Динамика показателей системного и местного иммунитета у пациентов с бронхолегочными заболеваниями при применении поликомпонентной вакцины: ВП-4 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Слатинова, Ольга Владимировна

• Слатинова, Ольга Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Слатинова, Ольга Владимировна

Введение. Актуальность проблемы.стр.

Обзор литературы.стр.

Глава 1. Иммунологическая система слизистых. Показатели местного мукозального гуморального иммунитета при некоторых патологических состояниях и при непарантеральных методах вакцинации.стр.

Глава 2. Результаты клинических испытаний вакцины поликомпонентной..стр.

1.1. Оценка клинической эффективности вакцины поликомпонентной.стр.

1.2. Изменение некоторых иммунологических показателей в результате проведения курса вакцинотерапии препаратом ВП-4.стр.

Глава 3. Материалы и методы.стр.

3.1 Вакцинируемые пациентыстр. 3.2 Группы сравнения при обслелрвании параметров местного гуморального мукозального иммунитетастр.

3.3 Схемы применения поликомпонентной вакциныстр.

3.4 Методика непрямой иммунофлуоресценции для определения фенотипа лимфоцитов периферической крови с помощью моноклональных антител;стр.

3.5 Определение концентрации иммуноглобулинов классов А, М, в в сыворотке кровистр.

3.6 Определение концентрации иммуноглобулинов в слюнестр.

3.7 Определение общего белка по Бредфордустр.

3.8 Определение титров специфических антител в РПГА с использованием эритроцитарных диагностикумовстр.

3.9 Определение ^в-антител к бактериальным антигенам иммуно-ферментным анализомстр.

ЗЛО Статистическая обработка данныхстр.

Глава 4. Результаты собственных исследований. стр.

4.1. Изменения уровня популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови у больных с хроническими бронхолегочными заболеваниями в результате вакцинотерапии ВП-4.стр.

4.2. Особенности гуморального иммунного ответа у пациентов с хроническими бронхолегочными заболеваниями при проведении курса терапии вакциной поликомпонентной.стр.

4.3. Методические подходы к определению уровня иммуноглобулинов классов A,G и секреторного А в слюне и диагностическая ценность этих показателей.стр.

4.4. Параметры гуморального мукозального иммунитета у больных с различными бронхолегочными заболеваниями.стр.

4.5. Показатели местного мукозального гуморального иммунитета у часто болеющих детей.стр.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Динамика показателей системного и местного иммунитета у пациентов с бронхолегочными заболеваниями при применении поликомпонентной вакцины: ВП-4»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.

В последние годы практикующим врачам большинства специальностей все чаще приходиться сталкиваться с различными иммунологическими нарушениями, сопровождающими заболевания, на первый взгляд, не связанные напрямую с патологиями иммунной системы. Такие изменения могут быть обусловлены многими причинами, в том числе ухудшающейся экологической обстановкой, рядом социальных факторов и др. (3, 4, 5, 17, 28, 39, 56, 64, 72).

При ряде хронических заболеваний клинические проявления, течение и исход заболевания, способность воспринимать действие проводимой терапии во многом определяются состоянием иммунной системы больного (52). По данным ВОЗ, одной из причин хронизации заболевания следует считать развитие у пациента вторичной иммунологической недостаточности, ведущей к снижению сопротивляемости организма (48).

Снижение иммунологической реактивности организма влечет за собой многочисленные неблагоприятные последствия. Одно из них - частые респираторные инфекционные заболевания. Так, дети, у которых регистрируется более 5-ти случаев ОРВИ в году - часто болеющие, формируют особую группу пациентов, характеризующуюся определенными иммунологическими нарушениями (1, 28, 42, 46, 54, 89, 111). В этих случаях сдвиги в параметрах иммунитета обычно не обусловлены врожденной аномалией. Подобные отклонения в показателях иммунной системы, как правило, легко поддаются нормализации при проведении курса лечения иммунокорригирующими препаратами (29, 36, 49, 52, 77).

С другой стороны, неуклонный рост аллергических и аутоиммунных заболеваний говорит о том, что широкое распространение получил тип нарушений иммунной системы, при котором меняется характер иммунологических реакций при сохранении высокой функциональной активности большинства звеньев иммунной системы (3, 50, 56).

Многими исследователями неоднократно было показано, что заболевания верхних дыхательных путей и аллергической, и инфекционной природы протекают на фоне нарушений иммунологического статуса больного (16, 67, 69, 146). При этом изменения отмечаются и в уровне иммуноглобулинов сыворотки крови, и в соотношении субпопуляций лимфоцитов, и в параметрах мукозального иммунитета (53, 106, 146). Очевидно, что в этих случаях наряду с традиционными методами терапии требуется использование иммунокорригирующих препаратов для повышения эффективности лечения.

На сегодняшний день фармацевтическая промышленность располагает широким спектром средств такого рода. Среди них есть препараты как узконаправленного иммуностимулирующего действия (миелопид, Т-активин, ликопид), так и обладающие неспецифическими иммуномоду-лирующими свойствами. К последним можно отнести многие терапевтические вакцины, созданные на основе бактериальных антигенов (44, 58, 93, 95, 102, 139, 145). Большей частью это импортные препараты, такие как ИРС-19 (Франция), бронхомунал (Швейцария), бронховаксом (Словения), рибомунил (иммунал, Франция) и др. Каждая из вышеперечисленных бактериальных вакцин содержит большое количество (порядка 7- 19) компонентов, что предполагает обеспечение протективного эффекта при использовании препарата путем формирования антител многих специфичностей.

