Выделение, свойства и строение мембран вакуолей растений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.17, кандидат биологических наук Кузеванов, Виктор Яковлевич

• Кузеванов, Виктор Яковлевич
• кандидат биологических наук
• 1983

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кузеванов, Виктор Яковлевич

ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Глава I. Вакуолярная мембрана и роль вакуоли в растительной клетке

1.1. История изучения вакуолярных мембран и вакуолей.

1.2. Современные представления о роли вакуолей и вакуолярных мембран в растении.

1.2.1. Цитологический аспект изучения вакуолей и вакуолярных мембран .Ю

1.2.2. Эволюционная роль вакуолей.

1.3. Методы выделения вакуолей и вакуолярных мембран.

1.4. Особенности состава тонопласта растений.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Выделение, свойства и строение мембран вакуолей растений»

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.45

Глава 2. Объекты и методы исследований.45

2.1. Растительный материал.45

2.2. Методики выделения, фракционирования и экспериментирования с вакуолями и вакуолярными мембранами.46

2.3. Методы анализов состава мембранных фракций.58

2.4. Методы электронной микроскопии мембран.63

2.5. Методика экспериментов по взаимодействию вакуолярных мембран с искусственной фосфолипидной мембраной.65

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.67

Глава 3. Подбор условий выделения и очистки вакуолей и вакуолярных мембран из клеток растений.67

3.1. Микрообъемный метод и подбор условий выделения вакуолей. 67

3.2. Макрообъемный метод выделения и очистки вакуолей 76

3.3. Общий подход к фракционированию изолированных вакуолей растений в градиенте плотности. 83

3.4. Получение изолированных вакуолярных мембран. 89

3.5. Общая схема получения препаративных количеств изолированных вакуолей и вакуолярных мембран. 94

Выводы. 100

Глава 4. Стабильность мембран изолированных вакуолей. 102

4.1. Влияние различных веществ на стабильность вакуолей 104

4.2. Влияние рН среды на стабильность вакуолей. 110

4.3. Влияние температуры на стабильность вакуолей. 112

4.4. Текучесть и эластичность тонопласта как факторы стабильности вакуолей. 114

Выводы. 121

Глава 5. Особенности состава изолированной вакуолярной мембраны. 123

5.1. Содержание белков, липидов и углеводов во фракциях изолированного тонопласта. 123

5.2. Экстракция белков из фракций вакуолярных мембран 127

5.3. Полипептидный состав белков изолированной вакуолярной мембраны. 130

5.4. Обнаружение углеводных рецепторов лектинов на поверхности изолированных вакуолей. 132

Выводы .144

Глава 6. Ультраструктурные особенности изолированных вакуолярных мембран. 146

Выводы . 153

Глава 7. Взаимодействие изолированных вакуолей и везикул тонопласта с искусственной фосфолипидной мембраной.155

Выводы .159

ОБЩЕЕ ОБСУДЦЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.160

ШВ0.ПД.173

ЛИТЕРАТУРА.176

ПОЛОЖЕНИЕ.196

ВВЕДЕНИЕ

Исследование биологических мембран является одним из наиболее актуальных направлений современной биологии и занимает важное место в изучении жизнедеятельности клетки. Возрастание числа работ по этой тематике определяется необходимостью раскрытия структурной организации и функционирования биомембран, что в конечном итоге позволит целенаправленно воздействовать на них и управлять отдельными звеньями метаболизма. Если для клеток животных и микроорганизмов достигнуты заметные успехи в этом важном и быстро развивающемся направлении, то мембраны растений, и в частности мембраны органелл, изучены в значительно меньшей степени и нуждаются в систематических и глубоких исследованиях.

Например, такие органеллы как центральные вакуоли, состоящие из вакуолярного сока и вакуолярной мембраны (тонопласта), определяют специфику растительных клеток и не встречаются у организмов не относящихся к растениям. Занимая до 90% и более от объема клетки, большие центральные вакуоли играют особую роль в структурной и функциональной организации растительного организма, так как они активно участвуют во внутриклеточном перераспределении веществ, а также выполняют функции лизосом (Саляев,1969; Matile, 1975).

Актуальность исследования вакуолей заключается в том, что в них аккумулируются большие количества запасных веществ и других метаболитов, составляющих пищевую и лекарственную ценность растений (сахара, аминокислоты, органические кислоты, витамины, белки и др.) (Курсанов,197б). При отложении веществ в запас вакуоляр-ная мембрана выступает в качестве конечного барьера, регулирующего процессы накопления и удерживания питательных веществ в запасающих органах растений.

В перспективе,изучение вакуолей и вакуолярных мембран должно помочь выяснить механизмы перераспределения биологически важных веществ в клетках с целью нахождения путей управления их накоплением в запасающих органах растений.

К моменту начала выполнения настоящей работы, а в значительной степени вплоть до 1981 г., вакуоли и вакуолярные мембраны растений были мало изучены из-за целого ряда трудностей, наиболее существенными из которых являлись недостаточная разработанность методических подходов, позволяющих их вццелять из клеток в количествах, достаточных для анализов, а также неустойчивостью мембран вакуолей в изолированном состоянии. Поэтому перед нами на первом месте стояли задачи разработки методов вццеления вакуолярных мембран, отработки технологии получения их препаративных количеств, выяснение условий стабилизации мембран, определение их химического состава, строения и свойств в связи с функционированием вакуолей как основных запасающих и литических компартментов клетки.

Работа выполнена в лаборатории физиологии растительной клетки Сибирского института физиологии и биохимии растений СО АН СССР в период с 1976 г. по 1982 г. в соответствии с планом научно-технических работ по темам: "Изучение строения и функций мембран растений" - № гос.регистрации 77016799; "Изучение химического состава, строения и функциональных особенностей мембран растений" - № гос.регистрации 0182.9.050479 по проблеме 0.74.05 "Разработать новые направления исследований генетического аппарата, биополимеров и структур клетки, осуществляющих важнейшие проявления жизнедеятельности, и внедрить достижения молекулярной биологии и генетики в народное хозяйство"(задание 07.HI).

Автор выражает искреннюю благодарность Р.К.Саляеву за постоянное внимание и поддержку, а особенно, за неоценимую помощь в процессе поисков решения многих организационных и научных проблем. Автор благодарит также всех сотрудников лаборатории физиологии растительной клетки, лаборатории биохимии белка и группы физических методов, исследований СИФИБР СО АН СССР, участвовавших во внедрении разработок автора и коллективный труд которых при выделении препаративных количеств вакуолей путем переработки нескольких центнеров растительного материала позволил начать комплексные исследования свойств, структуры, состава и функций вакуолярных мембран растений.

