Антиагрегантная и проагрегантная активность некрахмальных полисахаридов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат наук Шокур, Ольга Андреевна

• Шокур, Ольга Андреевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Шокур, Ольга Андреевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ГЕМОСТАЗА 11 НЕКРАХМАЛЬНЫМИ ПОЛИСАХАРИДАМИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Структура и свойства некрахмальных полисахаридов

1.1.1. Пектины

1.1.2. Альгиновая кислота и ее соли

1.1.3. Каррагинаны

1.1.4. Фукоидаиы

1.1.5. Хитозан

1.2. Прокоагулянтная и антикоагуляптиая активность некрахмальных полисахаридов

1.3. Протромботичсская и антитромботическая активность некрахмальных полисахаридов

1.4. Проагрегантная и антиагрегантная активность некрахмальных полисахаридов

Заключение

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Получение и характеристика экспериментальных образцов

2.2. Стандартизация полученных образцов

2.3. Оценка анти- и проагрегантной активности некрахмалыгых

полисахаридов и препаратов сравнения in vitro

2.4. Характеристика экспериментальных животных

2.5. Определение влияния сульфатированных некрахмальных полисахаридов на гемостаз в экспериментах in vivo

2.6. Определение антитромботической активности сульфатированных иекрахмальных полисахаридов на модели фотоплетизмографической ре-

гистрации артериального тромбоза сонной артерии крыс

2.7. Статистическая обработка результатов

Глава 3. АНТИ- И ПРОАГРЕГАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКРАХМАЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ IN VITRO

3.1. Характеристика экспериментальных образцов

3.2. Изменение спонтанной агрегации тромбоцитов под действием пекти-

и о в in vitro

3.3. Изменение индуцированной агрегации тромбоцитов под действием пектинов in vitro

3.4. Изменение спонтанной агрегации тромбоцитов под действием альги-натов in vitro

3.5. Изменение индуцированной агрегации тромбоцитов под действием альгинатов in vitro

3.6. Изменение спонтанной агрегации тромбоцитов под действием карра-гинанов in vitro

3.7. Изменение индуцированной агрегации тромбоцитов под действием каррагипанов in vitro

3.8. Изменение спонтанной агрегации тромбоцитов под действием фукои-дана in vitro

3.9. Изменение индуцированной агрегации тромбоцитов под действием

фукоидана in vitro

Глава 4 ВЛИЯНИЕ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ НА ГЕМОСТАЗ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

4.1. Влияние сульфатированпых полисахаридов на гемостаз у экспериментальных животных при пероральном введении

4.2. Антикоагулянтная и антиагрегантная активность фукоидана из бурой водоросли Sacharina japónica in vivo

4.3. Разработка оригинального способа диагностики экспериментального тромбоза у лабораторных животных

4.4. Антитромботическая активность сульфатированпых пекрахмальных

полисахаридов на модели фотоплетизмографической регистрации артери-

ального тромбоза сонной артерии крыс

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АДФ - аденозиндифосфат AT-III - антитромбин III

АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

МГДФ - мета-гидроксидифенил

ОТП - обогащенная тромбоцитами плазма

Г1В - протромбиновое время

ТВ - тромбиновое время

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота (этилендиаминтетраацетат)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Антиагрегантная и проагрегантная активность некрахмальных полисахаридов»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Основным фактором риска нарушений деятельности сердечно-сосудистой системы является патологическая активация тромбоцитов, которая приводит к тромбоэмболическим осложнениям (Weyrich, Zimmerman, 2004; Gawaz et al. 2005). Эти осложнения являются причиной смерти или хронических заболеваний, которые ограничивают качество жизни, являются причиной нетрудоспособности и, как следствие, приводят к высоким расходам па терапию и уход (Липовецкий, 2012; Crea, Liuzzo, 2013; Tardif et al., 2013).

Ключевым механизмом формирования тромба является повышенная склонность тромбоцитов к агрегации, и этот факт стал патофизиологическим обоснованием для создания и клинического применения лекарственных препаратов ингибиторов агрегации тромбоцитов, или антиагрегантных средств (Schneider, 2011 ; Smyth, 2011; Angiolillo, 2012). Механизм действия этих веществ может быть обусловлен угнетением синтеза простагландинов за счет ацетилирования циклокси-геназы арахидоновой кислоты с последующим снижением уровня тромбоксана А2 в тромбоцитах (ацетилсалициловая кислота), либо ипгибированием P2Y12 рецепторов (клопидогрель), либо подавлением самих гликопротеиновых рецепторов Ilb/IIIa, расположенных на мембране тромбоцитов (абциксимаб, эптифибатид, ти-рофибан) (Gomes, Verheugt, 2003; Karha, Cannon, 2008; Hagemeycr, Peter, 2010; Ueno et al., 2010; Picker, 2013).

Имеющиеся в арсенале современной фармакологии ингибиторы агрегации 'тромбоцитов доказали свою эффективность при проведении первичной и вторичной профилактики инфаркта миокарда и ишемического инсульта и в лечении острого коронарного синдрома (Sanmuganathan et al., 2001; Boersma et al., 2002; Thiele et al., 2012; Aradi et al., 2013; Sutcliffe et al., 2013). Вместе с тем, в той или иной степени применение антиагрегантных средств сопряжено с риском нежелательных эффектов и осложнений, таких как желудочно-кишечные кровотечения, диспепсические расстройства, поражение периферической нервной системы, аллергические реакции, тромбоцитопепия (Cerbone, 2009; Chan et al., 2012; Tsai et

al., 2012). Больше того, для этих средств имеются противопоказания, существенно ограничивающие их применение (Cattaneo, 2008; Inzitari et al., 2010). Все это, а также нередко встречающиеся случаи резистентности к асиирипу и клогшдогрелю (Musallam et al., 2011) ставят перед фармакологами и фармацевтами актуальную задачу поиска новых и безопасных средств, предназначенных для лечения и предупреждения тромботических поражений сосудов.

Углеводные биополимеры, составляющие группу пекрахмальных полисахаридов, характеризуются широким спектром обнаруженных у них фармакологических эффектов, низкой токсичностью и высокой степенью безопасности (de An-drade Moura et al., 2001; Mayer, Hamman, 2004; Mousa, 2010; Vilahur, Badimon, 2013). К таким соединениям относятся пектины, альгииаты, фукоиданы, карраги-наны, хитозапы. Показано, что эти полисахариды обладают умеренной гипохолс-стеринемической, гипотриглицеридемической и гипогликемической активностью и способностью влиять на ключевые звенья регуляции гемостаза (Хотимчепко и др., 2001а, б, 2005; Panlasigui et al., 2003; Оводов, 2009; Хотимченко, 2009; Ustyuzhanina et al., 2013). Некоторые высокосульфатированные полисахариды, выделенные из морских водорослей, по антикоагулянтиой активности не уступают гепарину (Parias et al., 2000; Cicala et al., 2007; Cipriani et al., 2009; de Azevedo et al., 2009) и рассматриваются в качестве перспективных источников прямых антикоагулянтов (Camara et al., 2011). Вместе с тем, в отношении эффектов растительных полисахаридов па процессы агрегации тромбоцитов имеющаяся литература противоречива. В одних случаях образцы полисахаридов проявляли про-тромботические и проагрегаптпые свойства (de Azevedo et al., 2009; Hagimori ct al., 2009; Rodrigues et al., 2011; Manne et al., 2013), в других, наоборот, оказывали антитромботическую и аптиагрегантную активность (Zhu el al., 2010; Chen et al. 2011; Zhao et al., 2012; Bijak et al., 2013; Sokolova et al., 2013b). В настоящей работе на одних и тех же экспериментальных моделях проведена сравнительная количественная оценка проагрегантпых и аптиагрегантпых свойств у представителей всех групп растительных некрахмальных полисахаридов: пектинов, альгипатов, каррагиианов и фукоидапов.

Цель работы: установление закономерных связей структуры некрахмаль-пых полисахаридов с их проагрегантиой и аптиагрегаптпой активностью, как теоретической основы для разработки новых лекарственных препаратов, предназначенных для применения в качестве аптиагрегантпых средств.

Задачи работы:

1. изучить влияние пектинов, альгинатов, каррагинаиов и фукоиданов па спонтанную агрегацию тромбоцитов человека;

2. изучить влияние пектинов, альгинатов, каррагинаиов и фукоидаиов па агрегацию тромбоцитов человека, индуцированную АДФ, коллагеном и адреналином;

3. исследовать воздействие фукоиданов на агрегацию и коагуляцию крови у экспериментальных животных при парентеральном введении;

4. исследовать воздействие каррагинаиов и фукоиданов на показатели агрегации и коагуляции крови у экспериментальных животных при пероральпом введении;

5. оценить аптитромботический потенциал образцов фукоидана на модели острого артериального тромбоза.

Научная новизна и теоретическое значение работы. Проведена сравнительная количественная оценка проагрегантиой и аптиагрегаптпой активности у представителей всех групп растительных некрахмальпых полисахаридов: пектинов, альгинатов, каррагинаиов и фукоиданов. Проведен анализ зависимости уровня агрегационной активности некрахмальпых полисахаридов от химической структуры и молекулярной массы. Установлены наиболее эффективные образцы некрахмальпых полисахаридов в отношении аптиагрегаптпой и проагрегантиой активности.

Теоретическое значение работы заключается в установлении новых закономерных связей структуры и физико-химических свойств некрахмальпых полисахаридов с их аптиагрегаптпой и проагрегантиой активностью.

Практическая значимость исследования. Препараты некрахмальных полисахаридов можно рассматривать в качестве дополнительных средств в ком-

нлексном лечении заболеваний, сопровождающихся тромбоэмболическими нарушениями. Полученные экспериментальные данные являются основой для более глубоких доклинических исследований и клинических испытаний новых фармацевтических субстанций, обладающих аптикоагуляптной и антитромботиче-ской активностью.

Разработан точный, легко воспроизводимый и высокоэффективный в исполнении способ диагностики артериального тромбоза у лабораторных животных, основанного на анализе формы объемной пульсовой волны, регистрируемой фо-топлегизмографическим методом.

Внедрение результатов. Установка для регистрации артериального тромбоза внедрена в лабораторию фармакологии Института биологии моря им. Д.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук (ИБМ ДВО РАН) как инструмент для дальнейшего изучения антитромботических, антиагрегатных и профибринолитических свойств фармакологических веществ (акт внедрения от 12 ноября 2013 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Сульфатированпые некрахмальные полисахариды способны оказывать двойной эффект на агрегацию: повышают спонтанную агрегацию и ослабляют индуцированную.

2. Механизм аптитромбоцитарного действия сульфатированных полисахаридов при индуцированной агрегации обусловлен конкурентными взаимоотношениями с эндогенными агопистами рецепторов на тромбоцитах.

Апробация работы. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на отчетной конференции в рамках целевой комплексной программы фундаментальных научных исследований ДВО РАН (Перспективные направления развития наиотехпологий в ДВО РАН): «Получение, исследование и моделирование биогенных и биомиметических наноструктурированных материалов» (Владивосток, 2010), IV Съезде фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 2012), Международной научно-практической конференции «Тенденции и инновации современной науки» (Краснодар, 2012), IX, X Дальне-

восточном региональном конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Владивосток, 2012, 2013), Юбилейном XX Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2013), IX Международной научно-практической конференции «Новые достижения европейской науки» (София, 2013), V Международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине», (Санкт-Петербург, 2013), XVIII Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека», (Самара, 2013).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, из них 5 статей в изданиях, рекомендованных перечнем ВАК.