Наряду с выше упомянутыми лекарственными средствами существует их отечественный аналог (12, 19, 21, 34). Это поликомпонентная вакцина (ВП-4), созданная сотрудниками Института вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова под руководством профессора Егоровой Н.Б. Препарат предназначен для терапии и профилактики воспалительных заболеваний органов дыхания (21). Вакцина включает в себя антигены четырех условно-патогенных микроорганизмов, а именно Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae. Антигенные компоненты стафилококка получены путем водной экстракции культуры, а остальных трех микроорганизмов - путем гидроксиламино-вой экстракции. При разработке вакцины поликомпонентной из антигенов условно-патогенных микроорганизмов авторы руководствовались необходимостью обеспечения протективного эффекта в отношении значительного числа видов и серологических типов возбудителей, были использованы оригинальные подходы, что выгодно отличает ВП-4 от импортных аналогов (34). Расширение спектра действия препарата в отношении различных этиологически значимых микроорганизмов в данном случае достигалось не за счет увеличения числа компонентов в препарате, а за счет тщательного подбора антигенов, обеспечивающих широкий спектр перекрестных реакций с наиболее часто встречающимися патогенными представителями микрофлоры бронхо-легочного тракта и обладающих иммуномодулирующими свойствами (22). Антигены подобранных бактериальных штаммов обладали высокой иммуногенно-стью и широкой перекрестной реактивностью, в частности, в отношении Hemophilus influenzae тип b, и различных сероваров К. pneumoniae (20, 22, 33).

Проведенные клинические исследования подтвердили высокую эффективность ВП-4 у пациентов с различными заболеваниями, в том числе у больных с хроническими обструктивными заболеваниями легких (40, 68, 69). В группах детей с бронхиальной астмой различных типов также было показано, что применение препарата в высоком проценте случаев обеспечивает хороший клинический результат, и коррекцию уровня популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови (7, 8, 55, 70). Однако механизмы, обуславливающие положительный терапевтический эффект в результате вакцинотерапии ВП-4, четко определены не были. В частности, не было изучено влияние вакцинотерапии

ВП-4 на факторы местного мукозального гуморального иммунитета, которые играют важную роль в обеспечении протективных свойств слизистой респираторного тракта. Это создает затруднения при определении категории больных, которым поликомпонентная вакцина показана к применению.

Исходя из выше изложенного, нами была сформулирована следующая цель работы.

Охарактеризовать воздействие поликомпонентной вакцины ВП-4 на различные звенья системного и местного иммунитета у пациентов с хроническими бронхолегочными заболеваниями и у часто болеющих детей.

Для решения поставленной проблемы были определены следующие задачи.

1. Оценить иммунологическую реактивность слизистых верхних дыхательных путей по уровню 1§А и з^А в слюне в следующих группах пациентов: а) у больных с бронхиальной астмой различных форм легкого и среднетяжелого течения; б) у больных с хроническим обструктивным бронхитом; в) у часто болеющих детей.

2. Выявить характерные особенности в изменениях уровня популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови у больных с хроническими бронхолегочными заболеваниями различной этиологии в результате проведения курса вакцинотерапии ВП-4.

3. Исследовать динамику уровня иммуноглобулинов классов А, М, О в сыворотке крови у пациентов с хроническими бронхолегочными заболеваниями при применении поликомпонентной вакцины ВП-4.

4. Определить динамику уровня антител к антигенам S. aureus, P. vulgaris, Е. coli, К. pneumoniae, у больных с хроническими бронхолегоч-ными заболеваниями в результате вакцинотерапии ВП-4.

5. Охарактеризовать изменения показателей местного мукозального гуморального иммунитета у пациентов с хроническими бронхолегоч-ными заболеваниями и у часто болеющих детей в результате вакцинотерапии ВП-4.

Научная новизна работы.

В проведенном исследовании впервые получены данные о влиянии вакцины поликомпонентной (ВП-4) на параметры мукозального гуморального иммунитета в группах больных с хроническими бронхолегоч-ными заболеваниями и у часто болеющих детей. Было выявлено, что в группе пациентов старше 18 лет с хроническими бронхолегочными заболеваниями при исходно высоком уровне slgA в слюне применение поликомпонентной вакцины позволяет значительно снизить уровень этого иммуноглобулина (различия достоверны, р<0,05). У часто болеющих детей в результате вакцинотерапии ВП-4 наблюдалось статистически значимое увеличение концентрации IgG и slgA в слюне.

Отслежена динамика концентрации иммуноглобулинов А, М, G сыворотки крови при вакцинотерапии ВП-4. Выявлено иммуномодули-рующее действие препарата на уровень IgG у детей с хроническими бронхолегочными заболеваниями: происходило снижение исходно высокой концентрации IgG сыворотки крови, и повышение - при исходно низком уровне (различия достоверны, р<0,05). Также, у детей отмечено нарастание уровня IgA в сыворотке крови при исходно сниженных значениях этого показателя. У пациентов старшего возраста при исходно нормальном уровне иммуноглобулинов сыворотки крови происходило статистически значимое нарастание уровня IgG и IgA в результате вакцинотерапии ВП-4.

Впервые у вакцинированных больных проведено определение уровня IgG-антител ко всем компонентам вакцины (к антигенам S. aureus, Р. vulgaris, Е. coli, К, pneumoniae) методом ИФА. Выявлено иммуномоду-лирующее действие ВП-4 в отношении IgG-антител к антигенам S. aureus. Наблюдалось нарастание специфических IgG-антител к антигенам Р. vulgaris в группе пациентов с хроническими бронхолегочными заболеваниями старше 18 лет (при использовании подкожного введения препарата) и к антигенам S. aureus, в той же группе, при исходно невысоких значениях уровня антител к этому компоненту вакцины.

В работе представлены данные по уровню IgG, IgA, slgA в слюне у больных с различными хроническими бронхолегочными заболеваниями, в том числе с атопической бронхиальной астмой, инфекционно-зависимой бронхиальной астмой, хроническим обструктивным бронхитом. У пациентов с бронхиальной астмой (не зависимо от формы заболевания) наблюдается тенденция к повышению уровня IgG и slgA в слюне, в то время как для детей с ХОБ характерно снижение уровня slgA в слюне, лица с повышенными значениями этого показателя среди пациентов с ХОБ не выявлялись.

