Возрастные особенности кейлонной регуляции пролиферации клеток печени крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Шенцева, Елена Александровна

• Шенцева, Елена Александровна
• кандидат биологических наук
• 1995

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шенцева, Елена Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

стр.

Список принятых сокращений

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Регуляция пролиферации клеток

1.2. Факторы, регулирующие пролиферацию клеток

1.3. Возможные механизмы действия кейлонов

1.4. Возрастные особенности регуляции пролиферации

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Характеристика фракции кейлонов на разных

этапах онтогенеза

Заключение к главе 3.1

3.2. Активность ингибиторов пролиферации на разных этапах онтогенеза и на различных экспериментальных моделях

3.2.1. Активность кейлонной фракции на разных этапах онтогенеза

3.2.2. Влияние гидрокортизона на активность кейлонов

3.2.3. Действие кейлонов почки на интенсивность компенсаторной гипертрофии после односторонней нефроэктомии у животных разных возрастных групп

Заключение к главе 3.2

3.3. Исследование механизмов действия кейлонов

3.3.1. Исследование продолжительности действия кейлонов

3.3.2. Тканевая локализация кейлонов после их внутрибрюшинного введения

3.3.3. Влияние кейлонов на удельную радиоактивность гистонов и негистоновых белков ядер печени

3.3.4. Влияние кейлонсодержащей фракции при ее многократных введениях на удельную радиоактивность ДНК регенерирующей печени

Заключение к главе 3.3

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ЛИТЕРАТУРА

- 4 -

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

МИ - митотический индекс

МЦ - митотический цикл

ЧГЭ - частичная гепатэктомия

НГБ - негистоновые белки

ГБ - гистоновые белки

Уд.РА. - удельная радиоактивность

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Возрастные особенности кейлонной регуляции пролиферации клеток печени крыс»

-5 -ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время вопросы регуляции размножения клеток занимают одно из центральных мест в биологии. Пролиферация является важнейшей стороной жизнедеятельности и развития организмов и ее нарушения лежат в основе возникновения многих патологических процессов. Поэтому выяснение механизмов регуляции клеточной пролиферации и, тем более, умение целенаправленно изменять их, несомненно, является актуальной проблемой биологии как в научном, так и в прикладном аспектах.

Феномен старения на клеточном уровне проявляется в выходе стареющих клеток из пролиферативного цикла в состояние, сходное с состоянием покоя. Подобно покоящимся клеткам, стареющие клетки характеризуются пониженной матричной активностью хроматина [443, накоплением липидов [143, изменением активности лизосомальных ферментов, снижением способности клеток к репликации ДНК [453.

Поддержание определенного соотношения масс органов и тканей в период развития и на протяжении жизни высших организмов свидетельствует о существовании тонкой и быстродействующей системы регуляции деления клеток. Нарушение или изменение в механизмах, ответственных за поддержание клеточного гомеостаза, лежит в основе многих патологических состояний, включая злокачественный рост. Один из подходов к анализу причин возникновения этой группы явлений может состоять в изучении возрастной динамики факторов, регулирующих клеточную пролиферацию. К ним можно отнести как ингибиторы, так и стимуляторы клеточного деления.

Одним из хорошо изученных примеров контролируемого размножения клеток является регенерирующая печень млекопитающих, на примере которой показано существование гомеостатического контро-

ля клеточной пролиферации. Уже через сутки после повреждения в популяции оставшихся гепатоцитов возникает волна клеточных делений и утраченная ткань быстро восстанавливается. Если у крыс удалить 2/3 печени, то оставшаяся часть регенерирует до исходной массы за 10-14 дней [1003.

Единого мнения о природе сигналов, заставляющих гепатоциты перейти из состояния покоя в митотический цикл, а после восстановления массы органа вновь вернуться в состояние покоя, пока нет.

Регуляция пролиферации клеток у эукариот осуществляется разнообразными факторами, среди которых присутствуют как индукторы, так и ингибиторы деления. Соотношение между индукторами и ингибиторами является важным фактором, регулирующим пролиферацию. Из печени было выделено множество ингибиторов пролиферации [156, 1953. Так, Н. Onda и J.Yoshikava [1963 разработали теорию, согласно которой в каждой клетке синтезируется специфический супрессор митоза, причем в печени этот белок 1-кислый протеид. Из клеток печени и из сыворотки крови были выделены также и стимуляторы пролиферации [105, 1953. Механизм их действия пока неизвестен. По-видимому, имеется две возможности: во-первых, стимуляторы могут инактивировать ингибиторы; во-вторых, они могут оказывать непосредственное воздействие на гепатоциты, запуская таким образом механизм, снижающий внутриклеточную концентрацию активных ингибиторов.

Как в составе данной ткани, так и вне ее встречается множество смешанных разновидностей регуляторов этих двух основных типов. Например, вне ткани обнаружены фактор роста фибробластов, фактор роста эпидермиса, эритропоэтин и др.[144, 159, 1753.

Таким образом, клеточное равновесие в тканях взрослого ор-

ганизма поддерживается как ингибиторами, действующими по механизму обратной связи, так и индукторами С122, 220].

Химические вещества, ингибирующие пролиферацию клеток, находят применение в онкологической практике. Однако, большинство из них - токсичные вещества, вызывающие гибель не только трансформированных клеток но, как следствие, нежелательные побочные эффекты.

В последние годы большое внимание уделяется эндогенным специфическим ингибиторам клеточного деления естественного происхождения в качестве возможных регуляторов клеточной пролиферации Е154, 160, 198, 2063. Большое значение в регуляции пролиферации имеют при онкогенезе внутритканевые ингибиторы, в частности, кейлоны [148, 1983.

Однако, закономерности кейлонной регуляции и ее взаимоотношения с остальными элементами общей системы контроля деления клеток остаются не исследованными. Кейлонная система регуляции является важным звеном регуляции клеточного гомеостаза тканей, обеспечивая внутритканевой контроль над процессами размножения клеток [35].

Таким образом, функциональная активность тканей контролируется благодаря согласованной деятельности регуляторных механизмов гомеостаза на собственно тканевом (в том числе кейлоны), межтканевом (генотропные активаторы) и организменном уровнях (эндокринная, иммунологическая, нервная регуляции).

Кроме поддержания подвижного равновесия фунциональной активности, тканевой гомеостаз обеспечивает в организме и сохранение общей массы клеток, а следовательно, и соотношение между числом делящихся, дифференцированных и гибнущих клеток. Изучение этих закономерностей составляет важнейшую задачу современной би-

ологии.

Вопросы регуляции клеточной пролиферации на разных этапах онтогенеза животных изучены недостаточно.

Учитывая важную роль кейлонной регуляции в возрастном' становлении пролиферации клеток и возможность использования факторов роста в медицинской практике, значительный интерес представляет исследование возрастной активности кейлонов печени, чувствительности к ним кяеток - мишеней и механизмов их действия на процессы деления клеток.

Цель и задачи исследования. Целью работы было исследование фракционного состава кейлонов печени, их количественной характеристики и биологической активности, чувствительности к ним клеток на разных этапах онтогенеза, на различных экспериментальных моделях, а также исследование возможных механизмов их действия на модели индуцированной пролиферации клеток печени крыс разного возраста.

В конкретные задачи исследования входило:

1. Исследовать фракционный состав кейлонов печени животных разного возраста.

2. Исследовать содержание отдельных фракций кейлонов в печени на разных этапах онтогенеза.

3. Исследовать активность кейлонсодержащей фракции печени и почек и чувствительности к ним клеток на разных этапах онтогенеза.

4. Исследовать влияние гидрокортизона на активность кейлонов.

5. Исследовать тканевую локализацию и время действия кейлонов при внутрибрюшинном введении их в организм.

6. Исследовать действие кейлонов на интенсивность пролиферации клеток печени на модели регенерирующей печени при однократных и многократных последовательных введениях кейлонов в организм.

Научная новизна. Впервые осуществлена возрастная качественная и количественная характеристика кейлонов печени как регуляторов пролиферации клеток. Показано, что в процессе онтогенеза присходят как количественные (увеличивается низкомолекулярная фракция кейлонов М.м. 17 КДа), так и качественные изменения, снижается их активность как в интактной, так и в регенерирующей печени.Чувствительность гепатоцитов к действию кейлонов также снижается с возрастом. Активность кейлонов может модифицироваться разнообразными клеточными метаболитами и, прежде всего, гормональным статусом организма, т.е. кейлоны входят в систему возрастной регуляции пролиферации. Возрастная система кейлонной регуляции имеет выраженную тканевую особенность , по крайней мере, для печени и почек.

Показано, что активность кейлонов печени не столь кратковре-менна, как считалось ранее, а может сохраняться на высоком уровне достаточно долго, не менее 23 часов.

Обнаружено, что после внутрибрюшинного введения кейлонов в организм они связываются с клетками печени и удерживаются там не менее 12 часов.