Личный вклад автора. Лично автором проделан основной объем работ по выделению, очистке, характеристике экспериментальных образцов полисахаридов, разработке дизайна экспериментов, планированию и проведению опытов с животными и исследований in vitro, систематизации, анализу экспериментальных данных, статистической обработке результатов, обобщению литературных данных по теме диссертации. Оригинальный метод регистрации количественных параметров экспериментального тромбоза на крысах разработан совместно со старшим научным сотрудником лаборатории биофизики клетки Института биологии моря им. A.B. Жирмунского ДВО РАН к.б.н. A.A. Карпенко.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена па 128 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, двух глав исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы.

Текст диссертации иллюстрирован 17 таблицами и 40 рисунками. Список лите-ратуры включает наименование 277 первоисточников.

Благодарности. Автор благодарит сотрудника Института биологии моря им. A.B. Жирмунского ДВО РАН Карпенко Александра Александровича за помощь в разработке способа диагностики экспериментального тромбоза у лабораторных животных.

ГЛАВА 1.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ГЕМОСТАЗА НЕКРАХМАЛЬНЫМИ ПОЛИСАХАРИДАМИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1Л. Структура и свойства нскрахмальных полисахаридов

Некрахмальные полисахариды представляют собой макромолекулы, состоящие более чем из 10-ти мономерных единиц, соединенных друг с другом О-гликозидпыми связями. Они являются основными компонентами клеточных стенок и межклеточного вещества растений (Craigie, 1990; Cummings, Stephen, 2007).

К пекрахмальным полисахаридам высших растений относят целлюлозу, ге-мицеллюлозу, пектин, арабиноксилапы, Р-ппокан, глюкомаппаны и камеди. Некрахмальные полисахариды водорослей включают агар, альгинат, каррагинап и фукоидап. Последние два являются сульфатированиыми полисахаридами. Суль-фатированные полисахариды - сложные гетерогенные полианиопы, образованные из повторяющихся углеводных единиц, и отрицательно заряжены благодаря наличию сульфатных групп (Rodrigues et al., 2010). Сульфатировапные галактаны находятся в красных водорослях (Pereira et al., 2005; Silva et al., 2010; Amorim et al., 2011), сульфатировапные фукапьт содержатся в бурых водорослях (Berteau, Mulloy, 2003; de Azevedo et al., 2009; Fitton, 2011) и, наконец, арабипо-галактапы наиболее часто встречаю'гся в зеленых водорослях (Ciancia et al., 2007; Zhang et al., 2008). Хитозан является единственным представителем нскрахмальных полисахаридов, который входит в состав скелета членистоногих, и его получают из панцирей ракообразных путем деацетилироваиия хитина (Knaul et al., 1999).

Некрахмальные полисахариды относятся к пищевым волокнам. Этот термин объединяет множество углеводов, обладающих физиологически полезным эффектом на здоровье, а также определяет продукты, которые могут быть частью здоровой диеты. Комитет кодекса по питанию и пищевым продуктам для диетического питапия (CCNFSDU, the Codex Committee on Nutriotion and Foods íor Special

Dietary Uses, 2009) определят пищевые волокна как углеводные полимеры с десятью или более мономерными остатками, которые не гидролизуются эндогенными энзимами в тонком кишечнике человека и находятся в составе потребляемой пищи, производятся из пищевого сырья, или являются синтетическими углеводными полимерами, имеющими доказанную физиологическую пользу для здоровья (Phillips, 2011). Некрахмальпые полисахариды способствуют быстрому насыщению, снижению уровня холестерина и сахара в крови, увеличению объема химуса, а также обладают пребиотическими свойствами (Cummings, Stephen, 2007).

Классификация пищевых углеводов основывается на размере молекул и определяется степенью полимеризации, типом связи и характеристикой отдельных мономеров. Химическая классификация необходима для согласованного измерения и маркировки, она создает основу для терминологии и понимания физиологических воздействий па организм. Некрахмальные полисахариды могут образовывать как линейные, так и разветвленные цепи. Важную роль в определении физических свойств и способности полисахаридов образовывать ассоциации с другими полисахаридами и белками играют боковые углеводные цепи и конфигурация их гликозидпых связей (Хотимченко и др., 2005).

Некрахмальные полисахариды являются самыми разнообразными из всех групп углеводов и содержат смесь многих молекулярных форм, среди которых широко распространенной структурой является линейная цепочка (31-4-связанпого ппокана (Phillips, 2011).

1.1.1. Пектины

Пектины являются полимерами с наиболее изученной химической структурой. Они состоят из остатков £)-галактуроповой кислоты, которые соединены друг с другом а(1-4)-связыо (Рис. 1). Сложная структура пектина включает три основные части: гомогалактоуронан, рамногалактоуронап I и рамногалактоуронан II (Ridley et al., 2001; Round et al., 2010). Гомогалактоуронан представляет собой a-(1-4)связанные остатки £)-галактуроновой кислоты с разнообразной степенью ме-

тилэтерификации. Рамногалактоуронан I состоит из (1-2)-а-£-рампозил-(1-4)-дисахаридных остатков a-D-галактуроповой кислоты. Рамногалактоуронан II -это скелет гомогалактоуронана со сложными боковыми цепями (Ridley, 2001; Round et al., 2010).

Часть остатков галактуроповой кислоты является метил-этерифицироваиной в положении С-6 и/или Оацетилированной в положениях С-2 и С-3. Различают высокоэтерифицированпые и низкоэтерифицированные пектины, или высокометоксилированпые и низкометоксилированные пектины, соответственно (Рис. 1). Степень этерификации тем выше, чем больше групп этерифици-рованы метиловым спиртом в полимерной цепочке пектина. К высокоэтерифици-ровапным пектипам относятся пектины со степенью этерификации более 50%, к низкоэтерифицировапным - менее 50% (обычно 30-40%)) (Schols, Voragen, 1996). В природных пектинах более половины карбоксильных групп галактуроповой кислоты этерифицированы метиловым спиртом, поэтому из растительного сырья получают высокоэтерифированные пектины. Для того, чтобы получить низкоэтерифицированные пектины, природные полисахариды подвергают деэтерифика-ции. Таким образом можно получать препараты пектинов с заданными физико-химическими свойствами.

Основными источниками коммерческого пектина являются яблочные выжимки и кожура цитрусовых плодов (Thalcur et al., 1997). Молекулярная масса пектинов составляет около 80000 Да, что соответствует примерно 400 остаткам галактуроповой кислоты (Mohnen, 2008).

С

I

С

но

н

он н

соон

НО — С — н

I

Н — С — ОН

I

СООН

А - галактуроновая кислота

кь

н 1

о\ н

н

о

/

он

н он

Б - циклическая молекула

галактуроновои кислоты

н он

н он

соон

н он

СООСНз

В - полимерная цепочка высокоэтерифицированного пектина со степенью этери-фикации 75% (карбоксильные группы трех пиранозных колец из четырех этери-фицированы метиловым спиртом)

соон

соон

Н ОН СООН н ОН СООСН з

Г - полимерргая цепочка низкоэтерифицировапного пектина со степенью этери-фикации 25%.

Рис. 1. Схема строения пектина.

1.1.2. Альгиновая кислота и ее соли

Альгиновая кислота и ее соли встречаются главным образом в морских бурых водорослях (РЬаеорЬу1а), в которых они составляют основную часть полисахаридов, достигая 40% сухой массы, а также в красных водорослях семейства

Corallinaceae. Бактерии родов Azotobacter и Pseudomonas также способны продуцировать альгиновые кислоты. Альгиновая кислота состоит из остатков ß-D-манпуроиовой и a-L-гулуроповой кислот, соединенных (1-4)-связями (Рис. 2) (Усов, 1999). Альгипаты имеют множество свободных гидроксильных и карбоксильных групп, распределенных вдоль основной цепи полимера, и в отличие от нейтральных полисахаридов имеют два типа функциональных групп, которые могут быть модифицированы (Yang, 2011). Повторяющиеся мономеры гулуроно-вой кислоты образуют G блоки, манпуроповой кислоты - M блоки. Между собой альгиновые кислоты различаются молекулярной массой, процентным соотношением маппуроновой и гулуроновой кислот (М и G блоки) и распределением мо-померных звеньев вдоль цепи полимера (Andriamanantoanina, Rinaudo, 2010). Различная жесткость блоков, образованных остатками маппуроновой и гулуроновой кислот объясняет различия в молекулярной копформации этих двух гомополимс-ров. Альгииат, содержащий остатки одной только маппуроновой кислоты, остается в растворе в виде клубков, а введение в макромолекулу остатков гулуроновой кислоты приводит к формированию сетчатой структуры (Щипупов, Постнова, 2006). Блочная структура альгипатов определяет механизмы формирования и свойства их водорастворимых полиэлектролитиых комплексов с катиоппыми производными, способность к гелеобразовапию и биологическую активность (Усов, 1999; Щипупов, Постпова, 2006; Lee, Mooney, 2012).

G-блоки углеводных цепей могут взаимодействовать с двухвалентными катионами, такими как кальций, магний, стронций и барий (Pawar, Edgar, 2012) и, за счет формирования структур, именуемых «egg-box» («упаковка для яиц») обеспечивать переход системы в состояние геля (Donati, Paoletti, 2009). Альгииатный гель не образуется, если содержание гулуроновой кислоты меньше 20-25%. Аль-гинатные гели термически необратимы.

Физические характеристики гелевой системы зависят от химического состава альгипатов (соотношения и расположения G и M блоков), молекулярной массы полимеров, концентрации и типа катионов, температуры, pH. Так, гели, полученные с использованием бария или стронция, более прочные, чем гели на ос-

нове хлорида кальция. Введение ионов кальция в состав солей СаС03-£)-глюкопо-5-лактон или CaC03-GDL-CaS04, медленно высвобождающих кальций, позволяет замедлить процесс желирования и получить более однородную систему (Wong, 2004; Banerjee et al., 2009). Натриевая, магниевая и аммонийная соли альгиповой кислоты хорошо растворимы в воде, но вследствие большой молекулярной массы (100-500 кДа) образуют в ней вязкие, клейкие растворы. Альгинаты могут быть монокатиониыми и поликатионпыми, когда в образовании альгината участвую'1 катионы одного или нескольких металлов (Wong, 2004).

Полимерные гели альгинатов способны деградировать. На скорость их деградации влияет наличие дополнительных сшивок между цепями полисахаридов, концентрация двухвалептых ионов, химический состав и молекулярный вес полимеров. Для утраты материалом физических характеристик, таких как жесткость, осмотичность, достаточно потери катионов, обеспечивающих гелеобразное состояние системы (Кио, Ма, 2008; Banerjee et al., 2009). Выведение ионов кальция, обычно используемых при желировании полисахарида, происходит вследствие активности хелаторов (например, фосфатов), замещения другими ионами, например, ионами натрия и калия (Кио, Ма, 2008; Banerjee et al., 2009). Возможным решением проблемы может стать использование солей бария вместо кальция или введение ковалептных сшивок в материал (Кио, Ма, 2008).

н соон

Рис. 2. Схема строения альгиновой кислоты.

А - /,-гулуроновая кислота; Б - О-маннуроновая кислота; В - соединенные сс(1-4) связями остатки Х-гулуроновой кислоты; Г - соединенные (3(1-4) связями остатки £)-маннуроновой кислоты.

1.1.3. Каррагинаны

В основе молекул каррагинанов лежит углеводная цепь, построенная из чередующихся остатков (3-£)-галактопиранозы и а-£)-галактопиранозы. Эти остатки могут частично или полностью находиться в форме 3,6-ангидропроизводиого и содержать эфирные сульфатированные группировки в различных положениях (Усов, 2001).

