Антипролиферативная активность низкомолекулярных каппа и лямбда каррагинанов на моделях клеточных линий опухолей желудочно-кишечного тракта тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Тясто Владлена Александровна

• Тясто Владлена Александровна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Тясто Владлена Александровна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Противоопухолевый потенциал каррагинанов (обзор литературы)

1.1. Каррагинаны как перспективные соединения для лечения и профилактики карцином

1.2. Противоопухолевые эффекты каррагинанов in vivo и in vitro

1.3. Клеточные и системные механизмы противоопухолевой активности каррагинанов

1.3.1. Влияние каррагинанов на апоптоз

1.3.2. Иммунные механизмы противоопухолевого действия каррагинанов

1.3.3. Антиоксидантные эффекты каррагинана

1.3.4. Антиангиогенные механизмы действия каррагинана

1.3.5. Wnt-каскад в антипролиферативном действии каррагинанов

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Материалы исследования

2.1.1. Выделение и фракционирование каррагинанов

2.1.2. Получение низкомолекулярных производных каппа- и лямбда-каррагинанов

2.1.3. Состав растворов

2.1.4. Опухолевые клеточные линии

2.2. Методы

2.2.1. Культивирование клеток

2.2.2. Физико-химический анализ каррагинанов и их производных

2.2.3. Оценка метаболизма МТТ-тестом

2.2.4. Оценка жизнеспособности клеток

2.2.5. Определение полуингибирующих концентраций каррагинанов

2.2.6. Анализ фаз клеточного цикла

2.2.7. Оценка индукции апоптоза

2.2.8. Лизирование клеток

2.2.9. Электрофорез в полиакриламидном геле

2.2.10. Вестерн-блоттинг

2.2.11. Гибридизация с антителами

2.2.12. Атомно-силовая микроскопия

2.2.13. Тест на хромосомную нестабильность

2.2.14. Анализ Wnt-зависимой транскрипционной активности на основе люциферазы

2.2.15. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. Структура модифицированных каррагинанов красной водоросли Chondrus armatus

3.1. Инфракрасные спектры каппа- и лямбда-олигокаррагинанов

3.2. ЯМР спектры каппа- и лямбда-каррагинанов

3.3. Молекулярная масса каппа- и лямбда-олигокаррагинанов

ГЛАВА 4. Противоопухолевая активность каппа- и лямбда-каррагинанов, выделенных из красной водоросли Chondrus armatus

4.1. Антиметаболическая активность олигокаррагинанов

4.2. Влияние олигокаррагинанов на жизнеспособность раковых клеток

4.3. Влияние каррагинанов на пролифирацию и жизнеспособность иммортализированных клеток пигментного эпителия глаза

4.4. Определение полуингибирующих концентраций низкомолекулярных каррагинанов

ГЛАВА 5. Механизмы противоопухолевого действия олигокаррагинанов

5.1. Влияние каппа- и лямбда-олигокаррагинанов на клеточный цикл опухолевых клеток

5.2. Влияние олигокаррагинанов на апоптоз клеточных линий

5.3. Влияние олигокаррагинанов на экспрессию белков клеточного цикла

5.4. Влияние олигокаррагинанов на хромосомную нестабильность

5.5. Влияние каррагинанов на Wnt-каскад

5.6. Влияние олигокаррагинанов на морфологию, адгезию и жесткость опухолевых клеток in vitro

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Антипролиферативная активность низкомолекулярных каппа и лямбда каррагинанов на моделях клеточных линий опухолей желудочно-кишечного тракта»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность и степень ее разработанности темы исследования

Поиск новых высокоэффективных соединений с противоопухолевой активностью и создание на их основе лекарственных препаратов представляют актуальную задачу современной фармакологии и онкологии. Важными являются исследования, направленные на повышение эффективности действия противоопухолевых препаратов и оказывающих минимальное токсическое воздействие на организм (Wurth et al., 2016; Huang et al., 2022; Khoo et al., 2016). Считается, что природные соединения в большинстве случаев могут сочетать в себе высокую антипролиферативную активность по отношению к злокачественным клеткам и низкую токсичность для нормальных нераковых клеток (Majolo et al., 2019).

Благодаря особым экологическим условиям среды морские организмы приобрели способность синтезировать вторичные метаболиты с уникальной химической структурой, обладающие многообещающей биологической активностью, и некоторые из них могут быть использованы для профилактики и лечения заболеваний человека (Stonik, 2014; Khalifa et al., 2019; Mayer et al., 2020) в качестве лекарственных препаратов и биоактивных пищевых добавок (Dyshlovoy, 2021). На сегодняшний день, одиннадцать препаратов, разрешенных для клинического применения, были созданы из натуральных молекул морского происхождения и предназначены для лечения различных видов рака человека, и около двух десятков «морских» молекул находятся на разных стадиях клинических испытаний (Dyshlovoy, 2020; Mayer et al., 2020).

Большинство морских соединений с установленной антипролиферативной активностью были выделены из морских растений, микро- и макроводорослей (Malaker, 2013; Encarnaçâo et al., 2015), морских бактерий и актиномицетов (Olano et al., 2009; Sagar et al., 2013), морских грибов, губок (Du et al., 2010; Suja et al., 2014; Zovko et al., 2016) и мягких кораллов (Gross et al., 2003; Chao et al., 2008). Высокую противораковую активность продемонстрировали полифенолы (Zhao et al., 2007; Lopes-Costa et al., 2017), алкалоиды (Du et al., 2010; Lyakhova et al., 2020), протеины (Yu et al., 2008; Costa et al., 2012) и полисахариды (Хотимченко, 2010а, б; Magalhaes et al., 2011).

Известно, что более высокое потребление биологические активных веществ морского происхождения связано с более низким риском развития различных видов рака, особенно колоректального рака и рака желудка (Galasso et al., 2019; Hull et al., 2019; Nicolini et al., 2016). Большинство морских соединений с установленной антипролиферативной активностью были выделены из морских растений, микро-и макроводорослей (Malaker, 2013; Liu et al., 2019). Мы обратили наше внимание на морские водоросли, которые являются неисчерпаемым источником биоактивных соединений, среди которых выделяются комплексы полимерных макромолекул с превосходными биологическими свойствами, включая антиоксидантную, антикоагулянтную, противовирусную и иммуномодулирующую активности (Tang et al., 2013; Cosenza et al., 2015; dos Santos-Fidencio et al., 2019; Pangestuti et al., 2014). Среди этих веществ выделяются сульфатированные полисахариды, которые наряду с указанными активностями, обладают противоопухолевыми и антиметастатическими свойствами.

Анализ литературы, посвященный антипролиферативной активности каррагинанов, полисахаридов красных морских водорослей (Khotimchenko et al., 2020), показал основные тренды онкофармакологии каррагинанов, связанные с изучением связи структуры и физико-химических свойств каррагинанов с их противоопухолевым действием, и другие аспекты фармакологии, позволяющие рассматривать каррагинаны в качестве потенциальных противоопухолевых средств. Следует отметить небольшой набор клеточных линий, на которых были испытаны эти полисахариды, мало сведений о внутриклеточных механизмах их антипролиферативных эффектов. Учитывая тот факт, что сульфатированные полисахариды красных водорослей не подвергаются микробной и ферментативной деградации в желудочно-кишечном тракте и не поступают в системный кровоток (Weiner, 2014; Weiner et al., 2015), мы выбрали для первичных исследований опухолевые линии карцином пищевода и толстой кишки, которые ранее как мишени противоопухолевого действия каррагинанов не изучались.

Цель исследования: разработка комплексной модели антипролиферативной активности высокомолекулярных и низкомолекулярных каппа- и лямбда-каррагинанов на опухолевых клеточных линиях желудочно-кишечного тракта человека как основы для дальнейшего создания новых фармацевтических субстанций.

Задачи исследования:

1. Разработать технологию получения низкомолекулярных каррагинанов с использованием ультразвуковой деполимеризации и установить физико-химические параметры полученных образцов олигкаррагинанов для их стандартизации.

2. Изучить влияние высокомолекулярных и низкомолекулярных каппа- и лямбда-каррагинанов на жизнеспособность и метаболическую активность клеточных линий карцином пищевода KYSE-30 и FLO-1, колоректальной карциномы HCT-116 и карцином толстого кишечника человека RKO.

3. Исследовать действие каппа- и лямбда-олигокаррагинанов на апоптоз и клеточный цикл линий KYSE-30, FLO-1, RKO и HCT-116.

4. Определить экспрессию белков клеточного цикла циклина Е, циклин-зависимой киназы-2 и фактора транскрипции E2F2 при воздействии олигокаррагинанов на клетки аденокарциномы RKO и клетки пигментированного эпителия глаза человека RPE-1.

5. Исследовать предполагаемые механизмы антипролиферативного действия олигокаррагинанов на Wnt-ингибирующую активность, хромосомную нестабильность и адгезивные свойства опухолевых клеток.

Научная новизна

Впервые изучено влияние каппа- и лямбда-олигокаррагинанов, полученных ультразвуковой деполимеризацией нативных каррагинанов, выделенных из дальневосточной красной морской водоросли Сквп&ш агшШш, на метаболическую активность и жизнеспособность клеток карцином пищевода KYSE-30 и FLO-1, колоректальной карциномы НСТ-116 и карциномы толстой кишки ЯКО. Проведена количественная оценка молекулярно-массового распределения и определены показатели средневесовой и среднечисловой молекулярной массы модифицированных образцов каррагинанов. Исследован ряд механизмов противоопухолевой активности низкомолекулярных каррагинанов, индукция апоптоза, влияние на экспрессию регуляторных белков клеточного цикла и Винт-сигнальный путь. Теоретическая и практическая значимость

Результаты работы могут быть использованы для разработки технологий выделения, очистки и деполимеризации природных каррагинанов. Описанные физико-

химические свойства модифицированных каррагинанов будут использованы для стандартизации тестируемых соединений полисахаридных веществ. При участии автора разработана тест-система для определения уровня хромосомной нестабильности как инструмент для скрининга новых биоактивных соединений на противоопухолевую активность (Патент РФ N° RU 2744383 C1 от 09.03.21, Гончаров Н.В., Ковальская В.А., Тясто В.А., и др.). Наиболее активный образец лямбда-каррагинана может быть рекомендован для дальнейших исследований как потенциальный противоопухолевый препарат. Результаты работы могут использоваться в образовательном процессе на занятиях по фармакологии, фармацевтической технологии, фармакогнозии и фармацевтической химии. Теоретическое значение работы состоит в получении новых данных о зависимости противоопухолевых эффектов каррагинанов от типа, структуры и молекулярной массы сульфатированных полисахаридов.

Методология и методы исследования

Для достижения поставленной цели и решения сформулированных задач были использованы методы экспериментальной фармакологии и культивирования злокачественных клеток четырех линий in vitro, мониторинга функционального состояния клеток в анализаторе Cell-IQ с соблюдением правил поддержания жизнеспособности клеток в искусственных условиях. Оценку фармакологических эффектов проводили путем построения кривых «доза-эффект». Для сравнения эффективности разных образцов полисахаридов и чувствительности раковых клеток к олигокаррагинанам определяли полумаксимальные ингибирующие концентрации тестируемых соединений. Структуру и молекулярные массы модифицированных полисахаридов изучали методами инфракрасной спектроскопии и высокоэффективной жидкостной хроматографии. Действие модифицированных соединений на раковые клетки исследовали методами молекулярной и клеточной биологии, колориметрии и проточной цитофлуориметрии. Для определения регуляторных белков клеточного цикла использовали Вестерн-блоттинг.