Проведен анализ значений концентрации иммуноглобулинов в слюне в группах пациентов с бронхиальной астмой в зависимости от типа заболевания и его степени тяжести. У детей с АБА увеличение степени тяжести заболевания сопровождается увеличением концентрации slgA в слюне. При среднетяжелом течении заболевания, в отличие от легкой формы, не выявляются пациенты со сниженными значениями этого показателя.

На основании данных первичного иммунологического обследования часто болеющих детей нами впервые была отмечена значимость факторов мукозального гуморального иммунитета для этой категории больных: у детей с высокой восприимчивостью к вирусной инфекции респираторного тракта выявлена низкая концентрация б^А в слюне по сравнению с практически здоровыми детьми. У детей с хроническими очагами бактериальной инфекции ЛОР-органов выявлено снижение в уровне 1§А в слюне, определяющееся в РИД по Манчини с антисывороткой к а-цепи молекулы 1§А, но не с антисывороткой к секреторному компоненту.

Практическая значимость работы.

Данные, полученные в проведенном исследовании, могут быть использованы в качестве практических рекомендаций при назначении вакцинотерапии ВП-4.

1. Определены группы больных, для которых такое лечение является целесообразным и может дать выраженный положительный клинический эффект. В частности, учитывая иммуномодулирующее действие препарата в отношении популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови назначение курса вакцинотерапии ВП-4 можно рекомендовать лицам с отклонениями в клеточном звене иммунитета. В той же мере вакцинотерапия ВП-4 показана детям со сниженным уровнем в сыворотке крови, поскольку поликомпонентная вакцина способствует нарастанию концентрации ^А в сыворотке.

2. Показана необходимость учитывать иммунологические показатели больного при рекомендации провести курс лечения ВП-4. Некоторые отклонения в параметрах иммунитета, в частности, повышенный уровень СД4+-лимфоцитов, может служить «предупредительным» сигналом о наличии серьезных иммунологических нарушений у такого пациента. У детей с исходно повышенным уровнем СД4+-лимфоцитов снизить этот показатель при помощи терапии ВП-4 не удается. Знание исходных иммунологических параметров позволит спрогнозировать ожидаемый результат в сдвигах лабораторных показателей больного.

3. Возможно использование препарата как профилактического средства, например, для часто болеющих детей, причем как для детей с частыми эпизодами ОРВИ и высокой восприимчивостью к вирусной инфекции, так и для детей с очагами хронической бактериальной инфекции ЛОР-органов.

Представленные данные наглядно иллюстрируют информационную ценность определения иммуноглобулинов в слюне для некоторых категорий больных. В частности, высокий уровень б^А в слюне, йЛ? {м.лг'се * характерный для пациентов с бронхиальной астмой, но не характерный для больных с ХОБ, может служить дополнительным дифферен-цировочным критерием при диагностике этих заболеваний. Оценка локальной иммунологической реактивности слизистых необходима для представителей группы часто болеющих детей с целью выявления снижения протективных свойств слизистых носоглотки.

В работе описан ряд методических аспектов, касающихся методов сбора слюны, стандартизации показателей, постановки РИД по Ман-чини со слюной.

Оценка уровня иммуноглобулинов в слюне включена в перечень услуг по лабораторной диагностике аллергологического отдела НИ-ИВС им. И.И. Мечникова.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Слатинова, Ольга Владимировна

выводы.

1. Вакцинотерапия ВП-4 оказывает иммуномодулирующее действие на количественное содержание различных популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови, как у детей, так и у взрослого контингента больных с хроническими бронхолегочыми заболеваниями.

2. В результ&те проведения курса лечения поликомпонентной вакциной происходит нормализация уровня иммуноглобулинов сыворотки крови у больных с хроническими бронхолегочными заболеваниями.

3. После приема ВП-4 отмечается нарастание титров антител в сыворотке крови к антигенам Р. vulgaris, Е. coli, К. pneumoniae, выявляемых в РПГА. Увеличение титров антител к S. aureus не наблюдалось.

4. В результате вакцинотерапии ВП-4 у пациентов старшего возраста с хроническими бронхолегочными заболеваниями ( при использовании подкожного способа введения препарата) происходило нарастание IgG-антител к антигенам Р. vulgaris, а также был выявлен иммуномодулирующий эффект в отношении IgG-антител к антигенам S. aureus.

5. У детей с частыми эпизодами ОРВИ выявлен достоверно более низкий (р<0,05) уровень slgA в слюне в сравнении с практически здоровыми детьми. Наряду с этим, у часто болеющих детей с очагами хронической бактериальной инфекции JIOP-органов преимущественно наблюдалось снижение уровня IgA в слюне, но не slgA.

6. Введение поликомпонентной вакцины часто болеющим детям вызывает статистически значимое увеличение уровня IgG и slgA в слюне.

7. У пациентов старшего возраста с хроническими бронхолегочными заболеваниями в результате терапии поликомпонентной вакциной наблюдается нормализация концентрации slgA в слюне, тогда как у детей, с теми же заболеваниями, отмечается тенденция к увеличению ^А и б^А в слюне.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Слатинова, Ольга Владимировна, 2000 год

1. Абатуров А.Е., Абатуров Ан. Е./ Нозоспецифические особенности динамики иммунологических показателей у детей раннего возраста больных острыми респираторными вирусными инфекциями различной этиологии.// ЖМЭИ.-1989.-№6.-с.70-74

2. Агальцова С.И. Иммунологические и морфологические проявления местного и системного иммунитета при пероральной иммунизации корпускулярной коклюшной вакциной: Автореф. дис. канд. мед. на-ук.-М., 1990.-24 с.

3. Адо А.Д., Булатов П.К. Клинико-физиологические основы классификации бронхиальной астмы. -М., 1969.-206 с.

4. Аллергия, иммунитет и патология внутренних органов: Сборник научных трудов./-Рязань.-1995.-с.26

5. Артемова О.П. Сравнительная оценка гуморального звена местного иммунитета у больных с хроническими неспецифическими заболеваниями легких и некоторые способы его коррекции: Автореф. дис. канд. мед. наук.-М., 1995.-23 с.

6. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробио-логии.-М., 1961.-180 с.

7. Балаболкин И.И., Степушина М.А., Егорова Н.Б., и др./ Использование поликомпонентной бактериальной вакцины ВП-4 в лечении бронхиальной астмы у детей.// Int. J. on immunorehabilitation.-1998.-№10.-с.158-164

8. Балаболкин И.И., Степушина M.A., Краснопрошина Л.И. и др./ Эффективность поликомпонентной бактериальной вакцины ВП-4 при бронхиальной астме у детей.// Педиатрия.-1998.-№4.-с.29-33

9. Бейли Н. Статистические методы в биологии.: Пер. с англ./Под ред. Налимова В.В.-М.: «Мир»,1959.-271 с.

10. Беляков И.М./ Иммунная система слизистых./ Иммунология,-1997.-№4.-с. 7-13

11. Бредфорд Хилл А. Основы медицинской статистики: Пер. с англ./Под ред. Меркова А.М.-М.: «Гос. Издательство мед. литературы», 1958.-306 с.

12. Волгарева Г.М., Голгеев Ю.Д., Егорова Н.Б., и др./ Исследование мутагенности новой поликомпонентной вакцины из антигенов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris и Escherichia coli.// ЖМЭИ.-1991.-№6.-с.50-52

13. Воробьев А.А., Осипов В.И./ Роль проницаемости мембран слизистой желудочно-кишечного тракта для микроорганизмов и их антигенов в механизме пероральной вакцинации.// ЖМЭИ.-1971.-№4.-с.60-64

14. Воробьев А.А., Лебединский В.А. Массовые способы иммунизации.-М.: «Медицина», 1977.-c.255

15. Воробьев А.А., Осипов В.И., Лебединский В.А./ Современное представление о проникновении макромолекулярных антигенов и микроорганизмов через слизистые оболочки и в клетки животных.// Успехи современной биологии.- 1979.-т.88.-№2(5).-с. 226-240

16. Галкина О.В., Алешина Л.А., Басек Т.С., и др. / Особенности имму-ноглобулинового профиля бронхоальвеолярной жидкости при патологии дыхательного тракта.// Медицинская иммунология,-1999.-Т.1.-№3-4.-с.34-35

17. Гервазиева В.Б., Петрова Т.И./ Экология и аллергические заболевания у детей.// Аллергология и иммунология.-2000.-т.1.-№1.-с. 101-108

18. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов.-Л. «Медицина», 1978.—290 с.

19. Егорова Н.Б., Мансурова Н.Л., Ефремова В.Н. и др./ Экспериментальное изучение иммуногенности монопрепарата антигенного комплекса клебсиеллы пневмонии его ассоциаций с антигенами стафилококка, протея и кишечной палочки.// ЖМЭИ.-1984.-№1.-с.35-38

20. Егорова Н.Б., Ефремова В.Н., Курбатова Е.А., Кузьмина Л.А./ Итоги экспериментального и клинического изучения поликомпонентной вакцины из антигенов условно патогенных микроорганизмов.// ЖМЭИ-1997.-№6.-с.96-101

21. Иммуномодуляторы: Сборник научных трудов/ НИИВС им. И.И. Мечникова АМН СССР.-М.:-1987-198 с.

22. Иммунохимическая диагностика гаммапатий: Метод, рекомендации/ МНИИЭМ им. Г.М. Габричевского МЗ РФ; Подгот. Чернохвостова Е.В., Герман.Г.П. Москва, 1984.- 51 с.

23. Иммунологические методы./Под ред. Г. Фримеля.-М.: «Медицина», 1987.-C.73-89

24. Исследование иммуноглобулинов и других белков в секретах человека: Метод, рекомендации/ МНИИЭМ им. Г.М. Габричевского МЗ РФ; Подгот. Чернохвостова Е.В. и др. Москва, 1987.- 33 с.

25. Каральник Б.В. Эритроцитарные диагностикумы.-М.: «Медицина», 1976

26. Каральник Б.В./ Варианты реакции агглютинации: настоящее и будущее.// ЖМЭИ.-1989.-№8.-с.84-89

27. Касаткин В.Н., Михайлова Н.В., Румянцев А.Г./ Результаты трехлетнего катамнеза у часто болеющих детей.// Педиатрия.-1998.-№2.-с.43-46

28. Комарова Л.Г., Алексеева О.П. Новые представления о функции слюнных желез в организме (клинико-биохимический аспект). -Н.Новгород:,1994.-96 с.

29. Краснов М.В., Ботвиньева В.В. Иммунологическая реактивность детей.- Чебоксары: Изд-во Чуваш. Ун-та, 1993.-104 с.

30. Краснопрошина Л.И., Алексеева И.А., Соколов Я.А., Грачева A.M./ Радиоиммунологический метод определения антименингококковых секреторных антител IgA-класса в слюне человека.// ЖМЭИ.-1991.-№2.-с.51-54

31. Курбатова Е.А., Егорова Н.Б., Киселева Б.С./ Протективная активность бесклеточной клебсиеллезной вакцины в отношении различных сероваров Klebsiella pheumoniae.// ЖМЭИ.-1984.-№8.-с.80-83

32. Курбатова Е.А./ Разработка поликомпонентной вакцины из антигенов условно-патогенных микроорганизмов (экспериментальное и клинико-иммунологическое исследование): Дисс. д. мед. наук: 14.00.36 и 03.00.07.- Защищена 25.12.97.- М., 1997.-313 с.

33. Левина Л.А. Мигунов В.Н., Зайцева Е.В., и др./ Противоэшерихиоз-ные антитела в сыворотке крови неиммунизированных доноров и препаратах иммуноглобулина человека.// ЖМЭИ.-1995.-№ 1.-е.62-66

34. Мартынов Ю.В., Девяткина Н.П., Маринин И.Ю., Спирихина Л.В./ Определение менингококковых антител в слюне здоровых людей.// ЖМЭИ.-1991 .-№9.-с.З 5-37

35. Николаенко В.Н. Сдвиги в системе иммунекомпетентных клеток у людей, иммунизированных различными вакцинными препаратами: Дисс. канд. мед. наук: 14.00.36.- М.,1990.-179 с.

