Воздействие растворов америция-241 малой и средней активности на биолюминесцентные системы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Рожко, Татьяна Владимировна

• Рожко, Татьяна Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рожко, Татьяна Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ПРЕДПОСЫЛКИ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫХ ТЕСТОВЫХ СИСТЕМ ДЛЯ МОНИТОРИНГА РАДИОТОКСИЧНОСТИ (ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР)

1.1. Биолюминесценция: природа и свойства

1.2. Использование биолюминесценции для мониторинга химической токсичности

1.2.1. Использование люминесцентных бактерий для мониторинга химической токсичности

1.2.2. Использование биолюминесцентных ферментативных реакций для мониторинга химической токсичности

1.3. Способы оценки радиационного состояния окружающей среды

1.3.1. Методы детектирования радионуклидов в различных объектах

1.3.2. Метод гамма-спектрометрии

1.3.3. Метод альфа-спектрометрии

1.3.4. Метод бета-спектрометрии

1.3.5. Масс-спектрометрия

1.3.6. Жидкостно-сцинтилляционная спектрометрия

1.3.7. Определение отдельных радионуклидов. 27 1 -4. Воздействие ионизирующих излучений

1.4.1. Характеристика излучений

1.4.2. Биологические процессы под действием ионизирующего излучения. Радиобиологические методы.

1.5. Проблема «малых доз»

1.6. Использование гуминовых веществ для детоксикации растворов

1.7. Перспективность использования бактериальной люминесценции для мониторинга радиотоксичности 49 растворов

ГЛАВА 2. МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТА

2.1. Реактивы и приборы

2.2. Методы измерения

2.2.1. Регистрация кинетики биолюминесценции

2.2.2. Приготовление образцов для измерения интенсивности биолюминесценции

2.2.2.1. Основные этапы

2.2.2.2. Приготовления проб и растворов (рабочих и контрольных) с использованием интактных и лиофильно высушенных 56 бактерий

2.2.2.3. Приготовления проб и растворов (рабочих и контрольных) с использованием водорастворимой и иммобилизованной 57 ферментативных систем

2.2.2.4. Измерение интенсивности биолюминесценции интактных бактерий в присутствии гуминовых веществ

2.3. Обработка данных биолюминесцентного анализа

2.4. Измерение активности растворов Ат

2.5. Анализ ультраструктуры бактериальных клеток.

2.6. Анализ распределения Ат-241 в клеточной культуре

ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ РАСТВОРОВ Ат-241 НА

БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ СИСТЕМЫ

3.1. Влияние растворов Ат-241 на биолюминесцентные системы

3.1.1 Бактериальные системы

3.1.1.1. Интактные бактерии

3.1.1.2. Лиофилизированные бактерии

3.1.2. Ферментативные системы

3.1.2.1 Водорастворимая биферментная система

3.1.2.2 Иммобилизованная в крахмальный гель ферментативная система

3.2. Сравнение влияния Аш-241 на биолюминесцентные системы

3.3. Распределение Ат-241 в бактериальной культуре

3.4. Результаты электронно-микроскопических исследований ^ бактериальной культуры в растворе Am

ГЛАВА 4. СРАВНЕНИЕ ВЛИЯНИЯ СОЛЕЙ МЕТАЛЛОВ НА БАКТЕРИАЛЬНУЮ БИОЛЮМИНЕСЦЕНЦИЮ

4.1. Классификация эффектов металлов различных групп на биолюминесцентные системы (начальная стадия 76 и нкубирования)

4.2. Исследование эффектов тяжелых металлов при различных временах инкубирования

4.2.1. Хроническое воздействие Европия

4.2.2. Хроническое воздействие Урана

4.3. Сравнение воздействия на биолюминесценцию металлов различной удельной радиоактивности 4.3.1. Сравнение эффектов европия и америция

4-3-2 Сравнение эффектов европия и урана

4.3.3. Сравнение эффектов урана и америция

4.4. Итоги главы

ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ ГУМИНОВЫХ ВЕЩЕСТВ НА ТОКСИЧНОСТЬ РАСТВОРОВ Ат

5.1. Влияние гуминовых веществ на интенсивность биолюминесценции бактерий в растворах нитрата америция 5.2 Распределение радионуклидов между бактериальными клетками и средой в присутствии и отсутствии гуминовых веществ

5.3. Результаты электронно-микроскопических исследований воздействия гуминовых веществ на бактериальную культуру в растворе Am

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Воздействие растворов америция-241 малой и средней активности на биолюминесцентные системы»

В настоящее время в радиоэкологических исследованиях наблюдается смена концептуального подхода: на смену антропоцентрическому приходит экоцентрический подход. Созрело понимание необходимости изучения влияния радиоактивности на всю биоту в целом и на человека как составную часть этой биоты, интегрированную в биосферу множеством функциональных связей. Микроорганизмы являются простейшей и основополагающей частью биосферы, и их состояние может служить индикатором состояния системы в целом. В связи с этим исследования воздействия радиоактивности на микроорганизмы приобретают все большую актуальность.

Фундаментальной задачей в рамках указанной проблемы является разработка научных основ использования микроорганизмов для мониторинга радиационной токсичности. Удобными объектами являются морские люминесцентные бактерии, которые уже более сорока лет применяются для мониторинга химической токсичности различных сред (Гительзон и др., 1984; Кратасюк, 1994; Girotti, 2008). Для количественной оценки состояния этих микроорганизмов в различных условиях окружающей среды используется интенсивность их люминесценции. Имеется возможность аналитического использования как бактериальных клеток, так и выделенных ферментов, что дает возможность сравнивать результаты воздействия радиации на микробиологическом и биохимическом уровнях.

