Нуклеазные активности антител при рассеянном склерозе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Барановский, Андрей Геннадьевич

• Барановский, Андрей Геннадьевич
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Барановский, Андрей Геннадьевич

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Каталитически активные антитела

1.1.1. Искусственные абзимы

1.1.2. Природные абзимы

1.1.2.1. Абзимы-протеазы

1.1.2.2. Абзимы-нуклеазы

1.1.2.3. Природные абзимы с другими активностями

1.1.2.4. Механизмы возникновения КААТ

1.1.2.5. Биологическая роль КААТ

1.2. Рассеянный склероз

1.3. Дезоксирибонуклеазы человека

1.3.1. ДНКаза

1.3.2. ДНКаза II

1.3.3. Фосфодиэстераза I

1.3.4. ДНКаза DFF

1.3.5. Эндонуклеаза G

1.3.6. Лактоферрин

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

2.2. МЕТОДЫ

2.2.1. Исследуемая группа больных рассеянным склерозом и группы сравнения

2.2.2. Получение сульфат-аммонийного осадка белков крови

2.2.3. Выделение антител крови аффинной хроматографией на Protein A-Sepharose

2.2.4. Выделение антител из спинномозговой жидкости

2.2.5. Очистка IgG с помощью гель-фильтрации и ионообменной хроматографии

2.2.6. Аффинная хроматография IgG на ДНК-целлюлозе

2.2.7. Концентрирование препаратов белка

2.2.8. Определение концентрации белка

2.2.9. Электрофоретическйй анализ белков

2.2.10. Перенос белков на нитроцеллюлозную мембрану и окрашивание коллоидным раствором серебра

2.2.11. Иммуноферментное окрашивание IgG и их субъединиц

2.2.12. Синтез конъюгатов IgG кролика против легких и тяжелых цепей IgG человека с пероксидазой хрена

2.2.13. Проведение рН-шока для препаратов антител

2.2.14. Исследование взаимодействия ДНК-абзимов с аффинными сорбентами

2.2.15. Разделение молекул IgG с легкими цепями к- и А.-типа

2.2.16. Получение и очистка Fab-фрагментов IgG

2.2.17. Выделение ДНКазы I человека

2.2.18. Выделение ДНКазы II человека

2.2.19. Получение и очистка ДНК плазмиды pBluescript

2.2.20. Получение и очистка 5'-[ Р]-меченых олигонуклеотидов

2.2.21. Определение активности антител в реакции гидролиза ДНК плазмиды pBluescript

2.2.22. Экспресс-оценка ДНК-гидролизующей активности антител

2.2.23. Определение активности ДНКаз в реакции гидролиза ДНК плазмиды pBluescript

2.2.24. Определение активности ДНКаз по Кунитцу

2.2.25. Исследование рН-зависимости реакции гидролиза ДНК препаратами IgG и ДНКаз

2.2.26. Исследование металл-зависимости реакции гидролиза ДНК препаратами IgG и ДНКаз

2.2.27. Исследование кислотолабильности IgG-абзимов и ДНКаз человека

2.2.28. Исследование термостабильности IgG-абзимов и ДНКаз человека

2.2.29. Исследование гидролиза дезоксирибоолигонуклеотидов препаратами IgG и ДНКаз человека

2.2.30. Тестирование нуклеазной активности в геле

2.2.31. Определение кинетических параметров реакции гидролиза олигонуклеотидов препаратами IgG

2.2.32. Определение активности антител в реакции гидролиза полирибонуклеотидов исСМР

2.2.33. Определение РНКазной активности антител в реакции гидролиза (pU)io методом кислотонерастворимых осадков

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Выделение препаратов антител из крови человека

3.2. Скрининг ДНК-гидролизующей активности в препаратах антител

3.3. Доказательство наличия у антител крови больных рассеянным склерозом каталитических функций

3.3.1. "Кислый шок" препаратов антител

3.3.2. Связывание ДНК-гидролизующих антител аффинными сорбентами

3.4. Получение высокоочищенных препаратов IgG из крови больных рассеянным склерозом

3.5. Взаимодействие ДНК-абзимов с ДНК-целлюлозой

3.6. Выделение ДНКаз из мочи человека

3.7. Определение оптимальных условий гидролиза ДНК препаратами IgG и ДНКаз человека

3.7.1. Исследование металл-зависимости

3.7.2. Исследование рН-зависимости

3.8. Сравнение рН- и термостабильности ДНК-абзимов и ДНКаз человека

3.9. Локализация активного центра ДНК-гидролизующих антител при рассеянном склерозе

3.9.1. Определение типа легких цепей ДНК-абзимов

3.9.2. Каталитическая активность Fab-фрагментов IgG

3.9.3. Тестирование ДНК-гидролизующей активности антител in situ

3.10. Исследование гидролиза дезоксирибоолигонуклеотидов препаратами IgG и

ДНКазами человека

3.11. Кинетические характеристики реакции гидролиза ДНК препаратами IgG

3.12. Сравнение субстратной специфичности препаратов антител и РНКаз

4. ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Нуклеазные активности антител при рассеянном склерозе»

Иммунная система высших организмов играет важнейшую роль в их защите от патогенного влияния окружающей среды. Иммуноглобулины являются одним из основных специфических факторов иммунитета, направленных против чужеродного соединения, явившегося причиной их возникновения. До недавнего времени считалось, что результатом взаимодействия антиген-антитело (АГ-АТ) является формирование иммунного комплекса за счет нековалентных связей, а образование или разрыв ковалентных связей невозможен. Исследования последних десятилетий привели к открытию новой функции иммуноглобулинов - их способности катализировать различные химические реакции. Теоретическое предсказание данного явления было сделано В. Дженксом в 1969 году [1], однако для практического подтверждения его гипотезы потребовалось не одно десятилетие. В настоящее время абзимология - область биохимии, изучающая каталитически активные антитела (КААТ), является интенсивно развивающимся направлением науки, а число известных примеров химических превращений, катализируемых абзимами, превышает сотню. Субстратная специфичность абзимов в ряде случаев выше, чем ферментов; описаны примеры КААТ, которые катализируют химические реакции с эффективностью, близкой к эффективности ферментов с аналогичной активностью. Более того, существуют примеры абзимов, для которых не известны ферменты с аналогичной активностью. В связи с этим, дизайн антител с заданной каталитической специфичностью имеет огромный спектр возможностей в биотехнологии и медицине.

Новые перспективы в области изучения КААТ возникли с открытием в 1989 году природных абзимов: аутоантитела к вазоактивному интестинальному пептиду, полученные из крови больных бронхиальной астмой, не только связывали, но и эффективно гидролизовали данный пептид. Позднее, при ряде других аутоиммунных заболеваний, а также в молоке здоровых рожениц, были обнаружены абзимы с различными ферментативными активностями: протеолитической, ДНК- и РНК-гидролизующей, амилолитической, протеинкиназной, нуклеотид-гидролизующей и некоторыми другими. Появление каталитически активных антител в крови человека связывают с протеканием в организме аутоиммунных процессов, когда происходит срыв толерантности к собственным антигенам и наработка антител к ним.

Рассеянный склероз (PC) - хроническое, прогрессирующее заболевание центральной нервной системы (ЦНС), для которого характерна многофакторная природа и чрезвычайно гетерогенное клиническое течение. Основную роль в патогенезе PC играет сочетание хронического воспалительного и нейродегенеративного процессов, сопровождающихся аутоиммунными реакциями. Хотя аутоиммунный ответ в основном направлен к компонентам миелина - белково-липидной оболочке проводящих нервных волокон, в крови и ткани мозга больных также нарабатываются антитела к ДНК и нуклеопротеидным комплексам, что указывает на возможность индукции каталитических анти-ДНК AT при PC.

