Влияние природных и антропогенных факторов на активность ферментов сыворотки крови черноморских рыб: на примере морского ерша тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат биологических наук Рощина, Ольга Владимировна

• Рощина, Ольга Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рощина, Ольга Владимировна

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

РАЗДЕЛ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ферменты как индикаторы физиологического состояния рыб.

1.2 Роль сывороточных ферментов для оценки физиологического статуса рыб

1.2.1 Роль аминотрансфераз в обмене веществ.

1.2.2 Роль щелочной фосфатазы в обмене веществ.

1.2.3 Роль альдолазы в обмене веществ.

1.3 Влияние меди на организм рыб.

РАЗДЕЛ 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Экологическая характеристика мест обитания морского ерша.

2.2 Характеристика объекта исследования.

2.3. Методы исследования

2.3.1. Физико-химические методы

2.3.1.1. Определение активности ферментов.

2.3.1.2. Определение содержания меди.

2.3.2. Электрофоретический анализ.

2.3.3. Токсикологические методы.

2.3.4. Статистическая обработка результатов.

РАЗДЕЛ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Электрофоретический анализ АсАТ сыворотки крови морского ерша.

3.2. Возрастные особенности активности ферментов в сыворотке крови морского ерша.

3.3. Половые особенности активности ферментов в сыворотке крови морского ерша.

3.4. Сезонные особенности активности ферментов в сыворотке крови морского ерша.

3.5. Ответные реакции морскго ерша на загрязнения среды обитания 3.5. 1. Влияние содержания токсичных элементов в мышцах морского ерша на активность сывороточных ферментов (природные исследования).

3.5.2. Влияние купроксата на активность ферментов в сыворотке крови рыб (экспериментальные исследования).

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние природных и антропогенных факторов на активность ферментов сыворотки крови черноморских рыб: на примере морского ерша»

Актуальность проблемы

Прибрежные морские экосистемы в большей степени подвержены антропогенному прессингу в результате сброса сточных вод промышленных, сельскохозяйственных и коммунальных предприятий. В прибойной зоне концентрируется множество различных загрязнителей (тяжелые металлы, нефтепродукты, пестициды и другие органические соединения). Это приводит к изменению гидрохимического режима, нарушению эволюционно сложившихся связей между различными компонентами сообщества, развитию процессов эвтрофирования, сокращению численности видов и их разнообразия [53, 83, 84, 99].

Ежегодно сбросы сточных вод на территории Украины составляют около 7000 млрд. м , большая часть из которых попадает в Черное море. При этом только 60% являются нормативно очищенными. Ситуацию значительно осложняют аварии на очистных сооружениях в результате их изношенности и устаревших конструкций. Следствием этого является сброс в огромных количествах неочищенных сточных вод непосредственно в морские акватории [83]. Все это создает крайне неблагоприятные условия для функционирования гидробионтов в прибрежной части Черного моря. Последствия проявляются, прежде всего, в сокращении биоресурсов, изменении и уменьшении видового разнообразия ихтиофауны, смене доминирующих видов в сторону малоценных. Так, в бухтах Севастополя в 1990-х годах число видов рыб сократилось в два раза, а их численность снизилась в сотни раз по сравнению с 1950-ми гг. [58, 99]. Аналогичные тенденции наблюдаются и в других районах Черного моря и Мирового океана.

В настоящее время качество морской среды определяется наличием различных загрязнителей в воде, в донных отложениях, в гидробионтах. Химические методы измерения количества ксенобиотиков в воде позволяют проверить только их соответствие установленным нормативам. При этом реальный биологический эффект остается невыясненным, так как уровни насыщения морской среды загрязняющими веществами могут варьировать в достаточно широких пределах, что не всегда позволяет определить их токсичность для гидробионтов. Таким образом, система ограничений, основанная на предельно допустимых концентрациях (ПДК), не защищает в полной мере водные экосистемы от пагубного воздействия хозяйственной деятельности. В связи с этим возникает потребность в разработке достоверных методов и критериев токсикологического контроля [53, 90].

Рыбы, как верхнее трофическое звено водной экосистемы, считаются индикаторами загрязнения. По изменению их физиолого-биохимического состояния можно оценить и прогнозировать последствия нахождения токсических веществ в воде [53, 86]. Существование строгой зависимости между уровнем метаболизма и активностью ферментов позволяет охарактеризовать статус рыб с помощью молекулярных индикаторов [111,220].

Сывороточные ферменты являются чувствительными биоиндикаторами действия как природных, так и антропогенных: факторов [195, 226]. Они отражают физиолого-биохимическое состояние организма, а также его устойчивость и адаптационные возможности. В этом отношении наряду с антиоксидантными ферментами наиболее информативными считаются аминотрансферазы (аланин- и аспартатаминотрансфераза), щелочная фосфатаза и альдолаза, активность которых характеризует функциональное состояние печени, являющейся основным органом метаболических процессов и детоксикации ксенобиотиков [195].

Особый интерес представляет анализ с помощью данных показателей физиолого-биохимического статуса биомониторных видов. В качестве биомонитора, как было показано ранее, может выступать морской ерш Scorpaena porcas L. (широко распространен в прибрежной зоне; биологические особенности и жизненный цикл хорошо изучены; доступен для исследований). Кроме того, ерш не является основным промысловым видом (его выловы в районе Севастополя не превышают 400 кг/год). Поэтому при изучении его популяционных характеристик можно игнорировать промысловое изъятие [83].

Совершенно очевидно, что поиск и область применения биохимических индикаторов для экотоксикологической характеристики водных объектов является перспективным направлением, позволяющим быстро получить адекватную информацию о состоянии водной среды по откликам биоты. Одновременно при оценке степени тяжести и прогнозировании негативного воздействия на организм необходимо учитывать влияние различных биотических и абиотических факторов для более детального понимания механизмов ответных реакций рыб на действие загрязнителей, а также для корректного их применения в мониторинговых программах и прогностических целях.

Цель и задачи исследований

Цель настоящей работы состояла в изучении влияния природных и антропогенных факторов на активность ферментов аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ), альдолазы и щелочной фосфатазы в сыворотке крови морского ерша Scorpaena porcus L, обитающего в прибрежных акваториях г. Севастополя и перспективного в качестве биомонитора морской среды.

В соответствие с целью исследования были поставлены следующие задачи:

1. Установить возрастные и половые особенности активности ферментов в сыворотке крови морского ерша.

2. Изучить сезонные изменения активности сывороточных ферментов.

3. Исследовать электрофоретический спектр АсАТ в сыворотке крови рыб, обитающих в прибрежной зоне г. Севастополя.

4. Провести сравнительный анализ ферментов в сыворотке крови морского ерша, обитающего в бухтах с различной антропогенной нагрузкой.

5. Определить зависимость между активностью сывороточных ферментов и содержанием токсичных элементов в мышцах рыб.

6. В экспериментальных условиях установить токсические эффекты медьсодержащего пестицида купроксата на морского ерша.

7. Выявить наиболее информативные ферменты — биоиндикаторы физиолого-биохимического состояния рыб и среды их обитания с целью использования в мониторинговых программах.

Объект исследования -морской ерш, обитающий в прибрежной зоне г. Севастополя.

Предмет исследования -активность ферментов в сыворотке крови морского ерша при действии физиологических, природных и антропогенных факторов.

Методы исследования. Комплекс фотоколориметрических методов определения активности сывороточных ферментов — аминотрансфераз (АсАТ и АлАТ), альдолазы, щелочной фосфатазы, электрофоретический анализ АсАТ в тонком слое полиакриламидного геля с последующим гистохимическим окрашиванием, инверсионный вольтамперометрический и пламенный атомно-абсорбционный методы определения содержания меди в мышечной ткани, статистический и корреляционный анализы.

Связь с научными программами, планами, темами

Исследования проводили в рамках договора № 115 от 01.11.2005 г. о научном сотрудничестве ГП «Севастопольский научно-производственный центр стандартизации, метрологии и сертификации» и ИнБЮМ НАНУ, а также работы отдела ихтиологии ИнБЮМ НАНУ по госбюджетной темам НАН Украины «Структурно-функциональные основы биоразнообразия морских сообществ» (№ государственной регистрации 0199U001388) (2002 г.), «Исследование факторов поддержания устойчивости морских экосистем» (№ государственной регистрации 0103U001048) (2003 - 2005 гг.).

Научная новизна полученных результатов

Впервые проведена комплексная оценка влияния совокупности физиологических (пол, возраст особей, стадия годового цикла) и экологических (природных и антропогенных) факторов на активность аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ), альдолазы и щелочной фосфатазы в сыворотке крови морского ерша, обитающего в прибрежной зоне г. Севастополя. Установлены возврастные и половые различия активности энзимов.

Обнаружены сезонные вариации исследуемых параметров, которые характеризуются возрастанием их активности летом в период нереста рыб и снижением зимой, за исключением АлАТ.

