Алгоритм выбора наночастиц как носителей лекарственных субстанций тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат химических наук Красильникова, Валентина Владимировна

• Красильникова, Валентина Владимировна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Красильникова, Валентина Владимировна

1. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

2. ВВЕДЕНИЕ

3. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ЛЕКАРСТВЕННЫ! ФОРМЫ ДЛЯ ДОСТАВКИ БЕЛКОВ

3.1. Введение

3.2. Модификации белка

3.2.1. коньюгаты и фыожн-белки

3.2.2. гликозилирование

3.2.3. Ацилирование И

3.2.4. пэгилирование

3.3. Корпускулярные формы для создания белковых препаратов

3.3.1. липосомы-красивое решение, непростое воплощение

3.3.2. Эмульсии - и просто и сложно

3.3.3. Кохлеаты

3.3.4. нанодиски

3.3.5. Кубосомы-еще одна редкость

3.3.6. полые полимерные нанокапсулы

3.3.7. Нанокристаллы или наночастицы?

3.3.8. Магнитные наночастицы - притягательные перспективы

4. РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Выбор объектов исследования

4.1.1. Выбор тип а НЧ

4.1.2. Выбор субстанций

4.1.3. Методы исследования дисперсий НЧ

4.2. инкапсуляция субстанций в нч

4.2.1. Полярные субстанции

4.2.1.1. Белки (ВПМС)

4.2.1.2. Гидрохлорид доксорубицина (ДРГХ)

4.2.2. Амфифильные субстанции 51 Семакс

4.2.3. Гидрофобные субстанции

4.2.3.1. Смесь тритерпеноидов лупанового ряда, выделенных из бересты 53 Подбор оптимальных условий получения нанодисперсий СТБ 62 Обратный порядок прибавления 62 Влияние концентрации СТБ в ТГФ на размер частиц дисперсии 62 Влияние растворителя на свойства дисперсии 63 Уменьшение количества добавляемой воды 65 Влияние температуры на размер частиц и стабильность дисперсий СТБ

4.2.3.2. Силимарин и Силибинин

4.2.3.3. Метилфеофорбид а

4.2.3.4. Доксорубицин

4.3. комбинированное действие липосомальных эс и дргх

4.4. разработка Алгоритма выбора типа носителя 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

5.1. Выделение сфинголипидов

5.2. Синтез меченого тритием семакса

5.3. Получение Лс с белком

5.3.1. Получение Лс с белком методом липидной пленки

5.3.2. получение липосом с белком методом обращения фаз

5.4. Получение лс с МФФА

5.5. Получение Лс с см и сб

5.6. получение Лс с ДРГХ методом активной загрузки

5.7. Определение концентрации субстанции в дисперсии

5.8. Получение Лс с семаксом

5.8.1. Полу чение Лс с семаксом методом ли пи д ной пленки

5.8.2. Получение Лс с семаксом методом обращения фаз

5.8.3. Получение 1% дисперсии пролипосом из гликосфинголипидов

5.8.4. Получение Лс с семаксом с использованием пролипосом

5.9. Определение эффективности включения субстанции в Лс

5.10. Получение смешанных мицелл с яФХ

5.11. ОБщая схема получения дисперсий СТБ прямым прибавлением

5.12. Получение дисперсии СТБ при обратном прибавлении

5.13. получение дисперсий СТБ, загруженных гидрофобными субстанциями

5.14. Приготовление образцов для рентгенофазового анализа

5.15. Определение эффективности включения субстанций в дисперсии СТБ

5.16. Электронная микрофотография

5.17. Определение размеров частиц

5.17.1. Турбидиметрия

5.17.2. Электронная микрофотография

5.18. Определение противоопухолевой активности липосомальных препаратов эндостатина и доксорубицинаin vivo

6. ВЫВОДЫ

7. БЛАГОДАРНОСТИ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Алгоритм выбора наночастиц как носителей лекарственных субстанций»

