Внутрипопуляционные взаимодействия в культуре бактерий Pseudomonas aeruginosa тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат биологических наук Опарина, Ирина Алексеевна

• Опарина, Ирина Алексеевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Опарина, Ирина Алексеевна

Введение.

Обзор литературы.

1. Диссоциация - процесс адаптации популяции бактерий к условиям среды.

1.1. Физиолого-биохимические и морфологические особенности диссоциантов бактерий.

1.1.1. Морфология колоний и клеток диссоциантов.

1.1.2. Клеточные оболочки диссоциантов.

1.1.3. Особенности обмена веществ у диссоциантов.

1.1.4. Сравнение практически ценных свойств у диссоциантов бактерий.

1.2. Генетические основы диссоциативных переходов.

1.3. Влияние внешних факторов на рост диссоциантов.

1.3.1. Влияние физико-химических факторов среды на рост диссоциантов.

1.3.2. Влияние состава среды на рост диссоциантов.

2. Управление экологическими сообществами.

2.1. Потребности микроорганизмов в ресурсах среды.

2.1.1. Концепция потребностей.

2.1.2. Изменение потребностей в процессе роста.

2.2. Выявление ресурсных лимитирующих факторов.

2.2.1. О принципах лимитирования в экологии.

Экспериментальная часть

3. Объект и методы исследования.

3.1. Объект исследования.

3.2. Методы культивирования.

3.3. Оценка роста бактерий.

3.4. Определение основных биогенных элементов.

3.4.1. Определение глюкозы.

3.4.2. Определение фосфора.

3.4.3. Определение азота.

3.5. Определение потребностей диссоциантов в основных биогенных элементах.

3.6. Определение рН.

3.7. Феноменологический количественный анализ результатов.

3.8. Оценка погрешностей и доверительных интервалов измеряемых и рассчитанных величин.

4. Влияние различного количества углерода, азота и фосфора в среде на рост в монокультурах R-, S- и М-диссоциантов Pseudomonas aeruginosa.

4.1.1. Изучение воздействия углерода, азота и фосфора в широком диапазоне концентраций на рост диссоциантов Pseudomonas aeruginosa.

4.1.2. Динамика роста дисоциантов Pseudomonas aeruginosa и потребление ими углерода, азота и фосфора на исходной среде (серия опытов № 1).

4.2. Поиск лимитирующих концентраций основных биогенных элементов.

4.2.1. Рост диссоциантов Pseudomonas aeruginosa и потребление ими углерода, азота и фосфора на средах, ограниченных по одному из этих элементов (серия опытов №

4.2.2. Динамика роста диссоциантов Pseudomonas aeruginosa и потребление ими углерода, азота и фосфора в средах, ограниченных одним из этих элементов (серия опытов №

4.2.3. Рост диссоциантов Pseudomonas aeruginosa на средах, ограниченных по одному из биогенных элементов (серия опытов № 4).

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Внутрипопуляционные взаимодействия в культуре бактерий Pseudomonas aeruginosa»

Актуальность проблемы. Одним из механизмов поддержания гетерогенности микробной популяции является диссоциация. Диссоциация — это расщепление однородной популяции на варианты или диссоцианты с реверсией в исходный вариант. Диссоциативные переходы обусловливаются геномными перестройками, которые происходят с высокой частотой порядка 10"2 - 10"4 на одно клеточное деление и обладают плейотропным действием. Это определяет постоянные и обратимые изменения многих физиолого-биохимических и морфологических свойств: скорости роста, способности к синтезу и трансформации практически ценных веществ, деградации ксенобиотиков и углеводородов (Du-bos, 1976; Беляков и др., 1987; Иванов и др., 1990, Милько, Егоров, 1991; Ряпис, Беляков, 1998). Однако данных о пищевых потребностях диссоциантов в литературе мало (Беляков, Ряпис, 1990).

Диссоциация широко распространена среди бактерий. Поэтому ее необходимо учитывать при решении проблем различного рода, в частности проблем охраны окружающей среды, и прежде всего таких, как очистка от промышленных загрязнений почв, водоемов (Калакуцкий и др, 1996; Аношкин и др., 1997; Мордухова и др, 2000) и определение степени этих загрязнений (Сафронова и др., 1995; Скворцова, 1997). Изучение потребностей диссоциантов в основных биогенных элементах среды, устойчивости к внешним воздействиям позволит управлять структурой популяции бактерий и эффективностью микробиологического процесса, а также прогнозировать поведение бактериальной популяции в зависимости от условий окружающей среды.

