Агробиологические и биохимические особенности декоративных сортов календулы лекарственной (Calendula officinalis L.) и перспективы их использования в качестве источников лекарственного сырья тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.06, кандидат наук Биктимирова, Лилия Владимировна

• Биктимирова, Лилия Владимировна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Биктимирова, Лилия Владимировна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Ботаническая характеристика и биологичесие особенности календулы лекарственной

1.2 Хозяйственное значение культуры календулы

1.3 Сырьё и химический состав календулы лекарственной

1.4 Особенности строения и накопления ксантофиллов лютеина и заексантина в растениях и основные промышленные методы получения

1.5 Технологический процесс получения технического полупродукта «о1еоге8т» суммы ксантофиллов

1.6 Опыт и перспективы комплексного использования календулы

1.5.1 Результаты современных исследований по применению растений календулы в научной медицине

ГЛАВА II УСЛОВИЯ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Условия проведения эксперимента

2.2 Методика проведения наблюдений и анализов

2.3 Характеристика погодных условий в период проведения эксперимента

ГЛАВА 3

3.1 Биоморфологические особенности изучаемых сортов

3.2 Морфологические особенности растений и соцветий календулы лекарственной в зависимости от сорта

3.3 Динамика формирования урожая и суммарная урожайность сортов календулы

ГЛАВА 4 КАЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫРЬЯ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СОРТА КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ

4.1 Влияние погодных условий на содержание различных классов БАВ в сырье

4.2 Особенности распределения флавоноидов в сырье календулы лекарственной

4.3 Содержание суммы полисахаридов в сырье календулы лекарственной

4.4 Анализ существующих методик извлечения каротиноидов и определение содержания каротиноидов в сырье календулы

4.5 Динамика изменения содержания действующих веществ в процессе хранения

4.6 Комплексная оценка сортов календулы лекарственной по содержанию основных биологически активных веществ

ГЛАВА 5 ОЦЕНКА ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДСТВА ЛЮТЕИНОСОДЕРЖАЩЕГО СЫРЬЯ

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ А

ПРИЛОЖЕНИЕ В

ПРИЛОЖЕНИЕ С

ПРИЛОЖЕНИЕ Р

ПРИЛОЖЕНИЕ Е

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Агробиологические и биохимические особенности декоративных сортов календулы лекарственной (Calendula officinalis L.) и перспективы их использования в качестве источников лекарственного сырья»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В настоящее время возрос интерес к природным источникам ксантофиллов (лютеина и зеаксантина), и прежде всего лютеинсодержащим растениям. Лютеин является природным антиоксидантом, ответственным за нормальное функционирование макулы глаза (в последнее время такое сырье широко используется в профилактике возрастных заболеваний глаз, включая катаракту и ретинопатии). Основной источник сырья в данный момент язычковые цветки некоторых сортов бархатцев прямостоячих, в которых лютеин содержится в виде сложного эфира и с одной стороны обладает определённой стабильностью при выделении субстанции и при дальнейшем хранении, а с другой менее доступен для организма, чем непосредственно лютеин. Кроме того, выращивание бархатцев с этой целью экономически целесообразно только в тропических и субтропических странах. Поэтому поиск растений потенциальных источников лютеина, способных расти в центральной России, является перспективным направлением, востребованным фирмами производителями биологически активных добавок (БАДов). Одним из таких растений является календула лекарственная или ноготки лекарственные (Calendula officinalis L.). Календула является одной из наиболее крупнотоннажных культур в современном лекарственном растениеводстве. Её сырьё доступно, благодаря тому, что агротехника этого растения проста, культура нетребовательна к условиям выращивания, возможна механизация уборки. Сырьё календулы производят десятки стран мира, в частности Польша, Германия, Китай, Египет, Россия и др. Однако различные сорта существенно отличаются как по содержанию каротиноидов, прежде всего лютеина, так и других фармакологически значимых веществ. Учитывая, что в настоящее время селекция новых лекарственных сортов в нашей стране ведётся не активно, перспективно оценить по содержанию действующих веществ и урожайности наиболее распространенные декоративные сорта.

Цель и задачи исследований. Основная цель заключалась в оценке содержания основных биологически активных веществ в декоративных сортах календулы лекарственной и выявлении высокопродуктивных сортов из ассортимента декоративного направления для использования в качестве источников лекарственного растительного сырья и субстанций для БАД.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

> изучить динамику формирования и суммарную урожайность наиболее распространённых в нашей стране сортов календулы;

> сравнить структуру соцветий и выявить сорта с максимальной долей язычковых цветков;

> оценить содержание основных фармакологически значимых соединений в соответствии с требованиями ГФ 11, ГФ 12 и Европейской Фармакопеи (экстрактивных веществ, лютеина, флавоноидов, полисахаридов) в 18 сортах;

> выявить влияние условий и продолжительности хранения сырья на содержание лютеина и разработать рекомендации по оптимизации хранения лютеинсодержащего сырья (язычковых цветков).

Научная новизна исследований заключается в комплексном подходе к переработке календулы, совершенствовании методик извлечения лютеина при проведении анализа качества сырья и разработке условий хранения календулы, как лютеинсодержащего сырья. Впервые проанализировано большое число декоративных сортов календулы на предмет содержания экстрактивных веществ, флавоноидов, полисахаридов и лютеина в сырье.

Практическая значимость результатов исследований. В результате комплексной оценки отобраны перспективные декоративные сорта календулы, которые могут быть использованы для получения лекарственного сырья как для медицинской промышленности, так и при производстве косметических средств, чаев, продуктов функционального питания и БАД. Подобраны наиболее продуктивные для выращивания в

Нечерноземной зоне сорта и разработана конкурентоспособная технология хранения лютеинсодержащего сырья, что подтверждено результатами химических анализов и экономическими расчетами. Основные положения, выносимые на защиту:

• Декоративные сорта календулы лекарственной имеют высокую продуктивность как источники соцветий и надземной массы

• Содержание действующих веществ (флавоноидов, каротиноидов, полисахаридов и экстрактивных веществ) во многих сортах не уступало сорту Кальта, предназначенному для выращивания в лекарственном растениеводстве.

• Условия и продолжительность хранения сырья имеют решающее значение для сохранности каротиноидов, но мало влияют на содержание флавоноидов и экстрактивных веществ.

• В качестве источника лютеина и зеаксантина для производства фиточаёв и БАД на территории Российской Федерации, рекомендовать вместо бархатцев использовать календулу лекарственную.

)

ГЛАВА I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Ботаническая характеристика и биологичесие особенности календулы лекарственной

В природе известны около двадцати видов календулы, которая растет в основном в Средиземноморье. Особенно часто, календулу можно встретить в Иране, Центральной Европе. В России распространены всего четыре вида календулы. Наибольший интерес с медицинской точки зрения представляет календула лекарственная. Все остальные виды календулы в настоящее время не используются в научной медицине.

В диком виде календула лекарственная встречается в средиземноморских странах Европы, Африки и Азии, распространяясь на Ближний Восток к Ирану. Некоторые ботаники считают, что этот вид является давним естественным гибридом календулы полукустарниковой (С. suffruticosa), которая растет в Южной Европе, с африканским видом календулы звездчатой (С. stellata){ Гаммерман А. Ф. и др., 1990).

Календула лекарственная (Calendula officinalis L.). - однолетнее растение с прямостоячим стеблем высотой 20—75 см. и стержневой корневой системой. Утолщенные ребристые побеги, покрыты железистыми волосками. Листья простые, удлинённые или овальные, покрыты жёсткими волосками. Листорасположение очередное. Цветки собраны в рацемозные головки (capitula), обычно называемые корзинками. Корзинка календулы - блюдцевидно-головчатое, простое соцветие диаметром 5-6 см. Обертка однорядная из узких листочков. Краевые (лучевые) цветки - женские, язычковые, жёлтые или оранжевые. Центральные (дисковые) цветки - с функционально мужской фазой, затем стерильные, трубчатые, мелкие, жёлтые, оранжевые или тёмно-коричневые. Трубка чашечки вместе с основанием трубки венчика полностью приросла к завязи, и ее свободные лопасти обычно сильно видоизменены и превращены в хохолок. Тычинки прикреплены к трубке венчика и чередуются с

лепестками, нити свободные, пыльники обычно склеены между собой. Гинецей из двух карпелл (плодолистиков), паракарпный, с нектарным диском у основания. Рыльце состоит из двух равных лопастей. Для календулы характерна гетерокарпия. Плоды - семянки различной величины и формы (когтевидные, ладьевидные и кольцевидные и переходные между ними формы), с прямым маслянистым зародышем и очень тонким остаточным эндоспермом (Тахтаджан А.Л., 1987).

Календула культивируется как декоративное и лекарственное растение во многих странах Западной и Восточной Европы (Германии, Австрии, Венгрии, Польши), в том числе в России, а также в США, Средней Азии, на Кавказе. В Россию растение завезено из Южной Европы еще в средние века (Еременко Л.Л., Костюков И.О., 2006).