3.2. Модификации белка 9

3.2.1. коньюгаты и фыожн-белки 103.2.2. гликозилирование 103.2.3. Ацилирование И3.2.4. пэгилирование 113.3. Корпускулярные формы для создания белковых препаратов 123.3.1. липосомы-красивое решение, непростое воплощение 123.3.2. Эмульсии - и просто и сложно. 283.3.3. Кохлеаты 323.3.4. нанодиски 323.3.5. Кубосомы-еще одна редкость 333.3.6. полые полимерные нанокапсулы 343.3.7. Нанокристаллы или наночастицы? 343.3.8. Магнитные наночастицы - притягательные перспективы 414. РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ434.1. Выбор объектов исследования 434.1.1. Выбор тип а НЧ 434.1.2. Выбор субстанций 444.1.3. Методы исследования дисперсий НЧ 454.2. инкапсуляция субстанций в нч 464.2.1. Полярные субстанции 464.2.1.1. Белки (ВПМС) 464.2.1.2. Гидрохлорид доксорубицина (ДРГХ) 504.2.2. Амфифильные субстанции 51 Семакс 514.2.3. Гидрофобные субстанции 534.2.3.1. Смесь тритерпеноидов лупанового ряда, выделенных из бересты 53 Подбор оптимальных условий получения нанодисперсий СТБ 62 Обратный порядок прибавления 62 Влияние концентрации СТБ в ТГФ на размер частиц дисперсии 62 Влияние растворителя на свойства дисперсии 63 Уменьшение количества добавляемой воды 65 Влияние температуры на размер частиц и стабильность дисперсий СТБ 664.2.3.2. Силимарин и Силибинин 694.2.3.3. Метилфеофорбид а 744.2.3.4. Доксорубицин 764.3. комбинированное действие липосомальных эс и дргх 784.4. разработка Алгоритма выбора типа носителя 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ5.1. Выделение сфинголипидов 855.2. Синтез меченого тритием семакса 855.3. Получение Лс с белком 865.3.1. Получение Лс с белком методом липидной пленки 865.3.2. получение липосом с белком методом обращения фаз 865.4. Получение лс с МФФА 865.5. Получение Лс с см и сб 875.6. получение Лс с ДРГХ методом активной загрузки 875.7. Определение концентрации субстанции в дисперсии 875.8. Получение Лс с семаксом 885.8.1. Полу чение Лс с семаксом методом ли пи д ной пленки 8 85.8.2. Получение Лс с семаксом методом обращения фаз 885.8.3. Получение 1% дисперсии пролипосом из гликосфинголипидов 885.8.4. Получение Лс с семаксом с использованием пролипосом 885.9. Определение эффективности включения субстанции в Лс 895.10. Получение смешанных мицелл с яФХ 895.11. ОБщая схема получения дисперсий СТБ прямым прибавлением 905.12. Получение дисперсии СТБ при обратном прибавлении 905.13. получение дисперсий СТБ, загруженных гидрофобными субстанциями 905.14. Приготовление образцов для рентгенофазового анализа 915.15. Определение эффективности включения субстанций в дисперсии СТБ 915.16. Электронная микрофотография 915.17. Определение размеров частиц 925.17.1. Турбидиметрия 925.17.2. Электронная микрофотография 925.18. Определение противоопухолевой активности липосомальных препаратовэндостатина и доксорубицинаin vivo 926. ВЫВОДЫ947. БЛАГОДАРНОСТИ958. ЛИТЕРАТУРА96О

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Красильникова, Валентина Владимировна

6. Выводы

1. Разработан и представлен в виде блок-схемы алгоритм выбора типа НЧ-носителя для инкапсуляции различных субстанций.

2. Обнаружено, что пептид семакс легко выходит из липосом, состоящих из яФХ/Хол (7/3 мольн.) и из липосом, состоящих из гликосфинголипидов (Тс~60°С) в течение получаса, в то время как изониазид не проходит через бислой липосом из гликосфинголипидов.

3. Получены смешанные мицеллы с яФХ для силибинина и силимарина, ёмкость которых составляет 0.71, что примерно в 18 раз выше максимальной ёмкости при включении силибинина в липосомы и для доксорубицина (ёмкость в 40 раз больше ёмкости дисперсий смеси тритерпеноидов лупанового ряда).

4. Разработан метод получения нового типа наночастиц из смеси тритерпеноидов лупанового ряда, не требующий стабилизации поверхностно-активными веществами.

5. Показано на примере силимарина, силибинина, доксорубицина и метилфеофорбида а, что дисперсии смеси тритерпеноидов лупанового ряда могут служить для инкапсуляции гидрофобных субстанций. Ёмкость этого вида наночастиц достигает от 0.05 до 0.2.