Приятный долг - сердечно поблагодарить за многостороннюю помощь Н.В.Озолину, С.Б.Хаптагаева, В.Н.Копытчук, Б.Б.Каткова и A.M. Корзуна, совместная работа с которыми имеет для автора большую ценность.

Автор весьма благодарен В.К.Войникову, Д.Н.Островскому, Г.Н. Берестовскому, В.А.Ненашеву, Э.И.Выскребенцевой, И.Л.Семенову и С.П.Макаренко за критическое обсуждение полученных результатов и полезные советы.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Цитология», Кузеванов, Виктор Яковлевич

вывода

1. Предложены два способа механического выделения вакуолей - микрообъемный(ручной) и макрообъемный(с помощью специального аппарата), - основанные на разрезании растительных тканей в растворах, содержащих KCI в качестве главного осмотического компонента, и подходящих для быстрого получения небольших или препаративных количеств вакуолей из различных растений.

2. Изучены факторы, влияющие на выход вакуолей и подобраны условия, повышающие эффективность выделения чистых вакуолей: использование высоких осмотических концентраций KCI, сокращение времени плазмолиза клеток, использование хелатирующих агентов, применение щелочных буферных растворов, выделение при пониженной температуре.

3. Обоснован принцип расчета плавучей плотности изолированных вакуолей по удельной плотности и осмотическому давлению сока, выжатого из клеток. Показано, что предложенный способ расчета позволяет без длительного и трудоемкого перебора вариантов составлять прописи ступенчатых градиентов плотности, обеспечивающие фракционирование препаративных количеств очищенных вакуолей из сочных запасающих органов растений.

4. Разработана технология получения препаративных количеств очищенных фракций вакуолей и вакуолярных мембран из запасающей паренхимы корнеплода столовой свеклы, позволяющая с помощью методов дифференциального центрифугирования и центрифугирования Q в градиенте плотности получать до 10 вакуолей за один цикл выделения и накапливать препаративные количества очищенных фракций вакуолярных мембран (до 200 мг сухого препарата).

5. Установлено, что устойчивость изолированных вакуолей обусловлена способностью противостоять повреждающим воздействиям за счет высокой эластичности и текучести(жидкостности) тонопласта, а стабильность вакуолей определяется условиями среды, способствующими сохранению динамичной структуры их мембран. Изолированные вакуоли наиболее стабильны при температуре 15-22° в присутствии восстановителей и белков при рН 7,3-7,7 , что близко соответствует условиям в цитоплазме, оптимальным для функционирования тонопласта в живой клетке. Найдены условия, при которых период полураспада вакуолей достигает 7-10 ч, что позволяет проводить с ними длительные эксперименты.

6. Установлено, что для изолированных вакуолярных мембран характерно повышенное содержание липидных компонентов, а среди белков, составляющих около 21% от сухого веса мембраны, преобладают интегральные белки прочно связанные с мембраной, пронизывающие липидный матрикс и, предположительно, формирующие элементы системы транспорта веществ.

7. На наружной (цитоплазматической) поверхности тонопласта обнаружены углеводные рецепторы, обусловливающие образование контактов и слияние мембран вакуолей в присутствии лектинов. Обосновано предположение, что углеводные рецепторы на тонопласте могут участвовать в процессах мембранного узнавания при функционировании вакуолей как литических компартментов клетки.

8. Двумя независимыми методами показана асимметричность строения тонопласта, заключающаяся в различной электронной плотности наружного и внутреннего слоев мембраны на тонких срезах и в разной концентрации внутримембранных частиц на цитоплазматической и вакуолярной сторонах мембраны при криоскалыва-нии. Установлено, что значительная часть внутримембранных частиц пронизывает мембрану. Высокие концентрации внутримембранных частиц в тонопласте, занимающих около 23,5% от общей площади мембраны, свидетельствуют о высокой функциональной нагрузке тонопласта.

9. Установлено, что вакуолярные мембраны способны к взаимодействию с искусственной фосфолипидной мембраной (БЛМ), при котором происходит возрастание электропроводности БЛМ и зафиксировано функционирование трансмембранных ионных каналов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кузеванов, Виктор Яковлевич, 1983 год

1. Атлас ультраструктуры растительных клеток/ред.Козубов Г.М., Данилова М.Ф. Петрозаводск,1972. - 295 с.

2. Бабунашвили И.Н.,3ильберштейн А.Я.,Ненашев В.А. Анализ взаимодействия липосом с плоскими бислойными липидными мембранами методом блокирования ионофора. Докл.АН СССР,1981, т.259, № 5, с.1243-1246.

3. Белицер Н.В. Автолитические процессы в клетках высших растений. II. Центральная вакуоль как автофагическая вакуоль растительной клетки. Цитология, 1972, т.14, №11, с.1309-1313.

4. Белов А.П.,Давидова Е.Г. ,Рачинский В.В^.^деление вакуолей из дрожжей Candida tropicalis. Микробиология,т!45,№5,с.852-858.

5. Беркинблит М.Б.,Божкова В.П.,Бойцова Л.Ю. и др. Высокопроницаемые контактные мембраны. М.:Наука,I981. - 464 с.

6. Боровягин В.Л. Ультраструктурная организация мембран:факты, гипотезы, модели. Тез.доклЛ Всесоюзного биофизического съезда, Москва,1982, с.42.

7. Вернадский В.И. Избранные труды по истории науки. М.:Наука, 1981. - 359 с.

8. Гродзинский A.M.,Гродзинский Д.М. Краткий справочник по физиологии растений. Киев:Наукова думка,1973. - 591 с.

9. Гусев Н.А. Некоторые методы исследования водного режима растений. Ленинград,I960. - 61 с.

10. Данжар П. Цитология растений и общая цитология. М.:ИЛ, 1950, с.519.

11. Заалишвили Э.А. Исследование синаптических мембранных белков. Изв.АН ГрузССР,сер.биол.наук,1976,т.2,№4,с.329-336.

12. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. М.: Высшая школа,1974. - 214 с.

13. Ивенс И.,Скалак Р. Механика и термодинамика биологических мембран. М.:Мир,1982. - 304 с.

14. Ивков В.Г.,Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. М.:Наука,1982. - 224 с.

15. Кларксон Д. Транспорт ионов и структура растительной клетки.- М.:Мир,1978. 368 с.