36. Новиков Д.К., Новикова В.И. Оценка иммунного статуса.-М.; Вит.: «Витязь», 1996.-282 с.

37. Осипова Г.Л./ Иммунотерапия поликомпонентной вакциной больных с хроническими обструктивными заболеваниями легких: Дисс. канд. мед. наук: 14.00.36.- Защищена 16.09.93.- М.,1993.-94 с.

38. Оценка иммунологического статуса человека: Метод, рекомендации/ МОЛГМИ им. Н.И. Пирогова МЗ РСФСР; Подгот. Чередеев А.Н. и др.- Москва, 1980.-31 с.

39. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В./ Иммунодиагностика имму-нодефицитов.//Иммунология.-1997.-№4.-с. 4-7о

40. Першин Б.Б., Кузьмин С.Н., Кочкуркин В.Н., и др./ Реакции местного иммунитета у пловцов сборной страны.//ЖМЭИ.-1996.-№1.-с.53-57

41. Покровская Е.Е., Камальдинова Э.Г., Иванова В.В., Шварцман Я.С./ Местный и общий гуморальный иммунитет при респираторно-синцитиальной инфекции.// Иммунология.-1992.-№2.-с.21-23

42. Польнер A.A., Кузин И.И., Ермолин Г.А., и др./ Иммуноглобулины бронхиального секрета при бронхиальной астме и хроническом бронхите.// Совет. Медицина.-1984.-№6.-с.36-39

43. Прокопенко В.Д. Особенности лабораторной диагностики и клинического течения основных форм вторичной иммунологической недостаточности: Автореф. дис. докт. мед наук.-М., 1996.- 44 с.

44. Райкис Б.Н., Ракитина E.JL, Титаренко А.И., Щербакова Б.В./ Использование иммунокорректоров бактериального происхождения в терапии часто болеющих детей Ставропольского края.// Тез. докл. 2-го съезда по иммунореабилитации.- Эйлат, Израиль.-1998.-28 с.

45. Ройт А./ Основы иммунологии. -М.: Мир, 1991.-252 с.

46. Смирнова Г.И., Коровина H.A., Захарова И.Н./ Применение рибому-нила у детей с хронической бронхо-легочной патологией.// Материалы Всероссийской научной конференции «Аллергические болезни у детей».-1996.-е. 115

47. Современные аспекты изучения иммунологической безвредности и эффективности вакцин: Сборник научных трудов./ МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского.-М.- с. 44-64

48. Сокуренко С.И., Караулов A.B./ Иммунотерапия хронических об-структивных заболеваний легких.// В кн: Успехи клинической иммунологии и аллергологии. Под ред. Караулова А.В.-М.: «Лекарства и пищевые добавки»,-2000.-е. 91-123

49. Справочник по функциональной диагностике в педиатрии./ Под. ред. Ю.Е. Вельтищева, Н.С. Кисляк; М.: Медицина, 1979.-624 с.

50. Степушина М.А./ Эффективность поликомпонентной бактериальной вакцины (ВП-4) при бронхиальной астме у детей: Дисс. канд. мед. наук: 14.00.36 и 14.00.09.- Защищена 28.01.97.-М.,1997.-94 с.

51. Студеникин М.Я., Соколова Т.С. Аллергические болезни у детей. -М.: Медицина, 1986.-288 с.

52. Тотолян A.A./ Современные подходы к диагностике иммунопатологических состояний.// Медицинская иммунология.-1999.-т. 1.-№ 1-2.-с.75-108

53. Уланова М.А., Горелова Ж.Ю., Резник И.Б., и др./ Влияние бронхо-мунала на заболеваемость острыми респираторными инфекциями и иммунологические показатели у детей раннего возраста.// Пульмонология.- 1992.-Приложение 1 .-с.49-52

54. Урбах В.Ю. Биометрические методы.-М.: «Наука», 1964.-415 с.

55. Федорцов К.К. Стандартизация иммунологических методов и их применение для для изучения иммунологической реактивности человека в экстремальных условиях: Дисс. канд. мед. наук: 14.00.36.-М, 1994.-120с.

56. Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук Л.В., и др./ Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях.-М: Промедэк, 1993.-320 с.

57. Федько Н. А., Бодрова И.В., Щербакова Б.В./ Клинико-иммунологи-ческие показатели при частых респираторных заболеваниях у детей и возможности иммунокоррегирующей терапии.// Тез. докл. 2-ой Конгресс педиатров России.- Москва.-1998.-118 с.

58. Федько H.A., Щербакова Б.В./ Эффективность использования препарата ВП-4 в терапии у часто болеющих детей.// Депонированная ст. в ГЦНМБ.-Москва.-1999.-21 с.

59. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И./ Экологическая иммунология. -М.: ВНИРО, 1995.-220 с.

60. Хорошилова H.B. Клинико-иммунологическая оценка эффективности применения рибомунила и низкоинтенсивной лазерной терапии у больных хроническим бронхитом: Автореф. дис. канд. мед. наук.- М.-1993 .-с. 17

61. Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В./ Концептуальные проблемы оценки иммунного статуса человека.// ЖМЭИ.-1990.-№11.-С.90-95

62. Чучалин А.Г. Иммунокоррекция в пульмонологии.-М., 1989.-е.84-90

63. Чучалин А.Г., Егорова Н.Б., Ефремова В.Н., и др./ Иммунотерапия поликомпонентной вакциной в пульмонологической практике.// Пульмонология,-1991 .-№4.-с. 14-20

64. Чучалин А.Г., Осипова Г.Л., Егорова Н.Б., и др./ Контролируемые исследования по эффективности поликомпонентной вакцины при иммунотерапии у больных с хроническими обструктивными заболеваниями органов дыхания.// Пульмонология.-1995.-№2.-с.55-61

65. Чучалин А.Г., Балаболкин И.И., Егорова Н.Б., и др./ Иммунотерапия бронхиальной астмы поликомпонентной вакциной при назально-оральном введении.// ЖМЭИ.-1997.-№3.-с.84-88

66. Шарапов C.B., Плиско Л.Ф./ Физико-иммунологическая характеристика отделяемого бронхов при бронхиальной астме.// Иммунология.-1992.-№4.-с.39-42

67. Шварцман Я.С., Хазенсон Л.Б. Местный иммунитет.-Л.^Медицина», 1978.-224 с.