6. Испытанием активности липосомальных препаратов эндостатина и гидрохлорида доксорубицина на мышах С57В1/6 с привитой меланомой линии В16 установлено, что при комбинированном использовании липосомальные эндостатина и доксорубицина обладают большей противоопухолевой активностью, чем комбинированный липосомальный препарат ангиостатина и гидрохлорида доксорубицина и липосомальные эндостатин и гидрохлорид доксорубицина в отдельности, а также не липосомальные растворы веществ и их комбинации.

7. Благодарности

Благодарю за помощь в работе:

- ведущего научного сотрудника ИМБ им. В.А. Энгельгардта РАН Попенко В.И. за проведение электронной микрофотосъемки, т фирму «Биолек» за предоставленные липиды,

- профессора Мчедлишвилли Бориса Викторовича (Институт Электрохимии РАН) за предоставленные ядерные поликарбонатные фильтры,

- к.х.н. Шевченко Константина Валерьевича за помощь в работе с изотопно-меченным семаксом,

- сотрудников лаборатории разработки лекарственных форм НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей ГУ РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН за предоставленную возможность измерить размер частиц липосомальной дисперсии с помощью динамического светорассеяния,

- студентов кафедры Биотехнологии Бастрич А.Н., Пахарькову Н.И., Лыу Т.Н., Королеву А.И. за помощь и дружескую поддержку,

- мужа за долготерпение и материальное обеспечение на протяжении долгих лет аспирантуры.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Красильникова, Валентина Владимировна, 2009 год

1. Nanoparticulates as Drug Carriers Ed. V.P. Torchilin//1.perial College Press, 2006, P. 724

2. K. Kawakami, T. Yoshikawa, Y. Moroto, E. Kanaoka, K. Takahashi, Y. Nishihara, K. Masuda. Microemulsion formulation for enhanced absorption of poorly soluble drugs. I. Prescription design// J. Control. Release, 2002, V. 81, P. 65-74

3. E. Marengo, R. Cavalli, O. Caputo, L. Rodriguez, M.R.Gasco/ Scale-up of the preparation process of solid lipid nanospheres. Part I// Int. J. Pharm., 2000, V. 205, P. 3-13

4. S.J. Lim, C.K. Kim/ Formulation parameters determining the physicochemical characteristics of solid lipid nanoparticles loaded with all-trans retinoic acid// Int. J. Pharm., 2002, V. 243, P. 135-1466. http://ru.wikipedia.org/wiki/HncyjiHH

5. M. Brange/ Galenics of Insulin: The Physico-chemical and Pharmaceutical Aspects of Insulin and Insulin Preparations// Springer-Verlag, Berlin, 1987 (103 P.) ^

6. J.M. Beals, A. B. Shanafelt/ Enhancing exposure of protein therapeutics// DDT: Technologies, 2006, V. 3,No. 1,P. 87-94

7. A.M. Sinclair, S. Elliot/ Glycoengineering: the effect of glycosylation on the properties of therapeutic proteins//J. Pharm. Sci., 2005, V. 94, P. 1626-1635

8. A. Abuchowski, T. van Es, N.C. Palczuk, F.F.Davis/ Alteration of immunological properties of bovine serum albumin by covalent attachment of polyethylene glycol// J. Biol. Chem., 1977, V. 252, No. 11, P. 3578-3581

9. A. Abuchowski, J.R. McCoy, N.C. Palczuk, T. van Es, F.F. Davis// Effect of covalent attachment of polyethylene glycol on immunogenicity and circulating life of bovine liver catalase// J. Biol. Chem., 1977, V. 252, No. 11, P. 3582-3586

10. F.M. Veronese, G. Pasut/ PEGylation, susseful approach to drug delivery//DDT, 2005, V. 10, No. 21, P. 1451-1458

11. L.M. Graham/ PEGASPARAGINASE: a review of clinical studies// Adv. Drug Deliv. Rev., 2003, V. 55, P. 1293-1302

12. Y.S. Wang, S. Youngster, M. Grace, J. Bausch, R. Bordens, D.F. Wyss/ Structural and biological characterisation of pegylated recombinant interferon a-2b and its therapeutic implications// Adv.Drug Deliv. Rev., 2002, V. 54, P. 547-570

