Белки ядер и хроматина клеток в возрастном развитии животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, доктор биологических наук Клименко, Анатолий Иванович

• Клименко, Анатолий Иванович
• доктор биологических наук
• 1982

Оглавление диссертации доктор биологических наук Клименко, Анатолий Иванович

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ГИСТОНЫ И НЕГИСТОНОВЫЕ БЕЛКИ: ИХ РОЛЬ В СТРУКТУРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ И ФУНКЦИОНИРОВАНИИ ХРОМАТИНА (обзор литературы).

1.1. Гистоны: влияние на конформационные и функциональные свойства хроматина

1.2. Негистоновые белки хроматина: влияние на активность генома.

1.3. О некоторых механизмах регуляции гистонами и негис-тоновыми белками структурных и функциональных свойств генетического аппарата

Глава 2. ПЛАН СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Глава 3. ВОЗРАСТ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ГИСТОНОВ И НЕ

ГИСТОНОВЫХ БЕЛКОВ ЯИЕР КЛЕТОК ПЕЧЕНИ БЕЛЫХ КРЫС

3.1. Белок-белковые и белок-нулеиновые соотношения в ядрах клеток печени интактных крыс в постнатальном онтогенезе.

3.2. Влияние гормональных факторов на белок-белковые и белок-нуклеиновые соотношения в ядрах клеток печени крыс разного возраста

3.2.1. Белок-нуклеиновые соотношения в ядрах клеток печени крыс разного возраста при индукции гидрокортизоном.

3.2.2. Влияние тироксина на белок-белковые и белок-нуклеиновые соотношения в ядрах клеток печени крыс разного возраста

3.3. Влияние периодического сдерживающего рост питания на белок-нуклеиновые соотношения в ядрах клеток печени крыс разного возраста

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Белки ядер и хроматина клеток в возрастном развитии животных»

Для выяснения основополагающих механизмов функционирования организма эукариотов первостепенное значение имеет исследование процессов жизнедеятельности клеток на молекулярном уровне.

Из постановления ЦК КПСС и Совета Министров СССР от 19 апреля 1974 года "О мерах по ускорению развития молекулярной биологии и молекулярной генетики и использовании их достижений в народном хозяйстве", а также решений ХХУТ съезда КПСС вытекает необходимость интенсивного развития молекулярной биологии, ее ведущая роль в успешном развитии как теоретических, фундаментальных проблем современной биологической науки на ее цитобиологическом уровне, так и применение результатов этих исследований в прикладном аспекте.

Весьма важное значение имеют молекулярно-биологические подходы к разработке проблем возрастной биологии и геронтологии.

В настоящее время кардинальным вопросом возрастной биохимии и геронтологии, привлекающим внимание многих исследователей, является выяснение характера возрастных изменений в генетическом аппарате клетки и лежащих в их основе процессов.

Впервые ведущее значение для процессов старения организма изменений генетического аппарата клетки было постулировано В.Н.Никитиным £74, 75j при анализе цитобиохимических аспектов онтогенеза высших животных. На этой основе им была переработана

Использованные сокращения: ДНК-дезоксирибонуклеиновая кислота; РНК - рибонуклеиновая кислота; иРНК - информационная РНК; рРНК - рибосомальная РНК; ГО - гистоны общие; ВГ - внутринуклео-сомные гистоны; НТВ - негистоновые белки; АТФ - аденозинтрифосфор-ная кислота; цАМФ - циклический аденозин 3*5'-монофосфат; цШФ -циклический гуанозин 3,'5'-монофосфат; ПААГ-полиакриламидный гель. выдвинутая А.Б.Нагорным L 68, 69] теория затухающего обновления цитоплазмы как причина старения.

Основополагающая роль изменений в геноме клеток, как одна из важнейших предпосылок старения, впоследствии была подчеркнута в ряде других теорий старения, выдвинутых Сциллардом С 5623 , Сайнексом С 525] , Стрелером С 557 ] , Комфортом L 53 ] , Куртисом [224 ] , Фролькисом В.Б. CII8D , Бердышевым Г.Д. LI4D , Виленчи-ком М.М.[28]и другими геронтологами.