В Америке и Европе большое внимание уделяют декоративным качествам этого растения. Культивары зарубежной селекции имеют большое разнообразие форм, размеров соцветий и растений.

Календула лекарственная является чрезвычайно экологически пластичным видом, способным приспосабливаться к условиям от субтропических и тропических до северной зоны умеренного пояса. Являясь по происхождению растением южным, календула, тем не менее, способна успешно произрастать практически по всей территории России и ближнего зарубежья. В литературе имеются сведения об успешной интродукции этого вида в Московской области (Пушкина Г.П., Бушковская Л.М. и др., 2007), Псковской области (Григорьева Н.А. , 2003), Ленинградской области, она без ущерба для урожая переносит резкие колебания дневных и ночных температур в высокогорных районах Таджикистана Нормальное плодоношение и созревание семян календулы возможно при посеве в грунт в Сибири (Еременко Л.Л., 1994; Первышина Г.Г. и др., 2002), и в условиях Центральной Якутии. Интродукционные опыты в Полярно-альпийском ботаническом саду на Кольском полуострове позволили

признать календулу лекарственную перспективной культурой для озеленения городов и поселков Мурманской области.

Вегетационный период у календулы зависит от срока посева и периодичности сбора цветков: при проведении сборов соцветий составляет у сорта Кальта от 92-98 дней (без сбора) до 160-175 дней (при систематическом сборе соцветий) (Орлова И.Г.; Власова B.C. , 1993; Костылев ДА., Исмагилов P.P., Тимофеева О.В., 2011; Костылев Д.А.; Исмагилов Р.Р., 2011), от всходов до цветения проходит 30-35 дней в зависимости от погодных условий (Чиков П.С, 1998). Почвы предпочтительны нейтральные -6,5-7,0 (Haban М., Ostepka Р., Salamon I., 2008).

Календула - растение холодостойкое. Необходимая для её экономически целесообразного возделывания сумма температур 2500-2800 °С (Haban М., Ostepka P., Salamon I., 2008). Всходы способны хорошо выдерживать кратковременные заморозки. Для роста и развития календуле достаточно температуры 8-12°С, семена начинают прорастать при температуре 2-4°С, но оптимальная температура прорастания 20-22 °С. Сухие и жаркие погодные условия вызывают стресс растения. При этом развитие растений ускоряется, сокращается время цветения и снижается урожайность соцветий, уменьшается количество махровых соцветий. Напротив, если в период формирования генеративного побега и в фазе бутонизации условия будут прохладные и влажные, наблюдается резкое повышение махровости и увеличение урожайности соцветий. С точки зрения возделывания календулы для получения соцветий, такие погодные условия благоприятны на протяжении всего периода цветения (Исмагилов P.P.; Костылев Д.А. , 2001; Haban М., Ostepka P., Salamon I., 2008). При возделывании календулы на семена, прохладная и влажная погода играет отрицательную роль, особенно в период формирования и созревания семян. При повышенной влажности и холодной погоде семена могут прорастать непосредственно в соцветиях, что снижает их урожайность и посевные качества (Janssens Robert I.R., 2000). Гетерокарпия (до 5-6 разнообразных форм семян)

приводит к тому, что очень сильно отличается масса 1000 семян (3,9-15,2 ) (Isaak О., 2000; Saat- und Pflanzengut Angebot, 2010).

Этот вид способен произрастать на многих видах почв, но наиболее высокие урожаи дает на плодородных черноземах. Чуть меньше ее урожайность на серых лесных почвах. На заболоченных или песчаных почвах урожайность календулы низкая (Полуденный JI.B., Хлалцев Е.Е., Сотник В.Ф., 1979).

Календула является растением длинного дня с исключительно низким фотопериодом: иногда растения зацветают при длине дня 6,5 ч. Многими - авторами отмечается, что календула - растение светолюбивое, лучше растет на открытых солнечных местах. Установлено, что уменьшение интенсивности освещения вызывает увеличение высоты растений календулы и удлинение времени цветения (Haban М., Ostepka P., Salamon I., 2008).

1.2 Хозяйственное значение культуры календулы

Календула возделывалась в специализированных совхозах объединения

«Союзлекраспром» (позднее - «Эфирлекраспром») в Московской, Воронежской

и Самарской областях (Ляшенко З.Д. , 1995), в Башкирии (Исмагилов P.P.;

Костылев Д.А., 2000; Костылев Д.А., 2000), в Красноярском крае (Первышина

Г.Г.; Ефремов A.A.; Гордиенко Г.П.; Агафонова Е.А. 2002), Дальнем Востоке

(Живчиков А.И.; Живчикова Р.И., 2004), на Украине (Либусь О. К. и др., 2004), в

Молдавии (Мустяцэ Г.И.; Брынзилэ И.В., 1998). В настоящее время её

выращивают в Беларуси (Карпинская Е.В., 2008; Дорошкевич Е.И. и др., 2009), в

республиках Северного Кавказа (Сампиев А.М., Хочава М.Р., 2010) и

Прибалтике (Raal A, Kirsipuu К., 2011).

В 1969 г. в СССР календула занимала площадь 178 га, в 1978 г. - 358 га

Были созданы сорта лекарственного направления Рыжик и Кальта, которые до

настоящего времени введены в Государственные реестры сортов России и

Украины, Казахстане (Рахимов А.Р. и др., 1996; Лукьянец В.Н., Федоренко Е.В.,

1997 а; Лукьянец В.Н.; Федоренко К.В., 1997 б).

В Европе и других регионах мира во второй половине XX века так же наблюдается повышение интереса к лекарственным растениям вообще и календуле в частности. Например, в ГДР с 1960 по 1985 год площадь воздельтания лекарственных и пряно-вкусовых растений увеличилась с 3445 га до 5749 га. Большие плантации имелись в Болгарии (Канински А., 1996; Георгиев С.; Топалова В., 1998), Венгрии, Польше. Однако в настоящее время основное производство цветков календулы сосредоточено в Китае и Египте и других развивающихся странах мира, что связано с более низкой стоимостью ручного труда. Так, в настоящее время календула не упоминается в списке видов, выращиваемых на больших площадях в Польше (Chmielecki R., 2011), на Украине (Chmielecki R., 2012) и Болгарии (Todorova R., Stanev St et al., 2009). Однако в настоящее время увеличение площадей возделывания календулы и в странах Европы становится возможным благодаря механизации большинства процессов выращивания, а самое главное механизации наиболее трудоемкого процесса - уборки лекарственного сырья (соцветий) его приведения в надлежащее состояние.

Основные выращиваемые сорта в России Кальта и Рыжик (Конон Н.Т. и др., 2006; Государственный Реестр, 2010), в Германии Erfurter Orangefarbige Gefüllte, представленная 3 различными группами (Saat- und Pflanzengut Angebot, 2010; Handbuch ..., 2010; Каталог семян фирмы N.L. Chrestensen, 2011), а также для любительского выращивания Fiesta Gitana, Orange gitana, Yellow gitana (Frizsche H., 1990), в Словакии Plamen и Plamen plus, a также декоративные сорта Meisterstuck, Orangekoenig, Orange Kugel, Green heart, Indian Prince (Haban M., Ostepka P., Salamon I., 2008), в Венгрии выведены свои сорта Claudia (1989) и Oasis ( 1998), на Кубе используют декоративный сорт - Fiesta Gitana, а в качестве альтернативы Радио (Fiallo V. et al., 2000). В Египте и Китае сырьё как правило не сортовое, а местная популяция с широко варьирующими внешними признаками и содержанием действующих веществ.

Посев практически во всех странах рекомендован ранневесенний, междурядья 30 и 50 см (Германия), 45-60 см (Россия). Удобрения 50-60 азота кг/га , (70)80 - 100 и Р205 60-80 К20 (Атлас, 2006; Junghanns W., 2000; Saat-und Pflanzengut Angebot, 2010). Как видно из соотношения элементов питания предпочтение отдано фосфорным и калийным удобрениям, необходимость которых повышена в связи с продолжительным и интенсивным образованием цветков.

В последние годы разработан ряд методов предпосевной обработки семян стимуляторами роста (Эпин экстра, Циркон, Силиплант, Феровит) с целью повышения энергии прорастания семян и соответственно повышения конкурентоспособности растений по отношению к сорнякам (Вакулин, 2008). Кроме того, применение указанных препаратов, как на семенах, так и на вегетирующих растениях ускоряет их рост, развитие и соответственно переход к началу цветения, что удлиняет период сбора цветков.