Известно около 20 видов каррагинанов. Шесть из них обладают регулярной последовательностью в виде повторяющихся дисахаридных звеньев. В зависимости от содержания 3,6-ангидрогалактозы, количества и расположениея сульфат-

пых групп эти полисахариды относят к мю- (ц), каппа- (к), ню- (v), йота- (i), лямбда- (А.), те та- (0) или кси- (£) каррагипапам (Рис. 3).

Для большинства каррагипанов характерно молекулярно-массовое распределение от 500 ООО до 1 ООО ООО Да (Lecacheux et al., 1985), при этом они могут содержать до 25% полисахарида с молекулярной массой меньше 100 ООО Да. Вязкость водных растворов каррагииапов зависит от типов и молекулярной массы полисахарида, присутствия ионов и температуры; вязкость растворов каррагинапа уменьшается при повышении температуры и увеличении ионной силы раствора (Iieyraud et al., 1990).

Большинство каррагипанов обладают способностью образовывать гели при взаимодействии с белками, в присутствии катионов определенного размера, например, калия, натрия и кальция. Механизмы желирования каррагипанов связаны с агрегацией полимерных цепочек в двойные спирали но мере охлаждения растворов. При этом гели каррагипанов термически обратимы, поэтому их гели могут солюбилизироваться и вновь формироваться неоднократно при нагревании и охлаждении. Желирующие свойства каррагипанов усиливаются с уменьшением степени сульфатировапия и с повышением содержания З-б-О-ангидрогалактозы. Увеличение содержания последней от 28 до 35% при специальной щелочной обработке приводит к существенному повышению желирующих свойств каррагипа-новых полисахаридов (Chapman, Chapman, 1980). Способность каррагииапов к ге-леобразоваиию в водных растворах обеспечивает их широкое применение в пищевой и легкой промышленности, фармацевтической практике и биотехнологии.

0,S0

--о

Jkr

каппа-каррагипап

ОН

CH2OH

о

------CH2OS03

OSOj- L \ ^o

лямбда-каррагинан

0S0,

•03S0

иота-каррапшаи

Рис. 3. Схема строения каррагинанов.

1.1.4. Фукоиданы

Фукоиданы - сложный гетерогенный класс фукозосодержащих сульфатиро-ванньтх полисахаридов, локализованных во внеклеточном матриксе бурых водорослей, в яйцевых оболочках морских ежей и стенке тела кукумарии (Khotim-chenko, 2010). Основным компонентом молекул большинства фукоиданов служат остатки a-L-фукозы, этерифицированные серной кислотой (Усов, Билан, 2009). Показано, что главная цепь фукоиданов построена либо из а-1,3-связанных остатков фукозы либо из чередующихся дисахаридов, состоящих из а-1,3- и а-1,4-связанных остатков фукозы с разветвлениями, присоединенными в положении С2 фукопиранозного кольца (Рис. 4) (Patankar et al., 1993; Kusaykin et al., 2008; Jiao et al., 2011). В зависимости от структуры основной цепи фукоиданы могут быть сульфатированы в С2, С4 или в том и другом положениях, при этом некоторые фукоиданы могут быть одновременно и сульфатированы и ацетилированы (Chi-zhov et al., 1999; Bilan et al., 2002). Кроме фукозы различные виды фукозо-

сульфатированпых полисахаридов могут также содержать галактозу, маннозу, ксилозу, глюкозу и/или остатки пнокуроповой кислоты, как правило, в минорных количествах (Урвапцева, 2004; е1 а1., 2008; Ротт, Моигао, 2008). Близкие по структуре сульфатированные фукапы были выделены из студенистой оболочки яиц морских ежей и стеики тела голотурий, и в отличие от фукоидапов водорослей они характеризуются регулярной структурой и отсутствием ацетатных групп (Вепеаи, Ми11оу, 2003).

= S.OrorHoi СОСНз

R: = SO.; OI H

ОЗОз" H

Рис. 4. Общая структура фукоидапов из бурых водорослей.

Морская бурая водоросль Saccharina japónica (J.E. Areschoug, 1851) C.E. Lane, С. Mayes, Druehl et G.W. Saunders, 2006, широко используется в качестве сырьевого источника. Ее заготовка осуществляется в промышленных масштабах в морских акваториях азиатско-тихоокеанского региона (Fitton, 2011). Структура фукоидапа, выделенного из этой водоросли, хорошо изучена. Установлено, что главная цепь фукоидапа из S. japónica построена из остатков L-фукопирапозы, 75% которых связаны между собой а-1,3-связыо, 25%> соединены а-1,4 связью (Wang et al., 2010a). Боковые цепи (3-£)-галактопирапозы находятся в положении С4 a-L-фукопиранозы (35%), а фукозные остатки - преимущественно в положении С2 (65%). Фукоза является преобладающим моносахаридом, однако, фукои-дап также обогащен галактозой, содержание которой может достигать 25-29% (Нопуа et al., 1999; Xue et al., 2001; Zvyagintseva et al., 2003). Обнаружено присутствие небольшого количества нейтральных Сахаров, таких как мапноза, глюкоза, рампоза, ксилоза и арабипоза (Xue et al., 2001; Кузнецова и др., 2006; Wang et al., 2010а). Соотношение сульфатных групп к фукозе составляет от 1:1 до 1:3 (Нопуа

et al., 1999; Xue et al., 2001 ; Zvyagintseva et al., 2003; Кузнецова и др., 2006). Сульфатные группы занимают положения С4 и/или С2 в фукозе и СЗ и/или С4 в галактозе (Wang et al., 2010а). Сульфатные группы находятся как в аксиальном, так и в экваториальном положениях (Zvyagintseva et al., 1999, Li et al., 2008). Молекулярная масса пативного фукоидана достигает 200 кДа (Xue et al., 2001).

1.1.5. Хитозан

Предшественником хитозана является органический полисахарид хитин, N-ацстил-£)-глюкозамип, который составляет основу наружного скелета членистоногих, клеточных стенок грибов и является вторым по распространенности углеводом в природе (Рис. 5). Хитозан (1,4-связанпый 2-амино-2-деокси (3-£>-глюкап) - это продукт щелочного деацитилирования хитина (Рис. 6). Его молекулярная масса варьирует от 50 до 2000 кДа, но может достигать нескольких миллионов дальтои. Количество свободных аминогрупп определяет степень деацитилирования хитозана, его общий положительный заряд и, соответственно, базовые физико-химические свойства полисахарида. Выраженная физико-химическая активность хитозана обеспечивается положительным зарядом, который несет молекула хитозана в положении С-2, в отличие от целлюлозы, которая в положении С-2 содержит гидроксильную группу. Это дает возможность хитозапу эффективно связываться с отрицательно заряженными молекулами, включая жиры, липиды, холестерин, ионы металлов, белки и макромолекулы (Li et al., 1992).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шокур, Ольга Андреевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Афанасьев С.П., Чирва В.Ю., Кацева Г.П. и др. Модификация титриметри-ческого метода анализа пектиновых веществ // Химия природ, соедин. 1984. № 4. С. 428-431.

2. Белушкина H.H., Дегтярева О.Г., Махлай A.A. и др. Рецепторы тромбоцитов - мишень для антиагрегационпой терапии // Молекулярная медицина. 2011. №

3. С. 10-17.

3. Воронина Е. П., Филипепко M.JL, Сергеевичсв Д.С., Г1икалов И. В. Мембранные рецепторы тромбоцитов: функции и полиморфизм // Вестник ВОГиС. 2006. Т. 10. №3. С. 553-564

4. Гржибовский A.M. Типы данных, проверка распределения и описательная статистика // Экология человека. 2008 а. № 1. С. 52-58.

5. Гржибовский A.M. Анализ количественных данных для двух независимых групп // Экология человека. 2008 б. № 2. С.54-61.

6. Гржибовский A.M. Одномерный анализ повторных измерений // Экология человека. 2008 в. № 4. С.51 -60.

7. Закревская А.Л. Тромбоциты крыс как модель исследования ингибиторов агрегации //Патологии. Функциоп. Системы гемостаза. Л., 1990. С. 46-54.

8. Западшок И.П., Западшок В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные // Киев: «Вища школа». 1974. 303 с.

9. Иванов И.С., Сидехмепова A.B., Смольякова В.И. и др. Антитромбогенная активность липовертипа па модели венозного тромбоза крыс // Medline.ru. Российский биомедицинский журнал. 2010. Т. 11. № 2-2. С. 590-596.

10. Копдашевская М.В. Современные представления о роли гепарина в гемостазе и решуляции ферментативной и гормональной активности // Вестник Российской Академии медицинских наук. 2010. N 7. С.35-43.

11. Кузнецова Т.А., Беседнова II.П., Урванцева A.M. и др. Сравнительное исследование биологической активности фукоидапов из бурых водорослей // Вест-пик ДВО РАН. 2006. № 6. С. 105-110.

12. Липовецкий Б.M. Дислипидемии, атеросклероз и их связь с ишемической болезиыо сердца и сосудов // М.: Эко-Вектор, 2012. 112 с.

13. Оводов Ю.С. Современные представления о пектиновых веществах // Биоорганическая химия. 2009. Т. 35. № 3. С. 293-310.

14. Савицкая И.М., Фурманов Ю.А. Механизм гемостатического действия аль-гипатпых материалов // Клиническая хирургия. 1989. № 1. С. 17-19.

15. Удовиченко О.В., Галстян Г.Р. Алгоритмы выбора перевязочного материала для лечения синдрома диабетической стопы (на примере повязок фирмы Paul Hartmann) // Сахарный диабет. 2006. № 1. С. 46-52.

16. Урвапцева A.M., Бакунина И.Ю., Ким Н.Ю., и др. Выделение очищенного фукоидапа из природного комплекса с полифеполами и его характеристика // Химия растительного сырья. 2004. № 3. С. 15-24.

17. Усов А.И. Альгиновые кислоты и альгинаты: методы анализа, определения состава и установления строения//Успехи химии. 1999. Т. 68, № 11. С. 1051-1061.

18. Усов А.И. Проблемы и достижеиия в структурном анализе сульфатировап-ных полисахаридов красных водорослей // Химия растительного сырья. 2001. №2. С. 7-20.

19. Усов А.И., Билан М.И. Фукоидапы - сульфатироваииые полисахариды бурых водорослей // Успехи химии. 2009. Т. 78, № 8. С. 846-862.

20. Усов А.И., Смирнова Г.П., Клочкова Н.Г. Полисахаридный состав некоторых бурых водорослей Камчатки // Биооргап. химия. 2001. Т. 27, № 6. С. 444-448.

21. Хотимченко М.Ю. Гиполипидемическая активность пизкоэтерифицировап-пых пектинов при этаноловом поражении печени в эксперименте // Биология моря. 2009. Т.35, № 4. С. 302-305.

22. Хотимченко Ю.С., Ермак И.М., Бедняк А.Е. и др. Фармакология некрах-мальпых полисахаридов // Вестник ДВО РАН. 2005. № 1. С. 72-82.

23. Хотимченко Ю.С., Ковалев В.В., Савченко О.В., Зигашпина O.A. Физико-химические свойства, физиологическая активность и применение альгипатов -полисахаридов бурых водорослей // Биология моря. 2001 б. Т. 27, № 3. С. 151-162.

24. Хотимченко Ю.С., Кропотов А.В., Хотимченко М.Ю. Фармакологические свойства пектинов // Эфферентная терапия. 2001а. Т. 7, № 4. С. 22-36.