К настоящему времени известны исследования (Min, 2003), в которых биолюминесценция бактериального рекомбинантного штамма E.coli применялась для определения токсичности среды, задаваемой гамма-излучением. Биолюминесцентные системы до сих пор не использовались для изучения воздействия следовых количеств изотопов с преимущественно альфа-излучением.

В последние годы исследователи все чаще обращаются к проблеме «малых доз». Обсуждаются неаддитивность и гетерогенность откликов организмов на низкодозовое воздействие. Наиболее важным достижением в данной проблеме является выявление нелинейности зависимости доза-эффект и понимание того, что воздействия излучений в малых дозах нельзя оценивать путем простой экстраполяции экспериментальных данных, полученных при использовании больших повреждающих доз облучения (Кудряшов, 2004). Известно, что в определенном диапазоне доз наблюдается стимуляция, а не угнетение клеточных процессов (так называемый эффект «гормезиса»).

Вместе с тем, несмотря большой интерес к проблеме «малых доз», вопрос о механизмах формирования вызываемых ими эффектов остается на уровне гипотез и предположений (Kim et al., 2007).

Одним из наиболее опасных, с точки зрения влияния на живые организмы, является воздействие радионуклидов, характеризующихся преимущественно альфа-распадом. Типичным альфа-излу чающим радионуклидом является Am-241. Время его полураспада - 432,7 лет. Этот радиоизотоп имеет техногенное происхождение, является одним из побочных продуктов ядерного производства и в последние годы все чаще регистрируется в окружающей среде.

Цель исследования - изучение воздействия растворов Am-241 малой и средней активности на биолюминесцентные системы - люминесцентные бактерии и выделенные ферменты.

В работе поставлены следующие задачи:

1. Адаптировать биолюминесцентные методики для мониторинга радиотоксичности растворов малой и средней активности.

2. Сравнить воздействие на бактериальную биолюминесценцию Am-241, радионуклидов низкой удельной активности (на примере урана) и стабильных тяжелых металлов. На основе этого сравнения оценить вклады химической и радиационной составляющих в воздействии Am-241 и урана на биолюминесцентные системы.

3. Сравнить воздействие Am-241 на биолюминесценцию бактерий и выделенных ферментативных систем.

4. Оценить распределение Am-241 в бактериальной культуре.

5. Исследовать влияние гуминовых веществ на люминесценцию бактерий в растворах Am-241, поврежденность клеток и содержание Am-241 в клеточной фракции.

Научная новизна. На примере Am-241 впервые исследовано воздействие растворов альфа-излучающего изотопа малой и средней активности на биолюминесцентные системы - интактные и лиофилизированные бактерии, водорастворимую и иммобилизованную в крахмальный гель ферментативные системы. Получены зависимости интенсивности биолюминесценции от времени воздействия радионуклида и его концентрации/удельной активности. Показано, что воздействие Am-241 проявляется при низких концентрациях/удельных активностях радионуклида, характеризуется начальным периодом активации и последующим периодом ингибирования биолюминесценции.

На основе сравнения со стабильными элементами показано, что эффекты Am-241 на биолюминесцентные системы определяется радиационными, а эффекты урана — химическими свойствами.

Обнаружено накопление Am-241 бактериальными клетками, визуализированы изменения бактериальных клеток на различных этапах радиационного воздействия.

Биолюминесцентные системы впервые использованы для мониторинга процессов детоксикации растворов Am-241 гуминовыми веществами.

Практическая значимость. Предлагаемые исследования являются основой для разработки биолюминесцентных методик мониторинга радиотоксичности радиоизотопов, характеризующихся альфа-распадом, в растворах низкой и средней активности. Биолюминесцентные системы могут быть использованы в экологии и медицине для мониторинга воздействия растворов радионуклидов на микробиологические и биохимические процессы, для выявления эффектов при различных дозах облучения.

Положения, выносимые на защиту:

1 Нелинейность зависимости эффекта от времени хронического воздействия Агп-241 на биолюминесцентные системы в растворах низкой и средней активности: активация на начальной и ингибирование на конечной стадиях воздействия.

2 Радиационная природа токсичности Ат-241 и химическая природа токсичности урана в растворах низкой и средней активности.

3 Уменьшение эффектов Агп-241 на люминесцентные бактерии в присутствии гуминовых веществ.

Апробация работы. Основные положения работы представлены на

VII-ой Международной школе-семинаре молодых ученых "Актуальные проблемы физики, технологий и инновационного развития" (Томск, 2005),

VIII-ом Международный симпозиум «Сложные системы в экстремальных условиях» (Красноярск, 2006), Российской школе-конференции молодых ученых «Экотоксикология: современные биоаналитические системы, методы и технологии» (Москва, 2006), конференции «Социально-экологические проблемы природопользования в Центральной Сибири» (Красноярск, 2006), ХН-ом Международном симпозиуме по люминесцентной спектроскопии (Испания, Луго, 2006), 2-ой Всероссийской конференции по аналитической химии (Краснодар, 2007), Международной конференции по радиоактивности окружающей среды (CN-145, Вена, Австрия, 2007), 12-ом Международном симпозиуме по биолюминесценции (Шанхай, Китай, 2008), 1-ой Российской конференции «Радиоэкология: итоги, современное состояние и перспективы» (Москва, 2008).

Работа выполнена при финансовой поддержке следующих грантов: Грант Министерства Образования 1>Ф REC-002 KR-006; ФСП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научнотехнологического комплекса России на 2007-2012 годы» по теме: «Биолюминесцентный анализ: биосенсоры и биокаталитические технологии»; Программа РАН «Молекулярная и клеточная биология»; грант молодежной инновационной программы Сибирского Федерального Университета «Биолюминесцентный метод мониторинга радиотоксичности», 2007.