Теоретические предпосылки в этой области, в основном, можно свести к двум концепциям: а/ повреждение надмолекулярных комплексов, образующих генетический аппарат клетки, вследствие воздействия на них как экзогенных, так и эндогенных факторов; б/ изменение регуляции функций генома, отражающее заложенную в нем программу индивидуального развития, охватывающую не только период формирования организма, но и его старение. Обе эти концепции не следует считать взаимоисключающими. Выяснение "удельного веса" каждой из них в биохимизме онтогенеза позволит полноценнее подойти к поискам путей управления возрастным развитием организма. Работы в этом направлении имеют не только теоретическое, но и практическое значение.

Следует отметить, что фронт исследований молекулярных основ функционирования клеток и, в частности, их генетического аппарата, очень неравномерен для отдельных этапов онтогенетического развития высших животных. В этом отношении подробнее изучен период пренатального онтогенеза животных и ранние этапы их постната-льного развития [71, 72] . Однако выяснение фундаментальных закономерностей онтогенетического развития животных, выбор эффективных путей и способов целенаправленного воздействия на ход возрастного развития, на процессы старения и долголетия невозможны без тщательного исследования всех периодов онтогенеза, в том числе и постнатального.

Существуют разные экспериментальные подходы к изучению возрастных изменений генома, их причин и механизмов регуляции. Одним из наиболее перспективных направлений является исследование состояния основных видов белков, принимающих участие в структурной организации и регуляции функциональной активности генетического аппарата клеток.

Согласно современным представлениям С. 30, 114, 255] , струк-турно-конформационные свойства генетического аппарата клеток и его функционирование в большой мере зависят от входящих в состав этого аппарата белковых компонентов - гистонов и НГБ, от количественных сдвигов и модификаций молекул этих белков. Поэтому всестороннее изучение возрастной динамики изменений гистонов и НГБ на разных этапах постнатального онтогенеза животных может дать важную информацию о возрастных особенностях регуляции этими белками структурной организации и функциональной активности клеточного генома.

В связи с этим, основной целью нашей работы было исследование в процессе постнатального развития животных главных белковых компонентов хроматинового комплекса - гистонов и НГБ, их количественных изменений в ядре и хроматине клеток печени, химических модификаций и метаболизма, а также изучение на фоне этих изменений возрастных особенностей функционирования клеточного генома и некоторых из тех механизмов, посредством которых осуществляется, согласно современным представлениям, регуляция активности генетического аппарата этими белками.

Конкретные задачи наших исследований сводились к следующему: Т/. Изучить соотношения между гистонами и НГБ, а также между

- 8 этими белками и нуклеиновыми кислотами в ядрах клеток печени на разных этапах постнатального онтогенеза животных, при различных эндокринных сдвигах в их организме и в условиях периодического сдерживающего рост питания /диета Мак Кея/, являющегося эффективным методом значительного продления жизни лабораторных животных.

2/. Исследовать влияние различных факторов /эндокринные сдвиги в организме, экспериментальное сдерживание роста животных с помощью диеты Мак Кея/ на гетерогенность гистонов и НЕБ, выделенных из цельных ядер клеток печени и непосредственно из хрома-тинового комплекса, а также из различных по степени транскрипционной активности фракций последнего /активный и низкоактивный хроматин/ на разных этапах постнатального онтогенеза животных.

3/. Изучить возрастные особенности соотносительного метаболизма гистонов и КГБ в ядрах клеток печени и в изолированном хроматине.

4/. Выяснить возрастные особенности модификаций гистонов и НГБ - их ацетилирование, метилирование и фосфорилирование.

5/. Провести исследование активности генома у животных разного возраста и проанализировать вероятную роль количественных изменений и модификаций гистонов и НГБ в регуляции транскрипции ДНК и структурной организации хроматинового комплекса в постната-льном онтогенезе животных и в условиях периодического сдерживающего рост питания.

Таким образом, ставится задача получить на разных этапах постнатального развития животных информацию о структурно-метаболических особенностях гистонов и негистоновых белков и их роли в структурной организации и функциональной активности клеточного генома при старении животных.

- 9

В результате экспериментального решения поставленных в работе задач установлено, что в постнатальном онтогенезе белых крыс основные белковые компоненты хроматинового комплекса клеток печени - гистоны и НГБ - претерпевают специфические для каждого этапа возрастного развития животных изменения в содержании, метаболизме и ковалентных модификациях. На основании данных о возрастной специфике этих изменений, а также данных о синтезе РНК ядрами и хроматином клеток печени животных разного возраста выдвигается предположение о повышении в постнатальном онтогенезе структуризации хроматинового комплекса клеток печени, являющейся одним из факторов торможения активности генома при старении животных.