16. Конев С.В.,Волотовекий И.Д. Структурные перестройки биологических мембран. В кн.:Биомембраны. Рига:3инатне,1977,с.42-76.

17. Корзун A.M.,Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я. Электрические параметры изолированного тонопласта клеток корнеплода Beta vulgaris L.- Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,1982,с.22-25.

18. Котык А.,Яначек К. Мембранный транспорт. М.:Мир,1980.- 341 с.

19. Красавина М.С.,Бурмистрова Н.А.,Соколова С.В. Распределение катионов в различных тканях черешка сахарной свеклы. Тез.докл. III Всесоюзн.конфер."Транспорт ассимилятов в растениях и проблема сахаронакопления".Фрунзе:Илим,1983, с.103.

20. Красавцев О.А. Физиология закаливания растений отрицательными температурами. Автореф.дис. . докт.биол.наук. - М.,1974.-44с.

21. Кругляков П.,Ровин М. Физико-химия черных углеводородных пленок. М.:Наука,1978. - 183 с.

22. Кузеванов В.Я.,Саляев Р.К. ТУрбидиметрический метод определения агглютинации клеточных структур. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,I981,с.12-15.

23. Кузеванов В.Я.,Катков Б.Б.,Кошкина С.В.,Саляев Р.К. Влияние различных веществ на стабильность изолированных вакуолей растительных клеток. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,1983а, с.12-15.

24. Кузеванов В.Я.,Катков Б.Б.,Кошкина С.В.,Саляев Р.К. Влияние температуры и рН среды на стабильность изолированных вакуолейрастительных клеток. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,19836,с.22-25.

25. Кук Дж. Методы анализа углеводов мембран. В кн.:Биохимическое исследование мембран.М.:Мир,1979, с.254-312.

26. Курсанов А.Л. Транспорт ассимилятов в растениях. М.:Наука, 1976. - 646 с.

27. Ладыженская Э.П.,Кадыржанова Д.К.,Любимова Н.В. и др. Электро-форетическое исследование белков плазмалеммы клубней картофеля.- Биохимия,I980,т.45,№9,с.I619-1629.

28. Луцик М.Д.,Панасюк Е.Н.,Луцик А.Д. Лектины. Львов:Вища школа, 1981. - 155 с.

29. Макаренко С.П.,Горшкова 3.А.,Кузеванов В.Я.,Каменкова Л.Д.,Саляев Р.К. Изучение липидов вакуолярных мембран методами ИК-спект-роскопии. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,1981,ч.2, с.44-47.

30. Маковейчук А.Ю.,Макеев A.M.,Микитюк О.Д.,Чкаников Д.И. О локализации 2,4-Д в вакуолях, изолированных из протопластов ячменя.- Цитология,I982,т.24,№5,с.612-614.

31. Мэдди Э.,Данн М. Солюбилизация мембран. В кн.:Биохимическое исследование мембран. М.:Мир,1979,с.160-175.

32. Ненашев В.А. Моделирование взаимодействия клеточных мембран на искусственных фосфолипидных мембранах.-Автореф.дис. . канд.биол. наук. Пущино-на-0ке,1972. - 27 с.

33. Окороков Л.А. Транспорт и регуляция концентраций неорганических ионов у грибов.-Автореф.дис. . докт.биол.наук. Пущино,1983.- 37 с.

34. Павлинова О.А. Роль сахарозосинтетазы в превращении и аккумуляции сахарозы в корнеплоде сахарной свеклы. В кн.:Современные проблемы физиологии и биохимии сахарной свеклы. Киев:Наукова думка, 1981, с.81-86.

35. Панин Л.Е. Биохимические механизмы стресса. М.:Наука,1983, с.191.

36. Парамонова Н.В. Ультраструктурные основы межорганоидного и межклеточного обмена в растении.-Автореф.дис. . канд.биол.наук. -М.,1982. 25 с.

37. Потапова JI.Д. ,Яглова Л.Г. ,Синещеков О.А. Авторегуляция рН вакуолярного сока клеток Nitellopsis obtusa. Физиол.растений, 1980,т.27,в.4,с.800-805.

38. Разин Ш.,Роттем Ш. Методы вццеления мембран микоплазм. В кн. :Биохимическое исследование мембран.М.:Мир,1979,с.9-28.

39. Саляев Р.К. Поглощение веществ растительной клеткой. М.: Наука,1969. - 206 с.

40. Саляев Р.К.,Козаренко Т.Д.,0золина Н.В.,Кузеванов В.Я. Аминокислотный состав белков изолированной вакуолярной мембраны. -Физиол.растений,1983,т.30,в.3,с.487-491.

41. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я. Исследования эластичности изолированной вакуолярной мембраны. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,1979, с.3-4.

42. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я. Выявление рецепторов лектинов на поверхности изолированных вакуолей. Опер.информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск,I981,с.8-12.

43. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я. Рецепторы лектинов на тонопласте и агглютинация изолированных вакуолей. Физиол.растений,1984,т.31, в.1, с.73-81.

44. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я.,Катков Б.Б. Общий подход к фракционированию изолированных вакуолей в градиенте плотности. Опер, информ.матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР, Иркутск,1983, с.5-9.

45. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я., Корзун A.M.,Ненашев В. А. Крестовский Г.Н. Взаимодействие изолированных вакуолярных мембран растений с искусственной фосфолипидной мембраной. Докл.АН СССР, I983,т.270,№1,с.247-250.

46. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я.Макаренко С.П. Обнаружение углеводородов во фракциях изолированных вакуолярных мембран. Опер.информ. матер.Сиб.ин-та физиологии и биохимии растений СО АН СССР,Иркутск, 1983, с.10-11.

47. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я.,0золина Н.В.,Каменкова Л.Д.,Пузанова Н.А. Содержание липидов, белков и углеводов в мембране изолированных вакуолей красной свеклы. Физиол.растений,1982,т.29,в.5, с.933-940.

48. Саляев Р.К.,Кузеванов В.Я.,Хаптагаев С.Б.,Копытчук В.Н. Вьще-ление и очистка вакуолей и вакуолярных мембран из клеток растений.- Физиол.растений,1981,т.28,в.6,с.1295-1305.

49. Саляев Р.К.,0золина Н.В.,Кузеванов В.Я. Особенности белкового и полипептидного состава изолированного тонопласта красной столовой свеклы. Физиол.растений,1983,т.30,в.2,с.241-245.

50. Саляев Р.К.,Романенко А.С. Эндоцитоз. Н.:Наука,1979.- 112 с.