Основные положения, выносимые на защиту: 1. Низкомолекулярные каррагинаны каппа- и лямбда-типов, в отличие от нативных каррагинанов, оказывают прямое антипролиферативное действие на злокачественные клетки опухолей пищевода и толстой кишки. Противоопухолевое

действие высокомолекулярных каррагинанов обусловлено преимущественно системными механизмами.

2. Механизм антипролиферативного действия олигокаррагинанов в отношении раковых клеток пищевода и кишечника связан с подавлением клеточного цикла путем ингибирования экспрессии регуляторных белков клеточного цикла, подавления Wnt-сигнального каскада и индукции апоптоза.

Степень достоверности и апробация результатов

Достоверность полученных в ходе экспериментальных исследований результаты обеспечена применением регламентированных методик статистической обработки данных и воспроизводимостью экспериментов. Результаты исследований иллюстрировали в виде рисунков, диаграмм и таблиц. Данные, представленные в диссертации, соответствуют протоколам исследований. Степень достоверности результатов обоснована достаточным объемом наблюдений, использованием методов статистической обработки программным пакетом «GraphPad Prism 8.0» (GraphPad Software Inc, США), проведением непараметрического дисперсионного «ANOVA Краскела-Уоллиса» анализа, проверкой нормальности распределения значений признака с вычислением критерия Шапиро-Уилка.

Результаты работы были представлены на Международной конференции «Future of Biomedicine» (17-22 сентября, Владивосток 2019), IV Дальневосточном медицинском молодежном форуме с международным участием (2-17 октября, Хабаровск 2020), II Дальневосточном международном медицинском конгрессе (1-15 октября, Хабаровск 2021), Дальневосточной конференции молодых ученых «Медицина будущего» (24-27 мая, Владивосток 2022).

Материалы диссертации были доложены на заседании научного семинара Института наук о жизни и биомедицины ДВФУ. По результатам обсуждения диссертация была рекомендована к защите по специальности «фармакология, клиническая фармакология».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 12 работ, из них 5 статей в рецензируемых научных журналах, входящих в список ВАК РФ, в том числе 4 статьи - в журналах, индексируемых международными системами цитирования Scopus и Web of Science, и 7 работ опубликованы в материалах научных конференций.

Финансовая поддержка

Работа выполнялась при поддержке гранта РФФИ «аспиранты» № 20-315-90005. Часть работ выполнялась при финансовой поддержке гранта Министерства науки и высшего образования 13.1902.21.0012 «Фундаментальные проблемы изучения и сохранения глубоководных экосистем потенциально рудоносных районов СевероЗападной Пацифики» (контракт № 075-15-2020-796).

Структура и объем работы

Диссертационная работа состоит из введения, основных глав: Обзор литературы, Материалы и методы, Результаты, Заключение, а также выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 123 страницах, содержит 24 рисунка и 8 таблиц. Список литературы содержит 247 источников на английском и русском языке.

Глава 1. Противоопухолевый потенциал каррагинанов (обзор литературы)

1.1. Каррагинаны как перспективные соединения для лечения

и профилактики карцином

Современная терапия злокачественных заболеваний широко использует противоопухолевые препараты, полученные из природных соединений, такие как доксорубицин, блеомицин, дауномицин, винкристин, паклитаксел, винбластин и другие. Они применяются для лечения ряда солидных опухолей и гематологических злокачественных новообразований (Jimeno et al., 2004). В последние годы повились новые эффективные средства природного происхождения, например, цетуксимаб (Sithranga et al., 2011), панитумумаб (Tebbutt et al., 2016), трастузумаб (Niu et al., 2014) и бевацизумаб, а также трастузумаб, который был одобрен для терапии рака пищевода и кишечника (Ilson et al., 2011).

Несмотря на большие усилия по созданию целевых методов лечения карцином пищевода и кишечника, пока не удалось достичь прорывных результатов в повышении эффективности лечения и общих показателей выживаемости пациентов (Märmol et al., 2017; Akutsu et al., 2015; Davidson et al., 2016; Robertson, 2012). Это свидетельствует о необходимости поиска новых веществ с более сложными механизмами действия, способных блокировать одновременно несколько молекулярных путей и воздействующих только на раковые клетки и не проявляющих цитотоксичности в отношении нормальных клеток. Перспективным источником таких средств могут стать природные соединения, обладающие ценными биологическими свойствами, управляющие многочисленными биохимическими реакциями и отличающиеся низкой токсичностью (Tiasto et al., 2018).

Известно, что многие уникальные химические соединения морского происхождения проявляют выраженное противоопухолевое действие. Часть из них уже одобрены как противоопухолевые препараты, другая часть соединений находятся на различных стадиях в доклинических исследованиях и клинических испытаниях (Kijjoa et al., 2004). Различные группы биоактивных молекул с противоопухолевой активностью были выделены из морских водорослей. Показано, что соединения из морских источников обнаруживают антипролиферативную активность

на опухолевых клеточных линиях человека in vitro, а также ингибируют рост опухолей у животных in vivo (Lins et al., 2009).

Морские водоросли оказались богатым источником природных молекул, обладающих многообразной биологической активностью, в том числе способностью оказывать профилактическое действие в отношении различных форм рака (Khotimchenko et al., 2020). Последние данные литературы показывают, что более 30 соединений морского происхождения способны проявлять противораковую активность (Dyshlovoy, 2020). Значительное количество молекул, для которых ранее были описаны противораковые свойства, в последние годы были дополнительно исследованы. Основной приоритет исследований был смещен на соединения, обнаруженные в пищевых источниках (Yermak et al., 2021).

Некоторые виды морских водорослей считаются не только пищей, но и часто используются для лечения желудочных расстройств. Морские красные водоросли являются источником биологически активных сульфатированных полисахаридов -каррагинанов, обладающих противораковой активностью in vitro и in vivo в отношении некоторых видов опухолей (Khotimchenko et al., 2020; Calvo et al., 2019). Благодаря особым характеристикам каррагинана, таким как сильный отрицательный заряд и гелеобразование, он используется в качестве гелеобразующего агента, повышающего вязкость, для контролируемого высвобождения лекарственного средства и длительного удерживания. Каррагинаны также использовались для регенерации тканей с помощью терапевтических биомакромолекул и для доставки клеток (Li et al., 2014). Наличие структурных вариаций среди различных типов каррагинанов помогает регулировать их температуру и поведение перехода золь-гель в зависимости от ионов. Микроразмерные системы доставки лекарств на основе каррагинана (микросферы, микрочастицы) можно использовать для легкого и контролируемого введения лекарств. Кроме того, каррагинаны могут быть изготовлены в виде 3D-печатных гидрогелей и аэрогелей для контролируемой доставки лекарств (Qureshi et al., 2019).

Каррагинаны - сульфатированные полисахариды морских красных водорослей, которые являются источником биологически активных веществ. В основе химической структуры каррагинанов находится повторяющееся дисахаридное звено, состоящее из остатков D-галактозы, соединенных регулярно чередующимися Р-(1-4) и а-(1-3) гликозидными связями (Yermak., 2003). Каррагинан является собирательным

термином для группы сульфатированных полисахаридов красных водорослей, в которых они являются основными компонентами клеточных стенок. Сам термин "carraigm" происходит от разговорного ирландского названия для морской водоросли Chondrus crispus, что в переводе означает "маленькая скала".

Природные каррагинаны представляют собой смесь сульфатированных линейных галактанов, структурная единица которых каррабиоза является дисахаридом а-(1-4)-связанного остатка D-галактопиранозы или 3,6-ангидрогалактопиранозы и Р-(1-3)-связанного остатка D-галактопиранозы. Сульфатные группы каррагинанов ковалентно связаны через эфирные связи с углеродными атомами C-2, C-4 или C-6 галактозы. Количество сульфатных групп в сульфатированных полисахаридах может варьировать в диапазоне от 0 до 41%, что приводит к резко отрицательному заряду полимера. На галактаны приходится до 40-50% сухой массы красных водорослей (Yermak, 2003; Campo et al., 2009).

Среди 4000 видов красных водорослей Мирового океана каррагинанофиты обнаружены в семействах Solieriaceae, Rhabdoniaceae, Phyllophoraceae, Gigartinaceae, Rhodophilidaceae и Thichocarpaceae. В Японском море найдены восемь источников каррагинанов, шесть из которых (Chondrus pinnulatus, C. armatus, C. yendoi, Gigartina ochotensis, G. unalaskensis, Rhodoglossum hemisphaericum) являются представителями двух семейств, Gigartinaceae и Solieriaceae. Наряду с Gigartinaceae, высокое содержание каррагинанов обнаружено в водорослях, принадлежащих к семействам Phillophoraceae и Thichocarpaceae, представители которых широко распространены во всех дальневосточных морях (Yermak et al., 1999).

В соответствии со структурными особенностями повторяющегося дисахаридного звена выделяют шесть основных типов каррагинанов, обозначаемых буквами греческого алфавита: каппа (к-), лямбда (Х-), йота (i-), ню (v-), мю (ц-) и тета (0-) (Рисунок 1), из которых коммерческое значение имеют к-, Х- и i-каррагинаны. Всего установлено 20 идеализированных типов, различающихся присутствием 1,4-связанных остатков в форме 3,6-ангидрогалактозы, местоположением и количеством сульфатных групп в дисахаридном звене (Рисунок 1).

Рисунок 1 - Химическая структура разных типов каррагинана.

Химическая структура каррагинанов определяется ступенчатым процессом биосинтеза, который зависит от условий произрастания, физиологии и возраста водоросли, ее видовой принадлежностью и стадии развития. Водоросли одного вида на разных стадиях жизненного цикла могут продуцировать разные типы каррагинанов (Falshaw, 1994; Neill et al., 2018). Качественные и количественные характеристики полисахаридов также зависят от факторов среды обитания водорослей и условий их сбора (Azevedo et al., 2015). Некоторые каррагинаны, помимо сульфатных групп, могут содержать и другие заместители. Небольшое количество 6-О-метил^-галактозы было обнаружено в каппа-каррагинане, выделенного из Kappaphycus alvarezii (Goes, Reis, 2012). Во многих каррагинанах присутствует ксилоза, но ее местоположение часто остается неопределенным (Liao et al., 1996).

Взаимосвязь между химической структурой и физическими свойствами сульфатированных галактанов сложна ввиду полидисперсности полисахаридов и их способности к самоассоциации (Kravchenko et al., 2020). Подобно другим полисахаридам для каррагинанов характерно молекулярно-массовое распределение. Большинство имеет молекулярную массу от 500 до 1000 кДа (Lascombes et al., 2017). Коммерческие образцы каррагинанов пищевого назначения имеют среднемолекулярную массу в пределах от 200 до 400 кДа (Prajapati et al., 2014), иногда до 800 кДа (Pereira et al., 2009; Torres et al., 2019).