Установлено постоянство числа фракций гистонов в ядрах и хроматине клеток печени на протяжении постнатального развития животных и уменьшение гетерогенности хромосомальных НГБ в старости. Показано увеличение соотношения гистоны/ДНК и понижение соотношения гистоны/НГБ в ядрах клеток печени, приуроченное к периоду завершения полового созревания животных, к концу которого происходит резкое падение матричной активности ядер и хроматина.

Найдено, что во фракции активного хроматина возрастные различия в содержании отдельных фракций гистонов, в том числе и HI, выражены менее четко, чем в низкоактивном. Обнаруженный нами факт увеличения содержания богатых лизином гистонов HI в низкоактивном хроматине во второй половине постнатального онтогенеза животных свидетельствует о повышении возможности образования более компактной структуры хроматина при старении организма. С этим согласуется и более высокое содержание низкоактивного хроматина в печени животных в поздние периоды их постнатального развития.

Установлены количественные различия в содержании отдельных фракций гистонов в ядрах и хроматине: относительное содержание

- 10 одной из субфракций гистонов Н2А в ядрах с возрастом животных увеличивается, а в хроматине, наоборот, понижается; содержание гистонов Н2В в ядрах клеток печени нарастает у старых животных, а в хроматине оно стабильно на протяжении всего постнатального развития. Эти данные свидетельствуют о наличии в клетках печени вне-хромосомного пула гистоновых белков.

Показано, что при изменении в организме условияй регуляции синтеза белков /введение тироксина и использование периодического сдерживающего рост питания/ фракция низкоактивного хроматина, обычно обедненная НГБ, значительно обогащается ими у животных всех возрастных групп, за исключением старых. Повышение содержания НГБ в низкоактивном хроматине клеток печени под воздействием тироксина и диеты Мак Кея может рассматриваться как свидетельство декомпактизации хроматина в этих условиях.

Выявлено разнообразие возрастных изменений модификаций /фос-форилирование, ацетилирование, метилирование/ гистонов и НГБ и установлено, что они происходят на протяжении всего постнатального развития животных. При старении понижается интенсивность аце-тилирования суммарных гистонов ядер клеток печени. Установлено, что во все периоды постнатального развития наиболее интенсивно фосфорилируются богатые лизином гистоны HI по сравнению с другими фракциями гистонов и НГБ. При старении фосфорилирование глобулино-вых белков ядер повышается, а гистонов HI, наоборот, значительно падает. Возрастная динамика метилирования суммарных гистонов и НГБ сходна: при старении животных метилирование этих белков заметно усиливается, причем, для гистонов это происходит, в основном, за счет богатых аргинином гистонов НЗ, тогда как гистоны HI на всем протяжении постнатального развития животных не включают метальную метку.

Принимая во внимание тот факт, что ацетилирование и фосфори

- II лирование уменьшает положительный заряд гистонов и ослабляет их связь с ДНК, а при метилировании гистоновых белков прочность их связывания с ДНК усиливается, установленная нами возрастная специфика модификаций гистонов /понижение с возрастом животных фос-форилирования богатых лизином гистонов HI и ацетилирования суммарных гистонов, увеличение метилирования большинства фракций гистонов/ свидетельствует об усилении в постнатальном онтогенезе животных прочности связи между этими белками и ДНК. Это может быть одним из факторов, приводящих к повышению структуризации хромати-нового комплекса клеток печени и понижению его активности при старении животных.

Предпринятое нами исследование процесса обновления разных видов ядерных белков позволило получить новые данные об особенностях их метаболизма в ядрах и хроматине клеток печени животных разного возраста. Установлено, что гистоны и, особенно, НТВ обладают более высокой скоростью обновления в составе хроматинового комплекса, нежели в цельных ядрах у животных всех возрастных групп. Среди гистоновых белков выделена субфракция богатых лизином гистонов Н1а, уровень обновления которой превышает таковой других фракций гистонов и НГБ ядер и хроматина на всех этапах постнатального развития животных.

Установлено, что наиболее значительно матричная активность ядерного генома клеток печени понижается в период между 1-3 месяцами постнатального развития животных и в дальнейшем этот низкий уровень сохраняется без существенных изменений до глубокой старости.