25. Щипупов Ю.А., Постнова И.В. роль блочной структуры альгината в формировании полиэлектролитных комплексов с катиопиыми производными гидрокси-этилцеллюлозы // Высокомолекулярные соединения. 2006. Т. 48. № 2. С. 285-291.

26. Ясницкий Б.Г., Безуглая Л.П., Дольберг Е.Б. Альгиновая кислота в фармации и медицине // Фармация. 1979. Т. 28. №6. С. 58-61.

27. Adhikari U., Mateu C.G., Chattopadhyay К. et al. Structure and antiviral activity of sulfated fucans from Stoechospermum marginatum II Phytochemistry. 2006. V. 67. P. 2474-2482.

28. Alban S., Franz G. Anticoagulant activities of b-1,3-glucansulfates in dependence on their molecular weight // Pure and Applied Chemistry. 1994. V. 66. P. 2403-2406.

29. Albuquerque I.R., Queiroz K.C., Alves L.G. et al. Heterofucans from Dictyota menstrualis have anticoagulant activity // Braz. J. Med. Biol. Res. 2004. V. 37. P. 167171.

30. Ale M.T., Maruyama Ii., Tamauchi IT., Miklcelsen J.D., Meyer A. Fucoidan from Sargassum sp. and Fucus vesiculosus reduces cell viability of lung carcinoma and melanoma cells in vitro and activates natural killer cells in mice in vivo II Int. J. Biol. Mac-romol. 2011. V. 49. P. 331-336.

31. Alwayn I.P., Appel J.Z., Goepfert C. et al. Inhibition of platelet aggregation in baboons: therapeutic implications for xenotransplantation // Xenotransplantation. 2000. V. 7. P. 247-257.

32. Amorim C.R.N., Rodrigues J.A.G., Holanda M.L. et al. Anticoagulant properties of a crude sulfated polysaccharide from the red marine alga Halymenia floresia (Clemente) C. Agardh // Maringa. 2011. V. 33, N. 3. P. 255-261.

33. Andriamanantoanina П., Rinaudo M. Relationship between the molecular structure of alginates and their gelation in acidic conditions // Polym Int. 2010. V. 59(11). P.1531-1541.

34. Angiolillo D.J. The evolution of antiplatelet therapy in the treatment of acute coronary syndromes: from aspirin to the present day // Drugs. 2012. V. 72, N. 16. P. 20872116.

35. Aradi D., Komocsi A., Vorobcsuk A., Serebruany V.L. Impact of clopidogrel and potent P2Y 12 -inhibitors on mortality and stroke in patients with acute coronary syndrome or undergoing percutaneous coronary intervention: a systematic review and meta-analysis//Thromb. Haemosl. 2013. V. 109. P. 93-101.

36. Awtry E.I I., Loscalzo J. Aspirin//Circulation. 2000. V. 101. P. 1206-1218.

37. Bachelet L., Bertholon I., Lavigne D. et al. Affinity of low molecular weight fu-coidan for P-selectin triggers its binding to activated human platelets // Biochimica et Biophysica Acta. 2009. V. 1790. P. 141-146.

38. Bae I.Y., Chang Y.J., Kim, Ii.W., Lee, H.G. Anticoagulant activity of sulfated barley b-glucan // Food Sciencc and Biotechnology. 2008. V. 17. P. 870-872.

39. Bae I.Y., Joe Y.N., Rha H.J. et al. Effect of sulfation on the physicochemical and biological properties of citrus pectins //Food Iiydrocolloids. 2009. V. 23 P. 1980-1983.

40. Baigent C., Blackwell L., Collins R., et al. Aspirin in the primary and secondary prevention of vascular disease: collaborative meta-analysis of individual participant data from randomised trials //Lancet. 2009. V. 373(9678). P. 1849-1860.

41. Banerjee A., Arha M., Choudhary S. et al. The influence of hydrogel modulus on the proliferation and differentiation of encapsulated neural stem cells // Biomaterials. 2009. V. 30. P. 4695-4699.

42. Bates S.M., Weitz J.I. Prevention of activation of blood coagulation during acute coronary ischemic syndromes: beyond aspirin and heparin // Carbohydr. Res. 1999. V. 41. P. 418-432.

43. Becker R.C. Platelet Biology: The Role of Platelets in Iiemostasis, Thrombosis and Inflammation // In: Deepak L.B. (Ed), Platelets in Cardiovascular Disease. Imperial. College. Press. 2008. P. 1-37.

44. Bekemeier H., Giessler A.J. Thrombosis induction by different carrageenans in rats and mice // Naturwissenschaften. 1987. V. 74. P. 345-346.

45. Bekemeicr H., I-Iirschelmann R., Gicsslcr A.J. Carragcenin-induccd thrombosis in rats and mice: a model for testing antithrombotic substances? // Agents Actions. 1985. V. 16. P. 446-451.

46. Berteau O., Mulloy B. Sulfated fucans, fresh perspectives: structures, functions, and biological properties of sulfated fucans and an overview of enzymes active toward this class of polysaccharide // Glycobiology. 2003. V. 13, N. 6. P. 29-40.

47. Bertelli A, Giovannini L, Galmozzi G, Bertelli AAE. Protective role of propionyl carnitine in vascular disorders experimentally induced by endothelin (ET-1) serotonin and k-carrageenin // Drugs Exp. Clin. Res. 1993. V. 19. P. 7-11.

48. Bijak M., Saluk J., Tsirigotis-Maniecka M. et al. The influence of conjugates isolated from Matricaria chamomilla L. on platelets activity and cytotoxicity // Int. J. Biol. Macromol. 2013. V. 61. P. 218-229

49. Bilan M.I., Grachev A.A., Ustuzhanina N.E. et al. Structure of a fucoidan from the brown seaweed Fucits evanescens C.Ag. // Carbohydr. Res. 2002. V. 337. P. 719730.

50. Blair S.D., Jarvis P. Clinical trial of calcium alginate haemostatic swabs // British Journal of Surgery. 1990. V. 77(5). P. 568-570.

51. Blumenkrantz N., Asboe Hansen G. New method for quantitative determination of uronic acids // Anal Biochem. 1973. V. 54, N. 2. P. 484-489.

52. Boersma E., Harrington R.A., Molitemo D.J. et al. Platelet glycoprotein Ilb/HIa inhibitors in acute coronary syndromes: a meta-analysis of all major randomized clinical trials//Lancet. 2002. V. 359, N. 9302. P. 189-198.

53. Boisson-Vidal C., Chaubet F., Chevolot L. et al. Relationship between antithrombotic activities of Hicans and their structure // Drug Dev. Res. 2000. V. 51. P. 216-224.

54. Boisson-Vidal C., Haroun F., Ellouali M. et al. Biological activities of polysaccharide from marine algae // Drugs Fut. 1995. V. 20. P. 1237-1249.

55. Bokura H., Kobayashi S. Chitosan decreases total cholesterol in women: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial // Eur. L. Clin. Nutr. 2003. V. 57. P. 721-725.

56. Bom G. V. R. Quantitative investigation into the aggregation of blood platelets // The Journal of Physiology. 1962. V. 162. P. 67-68.

57. Broersma R.J., Kutcher L.W., Heminger E.F. The effect of thrombin inhibition in a rat arterial thrombosis model // Thromb. Res. 1991. V. 64. P. 405-412.

58. Broos K., Fcys H.B., De Meyer S.F., Vanhoorelbeke K., Deckmyn H., Platelets at work in primary hemostasis//Blood Reviews. 201 l.V. 25. P. 155-167.

59. Byankina A.O., Sokolova E.V., Anastyuk S.D. et al. Polysaccharide structure of tetrasporic red seaweed Tichocarpus crinitus II Carbohydrate Polymers. 2013. V. 98. P. 26-35.

60. Camara R.B.G., Costa L.S., Fidelis G.P. et al. Heterofucans from the Brown Seaweed Canistrocarpus cervicornis with Anticoagulant and Antioxidant Activities // Mar. Drugs. 2011. V. 9. P. 124-138.

61. Cao Z., Gilbert R.J., He W. Simple Agarose-Chitosan Gel Composite System for Enhanced Neuronal Growth in Three Dimensions // Biomacromolecules. 2009. V. 10. P. 2954-2959.

62. Carlucci M.J., Pujol C.A., Ciancia M. et al. Antiherpetic and anticoagulant properties of carragccnans from the red seaweed Gigartina slcottsbergii and their cyclized derivatives: Correlation between structure and biological activity // Int. J. Biol. Macromol. 1997. V. 20. P. 97-105.

63. Cattaneo M. Haemorrhagic stroke during anti-platelet therapy // Eur. J. Anaesthe-siol. Suppl. 2008. V. 42. P. 12-15.

64. Cerbone A.M., Macarone-Palmieri N., Saldalamacchia G. et al. Diabetes, vascular complications and antiplatelet therapy: open problems // Acta Diabetol. 2009. V. 46, N. 4. P. 253-261.

65. Challen A.D., Branch W.J., Cummings J.H. The effect of pectin and wheat bran on platelet function and haemostatis in man // Hum Nutr Clin Nutr. 1983. V. 37 (3). P. 209-217.

66. Chan F.K. Anti-platelet therapy and managing ulcer risk // J. Gastroenterol. Hepatol. 2012. V. 27, N. 2. P. 195-199.

67. Chandia N.P., Matsuhiro B. Characterization of a fucoidan from lessonia vadosa (phacophyta) and its anticoagulant and elicitor properties II Int. J. Biol. Macromol. 2008. V. 42, N.3. P. 235-240.

68. Chang Y.J., Lee S., Yoo M.A., Lee H.G. Structural and biological characterization of sulfated-derivatized oat b-glucan // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2006. V. 54. P. 3815-3818.

69. Chapman V.J. and Chapman D.J. Seaweeds and their uses. Third edition // London, New York: Chapman and I-Iall. 1980. P. 98-148.

70. Chen A., Zhang F., Shi J., Zhao X. Study on Antithrombotic and Antiplatelet Activities of Low Molecular Weight Fucoidan from Laminaria japonica // J. Ocean Univ. China (Oceanic and Coastal Sea Research). 2011. V. 11(2). P. 236-240.

71. Chevolot L., Foucault A., Chaubet F. et al. Further data on the structure of brown seaweed fucans: Relationships with anticoagulant activity // Carbohydr. Res. 1999. V. 319. P. 154-165.

72. Chizhov A.O., Dell A., Morris H.R. ct al. A study of fucoidan from the brown seaweed Chorda filum II Carbohydr. Res. 1999. V. 320. P. 108-119.

73. Chou T.-C., Fu E., Wu C.-J., Yeh J.-H. Chitosan enhances platelet adhesion and aggregation // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2003. V. 302. P. 480-483.

74. Chua T.K., Koh H.L. Medicinal Plants as Potential Sources of Lead Compounds with Anti-Platelet and Anti-Coagulant Activ // Mini Reviews in Medicinal Chemistry. 2006. V. 6. P. 61 1-624.

75. Church F. C., Meade J. B., Treanor E. R., Whinna H. C. Antithrombin activity of fucoidan. The interaction of fucoidan with heparin cofactor II, antithrombin III, and thrombin//J. Biol. Chem. 1989. V. 264 P. 3618-3623.

76. Ciancia M., Quintana I., Cerezo, A.S. Overview of anticoagulant activity of sulfated polysaccharides from seaweeds in relation to their structures, focusing on those of green seaweeds // Curr. Med. Chem. 2010. V. 17, N. 23. P. 2503-2529.