51. Саляев Р.К.,Саляева М.П.,Буряков Б.М. Некоторые особенности ультраструктуры пограничных мембран растительной клетки. В кн.: Механизмы поглощения веществ растительной клеткой.Иркутск,1971, с.31-34.

52. Саляев Р.К.,Хаптагаев С.Б.,Кузеванов В.Я.,Копытчук В.Н. Об ультраструктуре изолированных вакуолярных мембран. Цитология, 1983,т.25,№6,с.643-648.

53. Саляев Р.К.,Чернышов В.И. Особенности ультраструктуры и формирования поверхностных мембран у клеток растений. В кн.:Структура и функции биологических мембран.М.:Наука,1975,с.108-120.

54. Сафонов В.И.,Сафонова М.П. Исследование белков и ферментов растений методом электрофореза в полиакриламидном геле. В кн.биохимические методы в физиологии растений.М.:Наука,1971,с.II3-I36.

55. Свиридов Б.Е.,Левин С.В.,Янусина А.Л и др. Слабосвязанные белки и ультраструктура мембран теней эритроцитов. Цитология,1976, т.18,№2,с.178-182.

56. Симакова И.М. Протеолиз как метод исследования биологических мембран. В кн.'.Мембраны.Рига:Зинатне, 1977,с.77-90.

57. Стом Д.И. Перемещение фенолов через тонопласт и его физиологическое значение. Успехи соврем.биологии,1978,т.87,в.I,с.78-92.

58. Стом Д.И. ,Апарцин М.С. Локализация фенолов в Nitella spf. -Цитология,1976,т.18,М,Ic.100-102.

59. Туркина М.В.,Соколова С.В. Методы определения моносахаридов и олигосахаридов. В кн.:Биохимические методы в физиологии растений. М.:Наука,1971,с.7-34.

60. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих. М.:Мир,1975.- 324 с.

61. Фейнман P.,Лейтон Р.,Сэндс М. Фейнмановские лекции по физике, т.7.Физика сплошных сред. М.:Мир,1977, с.231.

62. Фонбрюн П. Методы микроманипуляции. М.:Ш1,1951. - 168 с.

63. Фрей-Висслинг А. Сравнительная органеллография цитоплазмы. -М.:Мир,1976, -144с.

64. Фрей-Висслинг А.,Мюлеталер К. Ультраструктура растительной клетки. М.:ИЛ,1968. - 453 с.

65. Холодова В.П. Локализация сахарозы в тканях запасающего корня сахарной свеклы. Физиол.растений,1967,т.14,в.3,с.444-450.

66. Холодова В.П. Компартментация Сахаров в тканях растений. -В кн.:Рост растений.Первичные механизмы. М.:Наука,1978,с.253-277.

67. Шилов А.Г. Общие принципы стереологии срезов. В кн.Применение стереологических методов в цитологии.Новосибирск,1974,с.11-17.

68. Штруггер 3. Практикум по физиологии растительных клеток и тканей. М.:ИЛ,1953. - 278 с.

69. Юрин В.М.,Гончарик М.Н.,Галактионов С.Г. Перенос ионов через мембраны растительных клеток. Минск:Наука и техника,1977.-160 с.

70. Amar A.,Rottem S. ,Razin S. Characterization of the Mycoplasma membrane proteins.IV.Disposition of proteins in the membrane. -Biochim.Biophys.Acta,1974,V.352,No 2,p.228-244.

71. Bancher E.,Holzl J. Beobachtungen zur beteiligung des tono-plasten an der protoplasmastromung. Protoplasma,l988,v.66, No 3,p.481-483.

72. Bank 0. Zur tonoplasten-frage.I.Die natur der vakuolenhaut. II.Die reversibilitat der valmolehform in embryonalen zellen. Protoplasma,1935»v.23,No 2,p.239-249.

73. Bligh E.G.,Dyer W.S.T. A rapid method of total lipid extraction and purification. Canad.J.Biochem.Physiol.,1959,v.37» No 5,P.911-917.

74. Boiler T. Enzymatic equipment of plant vacuoles. Physio!, veg.,1982,v.20,No 2,p.247-257.

75. Boiler T.,Durr M.,Wiemken A. Characterization of a specific transport system for arginine in isolated yeast vacuoles. Eur. J.Biochem.,1975,v.54,No 1,p.81-91.

76. Boiler T.,Durr M.,Wiemken A. Asymmetric distribution of Con-canavglin A binding sites on yeast plasmalemma and.vacuolar membrane. Arch.Microbiol.,1976,v.109,No 1,p.115-118.

77. Boiler T.,Kende H". HydrolytiQ enzymes, in the central vacuole of plant cells. Plant Physiol,,1979,v.63,No 6,p.1123-1122.

78. Boudet A.M.,Canut H.,Alibert G. Isolation and characterization of vacuoles from.Melilotus alba mesophyll. Plant Physiol.,1981, v.68,No 6,p.1354-1358.

79. Branton D.,Bullivant S,,Gilula N. et al. Freeze-etching nomenclature. Science,1975»v.190,p.54-5&.

80. Branton Df,Deamer D. Membrane structure. Vienna:Springer--Verlag,l972.

81. Briskin D.P.,Leonard R.T. Isolation of tonoplast vesicles isolated from tobacco protoplasts. Plant Physiol.,1980,v.66,No 4, p.684-687.

82. Buser C.,Matile Ph. Malic acid in vacuoles from Bryophyllum leaf cells. Z.Pflanzenphysiol.,1977,v.82,No 5,p.462-466.

83. Buser-Suter C.,Wiemken A.,Matile Ph. A malic acid permease in isolated vacuoles of Crassulacean.acid metabolism plant. Plant Physiol.,1982,v.69,No 2,p.456-459.

84. Butcher H.,Wagner G.J. ,Siegelman H.W. Localization of acid hydrolases in protoplasts. Examination of the proposed lysosomal function of,the mature vacuoles. Plant Physiol.,1977,v.59» No 6, p.1098-1103.

85. Buvat R;. .Le reticulum endoplasmatique des cellules vegetales. Ber.Dtsch.Bot.Ges.,l96l,v.74,No 3,p.261-267.

86. Buvat R. Electron microscopy of plant protoplasm. Intern. Rev.Cytol.,1963,v.14,p.41-155.

87. Buvat R. Origin and continuity of cell vacuoles. InjResults and problems in cell differentiation.Berlin-New York:Springer-Verlag,1971,v.2,p.127-157.

88. Buvat R.,Robert G. Vacuole formation in the actively.growing root meristem of barley (Hordeum sativum). Amer.J.Bot.,1979» v.66,No 10,p.1219-1237.

