67. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н. Иммуномодулирующие эффекты нейпогена и полиоксидония в лечении ВИЧ-инфекции EAACI.-2002.- С.-54.

68. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н Протективные свойства и микробицидная активность полиоксидония при местном применении у ВИЧ-инфицированных женщин. lXPocc. националь-ный конгресс"Человек и лекарство".2002, С. 240.

69. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н. Микробицидная активность Полиоксидония при превентивном его использовании у дискордантных по серопозетивности к ВИЧ партнеров. 5 конгресс РААКИ, 2002., т-2, С. 424.

70. Сизякина Л.П., Т.Н.Кузина, Соколова Ю.В. Перспективы применения топических микробицидов в лечении ВИЧ-инфицированных Сб. "Механизм действия и клиническое применение поли-оксидония". Выпуск №3. ГНЦ-Институт Иммунологии МЗ РФ Москва, 2004, С. 72-75.

71. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н,Терновой М.В.,Денисенко В.Б. Возможности применения новых иммуномодуляторов в лечении ВИЧ-инфекции Медицинская иммунология, 2001, т.З, №2, С.237

72. Сизякина Л.П., Кузина Т.Н. Microbicidal activity of polyoxidonium in cases of its preventive use for HIV-seropositively discordant partners 12-th International Symposium on HIV & Emerging Infectious Diseasts. Toulon, 2002, p.000147.

73. Сизякина Л.П., Плаван B.B., Шемшура А.Б. Сравнительная характеристика результатов определения ИЛ-ip иммуноферментным методом и в РБТЛ с индометацином // Клин. лаб. диагност. 1996. - №2. -С.42-43.

74. Сизякина Л.П., Чернышев В.Н., Симованян Э.Н. ВИЧ-инфекции у детей.Монография, 2001, С.232.

75. Сизякина Л.П., Чернышев В.Н., Симованян Э.Н. ВИЧ-инфекции у детей. Монография, 2001,С.232.анкт-Петербурге-98" (к 100-летию акад.В.И.Иоффе). СПб., 1998. - С.49.

76. Сизякина Л.П., Шемшура А.Б., Чернышов В.Н. и др. Особенности макрофагального звена у детей, больных ВИЧ- инфекцией, при лечении ретровиром//Иммунология. 1995. - №5. - С.19-21.

77. Талеб Эли Таннус.Функциональная активность антител в динамике ВИЧ-инфекции Автореф. на соиск.к.м.н.Ростов-на-Дону, 2001. 23 с.

78. Фримель X., Брок И. Основы иммунологии. М.,1985. -С.ЗЗ.

79. Хаитов P.M. В-клеточная регуляция иммунной системы// Иммунология.1987.-№3.-С. 10-13.

80. Хаитов P.M. Рециркуляция стволовых и лимфоидных клеток: значение для иммуногенеза. М.гВИНИТИ АН СССР.-1972.-С.217-254 (Итоги науки и техники. Сер.Общие вопр.патологии.Т.З).

81. Хаитов P.M., Алексеев Л.П. Генетика иммунного ответа.// Иммунология.-1998.- №5. С.11-15

82. Хаитов P.M., Алексеев Л.П., Василов Р.Г. Молекулярно-генетические подходы к изучению системы HLA: новые возможности фундаментальных и прикладных исследований// Бюл.эксперим. биол. И мед.-1994. №10.-С.436-439

83. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология.-М.:Медицина.- 2000. С.430.

84. Хаитов P.M., Манько В.М., Алексеев Л.П. Иммуногенетика и иммунология:резистентность к инфекции.Ташкент, 1991,С.32-39.

85. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А. СПИД. — М.: Нар. акад. культуры и общечеловеч. ценностей, 1992. —351с.

86. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология.-М.:Медицина.-2000.-С.430.

87. Чередеев А.Н. Клиническая иммунология в современной медицине // Аллергология и клиническая иммунология. 1993. -N1. -С. 4-13.