77. Ciancia M., Quintana I., Vizcarguenaga M. I. et al. Polysaccharides from the green seaweeds Codium fragile and C. vermilara with controversial effects on hemosta-sis // Int. J. Biol. Macromol. 2007. V. 41. P. 641-649.

78. Cicala C., Morello S., Alfieri A. et al. Haemostatic imbalance following carra-gcenan-induced rat paw oedema // Eur. J. Pharmacol. 2007. V. 577(1-3). P. 156-161.

79. Cipriani T.R., Gracher A.H.P., De Souza L.M. et al. Influence of molecular weight of chemically sulfated citrus pectin fractions on their antithrombotic and bleeding effects //Thromb. Iiaemost. 2009. V. 101(5). P. 860-866.

80. Clement M.J., Tissot B., Chevolot L. et al. NMR characterization and molecular modeling of fucoidan showing the importance of oligosaccharide branching in its anticomplementary activity // Glycobiology. 2010. Vol. 20. P. 883-894.

81. Coller B.S. GPIIb/IIIa antagonists: pathophysiologic and therapeutic insights from studies ofc7E3 Fab. //Thromb. Haemost. 1997. V. 78. P. 730-735.

82. Colliec S., Fischer A. M., Tapon-Bretaudiere J. et al. Anticoagulant properties of a fucoidan fraction //Thromb. Res. 1991. V. 64(2). V. 143-154.

83. Costa L.S., Fidelis G.P., Cordeiro S.L. et al. Biological activities of sulfated polysaccharides from tropical seaweeds // Biomed. Pharmacother. 2010. V. 64. P. 21-28.

84. Craigie J.S. Cell wall // In: Cole K.M. and Sheath G. (eds.), Biology of the Red Algae; Cambridge: Cambridge University Press, 1990. P. 221-257.

85. Crea F., Liuzzo G. Pathogenesis of acute coronary syndromes // J. Am. Coll. Cardiol. 2013. V. 61, N. l.P. 1-11.

86. Croci D.O., Cumashi A., Ushakova N.A. et al. Fucans, but not fucomannoglucu-ronans, determine the biological activities of sulfated polysaccharides from Laminaria saccharina brown seaweed // PLoS ONE. 2011. Vol. 6, N. 2. P. 1-10.

87. Crompton K. E., Tomas D., Finkelstein D. I. et al. Inflammatory response on injection of chitosan/GP to the brain // Journal of Materials Science-Materials in Medicine. 2006. V. 17. P. 633-639.

88. Crompton K.E., Goud J.D., Bellamkonda R.V. et al. Polylysine-functionalised thermoresponsive chitosan hydrogel for neural tissue engineering // Biomaterials. 2007. V. 28. P. 441-449.

89. Cumashi A., Ushalcova N.A., Preobrazhenskaya M.E.A. ct al. A comparative study of the antiinflammatory, anticoagulant, antiangiogenic, and antiadhesive activities of nine different flicoidans from brown seaweeds // Glycobiology. 2007. V. 17 P. 541 -552.

90. Cummings J.H., Stephen A.M. Carbohydrate terminology and classification // Eur. J. Clin. Nutr. 2007. V. 61(1). P. 5-18.

91. Dardik R., Savion N., Kaufmann Y., Varon D. Thrombin promotes platelet-mediated melanoma cell adhesion to endothelial cells under flow conditions: Role of platelet glycoproteins P-selectin and GPIIb-IIIA // Br. J. Cancer. 1998. V. 77(12). P. 2069-2075.

92. Davies M.S., Flannery M.C., McCollum C.N. Calcium alginate as haemostatic swabs in hip Fracture surgery //J. R. Coll. Surg. Edinb. 1997. V. 42, N. 1. P. 3 1-32.

93. de Andrade Moura L., Ortiz-Ramirez F., Cavalcanti D.N. et al. Evaluation of marine brown algae and sponges from Brazil as anticoagulant and antiplatelet products // Mar. Drugs. 2001. V. 9, N. 8. P. 1346-1358.

94. de Azevedo T.C.G., Bezerra M.E.B., Santos M.G.L. et al. Heparinoids algal and their anticoagulant hemorragic activities and platelet aggregation // Biomedicine & Pharmacotherapy. 2009. V. 63, N. 7. P. 477-483.

95. Deacon-Smith R.A., Lee-Potter J.P., Rogers D.J. Platelet aggregation in the presence of extracts of British marine algae // Med. Lab. Sei. 1985. V. 42. P. 404-405.

96. Dische Z., Shettles L.B. A specific color reaction of methylpentoses and a spec-trophotometric micromethod for their determination // J. Biol. Chem. 1948. V. 175, N. 2. P. 595-603.

97. Dobashi K., Nishino T., Fujihara M., Nagumo T. Isolation and preliminary characterization of fucose-containing.sulfated polysaccharides with blood-anticoagulant activity from the brown seaweed Hizikia fusiforme II Carbohydr. Res. 1989. V. 194. P. 315-320.

98. Dodgson K.S. Determination of inorganic sulphate in studies on the enzymicand non-enzymic hydrolysis of carbohydrate and other sulphate esters // Biochem. J. 1961. V. 78. P. 312-319.

99. Donati I., Paoletti S. Material properties of alginates // In Alginates: Biology and Applications. Rehm, B.Ii.A. (ed.). Berlin, Heidelberg, Genmany: Springer Berlin Heidelberg, pp. 2009. 1-53.

100. Dubois M., Gilles K.A., Hamilton J.K. et al. Colorimetric method for the determination of sugars and related substances // Anal. Chem. 1979. V. 28. P. 350-356.

101. Durand E., Helley D., Al I-Iaj Zen A. et al. Effect of low molecular weight fu-coidan and low molecular weight heparin in a rabbit model of arterial thrombosis // J. Vase. Res. 2008. V. 45(6). P. 529-537.

102. Dung J., Bruhn T., Zurbom K.Ii. et al. Anticoagulant fucoidan fractions from Fucus vesiculosus induce platelet activation in vitro // Thromb. Res. 1997. V. 85. P. 479-491.

103. Edashige Y., Murakami N.., Tsujita T. Inhibitory effect of pectin from the segment membrane of citrus fruits on lipase activity // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 2008. V. 54(5). P. 409-415.

104. Eitzman D. T., Wcstrick R. J., Nabel E. G., Ginsburg D. Plasminogen activator inhibitor-1 and vitronectin promote vascular thrombosis in mice // Blood. 2000. Vol. 95(2). P. 577-580.

105. Farias W.R.L. Valente A.P., Pereira M.S., Mourao P.A. Structure and anticoagulant activity of sulfated galactans. Isolation of a unique sulfated galactan from the red alga Botryocladia occidentalis and comparison of its anticoagulant action with that of sulfated galactans from invertebrates // J. Biol. Chem. 2000. V. 275, N. 38. P. 2929929307.

106. Farias W.R.L., Nazareth R.A., Mourao A.P.S. Dual effects of sulfated D-galactans from the Red Algae Botryocladia occidentalis preventing thrombosis and inducing platelet aggregation //Thromb. Haemost. 2001. V. 86. P. 1540-1546.

107. Farndale R.W. Collagen-induced platelet activation // Blood Cells Mol. Dis. 2006. V. 36(2). P. 162-165.

108. Fernandez P.V., Estevez J.M., Cerezo A.S., Ciancia M. Sulfated b-D-mannan from green seaweed Codium vermilara II Carbohydr. Polym. 2012. V. 87. P. 916-919.

109. Fisher T., Connolly R., Thatte M.S., Schwaitzberg S.S. Comparison of Structural and Hemostatic Properties of the Poly-N-Acetyl Glucosamine Syvek Patch With Products Containing Chitosan // Microscopy research and technique. 2004. V. 63. P. 168174.

110. Fitton J.H. Therapies from Fucoidan; Multifunctional Marine Polymers // Marine Drugs. 2011. V. 9, N. 10. P. 1731-1760.

111. Fonseca R.J., Santos G.R., Mourao P.A. Effects of polysaccharides enriched in 2,4-disulfated fucose units on coagulation, thrombosis and bleeding. Practical and conceptual implications//Thromb. I-Iacmost. 2009. V. 102(5). P. 829-836.

112. Fonseca R.J.C., Oliviera S.N., Melo M.R.S. et al. Slight differences in sulfatation of algal galactans account for differences in their anticoagulant and venous antithrombotic activities // Thromb. Haemost. 2008. V. 99, N. 3. P.539-545.

113. Gabbasov Z.A., Popov E.G., Gavrilov I.Yu., Posin E.Ya. Platelet aggregation: the use of optical density fluctuations to study microaggregate formation in platelet suspension //Thrombosis Research. 1989. V. 54, N. 3. P. 215-223.

114. Gallaher D.D., Gallaher C.M., Mahrt G.J. et al. A glucomannan and chitosan fiber supplement decreases plasma cholesterol and increases cholesterol excretion in overweight normocholesterolemic humans // J. Am. Coll. Nutr. 2002. Vol. 21. P. 428433.

115. Gama C.I., Tully S.E., Sotogaku N. et al. Sulfation patterns of glycosaminogly-cans encode molecular recognition and activity // Nat. Chem. Biol. 2006. V. 2. P. 467473.

116. Gawaz M., Langer H., May A.E. Platelets in inflammation and atherogenesis // J. Clin. Invest. 2005. V. 115, N. 12. P. 3378-3384.

117. Ghosh P., Adhikari U., Ghosal P.K. et al. In vitro anti-herpetic activity of sulfated polysaccharide fractions from Caulerpa racemosa II Phytochemistry. 2004. V. 65, N. 23. P. 3151-3157.

118. Glauser B.F., Rezende R.M., Melo F.R. et al. Anticoagulant activity of a sulfated galactan: scrpin-independent effect and specific interaction with factor Xa // Thromb. Haemost. 2009. V. 102(6). P. 1183-1193.

119. Gomes M.E., Verheugt F.W. Platelet aggregation inhibitors in prevention and treatment of coronary thrombosis //Neth. J. Med. 2003. V. 61, N. 6. P. 185-192.

120. Gracher A.PI.P., Cipriani T.R., Carbonero E.R., Gorin P.A.J., Iacomini M. Antithrombin and heparin cofactor II-mediated inactivation of a-thrombin by a synthetic, sulfated mannogalactan //Thromb. Res. 2010. V. 126, N. 3. P. 180-187.

121. Gresele P., Fuster V., Lopes J. A. et al. Platelets hematologic and cardiovascular disorders. //New York: Cambridge University press, 2008. 51 1 p.

122. Gu R., Sun W., Zhou FI. et al. The performance of a fly-larva shell-derived chi-tosan sponge as an absorbable surgical hemostatic agent // Biomaterials. 2010. V. 31. P. 1270-1277.

123. Gurbel P.A., Bliden K.P., Flayes K.M., Tantry U. Platelet activation in myocardial ischemic syndromes // Expert Review of Cardiovascular Therapy. 2004. V. 2. P. 535545.

124. Güven K.C., Ozsoy Y., Ulutin O.N. Anticoagulant, fibrinolytic and antiaggregant activity of carrageenans and alginic acid//Botanica marina. 1991. V. 34. P.429-432.

125. I-Iagemeyer C.E., Peter K. Targeting the platelet integrin GPIIb/IIIa // Curr. Phaarm. Des. 2010. V. 16, N. 37. P. 4119-4133.

126. Hagimori M., Kamiya S., Yamaguchi Y., Arakawa M. Improving frequency of thrombosis by altering blood flow in the carrageenan-induced rat tail thrombosis model // Pharmacol. Res. 2009. V. 60. P. 320-323.

