Дифференциально-диагностические свойства и чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий Pseudomonas aeruginosa тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Чжун Синь

• Чжун Синь
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Чжун Синь

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Дифференциально-диагностические признаки Pseudomonas aeruginosa

1.2. Факторы вирулентности Pseudomonas aeruginosa

1.3. Циркуляция бактерий Pseudomonas aeruginosa в природе, пути

и источники заражения животных, факторы передачи человеку

1.4. Чувствительность Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам

1.5. Заключение по обзору литературы

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Методы индикации и идентификации Pseudomonas aeruginosa

2.2. Методы изучения патогенных свойств Pseudomonas aeruginosa

2.3. Методы изучения антагонистических свойств бактерий

2.4. Методы изучения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам

2.5. Методы статистической обработки результатов исследований

3.1. Результаты исследований морфологии колоний бактерий Pseudomonas aeruginosa

3.2. Результаты изучения дифференциально-диагностических

свойств бактерий Pseudomonas aeruginosa

3.3. Результаты изучения патогенных свойств Pseudomonas aeruginosa

3.4. Результаты изучения антагонистических свойств микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa

3.5. Результаты изучения чувствительности бактерий Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Дифференциально-диагностические свойства и чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий Pseudomonas aeruginosa»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Бактерии Pseudomonas aeruginosa выделены практически от всех видов млекопитающих, птиц, рыб, при инфицировании восприимчивых видов, реализуют факторы вирулентности, связанные с синтезом экзотоксинов (гемотоксин, лейкоцидин, цитотоксины) и эндотоксина (липополисахариды). Указанные бактерии распространены повсеместно, обнаружены в воде, почве, пищевых продуктах, выделенные из объектов внешней среды, характеризуются психрофильностыо, метаболической пластичностью, ростом на обедненных средах с сохранением вирулентности (Сомов Г.П., Литвин В.Ю., 1988; Павлова И.Б., Ленченко Е.М., 1998; Марченко Т.В., 2006; Павлова И.Б. и соавт., 2007; Макаров В.В., 2008; Шестаков А. Г., 2010; Викторов Д.А., 2011; Захарченко О.Н., Плешакова В.И., 2011; Кондакова И.А. и соавт., 2011, 2014; Николаева Н.В., 2011; Пруцаков B.C., 2011; Рождественская Т.Н., 2011; Серегин И.Г. и соавт., 2011; Баженова Е.А., 2012).

Экзополисахариды, продуцируемые бактериями Р.aeruginosa в виде биопленок, обладают защитным эффектом от действия активного кислорода, что приводит к смене бактериями фенотипа в виде перехода в мукоидную форму, характеризующуюся изменением способности окраски по Граму, снижением процессов метаболизма и переходом популяции в «некультивируемое состояние», что обусловливает длительность и ретроспективность бактериологических исследований (Мележик И.А. и соавт., 2013; Ленченко Е.М., 2014; Dora Marta, 2011).

При мониторинге распространенности возбудителей инфекционных болезней наблюдается статистически достоверная тенденция роста множественной лекарственной устойчивости бактерий (Куликовский A.B., 2004, 2011; Тарасова И.И. и соавт., 2014; Gram et al., 2002; Huang Meizi et al, 2003; Irohal R. et al, 2011; He Lawciang et al, 2012).

Учитывая социальную и экономическую значимость проблемы, одной из

приоритетных задач является изыскание антибактериальных препаратов,

эффективность которых определяется экологической безопасностью и

3

широким спектром действия, в том числе и по отношению к бактериям P.aeruginosa, проявляющим множественную лекарственную устойчивость, вследствие повышенного синтеза экзополисахаридов, формирующих биопленки, которые способны замедлять диффузию антибактериальных препаратов (Чеботарь И.В. и соавт., 2012; Не Xianyuan, 2014). Для расширения научных познаний этиологической значимости факторов вирулентности бактерий P.aeruginosa целесообразным является изучение динамики патологических процессов на восприимчивых лабораторных моделях; апробация, изыскание и подбор эффективных диагностических сред, тест-систем для дифференциации бактерий, а также экспресс-тестов изучения чувствительности к антибактериальным препаратам, что и определило актуальность темы диссертационной работы.

Цель работы: изучить дифференциально-диагностические, патогенные, антагонистические свойства, чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий P.aeruginosa, выделенных из пищевого сырья и продуктов.

Задачи исследований:

- изучить морфологию колоний бактерий Pseudomonas aeruginosa;

- апробировать и изыскать эффективные диагностические среды и тест-системы для количественного учета, видовой идентификации и дифференциации бактерий Pseudomonas aeruginosa;

- изучить патогенные свойства бактерий Pseudomonas aeruginosa;

- изучить антагонистические свойства бактерий Pseudomonas aeruginosa;

- изучить чувствительность бактерий Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным препаратам

Научная новизна. Научно обоснована и экспериментально подтверждена эффективность применения селективной среды «Cetrimide agar» (специфичность - 94,8 %) для количественного учета, видовой идентификации и дифференциации бактерий P.aeruginosa. Установлено, что цитопатическое

действие бактерий P.aeruginosa при экспериментальной токсемии птиц характеризовалось преобладанием процессов, развивающихся по типу реакции гиперчувствительности замедленного типа, признаками макрофагальных реакций, экссудативно-инфильтративными процессами тканей и органов иммунной системы, сочетанием общей сосудистой реакции с дистрофическими и некротическими изменениями паренхиматозных органов. При изучении антагонистической активности бактерий установлено, что бактериоцины, продуцируемые бактериями P.aeruginosa, угнетали рост бактерий S.enteritidis -12,3±0,39; К.pneumoniae - 11,0±0,35; C.freundii - 9,6±0,30; Y.enterocolitica -10,3±0,33. Установлено, что 79,8 % культур микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa, выделенных из пищевого сырья и продуктов, чувствительны к антибиотикам группы ß-лактам (цефоперазон, цефотаксим, цефепим, азтреонам, имипенем, меропенем); 51,8 % - аминогликозидам (гентамицин, тобрамицин, нетилмицин); 88,4 % - хинолонам (норфлоксацин, пефлоксацин, ципрофлоксацин, левофлоксацин, ломефлоксацин); 58,1 % устойчивы к хлорамфениколу, тетрациклину, доксициклину.

Практическая значимость работы. На основе изучения морфологии колоний Р. aeruginosa модифицирована методика подготовки препаратов для микроскопического исследования колоний бактерий. Результаты исследований по данной методике используются в учебном процессе ФГБОУ ВПО «МГУПП» по дисциплинам: «Цитология, гистология, эмбриология»; «Эпизоотология».

Апробация материалов диссертации. Основные результаты диссертационной работы доложены и одобрены на заседаниях кафедры «Ветеринарная медицина» ФГБОУ ВПО «МГУПП» (Москва, 2011-2015 гг). Материалы диссертации доложены на Международных научных конференциях студентов и молодых учёных «Живые системы и биологическая безопасность населения» (М., 2011; М., 2012).

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты изучения морфологии колоний P. aeruginosa;

-результаты изучения дифференциально-диагностических свойств бактерий P.aeruginosa;

- результаты изучения патогенных свойств бактерий P.aeruginosa;

- результаты изучения антагонистических свойств бактерий P.aeruginosa;

-результаты изучения чувствительности бактерий P.aeruginosa к

антибактериальным препаратам

Публикация результатов исследований.

По материалам диссертации опубликованы 5 работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, библиографии, приложений. Работа изложена на 152 страницах компьютерного текста, содержит 25 таблиц, 27 рисунков. Библиографический список включает 230 источников, из них 110 иностранных авторов.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Дифференциально-диагностические признаки Pseudomonas aeruginosa

Бактерии вида Pseudomonas aeruginosa наряду с бактериями

Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas putida в соответствии с «Bergey's

Manual of Determinative Bacteriology» (1994) относятся к роду Pseudomonas,

отделу Cracillicutes, семейству Pseudomonadaceae, занимают следующее

систематическое положение:

Надцарство: Procaryota Царство: Bacteria Отдел: Proteobacteria Класс: Gammaproteobacteria Порядок: Pseudomonadales Семейство: Pseudomonadaceae Род: Pseudomonas Вид: Pseudomonas aeruginosa

В составе семейства Pseudomonadaceae на основании гомологии рРНК и ДНК выделяют 5 групп, бактерии Р. aeruginosa (I группа рРНК гомологии) входят в подгруппу флуоресцирующих бактерий. Ранее к роду Pseudomonas относили других представителей семейства Pseudomonadaceae, которые в настоящее время выделены в самостоятельные роды, такие как Burkholderia, Stenotrophomonas («Определитель зоопатогенных бактерий», 1980). В группу «Грамотрицательные аэробные палочки и кокки» объединены 8 семейств: Pseudomonadaceae, Neisseriaceae, Rhizobiaceae, Methylococcaceae, Halobacteriaceae, Acetobacteriaceae, Legionellaceae, Azotobacteriaceae, и 16 родов, не отнесенных в семейства, но имеющих сходные морфофизиологические признаки (табл. 1.1).

Таблица 1.1

Дифференциальные признаки семейств грамотрицательных аэробных палочек и кокков (М. А. Сидоров и соавт., 1995)

Признаки Рьеийо топайа Л'ешт асеае ЯШгоЬ ¡асеае \tethyl ососсас На1оЬа& епасеае Асе/оЬаа епасеае Legionel 1асеае АгМоЬа &епасе

Форма клетки: палочковидная шаровидная + Р Р + Р Р Р Р + + +

Подвижность + Р Р Р Р + Р

Наличие мурамовой кислоты в пептидогликане + + + + + + +

Использование метана как источника углерода +

Потребность для роста в 12-15% натрия хлорида +

Окисление этанола в нейтральной или кислой среде (рН 4,5) до уксусной кислоты +

Продукция оксидазы Р Р + — Р Р

Продукция каталазы + Р Р Р Р Р

Потребность в цистеине и солях — — ~■* +

Формирование желтых колоний на агаре Р Р Р

Образование водорастворимого флюоресцирующего пигмента Р Р

Патогенность для растений для теплокровных для человека Р Р Р Р Р Р - - Р + -

Содержание Г+Ц в ДНК, моль % 58-71 38-55 57-66 — 51 -65 39-43 52-68

Имеются исключения; р - признак различен в таксонах рангов

В соответствии с эмпирическим принципом классификации группы бактерий формируются на основании следующих признаков: окраска по Граму, форма клеток, тип дыхания («Определитель зоопатогенных бактерий», 1980).

Микроорганизмы семейства Рьеидотопайасеае - грамотрицательные подвижные, прямые или изогнутые палочки, растущие при температуре 4-43°С, продуцирующие каталазу и оксидазу. Дифференциальные признаки родов семейства Р$еис1отопа£1асеае представлены в таблице 1.2.

Таблица 1.2

Дифференциальные признаки родов семейства Рьеийотошйасеае (М. А. Сидоров и соавт., 1995)

Признаки Pseudomonas Xanthomonas Frateuria Zoogloea

Потребность в факторе роста - + - +

Рост на средах с рН 3,6 - - + -

Образование в жидких средах звездообразных хлопьев - - - +

Патогенность для растений Р + - -

Бактерии P.aeruginosa впервые обнаружены в 1862 году А. Lücke, который описал нагноение раны у человека, вызванное Р. aeruginosa, при этом отмечалось характерное сине-зеленое окрашивание повязок («синегнойная палочка»). В чистой культуре указанные бактерии выделены C.Gessard в 1882 году и названы Bacillus руосуапеа, в 1889 году A.Charrin продемонстрировал патогенность для животных. В 1895 году Migula предложил включить B.pyocyaneus в род Pseudomonas под названием Pseudomonas aeruginosa, что было официально утверждено номенклатурным комитетом Международного общества микробиологов в 1952 году. В настоящее время представлена таксономическая характеристика 202 штаммов, относящихся к 28 видам псевдомонад и разделенных на группы флуоресцирующих, хромогенных и ахромогенных бактерий на основании характеристики образуемых пигментов (Определитель бактерий Берджи, 1997; Афонин Э. А., 1999) (табл. 1.3).