В настоящее время существует несколько определений понятия «потребности». Например, количество субстрата, необходимое для наращивания единицы клеточной биомассы (Перт, 1978). Левич А.П. (2000) предлагает потребностями клеток микроводорослей в ресурсах среды считать количество ресурса, поглощенное из среды одной клеткой. Для определения потребности необходимо установить минимальную концентрацию ресурса, из-за исчерпания которого происходит остановка роста культуры.

Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы было изучение влияния исходных концентраций основных биогенных элементов в среде на рост R-, S- и М-диссоциантов Pseudomonas aeruginosa и определение потребностей клеток в биогенных элементах для управления сообществом бактерий.

Поэтому в настоящем исследовании перед нами стояли следующие задачи: для культур трех диссоциантов P. aeruginosa К-2

1) выявить влияние основных биогенных элементов в широком диапазоне их концентраций на рост диссоциантов;

2) исследовать в динамике рост и потребление углерода, азота и фосфора культурами диссоциантов, изменение рН среды и состава популяции на стационарной фазе роста;

3) определить лимитирующие рост концентрации биогенных элементов;

4) рассчитать потребности диссоциантов в углероде, азоте и фосфоре;

5) исследовать возможности регулирования состава поликультуры диссоциантов на стационарной стадии роста с помощью начального содержания в среде основных биогенных элементов;

6) определить различия в соотношении двух путей использования глюкозы (окисление и брожение) у каждого диссоцианта:

Научная новизна работы. Впервые изучено влияние основных биогенных элементов на рост трех диссоциантов бактерий. Установлено, что при периодическом культивировании бактерий P.aeruginosa начальные концентрации ресурсов влияют на состав популяции поли- и монокультур диссоциантов на стационарной стадии роста. Изменение соотношения диссоциантов происходит благодаря различиям в пищевых потребностях: по мере уменьшения концентрации основных биогенных элементов происходит смена доминирующего диссоцианта. Показано, что потребности R-, S- и М-диссоциантов в глюкозе, 6 нитратах и фосфатах увеличиваются в ряду R, S, М. Выявлено, что при использовании глюкозы в качестве источника углерода диссоцианты различаются по степени смещения обмена веществ в сторону брожения или окисления.

Практическая значимость работы. Полученные результаты могут быть использованы для прогнозирования поведения популяций бактерий в различных экологических условиях, в частности в зависимости от различных количеств основных биогенных элементов в среде. Результаты могут иметь практическое значение при использовании диссоциирующих видов бактерий в различных биотехнологических процессах.

1. ДИССОЦИАЦИЯ БАКТЕРИЙ — ПРОЦЕСС АДАПТАЦИИ ПОПУЛЯЦИИ БАКТЕРИЙ К УСЛОВИЯМ СРЕДЫ

Популяция бактерий состоит из вариантов (групп организмов), различающихся генетическими, физиолого-биохимическими и морфологическими свойствами. Так как в популяции при определенных условиях преобладает один из вариантов, для которого такие условия являются оптимальными, то обычно полагают, что популяция бактерий гомогенна. Но как только условия среды меняются, в популяции происходит перестройка, приводящая к смене доминирующего варианта, и соответственно изменению функций популяции в целом. Процесс расщепления однородной популяции на варианты, носит название «диссоциация», в медицинской литературе чаще используют термин «вариация фаз». Диссоциация состоит из двух процессов: возникновения дис-социантов в результате изменений генетических свойств клетки и селекции различных вариантов при развитии культуры (Dubos, 1976; Беляков и др., 1987; Милько, Егоров, 1991; Иванов и др., 1990; Ряпис, Беляков, 1998).

Диссоциация была открыта еще в 20-е годы медицинскими микробиологами, которые внесли основной вклад в изучение этого процесса. Ими было установлено, что диссоцианты различаются по такому важному для человека признаку, как вирулентность.

В англоязычной литературе специалисты, незнакомые с термином «диссоциация», называют этот процесс «adaptive radiation» (адаптивное расщепление) (Rainey et al., 1998). И это вполне соответствует биологическому смыслу данного процесса, суть которого заключается в расширении границ выживаемости вида в меняющихся условиях внешней среды. Таким образом, диссоциация — это адаптация на уровне популяции.

Изменения при диссоциативных переходах происходят с высокой частотой порядка от одной сотой до одной десятитычной на одно клеточное деление, носят постоянный и обратимый характер, при этом наблюдается плейо-тропный эффект.

Одни из первичных фенотипических изменений при диссоциативных переходах происходят в клеточной оболочке: капсуле, клеточной стенке, цито-плазматической мембране. Эти различия определяют многие особенности диссоциантов: изменяют скорость поступления веществ в клетки, а следовательно, скорость роста, способность к трансформации, деградации ксенобиотиков и углеводородов; изменяют скорость выделения веществ из клетки, в том числе промышленно ценных биологически активных веществ; изменяют устойчивость клеток к действию физических и химических факторов; отличия в текучести мембран могут изменять активность ряда ферментов, связанных с ними; изменяют морфологию клеток и характер их расхождения после деления и, следовательно, морфологию колоний.