Изучен электрофоретический спектр АсАТ сыворотки крови морского ерша, обитающего в акваториях г. Севастополя, проведено его сопоставление с активностью фермента. Наименьшая активность АсАТ выявлена в сыворотке крови особей, обладающих "смешанным" электрофоретическим типом, что соответствует среднему значению для ерша, выловленного в районах исследования.

Оценено влияние загрязнения морских акваторий на исследуемые параметры. Наиболее чувствительными к изменениям условий обитания, не связанным с колебаниями температуры воды, является АлАТ, менее -альдолаза и щелочная фосфатаза. При этом коэффициент де Ритиса, представляющий собой отношение АсАТ/АлАТ, характеризует функциональное состояние печени, её изменения при действии загрязняющего фактора.

Установлена зависимость между уровнем накопления токсичных элементов в мышечной ткани морского ерша и ответными реакциями сывороточных ферментов. Показано, что исследуемые ферменты в большей степени реагируют на изменение содержания меди и цинка в мышечной ткани.

В экспериментальных условиях исследовано действие медьсодержащего пестицида купроксата на активность ферментов в сыворотке крови морского ерша. Выявлена четкая ответная реакция активности энзимов рыб на увеличение уровня меди в среде. Даже при достаточно низких концентрациях в воде, которые не приводили к значительному накоплению данного элемента в тканях гидробионтов, активность сывороточных ферментов является чувствительным индикатором.

Полученные результаты имеют теоретическое значение, так как вносят вклад в теорию эволюции, понимание механизмов адаптации водных организмов, а также в физиологию, биохимию, экологию и экотоксикологию рыб.

Практическое значение

Результаты работы представляют интерес для разработки мониторинговых программ, в частности для биотестирования и биоиндикации водных объектов с помощью биохимических индикаторов рыб. В настоящее время такой подход широко применяется в странах Европы, что позволяет гармонизировать отечественные разработки со стандартами Европейского Сообщества.

Критерии анализа состояния рыб, основанные на измерении активности сывороточных ферментов, дают возможность получить адекватную информацию о здоровье популяций гидробионтов в условиях хронического загрязнения морских акваторий и оценить степень риска, прогнозировать и корректировать хозяйственную деятельность, включая промысел и аквакультурные мероприятия, обосновать критерии загрезнения водоемов, разрабатывать меры по их оздоровлению,

Личный вклад соискателя

Диссертационная работа является самостоятельным научным исследованием. Автором была разработана методология исследования, проведены лабораторные эксперименты, выполнен анализ, обобщение и статистическая обработка полученных результатов, а также сопоставление их с литературными источниками.

Апробация результатов диссертации

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Всеукраинской конференции молодых ученых «Актуальные вопросы современного естествознания» (Симферополь, 2003г.), на 2-м съезде токсикологов России (Москва, 2003), на Международной конференции «30th Pacem in Maribus» (Киев, 2003), на 6-м Международном симпозиуме «Биологические механизмы старения» (Харьков, 2004), на Международной конференции молодых ученых «Комплексные исследования биологических ресурсов южных морей и рек» (Астрахань, 2004 г.), на Международной конференции «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов» (Петрозаводск, 2004), на научно-практической конференции «Экологические проблемы Азово-Черноморского бассейна: вклад Крыма и прилегающих регионов в их решение» (Керчь, 2004), на научной конференции «Заповедники Крыма» (Симферополь, 2005), на конференции молодых ученых по проблемам Черного и Азовского морей «Понт Эвксинский» IV (Севастополь, 2005), на научно-практической конференции-«Актуальные вопросы оценки соответствия в условиях интеграции систем управления качеством и безопасностью1 пищевых продуктов» (Севастополь, 2005), на Всероссийской конференции с участием специалистов из стран Ближнего и Дальнего зарубежья «Современные проблемы водной токсикологии» (Борок, 2005), на II Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, посвященной имени И.И. Мечникова «Биоразнообразие. Экология. Эволюция. Адаптация» (Одесса, 2005г.), на Международной научно-практической конференции «Проблемы иммунологии, патологии и охраны здоровья рыб и других гидробионтов - 2» (Борок, 2007), на Международной конференции «Современные проблемы морской инженерной экологии (изыскания, ОВОС, социально-экономические аспекты)» (Ростов-на-Дону, 2008); на Международной конференции «Современные проблемы гидробиологии. Перспективы, пути и методы решения» (Херсон, 2008), на Всероссийской конференции по водной токсикологии, посвященной памяти Б.А. Флерова «Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы», на конференции по гидробиологии «Критерии оценки качества вод и методы нормирования антропогенной нагрузки», на школе-семинаре «Современные методы исследования и оценки качества вод, состояния водных организмов и экосистем в условиях антропогенной нагрузки» (Борок, 2008).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 21 научная работа, в том числе 13 статей, из них 2 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК России, и 8 тезисов; 16 работ написано без соавторов.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 150 страницах, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 235 источников. Текст иллюстрирован 31 таблицей, 22 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Экология», Рощина, Ольга Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Активность ферментов в сыворотке крови морского ерша характеризуется возрастными и половыми особенностями. Активность аминотрансфераз и щелочной фосфатазы максимальна у половозрелых особей, у стареющих рыб с паданием уровня метаболизма происходит ее снижение. Активность АлАТ и щелочной фосфатазы выше у самок, а АсАТ-у самцов. В условиях повышенной антропогенной нагрузки данные показатели снижаются.

2. Сывороточная АсАТ у морского ерша из обследуемого региона гетерогенна и представлена тремя электрофоретическими типами ("быстрым", "медленным" и "смешанным"). Доминирует "смешанный тип", которому соответствует наименьшая активность.

3. Активность АсАТ в сыворотке морского ерша возрастает летом, во время нереста, щелочной фосфатазы и альдолазы- весной, в преднерестовый период, снижение активности ферментов (за исключением АлАТ) происходит зимой.

4. Антропогенная нагрузка на морскую среду модифицирует ферментативную активность. У особей, обитающих в более загрязненной бухте, активность АлАТ выше летом, щелочной фосфатазы и альдолазы— зимой, в то же время значение коэффициента де Ритиса в данные периоды ниже по сравнению с таковым у рыб из менее загрязненного района.

5. Обнаружена сезонная зависимость между содержанием токсичных элементов в мышечной ткани морского ерша и активностью сывороточных ферментов, которая наиболее чувствительна к накоплению эссенциальных элементов - меди и цинка.

6. Не выявлены различия в накоплении меди в мышечной ткани ерша при экспонировании его в среде с медьсодержащим пестицидом купроксатом и после прекращения его действия.

7. Реакции сывороточных ферментов на действии малых концентраций купроксата имеют характерные фазы, зависящие от времени и концентрации пестицида и отражающие стадии адаптивного ответа, которые соответствуют классической картине адаптационного синдрома.

8. После прекращения действия купроксата не происходит полного восстановления исследуемых параметров до исходного состояния, за исключением активности щелочной фосфатазы. Это свидетельствует о необратимых изменениях молекулярных параметров рыб и требует пересмотра степени токсичности препарата.

9. Активность сывороточных ферментов, в частности аминотрансфераз, может быть использована в качестве индикаторов для оценки физиолого-биохимического статуса рыб и среды их обитания. При этом необходимо учитывать биологические особенности исследуемых объектов, возрастные, половые и сезонные вариации биохимических параметров.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время в результате усиления загрязнения морских акваторий остро стоит проблема оценки состояния рыб и их адаптационного потенциала, позволяющего выдерживать условия антропогенного стресса. Для данной цели наиболее эффективно использование биохимических методов, так как молекулярные системы быстро реагируют на действие неблагоприятных факторов и могут быть задействованы в системах ранней диагностики состояния биоты и экосистемы в целом [86]. В этом отношении особый интерес представляют ферменты сыворотки крови рыб (аминотрансферазы - АсАТ и АлАТ, альдолаза и щелочная фосфатаза), характеризующие состояние печени, ее биосинтетическую и детоксикационную функции [195]. Кроме того, обладая значительной чувствительностью к различным воздействиям, включая антропогенные, они имеют диагностическое значение не только для оценки физиолого-биохомического состояния организма, но также среды его обитания [195, 175, 226].

В результате наших исследований проведена комплексная оценка влияния природных и антропогенных факторов на активность ферментов (аминотрансфераз - АлАТ и АсАТ, альдолазы, щелочной фосфатазы) в сыворотке морского ерша, обитающего в прибрежных акваториях г. Севастополя, с учетом половых, возрастных особенностей, физиологического состояния организма, связанного с периодами годового цикла.

Установлено, что активность аминотрансфераз и щелочной фосфатазы подвержена колебаниям в течение онтогенеза ерша. Значительное увеличение активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови рыб отмечено при достижении ими половой зрелости, что связано с началом репродуктивной деятельности и соотносится с интенсификацией общего метаболизма организма. С возрастом происходит подавление их активности, что, очевидно, обусловлено ослаблением обмена. Выявленное снижение коэффициента де Ритиса, являющегося интегральным показателем, свидетельствует об увеличении функциональной нагрузки на печень у стареющих особей. В наибольшей степени возрастным изменениям подвержена активность АлАТ и щелочной фосфатазы.