Цель настоящей работы заключалась в детальном анализе каталитических свойств антител с нуклеазными активностями при рассеянном склерозе. В процессе выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- провести скрининг ДНК-гидролизующей активности антител при рассеянном склерозе, а также при ряде других заболеваний и у здоровых доноров;

- провести анализ РНК-гидролизующей активности антител при гидролизе различных субстратов;

- доказать, что нуклеазная активность антител является их собственным свойством;

- локализовать активный центр на молекуле ДНК-абзимов;

- изучить ферментативные и физико-химические свойства ДНК-абзимов (металл- и рН-зависимость, субстратная специфичность, кинетические параметры реакции гидролиза, рН- и термостабильность), а также провести их сравнение с соответствующими характеристиками дезоксирибонуклеаз человека.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Барановский, Андрей Геннадьевич

выводы

1. Впервые показано, что иммуноглобулины класса G из сыворотки крови и спинномозговой жидкости больных рассеянным склерозом, а также антитела крови больных гепатитом В, обладают высоким уровнем ДНК-гидролизующей активности. При заболеваниях, не сопровождающихся аутоиммунными процессами (грипп, тонзиллит, пневмония, язва 12-ти перстной кишки, туберкулез, различные типы рака), ДНКазная активность антител либо не тестировалась, либо была очень низкой. Препараты антител из крови здоровых доноров не содержат детектируемых количеств ДНК-абзимов.

2. Впервые показано, что антитела крови больных рассеянным склерозом способны эффективно гидролизовать РНК. Анализ субстратной специфичности позволяет сделать вывод об отличии репертуара РНК-гидролизующих антител при рассеянном склерозе и других заболеваниях, что предполагает различный механизм индукции абзимов при разных патологиях.

На основании выполнения общепринятых критериев показано, что нуклеазные активности являются собственным свойством IgG при рассеянном склерозе.

3. С помощью ряда методов (аффинная хроматография, ферментативный протеолиз, анализ активности in situ) установлено, что в состав абзимов, специфичных к двухцепочечной ДНК, входят легкие цепи к- и А.-типа, активный центр располагается в Fab-фрагменте молекулы IgG, и отдельные легкие цепи способны эффективно гидролизовать ДНК.

4. Показано, что при рассеянном склерозе образуется широкий спектр абзимов с различными ферментативными характеристиками и механизмами гидролиза ДНК, при этом состав спектра индивидуален для каждого пациента. Каталитические свойства антител и секреторных дезоксирибонуклеаз человека (сродство к субстратам, металл- и р Н- з ависимо сть, субстратная специфичность) существенно отличаются.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Барановский, Андрей Геннадьевич, 2004 год

1. Jencks W. Catalysis in chemistry and enzymology (1969) New York, McGraw-Hill.

2. Лейтмен Г., Гуд P.M. Иммуноглобулины (1981) Москва, Мир.

3. Tramontano A., Janda K.D., Lerner R.A.Catalytic antibodies (1986) Science, 234, 15661570.

4. Pollack S.J., Jacobs J.W., Schultz P.G. Selective chemical catalysis by an antibody (1986) Science, 234, 1570-1573.

5. Janda K.D., Schloeder D., Benkovic S.J., Lerner R.A. Induction of an antibody that catalyzes the hydrolysis of an amide bond (1988) Science, 241, 1188-1191.

6. Benkovic S.J., Adams J.A., Borders C.L.J., Janda K.D., Lerner R.A. The enzymic nature of antibody catalysis: development of multistep kinetic processing (1990) Science, 250, 11351139.

7. Krebs J.F., Siuzdak G., Dyson H.J., Stewart J.D., Benkovic S.J. Detection of catalytic antibody species acylated at the active site by electrospray mass spectrometry (1995) Biochemistry, 34, 720-723.

8. Zhou G.W., Guo J., Huang W., Fletterick R.J., Scanlan T.S. Crystal structure of a catalytic antibody with a serine protease active site (1994) Science, 265, 1059-1064.

9. Guo J., Huang W., Zhou G.W., Fletterick R.J., Scanlan T.S. Mechanistically different catalytic antibodies obtained from immunization with a single transition-state analog (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 1694-1698.

10. Schultz P.G., Lerner R.A. From molecular diversity to catalysis: lessons from the immune system (1995) Science, 269, 1835-1842.

11. Nevinsky G.A., Favorova O.O., Buneva B.N. Catalytic antibodies: New characters in the protein repertoire (2002) Protein-protein interactions. A molecular cloning manual (Ed. Golemis, E.), New York, Cold Spring Harbor Lab. Press, 523-534.

12. Невинский Г.А., Семенов Д.В., Бунева B.H. Каталитически активные антитела (абзимы) индуцированные стабильными аналогами переходного состояния (2000) Биохимия, 65, 1233-1244.

13. Paul S., Sun М., Mody R., Tewary H.K., Stemmer P., Massey R.J., Gianferrara Т., Mehrotra S., Dreyer Т., Meldal M. Peptidolytic monoclonal antibody elicited by a neuropeptide (1992) J. Biol. Chem., 267, 13142-13145.

14. Slobin L.I. Preparation and some properties of antibodies with specificity toward p-nitrophenyl esters (1966) Biochemistry, 5, 2836-2841.

15. Кульберг А., Дочева В., Тарханова И.А., Спивак В.А. О протеолитической активности в препаратах очищенного иммуноглобулина G и антител кролика (1969) Биохимия, 34, 1178-1183.

16. Paul S., Voile D.J., Beach С.М., Johnson D.R., Powell M.J., Massey R.J. Catalytic hydrolysis of vasoactive intestinal peptide by human autoantibody (1989) Science, 244, 11581162.

17. Paul S., Mei S., Mody В., Eklund S.H., Beach C.M., Massey R.J., Hamel F. Cleavage of vasoactive intestinal peptide at multiple sites by autoantibodies (1991) J. Biol. Chem., 266, 16128-16134.

18. Mei S., Mody В., Eklund S.H., Paul S. Vasoactive intestinal peptide hydrolysis by antibody light chains (1991) J. Biol. Chem., 266, 15571-15574.

19. Paul S., Li L., Kalaga R., Wilkins-Stevens P., Stevens F.J., Solomon A. Natural catalytic antibodies: peptide-hydrolyzing activities of Bence Jones proteins and VL fragment (1995) J. Biol. Chem., 270, 15257-15261.

20. Paul S., Kalaga R., Gololobov G.V., D. B. Natural catalytic immunity is not restricted to autoantigenic substrates (2000) Appl. Biochem. Biotechnol., 83, 71-84.

21. Thiagarajan P., Dannenbring R., Matsuura K., Tramontano A., Gololobov G., Paul S. Monoclonal antibody light chain with prothrombinase activity (2000) Biochemistry, 39, 6459-6465.

22. Sun M., Gao Q.S., Li L., Paul S. Proteolytic activity of an antibody light chain (1994) J. Immunol., 153, 5121-5126.

23. Gao Q.S., Paul S. Site-directed mutagenesis of antibody-variable regions (1995) Methods Mol. Biol., 51, 319-327.

24. Li L., Paul S., Tyutyulkova S., Kazatchkine M.D., Kaveri S. Catalytic activity of anti-thyroglobulin antibodies (1995) J. Immunol., 154, 3328-3332.

25. Шустер A.M., Гололобов Г.В., Квашук О.А., Габибов А.Г. Антиидиотипические и природные каталитически активные антитела (1991) Молекуляр. биология, 25, 593601.

26. Татишвили Н.И., Меунаргия В.В., Соселия Т.С. Молекулярные и клеточные механизмы иммунологического распознавания (1988) Тбилиси, Меиниереба.