К сбору сырья приступают с начала цветения, срывая только что распустившиеся цветки у самого основания в фазе раскрытия (не менее половины) язычковых цветков у немахровых форм. Цветочные корзинки собирают вручную - сначала через 2-3 дня, а затем через 4-5- дней. Всего за вегетацию проводят 15-20 сборов, и суммарная урожайность составляет 10-18 ц/га сухого сырья (Чиков П.С., 1998; Атлас, 2006), а в европейских странах 1520 ц/га (Haban М., Ostepka P., Salamon I., 2008).

Сушат соцветия в воздушных или тоннельных сушилках при температуре до 40-45 °С, расстилая тонким слоем, не более 4-х часов (Hiller К., Melzig M.F., 2010). В связи с содержанием в сырье каротиноидов не допускается попадание прямого солнечного света

В России и европейских странах при осеннем снижении среднесуточных температур и повышении влажности растения сильно поражаются мучнистой росой (Sphaerotheca fiiliginea (Schltdl. Fr.) Pollacci. или Podosphaera fuliginea (Schltdl. Fr., U.Braun&Takamatsu). Белый налёт покрывает листья и стебли (Isaac

О., 2000). Сорт Midas Orange зарубежной селекции почти не поражается мучнистой росой, но содержит мало эфиров фарадиола (Novak J., 2000). В Германии испытаны методы биологической защиты, в частности экстракты растений, силикаты и т.д., но наибольший эффект показал экстракт Reynoutria sachalinensis (Milsana®) (Hebertshausen D.) , Kortekamp A, 2004).

Сбор семян может составлять 1170-2050 кг/га и даже 3500 кг/га (Jarnsens R-, 2000).

Для повышения урожайности изучено воздействие ряда регуляторов роста, в частности гиббереллина, Морфактина (chlorflurenol) (Mohan Ram H. Y. and Usha Mehta 15,1973,1978).

1.3 Сырьё и химический состав календулы лекарственной

В настоящее время, в зависимости от направления использования, у календулы лекарственной существует несколько видов сырья. Основным фармакопейным сырьём в нашей стране являются цветочные корзинки -Flores Calendulae (ГФ 11; ГФ 12). Качество сырья регламентировано требованиями ГФ XI и ВФС 42-1738-87.

В соответствующей статье ВОЗ даётся морфологическое определение сырья календулы как «язычковые цветки или целые корзинки» (Monograpfs of WHO, 2006).

Существует отличие в стандартизации сырья по действующим веществам. Так, в ГФ 11 определяли содержание экстрактивных веществ, извлекаемых 70% спиртом, а в ГФ 12, также как в Европейской фармакопее стандартизация проводится по содержанию флавоноидов в пересчёте на гиперозид не менее 0,4% в сухом сырье при определении на спектрофотометре (ГФ И; ГФ 12, Monograpfs of WHO, 2006; EUrPh, 2008).

В Европейской Фармакопее сырьём календулы являются язычковые цветки (Peíales calendulae), освобожденные от корзинок (Dinner Н., 1965; Deutscher Arzneimittel Codex., 2003; EUrPh, 2008).

Для изготовления настоек и экстрактов в медицинской промышленности используют надземную массу (Herba Calendulae), срезаемую во время цветения.

В гомеопатии используют надземную часть растения при трофических язвах и варикозном застое (Келлер Г., 1989).

Цветки календулы используют в медицинской промышленности, в пищевой при изготовлении продуктов питания, пищевых красителей и биологически активных добавок к пище, в косметической промышленности и ветеринарии (Ковалёва Н.Г., 1971; Рабинович 1987).

В пищевой промышленности в качестве специи и пищевого красителя собирают язычковые цветки. «Лепестки» отделяют и сушат в тени. Хранят их в сухом проветриваемом тёмном помещении или в плотно закрывающейся таре.

Химический состав календулы изучен достаточно подробно. В цветках и траве присутствуют следующие группы соединений: флавоноиды, ксантофиллы и каротиноиды, эфирное масло, кумарины (скополетин) (Hiller К., Melzig M.F., 2010), водорастворимые полисахариды (14,75%) (Haensel R., Sticher О., 2007). Содержит тритерпеновые сапонины 2-10% (гликозиды олеаноловой кислоты), тритерпеновые спирты (\|/-тараксастерол, тараксостерол, фарадиол, арнидиол, гелиантриол), стероиды. Фарадиол считается наиболее активным (противоотёчное и антимутагенное действие). Содержание моноэфира фарадиола позитивно коррелирует с содержанием тараксостерола (Vidal -Olliver et al, 1989; Novak J., 2000).

Синтез терпеноидов происходит в листе и в дальнейшем они транспортируются по всему растению (Augustinska Е., Kasprzyk Z., 1982). Цветки содержат эфирное масло (до 0,4%), в основном из сесквитерпенов (а-кадинол и торрейол) (Baumler S., 2010).

В состав ЭМ входят ментон, изоментон, терпинен, кадинен, кариофиллен (Ennet D. ,1990). Однако, эфирное масло в чистом виде не является коммерческим продуктом (Либусь O.K. и др., 2004).

В семенах содержание липидов составляет 15,1-25,0 % в том числе фосфолипиды составляют 0,6%, а гликолипиды 0,9% (Ul'chenko N. Т., Glushenkova А. I. Mukhamedova Kh. S. , 1998), 60% календуловой кислоты, а также протеины (18%), где 38 % эссенциальных аминокислот. Масло высыхает быстрее, чем льняное. Может быть использовано в лакокрасочной промышленности (Isaac О., 2000; Janssens Robert I.R., 2000).

Как уже было сказано выше, качество сырья календулы регламентируется по сумме флавоноидов, содержание которых колеблется 0,3-0,8%. Количество флавоноидов больше в траве (Рыбалко К.С., Коновалова О. и др., 1987), чем в цветках, поэтому для производства некоторых флавоноидосодержащих препаратов в качестве сырья используют именно надземную массу, срезанную во время цветения.

Содержащиеся в надземной части и цветках флавоноиды представлены в основном рутином, гиперозидом и кверцетином, которые относятся к биофлавоноидам и обладают Р-витаминной активностью. Кверцетин представляет из себя агликон, который является предшественником многих флавоноидов, в т.ч. рутина и гиперозида. Встречается во многих овощах и фруктах. Обладает антитоксическим действием ( Mi Y, Zhang С et al., 2009; Liu S, Hou W. et al., 2009; Abdel-Raheem ГГ, Abdel-Ghany AA, Mohamed GA., 2009; V6squez-Garzyn VR, Arellanes-Robledo J et al., 2009), антиоксидантным действием (Krukoski DW, Comar SR et al., 2009; Fahlman BM, Krol ES, 2009;Boumival J, Quessy P et al., 2009; Reiter M, Rupp K. et al., 2009), довольно много исследований показывают его эффективность при диабете (Кит С.М., Турчин И.С., 1986; Kobori M, Masumoto S. et al., 2009; Chao CL, Hou YC. et al., 2009 ; Fang XK, Gao J, Zhu DN., 2008), профилактике атеросклероза (Punithavathi VR, Prince PS., 2009; Han JJ, Hao J. et al., 2009; Perez-Vizcaino F,

Duarte J. et al., 2009; Wan LL, Xia J. et al., 2009; Gong M, Garige M. et al., 2009; Sanchez M, Lodi F. et al., 2007), снижает риск онкологических заболеваний различных органов ( Kang JW, Kim JH. et al., 2009; Zamin LL, Filippi-Chiela EC. et al., 2009; Du G, Lin H. et al., 2009; Shan BE, Wang MX, Li RQ., 2009; Zhang W, Zhang F., 2009; Aalinkeel R, Bindukumar B. et al., 2008; Gupta C, Vikram A . et al., 2009).

он

Рис. 1.3 Рутин

Рутин обладает антиоксидантной активностью, укрепляет капилляры и предотвращает кровотечение, венозные отёки и варикоз, обладает противовоспалительной активностью и онкопротекторным действием.

Другой ценной группой биологически активных соединений являются каротиноиды, которые содержатся во всех частях растения.

Язычковые цветки содержат каротиноиды флавоксантин и ауроксантин, являющиеся антиоксидантами и представляющими интерес в качестве пищевого красителя. Листья и стебли содержат другие каротиноиды, большей частью лютеин (80%), зеаксантин (5%) и бета-каротин {Herbs and Supplements.). O.A. Коновалова с соавт. (1990) отмечают взаимосвязь между компонентным составом каротиноидов и местом произрастания растения: в Англии из язычковых цветков были выделены b-, d- и g-каротины, ликопин, лютеин, мутатохром, фитофлуин, флавоксантин, флавохром и хризантемаксантин (Goodwin, 1954); в европейской части СССР b-каротин, ликопин, виолоксантин и рубиксантин (Мовчан, 1960); в Австралии b-каротин, виолоксантин, зеаксантин, лютеин, неуроспорин и фитоен (Milborrow, 1982). Литературные данные о процентном содержании каротиноидов и их составе различны, что по нашим наблюдениям, связано с использованием разных методов их количественного определения (растворитель или система растворителей, метод определение, в зависимости от использованных стандартов) (Государственная фармакопея СССР, 1991; Слуева Е.К., Жукович E.H. и др., 2003; Абдуллабекова В.Н., Тулаганов A.A., 2001; Шарова О.В., Куркин В.А.; 2007).