В ходе исследований продемонстрировано существование половых особенностей активности сывороточных ферментов. Нами обнаружено, что активность АлАТ и щелочной фосфатазы в сыворотке крови самок выше, чем у самцов. В то же время для активности АсАТ и коэффициента де Ритиса характерна противоположная тенденция. Вероятно, выявленные различия биохимических параметров самок и самцов определяются их гормональным статусом, а также могут быть связаны с особенностями накопления ксенобиотиков в гонадах и специфическими физиологическими реакциями разнополых рыб [218].

В связи с тем, что для большинства показателей метаболизма рыб характерна сезонная изменчивость, проведен анализ динамики активности ферментов в сыворотке крови морского ерша в различные периоды года, учитывая среднюю сезонную температуру воды. Обнаружено увеличение активности АсАТ летом во время нереста морского ерша. Репродуктивный процесс, являясь наиболее значимым этапом жизнедеятельности рыб, требует больших энергетических затрат и сопряжен с интенсификацией обмена [5, 114, 220]. Активность остальных анализируемых ферментов (АлАТ, альдолазы, щелочной фосфатазы) в этот период также находилась на достаточно высоком уровне. Увеличение коэффициента де Ритиса летом свидетельствует об усилении процессов кровообращения во время нереста [220].

В осенне-зимний период происходит снижение активности сывороточных ферментов, так как с падением температуры воды метаболизм у рыб понижается, питание прекращается полностью или в значительной мере сокращается, рыбы малоактивны, энергозатраты минимальны, окислительные процессы замедлены [111, 113, 220]. Исключение составляет

АлАТ, наибольшее значение активности которой зафиксировано зимой. Очевидно, это связано с повышением метаболических процессов в печени, которая является основным депонирующим органом морского ерша. Возрастание активности щелочной фосфатазы и альдолазы весной в преднерестовый период морского ерша свидетельствуют об активизации углеводного обмена, что, очевидно, обусловлено интенсификацией процессов гаметогенеза, соматического роста, повышением мышечной активности. Степень чувствительности ферментов к колебаниям температурного режима выражается следующей последовательностью: АсАТ>альдолаза, щелочная фосфатаза>АлАТ.

Следует отметить, что определенный уровень функционирования ферментативного аппарата клеток может обеспечиваться за счет наличия специфического набора изоферментов. В результате исследований выявлено 3 электрофоретических типа АсАТ: "быстрый", "медленный" и "смешанный". Активность АсАТ "смешанного" типа соответствует среднему значению, которое выявлено для морского ерша, обитающего в прибрежных акваториях г. Севастополя. Группа особей, обладающих данным электрофоретическим типом АсАТ, является доминирующей как в б.Мартынова, так и б.Карантинной.

Известно, что загрязнение среды может существенным образом модифицировать естественные процессы в организме рыб, что, прежде всего, проявляется в изменении ферментативной активности. В наших исследованиях были изучены особенности активности ферментов в сыворотке крови морского ерша, обитающего в бухтах, характеризующихся различной уровнем антропогенной нагрузки (б. Мартынова и б. Карантинной). Бухта Мартынова считается более загрязненной.

Установлено, что в летний период активность АлАТ, в зимний -щелочной фосфатазы и альдолазы значительно выше, в то время как активность АсАТ ниже у рыб из б. Мартынова по сравнению с таковой из б. Карантинной. При этом коэффициент де Ритиса снижен в данные периоды года у особей из более загрязненного района. Аналогичная тенденция характерна для молодых особей ерша. Более того в б. Мартынова отмечено сокращение возрастного ряда морского ерша и доминирование в уловах самок. Очевидно, это связано с более напряженным функционированием организма в условиях большего загрязнения. Наиболее чувствительными к изменениям условий обитания, не связанным с колебаниями температуры воды, являются АлАТ, менее альдолаза и щелочная фосфатаза.

Полученные результаты показали наличие зависимости между уровнем накопления токсичных элементов в мышечной ткани морского ерша и ответными реакциями сывороточных ферментов. При этом отклики энзимов проявляют специфичность к ТЭ, что необходимо учитывать при проведении и интерпретации результатов мониторинговых исследований среды. Исследуемые параметры в наибольшей степени изменяются в присутствии Си и Zn в тканях, что, очевидно, связано с высокой биофильностью данных элементов [13, 54]. Выявлена высокая корреляционная связь между исследуемыми показателями. Кроме того, содержание ТЭ в тканях морского ерша и ответные реакции сывороточных ферментов характеризуются четкой сезонной зависимостью, которая обусловлена годовыми циклами рыб, а также загрязнением среды обитания.

На основании выше изложенного, особый интерес представляло моделирование в экспериментальных условиях влияния меди на активность ферментов в сыворотке крови морского ерша, содержащегося в течение 3-х суток в среде с различной концентрацией медьсодержащего пестицида -купроксата (1, 10, 100 ПДК в пересчете на медь, что соответствует 0,001; 0,01; 0,1 мгСи/л), и после прекращения его действия.

Выявлено, что содержание меди в мышечной ткани ерша при действии купроксата незначительно варьировало в течение всего эксперимента, проявляя тенденцию к снижению к концу экспозиции. Это, видимо, обусловлено инициированием механизмов выведения металла, связанного с активацией синтеза цистеин-обогощенных белков — металлотионеинов [4, 54]. После прекращения действия купроксата и перемещения рыб в чистую воду не установлено сильных изменений в уровне меди в мышечной ткани ерша. Вероятно, это обусловлено перераспределением меди в организме рыб, так как Си является зссенциальным элементом и необходима для протекания многих метаболических процессов [54].

Динамика изменения активности сывороточных ферментов при действии малых концентраций купроксата соответствовала классической картине адаптационного синдрома. На начальном этапе действия токсиканта отмечены изменения активности сывороточных ферментов: подавление активности аминотрансфераз и возрастание активности альдолазы и щелочной фосфатазы. С увеличением экспозиции установлено постепенное нарастание активности АсАТ и АлАТ, что, вероятно, обусловлено интенсификацией энергетического обмена за счет включения дополнительных резервов белкового происхождения. Снижение коэффициента де Ритиса на 3-й сутки может быть связано с усилением нагрузки на печень как на основное место детоксикации ксенобиотиков.

После прекращения действия купроксата и перемещения рыб в чистую воду в течение 3-х суток не происходило полное восстановление параметров системы до исходного состояния, за исключением активности щелочной фосфатазы. Несмотря на отсутствие токсиканта в среде, процессы, направленные на снижение негативного последствия данного воздействия, продолжаются и требуют значительных затрат энергии.

В результате проведения модельного эксперимента установлено наличие четкой ответной реакции биохимических параметров рыб на изменения содержания меди в среде. Даже при достаточно низком уровне Си в воде, который не вызывает значительного накопления элемента в тканях рыб, происходят изменения активности сывороточных ферментов, зависящие от времени воздействия и концентрации купроксата. Наличие высокой корреляционной связи между данными параметрами подтверждает данные, полученные в природных исследованиях.

Таким образом, активность сывороточных ферментов рыб, особенно аминотрансфераз, является чувствительным индикатором к воздействию различных факторов, в том числе и антропогенных, и может быть использована для оценки физиолого-биохимического состояния рыб и среды их обитания в условиях хронического загрязнения. При этом коэффициент де Ритиса выступает в качестве интегрального показателя, характеризующего функциональное состояние печени, её изменения при действии токсиканта. Более того, необходимо учитывать биологические особенности исследуемых объектов, возрастные, половые и сезонные вариации биохимических параметров.

Результаты наших исследований могут иметь практическое значение и представляют интерес для разработки мониторинговых программ. Так оценка качества морской среды по состоянию ее обитателей позволяет получить адекватную информацию об уровне антропогенного воздействия, оценить экологический риск, обосновать критерии загрязнения водоемов и определить систему мероприятий по восстановлению биоресурсов. Более того анализ на основе биохимических индикаторов может быть использован при обосновании ПДК, разработке технических регламентов и их применении, позволяя скорректировать хозяйственную деятельность человека в прибрежных акваториях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рощина, Ольга Владимировна, 2010 год

1. Андреева A.M. Особенности проявления генов лактатдегидрогеназы в раннем развитии леща Abramis brama (L.), плотвы Rutilus rutilus (L.) и их реципрокных гибридов F.// Вопросы ихтиологи. 2005. — Т.45, № 3. — С. 411417.

2. Андреева A.M. Особенности проявления генов аспартатаминотрансферазы в раннем развитии некоторых видов карповых рыб и их межвидовых гибридов F1// Онтогенез. 2007. - Т.38, № 1. - С.44-51.

3. Анисимова И.М. Лавровский В.В. Ихтиология: учебник для вузов: 2-е изд., перераб. и доп. -М.: Агропромиздат, 1991. 288 с.