27. Pisetsky D.S. The immunologic properties ofDNA (1996) J. Immunol., 156, 421-423.

28. Гололобов Г.В., Богомолова, Ядав, Ермолаева, Белостоцкая, Прокаева, Шустер A.M., Габибов А.Г. Выделение и харакеристика каталитических антител к ДНК при системной красной волчанке (1993) Биохимия, 58, 313-318.

29. Gabibov A.G., Gololobov G.V., Makarevich O.I., Schourov D.V., Chernova E.A., Yadav R.P. DNA-hydrolyzing autoantibodies (1994) Appl. Biochem. Biotechnol., 47, 293-302.

30. Shuster A.M., Gololobov G.V., Kvashuk O.A., Bogomolova A.E., Smirnov I.V., Gabibov A.G. DNA hydrolyzing autoantibodies (1992) Science, 256, 665-667.

31. Щуров Д.В., Макаревич О.И., Лопаева О.А., Бунева В.Н., Невинский Г.А., Габибов А.Г. Взаимодействие ДНК гидролизующих аутоантител с низкомолекулярными субстратами (1994) ДАН, 337, 407-410.

32. Gololobov G.V., Chernova Е.А., Schourov D.V., Smirnov I.V., Kudelina I.A., Gabibov

33. A.G. Cleavage of supercoiled plasmid DNA by autoantibody Fab fragment: application of the flow linear dichroism technique (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 254-257.

34. Власов А.В., Барановский А.Г., Канышкова Т.Г., Принц А.В., Забара В.Г., Наумов

35. B.А., Бреусов А.А., Жьеже Р., Бунева В.Н., Невинский Г.А. Субстратная специфичность ДНК- и РНК-гидролизующих антител из крови больных полиартритом и аутоиммунным тиреоидитом (1998) Молекуляр. биология, 32, 559-569.

36. Харитонова М.А., Сизякина Л.П., Невинский Г .А. ДНК-гидролизующая и протеолитическая активность абзимов в динамике ВИЧ-инфекции (2003) Иммунология, 24, 68-69.

37. Gololobov G.V., Mikhalap S.V., Starov A.V., Kolesnikov A.F., Gabibov A.G. DNA-protein complexes. Natural targets for DNA-hydrolyzing antibodies (1994) Appl. Biochem. Biotechnol., 47, 305-314.

38. Kozyr A.V., Kolesnikov A.V., Iakhnina E.I., Astsaturov I.A., Varlamova E., Kirillov E.V., Gabibov A.G. DNA-hydrolyzing antibodies in lymphoproliferative disorders (1996) Biull. Eksp. Biol. Med., 121, 204-206.

39. Бунева В.Н., Андриевская О.А., Романникова И.В., Гололобов Г.В., Ядав Р.П., Ямковой В.И., Невинский Г.А. Взаимодействие каталитически активных антител с олигорибонуклеотидами (1994) Молекуляр. биология, 28, 738-743.

40. Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., Бунева В.Н. Природные каталитически активные антитела (абзимы) в норме и при патологии (2000) Биохимия, 65, 1473-1478.

41. Власов А.В., Андриевская О.А., Канышкова Т.Г., Барановский А.Г., Наумов В.А., Бреусов А.А., Жьеже Р., Бунева В.Н., Невинский Г.А. РНК-гидролизующие антитела из крови больных системной красной волчанкой (1997) Биохимия, 62, 556-562.

42. Vlassov A., Florentz C., Helm M., Naumov V., Buneva V., Nevinsky G., Giege R. Characterization and selectivity of catalytic antibodies from human serum with RNase activity (1998) Nucleic Acids Res., 26, 5243-5250.

43. Андриевская О.А., Бунева B.H., Забара В.Г., Наумов В.А., Ямковой У.И., Невинский Г.А. Иммуноглобулины класса М из сыворотки крови больных системной красной волчанкой эффективно расщепляют РНК( 1998) Молекуляр. биология, 32, 908-915.

44. Andrievskaia О.A., Buneva V.N., Zabara V.G., Naumov V.A., Iamkovoi V.I., Nevinskii G.A. Catalytic heterogeneity of polyclonal RNA-hydrolyzing IgM from sera of patients with lupus erythematosus (2000) Med. Sci. Monit., 6, 460-470.

45. Бунева B.H., Кудрявцева A.H., Гальвита A.B., Дубровская В.В., Хохлова О.В., Калинина И. А., Галенок В.А., Невинский Г .А. Динамика уровня нуклеазной активности антител крови женщины во время беременности и лактации (2003) Биохимия, 68, 1088-1100.

46. Канышкова Т.Г. Нуклеазные активности антител и лактоферрина молока человека (1999) Диссертация на соискание уч. степени канд. хим. наук, Новосибирск.

47. Buneva V.N., Kanyshkova T.G., Vlassov A.V., Semenov D.V., Khlimankov D., Breusova L.R., Nevinsky G.A. Catalytic DNA- and RNA-hydrolyzing antibodies from milk of healthy human mothers (1998) Appl. Biochem. Biotechnol., 75, 63-76.

48. Nevinsky G.A., Kanyshkova T.G., Semenov D.V., Vlassov A.V., Gal'vita A.V., Buneva V.N. Secretory immunoglobulin A from healthy human mothers' milk catalyzes nucleic acid hydrolysis (2000) Appl. Biochem. Biotechnol., 83, 115-129.

49. Андриевская О.А., Канышкова Т.Г., Ямковой В.И., Бунева В.Н., Невинский Г.А. Моноклональные антитела к ДНК лучше гидролизуют РНК, чем ДНК (1997) ДАН, 355, 401-403.

50. Nevinsky G.A., Buneva B.N. Human catalytic RNA- and DNA-hydrolyzing antibodies (2002) J. Immunol. Methods, 269, 235-249.

51. Gololobov G.V., Rumbley C.A., Rumbley J.N., Schourov D.V., Makarevich O.I., Gabibov A.G., Voss E.W., Jr., Rodkey L.S. DNA hydrolysis by monoclonal anti-ssDNA autoantibody BV 04-01: origins of catalytic activity (1997) Mol. Immunol., 34, 1083-1093.

52. Kit Y.Y., Kim A.A., Sidorov V.N. Affinity-purified secretory immunoglobulin A possesses the ability to phosphorylate human milk casein (1991) Biomed. Sci., 2, 201-204.

53. Kit Y., Semenov D.V., Nevinsky G.A. Phosphorylation of different human milk proteins by human catalytic secretory immunoglobulin A (1996) Biochem. Mol. Biol. Int., 39, 521-527.

54. Семенов Д.В., Канышкова Т.Г., Кит А., Хлиманков Д., Акимжанов A.M., Горбунов Д.А., Бунева В.Н., Невинский Г.А. Иммуноглобулины класса G человека гидролизуют нуклеотиды (1998) Биохимия, 63, 40-45.

55. Кит, Шипицин М.В., Семенов Д.В., Рихтер В.А., Невинский Г.А. Фосфорширование липидов, прочно связанных с секреторным иммуноглобулином А, в препаратах антител из молока человека, обладающих протеинкиназной активностью (1998) Биохимия, 63, 852-858.

56. Savel'ev A.N., Eneyskaya E.V., Shabalin К.A., Filatov M.V., Neustroev K.N. Antibodies with amylolytic activity (1999) Protein Peptide Lett., 6, 179-184.

57. Savel'ev A.N., Kanyshkova T.G., Kulminskaya A.A., Buneva V.N., Eneyskaya E.V., Filatov M.V., Nevinsky G.A., Neustroev K.N. Amylolytic activity of IgG and slgA immunoglobulins from human milk{2001) Clin. Chim. Acta, 314, 141-152.