13. O.B. Kinstler, D.N. Brems, S.L. Lauren, A.G. Piage, J.B. Hamburger, M.J. Treuheit/ Characterization and stability of N-terminally pegylated rhG-CSF// Parm. Res., 1996, V. 13, P. 996-1002

14. C.P. Caygill, W.D. Stein/ Binding of insulin by liposomes incorporating protein// Life Sci., 1969, V. 8, No 16, P. 809-812

15. A. Graff, M. Winterhalter, W. Meier/ Nanoreactors from Polymer Stabilized Liposomes// Langmuir, 2001, V.17, P. 919-923

16. Liposomes: A Practical Approach. Second edition. Ed. by V.P. Torchilin and V. Weissig// Oxford University Press, 2003, P.396

17. Г.М. Сорокоумова, A.A. Селищева, А.П. Каплун/ Фосфолипиды. Методы их выделения, обнаружения и изучения физико-химических свойств липидных дисперсий в воде// М., 2000

18. J.-P. Colletier, B. Chaize, M. Winterhalter, D. Fournier/ Protein encapsulation in liposomes: efficiency depends on interactions between protein and phospholipid bilayer// BMC Biotechnol., V. 2, P. 9-17

19. D.A. Epstein, Y.V. Marsh, M. van der Pas, P.L. Feigner, A.B. Shreiber/ Biological activity of liposome-encapsulated murine interferon y is mediated by a cell membrane receptor// Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1985, V. 82, P. 3688-3692

20. M.L. Van Slooten, O. Boerman, K. Romoren, E. Kedar, DJ.A. Crommelin, G. Storm/ Liposomes as sustained release system for humaninterferon-y: biopharmaceutical aspects// Bioch. Biophys. Acta, 2001, V. 1530, P. 134-145

21. Y.Y. Huang, C.H. Wang/ Pulmonary delivery of insulin by liposomal carriers// J. Control. Release, 2006, V. 113, No 1, P. 9-14

22. D. Li, A.J. Hickey/ Liposomal Dry Powders as Aerosols for Pulmonary Delivery of Proteins// AAPS Pharm. Sei. Tech., 2005, V. 6, No 4, article 80, P. E641-E648, http://www.aapspharmscitech.org

23. H. Shreier, W.C. Mobley, N. Concessio, A.J. Hikey, R.W. Niven/ Formulation and in vitro performance of liposome powder aerosols// STP Pharma Sciences//1994, V.4, P. 38-44

24. M.A. Schubert, C.C. Müller-Goymann/ Solvent injection as a new approach for manufacturing lipid nanoparticles evaluation of the method and process parameters// Eur. J. Pharm, and Biopharm., 2003, V. 1, P. 125-131

25. K.-H. Song, S.-J. Chung, C.-K. Shim, Preparation and evaluation of proliposomes containing salmon calcitonin// J. Contr. Release, 2002, V. 84, P. 27-37

26. D.D. Lasic/ Sterisch stabilisierte Vesikel// Angew. Chem., 1994, B. 106, S. 1765-1779

27. J.M. Sual, A. Annapragada, J.V. Natarajan, R.V. Bellamkonda. Controlled targeting of liposomal doxorubicin via folate receptor in vitro// J. Cont. Rel., 2003, V. 92, P. 49-67

28. S.K. Sahoo, V. Labhasetwar. Nanotech approaches to drug delivery and imaging// Drug Deliv. Today, 2003, V.8, No 24, P. 1112-1120

29. C.C. Visser, S. Stevanovic, L.H. Voorwinden, L. van Bloois, P.J. Gaillard, M. Danhof, D.J. Crommelin, A.G. de Boer/ Targeting liposomes with protein drugs to the blood-brain barrier in vitro// Eur. J. Pharm. Sci., 2005, V. 25, No 2-3, P. 299-305

30. M. Furuhata, H. Kawakami, K. Toma, Y. Hattori, Y. Maitani/ Intracellular delivery of proteins in complexes with oligoarginine-modified liposomes and the effect of oligoarginine length// Bioconjug. Chem., 2006, V. 17, No 4, P.935-942

31. M. Singh, D.T. O'Hagan/ Recent Advances in Vaccine Adjuvants// Pharm. Res., 20026, V. 19, No. 6, P. 715-728

32. A. Podda, G. Del Giudice/ MF59-adjuvanted vaccines: increased immunogenicity with an optimal safety profile. Expert Rev.// Vaccines, 2003, V. 2, P. 197-203

33. D.T. O'Hagan/ MF59 is a safe and potent vaccine adjuvant that enhances protection against influenza virus infection. Expert Rev.// Vaccines, 2007, V. 6, No 5, P. 699-710.

