Акушерские и перинатальные исходы, эффективность эко с использованием криоконсервированных эмбрионов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, кандидат медицинских наук Коновальчикова, Татьяна Львовна

• Коновальчикова, Татьяна Львовна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Коновальчикова, Татьяна Львовна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль криоконсервации эмбрионов в программах вспомогательных репродуктивных технологий.

1.2. Физические основы криоконсервации.

1.3. Сравнительная эффективность программы ЭКО при переносе размороженных эмбрионов в зависимости от используемых методик оплодотворения, протоколов криоконсервации и схем подготовки эндометрия.

1.4. Отдаленные результаты криоконсервации эмбрионов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Обьем исследования; параметры, по которым проведены сравнительные исследования.

2.2. Методика ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов.

2.3. Общеклинические и специальные методы обследования беременных и новорожденных.

2.4. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. Клиническая характеристика групп.

ГЛАВА 4. ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЭКО ПРИ ПЕРЕНОСЕ КРИОКОНСЕРВИРОВАННЫХ ЭМБРИОНОВ.

4.1. Результаты программы криоконсервации эмбрионов в зависимости от стадии развития эмбриона на момент замораживания.

4.2. Влияние способа оплодотворения (ИКСИ или ЭКО) на эффективность программы криоконсервации эмбрионов.

4.3. Влияние различных протоколов подготовки эндометрия на эффективность ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов.

ГЛАВА 5. ТЕЧЕНИЕ БЕРЕМЕННОСТИ И РОДОВ ПОСЛЕ ПЕРЕНОСА КРИОКОНСЕРВИРОВАНЫХ ЭМБРИОНОВ, ПЕРИНАТАЛЬНЫЕ

ИСХОДЫ, СОСТОЯНИЕ ЗДОРОВЬЯ НОВОРОЖДЕННЫХ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Акушерские и перинатальные исходы, эффективность эко с использованием криоконсервированных эмбрионов»

Актуальность проблемы

Бесплодный брак, как в нашей стране, так и за рубежом остается одной из1 важнейших медицинских, социальных и общегосударственных проблем. По данным ВОЗ, частота бесплодного брака составляет 10-15% от числа супружеских пар и не имеет тенденции к снижению. В нашей стране проблема бесплодия приобретает особую актуальность в связи с резким падением рождаемости, которое наблюдается в последние годы (16).

Проблема бесплодия беспокоила человечество еще с древних времен. Разработаны и широко используются как консервативные, так и оперативные методы терапии бесплодия. Однако восстановление естественной фертильности традиционными способами — процесс длительный и не всегда результативный, а порой и невозможный. В связи с этим, успехам репродуктологии в последние десятилетия помимо достижений лапароскопии способствовала разработка нового метода лечения бесплодия — экстракорпорального с последующим переносом эмбрионов в полость матки (ЭКО).

Незаменимость ЭКО проявляется прежде всего при лечении пациенток с вариантами трубного бесплодия, которые исключают успех хирургических методов: при абсолютном женском бесплодии (отсутствие или полная непроходимость маточных труб); у женщин с гипофункцией яичников, обусловленной возрастным фактором, при истощении яичников, вызванном различными причинами; при тяжелых формах мужского бесплодия.

Сама идея экстракорпорального оплодотворения с целью лечения бесплодия возникла в 1930-х годах, после того как в опытах на животных кроликах) удалось провести оплодотворение in vitro, перенести эмбрион в матку и достичь успешного завершения беременности. Однако потребовалось свыше 40 лет интенсивных исследований, прежде чем появилось первое сообщение о рождении ребенка, зачатого «в пробирке» (24, 4

154). Начиная с 1978 года, метод экстракорпорального оплодотворения, разработаный Р. Эдвардсом и П. Стептоу (Англия), получил широкое развитие в мире. В России этот метод впервые был внедрен в 1985 году под руководством Б.В. Леонова и В.И. Кулакова, рождение первого ребенка произошло в 1986 году. Позже был достигнут значительный прогресс в лечении мужского бесплодия, связанный главным образом с разработкой метода интрацитоплазматической инъекции сперматозойда (ИКСИ).

В 90-х годах 20 века возможности вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) значительно расширились за счет широкого внедрения в практику ведущих мировых клиник, специализирующихся на лечении бесплодия, метода криоконсервации эмбрионов. Впервые криоконсервация эмбрионов млекопитающих была применена WЫttingham в 1972 году, когда в опытах на мышиных эмбрионах, которые были замороженны, а затем оттаяли, удалось добиться рождения здоровых особей (189). Первая беременность после переноса криоконсервированных человеческих эмбрионов была получена и описана в исследовании А.Тгоишоп в 1983 году, а первые роды произошли в 1984 году (172). К сожалению, в нашей стране применение вспомогательных репродуктивных технологий несколько отстает от мировых стандартов: достаточно сказать, что в России первый ребенок в программе ЭКО родился только в 1986 году в лаборатории Б.В. Леонова, а первые роды после переноса криоконсервированных эмбрионов произошли только в 2001 году. В настоящее время метод криоконсервации эмбрионов законодательно разрешен и введен в медицинскую практику в большинстве стран мира, в том числе и в России (18, 20).

Несмотря на относительно небольшой период времени, прошедший от начала использования криоконсервации эмбрионов человека в программах ЭКО, данный метод зарекомендовал себя как эффективный способ сохранения неперенесенных эмбрионов, применение которого способствует повышению суммарной вероятности преодоления бесплодия и расширяет показания для применения вспомогательных репродуктивных технологий.

При этом в циклах с использованием криоконсервированных эмбрионов нет необходимости в применении высоких доз гормональных препаратов (которые обычно используют для индукции суперовуляции), что исключает риск развития синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) и других осложнений гормональной стимуляции, а также приводит к снижению затрат пациентки на лечение, связанных с приобретением гормональных препаратов.

В некоторых случаях, криоконсервация эмбрионов является основным методом вспомогательных репродуктивных технологий, который может быть применен у ряда пациенток для реализации репродуктивной функции. В первую очередь, это касается женщин, у которых в ходе гормональной стимуляции суперовуляции развился СГЯ (или возникла высокая вероятность его развития), и у женщин с онкологическими заболеваниями, которым планируется проведение оофорэктомии, противоопухолевой лучевой или химиотерапии.

