Биомаркеры воздействия загрязнений на двустворчатых моллюсков Северо-Кавказского побережья Черного моря тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.18, кандидат биологических наук Колючкина, Галина Антоновна

• Колючкина, Галина Антоновна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Колючкина, Галина Антоновна

ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1 ЗАГРЯЗНЕНИЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ И БИОМАРКЕРЫ.,

2.1.1 Экотоксикология и биомаркеры. Основные понятия и термины.

2.1.2 Специфические и неспецифические биомаркеры.

2.1.3 Двустворчатые моллюски - идеальные объекты биомониторинга.

2.1.4 Разновидности неспецифических биомаркеров и их применимость в полевых условиях для экологического мониторинга.

2.1.5 Импульсное и хроническое загрязнение. Содержание АТФ в гемоцитах, концентрация гемоцитов в гемолимфе и гистопатологии - как биомаркеры острого стресса.

2.2 РАЙОН И ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1 Антропогенное загрязнение Черного моря.

2.2.2 Динамика прибрежных макрозообентосных сообществ Северо-кавказского побережья Черного моря.

2.2.3 Объекты исследований.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА.

3.1 Экспериментальные исследования.

3.1.1 Исследования последствий хронического загрязнения для моллюсков.

3.1.2 Исследования влияния импульсного загрязнения на моллюсков.

3.1.2.1 Предварительный эксперимент. Определение сублетальных концентраций загрязняющих веществ для черноморских двустворчатых моллюсков Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis и Chamelea gallina.

2.1.2.2 Иследование боимаркерных параметров двустворчатых моллюсков Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis и Chamelea gallina при экспериментальном импульсном загрязнении.

3.2 Оценка фоновых значений биомаркерных параметров двустворчатых моллюсков из разных районов Северо-Кавказского побережья Черного моря.

3.3 Методики анализов.

ГЛАВА 4. ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ РАБОТЫ.

4.1. ЭФФЕКТЫ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАГРЯЗНЕНИЙ НА ДВУСТВОРЧАТЫХ

МОЛЛЮСКОВ.

4.1.1 Chamelea gallina.

4.1.2 Anadara cf. inaequivalvis.

4.2. ЭФФЕКТЫ ИМПУЛЬСНЫХ ЗАГРЯЗНЕНИЙ HA Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis и Chamelea gallina.

4.2.1 Определение сублетальных концентраций загрязняющих веществ для черноморских двустворчатых моллюсков.

4.2.2 Исследование боимаркерных параметров двустворчатых моллюсков Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis и Chamelea gallina при экспериментальном импульсном загрязнении.

4.3. БИОМАРКЕРЫ ИМПУЛЬСНОГО И ХРОНИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ.

4.4 ФОНОВЫЕ ЗНАЧЕНИЯ БИОМАРКЕРНЫХ ПАРАМЕТРОВ ДВУСТВОРЧАТЫХ МОЛЛЮСКОВ ИЗ РАЗНЫХ РАЙОНОВ СЕВЕРОКАВКАЗСКОГО ПОБЕРЕЖЬЯ ЧЕРНОГО МОРЯ В 2003-2007 гг.

4.2.1 Содержание загрязняющих веществ в мягких тканях моллюсков.

4.4.2 Гистопатологии.

4.4.3 Содержание АТФ в гемоцитах и концентрация гемоцитов в гемолимфе моллюсков.

4.4.4 Динамика биомаркерных параметров Anadara cf. inaequivalvis и популяционная динамика A. cf. inaequivalvis и Rapana venosa.