Наиболее выраженный ингибирующий эффект кейлонов наблюдается при их однократном введении в организм. Кейлоны не влияют на синтез белков хроматина, а действуют непосредственно на уровень репликации.

Многократное последовательное введение кейлонов в организм сопровождается потерей чувствительности гепатоцитов к

этому ингибитору.

»

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Кейлонная система онтогенетической регуляции пролифера -ции характеризуется выраженной тканевой специфичностью.

2.Активность кейлонов и чувствительность гепатоцитов к их действию имеет возрастную специфику.

3.Йнгибирующая активность кейлонов сохраняется не менее 23 часов после их однократного введения в организм.

4.Многократные, последовательные введения кейлонов в организм сопровождаются потерей чувствительности гепатоцитов к ним.

Научно-практическое значение работы. Выполненная работа является важным этапом в исследовании системы кейлонной регуляции пролиферации клеток, которая имеет общебиологическое значение, а также в понимании возрастной регуляции клеточных делений.

Исследованная кейлонсодержащая фракция может быть использована в качестве одного из компонентов комплексного препарата для решения вопросов, связанных с нарушением клеточной пролиферации при различных патологиях.

Полученная кейлонсодержащая фракция используется в качестве тканевого биохимического препарата, ингибирующего пролиферацию клеток, в научных исследованиях.

Результаты работы используются в учебном процессе в курсе лекций "молекулярная биология" к "Биотехнология".

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на симпозиуме " Продолжительность жизни.* механизмы, прогнозы, пути увеличения" (Киев, 1991 г.), на международном симпозиуме "Биологические механизмы старения" (Харьков, 1994 г.), Нащональному

конгресс геронтолог!в 1 гер!атр1в Укра1ни (Киев, 1994г.), на на» учных конференциях молодых ученых биологического факультета и НИИ биологии (Харьков, 1993, 1994, 1995 гг.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 работ, в том числе 5 статей.

Объем и стуктура диссертационной работы. Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста, содержит б таблиц, 16 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, изложения полученных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка цитируемой литературы (231 наименование).

Заключение диссертации по теме «Физиология», Шенцева, Елена Александровна

- 111 -выводы

1.Кейлонсодержащая фракция» выделяемая спиртовым осаждением, является гетерогенной по составу и представлена 9-10 белковыми компонентами с молекулярными массами от 17000 до 100000 Да. Количество электрофоретических зон в полиакриламидном геле остается неизменным в онтогенезе. Индукция пролиферации клеток печени частичной гепатэктомией не приводит к изменению элект-рофоретической характеристики кейлонов печени.

2.Количество низкомолекулярной фракции кейлонов (17КДа, обладающая наибольшей ингибирующей активностью в отношении пролиферации), выделяемой хроматографией на сефадексе, увеличивается с возрастом животных от 3,7% у 1 месячных до 11,2% у 24 месячных крыс.

3.Максимум синтеза ДНК у 1 и 3 месячных крыс наступает раньше (24 часа после ЧГЭ), чем у 12 и 24 месячных (26 ч после ЧГЭ), что свидетельствует о более быстром прохождении клеточного цикла на ранних этапах онтогенеза. Чувствительность гепатоцитов к кейлонам у старых (24 месячных) крыс была ниже по сравнению с таковой молодых и взрослых животных , оцениваемой по их влиянию на скорость синтеза ДНК гепатоцитов. Активность кейлонов снижалась с 3 до 24 месячного возраста крыс. Активность кейлонов, выделенных из регенерирующей печени была ниже по сравнению с таковой интактной печени.

4. Совместное введение кейлонсодержащей фракции с гидрокортизоном усиливало ингибирующий эффект на пролиферацию клеток кейлонов.

5. Возрастная характеристика активности кейлонсодержащей фракции была различной для разных тканей. Если в печени кейлоны подавляли удельную радиоактивность ДНК у 1 месячных животных на

- 112

82%, то в почках они не ингибировали синтез ДНК в этом возрасте и только с 3 месячного возраста подавляли репликацию.

6.Кейлоны печени специфически связывются с клетками печени и удерживаются там не менее 12 часов, что свидетельствует об их прямом специфическом действии на орган-мишень.

7.Максимальная ингибирующая активность кейлонов на пролиферацию клеток печени выявлялась спустя 4-8 часов после их однократного введения в организм, однако их активность сохрнанялась на высоком уровне достаточно долго ( не менее 23 часов). После многократных введений кейлонсодержащей фракции печени гепато-циты теряли чувствительность к действию этих ингибиторов.

8.Кейлоны не оказывали влияния на скорость синтеза гистонов и негистоновых белков хроматина (т.е. не влияли на биогенез хроматина), а действовали непосредственно на синтез ДНК.

- 103 -ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Несмотря на противоречивость результатов, полученных разныv v ми авторами, изучавшими действие кейлонов на пролиферацию, участие кейлонов в регуляции клеточного деления не вызывает сомнений. Главным ограничением на пути использования кейлонов в фундаментальных исследованиях и практической медицине стало отсутствие единого мнения о механизме их действия и, как следствие, отсутствие обоснованных схем введения и использования кейлонов. Значительный интерес в этом плане представляют исследования времени действия кейлонов, определение их функциональной активности на разных этапах онтогенеза, анализ их точки приложения в метаболической цепи, обеспечивающей пролиферативные процессы при разных схемах введения кейлонов в организм. Несомненно, эти исследования могут быть важными этапами в выяснении механизма действия кейлонов, как одних из регуляторов клеточной пролиферации.

Анализ литературных данных о функциональной роли кейлонов показывает, что максимальный эффект ингибирования пролиферации кейлонами выявляется через 2-8 часов после их введения в организм. [15, 122, 152, ] .Полученные нами результаты также свидетельствуют о том, что наибольший эффект снижения удельной радиоактивности ДНК в клетках регенерирующей печени выявляется спустя 8 часов после инъекций кейлонов. Однако, наши исследования показывают также, что ингибирование пролиферации кейлонами, хотя несколько в меньшей степени, проявляется и через 23 часа м мм после введения кейлонов. О длительности действия кейлонов свидетельствуют и данные по времени удержания меченных кейлонов в печени, - не менее 12 часов после введения (раздел 3.3.1.).

- 104

Таким образом, на основании наших исследований на модели индуцированной пролиферации печени частичной гепатэктомией, правомерно сделать вывод о длительном действии кейлонов ( не менее 12-23 часов) с максимальным эффектом акивности через 8 часов после однократного введения в организм.

Принимая во внимание факт длительного эффекта кейлонов в клетке, можно заключить, что: во-первых, кейлоны могут оказывать действие на прохождение Б-периода клеточного цикла опосредованно через другие метаболические звенья, в частности синтез белков хроматина (гистоны, негистоновые белки), которые синтезируются до наступления синтеза ДНК Е16, 193, во-вторых , сохраняя свою активность достаточно долго, кейлоны могут проявлять свой эффект как ингибиторы клеточной пролиферации и в момент наступления Б-периода клеточного цикла, т.е. они действуют непосредственно на синтез ДНК.

Проведенные нами исследования влияния кейлонсодержащей фракции на удельную радиоактивность гистонов и негистоновых белков хроматина показало, что скорость синтеза этих хромосомальных белков осуществляется с такой же интенсивностью, как и в контроле (раздел 3.3.3.). Эти результаты позволяют полагать, что кейлоны реализуют свой эффект не на уровне изменения процессов биогенеза хроматина, а непосредственно воздействуя на уровень реп-ликативных процессов. В пользу этого свидетельствуют и данные по незначительному влиянию кейлонсодержащей фракции на скорость синтеза РНК и скорость транспорта вновь синтезированной РНК из ядра в цитоплазму клеток (раздел 3.3.4.).

О тканеспецифическом действии кейлонов печени на синтез ДНК свидетельствуют и результаты наших исследований по локализации С меченых молекул кейлонов в клетках печени и значительно

- 105 больший эффект ингибирования пролиферации кейлонами по сравнению с вводимым внутрибрюшгнно альбумином (раздел 3.3.2.).

Таким образом, на основании этой серии экспериментов сделан вывод, что кейлоны печени после однократного введения в организм связываются с гепатоцитами, где они удерживаются не менее 12 часов. Кейлоны не оказывают влияния на синтез белков хроматина, незначительно изменяют синтез и транспорт РНК из ядра в цитоплазму, а эффект действия кейлонов в клетке реализуется непосредственно за счет синтеза ДНК (снижают удельную радиоактивность ДНК в 3-4 раза после однократного их введения в организм) .

Максимальная активность кейлонов печени проявляется при однократном введении их за 8 часов до наступления S- периода клеточного цикла, однако она сохраняется на высоком уровне и на протяжении 23 часов до наступления пика синтеза ДНК после частичной гепатэктомии.