Вместе с тем, несмотря на существенные достижения в области замораживания эмбрионов эффективность программы ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов ниже, чем в циклах стимуляции суперовуляции и переноса нативных эмбрионов. На сегодняшний день многие вопросы, касающиеся эффективности и безопасности применения данного метода, остаются открытыми. Нет окончательной ясности в проблеме выбора наиболее эффективных протоколов криоконсервации и определения оптимальной для криоконсервации стадии развития эмбрионов. Вопрос о дозировке, способе введения и сочетании эстроген-гестагенов, равно как и о необходимости использования агонистов гонадотропных релизинг гормонов при подготовке эндометрия к переносу размороженных эмбрионов пока не имеет однозначного ответа. Недостаточно данных о влиянии криоконсервации эмбрионов на течение беременности, родов и состояние детей в перинатальном периоде. Так, по данным одних исследователей (122, 140, 184), дети, родившиеся в результате переноса размороженных эмбрионов, развиваются нормально и их здоровье не отличается от такового в общей популяции, другие авторы приводят противоположные факты (163). Все это определяет необходимость дальнейших исследований, направленных на оптимизацию протоколов ЭКО при переносе размороженных эмбрионов.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Повышение эффективности лечения бесплодия путем оптимизации протоколов криоконсервации эмбрионов и улучшение акушерских и неонатальных исходов.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Оценить эффективность программы криоконсервации эмбрионов на основании анализа выживаемости, их морфофункционального состояния, частоты имплантации и вероятности наступления беременности.

2. Определить частоту наступления беременности в зависимости от стадии развития эмбриона на момент криоконсервации (2 или 3 сутки).

3. Оценить влияние способа оплодотворения (ИКСИ или инсеминация) на эффективность ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов.

4. Провести сравнительный анализ частоты имплантации эмбрионов и наступления беременности при применении различных протоколов подготовки эндометрия.

5. Изучить особенности течения беременности, родов и раннего неонатального периода при ЭКО с использованием криоконсервации эмбрионов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

В результате проведенного исследования оценена эффективность ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов: частота наступления беременности составила 25%.

Определено, что на стадии раннего дробления оптимальными для криоконсервации являются 3 сутки развития эмрионов.

Способ оплодотворения (ИКСИ или инсеминация) достоверно не влияет на эффективность данного метода.

Доказано также, что частота наступления беременности значительно не отличается при различных схемах подготовки эндометрия к переносу размороженных эмбрионов, хотя и несколько выше при использовании агонистов ГнРГ.

Определены особенности течения беременности и родов у пациенток после переноса нативных эмбрионов и подвергшихся криоконсервации в сравнении с популяционными.

Существенной разницы в перинатальных исходах в зависимости от модификации ЭКО и в сравнении с популяционными показателями выявленно не было.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ.

Полученные в работе данные позволяют оптимизировать протоколы ЭКО при переносе криоконсервированых эмбрионов, тем самым повышая вероятность преодоления бесплодия с помощью методов вспомогательных репродуктивных технологий. Пациенткам группы высокого риска развития синдрома гиперстимуляции яичников целесообразно проводить криоконсервацию эмбрионов и переносить их в последующих циклах. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез пациенток в циклах ЭКО, осложненное течение беременности (высокая частота угрозы выкидыша и преждевременных родов, гестоза, внутриутробной задержки роста плода) обуславливают высокий процент кесарева сечения. Полученные данные могут быть использованы для определения тактики ведения данной группы пациенток, своевременного выявления и предупреждения осложнений течения беременности, снижения ранних репродуктивных потерь.

Положения, выносимые на защиту.

1. Криоконсервация является эффективным способом сохранения неперенесенных в ходе попытки ЭКО эмбрионов для их использования в последующих циклах. Выживаемость эмбрионов после криоконсервации составляет 50,2%; частота наступления беременности на перенос эмбрионов -24,76%; а уровень имплантации на перенесенный эмбрион - 11,52%).

2. Эффективность программы ЭКО при переносе эмбрионов, замороженных на 3 день развития, достоверно выше таковой при переносе эмбрионов, криоконсервированных на 2 день.

3. Применение процедуры ИКСИ не оказывает негативного влияния на жизнеспособность эмбрионов после криоконсервации и на частоту наступления беременности при переносе размороженных эмбрионов.

4. Эффективность ЭКО при переносе криоконсервированных эмбрионов после подготовки эндометрия с применением препаратов аналогов гонадолиберина, несколько выше, чем в естественном цикле (без а-ГнРГ), однако эти различия не имеют статистической значимости.

5. Особенностями течения беременностей, наступивших в результате подсадки размороженных эмбрионов, также как и нативных, является высокая частота угрозы выкидыша и преждевременных родов, гестоза, ВЗРП.

6. Основным методом родоразрешения пациенток после ЭКО является кесарево сечение, высокая частота которого (85%>) связана с чрезвычайно отягощенным анамнезом пациенток.

7. Массово-ростовые показатели и состояние здоровья новорожденных существенно не отличаются при переносе криоконсервированных или нативных эмбрионов. Перинатальные исходы в большей степени определяются осложненным течением беременности и родов, особенно при многоплодной беременности, и сроками родоразрешения.

Структура и обьем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, двух глав результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Коновальчикова, Татьяна Львовна

выводы

1. Криоконсервация эмбрионов является эффективным методом лечения бесплодия, повышая кумулятивную частоту наступления беременности при эко.

2. Уровень имплантации и частота наступления беременности после переноса размороженных после криоконсервации эмбрионов составляет 11,52% и 24,76% соответственно.

3. Эффективность программы ЭКО при переносе эмбрионов, замороженных на 3 день развития, достоверно выше таковой при переносе эмбрионов, криоконсервированных на 2 день.

4. Применение процедуры ИКСИ не оказывает негативного влияния на жизнеспособность эмбрионов после криоконсервации и на частоту наступления беременности при переносе размороженных эмбрионов.

5. Частота наступления беременности достоверно не зависит от схемы подготовки эндометрия к переносу криоэмбрионов. Перенос размороженных эмбрионов может осуществляться без применения агонистов гонадотропных р елизинг-гормонов.

6. Беременности, наступившие в результате подсадки размороженных эмбрионов, по течению не отличаются от ЭКО в стимулированных циклах и относятся к группе высокого риска в отношении развития угрозы прерывания, гестоза, ВЗРП, преждевременных родов. Особенно часто осложненное течение беременности отмечается при многоплодной беременности.

7. Высокая частота оперативного родоразрешения (85,7%) определяется не использованием криоэмбрионов, а связана с чрезвычайно отягощенным анамнезом пациенток.

8. Риск врожденных пороков развития у новорожденных от матерей, которым проводилось ЭКО с переносом криоконсервированных эмбрионов, не превышает этот показатель в общей популяции.

Практические рекомендации

1. Оставшиеся после переноса в стимулированных циклах эмбрионы «хорошего» качества целесообразно криоконсервировать и использовать при необходимости в последующих циклах.