4.5 ПОСЛЕДСТВИЯ РАЗЛИВА МАЗУТА В КЕРЧЕНСКОМ ПРОЛИВЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биомаркеры воздействия загрязнений на двустворчатых моллюсков Северо-Кавказского побережья Черного моря»

Актуальность темы

Интенсивное антропогенное загрязнение прибрежных морских акваторий остается одной из важных проблем современности. В результате человеческой деятельности в океаны и моря поступает огромное число загрязняющих веществ, включая ксенобиотики. По времени воздействия и концентрации веществ загрязнение можно разделить на хроническое и импульсное. Хроническое загрязнение характеризуется наличием постоянного источника загрязнения (канализационные стоки городов, загрязнение нефтепродуктами вблизи крупных портов и пр.). Импульсное или залповое загрязнение - это одномоментный выброс высоких концентраций загрязняющих веществ, при этом облако загрязнителя может сравнительно быстро рассеиваться в толще вод.

Традиционно используемые при оценке качества водной среды величины предельно допустимых концентраций (ПДК) не позволяют ни предсказать эффекты всех возможных комбинаций поллютантов на биоту, ни выявить последствия импульсных воздействий. Они предназначены для предотвращения и контроля неблагоприятных последствий загрязнения на окружающую среду (Филенко, 2007). Методики биотестирования с использованием культур ракообразных и микроводорослей, которые используют при анализе токсичности водной среды, не применимы для морских экосистем с высокой гидродинамической активностью, когда изменения концентрации поллютантов вблизи источника загрязнения могут происходить за часы (Отчет по ФЦП «Мировой океан»., 2004). Кроме того, эти методы ориентированы на быструю оценку токсичности среды (Филенко, 2007), но не позволяют предсказать возможные эффекты антропогенного 4 загрязнения на экологические характеристики водных экосистем. Множество комбинаций синергических, антагонистических и маскирующих эффектов антропогенных факторов (1У^аи<1 е1 а1., 1997), а также необходимость соотнесения этих эффектов с изменениями в реальных сообществах, выдвигают на первый план проблему методов интегральной оценки их влияния на водные организмы (Руднева и др., 2004).

Традиционным методом оценки состояния морских экосистем является биоиндикация (ЫошсНсайоп) - метод определения качества среды обитания по видовому составу и структуре сообществ, а также по показателям количественного развития видов-биоиндикаторов. Наиболее консервативными и пригодными для биомониторинга являются бентосные организмы. Однако для водоемов с нестабильной экологической обстановкой использование этого метода оказывается затруднительным. Так, в последние годы на Северо-Кавказском побережье Черного моря наблюдаются значительные изменения в структуре прибрежных экосистем. В результате инвазии аллохтонных видов и бенто-планктонных взаимодействий наблюдаются значительные колебания численности и биомассы донных организмов (Кучерук и др., 2002; СЫкта, КисИегик, 2003) На этом фоне значительно сложнее выявить появление и динамику видов-биоинднкаторов, а также однозначно связать изменения в структуре сообществ с загрязнением. Кроме того, виды-биоиндикаторы развиваются в экосистемах в основном при хроническом загрязнении. Однако возможность залпового загрязнения прибрежных акваторий с интенсивными морским транспортом и слабо контролируемыми бытовыми стоками остается важной проблемой и сравнительно слабо изученной областью. Поэтому рациональным и целесообразным представляется использование подходов, основанных на принципе биомаркирования, позволяющих получить интегральную оценку физиологического состояния животных на основе измерения нескольких ключевых параметров. Главное преимущество этого метода - в возможности использования неспецифических биомаркеров, отражающих общее изменение физиологического состояния организма в ответ на воздействия разной природы.

Наиболее доступными и удобными объектами биомаркерных исследований в прибрежных донных экосистемах Северо-Кавказского побережья Черного моря являются двустворчатые моллюски-фильтраторы -доминанты местных донных сообществ. Они характеризуются крупными размерами и высокой численностью, легкодоступны для отбора, что позволяет использовать их как для химического анализа загрязнений, так и для изучения биологических реакций на поллютанты.

Целью настоящей работы является выявление неспецифических физиологических и гистологических биомаркеров в организме двустворчатых моллюсков, отражающих уровень антропогенной нагрузки на прибрежные экосистемы Северо-Кавказского побережья Черного моря и позволяющих разделять хроническое и импульсное воздействие загрязняющих веществ.