Личный вклад соискателя состоял в адаптации биолюминесцептных методик для мониторинга радиотоксичности растворов, проведении всех экспериментов, обработке и обсуждении экспериментальных данных. Радиометрический анализ радиоактивных растворов осуществлялся в Лаборатории радиоэкологии ИБФ СО РАН, приготовление препаратов интактных и лиофилизированных бактерий - в Лаборатории бактериальной биолюминесценции ИБФ СО РАН, иммобилизованных ферментативных препаратов — в лаборатории фотобиологии ИБФ СО РАН. Основная часть результатов была получена в сотрудничестве с Болсуновским А.Я., Бондаревой Л.Г., Есимбековой Е.Н., Кратасюк В.А., Кузнецовым A.M., Выдряковой Г.А., Могильной О.А., Александровой М.А. Вклад соавторов отражен в публикациях. Автор приносит благодарность всем коллегам за участие в совместных работах и обсуждении результатов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 статей, 7 тезисов конференций, 1 патент Российской Федерации.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, трех глав с изложением результатов работы, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 115 страницах машинописного текста, проиллюстрирована 8 таблицами и 22 рисунками. Библиография включает 150 источников.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Рожко, Татьяна Владимировна

ВЫВОДЫ

1 Установлена нелинейность зависимости эффекта от времени хронического воздействия Ат-241 на биолюминесцентные системы в растворах малой и средней активности: продемонстрирована активация биолюминесценции на начальной стадии и ингибирование биолюминесценции на конечной стадии воздействия. Указанные эффекты зависят от уровня организации системы (бактериальные клетки или ферментативные системы), поврежденности клеток и концентрации радионуклида. Эффект проявляется при низком содержании Ат-241 в растворах (10"ПМ, 100 Бк/л).

2 На основе сравнения хронического воздействия на люминесцентные бактерии америция, урана и стабильных элементов (европия, железа) показано, что эффект Ат-241 в растворах малой и средней активности определяется его радиационными свойствами, а урана - химическими.

3 Продемонстрировано накопление Ат-241 в клеточной фракции.

4 Установлено, что гуминовые вещества в растворах Ат-241 уменьшают его влияние на люминесценцию бактерий, уменьшают поврежденность бактериальных клеток и изменяют накопление Ат-241 в клеточной фракции.

5 На примере Ат-241 показана принципиальная возможность использования люминесцентных бактерий для мониторинга радиотоксичности растворов радионуклидов, характеризующихся альфа-распадом, в различном микроокружении.

98

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Предлагаемая работа имеет перспективы продолжения, как в фундаментальном, так и прикладном аспектах. Среди перспективных направлений можно отметить следующие: а) выявление клеточных процессов и структур, наиболее чувствительных к воздействию альфа-излучения низкой и средней активности -мутагенность, редокс-состояние низкомолекулярных соединений, активность ферментов. Потенциальные заказчики — медицинские и радиобиологические организации в России и за рубежом. б) выявления закономерностей воздействия хронического альфа-облучения низкой и средней активности на жизнедеятельность организмов; связь длительности и дозы облучения с восстановительными свойствами живых систем. Потенциальные заказчики — медицинские и радиобиологические организации в России и за рубежом. в) изучение детоксикации растворов альфа-радионуклидов природными комплексообрателями - гуминовыми веществами. с) расширение количества анализируемых радионуклидов. В частности, имеется острая необходимость контроля радиотоксичности трития в связи с развитием ядерной промышленности и интенсивным распространением этого радиоизотопа в окружающей среде. Потенциальными заказчиками являются контролирующие организации Казахстана (Семипалатинский полигон), Красноярского региона (бассейн реки Енисей) и др.

97

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рожко, Татьяна Владимировна, 2008 год

1. Алесина М.Ю. Формирование радиобиологических эффектов при хроническом внутреннем и внешнем облучении экспериментальных животных в малых дозах / М.Ю. Алесина // Международный журнал радиационной медицины, 1999, №2.- С.92-99

2. Ахапкин Ю. К. Биотехника новое направление компьютеризации / Ю.К. Ахапкин, С.И. Барцев, Н.Н. Всеволодов, В.А. Кратасюк // М.: Наука, 1990.- С.82-87.

3. Болсуновский А .Я. Новые данные по содержанию трития в одном из притоков реки Енисей / А.Я. Болсуновский, Л.Г. Бондарева // Доклады Академии наук, 2002. Т.385,№5.- С.714-717.

4. Вакуловский С.М Накопление 32Р в рыбе р. Енисей и реконструкция дозы облучения населения / Вакуловский С.М., Крышев А. И., Тертышник Э. Г., Чумичев В. Б., Шишлов А. Е // Атомная энергия, 2004. Т. 94. Вып. 1.-С. 61-67.

5. Гиль Т.А. Гашение люминесценции светящихся бактерий как тест для оценки токсичности фенольных компонентов стоков / Т.А. Гиль, А.Э. Балаян, Д.И. Стом //Микробиология, 1983.- Т.52,№6.- С. 1014-1016.

6. Гительзон И.И. Экологическая биофизика. /И.И. Гительзон, В.А. Кратасюк, В.Н. Лопатин, А.А. Тихомиров, Л.А. Щур, B.C. Филимонов // В Зт Учебное пособие; М.: Логос, 2002. 127с.