Каррагинаны условно делят на желирующие (к-, 0- и i- каррагинаны), способные образовывать гели и нежелирующие (v-, ц- и Х-каррагинаны) (Stortz, Cerezo, 1992). Способность каррагинанов к гелеобразованию определяется структурой основного дисахаридного звена, а именно присутствием 4-связанного остатка D-галактозы в виде 3,6-ангидропроизводного, количеством сульфатных групп на одно звено каррабиозы и их местоположением в молекуле. Большая часть желирующих каррагинанов содержат 3,6-ангидрогалактозу, наличие которой в структуре основного дисахарида является главным условием гелеобразования. Желирующие свойства полисахаридов тем выше, чем больше в них содержание 3,6-ангидрогалактозы, остатки которой придают полимерной цепи жесткость, обеспечивают спиральную конформацию и определенное расположение сульфатных групп в присутствии специфических катионов (Robal et al., 2017; Torres et al., 2017). Сульфатные группы 1,4-связанного остатка a-D-галактозы (6-сульфат или 2,6-дисульфат) вызывают перекручивание цепи, что препятствует образованию геля.

При удалении сульфатов цепь выпрямляется и происходит формирование геля. Добавление специфических катионов приводит к стабилизации геля и образованию единой трехмерной сетки (Lahaye et al., 2001). Нежелирующие каррагинаны содержат большое количество сульфатных групп и не содержат 3,6-ангидрогалактозу. В большинстве случаев каррагинаны образуют растворы с вязкостью 25-500 Мра, чаще всего 25-100 Мра, хотя вязкость растворов нативного лямбда-каррагинана может достигать 20000 Мра (Lascombes et al., 2017).

Каррагинаны разделяют на высокомолекулярные, или «недеградированные», и низкомолекулярные, или «деградированные» каррагинаны со средней молекулярной массой 10-20 кДа. Деградированные каррагинаны могут быть получены

окислительной деградацией (Chen et al., 2010), облучением (Relleve et al., 2005), ферментативным гидролизом (Wu, 2012) и мягким кислотным гидролизом (Yang et al., 2009). Биологические свойства каррагинанов и их фармакологическая активность зависит как от их первичной структуры (структуры основного дисахаридного звена), количества и местоположения сульфатных групп и степени полимеризации молекулы, так и от конформации макромолекул в растворе и их макромолекулярной организации. Связь структуры и физико-химических свойств каррагинанов с противоопухолевой активностью рассмотрена в следующих разделах.

1.2. Противоопухолевые эффекты каррагинанов in vivo и in vitro

Аналитический обзор экспериментальных работ, посвященных противораковому действию каррагинанов, предусматривает рассмотрение антипролиферативной, противоопухолевой и антиметастатической активности, а также источников, из которых были выделены полисахариды, тип каррагинана, молекулярную массу, степень сульфатирования и условия эксперимента.

Высокомолекулярные каппа- и лямбда-каррагинаны (Sigma-Aldrich) были протестированы in vitro на клетках рака шейки матки HeLa и эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC) в концентрациях 250, 500, 1000 и 2500 мкг/мл. Оба каррагинана не влияли на жизнеспособность клеток HUVEC, но дозо-зависимым образом подавляли рост клеток HeLa со значениями IC50 550.8±7.6 мкг/мл для каппа-каррагинана и 475±12 мкг/мл для лямбда-каррагинана за период 72 ч. Анализ профилей клеточного цикла показал, что каппа- каррагинан вызывал задержку роста клеток HeLa в фазе G2/M, в то время как лямбда-каррагинан таким эффектом не обладал. Покадровая съемка клеток HeLa с интервалом в 10 мин за 72 ч показала, что контрольные опухолевые клетки проходили клеточный цикл за 26.0±0.6 ч, а тем же клеткам в среде с лямбда-каррагинаном (1000 мкг/мл) для завершения клеточного цикла требовалось в среднем 59±4.6 ч в результате удлинения и фазы G1 и фазы G2/M, что приводило к задержке клеточного цикла в целом. Продолжительность клеточного цикла в среде с каппа-каррагинаном составила 50.2±2.9 ч за счет удлинения фазы G2/M. Клетки, обработанные каппа-каррагинаном, были в состоянии делиться по крайней мере один раз, прежде чем наступала их гибель, в то время как большинство клеток, обработанных лямбда-каррагинаном, были неспособны пройти клеточное деление (Prasedya et al., 2016). Создается впечатление, что лямбда-каррагинан потенциально

обладает более сильным ингибирующим действием на опухолевые клетки HeLa по сравнению с каппа-каррагинаном. Различия в эффектах двух каррагинанов, возможно, обусловлены различием в степени сульфатирования, которая выше в лямбда-каррагинане.

Цитотоксические эффекты химических соединений могут быть классифицированы на основе показателей полуингибирующих концентраций (IC50). Значения IC50 менее 100 мкг/мл указывают на потенциально цитотоксические соединения. Вещества со значениями IC50 в диапазоне 100-1000 мкг/мл рассматриваются как умеренно цитотоксические, а соединения со значениями IC50, превышающими 1000 мкг/мл, считаются нетоксичными для клеток (Jurisic et al., 2008; Ariffin et al., 2014). В этом отношении оба каррагинана (каппа и лямбда) оказывали умеренное токсическое воздействие на клетки HeLa. Следует также отметить, что более высокая степень сульфатирования приводит к более сильному антиоксидантному действию. Высокая антиоксидантная активность потенциально может привести к антипролиферативным эффектам (Riou et al., 1996).

Сравнительные исследования in vitro антипролиферативной активности нативного каппа-каррагинана, выделенного из морской водоросли Kappaphycus striatum, со средней молекулярной массой 37.7 кДа и каппа-олигокаррагинана со средней молекулярной массой 1.2 кДа, приготовленного путем мягкого солянокислого гидролиза природного каппа-каррагинана, на клеточных линиях карциномы носоглотки человека KB, карциномы желудка человека BGC и рака шейки матки HeLa показали, что при всех исследуемых концентрациях (125, 250 и 500 мкг/мл) степень ингибирования при воздействии каппа-олигокаррагинана превышала таковую высокомолекулярного каппа-каррагинана в 2.7-6.3 раза (Yuan, Song, 2005).

Влияние нативных и деградированных каррагинанов на рост клеток эпителиальной колоректальной аденокарциномы человека линии Caco-2 и гепатоцеллюлярной карциномы человека HepG2 исследовали in vitro в концентрациях от 62.5 до 2000 мкг/мл. Исследовались каррагинаны, экстрагированные из Kappaphycus alvarezii, и коммерческие каррагинаны (Sigma). Деградированные коммерческие и пищевые каппа-каррагинаны достоверно снижали жизнеспособность клеток Caco-2 через 24, 48 и 72 ч инкубации в отличие от недеградированного пищевого йота-каррагинана, цитотоксический эффект

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Тясто Владлена Александровна, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Жминченко, В. М. Влияние каррагинана на биологическую ценность и усвояемость белка / В. М. Жминченко, И. С. Зилова, В. А. Пашорина // Вопросы питания. - 2009. -Т. 78. - №. 3. - С. 33-38.

2. Жуков, Н. В. Целевая терапия в лечении солидных опухолей: практика противоречит теории (обзор) / Н. В. Жуков, С. А. Тюляндин // Биохимия. - 2008. - Т. 73. - №. 5. -С. 751-770.

3. Иммуномодулирующая активность каррагинанов из красных водорослей дальневосточных морей / И. М. Ермак, В. Н. Давыдова, Д. Л. Аминин [и др.] // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - №. 3 (37). - С. 40-45.

4. Каррагинаны: польза или вред? / А. С. Ткаченко, О. А. Наконечная, Т. В. Горбач [и др.] // Вестник Витебского государственного медицинского университета. - 2018. - Т. 17. -№. 1. - С. 7-13.

5. Структура и свойства к-каррагинана красных водорослей Eucheuma gelatina / Т. Г. Шутова, В. И. Куликовская, Х. Х. Фам [и др.] // Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия химических наук. - 2011. - № 4. - С. 47-52.

6. Татарский, В. В. Сигнальный путь Wnt: перспективы фармакологического регулирования / В. В. Татарский // Успехи молекулярной онкологии. - 2016. - Т. 3. -№. 1. - С. 28-31.

7. Ткаченко, А. С. Влияние пищевой добавки е407а на интенсивность апоптоза гранулоцитов в эксперименте in vitro / А. С. Ткаченко // Вестник Витебского государственного медицинского университета. - 2020. - Т. 19. - №. 2. - С. 28-34.

8. Тясто, В. А. Влияние к- и Х-каррагинанов из chondrus armatus на пролиферацию опухолевых клеток кишечника RKO и HCT-116 / В. А. Тясто // Молекулярная медицина. -2022. - Т. 20. - №. 1. - С. 46-52.

9. Фармакология некрахмальных полисахаридов / Ю.С. Хотимченко, И. М. Ермак, А. Е. Бедняк [и др.] // Вестник Дальневосточного отделения Российской академии наук. -2005. - №. 1. - С. 72-82.

10. Физико-химические характеристики каррагинанов из дальневосточной водоросли Chondrus armatus (Harv.) Okam. и их смесей с молочными белками / И. М. Ермак,

B. П. Дедюхина, Н. В. Ситун [и др.] // Растительные ресурсы. - 2002. - Т. 38. - №. 3. -

C. 98-106.

11. Хотимченко Ю. С. Противоопухолевые свойства некрахмальных полисахаридов: каррагинаны, альгинаты, пектины / Ю. С. Хотимченко // Биология моря. - 20106. - Т. 36. -№. 6. - С. 399-409.

12. Хотимченко, М. Ю. Оценка возможности применения каррагинана для адресной доставки противоопухолевых лекарственных средств / М. Ю. Хотимченко, О. А. Шокур, Н. Е. Ламаш // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2010. - №. 2 (40). - С. 59-62.

13. Хотимченко, Ю. С. Противоопухолевые свойства некрахмальных полисахаридов: каррагинаны, альгинаты, пектины / Ю. С. Хотимченко // Биология моря. - 2010а. - Т. 36. -№. 6. - С. 319-328.

14. 1H and 13C high resolution NMR spectroscopy of carrageenans: application in research and industry / F. van de Velde, S. H. Knutsen, A. I. Usov [et al.] // Trends Food Sci Technol. -2002. - V.13. - P. 73-92. doi:10.1016/S0924-2244(02)00066-3.

15. 3-Bromofascaplysin is a prospective chemical compound for developing new chemotherapy agents in glioblastoma treatment / I. Lyakhova, M. Piatkova, Y. Khotimchenko [et al.] // International Review of Neurobiology. - Academic Press, 2020. -V. 151. - P. 325-343.

16. A 90-day dietary study on kappa carrageenan with emphasis on the gastrointestinal tract / M. L. Weiner, D. Nuber, W. R. Blakemore [et al.] // Food and chemical toxicology. - 2007. -V. 45. - №. 1. - P. 98-106.

17. A comparative analysis of phycocolloids produced by underutilized versus industrially utilized carrageenophytes (Gigartinales, Rhodophyta) / L. Pereira, A. T. Critchley, A. M. Amado [et al.] // Journal of Applied Phycology. - 2009. - V. 21. - №. 5. - P. 599-605.

18. A phase 2 trial of erlotinib in patients with previously treated squamous cell and adenocarcinoma of the esophagus / D. H. Ilson, D. Kelsen, M. Shah [et al.] // Cancer. -2011. - V. 117. - №. 7. - P. 1409-1414.

19. A pilot study on anti-obesity mechanisms of Kappaphycus alvarezii: The role of native к-carrageenan and the leftover sans-carrageenan fraction / Y. X. Chin, Y. E. Mi, W. X. Cao [et al.] // Nutrients. - 2019. - V. 11. - №. 5. - P. 1133.