Для достижения цели нами были поставлены следующие задачи:

1. Найти неспецифические биомаркеры при экспериментальном импульсном и хроническом воздействиях сублетальных концентраций тяжелых металлов и нефтепродуктов на черноморских двустворчатых моллюсков (Скате1еа %аШпа, Апас1ага с£ таедипюЫз и МуШт &аНорго \nncialis).

2. Оценить возможности использования физиологических и гистологических параметров для разделения эффектов импульсного и хронического воздействий.

3. Оценить фоновые значения биомаркерных параметров: содержание АТФ, концентрацию гемоцитов в гемолимфе, уровень гистопатологий двустворчатых моллюсков из разных районов СевероКавказского побережья Черного моря.

Научная новизна. В экспериментальных условиях получены новые данные по: 1) содержанию АТФ в гемоцитах трех видов черноморских двустворчатых моллюсков {Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis, Chôme lea gallina), 2) соотношению клеточных типов в гемолимфе, 3) концентрации гемоцитов и 4) гистопатологиям в условиях импульсного и хронического загрязнения среды обитания.

Впервые был выполнен анализ содержания АТФ в гемоцитах, концентрации гемоцитов и гистопатологиям трех видов двустворчатых моллюсков {Anadara cf. inaequivalvis, Mytilus galloprovincialis, Chamelea gallina) Северо-Кавказского побережья Черного моря.

Разработан метод идентификации импульсных и хронических стрессовых воздействий на двустворчатого моллюска Anadara cf. inaequivalvis, играющего важную роль в структуре прибрежных донных сообществ Северо-Кавказского побережья Черного моря.

Теоретическое и практическое значение работы. Полученные результаты подтверждают применимость метода гистологического анализа для разделения эффектов импульсного и хронического воздействий загрязняющих веществ на двустворчатых моллюсков. Единообразная реакция животных на действие загрязняющих веществ указывает на неспецифичность и универсальность регистрируемых реакций. Полученные результаты по исследованию параметров гемолимфы Anadara cf. inaequivalvis указывают на неспецифичность ответа организма на различные типы загрязнителей и специфичность реакции на разное время воздействия и концентрацию загрязнителей. При кратковременных воздействиях высоких концентраций на организм преимущественно происходят принципиально иные процессы, в отличие от хронических воздействий загрязняющих веществ в низких концентрациях.

Эти методы могут быть использованы в рутинном мониторинге для оценки физиологического состояния двустворчатых моллюсков -доминирующих видов большинства прибрежных донных сообществ СевероКавказского побережья Черного моря. Комплексная оценка концентрации гемоцитов в гемолимфе и содержания в них АТФ может применяться в качестве экспресс-метода для выявления и разделения импульсных и хронических воздействий.

Апробация работы. Результаты работы были представлены на I Международной научной конференции по изучению Черного моря (2006, Стамбул, Турция); на 99-й Международной конференции по аквакультуре (2007, Сан-Антонио, Техас, США); на XXII Международной береговой конференции «Проблемы управления и устойчивого развития прибрежной зоны моря» (2007, Геленджик); на 50-м Ежегодном симпозиуме Научного комитета по изучению океана (2008, Вудсхол, Массачусетс, США) и на коллоквиумах Лаборатории экологии прибрежных донных сообществ Института океанологии им. П.П. Ширшова РАН (2003-2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ (3 статьи и 7 тезисов), 1 статья находится в печати.

Сокращения в тексте. ТМ — тяжелые металлы, НУ - нефтяные углеводороды, ДТ — дизельное топливо, ГЛПП - гранулы липофусциноподобного пигмента. АТФ - аденозинтрифосфат, ДМ -двустворчатые моллюски.

Работа выполнена в Лаборатории экологии прибрежных донных сообществ Учреждения Российской академии наук Института океанологии им. П.П. Ширшова РАН.