Таблица 1

Классификация семейства Pseudomonadaceae («Определитель зоопатогенных микроорганизмов, справочник», 1995)

Классификация IIO гомологии рРНК Классификация по физиологическим свойствам

Род Pseudomonas (I группа)

Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas ßuorescens Pseudomonas ßuorescens

Pseudomonas putida Pseudomonas putida

Pseudomonas stützen Pseudomonas stutzeri

Pseudomonas mendocina Pseudomonas mendocina

Pseudomonas alcaligenes Pseudomonas alcaligenes

Pseudomonas pseudoalcaligenes h ,ap. Pseudomonas pseudoalcaligenes h ,np.

Род Burkholderia (II группа)

Burkholderia mallei Pseudomonas mallei

Burkholderia pseudomallei Pseudomonas pseudomallei

Burkholderia cepacia и др. Pseudomonas cepacia h AP-

Род Comamonas (III группа)

Comamonas acidovorans Pseudomonas acidovorans

Comamonas terrigena и др. Pseudomonas terrigena и др.

Род Brevundimonas (IVгруппа)

Brevundimonas diminuta -

Brevundimonas vesicularis

Pod Stenotrophomonas (V группа)

Stenotrophomonas maltophilia Pseudomonas maltophilia

Роды с неясной рРНК гомологией

Chryseomonas luteola Pseudomonas luteola

Flavimonas oryzohabitans Pseudomonas oryzohabitans

Shewanella putrifaciens Pseudomonas putrifaciens

Sphingomonas paucimobilus Pseudomonas paucimobilus

Группа флуоресцирующих бактерий объединяет представителей 12 видов, синтезирующих водорастворимые флуоресцирующие пигменты от желто-зеленого до оранжевого оттенка, в том числе синий пигмент, нерастворимый в воде. Бактерии этой группы - аэробы, активно ферментируют углеводы, на средах с гексозами образуют кислоты, не растут на средах с лактозой и крахмалом, утилизируют органические кислоты, растут на средах с ароматическими соединениями, восстанавливают нитраты до нитритов, сероводород и индол не образуют. Распространены в воде, почве, сточных водах («Определитель зоопатогенных бактерий», 1980; Больных В.Т. и соавт., 1987; Беляков В.Д. и соавт., 1990).

В группу ахромогенных бактерий входят бактерии, не синтезирующие пигменты, ферментирующие углеводы, органические кислоты, восстанавливающие нитраты до нитритов, не образующие сероводород и индол. (Беляков В.Д. и соавт., 1990).

Группа хромогенных бактерий объединяет 6 видов, выделенных из почвы, Бактерии данной группы аэробы, образуют желтый пигмент, нерастворимый в воде, восстанавливают и утилизируют нитраты, гидролизуют крахмал, образуют сероводород и индол (Беляков В.Д. и соавт., 1990).

Результаты, полученные при сравнении способности ферментировать различные углеродные соединения, подтверждают правильность разделения бактерий рода Pseudomonas на три группы по признакам пигментации. Штаммы, отнесенные к флуоресцирующей группе, характеризуются общими свойствами: снижают pH среду при ферментации глюкозы, утилизируют глюконат, ароматические соединения, обладают высокой активностью фермента цитохромоксидазы. Указанные свойства у бактерий, отнесенных к ахромогенной и хромогенной группам, отсутствуют. Следовательно, существует корреляция между характером углеводного обмена бактерий рода Pseudomonas и пигментацией (Гвоздяк Р.И., 1987; Беляков В.Д. и соавт., 1990; Павлова О. Н., 2004) (табл. 1.4).

Таблица 1.4

Грамотрицательные, неферментирующие углеводы бактерии рода Pseudomonas (Покровский В.И. и соавт., 2002)

Флуоресцирующая группа

Р. aeruginosa P.fluorescens Р. chlororaphis Р. putida

Недифференцированные виды

Группа Stützen Р. stutzeri Р. mendocina Группа Alcaligenes

%

Р. alcaligenes Р. pseudoalcaligenes Недифференцированные виды

Группа Pseudomallei Р. mallie Р. pseudomallie Р. cepacia Р. gladioli Р. pickettii Группа Diminuta Р. diminuta Р. vesicularis

Псевдомонады неизвестной гомологии Р. paucimobilis Р. pertucinogena

Псевдомонадоподобные бактерии

Для уточнения таксономического разделения бактерий

рода Pseudomonas на группы по основным биохимическим свойствам, на основании изучения 267 штаммов микроорганизмов, принадлежащих к 10 видам с применением метода, предложенного Дюреном де Йонгом (1926), исследовали способность каждого штамма микроорганизмов утилизировать в качестве единственного источника углерода и энергии 146 органических соединений (углеводы, жирные кислоты, органические кислоты, спирты, ароматические соединения, не содержащие азота в кольце, а также углеводороды). Полученные данные позволили разделить бактерии рода Pseudomonas на три группы: флуоресцирующие, кислотоутилизирующие и щелочеобразующие бактерии (Беляков В.Д. и соавт., 1990).

Группа флуоресцирующих бактерий включает бактерии, относящиеся к трем видам {P.aeruginosa, Pßuorescens, Pputida) и несколько представителей других видов. Бактерии данной группы синтезируют водорастворимый желто-зеленый флуоресцирующий пигмент, утилизируют нитраты или соли аммония, не образуют поли-Р-масляную кислоту в качестве резервного материала в клетках (Афонин Э. А., 1999).

Группа кислотоутилизирующих бактерий - аэробы, не синтезируют пигменты, образуют в клетках поли-Р-оксимасляную кислоту в качестве резервного материала.

Группа щелочеобразующих бактерий подразделяется на семь различных биотипов в зависимости от специфических признаков: способности синтезировать пигменты феназинового типа, образовывать леван из сахарозы, а также по наличию сильных денитрифицирующих свойств (Афонин Э. А., 1999; Шестаков А. Г., 2010).

1. 2. Факторы вирулентности Pseudomonas aeruginosa

Патогенность - потенциальная способность микроорганизмов вызывать инфекционный процесс, для характеристики степени патогенности определенного штамма микроорганизмов предложен термин вирулентность (Сидоров М.А., 1980; Езепчук Ю.В., 1985). Вирулентность (лат. virulentus -ядовитый) характеризует способность микроорганизмов реализовать факторы патогенности при определенных условиях заражения животных. Выделяют три наиболее важные группы факторов патогенности (вирулентности): адгезивность - продукция антигенов адгезии, с помощью которых бактерии прикрепляются к эпителиальным клеткам макроорганизма; инвазивность - способность микроорганизмов преодолевать защитные приспособления организма и размножаться in vivo; токсигенность -способность микроорганизмов продуцировать вещества, нарушающие постоянство внутренней среды организма, путем изменения метаболических функций (Сидоров М.А., 1980; Езепчук Ю.В., 1985, Rocha C.L. etal., 2003).

Адгезия P.aeruginosa к абиотическим поверхностям обусловлена неспецифическими взаимодействиями (например, за счет разницы заряда), адгезия к живым тканям осуществляется путем контакта с рецепторами эукариотической клетки (Езепчук Ю.В.,1985; Малышева Э.Ф., 1988; Dholakia P.M., 1985). С помощью электронной микроскопии установлено, что бактерии P.aeruginosa продуцируют фимбрии или пили - выросты нитевидной формы, расположенные на полюсах бактериальной клетки в количестве 2-12 на каждом полюсе диаметром 5,2 нм, длиной 2,5 мкм, состоящие из белковых субъединиц с молекулярной массой 15000-18000, содержащие свыше 50% гидрофобных аминокислот. У псевдомонад обнаружено два типа пилей: полярные, тонкие выросты и неполярные более

толстые пили, с которыми связывают передачу плазмид лекарственной резистентности. Связи между образованием пилей и вирулентностью штаммов, а также связи между наличием пилей и О-серогруппами или иммунотипами не установлено (Гвоздяк Р.И., 1987; Афонин Э. А., 1999; Николаева Н. В., 2011).

Инвазивные свойства P.aeruginosa обусловлены протеолитическими ферментами, которые относятся к группе факторов патогенности, способных деполимеризовать субстрат, препятствующий проникновению и распространению возбудителя (Езепчук Ю.В.,1985). Для локального продвижения возбудитель деполимеризует ткани макроорганизма с помощью ферментов (протеазы и фосфолипазы), а также системы секреции III, которая может доставлять синтезированные токсины и ферменты непосредственно в эукариотическую клетку (Эль-Базза, 1987; Van Delden С, 1998; RashidН.М. et ah, 2000; Расе J.L. et ah, 2005). Протеолитические ферменты псевдомонад связаны с патогенностью возбудителя и действуют как агрессины, подавляя функцию иммунной системы и увеличивая инвазию бактерий. На этапе инвазии происходит размножение возбудителя в количестве, достаточном для развития системной инфекции, характерным механизмом для этой стадии является образование биопленки, обеспечивающей концентрацию и размножение клеток в полисахаридном матриксе, персистенцию, защиту бактерий от распознавания иммунной системой, устойчивость к антибактериальным препаратам (Мележик И.А., 2013; Waiters М.С. et al., 2013).

К группе факторов патогенности, выполняющих функцию защиты клеток от фагоцитоза относится экстрацеллюлярная слизь (Езепчук Ю.В.,1985). Сравнительное электронно-микроскопическое исследование штаммов P. aeruginosa показало, что клетки вирулентных штаммов имеют

слизеподобную капсулу, в которой различимы два слоя - внутренний ригидный, тесно связанный с клеточной стенкой, и наружный, более тонкий, гомогенный. На поверхности наружного слоя обнаружены множественные мелкие шаровидные образования, обеспечивающие прикрепление бактерий к различным субстратам (Gray К.М., 1997). Клетки авирулентных штаммов слизеподобной капсулой не обладают и имеют типичную для большинства грамотрицательных бактерий структуру. В присутствии очищенного полисахарида слизи адгезивные свойства мукоидных штаммов P.aeruginosa повышаются на 30-50 % (Pritt В., 2007). Экстрацеллюлярная слизь псевдомонад - макромолекулярный комплекс, покрывающий поверхность клетки и выделяющийся во внешнюю среду. Слизистое вещество P.aeruginosa выделено путем осаждения этанолом с последующей гель-фильтрацией и ионообменной хроматографией на целлюлозе, содержало преимущественно углеводный компонент и небольшое количество белка (Alkawash М.А., 2006). В составе полисахарида обнаружены рамноза, глюкоза, манноза, глюкозамин, галактозамин, глюкуроновая кислота, N- и О-ацетильные группировки и гликопротеид, обеспечивающий токсигенные и антигенные свойства (Литовченко П.П., 1981). Продукция слизи, придающей характерную вязкость бульонным культурам и колониям мукоидных штаммов, является одним из характерных видовых признаков псевдомонад. При культивировании псевдомонад наличие в питательной среде серосодержащих соединений влияет на продукцию слизи (Mathee К et al., 1999).

