Защитные свойства рекомбинантного человеческого белка теплового шока (70 КДА) при экспериментальном сепсисе у крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат биологических наук Остров, Владимир Федорович

• Остров, Владимир Федорович
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Остров, Владимир Федорович

Список использованных сокращений.

Введение.

Актуальность исследования.

Цель и задачи исследования.

Научная новизна работы.

Основные положения, выносимые на защиту.

Научно-практическое значение.

Объем и структура диссертации.

Апробация и публикация результатов исследования.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Основные термины.

1.2 Современное состояние проблемы сепсиса.

1.2.1 Данные статистики.

1.2.2 Недостаточность современных подходов борьбы с сепсисом.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Защитные свойства рекомбинантного человеческого белка теплового шока (70 КДА) при экспериментальном сепсисе у крыс»

Актуальность исследования

Сепсис и септический шок остаются самой частой причиной смерти у больных в отделениях реанимации, несмотря на использование мощных антибиотиков и химиотерапевтических препаратов, а также современных технологий интенсивной терапии (Parrillo, 1993). Более того, прослеживается тенденция роста смертности пациентов от сепсиса (Friedman et al., 1998). По данным Национального Института Здоровья США ежегодно регистрируют сепсис примерно у 750 ООО пациентов (Martin G., 2003), и почти каждый третий такой случай заканчивается летальным исходом (Riedemann et al., 2003).

Это свидетельствует об отсутствии в настоящее время в клинической медицине средств эффективной терапии и профилактики септических состояний. Сказывается разброс мнений относительно клинического прочтения, первопричины сепсиса, основных звеньев патогенеза, а также отсутствие четко определенной терминологии. Это затрудняет сравнительную оценку статистических данных, создает трудности в диагностике и не способствует выработке единой тактики лечения (Козлов В.К., 2006).

Как известно, сепсис имеет инфекционную природу и этиология его разнообразна. Это патологическое состояние развивается при проникновении в системный кровоток больших количеств бактерий. Наиболее трудно поддается терапии сепсис, вызванный эндотоксинами грамотрицательных бактерий. Однако, известно, что примерно в 50% случаев причиной сепсиса являются грамположительные бактерии, из которых наиболее часто в микрофлоре пациентов доминирует Staphylococcus aureus (Solomkin, 2001). По данным литературы в 1990-1996 годах S. aureus был наиболее частым возбудителем внутрибольничных инфекций. Являясь характерным возбудителем нозокомиальной пневмонии и внутрибольничных катетер-ассоциированных инфекций, S. aureus нередко вызывает и внебольничные инфекции (Козлов В.К., 2006).

Ведущим звеном патогенеза являются структурные компоненты бактериальной клеточной стенки: молекулы тейхоевых и липотейхоевых кислот (lipoteichoic acid, LTA) - в случае грамположительных бактерий, а также липополисахариды (lipopolisaccharides, LPS) - в случае грамотрицательных бактерий. Механизм действия LPS подробно изучен в экспериментах in vitro и in vivo. Они являются эндотоксинами и при проникновении в системный кровоток связываются с рецепторным комплексом CD 14, TLR-4, MD-2 на поверхности моноцитов, нейтрофилов и некоторых других клеток. Происходит запуск внутриклеточного каскада реакций и секреция воспалительных цитокинов (TNF-альфа, IL-6, IL-1) в системный кровоток. В свою очередь LTA является супер-антигеном и способен стимулировать иммунный ответ организма. В отличие от LPS механизм действия LTA связан с TLR-2 рецепторами, однако, в дальнейшем патологический процесс развивается сходным образом (Fournier В., Philpott D., 2005). Таким образом, секреция чрезмерного количества цитокинов в кровоток, прямое токсическое воздействие на клетки эндотелия сосудов, а также нарушение агрегации тромбоцитов и определяют клиническую картину сепсиса.

Установлено, что септический процесс сопровождается нарушениями гемодинамики, гемостаза и патологическими изменениями во внутренних органах (Karima et al., 1999). При этом наблюдается тахикардия и системная гипотензия (вплоть до шока), вызванная секрецией в кровь мощного вазодилататора оксида азота (NO). Также известно, что нарушения свертываемости крови характеризуются фазой гиперкоагуляции с последующей фазой глубокой гипокоагуляции. При этом происходит неконтролируемое внутрисосудистое тромбооразование на фоне депрессии фибринолиза. Такой характерный симптомокомплекс получил название синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС-синдром) (Lin et al., 1999; Грачев и др. 2003; Bhagat et al. 1996; Сидоркин, Преснякова 2008).

Необходимо отметить, что из-за нарушений микрососудистого кровотока развивается ишемия тканей и внутренних органов - полиорганная недостаточность (ПОН). В связи с этим, важным диагностическим показателем является мониторинг биохимических параметров крови, которые отражают функционирование отдельных органов и систем организма, а также обмена веществ.

Одним из возможных путей борьбы с септическими патологиями могут стать белки теплового шока (heat shock proteins, HSP) с молекулярной массой 70 кДа (HSP70). Это предположение основано на уникальных свойствах HSP70, которые были исследованы в последние годы.

В экспериментах in vitro показано, что эти белки способны связываться с TLR-рецепторами (Asea A. et al., 2002; Zuo N. et al.,2008). Если ранее считалось, что HSP70, являясь универсальной защитой клетки от стрессовых воздействий, выполняют свои функции внутри клетки, то в настоящее время известно, что HSP70 при различных стрессорных воздействиях выходит из клеток, где он повышенно экспрессируется. При этом HSP70 взаимодействует с рецепторами на мембранах других клеток, может поглощаться клетками, в целом участвуя в стресс-реакции и оказывая защитное действие на клетки организма. Следует отметить, что при выходе из клетки такие экзогенные HSP70 способны стимулировать неспецифический иммунный ответ и выступать в роли "сигнала опасности" для окружающих клеток (Johnson, Fleshner, 2006).

Экспериментально доказана корреляция между уровнем экспрессии HSP70 и выживаемостью грызунов при моделировании у них эндотоксинового шока (Hotchkiss R. et al., 1993). Тепловое прекондиционирование, предшествующее эндотоксемии увеличивает содержание HSP70 и уменьшает дисфункцию органов и смертность животных (Villar J. et al., 1994). Известно также, что введение крысам HSP70, полученного из мышцы быка, вызывает снижение токсического действия LPS (Kustanova G. et al., 2006).

Цель исследования

Цель данного исследования - изучить протекторные свойства препарата рекомбинантного человеческого белка теплового шока 70 кДа (recombinant human Heat Shock Protein, rhHSP70) на модели экспериментального сепсиса у лабораторных грызунов и оценить его безопасность.