88. Чумакова Е.А. Особенности нейтрофилыюго звена в динамике ВИЧ-инфекции у детей. Автореф. на соиск. к.м.н. Ростов-на-Дону, 2000. 23 с.

89. Шемшура А.Б. особенности мактрофагального звена в динамике ВИЧ-инфекции у детей. Автореф. на соиск. к.м.н. Краснодар, 1997. 24 с.

90. Шемшура А.Б., Сизякина Л.П. Особенности макрофагального звена в динамике ВИЧ-инфекции у детей различной возрастной группы.Иммунология, 2000, №1, С. 13-18.

91. Шестакова И.В. Особености распределения антигенов HLA уинфицированных различными субтипами ВИЧ-1. Автореф. на соиск. к.м.н., Ростов-на-Дону, 1999. 23 с.

92. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медицина, 1999. - 608 с.

93. Benyoucef S., Hober D., Groote D.D. et al. A decreased production of IL12 in vitro is associated with isolation of cytopathic HIV-1 strains in HIV-1-infected patients//J. Med. Virol. 1998. - Vol.55, N.3. - P.209-214.

94. Burchard E.G., Silverman E. K. et al. Association between a sequence variant in the IL-4 gene promoter and FEV1 in asthma //American J. of Respiratory and Critical Care Medicine. 1999. - Vol.160 - P.919-922.

95. Cecilia D., Kleeberger C., Munoz A. et al. A longitudinal study of neutralizing antibodies and disease progression in HIV-1-infected subjects // J. Infect. Dis. — 1999 Vol. 179, N.6. - P. 1365-1374.

96. Coito C., Bomsel M. B7 cosignal potentiates apoptosis of uninfected CD4+ T-lymphocytic cell lines primed by HIV envelope proteins // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1999. -Vol.15, N.6. - P.509-521.

97. Coudronniere N., Biard-Piechaczyk M., Robert-Hebmann V. et al. Role of CXCR4 in HIV-1-induced apoptosis of cells with a CD4+, CXCR4+ phenotype // Immunol. Lett. 1999. - Vol.70, N. 1. - P. 1 -3.

98. Dalgleish A. Antibody response may confer natural protection against HIV-infection //AIDS. 1999.-Vol.13-P.2515-2521.

99. Real G., Llorente M., Lucas P., KremerL., ToranJ.L. Martinez-A, Antibody repertoire against HIV-1 gpl20 triggered in nude and normal mice by GM-CSF/gpl20 immunization // J. Mol. Immunol. 1999 - V.36 -N.l 1-12 P.721-731.

100. Etter H., Althaus R., Eugster H.P. et al. IL-4 and IL-13 downregulate rolling adhesion of leukocytes to IL-1 or TNF-alpha-activated endothelial cells by limiting the interval of E-selectin expression // Cytokine. 1998.-Vol.10, N.6. -P.395-403.

101. Fauci A. From new knowledge concerning a virus and pathogenesis to the best treatment: the factors of the owner in a pathogenesis of disease a HIV: values for therapy // XII Int. Conf. AIDS. Geneva, 1998. - Abstr. 157.

102. Hildreth J.E., Hampton R., Halsey N.A. Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity can protect PBMC from infection by cell-associated HIV-1 // J.

103. Clin. Immunol. 1999. - Vol.90, N.2. - P.203-212.

104. Huang T.T., Wuerzberger-Davis S.M., Seufzer B.J. et al. NF-kappaB activation by camptothecin. A linkage between nuclear DNA damage and cytoplasmic signaling events // J. Biol. Chem. 2000. - Vol.275,- N.13. -P.9501-9509.

105. Kato Т., Daimon M., Suzuki J. et al. Three-dimensional conformation of the epitopes of human superoxide dismutase-2 recognized by antibody against HIV-1 pi7// Int. J.Mol. Med.- 1998.-Vol.1,N 1.-P.63-66.

106. Koup R.A., Montefiori D.C., Mascola J.R. et al. Postexposure immunoprophylaxis of primary isolates by an antibody to HIV.receptor complex // J. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1999. Vol.96, N.18. - P. 1036710372.