Токсины и токсические продукты Pseudomonas aeruginosa дифференцируются на экзо- и эндотоксины. Экзотоксины представлены продуктами жизнедеятельности с широким спектром активности: экзотоксин А нарушает организацию матрицы белкового синтеза; экзотоксин S

индуцирует воспаление, пирогенные реакции, патологические процессы в легких; патогенетическое значение эндотоксина заключается в угнетении активности фагоцитоза, развитии лихорадки, олигурии, лейкопении. Нейраминидаза нарушает процессы метаболизма веществ, содержащих нейраминовые кислоты, например, в соединительнотканных элементах, цитотоксин - повышает проницаемость клеточных мембран, что приводит к структурному изменению клеток, также изменению градиентов концентрации К+, Иа+, Са+ и глюкозы; гемолизины приводят к развитию некротических поражений в печени и легких (Мележик И.А., 2013). Экзотоксин А относится к группе факторов патогенности с токсической функцией, ответственных за формирование специфического патологического синдрома, экстрацеллюлярный белковый продукт молекулярной массой 6671,5 кДа, изоэлектрическая точка - 5,1 (Езепчук Ю.В., 1985). Экзотоксин А Р.аеги^това - фермент с аденозин-дифосфатрибозил-трансферазной активностью, подобный дифтерийному токсину, обусловливает летальность экспериментальных животных (Вертиев Ю.В.,1981; Дзюбак С.Т., 1984). Экзотоксин А оказывает влияние на клетки иммунной системы, в частности, токсичен для макрофагов. Парентеральное введение очищенного препарата экзотоксина А вызывало гибель мышей, собак, обезьян в течение первых двух суток. При патолого-морфологическом изучении печени животных через 4 часа после введения экзотоксина А отмечали дегенеративные изменения и частичный некроз клеток, полный некроз клеток наблюдали через 48 часов после введения (Исаков М. А., 2010). При исследовании сыворотки крови экспериментальных животных обнаружено увеличение уровня аминотрансфераз и щелочной фосфатазы. Экзотоксин А обнаруживался в крови через 3 часа после парентерального введения; более высокие концентрации обнаруживались в почках, более низкие - в печени,

селезенке, поджелудочной железе, сердце, легких, мозге и передней камере глаза (Pavlovskis O.R. et al., 1974). Возможность выявления экзотоксина А показана при скрининге клинических штаммов P.aeruginosa с помощью иммуноферментного метода с использованием в качестве твердой фазы нитроцеллюлозных фильтров. С помощью этого метода определена способность образовывать экзотоксин А 88,5% клинических штаммов P. aeruginosa, выделенных от больных животных, людей и из объектов внешней среды (Бродинова Н.С. и соавт., 1990).

Экзотоксин S обнаруживается только у высоковирулентных штаммов P.aeruginosa. Механизм повреждающего действия на клетки неясен, однако известно, что инфекции, обусловленные экзоэнзим-3-продуцирующими штаммами P.aeruginosa, нередко заканчиваются летально (Мележик И.А., 2013).

Бактерии P. aeruginosa продуцируют гемолизины двух типов: термолабильную фосфолипазу С и термостабильный гликолипид. Фосфолипаза С разрушает фосфолипиды в составе сурфактантов на альвеолярной поверхности легких, вызывая развитие ателектазов (бронхоэктазов) при патологии респираторного тракта (Мележик И.А., 2013). Протеолитические ферменты псевдомонад расщепляют белковые молекулы на низкомолекулярные компоненты, обеспечивают рост и размножение бактерий. Практически все штаммы P. aeruginosa в той или иной степени обладают протеолитической активностью {Rhame F.S.; 1980). Протеолитические ферменты играют наряду с экзотоксином А значительную роль в патогенезе псевдомоноза (Бродинова Н.С. и соавт., 1986; Johes L.F., 1974; Holloway D.W., 1975; Нотта J.Y., 1976; Dholakia P.M., 1985) (табл. 2.1).

Таблица 2.1

Факторы вирулентности Р. aeruginosa при развитии инфекционного процесса (Мележик И.А. и соавт., 2013)

Факторы вирулентности Механизм действии

Клинические проявления

1. Адгезия

Пили Адгезия, хемотаксис, основа для биопленки

Воспаление

Альгинат Служит основой для биопленки

Токсическое действие на нейтрофилы

2.Инвазия

Щелочная протеаза Деградация фибрина, эластина, коллагена

Некрозы, геморрагии

Фосфолипаза С Расщепление лецитина

Деструкция легочного сурфактанта, колонизация легких

З.Токсины

Экзотоксин А Токсическое действие на клетки иммунной системы, нарушение синтеза белка в клетках

Экзотоксин S АДФ-рибозилирование, эффектор системы секреции III

Нарушение функций фагоцитирующих клеток; патологические процессы в печени и легких

Секреция III Секререция бактериальных токсинов

11екрозы, деградация тканей

Сидерофоры Регуляция синтеза факторов вирулентности

Хелатирование железа

Пиоцианин Ингибирование факторов роста других бактерий

Размножение и колонизация

Биопленка Концентрация и размножение клеток в полисахаридном матриксе

Персистенция, устойчивость к антибактериальным препаратам

Хронические инфекции

Системы кворум-сенсинга Кооперация, регуляция факторов вирулентности

Передача информации с помощью специальных химических медиаторов

Анализируя данные литературы следует отметить, что факторы вирулентности Р. aeruginosa обусловлены многочисленными связанными с клеткой или экстрацеллюлярно секретированными веществами: адгезины, эксрацеллюлярная слизь, капсулы альгината (биопленка), экзотоксины S и А, гемолизины, протеазы, липополисахариды (ЛПС) (Езепчук Ю.В.,1985; Iglewski B.N. et al., 1975; Van Delden С., Iglewski В., 1998; Pozo J.L. et al, 2008).

1.3. Циркуляция бактерии Pseudomonas aeruginosa в природе, пути и источники заражения животных, факторы передачи человеку

Псевдомоноз (pseudomonosis) - инфекционное заболевание сельскохозяйственных животных, птиц, пушных зверей, рыб, вызываемое Pseudomonas aeruginosa, характеризующееся у молодняка пневмониями, диареей, артритами, у взрослых животных - маститами, вагинитами и эндометритами, наносящее значительный экономический ущерб. Псевдомоноз регистрируется у крупного рогатого скота и свиней, наиболее восприимчивыми являются телята, 10-20 сут., поросята-сосуны, 5-25-сут., поросята отъемного и послеотьемного возраста, 35-60 сут. (Пруцаков B.C., 2011). Среди птиц к псевдомонозу восприимчивы цыплята-бройлеры, утки, фазаны, страусы, наиболее часто возбудитель болезни выделяется из патологического материала «эмбрионов-задохликов» и молодняка птицы до 45 сут. (Шурахова Ю.Н. и соавт., 2010; Рождественская Т.Н., 2011; Серегин И.Г. и соавт., 2011; Ленченко Е.М., Плитов И.С., 2012). Сельскохозяйственные животные - источник возбудителя псевдомоноза, пищевое сырье и продукты -факторы передачи человеку.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Чжун Синь, 2015 год

Список литературы

1. Авакян A.A. Атлас анатомии бактерий, патогенных для человека и животных / A.A. Авакян, J1.H. Кац, И.Б. Павлова. -М.: Медицина, 1972. - 181с.

2. Авдеева Е.В. Итоги бактериологических исследований рыб в рыбоводных хозяйствах различного типа и естественных водоемах Калининградской области / Е.В. Авдеева, О.В. Казимирченко // Успехи современного естествознания. - 2006. - № 1 - С. 29-29.

3. Агеевец В.А. Чувствительность грамотрицательных бактерий, продуцентов карбапенемаз, к антибиотикам различных групп /В.А. Агеевец, И.В. Партина, Е.С. Лисицына, И.М. Батыршин, Л.Н. Попенко, С.А. Шляпников, E.H. Ильина, C.B. Сидоренко // Антибиотики и химиотерапия. - 2013. - том 58. -№ 3-4. - С.10 - 13.

4. Азямов М.А. Характеристика культур Pseudomonas aeruginosa, выделенных от быков-производителей и объектов внешней среды: автореф. дис. ... канд. ветеринар, наук / М.А.Азямов; Ленингр. ветеринар, ин-т - Л., 1988. -17 с.

5. Алтон Л.В. Выживаемость и адаптация некоторых штаммов рода Pseudomonas в морской и речной воде / Л.В. Алтон // Микробиология- 1983. - Т.45. -№ 6. - С. 16-20.

6. Андреева Н.Л. Изучение бактериальных инфекций на птицефабриках / Н.Л. Андреева, М.Е. Дмитриева, A.A. Климов, Л.С. Фогель // Ветеринария. -2004.- №5. -С. 14-16.

7. Афонин Э. А. Разработка бактериологического метода выделения и идентификации Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис... канд. биол. наук / Э. А. Афонин. - Ульяновск, 1999. - 18 с.

8. Африканов С.Г. Псевдомоноз птиц / С.Г. Африканов, B.C. Ладыгин, А.К. Силин, Г.И. Пиленко // Ветеринария. - 1985. -№ 10. - С. 40-41.

9. Ашмарин И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, A.A. Воробьёв. - М., 1962. - 225с.

10. Баженова Е.А. Чувствительность Pseudomonas aeruginosa, выделенных от сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц, к антибиотикам / Е.А. Баженова// Ветеринария Кубани. -2012. - №6. - С.8-10.

11. Балашов Н.Г. Ветеринарно-санитарный контроль при международном обмене спермой. XIX всемирный ветеринарный конгресс, Мексика, 1971.

12. Барышников П.И. Инфекционные болезни диких птиц в лесостепной области Алтайского края / П.И. Барышников, А.Ю. Бондарев, Б.В. Новиков // Ветеринария. - 2012. - № 6. - С. 30-32.

13. Беляков В.Д. Псевдомонады и псевдомонозы / В.Д. Беляков, JI.A. Ряпис, В.И. Илюхин // М.: Медицина, 1990. - 224 с.

14. Беседнова Н.Н. Антиинфекционное, антитоксическое и антипаразитарное действие экзогенной ДНК / Н.Н. Беседнова, Т.С. Запорожец // Антибиотики и химиотерапия. - 2010. - том 55. - № 7 - 8. - С.46.

15. Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследований/ М.О. Биргер. - М.: «Медицина», 1973. - 456 с.

16. Больных В.Т. Псевдомонозы животных и их профилактика / В.Т.Больных, Кирьянов Е.А., Н.В Больных // Владивосток: «Дальневосточное кн. изд-во», 1987. - С.37-43.

17. Бродинова Н.С. Оценка токсигенности клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa иммуноферментным методом с использованием нитроцеллюлозных фильтров / Н.С. Бродинова, А.Д. Александров, Г.Г. Китарова, А.Ф. Мороз // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1990. - № 11. - С. 19-21.

18. Булгакова В.Г. Действие антибиотиков как сигнальных молекул / В.Г. Булгакова, К.А. Виноградова, Т.И. Орлова, П.А. Кожевин, А.Н. Полин // Антибиотики и химиотерапия. - 2014. - том 59. - №1-2. - С. 6-9.

19. Бунаков А.П. Псевдомоноз кур (Биологическая характеристика возбудителя, профилактика и лечение): Диссерт. канд.вет.наук. -J1., 1984.-С. 63-67. 25.

20. Быстрова О. В. Установление полной структуры липополисахаридов бактерии Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис... канд. хим. наук / О. В. Быстрова. - М., 2004. - 25 с.

21. Васильев А. К. Псевдомоноз свиней в Краснодарском крае: автореф. дис... канд. вет. наук / А. К. Васильев. - Краснодар, 2003. - 25 с.

22. Васильев М.В. Результаты выделения Р. aeruginosa из различных объектов внешней среды / М.В. Васильев, A.C. Доценко // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1976. - № 11. - С. 143-144.

23. Вертиев Ю.В. Экзотоксин А Pseudomonas aeruginosa и его роль в патогенезе синегнойной инфекции / Ю.В. Вертиев, Н.С. Бродинова, А.Ф. Мороз // Журн. микробиологии. - 1981. -№ 2. - С. 13-19.