Заключение диссертации по теме «Гидробиология», Колючкина, Галина Антоновна

6. выводы

1. Показано, что гистопатологическне изменения тканей пищеварительной железы (сходные у трех массовых видов черноморских моллюсков-Anadara cf. inaequivalvis, Chamelea gallina и Mytilus galloprovincialis), концентрация эритроцитов в гемолимфе и содержание в них АТФ (у A. cf. inaequivalvis) являются биомаркерами загрязнений среды и могут быть использованы для выявления как хронических, так и импульсных загрязнений.

2. Предложенные биомаркеры позволяют выявить воздействие поллютантов (дизельного топлива и тяжелых металлов) на двустворчатых моллюсков до того, как это воздействие проявляется по популяционным показателям (смертность и др.), а также обнаружить последствия воздействия загрязнений на естественные популяции после возвращения состояния среды к норме.

3. Хронические и импульсные загрязнения среды различаются по вызываемым ими реакциям в организмах двустворчатых моллюсков, эти изменения могут быть дифференцированы только с использованием комплексного анализа гистологических и физиологических биомаркеров.

4. Значительное снижение численности Anadara cf. inaequivalvis на СевероКавказском шельфе Черного моря в районе поселка Шепси является последствием ее истощения из-за длительного воздействия загрязняющих веществ, что сделало этот вид более доступным пищевым объектом для хищного моллюска Rapana venosa.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор искренне благодарен своему научному руководителю к.б.н. Н.В. Кучеруку за постоянную помощь и поддержку при проведении данной работы. Глубокую признательность за постоянную идейную поддержку и благодарность приношу своему учителю - Марии Александровне Ланге, безвременно ушедшей из жизни в июне 2005 года. Автор признателен д.б.н. в.н.с. кафедры микробиологии Биологического факультета МГУ А.Д. Исмаилову за помощь в освоении методов измерения концентрации АТФ и поддержку при выполнении исследований. Выполнение данной работы стало возможным благодаря активной поддержке и помощи д.б.н. М.В.Флинта и к.б.н. В.А. Спиридонова (Институт океанологии РАН). Автор благодарен д.б.н. А.И. Азовскому, к.б.н. Д.А. Астахову, ст.н.с. О.В., Максимовой (ИО РАН) за помощь в обсуждении результатов работы, а также всем сотрудникам и аспирантам Лаборатории экологии прибрежных донных сообществ ИО РАН за поддержку, и особенно М.В. Чикиной и У.В. Симаковой. Автор искренне признателен доктору Инке Сунила (Inke Sunila, Dept. ofAgriculture, Bureau of Aquaculture, Connecticut, USA) - за бескорыстную помощь в освоении методов гистопатологического анализа двустворчатых моллюсков; И. Яхонтовой (ВНИРО) и сотрудникам базы ВНИРО на Черном море - за помощь при сборе материала; сотрудникам ЮО ИО РАН и особенно В.В. Козлову - за бессменную помощь в передвижениях по СевероКавказскому побережью при сборе материала; к.б.н. М.А. Милютиной и к.б.н. ДА. Милютину (Forschungsinstitut Senckenberg DZMB, Germany), a также сотрудникам Лаборатории экологии и распределения планктонных организмов, Лаборатории биохимии и гидрохимии, и Лаборатории экспериментальной физики океана (ИО РАН), и особенно П.В. Хлебопашеву, К.А. Соловьеву и к.ф.-м.н В.В. Кременецкому за помощь при организации и проведении полевых исследований; а также всем сотрудникам Лаборатории гистологии МГУ, где автор начинал гистологические исследования. Автор признателен к.ф.-м.н. зав. Лабораторией аэрокосмической радиолокации ИКИ РАН О.Ю. Лавровой за предоставленные спутниковые изображения, сотрудникам Лаборатории химии океана под руководством д.х.н. В.И. Пересыпкина, сотрудникам лаборатории Физико-геологических исследований (ИО РАН) под руководством академика А.П. Лисицына (ИО РАН) и сотрудникам Лаборатория прикладной гидрохимии и аналитической химии (ГОИН) под руководством д.х.н. А.В. Сыроешкина за определение содержания тяжелых металлов и углеводородов. Автор благодарен своей семье и друзьям за поддержку и понимание.