Однако специалисты по общей и промышленной микробиологии уделяют мало внимания диссоциации как одному из важнейших процессов, создающих гетерогенность микробной популяции. При диссоциации бактерий-продуцентов могут изменяться количество и качество синтезируемых продуктов. Появление в популяции неактивных и малоактивных вариантов приводит к снижению выхода целевого продукта, что в производстве приводит к большим потерям. Высокоактивным в разных микробиологических процессах может быть каждый из диссоциантов (Милько, Егоров, 1991).

Диссоциация широко распространена среди бактерий. Поэтому ее необходимо учитывать при решении проблем различного рода, в частности охраны окружающей среды, и прежде всего таких как очистка от промышленных загрязнений почв, водоемов и определение степени этих загрязнений (Сафроно-ва и др., 1995; Скворцова, 1997). Изучение физиолого-биохимических особенностей диссоциантов, их потребностей в основных биогенных элементах среды, устойчивости к внешним воздействиям позволит управлять структурой популяции бактерий и эффективностью микробиологического процесса, а также прогнозировать поведение бактериальной популяции в зависимости от условий окружающей среды.

Заключение диссертации по теме «Экология», Опарина, Ирина Алексеевна

ВЫВОДЫ

1. Различные начальные концентрации ресурсов в среде приводят к изменению соотношения диссоциантов Pseudomonas aeruginosa К-2 в моно- и смешанных культурах на стационарной фазе роста: на богатых средах доминирует R-диссоциант, на бедных - М-диссоциант.

2. У диссоциантов P.aeruginosa К-2 обнаружены различия в соотношении двух путей использования глюкозы: окисление и брожение. Окисление доминирует у R-диссоцианта, брожение - у М-диссоцианта, S-диссоциант обладает наиболее лабильным энергетическим процессом.

3. Потребности R-, S- и М- диссоциантов P. aeruginosa в глюкозе, нитратах и фосфатах различаются и увеличиваются в ряду R, S, М. Потребности в глюкозе зависят от пути ее использования.

4. Количество диссоциантов в посевном материале изменяют состав популяции на стационарной фазе роста.

5. Расщепление популяции бактерий на диссоцианты позволяет виду в целом с наибольшей полнотой использовать пищевые ресурсы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО 4 ГЛАВЕ

На рис. 16 обобщены в одном масштабе все данные по росту трех диссоциантов в монокультуре, т.е. во всех четырех вариантах опытов.

R-диссоциант. Состав популяции R-диссоцианта не меняется при достаточной для роста концентрации биогенных элементов (серии опытов №№ 1 и 2) и при очень низкой их концентрации (серия опытов № 4), когда количество клеток мало, чтобы изменился состав популяции.

В серии опытов № 3 при недостатке в среде азота или фосфора в популяции R-диссоцианта появляются колонии S-диссоцианта, составляющие в конце процесса культивирования 30 - 40%, при этом рН среды снижается до 4. Из трех диссоциантов R является быстрорастущим: во всех вариантах сред, кроме опытов серии № 4, в первые часы рост R-диссоцианта наибольший.

Он самый требовательный к содержанию в среде глюкозы: в конце культивирования при уменьшении ее исходной концентрации в среде с 2% до 1% рост уже снижается, а при 0.2% становится даже ниже, чем у М-диссоцианта.

На средах, ограниченных азотом или фосфором, но содержащих достаточное количество углерода (серия опытов № 3), S-диссоциант, у которого в этих условиях выше скорость роста, постепенно вытесняет из популяции исходный R-диссоциант. Подкисление сред обусловлено уже ростом клеток S-диссоцианта.

Во всех средах соотношение потребленных углерода и фосфора (табл.9) минимально и минимально также изменение рН. Следовательно, у клеток R-диссоцианта преобладает окислительный путь использования глюкозы, хотя полное отсутствие брожения не доказано. Исключение составляют среды, ограниченные азотом и фосфором в серии опытов № 4, где происходит подкисление среды без изменения состава популяции. Возможно, в этом случае и появляются клетки S-диссоцианта, но из-за очень низкого роста бактерий они не выявляются.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Опарина, Ирина Алексеевна, 2002 год

1. Азизбекян P.P. Энтомопатогенные бактерии Bacillus thuringiensis и их фаги: генетическая и физиологическая характеристики: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1980.-20 с.