20. A randomized trial of the effects of the no-carrageenan diet on ulcerative colitis disease activity / S. Bhattacharyya, T. Shumard, H. Xie [et al.] // Nutrition and Healthy Aging. - 2017. -V. 4. - №. 2. - P. 181-192.

21. A review of the role of Wnt in cancer immunomodulation / W. N. Goldsberry, A. Londono, T. D. Randall [et al.] // Cancers. - 2019. - V. 11. - №. 6. - P. 771.

22. A second WNT for old drugs: drug repositioning against WNT-dependent cancers / K. Ahmed, H. V. Shaw, A. Koval [et al.] // Cancers. - 2016. - V. 8. - №. 7. - P. 66.

23. A specific expression profile of LC3B and p62 is associated with nonresponse to neoadjuvant chemotherapy in esophageal adenocarcinomas / O. Adams, F. A. Janser, B. Dislich [et al.] // PloS one. - 2018. - V. 13. - №. 6. - P. e0197610.

24. A study on the mechanisms involving the anti-inflammatory effect of amitriptyline in carrageenan-induced paw edema in rats / H. Sadeghi, V. Hajhashemi, M. Minaiyan [et al.] // European journal of pharmacology. - 2011. - V. 667. - №. 1 - 3. - P. 396-401.

25. Adapalene inhibits the activity of cyclin-dependent kinase 2 in colorectal carcinoma / X. N. Shi, H. Li, H. Yao [et al.] // Molecular medicine reports. - 2015. - V. 12. - №. 5. - P. 6501-6508.

26. Akutsu, Y. Chemoradiotherapy and surgery for T4 esophageal cancer in Japan / Y. Akutsu, H. Matsubara // Surgery today. - 2015. - V. 45. - №. 11. - P. 1360-1365.

27. Alginate therapy is effective treatment for GERD symptoms: a systematic review and meta-analysis / D. A. Leiman, B. P. Riff, S. Morgan [et al.] // Diseases of the Esophagus. -2017. - V. 30. - №. 5. - P. 1.

28. Alharbi, M. S. Antioxidant properties of marine algae: An overview / M. S. Alharbi, A. K. Al Tuwayjiri, M. J. Alanazi // Bioscience Research. - 2019. - V. 16. - № 2. - P. 986-996.

29. Alkaloids from a deep ocean sediment-derived fungus Penicillium sp. and their antitumor activities / L. Du, T. Feng, B. Zhao [et al.] // The Journal of Antibiotics. - 2010. - V. 63. -№. 4. - P. 165-170.

30. Alley, M. Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay / M. Alley, D. Scudiero, A. Monks [ et al.] // Cancer research. - 1988. - V. 48. - №. 3. - P. 589-601.

31. An in vitro study on curcumin delivery by nano-micelles for esophageal squamous cell carcinoma (KYSE-30) / S. Hosseini, J. Chamani, H. Rahimi [et al.] // Reports of Biochemistry & Molecular Biology. - 2018. - V. 6. - №. 2. - P. 137.

32. An infant formula toxicity and toxicokinetic feeding study on carrageenan in preweaning piglets with special attention to the immune system and gastrointestinal tract / M. L. Weiner, H. E. Ferguson, B. A. Thorsrud [et al.] // Food and Chemical Toxicology. - 2015. - V. 77. -P. 120-131.

33. An LDL-receptor-related protein mediates Wnt signalling in mice / K. I. Pinson, J. Brennan, S. Monkley [et al.] // Nature. - 2000. - V. 407. - №. 6803. - P. 535-538.

34. An overview on natural antioxidants for oxidative stress reduction in cancers; a systematic review / N. Gholamian-Dehkordi, T. Luther, M. Asadi-Samani [et al.] // Immunopathologia Persa. -2017. - V. 3. - №. 2. - P. e12.

35. Anderson, W. Structure- activity in the carrageenans: iota- carrageenan and experimental oedemagenic activity / W. Anderson, J. E. Harthill, I. J. Zeitlin // Journal of pharmacy and pharmacology. - 1984. - V. 36. - №. 12. - P. 808-813.

36. Anti-cancer activity of porphyran and carrageenan from red seaweeds / Z. Liu, T. Gao, Y. Yang [et al.] // Molecules. - 2019. - V. 24. - №. 23. - P. 4286.

37. Anticancer and cancer preventive properties of marine polysaccharides: Some results and prospects / S. N. Fedorov, S. P. Ermakova, T. N. Zvyagintseva [et al.] // Marine drugs. -2013. - V. 11. - №. 12. - P. 4876-4901.

38. Anticoagulant, antioxidant and antitumor activities of heterofucans from the seaweed Dictyopteris delicatula / K. D. Magalhaes, L. S. Costa, G. P. Fidelis [et al.] // International journal of molecular sciences. - 2011. - V. 12. - №. 5. - P.3352-3365.

39. Antigenotoxic and antimutagenic effects of Schinus terebinthifolius Raddi in Allium cepa and Swiss mice: a comparative study / L. E. S. Fedel-Miyasato, A. S. N. Formagio, S. A. Auharek [et al.] // Genetics and Molecular Research. - 2014. - V. 13. - P. 3411-3425.

40. Antioxidant activities of sulfated polysaccharides from brown and red seaweeds / M. C. R. de Souza, C. T. Marques, C. M. G. Dore [et al.] // Journal of applied phycology. - 2007. - V. 19. - №. 2. - P. 153-160.

41. Antioxidant activity potential of gamma irradiated carrageenan / L. V. Abad, L. S. Relleve, C. D. T. Racadio [et al.] // Applied Radiation and Isotopes. - 2013. - V. 79. - P. 73-79.

42. Anti-proliferative activity of X-carrageenan through the induction of apoptosis in human breast cancer cells / M. Jazzara, A. Ghannam, C. Soukkarieh [et al.] // Iranian journal of cancer prevention. - 2016. - V. 9. - №. 4.

43. Antitumor and adjuvant activity of X-carrageenan by stimulating immune response in cancer immunotherapy / M. Luo, B. Shao, W. Nie [et al.] // Scientific reports. - 2015. -V. 5. - №. 1. - P. 1-12.

44. Antitumor and antiproliferative effects of a fucan extracted from ascophyllum nodosum against a non-small-cell bronchopulmonary carcinoma line / D. Riou, S. Colliec-Jouault, D. Pinczon du Sel [et al.] // Anticancer research. - 1996. - V. 16. - №. 3A. - P. 1213-1218.

45. Antitumor effect and molecular mechanism of antioxidant polysaccharides from Salvia miltiorrhiza Bunge in human colorectal carcinoma LoVo cells / X. Y. Wang, A. N. Gao, Y. D. Jiao [et al.] // International journal of biological macromolecules. - 2018. - V. 108. -P. 625-634.

46. Antitumor potential of carrageenans from marine red algae / M. Y. Khotimchenko, V. A. Tiasto, A. A. Kalitnik [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2020. - V. 246. - P. 116568.

47. Antitumor properties of a sulfated polysaccharide from the red seaweed Champia feldmannii (Diaz- Pifferer) / K. O. Lins, D. P. Bezerra, A. P. N. Alves [et al.] // Journal of Applied Toxicology. - 2009. - V. 29. - №. 1. - P. 20-26.

48. Assessment of the oxidative cellular toxicity of a K-carrageenan oxidative degradation product towards Caco-2 cells / H. M. Chen, X. J. Yan, F. Wang [et al.] // Food research international. - 2010. - V. 43. - №. 10. - P. 2390-2401.

49. Bioactive potential and composition analysis of sulfated polysaccharide from Acanthophora spicifera (Vahl) Borgeson / J. Anand, M. Sathuvan, G. V. Babu [et al.] // International journal of biological macromolecules. - 2018. - V. 111. - P. 1238-1244.

50. Blagodatski, A. Targeting the Wnt pathways for therapies / A. Blagodatski, D. Poteryaev, V. L. Katanaev // Molecular and cellular therapies. - 2014. - V. 2. - №. 1. - P. 1 - 15.

51. Bridges, E. M. The angiogenic process as a therapeutic target in cancer / E. M. Bridges, A. L. Harris // Biochemical pharmacology. - 2011. - V. 81. - №. 10. - P. 1183-1191.

52. Brito, D. A. The ability to survive mitosis in the presence of microtubule poisons differs significantly between human nontransformed (RPE- 1) and cancer (U2OS, HeLa) cells / D. A. Brito, C. L. Rieder // Cell motility and the cytoskeleton. - 2009. - V. 66. - №. 8. -P. 437-447.

53. Carnero, A. Targeting the cell cycle for cancer therapy / A. Carnero // British journal of cancer. - 2002. - V. 87. - №. 2. - P. 129-133.

54. Carrageenan and its applications in drug delivery / L. Li, R. Ni, Y. Shao [et al.] // Carbohydr Polym. - 2014. V. 103. - P. 1-11. doi: 10.1016/j.carbpol.2013.

55. Carrageenan delays cell cycle progression in human cancer cells in vitro demonstrated by FUCCI imaging / E. S. Prasedya, M. Miyake, D. Kobayashi [et al.] // BMC complementary and alternative medicine. - 2016. - V. 16. - №. 1. - P. 270.

56. Carrageenan induces interleukin-8 production through distinct Bcl10 pathway in normal human colonic epithelial cells / A. Borthakur, S. Bhattacharyya, P. K. Dudeja [et al.] // American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. - 2007. - V. 292. - №. 3. -P. G829-G838.

57. Carrageenan reduces bone morphogenetic protein-4 (BMP4) and activates the Wnt/p-catenin pathway in normal human colonocytes / S. Bhattacharyya, A. Borthakur, P. K. Dudeja [et al.] // Digestive diseases and sciences. - 2007. - V. 52. - №. 10. - P. 2766-2774.

58. Carrageenan: A natural seaweed polysaccharide and its applications / V. D. Prajapati, P. M. Maheriya, G. K. Jani [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2014. - V. 105. - P. 97 - 112.

59. Carrageenan: a wonder polymer from marine algae for potential drug delivery applications /

D. Qureshi, S. K. Nayak, S. Maji [et al.] // Current Pharmaceutical Design. - 2019. - V. 25. -№. 11. - P. 1172-1186.

60. Carrageenan-induced colitis is associated with decreased population of anti-inflammatory bacterium, Akkermansia muciniphila, in the gut microbiota of C57BL/6J mice / Q. Shang, W. Sun, X. Shan [et al.] // Toxicology Letters. - 2017. - V. 279. - P. 87-95.

61. Carrageenan-induced squamous metaplasia of the rectal mucosa in the rat / R. J. Fabian, R. Abraham, F. Coulston [et al.] // Gastroenterology. 1973. V. 65. P. 265-276.

62. Carrageenans effect on neutrophils alone and in combination with LPS in vitro /

E. V. Sokolova, Y. Karetin, V. N. Davydova [et al.] // Journal of Biomedical Materials Research Part A. - 2016. - V. 104. - №. 7. - P. 1603-1609.

63. Carrageenans: Biological properties, chemical modifications and structural analysis-A review / V.L. Campo, D. F. Kawano, D. B. Jr da Silva [ et al.] // Carbohydrate polymers. -2009. - V. 77. - №. 2. - P. 167-180.