Работа была поддержана грантами РФФИ 02-05-64012-а, 05-05-64329-а (рук. к.б.н. Н.В. Кучерук), 06-05-65284-а (рук. к.б.н. В.А. Спиридонов), Программой 17 фундаментальных исследований Президиума РАН, Программой 12 фундаментальных исследований ОНЗ РАН, Программой по экологической политике нефтегазового сектора и региональным отделением «Российский Кавказ» Всемирного фонда природы (WWF- Россия).

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследование биомаркерных характеристик трех массовых видов двустворчатых моллюсков — Anadara cf. inaequivalvis, Chamelea gallina и Mytilus galloprovincialis из разных районов Северо-Кавказского побережья Черного моря показало, что в районах Железного Рога, Анапы и Шепси физиологическое состояние моллюсков значительно отличалось от фонового. Частота встречаемости моллюсков с патологическим содержанием ГЛГШ в пищеварительной железе положительно коррелировала с содержанием тяжелых металлов и нефтепродуктов в моллюсках, а содержание АТФ -отрицательно (достоверно только для ТМ), что согласуется с результатами лабораторных экспериментов по хроническому воздействию.

Последствия импульсных воздействий загрязнений (тяжелых металлов и дизельного топлива) на исследованные виды моллюсков во многом схожи с этапами восстановления физиологического состояния животных после продолжительных хронических воздействий. Изменения в организмах моллюсков после импульсных воздействий в организмах моллюсков менее долговременны, поэтому частота их регистрации в природе ниже. Выявить импульсные загрязнения возможно только при регулярном мониторинге исследуемых точек, причем при анализе параметров гемолимфы не реже 1 раза в месяц. Комплексное исследование параметров гемолимфы и гистопатологий позволяет более точно определить физиологическое состояние животных при меньшей частоте исследований.

Динамика биомаркерных признаков, прослеженная для A. cf. inaequivalvis в районе поселка Шепси на протяжении 3-х лет, указывает на интенсивное загрязнение тяжелыми металлами в период, предположительно, с мая по ноябрь 2006 года, что спровоцировало значительные изменения в донной экосистеме.

Таким образом, комплексный анализ предлагаемых параметров может стать основой для выявления вклада импульсных воздействий загрязняющих веществ в общую антропогенную изменчивость донных экосистем.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Колючкина, Галина Антоновна, 2009 год

1. Болтачев А.Р., Загородняя Ю.А., Болтачева НА. и др. Балластные воды как основной фактор биологического загрязнения Черного моря. // Рыбное хозяйство Украины. 2003. Т. 1 (24). С. 11-15.

2. Востоков C.B., Иванов А.Ю. Применение методов спутникового зондирования для мониторинга нефтяного загрязнения и экологического состояния морской среды в местах добычи и транспортировки нефти в Каспийском море. // Морские испытания. 02. 2007. 28-38.

3. Дементьева Е.И.; Кутузова Г.Д.; Лундовских И.А.; Угарова H.H. Реагент для определения аденозин -5'-трифосфата: Патент РФ № 2164241 // Электронный ресурс «База патентов РФ». URL: http://ru-patent.info/

4. Костылев Э.Ф., Красота JI.JI., Макаров Ю.Н. Оценка качества морской среды с использованием биомаркеров у мидий. //Ш Междунар. симпозиум "Экологические проблемы Черного моря". Одесса, 31 октября 2 ноября 2001 г., с. 170-171.

5. Крыленко В.В., Есин Н.В. Загрязнение Геленджикской бухты ливневым стоком. // Экология моря. 2001. Вып. 58. С.69-73.

6. Куценко С.А. Основы токсикологии. С.-П. 2002.

7. Кучерук Н.В. Макрозообентос Кавказского побережья Черного моря: влияние пелагических и донных видов-вселенцев // Материалы X НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ Беломорской биологической станции им. H.A. Перцова. 9-10 августа 2006 года. С.68-70.