107. Laisney I.L., Strosberg A.D. Dual specificity of a human neutralizing monoclonal antibody, specific for the V3 loop of GP120 (HIV-1) // Immunol. Lett. 1999. - Vol.67, N 3. - P. 185-192.

108. Landau R.N. HIV.Recent advances in AIDS research: genetics, molecular biology and immunology // Current Opinion in Immunology. 1999. - Vol.11. - P.449-450.

109. Lefevre E.A., Krzysiek R., Loret E.P. et al. Cutting edge: HIV-1 Tat protein differentially modulates the В cell response of naive, memory, and germinal center В cells // J. Immunol. 1999. - Vol.163, N 3. - P.l 119-1122.

110. Legastelois I., Desgranges C. Design and intracellular activity of a human single-chain antibody to human immunodeficiency virus type 1 conserved gp41 epitope // J. Virol. 2000. - Vol.74, N.12. - P.5712-5715.

111. Menendez A., Monte Carlo M., Quintana D. Полипептидные эпитопы, расположенные в V3 области, действуют на экспозицию антигенных детерминант и их иммуногенность // XI-th Intern.Conf on AIDS.-Vancouver, 1996,- Abstr.2104.

112. Mofenson L.M., Harris D.R., Rich K. et al. Serum HIV-1 p24 antibody, HIV

113. RNA copy number and CD4 lymphocyte percentage are independently associated with risk of mortality in HIV-1-infected children // AIDS. 1999. -Vol.13, N.1.-P.31-39.

114. Pinter A., Honnen W.I., Wu Z. et al. Антитела к высоко консервативным эпитопам области V2 gp 120 обладают мощной нейтрализующей способностью в отношении макрофаготропных изолятов // XI-th Intern. Conf. on AIDS. Vancouver, 1996. - Abstr.2101.

115. Raux M., Finkielsztejn L., Salmon-Ceron D. et al. Comparison of the distribution of IgG and IgA antibodies in serum and various mucosal fluids of HIV type 1-infected subjects // AIDS Res. Hum. Retroviruses.- 1999.- Vol.15, N.15. P.1365-1376.

116. Sato H., Kato K., Takebe Y. Functional complementation of the envelope hypervariable V3 loop of human immunodeficiency virus type 1 subtype В by the subtype E V3 loop // Virology. 1999. - Vol.257, N 2. - P.491-501.

117. Sattentau Q.J., Moulard M., Brivet B. et al. Antibody neutralization of HIV-1 and the potential for vaccine design // Immunol. Lett. 1999. - Vol.66, N 1/3. - P.143-149.

118. Seroogy C.M., Wara D.W., Bluth M.H. et al. Cytokine profile of a long-term pediatric HIV survivor with hyper-IgE syndrome and a normal CD4 T-cell count // J. Allergy Clin. Immunol. 1999 - Vol.104, N 5. - P. 1045-1051.

119. Shibata R., Igarashi Т., Haigwood N. et al. Neutralizing antibody directed against the HIV-1 envelope glycoprotein can completely block HIV-1/SIV chimeric virus infections of macaque monkeys // Nat. Med. 1999.- Vol.5, N 2. - P.204-210.

120. Suzuki I., Yamaguchi E. et al. A new polymorphism in the 5' flanking region of the human IL-4 gene // Immunogenetics. 1999. - Vol.49. - P.738-739.

121. Tewari D., Goldstein S.L., Notkins A.L., Zhou P. cDNA encoding a single-chain antibody to HIV pi7 with cytoplasmic or nuclear retention signals inhibits HIV-1 replication // J. Immunol. 1998.- Vol.161, N 5. - P.2642-2647.

122. Torres Y., Medrano F.J., Rey C. et al. Evidence for a role of T-helper type 2 cytokines in the acquisition of human immunodeficiency virus syncytium-inducing phenotype // Eur. J. Clin. Invest. 1998. - Vol.28, N 11. - P.930-936.