7. Гительзон И.И. Светящиеся бактерии / И.И. Гительзон, Э.К. Родичева, С.Е. Медведева, Г.А.Примакова, С.И. Барцев, В.Н. Петушков, В.В.

8. Межевикин, Е.С. Высоцкий, В.В. Заворуев, В.А. Кратасюк // Новосибирск: Наука, 1984. 278с.

9. Гродзенский Д.Э. Радиобиология: Биол. действие ионизирующих излучений / Д.Э. Гродзенский // М., Госатомиздат, 1963. 199 с.

10. Гудков Д.И. Тритий в воде Днепра и его водохранилищ / Д.И. Гудков // Гидробиологический журнал, 1995. Т.31, №3. - С. 95-102.

11. Гуркова В.И. Физика атомного ядра и частиц / В.И. Гуркова // Лабораторный практикум. Красноярск, 2000. 205с.

12. Джунковская И.П. Действие продукта окисления керогена на рост и люминесценцию Photobacterium fischeri / И.П. Джунковская, В.И. Сухаревич, В.Е. Шкинке, Л.А. Виестуре // Микробиология, 1985. Т.54, №1. - С. 89-92.

13. Есимбекова Е.Н. Исследование чувствительности трехферментных систем с бактериальной люциферазой при биотестировании водных экосистем: Автореф. дис. канд. биолог, наук / Е.Н. Есимбекова. Красноярск, 2000.-С. 17.

14. Жмур Н.С. Государственный и производственный контроль токсичности вод методами биотестироания в России. / Н.С. Жмур // М: Междун.дом сотрудничества, 1997. 148с.

15. Журавлев А.И. Спонтанная биохемилюминесценция животных тканей / А.И. Журавлев // В кн. Биохемилюминесценция. Наука, Москва, 1983.-С.10.

16. Карнаухов В.Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки / В.Н. Карнаухов //М: Наука, 1978. 204с.

17. Кратасюк В.А. Гелевая модель функцонирования люциферазы в клетке/ В.А. Кратасюк, В.В. Абакумова, Н.И. Ким // Биохимия, 1994 Т.59, №7-С.761-765.

18. Кратасюк В.А. Каталитические свойства люциферазных биосенсоров / В.А. Кратасюк, Н.Б. Ким // В кн. Биотехника новое направление компьютеризации /Ахапкин Ю.К., Барцев С.И., Всеволодов Н.Н., Кратасюк В.А. и др.//М.: Наука. 1990 - С.82-87.

19. Кратасюк В.А. Люциферазное биотестирование: биофизические основы, методы и применение: Дис. док. биолог, наук / В.А. Кратасюк — Красноярск, 1994. М. 377 с.

20. Кратасюк В.А. Использование светящихся бактерий в биолюминесцентном анализе / В.А. Кратасюк, И.И. Гительзон // Успехи микробиологии, 1987-№21 С. 3-30.

21. Коган P.M. Основы гамма спектрометрии природных сред / P.M. Коган, И.М. Назаров, Ш.Д. Фридман // М.:Атомиздат, 1969. 468 с.

22. Коггл Д. Биологические эффекты радиации. / Коггл Д. // Пер с англ. М. Энергоатомиздат, 1986. 184 с.

23. Кудряшов Ю.Б. Радиационная биофизика (ионизирующие излучения) / Ю.Б. Кудряшов // М.: Физматлит, 2004. 446 с.

24. Кудряшева Н.С. Закономерности ингибирования бактериальной биолюминесценции in vitro хинонами и фенолами компонентами сточных вод / Н.С. Кудряшева, Е.В. Шалаева, Е.Н. Задорожная, В.А. Кратасюк // Биофизика, 1994.- Т.39. №3.- С. 455-464.

25. Кудряшева Н.С. Использование биолюминесцентных биотестов для мониторинга вод озера Шира / Н.С. Кудряшева, Е.В.Шилова, Е.В., Хендогина В.А., Кратасюк // Сб. Медико-биологические и экологические проблемы комплекса "Озеро Шира". Томск, 1997. С. 100-105.

26. Кудряшева Н.С. Физико-химические основы биолюминесцентного анализа / Н.С. Кудряшева, В.А. Кратасюк, Е.Н. Есимбекова // Краснояр. гос. ун-т. Красноярск, 2002. 154 с.

27. Кудряшева Н.С. Основы физической химии / Н.С. Кудряшева // ГОУ ВПО «Гос.ун-т цвет, металлов и золота». Красноярск, 2006. 120 с.

28. Кузьмин М. Химия / М. Кузьмин // Учеб. пособие, М.: 1982. 284 с.

29. Кузин A.M. О различии ведущих молекулярных механизмов при действии g-радиации на организм в больших и малых дозах / A.M. Кузин // Изв. АН СССР. Сер. Биол., 1980. № 6. С. 883-890.

30. Кузин A.M. Возможные механизмы участия природного радиационного фона (ПРФ) в стимуляции деления клеток / A.M. Кузин // Радиац. биол. Радиоэкол., 1994. Т. 34. Вып. 2. - С. 398-400.

31. Кузин A.M. Идеи радиационного гормезиса в атомном веке. / A.M. Кузин // М.: Наука, 1995. 158с.

32. Кузин A.M. Роль природного радиоактивного фона и вторичного биогенного излучения в явлении жизни / A.M. Кузин //. М.: Наука, 2002. 80с.

33. Кузнецов A.M. Изучение характеристик реагентов для биолюминесцентных биотестов / A.M. Кузнецов, Н.А. Тюлькова, В.А. Кратасюк, В.В. Абакумова, Э.К. Родичева. //Сибирский экологический журнал, 1997. №5.- С.459-465.