4. Арсан О.В. Влияние ионной формы меди водной среды на содержание метаболитов гликолиза трикарбонового цикла в тканях карпаII Гидробиол. журн. -2003. Т.39, № 2. -С. 109-115.

5. Багнюкова Т.В., Русинова О.С., Лущак В.И. Сезонные изменения некоторых физиолого-биохимических и морфологических показателей султанки Mullus barbatus ponticus essipov// Гидробиол. журн. 2000. - 36, №3. -С. 23-30.

6. Безруков О.П., Руднева И.И., Мельникова Е.Б. Вщповщш реакцн антиоксидантно'1 системи KpoBi inypiB на дно фунгщиду купроксата// Медична х1м1я. 2003. - №2. -С. 70-73.

7. Симферополь, 2005. — Ч. 2. Зоология беспозвоночных. Зоология позвоночных. Экология. С. 198 - 204.

8. Гильденскиольд Р.С., Новиков Ю.В., Хамидулин Р.С. и др. Тяжелые металлы в окружающей среде и их влияние на организм// Гигиена и санитария. 1992. - Вып. 5 - 6. - С. 6 - 9.

9. Голованова И.Л. Влияние тяжелых металлов на физиолого-биохимический статус рыб и водных беспозвоночных// Биология внутрен. вод. 2008. -№1. - С. 99-108.

10. ГОСТ 26926-94 Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб для определения содержания токсичных элементов/ отв. за вып. Л.П. Ванифатова. Киев: ГОССТАНДАРТ Украины, 1997. - с. 16.

11. ГОСТ 26931-86. Сырье и продукты пищевые. Методы определения меди/ ред. А.А. Зимовнова. М.: Изд-во стандартов, 1986. - с. 35.

12. ГОСТ 30178-96. Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбциониый метод определения токсичных элементов. — Киев: ГОССТАНДАРТ Украины, 1997. с. 16.

13. Грубинко В.В., Леус Ю.В. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная защита у рыб (обзор)// Гидробиол. журн. 2001. - Т. 37, № 1.-С. 64-78.

14. Губанов В.И., Стельмах JI.B., Клименко Н.П. Комплексные оценки качества вод Севастопольского взморья (Черное море)// Экология моря. 2002. - вып. 62 - С. 76-80.

15. Дмитрева А.Г., Кожанова О.Н., Дронина H.JI. Физиология растительных организмов и роль металлов- М.: Изд-во Московского университета, 2002. — 160 с.

16. Заботкина Е.А., Лапирова Т.Е. Влияние тяжелых металлов на иммунофизиологический статус рыб// Успехи совр. биолг. 2003. - Т. 123, № 4.-С. 411-418.

17. Залевская И.Н., Матвеева З.С., Руднева И.И. Оценка токсического действия фунгицида купроксата на Artemia Salina// Агроекол. журн. 2004. - №3- С. 75-78.

18. Залевская И.Н., Басова М.М., Руднева И.И. Показатели липидного обмена рыб как индикаторы состояния их среды обитания//

19. Заповедники Крыма: заповедное дело, биоразнообразие, экообразование: Материалы III науч. конф., 22 апр. 2005г., Симферополь. Симферополь, 2005. — Ч. 2. Зоология беспозвоночных. Зоология позвоночных. Экология. — С. 204-207.

20. Зубаченко B.JI. Содержание меди в воде и в некоторых видах рыб Черного и Азовского морей// Агроекол. журн. — 2004. ~ №3. С.78-80.

21. Зубаченко В.Л., Симчук Г.В., Аверина И.В. и др. Экологический мониторинг прибрежных вод юго-западного побережья Крыма Электронный ресурс./ Режим доступа: http://www.rusnauka.com/ONG/Ecologia/6zubachenko. doc.htm

22. Зуев Г.В., Мельникова Е.Б. Экологическое (внутривидовое) разнообразие ихтиофауны// Современное состояние биоразнообразия прибрежных вод Крыма (черноморский сектор). Севастополь, 2003. - С. 380-424.

23. Иванов И.И., Коровкин Б.Ф., Манкелов И.М. Введение в клиническую энзимологию. —Л.: Медицина, 1972.—277 с.

24. Игнатьева О.Г., Овсяный Е.Н., А.С. Романов и др. Интегральная оценка загрязнения донных отложений Севастопольской бухты// Системы контроля окружающей среды. Севастополь: Мги, 2003. - С. 93-95.

25. Коновалов Ю.Д. Реакция белоксинтезирующей системы рыб на наличие в их организме катионов ртути, кадмия, меди и цинка// Гидробиол. журн. 2001.-Т. 37, № 1.-С. 95-105.

26. Корочкин Л. И., Серов О. Л., Пудовкин А. И. и др. Генетика изоферментов. М.: Наука, 1977. - 275с.

27. Корочкин Л.И. Введение в генетику развития. М.: Наука, 1980. -291с.

28. Кузьмина В.В. Физиологические адаптации (на примере экзотрофии у рыб)// Журн. эволюционной биохимии и физиологии. — 2001 -№ 3. — с. 355-369.

29. Кузьмина В.В., Шишин М.М., Корюкаева Н.В. и др. Влияние меди и цинка на эффективность гидролиза белковых компонентов пищи у ряда видов пресноводных костистых рыб в условиях in vitro// Биология внутр. вод. 2005. - № 4. - С. 84-92.

30. Кузьминова Н.С. Оценка токсичного действия хозяйственно-бытовых сточных вод на морские организмы: дис. . кандидата биол. наук: 03.00.16: / Кузьминова Н. С. М., 2006. - 168 с.

31. Кузьминова Н.С., Скуратовская Е.Н. Возрастные и половые особенности устойчивости морского ерша Scorpaena porcus L. по отношению антропогенному фактору// Сб. научн. тр. НАН Украины. МГИ. -Севастополь, 2008. С. 414-420.

32. Куфтаркова Е.А., Немировский М.С., Родионова Н.Ю. Гидрохимический режим района экспериментальной мидиевой фермы (рейд Севастополя, Черное море)// Экология моря. 2002. — вып. 59 - С. 61-65.

33. Лавровская Н.Ф. Современные исследования по биохимии рыб. — М.: ЦНИИТЭИ, 1973. 100 с.

34. Лакин Р.Ф. Биометрия. М: Высшая школа, 1990 - 352 с.

35. Левитес. Е.В. Генетика изоферментов растений. Новосибирск: Наука, 1986. - 345 с.

36. Лущак В.И. Свободнорадикальное окисление белков и его связь с функциональным состоянием организма// Биохимия. 2007. - Т. 72, вып. 8. -С. 995-1017.

37. Медико-биологические требования и санитарные нормы качества производственного сырья и пищевых продуктов/ утв. Минздравом СССР 01.08.89 № 5061-89. -М.: Издательство стандартов, 1990. 156 с.

38. МВВ 081-12/05-98 Методика выполнения измерений содержания кадмия, . свинца, меди в водных растворах инверсионными электрохимическими методами. С.-П., 1992. - с. 25.

39. МВВ 081/12-4631-00 Методика выполнения измерений содержания кадмия, свинца, меди в природных и очищенных сточных водах методом инверсионной вольтамперометрии. С.-П., 1999. - с. 31.

40. Микряков В.Р., Балабанова Л.В., Заботкина Е.А. и др. Реакция иммунной системы рыб на загрязнение воды токсикантами и закисление воды. М.: Наука, 2003. - 126 с.

41. Миронов Е.И., Енина Л.В., Сосновская Р.В. и др. Санитарно-бактериологическая характеристика Карантинной бухты (Севастополь, Черное море)// Экология моря. 2002. - вып. 59 - С. 70-73.

42. Миронюк М.О., Арсан О.М., Хоменчук В.О. Процеси переамшування в оргашзм1 риб за дп нафтопродукив водного середовища// Гидробиол. журн. 2008. - Т. 44, №2. - С. 88-95.

43. Моисеенко Т.И. Экотоксикологический подход к оценке качества вод// Водные ресурсы. 2005. - Т. 32, № 2. - С. 184 - 195.

44. Моисеенко Т.И., Кудрявцева Л.П., Гашкина Н.А. Рассеивание элементов в поверхностных водах суши. Технофильность, биоаккумуляция, экотоксикология.— М: Наука. — 2006. 262 с.

45. Неваленный А.Н., Туктаров А.В., Бедняков Д.А. Функциональная организация и адаптивная регуляция процессов пищеварения у рыб.~ Астрахань: Астрах, гос. техн. ун-т, 2003. 152с.

46. Овен Л.С. Особенности оогенеза и характера нереста морских рыб. К: Наукова думка, 1976. - 132 с.

47. Овен Л.С., Руднева И.И., Шевченко Н.Ф. Ответные реакции морского ерша Scorpaena porcus на антропогенное воздействие// Вопросы ихтиологии. 2000. - Т. 40, № 1 - С. 75-78.