Выявлены структурно-функциональные изменения генома при сдерживающем рост питании, которые позволили внести ясность в некоторые механизмы воздействия данного фактора на продолжительность жизни лабораторных животных. Ряд установленных нами фактов /резкое торможение синтеза иРНК ядрами клеток печени и исчезновение его возрастных особенностей, характерных для интактных животных, относительно высокий уровень синтеза рРНК во все периоды онтогенеза, резкое падение содержания гистонов HI в обеих фракциях хроматина, уменьшение относительного содержания ДНК и гистонов в ядрах; клеток печени взрослых животных с задержанным ростом/ показывают заметное сдерживание темпов старения животных диетой Мак Кея.

Таким образом, вся совокупность полученных в работе данных показывает, что происходящие в постнатальном онтогенезе изменения в содержании гистонов и НГБ, в уровне их модификации могут быть важным звеном в регуляции структурной организации и функциональной активности клеточного генома при старении животных. Констатируется, что одним из факторов, способствующих торможению синтеза

РЖ в печени при старении животных может быть усиление в процесо се возрастного развития структуризации хроматинвого комплекса, обусловленное увеличением относительно ДНК и НГБ гистоновых белков, понижением уровня фосфорилирования богатых лизином гистонов HI и ацетилирования суммарных гистоновых белков, а также нарастанием в постнатальном онтогенезе животных метилирования большинства фракций гистонов и НГБ.

Результаты проведенных исследований имеют важное значение для разработки фундаментальных проблем возрастного развития высших животных: молекулярных механизмов, регуляции функциональной активности генетического аппарата клеток на разных этапах онтогенеза и воздействия на его активность гормональных и алиментарных факторов.

Полученные данные являются экспериментальным подтверждением представлений о ведущей роли генетического аппарата клетки в старении организма, впервые постулированных в Харьковской школе он-тофизиологов и онтобиохимиков С 74] и являющихся в настоящее время основной предпосылкой многих теорий и гипотез возрастного развития животных.

Кроме решения актуальных вопросов, связанных с теоретическими проблемаш молекулярной биологии и биохимии возрастного развития, результаты данной работы имеют существенное значение и для практической геронтологии - они способствуют пониманию ряда основополагающих механизмов, обеспечивающих в конечном итоге значительное увеличение продолжительности жизни лабораторных животных, достигаемое с помощью периодического сдерживающего рост питания. Знание этих механизмов может сыграть важную роль для целенаправленного воздействия на продолжительность жизни высших животных и найти свой выход в геронтологическую практику.

Отдельные положения диссертационной работы отражены в руководстве "Основы геронтологии" /"Медицина", М., 1969/ и crf/bfcgrp ", 8c/[{j^e/7c4 1978/, а также внедрены в учебный процесс на биологическом факультете Харьковского госуниверситета.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Клименко, Анатолий Иванович

ВЫВОДЫ

1. Установлены специфические для каждого этапа постнатального онтогенеза белых крыс изменения в содержании, метаболизме и химических модификациях гистонов и НГБ ядер и хроматина клеток печени. На основании этих изменений, а также данных о динамике синтеза РНК ядрами и хроматином клеток печени выдвигается положение об усилении при старении животных структуризации хроматинового комплекса, являющейся одной из причин понижения функциональных свойств генетического аппарата в постнатальном онтогенезе.

2. Установлен двоякий характер возрастных изменений гистонов и НГБ в постнатальном онтогенезе: основные сдвиги в соотношении гистоны/НГБ/ДНК в ядрах клеток наблюдаются преимущественно в раннем онтогенезе животных /период полового созревания/ при малом изменении в период зрелости и старости, тогда как различные модификации этих белков /изменение уровня ацетилирования, метилирования и фосфорилирования/ происходят в течение всего постнатального развития животных, включая зрелый и старческий.

3. При старении животных в хроматине клеток печени общее содержание гистоновых белков увеличивается, а НГБ падает, что может способствовать повышению с возрастом животных компактизации хроматина и понижать его функциональную активность. В процессе постнатального развития соотношение негистоновые белки HMG/гистоны HI понижается за счет преимущественного накопления в печени лизинбогатых гистонов HI.

4. В ядрах клеток печени, в хроматине и его различных по транскрипционной активности фракциях при старении животных, различных гормональных воздействиях и сдерживающем рост питании не происходит сдвигов в наборе /спектре/ гистоновых белков, в то время каквЬоставе фракций НГБ происходят определенные изменения.