2. У пациенток с высоким риском развития синдрома гиперстимуляции яичников средней и тяжелой степени целесообразно отменять перенос эмбрионов в стимулированных циклах, замораживать эмбрионы «хорошего» качества с целью их длительного хранения и переноса в последующих циклах после улучшения состояния пациенток.

3. Пациенток после ЭКО с переносом криоконсервированных эмбрионов, также как и после ЭКО в стимулированных циклах, необходимо более тщательно наблюдать в женской консультации, так как они относятся к группе высокого риска по осложненному течению беременности, особенно при многоплодии.

4. При родоразрешении пациенток после лечения бесплодия с использованием криоконсервации эмбрионов необходим индивидуальный подход с учетом фактора бесплодия. У женщин до 30 лет с трубно-перитонеальным или мужским генезом бесплодия при отсутствии сопутствующей экстрагенитальной и акушерской патологии, многоплодия возможно роды проводить через естественные родовые пути с тщательным кардиомониторным наблюдением за состоянием плода.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Коновальчикова, Татьяна Львовна, 2006 год

1. Адамян Л.В., Белобородов С.М. Возможность сохранения репродуктивной функции у онкологических больных // Проблемы репродукции 2003; 6: с. 29-41.

2. Ероян Л.Х. Беременность и роды у пациенток после ЭКО // Автореф. к.м.н., М., 2003, с. 22.

3. Жданова Ю.А. Многоплодная беременность // Вестник РГМУ, 2001, № 2/17, с.75 (абстр.)

4. Здановский В.М., Витязева И.И. Течение и исход беременностей после лечения бесплодия методами вспомогательной репродукции (МБР) // Проблемы репродукции 2000; 3: С.55-58.

5. Исакова Э.В., Каменецкая Ю.К., Корсак B.C. Многоплоидная беременность в программе переноса размороженных эмбрионов // Проблемы репродукции 2002; 3: С.68-69

6. Исакова Э.В. Подготовка эндометрия у реципиентов в программе "донорство ооцитов" // Проблемы репродукции 2003; 6: С. 42-48.

7. Калашников С.А., Зябликова Р.В., Сичинава Л.Г. Оценка физического развития новорожденных из двойни // Вопр. гинек., акуш. и перинат., 2004, т. 3, № 3, с. 55-58.

8. Камилова Д.П., Корнеева И.Е., Волков Н.И., Ковалев В.Ф. Случай тяжелого течения синдрома гиперстимуляции яичников // Проблемы репродукции 1999, 2, с.65-66

9. Кетиладзе Т.М., Овсянникова Т.В., Алексеева М.Л., Калинина Е.А. Синдром гиперстимуляции яичников: лечение и профилактика // Проблемы репродукции 1999; 2: С.52-55.

10. Ю.Корнеева И.Е., Кузьмичев Л.Н., Камилова Д.П., Ковалев В.Ф. Синдром гиперстимуляции яичников: некоторые аспекты диагностики и лечения // Материалы научного форума: «Новые технологии в акушерстве и гинекологии». М 1999; С.70-71.

11. Корнеева И.Е., Иванова A.B., Баркалина Н.В. Синдром гиперстимуляции яичников: профилактика, диагностика, лечение (обзор литературы) // Проблемы репродукции 2004; 1: С.43-50.

12. Корнеева И.Е., Фанченко Н.Д., Леонов Б.В., Иванец Т.Ю., Камилова Д.П. Профилактика тромботических осложнений у пациенток с синдромом гиперстимуляции яичников // Проблемы репродукции 2002; 1: С.30-33.

13. Корсак B.C., Аржанова О.Н., Жаворонкова Н.В., Пайкачаева Ю.М. Проблемы вынашивания беременности после экстракорпорального оплодотворения //Вестн. Рос.асс.акуш-гинек. 1997; 2; С.52-55.

14. Корсак B.C., Громыко Ю.Л., Исакова Э.В. Алгоритм ведения и исходы беременностей, наступивших в результате вспомогательных репродуктивных технологий // Проблемы репродукции 2003; 3: С.40-42.

15. Кузьмичев Л.Н., Кулаков В.И., Леонов Б.В. Экстракорпоральное оплодотворение. Отбор, подготовка и тактика ведения больных // М.: «Мир», 2001: С.165

16. Перфильева Н.В. Особенности течения и исходы беременности у женщин после применения вспомогательных репродуктивных технологий. // Проблемы репродукции, № 5, 2003, с.45-46.

17. Регистр Российской ассоциации репродукции человека. Вспомогательные репродуктивные технологии в России: отчет №5 за 1999г. //Проблемы репродукции 2001; 5: С. 8-13.

18. Савельева Г.М., Шалина Р.И., Иванова О.Г., Ероян JI.X. Роль кесарева сечения в современном акушерстве // Актуальные вопросы акушерства и гинекологии, т. 1, № 1, 2001-2002, с. 81-8.

19. Сичинава Л.Г., Панина О.Б., Калашников С.А., Викаитова М.В., Ермолаева А.С. Многоплодие: диагностика и тактика ведения беременности и родов // Вопр. гинекол., акушерства и перинатологии, 2002, т. 1, № 2, с. 4751.

20. Фанченко Н.Д., Леонов Б.В., Щедрина Р.Н., Кузьмичев Л.Н., Яворовская К.А., Алексеева М.А., Колодько В.Г., Новиков Е.А., Киндарова Л.Б. К вопросу об эффективности экстракорпорального оплодотворения // Проблемы репродукции 2000; №5

21. Acker, J.P. and McGann, L.E. Protective effect of intracellular ice during freezing // Cryobiology 2003; 46, P. 197-202.

22. Al-aghbari, A.M. and Menino, A.R. Survival of oocytes recovered from vitrL£ed sheep ovarian tissues // Anim. Reprod. Sci. 2002; 71: P. 101-110.

23. Ali, J. and Shelton, J.N. Vitrification of preimplantation stages of mouse embryos // J. Reprod. Fertil. 1993; 98, P.459-465.

24. Ali, J. and Shelton, J.N. Design of vitrification solutions for the cryopreservation of embryos // J. Reprod. Fertil. 1993; 99: P.471-477.

25. Anchordoguy, T.J., Rudolph, A.S., Carpenter, J.F. and Crowe, J.H. Modes of interaction of cryoprotectants with membrane phospholipids during freezing // Cryobiology 1987; 24; P.324-31.

26. Anchordoguy, Т., Carpenter, J.F., Loomis, S.H. and Crowe, J.H. Mechanisms of interaction of amino acids with phospholipid bilayers during freezing // Biochim. Biophys Acta. 1988; 946: P.299-306.

27. Anchordoguy, T.J., Cecchini, C.A., Crowe, J.H. and Crowe, L.M. Insights into the cryoprotective mechanism of dimethyl sulfoxide for phospholipid bilayers// Cryobiology 1991; 28: P.467-473.