При однократном введении в организм кейлонов нельзя сделать вывод о том, осуществляют ли они временную задержку синтеза ДНК или же их действие приводит к длительному ингибированию пролиферации. Ответ на этот вопрос имеет принципиальное значение в исследовании механизмов действия кейлонов. В свяи с этим, нами исследовано влияние многократного введения кейлонов на динамику синтеза ДНК в процессе восстановления массы печени после частичной гепатэктомии.

Нами установлено, что многократное введение кейлонов не приводит к увеличению эффекта ингибирования синтеза ДНК, напротив, к 7 суткам после частичной гепатэктомии, когда практически завершается процесс восстановления массы печени в контроле, на фоне действия кейлонов наблюдается даже некоторое превосходство

- 106 в удельной радиоактивности ДНК печени по сравнению с контролем. Эти результаты могут отражать наличие в печени популяции гепатоцитов нечувствительных к действию кейлонов ( раздел 3.3.4.).

Состояние кейлонной системы при старении тканей изучено недостаточно, однако ряд данных указывают на снижение активности кейлонов в тканях в позднем онтогенезе С6, 98]. Несомненно, что активность кейлонов может определяться целым рядом факторов и, прежде всего, фракционным составом кейлонов.

В связи с этим, исследование кейлонсодержащей фракции, выделенной нами из интактной и регенерирующей печени животных всех возрастов, представляется весьма существенным. Результаты проведенных нами экспериментов показали, что кейлонсодержащая фракция, выделенная из интактной печени, представлена белками с различной молекулярной массой, разделяющимися методом диск-электрофореза в ПААГе на 9-10 компонентов с молекулярной массой от 17 до 100 КДа, что согласуется с данными и других авторов[73].

Дальнейшее фракционирование кейлонсодержащей фракции на се-фадексе G-75 позволило разделить ее на 4 компонента, обозначенные как I, la, II и III [40]. В аналогичных исследованиях других авторов убедительно показано, что наибольший ингибирующий эффект выявляется в низкомолекулярной фракции III с молекулярной массой 17 КД [40, 80]. Проведенные нами количественные исследования этой фракции у животных разных возрастных групп показали, что с возрастом она увеличивалась, причем с наиболее высоким уровнем у старых животных (24 мес.).

Следует отметить, что установленная нами динамика возрастного увеличения содержания низкомолекулярной фракции кейлонов находится в прямой корреляции со снижением активности пролиферации клеток печени в онтогенезе [3, 179], что на наш взгляд может

- 107 быть косвенным аргументом в пользу участия кейлонов в возрастной регуляции пролиферации клеток печени (раздел 3.1.).

Из литературных данных известно [38, 40, 153, 204], что при регенерации наблюдается временное исчезновение как чувствительности клеток-мишеней к действию ингибиторов, так и их биологической активности.

Исследования, проведенные нами по изучению состава (гетерогенности) и функциональной активности кейлонов, выделенных из регенерирующей печени, позволили прийти к заключению, что активность кейлонов не исчезает полностью при регенерации органа, хотя несколько снижается по сравнению с активностью кейлонов ин-тактной печени.

Молжно допустить, что в ткани с индуцированной пролиферацией, вероятно, уменьшена доля клеток, синтезирующих ингибитор (раздел 3.1.).

Эти результаты подтверждают данные о составе кейлонсодержа-щей фракции, выделенной из регенерирующей печени. При помощи электорофореза в ПААГе установлено, что гетерогенность компонентов регенерирующей печени не изменяется по числу имеющихся зон по сравнению с кейлонами интактной печени на протяжении онтогенеза. Наблюдаемые небольшие количественные изменения белка в отдельных зонах не позволяют сделать вывод об уменьшении количества ингибитора, которое логически можно ожидать при регенерации. Вероятно, определяющи в процессе восстановления массы печени являются качественные изменения факторов регуляции пролиферации клеток.

Все это свидетельствует о том, что скорость пролиферации клеток определяется не только активностью кейлонов, но и состоянием клеток т.е. их чувствительностью к действию кейлонов.

- 108

Поскольку возрастная динамика чувствительности клеток к кейлонам неизвестна, нами на модели регенерирующей печени была изучена чувствительность клеток к кейлонам на разных этапах онтогенеза белых крыс (раздел 3.2.1.).

Показателем чувствительности клеток к кейлонам в этой серии экспериментов явилось определение удельной радиоактивности ДНК после однократного внутрибрюшинного введения кейлонов животным разного возраста. Результаты, полученные нами, показали высокую степень ингибирования удельной радиоактивности ДНК кейлонами у животных 1, 3 и 12 мес. возраста. У животных £4 месячного возраста степень ингибирования удельной радиоактивности ДНК значительно ниже, по сравнению с животными более молодых возрастов.

В подтверждение этих результатов свидетельствуют данные, полученные при введении кейлонов, выделенных из печени одномесячных животных старым (24 мес) крысам и наоборот. Оказалось, что кейлоны из печени 1-месячных животных ингибируют синтез ДНК в печени 24 мес. крыс на 57,5 %, в то время как при обратной постановке эксперимента ( кейлоны из печени старых животным вводили 1 мес. крысам) ингибирующий эффект составлял только 30 %. Ингибиторы, вьщеленные из печени 1- и 12 мес. крыс, оказывают на синтез ДНК в клетках печени старых животных одинаковый эффект.

На основании этих данных правомерно сделать вывод о снижении чувствительности клеток печени старых животных к ингибирую-щему действию кейлонов (раздел 3.2.1.).

Наименьший эффект ингибирования пролиферации у 24 месячных крыс может быть обусловлен как изменением о возрастом ингибирую-щей активности кейлонов, так и сменой популяции гепатоцитов с возрастом, обладающих различной чувствительностью к кейлонам.

Анализируя эти положения важно остановиться на влиянии гор

- IOS монального статуса организма на действие кейлонов. Известно, что глюкокортикоиды ингибируют деление клеток [27, 503 . В ряде исследований показано также, что свой эффект кейлоны реализуют путем взаимодействия с гормонами [133, 1373. В частности, установлено, что адреналин и гидрокортизон в значительной степени усиливают влияние печеночного и почечного кейлонов [56, 1433. Для проявления действия печеночного кейлона in vivo большую роль играет определенный уровень гормонов коры надпочечников в крови [68 3.

Принимая во внимание результаты этих экспериментов, нами было исследовано раздельное и совместное влияние гидрокортизона и кейлонов на пролиферацию клеток печени на модели индуцированной пролиферации (раздел 3.2.2.).

Исследования показали, что их совместное действие оказывает значительно больший эффект ингибирования пролиферации, чем раздельное влияние гидрокортизона или кейлонов. Это демонстрирует модифицирующее влияние гормонов на реализацию кейлонами своего биологического эффекта. Учитывая , что с возрастом изменяется гормональный статус организма [693, логично предположить, что это, в известной степени, будет оказывать влияние на действие кейлонов, что в конечном итоге и может объяснять обнаруженные нами возрастные особенности их действия.

Глюкокортикоиды не единственный фактор, способный влиять на действие кейлонов, и для ответа на этот вопрос необходимы исследования взаимоотношений различных активаторов и ингибиторов клеточной пролиферации в различных органах и тканях.

Полученные нами результаты по действию кейлонов в различных тканях (печень,почки) могут служить косвенным подтверждением того, что действие кейлонов в большой степени зависит от функцио

- 110 нального состояния ткани (раздел 3,2.3.).

Как уже отмечалось, различия в возрастной чувствительности клеток печени к действию кейлонов могут быть обусловлены и возрастной сменой популяции гепатоцитов. Известно, что с возрастом увеличивается плоидность гепатоцитов, а гепатоциты с различной степенью плоидности различаются между собой по интенсивности метаболизма С51]. Можно полагать, что возрастная смена популяции гепатоцитов и изменение гормонального статуса организма оказывают влияние на действие кейлонов и предопределяют в конечном итоге снижение чувствительности гепатоцитов у 24- месячных крыс к действию кейлонов. Пониженная чувствительность гепатоцитов у старых животных сопровождается увеличением количества низкомолекулярной фракции кейлонов, что, вероятно, и позволяет контролировать скорость пролиферации на поздних этапах онтогенеза.

Установленные нами количественные и качественные характеристики действия кейлонов имеют выраженную возрастную и тканевую специфику.

Подводя итог наших исследований, необходимо подчеркнуть то, что кейлоны являются важным компонентом системы возрастной регуляции пролиферации клеток, исследование которых позволит осуществлять управление пролиферацией клетки как в процессе онтогенеза , так и при развитии патологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шенцева, Елена Александровна, 1995 год

- 113 -ЛИТЕРАТУРА

1. Алов И. А. // Цитология. Митотическое деление клетки. - М., 1975. - Т.2. - С.67-89.

2. Алов И.А., Семенова Н.Ф. Активация делений и роста клеток при регенерации // Бюлл. зкспер. биол. и мед. - 1988. - N9. - С.113-118.

3. Анисимов В.Н. Кейлоны в возрастном аспекте: - Тез. докл. симп. "Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах". - М.: Наука, 1981. - С.43-46.