24. Викторов Д. А. Усовершенствование методов выделения, идентификации и индикации бактерий Pseudomonas putida: автореф. дис... канд. биол. наук / Д. А. Викторов. - Саратов, 2011. - 25 с.

25. Гвоздяк Р.И. Об особенностях патогенности Pseudomonas aeruginosa / P.M. Гвоздяк, Л.М. Яковлева // Журн. микробиологии. - 1987. - № 3. - С.3-6.

26. Гордон К.В. Иммуноферментный анализ аминогликозидных антибиотиков: автореф. дис. канд. биол. наук / К.В. Гордон. - М., 2009. - 23 с.

27. Гриценко В.А. Сравнительный анализ чувствительности к желчи энтеробактерий / В.А. Гриценко, Ю.А. Брудастов, Л.И. Васильева, Е.В. Кудря // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002. - № 3. -С. 65-67.

28. Грязнева Т.Н. Антагонистическая активность бифидо- и лактобактерий в отношении энтеробактерий / Т.Н. Грязнева, Л.Я. Ставцева // Ветеринария. - 1991.-№ 6.-С. 21-22.

29. Гулюкин М.И. Профилактика инфекционных болезней - обеспечение Современные средства и методы диагностики, профилактики и лечения инфекционных, протозойных и микотических болезней сельскохозяйственных и промысловых животных, рыб и пчел: продовольственной и пищевой безопасности России / М.И. Гулюкин // труды ВИЭВ. - М.: Агентство творческих технологий, 2009. - Т. 75. - С. 28-52.

30. Гущин В.В. Безопасность пищевой продукции и лекарственных средств / В.В. Гущин // Материалы Международного ветеринарного конгресса: актуальные ветеринарные проблемы в промышленном птицеводстве». -М., 2013.-С. 40-42.

31. Далин М. В., Фиш Н. Г., Белковые токсины микробов, М., 1980, с. 196-202.

32. Данилов Е.П. // Болезни пушных зверей // Е.П. Данилов, А.И. Майоров, В.А. Чижов. -М. "Колос" - 1984.

33. Джупина С.И. Факторные инфекционные болезни животных / С.И. Джупина // Ветеринария. - 2001. - № 3. - С. 6-9.

34. Дзюбак С.Т. Механизм действия экзотоксина Pseudomonas aeruginosa на макроорганизм (экспериментальные исследования) / С.Т. Дзюбак // Журн. микробиологии. - 1984.-№3.- С.35-39.

35. Дубровин И. И. Разработка, получение и применение поливалетной сыворотки против псевдомоноза животных: автореф. дис... канд. вет. наук / И. И. Дубровин. - Краснодар, 2007. - 25 с.

36. Дугаржапова Е.Д. Микробиологический мониторинг рыб водоемов республики Бурятия: автореф. дис... канд. вет. наук: / Е.Д. Дугаржапова -Барнаул, 2014-21 с.

37. Захарченко О.Н. Эпизоотологические, клинико-патоморфологические особенности псевдомоноза свиней и крупного рогатого скота: автореф. дис... канд. вет. наук / О. Н. Захарченко. - Омск, 2011.- 23 с.

38. Езепчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул / Ю.В. Езепчук. - М.: Медицина, - 1985. - 240 с.

39. Ефимочкина Н.Р. Новые бактериальные патогены в пищевых продуктах: экспериментальное обоснование и разработка системы контроля с применением методов микробиологического и молекулярно-генетического анализа: дис. д-ра биол. наук. - Москва, 2010. - 53 с.

40. Ефремова Н. Н. Влияние уровня антиинфекционной защиты организма и условий внешней среды на структуру популяций Pseudomonas aeruginosa по биологическим признакам: автореф. дис... канд. биол. наук / Н. Н. Ефремова. - Санкт-Петербург, - 2000. - 25 с.

41. Желдакова Р. А. Механизмы биосинтеза антибиотиков и их действие на клетки микроорганизмов: Учеб.-метод. комплекс для студентов специальности 31 01 01 «Биология» / Р. А. Желдакова. - Мн.: БГУ, 2004. -111с.

42. Заболотных М.В. Качество и безопасность сырья и пищевых продуктов в современных условиях // Вестник Омского государственного аграрного университета. - 2014. - № 3 (15). - С.29-32.

43. Забровская A.B. Чувствительность к антимикробным препаратам микроорганизмов, выделенных от сельскохозяйственных животных и из продукции животноводства/А.В. Забровская // Vetpharma. - 2012. - №5. - С. 20-24.

44. Захарченко О.Н. Эпизоотологические, клинико-патоморфологические особенности псевдомоноза свиней и крупного рогатого скота: автореф. дис... канд. вет. наук / О. Н. Захарченко. - Омск, 2011. - 23 с.

45. Исаков М. А. Получение рекомбинантных атоксичных форм экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa и изучение их иммунобиологических свойств: автореф. дис... канд. биол. наук: 03.02.03 / М. А. Исаков. - М., 2010. - 25 с.

46. Казеев Р.В. Биологические свойства штаммов P.aeruginosa, выделенных от крупного рогатого скота в хозяйствах Краснодарского края / Р.В. Казеев, А.Н. Турченко, О.О. Надточий // Тр./ Куб.ГАУ.- 1989. - Вып. № 296. - С. 29-34.

47. Кальницкая О.И. Методы определения антибиотиков / О.И. Кальницкая // Молочная промышленность. - 2008. - № 6. - С.82-83.

48. Кац JI.H. Морфологическая характеристика шаровидных элементов L-форм бактерий по данным сканирующей электронной микрофоскопии / JI.H. Кац, С.А. Шевская, С.В. Прозоровский // Микроб, эпидемиол., - 1977. - № 7. -С.67-70.

49. Кожин Ю.В. Ветеринарно-санитарная оценка мяса птиц с остаточным количеством антибиотиков группы макролидов: Автореф.дис...канд.био.наук. -Казань., 2004,- 137с

50. Козлова Ю. Н. Строение печени, селезенки и лимфатических узлов при введении специфического бактериофага для коррекции пневмонии, вызванной Pseudomonas aeruginosa: автореф. дне... канд. биол. наук / Ю. Н. Козлова. - Новосибирск, 2014. - 25 с.

51. Колончин К.В. Технологии обеспечения безопасности и качества продуктов / К.В. Колончин, Д.А. Еделев, В.М. Кантере, В.А. Матисон // Пищевая промышленность. - 2010- № 5. - С. 16-18.

52. Кондакова И.А. Влияние 5% водно-спиртовой эмульсии почек сосны на показатели иммунного статуса кроликов / И.А. Кондакова, Ю.В. Ломова // Вестник РГАТУ- 2014. - № 2(22). - С. 9-12.

53. Кондакова И.А. Изучение влияния препарата сосновых почек на организм животных / И.А. Кондакова, Ю.В. Ломова //Актуальные вопросы развития науки: сборник статей Международной научно-практической конференции 14 февраля 2014 г.: в 6 ч. 4.5 / отв. ред. А.А. Сукиасян. - Уфа: РИЦ БашГУ, 2014.-С. 285-287.

54. Корж Б.А. Роль синегнойной палочки в патологии новорождённых телят / Б.А. Корж, Я.Д. Злотквич, И.И. Гевкан // Ветеринария. 1990.- Вып. 65. - С. 37-41.

55. Коротяев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология / А.И.Коротяев, С.А.Бабичев // СпецЛит: Часть седьмая. - 2008. - С. 348 -350.

56. Костенко Ю.Г. Современные аспекты возникновения и предупреждения пищевого сальмонеллеза / Ю.Г. Костенко, М.В. Храмов М.В, А.Д. Давлеев // Ветеринария.- 2012. -№4. - С. 9-12.

57. Кремлёв Е.П. Бактериальные аборты у коров / Е.П. Кремлёв // Ветеринария. -1974.-№ 1.-С. 79.

58. Куликовский A.B. Изменение адгезивной способности микроорганизмов / A.B. Куликовский, И.Б. Павлова// Ветеринария. - 1993. № 12. - С.12-15.

59. Куликовский A.B. Профилактика пищевых токсикоинфекций человека и концепция ХАССП / A.B. Куликовский // Ветеринария. - 2011. - № 1. - С. 1921.

60. Куликовский A.B. Эмерджентные пищевые зоонозы / A.B. Куликовский -М.:-2004.-176 с.

61. Лабинская A.C. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований : учеб. пособие / A.C. Лабинская, Л.П. Блинкова, A.C. Ещина; под. ред. A.C. Лабинской. - М.: Медицина, 2004. - 412с.

62. Ленченко Е.М. Биология и экология иерсиний - возбудителей пищевых токсикоинфекций: дне. ... д-ра вет. наук / Е.М. Ленченко. - М.: МГУПБ, 2000. - 446 с.

63. Ленченко Е.М. Характеристика токсигенности энтеробактерий, выделенных при желудочно-кишечных болезнях сельскохозяйственных животных / Е.М. Ленченко, Е.А. Мансурова, A.B. Моторыгин // Сельскохозяйственная биология. - 2014. - № 2. - С. 94-104.

64. Ленченко Е.М. Сравнительная оценка методов контроля производства и выделения патогенных бактерий из мяса птицы / Е. М.Ленченко, С.С. Козак, Д.И. Скородумов, О.Д. Скляров, Д. Диксон, Б. Шелдон // Материалы IV Международного ветеринарного конгресса по птицеводству, Москва. 8-11 апреля 2008.- С. 76-83.

65. Литвинов О.Б. Эпизоотологические аспекты и иммуно-биологические особенности возбудителя синегнойной инфекции у песцов и лисиц: автореф. дис... д-ра вет. наук / О.Б. Литвинов - М., 2000. - 25 с.

66. Литовченко П.П. Некоторые структурные элементы Pseudomonas aeruginosa по данным электронной микроскопии / П.П. Литовченко, Н.П. Чернобровый //Журн. Микробиологии. - 1981.-№ 7- С. 49-53.

67. Литовченко П.П. Морфологические, культуральные и биохимические свойства культур синегнойных бактерий, выделенных от больных людей, животных и объектов внешней среды / П.П. Литовченко, И.В. Заботина // Журн. Микробиологии. - 1981, - № 5. - С. 78-83.

68. Лузина Н.И. Микробиология мяса и мясных продуктов / Н.И. Лузина -Кемерово: КемТИПП, 2004. — 75 с.

69. Макаров В.В. Эпизоотологический метод исследования / В.В. Макаров, A.B. Святковский, В.А. Кузьмин, О.И. Сухарев. - СПб.: Лань, 2009. - 221 с.

70. Малышева Э.Ф. Адгезивные особенности различных штаммов Р. aeruginosa в системе колонизационной резистентности / Э.Ф. Малышева, Е.В. Салина // Актуальные вопросы микробиологии в неинфекционной клинике. -М., 1988. - 188 с.

71. Мальцева О.В. Особенности промежуточного метаболизма Pseudomonas aeruginosa, деградирующих чужеродные соединения: автореф. дис. ... канд. биол. наук / О. В. Мальцева. - Пущино, 1983. - 16 с.

72. Марченко Т.В. Биологические свойства Pseudomonas aeruginosa выделенной от животных, из кормов и объектов внешней среды в Краснодарском крае: автореф. дис... канд. вет. наук / Т. В. Марченко. - Краснодар, 2006. - 25 с.

73. Матвийчук А. В. Ветеринарно-санитарная характеристика и оценка мяса птицы при псевдомонозе: автореф. дис. ... канд. вет. наук / А. В. Матвийчук. -Москва, 2012.-22 с.

74. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза сельскохозяйственных животных -М.: РАСХН, - 2003. - 32 с.

75. Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания МУК 4.12.1890 - 04. - Минздрав России. - Москва, 2004. - 65 с

76. Мележик И.А. Роль биоплёнок Pseudomonas aeruginosa в развити эндогенных инфекций / И.А. Мележик, Н.В. Яворская, В.В. Шепелевич, В.Н. Кокозей // Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН. - 2013. - № 3.-29 с.

77. Михайлов H.H. К изучению псевдомоноза животных / H.H. Михайлов, В. А.

Зудилин // Ветеринария. - 1975. - № 6. - С. 88.

78. Мозгов И.Е. Фармакологоия / И.Е.Мозгов. - М. Агропромиздат.:1985. С.416.

79. Мудрак Д. Е. Молекулярно-генетические особенности устойчивости к бета-лактамным антибиотикам грамотрицательных микрооргнизмов-возбудителей нозокомиальных инфекций: автореф. дис... канд. биол. наук / Д. Е. Мудрак. -М., 2010.-25 с.

80. Нечаев А.Ю. Применение pH - метрии в процессе ветеринарно -санитарной экспертизы мяса / А.Ю. Нечаев // Мясная индустрия. - 2007. - № 6. - С. 5860.

81. Никогосян A.B. Патоморфологические изменения в эндометрии у свиноматок при искусственном осеменении спермой, контаминированной Pseudomonas aeruginosa / Профилактика и лечение акушерско-гинеколог. патологии с.-х. животных.- М., - 1990. - С. 82-84.

82. Николаева Н.В. Распространенность и биологические особенности нозокомиальных штаммов Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис... канд. биол. наук / Н. В. Николаева. - Пермь, 2011. - 25 с.

83. Опарина И. А. Внутрипопуляционные взаимодействия в культуре бактерий Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис... канд. биол. наук / И. А. Опарина. -М., 2002. - 24 с.

84. «Определитель бактерий Берджи». Т.1.- 9-е изд.- М.: Мир, 1997.

85. Павлова О. Н. Бактерии рода Pseudomonas в микробном сообществе озера Байкал: автореф. дис...канд. биол. наук / О. Н. Павлова. - Иркутск, 2004. - 25 с.

86. Павлова И.Б. Электронно-микроскопическое исследование бактерий на объектах внешней среды / И.Б. Павлова, Е.М. Ленченко // ЖМЭИ. -1998. -№5. -С. 13-17.

87. Павлова И.Б. Атлас морфологии популяций патогенных бактерий / И.Б. Павлова, Е.М. Ленченко, Д.А. Банникова // Колос. - М., - 2007. - 178 с.

88. Панин А.Н. Мониторинг распространения зоонозов и антимикробной устойчивости их возбудителей в странах ЕС / Панин А.Н., Куликовский А.В. // Ветеринария. - 2014. - №2. - С. 3-6.

89. Пирожков М.К. Диагностика, специфическая профилактика и лечение при бактериальных болезнях животных / М.К. Пирожков, С.В. Ленев, Е.В. Викторова, С.А. Стрельченко, Л.И. Тихонов, О.Д. Скляров // Ветеринария. -2011. - № 1.-С. 24-26.

90. Покровский В.И. Медицинская микробиология / В.И. Покровский, O.K. Поздеев // М.: «Гоэтар Медицина», 2002. - С. 343-348.

91. Попова О.Б. Влияние условий культивирования на термотропное поведение липидов Pseudomonas putida и Yersinia pseudotuberculosis: автореф. дис... канд. биол. наук / О. Б. Попова. - Владивосток, 2009. - 25 с.

92. Пруцаков С. В. Псевдомоноз продуктивных животных в регионе Северного Кавказа: автореф. дис... канд. вет. наук / С. В. Пруцаков. - Краснодар, 2011. —

93. Пруцаков С.В. Изучение вирулентных свойств выделенных изолятов Pseudomonas aeruginosa II С. В. Пруцаков, И.А. Болоцкий, В.И. Семенцов, А.К. Васильев // Ветеринария Кубани. -2011. -№1. - С. 16-20

94. Прямчук С.Д. Генетические детерминанты устойчивости к антибактериальным средствам в нозокомиальных штаммах Escherichia coli, Klebsiella spp. и Enterobacter spp., выделенных в России в 2003-2007 гг / С.Д. Прямчук, Н.К. Фурсова, И.В. Абаев, Ю.Н. Ковалев, Н.А. Шишкова, Э.И. Печерских, О.В. Коробова, Е.И. Асташкин, Д.М. Пачкунов, А.Н. Круглов, Д.В. Иванов, С.В. Сидоренко, Э.А. Светоч, И.А. Дятлов // Антибиотики и химиотерапия. - 2010. - том 55. - № 9-10. - С.3-10.

95. Радчук Н.А. Характеристика культур рода Pseudomonas, выделенных из патматериала и объектов внешней среды птицефабрик / Н.А. Радчук, В.В. Доругана, Н.П. Ледовских. А.Н. Бунаков // Проблемы профилактики и терапии заразных заболеваний с.-х. животных и птиц. - М., - 1986. - С. 60-64.

96. Рождественская Т.Н. Создание комплексной системы профилактики бактериальных болезней птиц в хозяйствах промышленного типа: дис. ... д-ра вет. наук / Т.Н. Рождественская. - СПб., 2011. - 308 с.

97. Ряпис Л.А. Биологическая активность, музейных и свежевыделенных культур Pseudomunas aeruginosa и возможные фазовые преобразования популяций возбудителя / Л.А. Ряпис // Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1994. - № 6. - С. 31-32.

98. Саакян Н.Н. Влияние некоторых хлорсодержащих дезинфектантов на Pseudomonas aeruginosa / Н.Н. Саакян, М.И. Леви, С.Л. Степанова, Н.Б. Азадова // Журн. Микробиологии. - 1986. - № 1. - С.98.

99. Сазыкин А. Ю. Идентификация и свойства бета-лактамаз полирезистентных штаммов грамотрицательных бактерий: автореф. дис. ... канд. биол. наук / А. Ю. Сазыкин. - М., 1985. - 23 с.

100. Селезнев С.Б. Постнатальный органогенез иммунной системы птиц и млекопитающих: Эволюционно-морфологическое исследование: дисс. ... д-ра вет. наук / С.Б.Селезнев. - М., 2000. - 245 с.

101. Серегин И.Г. Обоснование ветеринарно-сантарной оценки мяса птицы при псевдомонозе / И.Г. Серегин, А.В. Матвийчук, Л.П.Михалева, И.А. Логинов // Мясная индустрия. - 2011. № 11. - С. 48-52.

102. Сиволодский Е.П. Биохимические и культуральные особенности условно-патогенных энтеробактерий и псевдомонад как основа совершенствования их идентификации: автореф. дис... док. мед. наук / Е.П. Сиволодский. - Санкт-Петербург, 1994. - 34 с.

103. Сидоренко M.J1. Поиск новых видов сырья для получения антибактериальных препаратов / M.JI. Сидоренко, JI.C. Бузолева // Антибиотики и химиотерапия. - 2012. - том 57. - № 5-6. - С.7-10.

104. Сидоров М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов, справочник / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Ф. Федотов. - М.: Колос, 1995. - 319 с.

105. Сидорчук A.A. Общая эпизоотология / A.A. Сидорчук, Е.С. Воронин, A.A. Глушков. - М.: Колос С, 2005. - 232 с.

106. Скородумов Д.И. Микробиологическая диагностика бактериальных болезней животных / Д.И. Скородумов, В.В. Субботин, М.А. Сидоров, Т.С Костенко. - М.: ИзографЪ, 2005. - 656 с.

107. Смирнов В.В. Бактерии рода Pseudomonas / B.B. Смирнов, Е.А. Киприанова. - Киев: Наукова думка, - 1990. - 264 с.

108. Смирнов A.M. Контроль качества и безопасности мясопродуктов / A.M. Смирнов // Ветеринария. - 2006. - № 8. С. 3-5.

109. Сомов Г.П. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий: Экологические аспекты / Г.П.Сомов, В.Ю.Литвин. -1988. - 208 с.

110. Стефанов, И. Распространение Pseudomonas aeruginosa в мякоти мясных продуктов / И. Стефанов // Вет. мед. - 1997. - №4. - С. 256-257.

111. Сулейманова Л. Р. Исследование комплексообразования метаболитов бактерий рода Pseudomonas: автореф. дис... канд. биол. наук / Л. Р. Сулейманова. - Уфа, 2009. - 24 с.

112. Шадрова Н.Б. О результатах микробиологических исследований пищевых продуктов / Н.Б. Шадрова// Ветеринария сегодня. - 2012. - №1. - С. 43-45.

113. Шестаков А. Г. Усовершенствование методов выделения, идентификации индикации бактерий Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис... канд. биол. наук / А. Г. Шестаков. - Саратов, 2010. - 23 с.

114. Шоль А. В. Режимы скармливания куриной желчи бройлерам: дис. ... канд. с/х наук. - М., 2008. 139 с.

115. Шурахова Ю.Н. Этиологическая структура бактериальных болезней птиц по данным отчетов ветлабораторий Российской Федерации за 2009 год // Ю.Н. Шурахова, И.С.Плитов, М.В. Калмыков, О.Н. Виткова // VI международный ветеринарный конгресс по птицеводству. - М., 2010. - С. 26-28.

116. Чеботарь И.В. Новый метод исследования антибиотикорезистентности бактериальных биоплёнок / И.В. Чеботарь, Н.А. Маянский, Е.Д. Кончакова // Антибиотикорезистентность. - 2012, Том 14. - № 4. - С.303-308.

117. Черняев А.П. Оценка содержания остаточных количеств антибиотиков и сульфаниламидных препаратов в биологических объектах: Автореф.дис...канд.хими.наук. - Владивосток., 2003. - 181 с.

118. Эль-Базза. Получение и свойства эластазы Pseudomonas aeruginosa: автореф. дис.... канд. биол. наук/Эль-Базза- М., - 1987. С.

119. Янишевская М.Н. Антитела к токсину Pseudomonas aeruginosa в препаратах нормального иммуноглобулина человека / М.Н. Янишевская [и др.] // Журн. микробиологии.- 1983. -№ 6. - С. 100-102.

120. Яхкинд М.И. Молекулярно импринтированные полимеры для пенициллинов и тетрациклинов / М.И.Яхкинд, К.Р.Таранцева, М.А.Марынова, П.А.Стороженко, М.М.Расулов // Антибиотики и химиотерапия. 2014. - Том 59. - № 5 - 6. - С.34 - 40.

121. Adrian Javier multianalyte ELISA for immunochemical screening of sulfonamide, fluoroquinolone and P - lactam antibiotics in milk samples using class-selective bioreceptors / Adrian Javier, Pinaccho Danial G., Granier Benoit //Anal, and Bioanal.Chem. 2008. 391. №555, 1703- 1712.

122. Aiello D., Williams J., Majgier-Baranowska H. Discovery and Characterization of Inhibitors of Pseudomonas aeruginosa Type III Secretion. Antimicrob Agents Chemother. - 2010. - Vol.54. - P. 1988-1999.

123.Alkawash M.A., Soothill J.S., Schiller N.L. Alginate lyase enhances antibiotic killing of mucoid Pseudomonas aeruginosa in biofilms. APMIS. - 2006. - Vol. 114. - P.131-138.

124. Amorena B., Gracia E., Monzon M., et al. Antibiotic susceptibility assay for Staphylococcus aureus in biofilms devel-oped in vitro. J Antimicrob Chemother 1999; 44:43-55.

125. Anwar H, Strap JL, Chen K, et al. Dynamic interactions of biofilms of mucoid Pseudomonas aeruginosa with tobramycin and piperacillin. Antimicrobial Agents Chemotherapy. - 1992 -№36(6). - P. 1208-1214.