28. Anchordoguy, T.J., Carpenter, J.F., Crowe, J.H. and Crowe, L.M. Temperature-dependent perturbation of phospholipid bilayers by dimethylsulfoxide // Biochim. Biophys Acta 1992; 1104: P.l 17-22.

29. Anderson AR, Weikert ML, Crain JL. Determining the most optimal stage for embryo cryopreservation // Reprod Biomed Online. 2004 Feb; 8(2): P.207-11.

30. Arav, A., Zeron, Y., Leslie, S.B., Behboodi, E., Anderson, G.B. and Crowe, J.H. Phase transition temperature and chilling sensitivity of bovine oocytes // Cryobiology 1996; 33, P.589-599.

31. Arav, A., Pearl, M. and Zeron, Y. Does membrane lipid pro^Ele explain chilling sensitivity and membrane lipid phase transition of spermatozoa and oocytes? // CryoLetters 2000; 21: P. 179-186.

32. Arav, A., Yavin, S., Zeron, Y., Natan, D., Dekel, I. and Gacitua, H. New trends in gamete's cryopreservation // Mol. Cell. Endocrinol. 2002; 187: P.77-81.

33. Baril, G., Traldi, A.L., Cognie, Y., Leboeuf, B., Beckers, J.F. and Mermillod, P. Successful direct transfer of vitrLEed sheep embryos // Theriogenology 2001; 56: P.299-305.

34. Barlow P., Lejeune B., Englert., Van Rysselberge M., Dedueldre M., Vekemans M., Leroy F. Early pregnancy loss and obstetrical risk after in vitro fertilization and embrio replacement // Hum.Reprod. 1988 Jul; 3(5); P.671-675.

35. Bell R., Eddie L., Lester A. et al. Relaxin in human pregnancy serum measured with an homologous radioimmunoassay // Obstet. Gynecol. 1987; 69: P.585-589.

36. Ben-Nun I., Shulman A. Introduction of artifitial endometrial cycles with s.c. oestrogen implants and injectable progesterone in in-vitro fertilization treatment with donated oocytes // Hum. Reprod. 1997; 12: P.2267-2270.

37. Cocero MJ, Lopez-Sebastian A, Barragan ML, Picazo RA. Differences on post-thawing survival between ovine morulae and blastocysts cryopreserved with ethylene glycol or glycerol // Cryobiology 1996; 33: P.502-7.

38. Cohen J, Simons RS, Edwards RG, Fehilly CB, Fishel SB. Pregnancies following the frozen storage of expanding human blastocysts // J In Vitro Fertil Embr Trans 1985; 2: P.59-64.

39. Cohen J, Simons R, Fehilly C, Edwards RG. Birth after replacement of hatching blastocyst cryopreserved at expanded blastocyst stage // Lancet 1987; i: P.647.

40. Critser, J.K. Agca, Y. and Gunasena, K.T. The cryobiology of mammalian oocytes // In Karow, A.M. and Critser, J.K. (eds), Reproductive Tissue Banking: ScientiiEc Principles. Academic Press, New York, 1997; P.329-357.

41. Critser, J.K. and Russell, R.J. Cryobiology of embryos germcells, and ovaries // ILAR J. 2000; 41: P. 183-237.

42. Critser, J.K. and Mobraaten, L.E. Cryopreservation of murine spermatozoa// ILAR J. 2000; 41: P. 197-206.

43. Crowe, J.H., Crowe, L.M., Carpenter, J.F., Rudolph, A.S., Wistrom, C.A., Spargo, B.J. and Anchordoguy, TJ. Interactions of sugars with membranes // Biochim. Biophys. Acta. 1988; 947: P.367-384.

44. Damario MA, Hammitt DG, Session DR, Dumesic DA. Embryo cryopreservation at the pronuclear stage and efficient embryo use optimizes the chance for a liveborn infant from a single oocyte retrieval // Fertil Steril. 2000 Apr; 73(4): P.767-73.

45. Damario MA, Dumesic DA. Relationship of embryo cryopreservation to cost-effectiveness of ART //Fertil Steril. 2000 Sep; 74(3): P.613-4.

46. Delvigne A., Rozenbetg S. Epidemiology and prevention of ovarian hyperstimulation syndrome: a review// Hum Reprod 2002; 8: 6: P.559- 577.

47. Delvigne A., Rozenberg S. A qualitative systematic review of coasting, a procedure to avoid ovarian hyperstimulation syndrome in IVF patients // Hum Reprod Update 2002; 8: 3: P.291-296.

48. Demoulin A, Jouan C, Gerday C, Dubois M. Pregnancy rates after transfer of embryos obtained from different stimulation protocols and frozen at either pronucleate or multicellular stages // Hum Reprod 1991; 6: P.799-804.

49. Edgar DH, Bourne H, Spiers AL, McBain JC. A quantitative analysis of the impact of cryopreservation on the implantation potential of human early cleavage stage embryos // Hum Reprod 2000; 15: P. 175-9.

50. El-Danasouri I, Selman H. Successful pregnancies and deliveries after a simple vitrification protocol for day 3 human embryos // Fertil Steril 2001; 76: P.400-402.

51. El-Toukhy T, Khalf Y, Al-Darazi K, Andritsos V, Taylor A, Braude P. Effect of blastomere loss on the outcome of frozen embryo replacement cycles // Fertil Steril 2003; 79: P. 1106-11.

52. Elliott, K. and Whelan, J. (eds) The Freezing of Mouse Embryos // CIBA Foundation Symposium 52. Elsevier, Amsterdam, 1977; 340 pp.

53. Emiliani S, Van den Bergh M, Vannin AS, Biramane J, Englert Y. Comparison of ethylene glycol, 1,2-propanediol and glycerol for cryopreservation of slow-cooled mouse zygotes, 4-cell embryos and blastocysts // Hum Reprod. 2000 Apr; 15(4): P.905-10.

54. Fabbri, R., Porcu, E., Marsella, T., Rocchetta, G., Venturoli, S. and Flamigni, C. Human oocyte cryopreservation: new perspectives regarding oocyte survival//Hum. Reprod. 2001; 16: P.411-416.

55. Ferrareti A.P., Gianaroli L., Tarlatzis B.C. Ovarian hyperstimulation syndrom // Serono Fertility Series 1997; 1: P.89.

56. FIVNAT Comparaison des grossesses issues de transferts d'embryons congel6s aux grossesses issues de transferts d'embryons frais en f6condation in vitro // Contr Fert. Sex. 1994; 22: P.287-291.