5. Установлены следующие изменения фракционного состава НГБ хроматина клеток печени: во все периоды постнатального развития кивотных низкоактивный хроматин характеризуется значительно меньшим числом фракций НГБ, чем активный; при старении животных число фракций НГБ в суммарном хроматине и его активной в матричном синтезе РНК. фракции снижается; под влиянием тироксина и в условиях одерживающего рост питания в низкоактивном хроматине печени животных всех возрастных групп, за исключением старых, значительно уве-шчивается набор НГБ, приближаясь к их количеству в активном хроматине этих же животных. Это свидетельствует о возможности декомпак-'изации хроматина при воздействии гормональных и диетических фак-'оров.

- 335

6. Установлено, что интенсивность метаболизма гистонов и, особенно, НГБ более высока в хроматиновом комплексе, чем в цельных ядрах. Наиболее интенсивно белки хроматина обмениваются у молодых животных. В составе гистоновых белков обнаружена субфракция богатых лизином гистонов Н1а,сдельная радиоактивность которой. превышает таковую других фракций гистонов и НГБ ядер и хроматина.

7. На основании различий в относительном содержании отдельных фракций гистонов в цельных ядрах и хроматине клеток печени животных разного возраста и неодинаковом уровне их метаболизма постулируется наличие внехромосомного пула гистоновых белков.

8. Установлены охватывающие все периоды постнатального онтогенеза животных изменения уровня модификации гистонов и НГБ, заключающиеся в увеличении с возрастом животных метилирования большинства фракций гистонов и НГБ, значительном понижении фосфорилирования богатых лизином гистонов HI и ацетилирования суммарных гистонов. Такая возрастная динамика модификации гистоновых белков может способствовать усилению прочности их связывания с ДНК, повышению компактизации хроматина и понижению его функциональной активности при старении животных.

9. Показано, что наряду с возрастными изменениями в содержании и модификации гистонов и НГБ, в ядрах и хроматине клеток печени при старении животных имеет место снижение синтеза РНК, происходящее наиболее выражено на ранних этапах возрастного развития /к концу периода полового созревания/ и сохраняющееся на низком уровне на протяжении дальнейшего постнатального онтогенеза. Предполагается, что в угнетении синтеза РНК в печени при старении животных преимущественную роль до окончания периода полового созревания играет нарастание в ядрах клеток печени содержания гисто

- 336 новых белков относительно ДНК и НГБ, тогда как на последующих этапах постнатального онтогенеза в торможение, генной активности вносят свой вклад также структурно-функциональные перестройки белков хроматина, возникающие вследствие их химических модификаций.

10. Б условиях периодического сдерживающего рост питания, способствующего значительному продлению жизни лабораторных животных, значительно тормозится свойственное интактным животным возрастное накопление в ядрах клеток печени ДНК, понижается содержание богатых лизином гистонов HI при высоком уровне их фосфорилирования, существенно сдерживается синтез цельными ядрами клеток печени иРНК, в то время как синтез рРНК достигает высокого уровни. Эти исследования показали возможность воздействия диетическими факторами на программу индивидуального развития организма эукарио-тов, на молекулярно-генетические механизмы, контролирующие процессы старения и долголетия. Специфические изменения синтеза различных фракций РНК ядрами клеток печени животных с задержанным ростом. могут быть одним из проявлений механизма продления жизни лабораторных животных с помощью периодического сдерживающего рост питания. Исследования показали важность и перспективность этой экспериментальной модели для изучения на молекулярном уровне процессов старения организма и механизмов продления жизни высших живот-шх.

Заключение

Подводя общий итог результатов исследований, изложенных в данном разделе нашей работы, можно констатировать, что понижение синтеза различных форм РНК у интактных животных в процессе их постнатального онтогензза определяется, по-видимому, рядом факторов, воздействующих в своей совокупности на генетический аппарат клетки. Как показали наши эксперименты, это может быть детерминировано накоплением относительно ДНК при возрастном развитии животных гистоновых белков, способствующих^ конечном итоге, образованию более жесткой структуры хроматинового комплекса клеток и уменьшению таким образом доли активно транскрибирующего хроматина, а также относительным уменьшением в ядрах клеток печени негистоновых белков, что может понижать в процессе постнатального онтогенеза возможность их депрессорного воздействия на геном.