64. CARRAGEENAN-ULCEROGENIC AGENT / K. F. Benitz, R. Abraham, L. Golberg [et al.] // Toxicology and Applied Pharmacology. - 1972. - V. 22. - №. 2. - P. 282.

65. Chemical structure and gel properties of carrageenans from algae belonging to the Gigartinaceae and Tichocarpaceae, collected from the Russian Pacific coast / I. M. Yermak,

Y. H. Kim, E. A. Titlynov [et al.] // Sixteenth International seaweed symposium. -1999. -P. 555-562.

66. Chemical structures and bioactivities of sulfated polysaccharides from marine algae / G. Jiao, G. Yu, J. Zhang [et al.] // Marine drugs. - 2011. - V. 9. - №. 2. - P. 196-223.

67. Chromosomal and genomic variations in esophageal squamous cell carcinoma: a review of technologies, applications, and prospections / Q. Song, D. Jiang, H. Wang [et al.] // Journal of Cancer. - 2017. - V. 8. - №. 13. - P. 2492.

68. Clarifying the confusion between poligeenan, degraded carrageenan, and carrageenan: A review of the chemistry, nomenclature, and in vivo toxicology by the oral route / J. M. McKim, Sr. Willoughby, J.A. Blakemore [et al.] // Critical Reviews in Food Science and Nutrition. -2019. - V. 59. - №. 19. - P. 3054-3073.

69. Cohen, S.M. A critical review of the toxicological effects of carrageenan and processed eucheuma seaweed on the gastrointestinal tract / S. M. Cohen, N. Ito // Critical reviews in toxicology. - 2002. - V. 32. - №. 5. - P. 413-444.

70. Colorectal carcinoma: a general overview and future perspectives in colorectal cancer / I. Marmol, C. Sanchez-de-Diego, A. Pradilla Dieste [et al.] // International journal of molecular sciences. - 2017. - V. 18. - №. 1. - P. 197.

71. Common food additive carrageenan stimulates Wnt/p-catenin signaling in colonic epithelium by inhibition of nucleoredoxin reduction / S. Bhattacharyya, L. Feferman, S. Borthakur [et al.] // Nutrition and cancer. - 2014. - V. 66. - №. 1. - P. 117-127.

72. Compounds from the marine sponge Cribrochalina vasculum offer a way to target IGF-1R mediated signaling in tumor cells / A. Zovko, M. Novak, P. Hââg [et al.] // Oncotarget. - 2016. -V. 7. - №. 31. - P. 50258.

73. Contrasting quiescent G0 phase with mitotic cell cycling in the mouse immune system / M. Tomura, A. Sakaue-Sawano, Y. Mori [et al.] // PloS one. - 2013. - V. 8. - №. 9. - P. e73801.

74. Contribution of carbohydrate antigens sialyl Lewis A and sialyl Lewis X to adhesion of human cancer cells to vascular endothelium / A. Takada, K. Ohmori, T. Yoneda [et al.] // Cancer research. - 1993. - V. 53. - №. 2. - P. 354-361.

75. Cyanobacteria and microalgae: a renewable source of bioactive compounds and other chemicals / T. Encarnaçâo, A. A. Pais, M. G. Campos [et al.] // Science progress. -2015. - V. 98. - №. 2. - P. 145-168.

76. Cytotoxic and anti-inflammatory cembranoids from the soft coral Lobophytum crassum / C.- H. Chao, Z.- H. Wen, Y. -C. Wu [et al.] // Journal of natural products. - 2008. - V. 71. -№. 11. - P. 1819-1824.

77. Cytotoxicity effect of degraded and undegraded kappa and iota carrageenan in human intestine and liver cell lines / S. H. Ariffin, W. W. Yeen, I. Z. Abidin [et al.] // BMC complementary and alternative medicine. - 2014. - V. 14. - №. 1. - P. 1-16.

78. Davidson, M. Trastuzumab in the management of gastroesophageal cancer: patient selection and perspectives / M. Davidson, N. Starling // OncoTargets and therapy. - 2016. -V. 9. - P. 7235.

79. de Goes, H. G. Temporal variation of the growth, carrageenan yield and quality of Kappaphycus alvarezii (Rhodophyta, Gigartinales) cultivated at Sepetiba bay, southeastern Brazilian coast / H. G. de Goes, R. P. Reis // Journal of Applied Phycology. - 2012. - V. 24. -№. 2. - P. 173-180.

80. Defined carrageenan derivatives as angio- genesis inhibitors / D. H. Paper, H. Vogl, G. Franz [et al.] // Macromolecular Symposia. - V. 99. - P. 219-225.

81. Degradation and antioxidant activity of k- carrageenans / T. Sun, H. Tao, J Xie [et al.] // Journal of applied polymer science. - 2010. - V. 117. - №. 1. - P. 194-199.

82. Degradation of carrageenan by radiation / L. Relleve, N. Nagasawa, L. Q. Luan [et al.] // Polymer Degradation and Stability. - 2005. - V. 87. - №. 3. - P. 403-410.

83. Degraded carrageenan as a model for acute right-sided colitis in mice / B. M. Dworkin, E. E. Deschner, Jr. Fath [et al.] // Gastroenterology. - 1982. - V. 82. - №. 5. - P. 1048-1048.

84. Depolymerized products of X-carrageenan as a potent angiogenesis inhibitor / H. M. Chen, X. J. Yan, J. Lin [et al.] // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2007. - V. 55. -№. 17. - P. 6910-6917.

85. Design, synthesis, cytotoxic activity and apoptosis-inducing action of novel cinnoline derivatives as anticancer agents / M. M. Kandeel, A. M. Kamal, B. H. Naguib [et al.] // AntiCancer Agents in Medicinal Chemistry. - 2018. - V. 18. - №. 8. - P. 1208-1217.

86. Development of a novel HAC-based "gain of signal" quantitative assay for measuring chromosome instability (CIN) in cancer cells / J. H. Kim, H. S. Lee, N. C. Lee [et al.] // Oncotarget. - 2016. - V. 7. - №. 12. - P. 14841.

87. Dietary fibre: An agreed definition / J. Cummings, J. Mann, C. Nishida [et al.] // Lancet. -2009. - V. 373. - №. 9661. - P. 365-366.

88. Dietary total antioxidant capacity and risk of cancer: a systematic review and meta-analysis on observational studies / M. Parohan, A. Sadeghi, S. R. Khatibi [et al.] // Critical Reviews in Oncology/Hematology. - 2019. - V. 138. - P. 70-86.

89. Disaccharides obtained from carrageenans as potential antitumor agents / G. H. Calvo, V. A. Cosenza, D. A. Saenz [et al.] // Scientific reports. - 2019. - V. 9. - №. 1. - P. 1-13.

90. Donnellan, R. Cyclin E in human cancers / R. Donnellan, R. Chetty // FASEB Journal. -1999. -V.13. - №8. - P. 773 - 80. doi: 10.1096/fasebj.13.8.773.

91. Drug-repositioning opportunities for cancer therapy: novel molecular targets for known compounds / R. Würth, S. Thellung, A. Bajetto [et al.] // Drug discovery today. - 2016. -V. 21. - №. 1. - P. 190-199.

92. Dyshlovoy, S. A. Recent updates on marine cancer-preventive compounds / S. A. Dyshlovoy // Marine Drugs. - 2021. - V. 19. - №. 10. - P. 558.

93. Dyshlovoy, S.A. Marine compounds and cancer: Updates 2020 / S. A. Dyshlovoy,

F. Honecker // Marine Drugs. - 2020. - V. 18. - №. 12. - P. 643.

94. Effect of carrageenans on some lipid metabolism components in vitro / E. V. Sokolova, A. O. Kravchenko, N. V. Sergeeva [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2020. - V. 230. - P. 115629.

95. Effect of low molecular X-carrageenan from Chondrus ocellatus on antitumor H-22 activity of 5-Fu / G. Zhou, W. Sheng, W. Yao [et al.] // Pharmacological research. - 2006. - V. 53. -№. 2. - P. 129-134

96. Effect of pre-extraction alkali treatment on the chemical structure and gelling properties of extracted hybrid carrageenan from Chondrus crispus and Ahnfeltiopsis devoniensis /

G. Azevedo, M. D. Torres, I. Sousa-Pinto [et al.] // Food Hydrocolloids. - 2015. - V. 50. -P. 150-158.

97. Effect of red seaweed sulfated galactans on initial steps of complement activation in vitro / E. V. Sokolova, A. O. Kravchenko, N. V. Sergeeva [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2021. -V. 254. - P. 117251.

98. Effects of carboxyl group on the anticoagulant activity of oxidized carrageenans / G. C. dos Santos-Fidencio, A. G. Goncalves, M. D. Noseda [et al.] // Carbohydrate polymers. -2019. - V. 214. - P. 286-293.

99. Effects of structural peculiarities of carrageenans on their immunomodulatory and anticoagulant activities / I. M. Yermak, A. O. Barabanova., D. L. Aminin [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2012. - V. 87. - №. 1. - P. 713-720.

100. Effects of sulfate group in red seaweed polysaccharides on anticoagulant activity and cytotoxicity / W. Liang, X. Mao, X. H. Peng [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2014. -V. 101. - P. 776-785

101. Eicosapentaenoic acid and/or aspirin for preventing colorectal adenomas during colonoscopic surveillance in the NHS Bowel Cancer Screening Programme: the seAFOod RCT / M.A. Hull, K. Sprange, T. Hepburn [et al.] // Efficacy and Mechanism Evaluation. - 2019. -V. 6. - №. 4.

102. Enhanced immunostimulatory and antitumor activity of different derivatives of K-carrageenan oligosaccharides from Kappaphycus striatum / H. Yuan, J. Song, X. Li [et al.] // Journal of applied phycology. - 2011. - V. 23. - №. 1. - P. 59-65.

103. Enhanced immunostimulatory and antitumor activity of different derivatives of K-carrageenan oligosaccharides from Kappaphycus striatum / H. Yuan, J. Song, X. Li [et al.] // Journal of applied phycology. - 2011. - V. 23. - №. 1. - P. 59-65.

104. Enzymatic preparation of K-carrageenan oligosaccharides and their anti-angiogenic activity /Z. Yao, H. Wu, S. Zhang [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2014. - V. 101. -P. 359-367.

105. Epithelial dysplasia of the rabbit colon induced by degraded carrageenan / A. Kitano, T. Matsumoto, M. Hiki [et al.] // Cancer research. - 1986. - V. 46. - №. 3. - P. 1374-1376.

106. Esophageal cancer research today and tomorrow: Lessons from algae a nd other perspectives / V. Tiasto, V. Mikhailova, V. Gulaia [et al.] // AIMS genetics. - 2018. -V. 5. - №. 01. - P. 075-090.

107. Evaluation of anti-inflammatory activity of probiotic on carrageenan-induced paw edema in Wistar rats / H. K. Solanki, D. A. Shah, P. M. Maheriya [et al.] // International journal of biological macromolecules. - 2015. - V. 72. - P. 1277-1282.

108. Evaluation of the antimutagenic activity and mode of action of carrageenan fiber in cultured meristematic cells of Allium cepa / C. I. Nantes, J. R. Pesarini, M. O. Mauro [et al] // Genetics and Molecular Research. - 2014. - V. 13. - №. 4. - P. 9523-9532.

109. Evaluation of the medicinal herb Graptopetalum paraguayense as a treatment for liver cancer / W. H. Hsu, C. C. Chang, K. W. Huang [et al.] // PloS one. - 2015. - V. 10. - №. 4. -P. e0121298.