Задачи исследования

1. Изучить защитные свойства rhHSP70 на модели экспериментального грамотрицательного сепсиса при различных схемах введения.

2. Выявить зависимость защитного действия от дозы вводимого rhHSP70.

3. Изучить защитные свойства rhHSP70 на модели грамположительного сепсиса у крыс.

4. Исследовать фармакологическое действие rhHSP70 на здоровых крысах.

5. Определить острую токсичность rhHSP70.

Научная новизна работы

В исследовании показаны дозозависимые защитные эффекты rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг при профилактическом внутривенном введении крысам с моделируемым грамотрицательным сепсисом. Обнаружено, что предварительное внутривенное введение rhHSP70 снижает токсические эффекты LTA из S. aureus при экспериментальном сепсисе у крыс. Установлено, что rhHSP70 при внутривенном введении крысам в дозе 266 мкг/кг не оказывает заметного влияния на гемодинамику, систему гемостаза и биохимические показатели крови. Проведено предварительное токсикологическое исследование. Показано отсутствие токсических эффектов rhHSP70 при однократном внутривенном введении мышам в дозе (26,6 мг/кг), в 100 раз превышающей эффективную дозу (266 мкг/кг) при сепсисе. Рассчитаны следующие токсикологические параметры: терапевтический индекс (ТИ), характеризующий rhHSP70 как малоопасное вещество; средняя смертельная доза LD50, характеризующая rhHSP70 как умереннотоксичное вещество.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Превентивное внутривенное введение rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг при экспериментальном грамотрицательном сепсисе у крыс оказывает выраженное защитное действие и уменьшает или полностью блокирует токсические эффекты LPS из E.coli.

2. Наблюдается зависимость защитного эффекта от дозы вводимого rhHSP70. Снижение в два раза дозы, эффективной на модели экспериментального грамотрицательного сепсиса (266 мкг/кг) приводит к заметному ослаблению защитного действия rhHSP70.

3. Введение rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг здоровым крысам без сепсиса не влияет на изучаемые физиологические параметры гемодинамики, системы коагуляции и биохимические показатели крови животных.

4. Превентивное внутривенное введение rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг при экспериментальном грамположительном сепсисе у крыс уменьшает токсический действие LTA из S. aureus на организм животных.

5. Проведено предварительное токсикологическое исследование rhHSP70. При однократном внутривенном введении мышам rhHSP70 в дозе 26,6 мг/кг, которая в 100 раз превышает дозу, эффективную при экспериментальном сепсисе не проявляет токсического действия. По величине терапевтического индекса (ТИ) rhHSP70 является малоопасным, а по значению LD50 -умереннотоксичным веществом.

Научно-практическое значиние

Полученные результаты указывают на эффективность rhHSP70 как профилатического средства при сепсисе, вызванного как грамположительными, так и грамотрицательными микроорганизмами. Полученные в данной работе результаты могут быть использованы при разработке нового фармакологического средства для профилактики септических патологий, что свидетельствует о перспективности дальнейшего изучения свойств rhHSP70 и механизма его действия.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена настраницах машинописного

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Остров, Владимир Федорович

выводы

1. Превентивное внутривенное введение rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг при экспериментальном сепсисе у крыс оказывает выраженное защитное действие и уменьшает токсическое эффекты LPS из E.coli или LTA из S.aureus.

2. При введении rhHSP70 после LPS защитные свойства выражены значительно слабее.

3. Наблюдается зависимость защитного эффекта от дозы вводимого rhHSP70. Снижение в два раза дозы, эффективной на модели экспериментального сепсисе (266 мкг/кг) приводит к заметному ослаблению защитного действия rhHSP70.

4. Введение rhHSP70 в дозе 266 мкг/кг здоровым крысам без сепсиса не влияет на изучаемые физиологические параметры гемодинамики, системы коагуляции и биохимические показатели крови животных.

5. По величине ТИ rhHSP70 является малоопасным, умереннотоксичным по LD50 и не проявляет токсического действия при однократном внутривенном введении мышам в дозе 26,6 мг/кг, которая в 100 раз превышает дозу, эффективную при экспериментальном сепсисе.

6. На основании экспериментальных данных rhHSP70 может быть рекомендован для доклинических исследований в качестве профилактического антисептического средства.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, сепсис является актуальной проблемой для клинической медицины. Сложность терапии этого патологического процесса объясняется механизмом заболевания, который будучи запущен быстро развивается и приводит к разнообразным нарушениям функционирования органов и систем организма. Чрезмерный синтез и серкреция в кровь медиаторов воспаления приводит к состоянию цитокиновой бури. Нарушается баланс гомеостаза и развиваются коагулопатии (синдром ДВС), системная гипотензия (септический шок), нарушения микроциркуляции и ишемия тканей внутренних органов (ПОН). Высокая смертность пациентов, а также неуклонный рост числа случаев сепсиса в клинической практике и определяют необходимость поиска новых эффективных подходов в терапии и профилактике этого заболевания.

Стоит заметить, что предыдущие многочисленные попытки разработать препараты на основе анти-LPS и анти-TLR антител не привели к ожидаемым результатам (Fink М., 1993; Calandra Т. et al., 1991).

Одним из перспективных направлений борьбы с сепсисом являются белки теплового шока с молекулярной массой 70 кДа. В ряде научных работ in vitro показаны защитные свойства этих молекул при различных патологических состояниях. Известно, что начальный этап фармакологического исследования новых природных и синтетических соединений подчинен задачам возможно быстрого выяснения общих черт биологической активности изучаемого вещества при минимуме затрат и риска негативной оценки веществ, имеющих ценные фармакологические свойства (Сернов Л.Н., Гацура В.В., 2000).

В рамках данной работы планировалось подтвердить защитные свойства rhHSP70 на моделях грамположительного и грамотрицательного сеспсиса у крыс. Изучить зависимость этих эффектов - от дозы вводимого rhHSP70. Провести на здоровых животных предварительное исследование токсикологических и фармакологических свойств rhFISP70.

В настоящее время имеется целый ряд работ, указывающих на центральную роль молекул LPS и LTA при моделировании сепсиса. Это связано с их способностью стимулировать различные компоненты воспалительного ответа. В частности, они активируют систему комплемента, нейтрофилы и мононуклеарные фагоциты. Циркулирующие в крови молекулы LPS и LTA могут активировать полиморфноядерные лейкоциты и макрофаги, которые продуцируют различные воспалительные медиаторы и цитокины, адгезивные к клеточной поверхности молекулы, токсические кислородные радикалы, продукты метаболизма арахидоновой кислоты и оксид азота. Кроме того, LPS и LTA способны воздействовать на системы коагуляции и фибринолиза (Саенко В.Ф., 2005).