57. Frydman R., Forman R.G., Belaisch-Allart J. et al. An obstetric analysis of fifty consecutive pregnancies after transfer of cryopreserved human embryos // 1989; 160; P.209-213.

58. Gardner D.K., Lane M., Stevens J., and Schoolcraft W.B. Changing the start temperature and cooling rate in a slow-freezing protocol increases human blastocyst viability // Fertil Steril, Feb 2003; 79(2): P.407-10.

59. Gorrill MJ, Kaplan PF, Patton PE, Burry KA. Initial experience with extended culture and blastocyst transfer of cryopreserved embryos // Am J Obstet Gynecol 1999; 180: P. 1472-4.

60. Goto K, Muguruma K, Kuramochi T, Shimozawa N, Hioki K, Itoh T, Ebukuro M. Effects of cryopreservation of mouse embryos and in vitro fertilization on genotypic frequencies in colonies // Mol Reprod Dev. 2002 Jul; 62(3): P.307-11.

61. Guerif F, Bidault R, Cadoret V, Couet ML, Lansac J, Royere D. Parameters guiding selection of best embryos for transfer after cryopreservation: a reappraisal // Hum Reprod. 2002 May; 17(5): P. 1321-6.

62. Gutierrez Najar A., Stern Colin Y., Nunes J., Gonzalez Panzzy M.E., Orbea Travez M. Pregnancy and birth after assisted reproduction // Reprod Biomed Online 2002 Jul-Aug; 5(1); P.78-88.

63. Hee-Jun Chi, Jung-Jin Koo, Moon-Young Kim, Jin-Young Joo, Sang-Sik Chang, and Kil-Saeng Chung Cryopreservation of human embryos using ethylene glycol in controlled slow freezing // Hum Reprod. 2002 Aug; 17(8): P.2146-51

64. Hochi S., Akiyama M., Minagawa G., Kimura K. and Hanada A. Effects of cooling and warming rates during vitrification on fertilization of in vitro-matured bovine oocytes // Cryobiology 2001; 42: P.69-73.

65. Hochi S., Terao T., Kamei M., Hirao M. and Hirabayashi M. Vitri/Ecation of pronuclear stage rabbit zygotes by different ultra-rapid cooling procedures // Theriogenology 2003; 59: P.303.

66. Hoover M L, Baker A, Check JH, Lurie D, Summers D. Clinical outcome of cryopreserved human pronuclear stage embryos resulting from intracytoplasmic sperm injection // Fertil Steril 1997; 67: P.621^1.

67. Hsieh Y.Y., Tsai H., Chang C.C., Lo H.Y., Lai A. Ultrarapid cryopreservation of human embryos: experience of 1,582 embryos // Fertil Steril 1999; 72:2, P. 253-256.

68. Iwarson E, Lundqvist M, Inzunza J, et al. A high degree of aneuploidy in frozen-thawed human preimplantation embryos // Hum Genet 1999; 104: P.376-82

69. Janny L, Menezo Y. Evidence for a strong paternal effect on human preimplantation embryo development and blastocyst formation // Mol Reprod Dev 1994; 38: P.36-42.

70. Janny L, Me'ne'zo Y. Maternal age effect on early human embryonic development and blastocyst formation // Mol Reprod Dev 1996; 45: P.31-7.

71. Jelinkova L, Selman HA, Arav A, Strehler E, Reeka N, Sterzik K. Twin pregnancy after vitrification of 2-pronuclei human embryos // Fertil Steril 2002; 77: P.412-414

72. Karow, A.M. Cryobiology for mammalian embryologists // Reproductive Tissue Banking: Scientific Principles. Academic Press 2001, New York, 472pp.

73. Kattera S, Shristav P, Craft I. Comparison of pregnancy outcome of pronuclear and muticellular stage frozen-thawed embryo transfers // J Assist Reprod Genet 1999; 16: P.358-62.

74. Kasai, M., Niwa, K. and Iritani, A. Survival of mouse embryos frozen and thawed rapidly // J. Reprod. Fertil. 1980; 59: P.51-56.

75. Kasai, M., Komi, J.H., Takakamo, A., Tsudera, H., Sakurai, T. and Machida, T. A simple method for mouse embryo cryopreservation in a low toxicity vitrification solution, without appreciable loss of viability // J. Reprod. Fertil. 1990; 89: P.91-97.

76. Kasai, M., Zhu, S.E., Pedro, P.B., Nakamura, K., Sakurai, T. and Edashige, K. Fracture damage of embryos and its prevention during vitrification and warming // Cryobiology 1996; 33: P.459-464.

77. Keltz M.D., Jones E.E., Duleba A.J. Baseline cyst formation after luteal gonadotropin-releasing gormone agonist administration is linked to poor in vitro fertilization outcome // Fertil Steril 1995; 64, P. 568-572

78. Kowalik A, Palermo GD, Barmat L, Veeck L, Rimarachin J, Rosenwaks Z. Comparison of clinical outcome after cryopreservation of embryos obtained from intracytoplasmic sperm injection and in-vitro fertilization // Hum Reprod. 1998 Oct; 13(10): P.2848-51.

79. Kuleshova, L.L. and Lopata, A. Vitrification can be more favorable than slow cooling //Fertil. Steril. 2002; 78: P.449-454.

80. Kuleshova, L.L. and Shaw, J.M. A strategy for rapid cooling of mouse embryos within a double straw to eliminate the risk of contamination during storage in liquid nitrogen // Hum. Reprod. 2000; 15: P.2604-2609.

81. Kuleshova, L., Gianaroli, L., Magli, C., Ferraretti, A. and Trounson, A. Birth following vitrification of a small number of human oocytes: case report // Hum. Reprod. 1999; 14; P.3077-3079.

82. Kuleshova, L.L. MacFarlane, D.R., Trounson, A.O. and Shaw, J.M. Sugars exert a major influence on the vitrification properties of ethylene glycol-based solutions and have low toxicity to embryos and oocytes // Cryobiology 1999; 38: P.119-130.

83. Kuleshova, L.L., Shaw, J.M. and Trounson, A.O. Studies on replacing most of the penetrating cryoprotectant by polymers for embryo cryopreservation // Cryobiology 2001; 43: P.21-31

84. Lai AC, Lin BP, Chang CC, Tsai HD, Hwang VW, and Lo HY Pregnancies after transfer of ultrarapidly frozen human embryos // J Assist Reprod Genet, Sep 1996; 13(8): P.625-8.

85. Langley MT, Marek DM, Gardner DK, Doody KM, Doody KJ. Extended embryo culture in human assisted repoduction treatments // Hum Reprod 2001; 16: P.902-8.