58. Wentworth P., Jr., Jones L.H., Wentworth A.D., Zhu X., Larsen N.A., Wilson I.A., Xu X., Goddard W.A., 3rd, Janda K.D., Eschenmoser A., Lerner R.A. Antibody catalysis of the oxidation of water (2001) Science, 293, 1806-1811.

59. Zhu X., Wentworth P.J., Wentworth A.D., Eschenmoser A., Lerner R.A., Wilson I.A. Probing the antibody-catalyzed water-oxidation pathway at atomic resolution (2004) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 101, 2247-2252.

60. Jerne N.K. Towards a network theory of the immune system (1974) Ann. Immunol., 125, 373-398.

61. Puzzetti A., Madaio M.P., Bellese G., Migliorini P. Anti-DNA antibodies bind to DNase I (1995) J. Exp. Med., 181, 1797-1804.

62. Gololobov G., Sun M., Paul S. Innate antibody catalysis (1999) Mol. Immunol., 36, 12151222.

63. Tyutyulkova S., Gao Q.S., Thompson A., Rennard S., Paul S. Efficient vasoactive intestinal polypeptide hydrolyzing autoantibody light chains selected by phage display (1996) Biochim. Biophys. Acta., 1316, 217-223.

64. Paul S. Catalytic activity of anti-ground state antibodies, antibody subunits, and human autoantibodies (1994) Appl. Biochem. Biotechnol., 47, 241-253.

65. Paul S. Mechanism and functional role of antibody catalysis (1998) Appl. Biochem. Biotechnol., 75, 13-24.

66. Suenaga R., Abdou N.I. Cationic and high affinity serum IgG anti-dsDNA antibodies in active lupus nephritis (1993) Clin. Exp. Immunol., 94, 418-422.

67. Prince W.S., Baker D.L., Dodge A.H., Ahmed A.E., Chestnut R.W., Sinicropi D.V. Pharmacodynamics of recombinant human DNase I in serum (1998) Clin. Exp. Immunol., 113, 289-296.

68. Ramaswamy H., Swamy C.V., Das M.R. Purification and characterization of a high molecular weight ribonuclease from human тйк(\99Ъ) J. Biol. Chem., 268, 4181-4187.

69. Gillin F.D., Reiner D.S., Wang C.S. Human milk kills parasitic intestinal protozoa (1983) Science, 221, 1290-1292.

70. Suchkov S.V. Mechanisms underlying cytotoxicity of anti-DNA antibodies (2001) Bull. Exp. Biol. Med., 131, 475-478.

71. Sinohara H., Matsuura K. Does catalytic activity of Bens-Jones proteins contribute to the pathogenesis of multiple myeloma? (2000) Appl. Biochem. Biotechnol., 83, 85-94.

72. Гусев Е.И., Демина Т.JI., Бойко А.Н. Рассеянный склероз (1997) Москва, Нефть и газ.

73. Archelos J. J., Storch M.K., Hartung H.P. The role of В cells and autoantibodies in multiple sclerosis (2000) Ann. Neurol., 47, 694-706.

74. Shoenfeld Y., Ben-Yehuda O., Messinger Y., Bentwitch Z., Rauch J., Isenberg D.I., Gadoth N. Autoimmune diseases other than lupus share common anti-DNA idiotypes (1988) Immunol. Lett., 17, 285-291.

75. Collard R.C., Koehler R.P., Mattson D.H. Frequency and significance of antinuclear antibodies in multiple sclerosis (1997) Neurology, 49, 857-861.

76. Sierakowska H., Shugar D. Mammalian nucleolytic enzymes (1977) Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 20, 59-130.

77. Moore S. Pancreatic DNase (1981) The Enzymes (Ed. Boyer, P.D.), New York, Academic Press, 281-296.

78. Funakoshi A., Tsubota Y., Wakasugi H., Ibayashi H., Takagi Y. Purification and properties of human pancreatic deoxyribonuclease /(1977) J. Biochem. (Tokyo), 82, 1771-1777.

79. Love J.D., Hewitt R.R. The relationship between human serum and human pancreatic DNase 7(1979) J. Biol. Chem., 254, 12588-12594.

80. Nadano D., Yasuda Т., Kishi K. Purification and characterization of genetically polymorphic deoxyribonuclease I from human kidney (1991) J. Biochem. (Tokyo), 110, 321323.

81. Schmidt В., Peil S., Zahn R.K. The major fraction of deoxyribonuclease activity from human urinary proteins. Purification and properties (1978) J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 16, 607612.

82. Yasuda Т., Awazu S., Sato W., Iida R., Tanaka Y., Kishi K. Human genetically polymorphic deoxyribonuclease: purification, characterization, and multiplicity of urine deoxyribonuclease 1 (1990) J. Biochem. (Tokyo), 108, 393-398.

83. Yasuda Т., Sawazaki K., Nadano D., Takeshita H., Nakanaga M., Kishi K. Human seminal deoxyribonuclease I (DNase I): purification, enzymological and immunological characterization and origin (1993) Clin. Chim. Acta, 218, 5-16.

84. Kishi K., Yasuda Т., Ikehara Y., Sawazaki K., Sato W., Iida R. Human serum deoxyribonuclease I (DNase I) polymorphism: pattern similarities among isozymes from serum, urine, kidney, liver, and pancreas (1990) Am. J. Hum. Genet., 47, 121-126.

85. Yasuda Т., Nadano D., Iida R., Takeshita H., Lane S.A., Callen D.F., Kishi K. Chromosomal assignment of the human deoxyribonuclease I gene, DNASE 1 (DNL1), to band 16pl3.3 using the polymerase chain reaction (1995) Cytogenet. Cell Genet., 70, 221-223.

86. Yasuda Т., Kishi K., Yanagawa Y., Yoshida A. Structure of the human deoxyribonuclease I (DNase I) gene: identification of the nucleotide substitution that generates its classical genetic polymorphism (1995) Ann. Hum. Genet., 59, 1-15.

87. Yasuda Т., Nadano D., Takeshita H., Tenjo E., Kishi K. Molecular analysis of the third allele of human deoxyribonuclease I polymorphism (1995) Ann. Hum. Genet., 59, 139-147.

88. Iida R., Yasuda Т., Aoyama M., Tsubota E., Kobayashi M., Yuasa I., Matsuki Т., Kishi K. The fifth allele of the human deoxyribonuclease I (DNase I) polymorphism (1997) Electrophoresis, 18, 1936-1939.

89. Yasuda Т., Takeshita H., Iida R., Kogure S., Kishi К .A new allele, DNASE1*6, of human deoxyribonuclease I polymorphism encodes an Arg to Cys substitution responsible for its instability (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun., 260, 280-283.

90. Yasuda Т., Takeshita H., Iida R., Yuasa I., Kishi K. Population studies of human deoxyribonuclease I polymorphism (1997) Hum. Hered., 47, 121-124.

91. Shak S., Capon D.J., Hellmiss R., Marsters S.A., Baker C.L. Recombinant human DNase I reduces the viscosity of cystic fibrosis sputum (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, 91889192.

92. Shiokawa D., Tanuma S. Characterization of human DNase I family endonucleases and activation of DNase gamma during apoptosis (2001) Biochemistry, 40, 143-152.

93. Nadano D., Yasuda Т., Kishi K. Measurement of deoxyribonuclease I activity in human tissues and body fluids by a single radial enzyme-diffusion method (1993) Clin. Chem., 39, 448-452.

94. Gibson U.E., Chen А.В., Baker D.L., Sinicropi D.V. An antibody capture bioassay (ACB) for DNase in human serum samples (1992) J. Immunol. Methods, 155, 249-256.