127. Man F., Yao W., Yang X. et al. Experimental study on anticoagulant and antiplatelet aggregation activity of a chemically sulfated marine polysaccharide YCP // Int. J. Biol. Macromol. 2005. V. 36. P.201-207.

128. Hara II., Shimada H., Kitajima A., Tamao Y. Effect of (±)~2-(dimethylamino)-l-[[o-(m-methoxy-phenethyl)phenoxy]methyl]ethyl hydrogen succinate on experimental models of peripheral obstructive disease // Arzneim-Forsch/Drug Research. 1991. V. 41(6). P. 616-620.

129. Hayakawa K., Nagaminc T. Effect of fucoidan on the biotinidase kinetics in human hepatocellular carcinoma // Anticancer Res. 2009. V. 4. P. 1211-1217.

130. I-Iayakawa Y., Hayashi T., Lee J. B. et al. Inhibition of thrombin by sulfated polysaccharides isolated from green algae // Biochim. Biophys. Acta. 2000. V. 1543. P. 8694.

131. Heyraud A., Rinaudo M., Rochas C. Physical and chemical properties of phy-cocolloids // Introduction to Applied Phycology (ed. I.Akatsuka). The Hague, The Netherlands: SPB Academic Publishing, 1990. P. 151-176.

132. I-Ioltkamp A.D., Kelly S., Ulber R., Lang S. Fucoidans and fucoidanases - focus on techniques for molecular structure elucidation and modification of marine polysaccharides//Appl. Microbiol. Biotechnol. 2009. V. 82. P. 1-11.

133. Iionya M., Mori II., Anzai M. et al. Monthly changcs in the content of fucans, their constituent sugars and sulphate in cultured Laminaria japonica // Iiydrobiologia. 1999. V. 398/399. P. 411-416.

134. Huang R., Du Y., Yang J., Fan L. Influence of functional groups on the in vitro anticoagulant activity of chitosan sulfate // Carbohydrate Research. 2003. V. 338. P. 483-489.

135. Ibanez B., Vilahur G., Badimon J.J. Pharmacology of thienopyridines: Rationale for dual pathway inhibition // European Heart Journal, Supplement. 2006. V. 8. P. 3-9.

136. Inzitari D., Piccardi B., Sarti C. A critical review of aspirin in the secondary prevention of noncardioembolic ischaemic stroke // Int. J. Stroke. 2010. V. 5, N. 4. P. 306318.

137. Irhimeh M.R., Fitton J.H., Lowenthal R.M. Kongtawelert P. A quantitative method to detect fucoidan in human plasma using a novel antibody Methods Find // Exp. Clin. Pharmacol. 2005. V. 27. P. 705-710.

138. Irhimeh M.R., Fitton J.H., Lowenthal R.M. Pilot clinical study to evaluate the anticoagulant activity of fucoidan. Blood Coagul. Fibrinolysis. 2009. V. 20(7). P. 607-610.

139. Ishihara C., Shimakawa S., Tsuji M., Arikawa J., Tokura S. A sulfated chitin, SCM-chitin III, inhibits the clearance of human erythrocytes from the blood circulation in erythrocyte-transfused SCID mice // Immunopharmacology. 1995. V. 29. P. 65-71.

140. Ishikawa N., Suzuki Y., Ohia M. ct al. Peripheral nerve regeneration through the space formed by a chitosan gel sponge // Journal of Biomedical Materials Research Part A. 2007. V. 83A. P. 33-40.

141. Itzhaki R.F., Gill D.M. A micro-biuret method for estimating proteins// Analytical Biochemistry. 1964. V. 9, N. 4. P. 401-410.

142. Jiao G., Yu G., Zhang J., Ewart S.E. Chemical structure and bioactivities of sulfated polysaccharides from marine algae // Mar. Drugs. 2011. V. 9. P. 196-223.

143. Jurd K.M., Rogers D.J., Blunden G., McLellan D.S. Anticoagulant properties of sulphated polysaccharides and a proteoglycan from Codium fragile ssp. Atlanticum // J. Appl. Phycol. 1995. V. 7. P. 339-345.

144. Karha J., Cannon C.P. ADP Receptor Antagonists // In: Deepak L.B. (Ed), Platelets in Cardiovascular Disease. Imperial. College. Press. 2008. P. 87-125.

145. Khotimchenko M., Poleschuk T., Savchenko O., Shokur O. Comparative Lead-removing Activity of the Non-starch polysaccharides // J. Med. Sci. 2013. V. 13 (8). P. 647-656.

146. Khotimchenko M., Kovalev V., Kolenchenko E., Khotimchenko Y. Acidic method for the low molecular pectin preparation // International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 2012. V. 4 (1). P. 279-283.

147. Khotimchenko Y.S. Antitumor properties of nonstarch polysaccharides: Fu-coidans and chitosans//Russ. J. Mar. Biol. 2010. V. 36. P. 321-330.

148. Kim K.J., Lee O.H., Lec II.PL, Lee B.Y. A 4-week repeated oral dose toxicity study of fucoidan from the Sporophyll of Undaria pinnatifida in Sprague-Dawley rats // Toxicology. 2009. V. 267. 154-158.

149. Kim S.K., Wijesekara I. Anticoagulant effect of marine algae. Adv. Food Nutr. Res.//2011. V. 64. P. 235-244.

150. Kimura Y., Watanabe K., Okuda H. Effects of soluble sodium alginate on cholesterol excretion and glucose-tolerance in rats // J. Ethnopharmacol. 1996. V. 54. P. 4754.

151. Kindness G., Long W.F., Williamson F.B., Boyd J. Effects of carrageenans on the aggregation of human blood platelets //Thromb research. 1979. V. 15. P. 3-15.

152. Knaul J.Z., Hudson S.M., Creber K.A.M. Crosslinking of chiiosan fibers with di-aldehydes: Proposal of a new reaction mechanism // J. Polym. Sci. B: Polym. Phys. 1999. V. 37. P. 1079-1094.

153. Knopp R.H., Superko H.R., Davidson M. et al. Long-term blood cholesterol-lowering effects of a dietary fiber supplement // Am. J. Prev. Med. 1999. V. 17. P. 1823.

154. Kolender A.A., Pujol C.A., Damonte E.B., Matulewicz, M. C., Cerezo, A. S. The system of sulfated a-(l-3)-linked D-mannans from the red seaweed Nolhogenia fastigi-ata: Structures, antiherpetic and anticoagulant properties I I Carbohydr. Res. 1997. V. 304 P. 53-60.

155. Kuo C.K., Ma P.X. Maintaining dimensions and mechanical properties of ionical-ly crosslinked alginate hydrogel scaffolds in vitro // Journal of Biomedical Materials Research. Part A. 2008. V. 84A. P. 899-907.

156. Kurz K.D., Main B.W., Sandusky G.E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride // Thromb. Res. 1990. Vol. 60. P. 269-280.

157. Kusaykin M., Bakunina I., Sova V. et al. Structure, biological activity, and enzymatic transformation of fucoidans from the brown seaweeds // Biotechnol. J. 2008. V. 3. P. 904-915.

158. Kwak K.W., Cho K.S., Hahn O.J. et al. Biological effects of fucoidan isolated from Fucus vesiculosus on thrombosis and vascular cells // Korean J. Ilematol. 2010. V. 45(1). P. 51-57.

159. Lecacheux D., Panaras R., Brigand G., Martin G. Molecular weight distribution of carrageenans de size exclusion chromatography and low angle laser light scattering // Carbohydr. Polym. 1985. Vol. 5. P. 423-440.

160. Lee J.-B., Flayashi K., Plashimoto M. et al. Novel antiviral fucoidan from Sporo-phyll of Undaria pinnatifida (Mekabu) // Chem. Pharm. Bull. 2004. V. 52. N. 9. P. 1091-1094.

161. Lee K.Y., Mooney D.J. Alginate: Properties and biomedical applications // Progress in Polymer Science. 2012. V. 37(1). P. 106-126.

162. Li B., Lu I\, Wei X., Zhao R. Fucoidan: Structure and Bioactivity // Molecules. 2008. V. 13. P. 1671-1695.

163. Li LI., Mao W., Zhang X., et al. Structural characterization of an anticoagulant-active sulfated polysaccharide isolated from green alga Monostroma Icilissimum II Car-bohydr. Polym. 2011. V. 85. P. 394-400.

164. Li Q., Dunn E.T., Grandmaison E.W., Goosen M.F.A. Applications and properties of chitosan II J. Bioact. Compat. Polym. 1992. Vol. 7. P. 370-397.

165. Liu T., Scallan C.D., Broze Jr. G.J. et al. Improved coagulation in bleeding disorders by Non-Anticoagulant Sulfated Polysaccharides (NASP) // Thromb Flaemost. 2006. V.95. P. 68-76.

166. Maaroufi R.M., Giordano P., Triadou P. et al. Effect of oversulfated dermatan sulfate derivatives on platelet aggregation // Thromb Res. 2007. V. 120, N. 4. P. 615621.

167. Maas N.C., Gracher A.II.P., Sassaki G.L. et al. Sulfation pattern of citrus pectin and its carboxy-reduced derivatives: Influence on anticoagulant and antithrombotic effects // Carbohydrate Polymers. 2012. V. 89. P. 1081-1087.

168. Makarenkova I.D., Deriabin P.G., L'vov D.K., Zviagintseva T.N., Besednova N.N. Antiviral activity of sulfated polysaccharide from the brown algae Laminaria japónica against avian influenza A (FI5N1) virus infection in the cultured cells // Vopr. Virusol. 2010. V. 55. P. 41-45.

169. Manne B.K., Getz T.M., Hughes C.E. et al. Fucoidan is a novel platelet agonist for the C-type Lectin-like Receptor 2 (CLEC-2)// J. Biol. Chem. 2013. V. 288(1 1). P. 7717-7726.

170. Mao W., Li, Ii., Li, Y. et al. Chemical characteristics and anticoagulant activity of the sulfated polysaccharide isolated from Monostroma latissimum (Chlorophyta) // Int. J. Biol. Macromol. 2009. V. 44. P. 70-74.

171. Mao W.-J., Fang F., Li H.-Y. et al. Hcparinoid-active two sulfated polysaccharides isolated from marine green algae Monostroma nitidum II Carbohydr. Polym. 2008. V. 74. P. 834-839.

172. Marounelc M., Volek Z., Synytsya A., Copicova J. Effect of Pectin and Amidatcd Pectin on Cholesterol Homeostasis and Cecal Metabolism in Rats Fed a High-Cholesterol Diet // Physiol. Res. 2007. V. 56. P. 433-442.

173. Martinichen-FIerrero J.C., Carbonero E.R., Gorin P.A.J., Lacomini M. Anticoagulant and antithrombotic activity of a sulfate obtained from a glucan component of the lichen Parmotrema mantiqueirense Fíale // Carbohydrate Polymer. 2005. V. 60. P. 7-13.

174. Maruyama PI., Tamauchi II., Iizuka M., Nakano T. The role of NK cells in antitumor activity of dietary fucoidan from Undaria pinnatifidci sporophylls (Mekabu) // Planta Med. 2006. V. 72. P. 1415-1417.

175. Matsubara K. Recent advances in marine algal anticoagulants // Curr. Med. Chcm. 2004. V. 2. P. 13-19.

176. Matsubara K., Matsuura Y., Bacic A. et al. Anticoagulant properties of a sulfated galactan preparation from a marine green alga Codium cylindricum II Int. J. Biol. Mac-romol. 2001. V. 28. P. 395-399.