48. Овсяный Е.И., Романов А.С., Игнатьева О.Г. Распределение тяжелых металлов в поверхностном слое донных осадков Севастопольскойбухты (Черное море)// Морской экологический журнал. 2003. - Т. 2., № 2. -С. 85-93.

49. Олексиенко Н.В. Использование методов химического анализа при экологических исследованиях тепловодных рыбных хозяйств// Журн. хроматограф1чного товариства. 2008. - Т. VIII., № 1,2. - с. 18-21.

50. Омельченко С.О. Сравнительный анализ содержания тяжелых металлов и нитрозаминов в некоторых видах рыб, обитающих в двух бухтах Черного моря// Современные проблемы водной токсикологии: Материалы Междунар. конф. Борок, 2005. - С. 100-101.

51. Осадчая Т.С., Алемов С.В., Шадрина Т.В. Экологическое качество донных осадков Севастопольской бухты: ретроспектива и современное состояние// Экология моря. 2004. - Вып. 66. - С. 82 - 87.

52. Павлова Е.В., Овсяный Е.И., Гордина А.Д. и др. Современное состояние и тенденции изменения экосистемы Сев. бухты// Акватории и берега Севастополя: экосистемные процессы и услуги обществу. -Севастополь: Аквавита. 1999. - С. 70-95.

53. Перевозников М.А., Богданова Е.А. Тяжелые металлы в пресноводных экосистемах. СПб.:ГосНИОРХб, 1999. - 228с.

54. Поляновский O.JI. Аспартат-аминотрансфераза. Исследование структуры и каталитических функций// Усп. соврем, биологии. М, 1978. — 245с.

55. Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб. М.: Пищ. пром., 1966.-376 с.

56. Райдер К., Тейлор К. Изоферменты. М.: Мир, 1983. - 106 с.

57. Рекомендации по использованию электрофоретических данных при межпопуляционных и межвидовых сравнениях/ под ред. Т.В. Иванова. — Владивосток: Ротапринт ТИНРО, 1980. 39 с.

58. Руднева И.И., Жерко Н.В. Действие полихлорированных бифенилов на активность антиоксидантных ферментов и перекисное окисление липидов в мышцах и печени двух видов черноморских рыб// Биохимия. 1994. - Т. 59. - Вып. 1 - С. 34 - 44.

59. Руднева И.И., Жерко Н.В. Действие полихлорированных бифенилов на антиоксидантную систему и перекисное окисление липидов в гонадах черноморской султанки Mnllus barbatus ponticusll Биология моря. -1999.-№3.-С. 239-242.

60. Руднева И.И. Ответные реакции морских животных на антропогенное загрязнение Черного моря: автореф. дис. . д-ра биол. наук: 03.00.29/МГУ -М., 2000. 55 с.

61. Руднева И.И. Ответные реакции морских животных на антропогенное загрязнение Черного моря: Дис. . д-ра биол. наук: 03.00.29/МГУ М., 2000. - 357 с.

62. Руднева И.И., Чесалина Т.Л., Кузьминова Н.С. Ответные реакции молоди черноморской кефали на загрязнение мазутом// Экология. 2000. — №4.-С. 304-306.

63. Руднева И.И. Экол ого-физиологические особенности антиоксидантной системы у рыб и процессов перекисного окисления липидов// Усп. совр. биологии. 2003. - Т. 123, № 4. - С. 392 - 340.

64. Руднева И.И., Бахтина Т.Б., Скуратовская Е.Н. Влияние антропогенного загрязнения на активность антиоксидантных ферментов крови некоторых видов черноморских рыб// Вюник Одеського нац. ун-ту. Сер. Бюлопя. 2004. - Т. 9, вип. 5. - С. 198-203.

65. Руднева И.И., Рощина О.В., Васина О.Л. Активность некоторых ферментов сыворотки крови черноморского ерша в различные периодыгодового цикла// Вюник Одеського нац. ун-ту. Сер. Бюлопя. -2004. — Т.9., вып. 5-С. 111-114.

66. Руднева И.И., Залевская И.Н. Личинки атерины {Atherina Hepsetus L.) как биоиндикаторы загрязнения прибрежных акваторий Черного моря// Экология. 2004. - № 2. - С. 107 - 111.

67. Руднева И.И., Солонченко А.И., Мельникова Е.Б. Влияние паразитарной инвазии на активность некоторых антиоксидантных ферментов печени и мышц хозяина черноморского калкана Psetta maxima maeotica/l Паразитология. 2004. - 38, вып. 6. - С. 557 - 561.

68. Руднева И.И., Шайда В.Г., Кузьминова Н.С. Действие фунгицида купроксата на теплопродукцию личинок гидробионтов// Агроекол. журнал. — 2004.-№3.-С. 81-82.

69. Руднева И.И., Залевская И.Н., Кузьминова Н.С. и др. Оценка токсического действия фунгицида купроксата на личинок черноморской атерины// Агроекол. журн. 2004. - №3. - с. 83-86.

70. Руднева И.И., Шевченко Н.Ф., Залевская И.Н. и др. Биомониторинг прибрежных вод Черного моря// Водные ресурсы. 2005. -Т. 32, №2.-С. 238-246.

71. Руднева И.И. Применение биомаркеров рыб для экотоксикологической диагностики водной среды// Риб. госп-во Укр. 2006. - № 1.-С. 20-23.

72. Руднева И.И., Мельникова Е.Б., Кузьминова Н.С. и др. Влияние экологических факторов на уровень нитрозаминов у морских рыб// Экологическая химия.—2007. 16, №3. - С. 166-174.

73. Руднева И.И., Мельникова Е.Б., Кузьминова Н.С. и др.//Оценка влияния минеральных соединений азота на донных рыб в бухтах Черного моря// Водные ресурсы. 2008. - том 35, № 4 - С. 505-510.

74. Руднева И.И., Рощина О.В., Омельченко С.О. и др.// Применение биоиндикаторов рыб для анализа сезонной динамики экологического состояния морских акваторий// Экологическая химия. 2008. — 17(3). - С. 24-29.

75. Руднева И.И., Рощина О.В. Оценка уровня антропогенного воздействия на морские экосистемы с помощью биомаркеров рыб// Вода и экология. Проблемы и решения, 2008. - № 2 (35). - С.30-38.

76. Руднева-Титова И.И. Соотношение процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности в гонадах хрящевых и костных рыб Черного моря// Укр. 6ioxiM. журн. 1995. - Т. 67, № 5. С. 72 - 79.

77. Световидов А.Н. Рыбы Черного моря- М.: Наука, 1964 550с.

78. Сен А., Кирикбакан А. Биохимическая характеристика и распределение глутатион-Э-трансфераз у остроноса (Lisa saliens)// Биохимия. 2004. - Т. 69, вып. 9. - С. 1223 - 1232.

79. Скальный А.В. Химические элементы в физиологии и экологии человека. М.ЮНИКС 21 век. Мир. - 2004. - 216 с.

80. Скуратовская Е.Н. Ответные реакции антиоксидантных ферментов морского ерша (Scorpaena porcus L.) на антропогенное загрязнение// Учен. зап. Таврического нац. ун-та им. В.И. Вернадского. Серия «Биология». 2003. — Т. 16 (55),№2.-С. 175-178.

81. Современное состояние ихтиофауны Черного моря: сб. научн. трудов/НАН Украины. Институт биологии южных морей им. А.Щ. Ковалевского/ отв. ред. Коновалов С.М. Севастополь: СО «ЭКОСИ-Гидрофизика», 1996. -214 с.

82. Сополева Н.Н. Экологическое состояние Севастопольского региона// Открытое общество: матер, межд. конф. окт. 1998, Севастополь. -Севастополь, 1998. С. 56-68.

83. Столяр О.Б., Курант В.З., Хоменчук В.А. и др.// Характеристика низкомолекулярных серосодержащих соединений гепатопанкреаса карпа при интоксикации Си и Zn// Гидробиол. журнал. 2003. - Т. 39, № 4. - С. 91-98.

84. Столяр О.Б., Мудра А.Э., Зшьковська Н.Г. та ш. Селектившстьметалотюненпв печшки коропа у зв язуванш юшв метал!в та антиоксидантний захист оргашзму за дп cyMiini мщ1, цинку, марганцю i свинцю// Доповда НАНУ. 2004. - № 5. - С. 184 - 189.

85. Титов В.Н., Бочкова Н.А. Методологические и диагностические аспекты исследования активности аминотрансфераз (обзор литературы)// Лабораторное дело. 1990. - № 8. - С.4-12.

86. Фащук Д.Я., Сапожников В.В. Антропогенная нагрузка на геосистему море-водосбор и ее последствия для рыбного хозяйства. — М.:ВНИРО, 1999.-124 с.

87. Филенко О.Ф. Динамика эффекта загрязняющих веществ экотоксикологии// Токсикол. вестник.—2001. № 2.—С. 2-6.

88. Хочачка П., Сомеро Дж. Стратегия биохимической адаптации. -М.: Мир, 1977.-384с.