34. G. Lindbblom, J.B. Hauksson, L. Rilfors, B. Bergenstahl, A. Wieslander, P.-O. Eriksson/ Membrane Lipid Regulation in Acholeplasma laidlawii Grown with Saturatd Fatty Acids// J. Biol. Chem., 1993, V. 268, No 22, P. 16198-16207

35. T.P. Trouard, D.A. Mannock, G. Lindblom, L. Rilfors, M. Akiyama, R.N. McElhaney/ Thermotropic Phase Properties of l,2-Di-0-Tetradecyl-3-C-(3-0-Methyl-(3-D-Glucopyranosyl)-.sTi-Glycerol// Biophys. J., 1994, V. 67,p.l090-1100

36. R. Mitra, I. Pezron, W. A. Chu, A. K. Mitra/ Lipid emulsions as vehicles for enhanced nasal delivery of insulin// Int. J. Pharm., 2000, V. 205, P. 127-134

37. M. Werle, A. Makhlof, H. Takeuchi/ Oral protein delivery: a patent review of academic and industrial approaches// 2009, V. 3, No 2, P. 94-104

38. D. Papahadjopoulos, W.J. Vail, K. Jacobson, G. Poste/ Cochleate lipid cylinders: formation by fusion of unilamellar lipid vesicles. Biochim Biophys Acta. 1975 Jul 3;394(3):483-91.

39. R.D. Miclea, P.R. Varma, A. Peng, S.V. Balu-Iyer/ Development and characterization of lipidic cochleate containing recombinant factor VIII// Biochim. Biophys. Acta., 2007, V. 1768, No 11, P. 2890-2898

40. C. C. Evans, J. Zasadzinski. Encapsulating Vesicles and Colloids in Cochleate Cylinders. Langmuir. 2003, 19, 3109-3113

41. R. Santangelo, P. Paderu, G. Delmas, Z.W. Chen, R. Mannino, L. Zarif, D.S. Perlin/ Efficacy of Oral Cochleate-Amphotericin B in a Mouse Model of Systemic Candidiasis// Antimicrob. Agents Chemother., 2000, V. 44, P. 2356-2360

42. G. Bracho, M. Lastre, J. del Campo, C. Zayas, D. González, D. Gil, R. Acevedo, C. Taboada, R.L. Solís, O. Pérez/ Proteoliposome derived cochleate as novel adjuvant// Vaccine., 2006, V. 12; 24 Suppl 2:S2-30-31

43. M. Johnsson, K. Edwards/ Liposomes, Disks, and Spherical Micelles: Aggregate Structure in Mixtures of Gel Phase Phosphatidylcholines and Poly(Ethylene Glycol)-Phospholipids// Biophys. J., 2003, V. 85, P. 3839-3847

44. T. H. Bayburt, S. G. Sligar/ Self-assembly of single integral membrane proteins into soluble nanoscale phospholipid bilayers// Prot. Sci., 2003, V. 12, P. 2476-2481

45. I. G. Denisov, Y. V. Grinkova, A. A. Lazarides, S. G. Sligar/ Directed Self-Assembly of Monodisperse Phospholipid Bilayer Nanodiscs with Controlled Size// J. Am. Chem. Soc., 2004, V. 126, P. 3477-3487

46. A. Y. Shih, I. G. Denisov, J. C. Phillips, S. G. Sligar, K. Schulten/ Molecular Dynamics Simulations of Discoidal Bilayers Assembled from Truncated Human Lipoproteins// Biophys. J., 2005, V. 88, P. 548-556

47. A. Das, J. Zhao, G.C. Schatz, S.G. Sligar, R.P. Van Duyne/ Screening of type I and II drug binding to human cytochrome P450-3A4 in nanodiscs by localized surface plasmon resonance spectroscopy// Anal. Chem., 2009, V. 81, No 10, P. 3754-3759

48. S. G. Sligar/ Finding a single-molecule solution for membrane proteins// Biochem. Biophys. Res. Communs., 2003; V. 312, P. 115-119