89. Cecich R.A. Development of vacuoles and lipid bodies in apical meristems of Pinus banksiana. Amer.J.Bot.,1979,v.66,No 8, p.895-901.

90. Chafe S.C.,Durzan D.J, Tannin inclusions in cell suspension cultures of white spruce. Planta,1973»v.113,No 2,р.251-262!.

91. Chambers R. ,Hofler К. Micrurgicjal studies on the .tonoplast of Allium сера. Protoplasma,l931,v.12,No 3,p.338-355.

92. Cleland R.E. The control of cell enlargement. In:Integration of activity in the higher plant.Cambridge:University Press,1977, p.101-115.

93. Cocking E«C. A method for the isolation Qf plant,protoplasts and vacuoles. Nature,1960,v*187,No 4741,p.962-963'.

94. Coster H.G.L.,Zimmermann IP. Transduction of turgor.pressure by cell membrane compression. Z.Naturforsch.,1976,v.31c,No 3, p.461-463'.

95. Costerton J.W.F. ,MacRobbie E.A.C. Ultrastructure.of Nitella translucens in relation to ion transport. J.Exper.Bot.,1970, v.21,No 68,p.535-542.

96. Cram W.J. Negative feedback regulation of transport in cells. The maintenance of turgor, volume and nutrient supply. In: Transport,in plants.II,part A:Cells.Berlin:Springer-Verlag,1977» p.284-316.

97. Dainty J. The structure.and possible function of the vacuole. In:Plant cell organelles. New York:Acad.Press,1968,p.40-46.

98. Doi,E.,0htsuru C.,Matoba T. Lysosomal nature of plant vacuoles.II.Acid hydrolases in the central.vacuole,of internQdal.cells of Charophyta. Plant & Cell Physiol*; ,1975»v .16,No 4,p.581-588.

99. Doll S.,Hauer R. Determination of the membrane potential of vacuoles isolated from red-beet storage tissue. Planta,1981, v.152,No 2,p.153-158.

100. Doll S.,Rodier F.,Willenbrink J. Accumulation of sucrose invacuoles isolated from red beet tissue, Planta,1979,v.144,No5,p. 407-411:,

101. Doll . S.,Willenbrink J, Characteristics of the sucrose uptake system of vacuoles isolated from red beet tissue, Planta,1979, v.147,No 2, p", 159-162.

102. Durr М,,В<?11ег Т., Wiemken A', Polybase induced lysis of .yeast spheroplasts. Arch.Microbior. ,1975»v.105,No 2,p.319-327.

103. Durr M.,Boiler Т.,Wiemken A'. Action of proteinases on the ar-ginine.transport of purified vacuoles from Saccharomyces cere-, visiae. Biochem,Biophys.Res,Communs,1976,v,73»No 1,p,193-199»

104. Durr M.,Urech K.,Boiler T. et al. Sequestration of arginine by polyphosphate.in vacuoles of.yeast (Saccharomyces cerevisiae)1.- Arch.Microbiol., 1979,v. 121 ,No.2,p.169-175f.

105. Esau K.,Cheadle V. An evaluation of studies on ultrastructure of tonoplast in.sieve elements, Proc.Natl,Acad.Sci,USA,1962, v,48,No 1,p.1-8.

106. Fineras B.A, Organization of the tonoplast in frozen-etched root tips', J.Ultrastruct.Res, ,1970,v.33,No 4,p.574-586.

107. Frederick S.E,,Nies Bk. ,Gruber P.J. An ultrastructural search, for lectin-binding sites oo surfaces of spinach leaf organelles,- Planta,1981,v.152,No 2,p.145-152C

108. Furusawa M, Cellular microinjection by cell fusion:technique and application in biology and medicine. Intern.Rev.Cytol., 1980,v.62,p.29-67.

109. Garcia-Martinez J.L.,0hlrogge L.B.,Rappaport L. Differential compartmentation of Gibberellin A^.and its metabolites in vacuoles of covepea.and barley leaves. Plant Physiol. ,1981 ,v .68, No 4,p.865-867.

110. Garfield E. Trends in biochemical literature. Trends in biochemical Sci.,december 1979,p.290-295.

111. Granstedt R.C!. ,Huffaker R.C. Identification of the leaf vacuole as a major nitrate storage pool. Plant Physiol.,1982,v.70, No 2,p.410-413.

112. Gregory D.W.,Cocking E.С. Studies on isolated^protoplasts and vacuoles.I.General properties. J.Exper.Bot.,1986,v.17,No 50, p.57-67.

113. Grob K.,Matile Ph. Vacuolar location of glucosinolates in horseradish root cells. Plant Sci.Lett.,1979,v.14,No 4,p.327--336.

114. Grob K.,Matile Ph. Compartmentation of ascorbic acid in vacuoles of horseradish root cells. Z.Pflanzenphysiol.,1980,v.98, No 3,P*235-243.

115. Gutknecht J.,Hastings D.E.,Bisson M.A. Ion transport and turgor pressure regulation in giant algal cells. In;Hembrane transport in biology.BerliniSpringer-Verlag,1980,v.3»p.125-174.

116. Guy M.,Reinhold L.,Michaeli D. Direct.evidence for a sugar transport mechanism in isolated vacuoles. Plant Physiol.,1979» v.64,No 1,p. 61-64.

117. Gyenes M.,Andrianov V.K. ,Bulychev A.A.,Kurella G.A. Light-, rinduced H+-accumulation in the vacuole of Nitellopsis obtusa. J.Exper .Bot., 1978,v.29,No 112,p.1185-1196'.

118. Hastings D.F.,Gutknecht J. Ionic relations and the regulatir on of turgor pressure in the marine alga, Valonia macrophysa. -J.Membr.Biol.,1976,v.28,No 3,p.263-275.

119. Heck U.,Martinoia E.,Matile Ph. Subcellular localization ofacid proteinase in barley mesophyll protoplasts. Planta,1981, v.151,No 2,p.198-200.

120. Hope А.В.,Walker N.A. The physiology of giant algal cells. -Aberdeen:University Press,1975. 202 p.

121. Hofler.K. Zur tonoplastenfrage. Protoplasma,1932»v.15»No 4,p.462-477.

122. Jonsson L.M.V. ,Donker-Koopman W.E. ,Uitslager P. ,Schram A.W. Subcellular localization Qf.anthocyanin methyltransferase in flowes of Petunia hybrida. Plant Physiol.,1982,v.72,No 2, p.287-290.