95. Shimada O., Suzuki S., Tosaka-Shimada H., Ishikawa H. Detection of deoxyribonuclease I in a hormone-secretory pathway of pituitary cells in humans and rats (1998) Cell Struct. Funct., 23, 49-56.

96. Wolf E., Frenz J., Suck D. Structure of human pancreatic DNase at 2.2 resolution (1995) Protein Eng., 8, 79.

97. Oefner C., Suck D. Crystallographic refinement and structure of DNase I at 2 A resolution (1986) J. Mol. Biol., 192, 605-632.

98. Cacia J., Quan C.P., Pai R., Frenz J. Human DNase I contains mannose 6-phosphate and binds the cation-independent mannose б-phosphate receptor (1998) Biochemistry, 37, 1515415161.

99. Yasuda Т., Mizuta K., Ikehara Y., Kishi K. Genetic analysis of human deoxyribonuclease I by immunoblotting and the zymogram method following isoelectric focusing (1989) Anal. Biochem., 183, 84-88.

100. Pan C.Q., Lazarus R.A. Engineering hyperactive variants of human deoxyribonuclease I by altering its functional mechanism (1997) Biochemistry, 36, 6624-6632.

101. Lahm A., Suck D. DNase I-induced DNA conformation. 2 A structure of a DNase I-octamer complex (1991) J. Mol. Biol., 222, 645-667.

102. Weston S.A., Lahm A., Suck D. X-ray structure of the DNase I-d(GGTATACC)2 complex at 2.3 A resolution (1992) J. Mol. Biol., 226, 1237-1256.

103. Doherty A.J., Worrall A.F., Connolly B.A. The roles of arginine 41 and tyrosine 76 in the coupling of DNA recognition to phosphodiester bond cleavage by DNase 1: a study using site-directed mutagenesis (1995) J. Mol. Biol., 251, 366-377.

104. Suck D. DNA recognition by DNase I (1994) J. Mol. Recognit., 7, 65-70.

105. Jones S.J., Worrall A.F., Connolly B.A. Site-directed mutagenesis of the catalytic residues of bovine pancreatic deoxyribonuclease /(1996) J. Mol. Biol., 264, 1154-1163.

106. Drew H.R. Structural specificities of five commonly used DNA nucleases (1984) J. Mol. Biol., 176, 535-557.

107. Bernardi A., Gaillard C., Bernardi G. The specificity of five DNAases as studied by the analysis of 5'-terminal doublets (1975) Eur. J. Biochem., 52, 451-457.

108. Mehdi S., Gerlt J.A. Syntheses and configurational analyses of thymidine 4-nitrophenyl 170,180.phosphates and the stereochemical course of a reaction catalyzed by bovine pancreatic deoxyribonuclease /(1984) Biochemistry, 23, 4844-4852.

109. Herrera J.E., Chaires J.B. Characterization of preferred deoxyribonuclease I cleavage sites (1994) J. Mol. Biol., 236, 405-411.

110. Fish E.L., Vournakis J.N. Properties of DNase I digestion of the deoxyoligonucleotide: 5'd(ATCGTACGAT)2(3') (1987) Nucleic Acids Res., 15, 9417-9428.

111. Junowicz E., Spencer J.H. Studies on bovine pancreatic deoxyribonuclease A. II. The effect of different bivalent metals on the specificity of degradation of DNA (1973) Biochim. Biophys. Acta, 312, 85-102.

112. Clark P., Eichhorn G.L.A predictable modification of enzyme specificity. Selective alteration of DNA bases by metal ions to promote cleavage specificity by deoxyribonuclease (1974) Biochemistry, 13, 5098-5102.

113. Suck D., Oefner C. Structure of DNase I at 2.0 A resolution suggests a mechanism for binding to and cutting DNA (1986) Nature, 321, 620-625.

114. Suck D., Oefner C., Kabsch W. Three-dimensional structure of bovine pancreatic DNase I at 2.5 A resolution (1984) EMBO J., 3, 2423-2430.

115. Poulos T.L., Price P. A. Some effects of calcium ions on the structure of bovine pancreatic deoxyribonuclease A (1972) J. Biol. Chem., 247, 2900-2904.

116. Price P.A. Characterization of Ca2+ and Mg2+ binding to bovine pancreatic deoxyribonuclease A (1972) J. Biol. Chem., 247, 2895-2899.

117. Pan C.Q., Lazarus R.A. Ca2+-dependent activity of human DNase I and its hyperactive variants (1999) Protein Sci., 8, 1780-1788.

118. Evans S.J., Shipstone E.J., Maughan W.N., Connolly B.A. Site-directed mutagenesis of phosphate-contacting amino acids of bovine pancreatic deoxyribonuclease I (1999) Biochemistry, 38, 3902-3909.

119. Hugli Т.Е. The preparation and characterization of an active derivative of bovine pancreatic deoxyribonuclease A formed by selective cleavage with alpha-chymotrypsin (1973) J. Biol. Chem., 248, 1712-1718.

120. Price P. A. The essential role of Ca2+ in the activity of bovine pancreatic deoxyribonuclease (1975) J. Biol. Chem., 250, 1981-1986.

121. Campbell V.W., Jackson D.A. The effect of divalent cations on the mode of action of DNase I. The initial reaction products produced from covalently closed circular DNA (1980) J. Biol. Chem., 255, 3726-3735.

122. Zimmer C., Luck G., Triebel H. Conformation and reactivity of DNA. IV. Base binding ability of transition metal ions to native DNA and effect on helix conformation with special reference to DNA-Zn(II) complex (1974) Biopolymers, 13, 425-453.

123. Douvas A., Price P.A. Some effects of calcium and magnesium ions on the activity of bovine pancreatic deoxyribonuclease A (1975) Biochim. Biophys. Acta, 395, 201-212.

124. Pan C.Q., Lazarus R.A. Hyperactivity of human DNase I variants. Dependence on the number of positively charged residues and concentration, length, and environment of DNA (1998) J. Biol. Chem., 273, 11701-11708.

125. Riley D.E. Deoxyribonuclease I generates single-stranded gaps in chromatin deoxyribonucleic acid (1980) Biochemistry, 19, 2977-2992.

126. Ulmer J.S., Herzka A., Toy K.J., Baker D.L., Dodge A.H., Sinicropi D., Shak S., Lazarus R.A .Engineering actin-resistant human DNase I for treatment of cystic fibrosis (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93, 8225-8229.

127. Polzar В., Nowak E., Goody R.S., Mannherz H.G. The complex of actin and deoxyribonuclease I as a model system to study the interactions of nucleotides, cations and cytochalasin D with monomeric actin (1989) Eur. J. Biochem., 182, 267-275.

128. Peitsch M.C., Polzar В., Stephan H., Crompton Т., MacDonald H.R., Mannherz H.G., Tschopp J. Characterization of the endogenous deoxyribonuclease involved in nuclear DNA degradation during apoptosis (programmed cell death) (1993) EMBO J., 12, 371-377.

129. Rodriguez A.M., Rodin D., Nomura H., Morton C.C., Weremowicz S-> Schneider M.C. Identification, localization, and expression of two novel human genes similar to deoxyribonuclease 7(1997) Genomics, 42, 507-513.

130. Parrish J.E., Ciccodicola A., Wehhert M., Cox G.F., Chen E., Nelson D.L. A muscle-specific DNase I-like gene in human Xq28 (1995) Hum. Mol. Genet., 4, 1557-1564.

131. Zeng Z., Parmelee D., Hyaw H., Coleman T.A., Su K., Zhang J., Gentz R., Ruben S., Rosen C., Li Y. Cloning and characterization of a novel human DNase (1997) Biochem. Biophys. Res. Commun., 231, 499-504.