Для септического шока характерны уменьшение системного сопротивления и артериальная гипотензия при увеличении сердечного выброса. Одним из ключевых моментов явялется угнетение сократительной способности миокарда, несмотря на начальное увеличение сердечного индекса. На ранней стадии развивается тахикардия и вазодилатация вен и артерий, приводящая к снижению ОПСС. Высокий сердечный выброс объясняется тахикардией, а не увеличением сократительной активности миокарда. Более того, систолическая и диастолическая функции желудочков часто угнетены, несмотря на высокий сердечный выброс. При дальнейшем развитии шокового процесса функциональные способности сердца продолжают ухудшаться, и происходит снижение сердечного выброса. Литературные данные свидетельствуют, что при доминирующей грамотрицательной микрофлоре септический шок наблюдается приблизительно в 40% случаев сепсиса, при грамположительной - в 5% случаев (Саенко С.В. и др., 2005). Полученные в работе экспериментальные данные подтверждают, что при моделировании грамположительного и грамотрицательного сепсиса у лабораторных крыс наблюдается разная выживаемость животных в эксперименте. Во втором случае она значительно выше, чем в первом. Это хорошо согласуются с приведенными выше статистическими данными.

Также получены результаты, позволяющие сделать вывод о том, что высокоочищенный rhHSP70, полученный в культуре эукариотических клеток, при однократном внутривенном введении в дозе 266 мкг/кг проявляет защитные свойства при экспериментальном сепсисе у крыс. При этом подобные свойства отмечены как при грамположительном, так и при грамотрицательном сепсисе.

Интересным фактом является сочетание ярко выраженных защитных эффектов HSP70 на молекулярном уровне, которые продемонстрированы ранее в ряде работ, и неспособностью rhHSP70 вмешиваться в физиологические процессы на уровне организма. В данном исследовании продемонстрировано отсутствие заметного собственного фармакологического действия rhHSP70 на организм животных. В подтверждение этому получены данные свидетельствующие, что однократное внутривенное введение rhHSP70 здоровым крысам не оказывает влияния на параметры гемодинамики, гемостаза и биохимии крови.

В работе показано отсутствие токсических эффектов rhHSP70 при однократном внутривенном введении мышам в дозе (26,6 мг/кг), в 100 раз превышающей эффективную дозу (266 мкг/кг) при сепсисе. Также экспериментальным и расчетным способами определены токсикологические показатели (LD50, ED50, ТИ), с помощью которых ориентировочно охарактеризована безопасность данного вещества.

Значение ТИ позволяет определить принадлежность rhHSP70 к тому или иному классу опасных веществ. Необходимо отметить, что классификация степени опасности токсического действия лекарственных средств определяет вещества с ТИ > 45 как малоопасные (Березовская И.В., 1985). В то же время, по классификации токсичности химических веществ rhHSP70 характеризуются как умеренно токсичное вещество (Березовская И.В., 2003).

Механизм действия rhHSP70 плохо изучен и требует дальнейшего детального исследования. Однако, стоит отметить шаперонную функцию внутриклеточных HSP70. Она осуществляется благодаря способности этих

119 белков узнавать гидрофобные участки поли пептида. Это могут быть открытые участки вновь синтезированных белков или неправильно свернутые полипептиды, у которых в норме гидрофобные остатки находятся внутри молекулы. Молекула HSP70 связывается своим пептид-связывающим доменом с гидрофобным участком и с затратой энергии АТФ осуществляет шаперонный цикл. Таким образом, подобное уникальное свойство позволяет HSP70 способствовать правильному фолдингу белков.

Стоит обратить внимание на тот факт, что в структуре амфифильных молекул LPS и LTA также присутствуют гидрофильные и липофильные части. Поэтому взаимодействие rhHSP70 с молекулами LPS и LTA потенциально возможно и этот факт необходимо учитывать при исследовании механизма действия белков теплового шока при септических состояниях.

С другой стороны, в настоящее время имеется целый ряд работ, показыващих способность rhHSP70 взаимодействовать с То11-подобными рецепторами. Как было описано выше, данные рецепторы вовлечены в процесс развития воспаления в организме. Они способны связывать как молекул LPS, так и молекул LTA. В последние годы в ряде работ экспериментально доказано, что экзогенные HSP70 также могут связываться с рецепторами TLR (Calderwood S. et al., 2007). Таким образом, с полным основанием можно предположить, что возможно конкурирование между молекулами rhHSP70 с одной стороны, и молекулами LPS или LTA с другой стороны за связывание с рецепторами, играющими ключевую роль в развитии воспаления.

Таким образом, учитывая защитные свойства rhHSP70 при экспериментальном сепсисе, использование этих стресс-белков в профилактике сепсиса представляется, как новый эффективный подход в борьбе с подобными патологическими состояниями. Вместе с тем отсутствие собственной фармакологической активности и крайне низкая токсичность rhHSP70 позволяет предположить также и отсутсвие в будущем значительных побочных эффектов. Это является огромным преимуществом перед химическими агентами, вызывающими множество побочных эффектов на различные системы организма.

В целом, данная экспериментальная работа по изучению rhHSP70 in vivo является шагом в изучении нового перспективного подхода по борьбе с септическими патологиями. По результатам исследования высокоочищенный рекомбинантный человеческий белок теплового шока с молекулярной массой 70 кДа может быть рекомендован для дальнейших доклинических испытаний, как перспективное средство профилактики сепсиса.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Остров, Владимир Федорович, 2010 год

1. Андреев Л., Шабанов П., Маргулис Б. Экзогенный белок теплового шока с молекулярной массой 70 кДа изменяет поведение белых крыс, Доклады Академии Наук. 2004; 394(6): 835-839.

2. Борискин И.В. Неотложные состояния в клинике инфекционных болезней. Гомель, 2000. 49с.

3. Варбанец Л.Д., Винарская Н.В. Структура, функция, биологическая активность эндотоксинов грамотрицательных бактерий. . Проблемы токсикологии. 2002; №1: 24—27.

4. Грачёв С.В., Пак С.Г., Малов В.А., Городнова Е.А. Текущие аспекты патогенеза сепсиса. Терапевтический архив. 2003; 11: 84-89.

5. Грачев С.В., Якунин Г.А., Новочадов В.В., Ярошенко И.Ф. Клиническая и лабораторная диагностика. 1992; № 5: 6-10.

