Третичные лимфоидные структуры при опухолевом росте (экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Рустамханов Расул Айдарович

• Рустамханов Расул Айдарович
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Рустамханов Расул Айдарович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 ИММУНОТЕРАПИЯ, РАК И ТРЕТИЧНЫЕ ЛИМФОИДНЫЕ СТРУКТУРЫ

1.2 ЛИМФОГЕННОЕ МЕТАСТАЗИРОВАНИЕ САРКОМ

1.3 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 ХАРАКТЕРИСТИКА ЖИВОТНЫХ

2.2 ПЕРЕВИВНАЯ ОПУХОЛЬ

2.3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.4 ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ

2.5 ПЕРЕВИВКА ОПУХОЛИ

2.6 ЦВЕТНАЯ ЛИМФОГРАФИЯ

2.7 СОНОЛИПОДЕСТРУКЦИЯ

2.8 МИКРОХИРУРГИЧЕСКОЕ ПРЕПАРИРОВАНИЕ И ЗАБОР МАТЕРИАЛА

2.9 МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.9.1 МАКРОМОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.9.2 ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.9.3 МИКРОМОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.9.4. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.10 МЕТОДЫ СТАТИСТИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКИ

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 РЕЗУЛЬТАТЫ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОГО ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ОСНОВНОГО ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.3 МАКРОМОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАТИВНЫХ, СИГНАЛЬНЫХ И ТРЕТИЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

3.4 МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАТИВНЫХ, СИГНАЛЬНЫХ

И ТРЕТИЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

3.5 МИКРОМОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАТИВНЫХ, СИГНАЛЬНЫХ И ТРЕТИЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

3.6 ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАТИВНЫХ,

СИГНАЛЬНЫХ И ТРЕТИЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Онкологические заболевания считаются ведущей причиной смерти людей во всем мире и являются важным препятствием на пути увеличения продолжительности жизни во всех странах мира (Sung H., et al., 2020). У злокачественных опухолей имеется важная особенность, которая отличает их от доброкачественных - это способность создавать вторичные отдаленные очаги опухолевого роста. Метастатическая активность раковых клеток часто бывает связана с активностью клеточной инвазии. Перемещение злокачественных клеток может осуществляться вследствие аноикоза, варианта апоптоза, возникающего в ответ на потерю адгезии к внеклеточному матриксу. Аноикоз играет важную роль в регуляции тканевого гомеостаза при реконструкции ткани, а также в развитии опухолевых метастазов (Mesquita APS, et al., 2022). В среднем 80 % солидных опухолей метастазируют, главным образом путем проникновения опухолевых клеток в лимфатическую систему, 20 % - через кровеносную систему (Чехун В., 2009; Chen J. et al., 2012). Существуют так же дополнительные пути метастазирования - имплантационный, периневральный и другие.

В случаях метастатического поражения саркомой лимфатического аппарата, для которой более характерно гематогенное метастазировние, - это можно рассматривать не просто как проявление регионарного прогрессирования опухоли, но как клиническое выражение ранней биологической агрессивности саркомы, появления отдаленных микрометастазов, диссеминации опухолевого процесса (Sawamura C. et al., 2013).

Классическое формирование эффективного адаптивного иммунного ответа на опухоль возникает во вторичных лимфоидных органах (ВЛО), где молекулярно-пептидные комплексы главного комплекса гистосовместимости представлены CD4 + Т- и CD8 + Т-клетками, зрелыми дендритными клетками (Mellman I. et al., 2011). В-клетки активируются в ВЛО после связывания с антигеном в первичных фолликулах и получения сигнала от CD4+ Т-клеток и

клеток системы мононуклеарных фагоцитов, далее происходит пролиферация и образование вторичного лимфоидного фолликула, который в последующем становится зародышевым центром. Эти шаги необходимы для пролиферации и дифференцировки лимфоцитов в эффекторные Т-клетки, которые мигрируют в опухоль и приводят к разрушению клеток опухоли, и В-клетки, которые продуцируют соответствующие антитела (Mellman I. et al., 2011). Однако исследования опухолевого микроокружения показали, что регуляция противоопухолевой защиты, происходят не только во ВЛО, но также и непосредственно рядом с опухолью в составе организованных клеточных агрегатов, напоминающих ВЛО, получившими термин - третичные лимфоидные структуры (ТЛС) (Drayton D.L. et al., 2006; Dieu-Nosjean, M.-C. et al., 2016).

ТЛС, как проявление лимфоидного неогенеза, происходит из периферической лимфоидной ткани при длительном воздействии воспалительных сигналов, опосредованных хемокинами и цитокинами. Они развиваются при различных патофизиологических состояниях, включая аутоиммунные и инфекционные болезни, аллотрансплантацию органов, воспалительные заболевания и злокачественные опухоли (Aloisi F. Pujol-Borrell R., 2006; Lucchesi D., Bombardieri M., 2013; Pitzalis C. et al., 2014; Dieu-Nosjean M.-C. et al., 2014).

Многие современные исследования подтверждают тот факт, что образование ТЛС является следствием активации противоопухолевого иммунитета и способствует лучшему прогнозу, а также ответу на иммунотерапию (Schumacher T.N., Thommen D.S., 2022).

Были идентифицированы ключевые общие характеристики между вторичным лимфоидным органогенезом и ТЛС-новообразованием. Механизмы, лежащие в основе роли ТЛС в адаптивном противоопухолевом иммунном ответе, находятся на стадии расшифровки. Представлены корреляции между присутствием ТЛС у пациентов со злокачественными новообразованиями, доказывающие, что наличие ТЛС может быть благоприятным прогностическим фактором, что вызывает большой интерес к исследованию их роли в онкогенезе (Sautes-Fridman C. et al., 2019).

На сегодняшний день остаются вопросы, связанные с выявлением специфических признаков ТЛС, определением клеточного состава в каждой ТЛС и то, влияет ли клеточный состав ТЛС на прогноз заболевания Н. et а1., 2020; Yamaguchi К. et а!., 2020).

Исследования на мышах показали, что ТЛС образуются в окружении инфицированных органов, способствуют уничтожению патогенов посредством адаптивных иммунных реакции, опосредованных антителами (Моугоп-Ршго7 1.Б. et а!., 2004; Моугоп-Ошго7 Ш et а!., 2006).

Несмотря на значительное количество научных работ, посвященных лимфатической системе, до сих пор остаются вопросы, требующие ответа, расшифровки и, возможно, иной трактовки. Особенно это касается онкологических заболеваний, для которых характерно вовлечение лимфоидной ткани в патологический процесс (Ганцев Ш.Х., 2011).

Предполагается, что появление вновь образованных лимфатических узлов (ЛУ) при злокачественных опухолях можно рассматривать с позиций сложных механизмов взаимодействия иммунной системы с опухолью и ее метастазами. В частности, в третичных лимфатических узлах у онкологических больных выявлены изменения экспрессии генов, кодирующих определенные провоспалительные цитокины, хемокины и рецепторы, что может оказывать влияние на процесс распространения злокачественных клеток (Ганцев Ш.Х., 2009; ОаПзеу Б.К. et а!., 2013).

Таким образом, изучение механизма образования ТЛС, их специфики и роли при развитии злокачественных новообразованиях является актуальным.

Цель исследования

Изучить особенности третичных лимфатических узлов при злокачественном новообразовании в эксперименте.

Задачи исследования:

1. Оценить метастатический потенциал саркомы М1 и визуализировать опухолевые клетки в пораженных ее метастазами лимфоузлах в эксперименте.

2. Разработать методику выделения и визуализации третичных лимфоузлов при экспериментальном опухолевом процессе in vivo.

3. Изучить особенности развития третичных лимфатических узлов при опухолевом росте в эксперименте.

4. Определить морфологические особенности третичных лимфатических узлов при опухолевом росте в эксперименте.

5. Выявить иммуногистохимические признаки третичных лимфатических узлов при росте опухоли в эксперименте.

Научная новизна

1. Впервые обнаружено лимфогенное метастазирование экспериментальной саркомы М1 на крысах линии Вистар.

2. Впервые разработана методика визуализации и выделения третичных лимфоузлов при экспериментальном опухолевом процессе in vivo.

3. Впервые определено, что образование третичных лимфатических узлов в эксерименте связанно с лимфогенным метастазированием, в частности с развитием метастатического блока сигнального лимфатического узла.

4. Впервые при экспериментальном опухолевом процессе гистологическим и микроморфометрическим методами исследования выявлены особенности строения лимфоидных фолликулов, краевого и промежуточных синусов, а также кровоснабжения третичных лимфатических узлов, в сравнении с нативными и сигнальными лимфоузлами.

5. Впервые описана иммуногистохимическая характеристика третичных лимфатических узлов при злокачественном росте в эксперименте.

Теоретическая и практическая значимость работы

Результаты, полученные в ходе проведенного исследования, расширяют и углубляют знания по вопросам образования ТЛС в условиях in vivo, позволяют приблизиться к пониманию сложных механизмов взаимодействия иммунной системы с опухолью, лежащих в основе лимфогенного метастазирования неопластических клеток.

Разработанный метод визуализации новообразованной лимфоидной ткани у животных-опухоленосителей может быть использован для изучения её патофизиологии в условиях опухолевого роста и иммунотерапевтических воздействий in vivo.