34. Кузнецов A.M. Биотест, основанный на лиофилизованных бактериях / A.M. Кузнецов, Э.К. Родичева, Е.В. Шилова // Биотехнология, 1996 Т.9.- С.57-61.1 Ч 7

35. Кузнецов В.К. Накопление Cs в продукции растениеводства в зависимости от видовых и сортовых особенностей сельскохозяйственных культур / В.К. Кузнецов, Н.И. Санжарова, К.Г. Калашников, P.M. Алексахин // Сельскохозяйственная биология, 2000. №1. С.64-69.

36. Кузнецов Ю.В. К оценке вклада реки Енисей в общую радиоактивную загрязнённость Карского моря / Ю.В Кузнецов, Ю. А. Ревенко, В.К. Легин // Радиохимия, 1994. Т 36, №6 - С.546-559.

37. Кириллова И.П. Биолюминесцентный анализ и его возможности. / И.П. Кириллова, J1.A. Зайцева, JI.B. Дмитриева // Общие вопросы микробиологической промышленности, 1983. — С. 44.

38. Ландау-Тылкина С. П. Радиация и жизнь / С.П. Ландау-Тылкина // М. Атомиздат, 1974. 168с.

39. Лабас Ю.А. Неразгаданная Дарвиным биолюминесценция / Ю.А. Лабас, А.В. Гордеева. // Природа, 2003. №.2 С.25-31.

40. Левинский Б.В. Все о гуматах / Б.В. Левинский // 4-е изд. Корф-Полиграф. Иркутск, 2000. 75с.

41. Ленинджер А. Основы биохимии / А. Ленинджер // в 3-х томах. М.: Мир, 1985.367,368,320с.

42. Лютых В.П. Клинические аспекты действия «малых» доз ионизирующего излучения на человека (общесоматические заболевания) / В .П. Лютых, А.П. Долгих // Мед. радиол, и радиац. безопасность, 1998. -Т.43, №2. С.28-34.

43. Мажаров В.Ф. Радиационная обстановка в Красноярском крае и уровни канцерогенных рисков для населения / В.Ф. Мажаров, Л.Г. Климацкая, С.В. Куркатов // Бюллетень СО РАМН, 2006. №3. С. 64-67

44. Мажуль Л.М. Возрастные особенности влияния сочетанного радиационного воздействия на перекисное окисление липидов в крови крыс / Л.М. Мажуль, В.Е. Волыхина, Г.Г. Гацко // Вестник АН Беларусии, 2000. №1. С.68-69.

45. Мазурик В.К. Проблемы радиобиологии и белок р53 / В.К. Мазурик, Б.Б. Мороз // Радиационная биология. Радиоэкология, 2001. Т.41, № 5 -С.548-572.

46. Маслова И.В. Действие этанола на активность холинорецепторов и мембраносвязанных ферментов мозга крыс при длительном поступлении в организм радионуклидов / И.В Маслова // Здравоохранение, 1999. №7. -С.15-17

47. Матвеев А.Н. Атомная Физика / А.Н. Матвеев // М.: Высшая Школа, 1989. 439с.

48. Меликов Ю.В. Экспериментальные методы в ядерной физике / Ю.В. Меликов // Курс лекций. М.: Моск. ун-т, 1996. 120с.

49. Мильничук В.К. Радиационная химия / В.К. Мильничук //Соросовский образовательный журнал, 2000. Т.6, № 4 - С.24-29.

50. Молофей В.П. Адаптивный ответ на фоне радиопротекторного действия меланина в половых и соматических клетках мышей / В.П. Молофей, И.Б. Моссэ, С.И. Плотникова, JI.H. Кострова // Вестник АН Беларусии, 1999. №1.- С.35-36.

51. Несмеянов А.Н. Радиохимия. / А.Н. Несмеянов // М.: Химия, 1978.560с.

52. Никольский А.В. Радиоадаптивный ответ клеток млекопитающих / А.В.Никольский, А.Н. Котеров // Мед. радиол, и радиац. Безопасность, 1999. Т. 44, №6.- С. 5-18.

53. Носов А.В. Радиоактивное загрязнение р. Енисей, обусловленное сбросами Красноярского Горнохимического комбината / А.В. Носов // Атомная энергия, 1993. Т. 74. - С.144-150.

54. Носов А.В. Анализ радиационной обстановки на р. Енисее после снятия с эксплуатации прямоточных реакторов Красноярского ГХК / А.В. Носов, A.M. Мартынова // Атомная энергия, 1996. Т.81. - С.226-231.

55. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации / Д.С. Орлов // Москва: МГУ.1990. 325с.

56. Перцов JT.A. Ионизирующее излучение биосферы / JI.A. Перцов // М: Атомиздат, 1973. 228 с.

57. Пелевина И.П. Выживаемость облученных клеток млекопитающих и репарация ДНК / И.П. Пелевина, А.С. Саенко, В.Я. Готлиб, Б.И. Сынзыныс //М.: Энергоатомиздат, 1985. 120с.

58. Пелевина И.И. Радиационно-индуцированный адаптивный ответ у детей и эффект внешних и внутренних факторов/ И.И. Пелевина, Г.Г. Афанасьев, А.В. Алещенко // Радиац. биол. Радиоэкол, 1999. Т.39. Вып. 1. -С. 106-112.

59. Радиационная обстановка на территории Российской Федерации в 2000 году // Бюллетень по атомной энергии, 2002. №1- С.49-52.

60. Сапожников Ю.А. Радиоактивность окружающей среды / Ю.А.Сапожников, Р.А.Алиев, С.Н.Калмыков //М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2006. 287 с.