Содержание каротиноидов зависит также от сорта и популяции календулы, сроков сбора, окраски цветков, в разных частях растения оно различно. Так же существенные отличия отмечаются при анализе сухого и свежего сырья. Так, по данным Л.Г. Андреевой (1961), содержание каротиноидов в воздушно-сухих трубчатых желтых цветках составляет 91,2 мг%, в язычковых желтых - 195,4 мг%; язычковые темно-оранжевые цветки содержат 1546,6 мг%, тогда как всё соцветие темно-оранжевых форм - 34,9 мг% в пересчете на

воздушно-сухой вес. В свежих зеленых листьях календулы определено содержание каротина 0,53 мг%, в свежих язычковых темно-оранжевых цветках 48,4 мг% в пересчете на сырой материал. По данным С.Д. Мовчан (1960), содержание каротиноидов на 100 г абсолютно сухих язычковых цветках составляет: Ь-каротина 0,224 г, ликопина 0,336 г, виолаксантина 0,150 г и рубиксантина 0,070 г (цит. по Исмагилов Р.Р.; Костылев Д.А., 2000).

Как видно из результатов, полученных 50 лет назад, практически везде отсутствует лютеин, что связано с его большой нестабильностью и несовершенством лабораторного оборудования в то время.

В современных источниках литературы эти показатели также сильно рознятся. Так по одним данным соотношение в язычковых цветках следующее: флавоксантин (28%), лютеоксантин (11%), ликопин (20%), каротин ( сумма а-, Р", у-, : 12%), лютеин (8%), рубиксантин (7%), ауроксантин (7%), прочие (8%) (Kishimoto S, Maoka Т et al., 2005).

Содержание каротиноидов в цельных соцветиях, по данным О.Г. Степаненко (1982), составляло во 2-й сбор 1421-1522 мкг/100 г абсолютно сухих соцветий, в 4-й сбор - 904-1187 и в 6-й сбор - 773-813 мкг/100 г абс. сух. соцветий.

На содержание каротиноидов в лекарственном сырье влияют режимы сушки и хранения, продолжительность хранения сырья, которая регламентируетя НТД (ГФ 11). По данным М.А. Омельчук с соавт. (1984), содержание суммы каротиноидов в соцветиях при термической сушке в 1,5-2 раза выше, чем при естественной сушке, что связано с продолжительностью процесса обезвоживания. Содержание суммы каротиноидов в соцветиях календулы сорта Кальта варьировало от 0,12 % до 0,31 %.

Основным современным методом определения соотношения отдельных каротиноидов является ВЭЖХ (Bureau, J.L. and Bushway, R.J., 1986; Juhler, R.K. and Cox, R.P., 1990), который позволяет качественно идентифицировать и количественно определить состав каротиноидного комплекса сырья.

1.4 Особенности строения и накопления ксантофиллов лютеина и заексантина в растениях и основные промышленные методы получения

Каротиноиды - это липофильные вещества, большей частью нерастворимые в воде. Благодаря характерному для каротиноидов хромофору -сопряженной полиеновой системе, все соединения окрашены в разные оттенки от желтого до красного цвета. Присутствие многочисленных сопряженных двойных связей у каротиноидов делает возможным существование многочисленных геометрические изомеров (цис- трасн- изомеры или 2г Е-изомеры). Однако в природе большинство каротиноидов существует в трансформе (или Е-изомеры). Экспериментально доказано, что цис-формы бута-каротина обладают более низкой биодоступностью. Однако имеется ряд природных цис-форм каротиноидов (биксин полученный из семян аннато (Шха огеИапа)), проликопин, присутствующий в некоторых сортах томата.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Биктимирова, Лилия Владимировна, 2013 год

Список литературы

1. Волобуева В.Ф., Шатилова Т.И. «Практикум по биохимии плодовых, ягодных и лекарственных растений», изд. Московской сельскохозяйственной академии имени КАЛимирязева, 1989

2. Абдуллабекова В.Н., Тулаганов А.А. Разработка метода количественного анализа цветков календулы лекарственной // Химико-фармацевтический журнал. 2001. Т. 35. №10. С. 25-26.

3. Акимов Ю.А. Тритерпеновые гликозиды в систематике и эволюции цветковых растений // Раст. ресурсы. - 1997. - Т.ЗЗ; - Вып. 2 - С. 114-125.

4. Атлас лекарственных растений России. / Быков В.А., Сокольская Т.А., Зайко JI.H., и др./ Под общей ред. В.А. Быкова. - М.: ВИЛАР, 2006 .-345 с.

5. Бритгон Г. Биохимия природных пигментов. - М.:Наук, 1989. -387 с.

6. Бутьева И.В. Устойчивость биотропных факторов погодного режима города Москвы за столетний период // Комплексные биоклиматические исследования / Бутьева И.В., Галакова Э.Н., Шварева Ю.Н., Швейнева Т.Г. -М., 1988.-С.7-17.

7. Быков В.А. Защита лекарственных культур от вредителей и болезней. Справочник / Быков В.А., Бушковская JI.M., Пушкина Г.П.; М.: Изд-во ВИЛАР, 2006.- 112 с.

8. Вакулин К.А. Совершенствование приёмов выращивания календулы лекарственной с применением регуляторов роста. Автореферат дисс. На соискание к.б.н.- М.: ВИЛАР, 2010.- 20 с.

9. Гаммерман А. Ф., Кадаев Г. Н., Яценко-Хмелевский А. А. Лекарственные растения. - М.: Высшая школа, 1990.

Ю.Георгиев С.; Топалова В. Сравнително изпитване на български сортове невен (<Calendula officinalis) [Результаты испытания сортов группы Календа лекарственной календулы (определение элементов структуры

урожая,содержание каротина).Болгария] // Растен.Науки, 1998; r.35,N 3. -С. 209-213

11.Георгиевский В.П., Комисаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. - Новосибирск: Наука, Сибирское отд., 1990. - С. 116.

12.Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений.- Новосибирск: «Наука», Сиб.отделение, 1990.-С. 211-213.

13.ГОСТ 12420 - 81. Сортовые и посевные качества семян.

^.Государственная фармакопея СССР. 11-е издание. Вып. 1 и 2. М., 1991. Т.

2.

^.Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа // МЗ СССР - 11 изд. доп. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

16.Григорьева H.A. Биологические особенности возделывания календулы лекарственной и ромашки аптечной при минимальных затратах ручного труда, без применения средств химизации: Автореф. дис...канд. биол. наук / Всерос. НИИ лекарств. и аромат. растений - М., 2003. - 22 е.,

17.Гудвин Р., Мерсер Э. Введение в биохимию растений. - М.: Наука, 1987. -

18.Дорошкевич Е.И.; Суленко Д.М.; Дорошкевич И.Н. Влияние уровня минерального питания на рост, развитие и продуктивность календулы лекарственной в условиях Беларуси //Ботанические исследования на Урале / Перм. гос. ун-т, 2009. - С. 103

19. Доспехов Б.А. Математическая обработка данных. - М.: Агропромиздат, 1985. - 320 с.

20.Еременко JI.JI. Семенная продуктивность и прорастание семян календулы лекарственной в Новосибирске [Влияние метеорологических условий] //: Особенности развития и прорастания семян интродуцентов. - М., 1994. - С. 11.

21. Еременко JI.JI., Костюков И.О. Продуктивность и прорастание семян календулы лекарственной в Новосибирске //Нетрадиционные и редкие растения, природные соединения и перспективы их использования // VII Междунар. симпозиум Т. 2, Белгород, 2006 - с. 22

22.Живчиков А.И.; Живчикова Р.И. Особенности агротехники календулы лекарственной (Calendula officinalis) на Дальнем Востоке //Генетические ресурсы растениеводства Дальнего Востока / Дальневосточ. опыт, станция Всерос. науч.-исслед. ин-та растениеводства. - Владивосток, 2004. - С. 484489.

23.3айцев Г. Н. Методика биометрических расчетов. - М., 1973. - С. 21-23.

24.Интродукция лекарственных, ароматических и технических растений. Итоги работ интродукционного питомника БИН АН СССР за 250 лет - М.-Л.: «Наука», 1965.- С. 170,177-179.