86. Leibo, S.P. Cryobiology: preservation of mammalian embryos // Basic Life Sci. 1986; 37: P.251-272.

87. Leibo S, Loskutoff NM. Cryobiology of in vitro derived bovine embryos // Theriogenology 1993; 39: P.81-94.

88. Leibo, S.P., McGrath, J.J. and Cravalho, E.G. Microscopic observation of intracellular ice formation in unfertilized mouse ova as a function of cooling rate // Cryobiology 1978; 15: P.257-271.

89. Liebermann J, F Nawroth, V Isachenko, E Isachenko, G Rahimi, M. J. Tucker. Potential Importance of Vitrification in Reproductive Medicine // Biol Reprod, Dec 2002; 67: P.1671-1680.

90. Lopez-Bejar, M. and Lopez-Gatius, F. Nonequilibrium cryopreservation of rabbit embryos using a modified (sealed) open pulled straw procedure // Theriogenology 2002; 58: P.1541-1552.

91. Luyet BJ. The vitrification of organic colloids and of protoplasm // Biodynamica 1937; 1: P.l-14

92. Macas E, Imthurn B, Rosselli M, Borsos M, Maurer Major E, Keller PJ, et al. Impairment of the development potential of frozen thawed human zygotes obtained after intracytoplasmic sperm injection // Fertil Steril 1998; 69: P.630-5.

93. Machtinger R, Dor J, Levron J, Mashiach S, Levran D, Seidman DS. The effect of prolonged cryopreservation on embryo survival // Gynecol Endocrinol. 2002 Aug; 16(4): P.293-8.

94. Mandelbaum J, Belaisch-Allart J, Junca AM, Antoine JM, Plachot M, Alvarez S, et al. Cryopreservation in human assisted reproduction is now routine for embryos but remains a research procedure for oocytes // Hum Reprod 1998; 13 (Suppl 3): P.161-74.

95. Mandelbaum J, Junca AM, Plachot M, Alnot MO, Alvarez S, Debache C, et al. Human embryo cryopreservation, extrinsic and intrinsic parameters of success. Hum Reprod 1987;2:709-15.

96. Massip A. Cryopreservation of embryos of farm animals // Reprod Dom Anim 2001; 36: P.49-55.

97. Martinez, A.G. and Matkovic, M. Cryopreservation of ovine embryos: slow freezing and vitrification // Theriogenology 1998; 49: P.1039-1049.

98. Mauri A. L. Cryopreservation of embryos, blastocysts, and pregnancy rates of blastocysts derived from frozen-thawed embryos and frozen-thawed blastocysts // J Assist Reprod Genet. 2001 Nov; 18(11): P.579-82.

99. Mazur, P. The freezing of living cells: mechanisms and implications // Am. J. Physiol. 1984; 247 (3 Pt 1); P. 125-142.

100. Mazur, P. (1990) Equilibrium, quasi-equilibrium, and nonequilibrium freezing of mammalian embryos. Cell Biophys., 17, 53±92.

101. Mazur, P., Leibo, S. and Chu, E.H.Y. (1972) A two-factor hypothesis of freezing injury: evidence from Chinese hamster tissue culture cells. Exp. Cell Res., 71, 345±355.

102. McElhinney B., Ardill J., Caldwell C. et al. Ovarian hyperstimulation syndrome and assisted reproductive technologies: why some and not others? Hum Reprod 2002; 17: 6: 1548 — 1553.

103. Y. Menezo Cryopreservation of IVF embryos: which stage? Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2004 Apr 5;113 Suppl l:S28-32

104. Mikova M, Mardesic T, Huttelova R, Zetova L, Voboril J, Muller P. Importance of embryo cryopreservation in a program of in vitro fertilization: experience and results of 550 transfers of thawed embryos Ceska Gynekol. 1997 Oct;62(5):265-8.

105. Miller, R.H. and Mazur, P. (1976) Survival of frozen±thawed human red cells as a function of cooling and warming velocities. Cryobiology, 13, 404±414.

106. Miller KF, Goldberg JM. In vitro development and implantation rates of fresh and cryopreserved sibling zygotes. Obstet Gynecol 1995;85:999-1002.

107. Muasher S.J., Kruithoff C., Simonetti S. et al. Controlled preparation of the endometrium with exogenous steroids for the transfer of frozen-thawed pre-embryos in patients with anovulatory or irregular cycles // Hum. Reprod 1991; 6, P.443-445.

108. Mukaida, T., Wada, S., Takahashi, K., Pedro, P.B., An, T.Z. and Kasai, M. (1998) Vitrification of human embryos based on the assessment of suitable conditions for 8-cell mouse embryos. Hum. Reprod., 13, 2874±2879.

109. Mukaida T, Nakamura S, Tomiyama T, Ishikawa Y, Makita M, Asada T, Araki Y. Successful birth after transfer of vitrified human blastocysts with use of a cryoloop container-less technique. Fertil Steril 2001 76:618-623

110. Mukaida T, Takahashi K, Kasai M. Blastocyst cryopreservation: ultrarapid vitrification using cryoloop technique. Reprod Biomed Online 2003;6:221-5.

111. Mukaida, T., Nakamura, S., Tomiyama, T., Wada, S., Oka, C., Kasai, M. andTakahashi, K. (2003) Vitrification of human blastocysts using cryoloops: clinical outcome of 223 cycles. Hum. Reprod., 18, 384±391.

112. Oktay K, Buyuk E, Davis O, Yermakova I, Veeck L, Rosenwaks Z Fertility preservation in breast cancer patients: IVF and embryo cryopreservation after ovarian stimulation with tamoxifen. Hum Reprod. 2003 Jan;18(l):90-5.

113. O'Neil, L., Paynter, SJ. and Fuller, BJ. (1997) Vitrification of mature mouse oocytes: improved results following addition of polyethylene glycol to a dimethyl sulfoxide solution. Cryobiology, 34, 295±301.

114. O'Neil, L., Paynter, S.J., Fuller, B.J., Shaw, R.W. and DeVries, A.L. (1998) Vitrification of mature mouse oocytes in a 6 M Me2SO solution supplemented with antifreeze glycoproteins: the effect of temperature. Cryobiology, 37, 59±66.

115. Palasz AT, Thundathil J, De La Fuente J, Mapletoft RJ. Effect of reduced concentrations of glycerol and various macromolecules on the cryopreservation of mouse and cattle embryos.Cryobiology. 2000 Aug;41(l):35-42.

116. Pattinson A.H., Green C.A., Fleetham J. et al. Exogenous control of the cycle simplifies thawed embryo transfer and results in a pregnancy rate similar to that for natural cycles // Fertil Stiril, 1992; 58, p. 627-629.

117. Platek, D., Chazzotte, C., Girz, B. et al. (1997) Elevated relaxin levels may predict preterm delivery in spontaneous twin gestations. Am. J. Obstet.Gynecol., 176, S54.