123. Tugarinov V., Zvi A., Levy R., Anglister J. A cis proline turn linking two beta-hairpin strands in the solution structure of an antibody-bound HIV-1IIIB V3 peptide // Nat. Struct. Biol. 1999. - Vol.6, N 4. - P. 331-335.

124. Wang H., Cameron K., Honess R. Chemokine receptor regulation and HIV type 1 tropism in monocyte-macrophages // J. Biol. Chem. — 1999. Vol.325, N 2. — P.l 110-1112.

125. Weliky D.P., Bennett A.E., Zvi A. et al. Solid-state NMR evidence for an antibody-dependent conformation of the V3 loop of HIV-1 gpl20 // Nat. Struct. Biol.- 1999.-Vol.6, N2.-P.141-145.

126. Blackburn G.M., Kang A.S., Kingsbury G.A., and Burton D.R. (1989) Biochem. J., 262, 381-390.

127. Shultz P. J., Lerner R. A., Benkovic S. J. // Chem. and Eng. News. 1990. V. 68. N 22. P.26. Enzymology 68, 26-40.

128. Shokat K.M., and Schultz P.G. (1990) Annu. Rev. Immunol., 8, 335-363.

129. Lerner R. A., Benkovic S. J., and Shultz P. J. (1991) Science, 252, 659-667.

130. Benkovic S. J. (1992) Annu. Rev. Biochem. -1992, 61, 29-54.

131. Hilvert D. (1992) Pyre Appl. Chem., 64, 1103-1113.

132. Stewart J.D., and Benkovic S.J (1993) Chem. Soc. Rev., 22, 213-219.

133. Suzuki H. (1994) J. Biochem., 115, 623-628.

134. Schultz P.G., and Lerner R^A. (1995) Science, 269, 1835-1842.

135. Guo J., Huang W., Zhou G. W., Fletterick R. J., and Scanlan T. S. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci., 92, 1694-1698.

136. Roberts V. A., Stewart J., Benkovic S. J, and Getzoff E. D. (1994) J. Mol. Biol., 235, 1098-1116.

137. Shoenfeld Y., Ben-Ehuda O., Messinger J., Bentwithc Z., Rauch J., Isenberg 240. Gilbert D., Brard f., Jovelin F., and Tron F. (1996) J. Autoimmun., 9, 247-257.

138. Krause I., Blank M., and Shoenfeld Y. (1998) J. Biol. Regul. Homeost. Agents, 12,49-52.

139. Shoenfeld Y., Teplizki H.A., Mendlovic S., Blank M., Mozzes E., and Isenberg D.A. (1989) Clin. Immunol. Immunopathol., 51, 313-325.

140. Kozyr A.V., Kolesnikv A.V., Aleksandrova E.S., Sashchenko L.P., Gnuchev N.V., Favorov P.V., Kotelnikov M.A., Iakhnina E.I., Astsaturov I.A., Prokaeva T.V., Alekberova Z.S., Suchkov S.V., and Gabibov A.G. (1998) Appl. Biochem. Biotechn., 75, 45-61.

141. Reimer C., Raska I., Tan E. M., and Sheer U. (1987) Virchows Arch., 54, 131-136.

142. Earnshaw W. C., and RothfieldN. (1985) Chromosoma, 91, 313-320.

143. Shuster A. M., Gololobov G. V., Kvashuk O. A., Bogomolova A. E., Smirnov I. V., and Gabibov A. G. (1992) Science, 256, 665-667.

144. Sugiama Y., and Yamamota T. (1996) Tohoku J. Exp. Med., 178, 203 215.

145. Gilbert D., Brard f., Jovelin F., and Tron F. (1996) J. Autoimmun., 9, 247-257.

146. Krause I., Blank M., and Shoenfeld Y. (1998) J. Biol. Regul. Homeost. Agents, 12,49-52.

147. Shoenfeld Y., Teplizki H.A., Mendlovic S., Blank M., Mozzes E., and Isenberg D.A. (1989) Clin. Immunol. Immunopathol., 51, 313-325.