25.Исмагилов Р.Р. Башкирский гос. аграрный ун-т; г.Уфа, РФ ; Костылев Д.А. Урожайность и качество соцветий календулы (Calendula officinalis L.) в зависимости от гидротермических условий // IV Междунар. симп."Новые и нетрадицион. растения и перспективы их использ.":Тр.. - М., 2001; Т.З. - С. 161-163

26.Исмагилов P.P.; Костылев Д.А. Календула / Башкир, гос. аграр. ун-т: Уфа, 2000. - 102 е., 6 л. ил., табл

27.Канински А. Влияние на някои предшественици върху добива на отрязан цвят от календула (Calendula officinalis) [Предшественники и цветочная продуктивность календулы на срез.(Болгария)]. // Растен.Науки, 1996; r.33,N 2. - С. 71-73

28.Карпинская Е.В. Биологические особенности и элементы технологии выращивания календулы лекарственной и базилика благородного в Белоруссии : автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. с.-х. наук : специальность 06.01.09 <растениеводство> / Научно-исследовательский

институт сельского хозяйства Центральных районов Нечерноземной зоны, Москва: 2008. - 25 с.

29.Кёллер Г. Гомеопатия.- М.: «Медицина», 1989. - с. 295,322.

30.Кит С.М., Турчин И.С. Лекарственные растения в эндо!финологии. - Киев: «Здоровя», 1986.- 80 с.

31.Ковалёв В.Н., Попова Н.В., Кисличенко B.C., Исакова Т.И., Журавель И.А. и др. Практикум по фармакогнозии. - Харьков: Издательство НфаУ «Золотые страницы» «МТК-КНИГА», 2004. - 512 с.

32.Ковалёва Н.Г Лечение растениями М: Медицина, 1971. - С. 125-128.

33.Конон Н.Т., Морозов В.И., Кирцова М.В. Итоги селекции и семеноводства лекарственных и ароматических растений// В сб. научных трудов «Лекарственное растениеводство», материалы международной научной конференции, посвященной 75-летию ВИЛАРа. - М:2006. - С. 269-274.

34.Костылев Д.А. Формирование урожая календулы в зависимости от площади питания в условиях южной лесостепи Республики Башкортостан :Автореф. дис.канд. с.-х. наук / Башкир, гос. аграр. ун-т. - Уфа, 2000. - 22 с.

35.Костылев Д.А.; Исмагилов P.P. Уборка соцветий календулы лекарственной в условиях южного Предуралья. // Достижения науки и техники АПК, 2011;N2.-С. 32-33

36.Костылев Д.А.; Исмагилов P.P.; Тимофеева О.В. Семенной материал календулы лекарственной в Предуралье. // Аграрный вестник Урала, 2011; N1.-C. 9-10.

37.Костюков И.О. Изменчивость семян на растении календулы лекарственной в связи с ветвлением / Современные тенденции развития аграрной науки в России // Материалы IV междунар. науч.-практич. конфер. молодых ученых, посвященной 70-летию НГАУ - 28.03 - Новосибирск, 2006 - с. 96.

38.Кудрицкая С. Е. Каротиноиды плодов и ягод.— К.: Вища шк., 1990.— 221с.

39.Ладынина Е.А., Морозова P.C. Фитотерапия.- Л.: Медицина, 1987. - С. 54-55.

40.Либусь O.K., Работягов В.Д., Кутько С.П., Хлыпенко Л.А. Эфирномасличные и пряно-ароматические растения. - Херсон: «Айлант», 2004. -С. 113-120.

41.Лукнер М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных.- М.: «Мир», 1979. - С.194-211.

42.Лукьянец В.Н., Федоренко Е.В. Разработать технологию возделывания календулы лекарственной на лекарственные и семенные цели, провести сортоизучение и создать семенной фонд лучших сортов // Темат.сб.науч.тр.по картофелеводству,овощеводству и бахчеводству в Казахстане. - пос.Кайнар, 1997. - С. 167-170.

43.Лукьянец В.Н.; Федоренко К.В. Сортимент и технология выращивания календулы на лекарственные и семенные цели в условиях Алматинской области // Материалы Респ.науч.-практ.конф.по картофелеводству и овощеводству в Казахстане. - пос.Кайнар, 1997. - С. 56-57

44.Ляшенко З.Д. Влияние способов, норм и сроков посева на продуктивность лекарственных культур в Саратовском правобережье [Календула,ромашка аптечная и синюха] : Автореф.дис...канд.с.-х.наук; Сарат.гос.с.-х.акад.им.Н.И.Вавилова. - Саратов, 1995. - 21 с.

45.Майер Ф. Естественные органические красящие вещества. - М.: Государственное научно- техническое издательство химической литературы, 1940. - С. 7-75.

46.Майо П. Де Терпеноиды. - М.: Изд-во иностранной литературы, 1963. -412 с.

47.Майсурадзе Н.И., Киселев В.П., Черкасов O.A., и др. Методика исследований при интродукции лекарственных растений // Обзорная информация. Сер. Лекарственное растеневодство. - М., - 1984. - Вып. 3-32 с.

48.Махлаюк В.П. Лекарственные растения в народной медицине.- Саратов: Приволж. Книжное изд-во, 1967.- С.262-264.

49.Машанов В.И., Покровский А.А. Пряно-ароматические растения.- М.: Агропромиздат, 1991.-С.227-228.

50.Методика количественного определения группового состава углеводного комплекса растительных объектов/Д.Н. Олейников*, Л.М. Танхаева // Химия растительного сырья.- 2006. №4. С. 29-33.

51.Методика фенологических наблюдений в ботанических садах СССР // Бюлл. ГБС АН СССР. - 1979. - Вып. 113 - С. 3-8.

52.Методы анализа минорных биологически активных веществ пищи/ Под ред. В.А. Тутуляна и К.И. Эллера. - М.: Изд-во «Династия», 2010.- С. 4362; 118-122.

53.Мустяцэ Г.И.; Брынзилэ И.В. О густоте стояния растений Calendula officinalis L. при возделывании на сырье и семена //Всерос.науч.-произв.конф. "Интродукция нетрадиц.и ред.с.-х.растений" Материалы. -Пенза, 1998; Т.4. - С. 71-73.

54.Нужный В.П., Рожанец В.В. Ефремов А.П. Лекарственные растения и фитокомпозиции в наркологии. - М.: КомКнига, 2006. - 223-225.

55.0рлова И.Г.; Власова B.C. Влияние сроков сева на урожай цветков и семян ноготков лекарственных (Calendula officinalis L.). // Материалы междунар.науч.конф. "Экол. пробл. интродукции растений на соврем.этапе:вопр.теории и практики". - Краснодар, 1993; 4.1. - С. 375-377.

56.Первышина Г.Г.; Ефремов А.А.; Гордиенко Г.П.; Агафонова Е.А. : К вопросу комплексного изучения календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), произрастающей в Красноярском крае // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья / Алт. гос. ун-т. -Барнаул, 2002. - С. 152-155

57.Первышина Г.Г.; Ефремов А.А.; Гордиенко Г.П.; Агафонова Е.А. К вопросу комплексного изучения календулы лекарственной (Calendula

officinalis L.), произрастающей в Красноярском крае //Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья / Алт. гос. ун-т. -Барнаул, 2002. - С. 152-155.

58.Полудённый JI.B., Хлапцев Е.Е., Сотник В.Ф. Возделывание лекарственных и эфирномасличных культур. Учебник М.: Колос, 1979.- С. 143-148

59.Пушкина Г.П, Бушковская Л.М., Вакулин К.Н., Сидельников Н.И., Антипов Н.И. Защитно-стимулирующий эффект регулятора роста Эпин-экстра на лекарственных культурах. //В сб. «Полифункциональность действия брассиностероидов.» - М.: «НЭСТ М», 2007. - 256-269.

60.Рабинович Лекарственные растения в ветеринарии. М. Колос. 1977.-С.46.

61.Рабинович А.М. Целебные растения в доме и на работе. - М.: Арнебия, 2005-С. 137-143.

62.Рахимов А.Р.; Ющенко Н.С.; Шаушеков З.К. Изучение способов и норм посева календулы лекарственной (Calendula officinalis) в условиях Центрального Казахстана // Материалы междунар.науч.-практ.конф."Перераблекарств.сырья и пр-во фитопрепаратов для медицины и сел.хоз-ва". - Алматы, 1996. - С. 60.

63.Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство. Р 4.1.1672-03

64.Сампиев А.М., Хочава М.Р. Календула лекарственная - Краснодар: Советская Кубань, 2010. - 143 с.

65.Слуева, Е.К., Жукович Е.Н., Шарикова Л.А., Прибыткова Т.Ф., Деревщикова Е.Б. Оценка содержания суммы флавоноидов в настойке календулы // Фармация. 2003. Т. 51. №1. С. 13-15.

66.Тахтаджан А.Л. Система магнолиофитов. Л.; Наука, 1987.439 с.

67.Турова А.Д.Лекарственные растения СССР и их применение.- М.: «Медицина» 1967.- С. 410-418.

68.Хотин А.А. Роль внешних факторов в накоплении эфирных масел. //

Эфирно масличное сырьё и технологий эфирных масел. - М.: Пищевая пром.,1968. - С. 39.