2. Алексеев В.В., Сазыкина Т.Г. Модель конкуренции между водорослями в замкнутом фитоценозе // Ж. общ. биол. 1981. - Т.52, №3. - С.448.

3. Андреева Е.А. Микрофлора внутренних поверхностей гипербарических комплексов и сравнительная оценка эффективности дезинфицирующих средств: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 2000. - 24 с.

4. Андрюшечкина А.В., Николаева Л.П. Особенности обмена фосфорсодержащих соединений у R- и S-форм некоторых видов микроорганизмов // Микробиология. 1962. - Т.31, №4. - С.643-645.

5. Астуарова О.Б., Белых Р.А., Азизбекян P.P. Аминирование и синтез глута-мата у R- и S-форм Bacillus thuringiensis II Микробиология. 1979. - Т.48, №3. - С.509 -513.

6. Беляков В.Д., Голубев Д.Б., Каминский Г.Д., Тец В.В. Саморегуляция паразитарных систем. Л.: Медицина, 1987. - 239 с.

7. Беляков В.Д., Каминский Г.Д., Каминская С.Г. Гипотеза направленной самоперестройки популяций микроорганизмов и ее общебиологическое значение // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1985. №1.-С.93- 100.

8. Беляков В.Д., Ряпис Л.А., Илюхин В.И. Псевдомонады и псевдомонозы. -М.: Медицина, 1990. 224 с.

9. Браун В. Генетика бактерий. М., 1968.

10. Веремейко С.Н., Здоровенко Г.М. Особенности строения липополисахарида Pseudomonas fluorescens ИМБ 247 (биовар II) // Микробиология. 2000. -Т.69, №3. - С.362 - 369.

11. Веремейко С.Н., Здоровенко Г.М. Характеристика липополисахарида Pseudomonas fluorescens II Микробиология. 1994. - Т.63, №5. - С.831 - 839.

12. Войшвилло Н.Е., Турута A.M., Камерницкий А.В., Милько Е.С., Джланти-ашвилли Н.В., Стрелкова О.Г. стероидтрансформирующая активность диссоциативных вариатов Phodococcus sp. 11 Прикл. биохимия и микробиология. 1993. - Т.29. №3.

13. Выборных С.Н., Парыгин Е.В., Егоров Н.С. Колониально-морфологическая изменчивость Bacillus licheniformis 28 КА в связи с образованием антибиотиков, экзопротеаз и спор//Биол. науки. 1990. -№12. - С. 127- 134.

14. Высоцкий В.В. Гетероморфизм бактерий // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1979. -№3. - С.58 - 61.

15. Высоцкий В.В., Вайсман И.Ш., Ефимова О.Г., Чемурзаева Н.В. Криографи-ческое изучение межклеточных связей в популяциях агаровых культур Вог-detella pertussis II Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. -С.54 - 60.

16. Головлев E.JI. Введение в биологию стационарной фазы бактерий: механизм общего ответа на стрессы // Микробиология. 1999. - Т.68, №5. -С.623 - 631.

17. Гривня П., Озолиня Р.К., Тевелева М.К., Мишке И.В. Бактериологические свойства диссоциантов Pseudomonas stutzeri И Микроорганизмы в сельскомхозяйстве: Тез. докл. 4 Всес. науч. конф., Пущино, 20 24 янв. 1992. - Пущине, 1992. - С.44.

18. Данилевич В.Н., Степаншин Ю.Г., Троицкий А.В., Федосеева В.Г. Новый класс мутаций плазмиды RP4, индуцирующих мукоидный характер роста клеток Escherichia coli К-12 // Генетика. 1982. - Т.18, №6. - С.896 - 905.

19. Дорошенко Е.В., Лойко Н.Г., Ильинская О.Н., Колпакова А.И., Горнова И.Б., Климанова Е.В., Эль-Регистан Г.И. Характеристика диссоциантов Bacillus cereus II Микробиология. 2001. - Т.70, №6. - С.811 - 819.

20. Егоров Н.С., Максимов В.Н., Милько Е.С., Степанова Р.А., Ясева М.Б. Частота возникновения S-, R- и М-вариантов в культуре Mycobacterium lacti-colum II Вестн. Моек ун-та. сер. Биол. 1981. - №1. - С.48 -52.

21. Ермоленко З.М., Чугунов В.А., Герасимов В.Н., Мартовецкая И.И., Холо-денко В.Г. Влияние некоторых факторов окружающей среды на выживаемость внесенных бактерий, разрушающих нефтяные углеводороды // Биотехнология. -1997. №6. - С.33-38.

22. Жарикова Г.Г., Катруха Г.С., Силаев А.Б., Раджапов Р. А. Образование антибиотиков-полипептидов различными вариантами Bacillus brevis var. G.-B. // Биология Bacillus brevis var. G.-B. M., 1968. - C.45 - 61.