6. Гринев М.В., Громов М.И., Комраков В.Е. Хирургический сепсис. СПб. — М.: «Внешторгиздат», 2001. — 315с.

7. Гуськова Т.А. Токсикология лекарственных средств. М.: Издательский дом Русский врач, 2003. 154с.

8. Данилова Л.А. Анализы крови и мочи. СПб.: Салит-Медкнига, 2003. -128с.

9. Дати Ф., Метуманн Э. Белки. Лабораторные тесты и клиническое применение. М.: Лабора, 2007. 560с.

10. Дмитриева Н.Ф., Вылегжанина Е.С. Стратегия возбудителя в организме хозяина. Л.: Наука, 1987. 72с.

11. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. М.-Тверь: Триада, 2005. 27с.

12. Илюкевич Г.В. Абдоминальный сепсис: новый взгляд на нестареющую проблему. Медицинские новости. 2001; 9: 35-4.

13. Исаков Ю.Ф., Белобородова И.В. Сепсис у детей. М.: Издатель Мокеев, 2000.-368с.

14. Книрель Ю.А., Кочетков Н.К. Строение липополисахаридов грамотрицательных бактерий. III. Структура О-специфических полисахаридов. Биохимия. 1994; Т. 59, №12: 1784-1851.

15. Козлов В.К. Сепсис: этиология, иммунопатогенез, концепция современной иммунотерапии. СПб.: Диалект, 2006. 304с.

16. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия. М.: Бином, 1999. 368с.

17. Михайлов В.В. Основы патологической физиологии: Руководство для врачей. М.: Медицина, 2001. 704с.

18. Мурашев А.Н., Медведев О.С., Давыдова С. А. Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения. Саратов: Издательсво Саратовского университета, 1992. 42с.

19. Пастухов Ю.Ф., Екимова И.В. Молекулярныя, клеточные и системные механизмы протективной функции белка теплового шока 70 кДа. Нейронауки. 2005. Т.2(2): 3-25.

20. Покровский В.И., Пак С.Г., Брико Н.И., Данилкин Б.К. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004.-813с.

21. Руднов В.А., Ложкин С.Н., Галеев Ф.С. и др. Фармакоэпидемиологический анализ лечения абдоминального сепсиса в России. Результаты многоцентрового исследования. Инфекции в хирургии. 2003; №2: 45-53.

22. Саенко В.Ф., Десятерик В.И., Перцева Т.А., Шаповалюк В.В. Сепсис и полиорганная недостаточность. Кривой Рог. Минерал, 2005. 466с.

23. Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. М. 2000.-352с.

24. Сидоркин В., Преснякова М. Биохимические основы системы гемостаза и диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови. Н.Новгород: ННИИТО, 2008.-154с.

25. Шок. Патогенез. Диагностика. Лечение: Руководство / авт. сост. Тарасенко С.В., Дмитриева Н.В., Матвеева С.А. Рязань. РИО РГМУ, 2005. -67с.

26. Ткачук В.А. Клиническая биохимия. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. 515с.

27. Фрейдлин И.С. Цитокины и межклеточные контакты в противоинфекционной защите организма. Соросовский журнал. 1996; №7: 19— 25.

28. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М. 2005. 832с.

29. Цыганенко А .Я., Жуков В.И., Мясоедов В.В., Завгородний И.В. Клиническая биохимия. М.: Триада-Х, 2002. 504с.

30. Энтони П.К. Секреты фармакологии. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. 384с.

31. Abraham Е. Coagulation abnormalities in acute lung injury and sepsis. Am О Resp Cell Mol Biol 2000; 22: 401-4.

32. Agarraberes FA, Dice JF. A molecular chaperone complex at the lysosomal membrane is required for protein translocation. J Cell Sci. 2001; 114(Pt 13): 24912499.

33. Aird WC. The role of the endothelium in severe sepsis and multiple organ dysfunction syndrome. Blood. 2003; 101(10): 3765-77.

34. Akashi S, Shimazu R, Ogata H, Nagai Y, Takeda K, Kimoto M, Miyake K. Cutting edge: cell surface expression and lipopolysaccharide signaling via the tolllike receptor 4-MD-2 complex on mouse peritoneal macrophages. J Immunol. 2000; 164(7): 3471-5.

35. Alder G.M., Austen B.M., Bashford C.L., Mehlert A., Pasternak C.A. Heat shock proteins induce pores in membranes. Bioscience Rep. 1990; 10: 509-518.

36. Angus DC, Wax RS. Epidemiology of sepsis: an update. Crit Care Med. 2001; 29: 109-116.

37. Asea A, Kabingu E, Stevenson MA, Calderwood SK. HSP70 peptidembearing and peptide-negative preparations act as chaperokines. Cell Stress Chaperones. 2000; 5(5): 425-31.

38. Asea A, Kraeft SK, Kurt-Jones EA, Stevenson MA, Chen LB, Finberg RW, Koo GC, Calderwood SK. HSP70 stimulates cytokine production through a CD14-dependant pathway, demonstrating its dual role as a chaperone and cytokine.Nat Med. 2000; 6(4): 435-42.

39. Asea A, Rehli M, Kabingu E, Boch JA, Bare O, Auron PE, Stevenson MA, Calderwood SK. Novel signal transduction pathway utilized by extracellular HSP70: role of toll-like receptor (TLR) 2 and TLR4. J Biol Chem. 2002; 277(17): 15028-34.

40. Aulock SV, Deininger S, Draing C, Gueinzius K, Dehus O, Hermann C. Gender difference in cytokine secretion on immune stimulation with LPS and LTA. J Interferon Cytokine Res. 2006; 26(12): 887-92.

41. Balk RA. Severe sepsis and septic shock: Definitions, epidemiology and clinical manifestations. Crit Care Clin North Am. 2000; 16(2): 179-92.

42. Bannerman DD, Goldblum SE. Endotoxin induces endothelial barrier dysfunction through protein tyrosine phosphorylation. Am J Physiol. 1997; 273(1 Pt 1): L217-26.

43. Bataille R, Klein B. C-reactive protein levels as a direct indicator of interleukin-6 levels in humans in vivo. Arthritis Rheum. 1992; 35: 282-3.

44. Bausero MA, Gastpar R, Multhoff G, Asea A. Alternative mechanism by which IFN-gamma enhances tumor recognition: active release of heat shock protein 72. J Immunol. 2005; 175(5): 2900-12.