69.Чиков П.С. Лекарственные растения - путь к здоровью. - М/.НИЦ «Инженер», 1998. - С. 259-261.

70.Шарапов Н.И. Влияние климата на продуктивность растений и качество эфирных масел //Эфирномасличное сырьё и технология эфирных масел. -М.: «Пищевая пром.» 1968.- Вып. 1 -С.21.

71.Шарова О.В., Куркин В.А. Химия растительного сырья. 2007г. №1 с.65-68.

72. Aalinkeel R, Bindukumar В, Reynolds Л., Sykes DE, Mahajan SD, Chadha КС, Schwartz SA. The dietary bioflavonoid, quercetin, selectively induces apoptosis of prostate cancer cells by down-regulating the expression of heat shock protein 90. Prostate. 2008 Dec 1;68(16): 1773-1789.

73.Abdel-Raheem ГГ, Abdel-Ghany AA, Mohamed GA. Protective effect of quercetin against gentamicin-induced nephrotoxicity in rats. Biol Pharm Bull. 2009 Jan; 32(l):61-7.

74.Andersen FA, Bergfeld WF, Belsito DV, Hill RA, Klaassen CD, Liebler DC, Marks JG Jr, Shank RC, Slaga TJ, Snyder PW.Final report of the Cosmetic Ingredient Review Expert Panel amended safety assessment of Calendula officinalis-derived cosmetic ingredients.//Int J Toxicol. 2010 Nov-Dec;29(6 Suppl):221. - S-43.

75.Arnal E, Miranda M, Almansa I, Muriach M, Barcia JM, Romero FJ, Diaz-Llopis M, Bosch-Morell F. Lutein prevents cataract development and progression in diabetic rats. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2009 Jan;247(l): 115-20

76.Astner S, Wu A, Chen J, Philips N, Rius-Diaz F, Parrado C, Mihm MC, Goukassian DA, Pathak MA, Gonz61ez S. Dietary lutein/zeaxanthin partially reduces photoaging and photocarcinogenesis in chronically UVB-irradiated Skh-1 hairless mice. Skin Pharmacol Physiol. 2007;20(6):283-291.

77.Augustin M., Hoch I Phytotherapie bei Hauterkrarikungen. Grunglagen-Praxis-Studien.- Muenchen, Urban et Fischer, 2004.- S.197-200.

78. Augustinska E., Kasprzyk Z. Studies on the labeling of terpenoids in shoots and cells or protoplasts from Calendula officinalis leavels // Acta biochimica Polonica.-Vol. 29. - 1982.- № 1-2.- P. 8-17.

79.Bartollo D.-P. Teor et rendomento de flavonoides de calendula cultivada com diferentas laminas de irrigacias. Dissertacao -Universidade do Ueste Pauliste. -2008.-43 p.

80.Baumler S., Heilpflanzen Praxis Heute. Mtnchen, Urban et Fischer, 2010.-S.163-165.

81. Bendich, A. and Olson, J.A., Biological actions of carotenoids, FASEB J., 3, 1927,1989.

82. Bendich, A., Carotenoids and the immune-response, J. Nutr., 119,112,1989.

83.Bournival J, Quessy P, Martinoli MG.Protective Effects of Resveratrol and Quercetin Against MPP(+) -Induced Oxidative Stress Act by Modulating Markers of Apoptotic Death in Dopaminergic Neurons. Cell Mol Neurobiol. 2009 Dec; 29(8): 1169-1180..

84.Britton, G. and Hormero-Miindez, D., Carotenoids and colour in fruit and vegetables, in Phytochemistry of Fruit and Vegetables, Tom6s-Barber6n, F.A. and Robins, R.J. (Eds.), Clarendon Press, Oxford, United Kingdom, 1997, 1127.

85. Britton, G., Pigments in food: More than just colours, in Proc. First Int. Congr. Pigments Food Technol., Mmiguez-Mosquera, M.I., Jaran-Gal6n, M., and Hornero -Mfindez, D. (Eds.), PFT, Sevilla, Spain, 1999,3-9.

86. Bureau, J.L. and Bushway, R.J., HPLC determination of carotenoids in fruits and vegetables in the United States, J. Food Sci., 51,128,1986.

87. Burton, G.W. and Ingold, K.U., Beta-carotene—An unusual type of lipid antioxidant, Science, 224,569,1984.

88. Chao CL, Hou YC, Chao PD, Weng CS, Ho FM The antioxidant effects of quercetin metabolites on the prevention of high glucose-induced apoptosis of human umbilical vein endothelial cells. Br J Nutr. 2009 Apr,101(8): 1165-1170.

89.Chmielecki R. Agrarstruktur in Ukraina mit dem Schwerpunkt Anbau und Sammlung von Arzneipflanzen // Berrnburger Winterseminar zu Fragen der Arznei- und Gewuerzpflanzenproduktion/ -Bernburg, 2012.- S.21-23.

90.Chmielecki R. Agrarstruktur Polens mit dem Schwerpunkt Anbau und Sammlung von Arzneipflanzen // Berrnburger Winterseminar zu Fragen der Arznei- und Gewuerzpflanzenproduktion/ -Bernburg, 2011- S.18-20.

91.Cho E, Hankinson SE, Rosner B, Willett WC, Colditz GA .Prospective study of lutein/zeaxanthin intake and risk of age-related macular degeneration. Am J Clin Nutr. 2008 Jun;87(6):1837-43.

92.Chucair AJ, Rotstein NP, Sangiovanni JP, During A, Chew EY, Politi LE .Lutein and zeaxanthin protect photoreceptors from apoptosis induced by oxidative stress: relation with docosahexaenoic acid. Invest Ophthalmol Vis Sei. 2007 Nov;48(ll):5168-77.

93. Colditz, G.A., Branch, L.G., and Lipnick, R.J., Increased green and yellow vegetable intake and lowered cancer deaths in an elderly population, Am. J. Clin. Nutr., 41, 32,1985.

94. Delia Loggia R., A. Tubaro, S. Sosa, H. Becker, St. Saar, O. Isaac The Role of Triterpenoids in the Topical Anti-Inflammatory Activity of Calendula officinalis Rowers //Planta Med 1994; 60(6): 516-520.

95.Deutscher Arzneimittel Codex. - Stuttgart, Deutscher Apotheker Verlag, 2003.

96.Dinner H. Drogenkunde 4, verbesserte und erweiterte Auflage. - Leipzig: VEB Fachbuchverlag, 1965. - S. 168

97.Du G, Lin H, Wang M, Zhang S, Wu X, Lu L, Ji L, Yu L. Quercetin greatly improved therapeutic index of doxorubicin against 4T1 breast cancer by its opposing effects on HIF-lalpha in tumor and normal cells. Cancer Chemother Pharmacol. 2009 May 26.

98. Ennet D. Bi-Lexicon Heilpflanzen und Drogen. - Leipzig, UEB bibliographisches Institute990. - S. 114-115.

99.ESCOP. Vol.3, Proposals for European monographps on Calendulae flos, flos cum herba.

100. Europaesche Arzneibuch. 6. Ausgabe.- Stuttgart, Deutscher Apotheker Verlag, 2008.

101. Everett, S.A. et al., Scavenging of nitrogen dioxide, thiyl, and sulfonyl free radicals by the nutritional antioxidant b-carotene, J. Biol. Chem., 271, 3988, 1996.

102. Fahlman BM, Krol ES.Inhibition of UVA and UVB radiation-induced lipid oxidation by quercetin. J Agric Food Chem. 2009 Jun 24;57(12):5301-5305.

103. Fang XK, Gao J, Zhu DN. Kaempferol and quercetin isolated from Euonymus alatus improve glucose uptake of 3T3-L1 cells without adipogenesis activity. Life Sei. 2008 Mar 12;82(ll-12):615-622.

104. Fiallo V., Hernandez C., Reyes M. et al. Comparacion entre 2 cultivares de Calendula officinalis L. // Rev Cubana plant med., 2000.- n5 (1).- P. 14-16.

105. Flavonoids. Chemistry, Biochemistry and Application. // Ed. by Andersen Q.M., Markham K.R. New-York: Taylor and Francis Group, 2006. -1199 pp.

106. Fonseca YM, Catini CD, Vicentini FT, Nomizo A, Gerlach RF, Fonseca MJ. Protective effect of Calendula officinalis extract against UVB-induced oxidative stress in skin: evaluation of reduced glutathione levels and matrix metalloproteinase secretion.//J Ethnopharmacol. 2010 Feb 17;127(3):596-601. Epub 2009 Dec 22.

107. Foppen, F.H., Tables for identification of carotenoid pigments, Chromatogr. Rev., 14,133,1971.

108. Frizsche H. Les plantes medicinales et condimentaires au jardin. -Stuttgart,Ulmer, 1990.- S. 91-92.

109. Gibson, G.R. and Fuller, R., The role of probiotics and prebiotics in the functional food concept, in Functional Foods. The Consumer, the Products and the Evidence, Sadler, M.J. and Saltmarsh, M. (Eds.), The Royal Society of Chemistry, Cambridge, United Kingdom, 1998,3-4.