68. Щербакова Б.В./ Эффективность использования поликомпонентной вакцины ВП-4 в терапии у часто болеющих детей: Дисс. канд. мед. наук: 14.00.36,- Защищена 16.09.99.-М.,1999.-128 с.

69. Энциклопедия клинических лабораторных тестов./ под ред. Н. Тица.-М.: Лабинформ.-1997

70. Alurkar V., Kamat R./ Immunomodulatory properties of porins of some members of the family Enterobacteriaceae.// Infect. Immun.-1990.-v.65.-№6.-p.23 82-23 88

71. Atkinson J.C./ The role of salivary measurements in the diagnosis of salivary autoimmune diseases.// Annal of the N.-Y. Acad. Of Sciences.-1995.-v.694.-p.238-251

72. Bellanti J.A., Zeligs B.J./ Current concepts of immune investigation in children with respiratory diseases.// Respiration-1994.-v.61.-№l.-p.3-7

73. Bergemann R./ Preventiv treatment of chronic bronchitis: a meta-analysis of clinical trials with bacterial extract (OM-85 BV) and a cost-effectiveness analysis.//Mon. chest dis.-1994.-v.49.-№4.-p.302-307

74. Bergmann K.-C., Johurent K., Noack K./ Stimulation of paraspecific defence mechanisms in the respiratory tract by inchalation of a bacterial ly-sate.// Prax. Klin. Pneumol.-1985.-v.39.-№4.-p. 127-129

75. Bergmann K.-C., Waldman R.H./ Stimulation of secretory antibody following oral administration of antigen.// Rev. Resp. Dis.-1988.-v.10.-p.939-950

76. Boackle R.J./ The partial isolation and function of salivary factors which interact with the complement system: a possible role in mucosal immunity.// Adv. Exp. Med. Biol.-1978.-v.107.-p.411-421

77. Bosch A., Lucena F., et al./ Bacterial immunostimulant (Broncho-Vaxom) versus levamisole on the humural immune responses in mice.// J. of Immu-nogfarmacology.-1983.-v.5.-p. 107-116

78. Brandtzaeg P./ Molecular and cellular aspects of the secretory immunoglobulin system.// APMIS-1995.-v. 103 .-№ 1 .-p. 1 -19

79. Brown T.I./ Immunity at mucosal surfaces.// Adv. Dent. Res.-1996.-v.10,-№l.-p.62-65

80. Burrel R./ Immunomodulation by bacterial endotoxin.// Crit. Rev. Microbiol.- 1990,-v. 17.-p. 189-208

81. Canh P. Quan, Berneman A,, Pires R., et al,/ Natural polyreactive secretory immunoglobulin A autoantibodies as a possible barrier to infection in humans.// Infec. and Immun. -1997.-v.65.-№10.-p.3997-4004

82. Caille J./ Treitment des infection des bronches par vaccination et desensi-bilisation par nasale.// Gas. Med. Fr.-1969.-v.76.-p.25

83. Chretien J et al./ Acute respiratory infections in children: a global public-health problem.//N. Engl. J. med.-1984.-v.310.-p.982-984

84. Clancy R./ Oral vaccine: to exploit contemporary knowledge of mucosal immunology.// Third annual vaccines: New technologies & applications.-1995.-p.l-4

85. Clot J., Andary M./ Immunostimulation induced by a lyophilized bacterial lysate. Broncho-Vaxom: an in vitro study of specific and non-specific responses.// Med. Hyg.-1980.-v.38.-p.2776-2782

86. Collet J.-P., Ducruet T., Kramer M.S., et al./ Stimulation of nonspecific immunity to reduce the risk of . recurrent infections in children attending day-care centers.// Pediatr. Ifect. Dis.-1993.-v.l2.-p.648-652

87. Collet J.P., Boissel J.P./ OM-85 BV: Primary versus secondery prevention.// Respiration.-1994.-v.61 .-p.20-23

88. Clements M.L., Betts R.F., Tierney E.L., Murphy B.R./ Resistence of adults to challenge with influenza A wild-type virus after receiving live or inactivated virus vaccine.// J. Clin. Microbiology.-1986.-v.23.-p. 73-76

89. Cvoriscec B./ Oral immunotherapy of chronic bronchitis: a double-blind placebo-controlled multicentre study.// Respiration-1989.-v.55.-p.l29-135

90. Czerkinsky C., Prince S.J., Michalek S.M. et. al./ IgA antibody-producing cells in peripheral blood after antigen ingestion: evidence for a commonmucosal immune sistem in humans.// Proc. Natl. Acad. Sci.-1987.-v.84.-p.2449-2453

91. Djuric O., Michailovic-Vucinic V., Stojcic V.// Effect of Broncho-Vaxom on clinical and immunological parameters in patients with chronic obstructive bronchitis. A double-blind, placebo-controlled study.// Int. J. Immunotherapy.- 1989.-v.3 .-p. 139-143

92. Drummond P.D., Hewson-Bower B./ Increased psychosocial stress and decreased mucosal immunity in children with recurrent upper respiratory tract infections.// J. Psychosom. Res.-1997.-v.43.-№3.-p.271-278

93. Emmerich B., Emslander H.P., Milatovic D., et al./ Effects of a bacterial extract on local immunity of the lung in patients with chronic bronchitis.// Lung.-1990.-p.726-731