23. Жарикова Г.Г., Маркелова С.И. Диссоциация R- и Р+ -вариантов Bacillus brevis var. G.-B. при развитии на синтетической среде с аминокислотами в качестве единственного источника азота // Антибиотики. 1971а. - Т. 16, №3. - С.265 - 267.

24. ЗЗ.Зернов С.А. Общая гидробиология. М. - JL, 1934. - 580 с.

25. Иванов П.Л., Вербовая Л.В., Рысков А.П. и др. Геномный полиморфизм у диссоциативных форм Bacillus subtilis (mesentericus) 76. Идентификация диссоциантов методом геномной «дактилоскопии» // Молекулярная биология. 1990. - Т.24, №2. - С.560 - 565.

26. Иерусалимский Н.Д. Теоретические и промышленные аспекты микробиологического синтеза // Вестник АН СССР. 1965. - №4. - С.42.

27. Избранные задачи большого практикума по микробиологии. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1991. - 126 с.

28. Калакуцкий Л.В., Озерская С.М., Евтушенко Л.И. Российская коллекция микроорганизмов // Прикл. биохимия и микробиология. 1996. - №.32, Вып.1. - С.144 -154.

29. Кирсанов А.Е. Терия Митчерлиха, ее анализ и практическое применение. -М.-Л., 1931.-200 с.

30. Комарова Т.И., Поршнева О.В., Коронелли Т.В. Образование трегалозы клетками R- и S-вариантов Rhodococcus erithropolis в уловиях стресса // Микробиология. 1998. - Т.67, №3. - С.443 - 446.

31. Коронелли Т.В. Экофизиологические основы и практический опыт интродукции углеводородокисляющих бактерий в природные экосистемы // Интродукция микроорганизмов в окружающую среду. Тез. докл. науч. конф., Москва, 17 19 мая 1994. - М., 1994. - С. 53.

32. Коронелли Т.В., Степанова Л.Н. Исследование свойств парафинокисляю-щих штаммов Ppyocyanea II Микробиология. 1968. - Т.37, №3. - С.460 -465.

33. Левич А.П. Потребности фитопланктона в ресурсах среды и пути управления структурой альгоценозов // Журн. общ. биологии. 1989. - Т.50, №3. -С.316 - 328.

34. Левич А.П. Управление структурой фитопланктонных сообществ (эксперимент и моделирование): Автореф. дис. докт. биол. наук. -М., 2000. 19 с.

35. Левич А.П., Алексеев В.Л., Рыбакова С.Ю. Оптимизация структуры экологических сообществ: модельный анализ // Биофизика. 1993. - Т.38, Вып.5 -С.877 - 885.

36. Левич А.П., Булгаков Н.Г. Биогенные элементы в среде и фитопланктон: отношение азота к фосфору как самостоятельный регулирующий фактор // Успехи современной биологии. 1995. - Т.15, Вып.1. - С.13 - 23.

37. Левич А.П., Булгаков Н.Г. О возможности регулирования видовой структуры лабораторного альгоценоза // Изв. РАН. серия биол. 1993. - №4. - С.569 -578.

38. Левич А.П., Булгаков Н.Г., Замолодчиков Д.Г. Оптимизация структуры кормовых фитопланктонных сообществ / Под ред. В.Н.Максимова. М.: Товарищество научных изданий КМК, 1996. - 136 с.

39. Левич А.П., Личман Е.Г. Модельное изучение возможностей направленного изменения структуры фитопланктонных сообществ // Ж. общ. биол. 1992. -Т.53, №5. - С.689 - 703.

40. Левич А.П., Максимов В.Н., Булгаков Н.Г. Теоретическая и экспериментальная экология планктонных водорослей. Управление структурой и функциями сообществ. М., 1997. - 184 с.

41. Левич А.П., Худоян А.А., Булгаков Н.Г., Артюхова В.И. О возможности управления видовой и размерной структурами сообщества в экспериментах с природным планктоном in vitro // Биол. науки. 1992. - № 7. - С. 17 - 28.

42. Либих Ю. Химия в приложении к земледелию и физиологии. М. - Л., 1936.-408 с.

43. Лобанов В.В., Марченков В.И. Современное состояние проблемы изменчивого Vibrio cholerae II Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1999. - № 4. - С. 103 - 106.

44. Максимов В.Н. Многофакторный эксперимент в биологии. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1980.-279 с.

45. Максимова М.П. Минеральное питание и проблема обеспеченности фитопланктона питательными солями // Обзорная информация ЦНИИТЭИРХ. -1977.-Вып. 1.-39 с.