123. Kakinuma X. ,0hsumi Y.,Anraku Y. Properties of ^-translocating adenosine triphosphatase in vacuolar.membranes of Saccharomyces cerevisiae. J.Biol.Chem.,1981,v.256,No 21,p.10859--10863.

124. Kanno C.,Yamauchi K.,Jijima K. Solubilization, of fat globule membrane of bovine milk.by nonionic detergents. Agr.and Biol. Chem.,1978,v.42,No 12,p.2299-2307.

125. Kenyon W.H.,Kringstad R.,Black C. Duirnal changes in the malic acid content of vacuoles isolated from leaves of the Cras-sulacean acid metabolism.plant Sedum telephium. 5EBS Lett., 1978,v.94,No 2,p.281-283.

126. Khera P.K.,Tilney-Bassett R.A.E. The origin.of vacuoles in young embryos of Pelargonium x Hortorum bailey'. Planta,1976, v.130,No 3,p.333-338.

127. Komor E.,Thom M.,Maretzki A. Sugar transport.by sugarcane vacuoles. Physiol.Veg.,1982,v.20,No 2,p.277-287.

128. Kramer R.,Корр.,Niedermeyer W.,Fuhrmann G.F. Comparative studies of the structure and composition.of the plasmalemma.and the tonoplast of Saccharomyces cerevisiae. Biochim.Biophys.Acta, 1978,v.507,No 3,p.369-380.

129. MacRobbie,E.А.С. The active transport of ions in plant cells. Quater.Rev.Biophys.,1970,v.3,No 3,p.231-294.

130. MacRobbie E.A.C. Vacuoles: the framework. In:Plant organel-es.Chichester:Ellis Horwood Ltd.,1979,p.6l-68.

131. Mahlberg P.G. Futher observation on the.phenomenon of secondary vacuQlation in living cells. Amer.J.Bot.,1972,v.59,No 2, p.172-179.

132. Mahlberg P.G.,Turner E.R. ,Walkinshaw C. ,Venketeswaran S. Ul-trastructural studies pn,plasma membrane related secondary.vacuoles in cultured cells. Amer.J.Bot.,1974,v.61 ,N0 6,p.730-738.

133. Marinos N. Vacuolation in plant cells. J.Ultrastruct.Res., 1963,v.9,No 2,p.177-185^

134. Martinoia E.,Heck U.,Wiemken A.Vacuoles as storage compartments . for nitrate in barley leaves1. Nature, 1981,v.289,No 5795» p.292-294.

135. Marty F. Cytochemical studies on GERL, provacuoles, and vacuoles in root meristematic cells, of Euphorbia. Proc.Natl.Acad. Sci.USA,1978,v.75,N0 2,p.852-856.

136. Marty F,,Branton D, Analytical characterization of beetroot vacuole membrane. J.Cell Biol.,1980,v.87,No 1,p.72-83.

137. Marty F.,Branton D.,Leigh R, Plant vacuoles.- In:The Biochemistry of plants.New York:Acad.Press,1980,v.1,p.625-658.

138. Matile Ph.Lysosomes.of root.tip cells in corn seedlings. -Planta,1968,v.79>No 2,p.181-196.

139. Matile Ph. Vacuoles, lysosomes of Neurospora. Cytobiologie, 1971,v.3,No 3,p.324-330.

140. Matile Ph. The lytic compartment of plant cells. Wien-New York:Springer-Verlag,1975» - 183 p.

141. Matile Ph. Vacuoles. In: Plant Bio chemistry. New York-San Francisco-London: Acad.Press,1976,p.189-224.

142. Matile Ph.,Jans B.,Rickenbacher R. Vacuoles of Chelidonium latex: lysosomal properties and accumulation of alkaloids.

143. Biochem.Physiol.Pflanzen,1970,v.l6l,No 3,p.447-458.

144. Matile Ph.,Moor H. Vacuolation: origin and development of the lysosomal apparatus in root-tip cells. Planta,1968,v.80,No 2, p.159-175.

145. Motile Ph.,Wiemken A. The vacuole as the lysosome of the yeast cell. Arch.Microbiol.,1967,v.56,No 2,p.148-155.

146. Matile Ph.,Wiemken A. Interaction beetween the cytoplasm and vacuoles. In:Encyclopedia of plant physiology.New series.Ber-lin-Heidelberg-New York:Springer-Verlag,1976,v.3,P•255-287.

147. Mettler I.J.,Leonard R.T. Isolation and partial characterization of vacuoles from tobacco protoplasts. Plant Physiology, 1979,v.64,No 5,p.1114-1120.

148. Meyer Y. Isolation and culture of tobacco mesophyll protoplasts using a saline medium. Protoplasma,1974-,v.81 ,No 3, p.363-372.

149. Miller R. Voltage-gated cation conductance channel from fragmented sarcoplasmic reticulum: steady-state.electrical properties. J.Membr.Biol.,1978,V.40,No 1,p.1-24.

150. Montal M.,Darszon A.,Schindler H. Functional reassembly of membrane proteins in planar.lipid bilayers. Quater.Rev.Bio-phys.,1981,v.14,No 1,p.1-79.

151. Morre D.J.,Mollenhauer H.H. Interactions among cytoplasm, en-domembranes, and the eel surface. InEncyclopedia of plant physiology.New series,Berlin-Eeidelberg-New York:Springer-Verlag, 1976,v.3,p.288-344.

152. Moskowitz A.H.,Hrazdina G. Vacuolar content of fruit subepidermal, cells from Vitis species. Plant Physiol.,1981,v.68,No 5, p.686-692.

153. Mothes„K. Der tonoplast von Sphaeroplea. Planta,1933,v.21, No 4,p.486-510.

154. Muhlethaier K. Submikroskopische morphologie. Fortshr.Bot., 1960,v.22,p.49-54.

155. Nagy M. Studies on purine transport and on purine content in vacuoles isolated from Saccharomyces cerevisiae. Biochim.Bio-phys.Acta,1979,v.558,No 2,p.221-232.

156. Nakamura K.D. The isolation of vacuoles from Candida utilis'.- Prep.Biochem.,1973,v.3,No 3,p.353-563.

157. Nakamura K.D.,Schlerik F. Examination.of isolated yeast vacuoles for active transport. J.Bacterid. ,1974,v.118,No 2,p.314--316.

158. Niedermeyer W. The elasticity of the yeast cell tonoplast related to its ultrastructure and chemical composition.II.Chemical and cytochemical investigation. Cytobiologie,1976,v.13,No 3,p.380-393.