8. Лапшин В.Б., Сыроешкин A.B., Колесников М.В., Матвеева И.С., Смирнов А.Н., Яблоков М.Ю., Земляное И.В., Игнатченко A.B., Лебедев И.М., Александров И.З., Березинская Т.Л., Суздалева О. С., Шокина О.И.,

9. Ленинджер А. Биохимия. Молекулярные основы сруктуры и функций клетки. Изд. Мир. М. 1974.

10. Максимова О.В., Лучина Н.П. Современное состояние макрофитобентоса у побережья Северного Кавказа: реакция фитали на эвтрофикацию Черноморского бассейна // Комплексные исследования северо-восточной части Черного моря. М.: Наука. 2002. С. 297-308.

11. Милютин Д.М., Вилкова О.Ю. Черноморские моллюски-вселенцы рапана и анадара: современное состояние популяций и динамика запасов. Рыбное хозяйство. 2006. № 4. С. 50-53.

12. Миронов О.Г. Загрязнение нефтью // Общая экология. Биоценология. Гидробиология. М.: Итоги науки и техники (ВИНИТИ). 1976. Т. 3. С. 81110.

13. Овсиенко С.Н., Фащук Д.Я., Зацепа С.Н и др. Шторм 11 ноября 2007 г. в Керченском проливе: хроника событий, математическое моделирование и географо-экологический анализ// Труды ГОИН. 2008. Вып. 211. С. 308340.

14. Олейник Е.В., Мощенко A.B., Лишавская Т.С. Влияние загрязнений донных отложений на видовой состав и обилие двустворчатых моллюсков в заливе Петра Великого Японского моря//Биология моря. 2004. Т.ЗО. № 1. С.39-45.

15. Отчет ВВФ-Россия по изучению последствий катастрофического разлива мазута в Керченском проливе в ноябре 2007. // На странице сайта ВВФ-Россия. Москва. 2008. URL:http://www.wwf.ru/data/oil/tamanweb.pdf

16. Отчет по Федеральной Целевой Программе «Мировой океан», тема 7 -«Комплексные исследования Черного и Азовского морей»; 2004

17. Патин С.А. Влияние загрязнения на биологические ресурсы и продуктивность мирового океана. М.: Пищевая промышленность. 1979. 303 С.

18. Патин CA., Морозов Н.П. Микроэлементы в морских организмах и экосистемах. М. Легкая и пищевая промышленность. 1981. 153 С.

19. Перечень рыбохозяйственных нормативов: предельно допустимых концентраций (ПДК) и ориентировочно безопасных уровней воздействия (ОБУВ) вредных веществ для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение. ВНИРО. М. 1999.

20. Руднева И. П., Шевченко Н. Ф., Овен Л. С, Залевская И. Н., Скуратовская Е. Н. Комплексная оценка качества водной среды с помощью биомаркеров разного уровня // Актуальные проблемы водной токсикологии. Борок: ИБВВ. 2004. С. 124-150.

21. Туманов A.A., Постное И.Е. Водные беспозвоночные как аналитические индикаторы (Обзор) // Гидробиол. журн. 1983. Т. 19. № 5. С. 3-16.

22. Угарова H.H., Фрунджян В.Г. Применение биолюминесцентной АТФ-метрии в биоаналитических целях. М., 2003.

23. Ушева Л. Н., М. А. Ващенко, Дуркша В.Б. Гистопатология пищеварительной железы двустворчатого моллюска Crenomytilus grayanus (Dunker, 1853) из юго-западной части залива Петра Великого Японского моря // БИОЛОГИЯ МОРЯ, 2006, том 32, № 3, с. 197-203

24. Ушева, Л. Н. Гистопатология аддуктора у гребешка Mizuhopecten yessoensis из загрязненных районов залива Петра Великого Японского моря // Биология моря. 1999. Т. 25, N 5. С. 383-388.

25. Филенко О.Ф. Биологические методы в контроле качества окружающей среды. //Экологические системы и приборы. 2007. № 6. С. 18-20.