118. Quinn P. Success of oocyte and embryo freezing and its effect on outcome with in vitro fertilization. Semin Reprod Endocrinol 1990;8:272-80.

119. Quinn P, Kerin J. Experience with the cryopreservation of human embryos using the mouse as a model to establish successful techniques. J In Vitro Fertil Embr Trans 1986;3:40-5.

120. Rail, W.F. and Wood, M.J. (1994) High in vitro and in vivo survival of day 3 mouse embryos vitrified or frozen in a non-toxic solution of glycerol and albumin. J. Reprod. Fertil., 101, 681±688.

121. Rail, W.F., Mazur, P. and McGrath, J.J. (1983) Depression of the icenucleation temperature of rapidly cooled mouse embryos by glycerol and dimethyl sulfoxide. Biophys. J., 41, 1±12.

122. Reichenbach H.D., Rodriques n. Survival of mouse morulae and early blastocysts after direct plunging into liquid nitrogen. Theriogenology 1988. 29: 1: 294.

123. Renard JP, Nguyen BX, Gamier V. Two step freezing of two cell rabbit embryos after partial dehydratation at room temperature. J Reprod Fertil 1984;71:573-80.

124. Revel A, Safran A, Laufer N, Lewin A, Reubinov BE, Simon A. Twin delivery following 12 years of human embryo cryopreservation: case report. Hum Reprod. 2004 Feb; 19(2): 328-9.

125. Revel A. and Laufer N. Protecting female fertility from cancer therapy. Mol Cell Endocrinol, Feb 2002; 187(1-2): 83-91.

126. Rizk, B., Doyle, P., Tan, S.L. et al. (1991) Perinatal outcome and congenital malformations in IVF babies from the Bourn Hallam group. Hum. Reprod., 6, 1259-1264.

127. Schnorr J., Brown S., Oehninger S., Mayer J., Muasher S., Lanzerdorf S. Impact of intracytoplasmic sperm injection on evbryo cryopreservation and clinical outcome. //Fertil Stiril 2001; 75:3: P. 636-637.

128. Shaw J.M. and G.M.Jones. Terminology associated with vitrification and other cryopreservation procedures for oocytes and embryos // Human Reproduction Update, 2003, Vol.9, No.6 pp. 583±605

129. Shaw J.M., Oranratnachai, A. and Trounson, A.O. (2000b) Cryopreservation of oocytes and embryos. In Trounson, A.O. and Gardner, D. (eds), Handbook of In Vitro Fertilization, 2nd edn. CRC Press, Boca Raton, FL, USA. Chap. 16, pp. 373±412.

130. Shaw, P.W., Bernard, A.G., Fuller, B.J., Hunter, J.H. and Shaw, R.W. (1992) Vitrification of mouse oocytes using short cryoprotectant exposure: effects of varying exposure times on survival. Mol. Reprod. Dev., 33, 210±214.

131. Shenker J.G. Ovarian hyperstimulation syndrom. // Reproductive Medicine and Surgery. St Louis Mosby 1995; 650-679.

132. Selick CE, Hofmann GE, Albano C, Horowitz GM, Copperman AB, Garrisi GJ, et al. Embryo quality and pregnancy potential of fresh compared with frozen embryos—is freezing detrimental to high quality embryos? Hum Reprod 1995;10:392-5.

133. Selman HA, El-Danasouri I. Pregnancies derived from vitrified human zygotes. Fertil Steril 2002 77:422-423

134. Simon A, Holzer H, Hurwitz A, Revel A, Zentner BS, Lossos F, Laufer N. Comparison of cryopreservation outcome following intracytoplasmic sperm injection and conventional in vitro fertilization. // J Assist Reprod Genet. 1998 Aug; 15(7):431-7.

135. Smitz J. Ron-El R. Tarlatzis B.C. The use of gonadotropin-releasing gormone agonist for in vitro fertilization and other assisted procreation techniques: Experience from three centers // Hum Reprod 1992; 7, P.49-66.

136. Society for Assisted Reproductive Technology, American Society for Reproductive Medicine. Assisted reproductive technology in the USA and Canada // Fértil Steril 1996; 66, P. 697-705

137. Sreptoe P., Edwards R.G. Birth after the re-implantation of a human embryo (letter). //Lancet 1978; 2: P. 366.

138. Sutcliffe, A.G., D'Souza, S.W., Cadman, J. et al. (1995) Outcome in children from cryopreserved embryos. Arch. Dis. Child., 72, 290-293.

139. Sutton, R.L. (1992) Critical cooling rates for aqueous cryoprotectants in the presence of sugars and polysaccharides. Cryobiology, 29, 585±598.

140. Szell A., Shelton XX. Sucrose dilution of glycerol from mouses embryos frozen rapidly in liquid nitrogen vapour. J Reprod Fert 1986; 76: 1: 401 — 408.

141. Szell A., Shelton J.N. Role of equilibration before rapid freezing on mouse embryos. J Reprod Fert 1986; 78: 2: 699 — 703.

142. Szell A., Shelton J.N. Osmotic and cryoprotective effects of glycerol-sucrose solutions on Day-3 mouse embryos. J Reprod Fert 1987; 80: 1: 309 — 316.

143. Tachataki M, Winston RM, Taylor DM. Quantitative RT-PCR reveals tuberous sclerosis gene, TSC2, mRNA degradation following cryopreservation in the human preimplantation embryo. Mol Hum Reprod. 2003 0ct;9(10):593-601.

144. Takahashi Y., Kanagawa H. Effect of equilibration period on the viability or" lroren-thawed mouse morulae after rapid freezing. Molec Reprod Devel 1990; 26: 105 — 110.

145. Takeda T., Elsen R., Seidel G.E. Cryopreservation of mouse embryos by direct plunging into liquid nitrogen. Theriogenology 1984; 21:1: 266.

146. Tao J, Tamis R, Fink K. Pregnancies achieved after transferring frozen morula/compact stage embryos. Fertil Steril 2001; 75: 629-31.

147. Tao J, Tamis R, Fink K. Cryopreservation of mouse embryos at morula/ compact stage. J Assist Reprod Genet 2001; 18: 235-43.

148. Tao J, RH Craig, M Johnson, B Williams, W Lewis, J White, and N Buehler Cryopreservation of human embryos at the morula stage and outcomes after transfer. //Fertil Steril, Jul 2004; 82(1): 108-18

149. Testart J, Lassalle B, Belaisch-Allart J, Hazout A, Forman R, Rainhorn JD, et al. High pregnancy rates after early human embryo freezing. Fertil Steril 1986; 46: 268-72.