Новые данные о морфологических и иммуногистохимических (ИГХ) особенностях ТЛС целесообразно использовать в учебном процессе в курсе онкологии, патологической анатомии, патологической физиологии, а также учитывать при проведении экспериментальных исследований, направленных на изучение взаимодействия опухоли с лимфатической (иммунной) системой.

Методология и методы диссертационного исследования

Методологической основой настоящей работы явилось применение методов научного познания. Экспериментальная часть работы выполнена на достаточном для получения достоверных результатов количестве материала с использованием макро-, микроморфометрического, гистологического, иммуногистохимического и статистического методов исследования.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработана методика визуализации и препарирования третичных лимфоузлов при экспериментальном опухолевом процессе in vivo.

2. Выявлены основные гистологические и иммуногистохимические признаки третичных лимфатических узлов в виде: меньшего количества и размера лимфоидных фолликулов; меньшей выраженности коркового слоя; в 3,5 раза большей, по сравнению с нативными лимфатическими узлами (НЛУ) средней суммарной площади кровеносных сосудов; специфической экспрессии CD3, CD4, CD20, CD30 при ИГХ исследовании.

Степень достоверности результатов диссертации

Определяется достаточным количеством экспериментального материала, включенного в исследование, формированием групп сравнения, сопоставимых по своим характеристикам, современными методами исследования, корректно подобранными вариантами статистической обработки. Сформулированные положения, выносимые на защиту, выводы и практические рекомендации

обоснованы, аргументированы и являются логическим заключением комплексного анализа полученных результатов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Третичные лимфоидные структуры при опухолевом росте (экспериментальное исследование)»

Апробация работы

Апробация диссертационной работы состоялась 13.12.2021 в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Основные положения диссертационного исследования доложены и обсуждены на:

1. Международной конференции в рамках мероприятий саммитов ШОС и БРИКС «Современные достижения экспериментальной и клинической онкологии» (Уфа, 2015).

2. Заседании Академии наук Республики Башкортостан, посвященном Дню российской науки, в формате видеоконференции (Уфа, 2021).

3. Региональной конференции Общества онкологов Республики Башкортостан (Уфа, 2021, 2022).

4. Российской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы теоретической и прикладной морфологии» (Уфа, 2022).

Внедрение результатов работы

Полученные в результате проведенного исследования данные используются в учебном процессе для преподавания дисциплин онкология и патологическая анатомия, по темам:

• Фундаментальные основы канцерогенеза и метастазирования

• Неолимфогенез, перераспределение потоков лимфы при блокаде сигнального лимфатического узла

• Иммуногистохимические исследования, экспрессия ключевых маркеров иммунокомпетентных клеток в лимфатическом узле при онкологическом процессе.

На базах: кафедры онкологии с курсами онкологии и патологической анатомии ИДПО Федерального государственного бюджетного образовательного

учреждения высшего образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации и кафедры патологической анатомии Федерального государственного бюджетного учреждения высшего образования «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Публикации

Результаты диссертационного исследования опубликованы в 13 печатных работах, из них 5 статей в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации (1 из которых в журнале, входящем в международную реферативную базу SCOPUS) и в атласе «Лимфатический узел и его микроокружение при раке молочной железы», редактор Ш.Х. Ганцев.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 123 страницах компьютерного текста и состоит из введения, глав обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственного исследования, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы из 161 источника (19 отечественных и 142 -зарубежных авторов). Работа проиллюстрирована 33 таблицами, 60 рисунками.

Благодарности

Благодарю своих научных руководителей - академика Академии наук Республики Башкортостан, доктора медицинских наук, профессора Ш.Х. Ганцева за выбор темы и постоянную помощь при выполнении работы и Заслуженного врача РФ, доктора медицинских наук, профессора О.В. Зайратьянца за помощь в описании и понимании в разделах морфологии.

Огромную благодарность выражаю рецензентам за проделанную большую работу, за их критические замечания, после исправления, которых данная работа вышла на публичную защиту.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Иммунотерапия, рак и третичные лимфоидные структуры.

Мировые данные свидетельствуют о том, что за последние десятилетия заболеваемость и смертность от рака быстро растут. Ожидается, что рак станет основной причиной смерти и одним из основных препятствий на пути увеличения продолжительности жизни (Sung H. et al., 2020). Стандартные методы лечения, включая лучевую терапию и химиотерапию, имеют ограниченный терапевтический эффект. Иммунотерапия — это новая стратегия лечения рака, достигшая сегодня значительных успехов (Janakiram M. et al., 2016). Сегодня имеется определенное количество биомаркеров благодаря которым можно спрогнозировать и оценить терапевтический ответ от иммунотерапии. Лиганд запрограммированной гибели клеток 1 (PD-L1), устранение дефектного несоответствия (dMMR) / высокая микросателлитная нестабильность (MSI-H) и опухолевая мутационная нагрузка (TMB) считаются биомаркерами иммунотерапии. Тем не менее, исследования более точных биомаркеров по-прежнему находится в центре внимания исследований в области иммунотерапии (Zhao Z. et al., 2021).

Способность иммунной системы влиять на прогрессирование опухоли является известным фактом, который впервые получил клиническое подтверждение более 100 лет назад, когда доктор Уильям Коли ввел дезагрегированные бактериальные компоненты в опухоль и отметил, что последующее воспаление обычно связано с регрессом опухоли. С тех пор наше понимание отдельных компонентов и общего взаимодействия иммунной системы значительно расширилось. Это привело к развитию четкого понимания того, как компоненты врожденного и адаптивного иммунитета распознают опухоли и реагируют на них, и использования этой информации для разработки иммунотерапевтических средств против опухолей. Однако клинические неудачи также углубили наши знания о том, как опухоли могут адаптироваться, чтобы

избежать или подавить иммунный ответ, что, в свою очередь, привело к дальнейшему развитию иммунотерапии (Bullock T.N.J., 2021).

Иммунотерапия - это подход, направленный на эффективное иммуноопосредованное подавление роста опухоли. Ключевым игроком в этом процессе является микроокружение опухоли, которое представляет собой динамический объект, характеризующийся сложным набором опухолевых и стромальных клеток, а также популяциями иммунных клеток, перемещающихся к месту развития опухоли через эндотелиальный барьер. Понимание этой многогранной динамики имеет решающее значение для изучения тесных взаимодействий между раком и иммунной системой и для оценки эффективности новых видов иммунотерапии, таких как ингибиторы иммунных контрольных точек и продукты на основе адаптивных клеток (Parlato S. et al., 2021).

Органы иммунной системы разделяются на первичные (центральные) и вторичные (периферические). Существует два первичных органа иммунной системы - это красный костный мозг, в котором происходит образование функционально зрелых В-лимфоцитов, и тимус, в котором образуются функционально зрелые Т-лимфоциты. К вторичным лимфоидным органам (ВЛО) относятся селезенка и лимфатические узлы (ЛУ), а также миндалины (парные небные и трубные, непарные глоточная и язычная), Пейеровы бляшки в тонком кишечнике и червеобразный отросток, представляющие собой агрегаты лимфоидных фолликулов. Кроме того, в слизистых оболочках пищеварительного, респираторного, мочеполового трактов и коже имеются одиночные лимфоидные фолликулы и диффузно расположенные лимфоциты. В связи с этим, выделяют лимфоидную ткань, ассоциированную с кожей (skin-associated lymphoid tissue -SALT), и лимфоидную ткань, ассоциированную со слизистыми оболочками (mucosa associated lymphoid tissue - MALT). Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками, разделяется на лимфоидную ткань, ассоциированную с кишечником (gut-associated lymphoid tissue - GALT) и лимфоидную ткань, связанную с бронхами (bronchus-associated lymphoid tissue - BALT), и другие

виды лимфоидной ткани (Павленко В.И., Саяпина И.Ю., 2017; Ганцев Ш.Х с соавт., 2019).

Лимфатические узлы - онтогенетически пластичный и важнейший в функциональном плане структурный элемент периферической лимфоидной ткани. У млекопитающих, в том числе и у человека, ЛУ (600-800 ед.) закладываются внутриутробно и функционируют в течение всей жизни. Вследствие контакта с инфекционными или иными агентами их число и функциональная активность постоянно меняются, причем с возрастом число функционирующих ЛУ уменьшается (до 300-600 ед.). На позднем этапе онтогенеза происходит реорганизация структуры ЛУ, отражающая общий процесс старения и сопровождающаяся снижением функциональной активности лимфоидной ткани в пожилом и старческом возрасте (Горчакова О.В. и соавт., 2015).

ВЛО стратегически размещены в строго определенных местах организма, в совокупности образуя сложную сеть, обеспечивающую непрерывное иммунное наблюдение внутренних органов, слизистых оболочек и крови. Отдельно взятые ВЛО имеют высокоорганизованную конфигурацию (структуру, форму), способствующую взаимодействию клеток иммунной системы и формированию иммунного ответа (Drayton D.L. et al., 2006; Randall T.D. et al., 2008; Van de Pavert S.A., Mebius R.E., 2010).

Процесс формирования ВЛО генетически обусловлен и происходит в период эмбриогенеза. Хотя ЛУ и Пейеровы бляшки формируются пренатально, органогенез лимфоидной ткани слизистых оболочек, такой как BALT и более пластичных лимфоидных тканей, включая GALT, реализуется постнатально. Таким образом, существует континуум лимфоидной ткани, от основных (элементообразующих) ВЛО, предопределенных (детерменированных) во время онтогенеза, до высокопластичных, индуцируемых и переходных (неустойчивых) лимфатических структур, возникающих в более поздний (постнатальный) период жизни живого организма (Van de Pavert S.A., Mebius R.E., 2010, Dieu-Nosjean M.-C. et al., 2014).