94. Epstein M.M., Baumgarten A./ The usefulness of routine screening for salivary secretory component.// J. Allergy Clin. Immunol.-1991.-v.88.-№9.-p.356-360

95. Fiocci A., Arancio R., Cinquepaulei P., et al./ Recurrent respiratory infections in childhood: expirence with a bacterial ribosomes (immucytal).// J. of Int. Med. Res.-1990.-v. 18.-p.50-60

96. Fox P.C./ Salivary monitoring in oral diseases.// Annal of the N.-Y. Acad. Of Sciences.-1995.-v.694.-p.235-237

97. Garibaldi R.A./ Epidemiology of communiti-acquired respiratory tract infections in adults.// Am. J. med.-1985.-v.78.-6B.-p.32-37

98. Gleeson M., Cripps A.W., Clancy R.L./ Modifiers of the human mucosal immune system.// Immunol. Cell Biol.-1995.-v.73.-№5.-p.397-404

99. Gleeson M., Cripps A.W., Clancy R.L., et al./ The significance of transient mucosal IgA deficiency on the development of asthma and atopy in children.//Adv. Exp. Med. Biol.-1995.-v.371B.-p.861-864

100. Gluck U./ Intranasal virosomal influenza vaccine produces strong immune response./ J. of virology.-1999.-v.73.-p.7780-7786

101. Gorse G.J., Otto E.E., Powers D.S. et al./ Induction of mucosal antibodies by live attenuated and inactivated influenza virus vaccines in the chronically ill elderly.// J. Infect. Disease.-1996,-v.l73.-p.285-290

102. Grimwood K., Lund J.C., Coulson B.S., at al./ Comparison of serum and mucosal antibody responses following severe acute rotavirus gastroenteritis in young children.// J. Clin. Microbiol.-1988.-v.26.-№4.-p.732-738

103. Hewson-Bower B., Drummond P.D./ Secretory immunoglobulin A increases during relaxation in children with and without recurrent upper respiratory tract infections.// J. Dev. Dehav pediatr.-1996.-v.l7.-№5.-p.311-316

104. Holmgren G., Czerkinsky C., Lycky N., Svennerholm A.-M./ Mucosal immunity: implications for vaccine development.// Immunobiol.-1992.-v.l84.-p. 157-179

105. Holmgren G., Czerkinsky C., Lycky N., Svennerholm A.-M./ Strategies for the induction of immune responses at mucosal surfaces making use of cholera toxin B subunit as immunogen carrier and adjuvant.// Am. J. Trop. Med. Hyg.-1994.-v.50.-№5.-p. 42-54

106. Holmgren G., Svennerholm A.-M./ Bacterial enteric infections and vaccine development.// Gast. Clin. N. Am.-1992.-v.21.-p. 283-302

107. Immunobiology of the tonsils and adenoids: Handbook of mucosal immunology./ Edited by Ogra P.L., Mestecky J., Lamm M.E., et. al.-San Diego: Academic Press Inc,-1994.-p.625-640

108. Kauppi M., Escola J./ Anti-capsular polysaccharide antibody concentration in saliva after immunization with Haemophilus influenzae type b conJugate vaccines.// Pediatr. Infect. Dis. -1995.-v.l4.-№4.-p.286-294

109. Kraehenbugl J.-P., Neutra M.R./ Molecular and cellular basis of immune protection of mucosal surfaces.// Physiol.-1992.-v.72.-p. 853-879

110. Kraehenbugl J.-P., Neutra M.R./ Transepithelial transport and mucosal defence: secretion IgA.// Trends cell biol.-1992.-№2.-p.l70-174

111. Kugler J., Hess M., Haake D./ What accounts for the interindividual variability of slgA concentration in saliva?// Annal of the N.-Y. Acad. Of Sciences.-1995.-v.694.-p.296-298

112. Lusuardi M., Capelli A., Donner C.F./ Lung immune defences after stimulation of gut-associated lymphoid tissue with OM-85 BV: a doudle-blind study in patients with chronic bronchitis.// Eur. Respir. Rev. -1996.-v.36.-№6.-p. 182-185

113. Maestroni G.M., Losa G.A./ Clinical and immunological affects of an orally administrated bacterial extract.// J. int. immunofarmacol.-1984.-v.6.-p.111-117

114. Madore D.V., Johnson-Kraines C.L., Rothstein E.P., et al./ Kinetic of antibody response to Haemophilus influenzae type b vaccines.// Cur. Med. Res. and Opinion.-1999.-v.15.-№2.-p. 105-112

115. Mancini G., Nacb D.K., Heremans J.S./ Further studies on single radial immunodiffusion. Quantitative analysis of related and unrelated antigens. // Immunochem.-1970.- v.7.-p. 261-264

116. Mauel J./ Macrophage activation by OM-85.// Respiration-1992.-v.59.-№3.-p.l4-18

117. McDermott M.R., Bienenstock J./ Evidence for a common mucosal immunologic system. I. Migration of B immunoblasts into intestinal, respiratory and genital tissues.// J. Immunol.-1979.-v.122.-p. 1892-1898

118. McGhee J.R., Kiyono H., Michalek S.M., Mestecky J./ Enteric immuni-zacion reveals a T cell network for IgA responses and suggests that humans possess a common mucosal immune system.// A. Van Leuwenhoek.-1987.-v.53.-p.537-543

119. McGhee J.R., Mestecky J., Dertzbaugh M.T., et. al./ The mucosal immune system: from fundamental concepts to vaccine development.// Vaccine.- 1992.-№10.-p.75-88

120. McGhee J.R., Kiyono H./ New perspectives to vaccine development: mucosal immunity to infections.//Infect. Agents Dis.-1993.- №2.-p.55-73

121. Mestecky J./ The common mucosal immune system and current strategies for induction of immune responses in external secretions.// J. Clin. Immun.-1987.-№7.-p.265-276