110. Exploring new sources of antioxidants and phenolic contents from a marine red alga Agardhiella robusta (grevi.) Borg. Collected from Karachi coast / U. Hanif, B. Ghazala, S. Farid [et al.] // Journal of Animal and Plant Sciences. - 2016. - V. 26. - №. 5. - P. 1445-1450.

111. Expression, tissue distribution and function of miR-21 in esophageal squamous cell carcinoma / N. Nouraee, K. Van Roosbroeck, M. Vasei [et al.] // PloS one. - 2013. - V. 8. -№. 9. - P. e73009.

112. Falshaw, R. Carrageenan from the tetrasporic stage of Gigartina decipiens (Gigartinaceae, Rhodophyta) / R. Falshaw, R. H. Furneaux // Carbohydrate Research. - 1994. - V. 252. -P. 171-182.

113. FLT1 and its ligands VEGFB and PlGF: drug targets for anti-angiogenic therapy? / C. Fischer, M. Mazzone, B. Jonckx [et al.] // Nature Reviews Cancer. - 2008. - V. 8. - №. 12. -P. 942-956.

114. Folkman, J. Anti-angiogenesis: new concept for therapy of solid tumors / J. Folkman // Annals of surgery. - 1972. - V. 175. - №. 3. - P. 409.

115. From marine origin to therapeutics: The antitumor potential of marine algae-derived compounds / C. Alves, J. Silva, S. Pinteus [et al.] // Frontiers in Pharmacology. - 2018. -V. 9. - P. 777.

116. Funami, T. Atomic force microscopy imaging of food polysaccharides / T. Funami // Food science and technology research. - 2010. - V. 16. - №. 1. - P. 1-12.

117. Gelling polysaccharide from Chondrus armatus and its oligosaccharides: The structural peculiarities and anti-inflammatory activity / A. A. Kalitnik, P. A. Marcov, S. D. Anastyuk [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2015. - V. 115. - P. 768-775.

118. Grothey, A. Antiangiogenesis therapy in the treatment of metastatic colorectal cancer / A. Grothey, C. Allegra // Therapeutic Advances in Medical Oncology. - 2012. - V. 4. - №. 6. -P. 301-319.

119. Growth and carrageenan composition of two populations of the New Zealand carrageenophyte Sarcothalia lanceata (Gigartinaceae, Rhodophyta) / K. Neill, W. Nelson, C. Hurd [et al] // Journal of Applied Phycology. - 2018. - V. 30. - №. 4. - P. 2485-2497.

120. Haijin, M. A K-carrageenan derived oligosaccharide prepared by enzymatic degradation containing anti-tumor activity / M. Haijin, J. Xiaolu, G. Huashi // Journal of Applied Phycology. -2003. - V. 15. - №. 4. - P. 297-303.

121. High-throughput targeted screening in triple-negative breast cancer cells identifies Wnt-inhibiting activities in Pacific brittle stars / A. Blagodatski, V. Cherepanov, A. Koval [et al.] // Scientific reports. - 2017. - V. 7. - №. 1. - P. 1-8.

122. Huang, M. Antitumor pharmacological research in the era of personalized medicine / M. Huang, M. Geng, J. Ding // Acta Pharmacologica Sinica. - 2022. - P. 1-6.

123. Immune response mechanism of mouse monocytes/macrophages treated with K-carrageenan polysaccharide / Y. Shu, X. B. Liu, X. H. Ma [et al.] // Environmental Toxicology and Pharmacology. - 2017. - V. 53. - P. 191-198.

124. Immunological effects of Chondrus armatus carrageenans and their low molecular weight degradation products / E. Cicinskas, M. A. Begun, V. V. Vikhareva [et al.] // Journal of Biomedical Materials Research Part A. - 2021. - V. 109. - №. 7. - P. 1136-1146.

125. Immunomodulating properties of carrageenan from Tichocarpus crinitus / E. Cicinskas, A. A. Kalitnik, Y. A. Karetin [et al.] // Inflammation. - 2020. - V. 43. - №. 4. - P. 1387-1396.

126. Immunomodulation and antitumor activity of K-carrageenan oligosaccharides / H. Yuan, J. Song, X. Li [et al.] // Cancer letters. - 2006. - V. 243. - №. 2. - P. 228-234.

127. Immunomodulatory and anticancer activities of flavonoids extracted from litchi (Litchi chinensis Sonn.) pericarp / M. Zhao, B. Yang, J. Wang [et al.] // International immunopharmacology. - 2007. - V. 7. - №. 2. - P. 162-166.

128. Immunotherapy and hormone-therapy in metastatic breast cancer: A review and an update / A. Nicolini, P. Carpi, P. M. Ferrari [et al.] // Current Drug Targets. - 2016. - V. 17. -P. 1127-1139.

129. In vitro activities of kappa-carrageenan isolated from red marine alga Hypnea musciformis : Antimicrobial, anticancer and neuroprotective potential / R. B. Souza, A. F. Frota, J. Silva [et al.] // International journal of biological macromolecules. - 2018. - V. 112. - P. 1248-1256.

130. In vitro antioxidant and antitumor activities of six selected plants used in the Traditional Arabic Palestinian herbal medicine / A. I. Husein, M. S. Ali-Shtayeh, W. J. Jondi [et al.] // Pharmaceutical biology. - 2014. - V. 52. - №. 10. - P. 1249-1255.

131. In vitro antioxidant, hypoglycemic activity, and identification of bioactive compounds in phenol-rich extract from the marine red algae Gracilaria edulis (Gmelin) Silva / T. L. Gunathilaka, K. W. Samarakoon, P. Ranasinghe [et al.] // Molecules. - 2019. - V. 24. -№. 20.-P. 3708.

132. In vitro antitumor and immunotropic activity of carrageenans from red algae Chondrus armatus and their low- molecular weight degradation products / E. Cicinskas, M. A. Begun, V. A. Tiasto [et al.] // Journal of Biomedical Materials Research Part A. - 2020. - V. 108. -№. 2. - P. 254-266.

133. In vitro efficacy of chemotherapeutics as determined by 50% inhibitory concentrations in cell cultures of mammary gland tumors obtained from dogs / D. Simon, J. W. Knebel, W. Baumgartner [et al.] // American journal of veterinary research. - 2001. - V. 62. - №. 11. -P. 1825-1830.

134. In vivo antitumor and immunomodulation activities of different molecular weight lambda-carrageenans from Chondrus ocellatus / G. Zhou, Y. Sun, H. Xin [et al.] // Pharmacological research. - 2004. - V. 50. - №. 1. - P. 47-53.

135. In vivo growth-inhibition of S180 tumor by mixture of 5-Fu and low molecular X-carrageenan from Chondrus ocellatus / G. Zhou, H. Xin, W. Sheng [et al.] // Pharmacological research. - 2005. - V. 51. - №. 2. - P. 153-157.

136. Induction of apoptosis in cancer cell lines by the Red Sea brine pool bacterial extracts / S. Sagar, L. Esau, K. Holtermann [et al.] // BMC Complementary and Alternative Medicine. -2013. - V. 13. - №. 1. - P. 1-12.

137. Induction of colorectal tumors and its early lesions by degraded carrageenan in rats / K. Wakabayashi, Y. Fujimoto, Y. Oohashi [et al.] // Naturally occurring carcinogens, mutagens and modulators of carcinogenesis - P. 127-38.

138. Induction of colorectal tumors in rats by sulfated polysaccharides / T. Ishioka, N. Kuwabara, Y. Oohashi [et al.] // CRC Critical Reviews in Toxicology. - 1987. -V. 17. -№. 3. - P. 215-244.

139. Influence of molecular structure imaged with atomic force microscopy on the rheological behavior of carrageenan aqueous systems in the presence or absence of cations / T. Funami, M. Hiroe, S. Noda [et al.] // Food Hydrocolloids. - 2007. - V. 21. - №. 4. - P. 617-629.

140. Insight on structure-property relationships of carrageenan from marine red algal: A review / J. L. Jiang, W. Z. Zhang, W. X. Ni [et al.] // Carbohydrate Polymers. - 2021. - V. 257. -P. 117642.

141. Intestinal effects of carrageenans in the rhesus monkey (Macaca mulatta) / K. F. Benitz, L. Golberg, F. Coulston // Food and Cosmetics Toxicology. - 1973. - V. 11. - №. 4. -P. 565-575.

142. Isolation, Structural characterization, and antiproliferative activity of phycocolloids from the red seaweed Laurencia papillosa on MCF-7 human breast cancer cells / A. Ghannam, H. Murad, M. Jazzara [et al.] // International journal of biological macromolecules. - 2018. -V. 108. - P. 916-926.

143. Jin, Z. Degraded iota-carrageenan can induce apoptosis in human osteosarcoma cells via the Wnt/p-catenin signaling pathway / Z. Jin, Y. X. Han., X. R. Han // Nutrition and cancer. -2013. - V. 65. - №. 1. - P. 126-131.

144. Johnson, D. G. Role of E2F in cell cycle control and cancer / D. G. Johnson, R. Schneider-Broussard // Frontiers in Bioscience-Landmark. - 1998. - V. 3. - №. 4. - P. 447-448.

145. Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives. Compendium of food additives specifications. FAO Food and Nutrition Pipe. - 2008. - Addendum № 10. - P. 65-85.

146. Jurisic, V. In vitro assays for cell death determination / V. Jurisic, V. Bumbasirevic // Archive of oncology. - 2008. - V. 16. - №. 3 - 4. - P. 49-54.

147. Kastan, M.B. Cell-cycle checkpoints and cancer / M. B. Kastan, J. Bartek // Nature. - 2004.

- V. 432. - №. 7015. - P. 316-323.

148. Katanaev, V. L. The Wnt/frizzled GPCR signaling pathway / V. L. Katanaev // Biochemistry (Moscow). - 2010. - V. 75. - №. 12. - P. 1428-1434.

149. Katoh, M. Canonical and non-canonical WNT signaling in cancer stem cells and their niches: Cellular heterogeneity, omics reprogramming, targeted therapy and tumor plasticity / M. Katoh // International journal of oncology. - 2017. - V. 51. - №. 5. - P. 1357-1369.

150. Khotimchenko, Y. S. The antitumor properties of nonstarch polysaccharides: carrageenans, alginates, and pectins / Y. S. Khotimchenko // Russian journal of marine biology. - 2010. - V. 36.

- №. 6. - P. 401-412.

151. Kijjoa, A. Drugs and cosmetics from the sea / A. Kijjoa, P. Sawangwong // Marine Drugs.

- 2004. - V. 2. - №. 2. - P. 73-82.

152. Kirby, A. R. Imaging polysaccharides by atomic force microscopy / A. R. Kirby, A. P. Gunning, V. J. Morris // Biopolymers. - 1996. - V. 38. - №. 3. - P. 355-366.

153. Koval, A. Wnt3a stimulation elicits G-protein-coupled receptor properties of mammalian Frizzled proteins / A. Koval, V. L. Katanaev // Biochemical Journal. - 2011. - V. 433. - №. 3. -P. 435-440.

154. Laemmli, U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U. K. Laemmli // Nature. - 1970. - V. 227. - №. 5259. - P. 680-685.

155. Lahaye, M. Developments on gelling algal galactans, their structure and physico-chemistry / M. Lahaye // Journal of applied Phycology. - 2001. - V. 13. - №. 2. - P. 173-184.