4. Анисимов В.Н. Продолжительность жизни и частота возникновения опухолей у животных разных видов // Экспер.онкология. -1987. - Т.9,N5. - С. 17-23.

5. Анисимов В.Н. Роль регуляторов клеточной пролиферации в механизмах старения и канцерогенеза: Тез докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С. 114-116.

6. Анисимов В.Н., Окулов В.Б. Уровень эстрадиола в крови и G-1 кейлона в слизистой оболочке влагалища у крыс разного возраста // Проблемы эндокринологии. 1981. - Т. XXVI1. -

С.48-52.

7. Анисимов В.Н., Турусов B.C. Возраст, как модифицирующий фактор химического канцерогенеза // Экспер. онколология. -1980. - Т.2,N4. - С.3-12.

8. Антохин А.И., Барышева В.П., Романов Ю.А., Рыбаков В.Г. Действие экстракта клеток асцитная опухоль Эрлиха мышей на митотическую активность и синтез ДНК в этой опухоли // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1977. - N7. - С.86-88.

- 114 -

9. Антохин А.И., Богоева М.В., Рыбаков В.П., Мацак Н.Я.,

Бикс К. И. Кейлонный механизм регуляции клеточного размножения и его роль в формировании суточных ритмов пролиферации клеток: Тез. докл. симп. "Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах". - М.: Наука, 1981. -С.81-89.

10. Антохин А.И., Романов Ю.А. Влияние кейлонсодержащего препарата из асцитной опухоли Эрлиха на синтез ДНК и деление клеток в опухоли в зависимости от времени суток // Цитология. -1982. Т.24,N11. - С.1312-1318.

11. Антохин А.И., Рыбаков В.Г., Романов Ю.А. и др. Клеточно-попу ляционные механизмы противоопухолевого действия кейлона из АОЭ // Синтез и механизмы действия физиологически активных веществ. - Одесса, 1976. - С.749-750.

12. Аруин Л.И., Смотрова И.А., Городинская А.И. Кейлоны Gl и G2 слизистой оболочки желудка // Билл, зксперим. биол. и мед.

- 1984. - N4. - С.455-457.

13. Бабаева А.Г. 0 регуляции процессов компенсаторной и регене-рационной гипертрофии : Дисс... докт. биол. наук. - Москва, 1970. - 320 с.

14. Бабенко H.A. Кавок Н.С. Роль тиреоидных гормонов в регуляции активности фосфолипаз А-1 и А-2 в клетках и ядрах клеток печени крыс разного возраста // Биохимия. - 1994. - Т. 59, вып.8. - С.1130-1139.

15. Бала Ю.М. Антикейлоны и кейлоны. - Воронеж.: Изд-во ВГМИ, 1984. - 154 с.

16. Балаж А., Блажек И. Эндогенные ингибиторы клеточной пролиферации. - М.: Мир, 1982. - 302 с.

17. Беляева И.Д. Особенности пролиферации клеток регенерирующей

- 115 -

печени крыс // Цитология. - 1973. - Т.15,N10. - С.1297-1301.

18. Блюгер А.Ф., Карташова О. Я. Моделирование патологических процессов в печепи // Экспер. патология печени. Рига: Медицина, 1983. - С.7-16.

19. Божков А. И., Шерешевская Ц.М., Мартынюк Н.М. Синтез нуклеиновых кислот и белков в печени крыс разных линий в зависимости от возраста // Биохимия. - 1980. - Т.45, вып.1. - С. 113-117.

20. Васильев Ю.М., Маленков А.Г. Клеточная поверхность и реакция клетки. - М.: Медицина, 1968. - 293 с.

21. Ветвитский В.Н. Тканевая специфичность регуляции пролифера-тивных процессов экстрактами из мозга и печени // Известия АН СССР., Сер. биол. - 1988. - N5. - С.694-700.

22. Герасимова H.A., Егоров Л.В., Козинец Г.И., Терентьева Э.И. Значение определения фаз митотического цикла клеток в печени больных острым лейкозом // Проблемы гематологии и переливания крови. - 1976. - N4. - С.42-46.

23. Годорожа П.Д., Забужинский М.А., Колобов A.A., Окулов В.Б. Торможение опухолевого процесса в эпителии слизистой оболочки защечного мешка хомячка при апликации эпидермальных кей-лонов: Тез. докл. IV международного симпозиума по кейлонам.

- М.: Наука, 1983. - С.85.

24. Евгеньев М.Б. Генетическая регуляция митоза межвидовых гибридов Drosophila. Сообщ. 1. Материнский эффект на расхождение и элиминацию хромосом // Генетика. - 1973. - N8. - С.92-94.

25. Епифанова О.И. О периодах митотического цикла и этапах повышенной чувствительности к воздействиям // Цитология. -1967. - N9. - С.1033-1056.

26. Епифанова О.И. Изучение регуляторных механизмов митотичес-

-116-

кого цикла с помощью ингибиторов транскрипции и трансляции // Клеточный цикл / Под ред. О.й. Епифановой - М., 1973. -С.72-103.

27. Епифанова О.И. Гормоны и размножение клеток. - М.: Наука, 1965, - 240 с.

28. Журавлева Н.В.,Боброва Н.В. ,Стукалова Л.А., Кошелев Л.И., Чайцов В.Г. Недостаточность иммунитета у больных, обусловленная ингибированием активности антител // Активаторы и ингибиторы биол. процессов.: Сборник научных трудов ЦНИИ

/ Под ред. Э.Г.Быкова. Воронеж: Изд-во ВГМЙ, 1982. - С. 101-103.

29. Захаров В.Б.Интенсивность пролиферации в гепатоме Зайдела у мышей при воздействии печеночными кейлонами: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. -С. 85.

30. Захаров В.Б. Суточный ритм клеток гепатомы 22а после воздействия печеночным кейлоном: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М., 1983. - Т.5 - С. 594-596.

31. Захаров В. Б., Бережкова Н.И., Мамонтов С. Г. Суточный ритм клеточной пролиферации в эпителии языка // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1993. - N 7. -С. 72.

32. Збарский И.Б. Белки клеточного ядра и их биологическая роль // Материалы симпозиума "Структура и функции клеточного ядра". - М.: Наука, 1967. - С.111-121.

33. Карлсон Б.М. Регенерация. - М.: Наука, 1986. - 296 с.

34. Кетлинский С. А. Тканеспецифическая регуляция пролифератив-ных процессов в тканях в норме и при патологии; к проблеме кейлонов // Архив патологии. - 1978. - Т.XL, вып.З. - С. 3-13.

35. Кетлинский С.А. Кейлоны как фактор тканевого гомеостаза //

и -in _ - IJ. / -

Архив анатомии, гистологии и эмриологии. - 1980. - T.LXXVII. - N1. - С.29-49.

36. Кетлинский O.A. Роль кейлонов в регуляции пролиферации клеток в процессе становления тканей // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1981. - T.LXXX. N2. - С.90-95.

37. Кетлинский O.A., Назаров П.П., Светикова K.M., Гусихина В.И. К вопросу о тканеспецифическом действии лимфоцетар-ного кейлона, выделенного из селезёнки крыс // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. - 1978. - N9. - С.17-23.

38. Кетлинский O.A., Окулов В.Б. Изменение активности эпидерма-льных кейлонов в процессе ответной реакции кожи на воздействие канцерогеном и выщипывание волос // Еюл. эксперим. биол. и мед. - 1978.- T.5,N3. - С.354-356.

39. Кетлинский O.A., Парфенова Е.В. Действие эпидермальных кейлонов на дифференцировку эпидермоцитов: Тез. докл. симп. "Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах". - М.: Наука, - 1981. - С.73-81.

40. Кетлинский 0. А., Парфенова Е.В. Изучение биологической активности кейлонов, выделенных из нормальной и регенерирующей печени // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1981. - N7. -0.96-98.

41. Кетлинский O.A., Симбирцев A.C. Кейлоны в развитии физиологической и репаративной регенерации ряда эпидермальных эпителиев: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кей-лонам. - М.: Наука, 1983. - С. 41-44.

42. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C. Очистка эпидермального кейлона G-2 с помощью иммуноафинной хроматографии // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1983. - N8. - С.71-73.

43. Клеменс М. Выделение эукариотической матричной РНК //

- 118 -

Транскрипция и трансляция. Методы. - М.: Мир, 1987. - С. 254-275.

44. Клименко А.И., Малышев А.Б., Шевцова М.Я. Белковый состав фрагментированного хроматина печени крыс в постнатальном онтогенезе // Биохимия. - 1978. - Т.43, вып.10. - С.1757-1763.

45. Клименко А.И., Шевцова М.Я. Содержание ДНК и активность ДНК-аз в печени в онтогенезе белых крыс // Журн. эволюц. биох. и физиол. - Л.: Наука, 1977. - T.4,N.3. - С.337-341.