126. Ashok Kuma. Isolation and Characterization of Microorganisms Responsible for Different Types of Food Spoilages / Ashok Kuma, Varun Bhushan, Shikha Verma, Gaurav Srivastav, Sushil Kumar // International Journal of Research in Pure and Applied Microbiology. 2011; 1(2): 22-31.

127. Bagge N, Ciofu O, Skovgaard LT, et al. Rapid development in vitro and in vivo of resistance to ceftazidime in biofilm-growing Pseudomonas aeruginosa due to chromosomal beta-lactamase. APMIS. - 2000. - №108 (9). - P. 589-600.

128. Begley, M., Gahan, C. G.M., Hill, C. The interaction between bacteria and bile: FEMS Microbiology Reviews. - 2012. - V. 4. - P. 625 - 651.

129. Bentzmann S, Roger P, Bajolet-Laudinat O, et al. Asialo GM1 is a receptor for Pseudomonas aeruginosa adherence to regenerating respiratory epithelial cells. Infection and Immunity. - 1996. - №64. - P. 1582-1588

130. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology 9th edition. Baltimore: Williams & Wilkins. - 1994. - P. 48 - 59.

131. Bergmans D.C., Bonten M.J., van Tiel F.H. Cross-colonisation with Pseudomonas aeruginosa of patients in an intensive care unit. Thorax. - 1998. -Vol.53.-P.1053-1058.

132. Bjarnsholt T. Biofilm infections. Springer. -2011. - 314 p.

133. Bjarnsholt T., Jensen P.0., Fiandaca M.J. et al. Pseudomonas aeruginosa biofilms in the respiratory tract of cystic fibrosis patients. Pediatr Pulmonol. - 2009. -Vol.44. - P.547-558.

134. Bjarnsholt T., Kirketerp-Moller K., Kristiansen S. et al. Silver against Pseudomonas aeruginosa biofilms. APMIS. - 2007. - Vol. 115. - P.921-928.

135. Bower, C. K. The adhesion and detachment of bacteria and spores on food-con-tact surfaces / C. K. Bower, J. McGuire, M. A. Daeschel // Trends Food Sei. Tech. -1996.-Vol.7. -152-157.

136. Bui KQ, Banevicius MA, Nightingale CH, et al. In vitro and in vivo influence of adjunct clarithromycin on the treatment of mucoid Pseudomonas aeruginosa. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. - 2000. - №45(1). - P. 57-62

137. Carmen J.C., Roeder B.L., Nelson J.L., Ogilvie R.L. et al. Treatment of biofilm infections on implants with low-frequency ultrasound and antibiotics. Am J Infect Control. 2005. Vol.33: 78-82.

138. Charlton T.S., de Nys R, Netting A. et al. A novel and sensitive method for the quantification of N-3-oxoacyl homoserine lactones using gas chromatography-mass spectrometry: ap-plication to a model bacterial biofilm. Environ Microbiol. 2000. Vol.2: 530-541.

139. Ciofu O., Fussing V., Bagge N. et al. Characterization of paired mucoid/non-mucoid Pseudomonas aeruginosa isolates from Danish cystic fibrosis patients: antibiotic resistance, P-lactamase activity and RiboPrinting. J. Antimicrob. Chemother. 2001. Vol.48: 391-396.

140. Costerton J.W., Montanaro L., Arciola C.R. Biofilm in implant infections: its production and regulation. Int J Artif Organs. 2005. Vol.11: 1062-1068.

141. Control of Biofilm infections by signal manipulation / Ed. by N. Balaban. Springer. 2008. 173 p.

142. Dai Jigang. A brief of antibiotic science / Dai Jigang, Zhang Guoqiang, Hang Xiaobing, Wu Tingrui// Chin.J.Med.Hist, April 1999, Vol 29, №.2.c 88-91.

143. Davies D.G., Marques C.N. A fatty acid messenger is responsible for inducing dispersion in microbial biofilms. J Bacteriol. 2009. Vol.191: 1393-1403.

144. Davies DG, Parsek MR, Pearson JP, et al. The Involvement of Cell-to-Cell Signals in the Development of a Bacterial Biofilm. Science. 1998;280(10):295-298

145. Davies JC. Pseudomonas aeruginosa in cystic fibrosis: pathogenesis and persistence. Paediatr Respir Rev. 2002. Vol.3(2): 128-34.

146. Del Pozo J.L., Rouse M.S., Patel R. Bioelectric effect and bacterial biofilms. A systematic review. Int J Artif Organs. 2008. Vol.31: 786-795.

147. Dholakia P.M. Isolation, characterization, antibiotic sensitivity and aeruginocine typing of Pseudomonas aeruginosa from animals and poultry / P.M. Dholakia, N.M. Shah, J.U. Parohit, H.N. Kher // Indian.- Vet. J. -1985.- V. 62.- № 3.-P.263- 264.

148. Dibdin GH, Assinder SJ, Nichols WW, et al. Mathematical model of beta-lactam penetration into a biofilm of Pseudomonas aeruginosa while undergoing simultaneous inactivation by relese beta-lactamases. Journal of Antimicrobial Chemotherary. 1996;38(5):757-769

149. Diggle S.P., Matthijs S., Wright V. The Pseudomonas aeruginosa 4-Quinolone Signal Mole-cules HHQ and PQS Play Multifunctional Roles in Quorum Sensing and Iron Entrapment. Chemistry&Biology. 2007. Vol.14: 87-96.

150. Diggle S.P., Winzer K., Chabra S.R. et al. The Pseudomonas aeruginosa quinolone signal molecule overcomes the cell density-dependency of the quorum sensing hierarchy, regulates rhl-dependent genes at the onset of stationary phase and can be produced in the absence of LasR. Molecular Microbiology. 2003. Vol.80: 2943.

151. Dilek Keskin. Investigation of the incidence of Pseudomonas aeruginosa in foods and the effect of salt and pH on P.aeruginosa / Dilek Keskin, Sanver Ekmekci // Hacettepe journal of biology an chemistry., 2008. 36(1), 41-46.

152. Dunne W.M. Jr. Bacterial adhesion: seen any good bio-films lately? Clin Microbiol Rev2002; 15:155-66.

153. Elzbieta Boguslawska-Was. Effect of biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa on gas permeability of food wrapping foils / Elzbieta Boguslawska-Was, Stawomir Lisiecki, Anna Drozdowska, Katarzyna Ilczuk // Pol. J. Food. Nutr. Sei. 2007. - Vol.57. - №2. Pp. 167-172.

154. Floret N., Bertrand X., Touverez M., Talon D. Infections nosocomiales à Pseudomonas aeruginosa: origine exogène ou endogène de la bactérie responsable? Pathologie&Biologie. 2009. Vol.57: 9-12.

155. Fu W., Forster T., Mayer O. et al. Bacteriophage Cocktail for the Prevention of Biofilm Formation by Pseudomonas aeruginosa on Catheters in an In Vitro Model System. Antimicrob. Agents Chemother. 2010. - Vol. 54: 397-404.

156. Ganin H., Tang Xu., Meijler M. Inhibition of Pseudomonas aeruginosa quorum sensing by AI-2 analogs. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2009. Vol.19: 3941-3944.

157. Ghani M, Soothill JS. Ceftazidime, gentamicin, and rifampicin, in combination, kill biofilms of mucoid Pseudomonas aeruginosa, Canadian Journal of Microbiology. 1997;43(11):999 -1004

158. Gram, L. Food spoilage-interactions between food spoilage bacteria / L. Gram, L. Ravn, M. Rasch, J. B. Bruhn, A. B. Christensen, M. Givskov // Int. J. Food Microbiol. 2002. - 78. - 79-97.

159. Gray K.M. Intercellular communication and group behaviour in bacteria. Thends. Microbiology. 1997;5:184-188

160. Guo Q., Kong W., Jin S. PqsR-dependent and PqsR-independent regulation of motility and biofilm formation by PQS in Pseudomonas aeruginosa PAOl. JBM. 2013. Vol.53: 1-11.

161. Hassan K.S., Al-Riyami D. Infective Endocarditis of the Aortic Valve caused by Pseudo-monas aeruginosa and Treated Medically in a Patient on Haemodialysis. SQU Med J. 2012. Vol.12: 120-123.

162. He Xianyuan. Cluster Analysis of 53 Chinese Antipyretic Herbs on Bacteriostatic Effects Against Pseudomonas aeruginosa / He Xianyuan, Li Kun, Yu Lurong, Liu Junkang, Liao Sixiang, Liu Yanxia // Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. - 2014. - № 20. P. 82-85.

163. Hentzer M, Riedel K, Rasmussen TB, et al. Inhibition of quorum sensing in Pseudomonas aeruginosa biofilm bacteria by a halogenated furanone compound. Microbiology. 2002; 148(1 ):87-102

164. Hoiby N. Prospects for the prevention and control of pseudomonal infection in children with cystic fibrosis. Paediatrica Drugs. 2000;2(6):451-463

165. Holloway D.W. Bacteriophages and bacteriocines. In Geneties and Biochemistry of Pseudomonas ( Eds P.H., Clarce and Richmond M.N. / D.W. Holloway, V. Krishnapillai // John Wiley - London, 1975.

166. Homma J.Y. A nev antigenic shema and livecell stide agglutination procedure for the in infrasubspecific, serologic classification of Pseudomonas aeruginosa / J.Y. Homma // Areview Jap.J. exp. Med.- 1976.- V.46.- № 6 - P. 329-336.

167. Hoyle BD, Jass J. The biofilm glycocalyx as a resistance factor. Journal of Antimicrobial Chemotherary. 1990;26(1): 1—5

168. Iglewski B.N. NAD- dependent inhibition of protein syn thems by Pseudomonas aeruginosa toxin / B. N. Iglewski, D. Kabat // Proc. Nate Fcad. Soi. USA - 1975-V. 72.- P. 2284-2288.

169. Iroha I. R. Bacteria contamination of raw meat sold in Abakaliki, Ebonyi State Nigeria /1. R. Iroha, E. C. Ugbo, D. C.Ilang, A. E. Oji, T. E. Ayogu // Journal of Public Health and Epidemiology. - 2011. - Vol. 3(2), pp. 49-53.

170. Ischida T., Ikeda T., Takiguchi N. et al. Inhibition of Quorum Sensing in Pseudomonas aeruginosa by N-Acyl Cyclopentylamides. Appl Environ Microbiol. 2007. Vol.73: 3183-3188.

171. Jackson T.L., Reykyn S.J., Graham E.M. Endogenous Bacterial Endophthalmitis: A 17-year Prospective Series and Review of 267 Reported Cases. Survey of Ophtalmology. 2008. Vol.48: 403^123.

172. Japoni A., Farshad S., Alborzi A. Pseudomonas aeruginosa: Burn Infection, Treatment and Antibacterial Resistance. Iranian Red Crescent Medical Journal. 2009. Vol.11:244-253.

173. Jinsoo Song. Characterization of the pathogenesis Mechanism after Pseudomona aeruginosa infection through food consumption using chick embryo model / Jinsoo Song, Eun-Jung Jin, Kyoung -Hee Choi // Korean J. Food Sei. Ani. Resour. 2010. -Vol. 30. №4. Pp. 568-574.

174. Johes L.F. Pyocine typing Ps. aeruginosa: a simplified Method / L.F. Johes, LP. Zacanicz, E.T. Thomas, I.I. Farmer // Appl. Microbiol - 1974.- N21.- № 2 - P. 400^406.

175. Jones L.F. Simplified method of producting pyocins from Ps. aeruginosa / L.F. Jones, B.V. Pinto, E.T. Thomas, I.I. Farmer // Appl. Microbiol.- 1973.- V. 26 - № l.P. 120-121.