46. Малый практикум по биохимии. / Под ред. проф. В.В. Юркевича М.: Изд-во Моск. ун-та, 1979. - 209 с.

47. Мартынкина JI.П., Милько Е.С. Ультраструктурные особенности диссоциантов Rhodococcus rubropertinctus и Streptococcus lactis II Микробиология. -1991. -Т. 60, №2.-С. 334-338.

48. Медведева С.Е., Пузырь А.П., Могильная О.А. Цитоархитектоника бактериальных колоний // Препринт № 149 Б. Ин-т физики им. Л.В. Керенского СО АН СССР. Красноярск, 1991. - 35 с.

49. Методы почвенной микробиологии и биохимии. / Под. ред. Д.Г.Звягинцева. -М.: Изд-во Моск. ун-та, 1991. 304 с.

50. Милько Е.С. Выживаемость диссоциантов углеводородокисляющего штамма Pseudomonas aeruginosa при хранении // Микробиология. 1998. - Т.67, №1.-СЛ02- 105.

51. Милько Е.С., Егоров Н. С. Гетерогенность популяции бактерий и процесс диссоциации. М.: Изд - во Моск. ун-та, 1991. - 142 с.

52. Милько Е.С., Егоров Н.С., Максимов В.Н., Недбайло А.Н. Влияние аэрации и концентрации фосфора в среде на рост R-, S- и М-форм Mycobacterium lacticolum в смешанных культурах // Микробиология. 1977. - Т.46, №3. -С.490 - 495.

53. Милько Е.С., Красильникова Е.Н. Особенности углеводного метаболизма R- S- и М-диссоциантов Pseudomonas aeruginosa II Микробиология. 1999. -Т.68,№2.-С.211-214.

54. Милько Е.С., Мартынкина Л.П. Морфологические и физиолого-биохимические особенности диссоциантов Pseudomonas aeruginosa // Микробиология. 1996. - Т.65, №5. - С.352 - 356.

55. Милько Е.С., Никитенко Л.А. Влияние физических и химических факторов среды на рост диссоциантов Pseudomonas aeruginosa II Прикл. биохимия и микробиология. 1998. - Т.34, №2. - С. 171 - 174.

56. Митчерлих Э.А. Определение потребности почвы в удобрении. М. - Л., 1931.- 104 с.

57. Мордухова Е.А., Кочетков В.В., Лобанова Е.В., Степенькин А.В., Бородин A.M. Влияние салицилата натрия на популяционную динамику ризосферно-го штамма Pseudomonas aureofaciens в почве и на корнях пшеницы // Микробиология. 2000. - Т.69, №6. - С.844 - 849.

58. Мурадов М. Фаговая конверсия алкалоидообразования у Pseudomonas aeruginosa 11 VI съезд ВМО. Рига, 1980. - №2. С.26.

59. Настоящая Н.И. Морфолого-биохимические изменения культуры Pseudomonas aeruginosa-деструктора АПАВ: Автореф. дис. канд. биол. наук. -Минск, 1992.- 19 с.

60. Николаев Ю.А., Милько Е.С. Адгезивные и ростовые свойства R- и S-диссоциантов Pseudomonas fluorescens II Микробиология. 2000. - Т.69, №2.- С.293 294.

61. Нисилевич В.Ф. Физиолого-биохимические и ультраструктурные особенности S- и R-форм Streptococcus pneumonia'. Автореф. дис. канд. мед. наук. -М., 1987.

62. Общие основы изучения водных систем / Под ред. Г.Г.Винберга. Л., 1979.- 276 с.76.0дум Ю. Основы экологии. М., 1975. - 740 с.77.0дум Ю. Экология М, 1986. -Т.1.-328 с.

63. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток М.: Мир, 1978.-331 с.

64. Пианка Э. Эволюционная экология М., 1981. - 400 с.

65. Плохинский Н.А. Биометрия. М.: Изд-во моек, ун-та, - 1970. - 367 с.

66. Полетаев И.А. Модели Вольтерра «хищник жертва» и некоторые их обобщения с использованием принципа Либиха // Ж. общ. биол. - 1973. -Т.34, №1. - С.43.

67. Поляков Г.Д. Пособие по гидрохимии для рыбоводов. М: - 1950.

68. Ринкис Г.Я., Ноллендорф В.Ф. Сбаллансированное питание растений макро- и микроэлементами. Рига, 1982. - 304 с.

69. Рубан Е.Л. Физиология и биохимия представителей рода Pseudomonas М.: Наука, 1986.-200 с.

70. Рубан Е.Л. Хранение культур микроорганизмов // Прикл. биохимия и микробиология. 1989. - Т.25, Вып.З. - С.291 - 301.