89. Чадов Б.Ф. «Образ» регуляторного гена в опытах на дрозофиле// Генетика, 2002. Т. 38. - № 7. - С. 869-881.

90. Чесалина Т.Д., Руднева И.И., Кузьминова Н.С. Токсическое действие соляра на молодь черноморской кефали-остроноса Liza saliensll Вопр. ихтиологии. 2000. - Т. 40, № 3. - С. 429 - 432.

91. Шварц С.С., Смирнов B.C., Дробинский Л.Н. Метод морфофизиологических индикаторов в экологии наземных позвоночных// Тр. Ин-та экологии растений и животных. 1968. - Вып. 58. - 386 с.

92. Шульман Г.Е. Физиолого-биохимические особенности годовых циклов рыб. — М.: Пищевая пром., 1972 368с.

93. Шульман Г.Е., С.Ю. Урденко Продуктивность рыб Черного моря/ Г.Е. Шульман,-Киев: Наук. Думка, 1989. 188 с.

94. Шульман Г.Е., Финенко Г.А., Аннинский Б.Е. и др. Биоэнергетика гидробионтов. Киев: Наук, думка, 1990. - 248с.

95. Эмеретли И.В., Русинова О.С. Активность ферментов основных путей окисления углеводов в тканях рыб// Гидробиол. журн. 2001 - 37, № 1. - с. 79 - 86.

96. Юрин В.М. Основы ксенобиологии: Учеб. пособие. — МН:БГУ, 2001.-С. 234.

97. Adams S.M. Assessing cause and effect of multiple stressors on marine systems// Mar. Pollut. Bull. 2005. - Vol. 51, № 8 - 12. - P. 649 - 657.

98. Adham K.G.,Kharalla A., Abu-Shabana M. et al. Enviromental stress in lake Maryut and physiological response of Tilapia zilli Gerv.H J. Environm. Sc. Health.; Pt. A: Environm. Sc. Eng. Hazard. Subst. Control. 1997. - Vol. 32A, № 9-10.-P. 1077-1204.

99. Adham K.G., Hassan I.F., Taha N. et al. Impact of hazardous exposure to metals in the Nile and Delta lakes on the catfish Clarias lazera/l Environm. Monit. Assess. 1999. - Vol. 54, № 2. - P. 107-124.

100. Al-Yousuf M. H., El-Shahawi M.S., Al-Ghais S.M. Trace metal in liver, skin and muscle of Lethrinus lent/an fish species in relation to body length and sex// Sci. Total Environ. 2000. - Vol. 256. - P. 87-94.

101. Atli G., Canli M. Responses of metallothionein and reduced glutathione in a freshwater fish Oreochromis niloticus following metal exposures// Environ. Toxicology and Pharmacology. 2008. - Vol. 25. -P. 33-38.

102. Balk L., Larsson A., Forlin L. Baseline studies of biomarkers in the feral female perch {Perca flmiatilis) as tools in biological monitoring of anthropogenic substances// Mar. Environ. Res. 1996. - Vol. 42, № 1-4. - P. 203 - 208.

103. Barse Chakrabarti A.V., Ghosh Т.К., Pal A.K. et al. One-tenth dose of lc50 of 4-tert-butylphenol causes endocrine disruption and metabolic changes in Cyprinus carpiol! Pest. Biochem. and Physiol. Vol. 86, № 3. - P. 172-179.

104. Basaglia F., Cucchi C. Phenylhydrazine- induced changes in fructose-bisphosphate aldolase and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in Ictalurus melas (Siluriformes, Ictaluridae)// Cytobios. 1996. - Vol. 85, № 342. - P. 137154.

105. Berntssen M. H.G., Hylland K., Wendelaar B. S. E. et al. Toxic levels of dietary cooper in Atlantic salmon (Salmo salar L.) par// Aquat. Toxicol. — 1999. -Vol. 46, №2.-P. 87-99.

106. Berntssen M. H. G., Lundebye A-K., Hamre K. Tissue lipid peroxidative responses in Atlantic salmon {Salmo salar L.) parr fed high levels of dietary copper and cadmium// Fish physiology and biochemistry. 2000. - Vol. 23.-P. 35-48.

107. Berardini T.Z., Drygas-Williams M., Callard G.V. et al. Identification of neuronal isozyme specific residues by comparison of goldfish aldolase С to other aldolases// Сотр. Biochem. Physiol. 1997. - Vol. 117A, № 4. - P. 472476.

108. Bhattacharya H., Xiao Q., Lun L. Toxicity studies of nonylphenol on rosy barb (Puntius conchonious): A biochemical and histopathological evaluation// Tissue and Cell. -2008. Vol. 40, №4. - P. 243-249.

109. Blanchard J., Grosell M. Copper toxicity across salinities from freshwater to seawater in the euryhaline fish Fundulus heteroclitus: Is copper an ionoregulatory toxicant in high salinities// Aquatic Toxicology. — 2006. Vol. 80, №2.-P. 131-139.

110. Borges A., Scotti L. V., Siqueira D. R, et al. Changes in hematological and serum biochemical values in jundia Rhamdia quelen due to sub-lethal toxicity of cypermethrin//Chemosphere. 2007. - Vol. 69, № 6. - P. 920-926.

111. Carriquiriborde P., Ronco A.E. Distinctive accumulation patterns of Cd(II), Cu(II), and Cr(VI) in tissue of the South American teleost, pejerrey

112. Odontesthes bonariensis)// Aquatic Toxicology. 2008. - Vol. 86, № 2. - P. 313322.

113. Carney M. W., Erwin K., Hardman R. et al. Differential developmental toxicity of naphthoic acid isomers in medaka (Oryzias latipes) embryos// Mar. Poll. Bui. 2008. - Vol. 57, № 6-12. -P. 255-266.

114. Carvalho C.S., Fernandes M.N. Effect of temperature on copper toxicity and hematological responses in the neotropical fish Prochilodus scrofa at low and high pH// Aquaculture. 2006. - Vol. 251, № 1. - P. 109-117.

115. Clearwater S.J., Baskin S.J., Wood C.M. et al. Gastrointestinal uptake and distribution of copper in rainbow trout// J. Exp. Biol. 2000. - Vol. 203. № 16 — P. 2455-2466.

116. Clearwater S.J., Farag A.M., Meyer J.S. Bioavailability and toxicity of dietborne copper and zinc to fish// Сотр. Biochem. and Physiol. C. 2002. - Vol. 132, №3.-P. 269-313.

117. Crestani M., Menezes C., Glusczak L. et al Effects of Clomazone Herbicide on hematological and some parameters of protein and carbohydrate metabolism of silver catfish Rhamdia quelenU Ecotoxicol. and Environ. Safety. -2006. Vol. 65, № 1. - p. 48-55.

118. David M., Mushigeri S. В., Shivakumar R. et al. Response of Cyprinus carpio (Linn) to sublethal concentration of cypermethrin: alterations in protein metabolic profiles/ // Chemosphere. 2004. - Vol. 56, № 4. - P. 347-352.

119. Das В. К., Das N. Impacts of quicklime (CaO) on the toxicity of copper (CuSC>43 5H20) to fish and fish food organisms// Chemosphere. 2005. -Vol. 61, №2.-P. 186-191.

120. De Aguiar L. H., Moraes G., Avilez I. M. et al. Metabolical effects of Folidol 600 on the neotropical freshwater fish matrinxa, Brycon cephalusll Environ. Res. 2004. - Vol. 95, № 2. - P. 224-230.

121. De Smet H., R. Blust Stress responses and changes in protein metabolism in carp Cyprinus carpio during cadmium exposure// Ecotoxicol. and Environ. S. 2001. - Vol. 48, № 3. - P. 255-262.

122. Farkas A., Salanki J., Specziar A. Age- and size-specific patterns of heavy metals in the organs of fresh-water fish Abramis brama L. populating a low-contaminated site// Water Res. 2003. - Vol. 37. -P. 959-964.

123. Fleming L.F., Broad К., Clement A. et al. Oceans and human health: Emerging public health risk in the marine environment// Mar. Poll. Bull. 2006. — Vol. 53.-P. 545-560.

124. Folmar L.S., Gardner G.R., Schreibman M.P. et al. Vitellogenin-indused pathology in male summer flounder {Paralichthys dentatus)// Aquat. Toxicol. 2001. - V. 51 (4). P. 431 - 441.

125. Gabrielak Т., Zalesna G., Roshe H. et al. The effect of MS 222 an anaesthetic on the peroxide metabolism enzymes in erythrocites of freshwater and marine fish species/ // Ibid. C. 1989. - Vol. 92, № 1. - P. 5 - 8.

126. Gagne F., Macrogliese D.J., Blaise C. et al. Occurrence of compounds estrogenic to freshwater mussels in surface waters in an urban area// Environ. Toxicol. -2001. Vol. 16, № 3. - P. 260-268.

127. Gallagher E.P., Sheehy K.M. Altered glutathione-S-transferase catalytic activities in female brown bullheads from contaminated central Florida lake// Mar. Environ. Res. 2000. - 50. - P. 399 - 403.