159. Niedermeyer W.,Parish G.R.,Moor H. The elasticity of the yeast cell tonoplast related to its ultrastructure and chemical composition. I. Induced swelling and shrinking; a freeze-etch membrane study. Cytobiologie,1976,v.13,No 3, p.364-379.

160. Nishimura M. pH in vacuoles,isolated from castor bean endosperm. Plant Physiol.,1982,v.70,No 6,p.742-744.

161. Nishimura M.,Beevers H. Hydrolases in.vacuoles.from castor bean endosperm. Plant Physiol.,1978,v.62,No 1,p.44-48.

162. Ochoa J.-L.,Sierra A.,Cordoba F. On the specificity and hy-drophobicity of lectins. In:Lectins.Biology,Biochemistry,Clinical biochemistry.Berlin-New York:Walter de Gruyter,1981,v.1, p.73-78.

163. Ohlrogge J.B.,Garcia-Martinez J.L.,Adams D.,Rappaport L. Uptake and subcellular compartmentation of Gibberellin A^ applied to leaves.of barley and cowpea. Plant Physiol.,1980,v.66,No 3, p.422-427.

164. Pahlich E.,Eerres R.,Yager H.J. Influence of water stress on the vacuole/extravacuole distribution of proline in protoplasts of Nicotiana rustica. Plant Physiol.,1983,^.72,No 2,p.590-591.

165. Parish G.R. Seasonal variation in the membrane structure of differentiating shoot cambial-zone cells demonstrated by freeze--etching. Cytobiologie,1974,v.9,No 1,p-131-143.

166. Pertoft H.,Laurent T.C.,Seloelid R. et al. The use of density gradients of Percoll for the separation of biological particles.- InReparation of cells and subcellular elements.Oxford-New York:Pergamon Press,1979,Р»67-72.

167. Piatelli M. The betalains: structure,biosynthesis, and chemical taxonomy. In:Biochemistry of plants.New York e.a.:Acad. Press,1981,v.7,Р'. 557-575.

168. Pickard W.F.,Puther observation.on cytoplasmic streaming in Chara braunii. Can.J.Bot.,1972,v.50,No 4,p.703-711.

169. Poux N. Nouvelles observation sur la nature et l1origine dela membrane vacuolaire des cellules vegetales. J.Microscopie,1962,' v.1,No 1,p.55-66.

170. Prat R.,Vian B.,Reis D.,Roland J.C. Evolution of internal pressure ,vacuplation and membrane flow during cell growth.in mung bean hypocotyl. Biol.Cellulaire,1977,v.28,No 3,p.269-280.

171. Pujarniscle S. Caractere lysosomal des lutoides du latex d'Hevea brasilensis. Physiol.Veg.,1968,v.6,No 1,p.27-46.

172. Quail P.H. Plant.cell fractionation. Ann.Rev.Plant Physiol., 1979»v.30,p.425-484.

173. Razin S.,Markowitz 0.,Hasin M.,Rottem S. The outer membrane of Proteus mirabilis.IV.Solubilization and fractionation of the outer and cytoplasmic membrane components. Biochim.Biophys.Acta,1976, v.433»No 2,p.240-251.

174. Reinhold L.,Guy M.,Michaeli D.,Rahat M. Tonoplast and plasma-lemma sugar transport compared in isolated protoplasts and isolated vacuoles. In:Plant membrane transport.Curr.Concet.Issues. Elsevier:North Holland Biomedical Press,1980,p.557-558.

175. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an elec-tronopaque stain in electron microscopy. J.Cell Biol.,1963, v.17,No 2, p.208-212.

176. Rickwood D. Separation of subcellular organelles in differentmedia. In:Centrifugation: a practical approach.London-Washing-ton:Inform.retr.Ltd.,1978,p.135-142.

177. Risueno M.C.,Sogo J.M.,Gimenez-Martin G.,Garcia M.I.R. Vacuolation,in the cytoplasm of plant cells. Cytologia,1970,v.35, No 4,p.609-621.

178. Roa R.L.,Pickard W.F. The vacuolar pH of Chara braunii. -J.Exper.Bot.,1976,v.27,No 100,p.853-858.

179. Roland J.C.,Lembi C.A.,Morre D.J. Phosphotungstic acid-chromic acid as a selective stain for plasma membranes of plant cells. Stain Technol.,1972,v.47,No 2,p.195-200.

180. Salyaev R.K. A method of fixation and embedding of liquid and fragile materials in.agar microcapsules. InsProc.IV Eur. Conf.Electron Microscopy.Roma,1968,v.2,p.37-38.

181. Saunders J.A. Investigation of vacuoles isolated from tobacco. I.Quantitation of nicotine. Plant Physiol.,1979,v.64,No 1, p.74-78.

182. Saunders J.A.,Conn E.E. Presence of the cyanogenic glucoside dhurrio in isolated vacuoles from Sorghum. Plant Physiol., 1978,v.61,No 1,p.134-157.

183. Schafener W.,Weissmann C. A rapid sensitive and specific method, for the.determination of protein in dilute solution. -Anal.Biochem.,1971,v.56,No 4,p.502-514.

184. Schlenk F.,Dainko J.L.,Svihla G. The accumulation and intracellular distribution of biological sulfonium compounds in yeast. Arch.Bioch.Biophys.,1970,v.140,No 2,p.228-236.

185. Schlenk F.,Dainko J.L.,Svihla G. Protein injury to the yeast cell membrane. Acta Fac.Med.Univer.Brunensis,1970b,v.37,No 1, p.25-31.

186. Schmidt R.,Poole R.J. Isolation of protoplasts and vacuoles from storage tissue of red beet. Plant Physiol.,1980, v.66,No 1,p.25-28.

187. Schotton D.M. Freeze-etch studies of membrane proteins: a review. Biochem.Soc.Trans.,1978,v.6,No 1,p.38-40.

188. Schwencke J. Characterization and integration of the yeast vacuole with cellular functions. Fhysiol.Veg.,1977,v.15,No 3, p.491-517.

189. Schwencke J.,de Robichon-Szulmajster H. The transport of S--adenosyl-L-methionine in isolated yeast vacuoles and sphero-plasts. Eur.J.Biochem.,1976,v.65,No 1,p.49-60.