46. Клишов A.A. Гистогенез и регенерация тканей. - Л.: Медицина, 1984. - 232 с.

47. Конюхов Б.В. Роль генов в регуляции клеточной пролиферации // Известия АН СССР., Сер. биол. - 1977. - N5. - С.747-761.

48. Красильников М.А., Богданова H.H., Адлер В.В. Торможение пролиферации нормальных и опухолевых клеток печени в условиях длительной гормональной стимуляции // Биохимия. -1989. Т.54, вып.4. - С.656 -661.

49. Кухтина Ж.М. Руководство к практическим занятиям по цитологии. М.: Просвещение, 1971. - 96 с.

50. Лагучев С. С. Гормоны и митотический цикл клетки. - М.: Медицина, 1975. - 176 с.

51. Лиознер Л. Д. Теоретические к экспериментальные подходы к изучению регенерации у млекопитающих // Клеточные основы регенерации у млекопитающих. М.; Наука, 1984. - С.4-18.

52. Логинов A.C., Сперанский М.Д., Аруин Л.И., Матюшина Е.Д., Магницкий Г.С. О кейлонах печени // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1976. - Т.82,N12. - С.1482-1484.

53. Маленков А. Г. Контактины - биологическая активность и возможная биологическая роль: Тез. докл. IV Международного

симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С.31-33.

54. Маленков А.Г., Модянова Е.А., Ушаков В.Ф. Влияние адгезионного фактора печени - контактина на механические свойства ультраструктурных элементов контакта гепатоцитов // Биофизика. - 1979. - N5. - С.1054-1057.

55. Мамонтов С.Г. Свойства кейлонов и взаимодействие их с регу-ляторными системами организменного уровня: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, - 1983.

- С.41-44.

56. Мамонтов С.Г., Захаров В.Б. Взаимодействие кейлонов и глю-кокортикоидных гормонов в процессах регуляции клеточного деления // Еюл. эксперим. биол. и мед. - 1982. - Т.93, N2.

- С.51-52.

57. Мацак Н.Я., Антохин А.И., Романов Ю.А. Влияние различных фракций, полученных при гель-фильтрации кейлонсодержащего препарата из АОЭ, на митотическую активность и синтез ДНК в этой опухоли // Еюлл. эксперим. биол. и мед. - 1988. - N8. -С. 202- 204.

58. Мацак Н.Я., Романов Ю.А., Антохин А.И. Влияние различных доз кейлонсодержащего спиртового преципитата из АОЭ на митотическую активность и синтез ДНК в этой опухоли // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1987. - N1. - С;89-92.

59. Мкртчан Л.Н., Шукурян С. Г., Демирчоглян И. Г., Гарибян Д.Х. Экспериментальные данные о влиянии кейлона на опухолевый рост // Вопр. онкологии. - 1984. - T.3,N11. - С.64-67.

60. Моргунов Й.Н., Гаркавая Е.Г., Бордонос В.Г. Влияние лимфо-тического кейлона на Т-зависимое и Т-независимое антигенное раздражение: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С.95.

- 120 -

61. Наджимов У.К., Абзалов Ф.М., Рашкес A.M., Мусаев Д.А., Ше-гай И.Д., Шахидоятов Х.М. Идентификация и активность эндогенных ингибиторов роста в листьях карликовых и высокорослых линий хлопчатника // Физиология растений. - 1987. - Т. 34,N1. - С.89-96.

62. Неустроев Г.В. Влияние очищеного эритроцитарного кейлона на пролиферирующие клетки эритрона мыши // Физиологический журнал СССР. - 1980. - T.LXV1,N6. - С.846-851.

63. Неустроев Г.В. Влияние эритроцитарного кейлона на постсинтетический период митотического цикла клеток эритробласти-ческого ряда костного мозга мышей // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. - 1980. - N7. - С.69-73.

64. Неустроев Г.В. О рецепции эритроцитарного кейлона клетками эритроидного ряда костного мозга // Бюлл. эксперим. биол.

и мед. - 1981. - Т.91,N4. - С.481-483.

65. Неустроев Г.В. Исследование природы кейлонной фракции экстрактов эритроцитов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1985. - N9. - С.339-340.

66. Неустроев Г.В. Зритроцитарный кейлон: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М. : Наука, 1983. С. 8.

67. Неустроев Г.В., Померанцев В.П., Гороховская Г.Н., Федорова Е.И., Есипенко С.А. Содержание эритроцитарных ингибиторов (кейлонов) в крови больных с нарушением эритропоээа // Терапевтический архив. 1986. - T.LX111,N9. - С.110-112.

68. Никитин В.Н., Блок H.H., Красницкая A.A. и др. Влияние кортикостероидов на свойства компонентов печеночной белок-синтезирующей бесклеточной системы // Физиол., биохим. и биофиз. возрастного развития. - Киев: Наук, думка, 1980. -

С.48-54.

69. Никитин В.Н. Возрастные аспекты эндокринной ситуации организма // Физиол. и молекул, аспекты онтогенеза. - Киев.: Наук, думка, 1977. - С.5-34.

70. Новикова Н.М. Изменение состава ткани печени старых живот-ныхечени молодых и старых крыс при без белковой диете, откорме и регенерации // Пробл. возраст, физиол. и биох.: Ученые записки. - Харьков: Изд-во Харьков, ун-та, 1960. -Т.29. - С.161-177.

71. Озрина Р.Д., Ульянова A.M., Сарвачев К.Ф. Метод приготовления гомогенных образцов тканей и крови для жидкостного сцинтилляционного счета// Биологические науки. - 1979. -N4. - С.100-102.

72. Окулов В.Б. Кейлоны и опухолевый рост // Вопр. онкологии.

- 1981. - Т.XXVII,N4. - С.101-114.

73. Окулов В.Б., Кетлинский С.А. Использование иммунохимических методов для характеристики и очистки тканевоспецифических ингибиторов митотической активности (кейлонов) // Цитология.

- 1975. - Т.XVII,N11. - С.1294-1298.

74. Окулов В.Б., Колобов А.Н. Сравнительная характеристика эпи-дермального G-2 кейлона нормальных и опухолевых тканей: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С.105.

75. Окулов В.Б., Худолей В.В. Влияние кейлонсодержащего экстракта печени на гепатоканцерогенез // Экспериментальная онкология. - 1980. - Т.2,N4. - С.44-46.

76. Окулов В.Б., Чекулаева Л.И. К методике выделения ингибиторов пролиферативной активности гепатоцитов печени // Архив анат. гистол. эмбриол. - 1976. - T.LXX,N1. - С.106-109.

IOC-J

77. Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и центрифугирование // М.: Наука, 1981. -С.286 с.

78. Остерман Л. А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот // М.: Наука, 1985. - 536 с.

79. Оттесен В., Конышев В.А., Пятницкий H.H. О возрастной зависимости средней продолжительности митотического цикла и времени удвоения числа гепатоцитов в онтогенезе и при регенерации печени // Онтогенез. - 1980. - T.11,N3. - С.257-271.

80. Парфенова Е.В., Кетлинский O.A. Выделение тканеспецифичес-ких ингибиторов синтеза ДНК (кейлонов) из печени крыс // Еюлл. зксперим. биол. и мед. - 1983. - N7, - 0.41-43.

81. Пашков А.Н. Кейлон-антикейлонная система печени разных животных и ее состояние в зависимости от физиологических ри тмов у амфибий // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1991.

- N9. - 0.309-311.

82. Пашков А.Н., Авдеева Т.Д. О механизме действия печеночного кейлона // Активаторы и ингибиторы биологических процессов: Сборник научных трудов ЦНИЛ / Под ред. Э.Г.Быкова. Воронеж: Изд-во ВГМИ, 1982. - С.95-98.

83. Плохинский H.A. Руководство по биометрии для зоотехников. -М.: Колос, 1969. - 256 с.

84. Полищук А. Л. Особенности пролиферации гепатоцитов в растущей и регенерирующей печени // Успехи современной биологии.

- 1983. - Т.96, вып.3(6). - С.451-496.

85. Прилуцкии В.й., Романов Ю.А. Применение трехкомпонентной модели клеточной системы для анализа кинетики и динамики клеточной пролиферации // Регенерация и клеточное деление.

- М. - 1968. - С.320-327.

86. Радкевич Л.А. О пусковых механизмах компенсаторной гипертрофии печени крыс: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С. 79.

87. Родионов В.М., Кузмичева H.A., Поспелова A.B. Химические факторы, регулирующие деление клеток в организме // Вопр. мед. химии. - 1981. - N3. - С.290-300.

88. Родионов В.М., Кузмичева H.A., Поспелова A.B., Плескова М.В. Некоторые подходы к очистке G-2 халона печени крыс // Вопр. мед. химии. - 1981. - N4. - 0.569-572.

89. Романов Ю.А. Регуляция клеточного размножения кейлонами и ее место в общей системе контроля над репродукцией клеток: Тез. докл. симп. " Кейлоны. Значение и роль в нормальных

и патологических процессах". - М., 1981. - С.15-23.