128. Ghorpade N., Mehta V., Khare M. et al. Toxicity Study of Diethyl Phthalate on Freshwater Fish Cirrhina mrigalall Ecotoxicol. and Environ. Saf. -2002. Vol. 53, № 2. - P. 255-258.

129. Ghosh M.C., Ghosh R., Ray A.K. Impact of Copper on Biomonitoring Enzyme Ethoxyresorufm- о -deethylase in Cultured Catfish Hepatocytes// Environ. Res.—2001. Vol. 86, №. 2. -P. 167-173.

130. Gioda C.R., Lissner L.A., Pretto A. et al. Exposure to sublethal concentrations of Zn(II) and Cu(II) changes biochemical parameters in Leporinus obtusidensll Chemosphere. 2007. Vol. 69, № 1. - P. 170-175.

131. Glover C.N., Hogstrand C. In vivo characterization of intestinal zinc uptake in freshwater rainbow trout// J. Exp. Biol. 2002. - V. 205. № 1. - P. 141150.

132. Goksoyr A., Beyer J., Egas B. et al. Biomarker responses in flounder (Platichthys flesus) and their use in pollution monitoring// Mar. Pollut. Bui. -1996.-Vol. 33.-P. 36-45.

133. Gravato С., Santos M. A. Beta -Naphthoflavone Liver EROD and Erythrocytic Nuclear Abnormality Induction in Juvenile Dicentrarchus labrax L.// Ecotoxicol. Environ. Saf. 2002. - Vol. 52, № 1. - P. 69-74.

134. Gravato C., Santos M. A. Liver Phase I and Phase II Enzymatic Induction and Genotoxic Responses of beta -Naphthoflavone Water-Exposed Sea Bass// Ecotoxicol. Environ. Saf. 2002. - Vol. 52, № 1. - P. 62-68.

135. Gravato C., Teles M., Oliveira M. et al. Oxidative stress, liver biotransformation and genotoxic effects induced by copper in Anguilla anguilla L.- the influence of pre-exposure to p-naphthoflavone//Chemosphere. 2006. -Vol. 65, № 10.-P. 1821-1830.

136. Grosell M., Wood C.M. Copper uptake across rainbow trout gills: mechanisms of apical entry// J. Exp. Biol. 2002. - Vol. 205. № 8. - P. 11791188.

137. Grosell M., Blanchard J., Brix К. V. et al. Physiology is pivotal for interactions between salinity and acute copper toxicity to fish and invertebrates// Aquatic Toxicology. 2007. - Vol. 84, № 2. - P. 162-172.

138. Handy R.D., Musonda M.M., Phillips C. et al. Mechanisms of gastrointentinal copper absorption in the African walking catfish: Copper dose-effects and a novel anion-dependent pathway in the intestine// J. Exp. Biol. 2000.- Vol. 203. № 15. P. 2365-2377.

139. Hoyle I., Shaw B.J., Handy R.D. Dietary copper exposure in the African walking catfish, Clarias gariepinus: Transient osmoregulatory disturbances and oxidative stress// Aquatic Toxicology. 2007. - Vol. 83, № 1. — P. 62-72.

140. Hoff Р.Т., Van der Dongen W., Esmans E.L. et al. Evaluation of the toxicological effects of perfluorooctane sulfanic acid in common carp (Cyprinus carpio)// Aquat Toxicol. 2003. - Vol.62, № 4. - P. 349-59.

141. Humphrey C.A., King S.C., Klumpp D.W. A multibiomarker approach in barramundi {bates calcarifer) to measure exposure to contaminants in estuaries of tropical North Queensland/ C.A. Humphrey, // Mar. Pollut. Bull. -2007.-Vol. 54, №10.-P. 1569-1581.

142. Hylland K., Sandvik M., Skare J.U. et al. Biomarkers in flounder (Paralichthys flensus): an evaluation of their use in pollution monitoring// Mar. Environ. Res. 1996. - Vol. 42, № 14. - P. 223-227.

143. Hylland K. Biological effects in the management of chemicals in the marine environment// Mar. Pollut. Bull. 2006. - Vol. 53. - P. 614-619.

144. James R., Sampath K., Sivakumar V. et al. Toxic effect of copper and mercury on food intake, growth and proximate chemical composition in Heteropnenstes fossilisll J. Environ. Biol. 1995. - Vol. 16. № 1. - P. 1-6.

145. Johnson A., Carew E., Sloman K.A. The effects of copper on the morphological and functional development of zebrafish embryos// Aquatic Toxicol. 2007. - Vol. 84, № 4. - P. 431-438.

146. Jung H., Kim S.-J, Lee T.-K. et al. Biomarker responses in caged rockfish (Sebastes schlegeli) from Masan Bay and Haegeumgang, South Korea// Mar. Pollut. Bui. 2008. - Vol. 57, № 6-12. - P. 599-606.

147. Kamunde C.N., Grosell M., Higgs D. et al. Copper metabolism in-' actively groing rainbow trout (Oncorhynchus mykiss): interaction between dietary and waterborne copper uptake// J. Exp. Biol. 2002. - Vol. 205. № 2. - P. 279290.

148. Karan V., Vitorovi£ S., Tutundzi£ V. et al. Functional Enzymes Activity and Gill Histology of Carp after Copper Sulfate Exposure and Recovery// Ecotoxicol. and Environm. Safety. 1998. - Vol. 40, № 1-2. - P. 49-55.

149. Khazraiinia P., Payghan R., Azari Takami G. Studies on the effect of experimental acute ammonia toxicity on serum enzymes, urea and cholestrol in common carp// J. Fac. Vet. Med. Univ. Tehran. 2000. -Vol. 55, № 3. - P. 32-35.

150. Kokokiris L., Mourot В., Menn L. et al. Endocrine changes during the annual reproductive cycle of the red porgy, Pagrus pagrus (Teleostei, Sparidae)// Fish Physiol, and Biochem. 2000. - Vol. 23 (1). - P. 1 - 11.

151. Kopecka J., Lenhtonen K.K., Barsiene J. et al. Measurements of biomarker levels in flounder (Platichthys flesus) and blue mussel (Mutilus trossulus) from the Gulf of Gdansk (southern Baltic)// Mar. Pollut. Bull. 2006 -Vol. 53.-P. 406-421.

152. Kurilenko A.V., Zakhartsev M.V., Chelomin V.P. In vitro effect of copper ions on transbilayer distribution of aminophospholipids in synaptosomal membrane of walleye Pollock (Theragra chalcogramma)/! Aquatic Toxicol. — 2002.-Vol. 58.-P. 131-136.

153. Laskowski R., Hopkin S.P. Accumulation of Zn, Cu, Pb and Cd the garden snail (Helix aspersa): implication for predatoros// Environ. Pollution. -1996. Vol.91. № 3. - P. 289-297.

154. Lee R.F., Anderson J. W. Significance of cytochrome P450 system responses and levels of bile fluorescent aromatic compounds in marine wildlife following oil spills// Mar. Pollut. Bui. 2005. - Vol. 50, № 7. - P. 705-723.

155. Liu H., Wang W., Zhang J. F. et al. Effects of copper and its ethylenediaminetetraacetate complex on the antioxidant defenses of the goldfish, Carassius auratusll Ecotoxicol. and Environ. Safety. 2006. - Vol. 65, № 3. — P. 350-354.

156. Lushchak V.I., Bahnjukova T.V. Effect of hypoxia on activity and binding of glycolytic and associated enzymes in sea scorpion tissues// Braz. J. Med. Biol. Res. 1998. - Vol. 31, № 8. - P. 1059-1067.

157. Marijic V.F., Raspor В. Metallothionein in intestine of red mullet, Mullus barbatus as a biomarker of copper exposure in the coastal marine areas//Mar. Pollut. Bui. 2007. - Vol. 54, № 7. - P. 935-940.

158. Mee D. The Black Sea in Crisis: a need for concentrated international action// AMBIO. 1992. - Vol. 4 - P. 278 - 286.

159. Medda C. Haematological and biochemical alterations of Catla catla fingerlings following sublethal exposure to Nuvan// J. Indian Fish. Assoc. 1993, Vol. 23.- p. 113-116.

160. Narbonne J.F. Mechanism de biotransformation des pollutants organiques chez les animaux marines// Oceanis. 1991. - Vol. 17, № 4. - P. 449458.

161. Nesto N., Romano S., Moschino V. et al. Bioaccumulation and biomarker responses of trace metals and micro-organic pollutants in mussels and fish from the Lagoon of Venice, Italy// Mar. Pollut. Bull. 2007. - Vol. 55. - P. 469-484.

162. Oliveira M., Serafim A., Bebianno M.J. et al European eel (Anguilla anguilla L.) metallothionein, endocrine, metabolic and genotoxic responses to copper exposure// Ecotoxicol. and Environm. Safety. Vol. 70, № 1. — P. 20-26.