148. Kozyr A.V., Kolesnikv A.V., Aleksandrova E.S., Sashchenko L.P., Gnuchev N.V., Favorov P.V., Kotelnikov M.A., Iakhnina E.I., Astsaturov I.A., Prokaeva T.V., Alekberova Z.S., Suchkov S.V., and Gabibov A.G. (1998) Appl. Biochem. Biotechn., 75, 45-61.

149. Earnshaw W. C., and RothfieldN. (1985) Chromosoma, 91, 313-320.

150. Shuster A. M., Gololobov G. V., Kvashuk O. A., Bogomolova A. E., Smirnov I. V., and Gabibov A. G. (1992) Science, 256, 665-667.

151. Roberts V. A., Stewart J., Benkovic S. J, and Getzoff E. D. (1994) J. Mol. Biol., 235, 1098-1116.

152. Stewart J. D., Krebs J. F., Siuzdak G., Berdis A. J., Smithrud D. В., and Benkovic S. J. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 7404-7409.

153. Li L., Paul S., Tyutyulkova S., Kazatchkine M.D., and Kaveri S. (1995) J. Immunol., 154, 3328-3332.

154. Shoenfeld Y., Ben-Ehuda O., Messinger J., Bentwithc Z,, Rauch J., Isenberg

155. D.I., and Gado N. (1988) Immunol. Lett., 17, 285 291.

156. Sugiama Y., and Yamamota T. (1996) Tohoku J. Exp. Med., 178, 203 215.

157. Gololobov G.V., Mikhalp S.V., Starov A.V., Kolesnikov A.V., and Gabibov A.G. (1994) App. Biochem. Biotechnol., 47, 305-315.

158. Gabibov A. G., Gololobov G. V.,Makarevich О. I., Schourov D. V., Chernova

159. E. A., and Yadav R. P. (1994) Appl. Biochem. Biotechn., 47, 293-303.

160. Gilbert D., Brard f., Jovelin F., and Tron F. (1996) J. Autoimmun., 9, 247-257.

161. Krause I., Blank M., and Shoenfeld Y. (1998) J. Biol. Regul. Homeost. Agents, 12,49-52.

162. Kozyr A.V., Kolesnikv A.V., Aleksandrova E.S., Sashchenko L.P., Gnuchev

163. N.V., Favorov P.V., Kotelnikov M.A., Iakhnina E.I., Astsaturov I.A., Prokaeva T.V., Alekberova Z.S., Suchkov S.V., and Gabibov A.G. (1998) Appl. Biochem. Biotechn., 75,45-61.

164. Reimer C., Raska I., Tan E. M., and Sheer U. (1987) Virchows Arch., 54, 131-136.

165. Gololobov G. V., Chernova E. A., Schourov olobov G. V., Chernova E. A., Schourov D. V., Smirnov I. V., Kudelina I. A., and Gabibov A. G. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 254-257.

166. Vlassov A. V., Helm M., Florentz C., Naumov V. A., Breusov A. A., Buneva V. N., Giege R., and Nevinsky G. A. (1999) Russ. J. Immunol., 4, 25-32.

167. Savel'ev A. N., Eneyskaya E. V., Shabalin K. A., Filatov M. V., and Neustroev K. N. (1999) Protein Peptide Lett,.6, 179-184.

168. Nevinsky G. A., Kit Yu. Ya., Semenov D. V., and Buneva V. N. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol., 75, 77-91.

169. Kanyshkova T. G., Semenov D. V., Khlimankov D. Yu., Buneva V. N., and Nevinsky G. A. (1997) FEBS Lett, 416, 23-27.

170. Buneva V. N., Kanyshkova T. G., Vlassov A. V., Semenov D. V., Khlimankov D. Yu., Breusova L. R., and Nevinsky G. A. (1998) Appl. Biochem. Biotechnol., 75, 63-76.

171. Nevinsky G. A., Kanyshkova T. G., Semenov D. V., Vlassov A. V., Gal'vita A. V, and Buneva V. N. (2000) Appl. Biochem. Biotechnol., accepted for publication.