110. Gibson, G.R. and Roberfroid, M.B., Dietary modulation of the human colonic microbiota—introducing the concept of prebiotics, J. Nutr., 125, 1401, 1995.

111. Gong M, Garige M, Varatharajalu R, Marmillot P, Gottipatti C, Leckey LC, Lakshman RM.Quercetin up-regulates paraoxonase 1 gene expression with concomitant protection against LDL oxidation. Biochem Biophys Res Commun. 2009 Feb 20;379(4): 1001-1004.

112. Greichen G Heilwissen versunkener Kulturen.-2- Auflage Muenchen: Econ Verlag. 2004. - S. 162-165.

113. Griesbach U. Neue Wirkungs weisen fuer Botanikals finden.-Bekannte und beliebte Naturstoffe neu erfinden und erfolgreich verkaufen. - Skin Care Forum, 2007, Ausgabe 42.

114. Gunasekera RS, Sewgobind K, Desai S, Dunn L, Black HS, McKeehan WL, Patil B.Lycopene and lutein inhibit proliferation in rat prostate carcinoma cells. Nutr Cancer. 2007;58(2):171-7.

115. Gupta C, Vikram A, Tripathi DN, Ramarao P, Jena GB.Antioxidant and antimutagenic effect of quercetin against DEN induced hepatotoxicity in rat. Phytother Res. 2009 Jun 5.

116. Guruvayoorappan C, Kuttan G. Beta-carotene inhibits tumor-specific angiogenesis by altering the cytokine profile and inhibits the nuclear translocation of transcription factors in B16F-10 melanoma cells. Integr Cancer Ther. 2007 Sep;6(3):258-70.

117. Haban M., Ostepka P., Salamon I. Agricultural aspects medicinal plants cultivation.- Nitra: Slovenska polnohospodarskauniverzita, 2008.- P. 9-10, 3739.

118. Haensel R., Sticher O. Pharmakognosie-Phytopharmazie. 8., Ueberarbeitete und aktialisierte Auflage. - Heidelberg, Springer, 2007.- S. 11511155.

119. Han JJ, Hao J, Kim CH, Hong JS, Ahn HY, Lee YS.Quercetin prevents cardiac hypertrophy induced by pressure overload in rats. J Vet Med Sei. 2009 Jun;71(6):737-743.

120. Handbuch des Arznei- und Gewuerzpflanzenbaus. - Bernburg, Saluplanta, 2010. - B.l- S. 624-625.

121. Hebertshausen D. and A. Kortekamp (2004) Infektionszyklus und biologische Bekämpfung von Podosphaera xanthii, dem Echten Mehltau der Ringelblume (Calendula officinalis) //Gesunde Pflanzen Volume 56, Numbers 7-8, S. 201-207.

122. Henry, B.S., Natural food colours, in Natural Food Colorants, Hendry, G.A.F. and Houghton, J.D. (Eds.), Blackie Academic and Professional, London, United Kingdom, 1996,40-79.

123. Hiller KL, Melzig M.F. Lexikon der Heilpflanzen und Drogen, 2. Auflage. — Heidelberg, Spektrum, Akademischer Verlag, 2010.- S.106-107.

124. Isaac O. Die Ringelblume -eine alte Arzneipflanze neu betrachtet. // Drogenreport, Jg. 13 (2000) Heft 1.- S. 15-16.

125. Janssens Robert I.R. Calendula Oil -Recovery, Processing, and Industrial Applications. // Drogenreport, Jg. 13 (2000) Heft 1.- S. 17-19.

126. Juhler, R.K. and Cox, R.P., High-performance liquid chromatographic determination of chloroplast pigments with optimized separation of lutein and zeaxanthin, J. Chromatograph.,508,232,1990.

127. Junghanns W. Anbau von Calendula officinalis L. zur Drogengewinnung. // Drogenreport, Jg. 13 (2000) Heft 1.- S. 21-24.

128. Kalvatchev Z, R Walder and D Garzaro Anti-HIV activity of extracts from Calendula officinalis flowers //Biomedecine & Pharmacotherapy Volume 51, Issue 4, April 1997, Pages 176-180.

129. Khalid A. Khalid- and Jaime A. Teixeira da Silva Yield, essential oil and pigment content of Calendula officinalis L. flower heads cultivated under salt stress conditions // Scientia HorticulturaeVolume 126, Issue 2, 13 September 2010, Pages 297-305

130. Kim JH, Na HJ, Kim CK, Kim JY et al., The non-provitamin A carotenoid, lutein, inhibits NF-kappaB-dependent gene expression through redox-based regulation of the phosphatidylinositol 3-kinase/PTEN/Akt and NF-kappaB-inducing kinase pathways: role of H(2)0(2) in NF-kappaB activation. Free Radic Biol Med. 2008 Sep 15;45(6):885-96.

131. Kishimoto S, Maoka T, Sumitomo K, Ohmiya A.: Analysis of carotenoid composition in petals of calendula (Calendula officinalis L.). Biosci Biotechnol Biochem. 2005 Nov;69(ll):2122-2128.

132. Kleining H. The role of plastids in isoprenoid biosynthesis // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. - 1989. -Vol. 40. - P. 39-59.

133. Kobori M, Masumoto S, Akimoto Y, Takahashi Y.Dietary quercetin alleviates diabetic symptoms and reduces streptozotocin-induced disturbance of hepatic gene expression in mice. Mol Nutr Food Res. 2009 Jul;53(7):859-868.

134. Krinsky, N.I., Membrane antioxidants, Ann. N.Y. Acad. Sci., 551, 17, 1988.

135. Krukoski DW, Comar SR, Claro LM, Leonart MS, do Nascimento AJ. Effect of vitamin C, deferoxamine, quercetin and rutin against tert-butyl hydroperoxide oxidative damage in human erythrocytes. Hematology. 2009 Jun;14(3): 168-72.

136. Kurkin V. A. , Sharova O. V. Flavonoids from Calendula officinalis flowers //Chemistry of Natural Compounds.Volume 43, Number 2. - P. 216-217.

137. Lee, C.Y., Changes in carotenoid content of carrots during growth and post-harvest storage, Food Chem., 20,285,1986.

138. Liebler, D.C., Antioxidant reactions of carotenoids, Ann. N.Y. Acad. Sci., 669,20,1993.

139. Lindfort J. Heilkrauter. New York. Parragón Books,2008. - P 76-77.

140. Liu J, Zhou Q, Wang SJEvaluation of chemical enhancement on phytoremediation effect of Cd-contaminated soils with Calendula officinalis L.// Int J Phytoremediation. 2010 Jul;12(5):503-15.

141. Machado MA, Contar CM, Brustolim JA, Candido L, Azevedo-Alanis LR, Gregio AM, Trevilatto PC, Soares de Lima AA. Management of two cases of desquamative gingivitis with clobetasol and Calendula officinalis gel. //Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 2010 Dec;154(4):335-8.

142. Madejsky M. Lexikon der Frauenkrauter. 3. Auflag.- Muenchen, AT Verlag, 2010. - S. 204-205.

143. Mariassyova M. Antioxidant activity of some herbal extracts in rapeseed and sunflower oils. //Journal of food and nutrition research. - Vol 45, 2006. n 3 -Pp 104-109.

144. Martin, H.D. et al., Anti- and prooxidant properties of carotenoids, J. Prakt. Chem, 341,302,1999.

145. Mathews-Roth, M.M., Antitumor activity of beta-carotene, canthaxanthin and phytoene, Oncology, 39,33,1982.

146. Meos A, JTyriado T, Matto V, Raal A. Lead content in pot marigold (Calendula officinalis L.) inflorescences and leaves: impact of precipitations and vicinity of motorway. //Biol Trace Elem Res. 2011 May;140(2):244-51.

147. Middleton E., Kandaswami C., Theoharis C.T. The Effects of Plant Flavonoidson Mammalian Cells: Implications for Inflammation, Heart Disease, and Cancer // Pharmacol. Rev. 2000. - Vol. 52. - P. 673-751.

148. Mohan Ram H. Y. and Usha Mehta Retardation of inflorescence development in Calendula officinalis by a morphactin and its application // Biologia Plantarum Volume 15,1973, Number 2,152-154.

149. Mohr T., Hecht H., Eichhorn H. Vergleichende Untersuchungen einer verbesserten Pflueckmaschine zur Gewinnung von Bluetendrogen der Echten

Kamille (Chamomilla recutita L., Rauschert), Ringelblume (Calendula officinalis L.) sowie Johanniskraut (Hypericum perforatum L.) // Drogenreport, Jg. 9 (1996) Heft 14.- S. 15-23.