26. Чикина М.В., Колючкина Г.А., КучерукН.В. «Аспекты биологии размножения Scapharca inaequivalvis (Bruguiere) (Bivalvia; Arcidae) в Черном море». Экология моря. 2003. Вып. 64. С. 72-77.

27. Эколого-токсикологические аспекты загрязнения морской среды. Проблемы химического загрязнения вод Мирового океана // Под ред. Патина С.А. -М. Госкомгидромет. 1985.177 С.

28. Якушев Е.В. Отчет по проекту ФЦП «Мировой океан», Тема 7. Комплексные исследования процессов, характеристик и ресурсов Черного и Азовского морей. 2006.

29. AbdAllah А.Т., Moustafa М.А. Accumulation of lead and cadmium in the marine prosobranch Nerita saxtilis, chemical analysis, light and electron microscopy Environmental Pollution 116 (2002) 185-191

30. Akcha, F., Izuel, C., Venier, P., Budzinski, H., Burgeot, Т., Narbonne, J.F. Enzymatic biomarker measurement and study of DNA adduct formation in benzoa.pyrenecontaminated mussels, Mytilus galloprovincialis. II Aquat. Toxicol. 2000. V.49. P.269-287.

31. Allam В., Paillard C., Auffret M. Alterations in hemolymph and extrapallial fluid parameters in the manila clam, Ruditapes philippinarum, challenged with the pathogen Vibrio tapetis II J. inv. path. 2000. V. 76. P. 63-69.

32. Al-Sabti K., Kurelec B. 1985.Induction of chromosomal aberrations in the mussel Mytilus galloprovincialis watch. // Bull. Environ. Contam. Toxicol V. 1 35. P. 660-665.

33. Anderlini, VC. The effect of seawage on trace metal concentrations and scope for growth in Mytilus edulis aoteanus and Perna canaliculus from Wellington • Harbour, New Zealand. // The Science of the Total Environment. 1992. V.125. P. 263-288

34. ANZECC, 1992. Australian water quality guidelines for fresh and marine waters. National water quality management strategy paper no. 4. Australian and New Zealand Environment and Conservation council, Canberra

35. Atkinson DE The energy charge of the adenylate pool as a regulatoryparameter. Interaction with feedback modifiers. // Biochemistry. 1968. V.7. P. 4030-4034.

36. Au D.W.T. The application of histo-cytopathological biomarkers in marine pollution monitoring: a review // Marine Pollution Bulletin. 2004.V. 48. P.817-834.

37. Auffret M. Histopathological changes related to chemical contamination in Mytilus edulis from field and experimental conditions // Mar. Ecol. Prog. Ser. 1988. V. 46. P. 101-107.

38. Azevedo C, Cachola R. Fine structure of the apicomplexa oocyst of Nematopsis sp. of two marine bivalve molluscs. Dis. Aquat. Org. 1992. V.14. P.69-73.

39. Bakan G., Buyugungur H. The Black Sea. // Mar. Poll. Bull. 2000. V. 41 (16). P. 24-43.

40. Barnes H, Stanburry FA. The toxic action of copper andmercury salts both separately and when mixed on the harpacticoidcopepod, Nitocra spinipes (Boeck). J. Exp. Biol. 1948. V.25. P.270-275.

41. Baudrimont M, S Andres, G Durriea, A Boudou The key role of metallothioneins in the bivalve Corbicula fluminea during the depuration phase, after in situ exposure to Cd and Zn // Aquatic Toxicology. 2003. V. 63. Is. 2. P. 89-102.

42. Baudrimont M., Andres S., Durrieu G., Boudou A. The key role of metallothioneins in the bivalve Corbicula fluminea during the depuration phase, after in situ exposure to Cd and Zn // Aquatic Toxicology. 2003. V.63. Is. 2. P.89-102.

43. Bayne B.L. Cellular and physiological measures of pollution effects. // Mar. Pollut. Bull. 1985. V. 16(4). P. 127-129.