49. S. Egstrom, B. Ericsson, T. Landh/ A cubosome formulation for intravenous administration of somatostatin// Proceed. Intern. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater., 1996, V. 23, P. 89-90

50. J. Wang, Q. Zhang/ Uptake of eyelosporine A loaded colloidal drug carriers by mouse peritoneal macrophages in vitro// Acta Pharmacol. Sin., 2001, V. 22, No 1, P. 57-61

51. P. Yilgor, K. Tuzlakoglu, R.L. Reis, N. Hasirci, V. Hasirci/ Incorporation of a sequential BMP-2/BMP-7 delivery system into chitosan-based scaffolds for bone tissue engineering// Biomaterials., 2009, V. 30, No 21, P. 3551-3559

52. M. Aboubakar, F. Puisieux, P. Couvreur, M. Deyme, C. Vauthier/ Study of the mechanism of insulin encapsulation in poly(isobutylcyanoacrylate) nanocapsules obtained by interfacial polymerization// J. Biomed. Mater. Res., 1999, V. 47, No 4, P. 568-576

53. C. Damge, J. Vonderscher, P. Marbach, M. Pinget/ Poly(alkyl cyanoacrylate) nanocapsules as a delivery system in the rat for octreotide, a long-acting somatostatin analogue// J. Pharm. Pharmacol., 1997, V. 49, No 10, P. 949-954

54. N. Rasenack, H. Hartenhauer and B.W. Muller. Microcrystals for dissolution rate of poorly water-soluble drugs// Int. J. Pharm., 2003, V. 254, No 2, P. 137-145

55. K.S. Oh, S.K. Han, H.S. Lee, H.M. Koo, R.S. Kim, K.E. Lee, S.S. Han, S.H. Cho, S.H. Yuk / Core/Shell nanoparticles with lecithin lipid cores for protein delivery// Biomacromolecules. 200, V. 7, No 8, P. 2362-2367

56. T. Akagi, T. Kaneko, T. Kida, M. Akashi/ Preparation and characterization of biodegradable nanoparticles based on poly(gamma-glutamic acid) with 1-phenylalanine as a protein carrier// J. Control. Release., 2005,v. 108, No 2-3, P. 226-236

57. W.T. Leach, D.T. Simpson, T.N. Val, E.C. Anuta, Z. Yu, R.O. Williams III, K.P. Johnston/ Uniform encapsulation of stable protein nanoparticles produced by spray freezing for the reduction of burst release// J. Pharm. Sci., 2005, V. 94, No 1, P. 56-69

58. Y. Li, Y. Pei, X. Zhang, Z. Gu, Z. Zhou, W. Yuan, J. Zhou, J. Zhu, X. Gao/ PEGylated PLGA nanoparticles as protein carriers: synthesis, preparation and biodistribution in rats// J. Control. Release., 2001, V. 71, No 2, P. 203-211

59. J. Vandervoort, A. Ludwig/ Biocompatible stabilizers in the preparation of PLGA nanoparticles: a factorial design study// Int. J. Pharm., 2002, V. 238, P. 77-92

60. T.W. Chung, Y.Y. Huang, Y.L. Tsai, Y.Z. Liu/ Effects of solvent evaporation rate on the properties of protein-loaded PLLA and PDLLA microspheres fabricated by emulsion-solvent evaporation process//J. Microencapsul., 2002, V. 19, No 4, P. 463-471

61. J.X. Zhang, D. Chen, S.J. Wang, K.J. Zhu/ Optimizing double emulsion process to decrease the burst release of protein from biodegradable polymer microspheres// J. Microencapsul., 2005, V. 22, No 4, P. 413-422

62. W.T. Leach, D.T. Simpson, T.N. Val, E.C. Anuta, Z. Yu, R.O. Williams III, K.P. Johnston / Uniform encapsulation of stable protein nanoparticles produced by spray freezing for the reduction of burst release// J. Pharm.Sci., 2005,v. 94, No 1, P. 56-69

63. J.K. Li, N. Wang, X.S. Wu/ Poly(vinil alcohol) nanoparticles prepared by freezing-thawing process for protein/peptide drug delivery// J. Control. Release., 1998, V. 56, No 1-3, P. 117-126

64. N. Wang, X.S. Wu/ Preparation and characterization of agarose hydrogel nanoparticles for protein and peptide drug delivery// Pharm. Dev. Technol., 1997, V.2, No 2, P. 135-142*