90. Романов Ю.А., Антохин А.И., Селиванова М.В. и др. Кинетические параметры действия кейлонов на рамножение клеток: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М.: Наука, 1983. - С.112.

91. Романов Ю.А., Бикс К.И., Степанова Л. И., Мацак Н.Я. Совместное действие тормозящего рост экстракта асцитной опухоли Эрлиха и адреналина на деление клеток этой опухоли // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1981. - N2. - С.202-204.

92. Романов Ю.А., Кетлинский С.А., Антохин Л.И., Окулов В.Б. Кейлоны и регуляция деления клеток . - М.: Медицина, 1984. - 308 с.

93. Романов Ю.А., Семенова М.В. Действие кейлона и асцитной опухоли Эрлиха мышей на митотическую активность в этой опухоли после однократного и двукратного его введения // Бюлл. эксперим. биол. - 1980. - N2. - С.189-191.

94. Романов Ю.А., Семенова Н.В. Клеточное деление и изменения

- 124 -

продолжительности митоза в асцитной опухоли Эрлиха мышей после однократного воздействия кейлонсодержащим экстрактом из этой опухоли // Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 1982. -N3. - С. 81-83.

95. Романов Ю.А., Рыбаков Б.П., Антохин А.И., Барышева В.П. Тканевоспецифическая ингибиция клеточной пролиферации в асцитной опухоли Эрлиха // Бюлл. эксперим. биол. и мед.-1976. - Т.82,N12. - С.1474-1479.

96. Романова Л.К. Регуляция восстановительных процессов. - М.: Изд-во. Моск. Ун-та, 1984. - 209 с.

97. Роничевская Г.М., Зверева Л.Н. Некоторые биологические и химические свойства кейлоноподобных протеогликанов, выде-енных из нормальных и опухолевых клеток: Тез. докл. симп. " Кейлоны.Значение и роль в нормальных и патологических процессах". - 1981. - С.101-104.

98. Роничевская Г.М., Рыкова В.И., Зверева Л.Н. Биологическая активность кейлоноподобных протеогликанов в процессе онтогенеза // Онтогенез. - 1984. - Т.15,N5. - 0.529-534.

99. Сергеев A.B., Сейфулла Р. Д., Майский А.И. Молекулярные аспекты действия стероидных гормонов. - М.: Наука, 1971. -221 с.

100. Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М. Регенерация печени у млекопитающих. - Л.: Медицина, 1966. - 205 с.

101. Спирин A.C. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот // Биохимия. - 1958. -

Т.23,вып.4. - С.656-658.

* 102. Третьякова H.H. Биологическая активность эпидермальных кей-лонов в присутствии сыворотки крови больных псориазом // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1984. - N6. - С.754-755.

- 125 -

103. Трудолюбова М.Г. Количественное определение РНК и ДНК в субклеточных фракциях клеток животных // Современные методы в биохимии. - М.: Наука, - 1974. - С.338-343.

104. Туманишвили Г.Д., Гогсадзе Л.А. Внутриклеточная локализация рост-стимулирующих веществ: Тез. докл. симп." Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах".

- М. - 1981. - С. 27-35.

105. Туманишвили Г.Д., Колова Н.В., Саламатина Н.В. 0 теории внутритканевой регенерации скорости размножения клеток // Журн. общ. биол. - 1968. - Т.29. - С.711-718.

106. Халявкин A.B. Тканеспецифические ингибиторы и стимуляторы: кейлоны, иммуноглобулины и -фетопротеины: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М., 1983. - С. 78.

107. Хлопин Н.Г. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии. - Л.: Изд-во АН СССР, 1946. - 632 с.

108. Чекулаева Л. И., Кетлинский С.А., Окулов В.Б. Особенности влияния кейлонов печени крыс на пролиферацию клеток печени

в различные сроки после частичной гепатэктомии // Цитология.

- 1978. - N4. - С.436-440.

109. Шерешевская Ц.М. Влияние кортизона на синтез и качественный состав нуклеиновых кислот, фосфолипидов и фосфопротеинов в тканях печени животных разного возраста // Пробл. возр. фи-зиол. и биохимии. - Киев: Наук, думка, 1962. - С.95-104.

110. Элбакидзе Г.М. Внутритканевой контроль пролиферации и внутритканевой контроль метаболизма. Концепция комутона: Тез. докл. IV Международного симпозиума по кейлонам. - М., 1983.

- С. 37-41.

111. Яковлев А.Ю. Моделирование гуморальной регуляции клеточной пролиферации в тканях взрослых животных // Цитология. -

1972. - Т. 14,N6. - С.685.

112. Ямскова В.Н. Мембранные эффекты некоторых кейлонов: Тез. докл. оимп. " Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах". - М., 1981. - С.685.

113. Allen J.С., Smith С.J., Curry М.С., Gaugas J.M. Identification of a thymic inhibitor ("chalón") of lymphocite transformation as a spermine complex // Nature. - 1977. -V.267. - P.623-625.

114. Attallach A.M., Houck J.C. Tentative mechanism of lymphocite chalone action // Exp. Cell Res. - 1977. - V.105.

- P.137-141.

115. Attallah A.M., Houck J.C. Limphocyte chalone // In: Chalones / Ed. J.Houck. - New York, 1976. - P.355-380.

116. Baserga R. Biochemistry of the cell cycle: a review // Cell Tiss. Kinet. - 1968. - V.l. - P.167-191.

117. Balazs A., Rappay Gy. DNA dynamics in rat granulopoiesis studied by cytophotometry // Nature. - 1968. - V.217. - P. 166-168.

118. Barfod N.M. Flow microfluorometric estimation of G-l and G-2 chalone inhibition of the JB-1 tumour cell cycle in vitro // Exp. Cell Res. - 1977. - V.110,N1. - P.225-236.

119. Bishai J.S.M., Moscarello M.A., Ritchie A.C. Dimethyl ben-zanthracene binding to epidermal chalone // Nature. - 1971.

- V.232,N5306. - P.114-116.

120. Bjerkness R.,Iversen O.N. Antichalone. A theoretical treatment of the possible role of antichalone in the growth control system // Acta path. Microbiol. Scand. - 1974. -

Y.248. - P.33-48.

121. Bombik B.M., Burg-er M.M. cAMP and the cycle: inhibition of

growth stimulation // Exp. Cell Res. - 1973. - V.80. - P. 88-94.

122. Brugal G. Effects of adult intestine and liver extracts on the mitotic activity of ^responding- embryonic tissues of Pleurodeles Waltlii Michan // Cell Tiss. Kinet. - 1973. -V.6. - P.519-524.

123. Brugal G., Pelmont J. Existence of two chalone-like substances in intestinal extract from the adult newt, inhibiting embryonic intestinal cell proliferation // Cell Tiss. Kinet. - 1975. V.8. - P.171-187.

124. Bucher N.L<R. Regeneration of mammalian liver // Int. Rev. Cytol. - 1953. - V.15. - P.245-291.

125. Bullough W.5. Mitotic and fanctional homeostasis: aspecula-tive review // Cancer. Res. - 1955. - V.25,N10. - P.1683 -1727.

125. Bullough W.S. The chalones : A review // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. - V.38. - P.5-16.

127. Builough W.S. Mitotic control in adult mammalian tissues // Biol. Rev. - 1975. - V.50. - P.99-127.

128. Builough W.S. Chalone control mechanisms // Life Sci. -1975. - V.15. - P.323-330.

129. Bullough W.S., Deol J.U.R. Chalone control of mitotic activity in eccrine sweat glanda // Brit. J. Dermatol. -1972. - V.86. - P.586-592.

130. Bullough W.S., Hevett C.L., Laurence E.B. The epidermal chalone: a preliminary attempt at isolation // Exp. Cell Res. - 1964. - V.36,N1. - P.192-200.

131. Bullough W.S., Laurence E.B. The control of the mitotic activity in the mouse // Proc. Roy. Soc. - 1960. - V.151.

- P.517 -535.

132. Bullough W.S., Laurence E.B. Mitotic control by internal secretion: the role of the chalone-adrenalin complex // Exp. Cell Res. - 1964. - V.33,N1-2. - P.176-194.

133. Bullough W.S., Laurence E.B. Duration epidermal mitosis in vitro. Effect of the chalone-adrenal in complex and of energy production // Exp. Cell Res. - 1964. - V.35. - P.629-641.

k 134. Bullough W.S., Laurence E.B. The diurnal cycle in epidermal mitotic duration and relation to chalone and adrenalin // Exp. Cell Pes. - 1966. - V.43. - P.343-350.

135. Bullough W.S., Laurence E.B. Epidermal chalone and mitotic control in the Vx2 epidermal tumor // Nature. - 1968. -Y.220. - P.134-135.

136. Builough W.S., Laurence E.B. Melanocyte chalone and mitotic control in melanomata // Nature. - 1968. - V.110. - P. 137-138.