61. Сивухин. Д.В. Общий курс физики. Атомная и ядерная физика / Д.В. Сивухин // М.: ФИЗМАТЛИТ, 2006. Т 5. 784с.

62. Спитковский Д.М. Теоретические и экспериментальные подходы к проблеме индуцируемых адаптирующими дозами ионизирующей радиации изменений функциональных возможностей клеток / Д.М. Спитковский, И.В.

63. Кузьмина //Радиационная биология. Радиоэкология, 2001. Т. 41, № 5. - С. 599-609.

64. Урванцева Г.А. Применение методов биотестирования в оценке загрязнения вод тяжелыми металлами. / Г.А. Урванцева// 10 объед. пленум сов. и респ. ком. по прогр. Юнеско Человек и биосф. Тез. докл. Всес. конф. -Алма-Ата, 1988. С. 68 - 68.

65. Федорова Е.С. Детоксикация органических окислителей гуминовыми веществами / Е.С.Федорова, Н.С. Кудряшева //. Изв. Вузов. Физика, 2006. Т.49, №3. С. 172-174.

66. Худсон Д. Статистика для физиков: Лекции по теории вероятностей и элементарной статистике / Д. Худсон // Перев. с англ. М.: Мир, 1967. 242 с.

67. Шигорин Д.Н. Электронновозбужденные состояния многоатомных молекул / Д.Н. Шигорин, Г.А. Валькова, Е.А. Гастилович // Наука, Москва, 1993.496с.

68. Эйдус Л.Х. Проблемы механизма радиационного и химического гормезиса / Л.Х. Эйдус, В.Л. Эйдус//Радиационная биология. Радиоэкология, 2001.-Т. 41, №5.- С. 627-630.

69. Эйдус Л.Х. Мембранный механизм биологического действия малых доз. Новый взгляд на проблему / Л.Х. Эйдус // М.: ООО «Типография ФНПР», 2001. 82с.

70. Ansoborlo E. Development of a database: DACTARI for a radiotoxic element ranking methodology / E. Ansoborlo, C. Santucci, J.P. Grouiller// Radiation Protection Dosimetry, 2007. V. 127. N 1-4. - P. 526-530.

71. Barah M. The use of luminous bacteria for determination of phagdcytoses / M. Barah, S. Ulitzur, D. Merzbach// Immunol. Meth, 1983. V.64. -P. 353-363.

72. Barros M.P. Bioluminescence as a possible auxiliary oxygen detoxifying mechanism in elaterid larvae / M.P. Barros, E.J. Bechara // Free Radical in Biol. Med. 1998. V. 24, N 5. - P. 767-777.

73. Boothman D.A. Molecular analyses of adaptive survival responses (ASRs): role of ASRs in radiotherapy / D.A. Boothman, E. Odegaard, C.R. Yang // Hum. Exp. Toxicol., 1998. V. 17, N 8. - P. 448-453.

74. Bolsunovsky A. Artificail radionuclides in aquatic plants of the Yenisei River in the area affected by effluents of a Russian plutonium complex / A. Bolsunovsky // Aquatic Ecology., 2004. V.38. - P.57-62.

75. Bulich A.A Use of the luminescent bacterial system for the rapid assessment of aquatic toxicity / A.A. Bulich, D.Z. Isenberg // Instrum. Soc. Am. Tranc., 1981.-V.20,N1.-P. 29-33.

76. Calabrese E.J. Hormesis: A highly generalizable and reproducible phenomenon with important implications for risk assessment / E.J. Calabrese, L.A. Baldwin, C.D. Holland // Risk Anal., 1999. V. 19, N 2. P. 261-281.

77. Cali J.J. Bioluminescent assays for ADMET / J.J. Cali, A. Niles, M.P. Valley, M.A. O'Brien, T.L. Riss, J. Shultz // Expert Opinion On Drug Metabolism & Toxicology., 2008. V. 4, N 1.- P. 103-120.

78. Choppin G. R. Comparison of two models for metal-humic interactions / G. R. Choppin, N. Labonne-Wall //Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry, 1997. V. 221, N 1. - P. 67-80.

79. Clemens S. Toxic metal accumulation, responses to exposure and mechanisms of tolerance in plants / S.Clemens // Biochimie, 2006. V.88, N11.-P.1707-1719.

80. Esimbekova E.N. Bioluminescent method non-specific endotoxicosis in therapy / E.N. Esimbekova, V.A. Kratasyuk, V.V. Abakumova // Luminescence, 1999.-N 14.-P. 197-198.

81. Esimbekova E.N. Disk-shaped immobilized multicomponent reagent for bioluminescent analyses: Correlation between activity and composition / E.N. Esimbekova, V.A. Kratasyuk, I.G. Torgashina // Enzyme And Microbial Technology, 2007- V. 40, N 2. P. 343-346.

82. Feinendegen L.E. Cellular signal adaptation with damage control at low doses versus the predominance of DNA damage at high doses / L.E. Feinendegen, V.P. Bond, C.A. Sondhaus // R. Acad. Sci. Ill, 1999. V. 322, N 2-3. - P. 245251.

83. McCapra F. Chemical generation of excited states: The basis of chemiluminescence and bioluminescence / F. McCapra // Bioluminescence And Chemiluminescence, 2000. V. 305. - P. 3-47.

84. Hastings J.W. Bioluminescence / J.W. Hastings // In Cell Physiology. 3rd Edition. Academic Press, New York., 2001. P. 1115-1131

85. Holmberg K. Chromosomal instability in human lymphocytes after low dose rate irradiation and delayed mutagen stimulation / K.Holmberg, A. E. Mejer, M. Harms-Rindahl // Int. J. Radiat. Biol., 1998. -V. 73, N 1. P. 21-34.