Следует отметить, что органогенез вторичных лимфоидных тканей может повторно реализовываться в организме взрослого человека во время лимфоидного неогенеза. Эти эктопические лимфоидные структуры формируются как микроокружение опухоли (Sautes-Fridman C. et al., 2019), а также в воспаленных тканях как часть определенного патологического процесса - онкологического заболевания, аутоиммунных заболеваниях (Pipi E. et al., 2018), хронических инфекциях (Ruddle N.H., et al., 2020), или отторжения аллотрансплантата (de Leur K. et al., 2018) из-за длительной хронической стимуляции лимфоидной системы. В частности, ТЛС обнаруживаются в опухолях, где они генерируют локальные и системные противоопухолевые реакции (Sautes-Fridman C. et al., 2016).

ТЛС первоначально описывались в контексте неопухолевых хронических воспалительных заболеваний, включая аутоиммунные заболевания, инфекции и идиопатические заболевания (Aloisi F., Pujol-Borrell R., 2006; Drayton D.L. et al., 2006; Neyt K. et al., 2012). Неопластические злокачественные новообразования во многих своих свойствах сходны со средой хронического воспаления, в том числе с хроническим течением самого воспаления. Тем не менее, процесс роста злокачественных опухолей отличается от хронического воспаления по одному существенному признаку, который, как считают некоторые ученые, может предотвратить образование ТЛС: высоко-иммуносуппрессивное микроокружение опухоли (Goc J. et al., 2013; Joyce J.A., Fearon D.T., 2015). Однако, согласно опубликованным исследованиям ученых по всему миру, ТЛС различных степеней организации встречаются у пациентов с различными видами первичных и метастатических опухолей (Coppola D. et al., 2011; de Chaisemartin L. et al., 2011; Martinet L. et al., 2011; Cipponi A. et al., 2012; Messina J.L. et al., 2012; Nielsen J.S. et al., 2012; Gu-Trantien C. et al., 2013; Martinet L. et al., 2013; Remark R. et al., 2013; Di Caro G. et al., 2014; Goc J. et al., 2014; Sakai Y. et al., 2014; Bento D.C. et al., 2015; Finkin S. et al., 2015; Giraldo N.A. et al., 2015; Hiraoka N. et al., 2015; Kroeger D.R. et al., 2016; Low S. et al., 2016; Garcia-Hernandez M.L. et al., 2017).

ТЛС являются ключевым элементом иммунного микроокружения опухоли, которое состоит из T-клеток, B-клеток, различных клеток системы

мононуклеарных фагоцитов, включая фолликулярные дендритные клетки и венул с высоким эндотелием (Goc J. et al., 2013; Helmink B.A. et al., 2020).

Есть данные, что ТЛС играют важную роль в развитии различных типов опухолей (Zhao Y. et al., 2020; Lin Q. et al., 2020; Li H. et al., 2020). Исследователи показали, что наличие ТЛС в микроокружении опухоли (МОО) улучшает эффект иммунотерапии и выживаемость пациентов при меланоме и саркоме (Cabrita R. et al., 2020; Petitprez F, et al., 2020).

Третичные лимфоидные структуры или эктопические лимфоидные органы, являются одним из основных источников опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов которые имеют решающее значение для уничтожения раковых клеток (Martinet L. et al., 2011, Garaud S. et al., 2022).

Учитывая описанную протвоопухолевую роль ТЛС, также было показано, что иногда присутствие ТЛС способствует иммунологической толерантности, главным образом, отрицательно влияя на механизм представления антигена и рекрутируя иммуносупрессивные клетки, такие как регуляторные Т-клетки и ассоциированные с опухолью макрофаги. С образованием ТЛС также обнаруживают неолимфоагиогенез, новая сосудистая сеть играет потенциальную роль в метастазировании опухоли, выступая в качестве каналов для метастазирования опухолевых клеток. Возможная роль ТЛС в метастазировании в основном связана с тем фактом, что по мере развития TLS он способствует эктопическому лимфангиогенезу и образованию венул с высоким эндотелием. Было показано, что эта сосудистая сеть de novo играет ключевую роль в противоопухолевом иммунитете при большинстве видов рака, но это не исключает потенциальной роли в качестве пути распространения опухолевых клеток. Лимфангиогенез коррелирует с увеличением метастазирования в лимфатические узлы. Было показано, что богатая цитокинами среда ТЛС, благоприятная для противоопухолевого иммунитета, в некоторых случаях также обладает прометастатическим потенциалом (Mustapha R. et al., 2021).

Если говорить о терминологии, то термин «Третичные лимфоидные структуры» может относиться к структурам различной организации - от простого

скопления лимфоцитов до сложных сегрегированных структур, в значительной степени напоминающих ВЛО (Aloisi F., Pujol-Borrell R., 2006; Carragher D.M. et al., 2008; Neyt K. et al., 2012; Stranford S., Ruddle N.H., 2012; Lu T.T., Browning J.L., 2014; Pitzalis C. et al., 2014).

Формирование ТЛС начинается от простых агрегатов В- и Т-лимфоцитов, до образования высоко упорядоченных лимфоидных фолликулов (Takemura S. et al., 2001; Manzo A. et al., 2005; Cantaert T. et al., 2008). Результаты неолимфогенеза зависят как от характера заболевания, вызвавшего этот процесс, так и особенностей иммунного ответа. В многочисленных обзорных публикациях обсуждается состав и возможное происхождение ТЛС в норме и патологии. Обнаружена корреляция между высокой плотностью ТЛС и длительной выживаемостью пациентов во многих случаях (Messina J.L. et al., 2012). В отличие от первичных или вторичных лимфоидных клеток структуры или органы, ТЛС не формируются пренатально и не присутствуют в нормальных условиях, хотя богатые лимфоцитами структуры могут быть обнаружены в отсутствие болезни (Dieu-Nosjean M.C. et al., 2014; Pimenta E.M., Barnes B.J., 2014). Высокоорганизованные ТЛС очень похожи на лимфатические узлы, как по структуре, так и по развитию, а организация и целостность ТЛС обеспечивается стромальными клетками (Denton A.E. et al., 2019). В свою очередь ТЛС могут быть факультативными, временными лимфоидными структурами (Коненков В. И. с соавт., 2012; Мичурина С. В. с соавт., 2014), возникающими при патологических процессах в органах, где в норме лимфоидная ткань отсутствует. Появление таких образований принято считать компенсаторно-приспособительной реакцией и связано это с реактивными изменениями лимфоидной ткани в ответ на различные по природе воздействия на организм. Например, ЛУ формируются в портальных трактах печени при хроническом вирусном гепатите, щитовидной железе при аутоиммунном тиреоидите и в других органах при различных заболеваниях (Бородин Ю. И. с соавт., 2016)

Благодаря неугасающему интересу к ТЛС, на сегодня известно, что хорошо развитые ТЛС содержат B-клеточные фолликулы с активно реплицирующимися

B-клеточными герминативными центрами (GC), окруженными областью T-клеток. В ТЛС обнаруживаются венулы с высоким эндотелием (HEV) и мембранный белок, ассоциированный с лизосомальными клетками дендритных клеток (DC-LAMP) + дендритные клетки (DC). В ряде случаев присутствие ТЛС связано с негативным прогностическим исходом, таким как ревматоидный артрит, синдром Шегрена и тиреоидит Хашимото, где увеличение количества ТЛС связано со степенью тяжести заболевания. Однако ТЛС, ассоциированные с опухолью, часто ассоциируются с хорошим прогностическим исходом при большинстве злокачественных новообразований, включая рак молочной железы, колоректальный и рак легких. (Dieu-Nosjean M.C. et al., 2014). Имеются обширные данные о прогностической ценности присутствия ТЛС при многих видах рака (Sautes-Fridman C. et al., 2016; Lin L. et al., 2019; Sautes-Fridman C. et al., 2019).

Молекулярные механизмы, которые приводят к лимфоидному новообразованию, изучены лишь частично. Они похожи на те, которые приводят к образованию новых ВЛО во время внутриутробного развития. Это развитие управляется клетками гемопоэтического происхождения, клетками-индукторами лимфоидной ткани (LTi), которые заставляют эндотелиальные клетки экспрессировать PNAd и становиться HEV, и стромальными клетками, в т.ч. системы мононуклеарных фагоцитов, чтобы дифференцироваться в FDC и другие клетки. Неизвестно, вносят ли LTi-подобные клетки вклад в формирование эктопических лимфоидных структур. Был предложен альтернативный механизм, с помощью которого активированные лимфоциты замещают LTi (Aloisi F., Pujol-Borrell R., 2006; Marinkovic T. et al., 2006).

Проведенные исследования проливают свет на функции таких структур при различных заболеваниях и их роль в прогрессировании патологического процесса или разрешении заболевания. Данные одних ученых подтверждают наличие взаимосвязи между присутствием опухолеспецифических

(опухолеассоциированных) ТЛС и благоприятным прогнозом у пациентов с различными онкологическими заболеваниями, что дает возможность предположить участие ТЛС в эффективных локальных противоопухолевых

иммунных реакциях. Однако, определяющих доказательств в пользу содействия ТЛС иммунным процессам in vivo на данный момент нет, а имеющиеся в настоящее время сведения носят главным образом коррелятивный характер (Sautes-Fridman C. et al., 2016; Colbeck E.J. et al., 2017).