177. Mayer A.M., Flamman M.T. Marine pharmacology in 2000: marine compounds with antibacterial, anticoagulant, antifungal, anti-inflammatory, antimalarial, antiplatelet, antituberculosis, and antiviral activities; affecting the cardiovascular, immune, and nervous systems and other miscellaneous mechanisms of action // Mar. Biotechnol (NY). 2004. V. 6, N. 1. P. 37-52.

178. McLellan D.S. Jurd K.M. Anticoagulants from marine algae // Blood Coagul. Fibrinolysis. 1992. V. 3. P. 69-80.

179. Meló F.R., Mourao P.A.S. An algal sulfated galactan has an unusual dual effect on venous thrombosis due to activation of factor XII and inhibition of the coagulation proteases // Thromb. Haemost. 2008. V. 99. P. 531-538.

180. Meló F.R., Pereira M.S., Foguel D., Mourao P.A.S. Antithrombin-mediated anticoagulant activity of sulfated polysaccharides - different mechanisms for heparin and sulfated galactans // J. Biol. Chem. 2004. V. 279. P. 20824-20835.

181. Merhi Y., Provost P., Chauvet P. et al. Selectin blockade reduces neutrophil interaction with platelets at the site of deep arterial injury by angioplasty in pigs // Arterio-scler. Thromb. Vase. Biol. 1999. V. 19(2). P. 372-377.

182. Mestechkina N.M., Shcherbukhin V.D. Sulfated polysaccharides and their anticoagulant activity: A review // Appl. Biochem. Microbiol. 2010. V. 46. P. 267-273.

183. Mestechkina N.M., Shcherbukhin V.D., Bannikova G.E. et al. Anticoagulant activity of low molecular weight sulfated derivatives of galactomannan from Cyamopsis tetragonoloba (L.) seeds // Applied Biochemistry and Microbiology. 2008. V. 44. P. 98103.

184. Michelson A.D. Platelet s (Second Edition) // London: Elsevier Inc. 2007. 1376 p.

185. Millet J., Jouault S.C., Mauray S. et al. Antithrombotic and anticoagulant activities of a low molecular weight fucoidan by the subcutaneous route // Thromb. Haemost. 1999. V. 81(3). P. 391-395.

186. Mohamed S., Hashim S.N. and Rahman H.A. Seaweeds: A sustainable functional food for complementary and alternative therapy // Food Sci. Tech. 2012. V. 23. P. 8396.

187. Mohnen D. Pectin structure and biosynthesis // Curr. Opin. Plant Biol. 2008. Vol. 11. P. 266-277.

188. Mourao P.A. Use of sulfated fucans as anticoagulant and antithrombotic agents: Future perspectives // Curr. Pharm. Des. 2004. V. 10, N.9. P. 967-981.

189. Mousa S.A. Antithrombotic effects of naturally derived products on coagulation and platelet function // Methods Mol. Biol. 2010. V. 663. P. 229-240.

190. Musallam K.M., Charafeddinc K., Bitar A. et al. Resistance to aspirin and clopidogrel therapy // Int. J. Lab. Hematol. 2011. V. 33,N. LP. 1-18.

191. Nakazato K., Takada H., Iha M., Nagamine T. Attenuation of N-nitrosodiethylamine-induced liver fibrosis by high-molecular-weight fucoidan derived from Claclosiphon okamuranus II J. Gastroenterol. Iiepatol. 2010. V. 25. P. 1692-1701.

192. Nisbet D.R., Crompton K.E., Home M.K. et al. Neural tissue engineering of the CNS using hydrogels // Journal of Biomedical Materials Research Part B-Applied Biomaterials. 2008. V. 87B. P. 251-263.

193. Nishino T., Fukuda A., Nagumo T., Fujihara M., Kaji E. Inhibition of the generation of thrombin and factor Xa by a fucoidan from the brown seaweed Ecklonia kurome //Thromb. Res. 1999. V. 96(1). P. 37-49.

194. Nishino T., Yamauchi T., Horie M., Nagumo T., Suzuki H. Effects of fucoidan on the activation of plasminogen by u-PA and t-PA // Thromb. Res. 2000. V. 99. P. 623634.

195. Nishiya M., Hareyama H., Makinoda S., Fujimoto S. A study on the hemostatic cffect of sodium alginate on uterocervical hemorrhage // Asia Oceania J. Obstct. Gynaecol. 1994. V. 20, N. 2. P. 203-208.

196. No PI.K., Cho Y.I., Kim IT.R., Meyers S.P. Effective deacctylation of chitin under conditions of 15 psi/121-C // J. Agr. Food Chem. 2000. Vol. 48. P. 2625-2627.

197. O'Brien J. R. Platelet aggregation - Part II. Some results from a new method of study//Journal of Clinical Pathology. 1962. V. 15. P. 452-455.

198. Okamoto Y., Yano R., Miyatake K. et al. Effects of chitin and chitosan on blood coagulation // Carbohydrate Polymers. 2003. V. 53 P. 337-342.

199. Opoku G., Qiu X., Doctor V. Effect of oversulfation on the chemical and biological properties of kappa carrageenan // Carbohydr. Pol. 2006. V. 65. P. 134-138.

200. Panlasigui L.N., Baello O.Q., Dimatangal J.M., Dumelod B.D. Blood cholesterol and lipid-lowering effects of carrageenan on human volunteers // Asia Pac. J. Clin. Nutr. 2003. V. 12(2). P. 209-214.

201. Patanlcar M.S., Oehninger S., Barnett T. et al. A revised structure for fucoidan may explain some of its biological activities // J. Biol. Chem. 1993. V.268. P. 2177021776.

202. Patel S. Therapeutic importance of sulfated polysaccharides from seaweeds: updating the recent findings // Biotech. 2012. V. 2. P. 171-185.

203. Pawar S.N., Edgar K.J. Alginate derivatization: A review of chemistry, properties and applications // Biomaterials. 2012. V. 33(11). P. 3279-3305.

204. Pereira M.G., Benevides N.M.B. , Melo M.R.S. et al. Structure and anticoagulant activity of a sulfated galactan from the red alga Gelidium crinale. Is there a specific structural requirement for the anticoagulant action? 11 Carbohydrate Research. 2005. V. 340, N. 12. P. 2015-2023.

205. Pereira M.S., Melo F.R., Mourao P.A.S. Is there a correlation between structure and anticoagulant action of sulfated galactans and sulfated fucans? // Glycobiology. 2002b. V. 12. P. 573-580.

206. Pereira M.S., Vilela-Silva A.C.E.S., Valente A.P., Mourao P.A.S. A 2-sulfated, 3-linked alpha-L-galactan is an anticoagulant polysaccharide // Carbohydr. Res. 2002a. V. 337. P. 2231-2238.

207. Phillips G.O., Cui S.W. An introduction: Evolution and finalisation of the regulatory definition of dietary fibre // Food Hydrocoll. 2011. V. 25(2). P. 139-143.

208. Picker S.M. Antiplatelet therapy in the prevention of coronary syndromes: mode of action, benefits, drawbacks // Cardiovasc. Hematol. Agents Med. Chem. 2013. V. 11, N. 1. P. 49-57.

209. Pires L., Gorin P.A.J., Reicher F., Sierakowski M.R. An active heparinoid obtained by sulphation of a galactomannan extracted from the endosperm of Senna macranthera seeds // Carbohydrate Polymers. 2001. V. 46. P. 165-169.

210. Pomin V.H., Mouräo P.A.S. Structure, biology, evolution, and medical importance of sulfated fucans and galactans //Glycobiology. 2008. V. 18. P. 1016-1027.

211. Prasad S., Lillicrap D., Labelle A. et al. Efficacy and safety of a new-class hemostatic drug candidate, AV513, in dogs with hemophilia A // Blood. 2008. V. 111 (2). P. 672-679.

212. Pushpamali W.A., Nikapitiya C., De Zoysa M. et al. Isolation and purification of an anticoagulant from fermented red seaweed Lomentaria catenata // Carbohydr. Polym. 2008. V. 73. P. 274-279.

213. Rajadurai M., Prince P.S.M. Comparative effects of aegle marmelos extract and alpha-tocopherol on serum lipids, lipid peroxides and cardiac enzyme levels in rats with isoproterenol-induced myocardial infarction // Singapore Med. J. 2005. V. 46(2) P. 7881.

214. Reimann-Hunziger G. Uber experimentelle Thrombose und ihre Behandlung mit Heparin // Schweiz. Med. Wschr. 1944. V. 74. P. 66-69.

215. Ridley B.L., O'Neill M.A., Mohnen D. Pectins: Structure, biosynthesis, and oli-gogalacturonide-related signaling // Phytochemistry. 2001. V. 57(6). P. 929-967.

216. Rocha H.A.O., Moracs F.A., Trindadc E.S. ct al. Structural and hemostatic activities of a sulfated galactofucan from the brown alga Spatoglossum schroederi. An ideal antithrombotic agent? // J. Biol. Chem. 2005. V. 280. P. 41278-41288.

217. Rodrigues J.A.G., Araujo I.W.F., Paula G.A. et al. Isolation, fractionation and anticoagulant activity of /o/a-carrageenans from Solieria fdiformis II Ciencia Rural. 2010. V. 40, N. 11. P. 2310-2316.

218. Rodrigues J.A.G., de Queiroz I.N.L., Quindere A.L.G. et al. An antithrombin-dependent sulfated polysaccharide isolated from the green alga caulerpa cupressoides has in vivo anti- and prothrombotic effects // Ciencia Rural. 2011. V. 41 (4). P. 634-639.

219. Round A.N., Rigby N.M., MacDougall A.J., Morris V.J. A new view of pectin structure revealed by acid hydrolysis and atomic force microscopy // Carbohydr. Res. 2010. V. 345(4). P. 487-497.

220. Sanmuganathan P.S., Ghahramani P., Jackson P.R. et al. Aspirin for primary prevention of coronary heart disease: safety and absolute benefit related to coronary risk derived from meta-analysis of randomised trials // Heart. 2001. V. 95, N. 3. P. 265-271.

221. Scherer R., Morarescu A., Ruhenstroth Bauer G. The significance of plasma lipoproteins on erythrocyte aggregation and sedimentation // Br. J. Haematol. 1976. V. 32(2). P. 235-241.

222. Schneider D.J. Anti-platelet therapy: glycoprotein Ilb-IIIa antagonists // Br. J. Clin. Pharmacol. 2011. V. 72, N. 4. P. 672-682.

223. Schols FI.A., Voragen A.G.J. Complex pectins: structure elucidation using enzymes // In: J. Visser, A.G.J. Voragen (Eds), Pectins and Pcctinases. Elsevier Science, Amsterdam. 1996. P. 3-19.

224. Segal H.C., Hunt B.J., Gilding K. The effects of alginate and non-alginate wound dressings on blood coagulation and platelet activation // J. Biomater. Appl. 1998. V. 12, N. 3. P. 249-257.

225. Sen Sr. A.K., Das A.K., Banerji N., Siddhanta A.K., Mody K.H., Ramavat B.K. et al. A new sulfated polysaccharide with potent blood anti-coagulant activity from the red seaweed grateloupia indica // Int. J. Biol. Macromol. 1994. V. 16(5). P. 279-280.

226. Shanmugam M., Mody K.H. Heparinoid-active sulfated polysaccharides from marine algae as potential blood anticoagulant agents // Curr. Sci. 2000. V. 79. P. 16721683.

227. Shipp E.L., Ilsich-Wilson L.C. Profiling the sulfation specificities of glycosa-minoglycans interactions with growth factor and chemotactic proteins using microar-rays. Chem. Biol. 2007. V. 14. P. 195-208.