45. Bhagat К., Collier J., Vallance P. Local Venous Responses to Endotoxin in Humans. Circulation. 1996; 94: 490-497.

46. Bone RC, Grodzin С J, Balk RA. Sepsis: a new hypothesis for pathogenesis of the disease process. Chest. 1997; 112: 235-43.

47. Braun OH, Specht H, Luderitz O, Westphal O. Studies on endotoxins of dyspepsia coli bacteria. Z Hyg Infektionskr. 1954; 139(6): 565-72.

48. Buckley JM, Wang JH, Redmond HP. Cellular reprogramming by gram-positive bacterial components: a review. J Leukoc Biol. 2006; 80(4): 731-41.

49. Bukau B, Horwich AL. The Hsp70 and Hsp60 chaperone machines. Cell. 1998; 92(3): 351-66.

50. Burnett RJ, Haverstock DC, Dellinger EP, Reinhart HH, Bohnen JM, Rotstein OD, Vogel SB, Solomkin JS. Definition of the role of enterococcus in intraabdominal infection: analysis of a prospective randomized trial. Surgery. 1995; 118(4): 716-21.

51. Calandra T, Baumgartner JD, Glauser MP. Anti-lipopolysaccharide and antitumor necrosis factor/cachectin antibodies for the treatment of gram-negative bacteremia and septic shock. Prog Clin Biol Res. 1991; 367: 141-59.

52. Calderwood SK, Mambula SS, Gray PJ Jr, Theriault JR. Extracellular heat shock proteins in cell signaling. FEBS Lett. 2007; 581(19): 3689-94.

53. Campisi J, Leem TH, Fleshner M. Stress-induced extracellular Hsp72 is a functionally significant danger signal to the immune system. Cell Stress Chaperones. 2003; 8(3): 272-86.

54. Casey LC, Balk RA, Bone RC. Plasma cytokine and endotoxin levels correlate with survival in patients with the sepsis syndrome. Ann Intern Med. 1993; 119(8): 771-8.

55. Castellheim A., Brekke O.-L., Espevik Т., Harboe M., Mollnes Т. E. Innate Immune Responses to Danger Signals in Systemic Inflammatory Response Syndrome and Sepsis. Scandinavian Journal of Immunology 2009; 69(6): 479—491.

56. Caterina R, Libby P, Peng H-B et al. Nitric oxide decreases cytokine induced endothelial activation: nitric oxide selectively reduces endothelial expression of adhesion molecules and proinflammatory cytokines. J Clin Invest 1995; 96: 60-8.

57. Chen HW, Hsu C, Lu TS, Wang SJ, Yang RC. Heat shock pretreatment prevents cardiac mitochondrial dysfunction during sepsis. Shock. 2003; 20(3): 274-9.

58. Christis C, Lubsen NH, Braakman I. Protein folding includes oligomerization -examples from the endoplasmic reticulum and cytosol. FEBS J. 2008; 275(19): 470027.

59. Clark P., Menoret A., The inducible HSP70 as a marker of tumor immunogenicity Cell Stress Chaperones. 2001; 6(2): 121-125.

60. Clayton A, Turkes A, Navabi H, Mason MD, Tabi Z. Induction of heat shock proteins in B-cell exosomes. J Cell Sci. 2005; 118: 3631-8.

61. Colman RW. The role of plasma proteases in septic shock. N Engl J Med. 1989; 320(18): 1207-9.

62. Cooper NR, Morrison DC. Binding and activation of the first component of human complement by the lipid A region of lipopolysaccharides. J Immunol. 1978; 120(6): 1862-8.

63. Daugaard M, Rohde M, Jaattela M. The heat shock protein 70 family: Highly homologous proteins with overlapping and distinct functions. FEBS Lett. 2007; 581(19): 3702-10.

64. Davies E., Bacelar M., Marshall M., Johnson E., Wardle Т., Andrew S., Williams J., Experimental immuology 2006; 145(1): 183-189.

65. De Kimpe SJ, Thiemermann C, Vane JR. Role for intracellular platelet-activating factor in the circulatory failure in a model of gram-positive shock. Br J Pharmacol. 1995; 116(8): 3191-8.

66. De Jonge E, Levi M. Effects of different plasma substitutes on blood coagulation: a comparative review. Crit Care Med 2001; 29: 1261-7.

67. Demand J, Liiders J, Hohfeld J. The carboxy-terminal domain of Hsc70 provides binding sites for a distinct set of chaperone cofactors.Mol Cell Biol. 1998; 18(4): 2023-8.

68. Dobrovolskja MA., Vogel SN. Toll receptors, CD 14, and macrophage activation and deactivation by LPS. Microbes Infect. 2002; 4(9): 903-14.

69. Doweiko JP, Nompleggi DJ. Use of albumin as a volume expander. J Parent EntNutr. 1991; 15: 484-7.

70. Dubois MF, Hovanessian AG, Bensaude O. Heat-shock-induced denaturation of proteins. Characterization of the insolubilization of the interferon-induced p68 kinase. J Biol Chem. 1991; 266(15): 9707-11.

71. Dziarski R, Gupta D. Role of MD-2 in TLR2- and TLR4-mediated recognition of Gram-negative and Gram-positive bacteria and activation of chemokine genes.J Endotoxin Res. 2000; 6(5): 401-5.

72. Ellis J. Proteins as molecular chaperones. Nature. 1987; 328(6129): 378-9.

73. Engman DM, Kirchhoff LV, Donelson JE. Molecular cloning of mtp70, a mitochondrial member of the hsp70 family. Mol Cell Biol. 1989; 9(11): 5163-8.

74. Erridge C, Bennett-Guerrero E, Poxton IR. Structure and function of 1 ipopolysaccharides. Microbes Infect. 2002; 4(8): 837-51.

75. Evans GF, Snyder YM, Butler LD, Zuckerman SH. Differential expression of interleukin-1 and tumor necrosis factor in murine septic shock models. Circ Shock. 1989; 29(4): 279-90.

76. Fink MP. Adoptive immunotherapy of gram-negative sepsis: use of monoclonal antibodies to lipopolysaccharide. Crit Care Med. 1993; 21: 32-39.

77. Fischer W. Physiology of lipoteichoic acids in bacteria. Adv Microb Physiol. 1988; 29: 233-302.

78. Fischer W, Mannsfeld T, Hagen G. On the basic structure of poly(glycerophosphate) lipoteichoic acids Biochem Cell Biol. 1990; 68(1): 33-43.

79. Fleshner M, Campisi J, Amiri L, Diamond DM. Cat exposure induces both intra- and extracellular Hsp72: the role of adrenal hormones. Psychoneuroendocrinology. 2004; 29(9): 1142-52.