Следует особо подчеркнуть, что клиническая значимость ТЛС колеблется от разрушительной до защитной, что свидетельствует о необходимости более четкого понимания структуры и функции этих структур, отличающихся в зависимости от конкретной ситуации, до проведения клинического таргетинга (Colbeck E.J. et al., 2017).

Механизмы противоопухолевого иммунитета, обеспечиваемые ТЛС, могут связываться с отдельными компонентами, включая эффекторные цитокины и непосредственно цитотоксические молекулы, продуцируемые Т-клетками, антитуморальные антитела, продуцируемые В-клетками, и повышенную чувствительность к опухоли антигенов с местными дендритными клетками. Противоопухолевые механизмы ТЛС были недавно рассмотрены Sautes-Fridman и соавторами (2019). Учитывая сходную структурную и композиционную природу ТЛС, их близость к местам воспаления и их общие контрастирующие ассоциации прогностического исхода с аутоиммунными заболеваниями и раком, вполне вероятно, что ТЛС играет непосредственную роль во влиянии на иммунный ответ (Sautes-Fridman C. et al., 2019).

Лечение с помощью блокады иммунных контрольных точек (ICB) произвело революцию в терапии рака. До сих пор прогностические биомаркеры (Taube J.M. et al. 2014; Chen P.L. et al., 2016; Subudhi S.K. et al. 2016; Ayers M. et al. 2017; Jacquelot N. et al., 2017; Yarchoan M. et al., 2017; Cottrell T.R., Taube J.M., 2018; Gopalakrishnan V. et al., 2018; Matson V. et al., 2018; Routy B. et al., 2018) и стратегии увеличения клинического ответа в основном были сосредоточены на компартменте Т-клеток. Однако другие иммунные подгруппы также могут вносить вклад в противоопухолевый иммунитет (Dieu-Nosjean M.C. et al., 2014; Tsou P. et al., 2016; Fridman W.H. et al., 2017; Colbeck E.J. et al., 2017; Sarvaria A. et al., 2017), хотя они менее изучены при лечении ICB (Sautes-Fridman C. et al.,

2019). Ранее проведенное неоадъювантное исследование ICB у пациентов с меланомой показало с помощью целевого профилирования экспрессии (Amaria R.N. et al., 2018) что сигнатуры В-клеток были обогащены в опухолях пациентов, которые реагировали на лечение, по сравнению с пациентами, не ответившими на лечение. Чтобы основываться на этом, было выполнено объемное секвенирование РНК и обнаружено, что маркеры В-клеток были наиболее дифференциально экспрессируемыми генами в опухолях респондеров по сравнению с не отвечающими. Результаты были подтверждены с помощью вычислительного метода (MCP-counter (Becht E. et al., 2016)) для оценки иммунного и стромального состава в этой и двух других когортах, получавших ICB (пациенты с меланомой и почечно-клеточным раком). Гистологическая оценка выявила локализацию В-клеток в ТЛС. Был оценен потенциальный функциональный вклад В-клеток с помощью объемного и одноклеточного секвенирования РНК, которые демонстрировали клональную экспансию и уникальные функциональные состояния В-клеток у респондеров. Массовая цитометрия показала, что переключенные В-клетки памяти были обогащены в опухолях респондеров. Вместе эти данные дают представление о потенциальной роли В-клеток и ТЛС в ответе на лечение ICB, что имеет значение для разработки биомаркеров и терапевтических мишеней (Helmink B.A. et al., 2020). Три других исследования показали, что наличие в опухолях двух ключевых иммунных компонентов - В-клеток и ТЛС - было связано с благоприятными исходами при иммунотерапии (Bruno T.C., 2020).

Саркомы мягких тканей представляют собой гетерогенную группу опухолей, насчитывающую более 50 гистологических подтипов (Helman L., Meltzer P., 2003; Fletcher C. et al., 2013). Клиническая картина у пациентов с разными подтипами часто нетипична, и ответы на терапию, такие как блокада иммунных контрольных точек, широко варьируются (Tawbi H.A. et al. 2017; D'Angelo S.P. et al. 2018). Чтобы объяснить клиническую вариабельность, группа ученых изучила профили экспрессии генов в 608 опухолях подтипов саркомы мягких тканей. Они устанавили иммунную классификацию на основе состава микроокружения

опухоли и определили пять различных фенотипов: группы с низким иммунитетом (A и B), с высоким уровнем иммунитета (D и E) и группы с высоким уровнем васкуляризации (C). Анализ in situ независимой проверочной когорты показал, что класс E характеризовался наличием ТЛС, которые содержли Т-клетки, фолликулярные дендритные клетки и особенно богаты В-клетками. В-клетки являются сильнейшим прогностическим фактором даже в контексте высокого или низкого уровня CD8+. Группа класса E продемонстрировала лучшую выживаемость и высокую скорость ответа на блокаду PD1 пембролизумабом в клинических испытаниях фазы 2. Это исследование подтверждает наличие иммунных подтипов у пациентов с саркомой мягких тканей и раскрывает потенциал ТЛС, богатых В-клетками, для принятия клинических решений и методов лечения, которые могут иметь более широкое применение при других заболеваниях (Petitprez F. et al., 2020).

Если говорить о различиях ТЛС и ВЛО, то значительным различием является тот факт, что ЛУ заключены в капсулу, а ТЛС представляют собой скопление иммунных и стромальных клеток в пределах органа или ткани. Принципиально важно то, что, в отличие от развития ВЛО, которое является генетически обусловленным процессом индивидуального развития, ТЛС образуются в ответ на хронические раздражители, индуцируемые воспалительным процессом. Более того, хотя ВЛО образуются в предопределенных специфических анатомических зонах, ТЛС образуются, как правило, в нелимфоидных органах и обладают динамичностью развития и широкой вариативностью проявления, то есть могут временно существовать и исчезать после устранения антигена (Drayton D.L. et al., 2006; Colbeck E.J. et al., 2017). Развитие ТЛС описаны практически во всех органах в условиях хронического воспаления, включая сердце, почки, легкие, кишечник, сосудистую систему, центральную нервную систему и костный мозг. Клинические проявления заболеваний и экспериментальные модели, в которых ТЛС описаны, подробно рассматриваются в указанных публикациях (Pitzalis C. et al., 2014).

Патоморфологи пользуются специфичными критериями при определении ТЛС. Согласно этим критериям, ТЛС содержат обособленные участки Т- и В-лимфоцитов, есть сети стромальных клеток и peripheral node addressins (PNAds) + наружные венулы с высоким эндотелием в Т-клеточной области, фолликулярные дендритные клетки (ФДК) и есть подтверждение факту переключения класса иммуноглобулинов и реактивных герминативных центров (ГЦ) в В-клеточной области, а так же экспрессия цитидиндезаминазы, индуцируемой активацией; присутствие в В-лимфоцитах ГЦ фермента, необходимого для начала соматической гипермутации и переключения класса иммуноглобулинов (de Chaisemartin L. et al., 2011; Neyt K. et al., 2012). Доказано, что, подобно лимфатическим узлам, ТЛС имеют лимфатические сосуды, хотя на данный момент неизученными вопросами остаются: роль этих сосудов и их сходство с афферентными либо эфферентными лимфатическими сосудами ЛУ (Drayton D.L. et al., 2006; Lee J.-W. et al., 2007; Randall T.D. et al., 2008). Ряд критериев, отличающих полноценные ТЛС, были недавно предложены группой исследователей под руководством Фридман (Dieu-Nosjean M.-C. et al., 2014).

Возможно, наблюдаемая разнородность архитектуры и организации ТЛС отражает стадию заболевания, на которой проведена биопсия, и потому представляет собой выборочное исследование на различных стадиях развития, зрелости и/или разрешения ТЛС. Кроме того, некоторые ученые считают, что потенциальное функциональное сходство ТЛС с ВЛО, вероятно, является более значимым по сравнению с точной анатомической структурой: данные структуры либо связаны с отрицательным исходом, либо с защитными клиническими эффектами у людей; вышесказанное наталкивает на мысль о том, что ТЛС могут порождать функциональные адаптивные иммунные реакции, влияющие на прогрессирование заболевания (Pitzalis C. et al., 2014).

Феномен неолимфогенеза при раке впервые описан в работах Ш.Х. Ганцева (Ганцев Ш.Х., 2009). Неолимфогенез - это формирование новых (третичных) лимфатических узлов упрощенного строения при утрате функций, ранее существовавших из-за их метастатического поражения опухолью. Зарубежные

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Рустамханов Расул Айдарович, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Атлас: Лимфатический узел и его микроокружение при раке молочной железы / Ш.Х. Ганцев, М.Г. Галеев, КШ Ганцев. [и др.]. - М.: МИА, 2019. — 280 с.

2. Большаков, О.П. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных / О.П. Большаков, Н.Г. Незнанов, Р.В. Бабаханян // Качественная клиническая практика. - 2002. - № 1. -С. 58-61.

3. Бородин, Ю.И. Периферические лимфоидные структуры: образование и функция / Ю.И. Бородин, О.В. Горчакова, В.Н. Горчаков // Морфология. - 2016. -№ 4. - С. 90-96.

4. Ганцев, Ш.Х. Аксиллярный лимфатический аппарат при раке молочной железы: атлас / Ш.Х. Ганцев. - М.: МИА, 2011. — 194 с.