65. M. de Cuyper, M. Joniau/ Binding characteristics and thermal behaviour of cytochrome-C oxidase, inserted into phospholipid-coated, magnetic nanoparticles// Biotechnol Appl Biochem., 1992, V. 16, No 2, P.:201-210

66. S.Y. Shaw, Y.J. Chen, J.J. Ou, L. Ho/ Preparation and characterization of Pseudomonas putida esterase immobilized on magnetic nanoparticles// Enzym. Microb. Tech., 2006, V. 39, P. 1089-1095

67. A. Dyal, К. Loos, М. Noto, S.W. Spagnoli, K.V.P.M. Shafi, A. Ulman, M. Cowman, R.A. Gross/ Activity of Candida rugosa lipase immobilized on gamma-Fe203 magnetic nanoparticles// J. Am. Chem. Soc., 2003, V. 125, P. 1684-1685

68. X.D. Tong, B. Xue, Y. Sun/ A novel magnetic affinity support for protein adsorption and purification// Biotechnol. Prog., 2001, V.17, P. 134-139

69. M. Koneracka, P. Kopcansky, M. Timko and C.N. Ramchand/ Direct binding procedure of proteins and enzymes to fine magnetic particles// J. Magn. Magn. Matter., 2002, V. 252, P. 409411

70. G. Haran, R. Cohen, L.K. Bar, Y. Barenholz. Transmembrane ammonium sulfate gradients in liposome produce efficient and stable entrapment of amphipatic weak basis// Biochem. Biophys. Acta, 1993, V. 1151, P. 201-215

71. R. Santangelo, Р/ Paderu, G. Delmas, Z.W. Chen, R. Mannino, L. Zarif, D.S. Perlin/ Efficacy of oral cochleate-amphotericin В in a mouse model of systemic candidiasis// Antimicrob. Agents Chemother., 2000, V. 44, P. 2356-2360

72. A.B. Сымон/ Молекулярная модификация бетулиновой кислоты как антимеланомного средства и подходы к ее солюбилизации. Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук// М., 2004

73. М.Д. Машковский. Лекарственные средства, 15-е изд.//М., РИА «Новая волна», Издатель Умеренков, 2007, С. 526

74. М.Д. Машковский. Лекарственные средства, 15-е изд.//М., РИА «Новая волна», Издатель Умеренков, 2007, С. 713

75. Д.А. Безруков/ Технологии получения комбинированных липосомальных препаратов докеорубицина. Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук// М., МИТХТ, 2007

76. Н.Б. Фельдман/ Разработка противоопухолевых препаратов направленного действия на основе пептидных векторов и антиангиогенных агентов. Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук// М, 2007

77. М.А. Schubert, С.С. Muller-Goymann. Solvent injection as a new approach for manufacturing lipid nanoparticles evaluation of the method and process parameters// Eur. J. Pharm. Biopharm., 2003, V. 55, P. 125-131

78. K.-H. Song, S.-J. Chung, C.-K. Shim. Preparation and evaluation of proliposomes containing salmon calcitonin// J. Cont. Rel., 2002, V. 84, P. 27-37

79. А.П. Храпко/ Использование фосфолипидных наночастиц для повышения устойчивости семакса в различных биологических средах, обладающих протеолитической активностью. Магистерская диссертация// М, 2009

80. Т. Kai, Y. Akiyama, S. Nomura, M. Sato/ Oral absorption improvement of poorly soluble drug using solid dispersion technique// Chem. Pharm. Bull. (Tokyo), 1996, V. 44, No 3, P. 568571

81. M.J. Francis, N. Gulati, R.M. Pashley/ The dispersion of natural oils in de-gassed water// J. of Colloid and Interface Sci., 2006, V. 299, P. 673-677

82. M.J. Francis, R.M. Pashley/ A study of de-gassed oil in water dispersions as potential drug delivery systems// Colloids Surf. A, 2005, V. 260, P. 7-16

83. V. Tandon, S.K. Bhagavatula, W.C. Nelson, B.J. Kirby/ Zeta potential and electroosmotic mobility in microfluidic devices fabricated from hydrophobic polymers: 1. The origins of charge// Electrophoresis., 2008, V. 29, P. 1092-1101