Понижение с возрастом животных числа свободных фосфатных групп в ДНК хроматинового комплекса и повышение прочности комплексов отдельных фракций гистонов с ДНК, а также уменьшение в процессе постнатального развития животных интенсивности ацетилирования гистоновых белков и фосфорилирования лизинбогатых гистонов HI, или же усиления метилирования ряда хромосомальных белков. в свою очередь также могут оказывать негативное воздействие на функциональную активность генома клеток с возрастом животных.

Все эти факты показывают, что понижение в постнатальном он

- 303 тогенезе животных синтеза РНК в большой мере зависит от многих причин и что действие подавляющего их большинства реализуется на уровне хроматинового комплекса клетки.

Вместе с тем, затухание генетической активности ДНК в процессе постнатального онтогенеза животных не носит необратимый харак -тер. Как показывают опыты, проведенные нами на лабораторных животных с задержанным ростом (влияние периодического калорийно недостаточного питания), активностью клеточного генома можно управлять экспериментальным путем, направленно воздействовать на него. Эксперименты на этих животных показали также, что значительная задержка роста животных с помощью примененного нами питания может быть результатом значительного сдерживания в их организме синтеза иРНК.

В.то же время, наблюдающийся в этих условиях высокий уровень синтеза рРНК, а также быстрая нормализация матричной активности изолированных ядер клеток печени после кратковременного откорла животных со сдержанным ростом, свидетельствуют о высокой потенции белоксинтезирующего аппарата клеток печени этих животных.

Не исключено, что значительные колебания в активности генетического аппарата клеток у животных со сдержанным ростом и при их откорме, также как и изменения в других системах организма этих животных (например, установленные В.Н. Никитиным и сотр. Г.78J изменения в эндокринной ситуации), устраняют присущие животным ряд обусловленных возрастом негативных факторов в функционировании генома их клеток, что и детерминирует в конечном итоге значительное пролонгирование жизни этих животных. Детальная расшифровка этих фактонов, определяющих возрастные особенности функционирования генетического аппарата клеток на разных этапах постнатального развития животных, дальнейшее выяснение путей управления активностью генома и механизмов, лежащих в основе его работы и способствующих нормальному функционированию даже в период глубокой старости - представляется одной из важнейших задач молекулярной биологии онтогенеза и дальнейших исследований.

- 305 -ГЛАВА 8

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Клименко, Анатолий Иванович, 1982 год

1. Алов И.А. Очерки физиологии митотического деления клетки. М.: . Медицина, 1964, 302 с.

2. Аргутинская С.В., Кнорре В.Л., Ефимов Л.Ю., Селятицкая В.Г., Салганик Р.И. Изменение матричной активности и химического состава хроматина печени крыс при длительной индукции гидро. кортизоном. Мол. биол., 1973, т. 7, $6, с. 802-809.

3. Арион В.Я., Мантьева В.Л., Георгиев Г.П. Разделение метаболически стабильной и лабильной РНК ядер животных клеток. Молекулярная биология. 1967, т. I, вып. 5, с. 689-698.

4. Ашмарин И.II. Молекулярная биология. Л., Изд-во Ленинградского университета, 1977, 368 с.

5. Бакаев В.В., Варшавский А.Я. Структура хроматина: исследование хромосомных субъединиц. В сб.: Тезисы сообщ. У Всес. симпоз. "Структура и функции клеточного ядра", 1975 г. Новосибирск,1975, с. 20.

6. Басанец Л.М. Спектрофотометрическое титрование фосфатных групп ДНК в ДНП печени крыс разного возраста. Вестн. Харьк. ун-та,1976, № 135, Проблемы онтогенеза, гетерозиса и биоэкологии животных, с. 31-34.

7. Бердышев Г.Д. Процесс транскрипции и его изменения на позднихэтапах индивидуального развития животных. Успехи соврем, биологии, 1970, т. 70, вып. 3(6), с. 376-396.

8. Бердышев Г.Д. Молекулярно-генетические механизмы старения. -М., Медицина, 1977, 295 с.

9. Блок Л.Н., Красницкая А.А., Никитин В.Н., Сазонова Е.А., Анохина Г.А. Влияние частичной гепатэктомии на синтез белкаiri irotzr, и седиментационные свойства полисом печени крыс разного возраста. Докл. АН СССР, 1978, т. 239, № 3, с. 729731.

10. Борисова О.Ф., Минят О.Е. Комплексы дезоксирибонуклеопротеи-да с акридиновым оранжевым. Молекуляр. биология, 1969, т. 3, вып. 5, с. 758-769.

11. Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука, 1966, 270 с.

12. Бродский В.Я., Кущ А.А. Изменение числа полиплоидных клеток в постэмбриональном развитии тканей крыс. Докл. АН СССР, 1962, т. 147, с. 713-716.

13. Буш Г. Гистоны и другие ядерные белки. М.: Мир, 1967, 286 с.

14. Буш X., Кнехт М., Опсон М., Страбук Л. Современное состояние исследований белков ядрышка. В кн.: Клеточное ядро. Морфология, физиология и биохимия. М.: Наука, 1972, с. 99-121.

15. Валуева Г.В., Вержиковская Н.В. Тиреотропная активность гипофиза у крыс в различные возрастные периоды. Пробл. эндокринологии, 1977, т. 23, Л 5, с. 99-103.

16. Ванюшин Б.Ф. Метилирование ДНК и его биологическое значение. Успехи совр. биол., 1968, т. 65, с. 163-185.

17. Ванюшин Б.Ф. Метилирование ДНК в клетках различных организ-. мов. Успехи совр. биол.,.1974, т. 77, с. 68-90.

18. Ванюшин Б.Ф., Бердышев Г.Д. Молекулярно-генетические механизмы старения. - М.: Медицина, 1977, 296 с.

19. Ванюшин Б.Ф., Романов Г.А., Метилирование ДНК возможный механизм регуляции транскрипции. - В кн. Структура и функции клеточ. ядра. Тезисы сообщ. У1-го Всес. симпозиума, Алма-Ата, 1977, с. 5-6.

20. Виленчик М.М. Молекулярные механизмы старения. М.: Наука,1970, 168 е.

21. Геворкян Э.С. К вопросу о механизме взаимодействия глюкокорти-коидов с генетическим аппаратом клетки. Биол. ж. Армении,1979, 32, Js II, с. II04-IIII.

22. Георгиев Г.П., Бакаев В.В. Три уровня структурной организации, хромосом эукариот. Молекулярная биология, 1978, т. 12,вып. 6, с. 1206-1230.

23. Георгиев Г.П., Ермолаева Л.П., Збарский И.Б. Количественное соотношение белковых и нуклеопротеидных фракций в клеточныхядрах различных тканей. Биохимия, I960, т. 25, с. 318-330.

24. Германюк ЯЛ. Действие кортикотропина и глюкокортикоидных гормонов на биосинтез нуклеиновых кислот и белков. В кн.: Новое о гормонах и механизме их действия. Киев: Наукова думка, 1977, с. 91-100.

25. Германюк Я.Л.,. Холявко П.М., Мироненко В.И., Тронько Н.Д. Образование аминоацин-тРНК в печени адреналэктомированныхкроликов. Пробл. эндокринол., 1974, т. 20, № I, с. 71-74.

26. Деревянко Г.И. Сравнительная характеристика аминоацил-РНК-синтетаз печени молодых и старых животных. В кн.: Молекулярная биология старения. Киев: Наукова думка, 1969, с. 69-74.

27. Деревянко Г.И. Влияние гидрокортизона и высокобелковой диеты на активность некоторых аминоацил-тРНК-синтетаз в печени крыс разного возраста. В кн.: Проблемы возрастной физиологии,биохимии и.биофизики. Киев, Наукова думка, 1974, с. 148-157.

28. Джохадзе Д.И. Влияние различных фракций гистонов на РНК по-лимеразную активность клеточных ядер животных, растительных тканей и хлоропластов. - Изв. АН Груз.ССР. Сер. биол., 1975,т. I, № 5-6, с. 486-489.

29. Ельцина Н.В. Роль негистоновых белков хроматина в регуляции генетической активности. Успехи современной биологии, 1979, т. 87, вып. I, с. 3-15.

30. Збарский И.Б., Георгиев Г.П. Новые данные по фракционированию клеточных ядер печени крыс и химическому составу ядер. ных структур. Биохимия, 1959, т. 24, с. 192-202.

31. Збарский И.Б. Химическая организация клеточного ядра. В кн.: Функциональная биохимия клеточных структур. М.: Наука, 1970,с. 266-289.

32. Збарский И.Б., Кузьмина С.Н. Скелетные структуры клеточного ядра и.их возможная физиологическая роль. Тезисы УП Всес. симпоз. по структуре и функциям клеточного ядра. Харьков,28.30 мая 1980 г., Харьков, 1980, с. 65.