132. Pergolizzi R., Appierto V., Bosetti A., DeBellis G.L., Rovida E., Biunno I. Cloning of a gene encoding a DNase I-like endonuclease in the human Xq28 region (1996) Gene, 168, 267-270.

133. Baron W.F., Pan C.Q., Spencer S.A., Ryan A.M., Lazarus R.A., Baker K.P. Cloning and characterization of an actin-resistant DNase I-like endonuclease secreted by macrophages (1998) Gene, 215, 291-301.

134. Los M., Neubuser D., Coy J.F., Mozoluk M., Poustka A., Schulze-Osthoff K. Functional characterization of DNase X, a novel endonuclease expressed in muscle cells (2000) Biochemistry, 39, 7365-7373.

135. Shiokawa D., Kobayashi Т., Tanuma S. Involvement of DNase gamma in apoptosis associated with myogenic differentiation of C2C12 cells (2002) J. Biol. Chem., 277, 3103131037.

136. Bernardi G. Spleen acid deoxyribonuclease (1971) The Enzymes (Ed. Boyer, P.D.), New York, Academic Press, 271-287.

137. Шапот B.C. Нуклеазы (1968) Москва, Медицина.

138. Baker К.P., Baron W.F., Henzel W.J., Spencer S.A. Molecular cloning and characterization of human and murine DNase 7/(1998) Gene, 215, 281-289.

139. Shiokawa D., Tanuma S. Cloning of cDNAs encoding porcine and human DNase II (1998) Biochem. Biophys. Res. Commun., 247, 864-869.

140. Rrieser R.J., Eastman A. The cloning and expression of human deoxyribonuclease II. A possible role in apoptosis (1998) J. Bio I. Chem., 273, 30909-30914.

141. Yasuda Т., Nadano D., Sawazaki K., Kishi K. Genetic polymorphism of human deoxyribonuclease II (DNase II): low activity levels in urine and leukocytes are due to an autosomal recessive allele (1992) Arm. Hum. Genet., 56, 1-10.

142. Yasuda Т., Takeshita H., Iida R., Nakajima Т., Hosomi O., Nakashima Y., Kishi K. Molecular cloning of the cDNA encoding human deoxyribonuclease II (1998) J. Biol. Chem., 273, 2610-2616.

143. Yasuda Т., Takeshita H., Iida R., Tsutsumi S., Nakajima Т., Hosomi O., Nakashima Y., Mori S., Kishi K. Structure and organization of the human deoxyribonuclease II (DNase II) gene (1998) Ann. Hum. Genet., 62, 299-305.

144. MacLea K.S., Krieser R.J., Eastman A. Revised structure of the active form of human deoxyribonuclease Ilalpha (2002) Biochem. Biophys. Res. Commun., 292, 415-421.

145. Murai K., Yamanaka M., Akagi K., Anai M. Purification and properties of deoxyribonuclease IIfrom human urine (1980) J. Biochem. (Tokyo), 87, 1097-1103.

146. Yasuda Т., Takeshita H., Nakazato E., Nakajima Т., Hosomi O., Nakashima Y., Kishi K. Activity measurement for deoxyribonucleases I and II with picogram sensitivity based on DNA/SYBR Green 1 fluorescence (1998) Anal. Biochem., 255, 274-276.

147. Takeshita H., Yasuda Т., Iida R., Nakajima Т., Hosomi O., Nakashima Y., Mori S., Nomoto H., Kishi K. Identification of the three non-identical subunits constituting human deoxyribonuclease //(1998) FEBS Lett., 440, 239-242.

148. Harosh I., Binninger D.M., Harris P.V., Mezzina M., Boyd J.B. Mechanism of action of deoxyribonuclease IIfrom human lymphoblasts (1991) Eur. J. Biochem., 202, 479-484.

149. Mcllroy D., Tanaka M., Sakahira H., Fukuyama H., Suzuki M., Yamamura K., Ohsawa Y., Uchiyama Y., Nagata S. An auxiliary mode of apoptotic DNA fragmentation provided by phagocytes (2000) Genes Dev., 14, 549-558.

150. Odaka C., Mizuochi T.Role of macrophage lysosomal enzymes in the degradation of nucleosomes of apoptotic cells (1999) J. Immunol., 163, 5346-5352.

151. Barry M.A., Eastman A. Identification of deoxyribonuclease II as an endonuclease involved in apoptosis (1993) Arch. Biochem. Biophys., 300, 440-450.

152. Perez-Sala D., Collado-Escobar D., Mollinedo F. Intracellular alkalinization suppresses lovastatin-induced apoptosis in HL-60 cells through the inactivation of a pH-dependent endonuclease (1995) J. Biol. Chem., 270, 6235-6242.

153. Gottlieb R.A., Nordberg J., Skowronski E., Babior B.M .Apoptosis induced in Jurkat cells by several agents is preceded by intracellular acidification (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93, 654-658.

154. Krieser R.J., MacLea K.S., Park J.P., Eastman A. The cloning, genomic structure, localization, and expression of human deoxyribonuclease Ilbeta (2001) Gene, 269, 205-216.

155. Shiokawa D., Tanuma S.I. Isolation and characterization of the DLAD/Dlad genes, which lie head-to-head with the genes for urate oxidase (2001) Biochem. Biophys. Res. Commun., 288, 1119-1128.

156. Shiokawa D., Tanuma S. DLAD, a novel mammalian divalent cation-independent endonuclease with homology to DNase //(1999) Nucleic Acids Res., 27, 4083-4089.

157. Goding J.W., Terkeltaub R., Maurice M., Deterre P., Sali A., Belli S.I. Ecto-phosphodiesterase/pyrophosphatase of lymphocytes and non-lymphoid cells: structure and function of the PC-1 family (1998) Immunol. Rev., 161, 11-26.

158. Takahashi Т., Old L.J., Boyse E.A. Surface alloantigens of plasma cells (1970) J. Exp. Med., 131, 1325-1341.

159. Haugen H.F., Skrede S. Nucleotide pyrophosphatase and phosphodiesterase. I. Organ distribution and activities in body fluids (1977) Clin. Chem., 23, 1531-1537.

160. Hynie I., Meuffels M., Poznanski W.J. Determination of phosphodiesterase I activity in human blood serum (1975) Clin. Chem., 21, 1383-1387.

161. Tsou К.С., Ledis S., McCoy M.G. 5'-Nucleotide phosphodiesterase isoenzyme pattern in the serum of human hepatoma (1973) Cancer Res., 33, 2215-2217.

162. Rebbe N.F., Tong B.D., Finley E.M., Hickman S. Identification of nucleotide pyrophosphatase/'alkaline phosphodiesterase I activity associated with the mouse plasma cell differentiation antigen PC-1 (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 5192-5196.

163. Buckley M.F., Loveland K.A., McKinstry W.J., Garson O.M., Goding J.W. Plasma cell membrane glycoprotein РС-1. с DNA cloning of the human molecule, amino acid sequence, and chromosomal location (1990) J. Biol. Chem., 265, 17506-17511.

164. Funakoshi I., Kato H., Horie K., Yano Т., Hori Y., Kobayashi H., Inoue Т., Suzuki H., Fukui S., Tsukahara M. Molecular cloning of cDNAs for human fibroblast nucleotide pyrophosphatase (1992) Arch. Biochem. Biophys., 295, 180-187.

165. Jin-Hua P., Goding J.W., Nakamura H., Sano K. Molecular cloning and chromosomal localization of PD-Ibeta (PDNP3), a new member of the human phosphodiesterase I genes (1997) Genomics, 45, 412-415.

166. Ito K., Yamamoto Т., Minamiura N. Phosphodiesterase I in human urine: purification and characterization of the enzyme (1987) J. Biochem. (Tokyo), 102, 359-367.