84. V. Tandon, B.J. Kirby/ Zeta potential and electroosmotic mobility in microfluidic devices fabricated from hydrophobic polymers: 2. Slip and interfacial water structure// Electrophoresis., 2008, V. 29, P. 1102-1114

85. P. \V. binder, A. Voye/ Potentiometric investigations of the equilibria between caffeic acid and copper(II), zinc(II), iron(II) and hydrogen ions in aqueous solution// Polyhedron, 1987,V. 6, Iss. 1,P. 53-60

86. P. Shahgaldian, J. Gualbert, K. Aissa, A.W. Coleman/ A study of the freeze-drying conditions of calixarene based solid lipid nanoparticles// Eur. J. Pharm. Biopharm. 2003, V. 55, No 2, P. 181-184

87. Handbook of organic solvent properties, cons. I. M. Smallwood// Arnold, 1996, P. 241

88. J.L. Rigaud, M. Chami, O. Lambert, D. Levy, J.L. Ranck/ Use of detergents in two-dimensional crystallization of membrane proteins// Biochem. Biophys. Acta, 2000, V. 1508, P. 112-128.

89. V.S. Kulkarni, J.M. Boggs, R.E. Brown/ Modulation of nanotube formation by structural modifications of sphingolipids// Biophysical Journal 1999 - V. 77 - P. 319-330

90. T.C. Bai, G.B. Yan, J. Hu, H.L. Zhang, C.G. Huang/ Solubility of silybin in aqueous polyethylene glycol) solution// Int. J. Pharm., 2006, V. 308, P. 100-106

91. W. Wu, Y. Wang, L. Que/ Enhanced bioavailability of silymarin by self-microemulsifying drug delivery system// Eur. J. Pharm. Biopharm., 2006, V. 63, P. 288-294

92. J.Q. Zhang, J. Liu, X.L. Li, B.R. Jasti/ Preparation and characterization of solid lipid nanoparticles containing silibinin// Drug. Deliv. 2007, V. 14, P. 381-387

93. X. Yan-yu, S. Yun-mei, C. Zhi-peng, P. Qi-neng/ Preparation of silymarin proliposome: a new way to increase oral bioavailability of silymarin in beagle dogs// Int. J. Pharm., 2006, V. 319, P. 162-168

94. Д. В. Белых, А. В. Кучин/ Синтез полифункциональных хлоринов на основе метилфеофорбида а и его аналогов// Химия в интересах устойчивого развития, 2008, No 6, С. 617-629122. http://www.reles.ru/cat/drugs/Doxorubicin/

95. В.В. Ветрова /Выделение гликосфинголипидов головного мозга свиньи и изучение их свойств. Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук// М, МИТХТ. 2006

96. К.В. Шевченко, И.Ю. Нагаев,В.П. Шевченко,Н.Ф. Мясоедов/ Использование волокнистого углерода как носителя при введении трития в биологически активные соединения// Радиохимия, 2004, Т. 46, №4, С. 370-372

97. В.П. Шевченко, И.Ю. Нагаев, Л.Ю. Алфеева, Л.А. Андреева, П.А. Климова, А.В.Малкин, К.В. Шевченко, Н.Ф. Мясоедов/ Синтез меченного тритием семакса// Радиохимия. 2006, Т. 48, №3, С. 260-266

98. В.П. Шевченко, И.Ю. Нагаев, Л.Ю. Алфеева, Л.А. Андреева, К.В. Шевченко, Н.Ф. Мясоедов/ Синтез меченного тритием селанка//Радиохимия, 2006. Т. 48, №3, С. 267271

99. К.В. Шевченко, И.Ю. Нагаев,Л.Ю. Алфеева,Л.А. Андреева,А.А. Каменский, Н.Г. Левицкая, В.П. Шевченко,И.А. Гривенников,Н.Ф. Мясоедов/ Кинетика проникновения семакса в мозг и кровь крыс при интраназальном введении// Биоорг. хим., 2006, Т. 32, №1, С. 64-70

100. Л.А. Андреева, В.В. Безуглов, И.Ю. Нагаев, П.А. Климова, К.В. Шевченко, С.Н. Субботин, В.П. Шевченко, Н.Ф. Мясоедов/ Синтез меченного тритием семакса// Тезисы на Российском симпозиуме по химии и биологии пептидов, Москва, 2003, С.58