80. Forstermann U, Schmidt HH, Pollock JS, Sheng H, Mitchell JA, Warner TD, Nakane M, Murad F. Isoforms of nitric oxide synthase. Characterization and purification from different cell types. Biochem Pharmacol. 1991; 42(10): 1849-57.

81. Foster DM., Doig GS. Clinical trials for the evaluation of sepsis therapies. / in Vinsent GL., Yearbook of intensive care and emergency medicine. Berlin. Springer, 1997. 149-157.

82. Fournier B, Philpott DJ. Recognition of Staphylococcus aureus by the innate immune system. Clin Microbiol Rev. 2005; 18(3): 521-40.

83. Friedman G, Silva E, Vincent JL. Has the mortality of septic shock changed with time. Crit Care Med. 1998; 26(12): 2078-86.

84. Freudenberg M, Galanos C. Metabolic fate of endotoxin in rat. Adv Exp Med Biol. 1990; 256: 499-509.

85. Freudenberg MA, Galanos C. Tumor necrosis factor alpha mediates lethal activity of killed gram-negative and gram-positive bacteria in D-galactosamine-treatedmice. Infect Immun. 1991; 59(6): 2110-5.

86. Frey EA, Miller DS, Jahr TG, Sundan A, Bazil V, Espevik T, Finlay BB, Wright SD. Soluble CD14 participates in the response of cells to lipopolysaccharide. J Exp Med. 1992; 76(6): 1665-71.

87. Fulcher С A, Gardiner JE, Griffin JH, Zimmermann TS. Proteolitic inactivation jf human factor VIII procoagulant protein by activated human protein С and its analogy with factor V. Blood 1984; 63: 486-9.

88. Galanos C, Luderitz O, Rietschel ET, Westphal O, Brade H, Brade L, Freudenberg M, Schade U, Imoto M, Yoshimura H. Synthetic and natural Escherichia coli free lipid A express identical endotoxic activities. Eur J Biochem. 1985; 148(1): 1-5.

89. Gosling P., Albumin and the critically ill. Care Critically 111. 1995; 11: 57-61.

90. Grey ST, Tsushida A, Hau H et al. Selective inhibitory effects of the anticoagulant activated protein С on the responses of human mononuclear phagocytes to LPS, IFN-gamma or phorbol ester. J Immunol 1994; 153: 3664-72.

91. Grinell BW, Hermann RB, Yan SB. Human protein С inhibits selectin-mediated cell adhesion: role of unique fucosylated olygosaccharide. Glycobiology 1994;4:221-5.

92. Gunther E, Walter L. Genetic aspects of the HSP70 multigene family in vertebrates. Experientia. 1994; 50(11-12): 987-1001.

93. Hancock WW, Grey ST, Hau L et al. Binding of activated protein С to a specific receptor on human mononuclear phagocytes inhibits intracellular calcium signaling and monocyte-dependent proliferative responses.Transplantation 1995; 60: 1525-32.

94. Henderson В., Poole S., Wilson M. Bacterial modulins: a novel class of virulence factors which cause host tissue pathology by inducing cytokine synthesis. Microbiol. Rev. 1996; 60: 316-341.

95. Heumann D. CD 14 and LPB in endotoxinemia and infections caused by Gram-negative bacteria. J. Endotox. Res. 2001; 7(6): 439^141.

96. Hibbs JB, Vavrin Z, Taintor RR. L-arginin is required for expression of the activated macrophage effector mechanism causing selective metabolic inhibition in target cells. Hi Immunol 1987; 138: 550-65.

97. Hirasawa H, Oda S, Nakamura M. Blood glucose control in patients with severe sepsis and septic shock. World J Gastroenterol. 2009; 15(33): 4132-6.

98. Holt ME, Ryall ME, Campbell AK: Albumin inhibits human polymorphonuclear leucocyte luminol-dependent chemiluminescence: evidence for oxygen radical scavenging. Br J Exp Pathol 1984; 65: 231-41.

99. Hoshino K, Tsutsui H, Kawai T, Takeda K, Nakanishi K, Takeda Y, Akira S. Cutting edge: generation of IL-18 receptor-deficient mice: evidence for IL-1 receptor-related protein as an essential IL-18 binding receptor.J Immunol. 1999; 162(9): 5041^4.

100. Hotchkiss R, Nunnally I, Lindquist S, Taulien J, Perdrizet G, Karl I. Hyperthermia protects mice against the lethal effects of endotoxin. Am J Physiol. 1993; 265(6 Pt 2): 1447-57.

101. Hou L., Sasaki H., Stashenko P. Toll-like receptor 4-deficient mice have reduced bone destruction following mixed anaerobic infection. Infect.Immun. 2000; 68(8): 4681-4687.

102. Houenou LJ, Li L, Lei M, Kent CR, Tytell M. Exogenous heat shock cognate protein Hsc 70 prevents axotomy-induced death of spinal sensory neurons. Cell Stress Chaperones. 1996; 1(3): 161-6.

103. Hunt C, Morimoto RI. Conserved features of eukaryotic HSP70 genes revealed by comparison with the nucleotide sequence of human HSP70. Proc Natl Acad Sci U SA. 1985; 82(19): 6455-9.

104. Hunter-Lavin C, Davies EL, Bacelar MM, Marshall MJ, Andrew SM, Williams JH. Hsp70 release from peripheral blood mononuclear cells. Biochem Biophys Res Commun. 2004; 324(2): 511-7.

105. Hwang TL. Potential use of albumin administration in severe sepsis. J Chin Med Assoc. 2009; 72(5): 225-6.

106. Janssens S., Beyaert R., Role of Toll-Like Receptors in Pathogen Recognition Clin Microbiol Rev. 2003; 16(4): 637-646.

107. Johnson JD, Fleshner M. Releasing signals, secretory pathways, and immune function of endogenous extracellular heat shock protein 72. J Leukoc Biol. 2006; 79(3): 425-34.

108. Johnson SD, Lucas CE, Gerrick SJ Ledgerwood AM, Higgins RF Altered coagulation after albumin supplements for treatment of oligemic shock. Arch Surg 1979; 114: 379-83.

109. Karima R, Matsumoto S, Higashi H, Matsushima K. The molecular pathogenesis of endotoxic shock and organ failure.Mol Med Today. 1999; 5(3): 12332.

110. Kennedy MN, Mullen GE, Leifer CA, Lee C, Mazzoni A, Dileepan KN, Segal DM. A complex of soluble MD-2 and lipopolysaccharide serves as an activating ligand for Toll-like receptor 4. J Biol Chem. 2004; 279(33): 34698-704.