137. Bullough W.S., Laurence E.B. The role of glucocorticoid hormones in the control of epidermal mitosis // Cell Tiss. Kinet. - 1968. - V.l. - P.5-10.

138. Builough W.S., Laurence E.B. Chalone control of mitotic activity in sebaceous glands // Cell Tiss. Kinet. - 1970.

- V.3. - P.291-300.

139. Bullough W.S., Rytomaa T. Mitotic homeostasis // Nature. -1965. - V.205. - P.573-578.

140. Burger M.M., Bombik M., Breckenridge B., Sheppard J.R. Growth control and cyclic alterations of cyclic AMP in the cell cycle // Nature New Biol. - 1972. - V.293. - P.161-163.

141. Burns E.R., Tannock T.F. On the existence of a Go-phase in the cell cycle // Cell Tiss. Kinet. - 1970. - V.3. - P.

321-334.

142. Cairnie A.B., Lamerton L.F., Steel G.G. Cell proliferation studies in the intestinal epithelium of the rat. I. Determination of the kinetic parameters // Exp. Cell Res. - V. 39. - P.528-538.

143. Chopra D.P. Regulation of mitosis in the embrionic kidney (Xenopus laevis ) by kidney growth inhibitor ( chalone ), // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. - V.38. - P.189-195.

144. Cohen S., Carpenter G. Human epidermal growth factor:isolation and biological properties // Proc. Nat. Acad. Sci. -1975 - V.72. - P.1317-1321.

145. De Maertelaer V., Galand P. Some properties of a "Go" model of the cell cycle // Cell Tiss. Kinet. - 1975. - V.8. - P. 11-22.

146. Deschamps G., Verly W. The hepatic chalone 11. chetmical and biological properties of the rabbit liver chalone // Biomedicine. - 1975. - V.22. - P.195-208.

147. Dewey D.L. The melanocyte chalone // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. - Y.38. - P.213-216.

148. Dexter T.M., White H. Growth without inflation // Nature. -1990. - V.24. - P.380-381.

149. Elgo'o K. Chalone inhibition of cellular proliferation // J. Invest. Derm. - 1972. - V.59. - P.81-83.

150. Elgjo K. Epidermal chalone. Cell cycle specificity of two epidermal growth inhibitors // Nat. Cancer Inst. Monogr. -1973. - V.38. - P.71-76.

151. Elgjo K. Epidermal chalone and cyclic AMP: an in vivo study // J. Invest. Derm. - 1975. - V.64. - P.14-18.

152. Elgj'o K. 3 Clausen O.P.F., Thornd E. Epidermis extract

- 130.-

(chalone ) inhibit cell flux at the Gl-S; SI- G2 and G2-M transitions in mouse epidermis // Cell Tiss. Kinet. - 1981.

- V.14. - P.21 -29.

153. Elgjo K. Devik F. Growth regulation in X-irradiated mouse skin. The possible role of chalones // Int. J. Radiat. Biol.

- 1978. - V. 34, NE. - P.119-127.

154. Elgjo K., Reichelt K.L., Hennings H., Michael D., Yyspa S.H. Purified epidermal pentapetide inhibits proliferation and enhances terminal differentiation in cultured mouse epider-mall cell // J. Invest. Dermatol. - 1986. - V.87. - P. 555-558.

155. Evans L.S., Vant Hof J. Cell arrest in G2 in root meristems: a control factor from the cotyledone // Exp. Cell Res. - 1969. - V.82. - P.471-473.

155. Freed J.J., Sorf S. Reversible inhibition of cell multiplication by a small class of liver proteins // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1966. - V.22. - P.1-5.

157. Gelfant S. Initiation of mitosis in relation to the cell division cycle // Exp. Cell Res. - 1962. - V.26. - P. 395-403.

158. Gelfant S. A new concept of tissue and tumor cell proliferation // Cancer Res. - 1977. - V.37. - P.3845-3862.

159. Gospodorowicz D., Moran E.G., Optimal conditions for the study of growth control in BALB/c 3T3 fibroblasts // Exp. Cell Res. - 1975. - V.90. - P.279-284.

160. Graham G. T., Wright E.G., Hewick R. Identification arid characterisation of an inhibitor of haemopoietic stem cell proliferation // Nature. - 1990. - V.344. - P.442-444.

161. Hall P.A., Levison D.A., Wright N. A. Assessment of Cell

- 131 -

Proliferation in Clinical Practical. - Sringer-Verlag. -London. Limited. - 1992. - 210 p.

Harris H., Watkins J.F. Hybrid cells derived from mouse and man: artificial heterokaryons of mammalian cells from different species // Nature. - 1965. - V.205. - P.640-646. Harris A.W. Differentiated function express by cultured mouse lymphoma cells: 1. Specificity and kinetics of cell responses to corticosteroids // Exp. Cell Res. - 1970. -V.60. - P.348- 353.

Hartwell L.H., Mortimer R.K., Culotti J., Culloti M. Genetic control of the cell division cycle in yeast. V. Genetic analisis of cdc mutants // Genetics. - 1973. - V.74. - P. 267-286.

Higgins G.M., Anderson R.M. Experimental pathology of the liver restoration of the liver of white rat following partial surge removal // Arch. Path. - 1931. - V.12. -P. ,186-188.

166. Hondius Boldingh W., Laurence E.B. Extraction, purification and priliminary characterisation of the epidermal chalone: A.tissue specific mitotic inhibitor obtain from vertebrate skin // Europ. J. Biochem. - 1968. - V.5. - P.191-198.

167. Houck J.C., Hennings H. Chalones: specific endogenous mitotic inhibitors // Fed. Europ. Biochem. Soc. Letters. -1973. - Y.32. - P.1-8.

168. Iversen O.H. The regulation of cell members in epidermis. A cybernetic point of view // Acta path, microbiol. Scand. -1960. - V.148. - Suppl. - P.91-96.

169. Iversen O.H. Summary ( to the First Internat. Chalone Conference ) // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. - V.38. - P.

}

163.

i

164.

165.

225-230.

170. Iversen O.H. Effect of epidermal chalone on human epidermal mitotic activity in vitro // Nature. - 1968. - V.219. - P.75.

171. Kiger N., Florentin I., Mathi G. Some effect of a partially purified lymphocyte-inhibiting factor from calf thymus // Transplantation. - 1972. - V.14. - P.448-453.

172. Laiho M., De Caprio J.A., Ludlow J.W., Livingston D.M.,

A

Massague J. Growth inhibition by TGF- linked to suppression of retinoblastoma protein phosphorylation // Cell. -1990. - V.62. - P.175-185.

173. Lajtha L.G. On the concept of the cell cycle // J. Cell Comp. Physiol. - 1963. - V.62,Suppl.l. - P.143-145.

174. Lajtha L.G. Oytokinetics and regulation of progenitor cells // J. Cell Physiol. - 1966. - V.67,Suppl.1. - P. 133 -148.

175. Lajtha L.G. Schofield R. On the problem of differentiation in haemopoiesis // Differentiation. - 1974.- V.2 - P.313-320.

176. Laurence E.B., Spargo D.J., Thornley A.L. Cell proliferation kinetics of epidermis and sebaceous glands in relation to chalone action // Cell Tiss. Kinet. - 1979. - V.12,N6. -P. 615- 633.

177. Leblond C.P. Classification of cell populations on the basis of their proliferative behavior // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1964. - V.14. - P.119-150.

178. Lenfant M., Garcia-Giralt E., Thernas M., Giusto L.D. Purification of immunosuppresive factors extracted from boirne spleen ( lymphoid chalone ) // Cell Tiss. Kinet. - 1978. -

ioo

V.11.N5. - P.455-465.

179. Lesher S., Fry R.J.M., Kohn H.J. Age and the generation time of the muse duodenal epithelial cell // Exp. Cell Res.

- 1961. - V.24. - P. 334-339.

180. Ling Yi-he., Zhao Chao-shen., Hu bin. Влияние 10- оксикамп-тотецина на белки хроматина, синтезируемые в клетках гепа-томы мыши // Чжунго яолисюэбао, Acta Pharmacol sin. - 1986.

- V.7,N3. - P.285-288.

181. Lord B.I. The assay of cell proliferation inhibitors // In. Chalones. - New York.: Ed. J. C. Houck., 1976. - P.97-139.

182. Lord В.I., Testa N.G., Wright G.G., Banerjee R.K. Lack of effect of a granulocyte proliferation inhibitor on their commited precursor cells // Biomedicine. - 1977. - V.26. -P.163-169.

183. Loury 0., Rosenbrouph N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem.

- 1951. - V.193. - P.265-275.

184. Malamud D. DNA synthesis and the mitotic cycle in frog kidney cells cultivated in vitro // Exp. Cell Res. - 1967.

- V.45. - P.277-280.

185. Marks F. A tissue-specific factor inhibiting DNA synthesis in mouse epidermis // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. -V.38. - P.79-90.