86. Girotti S. Monitoring of environmental pollutants by bioluminescent bacteria / S. Girotti, E. N. Ferri, M. G. Fumo, E. Maiolini // Anal.Chim.Acta, 2008. V. 608, N 1.-P. 2-29.

87. Gil G. A biosensor for the detection of gas toxicity using a recombinant bioluminescent bacterium / G.C. Gil, R.J. Mitchell, S.T. Chang, M.B. Gu // Biosens. Bioelectron, 2000. N 15. - P. 23-30.

88. Joiner M.C. Adaptive response and induced resistance / M.C. Joiner, P. Lambin, B. Marples // C. R. Acad. Sci. Ill, 1999. V. 322, N 2-3. - P. 167-175.

89. Kim C.S. Low-dose radiation stimulates the proliferation of normal human lung fibroblasts via a transient activation of Raf and Akt / C.S. Kim, J.K. Kim, S.Y. Nam // Molecules And Cells, 2007. V. 24, N 3. - P. 424-430.

90. Kratasyuk V.A. Principle of luciferase biotesting. / V.A. Kratasyuk // In: Proceeding of the First International School "Biological Luminescence". -Singapore, 1990. World Scientific Publishing Co., 1990. - P. 550-558.

91. Kudryasheva N.S. Development of the bioluminescent bioindicators for analysis of environmental pollution / N.S. Kudryasheva, V.A, Kratasyuk E.N. Esimbekova, E.V. Vetrova// Field Analytical Chemistry and Technology, 1998. -N 2. P. 277-280.

92. N. S. Kudryasheva, Bioluminescence and exogenous compounds.Physico-chemical basis for bioluminescent assay (Review) / N. S. Kudryasheva // J. Photochem.Photobiol., 2006. V. 83, N 1. - P.77-86.

93. Kudryasheva N. S. Nonspecific effects of exogenous compounds onbacterial bioluminescent enzymes: Fluorescence study (Review) /N. S. Kudryasheva // Curr.Enzyme. Inhibition., 2006. V. 4, N 1. - P.363-372

94. Marples В., Lambin P., Skov K.A. et al. Low dose hyper radiosensitivity and increased radioresistance in mammalian cells // Int. J. Radiat. Biol., 1997. V. 71, N6.-P. 721-735.

95. Min J. Gamma-radiation dose-rate effects on DNA damage and toxicity in bacterial cells / J. Min', C. W. Lee, M. B. Gu // Radiation and Environmental Biophysics, 2003.- V.42,N3.-P. 189-192.

96. Mossman K.L., Ledesma L.M. Radiation exposure and adaptive processes // BELLE Newsletter, 1999. V. 7, N 3. - P. 16-19.

97. Morgan W.F., Corcoran J., Hartmann A. et al. DNA double-strand breaks, chromosomal rearrangements, and genomic instability // Mutat. Res, 1998. V. 404, N 1-2.-P. 125-128.

98. Nagasawa H., Little J.B. Unexpected sensitivity to the induction of mutations by very low doses of alpha-particle radiation: evidence for a bystander effect // Radiat. Res., 1999. V. 152, N5. - P. 552-557.

99. Naveh M. A new rapid and sensitive bioluminescence assay for antibiotics that inhibit protein synthesis / M. Naveh, S. Ulitzur// J. Appl.Bacterid., 1984. V.56, N3. - P. 457-463.

100. Parsons P.A. Hormesis: an adaptive expectation with emphasis on ionizing radiation / P.A. Parsons // J. Appl. Toxicol., 2000. V. 20, N 2. - P. 103112.

101. Persaud R. Demonstration of a radiation-induced bystander effect for low dose low LET beta-particles IR. Persaud, H. Zhou, T. Hei // Radiation and Environmental Biophysics, 2007. V. 46, N4. - P. 395-400.

102. Pohl-Ruling J. Effect of low dose acute X-irradiation on the frequencies of chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes in vitro / J. Pohl-Ruling, P. Fischer, O. Haas //Mutat Res, 1983. V. 100, N2. - P. 71-82.

103. Price A. The repair of ionising radiation-induced damage to DNA / A. Price // Semin. Cancer. Biol., 1993. V. 4, N2. - P. 61-71.

104. Puget К. Studies in bioluminescence. Bacterial NADH: FMN -oxidoreductase / K. Puget, A.M. Michelson, S. Adrameas // Anal. Biochem., 1987. V.79. - P. 447-456.

105. Ryan L.A. Radiation-induced adaptive response in fish cell lines / L.A.Ryan, C.B.Seymour, A. O'Neill-Mehlenbacher // Journal of Environmental Radioactivity, 2008. V. 99, N4. - P. 739-747.

106. Reis J.L.R. Toxicity evaluation of the process effluent streams of a petrochemical industry / J.L.R. Reis, M. Dezotti, G.L. Sant'Anna // Env.Tech., 2007. V. 28, N2. - P. 147-155.

107. Rees J.F. The origins of marine bioluminescence: Turning oxygen defence mechanisms into deep-sea communication tools / J.F. Rees, B. De Wergifosse, O. Noiset, M. Dubuisson, B. Janssens, E.M. Thompson. //J. Exp. Biol., 1998.-V. 201, N8. P. 1211-1221.

108. Roda A. Biotechnological application of bioluminescence and chemiluminescence / A. Roda P. Pasini, M. Mirasoni, E. Michchelini, M. Guardigli // Trends Biotechnol., 2004. V. 22, N4. - P. 295-303.