167. Haugen H.F., Skrede S. Nucleotide pyrophosphatase and phosphodiesterase I. Demonstration of activity in normal serum, and an increase in cholestatic liver disease (1976) Scand. J. Gastroenterol., 11, 121-127.

168. Hosoda N., Hoshino S.I., Kanda Y., Katada T. Inhibition of phosphodiesterase/pyrophosphatase activity of PC-1 by its association with glycosaminoglycans (1999) Eur. J. Bioche^i., 265, 763-770.

169. Belli S.I., Goding J.W. Biochemical characterization of human PC-1, an enzyme possessing alkaline phosphodiesterase I and nucleotide pyrophosphatase activities (1994) Eur. J. Biochem., 226, 433-443.

170. Yano Т., Horie K., Kanamoto R., Kitagawa H., Funakoshi I., Yamashina I. Immunoaffinity purification and characterization of nucleotide pyrophosphatase from human placenta (1987) Biochem. Biophys. Res. Commun., 147, 1061-1069.

171. Luthje J., Ogilvie A. 5'-Nucleotide phosphodiesterase isoenzymes in human serum: quantitative measurement and some biochemical properties (1987) Clin. Chim. Acta, 164, 275-284.

172. Hawley D.M., Crisp M., Hodes M.E. Tissue specificity of human phosphodiesterase. I. Blood serum (1983) Clin. Chim. Acta, 130, 31-37.

173. Luthje J., Ogilvie A. Catabolism of Ap4A and АрЗА in human serum. Identification of isoenzymes and their partial characterization (1987) Eur. J. Biochem., 169, 385-388.

174. Luthje J., Ogilvie A. Separation of 5'-nucleotide phosphodiesterase isoenzymes of human serum by anion exchange high pressure liquid chromatography (1987) Clin. Chim. Acta, 169, 183-188.

175. Eder P.S., DeVine R.J., Dagle J.M., Walder J.A. Substrate specificity and kinetics of degradation of antisense oligonucleotides by a 3' exonuclease in plasma (1991) Antisense Res. Dev., 1, 141-151.

176. Yano Т., Funakoshi I., Yamashina I. Purification and properties of nucleotide pyrophosphatase from human placenta (1985) J. Biochem. (Tokyo), 98, 1097-1107.

177. Kelly S.J., Dardinger D.E., Butler L.G.Hydrolysis of phosphonate esters catalyzed by 5'-nucleotide phosphodiesterase (1975) Biochemistry, 14, 4983-4988.

178. Luthje J., Pickert S., Ogilvie A., Homemann E., Siegfried W., Waldherr A., Domschke W. Levels of 5'-nucleotide phosphodiesterase isoenzymes in normal and pathological sera (1988) Clin. Chim. Acta, 177, 131-139.

179. Shaw J.P., Kent K., Bird J., Fishback J., Froehler B. Modified deoxyoligonucleotides stable to exonuclease degradation in serum (1991) Nucleic Acids Res., 19, 747-750.

180. Vichier-Guerre S., Pompon A., Lefebvre I., Imbach J.L. New insights into the resistance of alpha-oligonucleotides to nucleases (1994) Antisense Res. Dev., 4, 9-18.

181. Belli S.I., Sali A., Goding J.W. Divalent cations stabilize the conformation of plasma cell membrane glycoprotein PC-1 (alkaline phosphodiesterase I) (1994) Biochem. J., 304, 75-80.

182. Karpouzas G.A., Terkeltaub R.A. New developments in the pathogenesis of articular cartilage calcification (1999) Curr. Rheumatol. Rep., 1, 121-127.

183. Liu X., Zou H., Slaughter C., Wang X. DFF, a heterodimeric protein that functions downstream of caspase-3 to trigger DNA fragmentation during apoptosis (1997) Cell, 89, 175-184.

184. Mukae N., Enari M., Sakahira H., Fukuda Y., Inazawa J., Toh H., Nagata S. Molecular cloning and characterization of human caspase-activated DNase (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 9123-9128.

185. Halenbeck R., MacDonald H., Roulston A., Chen T.T., Conroy L., Williams L.T. CPAN, a human nuclease regulated by the caspase-sensitive inhibitor DFF45 (1998) Curr. Biol., 8, 537-540.

186. McCarty J.S., Toh S.Y., Li P. Study of DFF45 in its role of chaperone and inhibitor: two independent inhibitory domains of DFF40 nuclease activity (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun., 264, 176-180.

187. McCarty J.S., Toh S.Y., Li P. Multiple domains of DFF45 bind synergistically to DFF40: roles of caspase cleavage and sequestration of activator domain of DFF40 (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun., 264, 181-185.

188. Wolf B.B., Schuler M., Echeverri F., Green D.R. Caspase-3 is the primary activator of apoptotic DNA fragmentation via DNA fragmentation factor-45/inhibitor of caspase-activated DNase inactivation (1999) J. Biol. Chem., 274, 30651-30656.

189. Liu X., Zou H., Widlak P., Garrard W., Wang X. Activation of the apoptotic endonuclease DFF40 (caspase-activated DNase or nuclease). Oligomerization and direct interaction with histone HI (1999) J, Biol. Chem., 274, 13836-13840.

190. Inohara N., Koseki Т., Chen S., Benedict M.A., Nunez G. Identification of regulatory and catalytic domains in the apoptosis nuclease DFF40/CAD (1999) J.Biol. Chem., 274, 27021 A.

191. Sakahira H., Takemura Y., Nagata S. Enzymatic active site of caspase-activated DNase (CAD) and its inhibition by inhibitor of CAD (2001) Arch. Biochem. Biophys., 388, 91-99.

192. Meiss G., Scholz S.R., Korn C., Gimadutdinow O., Pingoud A. Identification of functionally relevant histidine residues in the apoptotic nuclease CAD (2001) Nucleic Acids Res., 29, 3901-3909.

193. Widlak P., Garrard W.T. Ionic and cofactor requirements for the activity of the apoptotic endonuclease DFF40/CAD (2001) Mol. Cell Biochem., 218, 125-130.

194. Widlak P., Li P., Wang X., Garrard W.T. Cleavage preferences of the apoptotic endonuclease DFF40 (caspase-activated DNase or nuclease) on naked DNA and chromatin substrates (2000) J. Biol. Chem., 275, 8226-8232.

195. Huang K.J., Zemelman B.V., Lehman I.R. Endonuclease G, a candidate human enzyme for the initiation of genomic inversion in herpes simplex type 1 virus (2002) J. Biol. Chem., 277, 21071-21079.

196. Low R.L., Buzan J.M., Couper C.L. The preference of the mitochondrial endonuclease for a conserved sequence block in mitochondrial DNA is highly conserved during mammalian evolution (1988) Nucleic Acids Res., 16, 6427-6445.

197. Gerschenson M., Houmiel K.L., Low R.L. Endonuclease G from mammalian nuclei is identical to the major endonuclease of mitochondria (1995) Nucleic Acids Res., 23, 88-97.

198. Ruiz-Carrillo A., Renaud J. Endonuclease G: a (dG)n X (dC)n-specific DNase from higher eukaryotes (1987) EMBO J., 6, 401-407.

199. Ohsato Т., Ishihara N., Muta Т., Umeda S., Ikeda S., Mihara K., Hamasaki N., Kang D. Mammalian mitochondrial endonuclease G. Digestion of R-loops and localization in intermembrane space (2002) Eur. J. Biochem., 269, 5765-5770.

200. Widlak P., Li L.Y., Wang X., Garrard W.T. Action of recombinant human apoptotic endonuclease G on naked DNA and chromatin substrates: cooperation with exonuclease and DNase I{2001) J. Biol. Chem., 276, 48404-48409.