71. Ряпис Л.А., Беляков В.Д. Молекулярная эпидемиология дифтерии // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1998.-№4.-С.101-106.

72. Сафронова И.Ю., Семенова Е.В., Аркадьева З.А. Свойства Alcalygenes ху-losoxidans активно окисляющего малеиновую кислоту // Микробиология. -1995. -Т.64, №1. С.32 - 35.

73. Светличный В.А., Эль-Регистан Г.И., Романова А.К., Дуда В.И. Характеристика ауторегуляторного фактора d, вызывающего автолиз клеток Pseudomonas carboxydoflava и Bacillus cereus II Микробиология. 1983. - Т.52, №1. - С.33 - 38.

74. Семевский Ф.Н., Семенов С.М. Математическое моделирование экологических процессов. Л., 1882. - 280 с.

75. Скворцова И.Н. Микробиологические и некоторые санитарно-гигиенические свойства городских почв // Почва, город, экология. М.: Книга издана при поддержке Московского Городского Экологического Фонда и РФФИ, 1997. - С.125 - 146.

76. Стасишина Г.Н., Могильная О.А., Волова Т.Г., Гусейнов О.А., Калачева Г.С., Медведева С.Е., Плотников В.Ф., Франк Л.А. Исследование гетерогенности в культуре водородных бактерий Alcaligenes eutrophus II Микробиология. 1999. - Т.68, №2. - С.198 - 205.

77. Страшкраба М., Гнаук А. Пресноводные экосистемы. Математическое моделирование. М., 1989. - 373 с.

78. Талалаев Е.В. К изучению внутриштаммовой изменчивости популяций эн-томопатогенных бацилл группы Thuringiensis // Микроорганизмы в защите растений от вредных насекомых. Иркутск, 1978. - С.З - 12.

79. Тевелева М.К., Осе В.П., Мишке И.В. Изменчивость Pseudomonas stutzeri 136-продуцента цитокининов // Регуляция микробного метаболизма. Пу-щино-на-Оке, 1989. - С. 165 - 166.

80. Тогунова А.И. Туберкулез. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. М., 1973. - С.239 - 249.

81. Умнов А.А. Математическая модель биотического круговорота вещества и энергии, происходящего в загрязненной реке // Биологические процессы и самоочищение на загрязненном участке реки (на примере Верхнего Днепра). -Минск, 1973.-С. 157.

82. Федоров В.Д., Гильманов Т.Г. Экология М., 1980. - 464 с.

83. Филиппова С.Н., Кузнецов В.Д., Бадяутдинов Д.Н., Рысков В.А., Васильев В.А., Даниленко В.Н. Изучение внутрипопуляционных спонтанных морфологических вариантов Streptomyces oligocarbophilus isp 5589 // Микробиология. 1999. - Т.68, №3. - С.375 - 382.

84. Хесин Р.Б. Непостоянство генома. М., 1985.

85. Цавкелова Е.А., Ботвинко И.В., Кудрин B.C., Олескин А.В. Детекция нейромедиаторных аминов у микроорганизмов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии // ДАН . 2000. - Т.372, №6. - С.840 - 842.

86. Церлинг В.В. Диагностика питания сельскохозяйственных культур. М., 1990.-235 с.

87. Шевченко Л.С., Командрова Н.А. Популяции Yersinia enterocolitica и их характеристики // Достижения микробиологии — практике. VII съезд ВМО. -Алма-Ата, 1985. -Т.2. С. 165.

88. Шеховцов В.П., Жарикова Г.Г. Электронно-микроскопическое изучение расположения клеток в колониях бактерий // Биол. науки. 1984. - №3. -С.93 - 97.

89. Algren G. Effects on algal growth rates by multiple nutrient limitation // Ar-chiv f. Hidrobiologie. 1980. - V.89, №1 / 2. - P.43.

90. Al-Hadhrami M.N. Lappin-Scott H.M., Fisher P.J. Bacterial survival and n-alcan degradation within omani crude oil and a mousse // Mar. Pollut. Bull. -1995. T.30, №6. - C.403 - 408.

91. Bierman V.J. Mathematecal model of the selectivee enhancement of blue-green algae by nutrient enrichment // Modelling biochemical processes in aquatic ecosystems. 1976. - P. 1.

92. Blackman F.F. Optima and limiting factors // Annals of botany. 1905. -V.19. - P.281.

93. Classen P.A.M., Kortstee G.J.J., Oosterveld van Vliet W.A. van Neerven A.R.W. Colonial heterogenecity of Tiobacillus versutus II J. Bact. 1986. -Vol.168, № 2.-P.791 -794.