176. Kleerebezem M, Quadri LE, Kuipers OP, et al. Quorum sensing by peptide pheromones and two-component signal-transduction systems in gram-positive bacteria. Molecular Microbiology. 1997;24:895-904

177. Kobayashi H. Basic and clinical study of bacterial biofilm. Nippon Naika Gakkai Zasshi. Abstract. 1994;83(9): 1692-1696

178. Kobayashi H. Biofilm disease: its clinical manifestation and therapeutic possibilities of macrolides. American Journal of Medicine. 1995;99(6A):26S-30S

179. Kondoh K, Hashiba M. Inhibitory effect of macrolide antibiotics on biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa. Nippon Jibiinkoka Gakkai Kaiho. Abstract. 1998;101(l):25-36

180. Kumon H, Ono N, Iida M, et al. Combination effect of fosfomycin and ofloxacin against Pseudomonas aeruginosa growing in a biofilm. Antimicrobial Agents Chemotherapy. 1995;39(5): 1038-1044

181. Laffer R.R., Graber P., Ochsner P.E., Zimmerli W. Outcome of prosthetic knee-associated infection: evaluation of 40 consecutive episodes at a single centre. Clin Microbiol Infect. 2006. Vol.12: 433^39.

182. Lambert R.J., Hanion G.W., Denyer S.P. The synergistic effect of EDTA/antimicrobial combinations on Pseudomonas aeruginosa. J Appl Microbiol. 2004. Vol.96: 244-253.

183. Mah T.F., Pitts B., Pellock B. A genetic basis for Pseudomonas aeruginosa biofilm antibi-otic resistance. Nature. 2003. Vol. 426: 306-310.

184. Mandsberg L.F,Antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa strains with increased muta-tion frequency due to inactivation of the DNA oxida-tive repair system / Mandsberg L.F, Ciofu O., Kirkby N., Christian- sen L.E, Poulsen H.E., Hoiby N. Antimicrob Agents Chemother 2009; 53:2483 - 91.

185. Mathee K, Ciofu O, Sternberg C, et al. Mucoid conversion of Pseudomonas aeruginosa by hydrogen peroxide: a mechanism for virulence activation in the cystic fibrosis lung. Microbiology. 1999; 145(6): 1349-1357

186. McLaughlin-Borlace L., Stapleton F., Matheson M., Dart J.K. Bacterial biofilm on contact lenses and lens storage cases in wearers with microbial keratitis. JAP. 1998. Vol,84: 827-838.

187. Meluleni G.J., Grout M., Evans D.J., Pier G.B. Mucoid Pseudomonas aeruginosa growing in a biofilm in vitro are killed by opsonic antibodies to the mucoid exopolysaccharide capsule but not by antibodies produced during chronic lung infection in cystic fibrosis patients. J Immunol. 1995. Vol. 155(4): 2029-2038.

188. Miller M.B., Bassler B.L. Quorum sensing in bacteria. Annu Rev Microbiol. 2001. Vol.55: 165-199.

189. Muh U., Schuster M., Heim R. et al. Novel Pseudomonas aeruginosa Quorum-Sensing In-hibitors Identified in an Ultra-High-Throughput Screen. Antimicrob. Agents Chemother. 2006. Vol.50: 3674-3679.

190. Mulcahy L.R., Isabella V.M., Lewis K. Pseudomonas aeruginosa biofilms in disease. Microb. Ecol. 2013. Vol.6: 76-79.

191.0'Toole G, Kaplan HB, Kolter R. Biofilm formation as microbial development. Annu Rev Microbiol. 2000. Vol.54: 49-79.

192. Pankey G.A., Sabath L.D. Clinical Relevance of Bacteriostatic versus Bactericidal Mecha-nisms of Action in the Treatment of Gram-Positive Bacterial Infections. Clin Infect Dis. 2004. Vol.38: 864-870.

193. Pasmans F. Modulation of interactions of Salmonella typhimurium with pigs bystress and T-2 toxin / F. Pasmans, S. Croubels, F. Haesebrouck // Faculty of Veterinary Medicine, Ghent University, Ghent. - 2012. - P. 11-169.

194. Pavlova I.B. Atlas: Pathogenic bacteria populations, in two parts / I.B. Pavlova // Pro Publishing House. - M., - 2014. - 352 p.

195. Pavlovskis O.R. Pseudomonas aeruginosa exotoxin in mice: Localizationand effect on protein synthesis / O.R. Pavlovskis, A.N. Shackelford // Infect. Immun. -1974.- V. 9.- № 3.- P. 540-546. 162.

196. Pearson JP, Van Delden C, Iglewski BH. Active efflux and difffusion are involved in transport of Pseudomonas aeruginosa cell-to-cell signals. The Journal of Bacteriology. 1999; 181 (4): 1203-1210.

197. Persek MR, Greenberg EP. Acy-homoserine Lactone quorum sensing in Gramnegative bacteria: A signaling mechanism involved in assciations with higher organisms. Proceedingd of the National Academy of Sciences of the United State of America. 2000;97(16):8789-8793

198. Petignat C., Francioli P., Nahimana I. et al. Exogenous Sources of Pseudomonas aeruginosa in Intensive Care Unit Patients: Implementation of Infection Control Measures and Follow-Up With Molecular Typing, infection control and hospital epidemiology. 2006. Vol.27 (9): 953-957.

199. Piddock L.J.V. N ewer mechanisms of resistance to lactam antibiotica of gramnegative bacteria / L.J.V. Piddock, R. Wise // J. Antimicrobiol. Chemoter-1985-V. 16.- №3.. p. 273-284.

200. Pritt B., O'Brien L., Winn W. Mucoid Pseudomonas in Cystic Fibrosis. Am J Clin Pathol. 2007. Vol.128: 32-34.

201. Rashid HM, Rumbaugh K, Passador L, et al. Polyphosphate Kinase is essential for biofilm development, quorum sensing, and virulence of Pseudomonas aeruginosa. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United State of America. 2000;97( 17):9636-9641

202. Rashid MH, Rao NN, Kornberg A. Inorganic polyphosphate is required for motility of bactetial pathogens. The Journal of Bacteriology. 2000; 182(1 ):225-227

203. Rashil MH, Rao NN, Kornberg A. Inorganic polyphosphate isneeded for swimming, swarming, and twitching motilities of Pseudomonas aeruginosa. Proceedings of the National Academy of Sciences of United State of America. 2000;97(9):4885-4890

204. Rhame F.S. Pseudomonas aeruginosa / F.S. Rhame // Ed. L.D. Sabath - « Bern, 1980.-P. 31.-54.

205. Rocha C.L., Coburn J., Rucks E., Olson J. Characterization of Pseudomonas aeruginosa Exoenzyme S as a Bifunctional Enzyme in J774A.1 Macrophages. Infection and immunity. 2003. Vol.7: 5296-5305.

206. Rossolini G., Mantegoni E. Treatment and control of severe infections caused by multiresistant Pseudomonas aeruginosa. Clin Microbiol Infect. 2005. Vol.11: 1732.

207. Saadia M. The microbial quality of fast food and traditional fast food / M. Saadia, Hassanein Easa//Nature and Science. - 2010.-№ 8 (10). - P. 117- 133.

208. Sepandj F., Ceri H., Gibb A. yt ai. Minimum inhibitory concentration (MIC) versus mini-mum biofilm eliminating concentration (MBEC) in evaluation of antibiotic sensitivity of gram-negative bacilli causing peritonitis. Perit Dial Int. 2004. 24: 65-67Schmidmaier G., Lücke M., Wildemann В. et al. Prophylaxis and treatment of implant-related infections by antibiotic-coated implants: a review. Injury. 2006 . Vol.37: 105-112.

209. Shen Ying. Pseudomonas aeruginosa была обнаружена в образцах пищевых отравлений / Shen Ying, Yang Zhenglin, Yue Feng // Zhejiang Prev Med. 2010. -vol. 22. -№.3. P. 45-46.

210. Song Z, Johansen HK, Moser С, et al.Effects of Chinese medicinal herbs on a rat model of chronic Pseudomonas aeruginosa Lung infection. Antimicrbial Agents and Chemotherapy. 1996;104:350-354

211. Stover C.K., Pham X.Q., Erwin A.L. et al. Complete genome sequence of Pseudomonas aeruginosa PAOl, an opportunistic pathogen. Nature. 2000. Vol. 406: 959-964.

212. Tanaka G, Shigeta M, Shigeta M, Komatsuzawa H, et al. Effect of clarithromycin on Pseudomonad aeruginosa biofilms. Chemotherapy. 2000;46(1):36^12

213. Teitzel G., Parsek M. Heavy Metal Resistance of Biofilm and Planktonic Pseudomonas aeruginosa. Appl Environ Microbiol. 2003. Vol.69: 2313-2320.

214. Tetz G., Artemenko N., Tetz V. Effect of DNase and Antibiotics on Biofilm Characteristics. Antimicrob. Agents Chemother. 2009. Vol.53: 1204-1209.

215. Trampuz A., Widmer A.F. Infections associated with orthopedic implants. Current Opinion in Infectious Diseases. 2006. Vol.19: 349-356.

216. Trampuz A., Zimmerli W. Diagnosis and treatment of infections associated with fracture-fixation devices. Injury. 2006. Vol.37: 59-66.

217. Tomlin K.L., Coll O.P., Ceri H. Interspecies biofilms of Pseudomonas aeruginosa and Burkholderia cepacia. Can J Microbiol. 2001. Vol.47: 949-954.

218. Tre-Hardy M., Vanderbist F., Traore H. et al. In vitro activity of antibiotic combinations against Pseudomonas aeruginosa biofilm and planktonic cultures. Int. J of Antimicrobial Agents . 2008. Vol.31: 329-336.

219. Van Delden C. Cell-to-cell sig-naling and Pseudomonas aeruginosa infections / C. Van Delden, B. H. Iglewski // Emerg. Infect. Dis. - 1998. -4.-551-560.

220. Van Loosdrecht MC, Lyklema J, Norde W, et al. Influence of interface on microbial activity. Microbiology Review. Review. 1990;54(l):75-87

221. Venturi V. Regulation of quorum sensing in Pseudomonas. FEMS Microbiol Rev. 2006. Vol.30: 274-291.

222. Watters C., DeLeon K., Trivedi U. et al. Pseudomonas aeruginosa biofilms perturb wound resolution and antibiotic tolerance in diabetic mice. Med Microbiol Immunol. 2013. Vol.202: 131-141.

223. Walters M.C. 3rd, Roe F., Bugnicourt A. et al. Contributions of antibiotic penetration, oxy-gen limitation, and low metabolic activity to tolerance of Pseudomonas aeruginosa biofilms to ciprofloxacin and tobramycin. Antimicrob Agents Chemother. 2003. Vol.47: 317-333.

224. Whiteley M., Bangera M.G., Bumgarner R.E. et al. Gene expression in Pseudomonas aeruginosa biofilms. Nature. 2001. Vol.413: 860-862.

225. Widmer A.F. Infection control and prevention in the ICU. Intensive care medicine. 1994. Vol.20: 7-11.

226. Willcox M.D. Pseudomonas aeruginosa infection and inflammation during contact lens wear: a review. Optom Vis Sei. 2007. Vol.84: 273-278.

227. Wu H., Song Z., Hentzer M. et al. Synthetic furanones inhibit quorum-sensing and enhance bacterial clearance in Pseudomonas aeruginosa lung infection in mice. J. Antimicrob. Chemother. 2004. Vol.53: 1054-1061.