228. Silva F.R.F., Dore C.M.P.G., Marques C.T. et al. Anticoagulant activity, paw edema and pleurisy induced carrageenan: action of major types of commercial carra-geenans // Carbohydrate Polymers. 2010. V. 79, N 1. P. 26-33.

229. Smyth S.S. Anti-platelet therapy // Curr. Drug Targets. 2011. V. 12, N. 12. P. 1790-1791.

230. Solcolova E.V., Byankina A.O., Kalitnik A.A. et al. Influence of red algal sulfated polysaccharides on blood coagulation and platelets activation in vitro II Journal of Biomedical Materials Research. Part A. 2013a. V. 101, N. 6. P. 1828-1836.

231. Solcolova E.V., Chusovitin E.A., Barabanova A.O. et al. Atomic force microscopy imaging of carrageenans from red algae of gigartinaceae and tichocarpaceae families // Carbohydr Polym. 2013b. V. 93, N. 2. P. 458-465.

232. Sutcliffe P., Connock M., Gurung T. et al. Aspirin for prophylactic use in the primary prevention of cardiovascular disease and cancer: a systematic review and overview of reviews //Health Technol. Assess. 2013. V. 17. P. 1-253.

233. Suzuki T., Nakai K., Yoshie Y et al. Effect of sodium alginate rich in guluronic and mannuronic acids on cholesterol levels and digestive organs of high-cholesterol-fed rats//Nippon Suisan Gakkaishi. 1993. V. 59, N. 3. P. 545-551.

234. Tang Z., Wang Y., Xiao Y. et al. Antithrombotic activity of PDR, a newly synthesized L-Arg derivative, on three thrombosis models in rats // Thromb. Res. 2003. Vol. 110(2-3) P. 127-133.

235. Tardif J.C., Spence J.D., Heinonen T.M. et al. Atherosclerosis imaging and the Canadian Atherosclerosis Imaging Network // Can. J. Cardiol. 2013. V. 29, N. 3. P. 297-303.

236. Thakur B.R., Singh R.K., Handa A.K. Chemistry and uses of pectin. A review // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 1997. Vol. 37, N 1. P. 37-47.

237. Thiele FT., Wohrle J., Plambrecht R. et al. Intracoronary versus intravenous bolus abciximab during primary percutaneous coronary intervention in patients with acutc ST-elevation myocardial infarction: a randomised trial // Lancet. 2012. V. 379, N. 9819. P. 923-931.

238. Tissot B., Daniel R. Biological properties of sulfated fucans: The potent inhibiting activity of algal fucoidan against the human complement system // Glycobiology. 2003. V. 13. P. 29-31.

239. Tissot B., Gonnet F., Iborra A., Berthou C., Thielens N., Arlaud G.J., Daniel R. Mass spectrometry analysis of the oligomeric Clq protein reveals the B chain as the target of trypsin cleavage and interaction with fucoidan // Biochem. 2005. V. 44. P. 2602-2609.

240. Tissot B., Montdargent B., Chevolot L., Varcnne A., Descroix S., Gareil P., Daniel R. Interaction of fucoidan with the proteins of the complement classical pathway // Biochim. Biophys. Acta. 2003. V. 1651. P. 5-16.

241. Toeller M., Buyken A.E., Heitkamp G. ct al. Fiber intake, serum cholesterol levels, and cardiovascular disease in European individuals with type 1 diabetes / EURO-DIAB IDDM complications study group // Diabetes Care. 1999. V. 22(2). P. 21-28.

242. Tokita Y., Nakajima K., Mochida PL, Iha M., Nagamine T. Development of a fu-coidan-speciFic antibody and measurement of fucoidan in serum and urine by sandwich ELISA // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2010. V. 74. P. 350-357.

243. Trento F., Cattaneo F., Pescador R., Porta R., Ferro L. Antithrombin activity of an algal polysaccharide. Thromb. Res. 2001. V. 102(5). P. 457-465.

244. Tsai T.J., Lai K.FI., FIsu P.I et al. Upper gastrointestinal lesions in patients receiving clopidogrel anti-platelet therapy // J. Formos Med. Assoc. 2012. V. 111, N. 4. P. 705-710.

245. Ueno M., Ferreiro J.L., Angiolillo D.J. Mechanism of action and clinical development of platelet thrombin receptor antagonists // Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 2010. V. 8, N. 8. P. 1191-1200.

246. Usov A.I., Bilan M.I. Fucoidans - sulfated polysaccharides of brown algae // Russian Chemical Reviews. 2009. V. 78(8) P. 785-799.

247. Ustyuzhanina N.E., Ushakova N.A., Zyuzina K.A. et al. Influence of fucoidans on hemostatic system // Mar. Drugs. 2013. V. 11, N. 7. P. 2444-2458.

248. Van Giezen J.J., Wahlund G., Nerme J., Abrahamsson T. The Fab-fragment of a PAI-1 inhibiting antibody reduces thrombus size and restores blood flow in a rat model of arterial thrombosis//Thromb. Haemost. 1997. Vol. 77. P. 964-969.

249. Veena C.K., Josephine A., Preetha S.P. , Varalalcshmi P., Sundarapandiyan R. Renal peroxidative changes mediated by oxalate: The protective role of fucoidan // Life Sci. 2006. V. 79. P. 1789-1795.

250. Veldman F.J., Nair C.H., Vorster FI.H. et al. Dietary pectin influences fibrin network structure in hypercholesterolaemic subjects // Thromb. Res. 1997. V. 86(3). P. 183-196.

251. Vilahur G., Badimon L. Antiplatelet properties of natural products // Vascul. Pharmacol. 2013. V. 59, N. 3-4. P. 67-75.

252. Vogel H. G. Pharmacological Assays in Thrombosis and Haemostasis. In: Drug Discovery and Evaluation: Pharmacological Assays // Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York. 2008. P. 393-455.

253. Vorster LI.PI., Cummings J.PI., Jerling J.C. Diet and haemostatic processes // Nutrition Research Reviews. 1997. V. 10. P. 115-135.

254. Wang J., Zhang Q.B., Zhang Z.S. Structural studies on a novel fucogalactan sulfate extracted from the brown seaweed Laminaria japonica II Int. J. Biol. Macro-mol. 2010a. V.47. P. 126-131.

255. Wang J., Zhang Q.B., Zhang Z.S. Potential antioxidant and anticoagulant capacity of low molecular weight fucoidan fractions extracted from Laminaria japonica II Int. J. Biol. Macromol. 2010b. V. 46. P. 6-12.

256. Wang C., Yang G. Comparison of effects of two kinds of soluble algae polysaccharide on blood lipid, liver lipid, platelet aggregation and growth in rats // Chung Hua Yu Fang I I-Isueh Tsa Chih. 1997. V. 31(6). P. 342-345.

257. Wang X., Smith P.L., Hsu M.Y., Ogletree M.L., Schumacher W.A. Murine model of ferric chloride-induced vena cava thrombosis: evidence for effect of potato carboxy-peptidase inhibitor//J. Thromb. Haemost. 2006. V. 4(2). P. 403-410.

258. Wang Y., Zhang L., Li Y., Hou X., Zeng F. Correlation of structure to antitumor activities of five derivatives of a [3-glucan from poria cocos sclerotium // Carbohydr Res. 2004. V. 339(15). P. 2567-2574.

259. Weyrich A.S., Zimmerman G.A. Platelets: signaling cells in the immune continuum // Trends in Immunology. 2004. V. 25, N. 9. P. 489-495.

260. Wijesekara I., Pangestuti R., Kim S.K. Biological activities and potential health benefits of sulphated polysaccharides derived from marine algae // Carbohydr. Polym. 2011. V. 84. P. 14-21.

261. Wijesinghe W.A.J.P., Athukorala Y., Jeona Y.-J. Effect of anticoagulative sulfated polysaccharide purified from enzyme-assistant extract of a brown seaweed Ecklonia cava on Wistar rats // Carbohydrate Polymers. 2011. V. 86. P. 917-921.

262. Wong M. Alginates in tissue engineering // In: Biopolymer Methods in Tissue Engineering. Edited by: Hollander A.P., Ilatton P.V. Humana Press, New Jersey. 2004. P. 77-87.

263. Xue C.H., Fang Y., Lin II. et al. Chemical characters and antioxidative properties of sulfated polysaccharides from Laminaria japonica //J. Appl. Phycol. 2001. V. 13. P. 67-70.

264. Yang J., Tian F., Wang Z. et al. Effect of Chitosan Molecular Weight and Deacetylation Degree on Hemostasis // J. Biomed. Mater. Res. Part B: Appl Biomater. 2008. V. 84B. P. 131-137.

265. Yang J.-S., Xie Y.-J., He W. Research progress on chemical modification of alginate: A review // Carbohydrate Polymers. V. 84, N. 1. 2011. P. 33-39.

266. Yeh PI.I., Chen I.J., Teng Ch.M. Cyclooxygenase-independent pathway of phosh-lipase activation in carrageenan-induced platelet aggregation // Thrombosis research. 1987. V. 45. P.39-49.

267. Ylitalo R., Lehtinen S., Wuolijoki E. et al. Cholesterol-lowering properties and safety of chitosan //Arzneim.-Forsch./Drug Res. 2002. V. 52. P. 1-7.

268. Yoon S.-J., Pereira M.S., Pavao M.SjU. ct al. The medicinal plant Porana volubilis contains polysaccharides with anticoagulant activity mediated by heparin cofactor II //Thrombosis Research. 2002. V. 106. P. 51-58.

269. Yoon S.-J., Yu M.-A., Pyun Y.-R. et al. The nontoxic mushroom Auricularia auricula contains a polysaccharide with anticoagulant activity mediated by antithrombin //Thrombosis Research. 2003. V. 112. P. 151-158.

270. Zen IC., Liu Y., Cairo D., Parkos C.A. CD 1 lb/CD 18-dependent interactions of neutrophils with intestinal epithelium are mediated by fucosylated proteoglycans // J. Immunol. 2002. V. 169. P. 5270-5278.

271. Zhang H.J., Mao V.G., Fang F. et al. Chemical characteristics and anticoagulant activities of a sulfated polysaccharide and its fragments from Monostroma latissimum // Carbohydrate Polymers. 2008. V. 71, N 3. P. 428-434.

272. Zhang Q., Li N., Zhao T. et al. Fucoidan inhibits the development of proteinuria in active Heymann nephritis II Phytother. Res. 2005. V. 19. P. 50-53.

273. Zhang X.W., Liu Q., Thorlacius FI. Inhibition of selectin function and leukocyte rolling protects against dextran sodium sulfate-induced murine colitis // Scand. J. Gastroenterol. 2001. V. 36. P. 270-275.

274. Zhao X., Dong S., Wang J., Li F., Chen A., Li B. A comparative study of antithrombotic and antiplatelet activities of different fucoidans from Laminaria japónica II Thromb Res. 2012. V. 129(6). P. 771-778.

275. Zhu Z., Zhang Q., Chen L. et al. Higher specificity of the activity of low molecular weight fucoidan for thrombin-induced platelet aggregation // Thrombosis Research. 2010. V. 125 P. 419-426.

276. Zvyagintseva T.N., Shevchenko N.M., Popivnich I.B. et al. A new procedure for the separation of water-soluble polysaccharides brown seaweed // Carbohydr. Research. 1999. V. 322. P. 32-39.

277. Zvyagintseva, T.N.; Shevchenko N.M., Chizhov A.O. Water-soluble polysaccharides of some far-eastern brown seaweeds. Distribution, structure, and their dependence on the developmental conditions //J. Exp. Mar. Bio. Ecol. 2003. V. 294. P. 1-13.