5. Ганцев, Ш.Х. Новое к теории метастазирования рака и подходам к его лечению / Ш.Х. Ганцев // Креативная хирургия и онкология. - 2010. - № 4. - С. 511.

6. Ганцев, Ш.Х. Новые технологии диагностики и лечения рака молочной железы / Ш.Х. Ганцев // Креативная хирургия и онкология. - 2009. - № 1. - С. 6-9.

7. Ганцев, Ш.Х. Третичные лимфоидные структуры (лимфоидный неогенез) / Ганцев Ш.Х., Рустамханов Р.А., Ганцев К.Ш., Кзыргалин Ш.Р. // Иммунология, 2019, - Т 40, №2. - С. 58-63.

8. Горчакова, О.В. Морфологические особенности лимфоузла, претерпевшего возрастные изменения, после озоно- и фитотерапии / О.В. Горчакова, Н.В. Кутафьева, В.Н. Горчаков // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2015. - № 12. - С. 1613-1616.

9. Павленко, В.И. Клетки и органы иммунной системы: учебное пособие / В.И. Павленко, И.Ю. Саяпина. - Благовещенск: 2017. - 121 с.

10. Кобзарь, А.И. Прикладная математическая статистика. Для инженеров и научных работников / А.И. Кобзарь. — М.: ФИЗМАТЛИТ, 2006. — 816 с.

11. Ковалев, А.А. Метастатический каскад как терапевтическая и хирургическая мишень / А.А. Ковалев // Здоровье Украины. - 2011. - № 4 (17). - С. 26-28.

12. Петров, С.В. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / С.В. Петров, Н.Т. Райхлин. - Казань: DESIGNstudio «RED», Казань, 2012. - 624 с.

13. Перитуморальный неолимфангиогенез как прогностический показатель при раке молочной железы / Ганцев Ш.Х., Ганцев К.Ш., Турсуметов Д.С., Кзыргалин Ш.Р. // В книге: Лимфология: от фундаментальных исследований к медицинским технологиям. Материалы XIII международной научно-практической конференции памяти академика Ю.И. Бородина 20-21 ноября, 2018. - С. 28-29.

14. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. - М.: Издательство Мир, 2000. - 582 с.

15. Способ моделирования неолимфогенеза в эксперименте: пат. № 2422914 РФ / Ганцев Ш.Х. - зарег. 27.06. 2011.

16. Способ стадирования рака in vitro: пат. № 2333776 РФ / Ганцев Ш.Х. - зарег. 20.09.2008.

17. Учебно-методическое пособие по методам общей бактериологии / сост.: Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин, А.А. Щербаков, Л.В. Карпунина. - Ульяновск: ГСХА, 2008. - 130 с.

18. Франк, Г.А. Проблемы морфологической классификации и диагностики опухолей мягких тканей / Г.А. Франк // Практическая онкология. - 2004. - Т. 5, № 4. - С. 231-236.

19. Шабад, Л.М. Новый перевиваемый штамм саркомы крыс М1 / Л.М. Шабад, М.М. Блох // Бюллетень экспериментальной биологии. - 1947. - Т. 24, № 10. - С. 4.

20. 12-Chemokine gene signature identifies lymph node-like structures in melanoma: potential for patient selection for immunotherapy? / J.L. Messina [et al.] // Sci. Rep. - 2012. - № 2. - P. 765. doi:10.1038/srep00765

21. A gene-rich cluster between the CD4 and triosephosphate isomerase genes at human chromosome 12p13 / M.A. Ansari-Lari [et al.] // Genome Res. — 1996. — Vol. 6, № 4. — P. 314—326. — D01:10.1101/gr.6.4.314.

22. A novel model for lymphocytic infiltration of the thyroid gland generated by transgenic expression of the CC chemokine CCL21 / A.P. Martin [et al.] // J. Immunol. - 2004. - Vol. 173, № 8. - P. 4791-8.

23. A unique cellular and molecular microenvironment is present in tertiary lymphoid organs of patients with spontaneous prostate cancer regression / M.L. García-Hernández [et al.] // Front. Immunol. - 2017. - № 8. - P. 563. doi: 10.3389/fimmu.2017.00563

24. Absence of functional lymphatics within a murine sarcoma: a molecular and functional evaluation / A.J. Leu [et al.] // Cancer Res. - 2000. - Vol. 60. - P. 4324-4327.

25. Aloisi, F. Lymphoid neogenesis in chronic inflammatory diseases / F. Aloisi, P.-R. Borrell // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - Vol. 6. - P. 205-217.

26. Analysis of Immune Signatures in Longitudinal Tumor Samples Yields Insight into Biomarkers of Response and Mechanisms of Resistance to Immune Checkpoint Blockade / P.L. Chen [et al.] // Cancer Discov. - 2016. - Vol. 6, № 8. - P. 827-837. doi:10.1158/2159-8290.CD-15-1545

27. Association of PD-1, PD-1 ligands, and other features of the tumor immune microenvironment with response to anti-PD-1 therapy / J.M. Taube [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2014. - Vol. 20, № 19. - P. 5064-5074. doi:10.1158/1078-0432.CCR-13-3271;

28. B cells and tertiary lymphoid structures promote immunotherapy response / B.A. Helmink [et al.] // Nature. - 2020. - № 577 (7791). - P. 549-555. doi:10.1038/s41586-019-1922-8

29. B cells are associated with survival and immunotherapy response in sarcoma / F. Petitprez [et al.] // Nature. - 2020. - № 577. - P. 556-560. https://doi.org/10.1038/s41586-019-1906-8

30. B lymphocyte autoimmunity in rheumatoid synovitis is independent of ectopic lymphoid neogenesis / T. Cantaert [et al.] // J. Immunol. - 2008. - Vol. 181. - P. 785-94. doi: 10.4049/jimmunol.181.1.785.

31. Biological prognostic factors in adult soft tissue sarcomas / A. Ottaiano [et al.] // Anticancer Res. - 2005. - Vol. 25. - P. 4519-4526.

32. Blazer, D.G. Is there a role for sentinel lymph node biopsy in the management of sarcoma? / D.G., M.S. Sabel, V.K. Sondak // Surg. Oncol. - 2003. - Vol. 12, № 3. - P. 201-206.

33. Bruno, T.C. New predictors for immunotherapy responses sharpen our view of the tumour microenvironment / T.C. Bruno // Nature. - 2020. - № 577 (7791). - P. 474476. doi:10.1038/d41586-019-03943-0

34. Bullock, T.N.J. Fundamentals of Cancer Immunology and Their Application to Cancer Vaccines / T.N.J. Bullock // Clin. Transl. Sci. - 2021. - Vol. 14. - P. 120-131. doi: 10.1111/cts. 12856

35. Cacciatore, M. Challenging epithelioid mesenchymal neoplasms: mimics and traps / M. Cacciatore, A.P. Dei Tos // Pathology. - 2014. - Vol. 46, № 2. - P. 126-134. doi: 10.1097/PAT. 0000000000000063

36. Carragher, D.M. Ectopic lymphoid tissues and local immunity / D.M. Carragher, J. Rangel-Moreno, T.D. Randall // Semin. Immunol. - 2008. - Vol. 20. - P. 26-42. doi: 10.1016/j.smim.2007.12.004

37. CCL21 chemokine regulates chemokine receptor CCR7 bearing malignant melanoma cells / H. Takeuchi [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2004. - № 10. - P. 2351-8.

38. CD20 deficiency in humans results in impaired T cell-independent antibody responses / T.W. Kuijpers [et al.] // J. Clin. Invest. — 2010. — Vol. 120, № 1. — P. 214—222. doi: 10.1172/JCI40231.

39. CD20+ tumor-infiltrating lymphocytes have an atypical CD27- memory phenotype and together with CD8+ T cells promote favorable prognosis in ovarian cancer / J.S. Nielsen [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2012. - Vol. 18. - P. 3281-92. doi:10.1158/1078-0432.CCR-12-0234

40. CD30 (Ki-1) molecule: a new cytokine receptor of the tumor necrosis factor receptor superfamily as a tool for diagnosis and immunotherapy / B. Falini [et al.] // Blood. - 1995. - Vol. 85. - P. 1-14.

41. CD30 expression in normal and neoplastic lymphoid tissue: biological aspects and clinical implications / P.C. DeBruin [et al.] // Leukemia. - 1995. - № 9. - P. 16201627.

42. CD4? follicular helper T cell infiltration predicts breast cancer survival / C. Gu-Trantien [et al.] // J. Clin. Invest. - 2013. - Vol. 123. - P. 2873-92. doi: 10.1172/JCI67428

43. Characteristics and clinical impacts of the immune environments in colorectal and renal cell carcinoma lung metastases: influence of tumor origin / R. Remark [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2013. - Vol. 19. - P. 4079-91. doi:10.1158/1078-0432.CCR-12-3847

44. Characteristics of tertiary lymphoid structures in primary cancers / J. Goc [et al.]// Oncoimmunology. - 2013. - № 2. - P. e26836. doi:10.4161/onci.26836

45. Characterization of chemokines and adhesion molecules associated with T cell presence in tertiary lymphoid structures in human lung cancer / L. de Chaisemartin [et al.] // Cancer Res. - 2011. - Vol. 71. - P. 6391-9. doi:10.1158/0008-5472.CAN-11-0952

46. Chen, D.S. Oncology meets immunology: the cancer-immunity cycle / D.S. Chen // Immunity. - 2013. - Vol. 39, № 1. - P. 1-10.