156. Lahaye, M. Structure and functional properties of ulvan, a polysaccharide from green seaweeds / M. Lahaye, A. Robic // Biomacromolecules. - 2007. - V. 8. - №. 6. - P. 1765-1774.

157. Ling, N. Growth Inhibition and Cell cycle arrest of Kappa-selenocarrageenan and paclitaxel on HepG2 cells / N. Ling // Advanced Materials Research. - Trans Tech Publications, 2012. - V. 343. - P. 530-534.

158. Lopes-Costa, E. Anticancer effects of seaweed compounds fucoxanthin and phloroglucinol, alone and in combination with 5-fluorouracil in colon cells / E. Lopes-Costa, M. Abreu, D. Gargiulo // Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. - 2017. -V. 80. - №. 13-15. - P. 776-787.

159. Lorz, A. Universal response in the RKO colon cancer cell line to distinct antimitotic therapies / A. Lorz, D. A. Botesteanu, D. Levy // Scientific reports. - 2018. - V. 8. - №. 1. -P. 1-11.

160. Malaker, A. Therapeutic potency of anticancer peptides derived from marine organism / A. Malaker, S. A. I. Ahmad // International Journal of Engineering. - 2013. - V. 2. -P. 2305-8269.

161. Marine cyanobacteria compounds with anticancer properties: a review on the implication of apoptosis / M. Costa, J. Costa-Rodrigues, M. H. Fernandes [et al.] // Marine drugs. - 2012. -V. 10. - №. 10. - P. 2181-2207.

162. Marine natural products: A source of novel anticancer drugs / S. A. M. Khalifa, N. Elias, M. A. Farag [et al.] // Marine drugs. - 2019. - V. 17. - №. 9. - P. 491.

163. Marine pharmacology in 2014-2015: Marine compounds with antibacterial, antidiabetic, antifungal, anti-inflammatory, antiprotozoal, antituberculosis, antiviral, and anthelmintic activities; affecting the immune and nervous systems, and other miscellaneous mechanisms of action / A. M. S. Mayer, A. J. Guerrero, A. D. Rodríguez [et al.] // Marine drugs. - 2019. -V. 18. - №. 1. - P. 5.

164. McKim, J. M. Food additive carrageenan: Part I: A critical review of carrageenan in vitro studies, potential pitfalls, and implications for human health and safety / J. M. McKim // Critical Reviews in Toxicology. - 2014. - V. 44. - №. 3. - P. 211-243.

165. Medicinal plants and bioactive natural compounds for cancer treatment: Important advances for drug discovery / F. Majolo, L. B. Delwing, D. J. Marmitt [et al.] // Phytochemistry Letters. - 2019. - V. 31. - P. 196-207.

166. Microalgal derivatives as potential nutraceutical and food supplements for human health: A focus on cancer prevention and interception / C. Galasso, A. Gentile, I. Orefice [et al.] // Nutrients. - 2019. - V. 11. - №. 6. - P. 1226.

167. Mining Natural Compounds to Target WNT Signaling: Land and Sea Tales / V. L. Katanaev, A. Blagodatski, J. Xu [et al.] // Pharmacology of the WNT Signaling System. -2021. - P. 215-248.

168. Molecular weight and fecal excreted quantity of carrageenan administered to rats in blended feed / Y. Uno, T. Omoto, Y. Goto [et al.] // Japanese Journal of Food Chemistry and Safety (JJFC). - 2001. - V. 8. - P. 83-93.

169. Monocationic salts of carrageenans: Preparation and physico-chemical properties / M. Robal, T. Brenner, S. Matsukawa [et al.] // Food Hydrocolloids. - 2017. - V. 63. - P. 656-667.

170. Morgan, D. O. Cyclin-depend kinases: engines, clocks, and microprocessors / D. O. Morgan // Annual Review of Cell and Developmental Biology. - 1997. - V. 13. -P. 261-291. doi: 10.1146/annurev.cellbio.13.1.261.

171. Morris, V. J. Macromolecules-Polysaccharides / V. J. Morris, A. R. Kirby, A. P. Gunning // Atomic force microscopy for biologists. - 1999. - P. 105 - 123.

172. New cytotoxic cembrane based diterpenes from the soft corals Sarcophyton cherbonnieri and Nephthea sp / H. Gross, S. Kehraus, M. Nett [et al.] // Organic & biomolecular chemistry. -2003. - V. 1. - №. 6. - P. 944-949.

173. New marine derived anticancer therapeutics— a journey from the sea to clinical trials / J. Jimeno, G. Faircloth, J. F. Sousa-Faro [et al.] // Marine Drugs. - 2004. - V. 2. - №. 1. - P. 14-29.

174. Olano, C. Antitumor compounds from marine actinomycetes / C. Olano, C. Méndez, J. A. Salas // Marine drugs. - 2009. - V. 7. - №. 2. - P. 210-248.

175. Oligosaccharides of K/ß-carrageenan from the red alga Tichocarpus crinitus and their ability to induce interleukin 10 / A. A. Kalitnik, S. D. Anastyuk, E. V. Sokolova [et al.] // Journal of applied phycology. - 2016. - V. 28. - №. 1. - P. 545-553.

176. Oohashi, Y. A study on carcinogenesis induced by degraded carrageenan arising from squamous metaplasia of the rat / Y. Oohashi, T. Ishioka, K. Wakabayashi [et al.] // Cancer Letters. - 1981. - V. 14. - P. 267-272.

177. Pangestuti, R. Biological activities of carrageenan / R. Pangestuti, S. K. Kim // Advances in food and nutrition research. - 2014. - V. 72. - P. 113-124.

178. Panitumumab added to docetaxel, cisplatin and fluoropyrimidine in oesophagogastric cancer: ATTAX3 phase II trial / N.C. Tebbutt, T. J. Price, D. A. Ferraro [et al.] // British journal of cancer. - 2016. - V. 114. - №. 5. - P. 505-509.

179. Parthenolide, a sesquiterpene lactone from the medical herb feverfew, shows anticancer activity against human melanoma cells in vitro / K. Lesiak, K. Koprowska, I. Zalesna [et al.] // Melanoma research. - 2010. - V. 20. - №. 1. - P. 21-34.

180. Partial and total C-6 oxidation of gelling carrageenans. Modulation of the antiviral activity with the anionic character / V. A. Cosenza, D. A. Navarro, C. A. Pujol [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2015. - V. 128. - P. 199-206.

181. PCL/chitosan/Zn-doped nHA electrospun nanocomposite scaffold promotes adipose derived stem cells adhesion and proliferation / E. V. Sokolova, E. A. Chusovitin, A. O. Barabanova [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2015. - V. 118. - P. 133-142.

182. Pharmacological importance of sulphated polysaccharide carrageenan from red seaweed Kappaphycus alvarezii in comparison with commercial carrageenan / A. M. Suganya, M. Sanjivkumar, M. N. Chandran [et al.] // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2016. - V. 84. -P. 1300-1312.

183. Pharmacological insights into antioxidants against colorectal cancer: A detailed review of the possible mechanisms / S. Gothai, K. Muniandy, C. Gnanaraj [et al.] // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2018. - V. 107. - P. 1514-1522.

184. Potential antioxidant and anti-proliferative activities of biologically active marine algae extracts / T. A. Kumosani, K. S. Balamash, H. Ghashlan [et al.] // British Journal of Pharmaceutical Research. - 2017. - V. 19. - № 6. - P. 38089.

185. Preparation and in vitro antioxidant activity of K-carrageenan oligosaccharides and their oversulfated, acetylated, and phosphorylated derivatives / H. Yuan, W. Zhang, X. Li [et al.] // Carbohydrate Research. - 2005. - V. 340. - №. 4. - P. 685-692.

186. Preparation and in vivo. Antitumor activity of K-carrageenan oligosaccharides / X. Hu, X. Jiang, E. Aubree [et al.] // Pharmaceutical biology. - 2006. - V. 44. - №. 9. - P. 646-650.

187. Preparation and potential in vivo anti- influenza virus activity of low molecular- weight K- carrageenans and their derivatives / F. Tang, F. Chen, F. Li // Journal of Applied Polymer Science. - 2013. - V. 127. - №. 3. - P. 2110-2115.

188. Programmed cell death pathways in cancer: a review of apoptosis, autophagy and programmed necrosis / L. Ouyang, Z. Shi, S. Zhao [et al.] // Cell proliferation. - 2012. -V. 45. - №. 6. - P. 487-498.

189. Protective effect of a natural carrageenan on genital herpes simplex virus infection in mice / M. Carlucci, L. Scolaro, M. Noseda [et al.] // Antiviral research. - 2004. - V. 64. - №. 2. -P 137-141.

190. Rapid production of ulcerative disease of the colon in newly-weaned guinea-pigs by degraded carrageenan / A. J. Marcus, S. N. Marcus, R. Marcus [et al.] // Journal of pharmacy and pharmacology. - 1989. - V. 41. - №. 6. - C. 423-426.

191. RAS/MAPK signaling functions in oxidative stress, DNA damage response and cancer progression / S. Rezatabar, A. Karimian, V. Rameshknia [et al.] // Journal of cellular physiology. - 2019. - V. 234. - №. 9. - P. 14951-14965.

192. Re-evaluation of carrageenan (E 407) and processed Eucheuma seaweed (E 407a) as food additives / M. Younes, P. Aggett, F. Aguilar [et al.] // EFSA Journal. - 2018. - V.16. - № 4. P. e05238.

193. Reinagel, D. M. The carrageenan controversy / D. M. Reinagel // Journal of Applied Phycology. - 2015. - V. 29. - № 5. - P. 2201-2207.

194. Revisiting the carrageenan controversy: do we really understand the digestive fate and safety of carrageenan in our foods? / S. David, C. Shani Levi, L. Fahoum [et al.] // Food & function. - 2018. - V. 9. - №. 3. - P. 1344-1352.

195. Ribatti, D. Novel angiogenesis inhibitors: addressing the issue of redundancy in the angiogenic signaling pathway / D. Ribatti // Cancer Treatment Reviews. - 2011. - V. 37. -№. 5. - P. 344-352.

196. Robertson, D. J. ABC of colorectal cancer / D. J. Robertson // Gastroenterology. - 2012. -V. 143. - №. 3. - P. 868-869.

197. Roufayel, R. Molecular chaperone HSP70 and key regulators of apoptosis-a review / R. Roufayel, S. Kadry // Current Molecular Medicine. - 2019. - V. 19. - №. 5. - P. 315-325.

198. Scopularides A and B, cyclodepsipeptides from a marine sponge-derived fungus, Scopulariopsis brevicaulis / Z. Yu, G. Lang, I. Kajahn [et al.] // Journal of Natural Products. -2008. - V. 71. - №. 6. - P. 1052-1054.

199. Sharma, A. Review of pharmacological activity of marine algae in Indian coast / A. Sharma, R. Koneri, D. K. Jha // International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research. -2019. - V. 10. - №. 8. - P. 3540-3549.

200. Shaw, H. V. Targeting the Wnt signalling pathway in cancer: prospects and perils / H. V. Shaw, A. Koval, V. Katanaev // Swiss Medical Weekly. - 2019. - V. 149. - P. w20129.

201. Significance of infectious agents in colorectal cancer development / V. Antonic, A. Stojadinovic, K. E. Kester [et al.] // Journal of Cancer. - 2013. - V. 4. - №. 3. - P. 227.