163. Olsson P.E., Keing P., Petterson P. et al. Interaction of cadmium and oestradiol 17(3 on metallotionein and vitellogenin synthesis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)// Biochemical J. 1995. - Vol. 307. - P. 197-203.

164. Oluah N.S. Plasma aspartate aminotransferase activity in the Catfish Clarias albopunctatus exposed to sublethal zinc and mercury// Bull. Environ. Contain. Toxicol. 1999. - P. 343-349.

165. Oruc E. Oe.3 Uener N. Effects of 2,4-Diamin on some parameters of protein and carbohydrate metabolisms in the serum, muscle and liver of cyprinus carpio// Environm. Pollut. 1999. - Vol. 105, № 2. - P. 257-272.

166. Pacheco M., Santos M.A. Biotransformation, Endocrine, and Genetic Responses of Anguilla anguilla L. to Petroleum Distillate Products and Environmentally Contaminated Waters// Ecotoxicol. Environ. Saf. 2001. - Vol. 49, №. l.-P. 64-75.

167. Papadimitriu E., Loumbourdis N. S. Glycogen, proteins and aminotransferase (GOT, GPT) changes in the frog Rana ribibunda exposed to high concentrations of coppe// Bull. Envirom. Contam. Toxical. 2005. - Vol. 74. - P. 120-125.

168. Pepeljnjak S., Petrinec Z., Kovacic S. et al. Screening toxicity study in youg carp (Cyprinus carpio) on feed amended with fumonisin Bl// Mycopatol. -2003.-Vol.156, №2.-P. 139-45.

169. Persin F., Konyalioglu S. Serum biochemical profiles of captive and wild northern bluefin tuna (Thunus thunus L. 1758) in the Eastern Mediterranean// Aquaculture Res. -- 2008. Vol. 39. - P. 945- 953.

170. Peter V. S., Joshua E. K., Wendelaar Bonga S. E. et al. Metabolic and thyroidal response in air-breathing perch (Anabas testudineus) to water-borne kerosene// Gen. and Сотр. Endocrinol. 2007. - Vol. 152, № 2-3. - P. 198-205.

171. Pinho G. L. L., Pedroso M. S., Rodrigues S. C. et al. Physiological effects of copper in the euryhaline copepod Acartia tonsa: Waterborne versus waterbome plus dietborne exposure//Aquatic Toxicol. Vol. 84, № l.-P. 62-70.

172. Poleksi V., Karan V. Effects of trifluralin on Carp: biochemical and histological evaluation// Ecotoxicol. Environ. Saf. 1999. - Vol. 43, № 2. - P.231-221.

173. Pouragan N., Dennis J.H. Gourchian H. Tissue distribution and redistribution of trace elements in shrimps species with the emphasis on the roles of metallothionein// Ecotoxicol. 2004. - Vol. 13. - P. 519-533.

174. Pyle G.G., Kamunde C.N., McDonald D.G. et al. Dietary sodium inhibits aqueous copper uptake in rainbout trout {Oncorhynchus my kiss)// J. Exp. Biol. 2003. - Vol. 206. № 3. - P. 609-618.

175. Ramachandran S, D., Sweezey M. J, Hodson P. V. et al. Influence of salinity and fish species on PAH uptake from dispersed crude oil// Mar. Pollut. Bull. 2006. - Vol. 52, № 10. - P. 1182-1189.

176. Romeo M., Bennani N., Gnassia-Barrelli M. et al. Cadmium and copper display different responses towards oxidative stress in the kidney of the sea bass Dicentrarchus labrax// Aquatic toxicol. -2000. Vol. 48. - P. 183-184.

177. Roy R., Campbell R.G.C. Survival time modeling of exposure of juvenile Atlantic salmon (Salmo salar) to mixture of aluminium and zinc in soft water at low pH// Aquat. Toxocol. 1995. - Vol. 33, № 2. - P. 155-176.

178. Rudneva I.I., Petzold-Bradley E. Environment and security challenges in the Black Sea regionI/ Environmental conflicts: implications for theory and practice.-2001.-P. 189-207.

179. Rudolph A. Stimulation of enzymatic defense mechanisms and appearance of liver damage in juvenile trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to water-accommodated trace petroleum residues// Bull. Environ. Contam. Toxicol. — 2002. Vol. 68. - P. 644 - 651.

180. Samsonova M. V., Minkova N.O., Mikodina E.V. et al. Aspartate- and alanine-aminotransferase in early development of keta// Ontogenez. 2003. - Vol. 34(1).-P. 19-23.

181. Sanchez W., Palluel O., Meunier L. et al. Copper-induced oxidative stress in three-spined stickleback: relationship with hepatic metal levels// Environ. Toxicol, and Pharmacol. 2005. - Vol. 19, № 1. - P. 177-183.

182. Schjolden J., S0rensen J., Nilsson G. E. et al The toxicity of copper to crucian carp (Carassius carassius) in soft water// S. of The Total Environ. 2007. -Vol. 384, № 1-3. - P. 239-251.

183. Schreck C.B., Contreras-Sanchez W., Fitzpatrick M.S. Effects of stress on fish reproduction, gamete quality, and progeny// Aquaculture. 2001. -Vol. 197.-P. 3-24.

184. Schultz I.R., Orner G., Merdink L. et al. Dose-response relationships and pharmacokinetics of vitellogenin in rainbow trout after intravascular administration of 17a-ethynylestradiol// Aquat. Toxicol. 2001. - V. 51 (3). P. 305 - 318.

185. Shulman G.E., Love R.M. Advances in marine biology. Vol. 36. The biochemical ecology of marine fishes/ Ed. Southward A.S., Tyler P.A., Young C.M. San Diego; San Francisco; New York etc.: Acad. Press, 1999. - 351 p.

186. Spry D.J., Wiener J.G. Metal bioavailability and toxicity to fish in low-alkalinity lakes: A critical review// Environ. Pollut. — 1991. Vol. 71. — P. 243-304.

187. Stegeman J.J., Miller C.A., Beyer J. et al. Cytochrome P450 1A expression and localization in organs of the Mink whale (Balaenoptera cutorostrata)ffMav. Environ. Res. 1998. - Vol. 46, № 1-5. - P. 128.

188. Stien X., Percic P., Barelli M. et. al. Evaluation of biomarkers in caged fishes and mussels to asses the quality of waters in a bay of the N W Mediterranean Sea// Environ. Pollut. 1998. - Vol. 99, № 3. - P. 339 - 345.

189. Swaileh K.M., Adelung D. Effect of body size and season on the concentrations of Cu, Cd, Pb and Zn in Diastylis rathkei (Kroyer) (Crustacea: Cumacea) from Kiel Bay, Western Baltic// Mar. Poll. Bull. 1995. - Vol. 31, № 1-3.-P. 103-107.

190. Varanka Z., Rojik I., Varanka I. et al. Biochemical and morphological changes in carp (Cyprinus carpio L.) liver following exposure to copper sulfate and tannic acid// Сотр. Biochem. Physiol. 2001. - Vol. 128, № 3. - P. 467477.

191. Vijayavel K., Gopalakrishnan S., Thilagam H. et al. Dietary ascorbic acid and a-tocopherol mitigates oxidative stress induced by copper in the thornfish Terapon jarbuall Sc. of The Total Environ. 2006. -Vol. 372, № 1. - P. 157-163.

192. Velisek J., Jurcikova J., Dobsikova R. et al. Effects of deltamethrin on rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)H Environ. Toxicol, and Pharmacol. — 2007. -Vol. 23, №3.-P. 297-301.

193. Venkateswara Rao J. Biochemical alterations in euryhaline fish, Oreochromis mossambicus exposed to sub-lethal concentrations of an organophosphorus insecticide, monocrotophos// Chemosphere. — 2006. Vol. 65, № 10. -P. 1814-1820.

194. Venkateswara Rao J. Toxic effects of novel organophosphorus insecticide (RPR-V) on certain biochemical parameters of euryhaline fish, Oreochromis mossambicusII Pesticide Biochemistry and Physiol. 2006. - Vol. 86, № 2. -P. 78-84.

195. Venkateswara Rao J. Sublethal effects of an organophosphorus insecticide (RPR-II) on biochemical parameters of tilapia, Oreochromis mossambicus// Сотр. Biochemistry and Physiol. Part C: Toxicol, and Pharmacol. 2006. - Vol. 143, № 4. - P. 492-498.

196. Westernhagen H. Sublethal effects of pollutants on fish eggs and larvae// Sarsia. 1987. - Vol. 72, № 3 - 4. - P. 419 - 422.

197. Wright D.A. Trace metal and major ion interactions in aquatic animals// Mar. Pollut. Bull. -1995. Vol. 31, №. 1-3. -P. 8-18.

198. Zikic R., Stajn A., Pavlovic S. et al. Activities of superoxide dismutase and catalase in erythrocytes and plasma transaminases of goldfish (Carrassius auratus gibelio Bloch.) exposed to cadmium// Physiol. Res. 2001. - Vol. 50, № l.-P. 105-116.