44. Beaven A.E., Paynter K.T. Acidification of the phagosome in Crassostrea virginica hemocytes following engulfment of zymosan.// Biol. Bull. V.196(l) P. 26-33.

45. Beutler E., Mathai C.K. A Comparison of Normal Red Cell ATP Levels as Measured by the Firefly System and the Hexokinase System // Blood. 1967. V. 30. P. 311-320.

46. Bigas, M., Amiard-Triquet, C., Dufort, M., Poquet, M. Sublethal effects of experimental exposure to mercuiy in European789 flat oyster Ostrea edulis. Cell alterations and quantitative analysis790 of metal. // Biometals. 1997. V. r 10 (4). P. 277-284.

47. Bilos, C., Colombo, J.C., Presa, M.J.R. Trace metals in suspended particles, sediments and asiatic clams (Corbicula flumniea) of the Rio de la Plata Estuary, Argentina. //Environ.Pollut. 1998. V.99. P. 1-11.

48. Bolognesi, C., Landini, E., Roggieri, P., Fabbri, R., Viarengo, A. Genotoxicity biomarkers in the assessment of heavy metal effects in mussels: experimental studies. // Environ.Mol. Mutagen. 1999. V. 33. P. 287-292.

49. Borchardt, T. Influence of food quantity on the kinetics of cadmium uptake and loss via food and seawater in Mytilus edidis. II Mar. Biol. 1983. V.7 (6). P. 67-76.

50. Bordin G, McCourt J., Cordeiro Raposo F. and Rodriguez A. R. Metallothionein-like metalloproteins in the Baltic clam Macoma balthica:seasonal variations and induction upon metal exposure // Marine Biology 1997. V. 129. N 3. P. 453-463.

51. Bordin, G., McCourt, J., Cordeiro Raposo, F., and Rodriguez, A. R. Metallothionein-like metallothioneins in the Baltic clam Macoma balthica: Seasonal variations and induction upon metal exposure. // Mar. Biol. 1997. V.129. P. 453-463.

52. Bouchard J.F., Pelletier E. and Fournier M. Effects of butyltin compounds on hemocytes phagocytosis activity of three marine bivalves // Environmental Toxicology and Chemistry . 1999.V.18(3). P.519-522

53. Bower, S.M. Synopsis of Infectious Diseases and Parasites of Commercially Exploited Shellfish: Rickettsia-like and Chlamydia-like Organisms of Mussels. 2004.

54. Bower, S.M. Synopsis of Infectious Diseases and Parasites of Commercially Exploited Shellfish: Rickettsia-like and Chlamydia-like Organisms of Clams and Cockles. 2004.

55. Bower, S.M. Synopsis of Infectious Diseases and Parasites of Commercially Exploited Shellfish: Kidney Coccidia of Clams. 2004.

56. Boyle, E. A. Copper in natural waters. // J. O. Nriagu, editor. Copper in the environment. Part 1: ecological cycling. John Wiley, New York. 1979. P. 7788

57. Brown, C.L., Luoma, S.N., Parchaso, F., Thompson, J.K. Lessons learned about metals in the Estuary: the importance of long-term clam accumulation data. In: The Pulse of the Estuary. San Francisco Estuary Institute, Oakland, CA. 2004. P. 38-45.

58. Bunger, R. and Soboll, S. Cytosolic adenylates and adenosine release in perfused working heart. Comparison of whole tissue with cytosolic nonaqueous fractionation analyses. // Eur J Biochem. 1986 Aug 15; V. 159(1):203-13.

59. Burgeot, T., His, E., Galgani, F. The micronucleus assay in Crassostrea gigas for the detection of seawater genotoxicity. // Mutat. Res. 1995. V.342. P.125-140.

60. Carballal M.J., Villalba A., Lopez C. Seasonal variation and effects of age, food availability, size, gonadal development, and parasitism on the hemogram of Mytilus galloprovincialis II J. of Invertebrate Pathology. 1998. V. 72. № 3. P. 304-312.72