202. Single-cell profiling approaches to probing tumor heterogeneity / B. L. Khoo, K. Chaudhuri, N. Ramalingam [et al.] // International Journal of Cancer. - 2016. - V. 139. -P. 243-255.

203. Sithranga Boopathy, N. Anticancer drugs from marine flora: an overview / N. Sithranga Boopathy N., K. Kathiresan // Journal of oncology. - 2010. - T. 2010.

204. Small molecule Wnt pathway modulators from natural sources: history, state of the art and perspectives / A. Blagodatski, A. Klimenko, L. Jia [et al.] // Cells. - 2020. - V. 9. -№. 3. - P. 589.

205. Soluble chitosan-carrageenan polyelectrolyte complexes and their gastroprotective activity / A. V. Volod'Ko, V. N. Davydova, E. Chusovitin [et al.] // Carbohydrate polymers. -2014. - V. 101. - P. 1087-1093.

206. Starch-carrageenan interactions in aqueous media: Role of each polysaccharide chemical and macromolecular characteristics / C. Lascombes, G. Agoda-Tandjawa, P. Boulenguer [et al.] // Food Hydrocolloids. - 2017. - V. 66. - P. 176-189.

207. STAT3 and NF-kB are common targets for kaempferol-mediated attenuation of COX-2 expression in IL-6-induced macrophages and carrageenan-induced mouse paw edema / A. Basu, A. S. Das, M. Sharma [et al.] // Biochemistry and biophysics reports. - 2017. - V. 12. - P. 54-61.

208. Stonik, V. A. Marine low molecular weight natural products as potential cancer preventive compounds / V. A. Stonik, S. N. Fedorov // Marine Drugs. - 2014. - V. 12. - №. 2. - P. 636-671.

209. Stortz C. A., Cerezo A. S. The 13C NMR spectroscopy of carrageenans: calculation of chemical shifts and computer-aided structural determination / C. A. Stortz, A. S. Cerezo // Carbohydrate polymers. - 1992. - V. 18. - №. 4. - P. 237-242.

210. Stortz, C. A. Carrageenans: Structural and conformational studies / C. A. Stortz // Handbook of carbohydrate engineering. - 2005. - P. 249-284.

211. Structural characteristics of carrageenans of red alga Mastocarpus pacificus from sea of Japan / A. O. Kravchenko, S. D. Anastyuk, V. P. Glazunov [et al.] // Carbohydrate Polymers. -2020. - V. 229. - P. 115518.

212. Structural characterization and antioxidant activities of к-carrageenan oligosaccharides degraded by different methods / Y. Sun, B. Yang, Y. Wu [et al.] // Food Chemistry. - 2015. -V. 178. - P. 311-318.

213. Studies on carrageenan and large-bowel ulceration in mammals / P. Grasso, M. Sharratt, F. M. B. Carpanini, [et al.] // Food and Cosmetics Toxicology. - 1973. - V. 11. - №. 4. -P. 555-564.

214. Suja, M. Anticancer activity of compounds isolated from marine endophytic fungus Aspergillus terreus / M. Suja, S. Vasuki, N. Sajitha // World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. - 2014. - V. 3. - №. 6. - P. 661-672.

215. Sulfated galactans from Australian specimens of the red alga Phacelocarpus peperocarpos (Gigartinales, Rhodophyta) / M. L. Liao, A. Chiovitti, S. L. A. Munro [et al.] // Carbohydrate research. - 1996. - V. 296. - №. 1 - 4. - P. 237-247.

216. Sulfated polysaccharide fraction from marine algae Solieria filiformis: Structural characterization, gastroprotective and antioxidant effects / W. M. Sousa, R. O. Silva, F. F. Bezerra [et al.] // Carbohydrate polymers. - 2016. - V. 152. - P. 140-148.

217. Synergistic inhibition of colon cancer cell growth with nanoemulsion-loaded paclitaxel and PI3K/mTOR dual inhibitor BEZ235 through apoptosis / H. Zou, L. Li, I. G. Carcedo, [et al.] // International journal of nanomedicine. - 2016. - V. 11. - P. 1947.

218. Targeting the Wnt pathway in cancer: a review of novel therapeutics / R. Tabatabai, Y. Linhares, D. Bolos [et al.] // Targeted Oncology. - 2017. - V. 12. - №. 5. - P. 623-641.

219. The comparative immunotropic activity of carrageenan, chitosan and their complexes / V. N. Davydova, I. V. Sorokina, A. V. Volod'ko [et al.] // Marine drugs. - 2020. - V. 18. -№. 9. - P. 458.

220. The immune regulation of к-carrageenan oligosaccharide and its desulfated derivatives on LPS-activated microglial cells / L. Xu, Z. Yao, H. Wu [et al.] // Neurochemistry international. -2012. - V. 61. - №. 5. - P. 689-696.

221. The immune regulation of к-carrageenan oligosaccharide and its desulfated derivatives on LPS-activated microglial cells / B. Yang, G. Yu, X. Zhao [et al.] // Neurochemistry international. - 2012. - V. 61. - №. 5. - P. 689-696.

222. The mechanism exploration of the non- colonic toxicity and obesity inhibition of food-grade к- carrageenan by transcriptome / H. Zhang, W. Cao, F. Liu [et al.] // Food science & nutrition. - 2021. - V. 9. - №. 11. - P. 6232-6244.

223. The mechanism exploration of the non- colonic toxicity and obesity inhibition of food-grade к- carrageenan by transcriptome / H. Zhang, R. L. Yang, F. Liu [et al.] // Food science & nutrition. - 2021. - V. 9. - №. 11. - P. 6232-6244.

224. The role of biomarkers of oxidative stress in breast cancer risk and prognosis: a systematic review of the epidemiologic literature / J. D. Lee, Q. Cai, X. O. Shu [et al.] // Journal of Women's Health. - 2017. - V. 26. - №. 5. - P. 467-482.

225. Therapeutic effects of fucoidan: A review on recent studies / S. Luthuli S, S. Wu, Y. Cheng [et al.] // Marine Drugs. - 2019. - V. 17. - №. 9. - P. 487.

226. Thomson, A.W. Carrageenan: a review of its effects on the immune system / A.W. Thomson, E. F. Fowler //Agents and Actions. - 1981. - V. 11. - №. 3. - P. 265-273.

227. Tobacman, J. K. Review of harmful gastrointestinal effects of carrageenan in animal experiments / J. K. Tobacman // Environmental health perspectives. - 2001. - V. 109. - №. 10. -P. 983-994.

228. Torres, M. D. Integral utilization of red seaweed for bioactive production / M. D. Torres, N. Florez-Fernandez, H. Dominguez // Marine drugs. - 2019. - V. 17. - №. 6. - P. 314.

229. Torres, M. D. Thermal reversibility of kappa/iota-hybrid carrageenan gels extracted from Mastocarpus stellatus at different ionic strengths / M. D. Torres, F. Chenlo, R. Moreira // Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers. - 2017. - V. 71. - P. 414-420.

230. Tracing the silhouette of individual cells in S/G2/M phases with fluorescence / A. Sakaue-Sawano, K. Ohtawa, H. Hama [et al.] // Chemistry & biology. - 2008. - V. 15. - №. 12. -P. 1243-1248.

231. Ultrasound-assisted depolymerization of kappa-carrageenan and characterization of degradation product / M. G. Tecson, L.V. Abad, V. D. Jr. Ebajo [et al.] // Ultrasonics Sonochemistry. - 2021. - V. 73. - P. 105540.

232. Ultrasound-assisted extraction and structural characterization by NMR of alginates and carrageenans from seaweeds / L. Youssouf, L. Lallemand, P. Giraud [et al.] // Carbohydrate Polymers. - 2017. - V. 166. - P. 55-63.

233. Up to 5% food-grade K-carrageenan has no colitis risk for body (in Chinese with English abstract) / H. Zhang, F. Liu, R. L. Yang [et al.] // Modern Food Science and Technology. -2021a. - V. 37. - P. 28-35.

234. Validation of an automated microculture tetrazolium assay (MTA) to assess growth and drug sensitivity of human-tumor cell-lines / M. Alley, D. Scudiero, A. Monks [ et al.] // Proceedings of the American Association for Cancer Research. -1986. - V. 27. -P. 389-389.

235. Vallejo, M. J. Oxidative stress modulation and ROS-mediated toxicity in cancer: a review on in vitro models for plant-derived compounds / M. J. Vallejo, L. Salazar, M. Grijalva // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. - 2017. - T. 2017.

236. Vinculin, cell mechanics and tumour cell invasion / W. H. Goldmann, V. Auernheimer, I. Thievessen [et al.] // Cell biology international. - 2013. - V. 37. - №. 5. - P. 397-405.

237. Wang, J. Application of atomic force microscopy in microscopic analysis of polysaccharide / J. Wang, S. Nie // Trends in Food Science & Technology. - 2019. -V. 87. - P. 35-46.

238. Water-soluble polysaccharides from Ulva intestinalis: Molecular properties, structural elucidation and immunomodulatory activities / M. Tabarsa, S. You, E. H. Dabaghian [et al.] // Journal of Food and Drug Analysis. - 2018. - V. 26. - №. 2. - P. 599-608.

239. Watt, J. Hyperplastic mucosal changes in the rabbit colon produced by degraded carrageenin / J. Watt, M. C. Path, R. Marcus // Gastroenterology. - 1970. - V. 59. - №. 5. -P. 760-768.

240. Weiner, M. L. Food additive carrageenan: Part II: A critical review of carrageenan in vivo safety studies / M. L. Weiner // Critical reviews in toxicology. - 2014. - V. 44. - №. 3. -P. 244-269.

241. Wnt/beta-catenin signaling in embryonic stem cell converted tumor cells / X. Peng, T. Liu, Y. Wang [et al.] // Journal of Translational Medicine. - 2012. - V. 10. - №. 1. - P. 1-9.

242. Wnt-beta-catenin pathway signals metastasis-associated tumor cell phenotypes in triple negative breast cancers / P. De, J. H. Carlson, H. Wu [et al.] // Oncotarget. - V.7, P. 43124-43149.

243. Wu, S. J. Degradation of K-carrageenan by hydrolysis with commercial a-amylase / S. J. Wu // Carbohydrate polymers. - 2012. - V. 89. - №. 2. - P. 394-396.

244. Yasueda, A. Efficacy and interaction of antioxidant supplements as adjuvant therapy in cancer treatment: a systematic review / A. Yasueda, H. Urushima, T. Ito // Integrative cancer therapies. - 2016. - V. 15. - №. 1. - P. 17-39.

245. Yermak, I. M. Current trend of marine carbohydrate-containing compounds with medicinal properties / I. M. Yermak, V. N. Davydova // Marine Drugs. - 2021. - V. 19. - №. 6. - P. 331.

246. K-Carrageenan enhances lipopolysaccharide-induced interleukin-8 secretion by stimulating the Bc110-NF-kB pathway in HT-29 cells and aggravates C. freundii-induced inflammation in mice / W. Wu, Z. Zhen, T. Niu [et al.] // Mediators of Inflammation. - 2017. -V. 2017.

247. X-Carrageenan improves the antitumor effect of dendritic cellbased vaccine / J. Li, A. Aipire, J. Li [et al.] // Oncotarget. - 2017. - V. 8. - №. 18. - P. 29996.