150. Monograpfs of WHO, 2006.- V. 2.- P. 38-45.

151. Moon, R.C., Comparative aspects of carotenoids and retinoids as chemopreventive agents for cancer, J. Nutr., 119,127,1989.

152. Muriach M, Bosch-Morell F, Arnal E, Alexander G, Blomhoff R, Romero FJ. Lutein prevents the effect of high glucose levels on immune system cells in vivo and in vitro. J Physiol Biochem. 2008 Jun;64(2): 149-57.

153. Novak J. Zbchterische Aspekte von Calendula officinalis L. Drogenreport, Jg. 13 (2000) Heft 1.- S. 24-25.

154. Olson, J.A., Vitamin A and carotenoids as antioxidants in a physiological context, J. Nutr. Sci. Vitaminol., 39, S57,1993.

155. Palombo P, Fabrizi G, Ruocco V, Ruocco E, Fluhr J, Roberts R, Morganti P Beneficial long-term effects of combined oral/topical antioxidant treatment with the carotenoids lutein and zeaxanthin on human skin: a double-blind, placebo-controlled study. Skin Pharmacol Physiol. 2007;20(4):199-210.

156. Perez-Vizcaino F, Duarte J, Jimenez R, Santos-Buelga C, Osuna A Antihypertensive effects of the flavonoid quercetin. Pharmacol Rep. 2009 Jan-Feb;61(l):67-75.

157. Pommier P., F. Gomez, M.P. Sunyach, A. D'Hombres, C. Carrie, X. Montbarbon Phase HI Randomized Trial of Calendula Officinalis Compared With Trolamine for the Prevention of Acute Dermatitis During Irradiation for Breast Cancer //Journal of Clinical Oncology, Vol. 22, No 8 (April 15), 2004: pp. 1447-1453.

158. Preethi KC, Siveen KS, Kuttan R, Kuttan G. Inhibition of metastasis of B16F-10 melanoma cells in C57BL/6 mice by an extract of Calendula officinalis L flowers. //Asian Pac J Cancer Prev. 2010;11(6): 1773-9.

159. Raal A, Kirsipuu K Total flavonoid content in varieties of Calendula officinalis L. originating from different countries and cultivated in Estonia.// Nat Prod Res. 2011 Mar; 25(6):658-62.

160. Rafi MM, Shafaie Y. Dietary lutein modulates inducible nitric oxide synthase (iNOS) gene and protein expression in mouse macrophage cells (RAW 264.7). Mol Nutr Food Res. 2007 Mar;51(3):333-40.

161. Ram H. Y. and Usha Mehta Effect of gibberellic acid on the growth of main shoot and axillary branches in Calendula officinalis //Biologia Plantarum Volume 87,1978, Number 11. - P.255-270.

162. Ray D, Mukherjee S, Falchi M, Bertelli A, Das DK. Amelioration of myocardial ischemic reperfusion injury with Calendula officinalis.//Curr Pharm. Biotechnol. 2010 Dec;ll(8):849-54.

163. Reiter M, Rupp K, Baumeister P, Zieger S, Harriius U.Antioxidant effects of quercetin and coenzyme Q10 in mini organ cultures of human nasal mucosa cells.Anticancer Res. 2009 Jan;29(l):33-39.

164. Saat- und Pflanzengut Angebot. - Arten: 2010.- 28 S.

165. Sanchez M, Lodi F, Vera R, Villar IC, Cogolludo A, Jimenez R Moreno L, Romero M, Tamargo J, Perez-Vizcaino F, Duarte J.Quercetin and isorhamnetin prevent endothelial dysfunction, superoxide production, and overexpression of p47phox induced by angiotensin II in rat aorta. Journal of Nutrition. 2007 Apr;137(4):910-915.

166. Shan BE, Wang MX, Li RQ.Quercetin inhibit human SW480 colon cancer growth in association with inhibition of cyclin D1 and survivin expression through Wnt/beta-catenin signaling pathway. Cancer Invest. 2009 Jul;27(6):604-612.

167. Strain, J.J. and Benzie, I.F.F., Antioxidant nutrients, in Functional Foods. The Consumer, the Products and the Evidence, Sadler, M.J. and Saltmarsh, M. (Eds.), The Royal Society of Chemistry, Cambridge, United Kingdom, 1998, 74-79.

168. Strehlow W. Die Heilkunde der Hildegarde von Bingen. / Weltbold, 2010.- P. 260.

169. Terao, J., Antioxidant activity of b-carotene-related carotenoids in solution, Lipids, 24,659,1989.

170. The Handbook of Natural Flavonoids. Vol. 2 / Ed. by J. B. Harborne and H. Baxter. UK: Jhon Wiley and Sons, Chchester, 1999. - 879 pp.

171. Todorova R., Stanev St, Staneva Zh. Stoyaniv G. Bioproduktion von Arznei-, Aroma- und Gewuerzpflanzen in Bulgarien - vor allem fuer Export. // Bermburger Winterseminar zu Fragen der Arznei- und Gewuerzpflanzenproduktion/ -Bernburg, 2009.- S.45-46.

172. Ukiya M, Akihisa T, Yasukawa K et al. Anti-inflammatory, anti-tumor-promoting, and cytotoxic activities of constituents of pot marigold (Calendula officinalis) flowers. (2006). //J Nat Prod. 69:1692-1696.

173. Ul'chenko N. T., A. I. Glushenkova and Kh. S. Mukhamedova Lipids of Calendula officinalis II Chemistry of Natural Compounds. Volume 34, Number 3.- P. 272-274

174. Vidal - Olliver E., Baiansard G., Faure R. et al. Revised structures of triterpenoid saponins from the flowers of Calendula officinalis. // Journal of Natural Products, 1989. - P. 1156-1159.

175. Vu HT, Robman L, Hodge A, McCarty CA, Taylor HR. Lutein and zeaxanthin and the risk of cataract: the Melbourne visual impairment project. Invest Ophthalmol Vis Sei. 2006 Sep;47(9):3783-6.)

176. V6squez-Garzyn VR, Arellanes-Robledo J, GarcHa-Romön R, Aparicio-Rautista DI, Villa-Trevico S.Inhibition of reactive oxygen species and preneoplastic lesions by quercetin through an antioxidant defense mechanism. Free Radic Res. 2009 Feb;43(2): 128-37.

177. Wabner D., Beier Ch. Aromatherapie. Muenchen, Urban et Fischer. 2009.-S. 362.

178. Wan LL, Xia J, Ye D, Liu J, Chen J, Wang G. Effects of quercetin on gene and protein expression of NOX and NOS after myocardial ischemia and reperfusion in rabbit. Cardiovasc Ther. 2009 Spring;27(l):28-33.

179. Wang M, Zhang C, Lin X.Protective effect of lutein against blue light-induced retinal damage in rat. Wei Sheng Yan Jiu. 2008 Jul;37(4):409-12.

180. Yoshikawa M, Murakami T, Kishi A et al. (2001). Medicinal flowers. Ш. Marigold.(l): hypoglycemic, gastric emptying inhibitory, and gastroprotective principles and new oleanane-type triterpene oligolycosides, calendasaponins A, В, C, and D, from Egyptian Calendula officinalis. //Chem Pharm Bull. 49:86370.

181. Zamin LL, Filippi-Chiela EC, Dillenburg-Pilla P, Horn F, Salbego C, Lenz G. Resveratrol and quercetin cooperate to induce senescence-like growth arrest in C6 rat glioma cells. Cancer Sci. 2009 May 12.

182. Zhang W, Zhang F.Effects of quercetin on proliferation, apoptosis, adhesion and migration, and invasion of HeLa cells. Eur J Gynaecol Oncol. 2009;30(l):60-64

183. Zhang, L.X., Conney, R.V., and Bertram, J.S., Carotenoids enhance gap junctional communication and inhibit lipid eroxidation in C3H=10T1=2 cells: Relationship to their cancer chemopreventive action, Carcinogenesis, 12, 2109, 1991.

184. Ziegler, R.G., A review of epidemiologic evidence that carotenoids reduce the risk of cancer, J. Nutr., 119,116,1989.

185. Zitterl-Eglseer K, S Sosa, J Jurenitsch, M Schubert-Zsilavecz, R Delia Loggia, A Tubaro, M Bertoldi and С Franz Anti-oedematous activities of the main triterpendiol esters of marigold (Calendula officinalis L.) Journal of Ethnopharmacology.- Volume 57, Issue 2, July 1997, Pages 139-144.

186. Каталог семян фирмы N.L. Chrestensen, 2011-2012. - С. 144.

187. http://en.uikipedia.org/wiki/Calendula officinalis - cite ref-3 Herbs and Supplements. "Calendula" (HTML). // National Institutes of Health.- U.S. National Library of Medicine

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/dTuginfo/natural/patient-calendula.html. Retrieved 200712-19.