111. Koch A.E., Kunkel S.L., Burrows J.C. et al. Synovial tissue macrophage as a source of the chemotatic cytokine IL-8. J.Immunol. 1991; 147: 2187-2195.

112. Kuhl SJ, Rosen H. Nitric oxide and septic shock. From bench to bedside. West J Med. 1998; 168(3): 176-81.

113. Lamian V, Small GM, Feldherr CM. Evidence for the existence of a novel mechanism for the nuclear import of Hsc70. Exp Cell Res. 1996; 228(1): 84-91.

114. Lin HC, Wan FJ, Kang BH, Wu CC, Tseng CJ Systemic administration of lipopolysaccharide induces release of nitric oxide and glutamate and c-fos expression in the nucleus tractus solitarii of rats. Hypertension. 1999; 33(5): 1218-24.

115. Luckow VA. Baculovirus systems for the expression of human gene products. Curr Opin Biotechnol. 1993; 4(5): 564-72.

116. Lynn WA, Cohen J. Adjunctive therapy for septic shock: a review of experimental approaches. Clin Infect Dis. 1995; 20(1): 143-58.

117. Marber MS, Mestril R, Chi SH, Sayen MR, Yellon DM, Dillmann WH. Overexpression of the rat inducible 70-kD heat stress protein in a transgenic mouse increases the resistance of the heart to ischemic injury. J Clin Invest. 1995; 95(4): 1446-56.

118. Martin GS, Mannino DM, Eaton S, Moss M. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med. 2003; 348(16): 1546-54.

119. Mathew A, Bell A, Johnstone RM. Hsp-70 is closely associated with the transferrin receptor in exosomes from maturing reticulocytes. Biochem J. 1995; 308(Pt 3): 823-30.

120. Mathison J.C., Ulevitch R.J. The clearance, tissue distribution and cellular localization of intravenously injected lipopolysaccharide in rabbits. J.Immunol. 1979; 123:2133-2143.

121. Medzhitov R, Preston-Hurlburt P, Janeway CA Jr. A human homologue of the Drosophila Toll protein signals activation of adaptive immunity. Nature. 1997; 388(6640): 394-7.

122. Moncada S, Higgs A. The 1-arginine-nitric oxide pathway. N Engl J Med. 1993;329:2002-2012.

123. Munford RS, Hall CL. Detoxification of bacterial lipopolysaccharides (endotoxins) by a human neutrophil enzyme. Science. 1986; 234(4773): 203—5.

124. Munro S, Pelham HR. An Hsp70-like protein in the ER: identity with the 78 kd glucose-regulated protein and immunoglobulin heavy chain binding protein. Cell. 1986; 46(2): 291-300.

125. Natanson C, Danner RL, Elin RJ, Hosseini JM, Peart KW, Banks SM, MacVittie TJ, Walker RI, Parrillo JE. Escherichia coli and Staphylococcus aureus challenges in a canine model of human septic shock. J Clin Invest. 1989; 83(1): 24351.

126. Nollen E. A., Morimoto R. I. Chaperoning signaling pathways: molecular chaperones as stress-sensing "heat shock' proteins Journal of Cell Science 2002; 115: 2809-2816.

127. Panayi GS, Corrigall VM. BiP regulates autoimmune inflammation and tissue damage. Autoimmun Rev. 2006; 5(2): 140-2.

128. Parrillo JE. Pathogenetic mechanisms of septic shock. N Engl J Med. 1993; 328(20): 1471-7.

129. Peters TJ. The albumin molecule: its structure and chemical properties. In: All About Albumin. Edited by Peters TJ. San Diego: Academic Press 1996; 9-75.

130. Pittet JF, Lee H, Morabito D, Howard MB, Welch WJ, Mackersie RC. Serum levels of Hsp 72 measured early after trauma correlate with survival. J Trauma. 2002; 52(4): 611-7.

131. Pockley AG, De Faire U, Kiessling R, Lemne C, Thulin T, Frostegard J. Circulating heat shock protein and heat shock protein antibody levels in established hypertension. J Hypertens. 2002; 20(9): 1815-20.

132. Pockley AG, Georgiades A, Thulin T, de Faire U, Frostegard J. Serum heat shock protein 70 levels predict the development of atherosclerosis in subjects with established hypertension. Hypertension. 2003; 42(3): 235-8.

133. Rea IM, McNerlan S, Pockley AG. Serum heat shock protein and anti-heat shock protein antibody levels in aging. Exp Gerontol 2001; 36: 341-52.

134. Riedemann NC, Guo RF, Ward PA. The enigma of sepsis. J Clin Invest. 2003; 112(4): 460-7.

135. Riedemann NC, Guo RF, Ward PA. Novel strategies for the treatment of sepsis. Nat Med. 2003; 9(5): 517-24.

136. Ritossa F. A new puffing pattern induced by heat shock and DNP in DrosophilaExperimentia. 1962; 18: 571-573.

137. Roger C., Bone MD., Gram-positive organisms and sepsis. Arch Intern Med. 1994; 154(10): 26-34.

138. Shi Y, Tu Z, Tang D, Zhang H, Liu M, Wang K, Calderwood SK, Xiao X. The inhibition of LPS-induced production of inflammatory cytokines by HSP70 involves inactivation of the NF-kappaB pathway but not the МАРК pathways. Shock. 2006; 26(3): 277-84.

139. Schlesinger M.J., Ashburner M., Tissieres A. Heat shock from bacteria to man. Cold Spring Harbor Laboratory. 1982

140. Schroder J.M., Persoon N.L.,Christopher E. Lipopolysacharide-stimulated human monocytes secrete apart from neutrophil-activating peptide-l/interleukin-8, a second neutrophil-activating protein. J. Exp. Med. 1990; 171: 1091-1100.

141. Shimazu R, Akashi S, Ogata H, Nagai Y, Fukudome K, Miyake K, Kimoto M. MD-2, a molecule that confers lipopolysaccharide responsiveness on Toll-like receptor 4. J Exp Med. 1999; 189(11): 1777-82.

142. Sriram M, Osipiuk J, Freeman B, Morimoto R, Joachimiak A. Human Hsp70 molecular chaperone binds two calcium ions within the ATPase domain. Structure. 1997; 5(3): 403-14.

143. Solomkin JS. Antibiotic resistance in postoperative infections. Crit Care Med. 2001; 29(4): 97-99.

144. Sriskandan S, Cohen J. Gram-positive sepsis. Mechanisms and differences from gram-negative sepsis. Infect Dis Clin North Am. 1999; 13(2): 397-412.