47. Chen, J. Integrins and Their Extracellular Matrix Ligands in Lymphangiogenesis and Lymph Node Metastasis / J. Chen, J.S. Alexander, A.W. Orr // Int. J. Cell Biol. -2012. - Article ID 853703. 12 p. doi: 10.1155/2012/853703.

48. Chronic inflammation caused by lymphotoxin is lymphoid neogenesis / A. Kratz [et al.] // J. Exp. Med. - 1996. - Vol. 183, № 4. - P. 1461-72.

49. Clonal expansion of CD8 T cells in the systemic circulation precedes development of ipilimumab-induced toxicities / S.K. Subudhi [et al.] // Proc. Natl.

Acad. Sci. USA.- 2016. - Vol. 113, № 42. - P. 11919-11924. doi: 10.1073/pnas.1611421113;

50. Cottrell, T.R. PD-L1 and Emerging Biomarkers in Immune Checkpoint Blockade Therapy / T.R. Cottrell, J.M. Taube // Cancer J. - 2018. - Vol. 24, № 1. - P. 41-46. doi: 10.1097/PPO.0000000000000301

51. Dendritic cells in tumor-associated tertiary lymphoid structures signal a Th1 cytotoxic immune contexture and license the positive prognostic value of infiltrating CD8+ T cells / J. Goc [et al.] // Cancer Res. - 2014. - Vol. 74. - P. 705-15. doi:10.1158/0008-5472.CAN-13-1342

52. Differing activities of homeostatic chemokines CCL19, CCL21, and CXCL12 in lymphocyte and dendritic cell recruitment and lymphoid neogenesis / S. Luther [et al.] // J. Immunol. - 2002. - Vol. 169, № 1. - P. 424-33.

53. Dunn, O.J. Multiple comparisons using rank sums / O.J. Dunn // Technometrics. - 1964. - № 6. - P. 241-252.

54. Dynamic molecular changes associated with Epithelial-Mesenchymal Transition and subsequent Mesenchymal-Epithelial Transition in the early phase of metastatic tumor formation / K. Aokage [et al.] // Int. J. Cancer. - 2011. - Vol. 128, № 7. - P. 1585-1595. doi: 10.1002/ijc.25500.

55. Ectopic expression of the murine chemokines CCL21a and CCL21b induces the formation of lymph node-like structures in pancreas, but not skin, of transgenic mice / S.C. Chen [et al.] // J. Immunol. - 2002. - Vol. 168, № 3. - P. 1001-8.

56. Ectopic lymphoid structures function as microniches for tumor progenitor cells in hepatocellular carcinoma / S. Finkin [et al.] // Nat. Immunol. - 2015. - Vol. 16. - P. 1235-44. doi:10.1038/ni.3290

57. Ectopic lymphoid-like structures in infection, cancer and autoimmunity / C. Pitzalis [et al.] // Nat. Rev. Immunol. - 2014. - Vol. 14. - P. 447-62. doi: 10.1038/nri3700

58. Embryonic FAP(+) lymphoid tissue organizer cells generate the reticular network of adult lymph nodes / A.E. Denton [et al.] // J. Exp. Med. - 2019. - Vol. 216. - P. 2242-2252.

59. Escalating regulation of 5T4-specific IFN-y+ CD4+ T cells distinguishes colorectal cancer patients from healthy controls and provides a target for in vivo therapy / M. Scurr [et al.] // Cancer Immunol. Res. - 2013. - Vol. 1, № 6. - P. 10.1158/2326-6066.CIR-13-0035. doi: 10.1158/2326-6066.CIR-13-0035

60. Estimating the population abundance of tissue-infiltrating immune and stromal cell populations using gene expression / E. Becht [et al.] // Genome Biol. - 2016. - Vol. 17, № 1. - P. 218. doi:10.1186/s13059-016-1070-5

61. Existence of intratumoral tertiary lymphoid structures is associated with immune cells infiltration and predicts better prognosis in early-stage hepatocellular carcinoma / H. Li [et al.] // Aging (Albany NY). - 2020. - № 12. - P. 3451-3472. https://doi.org/10.18632/aging.102821

62. Gonzalez, H. Roles of the immune system in cancer: from tumor initiation to metastatic progression / H. Gonzalez, C. Hagerling, Z. Werb // Genes Dev. - 2018. -Vol. 32, № 19-20. - P. 1267-1284. doi:10.1101/gad.314617.118

63. Guo, J. The pathological features of ectopic lymphoid neogenesis in idiopathic dacryoadenitis / J. Guo, J. Qian, R. Zhang // BMC Ophthalmol. - 2016. - Vol. 16. - P. 66. doi: 10.1186/s12886-016-0250-0.

64. Gut microbiome influences efficacy of PD-1-based immunotherapy against epithelial tumors / B. Routy [et al.] // Science. - 2018. - № 359 (6371). - P. 91-97. doi: 10.1126/science.aan3706

65. Gut microbiome modulates response to anti-PD-1 immunotherapy in melanoma patients / V. Gopalakrishnan [et al.] // Science. - 2018. - № 359 (6371). - P. 97-103. doi: 10.1126/science.aan4236;

66. Helman, L.J. Mechanisms of sarcoma development / L.J. Helman, P. Meltzer // Nature Rev. Cancer. - 2003. - Vol. 3, №. 9. - P. 685-694.

67. Helper T cell-dominant tertiary lymphoid structures are associated with disease relapse of advanced colorectal cancer / K. Yamaguchi [et al.] // OncoImmunology. -2020. - № 9. - P. 1. DOI: 10.1080/2162402X.2020.1724763

68. High endothelial venule blood vessels for tumor-infiltrating lymphocytes are associated with lymphotoxin p-producing dendritic cells in human breast cancer / L.

Martinet [et al.] // J. Immunol. - 2013. - Vol. 191. - P. 2001-8. doi: 10.4049/jimmunol.1300872

69. High endothelial venule-like vessels and lymphocyte recruitment in diffuse sclerosing variant of papillary thyroid carcinoma / S. Low [et al.] // Pathology. - 2016. -Vol. 48. - P. 666-74. doi:10.1016/j.pathol.2016.08.002

70. High endothelial venule-like vessels and lymphocyte recruitment in testicular seminoma / Y. Sakai [et al.] // Andrology. - 2014. - № 2. - P. 282-9. doi:10.1111/j.2047-2927.2014.00192.

71. High endothelial venules are rare in colorectal cancers but accumulate in extratumoral areas with disease progression / D.C. Bento [et al.] // Oncoimmunology. - 2015. - № 4. - P. e974374. doi:10.4161/2162402X.2014.974374

72. Holness, C.L. Molecular cloning of CD68, a human macrophage marker related to lysosomal glycoproteins / C.L. Holness, D.L. Simmons // Blood. - 1993. - Vol. 81, № 6. - P. 1607-13.

73. Hugo, H. Epithelial-mesenchymal and mesenchymal-epithelial transitions in carcinoma progression / H. Hugo // J. Cell. Physiol. - 2007. - Vol. 213. - P. 374-383.

74. Human solid tumors contain high endothelial venules: association with T- and B-lymphocyte infiltration and favorable prognosis in breast cancer / L. Martinet [et al.] // Cancer Res. - 2011. - Vol. 71. - P. 5678-87. doi:10.1158/0008-5472.CAN-11-0431

75. Idelalisib and rituximab in relapsed chronic lymphocytic leukemia / R.R. Furman [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2014. - Vol. 370, № 11. - P. 997-1007. doi: 10.1056/NEJMoa1315226

76. IFN-y-related mRNA profile predicts clinical response to PD-1 blockade / M. Ayers [et al.] // J. Clin. Invest. - 2017. - Vol. 127, № 8. - P. 2930-2940. doi: 10.1172/JCI91190;

77. Immunohistochemical quantification of lymph vessels, VEGF-C and VEGF receptor 3 in human sarcomas / N. Friedrichs [et al.] // Histopathology. - 2006. - Vol. 49, № 1. - P. 87-88.

78. Impact of Lymph Node Metastasis Metachronous Vs Synchronous on the Prognosis of Soft Tissue Sarcomas / A.E.P. Rosciano [et al.] // 2012. Session: Soft Tissue Sarcoma. Poster N. 122. - 883 p.

79. Interaction of mature CD3+CD4+ T cells with dendritic cells triggers the development of tertiary lymphoid structures in the thyroid / T. Marinkovic [et al.] // J. Clin. Invest. - 2006. - Vol. 116. - P. 2622-32.

80. Intratumoral tertiary lymphoid organ is a favourable prognosticator in patients with pancreatic cancer / N. Hiraoka [et al.] // Br. J. Cancer. - 2015. - Vol. 112. - P. 1782-90. doi:10.1038/bjc.2015.145

81. Involvement of chemokine receptors in breast cancer metastasis / A. Muller [et al.] // Nature. - 2001. - Vol. 410. - P. 50-56.

82. Joyce, J.A. T cell exclusion, immune privilege, and the tumor microenvironment / J.A. Joyce, D.T. Fearon // Science. - 2015. - № 348. - P. 74-80. doi:10.1126/science.aaa6204

83. Kilpatrick, S.E. Soft tissue sarcomas: the usefulness and limitations of fine-needle aspiration biopsy / S.E. Kilpatrick, K.R. Geisinger // Am. J. Clin. Pathol. - 1998. - Vol. 110. - P. 50-68.