190. Shepard D.V.,Moore K.G. Concanavalin.A-mediated agglutination of plant plastids. Planta,1978,v.138,No 1,p.35-39.

191. Simon EfW. Leakage from fruit cells in water. J.Exper.Bot., 1978,v.28,No 106,p.1147-1152;

192. Singer S.J. The proteins of.membranes. J.Colloid.and Interface Sci.,1977,v.58,No 3,P«452-459.

193. Singer S.G.,Nicolson G.L. The fluid mosaic model of.the. structure of cell membranes. Science,1972,v.175»No 4023,p.720-721.

194. Sjostrand F.S. The interpretation of pictures of freeze-frac-tured biological materials» J.Ultrastruct.Res. »1979,v.69,No 3, p.278-420.

195. Sleytr U.B. Fracture faces.in intact cells and.protoplasts of Bacillus stearothermophilus. Protoplasma,1970,v.7l»No 2»P«295--312.

196. Smitlj. F.A.,Raven J.A. Intracellular pH and its regulation. -Ann.Rev.Plant Physiol.,1979,v.30,p.289-211•

197. Steponkus P.Ii. ,Wiest S.C. Freeze-thaw induced lesions in. the plasma membrane. In:Low temperature stress in crop plants.New York: Ac ad. Press,1979 »P* 221-254.

198. Spallanzani L. Opuscoli di fisica animale e vegetabile.1776 (cited from Zirkle,1927)•

199. Spanswick R.M.,Miller A.G. Measurement of the cytoplasmic h pU in Nitella translucens. Plant Physiol.,1977,v.59»No 4, p.664-666.

200. Thorn M.,Maretzki A.,Komor E. Vacuoles from sugarcane suspension cultures.1.Isolation and partial.characterization. Plant Physiology,1982?v.69,No 6,p.1215-1219.

201. Thom M.,Komor E.,Maretzki A. Vacuoles from sugarcane suspension cultures.II.Characterization of sugar uptake. Plant Physiology, 1982b, v. 69, No 6,p.1220-1225.

202. Travis R.L.,Berkowitz R.L. Characterization of soybean plasma membrane during development.Free.sterols composition and ConA binding studies. Plant Physiol.,1980,v.65,No 5,p.871-879.

203. Waddel W.,Bates R'.G. Intracellular pH. Physiol .Rev. ,1969, v.49,p.285-229.

204. Wagner R.C. The effect of tannic acid on electron images ofcapillary endothelial cell membranes. J.Ultrastruct.Res.,1976, v.57,No 2,p.132-139.

205. Wagner G.J, Content and vacuo le/extravacuole distribution of neutral sugars,.free amino acids,.and anthocyanin in protoplasts.- Plant Physiol'. ,1979,v.64,No 1,p.88-93.

206. Wagner G.J. Vacuolar deposition of ascorbate-derived oxalic acid in barley. Plant Physiol.,1981?v.67,No 3,p.591-593.

207. Wagner G.J. Enzymic and protein character of tonoplast from Hippeastrum vacuoles. Plant Physiology,1981b,v.68,No 2,p.499--503.

208. Wagner G.J,,Mulready P.,Cutt J. Vacuole/extravacuole distribution of soluble protease in Hippeastrum petal and Triticum leaf protoplasts. Plant Physiol. ,1981,v.68,No 5,p.1081-1089'.

209. Wagner G.J.,Siegelman H.W, Large-scale isolation of intact vacuoles and isolation of chloroplasts from protoplasts of mature plant tissues. Science,1975,v.190,No 4221,p.1298-1299.

210. Walker R.R,,Leigh R.A. Characterization of a salt-stimulated ATPase activity associated with vacuoles isolated from storage roots of red beet (Beta vulgaris L.). Planta,1981,v.153,No 2, p.140-149.

211. Walker N'.A',,Smith F.A. Intracellular pH in Chara corallina measured by Ш0 distribution. Plant Sci.Lett. ,1975,v.4,No 1, p. 125-132'.

212. Walker-Simmons M.,Ryan C.A. Immunological identification of . proteinase inhibitors I.and II in,isolated tomato leaf vacuoles.- Plant Physiol,, 1977.60,No 1,p.61-63.

213. Walter H.,Stadelmann E'. The physiological prerequisites for the transition of autotropic plants from water to terrestrial life!, Bioscience,1968,v.18,No 17,p.694~701,

214. Waters Stephen P.,Noble E.R. ,Dalling M, J. Intracellular localization of peptide hydrolases in wheat (Triticum.aestivum L.) leaves. Plant Physiol.,1982,v.69,No 3,p.575-579.

215. Wiebe H.H. The.significance of plant vacuoles. Bioscience, 1978,v,28,No 65,p.327-331.

216. Wiemken A, Isolation of vacuoles from yeast, IxisMethods in cell biology.New York:Acad.Press,1975,v.12,p.99-109.

217. Wiemken A'.,Durr M. Characterization of amino acid,pools in the vacuolar compartment of Saccharomyces cerevisiae. Arch. Microbiol.,1974,v.101,No 1,p.45-57.

218. Wiemken A.,Nurse P. The vacuole as a compartment of amino, acid pools in yeast. InsProc.Third Intern. Symp. Yeasts. Helsinki: Otaniemi, 1975» part 2,p.321-24-7 •

219. Wittenbach V.,Lin W. ,Hebert R. Vacuolar localization of proteases and degradation of chloroplasts in mesophy11 protoplasts from senescing primary ndieat leaves. Plant Physiol.,1982,v.69,No 1, p.98-102.

220. Yamaki S. Localization of sorbitol oxidase in.vacuoles and other subcellular organelles in apple cotyledons. Plant & Cell Physiol.,1982,v.23,No 5»p.891-900.

221. Yancey P.H.,Clarke M.E.,Hand S.C.,Bowlus R.D.,Somero G.N. Living, with water stress: evolution of osmolyte systems. Science, 1982,v.217,No 4566,p.1214-1222.

222. Zacharius R.M.,Zell Т.Е. Glycoprotein staining following electrophoresis on acrylamide gels. Anal.Biochem.,1969,v.30,No 1, p.148-152.

223. Ziegler P.,Kandler 0. Tonoplast stability as a critical factor in frost injury and hardening of spruce (Picea abies L.Karst.) needles. Z.Pflanzenphysiol.,1980,v.99»No 5»р.292-4Ю.

224. Zimmermann U. Physics Qf turgor- and osmoregulation. Ann. Rev.Plant Physiol.,1978,v.29,p.121-148.

225. Zingsheim H.P. ,Plattner H. Electron .microscopic methods in. membrane biology. Meth.membrane biol.,1976,v.7»No 1,p.1-146.

226. Zirkle C. The plant vacuole. Bot.Rev.,1927,v.2,No 1,p.1-20.