94. Coutts D.A.P., Senior E., Balba M.T.M. Multi-stage chemostat investigation of interspecies interactions in a hexanoate-catabolizing microbial association isolated from an anoxic landfill // J. Appl. Bacteriol. 1987. - №62. - P.251 - 260.

95. De Oliveira N.S.M., Feliciano A.S.M. Changes in cellular components in a Cyanobacterium (Synechocystis aquatilis f.salina) subected to different N/P ratios — an ecophysiological study // Environ. Toxicol. 1999. - VI4, №1. - C.37 - 44.

96. Droop M.R. Some thought on nutrient limitation in algae // J. Phycol. 1973. -V.9.-P. 264.

97. Dubos F. One century of bacterial polimorfism // Role Cult. Collect. Era Mol. Biol. Washington, 1976. - P.35 - 42.

98. Go van J.R.W., Fife G.A., McMillan C. The instability of mucoid Pseudomonas aeruginosa: fluctuation test and improved stability of the mucoid form in shaken culture // J. Gen. Microbiol. 1979. - Vol.110, №1. - p.229 - 232.

99. Groot W.T.de. Modelling the multiple limitation of algal growth // Ecological Modelling. -1983. V. 18. - P.99.

100. Hanson K.G., Nigam A., Kapadia M., Desai A.J. Crude oil degradation by Acinetobacter sp. A3 as influenced by nitrogen, phosphorus and sulfactants // Indian J. Exp. Biol. 1996. - V.34, №12. - C.1276 - 1278.

101. Lachica R.V., Zink D.L., Ferris W.R. Association of fibril structure formation with cell surface properties of Yersinia enterocolitica II Infec. and Immunol. -1984. Vol.46, №1. - P.272 - 275.

102. Larsen D.P., Mercier H.T., Malweg K.W. Modelling algal growth dynamics in Shagawa Lake, Minnesota // Modelling the Eutrophication Process. Ann Arbor, 1974.-P.15.

103. Levich A.P., Bulgakov N.G. Regulation of species and size composition in phitoplancton communities in situ by N:P ratio // Russian Journal of Aquatic Ecology. 1992.-V.l, №2.-P. 149.

104. Liebig J. Chemistry in its application to agriculture and physiology. London, 1840.

105. Martin D.R. Mucoid variation in Pseudomonas aeruginosa induced by the action of phage // J. Med. Microbiol. 1973. - Vol.6, №1. - P.l 11 - 118.

106. Mitscherlich E.A. Das Gesert des Minimums und das Gesetz des abnehmenden Bodenertrags // Landw. Jahrb. 1909. - Bd.38. - S.595.

107. Mitscherlich E.A. Die Bestimmung des Dungerbedurfnisses des Bodens. -Berlin, 1925.

108. Patten B.G., Egloff D.A., Richardson Т.Н. Total ecosystem model for a cove in Lake Texoma // Systems Analysis in Ecology. New York, 1975. - V.3. - P.206.

109. Radoutcheva T.S., Veljanov D.K. Study of some metabolic features of R- and S-forms of Pseudomonas pseudomallei II Докл. Болг. АН. 1981. - Vol.34, №12. - P.69 - 73.

110. Rainey P.B., Travisano V. Adaptive radiation in a heterogeneous environment // Nature. 1998. - Vol.394, №2. - C.69 - 72.

111. Rhee G.-Yull, Gotham J.T. Optimum N:P ratios and the coexistance of planc-tonic algae // J. Phicol. 1980. - V. 16. - P.486 - 489.

112. Shelford V.E. The reactions of certain animals to gradients of evaporating power and air // Biol. Bull. 1913. - V.25. - P.79.

113. Terry K.L. Growth rate variation in the N:P requirement ratio of phytoplancton // J. Phicol. 1985. - V.21. - P.323 - 329.

114. Tilman D. Resourse competition and community structure. New Jersey, 1982.-290 p.

115. Tilman D. Resourse competition between planktonic algae: an experimental and theoretical approach // Ecology. 1977. - V.58. - P.338 - 348.

116. Ururahy A.E.P., Marins M.D.N., Vital R.L., Gabardo I.T., Pereira N. Effect of aeration on biodegradation of petroleum waste // Rev. Microbiol. 1998. - V.29. №4. - C.254 - 258.

117. Wilkinson T.G., Topiwala H.H., Hamer G. Interactions between a mixed bacterial population growing on methane in continuous culture // Biotechnol. Bioeng. 1974. - №16. - C41 - 47.

118. Xu K.D., Stewart P.S., Xia F., Huang C.T., McFeters G.A. Spatial phisiologi-cal heterogeneity in Pseudomonas aeruginosa biofilm is determined by oxygen133