186. Marks F. The epidermal chalones // In. Chalones. - New York.: Ed. J. S. Houck., 1976. - P.173-227.

187. Marks F., Bertsh S., Schweizer J. Homeostatic regulation of epidermal cell proliferation // Bull. Cancer. - 1978. -V.65,N2. - P.207-222.

188. Mitchison J.M. The biology of the cell cycle .-Cambridge:

-(Oil _

- XCrtt ~

University Press, 1971. - P.313.

189. Mohr U., Althoff J., Kinzel V., Suss R., Volurn H. Melanoma regression indused by "chalone": a new tumour inhibiting: principle acting1 in vivo // Nature. - 1968. - V.220. - P. 138-139.

190. Morley C.G.S. Humoral regulation of liver regeneration and tissue growth // Perspect. Biol. Med. - 1974. - V.17. -

P.411-428.

191. Moses H.L., Yang E.Y., Pietenpol J.A. TGF- stimulator and inhibitor of cell proliferation: new mechanistic insights // Cell. 1990. - V.63. - P.245-247.

192. Moses H.L. Growth inhibition by TGF- // J. Cell. Biochem.

- 1992. - Suppl.16A. - P.6.

193. Nose K., Shibanuma M., Kuroki T. Isolation of a gene sequence encoding leuzipper structure induced by TGF- and other growth factors // J. Cell. Biochem. - 1991. - Suppl. 16B. - P.162.

194. Olsson L., Claesson M.H. Studies on the regulation of lymphocyte production in the murine thymus and some effects of a crude thymus extract // Cell Tiss. Kinet. - 1975. - V.8.

- P.491-502.

195. Onda H., Yoshikava J. Presence of hepatocyte-specific mitotic inhibitor in normal rat plasma // Gann. - 1973. - V.64.

- P.139-149.

195. Onda H., Yoshikava J. 1-acid-glycoprotein as a hepatocyte-specific mitosis-inhibiting protein in regenerating rat liver // Gann. - 1975. - V.66. - P.227-235. 197. Pardee A.B., Dubrov R., Hamlin J.L., Kletzien R.F. Animal cell cycle // Ann. Rev. Biochem. - 1978. - V.47. - P.

715-750.

198. Parkinson E.K., Balman A. Chalones revisited - a possible role for transforming' growth factor beta in tumour promotion // Carcinogenesis. - 1990. - V.U. - P. 195-198.

199. Paukovits W.R., Paukovits I.E. Mechanism of action of granulopoiesis inhibiting faktor ( chalone ). I. Evidence for a receptor protein on bone marrow cell // Exp. Path. -1975. - V.10,N 5/6. - P.348-352.

200. Paukovits W.R., Hinterberger W. Molecular weight and some chemical properties of the granulocyte chalone // Blut. -1978. - V.37,N1. - P.7-11.

201. Powelek J., Haloban R., Christie G. Melanoma cells which reguire cyclic AMP for growth // Nature. - 1975. - V.258.

- P.539-540.

202. Radley J.M., Hodgson G.S., Koschel K.W. Properties of Go cells: variations in the proliferative response following1 isoprenaline // Cell Tiss. Kinet. - 1976. - V.9. - P.371-377.

203. Rao P.N., Hittelman W.N., Wilson B.A. Mammalian cell fusion. VI. Regulation of mitosis in binucleate HeLa cells // Exp. Cell Res. - 1975. - V.90. - P.40-45.

204. Rchibach R., Iversen O.H., Riede U.N., Sandritter W. Effects of cellophane tare stripping of mouse skin on epidermal growth regulators /chalones/ // Beitr. Path. Anat.

- 1977. - V.160. - P.175-186.

205. Reissmann K.R., Udupa K.B. Effect of erythropoetin on proliferation of erythropoietin-responsive cells // Cell Tiss. Kinet. - 19 . - V.5. - P.481-489.

206. Roberts A.B., Sporn M.B. Transforming growth factor /'/ Adv.

- 136 -

Cancer. Res. - 1988. - V.51. - P.107-145.

207. Rytomaa T. Chalone of the granulocyte system // Nat. Cancer Inst. Monogr. - 1973. - V.38. - P.143-146.

208. Rytomaa T.f Kiviniemi K. Chloroma regression induced by the granulocyte chalone // Nature. - 1969. - V.222. - P.995-996.

209. Rytomaa T., Kiviniemi K. Regression of generelized leukemia in rat induced by the granulocyte chalone // Eur. J. Cancer.

- 1970. - V.6. - P.401-410.

210. Rytomaa T., Vilpo J.A., Levanto A., Jones W.A. Effect of granulocytic chalone on acute and chronic granulocyte leukaemia in man, // Scand. J. Haemat.

- 1976. - V.27. - P.5-28.

211. Saetren H.A. A principle of auto-regulation of growth. Production of organ specific mitosis-inhibitors in kidney and liver // Exp. Cell. Res. - 1956. - V.ll. - P.229-232.

212. Schneider V.C., Hogeboom 6.H. Cytochemical studies of mammal ion tissues; isolation of cell components by differential centrifugation: rev. // Cancer. Res. - 1951. - V.ll, N1. - P.1-22.

213. Seith J.T. Comparison of the effects of epidermal chalone in young and aging mice // Cell Tiss. Kinet. - 1978. - V. 11. - P.433-440.

214. Short J., Brown R.F., Husakova A. Induction of desoxyribo-nucleic acid synthesis in the liver of the intact animal // J. Biol. Chem. -1972. - V.247. - P.1757-1766.

215. Simard A., Corneile L., Deschamps Y.V., Verly W. Inhibition of cell proliferation in the livers of hepatectomized rats by a rabbit hepatic chalone // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, -1974 - V.71. - P.1763-1766.

216. Smith T.A., Martin L. Do cell cycle ? // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, - 1973. - V.70. - P.1263-1267.

217. Spielhoff R. The specificity of the regulation of organ growth. The effect of tissue extracts on the incorporation of tritiated thymidine in liver and kidney // Proc. Soc. Exp. Biol., New York. - 1971. - V.138. - P.43-46.

218. Stich H.F., Florian M.L. The presence of mitosis inhibitor in the serum and liver of adult rats // Cand. J. Biochem. -1958. - V.36. - P.855-869.

219. Stillwell E.F., Cone C.M., Cone C.D. Stimulation of DNA synthesis in CSN neurones by sustained depolarisation // Nature New Biol. - 1973. - V.246. - P.110-111.

220. Szent-Gyorgyi A. Cell division and cancer // Scince. - 1965. V.149. - P.34-37.

221. Szpirer C. Reactivation of chick erytrocyte nuclei in hete-rokaryons with rat hepatoma cells // Exp. Cell Res. - 1974. - V.83. - P.47-54.

222. Temin H. Stimulation by serum of multiplication of stationary chicken cells // J. Cell Physiol. - 1971. V.78. - P. 161-170.

223. Tiegel E., Richter K.H., Marks F. Cell cycle specifity and reversibility of the inhibitory effect of epidermal G-l-chalone on DNA synthesis in partially synchronized RTE-2 keratinocytes in vitro // Exp. Cell Res. - 1989. - V.182, N2. - P.297 - 306.

224. Tisdale M.J., Phillips B.J. The relationship between the growth characteristics of somatic cell hybrids and their levels of cAMP and activities of adenylate cyclase and cAMP phosphodiesterase // Exp. Cell Res. - 1976. - V.99. - P.

63-71.

225. Yerly W.G. The hepatic chalone // In: Nat. Cancer. Inst. Monogr. Ser. - 1973. - V.38. - P.175-184.

226. Verly W.G., Deschamps V., Pushathadam J.} Desrosiers M. The hepatic chalone. Assay method for the hormone and purification of the rabbit liver chalone // Canad. J. Biochem. -1971. - V.49. - P.1376-1388.

227. Volm M., Kinzel V., Mohr U., Süss P. Inactivation of tissue specific inhibitors by a carcinogen (diethylnitros-amin) // Experientia (Basel). - 1969. - V.25. - P.68-69.

223. Voorhees J.J., Duell E.A., Bass L.J., Harrell E.R. Role of cyclic AMP in the control of epidermal1 cell growth and differentiation // Nat. Cancer. Inst. Monogr. - 1973. - V. 38. - P.47- 59.

229. Weiss P., Kavanau I.Z. A model of growth and growth control in mathematical terms // J. Gen. Physiol. 1957. - V.41. -P.1-47.

230. Wheldon T.E., Gray W.M., Kirk J., Orr J.S. Mitotic autoregulation of populations of normal and malignant cells // Nature. - 1970. - V.226. - P.574.

231. Whitfield J.F., McManus J.P., Boynton A.L., Gillan D.J. Concanavalin A and the inhibition of thymic lymphoblast DNA synthesis and proliferation by a calcium-dependent increase in cyclic GMP level // J. Cell Physiol. - 1974. - V.84. -P. 445-458.