145. Sudlow G, Birkett DJ, Wade DN. The characterization of two specific drug binding sites on human serum albumin. Mol Pharmacol. 1975; 11: 824-32.

146. Takeuchi O, Akira S. Toll-like receptors; their physiological role and signal transduction system Int Immunopharmacol. 2001; 1(4): 625-35.

147. Takeuchi O, Hoshino K, Kawai T, Sanjo H, Takada H, Ogawa T, Takeda K, Akira S. Differential roles of TLR2 and TLR4 in recognition of gram-negative and gram-positive bacterial cell wall components. Immunity. 1999; 11(4): 443-51.

148. Tavaria M, Gabriele T, Kola I, Anderson RL. A hitchhiker's guide to the human Hsp70 family. Cell Stress Chaperones. 1996; 1(1): 23-8.

149. Terry DF, McCormick M, Andersen S, Pennington J, Schoenhofen E, Palaima E, Bausero M, Ogawa K, Perls TT, Asea A. Cardiovascular disease delay in centenarian offspring: role of heat shock proteins. Ann N Y Acad Sci. 2004; 1019: 502-5.

150. Tesh VL, Vukajlovich SW, Morrison DC. Endotoxin interactions with serum proteins relationship to biological activity. Prog Clin Biol Res. 1988; 272: 47-62.

151. Tissieres A, Mitchell HK, Tracy UM. Protein synthesis in salivary glands of Drosophila melanogaster: relation to chromosome puffs. J Mol Biol. 1974; 84(3): 389-98.

152. Tobias PS, Soldau K, Ulevitch RJ. Isolation of a lipopolysaccharide-binding acute phase reactant from rabbit serum. J Exp Med. 1986; 164(3): 777-93.

153. Traylor RJ, Pearl RG. Crystalloid versus colloid versus colloid: all colloids are not created equal. Anesth Analg 1996; 83: 209-12.

154. Tsang TC. New model for 70 kDa heat-shock proteins' potential mechanisms of function. FEBS Lett. 1993; 323(1-2): 1-3.

155. Ulevitch RJ, Tobias PS. Recognition of endotoxin by cells leading to transmembrane signaling. Curr Opin Immunol. 1994; 6(1): 125-30.

156. Vervolet MG, Thisj LG, Hack CE. Derangements of coagulation and fibrinolisis in critically ill patients with sepsis and sepsis shock. Semin Thromb Hemost. 1998; 24: 34-44.

157. Villar J, Maca-Meyer N, Pёrez-Mёndez L, Flores C. Bench-to-bedside review: understanding genetic predisposition to sepsis. Crit Care. 2004; 8(3): 180-9.

158. Vreugdenhil AC, Snoek AM, van 4 Veer C, Greve JW, Buurman WA. LPS-binding protein circulates in association with apoB-containing lipoproteins and enhances endotoxin-LDL/VLDL interaction. J Clin Invest. 2001; 107(2): 225-34.

159. Walsh R. C., Koukoulas I., Garnham A., Moseley P. L., Hargreaves M., Febbraio M. A. Exercise increases serum Hsp72 in humans. Cell Stress Chaperones. 2001; 6(4): 386-393.

160. Weil MH, Henning RJ, Puri VK. Colloid oncotic pressure: clinical significance. Crit Care Med. 1979; 7: 113-6.

161. Weinstein MP, Murphy JR, Reller LB, Lichtenstein KA. The clinical significance of positive blood cultures: a comprehensive analysis of 500 episodes of bacteremia and fungemia in adults. Rev Infect Dis. 1983; 5(1): 54-70.

162. Welch WJ, Feramisco JR. Nuclear and nucleolar localization of the 72,000-dalton heat shock protein in heat-shocked mammalian cells. J Biol Chem. 1984; 259(7): 4501-13.

163. Wenzel RP. The mortality of hospital-acquired bloodstream infections: need for a new vital statistic? Int. J. Epidemiol. 1988; 17: 225-227.

164. Whitham M, Fortes MB. Heat shock protein 72: release and biological significance during exercise. Front Biosci. 2008; 13: 1328-39.

165. Whitley D, Goldberg SP, Jordan WD. Heat shock proteins: a review of the molecular chaperones. J Vase Surg. 1999; 29(4): 748-51.

166. Wicken AJ, Knox KW. Lipoteichoic acids: a new class of bacterial antigen. Science. 1975; 187(4182): 1161-7.

167. Wiener RS, Wiener DC, Larson RJ. Benefits and risks of tight glucose control in critically ill adults: a meta-analysis. JAMA. 2008; 300(8): 933-44.

168. Wright BH, Corton JM, El-Nahas AM, Wood RF, Pockley AG. Elevated levels of circulating heat shock protein 70 (Hsp70) in peripheral and renal vascular disease. Heart Vessels. 2000; 15(1): 18-22.

169. Wright, S. D., Ramos, R. A., Tobias, P. S., Ulevitch, R. J. and Mathison, J. C. CD14, a receptor-for-complexes-of-lipopolysaccharide (LPS) And LPS-binding- — protein. Science. 1990; 249: 1431 -1433.

170. Wurfel MM., Hailman E., Wright SD. Soluble CD14 acts as a shuttle in the neutralization of lipopolysaccharide (LPS) by LPS-binding protein and reconstituted high density lipoprotein. J Exp Med. 1995; 181(5): 1743-54.

171. Xue-Lian Wang, Ying Li, Jin-Song Kuang, Yue Zhao, Pei Liu. Increased heat shock protein 70 expression in the pancreas of rats with endotoxic shock. World J Gastroenterol. 2006; 12(5): 780-783.

172. Yipp BG, Andonegui G, Howlett CJ, Robbins SM, Hartung T, Ho M, Kubes P. Profound differences in leukocyte-endothelial cell responses to lipopolysaccharide versus lipoteichoic acid. J Immunol. 2002; 168(9): 4650-8.

173. Yoshimura A, Lien E, Ingalls RR, Tuomanen E, Dziarski R, Golenbock D. Cutting edge: recognition of Gram-positive bacterial cell wall components by the innate immune system occurs via Toll-like receptor 2. J Immunol. 1999; 163(1): 1—5.

174. Yost HJ, Lindquist S. RNA splicing is interrupted by heat shock and is rescued by heat shock protein synthesis. Cell. 1986; 45(2): 185-93.

175. Zhao Y, Wang W, Qian L. Hsp70 may protect cardiomyocytes from stress-induced injury by inhibiting Fas-mediated apoptosis. Cell Stress Chaperones. 2007; 12(1): 83-95.