33. Зильберман С.Ц., Паскевич И.Ф. Возрастные особенности синтеза и активности основных форм ДНК-зависимой РНК-полимеразы ядер клеток печени.белых крыс. В кн.: Физиол. и молекул.аспекты онтогенеза. Киев: Наукова думка, 1977, с. 68-74.

34. Калиман П.А., Шредер Б. Активность РНК-азы ядер и ядерных оболочек печени белых крыс разного возраста. Вестник Харь. ков. ун-та, Харьков, 1976, № 135, с. 22-25.

35. Карвонен В.Н. Некоторые физико-химические параметры ДНК печени белых крыс разного возраста. Вестник Харьк. ун-та, 1970,№ 39, Биология, вып. 2, с. 19-22.

36. Кирьянов Г.И., Маномшьян Т.А., Поляков В.Ю., Файс Д., Чен-цов 10.С. В сб. "Тезисы сообщ. У Всес. симпоз.: "Структураи функции клеточного ядра", 1975. Новосибирск, 1975, с. 7-8.

37. Клименко АЛ. ДНК I г1стони. Наука I життя, 1963, Jfc 12, с. 55.

38. Клименко А.И. Количественные изменения гистонов и нуклеиновых кислот в клеточных ядрах печени при стимулировании и угнете -нии процессов белкового синтеза в организме. Биохимия,1966, т. 31, вып.' 3, с. 446-452.

39. Клименко А.И. Ядерные белки и возраст. В кн.: Молекулярные и физиологические.механизмы возрастного развития. Киев: Наукова думка, 1975, с. 98-119.

40. Клименко A.I., Тупч1энко Г.С., Шевцова М.Я. Метабол1зм нук-ле1нових кислот в онтогенез1. В кн.: П Укр.б1ох1м. з"1зд. Тези доповХдей I повЩомлень. Ки1в: Наукова думка, 1971,с. 288-289.

41. Клименко А.И., Тупчиенко Г.С. К вопросу о транскрипции генома в постнатальном онтогенезе белых крыс. Онтогенез, 1973,т. 4, & I, с. 80-83.

42. Клименко А.И., Шевцова М.Я. Содержание ДНК и активность де-зоксирибонуклеаз в печени в онтогенезе белых крыс. Ж. эволюцион. биохимии и физиол., 1970, т. У1, с. 337-339.

43. Комфорт А. Биология стерения. М.: Мир, 1964, 253 с.

44. Козлов Ю.В., Георгиев Г.П. Регуляция биосинтеза информационной РНК в животных клетках. 3. Механизм угнетения синтеза РНК белками хроматина. Молекулярная биология, 197I, т. 5,№ 5, с. 789-796.

45. Кравцов Г.Г., Богданов А.А. Условия вьщеления и свойства комплексов ДНК тимуса теленка с остаточным белком хроматина. -Молекул, биол., 1970, т. 4, вып. 3, с. 422-429.

46. Красницкая А.А., Блок JI.H., Анохина Г.А., Никитин В.Н. Синтез белка ел (Г/-6 2.0 рибосомами печени крыс разного возраста. Вестн. Харьк. ун-та, 1976, № 135, с. 3-7.

47. Лимборская С.А. Регуляция биосинтеза информационной РНК в животной клетке. ЗУ. О роли гистона Fl в ингибировании транскрипции повторяющихся нуклеотидных последовательностей ДНК. Молек. биология, 1973, т. 7, № I, с. 124-130.

48. Малышко А.И. Возраст и некоторые физико-химические параметры ДНК печени белых крыс. В кн.: Физиологические и молекулярные аспекты онтогенеза. Киев: Наукова думка, 1977, с. 43-50.

49. Мартыненко А.А. О возрастной перестройке процессов ацетилирования в печени белых крыс. В кн.: Материалы симпоз. по основным проблемам возрастной физиологии и биохимии. Харьков, 15-19 окт.1963 г., Харьков: Изд-во Харьковского ун-та, 1965,о. 2II-2I4.

50. Меерсон Ф.З., Явич М.П., Лерман М.М. Метаболизм РНК и белка в миокарде при старении и длительной гиперфункции сердца.• Вопросы мед* химии, 1976, т. 22, вып. 6, с. 753-758.

51. Мейннуоринг У. Механизма действия андрогенов. М.: Мир, 1979, 224 с.62,63.64,65