228. Yanagihara K, Tomono K, Sawai T, et al. Efficacy of erythromycin inhalation in chronic respiratory infection caused by Pseudomonas aeruginosa. Kansenshogaku Zasshi. Abstract. 1997;71(4):337-341.

229. Zhang Xiaopan, Chen Ligang, Xu Yang etc. Determination of ß-lactam antibiotics in milk based on magnetic molecularly imprinted polymer extraction coupled withliquid chromatography-tandem mass spectrometry // J. Chromatogr. B. 2010.878.№32,3421-3426.

230. He Lanxiang. The investigation reports of food poisoning caused by Pseudomonas aeruginosa / He Lanxiang, Huang Xinhua, Chen Caihong, Mao Zhiqu, Huang Yanting // China Rural Health. 2012.

Дифференциально-диагностические свойства изученных штаммов бактерий

рода Pseudomonas

Бактерии рода Pseudomonas Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027 P.fluorescens № 19 P. putida № 43

Группа патогенности IV группа

Название штамма (производственный, эталонный, музейный) Музейный

Морфологические, биохимические и культуральные свойства Грамотрицательные МПА - колонии средней величины, круглые, выпуклые с неровными краями МПБ - пленка на поверхности среды, осадка нет Аэробные (расщепление глюкозы путем окисления с образованием кислоты без газа - «+» окислительно-ферментативный тест Хью-Лейфсона); Оксидаза «+» Каталаза «+» Мальтоза «-» Индол «-» Сероводород «-»

Способ хранения штаммов (t°, питательная среда) ПЖА 0,15%, 2-8°С

Периодичность пересевов на питательных средах Один раз в месяц

Питательные среды для культивирования МПА, МПБ, ПЖА

Диффундирующие нефлуоресцирующие пигменты Штаммы P. aeruginosa продуцируют сине-зеленый диффундирующий нефлуоресцирующий пигмент

Рост при 41°С + - -

Рост при 4°С - + +

Дифференциально-диагностические свойства изученных штаммов бактерий семейства Enterobacteriaceae

Бактерии семейства ЕМегоЬаМепасеае Salmonella enteritidis № 204; Escherichia coli K88, №727; Klebsiella pneumoniae №24; Proteus vulgaris H2091; Citrobacter freundii №33/57; Enterobacter aerogenes № 0030; Yersinia enterocolitica 09, №383

Группа патогенности IV группа

Название штамма (производственны й, эталонный, музейный) Музейный

Морфологические, биохимические и культуральные свойства Грамотрицательные МПА - колонии средней величины, круглые, выпуклые с неровными краями МПБ - пленка на поверхности среды, осадка нет Факультативно анаэробные (расщепление глюкозы путем окисления с образованием кислоты и газа — «+» окислительно-ферментативный тест Хью-Лейфсона); Хемоорганотрофы Не галофильны Подвижные Оксидаза «-» Каталаза «+» D-глюкоза «+» Редуцируют нитраты (исключение - Y. enterocolitica)

Способ хранения штаммов (1°, питательная среда) ПЖА 0,15%, 2-8°С

Периодичность пересевов на питательных средах Один раз в месяц

Питательные среды для культивирования МПА, МПБ, ПЖА

Дифференциально-диагностические свойства изученных штаммов бактерий

Staphylococcus aureus

Бактерии рода Staphylococcus Staphylococcus aureus №123

Группа патогенности IV группа патогенности

Название штамма (производственный, эталонный, музейный) Музейный

Морфологические, биохимические и культуральные свойства Грам пол ожител ьн ые МПА - круглые, выпуклые, гладкие, блестящие, непрозрачные колонии МПБ - помутнение среды, наличие осадка Факультативно анаэробные Неподвижные Каталаза «+» Коагулаза «+» Стафилококки ферментируют с образованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, фруктозу, сахарозу, ксилозу, глицерин, маннит и не разлагают дульцит, салицин, инулин, раффинозу. Выделяют аммиак и. сероводород, не образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты; продуцируют каталазу, фосфатазу, уреазу; Свертывают и пептонизируют молоко, разжижают желатин, иногда свернутую сыворотку крови.

Способ хранения штамма (t°, питательная среда) ПЖА- 0,15% 2-8°С

Периодичность пересевов на питательных средах Один раз в месяц

Рекомендуемые питательные среды для культивирования МПА, ПЖА

Антибактериальные препараты

Классификация антибиотиков

По характеру воздействия на бактериальную кле1ку:

> бактериостатические препараты (останавливают рост и размножение бактерий)

> бактерицидные препараты (разрушают структуры бактериальных клеток) По способу получения:

> природные

> синтетические

> полусинтегические

По направленности действия:

> антибактериальные

> противоопухолевые

> противогрибковые По спектру дейст вия:

> антибиотики широкого спектра действия

> антибиотики узког о спектра действия По химической структуре: Бе1а-лактамные антибиотики

Пенициллинм - вырабатываются колониями плесневого грибка РетсППпит. биосинтетические

(пенициллин в - бензилпенициллин),аминопенициллины (амоксициллин, ампициллин, бекампициллин) и пол)синтетические (оксациллин, метициллин, клоксациллин, диклоксациллин, флуклоксациллин) пенициллины.

Цефалосиорины - используются по отношению к пенициллинустойчивым бактериям. Различают цефалоспорины: 1-го (цепорин, цефалексин), 2-го (цефазолин, цефамезин), 3-го (цефтриаксон, цефотаксим, цефуроксим) и 4-го (цефепим, цефпиром) поколений. Карбапенемы - антибиотики широкого спектра действия. Структура карбапенемов обуславливает их высокую резистентность к бета-лактамазам. К карбапенемам относятся: меропенем (меронем) и имипинем. Монобактамы (аз1реонам)

Макролиды - антибиотики со сложной циклической структурой, обладающие бактериостатическим действием, являются менее токсичными. К ним относятся:

эритромицин, олеандомицин, рокситромицин, азитромицин (сумамед), кларитромицин и азалиды и кетолиды.

Тетрациклины - используются для лечения инфекций дыхательных и мочевыводящих путей, лечения тяжелых инфекций типа сибирской язвы, туляремии, бруцеллёза. Обладает бактериостатическим действием. Относятся к классу поликетидов, различают: природные (тетрациклин, окситетрациклин)

полусинтетические (метациклин, хлортетрин, доксициклин) тетрациклины. Аминогликозиды — антибиотиков высокотоксичные. Используются для лечения тяжелых инфекций типа заражения крови или

перитонитов. Обладает бактерицидным действием. Аминогликозиды активны в отношении к грамотрицательным аэробным бактериям.

К ним относятсяхтрептомицин, гентамицин, канамицин, неомицин, амикацин и др. Левомицетины— При использовании антибиотиков данной группы, существует риск возникновения серьезных осложнений - поражении костного мозга, вырабатывающего клетки крови. Обладает бактериостатическим действием.

Гликопептидные антибиотики нарушают синтез клеточной стенки бактерий. Обладает бактерицидным действием, однако возможно бактериостатическое действие антибиотиков данной группы в отношении к энтерококкам, стрептококкам и стафилококкам.

К ним относятся: ванкомицин, тейкопланин, даптомицин и др. Линкозамиды - бактериостатическое действие. К ним относятся: линкомицин и клиндамицин

Полипептиды- антибиотики данной группы в своей молекуле содержать остатки полипептидных соединений.

К ним относятся: грамицидин, полимиксины М и В, бацитрацин, колистин; К нолиенам относятся: амфотерицин В, нистатин, леворин, натамицин Антибиотики разных групп — Рифамицин, Ристомицина сульфат, Фузидин-натрий и др.

Лекарственные растения

Коптис китайский (Coptis chinensis Franck)

Отдел Magnoliophyta Класс Magnoliopsida Порядок Ranunculales Семейство Ranunculaceae Род Coptis

Вид Coptis chinensis Franch

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi)

Отдел Magnoliophyta Класс Magnoliopsida Порядок Lamiales Семейство Labiatae Род Scutellaria Вид Scutellaria baicalensis Georgi

- многолетнее травянистое растение семейства Лютиковые - Ranunculaceae, высотой до 15 см с тройчатыми кожистыми листья. Листья прикорневые, на длинных черешках, тройчатые;' цветочные стрелки одиночные, до 15 см длиной, при плодах немного удлиняются. Цветки одиночные, редко по 2 на стрелке, 11,5 см в диаметре, чашелистики в количестве 5, яйцевидные, бледно-желтые, к основанию с наружной стороны сиреневые. Плоды - листовки перепончатые, почти ланцетной формы, семена продолговатые, бурые. Корневище тонкое, ползучее, в верхней части покрыто остатками отмерших листьев. Корневище и трава содержат 8% алкалоидов, в основном берберин и контин. Кроме того в растении обнаружен ранункулин до 0,1 %. Произрастает в горных районах Китая, Японии, Кореи

— многолетнее травянистое растение семейства Яснотковые (Губоцветные) - Lamiaceae (Labiatae). Четырёхгранные, чаще прямостоячие стебли 15-50 см высотой с сидячими цельнокрайними ланцетными листьями до 5 см длины. Цветки крупные, собраны в простую одностороннюю кисть, расположены по одному в пазухах верхних листьев. Венчик до 25 мм, двугубый, синий. Корень вертикальный, длиной до 50 см, с коротким, разветвленным корневищем, тёмно-бурый, в изломе лимонно-желтый. Растение содержит флавоноиды, в составе которых производные апигенина, лютеолина, скутелляреина, изоскутелляреина, картемидина и изокартемидина, корни содержат дубильные вещества, эфирные масла, алкалоиды, крахмал, пирокатехин, листья и стебли - кутелляреин. Произрастает преимущественно на Дальнем Востоке, в Монголии, в Забайкалье.

Жимолость японская (Lonicera japónica)

Отдел Magnoliophyía Класс Magnoliopsida Порядок Dipsacales Семейство Caprifoliaceae Род Lonicera Вид Lonicera japónica

Чай Пуэр

(Camellia sinensis var. Assamic)

Отдел Magnoliophyta Класс Magnoliopsida Порядок Theales Семейство Theaceae Род Camellia Вид Camellia sinensis var. Assamic

— полувечнозеленый вьющийся кустарник семейства Жимолостные (Caprifoliaceae), высота - до 5 м. Имеет плотную крону диаметром от 1,5 до 3 м округлой, полуокруглой, обратноконической формы. Кора бурого цвета с желтоватым или сероватым оттенком. Листья кожистые, цветки белые, с пурпурным оттенком, плоды черные, сочные, покрыты густым восковым налетом. Жимолость японская содержит элаидиновую кислоту, салициловую кислоту, инозит, линолевую кислоту, магний, танин, цинк, лютеолин, миристиновую кислоту, дубильные вещества. Произрастает в Гималаях, Западном Китае, Японии и Корее, встречается на чайных плантациях в Закавказье.

- постферментированный чай, сырьем для получения которого служит Камелия ассамская {Camellia sinensis var. Assamic) семейства Чайные (Theaceae) - вечнозеленое дерево достигающее в высоту 15-20 метров. Листья кожистые очерёдные, овальные или удлинённо-овальные, к верхушке суженные, короткочерешковые, сверху темно-, снизу светло-зелёные, длиной 5-7, шириной 3,5 - 4 см, серебристо-опушённые. Край листа зубчатый, в мякоти листьев имеются ветвистые опорные склереиды. Чай Пуэр содержит полифенолы (флавоноиды, фенолокислоты, катехины и антоцианидины) в количестве 17-37%, обладающие антибактериальными свойствами, аминокислоты, алкалоиды (теин), статины, сахариды, каротин, витамины А, С, Е, минеральные вещества (калий, цинк, фтор, марганец и хром), ароматические вещества. Произрастает в южной китайской провинции Юньнань, Лаосе, Таиланде, Вьетнаме и Бирме.