201. Low R.L., Gerschenson M. Endonuclease G isolation and assays (2002) Methods Mol. Biol., 197, 331-349.

202. Ikeda S., Seki Y., Ozaki K. Mitochondrial factors modulate the activity of endonuclease G, the major nuclease of Mammalian mitochondria (2002) J. Biochem. Mol. Biol. Biophys., 6, 17-21.

203. Parks W.A., Couper C.L., Low R.L. Phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine enhance the activity of the mammalian mitochondrial endonuclease in vitro (1990) J. Biol. Chem., 265, 3436-3439.

204. Cote J., Ruiz-Carrillo A. Primers for mitochondrial DNA replication generated by endonuclease G (1993) Science, 261, 765-769.

205. Li L.Y., Luo X., Wang X. Endonuclease G is an apoptotic DNase when released from mitochondria (2001) Nature, 412, 95-99.

206. Jameson G.B., Anderson B.F., Norris G.E., Thomas D.H., Baker E.N. Structure of human apolactoferrin at 2.0 A resolution. Refinement and analysis of ligand-induced conformational change (1998) Acta Crystallogr. D. Biol. Crystallogr., 54, 1319-1335.

207. Канышкова Т.Г., Бунева B.H., Невинский Г .А. Лактоферрин и его биологические функции (2001) Биохимия, 66, 5-13.

208. Kanyshkova T.G., Semenov D.V., Buneva V.N., Nevinsky G.A. Human milk lactoferrin binds two DNA molecules with different affinities (1999) FEBS Lett., 451, 235-237.

209. Semenov D.V., Kanyshkova T.G., Buneva V.N., Nevinsky G.A. Human milk lactoferrin binds ATP and dissociates into monomers (1999) Biochem. Mol. Biol. Int., 47, 177-184.

210. Furmanski P., Li Z.P., Fortuna M.B., Swamy C.V., Das M.R. Multiple molecular forms of human lactoferrin. Identification of a class of lactoferrins that possess ribonuclease activity and lack iron-binding capacity (1989) J. Exp. Med., 170, 415-429.

211. Kanyshkova T.G., Babina S.E., Semenov D.V., Isaeva N., Vlassov A.V., Neustroev K.N., Kul'minskaya A.A., Buneva V.N., Nevinsky G.A. Multiple enzymic activities of human milk lactoferrin (2003) Eur. J. Biochem., 270, 3353-3361.

212. Mann D.M., Romm E., Migliorini M. Delineation of the glycosaminoglycan-binding site in the human inflammatory response protein lactoferrin (1994) J. Biol. Chem., 269, 2366123667.

213. Beaucage S.L., Caruthers M.H. Deoxynucleoside phosphoramidites A new class of key intermediates for deoxypoly nucleotide synthesis (1981) Tetrahedron Lett., 22, 1859-1862.

214. Gerald D., Fasman P.D. Handbook of Biochemistry and Molecular Biology. Nucleic Acides (1975) New York, CRC Press.

215. Kurtzke J.F. Rating neurologic impairment in multiple sclerosis: an expanded disability status scale (EDSS) (1983) Neurology, 33, 1444-1452.

216. Фриммель Г. Иммунологические методы (1987) Москва, Медицина.

217. Suelter C.H. A practical guide to enzymology (1985) Vol.3, New York, John Wiley & Sons.

218. Остерман JT.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование (1981) Москва, Наука.

219. Morrissey J.H. Silver stain for proteins in polyacrylamide gels: a modified procedure with enhanced uniform sensitivity (1981) Anal. Biochem., 117, 307-310.

220. Sambrook J., Russell D.W. Molecular Cloning: A laboratory manual (2001) New York, Cold Spring Harbor Laboratory Press.

221. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76, 4350-4354.

222. Scopsi L., Larsson hi. Increased sensitivity in peroxidase immunocytochemistry. A comparative study of a number of peroxidase visualization methods employing a model system (1986) Histochemistry, 84, 221-230.

223. Lee J.S., Dombrovski D.S., Mosmann T.R. Specificity of autoimmune monoclonal Fab fragments binding to single-stranded deoxyribonucleic acid (1982) Biochemistry, 21, 49404945.

224. Birnboim H.C., Doly J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA (1979) Nucleic Acids Res, 7, 1513-1523.

225. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика (1991) Москва, Мир.

226. Kunitz М. Crystalline deoxyribonuclease: Isolation and general properties; a spectrophotometric method for the measurement of deoxyribonuclease activity (1950) J. Gen. Physiol., 33, 349-362.

227. Irie M., Mikami F., Monma K., Ohgi K., Watanabe H., Yamaguchi R., Nagase H. Kinetic studies on the cleavage of oligouridilic acids and poly U by bovine pancreatic ribonuclease A (1984) J. Biochem., 96, 89-96.

228. Crook E.M., Mathias A.P., Rabin B.R. Spectrophotometric assay of bovine pancreatic ribonuclease by the use of cytidine 2':3'-phosphate (1960) Biochem. J., 74, 234-238.

229. Schauenstein E., Dachs F., Reiter M., Gombotz H., List W. Labile disulfide bonds and free thiol groops in human IgG (1986) Int. Archs. Allergy Appl. Immun., 80, 174-179.

230. Schurman J., Perdok G.J., Gorter A.D., Aalberse R.C. The inter-heavy chain disulfide bonds of 'IgG4 are in equilibrium with intra-chain disulfide bonds (2001) Mol. Immunol., 38, 1-8.

231. Соринсон C.H. Вирусные гепатиты (1998) Санкт-Петербург, Теза.

232. Manns M.P. Autoantibodies in chronic hepatitis: diagnostic reagents and scientific tools to study etiology, pathogenesis, and cell biology (1994) Prog. Liver Dis., 12, 137-156.

233. Balint J.P., Jr., Ikeda Y., Nagai Т., Terman D.S. Isolation of human and canine IgM utilizing protein A affinity chromatography (1981) Immunol. Commun., 10, 533-540.

234. Косик О.Г. Физико-химические особенности IgA, IgM и IgG сыворотки крови здоровых людей (1991) Иммунология, 1, 21-23.

235. Андриевская О.А. РНК-гидролизующие антитела из сыворотки крови больных системной красной волчанкой (1998) Диссертация на соискание уч. степени канд. хим. наук, Новосибирск.

236. Puccetti A., Madaio М.Р., Bellese G., Migliorini P. Anti-DNA antibodies bind to DNase I (1995) J. Exp. Med., 181, 1797-1804.

237. Beintema J.J., Hofsteenge J., Iwama M., Morita Т., Ohgi K., Irie M., Sugiyama R.H., Schieven G.L., Dekker C.A., Glitz D.G. Amino acid sequence of the nonsecretory ribonuclease of human urine (1988) Biochemistry, 27, 4530-4538.

238. Рыкова E. Взаимодействие олигонуклеотидов с белками сыворотки крови. Изучение условий образования и свойств олигонуклеотид-белковых комплексов (1994) Диссертация на соискание уч. степени канд. биол. наук, Новосибирск.

239. Rosenthal A.L., Lacks S.A. Nuclease detection in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (1977) Anal. Biochem., 80, 76-90.

240. Kanyshkova T.G., Semenov D.V., Khlimankov D., Buneva V.N., Nevinsky G.A. DNA-hydrolyzing activity of the light chain of IgG antibodies from milk of healthy human mothers (1997) FEBS Lett., 416, 23-26.

241. Власов А.В. Рибонуклеазы человека (1998) Биохимия, 63, 1587-1599.

242. Akagi К., Murai К., Hirao N., Yamanaka M. Purification and properties of alkaline ribonuclease from human serum (1976) Biochim. Biophys. Acta., 442, 368-378.