150. The European IVF-monitoring programme, for the European Society of Human Reproduction and Embriology // Hum Reprod. 2001; 16:2: P. 384-391.

151. Tiitinen A, Halttunen M, Harkki P, Vuoristo P, Hyden-Granskog C. Elective single embryo transfer: the value of cryopreservation. Hum Reprod. 2001 Jun; 16(6): 1140-4.

152. Trounson, A. (1986) Preservation of human eggs and embryos. Fertil. Steril., 46,1±12.

153. Trounson, A., Peura, A., Freemann, L. and Kirby, C. (1988) Ultrarapid freezing of early cleavage stage human embryos and eight-cell mouse embryos. Fertil. Steril., 49, 822±826.

154. Trounson A, Mohr L. Human pregnancy following cryopreservation, thawing and transfer of an eight-cell embryo. Nature 1983; 305: 707-9.

155. Troup SA, Matson PL, Critchlow JD, Morroll DR, Lieberman BA, Burslem RW. Cryopreservation of human embryos at the pronucleate, early cleavage, or expanded blastocyst stages. Eur J Obst Gyn Reprod Biol 1990; 38: 133-9.

156. Tucker M. Current status of blastocyst cryopreservation. In: The Human Blastocyst 2001, Proceedings of the 3rd Annual Workshop on Ulture Conditions and Cryopreservation August, March 24-25th, p. 49-56.

157. Tummon IS, Contag SA, Thornhill AR, Session DR, Dumesic DA, Damario MA. Cumulative first live birth after elective cryopreservation of all embryos due to ovarian hyperresponsiveness. Fertil Steril. 2004 Feb; 81(2): 30914.

158. Vajta, G. (2000) VitrLEcation of the oocytes and embryos of domestic animals. Anim. Reprod. Sci., 60±61, 357±364.

159. Vajta, G., Holm, P., Kuwayama, M., Booth, P.J., Jacobsen, H., Greve, T. and Callesen, H. (1998) Open pulled straw (OPS) vitrLEcation: a new way to avoid cryoinjuries of mammalian ova and embryos. Mol. Reprod. Dev., 51, 53±58.

160. Van den Abbeel E, Camus M, Van Waesberghe L, Devroey P, Van Steirteghem AC. Viability of partially damaged human embryos after cryopreservation. Hum Reprod. 1997 Sep; 12(9): 2006-10.

161. Van den Abbeel E, Camus M, Joris H, Van Steirteghem A. Embryo freezing after intracytoplasmic sperm injection. Mol Cell Endocrinol 2000a; 169: 49-52.

162. Van der Elst J, Van den Abbeel E, Vitrier S, Camus M, Devroey P, Van

163. Steirteghem AC. Selective transfer of cryopreserved human embryos with furthercleavage after thawing increases delivery and implantation rates. Hum Reprod 1997; 12: 1513-21.

164. Van Steirteghem A., Van der Elst J., Van den Abbeel E. et al. Cryopreservation of superhumerary multicellular human embryos obtained after intracytoplasmic sperm injection. //Fertil. Steril., 1994, 62: 775-80.

165. Veeck LL, Amundson CH, Brothman LJ, DeScisciolo C, Maloney MK, Muasher SJ, et al. Significantly enhanced pregnancy rates per cycle through cryopreservation and thaw of pronuclear stage oocytes. Fertil Steril 1993; 59: 1202-7.

166. Wada, I., Macnamee, M.C., Wick, K., Bradfield, J.M., Brinsden, P.R. (1994) Birth characteristics and perinatal outcome of babies conceived from cryopreserved embryos. Hum. Reprod., 9, 543-546.

167. Wennerholm WB. Cryopreservation of embryos and oocytes: obstetric outcome and health in children. Hum Reprod. 2000 Dec; 15 Suppl 5: 18-25.

168. Wennerholm U.B., L.Hambergerl, L.Nilssonl, an IVF programme. Obstetric and perinatal outcome of children conceived from cryopreserved embryos. Human Reproduction vol.12 no.8 pp.1819-1825, 1997

169. Wilmut, I. (1972) The effect of cooling rate, warming rate, cryoprotective agent and stage of development on survival of mouse embryos during freezing and thawing. Life Sci., 11, 1071±1079.

170. Whittingham DG, Leibo SP, Mazur P. Survival of mouse embryos frozen to -196 degrees and -269 degrees C. //Science. 1972 Oct 27; 178(59): 411-4.

171. Wowk, B. and Fahy, G.M. (2002) Inhibition of bacterial ice nucleation by polyglycerol polymers. Cryobiology, 44, 14±23.

172. Wowk, B., Darwin, M., Harris, S.B., Russell, S.R. and Rasch, C.M. (1999) Effects of solute methoxylation on glass-forming ability and stability of vitrLEcation solutions Cryobiology, 39, 215±227.

173. Wowk, B., Leitl, E., Rasch, C.M., Mesbah-Karimi, N., Harris, S.B. and Fahy, G.M. (2000) VitrLEcation enhancement by synthetic ice blocking agents. Cryobiology, 40, 228±236.

174. Xu K., Palasz A., Moker J., Mapletoft R.J. Fast freezing of mouse morulae. Theriogenology 1988. 29: 1: 334.

175. Yoon TK, Chung HM, Lim JM, Han SY, Ko JJ, Cha KY. Pregnancy and delivery of healthy infants developed from vitrified oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program letter. Fertil Steril 2000 74:180-181

176. Yokota Y, Sato S, Yokota M, Ishikawa Y, Makita M, Asada T, Araki Y. Successful pregnancy following blastocyst vitrification. Hum Reprod 2000 15:1802-1803

177. Younis J.L., Mordel N., Levin A. et al. Artificial endometrial preparation for oocyte donation: the effect of oestrogen stimulation on clinical outcome // J. Assist. Reprod. Genet., 1992; 9, p. 222-227.

178. Younis J.L., Simon A., Laufer N. Endometrial preparation lessons from oocyte donation // Fertil Stiril, 1996; 66, p. 873-884.

179. Zhu, S.E., Kasai, M., Otoge, H., Sakurai, T. and Machida, T. (1993) Cryopreservation of expanded mouse blastocysts by vitrification in ethylene glycol-based solutions. J. Reprod. Fertil., 98, 139±145.

180. Zhu, S.E., Sakurai, T., Edashige, K., Machida, T. and Kasai, M. (1996) Cryopreservation of zona-hatched mouse blastocysts. J. Reprod. Fertil., 107, 37±42.

181. Zhu, S.E., Zeng, S.M., Yu, W.L., Li, S.J., Zhang, Z.C. and Chen, Y.F. (2001) VitrLEcation of in vivo and in vitro produced ovine blastocysts. Anim. Biotechnol., 12, 193±203.ti