84. Kroeger, D.R. Tumor-infiltrating plasma cells are associated with tertiary lymphoid structures, cytolytic T-cell responses, and superior prognosis in ovarian cancer / D.R. Kroeger, K. Milne, B.H. Nelson // Clin. Cancer Res. - 2016. - Vol. 22. -P. 3005-15. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-15-2762

85. Lee, N.Y.-T. Metastasis of sarcomatouslesion in regional lymph node / N.Y.-T. Lee, T.M. Moore, C.P. Schwinn // J. Surg. Oncol. - 1982. - Vol. 20, № 1. - P. 53-58.

86. Local recurrence and assessment of sentinel lymph node biopsy in deep soft tissue leiomyosarcoma of the extremities / M.J. Lamyman [et al.] // Clin. Sarcoma Res.

- 2011. - Vol. 1, № 1. - P. 7-15. doi: 10.1186/2045-3329-1-7.

87. Long-term survival for patients with non-small-cell lung cancer with intratumoral lymphoid structures / M.C. Dieu-Nosjean [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2008.

- Vol. 26. - P. 4410-4417.

88. Lu, T.T. Role of the lymphotoxin/LIGHT system in the development and maintenance of reticular networks and vasculature in lymphoid tissues / T.T. Lu, J.L. Browning // Front. Immunol. - 2014. - № 5. - P. 47. doi:10.3389/fimmu.2014.00047

89. Lucchesi, D. The role of viruses inautoreactive B cell activation within tertiary lymphoid structures in autoimmune diseases / D. Lucchesi, M.J. Bombardieri // Leukoc. Biol. - 2013. - Vol. 94. - P. 1191-1199.

90. Lymphadenectomy and histologic subtype affect overall Survival of soft tissue sarcoma patients with nodal metastases / C. Sawamura [et al.] // Clin. Orthop. Relat. Res. - 2013. - Vol. 471, № 3. - P. 926-931. doi: 10.1007/s11999-012-2568-0.

91. Lymphangiogenesis and tumor metastasis / M.S. Pepper [et al.] // Cell Tissue Res. - 2003. - № 314. - P. 167-77.

92. Lymphatic metastasis in the absence of functional intratumor lymphatics / T.M. Padera [et al.] // Science. - 2002. - Vol. 296 (5574). - P. 1883-1886.

93. Lymphoid neogenesis in rheumatoid synovitis / S. Takemura [et al.] // J. Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 1072-80. doi: 10.4049/jimmunol.167.2.1072.

94. Dieu-Nosjean, M.-C. Lymphotoxin beta receptor signaling is required for inflammatory lymphangiogenesis in the thyroid / G.C. Furtado [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. - 2007. - Vol. 104, № 12. - P. 5026-31.

95. Massi, D. The biological significance of lymphangiogenesis in human tumours / D. Massi, O. Gokoz // Diagn. Histopathol. - 2010. - Vol. 16, № 6. - P. 295-305.

96. Mazeron, J.J. Lymph nodes as sites of metastases from sarcomas of soft tissue / J.J. Mazeron, H.D. Suit // Cancer. - 1987. - Vol. 60. - P. 1800-1808.

97. Mechanisms regulating lymphocytic infiltration of the thyroid in murine models of thyroiditis / S.A. Lira [et al.] // Crit. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 25, № 4. - P. 25162.

98. Mellman, I. Cancer immunotherapy comes of age / I. Mellman, G. Coukos, G. Dranoff // Nature. - 2011. - № 480. - P. 480-489.

99. Mesenchymal to epithelial transition in sarcomas / J. Yang [et al.] // Eur. J. Cancer. - 2014. - Vol. 50, № 3. - P. 593-601. doi: 10.1016/j. ejca.2013.11.006.

100. Nitric oxide regulates adhesiveness, invasiveness, and migration of anoikis-resistant endothelial cells / Mesquita APS [et al.] // Braz J Med Biol Res. - 2022. - Vol. 55 e11612. doi: 10.1590/1414-431X2021e11612

101. Multipeptide immune response to cancer vaccine IMA901 after single-dose cyclophosphamide associates with longer patient survival / S. Walter [et al.] // Nat. Med. - 2012. - Vol. 18, № 8. - P. 1254-1261. doi:10.1038/nm.2883

102. Neoadjuvant immune checkpoint blockade in high-risk resectable melanoma / R.N. Amaria [et al.] // Nat. Med. - 2018. - Vol. 24, № 11. - P. 1649-1654. doi:10.103 8/s41591-018-0197-1

103. Neogenesis of lymphoid structures and antibody responses occur in human melanoma metastases / A. Cipponi [et al.] // Cancer Res. - 2012. - Vol. 72. - P. 39974007. doi:10.1158/0008-5472.CAN-12-1377

104. Nivolumab with or without ipilimumab treatment for metastatic sarcoma (Alliance A091401): two open-label, non-comparative, randomised, phase 2 trials / S.P. D'Angelo [et al.] // Lancet Oncol. - 2018. - Vol. 19, №. 3. - P. 416-426.

105. Occurrence of tertiary lymphoid tissue is associated with T-cell infiltration and predicts better prognosis in early-stage colorectal cancers / G. Di Caro [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2014. - Vol. 20. - P. 2147-58. doi:10.1158/1078-0432.CCR-13-2590

106. Orchestration and prognostic significance of immune checkpoints in the microenvironment of primary and metastatic renal cell cancer / N.A. Giraldo [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2015. - Vol. 21. - P. 3031-40. doi:10.1158/1078-0432.CCR-14-2926

107. Osteosarcoma Pulmonary Metastasis Mesenchymal-to-Epithelial Transition and Suppression of Silencing of Autocrine Motility Factor Induces / Y. Niinaka [et al.] // Cancer Res. - 2010. - Vol. 70, № 22. - P. 9483-9493. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-09-3880.

108. Pembrolizumab in advanced soft-tissue sarcoma and bone sarcoma (SARC028): a multicentre, two-cohort, single-arm, open-label, phase 2 trial / H.A. Tawbi [et al.] // Lancet Oncol. - 2017. - Vol. 18, №. 11. - P. 1493-1501.

109. Pepper, M.S. Lymphatic endothelium: morphological, molecular and functional properties / M.S. Pepper, M. Skobe // J. Cell Biol. - 2003. - Vol. 163. - P. 209-213.

110. Peripheral antigen display by lymph node stroma promotes T cell tolerance to intestinal self / J.-W. Lee [et al.] // Nat. Immunol. - 2007. - № 8. - P. 181-90. doi:10.1038/ni1427

111. Persistence and responsiveness of immunologic memory in the absence of secondary lymphoid organs / J.E. Moyron-Quiroz [et al.] // Immunity. - 2006. - Vol. 25. - P. 643-654.

112. PI3K5 inhibition by idelalisib in patients with relapsed indolent lymphoma / A.K. Gopal [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2014. - Vol. 370, № 11. - P. 1008-1018. doi:10.1056/NEJMoa1314583

113. Pimenta, E.M. Role of tertiary lymphoid structures (TLS) in anti-tumor immunity: potential tumor-induced cytokines/chemokines that regulate TLS formation in epithelial-derived cancers / E.M. Pimenta, B.J. Barnes // Cancers. - 2014. - № 6. - P. 969-997.

114. Potentiation of a p53-SLP vaccine by cyclophosphamide in ovarian cancer: a single-arm phase II study / R. Vermeij [et al.] // Int. J. Cancer. - 2012. - Vol. 131, № 5. - P. E670-E680. doi: 10.1002/ijc.27388

115. Predictive value of tertiary lymphoid structures assessed by high endothelial venule counts in the neoadjuvant setting of triple-negative breast cancer / I.H. Song [et al.] // Cancer Res. Treatm. - 2017. - Vol. 49. - P. 399-407. doi:10.4143/crt.2016.215

116. Predictors of responses to immune checkpoint blockade in advanced melanoma / N. Jacquelot [et al.] // Nat. Commun. - 2017. - Vol. 8, № 1. - P. 592. doi:10.1038/s41467-017-00608-2;

117. Prognosisof Lymph Node Metastasis in Soft Tissue Sarcoma / K.A. Behranwala [et al.] // Ann. Surg. Oncol. - 2004. - Vol. 11, № 7. - P. 714-719.

118. Prognostic Factors for Patients with Localized Soft-Tissue Sarcoma Treated with Conservation Surgery and Radiation Therapy. An Analysis of 1225 Patients / G.K. Zagars [et al.] // Cancer. - 2003. - Vol. 97. - P. 2530-2543.

119. Randall, T.D. Development of secondary lymphoid organs / T.D. Randall, D.M. Carragher, J. Rangel-Moreno // Annu Rev. Immunol. - 2008. - Vol. 26. - P. 627-50. doi:10.1146/annurev.immunol.26.021607.090257

120. Role of inducible bronchus associated lymphoid tissue (iBALT) in respiratory immunity / J.E. Moyron-Quiroz [et al.] // Nat. Med. - 2004. - № 10. - P. 927-934.

121. Ruddle, N. H. Basics of Inducible Lymphoid Organs / N.H. Ruddle // Current topics in microbiology and immunology. - 2020 / - Vol. 426. - P. 1-19. doi: 10.1007/82_2020_218

122. Sung, H, Ferlay, J, Siegel, RL, Laversanne, M, Soerjomataram, I, Jemal, A, Bray, F. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2021: 71: 209- 249. doi: 10.3322/caac.21660

123. Saito, T. SYT-SSX1 and SYT-SSX2 interfere with repression of E-cadherin by Snail and Slug: a potential mechanism for aberrant mesenchymal to epithelial transition in human synovial sarcoma / T. Saito, M. Nagai, M. Ladanyi // Cancer Res. - 2006. -Vol. 66, № 14. - P. 6919-6927.