109. Richardson M. Ecotoxicity monitoring use of Vibrio Fischeri / M. Richardson // Arh.Hig.Rada.Toksikol., 1996. V.47, N4. - P. 389-396.

110. Ruiz M.J. Toxicity assessment of pesticides using the microtox test: application to environmental samples / M.J. Ruiz, L. Lopez-Jaramillo, M.J. Redonto, G. Font // Bull.Environ.Contam.Toxicol, 1997. V.59, N4. - P. 619-625.

111. Serat W.F. Evaluation of biological effects of air pollutants by use of luminescent bacteria / W.F. Serat, F.E. Budenger // J. Bacterid., 1965. V.90, N3. -P. 832-833.

112. Serat W.F. Toxicity evaluation of air pollutants by use of luminescent bacteria / W.F. Serat, F.E. Budenger // Atmospher. Environ., 1967. V.l. - P. 2132.

113. Sigel A Iron Transport and Storage in Microorganisms / A.Sigel, H.Sigel (Eds.) // Plants, and. Animals. New York, 1998. -VI. 35. P. 824

114. Stom D.I. Bioluminescent method in studying the complecs effect of sewage components / D.I. Stom, T.A. Gill, A.E. Balayn, O.I. Shahova // Arch.Environ.Toxicol., 1992. V.22. - P. 202-203.

115. Tchan J.T. A new rapid specific bioassay method for photosynthesis inhibiting herbicides / J.T. Tchan, I.E. Roseby, G.R. Funnel // Soil Biol. Biochem., 1975. V.7. - P. 39-44.

116. Yordan A.Z. Toxicant detector / A.Z. Yordan, E.R. Schnauss, E.H. Sie, A. Thanos // Pat. USA, 1968 -N 3370175.

117. Ulitzur S. H-NS Protein Represses Transcription of the lux Systems of Vibrio fischeri and Other Luminous Bacteria Cloned into Escherichia coli / S. Ulitzur, A. Matin, C. Fraley, E. Meighen // Curr. Microbiol., 1997. V. 35. - P. 336-342.

118. Ulitzur S. A new sensitive and simple bioluminescence test for mutagenic compounds / S. Ulitzur, I. Weiser, S. Yannai // Mutant Res., 1980. -V.74, N2. P. 113-124.

119. Ulitzur S. Factors affecting the cellular expression of bacterial luciferase/ S. Ulitzur, A. Reinhertz, J.W. Hastings // Arch. Microbiol., 1981. V. 129. - P.67-71.

120. Ulitzur S. Determination of antibiotic activities with the aid of luminous bacteria / S. Ulitzur // Methods Enzymol., 1986.- V. 133. P. 275-284.

121. Vlasova I.I. Determination of antibiotics using luminescent Escherichia coli and blood serum / I.I. Vlasova, T.V. Asrieli, E.M. Gavrilova, V.S. Danilov // Appl. Biochem.&Microbiol., 2007. V.43. - P.422-428.

122. Vetrova E. A bioluminescent signal system: detection of chemical toxicants in water / E. Vetrova, E. Esimbekova, N. Remmel, S. Kotova, N. Beloskov, V. Kratasyuk, I. Gitelson // Luminescence, 2007. V.22. - 206-214.

123. Wu L.J. Targeted cytoplasmic irradiation with alpha particles induces mutations in mammalian cells / L.J. Wu, G. Randers-Person, A. Xu // Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1999. V. 96, N9. - P. 4959-4962.

124. Wolf S. The adaptive response in radiobiology: evolving insights and implications // Environ. Health. Perspect., 1998. V. 106, N1. - P. 277-283.

125. Wright E.G. Radiation-induced genomic instability in haemopoietic cells / E.G Wright // Int. J. Radiat. Biol., 1998. V.74, N 6. - P. 681-687.

126. Weinstein J. Humic acids reduce the bioaccumulation and photoinduced toxicity of fluoranthene to fish/ J. Weinstein // Oris Environ. Toxic. Chem., 1999. -N18.-P. 2087-2094.

127. Zvara I. determination of very-low levels of radioactivity (technical report) /1. Zvara, P. Povinec, I. Sykora // Pure and applied chemistry, 1994. -V.66,N12 - P.2537-2586.1. Электронные источники:

128. Высокопроизводительный скрининг образцов, содержащих альфа и бета -излучающие радионуклиды: обзор методов. Packard Ind.,CPR-000047 Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.canberra.ru/html/literature/alphabeta.pdf

129. Государственное унитарное предприятие объединенный эколого-технологический и научно-исследовательский центр по обезвреживанию

130. РАО и охране окружающей средю-(ГУП МосНПО «Радон»). Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.radon.ru/cipt/radiochemistry/default.htm

131. Российский сайт ядерного нераспространения. Электронный ресурс. Режим доступа: www.NuclearNo.ru

132. Сцинтилляционные счетчики. Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.oval.ru/enc/69897.html

133. Сцинтилляционный метод (Характеристики сцинтилляционного детектора и его использование в качестве гамма спектрометра). Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.npi.msu.ru/structinc/lib/books/sovrmet/Labl .pdf

134. Сцинтилляционный счётчик Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.booksite.rU/fulltext/l/001/008/108/076.htm

135. Счетчики на основе жидких сцинтилляторов модельного ряда 'Tri-Carb' компании PerkinElmer(CLUA). Электронный ресурс. Режим доступа: http://spt.by/content/view/63/39/

136. Методы регистрации ядерных излучений. Визуальный метод сцинтилляций. Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.sduto.ni/87/l 04/2399/index 1.1 .html#Toc52005022