122. Mestecky J., McGhee J.R./ Immunoglobulin A (IgA): Molecular and cellular interactions involved in IgA biosynthesis and immune response.// Advances in Immunology. -1987.-№40.-p. 153-245

123. Michel F.B., Dussoud d"Hinterland, Bousquet J., et al./ Immunostimulation by a ribosomal vaccine associated with a bacterial cell wall adjuvant.// Infec. and Immun. -1978.-v.20.-p.760-769

124. Moro I., Komiyama K., Kusama K., et al./ Molecular aspects of secretory IgA (s-IgA) in gut- associated lymphoid tissues.// Nippon. Rinsho.-1996.-v.54.-№4.-p.l 155-1161

125. Mucosal immunity to viruses: Handbook of mucosal immunology./ Edited by Ogra P.L., Mestecky J., Lamm M.E., et. al.-San Diego: Academic Press Inc,-1994.-p.333-343

126. Mucosal immunoglobulins: Handbook of mucosal immunology./ Edited by Ogra P.L., Mestecky J., Lamm M.E., et. al.-San Diego: Academic Press Inc,-1994.-p. 79-97

127. Navazesh M./ Methods of collecting saliva.// Annal of the N.-Y. Acad. Of Sciences.-1995.-v.694.-p.72-77

128. Neutra M.R., Pringault E., Kraehenbugl J.-P./ Antigen sampling across epithelial barriers and induction of mucosal immune responses./ Annual Rev. Immunol.-1996,-v. 14.-p.275-300

129. Nuesslein T.G./ The concentrations of secretory immunoglobulin A and specific slgA antibodies in the saliva of school children.// Adv. Exp. Med. Biol.-1995.-v.371B.-p.l 167-1171

130. Oggiano N., Giralamo F., et al./ Polyvalent oral bacterial vaccine in recurrent respiratory infections.// Minevra. Pediat.-1985.-v.37.-№19.-p.741-745

131. Orcel B./ Oral immunization with bacterial extracts for protection against acute bronchitis in elderly institutionalized patients with chronic bronchitis.//Eur. Respir. J.-1994.-№7.-p. 446-452

132. Ozek J., Truszczynski M./ Mucosal immunity with implications for use in developing a new generation of vaccines.// Postepy Hig. Med. Dosw. -1995 .-v.49.-№4.-p.469-486

133. Palma-Carlos A., Palma-Carlos M./ Immunomodulation with bacterial extracts in respiratory diseases.// Lung.-1990.-v.l68.-p.732-773

134. Paupe J./ Immunotherapy with an oral bacterial extract (OM-85 BV) for upper respiratory infections.// Respiration-1991.-v.58.-p.150-154

135. Percival R.S., Marsh P.D., Challacombe S.J./ Age-related changes in salivary antibodies to commensal oral and gut biota.// Oral microbiol. Immunol." 1997.-v. 12.-№ 1 .-p.57-63

136. Pietz K., Haas J., Wurster U./ Protein composition, IgG, and IgA analysis in the saliva of patients with multiple sclerosis.// Annal of the N.-Y. Acad, of Sciences.-1995.-v.694.-p.305-307

137. Puigdollers J.M., Serna G.R., Del Rey I.H., et al./ Immunoglobulin production in man stimulated by an orally administered bacterial lysate.// Respiration.- 1980.-v.40.-p. 142-149

138. Rico-Mrendez F.G., Massey-Reynaud L.F., Rendron L., et al./ Measurement of slgA in patients with chronic stable bronchitis.// Rev. Allerg. Mex.-1997.-v.44.-№ 1 .-p.4-7

139. Scotti L., Biondelli G., Borzanni M./ The use of polyvalent oral bacterial vaccine for reccurent respiratory infections in children.// Minerva pediat.-1987.-v.35.-№7.-p.251-256

140. Staats H.F., Jackson R.J., Marinaro M., et. al./ Mucosal immunity to infection with implications for vaccine development.// Immunology.-1994.-№6.-p.572-583

141. Stein-Streilein J., Frazier J.-L., Gross C.N., Hart D.A./ Splenic influence on the development of a local pulmonary immune response.// Infec. and Immun. -1979.-v.24.-№ 1 .-p. 139-144

142. Tarlo S., Broder J., Spence L.A./ A prospective study of respiratory infection in adult asthmatics and their normal spouses.// Clin. Allergy.-1979.-v.9.-№3.-p.293-301

143. Taubman M.A., Smith D.J./ Significance of salivary antibody in dental diseases.// Annal of the N.-Y. Acad, of Sciences.-1995.-v.694.-p.203-215

144. Tomasi T.B./ Mucosal immunity: the origin and migration patterns of cell in the secretory system.// J. Allergy Clin. Immunol.-1980.-v65.-№l.-p. 12-19

145. Toy L.S., Mayer L./ Basic and clinical overview of the mucosal immune system.// Semin Gastrointest Dis.-1996.-v.7.-№l.-p.2-l 1

146. Vissink A., Panders A.K., Nauta J.M. et al./ Applicability of saliva as a diagnostic fluid in Sjogren's syndrome.// Annal of the N.-Y. Acad. Of Sci-ences.-1995.-v.694.-p.325-329

147. Watanabe N., Kato H., Mogi G./ Induction of antigen-specific IgA-forming cells in the upper respiratory mucosa.// Ann. Otol. Rhinol. Laryn-gol.-1989.-v.98.-№7.-p.523-529

148. Wienholt M.G., Erbling M.C., Bennetts R.W. et al./ Detection of antibodies to Helicobacter pylori using oral fluid specimens.// Annal of the N.Y. Acad. Of Sciences.-1995.-v.694.-p.340-342

149. Wu H.Y., Russel M.W./ Nasal lymphoid tissue intranasal immunization and compartmentalization of the common mucosal immune system.// Immunol. Res.-1997,-v. 16.-№2.-p. 187-201

150. Wybran J., Libin M., Schandene L./ Activation of natural killer cells and cytokine production in humans by bacterial extracts (OM-85 BV).//Lung.-1990; Suppl.:720-725