124. Sarvaria, A. B cell regulation in cancer and anti-tumor immunity / A. Sarvaria, J.A. Madrigal, A. Saudemont // Cell Mol. Immunol. - 2017. - Vol. 14, № 8. - P. 662674. doi:10.1038/cmi.2017.35

125. Sautes-Fridman C., Lawand M., Giraldo N.A. et al. Tertiary lymphoid structures in cancers: prognostic value, regulation, and manipulation for therapeutic intervention. Front. Immunol. - 2016; 7: 407. doi: 10.3389/fi mmu.2016.00407

126. Schumacher, T.N. Tertiary lymphoid structures in cancer / T.N. Schumacher, D.S. Thommen // Science. 2022; 375(6576):eabf9419. doi:10.1126/science.abf9419

127. Stranford, S. Follicular dendritic cells, conduits, lymphatic vessels, and high endothelial venules in tertiary lymphoid organs: parallels with lymph node stroma / S.

Stanford, N.H. Ruddle // Front. Immunol. - 2012. - № 3. - P. 350. doi: 10.3389/fimmu.2012.00350

128. Sustained interleukin-6 signalling leads to the development of lymphoid organlike structures in the lung / S. Goya [et al.] // J. Pathol. - 2003. - Vol. 200, № 1. - P. 827.

129. Systematic microanatomical analysis of CXCL13 and CCL21 in situ production and progressive lymphoid organization in rheumatoid synovitis / A. Manzo [et al.] // Eur. J. Immunol. - 2005. - Vol. 35. - P. 1347-59. doi: 10.1002/eji.200425830.

130. Tertiary lymphoid organs in cancer immunology: mechanisms and the new strategy for immunotherapy / L. Lin [et al.] // Front. Immunol. - 2019. - № 10. - P. 1398.

131. Tertiary lymphoid organs in infection and autoimmunity / K. Neyt [et al.] // Trends Immunol. - 2012. - Vol. 33. - P. 297-305. doi:10.1016/j.it.2012.04.006

132. Tertiary lymphoid structures improve immunotherapy and survival in melanoma / R. Cabrita [et al.] // Nature. - 2020. - № 577 (7791). - P. 561-565. doi:10.1038/s41586-019-1914-8

133. Tertiary lymphoid structures in cancer and beyond / M.-C. Dieu-Nosjean [et al.] // Trends Immunol. - 2014. - Vol. 35. - P. 571-80. doi:10.1016/j.it.2014.09.006

134. Tertiary Lymphoid Structures in Cancer: Drivers of Antitumor Immunity, Immunosuppression, or Bystander Sentinels in Disease? / E.J. Colbeck [et al.] // Front. Immunol. - 2017. - № 8. - P. 1830. doi:10.3389/fimmu.2017.01830.

135. Tertiary Lymphoid Structures in Cancers: Prognostic Value, Regulation, and Manipulation for Therapeutic Intervention / C. Sautès-Fridman [et al.] // Front. Immunol. - 2016. - № 7. - P. 407. doi:10.3389/fimmu.2016.00407.

136. Tertiary lymphoid structures in the era of cancer immunotherapy / C. Sautes-Fridman [et al.] // Nat. Rev. Cancer. - 2019. - Vol. 19. - P. 307-325.

137. Tertiary lymphoid structures, drivers of the anti-tumor responses in human cancers / M.C. Dieu-Nosjean [et al.] // Immunol. Rev. - 2016. - Vol. 271, № 1. - P. 260-75.

138. Textbook of bone metastases / C. Jasmin [et al.]. - 2005. - 555 p.

139. The commensal microbiome is associated with anti-PD-1 efficacy in metastatic melanoma patients / V. Matson [et al.] // Science. - 2018. - № 359 (6371). - P. 104108. doi: 10.1126/science.aao3290

140. The Emerging Role of B Cells in Tumor Immunity / P. Tsou [et al.] // Cancer Res. - 2016. - Vol. 76, № 19. - P. 5597-5601. doi:10.1158/0008-5472.CAN-16-0431

141. The gene encoding the T-cell surface protein T4 is located on human chromosome 12 / M. Isobe [et al.] // Proc. Nat. Acad. Sci. U S A. — 1986. — Vol. 83, № 12. — P. 4399—4402. — D0I:10.1073/pnas.83.12.4399.

142. The immune contexture in cancer prognosis and treatment / W.H. Fridman [et al.] // Nat. Rev. Clin. Oncol. - 2017. - Vol. 14, № 12. - P. 717-734. doi:10.1038/nrclinonc.2017.101

143. The immune contexture in human tumours: impact on clinical outcome / W.H. Fridman [et al.] // Nat. Rev. Cancer. - 2012. - Vol. 12, № 4. - P. 298-306. doi: 10.1038/nrc3245

144. The impact of lymph node disease in extremity soft-tissue sarcomas: a population-based analysis / D. Johannesmeyer [et al.] // Am. J. Surg. - 2013. - Vol. 206, № 3. - P. 289-295. doi: 10.1016/j.amjsurg.2012.10.043.

145. The role of inflammatory chemokines in lymphoid neoorganogenesis in breast cancer / S.K. Gantsev [et al.] // Biomed. Pharmacother. - 2013. - Vol. 67, № 5. - P. 363-6.

146. Tumor-on-a-chip platforms to study cancer-immune system crosstalk in the era of immunotherapy / S. Parlato [et al.] // Lab. Chip. - 2021. - Vol. 21, № 2. - P. 234-253. doi: 10.1039/d0lc00799d

147. Ulutin, C. Cohort Study of Adult Rhabdomyosarcoma: A Single Institution Experience / C. Ulutin, B.H. Bakkal, O.A. Kuzhan // World J. Med. Sci. - 2008. - Vol. 3, № 2. - P. 54-59.

148. Unique ectopic lymph node-like structures present in human primary colorectal carcinoma are identified by immune gene array profiling / D. Coppola [et al.] // Am. J. Pathol. - 2011. - Vol. 179. - P. 37-45. doi:10.1016/j.ajpath.2011.03.007

149. Unusual Metastases From Extremity Soft Tissue Sarcomas / M. Ryzewicz [et al.] // Orthopedics. - 2008. - Vol. 31, № 5. - P. 1-11.

150. Van de Pavert, S.A. New insights into the development of lymphoid tissues / S.A. Van de Pavert, R.E. Mebius // Nat. Rev. Immunol. - 2010. - № 10. - P. 664-74. doi: 10.1038/nri2832.

151. Warren, S. Lymph node metastasis of sarcoma / S. Warren, R.W. Meyer // Am. J. Pathol. - 1938. - Vol. XIV. - P. 605-619.

152. Weiss, S.W. Enzinger and Weiss's soft tissue tumors / S.W. Weiss, J.R. Goldblum. - 5th ed. - 2008. - 1258 p.

153. WHO. Classification of Tumours of Soft Tissue and Bone / C. Fletcher [et al.]. -World Health Organization, 2013.

154. Yanagawa, T. Risk Factors for Lymphatic Metastasis of Malignant Bone and Soft-Tissue Tumors: A Retrospective Cohort Study of 242 Patients / T. Yanagawa, K. Saito, K. Takagishi // Medicine. - 2014. - Vol. 93, № 27. - P. 1-5. doi: 10.1097/MD.0000000000000225.

155. Yarchoan, M. Tumor Mutational Burden and Response Rate to PD-1 Inhibition / M. Yarchoan, A. Hopkins, E.M. Jaffee // N. Engl. J. Med. - 2017. - Vol. 377, № 25. -P. 2500-2501. doi: 10.1056/NEJMc1713444

156. Zhao, Z. Relationship between Tertiary Lymphoid Structure and the Prognosis and Clinicopathologic Characteristics in Solid Tumors / Z. Zhao [et al.] // Int J Med Sci. - 2021. - Vol. 18(11):2327-2338. doi:10.7150/ijms.56347

157. Janakiram, M. Immune checkpoint blockade in human cancer therapy: lung cancer and hematologic malignancies / M. Janakiram [et al.] // Immunotherapy. - 2016. Vol. 8(7):809-819. doi:10.2217/imt-2016-0001

158. Garaud S. T follicular helper and B cell crosstalk in tertiary lymphoid structures and cancer immunotherapy / S. Garaud, MC. Dieu-Nosjean, K. Willard-Gallo // Nat Commun. - 2022. - Vol. 13(1):2259. doi:10.1038/s41467-022-29753-z

159. Mellman I, Coukos G, Dranoff G. Cancer immunotherapy comes of age. Nature. - 2011. Vol. 480(7378):480-489. doi:10.1038/nature10673

160. Pipi E, Nayar S, Gardner DH, Colafrancesco S, Smith C, Barone F. Tertiary Lymphoid Structures: Autoimmunity Goes Local. Front Immunol. - 2018. Vol. 9:1952. doi: 10.3389/fimmu.2018.01952

161. Mustapha R, Ng K, Monypenny J, Ng T. Insights Into Unveiling a Potential Role of Tertiary Lymphoid Structures in Metastasis. Front Mol Biosci. - 2021. Vol. 8:661516. doi:10.3389/fmolb.2021.661516